Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны и ее роль в регуляции выхода цитохрома с при апоптозе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, доктор биологических наук Гогвадзе, Владимир Георгиевич

• Гогвадзе, Владимир Георгиевич
• доктор биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации доктор биологических наук Гогвадзе, Владимир Георгиевич

I. ВВЕДЕНИЕ. Апоптоз и некроз - две формы гибели клеток.

II. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Глава 1. Кальциевый гомеостаз клетки и механизмы его регуляции.

1.1. Аккумуляция ионов Са2+ в цитоплазме некротических клеток.

1.2. Кальциевый гомеостаз клетки.

1.3. Зависимые от Са ферменты катаболизма.

Фосфолипазы.

Протеазы. Нуклеазы.

Си2' и повреждение цитоскелета.

1.4. Системы, поддерживающие кальциевый гомеостаз цитоплазмы.

1.5. Роль митохондрии в регуляции кальциевого гомеостаза клетки.

1.6. Митохондриальная система аккумуляции ионов Са

1.7. Система выхода ионов Са из митохондрий.

Глава 2. Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны.

2.1. Индукция неспецифической проницаемости митохондрий вследствие накопления дефектов мембраны.

Активация фосфолипазы Аг.

Перекисное окисление липидов. Образование пор в липидной фазе мембраны.

2.2. Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны вследствие открытия неселективной поры во внутренней мембране митохондрий.

2.3. Взаимосвязь различных механизмов индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны.

Глава 3. Апоптоз, характерные признаки и механизмы регуляции.

3.1. Апоптоз и его значение в жизнедеятельности организма.

3.2. Регуляция апоптоза на генетическом уровне.

3.3. Характерные признаки апоптоза.

Межнуклеосомная фрагментация ДНК. Появление на плазматической мембране фосфатидилсерина. Снижение мембранного потенциала митохондрий при апоптозе. Активация каспаз.

3.4. Механизмы активации каспаз.

3.5. Апоптоз, независимый от активации каспаз.

3.6. Роль митохондрий в апоптозе.

3.7. Функции цитохрома с в апоптозе.

3.8. Механизмы выхода цитохрома с из митохондрий.

Индукция не специфической проницаемости митохондриалъной мембраны в клетках, претерпевающих апоптоз.

Семейство белков Вс1-2.

Механизм выхода цитохрома с из митохондрий, индуцированный про-апоптозными белками семейства Ьс1-2.

3.9. Регуляция апоптоза.

Роль ионов Са2+. Активные формы кислорода. Фосфолипаза Аг.

3.10. Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны в гибели клеток по механизму некроза и апоптоза.

III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

Глава 4. Материалы и основные методы исследования.

Глава 5. Результаты и обсуждение.

5.1. Роль свободнорадикальных процессов в индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны.

5.2. Роль митохондриальной фосфолипазы А2 в повреждении митохондрий при окислительном стрессе.

5.3. Накопление в мембране митохондрий свободных жирных кислот стимулирует электронейтральный выход ионов Са2+ из митохондрий.

5.4. Роль продуктов перекисного окисления липидов в индуцируемом органическим гидроперекисями выходе ионов Са2+ из митохондрий.

5.5. Влияние антиоксиданта ВНТ на состояние пиридиновых нуклеотидов митохондрий.

5.6. Влияние фенольных антиоксидантов на способность митохондрий аккумулировать ионы Са2+.

5.7. Зависимость индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны от окисляемого субстрата.

5.8. Сукцинат защищает митохондрии в условиях гипоксии и реперфузии.

5.9 Регуляторная роль свободных радикалов на примере моноокиси азота (NO).

5.10. Предотвращение циклоспорином А падения мембранного потенциала митохондрий и выхода ионов кальция в отсутствие индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны.

Глава 6. Стимуляция выхода цитохрома с из митохондрий.

6.1. Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны и высвобождение цитохрома

6.2. Зависимость выхода цитохрома с от состава среды инкубации.

6.3. Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны и стимуляция выхода цитохрома с в суб-популяции митохондрий.

6.4. Индукция выхода цитохрома с из митохондрий рекомбинантным белком Вах как вследствие открытия поры, так и независимо от нее.

Глава 7. Различные пути стимуляции выхода цитохрома с этопозидом в клетках Jurkat.

7.1. Зависимый и независимый от каспаз выход цитохрома

7.2. Стимуляция этопозидом выхода цитохрома с из митохондрий в бесклеточной системе.

7.3. Влияние этопозида на накопление ионов Са2+ в митохондриях пермеабилизованных клеток.

7.4. Индукция этопозидом неспецифической проницаемости мембраны и выхода цитохрома с из изолированных митохондрий.

7.5. Мультимерный а-лактальбумин, МАЛ, вызывает апоптоз, стимулируя открытие поры в митохондриальной мембране.

Глава 8. Влияние ингибиторов энергетики митохондрий на характерные признаки апоптоза.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны и ее роль в регуляции выхода цитохрома с при апоптозе»

Апоптоз и некроз - две формы гибели клеток.

Исследование механизмов гибели клеток позволило выявить две формы этого процесса - некроз и апоптоз. Каждая из форм имеет свои особенности и характерные признаки. Гибель клетки по типу некроза носит случайный характер и вызвана, в первую очередь, серьезным поражением, травматическим повреждением ткани. Одним из наиболее ранних последствий такого события является нарушение проницаемости плазматической мембраны, что ведет к неконтролируемому поступлению в клетки ионов Са2+ и, как следствие, нарушению кальциевого гомеостаза клетки.

В подобных условиях особое значение приобретают митохондриальные системы транспорта ионов Са . Митохондрии аккумулируют поступающий в цитоплазму Са2+, пытаясь нормализовать кальциевый гомеостаз цитоплазмы, обеспечивая клетке возможность устранить повреждение. Обладая высокой емкостью по кальцию, эти органеллы справедливо получили название защитных систем ("safety device", Carafoli, 1987) клетки. Однако, способность митохондрий аккумулировать и удерживать ионы Са2+ небеспредельна.

Накопление ионов

Са2+ в митохондриях вызывает повреждение органелл. Митохондрии набухают, мембранный потенциал, главная движущая сила накопления ионов Са и синтеза АТР, падает, и накопленные ионы выходят из митохондрий. Подобное явление получило название индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны.

По мнению большинства исследователей, это объясняется открытием неселективной поры во внутренней митохондриальной мембране (Hunter and Haworth, 1979a,b; Haworth and Hunter, 1979). В результате этого митохондриальная мембрана становится проницаемой для молекул <1500 Da.

Альтернативной является гипотеза накопления дефектов митохондриальной мембраны, вызываемых фосфолипазой А2 и/или перекисным

2+ окислением липидов. Активация Са -зависимой фосфолипазы Аг ведет к накоплению в мембране митохондрий свободных жирных кислот и лизофосфолипидов, что также сопровождается падением мембранного потенциала и набуханием митохондрий.

Перекисное окисление липидов обладает мощным дестабилизирующим воздействием на мембраны (Bindoli, 1988). Накопление в мембране продуктов перекисного окисления липидов приводит к инактивации ферментов дыхательной цепи, разобщению окислительного фосфорилирования митохондрий, падению мембранного потенциала. Кроме того, это ведет к образованию кластеров в липидной фазе мембраны, нарушающих ее барьерные свойства (Dobretsov et al., 1977).

Независимо от механизма, лежащего в ее основе, индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны является ключевым событием гибели клетки по механизму некроза (Crompton, 1999). Нарушение барьерных свойств мембраны и, как следствие, падение мембранного потенциала приведет к тому, что митохондрии не только утратят способность производить АТР, но, более того, станут активно гидролизовать его. Это приведет к деэнергизации клетки и, в конечном итоге, к некрозу.

Другая форма клеточной гибели, апоптоз, вовлечена в удалении нежелательных клеток в процессе органогенезиса и в контроль клеточного гомеостаза во взрослых организмах (Kerr et al., 1972; Хансон,1979; Wyllie et al.; 1980; Umanskv, 1982). Первоначально под словом «апоптоз» подразумевали совокупность морфологических признаков, отличающих данную форму клеточной гибели от некроза. В настоящее время под словом «апоптоз» предполагают последовательность биохимических событий, ведущих к конкретным морфологическим изменениям (McConkey and Orrenius, 1996). Механизмы, необходимые для воплощения программы клеточной гибели, присутствуют практически во всех клетках млекопитающих и могут быть активированы различными вне- и внутриклеточными сигналами и стимулами.

В отличие от некроза, в первых исследованиях апоптоза митохондриям не отводилось сколь либо важной роли. Дальнейшие попытки выявить общее звено в гибели клетки по механизму апоптоза, инициируемого различными по своей природе цитотоксическими стимулами, обозначили ведущую роль митохондрий в этой форме клеточной гибели. Одним из ключевых событий апоптоза является выход из межмембранного пространства митохондрий ряда белков, в том числе цитохрома с. Необходимость цитохрома с для апоптоза стала очевидной, когда было показано, что после выхода из митохондрий цитохром с связывается с белком Apaf-1, dATP и про-каспазой-9, образуя так называемый апоптосомный комплекс (Li et al., 1997). Это, в конечном итоге, приводит к активации ключевых ферментов апоптоза - каспаз, ответственных за ряд биохимических и морфологических изменений в клетке.

Механизм, регулирующий выход цитохрома с, окончательно не выявлен. Поскольку одним из ранних признаков апоптоза является снижение мембранного потенциала на митохондриальной мембране, что характерно для открытия поры, в течение долгого времени это событие считалось единственным объяснением выхода цитохрома с. Действительно, открытие поры влечет за собой набухание митохондрий и разрыв внешней митохондриальной мембраны, что сопровождается выходом цитохрома с из межмембранного пространства. Впоследствии, однако, были предложены и иные модели. Согласно одной из них, выход белков из межмембранного пространства митохондрий происходит через поры/каналы на внешней митохондриальной мембране, образуемые и регулируемые про-апоптозными членами семейства белков Вс1-2, такими как Bid, Bad или Вах. Не исключено, однако, что Вах способен стимулировать открытие поры во внутренней мембране митохондрий в результате взаимодействия с так называемым потенциал-зависимым анионным каналом (voltage-dependent anion channel, VDAC) (Shimizu et al, 2001).

Несмотря на активное исследование механизмов, регулирующих высвобождение цитохрома с из митохондрий, и роли этого процесса в фазе инициации либо в фазе завершения апоптоза, вопрос этот далек от разрешения. Поскольку индукция неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны считается ключевым событием некроза, трудно предположить, что одно и тоже событие легло в основу двух таких различных по своей природе типов гибели клеток. Тем не менее, постоянно возрастающее количество работ, указывающих на активное участие митохондрий в апоптозе, вызывает вполне объяснимое желание разобраться в этом вопросе.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Гогвадзе, Владимир Георгиевич

VI. выводы.

1. Накопление продуктов перекисното окисления в митохондриях стимулирует Са2+-фосфат зависимую индукцию неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны и эта стимуляция опосредована фосфолипазой

А2.

2. В отсутствие ионов Са2+ накопление продуктов перекисното окисления липидов не вызывает падения мембранного потенциала митохондрий и митохондрии остаются интактными.

3. Предотвращение индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны обусловлено неспецифическим действием ВНТ, не связанным с его антиоксидантными свойствами.

4. Продемонстрирована возможность регуляции индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны субстратами митохондриального окисления.

5. Прооксидантный белок Вах способен стимулировать выход цитохрома с из митохондрий, как индуцируя неспецифическую проницаемость внутренней митохондриальной мембраны, так и образуя поры во внешней мембране митохондрий. При этом внутренняя митохондриальная мембрана остается интактной.

6. На примере одного из индукторов апоптоза, этопозида, показано, что в зависимости от используемой концентрации агента, выход цитохрома с из митохондрий может происходить как в результате непосредственного воздействия на митохондрии (при высоких концентрациях) так и не затрагивая целостность митохондрий (низкие концентрации).

7. Низкие дозы этопозида оказывают в основном эффект на ядерном уровне, стимулируя изменения, приводящие в конечном счете к выходу из ядра белкового фактора, взаимодействующего с митохондриями и вызывающего выход цитохрома с.

8. Ингибиторы энергетики митохондрий предотвращают межнуклеосомную фрагментацию ДНК в первичной культуре тимоцитов, не влияя на этот процесс в культуре клеток, что объясняется прежде всего различными механизмами обеспечивающими клетки энергией.

9. Ингибирование энергетики митохондрий в культуре клеток позволяет отделить характерные признаки апоптоза, связанные с плазматической мембраной (появление фосфатидилсерина на внешней стороне плазматической мембраны), от других признаков апоптоза

Диссертационная работа была выполнена при поддержке грантов Российского Фонда Фундаментальных Исследований, International Science Foundation (Фонд Сороса), European Science Foundation, Swedish Royal

Academy of Sciences.

V. Заключение.

Индукция неспецифической проницаемости митохондриалъной мембраны и ее последствия для клетки.

