Исследование факторов, определяющих избирательное влияние производного 6-метилурацила на активность ацетилхолинэстеразы в органах и тканях Rattus norvegicus тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат биологических наук Ланник, Наталья Ивановна

• Ланник, Наталья Ивановна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ланник, Наталья Ивановна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1. Ацетилхолинэстераза, ее функции и строение

2. Бутирилхолинэстераза и ее функции

3. Ингибиторы ацетилхолинэстеразы

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

1. Определение первичной нуклеотидной последовательности и интронно-экзонной структуры гена ache Rattus norvégiens

2. Различие в уровне экспрессии мРНК изоформ гена ache органов и тканей Rattus norvegicus

3. Влияние гликозилирования ацетилхолинэстеразы на обеспечение чувствительности к производным 6-метилурацила

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование факторов, определяющих избирательное влияние производного 6-метилурацила на активность ацетилхолинэстеразы в органах и тканях Rattus norvegicus»

ВВЕДЕНИЕ

Ацетилхолинэстераза (ацетилхолин-ацетилгидролаза, АХЭ, К.Ф. 3,1,1,7) - фермент, семейства сериновых гидролаз, играющий ключевую роль при передаче возбуждения путем гидролиза ацетилхолина с образованием холина и уксусной кислоты в синапсах центральной и периферической нервной системы. Известно, что АХЭ играет важную роль в патогенезе таких заболеваний как болезнь Альцгеймера, черепно-мозговые травмы, сосудисто-мозговые патологии, миастения Гравис, и т.д.(Jeffrey & Cummings, 2000; Jones et al., 2011; Shakil et al., 2011). Эти заболевания сопровождаются гибелью нейронов, дегенерацией аксонов, нарушением коммуникаций в нейронных сетях и контролируемых ими функций. Несмотря на то, что большинство заболеваний являются мультифакторными, одним из основных повсеместно принятых методов терапии остается применение антихолинэстеразных (анти-ХЭ) препаратов. В настоящее время имеется большой выбор препаратов с анти-ХЭ действием. Однако, большинство из них характеризуются недостатками, наиболее важным из которых является неселективность действия применяемых препаратов по отношению к органам, в том числе - не требующим коррекции. Это приводит к развитию широкого спектра тяжелых побочных явлений со стороны организма и является причиной частых патологических или смертельных исходов из-за нарушения работы дыхательной мускулатуры (Голиков и др., 1986; Сосюкин и др., 2005; Lester et al., 2010). В связи с этим, особую актуальность и значимость приобретает поиск и определение механизма действия новых высокоселективных, тканеспецифичных ингибиторов АХЭ.

В лаборатории химико-биологических исследований Института органической и физической химии им. А.Е. Арбузова (ИОФХ) были синтезированы производные урацила, содержащие тетраалкиламмониевые

1 3

группы при N и N атомах пиримидинового цикла, классифицированные, в дальнейшем, как новый класс необратимых и высокоселективных

ингибиторов АХЭ (Резник и др., 1998; Аникиенко и др., 2001). Являясь представителями хорошо известного класса необратимо действующих ингибиторов холинэстераз, они, в то же время, проявляют ряд аномальных свойств. Существенной особенностью действия производных 6-метилурацила у млекопитающих in vivo является большой диапазон между дозами, в которых они парализуют мышцы конечностей при функциональной нагрузке, и летальными дозами, в которых они блокируют дыхательные мышцы. К этому классу соединений относится и исследуемый нами ингибитор С-547 (далее по тексту - С-547), проявляющий избирательность действия по отношению к АХЭ разных органов и тканей (Аникиенко и др., 2001 ;Petrov et al., 2006, 2009). Однако в литературе отсутствуют данные о механизмах действия С-547, приводящих к избирательному ингибированию АХЭ, что необходимо для оптимизации процессов синтеза новых высокоселективных анти-АХЭ препаратов на основе 6-метилурацила.

На основании вышеизложенного, целью настоящей работы явилось выявление основных факторов, определяющих избирательное влияние ингибитора С-547 на активность ацетилхолинэстеразы в разных тканях и органах Rattus norvegicus.

В соответствии с поставленной целью требовалось решение следующих

задач:

1. Определить нуклеотидную последовательность 5 ' и 3 ' участков гена ацетилхолинэстеразы (ache) R. norvegicus и построить модель его интронно-экзонной структуры;

2. Выявить различия в экспрессии мРНК изоформ гена ацетилхолинэстеразы (ache) в органах и тканях R. norvegicus;

3. Установить различия в экспрессии мРНК гена бутирилхолинэстеразы (behe) в органах и тканях R. norvegicus;

4. Провести сравнительную оценку влияния ингибитора С-547 на активность различных форм ацетилхолинэстеразы, отличающихся по степени

гликозилирования и наличию якорных субъединиц (коллаген Q и богатый пролином мембраносвязанный белок - PRiMA).

