Генотипическая идентификация вируса лейкоза крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Шаева, Айгуль Юсуповна

• Шаева, Айгуль Юсуповна
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шаева, Айгуль Юсуповна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Лейкоз крупного рогатого скота.

1.2. Вирус лейкоза крупного рогатого скота.

1.2Л. Состав и структура вириона.

1.2.2. Геном вируса.

1.3. Патогенез лейкоза крупного рогатого скота.

1.4. Эпизоотология лейкоза крупного рогатого скота.

1.4.1. Эпизоотическое состояние по лейкозу крупного рогатого скота в Российской Федерации.

1.4.2. Эпизоотическое состояние по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Татарстан.

1.5. Методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота.

1.5.1. Реакция иммунодиффузии (РИД).

1.5.2. Иммуноферментный анализ (ИФА).

1.5.3. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

1.5.4. ПЦР-ПДРФ-анализ.

1.5.5. Секвенирование.

1.5.6. Филогенетический анализ.

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Татарстан.

3.1.1. Результаты серологических и гематологических исследований крупного рогатого скота за 2006-2010 гг.

3.1.2. Степень инфицированности крупного рогатого скота в разрезе районов Республики Татарстан по состоянию на 2010 год.

3.2. Стратегии типизации ВЛКРС, основанные на интерпретации ет>-ПЦР-ПДРФ-профилей.

3.2.1. Интерпретация еяу-ПЦР-ПДРФ-профилей ВЬУ по Б. Ве1ег ег а1. (2001).

3.2.2. Интерпретация елу-ПЦР-ПДРФ-профилей ВЬУ по М. Ысит & а1. (2002).

3.2.3. Интерпретация епу-ТХ\ТР-ГТДРФ-профи.ттей ВЬУ по Н. РесЬпег & а1. (1997).

3.3. Стратегия типизации ВЬУ на основе интерпретации результатов филогенетического анализа локуса еяу-гена возбудителя.

3.4. Классификация заявленных в ОепВапк ЫСВ1 представителей ВЬУ в зависимости от выбранной стратегии типизации.

3.5. Совершенствование способов генотипической идентификации ВЬУ по локусу ет>-гена возбудителя.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

5. ВЫВОДЫ.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Генотипическая идентификация вируса лейкоза крупного рогатого скота»

Актуальность темы. Лейкоз крупного рогатого скота — инфекционная болезнь опухолевой природы, этиологическим агентом которой является одноименный вирус (ВЛКРС, англ. Bovine leukemia virus, BLV), относящийся к роду Deltaretrovirns семейства Retroviridae (S.M. Rodriguez et al., 2009).

В структуре инфекционных болезней животных лейкоз крупного рогатого скота в Российской Федерации занимает ведущее место. Он представляет угрозу для генофонда племенного молочного скота, наносит значительный экономический ущерб вследствие падежа животных и недополучения продуктов животноводства (Н.З. Хазипов с соавт., 2008).

Лабораторно-диагностические исследования в системе мониторинга инфицированности стад ВЛКРС являются неразрывным звеном противолейкозных мероприятий.

Вопросы диагностики лейкоза крупного рогатого скота в контексте изучения генетического многообразия его этиологического агента весьма актуальны, учитывая факт невозможности типизации данного вирусного патогена серологическими методами исследования (G. Moratorio et al., 2010).

Ряд разработанных на основе интерпретации e^v-ПЦР-ПДРФ-профилей стратегий типизации BLV (Н. Fechner et al., 1997; D. Beier et al., 2001; M. Licursi et al., 2002; H. Fechner et al., 1997) имеют определенную идентификационную ценность, однако не способны охарактеризовать весь спектр генетического многообразия ВЛКРС, нежели современный подход к оценке его генотипического разнообразия на основе филогенетического анализа env-гена данного возбудителя (S.M. Rodriguez et al., 2009; G. Moratorio et al., 2010).

Цель и задачи исследования. Цель исследования — молекулярно-генетический анализ представителей ВЛКРС на предмет их таксономической классификации в контексте существующих подходов к типизации возбудителя и совершенствование способов генотипической идентификации BLV по локусу еяу-гена.

