Биохимические аспекты и экспериментальная оценка фармакологической активности полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Щекина, Ирина Анатольевна

• Щекина, Ирина Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Щекина, Ирина Анатольевна

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

1.1. Кислота ацетилсалициловая. Биохимизм фармакологического действия и применения.

1.2. Синтетические полимеры медицинского назначения. Обоснование синтеза и исследование физико-химических свойств полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой (ИАСК).

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Методы исследования на биохимические основы свертывающей системы и структурные элементы крови субстанции ИАСК в сравнении с монопрепаратами АСК, поливинилпирролидоном (ПВП), смеси АСК с ПВП и сополимера Ы-винилпирролидона с ]Ч-3-хлор-2-гидрокси-пропил-винил-у-аминомасляной кислотой (ФПВП).

2.2. Методы исследования гепатопротекторной активности ИАСК и АСК

2.3. Патоморфологические исследования.

2.4. Методы исследования антиагрегационной и реологической активности ИАСК в сравнении с АСК.

2.5. Методы исследования жаропонижающей, противовоспалительной, анальгетической активности субстанции ИАСК.

2.6. Методы исследования эффективных доз и острой токсичности ИАСК.

2.7. Методы оценки антиишемического действия соединения ИАСК в сравнении с АСК.

Глава 3. Собственные исследования.

3.1. Исследование влияния ИАСК на биохимию свертывающей системы крови и структурные элементы крови в сравнении с монопрепаратами АСК, поливинилпирролидон (ПВП), смеси АСК с ПВП и сополимера N - винилпирролидона с Ы-3-хлор-2-гидрокси-проггил-винил-у-аминомасляной кислотой (ФПВП) в хроническом эксперименте.

3.2. Исследование гепатопротекторной активности ИАСК и АСК.

3.3. Патоморфологические исследования.

3.4. Исследование антиагрегационной и реологической активности

ИАСК в сравнении с АСК.

3.5. Исследование жаропонижающего, противовоспалительного и анальгетического действия ИАСК.

3.6. Определение острой токсичности ИАСК.

3.7. Исследование антиишемического действия соединения ИАСК в сравнении с АСК.

Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биохимические аспекты и экспериментальная оценка фармакологической активности полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой»

Актуальность проблемы. Наиболее распространенными заболеваниями XX века стали гипертоническая болезнь (ГБ), ишемическая болезнь сердца (ИБС). Они ограничивают работоспособность, сопровождаются большими экономическими потерями [1, 120, 121, 122, 123, 124, 125] и составляют 53,5

- 55 % от общей смертности населения России [2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11]. По данным ВОЗ, 20 % людей в возрасте старше 40 лет страдают ГБ, которая приводит к ИБС, сердечной недостаточности, мозговому инсульту. На протяжении последних десятилетий в возрастной группе 40 - 50 лет отмечается устойчивый рост заболеваемости ИБС [126, 127, 128, 129]. Распространенность, неблагоприятный прогноз позволяют рассматривать ИБС, как одну из ключевых проблем современной медицины.

Фармакотерапия, основанная на регуляции биохимических механизмов агрегации, является одним из основных методов лечения этих заболеваний [12, 13, 14, 15, 16]. Среди антиагрегантов кислота ацетилсалициловая (АСК)

- занимает одно из ведущих мест [1, 10, 11, 130, 131, 132, 133, 134]. Накоплен опыт применения АСК с целью профилактики повторных инфарктов и тромбозов [1, 10]. Все НПВП обладают единым, известным на сегодняшний день, механизмом действия: блокада ферментов циклооксигеназы и снижением синтеза простагландинов. Этот механизм обусловливает не только основные эффекты АСК, но и токсическое действие, которое является прямым продолжением ее фармакологического терапевтического эффекта кровоточивость, поражение ЖКТ [17, 120]. С позиций поиска новых антиагрегационных препаратов представляют несомненный интерес лекарственные формы и субстанции на основе АСК с целью уменьшения ее побочных эффектов. Кроме того, применение данного препарата экономически выгодно [18, 19, 20, 21, 22, 23].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Целью настоящего исследования явилось изучение биохимических механизмов и оценка эффективности антиагрегантной активности оригинальной субстанции, полученной на основе химической иммобилизации кислоты ацетилсалициловой на низкомолекулярном полимере медицинского назначения.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1.Изучить некоторые биохимические механизмы, лежащие в основе антиагрегантного действия оригинальной субстанции - полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой, синтезированной на основе химической иммобилизации кислоты ацетилсалициловой в сополимер ЭД-винилпирролидона с ЭД-винил-у-аминомасляной кислотой при однократном внутрижелудочном введении.

2.Изучить состояние свертывающей системы крови при использовании вновь синтезированной субстанции.

3.Провести токсико-фармакологическое и структурно-функциональное исследование синтезированной субстанции и установить особенности влияния субстанции на структуру и функциональное состояние внутренних органов.

