Физиологическая роль изменения жирнокислотного состава урогенитальных жидкостей организма человека при дисбиозах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Крымцева, Татьяна Алексеевна

• Крымцева, Татьяна Алексеевна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Крымцева, Татьяна Алексеевна

Введение

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1 Физиологическая роль нормальной микробиоты в обеспечении 10 состояния равновесия микроэкологии половых органов

1.2 Колонизация микроорганизмами половых органов и 17 мочевыводящих путей в норме и при воспалительных процессах

1.2.1 Микробиоценозы женских половых органов в норме

1.2.2 Микробиота при дисбиозах и инфекциях половых путей 21 организма женщины

1.2.3 Микроорганизмы мужской половой сферы

1.2.4 Микрофлора мочевыводящих путей.

1.3. Роль полиненасыщенных жирных кислот в воспалении. 29 Особенности воспаления при инфекциях половых органах

1.4. Особенности течения инфекционных процессов в половых 32 органах

1.5. Применение газовой хроматографии и ее сочетания с масс- 35 спектрометрией в клинической микробиологии

1.6. Выводы по литературному обзору

ГЛАВА 2 Материалы и методы

2.1 Описание биологического материала

2.2 Подготовка проб урогенитальных жидкостей для хромато-м^сс- 42 спектрометрического анализа.

2.3 Выбор оптимальных условий пробоподготовки

2.4 Анализ методом газовой хроматографии - масс спектрометрии

2.5 Статистический метод обработки материала

2.6 Обоснование метода маркера. Выявление таксономически 48 значимых жирных кислот для микроорганизмов.

2.7 Методика расчета состава микробиоты урогентальных органов 56 по индивидуальным микробным маркерам и в условиях их суперпозиции

ГЛАВА 3 Результаты исследований

3.1 Определение жирнокислотного состава урогенитальных жидкостей в норме.

3.2 Исследование полиненасыщенных высших жирных кислот вагинальной жидкости у женщин в зависимости от фазы эстрального цикла в норме и при воспалении

3.3 Изучение минорных липидных компонентов в вагинальной жидкости, эякуляте и моче человека

3.4 Состав микробиоты урогенитальных жидкостей человека в норме, при дисбиозах и инфекционных воспалениях по данным ГХ - МС анализа минорных липидных компонентов как микробных маркеров

3.4.1. Составление локального банка данных состава жирных кислот микроорганизмов УГТ и формул для расчета концентраций микроорганизмов

3.4.2. Ведущие микроорганизмы и их ассоциации при вагинитах

3.4.3. Микробное сообщество половых органов мужчин и его изменение при простатите

3.4.4 Примеры анализов состава микробиоты половых органов

3.4.5 Клинические случаи

ГЛАВА 4 Обсуждение данных

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиологическая роль изменения жирнокислотного состава урогенитальных жидкостей организма человека при дисбиозах»

Актуальность темы исследования.

С момента рождения ребенка все слизистые оболочки и кожа заселяются микроорганизмами, образующими устойчивые микробиоценозы в организме человека. Нормальная индигенная микрофлора слизистых различных экологических ниш имеет исключительно важное значение в функционировании разных органов и систем человека. Наиболее изученным в этом отношении микробиоценозом является кишечник. (Куваева И.Б., 1976г.; Бондаренко В.М., 1995г.; Воробьев А.А.,1997г.; Шендеров Б.А., 1998).

Важную роль в обеспечении физиологических функций половой системы организма человека принадлежит нормальной микрофлоре урогенитальных органов. Известно, что аналогично биопленке микробиоценоза кишечника нормальная микробиота половых путей женщины участвует в репродуктивной функции, обеспечивая прежде всего барьерную роль, включающую поддержание колонизационной резистентности, иммуномодулирующее действие, обеспечение факторов специфического и неспецифического иммунитета, участие в различных метаболических процессах, влияющих на гомеостазис макроорганизма (образование молочной кислоты, перекиси водорода, биологически активных веществ, продукция бактериоцинов и антибиотикоподобных веществ) (Hill G.B., 1988г.; Bartlett J.G., 1984г.; Кира Е.Ф., 1994г.; Коршунов В.М., 1995г.) Поэтому одним из информативных показателей состояния как влагалища и всей половой системы, так и гормонального, иммунного статуса женского организма является состав микробиоты влагалища, параметры изменения состава вагинальной жидкости.

В настоящее время по данным ВОЗ воспалительные процессы внутренних половых органов составляют 62,5% в структуре гинекологических заболеваний и носят в основном полимикробный характер. Острый и хронический бактериальный простатит у мужчин также относится к микст-инфекциям, причем выявление трудно культивируемых микроорганизмов традиционными методами представляет большую проблему.

Еще не достаточно изучен вопрос об изменениях состава групп бактерий в микробиоценозах урогенитальных органов, их ассоциаций, где они могут взаимно стимулировать или ингибировать друг у друга определенные свойства и влиять на физиологические функции макроорганизма.

В свете этих представлений чрезвычайно актуально использование новейших методов исследования состава урогенитальных жидкостей с целыо выявления специфических липидных компонентов, как маркеров микробных клеток, позволяющих определять состав микроорганизмов в сложных микробиоценозах урогенитального тракта человека, включающих в себя как нормальную, так и условно-патогенную и патогенную микрофлору.

Дополнительные возможности в этом отношении дает метод газовой хроматографии в комбинации с масс-спектрометрией (ГХ-МС). Метод липидных маркеров может быть перспективным при проведении быстрого скрининга с целью обследования больших групп пациентов. Это позволит выявить общих агентов воспалительных процессов и их комбинаций при микст-инфекциях, а также проводить мониторинг изменения состава микрофлоры в динамике в процессе лечения. Последнее необходимо для выбора адекватной терапии.