Для реализации цели решались следующие задачи:

- изучить эпизоотическую ситуацию по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Татарстан;

- установить таксономическую принадлежность изолятов ВЛКРС, циркулирующих в хозяйствах Республики Татарстан, в контексте существующих молекулярно-генетических подходов к типизации возбудителя, как на основе ПЦР-ПДРФ, так и филогенетического анализа секвенированных последовательностей локуса еиу-гена провируса ВЬУ;

- классифицировать всех заявленных в ОепВапк ІЧГСВІ представителей ВЛКРС в зависимости от выбранной стратегии типизации с дальнейшим определением степени согласованности существующих способов генотипической идентификации ВЬУ;

- разработать схему ПЦР-ПДРФ-генотипирования ВЛКРС по локусу еиу-гена возбудителя, согласующуюся с филогенетической классификацией ВЬУ.

Научная новизна.

- Впервые на основании филогенетического анализа секвенированных последовательностей локуса ет-гена провируса ВЬУ охарактеризован новый, ранее не обоснованный генотип ВЛКРС, обозначенный нами «8-й генотип».

- Впервые разработана схема ПЦР-ПДРФ-генотипирования ВЬУ в соответствии с филогенетической классификацией данного возбудителя.

Научная новизна отражена в публикациях ведущих рецензируемых научных журналов, рекомендованных ВАК, и глобальной электронной базе данных ОепВапк ЫСВЬ

Научно-практическая значимость.

- Результаты молекулярно-генетического анализа представителей ВЛКРС на предмет их таксономической принадлежности существенно повышают уровень знаний о генетическом многообразии ВЬУ и позволяют эффективно использовать полученную информацию в научно-практической деятельности ветеринарной медицины.

- С учетом новых знаний о генетическом многообразии ВЬУ, разработана согласующаяся с филогенетической классификацией схема ПЦР-ПДРФ-генотипирования, позволяющая проводить идентификацию 8-ми генотипов ВЛКРС.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены на:

- научно-практической конференции «Становление и достижения биохимической школы Казанского университета (Казань, 2009 г.);

- Международной научно-практической конференции, посвященной 90-летию кафедры биологической и органической химии Санкт-Петербургской ГАВМ (Санкт-Петербург, 2009 г.);

- VII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика-2010» (Москва, 2010 г.);

- научно-практической конференции молодых ученых ФГОУ ВПО «Казанская академия ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана» (Казань, 2010);

- научно-практической конференции «Ветеринарная медицина домашних животных» (Казань, 2010 гг.);

- Международной научно-практической конференции «Инновационные подходы в ветеринарии, биологии и экологии» (Троицк, 2011 г.);

- Всероссийской научно-практической конференции. «Научное обеспечение инновационного развития животноводства» (Казань, 2011 г.);

- Научно-технической конференции «Модернизация АПК на основе инновационных достижений науки и техники» (Казань, 2011 г.).

Публикация результатов исследования. По теме диссертации опубликовано 16 работ, в том числе 6 публикаций в ведущих рецензируемых научных журналах, рекомендованных ВАК, включая 4 депонированные в глобальную базу данных ОепВапк ЫСВ1 публикации нуклеотидных последовательностей локуса еяу-гена выявленных изолятов провируса ВЬУ.

Основные положения, выносимые на защиту.

- На основании результатов серологических и гематологических исследований поголовья крупного рогатого скота на лейкоз в Республике Татарстан установлен эндемический характер распространения данной вирусной инфекции.

- На основании филогенетического анализа секвенированных последовательностей локуса env-гена провируса BLV охарактеризован новый, ранее не обоснованный 8-й генотип BJIKPC, ввиду формирования на выстраиваемых дендрограммах нового автономного генотипического кластера.

- Схема ПЦР-ПДРФ-генотипирования BJIKPC, разработанная в рамках совершенствования способов генотипической идентификации возбудителя, согласуется с современным подходом к оценке его генотипического разнообразия, основанным на филогенетическом анализе еиу-гена BLV.