4.Дать экспериментальную фармакологическую оценку перспективности использования синтезированной субстанции на модели ишемизированного сердца.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые проведено комплексное биохимическое, морфологическое, токсико-фармакологическое экспериментальное исследование оригинальной субстанции, синтезированной на основе химической иммобилизации кислоты ацетилсалициловой на низкомолекулярном полимере медицинского назначения. Показаны некоторые аспекты биохимических и других сторон механизма действия оригинальной субстанции. Установлена высокая терапевтическая активность и большая широта терапевтического индекса на различных моделях изучения эффективности субстанции, предполагающие возможность ее дальнейшего продвижения в качестве внутривенного лекарственного препарата антиагрегационного действия.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ Полученный материал предполагает его представление в Фармакологический Комитет МЗ РФ для дальнейшей разработки оригинального полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой в качестве нестероидного противовоспалительного средства, обладающего, по сравнению с кислотой ацетилсалициловой, пониженной гастро- и нефротоксичностью [приоритетная справка № 2000130527 от 5.12.2000]. Одновременно субстанция обладает антиагрегационными, антиангинальными свойствами, что позволяет использовать субстанцию для внутривенного введения на фоне экспериментальной ишемии.

Показано, что малые дозы АСК (1 мг/кг) обладают гепатопротекторным действием, которое выражается в том, что в гепатоцитах стимулируются репаративные процессы, что позволяет рекомендовать АСК в дозе 1 мг/кг для профилактики токсических гепатитов [положительное решение на выдачу патента от 25.01.2001 по заявке № 2000128859 от 17.11.2000].

РЕАЛИЗАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ По материалам исследования получены: патент на изобретение № 2000128859 от 17.11.2000 и приоритетная справка на изобретение № 2000130527 от 5.12.2000. Опубликовано 4 печатных работы. Основные положения диссертационной работы используются в учебном процессе со студентами кафедры фармакологии и курсантами факультета усовершенствования врачей на кафедре фармакологии и фармдела ФУВ Воронежской медицинской академии им. H.H. Бурденко и на фармфакультете Воронежского государственного университета (6 актов внедрения). Выполнены 4 дипломные работы студентами фармацевтического факультета ВГУ.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ Материалы диссертации докладывались, обсуждались и одобрены на VII и VIII Российских национальных конгрессах "Человек и лекарство" (Москва, 2000-2001 г).

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ РАБОТЫ Диссертация написана на русском языке, изложена на 183 страницах и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 7 разделов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов, списка литературы, включающего 177 источников, из них 119 отечественных, 58 зарубежных. Диссертация иллюстрирована 15 таблицами, 42 рисунками. Работа выполнена без соавторства, в научные труды, опубликованные в соавторстве, включены экспериментальные данные, полученные лично автором.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Щекина, Ирина Анатольевна

ВЫВОДЫ

1 .Впервые синтезированный полимерный водорастворимый аналог кислоты ацетилсалициловой (субстанция ИАСК) по влиянию на свертывающую систему крови ИАСК (в дозе 1 мг/кг по АСК) превосходит препарат сравнения АСК, так как вызывает увеличение индекса коагуляции на 53,1 %, а показатель индекса фибринолиза увеличивался в 2 раза, что свидетельствует о фибринолитической активности полимерного водорастворимого аналога кислоты ацетилсалициловой.

2.Субстанция ИАСК в дозе 1 мг/кг (по АСК) проявляла выраженную антиагрегационную активность, действуя преимущественно на тромбоцитарное звено гемостаза. При этом эффект при введении ИАСК развивался несколько позднее, чем у препарата АСК, но при этом не уступал по выраженности таковому для кислоты ацетилсалициловой. Наибольший эффект влияния субстанции ИАСК на вязкость крови кроликов наблюдался при высоких скоростях сдвига.

3.Сравнительная оценка гепатопротекторного действия субстанции ИАСК и препарата АСК в эквивалентных дозах на фоне патохимического повреждения печени показала, что ИАСК не влияет на гепатотропную функцию печени, тогда как АСК в дозе 1 мг/кг в сутки оказывает отчетливый гепатозащитный эффект, который выражается в уменьшении дистрофических явлений гепатоцитов, увеличении числа митозов, нормализации уровня ферментов в сыворотке крови. Положительные результаты экспериментальных исследований дают основание рекомендовать низкие дозы АСК как потенциальный гепатопротектор, который, возможно, можно использовать для комплексного лечения токсических поражений печени.

4.Анализ микропрепаратов внутренних органов животных, получавших ИАСК в дозе 2,3 мг/кг (эквивалентно 1 мг/кг по АСК), показал, что этот препарат обладает пониженной гастро- и нефротоксичностью. Все изменения во внутренних органах носят физиологический характер и могут быть связаны с некоторым усилением функции исследуемых органов.

5.Острая токсичность оригинальной субстанции ИАСК сравнима с препаратом АСК и для белых мышей составляет по показателю LD50 680±125,0 мг/кг и относится к малотоксичным соединениям. Возможная расчетная летальная доза для человека равняется 219,3 мг/кг.

159

6. Субстанция ИАСК обладает:

- Жаропонижающей активностью, сопоставимой с препаратом сравнения АСК в эквивалентных дозах.

