Биологические свойства иммуномодуляторов, их эффективность при профилактике экспериментального туберкулеза животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат биологических наук Азаев, Мамедьяр Шакир оглы

• Азаев, Мамедьяр Шакир оглы
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Азаев, Мамедьяр Шакир оглы

Список используемых сокращений.

Введение.

Глава 1. Литературный обзор.

Иммунобиологические свойства иммуномодуляторов и механизмы реализации биологических свойств в формировании неспецифического и специфического иммунного ответа.

1.1. Биологические свойства иммуномодуляторов.

1.2. Иммуномодуляторы, цитокины.

1.2.1.Роль цитокинов в формировании неспецифического и специфического иммунитета при инфекционном процессе.

1.2.2. Интерфероны.

1.2.3.Факторы некроза опухолей (ФНО-а).

1.2.4. Иммуностимулирующие свойства пробиотиков.

1.2.5. Диснуклеотидозы и иммунологические расстройства.

1.2.6. Иммунная природа хронических инфекций.

1.2.7. Важность определения иммунного статуса организма.

1.2.8. Сочетанное применение иммуномодуляторов и вакцин. Адьювантные свойства иммуномодуляторов.

1.2.9. Исследование биологических свойств иммуномодуляторов in vitro. Побочные эффекты иммуномодуляторов.

1.3. Туберкулез.

1.3.1. Туберкулез сельскохозяйственных животных.

Общие сведения.

1.3.2. Восприимчивость животных к туберкулезу.

1.3.3. Патогенез.

1.3.4. Клиническая картина.

1.4. Туберкулез лабораторных животных.

1.5. Роль первичных иммунодефицитов в формировании чувствительности и устойчивости к туберкулезной инфекций.

1.6. Эффективная вакцинация как мера борьбы с туберкулезом сельскохозяйственных животных.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологические свойства иммуномодуляторов, их эффективность при профилактике экспериментального туберкулеза животных»

Актуальность проблемы.

В настоящее время повсеместно отмечается нарастание заболевания туберкулезом как среди людей, такчсреди и животных. Это \ связано не только с появлением устойчивых к туберкулостатическим препаратам патогенных штаммов микобактерий, но и с увеличением числа людей и животных с иммунодефицитными состояниями [1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9]. Экономический ущерб от туберкулеза в животноводстве огромен. Обширность поражения существенно затрудняет процесс разрыва эпизоотологической и эпидемиологической цепи. Традиционный путь профилактики туберкулеза животных - вакцинация БЦЖ, без иммунокоррекции и учета иммунного статуса животного не дает желаемых результатов. Перспективным в этой связи является вакцинация БЦЖ при сочетанном применении с иммуномодуляторами -веществами, способными корректировать нарушения иммунной системы и приводить ее к норме. По мнению ряда исследователей основной причиной возникновения хронических форм заболеваний человека и животных являются первичные и вторичные иммунодефициты [4, 5].

Первичные иммунодефициты обусловлены генетическими отклонениями в развитии, пролиферации и дифференцировке иммунокомпетентных клеток В и Т лимфоцитов, что приводит к дефектам гуморального и клеточно-опосредованного иммунитета и к увеличению чувствительности к инфекциям. Вторичные иммунодефициты связаны с действием на человека и животных неблагоприятных естественных и искусственных факторов среды обитания: старения, радиации, стрессов, длительной персистенции вирусов, бактерий, паразитов и патогенных грибов. Для человеческой популяции довольно четко прослеживается связь вторичных иммунодефицитов и ухудшения условий жизни, в частности белково-витаминных голодании, дистрофии. К вторичным иммунодефицитам в животноводстве приводят несоблюдение режимов микроклимата, норм кормления, высокая плотность размещения животных, адинамия [5, 6, 8]. Процесс хронизации вирусных и бактериальных инфекций на фоне вторичных иммунодефицитных состоянии приводит к снижению естественной резистентности организма.

В современных условиях развития животноводства в России, на фоне резкого увеличения количества хронических инфекций, вторичных иммунодефицитов и недоступности эффективных антибактериальных и противовирусных средств, повышение резистентности сельскохозяйственных животных является актуальной задачей. Развитие средств иммунологической защиты идет в двух направлениях -улучшение старых и создание новых эффективных вакцин, а также регуляция иммунологической реактивности с помощью иммуномодуляторов [7]. Для того чтобы эффективно использовать вакцинацию сельскохозяйственных животных в комбинации с иммунокоррегирующими препаратами, очень важно хорошо представлять, как такие вакцинации отражаются на иммунном статусе организма животного, что происходит с Т- и В- клеточным ответом. Несмотря на то, что используется уже более 100 вакцин и ведутся достаточно интенсивные исследования в этом направлении, задача эффективной иммунопрофилактики инфекционных заболевании остается одной из самых актуальных проблем биологической науки. Остается широкое поле деятельности для подбора эффективных иммуномодуляторов и оптимальных схем их сочетанного использования с вакцинами.