Объем и структура диссертационной работы. Диссертация изложена на 150 страницах компьютерного текста (текстовый редактор «Microsoft Office 2003», стиль «Times New Roman», размер шрифта 14 пт, интервал полуторный) и включает: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследования, выводы, практические предложения, список использованной литературы (всего 132 источника, в том числе 93 иностранных) и приложения. Диссертация иллюстрирована 29 таблицами, 15 рисунками и 6 схемами. Прилагаются документы, подтверждающие научно-практическую значимость работы.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Шаева, Айгуль Юсуповна

5. ВЫВОДЫ

1. Эпизоотическая ситуация по лейкозу крупного рогатого скота в Республике Татарстан; характеризуется как эндемическая. Степень инфицированности стадам в разрезе: районов РТ за 2010 год варьировала в пределах 0,1-53,7%, со средним значением 16% РИД-позитивных животных от общего числа происследованного поголовья скота Республики Татарстан:

2. В популяциях; крупного рогатого скота Республики Татарстан циркулируют изоляты ВЛКРС, идентифицированные в зависимости от выбранной стратегии типизации на основе интерпретации е«у-ПЦР-ПДРФ-профилей как представители Бельгийской и Австралийской подгрупп; 6-гоу 1-го; и не: классифицированного генотипов; вариантных групп «А», «С» и «Е» ВЛКРС; а на основе интерпретации результатов филогенетического анализа секвенированных последовательностей локуса еиу-гена как представители 4-го; 7-го и нового ранее не обоснованного 8-го генотипов ВЛКРС, соответственно.

3. По результатам сравнительной оценки 210 заявленных в ОепВапк ЫСВГ нуклеотидных последовательностей локуса егсу-гена представителей ВЛКРС на предмет их классификации в зависимости) от выбранной стратегии идентификации установлено; что известные ранее способы типизации ВЕУ, разработанные на основе ПЦР-ПДРФ-анализа, не согласуются с позже предложенной филогенетической; классификацией; данного? инфекционного агента.

4. Разработанная нами схема ПЦР-ПДРФ-генотипирования: ВЛКРС с подобранными условиями идентификации. 8-ми генотипов ВЬУ по 6 эндонуклеазам рестрикции согласована с современным подходом к оценке его генотипического разнообразия, основанным на филогенетическом анализе ет>-гена возбудителя.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Внедрить в систему мониторинга эпизоотической ситуации по лейкозу крупного рогатого скота молекулярно-генетические способы оценки генотипического разнообразия ВЬУ, включая предложенную нами схему ПЦР-ПДРФ-генотипирования ВЛКРС, согласующуюся с современной филогенетической классификацией данного возбудителя.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шаева, Айгуль Юсуповна, 2011 год

1. Валихов, А.Ф. Распространение онкорновируса крупного рогатого скота в неблагоприятных по лейкозу хозяйствах / А.Ф. Валихов, Л.Г. Бурба, В.М. Нахмансон // Ветеринария. 1977. - №3. - С. 4043.

2. Галеев, Р.Ф. Характеристика гематологических показателей и серологических реакций у коров, спонтанно инфицированных вирусом лейкоза / Р.Ф. Галеев // II съезд гематологов и патоморфологов. — 1985: — 335 с.

3. Гулюкин, М.И. Исключить крайности' в проведении противоэпизоотических мероприятий при лейкозе крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин // Ветеринарный консультант. — 2005а. — № 13-14. — С. 4 ~ 6.

4. Гулюкин, М.И. Обзор эпизоотической ситуации по лейкозу в РФ / М.И. Гулюкин // Доклад на координационном совещании ВИЭВ — Москва, 2005Ы 17 с.

5. Иванов, O.B. Эффективность серологических методов исследования при лейкозе крупного рогатого скота / О.В. Иванов, О.Ю. Иванова, В.П. Федотов, Т.И. Брезгинова, Н.Г. Монова // Ветеринария. — 2008. — №7. — С. 6-8.

6. Итэсь, Ю.В. Результаты комплексных иммунобиохимических исследований крупного рогатого скота разной породной принадлежности и степени компрометации к лейкозу: Автореф. дис. . канд. биол. наук. — Новосибирск, 2002. — 22 с.

7. И. Камалов, Б.В. Лейкоз крупного рогатого скота в Республике Татарстан и меры борьбы с ним: Автореф. дис: . канд. ветер, наук. — Казань, 2006. — 24 с.

8. Камалов, Б.В. Лейкоз крупного рогатого скота. Методическое пособие / Б.В. Камалов, Ф.Ф. Зиннатов, Н.З. Хазипов, А.Х. Волков // Казань, 2005. -37 с.

9. Камалов, Б.В. Организация противолейкозных мероприятий в Республике Татарстан и их экономическая эффективность / Учёные записки КГАВМ. — 2009. -№ 198.-С. 93-99.