- Оказывает более сильное и продолжительное противовоспалительное действие, чем препарат сравнения АСК в той же дозе на массу тела животного.

- По всем видам анальгетической активности оригинальная субстанция ИАСК превосходит АСК.

7.Широта терапевтического индекса по анальгетической активности субстанции ИАСК в 1,7 раза больше, чем у препарата АСК.

8. Предварительное введение ИАСК в дозе 1 мг/кг по АСК при 30-ти минутной OHBJIKA отчетливо предупреждало кардиодепрессию и поддерживало гемодинамические показатели на более высоком уровне по сравнению с контрольной группой. При сравнении кардиопротекторного действия ИАСК и препарата АСК в эквивалентных дозах отмечается сопоставимое действие.

160

НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1 .Рекомендовать новую оригинальную субстанцию - полимерный водорастворимый аналог кислоты ацетилсалициловой - к дальнейшему углубленному доклиническому изучению с целью последующего представления в Фармакологический Комитет МЗ РФ в качестве антиагреганта, обладающего пониженной гастро- и нефротоксичностью.

2,Обоснована перспективность дальнейшего углубленного изучения оригинальной субстанции ИАСК как средства профилактики и лечения ишемии миокарда при внутривенном введении.

3.Полученные сведения о гепатопротекторных свойствах кислоты ацетилсалициловой в низких дозах позволили выявить свойства АСК в качестве потенциального гепатопротектора, которые связаны с нормализацией биохимических показателей, отражающих функциональное состояние печени.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Щекина, Ирина Анатольевна, 2002 год

1. Дезагреганты в современной клинической кардиологии/ Бокарев И.Н., Ивлева А.Я., Моисеев B.C. и др.//Кардиология. М., 1989. - С. 84 - 96.

2. Программа борьбы с артериальной гипертонией в СССР/ Бритов А.Н., Оганов Р.Г. //Терапевт, архив. 1985. - № 11. - С. 67 - 71.

3. Вихерт A.M., Чазов Е.И. Инфаркт миокарда /Под ред. Е.И.Чазова. -М.: Медицина, 1971. С. 47 - 66.

4. Вихерт А. М., Жданов В. С. Атеросклероз при различных заболеваниях. М.: Медицина, 1976. - 210 с.

5. Волков B.C., Курсаков Н.К., Кухто Л.М. О длительности жизни и трудоспособности больных, перенесших инфаркт миокарда //Клинич. медицина. -1976. Т. 57, № 2. - С. 25 - 30.

6. Волков B.C. Реабилитация больных, перенесших инфаркт миокарда.

7. М.: Медицина, 1982. 232 с.

8. Мясников А.Л. Гипертоническая болезнь и атеросклероз. М.: Медицина, 1965. - 615с.

9. Тринус Ф.П. Фармако-терапевтический справочник. Киев: Здоровье,- 1989.-640 с.

10. Метелица В.И. Справочник кардиолога по клинической фармакологии (Под ред. Чазова Е.И.), М. 1987. - 250 с.

11. Кукес В.Г., Рудаков А.Г., Цулая В.Р. Клиническая фармакология лекарственных средств, применяемых в кардиологии/Серия "Фармакология",1. Т. 16., М,-1987.-85 с.

12. Астахова A.B. Нестероидные противовоспалительные средства (НПВС): спектр побочных реакций//Безопасность лекарств. 2000. - № 1. -С. 26-30.

13. Способ лечения сосудистых тромбозов и рестеноза ингаляциями оксида азота: A.c. 5904938 США, МКИ 161 К 33/00/Zapol Warren М., Block Kenneth D./Опубл. 18.05.99.; РФ 190. 2000.

14. Составы и способы уменьшения менструальных болей: A.c. 5912006 США, МКИ А 61 F 13/02 /Bockow Barry I,Erlitz Marc D./ Опубл. 15.06.99; РФ 90267П. 2000.

15. Способ получения названия препарата ацетилсалициловой кислоты: A.c. 5046931/14, Россия, МКИ А61К31/79/Савицкая А.Б., Пащенко Л.А. Заявлено 27.02.96, Бюл. №6., ХФЖ№9. 1988.

16. Средства для снижения агрегации тромбоцитов в кровеносной системе: A.c. 4866046, Россия, МКИ А61КЗ1/245 кл. А 61 К 31/60, 1989/ Давыдов А.Б., Кокурина Е.В., Метелица В.И., Румянцев Д.О., Суслина З.А., Хромов Г.Л., Заявлено 10.11.97, Бюл. № 31.

17. Способ профилактики повторного инфаркта миокарда: A.c. 4906822/14, Россия МКИ А61К31/185/ Бичан H.A., Гольдберг Г.А., Заявлено 30.03.93, Бюл. №12.

18. Способ потенцирования действия лекарственных средств: A.c. 94042571/14, Россия МКИ А61К31/60/Гмиро В.Е., Сердюк С.Е., Копейкин

19. B.В., Панарин Е.Ф. Заявлено 28.08.97, Бюл. № 24.

20. Ингибиторы циклооксигеназы-2; современная концепция/Насонов JI.E.// Терапевтический архив. 1999. - № 11. - С. 54 - 57.