Тематическую направленность данной работы определило существование вопросов эффективного использования иммуномодуляторов и проблемы эффективной защиты от хронических инфекции сельскохозяйственных животных путем вакцинации и усиления резистентности макроорганизма к инфекционным агентам. Цель и задачи исследования.

Целью настоящей работы является изучение иммуногенных и протективных свойств различных иммунокоррегирующих препаратов и эффективности их использования при профилактике туберкулеза животных. Для достижения этой цели решались следующие задачи.

1. Предварительное изучение основных доклинических эффектов препарата ДНК полученной из молок лососевых рыб, химико-ферментативным методом; острая токсичность, хроническая токсичность, пирогенность, анафилактогенность, токсичность при совместном применении с бактериостатическом препаратом ниазоном.

2. Изучение в экспериментальных условиях факторов специфического и неспецифического иммунного ответа у животных при сочетанном применении вакцины БЦЖ с препаратами реафероном, ФНО-а, рекомбинантным штаммом Bacillus subtilis 2335/105, t а также ДНК из молок лососевых рыб.

3. Определение степени эффективности применения вышеперечисленных препаратов сочетанно с вакциной БЦЖ и перспективы их дальнейшего использования в схемах специфической профилактики туберкулеза животных.

Научная новизна работы.

Впервые изучено влияние препаратов реаферона, рекомбинантного штамма Bacillus subtilis 2335/105, ФНО-а, и ДНК из молок лососевых рыб при сочетанном применении с вакциной БЦЖ на течение экспериментальной туберкулезной инфекции у морских свинок, вызванной Mycobacterium bovis (шт.№14), с исследованием факторов специфического и неспецифического иммунного ответа.

Проведены доклинические исследования препарата ДНК выделенного химико-ферментативным методом из молок лососевых рыб с определением основных физико-химических и клинико-патоморфологических показателей.

Теоретическая и практическая значимость работы.

Результаты проведенных исследований являются экспериментально-теоретической предпосылкой для решения практических вопросов, связанных с проблемой повышения эффективности профилактики туберкулеза животных за счет рационального сочетанного использования вакцины БЦЖ с иммунокоррегирующими препаратами.

Проведенные доклинические исследования препарата ДНК полученного из молок лососевых рыб, химико-ферментативным методом, открывают возможность его клинического изучения и практического применения в экспериментальной ветеринарии.

Изучены методические подходы повышения эффективности специфической профилактики экспериментального туберкулеза животных при сочетанном использовании вакцины БЦЖ с препаратами ФНО-а и ДНК из молок лососевых рыб, основанной на сравнении различных иммунологических показателей у животных, чувствительных к заражению возбудителем туберкулеза.

Разработан способ снижения токсичности туберкулостатического препарата ниазона при совместном применении с инъекционным препаратом ДНК из молок лососевых рыб для дальнейшего практического решения проблемы повышения эффективности схем химиопрофилактики туберкулеза животных. Апробация работы.

Полученные результаты были представлены на Региональной научно-практической конференции "Химическая и химикофармацевтическая промышленность в современных условиях" (Новосибирск,1999) и на Международной конференции "Проблемы биологической и экологической безопасности" (Оболенск, 2000). Основные положения, выводы и практические предложения диссертации были обсуждены и одобрены на заседании научного семинара НИИ биоинженерии ГНЦ ВБ "Вектор" и ИЭВСиДВ СО РАСХН (2000).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Результаты экспериментального изучения влияния препаратов реаферона, ФНО-а, рекомбинантного штамма B.subtilis 2335/105, ДНК из молок лососевых рыб сочетанно с вакциной БЦЖ на течение туберкулезной инфекции у морских свинок и на факторы специфического и неспецифического иммунного ответа.

2. Материалы исследований, подтверждающие роль препаратов ФНО-а и ДНК из молок лососевых рыб сочетанно с вакциной БЦЖ в повышении эффективности иммунопрофилактики туберкулеза животных.

3. Результаты доклинических исследований, доказывающие отсутствие токсикогенных, анафилактогенных и пирогенных свойств у препарата ДНК из молок лососевых рыб, полученного химико-ферментативным методом.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Азаев, Мамедьяр Шакир оглы

Выводы

1. Результаты доклинических исследований, проведенных на лабораторных животных, свидетельствуют об отсутствии пирогенности, острой токсичности, хронической токсичности и анафилактогенности у инъекционного препарата ДНК из молок лососевых рыб, выделенного химико-ферментативным методом.

2. Впервые показано, что совместное использование препарата ДНК из молок лососевых рыб в дозе 25 мг/кг с композиционным препаратом ниазон, разработанного для химиопрофилактики туберкулеза животных, достоверно снижает его токсичность с ЛД50-796 мг/кг до ЛД50-926 мг/кг (Р<0,05).

3. Двухкратное введение препаратов ФНО-а (1млн.МЕ на животное) или ДНК из молок лососевых рыб (5 мг на животное) сочетанно с вакциной БЦЖ способствует развитию высокого уровня защитного иммунитета до 8090% против заражения возбудителем туберкулеза М. bovis, сопровождаемого активацией клеточных факторов иммунного звена у морских свинок через индукцию биосинтеза медиаторов иммунной системы (ИФН, ИЛ-1, ИЛ-2).