В настоящее время повышенное внимание уделяется изучению полиненасыщенных высших жирных кислот в связи с их иммуномодулирующей активностью (Wolfram G. et al., 1980; Gil A., 2002). Известно, что межорганный обмен нутриентами, в том числе эссенциальными жирными кислотами, происходит во многих органах и тканях (Разенков И.П., 1948г; Василевская Л.С.,1983; Шлыгин Г.К., 2001г.) В свете этих представлений исследование с применением метода ГХ-МС расширит знания о межорганном обмене арахидоновой и других полиненасыщенных высших жирных кислот, а также минорных липидных компонентов, обладающих цитокининдуцирующей активностью, в быстропролиферирующих тканях, таких как слизистая оболочка влагалища и матки, в норме и при воспалениях женских половых органов в зависимости от фазы астрального цикла и от изменения состава микробиоценоза.

Цель и задачи исследования.

Целью настоящего исследования является изучение функциональных изменений жирнокислотного состава вагинальной, семенной жидкостей, мочи и роли специфических минорных липидных компонентов (высших жирных кислот, оксикислот, альдегидов и стеролов) в урогенитальных жидкостях человека в норме и при дисбиозах.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Определить жирнокислотный состав урогенитальных жидкостей в норме.

2. Изучить изменения состава полиненасыщенных высших жирных кислот вагинальной жидкости в зависимости от фазы астрального цикла в норме и при воспалительных процессах у женщин с гонококковым вагинитом.

3. Выявить микробные минорные липидные компоненты в урогенитальных жидкостях человека в норме и при дисбиозах.

4. Исследовать состав микрофлоры урогенитальных жидкостей по составу минорных липидных компонентов, как маркеров микроорганизмов, в норме и при воспалительных заболеваниях инфекционной этиологии у урологических и гинекологических больных в мониторинге до и после лечения в связи с клиническими данными.

5. Определить методом математической статистики параметры распределения и корреляционные связи между маркерами различных видов микроорганизмов ценозов урогенитального тракта (УГТ).

6. Определить ассоциации микроорганизмов при гонококковом вагините и простатите.

Научная новизна

В результате проведенных исследований получены сведения о липидном составе биологических жидкостей УГТ человека с включением высших полиненасыщенных кислот, входящих в состав клеточных мембран тканей половых органов человека, и минорных липидных веществ, обусловленных клеточными и метаболическими компонентами микроорганизмов и продуктов их взаимодействия с тканями организма человека. Впервые изучено изменение состава высших полиненасыщенных кислот в зависимости от фазы астрального цикла у женщин, что возможно играет роль в индукции апоптоза гормональнозависимых тканей слизистых оболочек половых органов женщин.

Впервые показано, что качественный и количественный состав микроорганизмов, колонизирующих мочеполовые органы, может быть определен на основании анализа их специфических клеточных и метаболических липидных компонентов урогенитальных жидкостей (УГЖ) с помощью метода газовой хроматографии - масс спектрометрии (ГХ-МС). Получены данные, что в УГЖ специфические маркерные липидные вещества условно-патогенных микроорганизмов обнаруживаются одновременно в норме и их концентрация увеличивается при заболеваниях мочеполовой сферы в разных комбинациях между собой и в ассоциациях при участии компонентов патогенных микроорганизмов. Это соответствует изменению состава микробиоценоза при дисбиозах и инфекционных процессах в урогенитальных органах.

Теоретическая и практическая значимость

Практическая значимость исследования обусловлена экспрессностью, универсальностью, высокой чувствительностью и специфичностью метода ГХ-МС. Это позволяет выполнять мониторинг урогенитальных жидкостей у пациентов в процессе лечения, а также оценивать эффективность лечения антибактериальными препаратами in situ. Метод может быть использован при массовых обследованиях пациентов с дисбиозами различной этиологии.

Показано, что применение метода ГХ-МС, позволяющего изучать биохимические и физиологические процессы взаимодействия микроорганизмов урогенитального тракта с организмом-хозяином, создает базу для развития представлений о физиологии репродукции с участием микроорганизмов. Эти данные могут быть использованы в курсах лекций по физиологии и медицинской экологии.

Апробация работы

Материалы диссертации были доложены на международных конференциях:

Международной конференции: «Микробное разнообразие: состояние, стратегия, сохранение, экологические проблемы «1СОМГО-96» 8-11 окт. 1996г., г.Пермь;

4 International Symposium on the Interface between Analytical Chemistry and Microbiology "ISIAM-2000", June 4-7, 2000. Le Castel Sainte-Anne. Tregastel-Cotes d'Armor. France

Публикации.

По теме диссертации опубликовано 4 работы, в том числе 1 статья и 1 пособие для врачей.

1. Кубанова А.А., Аковбян В.А., Федоров С.М., Дмитриев Г.А., Бакалова Л.А.,Вахнина Т.Е., Коликова Т.Г., Халатов А.О., Осипов Г.А., Крымцева Т.А. Роль анаэробов в возникновении урогенитальных инфекций // Пособие для врачей,- ЦНИКВИ. Москва.- 1998 г.- 16 с.

2 Крымцева Т.А., Осипов Г.А., Бойко Н.Б., Соколов Я.А., Демина A.M., Радюшина Т.В., Осипов Д.Г. «Минорные жирные кислоты биологических жидкостей урогенитальных органов и их значимость в диагностике воспалительных процессов»// Журн. Микробиол. Эпидемиол. Иммун,- 2003,- №2.-с.92-101

3. Осипов Г.А., Демина A.M., Крымцева Т.А., Радюшина Т.В. «Экспрессный анализ урогенитального дисбиоза» // Материалы Международной конференции. Микробное разнообразие: состояние, стратегия, сохранение, экологические проблемы «1СОМГО-96» 8-11 окт.1996г., г.Пермь/ Ин-т экологии и генетики микроорганизмов. УРО РАН. - Пермь. 1996г.- с.210.