Индукция неспецифической проницаемости митохондриалъной мембраны вследствие открытия неселективной поры во внутренней мембране представляет собой событие, имеющее для митохондрий и клетки в целом весьма неблагоприятные последствия. Прежде всего, это связано с потерей митохондриями способности синтезировать АТР и аккумулировать ионы Са2+. Потеря митохондриальной мембраной барьерных свойств имеет следствием то, что митохондрии из органелл, синтезирующих АТР, превратятся в потребителей АТР. Это приведет к резкому падению содержания АТР в клетке, что вызовет дальнейший приток Са2+ в цитоплазму, и, в конечном итоге, некроз.

Как следует из приведенных данных, обилие факторов и соединений, индуцирующих повреждение митохондрий, не исключает наличия общих, либо частично совпадающих, звеньев этого процесса. Так окислительный стресс, лежащий в основе подавляющего большинства патологических ситуаций, вызывает повреждение мембраны митохондрий, инициируя перекисное окисление липидов. Вместе с тем, он может служить пусковым механизмом открытия поры, в частности, воздействуя на окислительно-восстановительное состояние пиридиновых нуклеотидов.

Следует, однако, с достаточной степенью осторожности трактовать данные о роли кислородных радикалов, основываясь лишь на способности антиоксидантов предотвращать повреждение митохондрий. Как показано в работе, действие широко используемого антиоксиданта, ВНТ, не связано с его антирадикальной активностью.

Образование свободных радикалов не является необходимым условием открытия поры. Открытие поры может наблюдаться и в анаэробных условиях, при поддержании мембранного потенциала за счет гидролиза АТР (Kuzminova et al, 1998). Окислительный стресс способствует открытию поры при наличии всех прочих необходимых условий, главное из которых - аккумуляция митохондриями ионов Са2+. В отсутствие ионов Са2+ открытия неспецифической поры не происходит. Повреждение митохондрий в случае активного накопления продуктов перекисного окисления, но в отсутствие кальциевой нагрузки, является скорее результатом накопления дефектов липидной фазы мембраны митохондрий, но не открытием поры.

Если накопление продуктов перекисного окисления липидов происходит в условиях кальциевой нагрузки, то вклад в повреждение митохондрий может вносить митохондриальная фосфолипаза А2. Индукция окислительного стресса и накопление продуктов перекисного окисления в мембране митохондрий благоприятствует активации этого фермента. Как следует из представленных данных, подавление фосфолипазы А2 способно предотвратить или отсрочить открытие поры. Накопление в митохондриальной мембране свободных жирных кислот вследствие активации фосфолипазы Аг не только вызывает снижение мембранного потенциала, что, по мнению Bernardi, способствует открытию поры, но и воздействует на состояние переносчика адениновых нуклетидов (Wojtczak and Wieckowski, 1999).

Как следует из результатов работы, в условиях, имитирующих состояние ишемии/реперфузии, при неконтролируемом накоплении продуктов перекисного окисления, вызванного высокими концентрациями органической гидроперекиси, основным повреждающим митохондрии фактором является не столько продукты перекисного окисления липидов, сколько последствия восстановления добавленной гидроперекиси. Известно, что восстановление перекисей митохондриями происходит за счет окисления пиридиновых нуклеотидов. По мнению Richter, присутствие ионов Ca" стимулирует гидролиз окисленных пиридиновых нуклеотидов, что является необходимым условием выхода ионов Са2+. Однако, как показано в представленной работе, несмотря на то, что ВНТ предотвращал открытие поры, он не влиял на активность НАО+-гликогидролазы, фермента, ответственного за гидролиз пиридиновых нуклеотидов. По-видимому, его действие обусловлено иным механизмом.

Следует отметить, что эксперименты Richter проводились в отсутствие неорганического фосфата, который, как известно, существенно стимулирует открытие поры в нагруженных ионами Са2т митохондриях. Поэтому считалось, что в отсутствие фосфата выход ионов Са2+ происходит из интактных митохондрий, а последующее их повреждение обусловлено циркуляцией ионов Са2+ через внутреннюю мембрану митохондрий. Неорганический фосфат стимулирует открытие поры, поэтому снижение содержания меченых пиридиновых нуклеотидов в митохондриях можно объяснить как их гидролизом, так и выходом из митохондрий в процессе открытия поры.

Предположение Richter et al (1990) о ключевой роли гидролиза пиридиновых нуклеотидов основывалось на локализации ЫАО'-гликогидролазы в матриксе митохондрий. Однако, последующие эксперименты показали, что по всей вероятности, этот фермент отсутствует в матриксе митохондрий, а связан либо с внешней мембраной, либо локализован в межмембранном пространстве митохондрий (Boyer and Moldeus, 1993 ). По данным Di Lisa et al. (2001), несмотря на то, что 92% активности МАО+гликогидролазы локализовано в митохондриях, окисленные пиридиновые нуклетотиды становятся доступными действию фермента только после открытия поры. Тем не менее, независимо от того, где происходит последующий гидролиз окисленных пиридиновых нуклеотидов, открытие поры ведет к падению содержания пиридиновых нуклеотидов в клетке, что, несомненно, играет важную роль в гибели клеток в условии ишемии (Di Lisa et al., 2001), и, по всей вероятности, при апоптозе (Petit et al, 2001).

Накопление в клетках продуктов перекисного окисления липидов, знаменует собой выход свободно-радикальных реакций из под контроля защитных систем клетки. В последнее время все больше внимания уделяется физиологическим аспектам действия активных форм кислорода, участие которых в качестве сигнальных молекул не вызывает сомнений. В этом отношении показательны результаты представленной работы, демонстрирующие способность моноокиси азота (NO') как вызывать гибель клеток, так и регулировать физиологические ответы клетки, модулируя функциональную активность митохондрий.

Известно, что NO' способно инициировать апоптоз. Индукция сопровождается падением мембранного потенциала, что может блокироваться циклоспорином A (Vieira et al, 2001). Pia основании этого, авторами делается вывод об открытии поры в митохондриальной мембране как о ведущем событии в инициации апоптоза. Поскольку NO' способна связываться с цитохромоксидазой, снижение потенциала, скорее, может быть результатом подавления активности дыхательной цепи, а не индукции открытия поры. Что касается способности циклоспорина А предотвращать падение мембранного потенциала, то, как показано в представленной работе, подобное возможно и в условиях ингибирования дыхания. Добавка малоната, ингибитора сукцинат дегидрогеназы, к нагруженным ионами Са2+ митохондриям вызывала снижение мембранного потенциала и выход накопленных ионов кальция, как это происходит при открытии поры. Однако, при этом не наблюдалось набухания органелл, наиболее характерного признака открытия поры. Тем не менее, ингибитор поры циклоспорин существенно подавлял снижении мембранного потенциала и полностью предотвращал потерю митохондриями ионов Са2+.

Вопрос о воздействии на митохондрии одновременно нескольких факторов, индуцирующих неспецифическую проницаемость мембраны, по-прежнему является актуальным и требует дополнительных исследований. Роль фосфолипазы Аг в повреждении митохондрий становится более весомой в условиях, когда открытие поры затруднено, к примеру, в отсутствие неорганического фосфата. В подобных условиях, как показано в работе, длительное удерживание ионов Са2+ ведет к активации фосфолипазы и накоплению свободных жирных кислот, что стимулирует выход ионов Са2г.

В особенности это касается ситуации, когда открытие поры рассматривается в качестве ключевого события апоптоза. В клетках культуры митохондрии достаточно устойчивы к кальциевой нагрузке, необходимому компоненту открытия поры, поэтому факторам, повышающим чувствительность поры к ионам Са2+, следует уделять особое внимание. Не исключено, что различные индукторы апоптоза способны воздействовать на митохондрии в клетках, модифицируя процессы, облегчающие индукцию неспецифической проницаемости мембраны, к примеру, вызывая окислительный стресс, либо активируя митохондриальные фосфолипазы. Как было показано (^соггапо е( а!., 2001), предотвращение клеточной гибели, вызываемой фактором некроза опухолей, действительно, может быть предотвращено совместным действием циклоспорина А и аристолохиевой кислотой, ингибитора фосфолипазы Аг.

Механизмы выхода цитохрома с

Ключевым событием апоптоза является выход из межмембранного пространства ряда проапоптозных белков, в том числе цитохрома с. Доступность цитохрома с определяется целостностью внешней митохондриальной мембраны. При открытии поры выход цитохрома с более выражен при инкубации митохондрий в КС1, что объясняется его слабым взаимодействием с мембраной в растворах с высокой ионной силой. Участие митохондриальной поры в выходе цитохрома с отмечается и в случае, когда кальциевая нагрузка недостаточна для индукции высокоамплитудного набухания и других характерных признаков неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны. В этом случае

2+ отсутствие падения мембранного потенциала либо выхода ионов Са в окружающую среду объясняется тем, что вследствие гетерогенности митохондриальной популяции (Beatrice et al. 1982) открытие поры происходит лишь в определенной суб-популяции митохондрий. Поэтому ионы Са (или ТРР4, если мембранный потенциал определяется по распределению этого катиона между матриксом митохондрий и окружающей средой), выходящие из этой субпопуляции будут аккумулироваться интактными митохондриями, сохраняющими высокий мембранный потенциал. Принимая это во внимание, при оценке выхода цитохрома с следует достаточно осторожно подходить к результатам, полученным в «бескальциевых» условиях, поскольку всегда есть вероятность открытия поры в отдельных митохондриях даже примесным количеством кальция в инкубационных средах.

Открытие поры во внутренней мембране митохондрий и сопровождающее это событие набухание органелл приводит к разрыву внешней митохондриальной мембраны и выходу из межмембранного пространства ряда белков, в том числе и цитохрома с. При этом митохондрии теряют целый ряд метаболитов и ферментов, локализованных в матриксе, компонентов дыхательной цепи, в частности, пиридиновых нуклеотидов. Учитывая деструктивные изменения в митохондриях, наступающие в процессе открытия поры, в ряде работ авторы высказывают сомнение в ключевой роли индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны в инициации апоптоза (Cossarizza et al., 1994; Cervinka et al., 1999). Согласно их данным, на ранних стадиях апоптоза митохондрии сохраняют свою структурную целостность, а снижение мембранного потенциала следует за началом фрагментации ДНК (Salvioli et al., 1997).

Можно, конечно, предположить, что под действием апоптозного стимула индукция неспецифической проницаемости происходит не во всех митохондриях одновременно, а лишь в определенной суб-популяции. Как следует из приведенных данных, в условиях ограниченной кальциевой нагрузки, выход цитохрома с, действительно, происходит лишь из субпопуляции митохондрий.

Подобное явление Cromton назвал "ограниченной" пермеабилизацией (Crompton, 2000), что подразумевает индукцию неспецифической проницаемости в ограниченной популяции митохондрий.

Подобная ситуация может иметь место и в клетке. Митохондрии в клетке достаточно гетерогенны. Эта гетерогенность может быть обусловлена, в частности, их близостью к кальциевым депо, например к мембранам эндоплазматического ретикулума. Значительное количество экспериментальных данных свидетельствует о том, что ответ митохондрий на изменение концентрации ионов Са2+ при распространении сигнала зависит от их локализации в клетке, в частности, от близости к эндоплазматическому ретикулуму (Rizutto el al., 1998, Duchen, 2000). Митохондрии, локализованные в непосредственной близости от каналов эндоплазматического ретикулума, подвергаются воздействию более высоких концентраций ионов Са2+ по

2+ сравнению с расположенными вдали от кальциевых депо. Накопление ионов Са сделает такие митохондрии более восприимчивыми к индукции неспецифической проницаемости митохондриальной мембраны. Если при этом остальные митохондрии сохраняют интактность, то это не вызовет существенного изменения содержания цитоплазматического АТР. Выходящий вследствие открытия поры Са2+ перераспределится между соседними митохондриями, а цитохром с включится в апоптозный процесс.

Хотя открытие поры изначально рассматривалось исследователями апоптоза в качестве основного механизма, ответственного за высвобождение цитохрома с, сравнительно недавно это убеждение подверглось пересмотру. Возрастающее количество экспериментальных данных свидетельствуют о том, что открытие поры является не единственным, а одним из механизмов, ответственных за выход цитохрома с из митохондрий. Альтернативой открытию поры является выход цитохрома с, стимулируемый про-апоптозными белками, в частности Вах. Данные, представленные в работе, показывают, что в зависимости от экспериментальных условий выход цитохрома с может осуществляться как посредством открытия неспецифической поры во внутренней мембране митохондрий, что ведет к разрыву внешней митохондриальной мембраны, так и при интактной внутренней мембране митохондрий, когда во внешней мембране образуются каналы/поры при участии про-апоптозных белков.

Согласно вышеприведенным данным, индуцируемый белком Вах выход цитохрома с из митохондрий можно разделить на зависимый и независимый от ионов Са2+. В первом случае высвобождение цитохрома с происходит вследствие стимуляции Вах открытия поры во внутренней мембране митохондрий, нагруженных ионами Са~ . Вах предположительно взаимодействует с белком VDAC, стимулируя тем самым индукцию неспецифической проницаемости и набухание органелл. Подобный механизм будет иметь место, если воздействие апоптозного стимула связано с повышением концентрации ионов Са2+ в цитоплазме.