4. Установлено, что введение реаферона или рекомбинантного шт. В. subtilis, продуцирующего человеческий интерферон- аг, сочетанно с вакциной БЦЖ морским свинкам, значительно повышает концентрацию суммарного пула противотуберкулезных антител, но не приводит к увеличению уровня функциональной активности мононуклеарных клеток и повышению защитного эффекта по сравнению с иммунизацией только вакциной БЦЖ.

5. Показана принципиальная возможность повышения эффективности противотуберкулезного иммунитета с применением иммуномодуляторов, действующих преимущественно на Т-клеточную систему иммунитета, сочетанно с вакциной БЦЖ.

Заключение

В результате проведенных исследований на модели экспериментального хронического туберкулеза показано, что эффективность специфической иммунопрофилактики значительно повышается при включении в нее рекомбинантных цитокинов и (или) препарата ДНК, которые способны оказывать иммуностимулирующее действие. При иммунопрофилактике туберкулеза животных вакциной БЦЖ сочетано с ФНО-а и субстанцией ДНК из молок лососевых рыб, активируются клеточные факторы иммунитета, что выражается в эффективности иммунизации. При этом отмечено, что сочетанное использование рекомбинантного штамма B.subtilis и серийного препарата реаферона с вакциной БЦЖ активирует, в основном, гуморальные и неспецифические факторы иммунного звена. Использование иммунобиологических свойств исследованных препаратов открывает возможности селективной активации клеточных или гуморальных факторов иммунного ответа в зависимости от их значимости для элиминации этиологического фактора инфекционного заболевания. Совместное введение рекомбинантного штамма B.subtilis, ФНО-а, реаферона или ДНК из молок лососевых рыб с вакциной БЦЖ сопровождается повышением активности сывороточного интерферона, ИЛ-1, ИЛ-2 на начальных стадиях иммунизации, что способствует усилению макрофагального и нейтрофильного фагоцитоза.

При исследовании совместного действия ДНК с химиопреларатом пролонгированного действия ниазоном, установлено существенное снижение токсичности данного препарата, весьма перспективного для проведения химиопрофилактики туберкулеза у животных. Возможность снижения токсических эффектов бактериостатических препаратов при их совместном применении с ДНК, открывает интересные возможности для разработки новых, более эффективных схем лечения.

Выявленные в наших экспериментах перспективы использования ДНК из молок лосося с вакцинными и бактериостатическими препаратами, заставили нас провести более детальное доклиническое исследование полученного альтернативным методом ДНК содержащего препарата. По результатам исследования острой и хронической токсичности, пирогенности, анафилактогенности можно заключить, что ДНК из молок лосося безвредна для теплокровных животных.

Эти результаты открывают возможность применения полученного ДНК-препарата в экспериментальной патологии различных заболеваний и более детального клинического исследования.

Суммируя, полученные в данной работе экспериментальные данные в целом, можно заключить, что существует сложная взаимосвязь специфических и неспецифических факторов иммунного ответа при сочетанном использовании иммунокоррегирующих препаратов с вакциной БЦЖ при иммунопрофилактике туберкулеза животных.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Азаев, Мамедьяр Шакир оглы, 2001 год

1. Мирлина Е.Д., Вышневский Б.И., Ланцов В.А. Диагностика туберкулеза: результаты практического применения ПЦР-теста "Амплитуб-К" // Биотехнология. 1997. - №11-12. - С.64-68.

2. Оттен Т.Ф. Микобактериоз легких: клинико-бактериологические критерии диагностики // Большой Целевой Журнал о туберкулезе. -1999. №5. - С.17-19.

3. Rattan A., Kalia A., Ahmad N. Multidrug-resistant Micobacterium tuberculosis: molecular perspectives // Emerging Infect. Disease. 1998. -Vol.4.-P.195-209.

4. Земсков A.M., Караулов A.B., Земсков B.M. Комбинированная иммунокоррекция. М.: Наука, 1994. 260с.

5. Кетлинский С. А., Калинина Н. М. Иммунология для врача. Санкт-Петербург: Гиппократ. 1998. 156с.

6. Кузнецов Ф.А., Баланин И.В. Справочник по ветеринарной гигиене. М.: Колос. 1984.- 335с.

7. Донченко А.С., Аликин Ю.С., Донченко В.Н. Применение биологически активных веществ в качестве иммуномодуляторов в ветеринарии и медицине: Обзор литературы // Ин-т экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальн. Востока. Новосибирск, 1989. С.43.

8. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Воробьев А.А. Эндогенные иммуномодуляторы. Санкт-Петербург: Гиппократ. 1992. 255с.

9. Лихолетов С.М. Современные аспекты разработки вакцин, адъювантов и иммуностимяляторов // Успехи совр. биологии. 1988. - Т. 105. - С.83-99.

10. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина. 1982. 367с.

11. Кабанов В.А., Петров Р.В., Хаитов P.M. Итоги науки и техники // Сер. Иммунология. М.: 1984. Т.13. - С.6-53.-11112. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Основные представления об иммунотропных лекарственных средствах // Иммунология. 1996. -№6. - С.4-9.