4\ Osipov G.A., O.N.Stolyarova, Ya.A Sokolov, N.B.Boiko, T.A.Krymtseva. " Gas chromatography-mass spectrometry investigation of vaginal fluid, mail urine and semen microflora genera-species composition" // Proceedings of the Fourth International Symposium on the Interface between Analytical Chemistry and Microbiology "ISIAM-2000", June 4-7, 2000. Le Castel Sainte-Anne. Tregastel-Cotes d'Armor. France- p.56

Объем и структура диссертации.

Материал диссертации изложен на 150 страницах машинописного текста и состоит из введения, 3 глав, обсуждения результатов и заключения, выводов и списка литературы, включающего 18.5" наименований, в том числе Ы4 на иностранных языка, содержит 14 таблицы и 27 рисунка.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Крымцева, Татьяна Алексеевна

Выводы

1. В составе урогенитальных жидкостей организма человека в норме определены четные кислоты с 12 - 18 атомами углерода: 18:1, 16:0, 18:2, 18:0, 16:1 (от 20% до 1% от суммы жирных кислот в порядке уменьшения содержания в профиле ЖК). Содержание холестерола в вагинальной жидкости составляет 10%, а в эякуляте - в 3 раза выше. В эякуляте больше содержание полиненасыщенных кислот С20:п и С22:п, альдегидов и 2-оксикислот.

2. Определено, что концентрация у-линоленовой кислоты (18:3, со-6) возрастает с 0,007 мкг/мл (фолликулярная фаза) до 0,02 мкг/мл (конец лютеиновой фазы перед менструацией) в эстральном цикле у женщин в норме (р<0,000).

3. Определено, что содержание высших полиеновых жирных кислот (линолевой, арахидоновой, клупонодоновой) и холестерола увеличивается в несколько раз в вагинальной жидкости при умеренном лейкоцитозе, вызванном хронической гонореей (р<0,000).

4. Обнаружено, что урогенитальные жидкости содержат минорные липидные компоненты (менее 1% от суммы жирных кислот) -оксикислоты, разветвленные и циклопропановые кислоты и стерины, имеющих в основном микробное происхождение. Ряд оксикислот - 3-оксидекановая (3hl0), 3-оксилауриновая (3hl2), 2-оксилауриновая (2hl2), 3-оксиизогептадекановая (ЗЫ17), 2-оксимиристиновая (2hl4), а также циклопропановая кислота 17сус - не обнаруживаются в урогенитальных жидкостях у здоровых мужчин и женщин.

5. Показано, что в урогенитальных жидкостях специфические маркерные липидные вещества условно-патогенных микроорганизмов обнаруживаются одновременно в норме и их концентрация увеличивается при дисбиозах и воспалениях.

Установлено, что при дисбиозах, связанных с хроническими воспалениями половых органов женщин участвуют Pseudonocardia, Fusobacterium/Haemophylus, Klebsiella, Streptococcus, Staphylococcus epidermidis и Clostridium perfringens. При этом в большинстве случаев снижено количество лактобацилл, пропионовых бактерий, энтеробактерий и Clostridium difficile. При дисбиозах у мужчин обнаружены стрептококки и коринеформные бактерии. Превышают норму клебсиелы и другие представители сем. Enterobacteriaceae. Обнаруживаются псевдомонады, в

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Крымцева, Татьяна Алексеевна, 2003 год

1. Анастасьева В.Г. Современные методы диагностики, лечения и профилактики бактериального вагиноза.// -Новосибирск, 1997

2. Анкирская А.С. Бактериальный вагиноз: клиническая лекция// Акушерство и гинекология.- 1995.-c.13

3. Анкирская А.С. Микроэкология влагалища и профилактика акушерской патологии. Гинекология.- 1999, №3.- с.80-82

4. Белобородова Н.В., Осипов Г.А. Гомеостаз малых молекул микробного происхождения и его роль во взаимоотношениях микроорганизмов с хозяином. //Вестник РАМН. -1999. Т. 16, -№7, с. 25-31.

5. Бондаренко В.М. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта// Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998г. -№1,-с.85-86

6. Бочков И.А., Крави М., Семина Н.А., Цейтлина А.И., Демина А.М. Сравнительная характеристика микрофлоры влагалища рожениц-носителей стрептококков серогруппы В и свободных от носительства.// Журн.микробиол.-1995.-№5.-с.89-92

7. Бунина Т.П. Функциональная система, определяющая половые функции организма// В кн. Нормальная физиология: Курс физиологии функциональных систем/ Под ред. К.В.Судакова М.Медицинское информационное агенство, 1999.- с.404-70

8. Василевская Л.С., Журавлев Б.С. Вопросы питания, 1983,-№4, с.57-61

9. Вейант Р., Мосс У., Холлис Д., Джордан Дж., Кук Э., Дейншвар М.

10. Определитель нетривиальных патогенных грамотрицательных бактерий. М. Мир, 1999, С. 612-783

11. Воробьев А.А. Микробиология и иммунология Учебник/Под ред.А.А.Воробьева- М. Медицина, 1999.- 464с.

12. Голышевская В.И. Микробиологическая диагностика туберкулеза. Вестник РАМН. 1995, №7 -с.16-18

13. Джавец Э., Мельник Дж.Л., Эйдельберг Э.А. Руководство по медицинской микробиологии: в 3-х т.- М.Медицина.-1982- 442 с.

14. Калмыкова А.И. Пробиотики: терапия и профилактика заболеваний Укрепление здоровья/НПФ «Био=Веста»; СибНИПТИП СО РАСХН.-Новосибирск, 2001.- 208с.