2+

Механизмы, ответственные за выход цитохрома с в отсутствие ионов Са , не столь хорошо изучены. Предполагается, что олигомерный Вах способен встраиваться во внешнюю митохондриальную мембрану, образуя канал, достаточный для выхода цитохрома с из межмембранного пространства. Действительно, согласно приведенным в работе результатам, мономерная форма Вах не способна стимулировать выход цитохрома с из изолированных митохондрий, что согласуется с данными литературы, указывающими на необходимость олигомеризации Вах. Оценка выхода из митохондрий белков, локализованных в различных отделах митохондрий, проведенная в представленной работе, показывает, что выход цитохрома с, стимулируемый Вах, оставляет внутреннюю митохондриальную мембрану интактной, функциональная активность митохондрий не претерпевает изменений. Соответственно, это не будет сказываться на внутриклеточном содержании АТР, что позволяет митохондриям довести апоптоз до завершения.

При анализе обусловленного проаптопзными белками выхода цитохрома с из митохондрий, следует иметь в виду, что в отсутствие в инкубационной среде EGTA (или ингибиторов поры) нельзя однозначно сказать, является ли выход цитохрома, вызываемый Вах, «специфическим», или же он опосредован индукцией неспецифической проницаемость митохондриальной мембраны, происходящей в ограниченной суб-популяции митохондрий. Не учитывая такую возможность, можно сделать неадекватные выводы. Так в работе Shimizu и Tsujimoto (Shimizu and Tsujimoto, 2000) авторами было показано подавление стимулируемого Вах выхода цитохрома с ингибиторами дыхательной цепи. Это позволило авторам сделать вывод о необходимости активного дыхания митохондрий для реализации выхода цитохрома с. Скорее всего, для выхода цитохрома с необходимо не столько активное дыхание само по себе, сколько поддерживаемый дыханием мембранный потенциал и аккумуляция ионов Са2+. По-видимому, в отсутствие хелаторов ионов Са2+ выход цитохрома с осуществлялся посредством открытия поры в субпопуляции митохондрий,

2+ чувствительной к примесному содержанию ионов Са . Ингибиторы дыхательной цепи (антимицин, KCN), а также разобщитель СССР, сбрасывали мембранный потенциал митохондрий, вследствие чего накопление Са2+ становилось невозможным и открытия поры не происходило. В результате выхода цитохрома с на наблюдалось.

Можно высказать предположение, что механизм выхода цитохрома с в каждом конкретном случае будет определяться как типом клетки, так и стимулом, индуцирующим апоптоз. Примером различных путей индукции выхода цитохрома с из митохондрий служит рассмотренный в работе выход цитохрома с из митохондрий при апоптозе, вызываемом этопозидом. Выход цитохрома с при апоптозе отмечен при действии самых различных специфических в отношении ДНК, равно как и неспецифических соединений. В настоящее время в литературе имеются различные мнения относительно механизмов, контролирующих выход цитохрома с из митохондрий при действии соединений, повреждающих ДНК. В частности, неизвестен сигнал, связывающий повреждение ДНК с изменениями в митохондриях. Являются ли эти соединения действительно специфичными по отношению к ДНК, либо их эффект частично обусловлен непосредственным действием на митохондрии? Какие из этих проявлений обусловлены активацией каспаз?

В отличие от апоптоза, опосредованного рецептором на плазматической мембране, когда после активации каспазы-8 происходит расщепление про-апоптозного белка Bid, который, встраиваясь в митохондриальную мембрану, инициирует выход цитохрома с, при действии соединений, повреждающих ДНК, выход цитохрома с рассматривается как событие, независящее от активации каспаз. Поэтому данные по подавлению апоптоза ингибитором Z-VAD.fmk обычно трактуются как следствие подавление активности каспазы 9, активируемой в апоптосомном комплексе. В представленном исследовании было использовано две концентрации этопозида. Это позволило показать, что Z-VAD.fmk способен эффективно блокировать выход цитохрома с на ранних стадиях апоптоза в ответ на низкую (10 |д,М) но не высокую (50 цМ) дозу этопозида. Использование реконструированной бесклеточной системы продемонстрировало, что выход цитохрома с при использовании низких концентраций этопозида зависит от присутствия ядер. Более того, использование митохондрий в качестве модельной системы показало возможность непосредственного воздействия этопозида на митохондрии (в основном, в дозах выше 25 |дМ). Взятые вместе, данные позволяют выделить два различных пути для индуцируемого этопозидом выхода цитохрома с из митохондрий в зависимости от используемой дозы.

Низкие дозы этопозида в основном оказывают эффект на ядерном уровне, стимулируя изменения, приводящие, в конечном счете, к выходу из ядра белкового фактора, взаимодействующего с митохондриями и вызывающего выход цитохрома с. Поскольку этот эффект подавлялся как ингибитором каспаз z-VAD.fmk, взаимодействующим со всеми каспазами, так и специфическим ингибитором каспазы-2, Z-VDVAD.fmk, было бы заманчиво предположить, что выход цитохрома с из митохондрий в ответ на низкие дозы этопозида требует активации каспазы 2. Подобное предположение подкрепляется данными о ранней активации каспазы 2 во время апоптоза (Harvey et al., 1997), а также данными о ее ядерной локализации (Butt et al., 1998; Zhivotovsky et al, 1999).

Как следует из приведенных в работе данных, механизм выхода цитохрома с может определяться не только типом клеток или природой апоптозного стимула, но и концентрацией действующего агента. Одно и то же соединение способно вызывать как специфический выход цитохрома с, так и выход, сопровождающийся повреждением митохондрий, в случае непосредственного воздействия на органеллы высоких концентраций агента. Подобный вывод весьма важен, поскольку в ряде случаев индукция апоптоза может быть вызвана прямым повреждением митохондрий при действии нефизиологически высоких концентраций апоптозного стимула, что может скрыть тонкую ферментативную регуляцию этого процесса.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Гогвадзе, Владимир Георгиевич, 2001 год

1. Белецкий И.П., Уманский С.Р. (1987). Природа разрывов, индуцируемых в ДНК на ранних этапах интерфазной гибели клеток. Радиобилогия 27:227-230.

2. Брагин Е.О., Дергунов А.Д., Неугодова Г.Л., Сороковой В.И., Владимиров Ю.А. (1977) Роль фосфолипазы А2 в аноксическом провреждении энергозависимых функций митохондрий. Вопр. Мед. Хим. 23:673-676.

3. Куцый М.П., Кузнецова Е.А., Газиев А.И. (1999) Участие протеаз в апоптозе Биохимия 64:149-163.

4. Марзоев А.И., Андрюгценко А.П., Владимиров Ю.А.(1983) Тиреоидные гормоны и фосфолипазная активность в митохондриях печени крыс. Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 96, 45-46.

5. Медведев Б.И., Евтодиенко Ю.В., Кузин A.M. (1974) Влияние ионизирующей радиации на ионную проницаемость митохондриальной мембраны. Доклады Акадмии Наук СССР 217:468-469.

6. Никонова Л.В., Селищева И.М., Уманский С.Р. (1982) Механизм деградации хроматина в тимоцитах облученных крыс. Радиобиология 22:441-445.

7. Никонова Л.В. Наназашвили М.Г., Кротова К.Е., Назарова Л.Ф., Рабая H.A., Прусакова О.В., Белецкий И.П. (1998) Сравнительное исследование Ca/Mg-зависимых нуклеаз из тимуса млекопитающих. Изв. Акад. Наук, Сер. Биолог., 2:180-186.

8. Северина Е.П. Евтодиенко Ю.В. (1981) Исследование локализации фосфолипазы А2 в митохондриях. Биохимия 46:1199-1201.

9. Сергеев П.В., Федоров В.К., Гукасов В.М., Владимиров Ю.А. (1977) Двавозможных механизма действия тироксина на набухание митохондрий. Бюлл. Эксп. Биол. Мед. 83: 680-683.

10. Хансон К.П. (1979) Молекулярные механизмы интерфазной гибели клеток. Радиобиология 19: 814-820.

11. Adams V, Bosch W, Schlegel J, Wallimann T, Brdiczka D. (1989) Furthercharacterization of contact sites from mitochondria of different tissues: topology of peripheral kinases. Biochim Biophys Acta., 981:213-225.

12. Adebodun F, Scott CE, Cunningham C, Bustamante PM, Bradshaw A, Ping L, Williams KR. (2000) Elevated levels of Ca(II) modulate the activity and inhibition of serine proteases: implication in the mechanism of apoptosis. Cell Biochem Funct., 18:59-66.

13. Afanas'ev VN, Korol BA, Mantsygin YuA, Nelipovich PA, Pechatnikov VA, Umansky SR (1986) Flow cytometry and biochemical analysis of DNA degradation characteristic of two types of cell death. FEBS Lett., 194:347-350.

14. Akao Y, Otsuki Y, Kataoka S, Ito Y, Tsujimoto Y. (1994) Multiple subcellular localization of bcl-2: detection in nuclear outer membrane, endoplasmic reticulum membrane, and mitochondrial membranes. Cancer Res., 54:24682471.

15. Akerman, K.E. (1978) Effect of pH and Ca2+ on the retention of Ca2+ by rat liver mitochondria. Arch. Biochem. Biophys., 189:256-262.

16. Albrecht H, Tschopp J, Jongeneel CV. (1994) Bcl-2 protects from oxidative damage and apoptotic cell death without interfering with activation of NF-kappa B by TNF. FEBS Lett., 351:45-48.

17. Al-Nasser I., Crompton M. (1986) The reversible Ca -induced permeabilization oi rat liver mitochondria. Biochem J., 239:19-29.

18. Alnemri, E.S., Livingston, D.J., Nicholson, D.W., Salvesen, G., Thornberry, N.A., Wong, W.W. and Yuan, J. (1996). Human ICE/CED-3 protease nomenclature. Cell, 87:171

19. Andreyev A, Fiskum G. (1999) Calcium induced release of mitochondrial cytochrome c by different mechanisms selective for brain versus liver. Cell Death Differ., 6:825-832.

20. Angielski S, Roman I, Gmaj P, Novicka C. (1980) Effect of unsaturated fatty acids and monovalent cations on calcium efflux from kidney cortex mitochondria. Int. J. Biochem., 12:119-123.

21. Antonov VF, Petrov VV, Molnar AA, Predvoditelev DA, Ivanov AS. (1980) The appearance of single-ion channels in unmodified lipid bilayer membranes at the phase transition temperature. Nature, 283:585-586

22. Augustin W., Gellerich F., Wiswedel I., Evtodienko Y. Zinchenko V. (1979) Inhibition of cation efflux by antioxidants during oscillatory ion transport in mitochondria. FEBS Lett., 107:151-154.

23. Beaver JP, Waring P. (1994) Lack of correlation between early intracellular calcium ion rises and the onset of apoptosis in thymocytes. Imunol Cell Biol., 72:489499.

24. Beaver JP, Waring P. (1996) Cyclosporin A rescues thymocytes from apoptosis induced by very low concentrations of thapsigargin: effects on mitochondrial function. Exp Cell Res., 15:264-276.

25. Beckman JK, Borowitz SM, Burr IM. (1987) The role of phospholipase A activity in rat liver microsomal lipid peroxidation. J Biol Chem., 262:1479-1484.

26. Beletsky IP, Matyasova J, Nikonova LV, Skalka M, Umansky SR. (1989) On the role of Ca, Mg-dependent nuclease in the postirradiation degradation of chromatin in lymphoid tissues. Gen Physiol Biophys., 8:381 -398

27. Bellomo G, Jewell SA, Orrenius S. (1982) The metabolism of menadione impairs the ability of rat liver mitochondria to take up and retain calcium. J.Biol.Chem., 257:11558-11562.

28. Bellomo G, Jewell SA, Thor H, Orrenius S. (1982) Regulation of intracellular calcium compartmentation: studies with isolated hepatocytes and t-butyl hydroperoxide. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 79:6842-6846.

29. Bellomo G, Orrenius S. (1985) Altered thiol and calcium homeostasis in oxidative hepatocellular injury. Hepatology, 5:876-882.

30. Bellomo G, Thor H, Orrenius S. (1984) Increase in cytosolic Ca2+ concentration during t-butyl hydroperoxide metabolism by isolated hepatocytes involves NADPH oxidation and mobilization of intracellular Ca2+ stores. FEBS Lett., 168:38-42.

31. Bernard! P, Broekemeier KM, Pfeiffer DR. (1994) Recent progress on regulation of the mitochondrial permeability transition pore; a cyclosporin-sensitive pore in the inner mitochondrial membrane. J Bioenerg Biomembr., 26:509-517

32. Bernardi P. (1992) Modulation of the mitochondrial cyclosporin A-sensitive permeability transition pore by the proton electrochemical gradient. Evidence that the pore can be opened by membrane depolarization. J Biol. Chem., 267:8834-8839

33. Berridge M.J. (1993) Inositol triphosphate and Ca signaling. Nature, 361, 315-325.

34. Beutner G., Ruck A., Riede B. Welte W., Brdiczka D. (1996) Complexes between kinases, mitochondrial porin and adenylate translocator in rat brain resemble the permeability transition pore. FEBS Lett. 336, 189-195.