10. Ковалюк, Н.В. Современные методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота / Н.В. Ковалюк, В.Ф. Сацук, Е.В. Мачульская // Ветеринария Кубани. 2007. - №1. - С. 11-12.

11. Крикун, В.А. Специфическая профилактика лейкоза крупного рогатого скота / В.А. Крикун, Т.В. Щекотурова // Бюлл. ВИЭВ. 1996. - Т. 77. - С. 49-51.

12. Крикун, В.А. Эффективность РИД с двойным антигеном онкорнавируса типа С при оценке эпизоотического состояния хозяйств по лейкозу крупного рогатого скота / В.А. Крикун, В.Г. Куликов, Л.И. Нагаева // Рига: Зинатне, 1979.-С. 130-140.

13. Кукайн, P.A. Вирус лейкоза крупного рогатого скота / P.A. Кукайн, Л.И. Нагаева//Рига: Зинатне, 1982.- 175 с.

14. Лукашов, В.В. Молекулярная эволюция и филогенетический анализ / В.В. Лукашов // М.: Бином. Лаборатория знаний, 2009. — 256 с.

15. Лысов, Ю.П. Определегие нуклеотидной последоватеьности ДНК гибридизацией с олигонуклеотидами: Новый метод / Ю.П. Лысов, В. Л. Флорентьев, А. А. Хорлин, К. Р. Храпко. В.В. Шик, А.Д. Мирзабеков // Докл. АН СССР.-1988.-Т. 303.-С. 1508-1511.

16. Максам, A.M. Метод определения последовательности ДНК (секвенирования) после введения метки, в конец молекулы и расщепления ее по основаниям / A.M. Максам, У. Гилберт // Молекуляр. биология. — 1986.-Т. 20.-С." 581-637.

17. Малоголовкин, С.А. Роль моноклональных антител в диагностике лейкоза крупного рогатого скота / С.А. Малоголовкин // Ветеринария. — 1997. — № 4.-С. 16.

18. Петров, И.Н. Обнаруживающие результаты есть, возвращаясь к теме лейкозов КРС / И. Н. Петров // Ветеринарная газета. 1998. - № 1. — С. 5.

19. Петропавловский, М.В. Эффективность диагностических тестов, в выявлении вируса лейкоза крупного рогатого скота в оздоравливаемых отлейкоза стадах: Автореф. дис. . канд. вет. наук. Екатеринбург, 2010. — 26 с.

20. Рачкус Ю.А. и др. Авт. свид. 4811056/13 опубл. 23.12.91, Бюлл. 47.

21. Сергеев, В.А. Вирусы и вирусные вакцины / В.А. Сергеев, Е.А. Непоклонов, Т.И. Алипер // Москва: Библионика, 2007. — С. 348.

22. Сергеев, В.А. Структура и биология вирусов животных / В.А. Сергеев, Б.Г. Орлянкин // Москва, 1983. — 336 с.

23. Симонян, Г.А. Ветеринарная гематология / Г.А. Симонян, Ф.Ф. Хисамутдинов // М.: Колос, 1995. С. 99-104.

24. Смирнов, П.Н. Практические аспекты лейкоза крупного рогатого скота / П. Н. Смирнов // Ветеринарная газета. — 1998. — №13. — С. 4.

25. Сюрин, В.Н. Вирус лейкоза крупного рогатого скота / В.Н. Сюрин, Р.В. Белоусова, Н.В. Фомина//Москва: МВА, 1986. —29 с.

26. Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомина// Москва: ВНИТИБП, 1998. 528 с.

27. Хазипов, Н.З. Молекулярная генодиагностика в ветеринарии / Н.З. Хазипов, А.Н. Аскарова // Казань, 2002 100 с.

28. Хазипов, Н.З. Репродукция вируса лейкоза крупного рогатого скота и иммунный ответ на нее / Н.З. Хазипов, Р.П. Тюрикова // Учёные записки КГАВМ. 2008. - № 192 - С. 152-160.

29. Хисамутдинов, Ф.Ф. Система противоэпизоотических мероприятий в скотоводстве / Ф.Ф. Хисамутдинов, И.Н. Никитин // Казань, 1996. С. 304.

30. Чемерис, А.В. Секвенирование ДНК / А.В. Чемерис, Э.Д. Ахунов, В.А. Вахитов // М.: Наука, 1999. 427 с.