15. Кейт (ред). Репродуктивное здоровье. В 2 т.Пер.с анг. Под ред. Кейта Л.Г. Г.С.Бергера, Д.А.Эдельмана.- М.:Медицина.- 1988.-С.400

16. Кира Е.Ф. Клиника и диагностика бактериального вагиноза //Акушерство и гинекология.-1994-№2.-с.32-35

17. Кира Е.Ф. Практичексий справочник акушера-гинеколога.-СПб.,1997.-с.70

18. Колачевская Е.Н. Клиническое течение и диагностика женскогогенитального туберкулеза. //Проблемы туберкулеза. 1994, №6-с.26-29.

19. Коршунов В.М, Володин Н.Н., Ефимов Б.А. идр. Микроэкология влагалища при бактериальных вагинозах: Учебное пособие,- М., 1999,с. 72

20. Коршунов И.М. и др. Микроэкология желудочно-кишечного тракта.

21. Коррекция микрофлоры при дисбактериозе кишечника: учебное пособие. М., 1999.-c.80

22. Краснопольский В.И., Радзинский В.Е., Буянов С.М. и др. Патология влагалища и шейки матки.- М.:Медицина,1997- с.64-73

23. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофлора.- М.,1976.-с.128

24. Минскер О.Б., Егорова Е.В. Актиномикоз женских половых органов. Сов. Мед. 1967, 6: 102-107.

25. Митрука Б.М. Применение газовой хроматографии в микробиологии и медицине. М. Медицина, 1978.

26. Нейчев Сл. Клиническая микробиология.// София. Медицина и Физкультура, 1977- с.356

27. Определитель бактерий Берджи. Под ред. Дж.Хоулта и др. М.Мир, 1997, т. 1,2, 638с.

28. Осипов Г. А. // Способ определения родового (видового) состава ассоциации микроорганизмов. //Патент РФ №2086642. C12N 1/00, 1/20, C12Q 1 /4. Приоритет от 24 дек. 1993г.

29. Осипов Г.А., Демина А.М.//Хромато-масс-спектрометрическое обнаружение микроорганизмов в анаэробных инфекционных процессах. //Вестник РАМН. -1996.-№2

30. Осипов Г.А., Парфенов А.И., Богомолов П.О. Сравнительное хромато-масс-спектрометрическое исследование состава химических маркеров микроорганизмов в крови и биоптатах слизистой оболочки кишечника. Российский гастроэнтерол.журнал. 2001,1: 54-69.

31. Осипов Г.А., Назина Т.Н., Иванова А.И. Изучение видового составамикробного сообщества заводняемого нефтяного пласта методом хромато-масс-спектрометрии.// Микробиология,-1994.-Т.63.-Вып.5 .-С .876-882

32. Перовская B.C., Марко О.П. Микрофлора в норме и патологии.-М.,1976

33. Покровский В.И., Поздееев O.K. Медицинская микробиология// ГЕОТАР Медицина, М. 1998. 1200с.

34. Прилепская В.Н. Инфекции в гинекологии: Особенности инфекционных процессов нижнего отдела половых путей. Возможности терапии препаратами для локального применения// Актуальные вопросы гинекологии, 2000, Том 2, № 2

35. Разенков И.П. Новые данные по физиологии и патологии пищеварения М.,1948, с.282-295

36. Раковская И.В.,Вульфович Ю.В. Урогенитальные микоплазмозы. Обзор. Медицина и зравохранение. Серия:» Акушерство и гинекол.», 1,1990.

37. Репродуктивное здоровье. В 2 т.Пер.с анг. Под ред. Кейта Л.Г. Г.С.Бергера, Д.А.Эдельмана.- М.:Медицина 1988.-С.400

38. Роль анаэробов в возникновении урогенитальных инфекций. Пособие для врачей. ЦНИКВИ, 1998, 16 с.

39. Саркизов Д.С., Пальцев М.А., Хитров Н.К. Общая патология человека: Учебник (2-е издание,перераб. и доп.).-М. -.Медицина,1997,- 608 с.

40. Седов В.И., Пинчук JI.M. Состав высших жирных кислот энтерококков. Журн.Микроб.Эпидем.Иммун., 1982, 9 ,49-59

41. Семчера И. А. Состояние микробиоценоза влагалища при беременности и в послеродовом периоде: Автореферат дис.канд.мед.наук.- СПб, 1999.

42. Скрипкин Ю.К., Аковбян В.А. //Росс.мед.журнал.- 1997,№ 6.- с.10-13

43. Сметник В.П., Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология: Руководство для врачей.-М.-1998.- р.321

44. Соловьева И.В. Характеристика микрофлоры влагалища женщин в норме и патологии: Автореферат дис.канд.мед.наук.-Москва- 1987

45. Турова Е.С., Осипов Г.А. Изучение структуры микробного сообщества, активного в биотрансформации минералов железа в каолине. Микробиология// 1996, 65(5), 682-689.

46. Уайт А. и др. «Основы биохимии» в 3-х томах, 1981, Из-во Мир.

47. Физиология человека, гл.18, Функция крови, Т.2, С.414-430. Под ред. Р.Шмидта и Г.Тевса. М.Мир,1996.

48. Цаплина И.А., Осипов Г.А., Богданова Т.И., Недорезова Т.П., Каравайко Г.И. Жирнокислотный состав липидов термоацидофильных бактерий рода Sulfobacillus. Микробиология, 1994, 63(5) 821-830.

49. Цвелев Ю. В., Кочеровец В. И., Кира Е. Ф., Баскаков В. П. Анаэробная инфекция в акушерско-гинекологической практике. Спб: Питер Пресс, 1995, -320с.-(Серия "Практическая медицина") .

50. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Издание в 3-х томах, Tl. М. Грант, 1998

51. Шеховцова Н.В., Осипов Г.А., Верховцева Н.В., Певзнер JI.A. Анализ липидных биомаркеров в породах архейского кристаллического фундамента. Международная конференция по бактериальной палеонтологии. Тезисы докладов. Москва, 24-25 мая 2002г.