35. Bielawska AE, Shapiro JP, Jiang L, Melkonyan HS, Piot C, Wolfe CL, Tomei LD, Hannun YA, Umansky SR. (1997) Ceramide is involved in triggering ofcardiomyocyte apoptosis induced by ischemia and reperfusion. Am. J Pathol., 151:1257-1263

36. Bindoli A. (1988) Lipid peroxidation in mitochondria. Free Radic Biol Med., 5:247261

37. Bolli R (1991) Oxygen-derived free radicals and myocardial reperfusion injury: an overview. Cardiovasc. Drugs Ther. Suppl., 2:249-268.

38. Boobis A.R., Seddon C.E., Nsseri-Sina P., Davies D.S. (1990) Evidence for a direct role of intracellular Ca2+ in paracetamol toxicity. Biochem. Pharmacol., 39:1277-1281.

39. Boveris A, Chance B. (1973) The mitochondrial generation of hydrogen peroxide. General properties and effect of hyperbaric oxygen. Biochem. J., 134:707-716.

40. Boyer CS, Moore GA, Moldeus P (1993) Submitochondrial localization of the NAD+ glycohydrolase. Implications for the role of pyridine nucleotide hydrolysis in mitochondrial calcium fluxes. J Biol. Chem., 268:4016-4020.

41. Bratton, S.B., Walker, G., Srinivasula, S.M., Sun, X.M., Butterworth, M., Alnemri, E.S. and Cohen, G.M. (2001). Recruitment, activation and retention of caspases-9 and -3 by Apaf-1 apoptosome and associated XIAP complexes. EMBO J., 20:998-1009.

42. Braunwald E, Kloner RA. (1985) Myocardial reperfusion: a double-edged sword? J Clin Invest. 76:1713-1739.

43. Brenner C, Cadiou H, Vieira HL, Zamzami N, Marzo I, Xie Z, Leber B, Andrews D, Duclohier H, Reed JC and Kroemer G. (2000). Bcl-2 and Bax regulate the channel activity of the mitochondrial adenine nucleotide translocator. Oncogene, 19:329-336.

44. Broekemeier K.M., Klocek C.K. Pfeiffer D.R. (1998) Proton selective substate of the mitochondrial permeability transition pore: regulation by the redox state of the electron transport chain. Biochemistry. 37:13059-13065.

45. Broekemeier K.M., Pfeiffer D.R. (1989) Cyclosporin A-sensitive and insensitive mechanisms produce the permeability transition in mitochondria. Biochem. Biophys. Res. Commun., 63:561-566.

46. Brustovetsky N.N., Klingenberg M. (1996) Mitochondrial ADP/ATP carrier can be reversibly converted into a large channel by Ca2+. Biochemistry, 35, 8483-8488.

47. Bustamante J, Tovar-B A, Montero G, Boveris A. (1997) Early redox changes during rat thymocyte apoptosis. Arch. Biochem. Biophys., 337:121-128.

48. Butt AJ, Harvey NL, Parasivam G, Kumar S. (1998) Dimerization and autoprocessing of the Nedd2 (caspase-2) precursor requires both the prodomain and the carboxyl-terminal regions. J Biol. Chem., 273:6763-6768.

49. Buttke TM, Sandstrom PA. (1994) Oxidative stress as a mediator of apoptosis. Immunol. Today, 15:7-10.

50. Buttke TM, Sandstrom PA. (1995) Redox regulation of programmed cell death in lymphocytes. Free Radic Res. 22:389-397.

51. Campbell A.K. Intracellular Ca2+: Its universal role as regulator. John Willey, London, 1983.

52. Carafloi E. (1987) Intracellular calcium homeostasis. Ann. Rev. Biochem. 56:395-433

53. Carafoli E., Crompton. (1978) The regulation of intracellular calcium by mitochondria. Ann. NY Acad. Sci. 307:269-289.

54. Carbonera D., Azzone G.F. (1988) Permeability of inner mitochondrial membrane and oxidative stress. Biochim. Biophys. Acta, 943:245-255.

55. Castedo, M., Hirsch, T., Susin, S. A., Zamzami, N., Marchetti, P., Macho, A., and Kroemer, G. (1996) Sequential acquisition of mitochondrial and plasma membrane alterations during early lymphocyte apoptosis J. Immunol., 157:512521.

56. Catisti R, Vercesi AE (1999) The participation of pyridine nucleotides redox state and reactive oxygen in the fatty acid-induced permeability transition in rat liver mitochondria. FEBS Lett., 464:97-101.

57. Cervinka M, Bereiter-Hahn J, Peychl J, Rudolf E, Cervinkova Z. (1999) The role of mitochondria in apoptosis induced in vitro. Gen. Physiol. Biophys., 8:33-40.

58. Chakraborti S, Gurtner GH, Michael JR. (1989) Oxidant-mediated activation of phospholipase A2 in pulmonary endothelium. Am. J Physiol., 257:L430-437.

59. Chakraborti S, Michael JR, Gurtner GH, Ghosh SS, Dutta G, Merker A. (1993) Role of a membrane-associated serine esterase in the oxidant activation of phospholipase A2 by t-butyl hydroperoxide. Biochem. J., 292:585-589.

60. Chance B., Sies H., Boveris A. (1979) Hydroperoxide metabolism in mammalian organs. Physiol. Rev., 59 527-605.

61. Chang H.Y. and Yang X. (2000). Proteases for cell suicide: functions and regulation of caspases. Microbiol. Mol. Biol. Rev., 64:821-846.

62. Cheng EH, Kirsch DG, Clem RJ, Ravi R, Kastan MB, Bedi A, Ueno K, Hardwick JM. (1997) Conversion of Bcl-2 to a Bax-like death effector by caspases. Science, 278:1966-1968.

63. Chernyak BV, Bernardi P. (1996) The mitochondrial permeability transition pore is modulated by oxidative agents through both pyridine nucleotides and glutathione at two separate sites. Eur. J Biochem., 238:623-630.

64. Cocco RE, Ucker DS. (2001) Distinct modes of macrophage recognition for apoptotic and necrotic cells are not specified exclusively by phosphatidylserine exposure. Mol. Biol. Cell, 12:919-930.

65. Cohen G.M. (1997). Caspases: the executioners of apoptosis. Biochem. J, 326:1-16.

66. Cohen GM, Sun XM, Fearnhead H, MacFarlane M, Brown DG, Snowden RT, Dinsdale D. (1994) Formation of large molecular weight fragments of DNA is a key committed step of apoptosis in thymocytes. J Immunol., 53:507-516.

67. Cohen GM, Sun XM, Snowden RT, Dinsdale D, Skilleter DN. (1992) Key morphological features of apoptosis may occur in the absence of internucleosomal DNA fragmentation. Biochem. J, 286:331-334.

68. Costantini P, Chernyak BV, Petronilli V, Bernardi P (1996) Modulation of the mitochondrial permeability transition pore by pyridine nucleotides and dithiol oxidation at two separate sites. J Biol. Chem., 271:6746-6751.

69. Cotterill L.A., Gower J.D., Fuller B.J., Green C.J. (1989) oxidative damage to kidney membranes during cold ischemia: Evidence of a role for calcium. Transplantation, 48:745-751.

70. Counis MF, Torriglia A. (2000) DNases and apoptosis. Biochem. Cell Biol., 78:405414

71. Crompton M (2000) Mitochondrial intermembrane junctional complexes and their role in cell death. J Physiol., 529:11-21.

72. Crompton M. (1985) The regulation of mitochondrial calcium transport in heart. Curr. Top. Membr. Trans. 25 231-276.

73. Crompton M. (2000) Bax, Bid and the permeabilization of the mitochondrial outer membrane in apoptosis. Curr. Opin. Cell Biol., 12:414-419.

74. Crompton M. (1999) The mitochondrial permeability transition pore and its role in cell death. Biochem. J. 341: 233-249.

75. Crompton M., Ellinger H., Costi A. (1988) Inhibition by cyclosporin A of a Ca2+-dependent pore in heart mitochondria activated by inorganic phosphate and oxidative stress. Biochem. J. 255:357-360.

76. Crompton M., Heid I (1978) The cycling of calcium, sodium, and protons across the inner membrane of cardiac mitochondria Eur. J.Biochem. 91:599-608.

77. Daugas E, Susin SA, Zamzami N, Ferri KF, Irinopoulou T, Larochette N, Prevost MC, Leber B, Andrews D, Penninger J, Kroemer G. (2000) Mitochondrio-nuclear translocation of AIF in apoptosis and necrosis. FASEB J. 14:729-739.

78. Denton RM, McCormack JG. (1980) On the role of the calcium transport cycle in heart and other mammalian mitochondria. FEBS Lett., 119:1-8

79. Desagher S, Osen-Sand A, Nichols A, Eskes R, Montessuit S, Lauper S, Maundrell K, Antonsson B, Martinou JC. (1999) Bid-induced conformational change of Bax is responsible for mitochondrial cytochrome c release during apoptosis. J Cell Biol. 144:891-901.

80. Deveraux QL, Reed J.C., (1999). IAP family proteins-suppressors of apoptosis. Genes Dev., 13:239-252.

81. Diaz C, Schroit AJ. 1996 Role of translocases in the generation of phosphatidylserine asymmetry. J Membr. Biol., 151:1-9.

82. Dillon SR, Constantinescu A, Schlissel MS. (2001) Annexin V binds to positively selected B cells. J Immunol. 166:58-71.

83. Dobretsov G.E., Borschevskaya T.A., Petrov V.A., Vladimirov Yu.A. (1977) The increase of phospholipid bilayer rigidity after lipid peroxidation. FEBS Lett. 84, 125-128.

84. Dong, Z., Saikumar, P., Weinberg, J.M. and Venkatachalam, M.A., (1997). Internucleosomal DNA cleavage triggered by plasma membrane damage during necrotic cell death. Involvement of serine but not cysteine proteases. Am. J. Pathol., 151:1205-1213.

85. Doran E, Halestrap AP. (2000) Cytochrome c release from isolated rat liver mitochondria can occur independently of outer-membrane rupture: possible role of contact sites. Biochem J, 348:343-350.

86. Du, C., Fang, M., Li, Y., Li, L. and Wang, X. (2000). Smac, a mitochondrial protein that promotes cytochrome c-dependent caspase activation by elimination IAP inhibition. Cell, 102:33-42.

87. Dubinsky, W.P., Cockrell, R.S. (1975) Ca2+ transport across plasma and mitochondrial membranes of isolated hepatocytes. FEBS Lett. 59:39-43.

88. Duchen MR, Leyssens A, Crompton M. (1998) Transient mitochondrial depolarizations reflect focal sarcoplasmic reticular calcium release in single rat cardiomyocytes. J Cell Biol. 142:975-988.

89. Duchen MR. (2000) Mitochondria and Ca(2+)in cell physiology and pathophysiology Cell Calcium 28:339-348

90. Earnshaw W.C. (1995) Nuclear changes in apoptosis. Curr. Opin. Cell Biol., 7:337343.

91. Earnshaw WC, Martins LM Kaufmann S.H. (1999) Mammalian caspases: structure, activation, substrates, and functions during apoptosis. Annu. Rev. Biochem. 68, 383-424.

92. Ekert PG, Si Ike J, Vaux DL (1999) Caspase inhibitors. Cell Death Diff. 6:1081-1086.

93. Ellis HM, Horvitz HR. (1986) Genetic control of programmed cell death in the nematode C. elegans. Cell. 44:817-829.

94. Ellis RE, Yuan JY, Horvitz HR. (1991)Mechanisms and functions of cell death. Annu Rev Cell Biol. 7:663-698.

95. Enari M, Hug H, Hayakawa M, Ito F, Nishimura Y, Nagata S. (1996) Different apoptotic pathways mediated by Fas and the tumor-necrosis-factor receptor. Cytosolic phospholipase A2 is not involved in Fas-mediated apoptosis. Eur J Biochem. 236:533-538.

96. Enari M, Sakahira H, Yokoyama H, Okawa K, Iwamatsu A., Nagata S. (1998). A caspase-activated DNase that degrades DNA during apoptosis, and its inhibitor ICAD. Nature, 391:43-50.

97. Eskes R, Desagher S, Antonsson B, Martinou JC. (2000) Bid induces the oligomerization and insertion of Bax into the outer mitochondrial membrane. Mol Cell Biol. 20:929-935.

98. Evtodienko YuV, Kudzina LuY, Medvedev BI, Yurkov IS. (1997) Direct participation of phospholipids in transmembrane K+-transport. Membr Cell Biol 10:573-581.

99. Evtodienko YV. (2000) Sustained oscillations of transmembrane Ca2+ fluxes inmitochondria and their possible biological significance. Membr Cell Biol. 14:117.

100. Fadeel B, Orrenius S, Zhivotovsky B. (2000). The most unkindest cut of all: on the multiple roles of mammalian caspases. Leukemia 14:1514-1525.

101. Fadok VA, Bratton DL, Frasch SC, Warner ML, Henson PM. (1998) The role of phosphatidylserine in recognition of apoptotic cells by phagocytes. Cell Death Differ. 5:551-562.

102. Fadok VA, Voelker DR, Campbell PA, Cohen JJ, Bratton DL, Henson PM. (1992) Exposure of phosphatidylserine on the surface of apoptotic lymphocytes triggers specific recognition and removal by macrophages. J Immunol. 148:2207-2216.