31. Шишков, В.П. Серологические методы выявления животных, инфицированных вирусом лейкоза крупного рогатого скота / В.П.tv Шишков, А.Ф. Валихов // Лейкозы и злокачественные опухоли животных.-М.: Агропромиздат, 1998.-С. 173-194.

32. Adam, Е. Involvement of the cyclic AMP-responsive element binding protein in bovine leukemia virus expression in vivo / E. Adam, P. Kerkhofs, M. Mammerickx, R. Kettmann, A. Burny, L. Droogmans, L. Willems// P. Virol. -1994. V. 68. - P. 5845-5853.

33. Avidan, O. The processivity and fidelity of DNA synthesis exhibited by the reverse transcriptase of bovine leukemia virus / O. Avidan, M.E. Meer, I. Oz, A. Hizi // Eur. J. Biochem. 2002. - V. 269. - P. 859-867.

34. Bains, W. A novel method for nucleic sequence determination / W. Bains, G.C. { Smith // J. Theor. Biol'. 1988. - V. 135. - P. 303-307.

35. Baumgartener, L.E. Host range of bovine leucosis virus: preliminary report /

36. E. Baumgartener, C. Olson // Curr. Top. Med. Amin. Sci. 1982. - V. 15. - P.338.347.

37. Camargos, M.F. Partial Sequencing of env Gene of Bovine Leukaemia Virus from Brazilian^ Samples and Phylogenetic Analysis / M.F. Camargos, D. Stancek, M.A. Rocha, L.M. Lessa, JtK.P. Reis, R.C. Leite // J. Vet. Med. -2002.-V. 49;-P. 325-331.

38. Carli, K.T. Detection of IgG antibody, to bovine leukaemia virus in. urine and serum by two enzyme immunoassays / K.T. Carli, A. Sen, H. Batmaz, E. Kennerman // Appl. Microbiol. 1999. - V. 28. - P. 416.

39. Chen, G. Synthesis of functional bovine leukemia virus (BLV) p34tax protein by recombinant baculoviruses / G. Chen, L. Willems, D. Portetelle, K.E. Willard-Gallo, A. Burny, D. Gheysen, R. Kettmann // Virology. 1989. - V. 173.-P. 343-347.

40. Choi, E.A. Mutational analysis of bovine leukemia virus Rex: identification of a dominant-negative inhibitor / E.A. Choi, T.J. Hope // J. Virol. 2005. - V. 79. -P. 7172-7181.

41. Copeland, T.D. Complete amino acid sequence of the nucleic acid-binding ' protein of bovine leukemia virus / T.D. Copeland, M.A. Morgan, S. Oroszlan //

42. FEBS Lett. 1983. -V. 156. - P. 37-40.

43. Derse, D. Nucleotide sequence and structure of integrated bovine leukemia virus long terminal repeats/ D. Derse, A.J. Diniak, J.W .Casey, P.L. Deininger // Virology. 1985.-V. 141.-P: 162-166.,

44. Derse, D. Two elements in the bovine leukemia virus long terminal repeat that regulate gene expression/ D. Derse, J.W. Casey // Science. 1986. - V. 231.1. P. 1437-1440.

45. Deshayes, L. Spontaneous immune response of bovine leukemia-virus-infected cattle against five different viral proteins/ L. Deshayes, D. Levy, A.L. Parodi, J.P. Levy // Int. J. Cancer. 1980. - V. 25. - P. 503-508.

46. Dolz, G. Comparison of agar gel immunodiffusion test, enzyme-linked immunosorbent assay and western blotting for the detection of BLV antibodies / G. Dolz, E. Moreno // J. Vet. Med. B. 1999. - V. 46. - P. 551-558.

47. Dube, S. Degenerate and specific PCR assays for the detection of bovine leukaemia virus and primate T cell leukaemia/lymphoma virus pol DNA and

48. RNA: phylogenetic comparisons of amplified* sequences from cattle andprimates from around the world / S. Dube, S. Bachman, T. Spicer, J. Love, D.