52. Шлыгин Г.К. Физиология пищеварения. JL, 1974.- с.571-578

53. Шлыгин Г.К., Василевская JI.C., Попова Ю.П., Немая М.А. В кн.: «Питание и здоровье», Таллин. 1991г., т.1, ч.2, с.43-45

54. Ярилин А.А. Апоптоз: природа феномена и его место в целостном организме.// Пат. физиология- 1998.-№2.-с.38-48

55. Acunts К.В. Mycoplasma infections and human reproduction. Akysh. Gynehol.(Mosk.)1989,7 , 8-10

56. Ahluwalia. Fatty acid composition of lipids of bull, boar, rabbit and human semen. J.Reprod.Fertil. 1969, Apr 18(3)

57. Alexander L.R., Justice J.B Jr. Fatty acid composition of human erythrocyte membranes by capillary gas chromatography mass spectrometry. J.Chrom.,Biomed.appl. -1985.-Vol.342.-P.l-12.

58. Allugupalli S., Portaels F., Larsson L. Systematic study of the 3-hydroxy fatty acid composition of mycobacteria. J.Bacteriol. May 1994, 176(10): 2962-296.

59. Andersson M.A., et al. The mitochondrial toxin produced by Streptomyces griseus strains isolated from indoor environments is valinomycin. Appl.Envir.Microbiol 1988, 64 (12) 4767-4773.

60. Asselineau C., Asselineau J. (1990) Lipid analysis in bacterial taxonomy proposal for a standardized method. -Biochem.Cell Biol. V 68 (l):379-86

61. Auger P. Microbial flora associated with Candida albicans vulvovaginitis. // Obstet Gynecol.- 1980-V.55(3):397-401

62. Axelsson B.-O., Saraf A., Larsson L. Determination of ergosterol in organic dust by gas chromatography mass spectrometry. J.Chromatogr.B. 1995, 666(1 ):77-84.

63. Bartlett J.G., Onderdonk A.B. et. al.(1977). Quantitative bacteriology of the vaginal flora. J.infect. diseases. V.136, 2,

64. Bartlett J.G., Polk B.F. Bacterial flora of the vagina: quantitative study.-Rev.Infect.Dis. 1984, 6,Suppl. 1, 67-72.

65. BeloborodovaN.V., Osipov G.A. 2000. Small molecules originating from microbes (SMOM) and their role in microbes-host relationship. Microb.Ecol.Heal.Dis., SCUP, 12: 12-21.

66. Bernard K.A, Bellefeuille M., Ewan E.P. Cellular fatty acid composition as an adjunct to the identification of asporooogenous, aerobic gram-positive rods. J.Clin.Microbiol. 1991, 29(1): 83-89

67. Birek C., Grandhi R., McNeil K. et al. Detection of Helicobacter pylori in oral aphthous ulcers. J.Oral.Pathol.Med. 1999, 28(5): 197-203

68. Bora Farsak, Aylin Yildirir, Yakut Akycn et al. Detection of Chlamydiapneumoniae and Helicobacter pylory DNA in Human Atherosclerotic Plaques by PCR. J.Clin.Microbiol. 2000V.38,№ 12: 4408-4411.

69. Borisa S., Barbes.C. Role played Lactobaccili in controlling the population of vaginal pathogens// Microbes and Infection.-V.2.-Issue5.-April 2000- p.543-46

70. Boskey ER, Telsch KM, Whaley KJ, Moench TR, Cone RA. Acid production by vaginal flora in vitro is consistent with the rate and extent of vaginal acidification. Продукция кислот вагинальной микрофлорой. Infect Immun, 1999 0ct;67(10):5170-5

71. Brandtzaeg P., Bryn K., Kierulf P. et.al. Meningococcal endotoxin in lethal septic shock plasma studied by gas chromatography, mass-spectrometry, ultracentrifiigation, and electron microscopy. J.Clin.Invest. 1992,89:816-823.

72. Brockman Person K. et al, Hohne C. Bacteriological aspects of trichomonal vaginits. Zentraebl.gymahol.1979,101(11),722-26.

73. Brondz I., Olsen I. (1991) Multivariate analyses of cellular fatty acids in Bacteroides, Prevotella, Porhyromonas, Wolinella and Campylobacter spp. -J.Clin.Microb., V 29 (1) :183-89

74. Brondz, J., Olsen, J.(1986) Microbial chemotaxonomy. Chromatography,electrophoresis and relevant profiling techniques. J. Chrom., Biomed. Appl. 379, 367-411

75. Card GL, Jasuja R.R, Gustafson G.l. Activation of arachidonic acid in mouse macrophages by bacterial amphiphiles. // J Leukoc Biol. 1994,-v.56(6): 723-8,

76. Chandiok S, Fisk PG, Riley VC, Prostatitis-clinical and bacterial studies // Int J STD AIDS, 1992 May-Jun 3:3 188-90

77. Chemical Methods in Bacterial Systematics (1985) (Goodfellow, M. and Minnikin, D.E., Eds.), Acad. Press, London Toronto.

78. Chemical methods in Procariotic Systematics (1994) ( Goodfellow, M. and O'Donnell, A.G., Eds.), John Willey and Sons, .Chiduster, UK.

79. Chimura Т. etal. (1992) Comparisons of the bacterial flora in genital regions at non-pregnancy. Jpp.J. Antibiot. V 45(8):1065-70.

80. Chow AW. Quantitative vaginal microflora in women convalescent from toxic shock syndrome and in healthy controls.// Infect Immun.- 1984 V.44(3):650-2

81. Christenson В., Wiebe Т., Pehrson C., Larsson L. Diagnosis of invasive candidiasis in neutropenic children with cancer by determination of D-arabinitol/L-arabinitolratios murine. J.Clin.Microbiol. 35(3), 636-640, 1997.