Научная новизна. Впервые определена нуклеотидная последовательность 5' и 3' недостающих участков гена ache R. norvegicus и на ее основе построена интронно-экзрнная структура гена. Данные депонированы в международную базу данных GeneBank (GQ338831 и GQ338832). Впервые разработаны праймеры для ПЦР в режиме реального времени по технологии TaqMan, позволяющие оценить уровень экспрессии мРНК изоформ гена ache в разных органах и тканях организма. Впервые разработаны вектора экспрессии для гена ache R. norvegicus, содержащие нуклеотидные замены в сайтах гликозилирования.

Научно-практическая значимость работы. Данные об интрон-

экзонной структуре гена ache R. norvegicus имеют важное теоретическое и

практическое значение, позволяют провести сравнительный анализ в

строении гена ache разных видов животных, исследовать процессы

альтернативного сплайсинга, выяснить взаимосвязи между регуляторными

последовательностями гена и различными внешними и внутренними

факторами, их влияние на избирательную экспрессию гена ache в разных

органах и тканях. Практическая значимость заключается в разработке

специфических праймеров и гибридизационных зондов для оценки

экспрессии мРНК изоформ АХЭ, амплификации фрагментов гена, создании

плазмидных и вирусных векторов, несущих ген ache. Полученные нами

данные об уровне экспрессии мРНК гена ache органов и тканей R. norvegicus

расширяют представление о разнообразии изоформ фермента в синапсах,

что необходимо при разработке и установлении механизмов действия новых

лекарственных препаратов-ингибиторов АХЭ. Данные об уровне экспрессии

мРНК гена bche необходимы при исследовании его компенсаторной роли в

различных органах и тканях и роли при различных патологических

процессах. Созданные генетические конструкции для экспрессии гена ache,

содержащего нуклеотидные замены в сайтах гликозилирования в различных

8

комбинациях, позволяют оценить влияние гликанов на биологическую активность АХЭ, транспорт к клеточной мембране, стабилизацию функциональной конформации, на функционирование головного мозга в норме и патологии (например, при болезни Альцгеймера), а также в исследовании других заболеваний, в патогенезе которых принимает участие АХЭ. Результаты исследований будут полезны для практического применения при разработке новых лекарственных препаратов селективного действия, свободных от недостатков ныне применяемых препаратов.

Положения, выносимые на защиту:

1. Структура гена ацетилхолинэстеразы (ache) Rattus norvégiens гомологична структуре гена ацетилхолинэстеразы (ache) Mus musculus;

2. Уровень экспрессии мРНК гена бутирилхолинэстеразы (bche) в поперечно-полосатой мускулатуре задних конечностей Rattus norvegicus ниже, чем в тканях сердца, головного мозга и диафрагмы;

3. Различная степень гликозилирования ацетилхолинэстеразы и образование гетероолигомеров в комплексе с якорными белками (коллаген Q и богатый пролином мембраносвязанный белок - PRiMA) не влияет на степень ингибирования АХЭ производным 6-метилурацила (С-547).

Связь работы с научными программами и собственный вклад автора в исследования. Работа выполнена при поддержке грантами Российского Фонда Фундаментальных Исследований (07-04-12097 офи-м), Правительства Республики Татарстан по подготовке и переподготовке кадров в зарубежных научных центрах и гранта «Пятьдесят лучших инновационных идей для Республики Татарстан» в номинации Молодежный инновационный проект «МИП» (Государственный контракт № р/14180). Научные положения диссертации и выводы базируются на результатах собственных исследований автора.

Апробация работы. Материалы диссертации представлены на II

Международной научно-практической конференции «Постгеномная эра в

биологии и проблемы биотехнологии» (Казань, 2008); Всероссийских

9

научно-практических конференциях с международным участием «Молодые ученые в медицине» (Казань, 2008, 2009); конкурсе «50 лучших инновационных идей для Республики Татарстан» (Казань, 2010); конкурсе «У.М.Н.И.К» - 2010; научной конференции, посвященной 35-летию кафедры генетики КФУ «Современные проблемы генетики» (Казань, 2011); ежегодных научных отчетных конференциях сотрудников КФУ (Казань, 2010, 2011).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них 2 статьи в центральных отечественных и зарубежных рецензируемых журналах: Ученые записки Казанского университета, секция естественные науки и British Journal of Pharmacology.