103. Farber JL (1990) The role of calcium in lethal cell injury. Chem. Res. Toxicol. 3:503508.

104. Finucane DM, Bossy-Wetzel E, Waterhouse NJ, Cotter TG, Green DR. (1999) Bax-induced caspase activation and apoptosis via cytochrome c release from mitochondria is inhibitable by Bcl-xL. J Biol Chem 274:2225-2233.

105. Fiskum G, Lehninger A. (1979) Regulated release of Ca2+ from respiring mitochondria by Ca2+/2H+ antiport. J. Biol. Chem. 254:6236-6239

106. Gardner AM, Xu FH, Fady C, Jacoby FJ, Duffey DC, Tu Y, Lichtenstein A. (1997) Apoptotic vs. nonapoptotic cytotoxicity induced by hydrogen peroxide. Free Radie Biol Med.;22:73-83.

107. Gilbert DL. (1994) Keeping reactive oxygen species (ROS) in their proper place. Ann N YAcadSci. 738:1-7.

108. Gissel H, Clausen T. (2001) Excitation-induced Ca2+ influx and skeletal muscle cell damage. Acta Physiol. Scand., 171:327-34.

109. Glaser KB, Mobilio D, Chang JY, Senko N. (1993) Phospholipase A2 enzymes: regulation and inhibition. Trends Pharmacol. Sci., 14:92-98.

110. Gores G.J., Herman B., Lemasters J.J. (1990) Plasma membrane bleb formation and rupture: a common feature of hepatocellular injury. Hepatologv 11:690-698.

111. Gross A, McDonnell JM, Korsmeyer SJ. (1999) BCL-2 family members and the mitochondria in apoptosis. Genes Dev. 13:1899-1911.

112. Grossmann J, Mohr S, Lapentina EG, Fiocchi C, Levine AD (1998) Sequential and rapid activation of select caspases during apoptosis of normal intestinal epithelial cells. Am. J. Physiol. 274:G1117-1124.

113. Gunter TE, Pfeiffer DR Mechanisms by which mitochondria transport calcium. (1990) Am. J. Physiol. 258:C755-C786.

114. Gylkhandanyan AV, Evtodienko YV, Zhabotinsky AM, Kondrashova MN. (1976)

115. Continuous Sr2+-induced oscillations of the ionic fluxes in mitochondria. FEBS Lett. 66:44-47.

116. Hackenbrock C.R. (1968) Chemical and physical fixation of isolated mitochondria in low energy and high energy states. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 61:598-605.

117. Hackenbrock C.R. Caplan A.I. (1969) Ion-induced ultrastructural transformations in isolated mitochondria. The energized uptake of calcium. J. Cell Biol. 42:221234.

118. Hakansson A, Zhivotovsky B, Orrenius S, Sabharwal H, Svanborg C. (1995) Apoptosis induced by a human milk protein. Proc Natl Acad Sci U S A. 92:8064-8068.

119. Halestrap A.P. (1994) Interactions between oxidative stress and calcium overload on mitochondrial function, in: Mitochondria: DNA, Proteins and Disease (Darley-Usmar V., and Shapira A.H.V., eds) pp.113-142, Portland Press Ltd, London.

120. Halestrap A.P. Kerr P.M., Javadov S., Woodfield K.Y. (1998) Elucidating the molecular mechanism of the permeability transition pore and its role in reperfusion injury of the heart. Biochem. Biophys. Acta 1366:79-94.

121. Halestrap AP, Woodfield KY, Connern CP. (1997) Oxidative stress, thiol reagents, and membrane potential modulate the mitochondrial permeability transition by affecting nucleotide binding to the adenine nucleotide translocase. J Biol Chem 272:3346-3354.

122. Hampton MB, Orrenius S. (1997) Dual regulation of caspase activity by hydrogen peroxide: implications for apoptosis. FEBS Lett. 414:552-556.

123. Hansford R.G. (1993) Dehydrogenase activation by Ca in cell and tissues. J.Bioenrg. Biomembrane. 23:823-854.

124. Harvey NL, Butt AJ, Kumar S. (1997) Functional activation of Nedd2/ICH-1 (caspase-2) is an early process in apoptosis. J Biol Chem. 272:13134-13139.

125. Haworth R.A., Hunter D.R. (1979) The Ca2+-induced membrane transition in mitochondria. II. Nature of the Ca2+ trigger site. Arch Biochem Biophys. 195:460-467.

126. Hellman B, Gylfe E, Grapengiesser E, Lund PE, Berts A. 1992 Cytoplasmic Ca2" oscillations in pancreatic beta-cells. Biochim Biophys Acta. 1113:295-305.

127. Hengartner MO, Horvitz HR. (1994) Activation of C. elegans cell death protein CED-9 by an amino-acid substitution in a domain conserved in Bcl-2. Nature. 369:318320.

128. Hengartner MO, Horvitz HR. (1994) Programmed cell death in Caenorhabditis elegans. Curr Opin Genet Dev. 4:581-586.

129. Hengartner MO, Horvitz HR. 1994 C. elegans cell survival gene ced-9 encodes afunctional homolog of the mammalian proto-oncogene bcl-2. Cell. Feb 76:665676.

130. Hengartner MO (2000). The biochemistry of apoptosis. Nature 407:770-776.

131. Hennet T, Bertoni G, Richter C, Peterhans E. (1993) Expression of BCL-2 protein enhances the survival of mouse fibrosarcoid cells in tumor necrosis factor-mediated cytotoxicity. Cancer Res. 53:1456-1460.

132. Hirata H, Takahashi A, Kobayashi S, Yonehara S, Sawai H, Okazaki T, Yamamoto K, Sasada M (1998). Caspases are activated in a branched protease cascade andcontrol distinct downstream processes in Fas-induced apoptosis. J. Exp. Med. 187:587-600.

133. Hirsch T, Marzo I, Kroemer G. (1997) Role of the mitochondrial permeability transition pore in apoptosis. Biosci Rep 17:67-76.

134. Hirt UA, Gantner F, Leist M. (2000) Phagocytosis of nonapoptotic cells dying by caspase-independent mechanisms. J Immunol. 164:6520-6529.

135. Hockenbery DM, Oltvai ZN, Yin XM, Milliman CL, Korsmeyer SJ. (1993) Bcl-2 functions in an antioxidant pathway to prevent apoptosis. Cell. 75:241-251.

136. Hu Y,. Benedict M A, Ding L Nunez G (1999) Role of cytochrome c and dATP/ATP hydrolysis in Apaf-1 -mediated caspase-9 activation and apoptosis. EMBO J. 18:3586-3595.

137. Hunter DR, Haworth RA (1979a) The Ca -induced membrane transition in mitochondria. I. The protective mechanisms. Arch Biochem Biophys. 195:453459.

138. Hunter DR, Haworth RA (1979b) The Ca2+-induced membrane transition in mitochondria. III. Transitional Ca2+ release. Arch Biochem Biophys. 195:468477.

139. Jewell S.A., Bellomo G., Thor H., Orrenius S., Smith M. (1982) Bleb formation in hepatocytes during drug metabolism is caused by disturbances in thiol and calcium ion homeostasis. Science 217:1257-1259.

140. Jiang X, Wang X. (2000) Cytochrome с promotes caspase-9 activation by inducing nucleotide binding to Apaf-1. J Biol Chem 275:31199-311203.

141. Johnson DE. (2000) Noncaspase proteases in apoptosis. Leukemia 14:1695-1703.

142. Jones DP, Thor H, Smith MT, Jewell SA, Orrenius S. (1983) Inhibition of ATP-dependent microsomal Ca2+ sequestration during oxidative stress and its prevention by glutathione. J Biol Chem. 258:6390-3.

143. Kaiser N, Edelman IS. (1978) Further studies on the role of calcium in glucocorticoid-induced lymphocytolysis. Endocrinology. 103:936-942.

144. Kaiser N, Edelman IS. (1977) Calcium dependence of glucocorticoid-induced lymphocytolysis. Proc Natl Acad Sci USA. 74:638-642.

145. Kappus A. (1985) Lipid peroxidation: mechanisms, analysis, enzymology and biological relevance. In: Sies H., ed., Oxidative stress. London: Academic Press Inc.

146. Kennedy NJ, Kataoka T, Tschopp J, Budd RC (1999) Caspase activation is required for T cell proliferation. J. Exp. Med. 190:1891-1895.

147. Kerr J.F., Wyllie A.H., Currie A.R. (1972) Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics. Br J Cancer. 26:239-257.

148. Kiefer MC, Brauer MJ, Powers VC, Wu JJ, Umansky SR, Tomei LD. Barr PJ. (1995) Modulation of apoptosis by the widely distributed Bcl-2 homologue Bak. Nature. 374:736-739.

149. Kim TH, Zhao Y, Barber MJ, Kuharsky DK, Yin XM. (2000) Bid-induced cytochrome с release is mediated by a pathway independent of mitochondrial permeability transition pore and Bax. J Biol Chem 275:39474-39481.

150. Kluck RM, Bossy-Wetzel E. Green DR, Newmeyer DD. (1997) The release of cytochrome с from mitochondria: a primary site for Bcl-2 regulation of apoptosis. Science. 275:1132-1136.

151. Kohler C, Hakansson A, Svanborg C, Orrenius S, Zhivotovsky B. (1999) Protease activation in apoptosis induced by MAL. Exp Cell Res. 249:260-268.

152. Köhler C, Gahm A, Noma T, Nakazawa A, Orrenius S, Zhivotovsky B. (1999) Release of adenylate kinase 2 from the mitochondrial intermembrane space during apoptosis. FEBS Lett. 447:10-12.

153. Komulainen H, Bondy SC (1988) Increased free Ca2+ by toxic agents: an index of potential neurotixicity? Trends Pharmacol. Sei. 9:154-156.

154. Kondrashova MN (1973) Biochemical cycle of excitation. In: Chance B. ed. Biological and Biochemical Oscillators. New York: Academic Press, pp. 373-387.

155. Korystov YN, Dobrovinskaya OR, Shaposhnikova VV, Eidus LK. (1996) Role of arachidonic acid metabolism in thymocyte apoptosis after irradiation. FEBS Lett 388:238-241.

156. Kroemer G, Petit P, Zamzami N, Vayssiere JL, Mignotte B. (1996) The biochemistry of programmed cell death. J Exp Med 183:1533-1544

157. Kroemer G, Reed JC (2000) Mitochondrial control of cell death. Nat Med. 6:513-519.

158. H, Zhu H, Xu CJ, Yuan J. (1998) Cleavage of BID by caspase 8 mediates the mitochondrial damage in the Fas pathway of apoptosis. Cell. 94:491-501.

159. X, Du L, Darzynkiewicz Z. (2000) During apoptosis of HL-60 and U-937 cells caspases are activated independently of dissipation of mitochondrial electrochemical potential. Exp Cell Res. 257:290-297.

160. Macho A, Hirsch T, Marzo 1, Marchetti P, Dallaporta B, Susin SA, Zamzami N, Kroemer G. (1997) Glutathione depletion is an early and calcium elevation is a late event of thymocyte apoptosis. J Immunol. 158:4612-4619.

161. Majno G., Joris I. (1995) Apoptosis, oncosis, and necrosis. An overview of cell death. Am J Pathol. 146:3-15.

162. Mancini M, Nicholson DW, Roy S, Thornberry NA, Peterson EP, Casciola-Rosen LA, Rosen A. (1998) The caspase-3 precursor has a cytosolic and mitochondrial distribution: Implications for apoptotic signaling. J. Cell Biol. 140:1485-1495.

163. Marshansky VN, Novgorodov SA, Yaguzhinsky LS. (1983) The role of lipid peroxidation in the induction of cation transport in rat liver mitochondria. The antioxidant effect of oligomycin and dicyclohexylcarbodiimide. FEBS Lett 158:27-30.

164. Martin SJ, Finucane DM, Amarante-Mendes GP, O'Brien GA, Green DR. (1996)

165. Phosphatidylserine Externalization during CD95-induced Apoptosis of Cells and Cytoplasts Requires ICE/CED-3 Protease Activity J. Biol. Chem. 271:28753-28756.

166. Marzo I, Brenner C, Zamzami N, Jtirgensmeier JM, Susin SA, Vieira HL, Prevost MC, Xie Z, Matsuyama S, Reed JC and Kroemer G. (1998). Bax and adenine nucleotide translocator cooperate in the mitochondrial control of apoptosis. Science 281:2027-2031.

167. Masini A, Trenti T, Ceccarelli D, Muscatello U. (1987) The effect of a ferric iron complex on isolated rat-liver mitochondria. III. Mechanistic aspects of iron-induced calcium efflux. Biochim Biophys Acta.891:150-156.

168. McCabe E.R. (1994) The microcompartmentation of energy metabolism at the outer mitochondrial membrane. J. Bioenerg. Biomembr. 26:317-321.

169. McConkey DJ, Nicotera P, Hartzell P, Bellomo G, Wyllie AH, Orrenius S. (1989) Glucocorticoids activate a suicide process in thymocytes through an elevation of cytosolic Ca concentration. Arch Biochem Biophys. 269:365-370.