82. Cohen MS Host defences and the vaginal mucosa. A re-evalution.// Scand J Urol Nephrol. 1984- Suppl.86.-p. 13-22.

83. Cook RL , Redondo-Lopez V, Schmitt C, Meriwether C, Sobel JD. Clinical, microbiological and biochemical factors in recurrent bacterial vaginosis // J Clin Microbiol 1992 Apr 30(4)870:7

84. Cooper H.G. Transmission of M.tuberculosis via genital tract J.Urol., 104(6), 914-915,(1970).

85. Costerton J.W, Marrie T.J., Cheng K.J. Phenomena of bacterial adhesion.- In: Bacterial Adhesion (eds. Savage D.C., Fletcher M.)// Plenum Publ. Corporation 1985

86. Dahya R.S., Speck M.L. Hydrogen peroxide formation by lactobacilli and its effects on Staphylococcus aureus// J.Dairy Sci.-1986.-Vol.51.- p.1568-72

87. Danielssson D, Molin L. Demonstration of Neisseria gonorrhoeae in prostatic fluid after treatment of uncomplicated gonorrheal urethritis.// Acta Dermatol. Venereol. -1971, v. 51:73

88. De Luca P. Latent female genital tuberculosis and sterility. Arch.Ostet.Ginecol. 87(5-6), 279-303, (1982).

89. Dees S.B., Moss C.W., Hollis D.G., Weaver R.E. Chemical characterization of Flavobacterium odoratum, Flavobacterium breve, and Flavobacterium-likegroups Пе, nh, and Hf. J.Clin.Microbiol. 23(2), 267-273, 1986.

90. Doble A., Harris J.R.W.,Taylor-Robinson D. Prostatodynia and Herpes simplex virus infection.// Urology. 1991, v.38:247-8

91. Doeschel M.A. Antimicrobial substances from lactic acid bacteria for use as food preservatives// Food Thechnol.- 1989.-Vol.43.-p.l64-67

92. Domingue GJ, Hellstrom WJ, Prostatitis.//Clin Microbiol Rev 1998 Oct 11:4 60413

93. Donald E. Riley, Richard E. Berger, David C. Miner, and JohnN. Krieger. Diverse and Related 16S rRNA-Encoding DNA Sequences in Prostate Tissues of Men with Chronic Prostatitis //Journal of Clinical Microbiology, June 1998, p. 16461652, Vol. 36, No. 6

94. Evaldson G. The normal human anaerobic microflora.// Scand J Infect Dis. 1982-Suppl.35:9-15

95. Fredricsson B. Gardnerella-associated vaginitis and anaerobic bacteria. // Gynecol Obstet Invest-1984- V.17(5):236-41

96. Gailly G., Sandra P., Verzele M., Cociti C. Analysis of mycolic acid from a group of corinebacteria by capillary gas chromatography and mass spectrometry.// Eur.J.Biochem. 1982,-125(1), 83-94.

97. Geiger AM., Foxman B, Sobel Jd Genitorin Med.// 1995 oct;71 (5): 304-307

98. Geis G., Leying H., Suerbaum S., Opferkuch W. Unusual fatty acid substitution in lipids and lipopolysaccharides of Helicobacter pylori// J.Clin.Microbiol. 1990,-28(5), 930-932.

99. Gil A. Polyunsaturated fatty acids and inflammatory diseases.// Biomed Pharmacother. 2002,- V.56(8):388-96

100. Gillis RC, Daley BJ, Enderson BL, Karlstad MD. Eicosapentaenoic acid and gamma-linolenic acid induce apoptosis in HL-60 cells.// J.Surg Res. 2002,-V.107(l):145-53

101. Granouillet R, Gaudin OG, Laurent JC, Rousset H, Moulin A Sem Hop 1982 May 6; 58(18): 1129-33

102. Gunn B.A, Davis C.D.E.,Jr. Staphylococcus haemolyticus urinary tract infection in a male patient// J Clin Microbiol., 1988,-V.26: 1055-7

103. Hammann R. (1982) A Predessessment of the microbial flora of the female genital tract with special reference to the occurrence of Bacteroides spp. -J.Med.Microbiol. V.15, 3: 239-302 .

104. Herrera-Alcaras E., Valero-Guillen P., Martin-Luengo F., Canteras-Jordana M. (1993). Numerical analysis of fatty and mycolic acid profiles of Corynebacterium urealyticum and other related corynebacteria. Microbiologia Sem.,9, 53-62.

105. Herrera-Alcaras E., Valero-Guillen P., Martin-Luengo F., Canteras-Jordana M. Numerical analysis of fatty and mycolic acid profiles of Corynebacterium urealyticum and other related corynebacteria.// Microbiologia Sem. 1993, -v.9: 53-62.

106. Hill GB. Bacteriology of the vagina.// Scand J Urol Nephrol. 1984- Suppl.86.-p.23-39.

107. Hill M.J (ed.) Microbial metabolism in the Digestive Tract// 1986

108. Hillier S.L., Krohn M.A., Rabe L.K. et al. Clin Infect Dis. 1993, June (16),Supp.4: 273-81.

109. Hillier SL The relationship of hydrogen peroxide-producing lactobaccili to bacterial vaginosis and genital microflora in pregnant women// Obstet. Gynecol- V.79 (3)- p.369-373

110. Hillier SL, Krohn MA, Rabe LK, Klebanoff SJ, Eschenbach DA, Clin Infect Dis, 1993 Jun;16 Suppl 4:S273-81.- The normal vaginal flora, H202-producing lactobacilli, and bacterial vaginosis in pregnant women)

111. Hofstad T. Current toxonomy on medically importantnonsporing anaerobes. Rev.Infect.Dis. 1990,12, Suppl.(122- 126)

112. Hoist E. Reservoir of 4 organisms associated with bacterial vaginosis suggests lack of sexual transmission. J.Clin.Microbiol.1990, V.29 (9),p 2035

113. Howell S.A., Moore M.K., Mallet A.I., Noble W.C. Sterols of fungi responsible for superficial skin and nail infection. J.Gen.Microbiol. //1990,- v. 136:241-7.