21. Актуальные взгляды на токсичность нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (НПЛС) и препаратов, контролирующих протекание ревматических заболеваний/Филипович-Сосновска А.//Новости фармации и медицины. 1997. - № 5 - 6. - С. 89 - 94.

22. Терапия основных сосудистых нарушений бета-каратином и витамином Е: А.с.5871766 США, МКЙ 6А61 К 31/07, 6А61 К 31/355/Hennekens, Charles Н./Опубл. 16.02.99; РФ 190. 2000.

23. Информационная мозаика/Голубев А.Г.//Терра мед. 1999. - № 2.1. C. 54-55.

24. Насыбулина Н.М. Нестероидные противовоспалительные препараты и их лекарственные формы (обзор)//ХФЖ. M - № 2. - 1999. - С. 30 - 35.

25. Физиология системы гемостаза/Балуда В.П., Балуда М.В., Деянов И.И., Тлепшуков И.К. М. - 1995. - 243 с.

26. ЗО.О побочном действии препарата аспирин (таблетки по 0,5 г) производства'ЪисЬу Stores INC", Dublin (Ирландия)//Фармакология. 1997. -Вып. 5.-С. 51.

27. Кузник Б.И., Баркаган З.С. Современные представления о процессе свертывания крови, фибринолизе и действии естественных антикоагулянтов//

28. Гематология и трансфузиология. М. 1991. - №. 11. - С. 22 - 25.

29. Аспирин -анти- или протромбогенный препарат?/Балуда В.П., Лукоянова Т.И., Адамчук A.C., Деянов И.//Клин.мед. 1983 - № 9. - С. 27 -29.

30. Лакин К.М./Проблемы фармакологического поиска ингибиторов агрегации тромбоцитов/ЯСардиология. 1988. - № 10 - С. 120 -126.

31. Петровский Б.В., Малиновский H.H. Современные проблемы тромбозов и эмболий. М. - 1978. - 245 с.

32. Люсов В.А., Савенков М.П., Теблоев К.И. Противотромботическая терапия в клинической практике. Новое в теории, диагностике, лечении. М. -1982.-77 с.

33. Чазов Е.И, Лакин K.M. Антикоагулянты и фибринолитические средства. М. - 1977. - 95 с.

34. Актуальные проблемы гемостаза в клинической практике/Тулупов А.Н., Филев Л.В., Вельских А.Н. и др. М. - 1987. - 138 с.

35. Биоантиоксидант/Барсель В.А., Сальников М.И., Олферьева А.М. и др. Черноголовка. - 1986. - 30 с.

36. Дадный А.И., Ефимов В.В. Эпидемиология, профилактика и лечение болезней сердечно-сосудистой системы. Харьков. - 1984. - 62 с.

37. Гацура В.В. Фармакологическая коррекция энергетического обмена ишемизированного миокарда. -М. 1993. 254 с.

38. Петрищев H.H. Тромборезистентность сосудов С.-П. - 1994. - 130 с.

39. Гаврилов O.K. Проблемы и гипотезы в учении о свертывании крови. -М.-1981.-С.63.

40. Высокомолекулярные соединения/Ануфриева Е.В., Некрасова Т.Н., Шевелева Т.В. и др. А. - 1994. - 449 с.

41. Паутов В.Д. Водорастворимые полимеры и их применение (Тез.доьсл. III Всесоюз.конференц.уИркутск. 1987. - С. 133.

42. Кирш Ю.Э. Поли-М-винилпирролидон и др. поли-М-виниламиды: Синтез и физикохимические свойства. М.: Наука. - 1999. - 350 с.

43. Синтетические полимеры медицинского назначения/Кирш Ю.Э., Зажирей Д.В.//Сборник лекций I Всесоюзной школы семинара. Ташкент. -1984.-С. 154.

44. Ландау М.А. Молекулярный механизм действия физиологически активных соединений. М.: Наука. - 1981.

45. Структура и стабильность биологических молекул (Пер. с англ.)/Под ред. ВолькенштейнаМ.В. М.: Мир. - 1973. - 584 с.

46. Растворимая шипучая лекарственная форма ацетилсалициловой кислоты: A.c. 98118742/14, Россия, МКИ 6 А 61 К 31/60/Гараев P.C., Амиров Н.Х., Зиганшина Л.Е. и др.; Опубл. 20.04.99. РЖ 210242П. - 1999.

47. Влияние гидрофильных эксципиентов и давления на физические свойства и характер высвобождения из микрокапсулированных таблеток аспирина (Доклад)/Farid D, Bolourtchian. N., Nokhodchi A/J. Pharm.fyl Pharmacol. -1998.-P. 150.

48. Биологически совместимые анионообменные материалы: A.c. 315696, США, МКИ 6 В 01D15/08/Brian, Ben F., Voorhees et al., Опубл. 15.07.97. РЖ 18Т341П,- 1999.