49. Choi, E. Esteban, J.F. Ferrer, B.J. Poiesz // J. Gen. Virol. 1997. - V. 78 - P. i 1389-1398.

50. Fechner, H. Provirus variants of the bovine leukemia virus and their relation tof the serological status of naturally infected cattle / H. Fechner, P. Blankenstein,i A.C. Looman, J. Elwert, L. Geue, C. Albrecht, A. Kurg, D. Beier, O. Marquardt,r

51. D. Ebner // Virology -1997. V. 237. - № 2. - P. 261 -269.

52. Francki, R.I.B. Classification and Nomenclature of viruses. Fifth report of the International Committee on Taxonomy of viruses / R.I.B. Francki, C.M Fauquet,

53. D.L. Knudson; F. Brown // Arch. Virol. (Suppl.). 1991 - V. 2. - P. 297.

54. Gatei, M. H. T-cell responses to highly conserved CD4 and CD8 epitopes on the outer membrane protein of bovine leukemia virus: relevance to vaccine development / M.H. Gatei, M.F. Good, R.C. Daniel, M.F. Lavin // J: Virol. -1993.-V. 67.-P. 1796-1802.

55. Ghysdael, J. Translation of bovine leukemia virus virion RNAs in heterologous protein-synthesizing systems / J! Ghysdael, R. Kettmann; A. Burny // J. Virol. -1979.-V. 29.-P. 1087-1098

56. E.M. Pituco, J.C.F. Oliveira, V.C.A. Ferreira, A.A. Ikuno // Arg. Inst. Biol. -2004.-V. 71.-P. 303-308.

57. Gupta, P. Detection of a precursor-like protein of bovine leukaemia virus structural polypeptides in purified virions / P. Gupta, J.F. Ferrer // J. Gen. Virol. 1980.-V. 47.-P. 311-322.

58. Hislop, A. D. Vaccine-induced cytotoxic T lymphocytes protect against retroviral challenge/ A.D. Hislop, M: F. Good, L. Mateo, J. Gardner, M.H. Gatei, R.C. Daniel, B.V. Meyers, M.F. Lavin, A. Suhrbier // Nat. Med. 1998. -V. 4.-P. 1193-1196.

59. Hyman, E.D. A new method of sequencing DNA / E.D. Hyman // Anal. Biochem. 1988. - V. 174, №2. - P.423-436.

60. Johnston, E.R. The SU and' TM envelope protein subunits of bovine leukemia virus are linked by disulfide bonds, both in cells and in virions / E.R. Johnston, K.J. Radke // Virol. 2000: - V. 74. - P. 2930-2935.

61. Kerkhofs, P. In vitro* and in vivo oncogenic potential of bovine leukemia virus G4 protein / P. Kerkhofs, H. Heremans, A. Burny, R. Kettmann, L. Willems // J. Virol. 1998. - V. 72. - P. 2554- 559.

62. Kettmann, R. Bovine leukemia virus: an exogenous RNA oncogenic virus / R. Kettmann, D. Portetelle, M. Mammerickx, Y. Cleuter, D. Dekegel, M. Galoux, J. Ghysdael, A. Burny, H Chantrenne // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1976. -V. 73.-P. 1014-1018.

63. Khrapko, K.R. An oligonucleotide hybridization approach to DNA sequencing / K.R. Khrapko, Yu:P. Lysov, A.A. Khorlin, V.V. Shick, V-.L. Florentiev, A.D. Mirzabekov // FEBS Lett. 1989. - V. 256. - P. 118-122.

64. Licursi, M. Genetic heterogeneity among bovine leukemia virus genotypes and' its relation to humoral responses in hosts / M. Licursi, Y. Inoshima, D: Wu, T. Yokoyama, E.T. González, H. Sentsui // Virus. Res. 2002. - V. 86. - №1-2. -P. 101-110. • ! . .

65. Licursi, M. Provirus variants of bovine leukemia virus in naturally infected cattle from Argentina and Japan / Mi Licursi, Y. Inoshima, D. Wu, T. Yokoyama, E. T. González, H. Sentsui // Vet. Microbiol. 2003. - V. 96. - P. 17-23.

66. Mahieux, R. New human retroviruses: HTLV-3 and HTLV-4 / R. Mahieux,. A. Gessain // Med. Trop. 2005. - V. 65. - P. 525-528.

67. Mamoun, R.Z. Bovine lymphosarcoma: expression1 of BLV-related; proteins in cultured cells / R.Z. Mamoun, T. Astier, B. Guillemain, J:F. Duplan // J. Gen. Virol. 1983. - V. 64. - P. 1895-1905.