114. Hurley R. Microflora of the vagina during pregnancy// Soc Appl Bacteriol Symp Ser.- 1974-№3- p.155-185

115. Jantzen E., Berdal B.P., Omland T. Fatty acid taxonomy of Haemophilus species, Pasteurella multocida, Actinobacillus actino-mycetemcomitans and Haemophilus vaginalis (Corinebacterium vaginale). Acta Path.Microbiol.Scand. 1991, 88B: 89-93.

116. Jantzen E., Bryn K., Hagen N., Bergan Т., Bovre K. Cellular fatty acid composition of Francisellatularensis.J.Clin.Microbiol. 12,928-930, 1979.

117. Jantzen E., Bryn K., Hagen N., Bergan Т., Bovre K. Fatty acids andmonosaccharides of Neisseriaceae in relation to established taxonomy. National Institute of Public Health (NIPH). Annals. 1(2), 59-71, 1978.

118. Jantzen E., Tangen Т., Eng I. (1989) GC of Mycobacterial FA and alcohols: diagnostic application. Apmis, 97 (11):1037-45

119. Kabra S.K. Congenital tuberculosis. N.Engl.J.Med.l994, 331(8):548.

120. Kaneda T. Fatty acids in the genus bacillus: an example of branched chainpreferences. Bacteriol.Rev. 1977, 41:391-418.

121. Koichi T. On the production of hydroxy fatty acids and fatty acids oligomers in the course of adipocere formation. Nippon Hoigaku Zasshi//1984,38(3):257-272.

122. Maitza S.K., Schotz M.C., Yoshikawa T.T., Guze L.B.//Defermination of lipid A and endotoxin in serum by mass-spectroscopy.//Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1978.-V.75.-P.3993.

123. Manual of Clinical Microbiology. 5-th ed. Editor in Chief Albert Balows. Washington, 1991, pp. 317-318.

124. Maybeny W.R., Lambe D.W.,Jr.; Ferguson H.P.// Identification of Bacteroides species by cellular fatty acid profiles.// Int.J.Syst.Bacteriol.-1982.-Voi.32(l).-P.21-27.

125. Mc Donald H. Group В streptococcal colonization and preterm labour // Aust N Z J Obstet Gynaecol. 1989-V.29(3): 291-3

126. McGroarfy I.A., Hawthorn L.A., Reid G. Anti-tumor activity of lactobacilli in vitro//Microbios.Lett.-1988.-Vol.39-p. 105-112

127. McNabb A., Shuttleworth R., Behme R.et al. Fatty acid characterization of rapidly growing pathogenic aerobic actinomycetes as means of identification. J. Clin.Microbiol. 1997, 35(6), 1361-1368.

128. McNeil M.M., Brown J.M. The medically important aerobic actinomycetes: epidemiology and microbiology. Clin.Microbiol.Rev. 1994, 7(3): 357-417.

129. Meares E.M., Jr. Prostatitis syndromes: new perspectives about old woes.// J Urol. 1980- V. 123:141-7

130. Mehta A., Talwalkav J., Shetty C.V., Motashaw N.D. Microbial Flora of the vagina// Ann. Meeting Somed. Boston, USA. -September 10-13, 1993

131. Microbial identification system. MIDI Inc., Delaware, 1994

132. Miyagawa E. Cellular fatty and fatty aldehyde composition of rumen bacteria. J.Gen.Appl.Microbiol. 1982, 28: 389-408.

133. Miyagawa E., Azuma R., Suto T. Cellular fatty acid composition in gram-negative obligately anaerobic rods. J.Gen.Appl.Microbiol. 25, 41-51, (1979).

134. Morgan, S.L., Fox, A., Gilbart, J. (1989) Profiling, structural characterization, and trace detection of chemical markers for microorganisms by gas chromatography mass spectrometry. J.Microbiol.Methods. 9, 57-69.

135. Moss C.W. Characterization of Clostridia by gas chromatography. 1.

136. Differentiation of species by cellular fatty acids. -Appl.Microbiol. 1967, 15(2), 390-397.

137. Moss C.W., Lambert M.A. Lombard G.L. Cellular fatty acids of Peptococcus variabilis and Peptostreptococcus anaerobius// J.Clin.Microbiol.,- 1977, -5(6): 665-7.

138. Mott G.E., Brinkley A.W. Plasmonylethanolamin: growth factor for cholesterol-reducing Eubacterium. J.Bacteriol. 1979,139(3):755-760.

139. Nagy E. Investigation of factors which may have an influence on the vaginal ecosystem// Microb.Therapy.-1995.-v.25-p.25-31

140. Nichols P.D., Leeming R., Rayner M.S., Latham V. Use of capillary gas chromatography for measuring fecal-derived sterols// J.Chrom., 1996, A 733: 497-509.

141. Nickel J.C., Costerton J.W. Coagulase-negative staphylococcus in chronic prostatitis// J Urol. 1992, V.147:398-400

142. Nissen Composition of lipid-bound fatty acids of human semen in relation to its fertility values, Andrologia, 13, (1981)

143. Nurminen M. Chemical characterization of Chlamydia trachomatis LPS. -Infection and Immunity. 1985, 48(2): 573-75.

144. Onderdonk AB Methods for quantitative and qualitative evaluation of vaginal microflora during menstruation.// Appl Environ Microbiol. 1986-V.51(2):333-39

145. Osipov G.A., Turova E.S. Studying species composition of microbialcommunities with the use of gas chromatography-mass spectrometry. Microbial community of kaolin. FEMS MicrobioLRev. 1997, 20: 437-446.