49. Способ получения биоспецифического адсорбента: A.c. 2808802/26, Россия, МКИ 6 В 01 J 20/04 6 А 61 К 31/0728/Платэ М.А., Валуев Л.И., Гумирова Ф.Х. и др.; Опубл. 20.01.98. РЖ 12Т304П. - 1999.

50. Материал, ингибирующий свертываемость крови и способ его получения: A.c. 19651096/1, Германия, МКИ 6 А 61 К 47/02, 6 А 01 N l/00/Kalles, Karl-Heinz, Böttcher et al.; Опубл. 10.06.98. РЖ 160252П. - 1999.

51. Рудакова Т.Е., Черненко Г.Т. Поражение сосудистой стенки и гемостаз. М. - 1983. - С. 223 - 224.

52. Энциклопедия лекарств/Издание седьмое переработанное. Под редакцией Ю.Ф. Крылова. 2000. - 742 с.5 9.По лучение и свойства гидролизированного поливинилпирролидона /Мусин Р.И., Ли В.А., Туляганов Р.Т. и др.// ХФЖ. М. - 1989. - № 11. - С. 1379 -1381.

53. Государственная Фармакопея. М. - 1968. - С. 756.

54. Руководство по экспериментальному доклиническому изучению новых фармакологических веществ/Под ред. Фисенко В.П.и др. М. - 2000. -С. 234-250.

55. Методы определения токсичности и опасности химических веществ (Токсикометрия)/Под ред. Саноцкого И.В. -М.: Медицина.-1970.-С.96- 100.

56. Прозоровский В.Б. Фармакология и токсикология. 1962. - № 1. - С. 115-119.

57. Иванов Е.П. Диагностика нарушений гемостаза. Минск.: Беларусь. - 1983.-С. 93-97.

58. Сепетлиев Д.А. Статистические методы в научных медицинских исследованиях. М.: Медицина. - 1968. - 419 с.

59. Любина А.Я., Спектор И.С., КатасоноваТ.В. Программированное пособие по методам клинических лабораторных исследований М.: Медицина. - 1971. - 208 с.

60. Методические указания по применению унифицированныхклинических, лабораторных методов исследования/Под ред. Меньшикова B.B. М. - 1973. - С. 55-63.

61. Кассирский И.А., Алексеев Г.А. Клиническая гематология, 1970. -М.: Медицина. 800 с.69 .Беленький М.А. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Ленинград. - 1963. - 152 с.

62. Ковалевский А.Н., Нифантьев O.E. Замечания по скриннинговому методу определений молекул средней массы./Лабораторное дело-1989. № 10,- С. 34-35.

63. Тугаринова В.Н., Миклашевский В.Е., Скобцева Г.Г. Модификация микрометода бромсульфалеиновой пробы на экскреторную функцию печени//Лабораторное дело. 1967. - №. 4 - С. 218 - 220.

64. Аюшева Л.Б. Полифитохол новый гепатопротектор в клинике туберкулеза (клинико-экспериментальное исследование): Автореф. дис.канд. мед. наук/М. 1998. - 21 с.

65. Исследование гепатопротекторного действия препарата из биомассы культуры ткани радиолы розовой/Крендель Ф.П., Левина Л.В., Козин C.B., Ванюшкин А.Н.//Поиск исслед., эксперим. М. - 1995. - С. 35 - 38.

66. Джозеф М., Хендерсон. Патфизиология органов пищеварения/(Пер.с англ.) Под ред. Наточина B.B. М. - 1997. - 286 с.

67. Меркулов Г.А. Курс патогистологической техники. М. - 1963. - С. 129-142.79.0сновы гистологии и гистологической техники/Под ред. Елисеева Г.В., Субботина М.Е. М. - 1967. - С. 251 - 252.

68. Габбасов З.А., Попов Е.Г., Гаврилов И.Ю. и др. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов./Лабораторное дело. 1989. - № 10. - С. 15-18.

69. Габбасов З.А., Попов Е.Г., Гаврилов И.Ю. и др. Новый методический подход к исследованию агрегации тромбоцитов in vitro./Бюлл.экспер.биол.и мед. 1989. - № Ю. - С. 437 - 439.

70. Баркаган З.С., Молот А.П. Диагностика и контр, терапия нарушений гемостаза. М.: Ньюдиамед - 2001. - 296 с.

71. Тринус Ф.П., Мохорт H.A., Клебанов Б.М. Нестероидные противовоспалительные средства. Киев.: Здоровье. - 1975. - С. 225 - 227.

72. Тринус Ф.П., Мохорт H.A., Клебанов Б.М. Нестероидныепротивовоспалительные средства. Киев.: Здоровье. - 1975. - С. 205 - 207.

73. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. М. - 1974. - С.38 - 39.

74. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. М. - 1974. - С.43 - 44.

75. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. М. - 1974. - С. 44.

76. Методы определения токсичности и опасности химических веществ (Токсикометрия)/Под ред. СаноцкогоИ.В. -М.: Медицина-1970- С. 101.