12. Беседкова Н.Н. Спектр и некоторые механизмы действия иммуномодуляторов природного происхождения // В сб. Иммуномодуляторы и их значение в инфекционной и неинфекционной патологии. М.: 1988. С. 17.

13. Wustenberg P., Henneicke-von Zepelin И., Kohler G., Stammwitz U. Efficacy and mode of action of an immunomodulator herbal preparation containing Echinacea, wild indigo, and white cedar // Adv. Ther. 1999. -Vol.16.-P.51-70.

14. Петров P.B., Михайлова A.A., Захарова Jl.A. Костномозговые медиаторы, регулирующие иммунный ответ (миелопептиды) // Гематология и трансфузиология. -1984. -№2. С.43-45.

15. Ярилин А.А. Система цитокинов и принципы ее функционирования в норме и патологии // Иммунология. 1997. - №5. - С.7-14.

16. Van der Meer J.M., Netea M.G., Kullberg B.J. Cytokines and immunotherapy in infectious diseases // Ned Tijdschr Geneeskd. 1999. -Vol.143.-P.2252-2255.

17. Земсков M.B, Земсков A.M. Диалектика некоторых форм современной иммунопатологии //Иммунология. 1984. - №1. - С.5-10.

18. Земсков В.М., Земсков A.M. Принципы дифференцированной иммунокоррекции // Иммунология. 1996. - №3. - С.4-6.

19. Петров Р.В., Хаитов P.M. Искусственные антигены и вакцины. М.: Медицина. 1988. 288с.

20. Галактинов В.Г. Иммунология. М.: Изд-во МГУ. 1998. 480с.

21. Коляков Я.Е. Ветеринарная иммунология. М.: Агропромиздат. 1986. 270с.-11223. Брондз Б.Д., Рохлин О.В. Молекулярные и клеточные основы иммунологического распознавания. М.: 1978. - 335с.

22. Вайсман И.Л., Худ Л.Е., Вуд У.Б. Введение в иммунологию / М.: Высшая школа. 1983. 160с.

23. Косяков П.Н. Общая и частная вирусология / М.: Медицина. 1982. -Т.1. С.341-345.

24. Эпизоотология и инфекционные болезни сельскохозяйственных животных / Под ред. А.А. Конопаткина. М.: Колос. 1984. 537с.

25. Abrams P.G., Clamrock Е.М., Foon К.А. Evening administration of alfa-interferon//New Engl. J. Med. 1985. - Vol.312. - P.443-447.

26. Walter M.R., Windsor W.T., Nagabhushan T.L., Lundel D.J. et al. Crystal structure of a complex between interferon-y and its soluble high affinity receptor // Nature. 1995. - Vol.376. - P.230-235.

27. Носик H.H., Ершов Ф.И. Клиническое использование интерферона и его индукторов // Антибиотики. 1980. №9. - С.695-710.

28. Ronald В., Ortaldo J.R., Timonen Т. et al. Interferon and natural killer (NK)cells // Tex. Rep. Biol. Med. 1981-1982. - Vol.41. - P.590-594.

29. Ершов Ф.И. Интерфероны (к 40-летию открытия) // Вопросы вирусологии. 1998. - С.247-252.

30. Wheelock E.F. Interferon-like virus-inhibitor induced in human leukocytes by phytohemagglutinin // Science. 1965. - Vol.149. - P.310-311.

31. Boresky L. Interferon after 30 years of investigation // Acta virol. 1998. - Vol.33. - P.378-397.

32. Ijzerman J.N., Bouwvan E.,Bijma A., Jeekel J., Van der Meide P., Marguet R. Immunomodulation by recombinant rat interferon-y in vitro //J. Interferon Research. 1990. - Vol.10. - P.203-211.

33. Jouanguy E., Doffinger R., Dupuis S., Pallier A., Altare F., Casanova J.L. IL-12 and INF-y in host defense against mycobacteria andsalmonella in mice and men // Current Opinion in Immunology. 1999. -Vol.11.-P.346-351.

34. Виноград H.A., Сайиткулов A.M., Тазулахова Э.Б., Ершов Ф.И., Шаткин А.А. Применение индуктора интерферона лафарина при экспериментальной нелетальной хламидийной инфекции мышей // Интерферон-89: Сб. научных тр. М.: 1989. С.129-132.

35. Ершов Ф.Н., Жданов В.М. Клинически перспективные индукторы интерферона // Индукторы интерферона. М.: Ин-т вирусологии АМН СССР. 1982.-С.17.

36. Фомина А.Н., Григорян С.С. Биологическая активность нового отечественного природного индуктора двунитевой РНК // Антибиотики. - 1980. - №1. - С.28-32.

37. Фомина А.Н., Буката JI.A., Григорян С.С. и др. Изучение нового индуктора интерферона дсРНК- при экспериментальных вирусных инфекциях // Индукторы интеферона. Рига.: 1981. - С.26-29.

38. Аликин Ю.С. Стимуляторы неспецифической резистентности на основе РНК для ветеринарной медицины // Дис. . докт. биологических наук. Новосибирск, 1998. - 314с.