68. Mamoun, R.Z. The pX region of the bovine: leukemia virus is transcribed as a 2.1-kilobase mRNA/ R.Z. Mamoun, T. Astier-Gin, R. Kettmann, J. Deschamps, N. Rebeyrotte, B:Ji Guillemain // J; Virol. 1985: - V. 54; - P.'.625^6291

69. Mateo, L. Delayed emergence of bovine leukemia virus after vaccination with a protective cytotoxic T cell-based vaccine / L. Mateo, J. Gardner, A. Suhrbier // AIDS Res. Hum: Retroviruses. 2001^ —V. 17. -P: 1447-1453.

70. Matthews, S. The solution structure of the,bovine leukaemia virus.matrix protein and: similarity with lentiviral matrix proteins / S. Matthews, M: Mikhailov, A. Burny, P. Roy //EMBO J. 1996. - V. 15. -P. 3267-3274.

71. Maxam, A.M. A new method for sequencing DNA / A.M. Maxam, W. Gilbert // Proc.Nat. Acad; Sci. USA.- 1977.-V. 74.-P. 560-564.

72. Meas, S. Vertical transmission of bovine leukemia virus and bovine immunodeficiency virus in dairy cattle herds / S. Meas , T. Usui, K. Ohashi, C. Sugimoto, M. Onuma // Vet. Microbiol: 2002. - V. 84. - P: 275-282.

73. Miller, J.M. Virus-like particles in phytohemagglutinin-stimulated lymphocyte cultures with reference to bovine lymphosarcoma / J.M. Miller, L.D. Miller, C. Olson, K.G. Gillette // J. Natl. Cancer Inst. 1969. - V. 43. - P. 1297-1305.

74. Miller, J.M., Serological detection of bovine leukemia virus infection / J.M. Miller, Ml J. van der Maaten // Vet. Microbiol. 1976. - №1. - P.l 95-202.

75. Morcock, D.R. Fluorescence and nucleic acid binding properties of bovine leukemia virus nucleocapsid protein / D.R. Morcock, S. Katakam, B.P. Kane, J.R. Casas-Finet // Biophys. Chem. 2002. - V. 97. - P. 203-212.

76. Nguyen, V.K. Evaluation* of an Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for detection of antibodies to Bovine Leukemia Virus in serum and milk / V.K. Nguyen, R.F. Maes // J. Clin. Microbiol. 1993. - V. 31(4). - P. 979-981.

77. Nyren, P. Enzymatic method for continuous monitoring of inorganic pyrophosphate synthesis / P. Nyren, A. Lundin // Anal. Biochem. 1985. - V. 151, №2. - P.504-509.

78. Nyren, P. Enzymatic method for continuous monitoring of DNA polymerase activity / P. Nyren // Anal. Biochem. 1987. - V. 167. - №2: - P.235-238.

79. Ogawa, Y. Structure of a defective provirus of bovine leukemia virus- / Y. Ogawa, N. Sagata, J. Tsuzuku-Kawamura, H. Koyama, M. Onuma, H. Izawa, Y. Ikawa // Microbiol. Immunol. 1987. -V. 31. - P. 1009-1015.

80. Pamba, R. Detection of bovine retrospumavirus by the polymerase chain reaction / R. Pamba, C. Jeronimo, D. Archambault // J. Virol. Meth. 1999. - V. 78.-P. 199-208.

81. Phillips, M. Isolation of a precipitating glycoprotein antigen from cell cultures persistently infected with bovine leukemia virus/ M. Phillips, J.M. Miller, M.J. Van der Maaten// J. Natl. Cancer Inst. 1978. - V. 60: - P. 213-217.

82. Portetelle, D. In animals infected by bovine leukemia virus (BLV) antibodies to envelope glycoprotein gp51 are directed against the carbohydrate moiety/ D. Portetelle, C. Brack, M. Mammerickx, A. Burny// Virology. 1980. -V. 105. -P: 223-233.

83. Powers, M.A. Activation of bovine leukemia virus transcription in lymphocytes from infected sheep: rapid transition through early to late gene expression / M.A. Powers, K. Radke // J Virol. 1992. - V. 66. - P. 4769-4777.

84. Powers, M.A. Episodic occurrence of antibodies against the bovine-leukemia virus Rex protein during the course of infection in sheep / M.A. Powers, D. Grossman, L.C. Kidd, K.Radke // J. Virol. 1991. - V. 65. - P. 4959-4965.

85. Rice, N.R. Sequence analysis of the bovine leukemia virus genome: Enzootic bovine leukosis and bovine leukemia virus / N.R. Rice, R.M. Stephens, R.V. Gilden // Martinus Nijhoff Publishing, The Hague, The Netherlands 1987. - P. 115-144.