77. Голдштейн Г.Х., Чичканов Г.Г. Сравнительное изучение влияния этацизина и лидокаина на кровоснабжение и функциональное состояние интактного и ишемизированного миокарда//Бюл.эксперм.биолгии и медицины. 1984. - Т.98. - № 10. - С. 466 - 469.

78. Гацура В.В. Методы первичного фармакологического исследования биологически активных веществ. М. - 1974. - С. 30 - 36.

79. Таспирин растворимая лекарственная форма с повышенным противовоспалительным и анальгезирующим действием/Гумеров Р.Х., Зиганшина Л.Е., Галиуллина Т.Н., Гараев Г.С.//РФ. № 1. - 2001. - С. 619.

80. Монцевичюте-Эрингене. Упрощенные математико-статистические методы в медицинской исследовательской работе//Патол.физиол.и экспер.терапия. М. - 1964. - № 4. - С. 71 - 78.

81. Фред Дж. Шиффман. Патфизиология крови/ (Пер.с англ.) Под ред. Наточина Ю.В. 2000. - 446 с.

82. Леонова М.В., Разумов В.Б. Роль эритроцитов в патогенезе, нарушение функциональной активности тромбоцитов у больных ишемической болезнью сердца и возможности медикаментозной коррекции//Кардиология. 1990. - № 4. - С. 107 - 110.

83. Бурлакова Е.Б., Голощапов А.Н., Керимов Р.Ф. Взаимосвязь между содержанием природных антиоксидантов и вязкостью липидов в мембранах органелл в норме./Бюллетень эксперимент.биол. и мед. М.: Медицина.1986,-№4.-С. 431-432.

84. ЮО.Алексеенко A.B. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. -М.-1981.-С. 3-16.

85. Дроговоз С.М., Яковлева Л.В., Зупанец И.А. О гепатотропных свойствах нестероидных противовоспалительных средств//Фармакология и токсикология. 1989. - № 6. - С.76 - 79.

86. Буюклинская О.В., Ходасевич Л.С., Крылов И.А. Превентивное действие каротинсодержащих препаратов на модели острого гастрита/ Экспериментальная клиническая фармакология М. - 2001. - Т. 64. - № 1. -С. 53-56.

87. Юб.Полуновский В.А. Генетический контроль размножения клеток и эволюция клеточного цикла//Цитология. Ленинград. - 1982. - Т. 24. - № 12. -С. 1379-1389.

88. Свободнорадикальное окисление липидов в норме и патологии/Рощупкин Д.И., Петренко Ю.М., Кузнецова Г.П., Владимиров Ю.А.-М,-1976.-163 с.

89. Кудряшов Б. А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и ее свертывания. М.: Медицина. - 1975. - 488 с.

90. Дж. Фэллон. Патфизиология сердечно-сосудистой системы/(Пер.с англ.) Под ред. Наточина Ю.В. 2000. - 440 с.

91. Чернух A.M., Александров П.Н., Алексеев О.В. Микроциркуляция. -М.: Медицина. 1984. - 429 с.

92. Ш.Колла В.Э., Сыропятов Б.Я. Дозы лекарственных средств и химических соединений для лабораторных животных. М.: Медицина. -1998.-263 с.

93. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте/Западнюк И.П., Заладнюк В.И., Захария Е.А. и др. Киев: Вища школа. - 1983. - 384 с.

94. Сидоров К.К., Измеров Н.Ф., Саноцкий И.В. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии (Справочник). М.: Медицина. - 1977. - 240 с.

95. Арзамасцев Е.В., Любимов Б.И. Современные требования к доклиническому изучению безопасности новых лекарственных препаратов/Токсикол.вестник. М. - 1994. - № 4. - С. 10 - 14.

96. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М. - 1972. - С. 241 - 243.

97. Бурлакова Е.В. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. М. -1972.-С. 23-24.

98. Баратс С.С., Смоленская О.Г. Перикисное окисление липидов и гиперурикемия у больных ишемической болезнью сердца/Кардиология. М.: Медицина. - 1990. - Т. 30. - № 4. - С. 51 - 53.

99. Bruce R. A., De Rouen Т. A, Hossaek К. F. Value of maximal exercise tests in risk assessment of primary coronary heart disease events in healthy men: five years experience of the Seattle Heart Watch Study //Amer. J. Cardiol.- 1980.

100. Cohn P. F. Silent myocardial ischemia //Ann. Intern. Med.- 1988 Vol. 109.-P. 312-317.

101. Dayton S. Nutrition and atherosclerosis //Prog. Food Nutr. Sci.- 1975.-Vol. 1,№3. P. 191 -206.

102. Gordon T, Thorn Th. The recent disease in CHD mortality //Prev. Med.-1975. Vol. 4, № 2. - P. 115-125.

103. Gordon T. Coronary heart disease in young women incidence and epidemiology //Coronary heart disease in young women /Ed. M.F. OliverEdinburgh, London, New York, 1978,- P. 8-19.

104. Hikman I.I., Une G.S., Cook R. et al. A natural history study of (asymptomatic coronary disease //Amer. J. Cardiol." 1980,- Vol. 45,- P. 422- 427.