39. Фельдман Г .Я., Умбрашко Ю.Б., Буйкис А.Х. и др. Физико-химические и биологические свойства двуспиральной РНК -индуктор интерферона // Вопросы вирусологии. 1984. - №4. -С.463-468.

40. Beutler В. and Cerami A. Cachectin and tumour necrosis factors as two sides of the same biological coin // Nature. 1986. - Vol.320. - P.584-588.

41. Beutler B. et al. Identity of tumour necrosis factors and the macrophage-secreted factor cachectin //Nature. 1985. - Vol.316. - P.552-554.

42. Beutler В., Milsark J.W., Cerami A.C. Passive immunization against cachectin/tumour necrosis factor protects mice from lethal effect of endotoxin // Science. 1985. - Vol.229. - P.869-871.

43. Carswell D. A., Old L. J., Kassel R. L. et al. An endotoxin-induced serum factor that causes necrosis of tumors // Proc. Natl. Acad. USA. -1975. Vol.72. - P.3666-3670.

44. Aggarwal B.B., Henzel W.J. et al. Primary structure of human lymphotoxin derived from 1788 lymphoblastoid cell line // J. Biol. Chem. 1985. - Vol.260. - P.2334-2344.

45. Aggarwal B.B., Kohr W.J., Hass P.E. et al. Human tumor necrosis factor. Production, purification and charaterization // J. Biol. Chem. -1985. Vol.26. -P.2345-2344.

46. Fransen L., Muller R., Marmenout A. et al. Molecular cloning of mouse tumour necrosis factor cDNA and its eukariotic expression // Nucl. Acids Res. 1985. - Vol.13., №2. - P.4417-4429.

47. Haranaka K., Carswell E.A., Williamson B.D. et al. Purification, characterization and antitumor activity of non recombnant mouse tumornecrosis factor//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1986. - Vol.83. - P.3949-3953.

48. Масычева В.И., Фадина В.А., Сысоева Г.М., Даниленко Е.Д., Разворотнев В.А. Изучение иммуномодулирующей активности рекомбинантного человеческого фактора некроза опухоли-бета (ФНО-(3) // Сб. науч. тр. сотрудников НИКТИ БАВ: Бердск, 1996. -С.98-103.

49. Денисов А.А., Пинегин Б.В., Еремин О.Ф., Кулаков В.В., Михина JI.B., Николаева О.Г., Мартынов А.И. Изучение иммунорегуляторных свойств рекомбинантного лимфотоксина человека // Иммунология. 1996. - №1. - С.34-39.

50. Bulkwill F., Lee A., Adam J. et al. Human tumor xenografts treated with recombinant human tumor necrosis factor alone or in recombination with interferon // Cancer Res. 1986. - Vol.46. - P.3990-3993.

51. Parant M. Effects of TNF on bacterial infection // Multiple roles of TNF:, 22nd forum of immunology / Paris, 1988. - P.301-304.

52. Cross A., Sadoff J., Kelly N. Treatment with recombinant murine tumor necrosis factor a (cachectin) and murine interleikin-la protects mice from lethal bacterial infection // J. Exp. Med. 1989. - Vol.169. -P.2021-2027.

53. Технические условия / 9291-037-23609643-98 "Ветом"-3. 1998. -11c.

54. Технические условия / 9291-020-23609643-98 "БИОСЕПТИН". -1998. 14с.

55. Palva J., Lenhtovaara P.Kaariainen L. et al. Secretion of interferon by Bacillus subtilis // Gene. .1983. - Vol.22. - P.229-235.

56. Vazantha N., Thompson L.D., Rpodes C.S. et al. Genes for alkaline protease and neutral protease from Bacillus amyloliguefaciens contains a coding for signal sequence an mature protein // J. Bacteriol. 1984. -Vol.159.-P.811-819.

57. Виноградов E. Я., Хохрин C.H. К вопросу о безвредности микроорганизмов Вас. mucilagenosis для человека и животных. // Сб. науч. тр. / Ленинградского вет. Ин-та. 1981. - С. 10-13.

58. Ильичев А.А., Беликов С.И., Пугачев В.Г., Тимофееев И.В., и др. Конструирование рекомбинантной плазмиды, обеспечивающей отбор оптимального промотора гена интерферона-осг человека // Молек. генет. микробиология и вирусология. 1986. - №7. - С.22-24.

59. Fleury С. Les souchesfortement hemolysantes de Bacillus subtilis sont-elles pathogenes? //Arch. Sci. 1983. - Vol.16. - P.469-470.

60. Белявская B.A. Рекомбинантные микробиотики // Сб. науч. тр. сотрудников НИКТИ БАВ: Бердск, 1996. С. 190-197.

61. Белявская В.А. Перспективы создания рекомбинантных штаммов бацилл для конструирования новых биопрепаратов // Автореф. дис. . канд. биол. наук. Киев, 1992. 22с.

62. Хаитов P.M., Земсков A.M., Земсков В.М. Диснуклеотидоз и иммунологические растройства // Иммунология. 1996. - №3. - С.7-10.