86. Rice, N.R. The nucleotide sequence of the env gene and post-env region of bovine leukemia virus / N.R. Rice, R.M. Stephens, D. Couez, J. Deschamps, R. Kettmann, A. Burny, R.V. Gilden // Virology. 1984. - V. 138 - P. 82-93.

87. Rodriguez, S.M. Bovine leukemia virus can be classified into seven genotypes: evidence for the existence of two novel clades / S.M. Rodriguez, M.D. Golemba,

88. R.H. Campos, K. Trono, L.R. Jones // J Gen Virol. 2009. - V. 90. - № 11. - P. 2788-2797.

89. Rola, M. the detection of bovine leukemia virus proviral DNA by PCR-ELISA / M. Rola, J. Kuzmak // J. Virol. Meth. 2002. - V. 99. - P. 33-40.

90. Ronaghi, M. A sequencing method based on real-time pyrophosphate / M. Ronaghi, M. Uhlen, P. Nyren // Science. V. 281. - P. 363-365.

91. Sanger, F. A rapid method for determining sequences in DNA- by primed synthesis with DNA polymerase / F.J. Sanger, A.R. Coulson // Moh Biol. — 1975i-V. 94.-P. 441-448.

92. Sanger, F. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors / F. Sanger, S. Nicklen, A.R. Coulson // Ibid. 1977. - V. 74. - P. 5463-5467.

93. Schultz, A.M. The envelope proteins of bovine leukemia virus: purification and sequence analysis / A.M. Schultz, T.D. Copeland, S. Oroszlan// Virology. — 1984.-V. 135.-P. 417-427.

94. Simard, C. ELISA for the diagnosis of bovine leukosis: comparision with AGID test approved by the Canadian food Inspection Agency / C. Simard, S. Richardson, P. Dixon, C. Belanger, P. Maxwell // Can. J! Vet. Res. 2000. - V. 64.-P. 101-106.

95. Southern, E.M. Analyzing and comparing nucleic acid sequences by hybridization to arrays of oligonucleotides: Evaluation using experimentalmodels / E.M. Southern, U. Maskos, J.K. Elder // Genomics. 1992. - V. 13. -P. 1008-1017.

96. Tanaka, A.S. Targeted rearrangement of a chromosomal repeat sequence by transfection of a homologous DNA sequence using purified integrase /A.S. Tanaka, K. Komuro // Gene Ther. 2005. - V. 12. - P. 783-794.

97. Tham, K.M. Parvovirus (feline panleucopaenia virus) plaque formation / K.M. Tham, M.J. Studdert // Arch. Virol. 1985. - V. 84. - P. 261.

98. Uckert, W. Translational order of bovine leukemia virus gag and env gene-coded proteins / W. Uckert, M. Grofova, G. Beaudreau // Virology 1984. - V. 135.-P. 288-292.

99. A. Burny, R. Brasseur // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1992. V. 89. - P. 3810-3814.

100. Wang, H. Analysis of bovine leukemia virus gag membrane targeting and late domain function/ H. Wang, K.M. Norris, L.M. Mansky // J. Virol. 2002. - V. 76.-P. 8485-8493.

101. Willems, L. Expression of a cDNA clone corresponding to the long open reading frame (XBL-I) of the bovine leukemia virus / L. Willems, C. Brack, D. Portetelle, A. Burny, R. Kettmann // Virology. 1987. - V. 160. - P. 55-59.

102. Willems, L. The amino acid (157-197) peptide segment of bovine leukemia virus p34tax encompass a leucine-rich globally neutral activation domain / L. Willems, R. Kettmann, A. Burny// Oncogene. 1991. - V. 6. - P. 159-163.

103. Willems, L. The major homology region of bovine leukaemia virus p24gag is required for virus infectivity in vivo / L. Willems, P. Kerkhofs, L. Attenelle, A. Burny, D. Portetelle, R. Kettmann // J. Gen. Virol. 1997. - V. 78. - P. 637640.

104. Wu, D. In vivo transcription of bovine leukemia virus and bovine immunodeficiency-like virus / D: Wu, K. Murakami, A. Morooka, H. Jin, Y. Inoshima, H. Sentsui // Virus Research. 2003. - V. 97 - P. 81-87.