170. McConkey DJ, Orrenius S. (1996) Signal transduction pathways in apoptosis. Stem Cells. Nov;14:619-631.

171. McConkey DJ, Orrenius S. (1997) The role of calcium in the regulation of apoptosis. Biochem Biophys Res Commun. 239:357-366.

172. McCormack J.G., Denton R.M. (1993) The role of mitochondrial Ca2+ in the regulation of oxidative phosphorylation in mammalian tissues. Biochem Soc. Trans. 21:793-799.

173. McCormack J.G., Halestrap A.N., Denton R.M. (1990) Role of calcium ionos in regulation of mamalian intramitochondrial metabolism. Physiol. Rev. 70:391425.

174. McEbery MW (1992) The mitochondrial benzodiazepine receptor: evidence for association with the voltage-dependent anion channel (VDAC). J Bioenerg Biomembr. 24:63-69.

175. Medvedev BI, Azarashvily TS, Evtodienko JuV, Luk'yanenko AI, Yagushinskij LS. (1982) Isolation of calcium-transporting lipid from the mitochondrial glycolipoprotein. Mol Cell Biochem 48:19-23

176. Meerson F.Z., Kagan V.E., Kozlov Yu.P., Belkina L.M., Arkhipenko Yu.Y. (1982) The role of lipid peroxidation in pathogenesis of ischemic damage and the antioxidant protection of the heart. Basic Res. Cardiol. 77:465-485.

177. Miao JY, Kaji K, Hayashi H, Araki S. (1997) Inhibitors of phospholipase promote apoptosis of human endothelial cells. J Biochem (Tokyo). 121:612-618.

178. Mironova GD, Lazareva A, Gateau-Roesch O, Tyynela J, Pavlov Y, Vanier M, Saris NE. (1997) Oscillating Ca2T-induced channel activity obtained in BLM with a mitochondrial membrane component. J Bioenerg Biomembr. 29:561-569.

179. Molkentin JD. (2001) Calcineurin, mitochondrial membrane potential, and cardiomyocyte apoptosis. Circ Res.88:1239-1246

180. Moore L., Chen T., Knapp H.R., Landon E.J. (1975) Energy dependent Ca2+ sequestration activity in liver microsomes. J.Biol. Chem. 250:4562-4569.

181. Moyle, J., and Mitchell, P. (1977) The lanthanide-sensitive calcium phosphate porter of rat liver mitochondria. FEBS Lett. 77:136-140.

182. Murphy KM, Ranganathan V, Farnsworth ML, Kavallaris M, Lock RB. (2000) Bcl-2 inhibits Bax translocation from cytosol to mitochondria during drug-induced apoptosis of human tumor cells. Cell Death Differ. 7:102- 111.

183. Nelipovich PA, Nikonova LV, Umansky SR. (1988) Inhibition of poly(ADP-ribose) polymerase as a possible reason for activation of Ca2+/Mg2+-dependent endonuclease in thymocytes of irradiated rats. Int J Radiat Biol Relat 53:749765.

184. Nicholls D.G., Crompton M. (1980) Mitochondrial calcium transport. FEBS Lett. 111:261-268.

185. Nichols, D.G. (1978) The regulation of extramitochondrial free calcium ion concentration by rat liver mitochondria. Biochem. J. 176:463-474.

186. Nicotera P, Leist M, Fava E, Berliocchi L, Volbracht C. (2000) Energy requirement for caspase activation and neuronal cell death. Brain Pathol. 10:276-282.

187. Nicotera P, Leist M, Ferrando-May E. (1998) Intracellular ATP, a switch in the decision between apoptosis and necrosis. Toxicol Lett. 102-103:139-142.

188. Nicotera P., Orrenius S., Nilsson T., Berggren P.O. (1989) An inositol 1,4,5-triphosphate-sensitive pool in liver nuclei. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:68586862.

189. Nikonova LV, Beletsky IP, Umansky SR. (1993) Properties of some nuclear nucleases of rat thymocytes and their changes in radiation-induced apoptosis. Eur J Biochem. 215:893-901.

190. Nikonova LV, Nelipovich PA, Umansky SR. (1982) The involvement of nuclear nucleases in rat thymocyte DNA degradation after gamma-irradiation. Biochim Biophys Acta. 699:281-289.

191. Nixon RA, Saito KI, Grynspan F, Griffin WR, Katayama S, Honda T, Mohan PS, Shea TB, Beermann M. (1994) Calcium-activated neutral proteinase (calpain) system in aging and Alzheimer's disease. Ann N Y Acad Sci 747:77-91

192. Nixon M, Chan SH. (1979) A simple and sensitive colorimetric method for thedetermination of long-chain free fatty acids in subcellular organelles. Anal Biochem. 97:403-409.

193. Novgorodov S.A. Gudz T.I. (1996) Permeability transition pore of the inner mitochondrial membrane can operate in two open states with different selectivities. J Bioenerg Biomembr. 28:139-146.

194. Novgorodov S.A., Gudz T.I., Milgrom Y.M., Brierley G.P. (1992) The permeability transition in heart mitochondria is regulated synergistically by ADP and cyclosporin A. Arch. Biochem. Biophys. 267:16274-16282.

195. Novgorodov SA, Gudz TI, Kushnareva YE, Eriksson O, Leikin YN. (1991) Effects of the membrane potential upon the Ca2+- and cumene hydroperoxide-induced permeabilization of the inner mitochondrial membrane. FEBS Lett 295:77-80.

196. Novgorodov SA, Gudz TI, Mohr YuE, Goncharenko EN, Yaguzhinsky LS. (1989) ATP-synthase complex: the mechanism of control of ion fluxes induced by cumene hydroperoxide in mitochondria. FEBS Lett 247:255-258.

197. Novgorodov SA, Kultayeva EV, Yaguzhinsky LS, Lemeshko VV. (1987) Ion permeability induction by the SH cross-linking reagents in rat liver mitochondria is inhibited by the free radical scavenger, butylhydroxytoluene. J Bioenerg Biomembr 19:191-202.

198. O'Gorman E, Beutner G, Dolder M, Koretsky AP, Brdiczka D, Wallimann T. (1997) The role of creatine kinase in inhibition of mitochondrial permeability transition. FEBS Lett. 414:253-257.

199. Ohkawa H, Ohishi N, Yagi K. (1979) Assay for lipid peroxides in animal tissues by thiobarbituric acid reaction. Anal Biochem. 95:351-358.

200. Oltvai ZN, Korsmeyer SJ. 1994 Checkpoints of dueling dimers foil death wishes. Cell. 79:189-192.

201. Oltvai ZN, Milliman CL, Korsmeyer SJ. (1993) Bcl-2 heterodimerizes in vivo with a conserved homolog, Bax, that accelerates programmed cell death. Cell. 74:609619.

202. Ormerod, M. G., Sun, X.-M., Snowden, R. T., Davies, R., Fearnhead, H., and Cohen,

203. G. M. (1993) Increased membrane permeability of apoptotic thymocytes: a flow cytometric study. Cytometry 14:595-602.

204. Orrenius S, Ormstad K., Thor H., Jewell S.A. (1983) Turnover and functions of glutathione studied with isolated hepatic and renal cells. Fed Proc. 42:31773188.

205. Pechatnikov VA, Afanasyev YN, Korol BA, Korneev VN, Rochev YuA, Umansky SR. (1986) Flow cytometry analysis of DNA degradation in thymocytes of gamma-irradiated or hydrocortisone treated rats. Gen Physiol Biophys. 5:273-284.

206. Penniston J.T. Plasma membrane Ca2+ ATPases as active Ca2+ pumprns. :in Cheung W.Y. (ed) Calcium and cell function, v.4, Academic Press, NY, 1983 p.99.

207. Perlman H, Georganas C, Pagliari LJ, Koch AE, Haines K 3rd, Pope RM. (2000) Bcl-2 expression in synovial fibroblasts is essential for maintaining mitochondrial homeostasis and cell viability. J Immunol. 164:5227-5235.

208. Permyakov EA, Berliner LJ. (2000) alpha-Lactalbumin: structure and function. FEBS Lett. 473:269-274.

209. Petit PX, Goubern M, Diolez P, Susin SA, Zamzami N, Kroemer G. (1998) Disruption of the outer mitochondrial membrane as a result of large amplitude swelling: the impact of irreversible permeability transition. FEBS Lett. 426:111-116.

210. Petit PX, Lecoeur H, Zorn E, Dauguet C, Mignotte B, Gougeon ML. (1995) Alterations in mitochondrial structure and function are early events of dexamethasone-induced thymocyte apoptosis. J Cell Biol. 130:157-167.

211. Petit PX, Susin SA, Zamzami N, Mignotte B, Kroemer G. (1996) Mitochondria and programmed cell death: back to the future. FEBS Lett. 396:7-13.

212. Petronilli V, Nicolli A, Costantini P, Colonna R, Bernardi P. (1994) Regulation of the permeability transition pore, a voltage-dependent mitochondrial channel inhibited by cyclosporin A. Biochim Biophys Acta 1187:255-259.

213. Pfeiffer D.R., Kaufman R.F., Lardy H.A. (1978) Effects of N-ethylmaleimide on the limited uptake of Ca2+, Mn2+, and Sr2+ by rat liver mitochondria. J Biol Chem. 253:4165-4171.

214. Piatt N, da Silva R, Gordon S (1998) Recognizing death: the phagocytosis of apoptotic cells. Trends Cell Biol. 8:365-372.

215. Porter, A.G. (1999) Protein translocation in apoptosis. Trends Cell Biol. 9:394-401.

216. Pressman B.C., Lardi, H.A. (1956) Effect of surface active agents on the latent ATPase of mitochondria. Biochem. Biophys. Acta 21:458-466.

217. Raff MC (1992) Social controls on cell survival and cell death. Nature 356:397-400.

218. Reed KC, Bygrave FL (1974) The inhibition of mitochondrial calcium transport by lanthanides and ruthenium red. Biochem. J. 140:143-155.

219. Reed JC, Jurgensmeier JM, Matsuyama S. (1998) Bcl-2 family proteins and mitochondria. Biochim Biophys Acta. 1366:127-137.

220. Richter C, Kass GE. (1991) Oxidative stress in mitochondria: its relationship to cellular Ca2+ homeostasis, cell death, proliferation, and differentiation. Chem Biol Interact. 77:1-23.

221. Richter C, Schlegel J. (1993) Mitochondrial calcium release induced by prooxidants. Toxicol Lett. 67:119-127.

222. Richter C, Schweizer M, Cossarizza A, Franceschi C. (1996) Control of apoptosis by the cellular ATP level. FEBS Lett. 378:107-110

223. Richter C. Pro-oxidants and mitochondrial Ca2+: their relationship to apoptosis and oncogenesis. FEBS Lett. 1993 325:104-107.

224. Riley WW Jr, Pfeiffer DR. (1986) The effect of Ca"+ and acyl coenzyme A:lysophospholipid acyltransferase inhibitors on permeability properties of the liver mitochondrial inner membrane. J Biol Chem. 261:14018-14024.

225. Rizzuto R, Brini M, Murgia M, Pozzan T. 1993 Microdomains with high Ca2r close to IP3-sensitive channels that are sensed by neighboring mitochondria. Science. 262:744-747.

226. Rizzuto R, Pinton P, Brini M, Chiesa A, Filippin L, Pozzan T. (1999) Mitochondria as biosensors of calcium microdomains. Cell Calcium. 26:193-199.

227. Rizzuto R, Pinton P, Carrington W, Fay FS, Fogarty KE, Lifshitz LM, Tuft RA, Pozzan T. (1998) Close contacts with the endoplasmic reticulum as determinants of mitochondrial Ca2+ responses. Science. 280:1763-1766.

228. Rodriguez J, Lazebnik Y. (1999). Caspase-9 and APAF-1 form an active holoenzyme. Genes Dev. 13:3179-3184.

229. Ruck A., Dolder M., Wallimann T., Brdiczka D. (1998) Reconstituted adenine nucleotide translocase forms a channel for small molecules comparable to the mitochondrial permeability transition pore. FEBS Lett. 426:97-101.

230. Rustenbeck I., Munster W., Lenzen S. (1996) Relation between accumulation of phospholipase A2 reaction products and Ca2+ release in isolated liver mitochondria. Biochim. Biophys. Acta 1304:129-138.

231. Saikumar P, Dong Z, Patel Y, Hall K, Hopfer U, Weinberg JM, Venkatachalam MA. (1998) Role of hypoxia-induced Bax translocation and cytochrome c release in reoxygenation injury. Oncogene. 17:3401-3415.

232. Sakahira H, Enari M, Nagata S. (1998) Cleavage of CAD inhibitor in CAD activation and DNA degradation during apoptosis. Nature 391:96-99.

233. Salvesen GS, Dixit VM. (1999) Caspase activation: the induced-proximity model. Proc Natl Acad Sci USA. 96:10964-10967.

234. Samali A, Cai J, Zhivotovsky B, Jones DP, Orrenius S. (1999a). Presence of a pre-apoptotic complex of pro-caspase-3, Hsp60 and HsplO in the mitochondrial fraction of Jurkat cells. EMBO J. 19:2040-2048.