63. Гендон Ю.З. Полинуклеотидные (ДНК) вирусные вакцины и проблемы их безопасности // Журн. микробиол. 1997. - №1. - С. 78-81.

64. Barry М., Johnston S. Biological features of genetic immunization // Vaccine. 1997. - Vol.15. - P.788-791.

65. Гендон Ю.З. Прогресс в разработке вирусных полинуклеотидных (ДНК) вакцин // Вопросы вирусологии. 1999. - №4. - С. 148-153.

66. Xiang Z., Spitalnik S., Chehg J. et al. Immunoresponses to nucleic acid vaccines to rabies virus // Virology. 1995. - Vol.209. - P.569- 579.

67. Петров P.B., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммунодиагностика иммунодефицитов //Иммунология. 1997. - №4. - С.4-7.

68. Марчук Г.И. Математические модели в иммунологии. М.: Наука. 1980. 264с.-11881. Ноздрин Г.А. Фармакологическая коррекция иммунодефицитов у телят в ранний постнатальный период жизни // Автореф. дис. . д-ра вет. наук. Санкт-Петербург, 1996. - 37с.

69. Ширинский B.C., Старостина Н.М., Сенникова Ю.А., Малышева О.А. Проблемы диагностики и классификации вторичных иммунодефицитов // Аллергология и иммунология. 2000. - Т.1, -№1. - С.62-70.

70. Петров Р.В., Павлюк А.С., Ковальчук J1.B. и др. Интерлейкинзависимые иммунодефициты человека // Иммунология. 1987. - № 4. - С.20-23.

71. Петров Р.В., Чередеев А.Н., Ковальчук JI.B. Клиническая иммунология: сегодняшние проблемы и будущие перспективы // Иммунология. 1982. - № 6. - С.21-4.

72. Новиков Д.К. Общие принципы иммунодиагностики и иммунотерапии: Иммунологический статус как феномен болезни и критерии целенаправленной иммунокоррекции // Иммунодиагностика и иммунотерапия / Сб. науч. тр.: Л., 1986. -№6. -С.3-13.

73. Петров Р.В., Чередеев А. Н., Ковальчук Л.В. Проблема клинической иммунологии на современном этапе // Иммунология. -1984. №6. - С.9-11.

74. Чередева А.Н., Ковальчук Л.В. Интерпретация лабораторных показателей при оценке иммунного статуса человека // Лабораторное дело. 1991. - №2. - С.6-14.

75. Григорян С.С., Майоров И.А., Иванова A.M. и др. Оценка интерферонового статуса людей по пробам цельной крови // Вопросы вирусологии. 1988. - №4. - С.43-437.

76. Modern vaccinology. (Ed. Е. Kbrstak) / New York: Plenum Publishing Corporation. 1994. P.88.-11990. Руководство по вакцинному и сывороточному делу / Под редакцией Бургасова П.Н. М.: Медицина. 1978. 440с.

77. Вершигора А.Е. Общая иммунология: Учебное пособие. Киев, Выща школа: 1990. 736с.

78. Воробьев А.А., Васильев Н.И. Адьюванты (неспецифические стимуляторы иммуногенеза). М.: Медицина. 1969. 207с.

79. Glenny А.Т., Pope C.G., Waddington Н., Wallage U. The antigenic value of toxid precipitated by potassium alum // J. Pathol. Bacteriol. -1926.-№29.-P.8-45.

80. Warren H.S., Vogel F.R., Chedid L.A. Current status of immunological in ISCOMS //Nature. 1990. - №344. - P.873-875.

81. Azuma I., Synthetic immunoadjuvants: application nonspecific host stimulation and potential of vaccine immunogenicity // Vaccine. 1992. - №10. - P.1000-1004.

82. Stuart-Harris C.H. Adjuvant influenza vaccines // Bull. WHO. 1969. -№41. - P.617-621.

83. Newman M.J., Wu Y.J., Gardner B.H., Mimroe K.J., Leombruno D., Ricchal J., Kensill C.R. Saponin adjuvant induction of ovalbumin specific CD8+ cytotoxic lymphocyte response // J. Immunol. 1992. -Vol.148. -P.257-2362.

84. Allison A.C., Byars N.E. Immunoloqical adjuvants: desirable properties and side effects // Mol. Immunol. 1991. - Vol.28. - P.279-284.

85. Garba S.A., Terry R.J. The relationship between serological responses and immunity of cattle vaccinated with oil based inactivated Mycoplasma mycoides vaccine // Bull. Anum. Health and Prod. Afr. -1987. Vol.35. - P.75-76.

86. Ветеринарные препараты. Справочник / Под ред. Осидзе Д.Ф. М.: Колос. 1981.-448с.

87. Масычева В.И., Хомов В.В., Сизов А.А., Фадина В.А., Барановская Г. А., Сизова Л.Ю. Иммуностимулирующие и адаптогенныесвойства препарата "фагостим" // Сб. науч. тр. сотрудников НИКТИ БАВ / Бердск, 1996. С. 185-189.

88. Донченко А.С., Донченко В.Н Повышение протективных свойств вакцины БЦЖ // Вестник РАСХН. 1995. - №5. - С.58-61.