105. Gulledge A.D. The psychological aftermath of a myocardial infarction //Psychological aspects of a myocardial infarction and coronary care.- Saint Louis, 1975.-P. 107-122.

106. Herd J. A., Weiss S. M. Overviw of hypertension: its treatment and prevention //Behavioral health /Ed. Matarozzo I. D.- New-York: Wiley, 1984.- P. 789-805.

107. Piekermg T. G„ Harshfild G. G., Blank S. et al. Behavioral determinants of 24 hour blood pressure pattern in borderline hypertension //J. Cardiovasc. Phannac.-1986.- Vol. 8, N 5,- P. 89-92.

108. Weiss E. Psychosomatic Medicine.- Philadelphia, London, 1957,- 557 p.

109. Hansson L. Current and future strategies in the treatment of hypertension //Amer. J. Cardiol.-1988.- Vol. 61,- P. 2-7.

110. Negver M. Organic-chemical Drugs and their Synonyms. Berlin. -1987/ - 345 p.

111. Antipiatelet Trialsts Collaboration. Secondary prevention of vascular disease by prolonged antiplatelet treatment// Brit.med. J 1988. - Vol. 269. -P.320-331.

112. Aspirin Myocardial Infarction Study Research Group. A randomized controlled trial of aspirin in persons recovered from myocardial infarction//J.A.M.A. 1980. - Vol. 243. - P. 661 - 669.

113. Cairns J.A., Gent M. Singer J et al. Aspirin, sulfinpyrazone, or both in unstable angina. Results a Canadian multricenter trial// New Engl. J. Med. 1985. -Vol. 313.-P. 1369-1375.

114. Roquier-Charles Danielle. Vers de nouveaux anti-inflammatoires// Actual.pharm. 1998. - Vol. 365. - P. 42 - 43.

115. Bellosillo Beatriz, Pique Maria, Barragan Mantserrat et all. Aspirin and salicylate induse apoptosis and activation of caspases in B-cell chronic lymphocytic leukemia cells//Blood. 1998. - Vol. 4. - P. 1406 - 1414.

116. Byron C., Mark F. Effects of Very Low Dose Daily, Longterm Aspirin Therapy on Gastric, Duodenal, and Rectal Prostaglandin leveels and on Mucosal Injury in Healthy Humans//Gastroenterology. 1999. - Vol.117 - P. 17 - 25.

117. Cooke Glen E., Bray Paul F., Hamtington Jeanette D. et all PJA2 polymorphism and efficacy of aspirin//Lancet. 1998. - Vol. 9111. - P. 1253.

118. Patrono C., Patrignani P., Panara M. et al.Improved Nonsteroidal Antiinflammatory Drugs. COX-2 Enzyme Inhibitors// Eds J. Vane et al. Boston. -1996.-P. 121-132.

119. Marini M., Gesi A, Masotti G. J primi cento anni dellaspirina//G.Gerontol. 1997. - Vol. 45. - P. 507 - 515.

120. Loperz-Fare A., Caramelo C., Esteban A. et al. Effects of aspirin on platelet-neutrophil interactions. Role of nitric oxide and endofhelin-l//Circulation. 1995. - Vol. 91 - P. 2080 - 2088.

121. Santos m.T., Vallès J., Marcus J.et al. Enhancement of platelet reactivity and modulation of eicosanoid production by intact erythrocytes. A new approad to platelet activation and recruitment.//J.clin. invest. 1991. - Vol. 87. - P. 571 -580.

122. Valles J., Santos M.T., Marcus A.J.et al. Downregulation of human platelet reactivity by neutrophils. Participation of lipoxygenase derivatives and adhesive proteins//!clin. Invest. 1993. - Vol. 92. - P. 1357 - 1356.

123. Wu K.K., Sanduja R., Tsai A.L.et al. Aspirin inhibits interleukin 1-induced prostaglandin H synthase expression in cultured endothelial cells//

124. Proc.nat. Acad. Sci. USA. 1991. - Vol.88. - P. 2384-2387.

125. Silberbauer K., Schernthaner G., Sinzinger H. et al. Decreased vascular prostacylin in juvenile-onset diabetes//New Engl. J. Med. 1979 - Vol. 300. -P. 366.

126. Sinzinger H., Silberbauer K., fiegl W.et al. Prostacyclin activity is diminished in different types of morphologically controlled human atherosclerotic lesions//Trombos.a.Haemostas. 1979. - Vol. 42. - P. 803.

127. Zibon V.A., Maruta H., Lord I.et al. Increased biosynthesis of thromboxane A2 by Diabetic platelets/ZEurop. J.clin. Invest. 1979. - Vol. 9. - P. 223.

128. LakinK.M., Makarov V.A. Thrombosis and Thrombolysis. Consultants Bureau/Ed. E.I. Chazov, V.N. Smirnov//New York. 1986. - P. 311 -363.

129. Lakin K.M., Schipilova S.J., Novikova N.V.et al. Action of nonsteroidal anti-inflammatory agents on fibrinolysis and platelet aggregation/ZFolia haemat. -1986. Vol. 113. - P. 230 - 235.