235. Samali, A., Zhivotovsky, B., Jones, D., Nagata, S., and Orrenius, S. (1999b).

236. Apoptosis: Cell Death defined by caspase activation. Cell Death Differ.6:495-496.

237. Sato N, Iwata S, Nakamura K, Hori T, Mori K, Yodoi J. (1995) Thiol-mediated redox regulation of apoptosis. Possible roles of cellular thiols other than glutathione in T cell apoptosis. J Immunol. 154:3194-3203.

238. Savill J (1997) Recognition and phagocytosis of cells undergoing apoptosis. Br. Med. Bull. 53:491-508.

239. Sawa H, Kobayashi T, Mukai K, Zhang W, Shiku H. (2000) Bax overexpression enhances cytochrome c release from mitochondria and sensitizes KATOIII gastric cancer cells to chemotherapeutic agent-induced apoptosis. Int J Oncol. 16:745-749.

240. Scarlett JL, Murphy MP. (1997) Release of apoptogenic proteins from themitochondrial intermembrane space during the mitochondrial permeability transition. FEBS Lett 418:282-286.

241. Schanne FAX, Kane AB, Young EE, Farber JL (1979) Calcium dependence of toxic cell death: a final common pathway. Science 217:1257-1259.

242. Schmidt HH, Warner TD, Ishii K, Sheng H, Murad F. (1992) Insulin secretion from pancreatic B cells caused by L-arginine-derived nitrogen oxides. Science. 255:721-723.

243. Schneider F. (1981) Aerobic glycolysis of tumor cells. Naturwissenschaften 68:20-27.

244. Schonfeld P, Bohnensack R (1997) Fatty acid-promoted mitochondrial permeability transition by membrane depolarization and binding to the ADP/ATP carrier. FEBS Lett 420:167-170.

245. Scorrano L, Penzo D, Petronilli V, Pagano F, Bernardi P. (2001) Arachidonic acid causes cell death through the mitochondrial permeability transition. Implications for tumor necrosis factor-alpha aopototic signaling. J Biol Chem 276:12035-12040.

246. Seiliev AA, Zvonareva NB, Zhivotovsky BD, Hanson KP. (1992) Determination of some nuclear deoxyribonucleases in X-irradiated rat thymocytes. Radiat Environ Biophys. 31:123-132.

247. Sevanian A, Kim E. (1985) Phospholipase A2 dependent release of fatty acids from peroxidized membranes. Free Radic Biol Med 1:263-271.

248. Sevanian A, Wratten ML, McLeod LL, Kim E. (1988) Lipid peroxidation and phospholipase A2 activity in liposomes composed of unsaturated phospholipids: a structural basis for enzyme activation. Biochim Biophys Acta 961:316-327.

249. Shaposhnikova VV, Dobrovinskaya OR, Eidus LK, Korystov YN. (1994) Dependence of thymocyte apoptosis on protein kinase C and phospholipase A2. FEBS Lett. 348:317-319.

250. Shimizu S, Konishi A, Kodama T, Tsujimoto Y. (2000) BH4 domain of antiapoptotic Bcl-2 family members closes voltage-dependent anion channel and inhibits apoptotic mitochondrial changes and cell death. Proc Natl Acad Sci USA. 97:3100-3105.

251. Shimizu S, Matsuoka Y, Shinohara Y, Yoneda Y, Tsujimoto Y. (2001) Essential role of voltage-dependent anion channel in various forms of apoptosis in mammalian cells. J Cell Biol 152:237-250.

252. Shimizu S, Narita M, Tsujimoto Y (1999) Bcl-2 family proteins regulate the release of apoptogenic cytochrome c by the mitochondrial channel VDAC. Nature 399:483-487.

253. Shimizu S, Shinohara Y, Tsujimoto Y. (2000) Bax and Bcl-xL independently regulate apoptotic changes of yeast mitochondria that require VDAC but not adenine nucleotide translocator. Oncogene 19:4309-4318.

254. Siliprandi D, Rugolo M, Zoccarato F, Toninello A, Siliprandi N. (1979) Involvement of endogenous phospholipase A2 in Ca2+ and Mg2+ movement induced by inorganic phosphate and diamide in rat liver mitochondria. Biochem Biophys Res Commun. 88:388-394.

255. Siliprandi D, Toninello A, Zoccarato F, Rugolo M, Siliprandi N. (1975) Synergic action of calcium ions and diamide on mitochondrial swelling. Biochem Biophys Res Commun. 66:956-961.

256. Simpson PB, Russell JT. (1996) Mitochondria support inositol 1,4,5-trisphosphate-mediated Ca2+ waves in cultured oligodendrocytes. J Biol Chem. 271:3349333501.

257. Skulachev VP. (1999) Mitochondrial physiology and pathology; concepts of programmed death of organelles, cells and organisms. Mol Aspects Med 20:139-184

258. Skulachev VP. (1998). Uncoupling: new approaches to an old problem of bioenergetics. Biochim. Biophys. Acta 1363:100-124.

259. Skulachev VP. (1996). Why are mitochondria involved in apoptosis. Permeability transition pores and apoptosis as selective mechanisms to eliminate superoxide-producing mitochondria and cell. FEBS Lett. 397:7-10.

260. Sparagna GC, Gunter KK, Sheu SS, Gunter TE (1995) Mitochondrial calcium uptake from physiological-type pulses of calcium. A description of the rapid uptake mode. J. Biol. Chem. 270:27510-27515.

261. Stennicke HR, Salvesen GS. (2000) Caspases controlling intracellular signals by protease zymogen activation. Biochim. Biophys. Acta 1477:299-306.

262. Sun XM, MacFarlane M, Zhuang J, Wolf BB, Green DR, Cohen GM. (1999) Distinct caspase cascades are initiated in receptor-mediated and chemical-induced apoptosis. J Biol Chem. 274:5053-5060.

263. Susin, S.A., Lorenzo, H.K., Zamzami, N., Marzo, I., Brenner, C., Larochette, N.,

264. Prevost, M.C., Alzari, P.M. and Kroemer, G., (1999a) Mitochondrial release of caspase-2 and -9 during the apoptotic process. J. Exp. Med. 189:381-394.

265. Suzuki YJ, Forman HJ, Sevanian A. (1997) Oxidants as stimulators of signal transduction. Free Radic Biol Med. 22:269-285.

266. Svensson M, Sabharwal H, Hakansson A, Mossberg AK, Lipniunas P, Leffler H, Svanborg C, Linse S. (1999) Molecular characterization of alpha-lactalbumin folding variants that induce apoptosis in tumor cells. J Biol Chem. 274:63886396.

267. Szabo I, Zoratti M. (1991) The giant channel of the inner mitochondrial membrane is inhibited by cyclosporin A. J Biol Chem. 266:3376-3379.

268. Szalai G, Krishnamurthy R, Hajnoczky G. (1999) Apoptosis driven by IP(3)-linked mitochondrial calcium signals. EMBO J. 18:6349- 6361.

269. Tangeras A, Fiatmark T, Backstrom D, Ehrenberg A. (1980) Mitochondrial iron not bound in heme and iron-sulfur centers. Estimation, compartmentation and redox state. Biochim Biophys Acta 589:162-175.

270. Tani M. (1990) Mechanisms of Ca" overload in reperfusied ischemic myocardium. Annu.Rev. Physiol. 52 543-559.

271. Teplova V, Evtodienko Y, Odinokova I, Kruglov A, Kudijavtsev A (2000) Suppression of mitochondrial permeability transition pore and induction of lymphoma P388 cell death by cyclosporin A. IUBMB Life. 50:75-80.

272. Tepper AD, de Vries E, van Blitterswijk WJ, Borst J. (1999) Ordering of ceramide formation, caspase activation, and mitochondrial changes during CD95-and DNA damage-induced apoptosis. J Clin Invest. 103:971-978.

273. Thornberry, N.A. and Lazebnik, Y. Caspases: enemies within. (1998) Science 281:1312-1316.

274. Thornberry NA, Peterson EP, Zhao JJ, Howard AD, Griffin PR, Chapman KT (1994) Inactivation of interleukin-lß converting enzyme by peptide(acyloxy)methyl ketones. Biochemistry 33:3934-3940.

275. Thornberry NA, Rano TA, Peterson EP, Rasper DM, Timkey T, Garcia-Calvo M, Houtzager VM, Nordstrom PA, Roy S, Vaillancourt JP, Chapman KT,

276. Nicholson DW (1997) A combinatorial approach defines specificities of members of the caspase family and granzyme B. J. Biol. Chem. 272: 1790717911.

277. Tomei LD, Umansky SR. (1998) Aging and apoptosis control. Neurol Clin. 16:735745.

278. Tsokos-Kuhn J.O. (1989) Evidence in vivo for elevation of intracellular Ca in the liver after diquat, acetaminophen and CCI4. Biochem. Pharmacol. 38:30613065.

279. Tsujimoto Y (1989) Overexpression of the human BCL-2 gene product results in growth enhancement of Epstein-Barr virus-immortalized B cells. Proc Natl Acad Sci USA. 86:1958-1962.

280. Tsujimoto Y, Shimizu S. (2000) Bcl-2 family: life-or-death switch. FEBS Lett. 466:610.

281. Turrens JF (1997) Superoxide production by the mitochondrial respiratory chain. Biosci Rep. 17:3-8.

282. Umansky SR (1982) The genetic program of cell death. Hypothesis and someapplications: transformation, carcinogenesis, ageing. J Theor Biol. 97:591-602.

283. Umansky SR, Korol' BA, Nelipovich PA. (1981) In vivo DNA degradation in thymocytes of gamma-irradiated or hydrocortisone-treated rats. Biochim Biophys Acta. 655:9-17.

284. Ungemach FR. (1987) Pathobiochemical mechanisms of hepatocellular damage following lipid peroxidation. Chem Phys Lipids 45:171-205.

285. Ungemach FR. (1989) Prevention of liver cell damage following lipid peroxidation by depression of lysophosphatide formation. Arch Toxicol Suppl. 13:275-281.

286. Vanags D M,. Porn-Ares M I, Coppola S, Burgess D H OrreniusS (1996) Protease1.volvement in Fodrin Cleavage and Phosphatidylserine Exposure in Apoptosis J. Biol. Chem 271:31075-31085.

287. Vander Heiden MG, Thompson CB. (1999) Bcl-2 proteins: regulators of apoptosis or of mitochondrial homeostasis? Nat Cell Biol. 1:E209-216.

288. Vaux DL, Cory S, Adams JM. (1988) Bcl-2 gene promotes haemopoietic cell survival and cooperates with c-myc to immortalize pre-B cells. Nature. 335:440-442.

289. Vayssiere JL, Petit PX, Risler Y, Mignotte B. (1994) Commitment to apoptosis isassociated with changes in mitochondrial biogenesis and activity in cell lines conditionally immortalized with simian virus 40. Proc Natl Acad Sci USA. 91:11752-11756.

290. Vercesi AE, Kowaltowski AJ, Grijalba MT, Meinicke AR, Castilho RF. (1997) The role of reactive oxygen species in mitochondrial permeability transition. Biosci Rep 17:43-52.

291. Verhagen AM, Ekert PG, Pakusch M, Silke J, Connolly LM, Reid GE, Moritz RL, Simpson RJ, Vaux DL (2000). Identification of DIABLO, a mammalian protein that promotes apoptosis by binding to and antagonizing IAP proteins. Cell 102:43-53.

292. Vieira HL, Belzacq AS, Haouzi D, Bernassola F, Cohen I, Jacotot E, Ferri KF, El

293. Hamel C, Bartle LM, Melino G, Brenner C, Goldmacher V, Kroemer G. (2001) The adenine nucleotide translocator: a target of nitric oxide, peroxynitrite, and 4-hydroxynonenal. Oncogene 20:4305-4316

294. Vondracek J, Stika JV. Soucek K, Minksova K, Blaha L, Hofmanova J, Kozubik A. (2001) Inhibitors of arachidonic acid metabolism potentiate tumour necrosis factor-alpha-induced apoptosis in HL-60 cells. Eur J Pharmacol. 424:1-11.

295. Waite M., (1969) Isolation of rat liver mitochondrial membrane fractions and localization of the phospholipase A. Biochemistry 8:2536-2542.

296. Waite M, Van Deenen LL, Ruigrok TJ, Elbers PF. (1969a) Relation of mitochondrial pphospholipase A2 activity to mitochondrial swelling. J. Lipid Res. 10: 599-608.

297. Waite M, Scherphof GL, Boshouwers FM, van Deenen LL. (1969b) Differentiation of phospholipases A in mitochondria and lisosomes in rat liver. J.Lipid Res. 10:411-420.

298. Wang JH, Redmond HP, Watson RW, Bouchier-Hayes D. (1997) Induction of human endothelial cell apoptosis requires both heat shock and oxidative stress responses. Am J Physiol. 272:C1543-1551.

299. Waring P, Beaver J. 1996 Cyclosporin A rescues thymocytes from apoptosis induced by very low concentrations of thapsigargin: effects on mitochondrial function. Exp Cell Res. 227:264-276.