89. Warren H.S., Vogel F.R., Chedia L.A. Current status of inmmunological adjuvants // Annu. Rev. Immunol. Palo Alto. California. 1986. - Vol.4. - P.369-388.

90. Weinberg A., Merigan T. Recombinant interleikin as an adjuvant for vaccine-induced protection. Immunization of ginea pigs with herpes simplex vims subunit vaccines // J. Immunol. 1988. - Vol.140. - P.294-299.

91. Доклинические испытания новых медицинских иммунобиологических препаратов. Основные положения: РД 42-288-89. М., МЗ СССР. 1989. 49с.

92. Pearson F.C. Pyrogens and depyrogenation: Theory and practice / Sterile pharmaceutical manufacturing applications for the 1990s. Vol. 2. - P.75-100.

93. Сорокин A.B. Пирогены. M.: Медицина. 1965. 176c.

94. Государственная фармакопея. Одиннадцатое издание / М.: Медицина. 1990. - С.183-185.

95. The United States Pharmacopoeia. XXII. 1990. - P.1493.

96. The European Pharmacopoeia / Pyrogens. 1990. - Vol.2.1.9.

97. The Pharmacopoeia of Japan. 1990. -12th ed. - P.98.-121113. Pearson F.C. Limulus amebocyte lysate testing: Comparative methods and reagents I I Sterile pharmaceutical manufacturing applications for the 1990s.-Vol.2 . -P.185-197.

98. Руководство по иммунофармакологии / Под ред. М.М.Дейла, Дж. К. Формена. М.: Медицина. 1998. 332с.

99. Хазипов Н.З., Сафин М.А., Идрисов Г.З. Туберкулез крупного рогатого скота. М.: Агропромиздат. 1985. - 127с.

100. Донченко А.С., Донченко В.Н. Туберкулез крупного рогатого скота, верблюдов, яков, овец и пантовых оленей // Профилактика туберкулеза крупного рогатого скота путем применения вакцины БЦЖ. Новосибирск, 1994. С. 172-194.

101. Урсов И.Г., Краснов В.А. Проблемы эпидемии туберкулеза в западной Сибири // Проблемы инфекционной патологии в регионах Сибири, Дальнего Востока и Крайнего Севера. Новосибирск, 1998. С.164-165.

102. Донченко А.С. Всесоюзная научно-методическая конференция "Состояние и перспективы научных исследований по туберкулезу животных" //Ветеринария. 1985. - №8. - С.70-71.

103. Донченко А.С. Основные научные положения проблемы оздоровления крупного рогатого скота от туберкулеза // Туберкулез крупного рогатого скота и меры борьбы с ним / ВАСХНИЛ Сиб. отд-ние. Новосибирск, 1986. С.11-16.

104. Перельман М.Н., Корякин В.А., Протопопова Н.М. Туберкулез: Учебник. М.: Медицина. 1990. 304с.

105. Шишков В.П., Ткачев-Кузьмин А.В., Качанова С.П. Туберкулез животных. Методы диагностики и профилактики // Обзорная информация. М.: 1986. С.44.

106. Кассич Ю.Я., Тихонов П.М. Совершенствование и сравнительное изучение методов обработки материала из объектов внешней среды для культуральной диагностики туберкулеза // Ветеринария. Киев.-1984. -Вып.54. С.16-18.

107. Кремлев Е.П. Причины возникновения туберкулеза крупного рогатого скота в ранее оздоровленных хозяйствах К Современ. пробл. профилактики и лечения зооноз. заболеваний и лейкозов. Минск. 1982.-С.92-93.

108. Ярбаев Н. Индикация микобактерий туберкулеза в объектах внешней среды // Методы и средства борьбы с инфекционными болезнями животных. Душанбе. 1984. С.14-18.

109. Ветеринарный энциклопедический словарь / Гл. ред. В.П.Шишков. Изд-во Советская энциклопедия. М.: 1981. - С.527-528.

110. Ганушкин М.С. Общая эпизоотология. М.: Сельхозгиз. 1961. -264с.

111. Болезни пушных зверей / Под ред. Е.П.Данилова. М.: Колос. 1984. -336с.

112. Кокуричеев П.И. Влияние типа туберкулиновых микробов и вида животных на характер патологоанатомических изменений при туберкулезе // Научн. тр. Всесоюз. межвуз. конф. по патолого-анатомии с-х животных. Воронеж, 1961. С.20-23.

113. Донченко В.Н., Донченко А.С., Донченко Н.А. Влияние различных иммуномодуляторов на развитие туберкулезного процесса у морских свинок: Сб. науч. тр. / РАСХН. Сиб. отд-ние. ИЭВСиДВ. Новосибирск, 1997. С.124-127.

114. Патолого-анатомическая диагностика болезней крупного рогатого скота / Под ред. академика ВАСХНИЛ В.П.Шишкова, профессора А.В.Жаркова и Н.А.Налетова. М.: Агропромиздат. 1987. - С.79-87.

115. Подымова С.Д. Болезни печени (Руководство для врачей). М.: Медицина. 1984. С.406-408.