Место выполнения работы Казанский (Приволжский) федеральный университет.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов и обсуждения, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 119 страницах машинописного текста, включает 19 рисунков и 11 таблиц. Библиография содержит 190 наименований, в том числе 177 -зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Ланник, Наталья Ивановна

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для определения взаимодействия между ферментом и ингибитором, нами определена нуклеотидная последовательность на 5' и 3' областях гена ache. На основании полученных данных нами построена компьютерная модель интронно-экзонной структуры гена ache R. norvégiens. Данные об интронно-экзонной структуре гена ache R. norvegicus имеют важное теоретическое и практическое значение, позволяя провести поиск потенциальных сайтов сплайсинга и сравнительный анализ продуктов альтернативного сплайсинга в разных органах и тканях.

Так как нам не удалось обнаружить дополнительных интронов и экзонов в нуклеотидной последовательности гена ache R. norvegicus, это позволило сделать вывод об отсутствии дополнительных изоформ АХЭ, образующихся в процессе альтернативного сплайсинга и способных объяснить избирательность действия производного 6-метилурацила по отношению к ферменту разных органов и тканей. В дальнейшем полученные данные легли в основу выполненного нами сравнительного анализа продуктов альтернативного сплайсинга гена ache R. norvegicus.

Известно, что экспрессия мРНК изоформ гена ache происходит в большинстве тканей организма, включая скелетную мускулатуру, различные типы нейронов центральной и периферической нервной системы. В поперечно-полосатой мускулатуре и в ЦНС основная масса АХЭ представлена в виде «Т» изоформы, в крови - «H», a «R» возникает в процессе воздействия на организм различных, вызывающих стресс, факторов. Экзоны 2, 3 и 4-й образуют при альтернативном сплайсинге каталитический домен, свойственный всем изоформам АХЭ. В результате сплайсинга экзонов, образующих каталитический домен, с 6 экзоном возникает изоформа «Т», локализующуюся преимущественно в мышцах и мозге. Изоформа «R» («readthrough») или прямой транскрипт образуется при

сплайсинге консервативных экзонов и 5-гоэкзона, без вырезания 4-го интрона.

Сравнительный анализ продуктов альтернативного сплайсинга гена ache R. norvegicus показал высокий уровень экспрессии изоформы «Т» в мышце EDL по сравнению с остальными исследуемыми органами. Полученные данные могут свидетельствовать о присутствии в синапсах тканей диафрагмы, сердца и головного мозга других холинэстреаз, выполняющих компенсаторную роль при воздействии ингибиторов. Так, известно, что уровень синаптической АХЭ не остается постоянным, а меняется под воздействием различных факторов эндогенной и экзогенной природы, что приводит к изменениям в сплайсинге пре-мРНК, в результате чего происходит сверхэкспрессия изоформы «R» с более длительным периодом полужизни вместо «Т». В результате проведенного нами анализа выявлено присутствие мРНК изоформы «R» во всех исследуемых образцах. При этом уровень экспрессии мРНК изоформы «R» был в 2 раза меньше по сравнению с изоформой «Т» в мышце EDL, в то время как в остальных органах уровень экспрессии мРНК этих изоформ был одинаков. Таким образом, втканях сердца, диафрагмы и головного мозга помимо основной изоформы «Т» присутствует высокий уровень изоформы «R» которая, вероятно менее подвергается влиянию С-547 и выполняет, таким образом, частично компенсаторную роль.

Также нами проверена компенсаторная роль БХЭ в исследуемых органах. Анализ уровня экспрессии мРНК bche показал высокий уровень мРНК bche в сердце. Установленная отрицательная зависимость уровня экспрессии мРНК гена ache по отношению к мРНК bche говорит о функциональной значимости БХЭ в синапсах диафрагмы, сердца и головного мозга в отличие от мышцы EDL. Таким образом, несомненно, компенсаторную роль может также играть и БХЭ, делая тем самым диафрагму, сердце и головной мозг менее чувствительными к воздействию производного 6-метилурацила.

Несмотря на то, что производное 6-метилурацила С-547 принадлежит к семейству тетраалкиламмониевых ингибиторов, способных взаимодействовать с периферическим анионным сайтом, известно, что С-547 может взаимодействовать с АХЭ подобно неконкурентному ингибитору, вызывая при этом изменение конформации молекулы фермента таким образом, что нарушается взаимодействие субстрата с активным центром фермента. Однако С-547 практически необратимо ингибирует АХЭ теплокровных без образования ковалентных связей с ней, что не характерно для неконкурирующего типа ингибирования. Возможно, С-547 не взаимодействует с функциональными группами АХЭ, а оказывает влияние на конформацию фермента за счет взаимодействия с N-гликанами, что приводит к потере ферментативной активности. Полученные нами данные показывают отсутствие влияния степени гликозилирования на активность АХЭ в присутствии С-547.