130. Breddin H.K.Preseribing nonsteroidae antiinflammatory drugs what's new?// Pheumatol. - 1997. - Vol. 2. - P. 243 - 245.

131. Lewis PJ.W., Dollery C.T. Clinical pharmacology and potential of prostacyclin//Brit.med.Bull. 1983. - Vol. 39. - P. 281 -284.

132. De Confo Antonio Alves, dos Santos Continho Devora, Rezende Assaf Joao Alexandre. Terapéutica antitronbotica ñas doencas cardiovasculares

133. Arg.bras.med. 1997. - Vol. 2. - P. 45 - 49.

134. Thastrup 0.,Knudsen J.B., Lemich P., Winter K. Inhibition of human platelet aggregation by dihydropyrano- and dihydrofuranocoumariins, a new class of cAMP-phosphodiesterase inhibitors// Biochem. Pharmacol. 1985. - Vol. 34. -P. 2137-2140.

135. Verstraete M. A pharmacological approach to the inhibition of platelet adhesion and platelet agregation. Wright-Schulte Lecture/ZHaemostasis. 1982. -Vol. 12. P. 317-336.

136. Andrioli Giuseppe, Lussignoli Sabrina, Gaino Stefania et all. Stady on paradoxical effects of NSAIDs on platelet activation//Arzneimittei-Forsch. 1997. -Vol. 5.-P. 519-530.

137. Revell P., Sleter G.P. Antiplatelet therapy in thrombotic thrombocytopenic purpura// Lancet. 1992. - N 8823. - P. 252.

138. Tantcheva L., Stoytchev T., Bangelova D. Influence of hydrocortisone of analgesi effect, toxiby and metabolism of aspirin in mice// Gen. Pharmacol. -1997.-Vol. 28.-P. 123-128.

139. Femadez-Urrusuno R., Fattal E. Eveluation of hepatic antioxidant sistems after intravenous administration of polymeric nanopartices/ZBiometerials. 1997.

140. Vol. 18, Suppl. 6.-P. 511-517.

141. Robinson B.V., Sullivan F.M., Borzelleca J.F., Schwarttz S.L.//PVP: A critical review of the kinetica and toxycology jf polyvinylpyrrolidone (povidone) /Chicago:Lewis publ., 1990. - P. 209.

142. Wessel W., Schoog M., Winker E. Poluvinylpyrrolidone (PVP), its diagnostic, therapeutic and technical application and consequences thereof// Arzneim. Forsch. (Drug., Res.). - 1971. - Vol. 21. - P. 510.

143. Alemany M., Rosell G., Bastida E. Effects of aspirin and indomethacin separetely in red blood cells and platelets modylation of the adhesiae and eohosive fuctions//Platelets. 1996. - Vol. 5, 6. - P. 277 - 282.

144. Kawasaki Yoko, Taceda Juiko, Jshiwata Hajimu. Eisei shikenjo hokoku/ZBull. Nat. Jnst. Hyg. Sei. 1995. - Vol. 113. - P. 77 - 80.

145. Ma Jian-Biao. Gaodend xuexiao huaxun xuebao//Chem J.Clin. 1997. -Vol. 18, Suppl. 7. - P. 1227 - 12235.

146. Moncada S., Vane I.R. Prostacyclin in cardiovascular system//Advanc Prost. Thromb. Res. 1980. - Vol. 6. - P. 43 - 59.

147. Salon K. Serum lipid peroxide in cerebrovascular disorders determinedby a new colometric method/ Clin. Clim. Acta. 1978. - № 90. P. 37-43.

148. Schneider B. Arzneimittelsicherheit und hterapeutischer Index. Prinzipen des pharmakologeschen Screenings und der Ubertragbarkeit tierexperimentelles Ergebnisse auf die Klimik.-Arzneimittej-Forschung. 1982. -№ 32. -P. 471 -474.

149. Lukas Erica R, Bartley Stephanie M., Diar Zoleida M., et all. No effect of loss E2F1 jn liber regeneration or hepatocareinogenesis in C5BL/6J or C3H/HeJ mice/Mol. Carcinogenes. 1999. - Vol. 25. - № 4. - P. 295 - 303.

150. Haupt Karlsten, Mosbach Klaus.Plastic antibodies: Developments and applications/Mycoses. 1998. - Vol. 41. - № 11 - 12. P. 468 - 475.

151. Faiture of antiplatelet effectivness of low-dose ASA in essentialiLthrombocytaemia: Absar. 14 Jnt.Cougr.Fibrinolysis and Proteolysis. 1998. -Vol. 12. - Suppl. - № 1.-P81.183

152. Савченкова JI.B. Гшоксичний синдром: молекулярш мехашзми патогенезу та фармакотератя/Укр. Лши. - 1988. - № 2. - С. 66 - 68.

153. Safo Tatsusuke, Miura Tomisato, Jnone Fumio et all. Relatioahip of DNA ploidy, nuctear area, nuclear numler and cell size of hepatocytes in rats: Abstr. 13ht Congr. Cytol/ Tokyo, May 10 14. - 1998. - № 2. - Suppl. - P. 562.