146. Overman B.A. The vagina as an ecologic system. Current understanding and clinical applications// J Nurse Midwifery-1993- V.38(3): 146-51

147. Paavonen J Chlamydial pelvic inflammatory disease// Hum Reprod Update 2(6):519.29 1996

148. Person К. et al. Prevalence of 9 different microorganisms in the female genital tract. A comparison between women from a venerial decease clinic and from a health control department. Brit.J.Vener.Dis.,1979, 55(6), 429-33

149. Pitt. Gas chromatographic-mass spectrometric characterization of unsaturated fatty acids in urine. J.Chromatogr, 1990, Dec.

150. Pybusa V., And В., Onderdon K. Microbial interactions in the vaginal ecosystem with emphasis on the pathogenesis of bacterial vaginosis// Microbes and Infection.-V. 1 -Issue 4- April 1999- p.285-92

151. Redondo-Lopez V. Emerging role of lactobacilli in the control and maintenance of the vaginal bacterial microflora// Rev Infect Dis. 1990- V. 12(5):856-72

152. Reina J, Gil J, Salva F,Gomez J, Alomar P. Microbiological characteristics of Weeksella virosa (formerly CDC group Iif) isolated from the human genitourinaiy tract. J.Clin.Microbiol. 1990, 28 (10) :2357-2359

153. Reiter В., Marschall V.M., Philips S.M. The antibiotic activity of thelactoperoxidase-thiocynate-hydrogen peroxide system in the calf abomasum// Res.Vet.Sci.- 1980.-Vol.28.-p.l 16-22

154. Roex AJ, Gynecological infections and strategies for treatment. Pharm Weekbl (Sci) 1990, 12 (6A): 268-74

155. Ross RA. Mixed-effect models for predicting microbial interactions in the vaginal ecosystem,// J Clin Microbiol.-1994- V.32(4):871-5

156. Rowe BR, Logan MN, Farrel I, Bamett AH. J Clin Pathol 1990 Aug; 43(8): 644645

157. Rowe BR, Logan MN, Farrel I, Barnett AH. J Clin Pathol 1990 Aug; 43(8): 644645

158. Sargent J.C., Irwin R. Prostatic abscess: clinical study of 42 cases. // Am. J. Surg. -1931-V. 11:334-7

159. Shekhovtsova N.V., Osipov G.A., VerkhovtsevaN.V., Pevzner L.A. Analysis of lipid biomarkers in rocks of the Archean crystalline basement //Proceedings of SPIE.- 2003.- Vol.4939.- P. 160 168.

160. Stead, D.E., Sellwood, J.E., Wilson, J., Viney, J. (1992) Evaluation of a commercial microbial identification system based on fatty acid profiles for rapid, accurate identification of plant pathogenic bacteria. J.Appl.Bacteriol. 72, 315-321.

161. Stead, D.E., Sellwood, J.E., Wilson, J., Viney, J. Evaluation of a commercial microbial identification system based on fatty acid profiles for rapid, accurate identification of plant pathogenic bacteria. J.Appl.Bacteriol. 1992, 72, 315-321. 25.

162. Stoakes L., John M.A., Lannigan R. et al. Gas-liquid chromatography of cellular fatty acids for identification of staphylococci. Clin.Microbiol. 1994 Aug.; 32(8): 1908-10

163. Sud J.J., Feingold D.SDetection 3-hydroxy fatty acids of picogram levels in biologic specimens. A chemical method of the detection of Neisseria gonorhoeae?//J.Investigative Dermatology.- 1979,-v. 73: 521-6

164. Sugimoto C. et al.// Cellular fatty acid composition of Haemophilus equigenitalis.// J.Clin.Microbiol.- 1982.-Vol.l5.-N5.-P.791-794.

165. Tanner Michael A, Daniel Shoskes and Norman R. Prevalence of Corynebacterial 16S rRNA Sequences in Patients with Bacterial and "Nonbacterial" Prostatitis // Journal of Clinical Microbiology, June 1999, p. 1863-1870, Vol. 37, No. 6

166. Teng K.,Li M., Yu W. e t al. Comparison of PCR with culture for detection of Ureaplasma urealyticum in clinical samples from patients with urogenital infections // J. Clin. Microbiol. 1994, -V.32:2232-34

167. Trevoux R., Fari A., Sebald M. Infections gynecologiques a anaerobies// Rev.Prat.(Paris).- 1977/- V.27,N3.-p.l49-54

168. Tsuchiya H., Masaru S., Kato M. et ai. High-Perfomance Liquid Chromatographicanalysis of bacterial fatty acid composition for chemotaxonomic characterization of oral streptococci. J.Clin.Microbiol. 1986, 24(1): 81-85.

169. Veerkamp J.H. Fatty acid composition of Bifidobacterium and Lactobacillus. J.Bacteriol. 1971, 108(2): 861-867.

170. Weidner W, Krause W, Schiefer HG, Brunner H, Friedrich HJ. Ureaplasmal infections of the male urogenital tract, in particular prostatitis, and semen quality// Urol Int 1985; 40(1): 5-9

171. Werder E.A. Neonatal infections with Streptomyces pelletieri. Am.J.Dis. Child. 1973,-v. 125(3): 439-441

172. Weyant R.S., Moss C.W., Weaver R.E., Hollis D.G., Jordan J.G., Cook E.C., Daneshvar M.J. Identification of Unusual Pathogenic Gram-Negativ Aerobic and Facultatively Anaerobic bacteria. Second edition. Williams and Wilkins, 1996.

173. White D.C. Validation of quantitative analysis for microbial biomass, community structure, and metabolic activity. //Adv. Limnol. 1988,-v. 31:1-18

174. Wolfram G., Adam O. Clinical significance of essential fatty acids.// MMW Munch Med Wochenschr. 1980,-V.122(48): 1721-4