116. Готтшалк Г. Метаболизм бактерий. М.: Мир. 1982. 310с.

117. Молекулярная микробиология. (Перевод с англ. к.б.н. А.Г.Савельникова, Л.И. Шеленковой) / Под редакцией проф. Б.И. Ильюшенко. М.: Мир. 1977. 520с.

118. Иоффе В.И. Клиническая и эпидемиологическая иммунология. Л.: -1968. 373с.

119. Пузик В.И. Проблемы иммуноморфологии туберкулеза. М.: Медицина. 1966. 180с.

120. Патологическая физиология / Под ред. А.Д.Адо и Л.М.Ишимовой. М.: Медицина. 1980. - 520с.

121. Обуховский Б.Н. К вопросу об активной иммунизации при туберкулезе // Тр. ГИЭВ. М.: 1926. Т.4. Вып.1. - С.33-39.

122. Тогунова А.И. Иммунизация живой вакциной против туберкулеза // Профилактика инфекции живыми вакцинами / Под ред. М.И.Соколова. М.: Медгиз. 1960. С. 199-345.

123. Хайкин Б.Я., Кравец А.Т., Зубакин В.А. Профилактическая эффективность вакцины БЦЖ при разных методах введения крупному рогатому скоту // Инфекционные болезни с.-х. животных / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. Новосибирск, 1984. С.3-7.

124. Зубакин В.А. Разработка оптимальной схемы специфической профилактики туберкулеза крупного рогатого скота // Автореф. дис. . канд. вет. наук. Новосибирск, 1989. 19с.

125. Донченко А.С. Изолированное выращивание здоровых телят в неблагополучных по туберкулезу хозяйствах // Эпизоотология и меры борьбы с инфекционными болезнями: Сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. Новосибирск, 1986. С.60-64.

126. Boom R., Sol A.J.C., Salimans М.М.М. et al. Rapid and Simple method for purification of nucleic acids // J. Clinical Microbiol. 1993. -Vol.28. -№3.-P.495-503.

127. Shawar R., Zaatart-El K.A.F. Detection of Mycobacterium tuberculosis in clinical samples by two-step polymerase chain reaction and non-isotopic Hybridization methods // J. of Clinical Microdiology. Jan.-1993.-Vol.31.-P.61-65.

128. Игнатенко Н.Г., Седов В.А., Зелепукин B.C., Гущин В.И. Сибирская язва сельскохозяйственных животных / Исследование патологического материала. М., Агропромиздат. 1987. С. 156-164.

129. Хоробрых В.В., Пронин В.А., Киркин Ф. А., Санин В.А. Методы постановки реакции бласттрансформации в микромодификации // Иммунология. 1983. - №3. - С.76-79.

130. Лимфоциты. Методы / Анализ интерлейкинов и других подобных им факторов // Под ред. Дж Клаус. М.: Мир. 1990. С.310-338.

131. Рыкова М.П., Спиранде И.В., Зедгенидзе М.С. и др. Новая высокочувствительная техника тестирования нормальных киллеров // Иммунология. 1981. - №3. - С.88-90.

132. Урманов И.Х., Серпинский О.И., Татьков С.И., Сиволобова Г.Ф. и др. Способ получения натриевой соли ДНК из молок рыб / Патент РФ №2072855, (МПК А 61 К 35/60. опубл. 10.02.97 г.).

133. Maniatis Т., Fritsch, Е. and J.Sambrook (editors) Russian translation., Molecular Cloning / Moscow, Mir. 1984.-P.480.

134. Временная фармакопейная статья 42-2547-95 "Дезоксинат".

135. Филиппович Ю.Б., Егорова Т.А., Севастьянов Г.А. Практикум по общей биохимии. М.: Просвещение. 1982. 375с.

136. Трахтенберг И.М., Сова Р.Е., Шефтель В.О., Оникиенко Ф.А. Проблема нормы в токсикологии (современные представления и методические подходы, основные параметры и константы). М.: Медицина. 1991. -208с.

137. Порядок и методы контроля иммунологической безопасности вакцин / Общие методические принципы: РД 42-28-10-90. М., МЗ СССР.- 1989.-31с.-126164. Меньшикова В.В. Справочник. Лабораторные методы в клинике// М.: Медицина. 1987. 286с.

138. Гольдберг Е.Д. Справочник по гематологии с атласом микрофотографии. Томск, Изд-во Томского Университета. 1989. -373с.

139. Лабораторные и инструментальные методы исследования/ Пропедевтика внутренних болезней / Под ред. Василенко В.Х. и Гребенева А.Л. М.: Медицина. 1983. С.527-543.

140. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях / Государственное изд-во Медицинской литературы. Л., 1962. - 177с.

141. Прозоровский К.В., Прозоровская М.П., Демченко В.М. Экспресс-метод определения средней эффективной дозы и ее ошибки // Фармакология и токсикология. 1978. - №.4. - С.497-502.

142. Лакин Г.Ф. Биометрия // Учебное пособие для университетов и педагогических институтов. М.: Высшая школа. 1973. С.155-157.