300. Wei MC, Lindsten T, Mootha VK, Weiler S, Gross A, Ashiya M, Thompson CB, Korsmeyer SJ. (2000) tBID, a membrane-targeted death ligand, oligomerizes BAK to release cytochrome c. Genes Dev. 14:2060-2071.

301. Wei MC, Zong WX, Cheng EH, Lindsten T, Panoutsakopoulou V, Ross AJ, Roth KA, MacGregor GR, Thompson CB, Korsmeyer SJ. (2001) Proapoptotic BAX and BAK: a requisite gateway to mitochondrial dysfunction and death. Science. 292:727-730.

302. Weil M, Jacobson MD, Coles HS, Davies TJ, Gardner RL, Raff KD, Raff MC (1996) Constitutive expression of the machinery for programmed cell death. J. Cell Biol. 133:1053-1059.

303. Weil M, Raff MC, Braga VMM (1999) Caspase activation in the terminal differentiation of human epidermal keratinocytes. Curr. Biol. 9, 361-364.

304. Wicker U, Bucheler K, Gellerich FN, Wagner M, Kapischke M, Brdiczka D. (1993) Effect of macromolecules on the structure of the mitochondrial inter-membrane space and the regulation of hexokinase.Biochim Biophys Acta. 1142:228-239.

305. Wieckowski MR, Wojtczak L (1998) Fatty acid-induced uncoupling of oxidative phosphorylation is partly due to opening of the mitochondrial permeability transition pore. FEBS Lett 423:339-342.

306. Wissing D, Mouritzen H, Egeblad M, Poirier GG, Jaattela M. (1997) Involvement of caspase-dependent activation of cytosolic phospholipase A2 in tumor necrosis factor-induced apoptosis. ProcNatl Acad Sci USA. 94:5073-5077.

307. Wojtczak L, Wieckowski MR (1999) The mechanisms of fatty acid-induced proton permeability of the inner mitochondrial membrane. J Bioenerg Biomembr 31:447-455

308. Wood DE, Newcomb EW. (2000) Cleavage of Bax enhances its cell death function. Exp Cell Res 256:375-382

309. Wyllie AH, Kerr JFR, Currie AR (1980) Cell death: the significance of apoptosis. Int. Rev. Cytol. 68:251-306.

310. Wyllie AH, Morris RG, Smith AL, Dunlop D. (1984) Chromatin cleavage in apoptosis: association with condensed chromatin morphology and dependence on macromolecular synthesis. J Pathol. 142:67-77.

311. Xiang J, Chao DT, Korsmeyer SJ. (1996) BAX-induced cell death may not requireinterleukin 1 beta-converting enzyme-like proteases. Proc Natl Acad Sci USA. 93:14559-14563.

312. Yang J, Liu X, Bhalla K, Kim CN, Ibrado AM, Cai J, Peng TI, Jones DP, Wang X. (1997) Prevention of apoptosis by Bcl-2: release of cytochrome c from mitochondria blocked. Science. 275:1129-1132.

313. Yasuda M., Fujita T. (1977) Effect of lipid peroxidation on phospholipase A2 activity of rat liver mitochondria. Japan J. Pharmacol. 27, 429-435.

314. Yin X.M. (2000) Bid, a critical mediator for apoptosis induced by the activation of Fas/TNF-Rl death receptors in hepatocytes. J Mol Med. 78:203-211.

315. Yuan J, Shaham S, Ledoux S, Ellis HM, Horvitz HR. (1993) The C. elegans cell death gene ced-3 encodes a protein similar to mammalian interleukin-1 beta-converting enzyme. Cell. Nov 75:641-652.

316. Yuan J., Horvitz HR. (1992) The Caenorhabditis elegans cell death gene ced-4 encodes a novel protein and is expressed during the period of extensive programmed cell death. Development. 116:309-320.

317. Yuan JS, Shaham S, Ledoux S, Ellis HM, Horvitz HR (1993) The C. Elegans cell death gene ced-3 encodes a protein similar to mammalian interleukin-lß-converting enzyme. Cell 75:641-652.

318. Zamzami N, El Hamel C, Maisse C, Brenner C, Munoz-Pinedo C, Belzacq AS, Costantini P, Vieira H, Loeffler M, Molle G, Kroemer G. (2000) Bid acts on the permeability transition pore complex to induce apoptosis. Oncogene 19:63426350.

319. Zamzami N, Marchetti P, Castedo M, Hirsch T, Susin SA, Masse B, Kroemer G. (1996) Inhibitors of permeability transition interfere with the disruption of the mitochondrial transmembrane potential during apoptosis. FEBS Lett 384:53-57.

320. Zamzami N, Susin SA, Marchetti P, Hirsch T, Gomez-Monterrey I, Castedo M, Kroemer G. (1996) Mitochondrial control of nuclear apoptosis. J Exp Med. 183:1293-1295.

321. Zhang L, Yu J, Park BH, Kinzler KW, Vogelstein B. (2000) Role of BAX in the apoptotic response to anticancer agents. Science. 290:989-992.

322. Zheng TS, Flavell RA (2000) Divinations and surprises: genetic analysis of caspase function in mice. Exp. Cell Res. 256: 67-73.

323. Zhivotovsky B, Wade D, Nicotera P, Orrenius S. (1994) Role of nucleases in apoptosis. Int Arch Allergy Immunol 105:333-338.

324. Zhivotovsky BD, Zvonareva NB, Hanson KP. (1981) Characteristics of rat thymus chromatin degradation products after whole-body x-irradiation. Int J Radiat Biol 39:437-440.

325. Zhivotovsky B, Samali A, Gahm A, Orrenius S. (1999) Caspases: their intracellular localization and translocation during apoptosis. Cell Death Differ. 6:644-651.

326. Zhu H, Fearnhead HO, Cohen GM. (1995) An ICE-like protease is a common mediator of apoptosis induced by diverse stimuli in human monocytic THP.l cells. FEBS Lett. 374:303-308.

327. Zoeteweij JP, van de Water B, de Bont HJ, Mulder GJ Nagelkerke JF (1992) Involvement of intracellular Ca2+ and K+ in dissipation of the mitochondrial membrane potential and cell death induced by extracellular ATP in hepatocytes. Biochem J. 288:207-213.

328. Zoratti M, Szabo I. (1995) The mitochondrial permeability transition. Biochim. Biophys. Acta 1241:139-176.

329. Zou H, Li Y, Liu X, Wang X, (1999) An APAF-1/Cytochrome c multimeric complex is a functional apoptosome that activates procaspase-9. J. Biol. Chem. 274:1154911556.

330. Zou H, Li Y, Liu X, Wang X. (1999) An APAF-1/Cytochrome c multimeric complex is a functional apoptosome that activates procaspase-9. J. Biol. Chem. 274:1154911556.

331. Список статей по теме диссертации

332. Kondrashova M.N., Gogvadze V.G., Medvedev В.I., Babsky A.M. (1982) "Succinic acid oxidation as the only energy substrate of intensive Ca uptake by mitochondria." Biochem. Biophys. Res.Comm. 109:376-381.

333. Medvedev B.I., Severina E.P. Gogvadze V.G., Chuhlova E.A., Evtodienko Yu.V. (1985) "Participation of endogenous free fatty acids in Ca2+ release activation from mitochondria." Gen. Physiol. Biophys. 4:549-556.

334. Новгородов С.А., Еогвадзе В.Г., Медведев Б.И., Зинченко В.П. (1987) "Антиоксидант предотвращает и обращает индуцируемое кальцием разобщение митохондрий" Биохимия 52:943-948.

335. Novgorodov S.A., Gogvadze V.G., Medvedev B.I. Zinchenko V.P. (1989) "The effect of butylated hydroxytoluene, an inhibitor of lipid peroxidation, on the calcium-induced uncoupling of rat liver mitochondria." FEBS lett. 248:179-181.

336. Gogvadze V.G., Brustovetsky N.N., Zhukova A.A. (1990) "The role of phospholipase A2 in lipid peroxidation-induced fall of membrane potential of rat liver mitochondria." FEBS lett. 264:168-170.

337. Гогвадзе B.F., Брустовецкий H.H. Жукова А.А. (1990) "Участие фосфолипазы А2 в индуцированном продуктами перекисного окисления липидов разобщения митохондрий печени крыс." Биохимия 55:2195-2199.

338. Gogvadze V.G., Zhukova А.А. (1991) "The role of lipid peroxidation products in cumene hydroperoxide-induced Ca2+ efflux from mitochondria" FEBS Lett. 281:139-141.

339. Gogvadze V., Richter C. (1993) "Cyclosporine A protects rat liver mitochondria in an in vitro model of hypoxia/reperfusion injury" FEBS Lett. 333:334-338.

340. Richter C., Gogvadze V., Schlapbach R., Scweizer M., Schlegel J. (1994) "Nitric oxide kills hepatocytes by mobilizing mitochondrial calcium." Biochem. Biophys. Res Comm. 205:1143-1150.

341. Richter С., Gogvadze V., Lafranchi R„ Schlapbach R., Schweizer M., Suter M., Walter P., Yaffee M. (1995) "Oxidants in mitochondria: from physiology to deseases" Biochim. Biophys. Acta 1271:67-74.

342. Laffranchi R., Gogvadze V., Richter C„ Spinas G. A. (1995) "Nitric oxide (nitrogen monoxide, NO) stimulates insulin secretion by inducing calcium release from mitochondria." Biochem. Biophys. Res. Comm. 217:584-591.

343. Gogvadze V., Schweizer M., Richter C. (1996) Control of the pyridine nucleotide-linked Ca2+ release from mitochondria by respiratory substrates. Cell Calcium 19:521-526

344. Галитовский B.E., Гогвадзе В.Г. (1998) Ингибиторы митохондриальной энергетики предотвращают межнуклеосомную фрагментацию ДНК в тимоцитах. Биохимия 63:1374-1377.

345. Zhuang J., Ren Y., Snowden R., Zhu H., Gogvadze V., Savill J.S., Cohen G.M. (1998) Dissociation of phagocyte recognition of cell undergoing apoptosis from other features of the apoptotic program. J. Biol. Chem. 273:15628-15632.

346. Ryan S., Gogvadze V. (1999) Substrate-dependent effect of phenolic antioxidants on Ca2+ accumulation by rat liver mitochondria. Redox Report 4:251-254.

347. Robertson JD, Gogvadze V, Zhivotovsky B, Orrenius S. (2000) Distinct pathways for stimulation of cytochrome с release by etoposide J Biol Chem. 275:3243832443.

348. Gogvadze V, Klein SD, Shigenaga M, Ames BN, Richter C. (2000) Effect of ebselen on Ca2+ transport in mitochondria. Redox Rep.5:359-363.

349. Kohler C, Gogvadze V, Hakansson A, Svanborg C, Orrenius S, Zhivotovsky B. (2001) A folding variant of human alpha-lactalbumin induces mitochondrial permeability transition in isolated mitochondria. Eur J Biochem. 268:186-191.

350. Gogvadze V, Robertson JD, Zhivotovsky B, Orrenius S. (2001) Cytochrome с release occurs via Ca2+-dependent and Ca2+-independent mechanisms that are regulated by Bax. J Biol Chem. 276:19066-19071.2+

351. Галитовский B.E., Гогвадзе В.Г. (2001) Исследование Са аккумулирующей способности митохондрий тимоцитов при апоптозе. Биохимия. 66:775-779.

352. Галитовский В.Е., Гогвадзе В.Г. (2001) Влияние энергетического состояния митохондрий на межнуклеосомную фрагментацию ДНК в тимоцитах после облучения. Радиационная биология. Радиоэкология. 41:151-154.

353. Список основных сокращений и условных обозначений1. АОР аденозин дифосфат;

354. АМС 7-амино-4-метилкумарин

355. АКТ переносчик адениновых нуклеотидов;1. АТР аденозин трифосфат;

356. ВНТ 2,6-ди-терт-бутил-р-крезол, (ионол);

357. ВНА 2,3-ди-терт-бутил-4-гидроксианизол;

358. ВН(3 2,5-ди-терт-бутилгидрохинон;

359. БСА бычьий сывороточный альбумин;1. СяА циклоспорин А;

360. СиООН гидроперекись кумола;

361. ЕСЗТА этиленгликоль тетрауксусная кислото;

362. ЕБТА этилендиамин тетрауксусная кислота;

363. МАЛ мультимерный а-лактальбумин;

364. КАЭ+ никотинамид аденин динуклеотид;

365. МАЭН восстановленный никотинамид аденин динуклеотид;ко- моноокись азота;кк рутениевый красный;м терт-бутил гидропероксид;

366. ТРР+ катион тетрафенил фосфония;

367. ТРСК (И-тозит-Ь-фенилаланил хлорометил кетон;

368. УБАС зависимый от потенциала анионный канал;г-УАЭТтк .ч-бензоилоксикарбонил~Уа1-А1а-А8р-трифторметилкетоном;1. БЕУО Азр-С1и-Уа1-Азр;1. ЬЕТО Ьеи-С1и-Н18-Азр;

369. УБУАО Уа1-Азр-Уа1-А1а-А8р;

370. СССР карбонил цианид-яг-хлорофенилгидразон.

371. А\\>, мембранный потенциал на внутренней мембранемитохондрий