Таким образом, в случае ингибирования АХЭ мышцы EDL С-547

играют роль процессы, лишь опосредованно связанные с конформацией

активного центра, хотя и оказывающие сильное регуляторное действие.

Следует отметить, что регуляция трехмерного пространственного

расположения АХЭ в гетероолигомере, образованном с якорными белками

ColQ и PRiMA является одним из вариантов регуляции активности фермента.

Известно, что в синапсе основные формы АХЭ представлены

ассиметричными формами (А), тетрамером (G4), ассоциированным с ColQ

или с PRiMA (Belbeoc'h et al., 2004; Dvir et al, 2004; Zhang et al., 2005;

Bernard et al., 2011). Хотя в нервно-мышечном синапсе основной пул

функционального нейромедиатора представляет собой коллаген-

ассоциированная форма, форма, ассоциированная с PRiMA, также

присутствует. Количество формы G4 зависит от активности скелетной

мускулатуры. Якорные белки взаимодействуют с мономерами, димерами,

тримерами и тетрамерами АХЭ образуя комплекс [АХЭ]„якорный белок.

Вероятно, разное распределение молекулярных форм АХЭ может отражать

90

их различную роль в регуляции концентрации АХ в синаптической щели (Aldunate et al, 2004; Meshorer & Soreq 2006; Massoulie & Millard 2009). С целью проверки гипотезы о регуляции активности АХЭ в гетероолигомере, образованном с якорными белками, мы провели анализ влияния якорных субъединиц PRiMA и ColQ на значения ингибирования АХЭ С-547. В результате проведенного нами биохимического анализа установлено, что наличие якорных субъединиц не оказывает влияния на избирательность действия С-547 по отношению к АХЭ.

Из данных литературы известно, что в окружении активных центров ферментов расположены обширные и малоизученные зоны, содержащие полярные группы и циклические фрагменты, способные к разнообразным, в том числе к стекинговым взаимодействиям с лигандами (Bourne et al, 2005; Da Silva et al, 2006; Tseng et al, 2009). Таким образом, следует заключить, что при взаимодействии фермента и ингибитора, вероятно, задействованы другие механизмы, выполняющие опосредованную роль в работе фермента, но оказывающие критическое значение при ингибировании. Также, следует отметить особое строение молекулы С-547, которая может принимать огромное количество пространственных конформаций, что делает затруднительным предсказание вероятных точек взаимодействия лиганда с ферментом. Сложная организация межсинаптического пространства, в котором происходит взаимодействие ингибитора и АХЭ, также может опосредованно влиять на процесс ингибирования.

Запланированные цели исследования достигнуты. Полученные нами

данные об интронно-экзонной структуре гена acheR. norvegicus имеют

важное теоретическое и практическое значение для дальнейших

исследований в различных областях биохимии, молекулярной биологии и

генетики. В литературе отсутствуют работы по комплексной оценке уровня

экспрессии мРНК изоформ гена ache в различных органах и тканях для

млекопитающих. Таким образом, проведенные нами исследования имеют

важную теоретическую и практическую значимость, расширяя представление

91

о разнообразии изоформ фермента в органах и тканях R. norvegicus. При этом, особый интерес представляет собой изоформа «R», значимость которой при исследовании ингибиторов избирательного действия может быть высока. Также обнаруженный нами высокий уровень мРНК гена bche в тканях диафрагмы, сердца и головного мозга указывает на важное функциональное значение БХЭ в этих органах, что может в дальнейшем помочь при рассмотрении ее компенсаторной роли под воздействием новых ингибиторов. Разработанные нами вектора экспрессии для гена ache, содержащего нуклеотидные замены в сайтах гликозилирования в различных комбинациях имеют как фундаментальное (исследование влияния гликанов на активность, процессы транспорта к мембране, исследование заболеваний, в патогенезе которых принимает участие АХЭ и т.д.), так и прикладное значение - для разработки на их основе вирусных векторов и клеточных тест-систем для скрининга анти-АХЭ препаратов.

выводы

1. Определена первичная нуклеотидная последовательность недостающих 5' и 3' участков гена ацетилхолинэстеразы (ache) Rattus norvegicus (229 и 391 пар нуклеотидов соответственно), важных для процессов альтернативного сплайсинга. На основании компьютерного анализа построена интронно-экзонная структура гена ache Rattus norvegicus. Показано, что интронно-экзонная структура гена ache Rattus norvegicus соответствует структуре гена ache Mus musculusna 84.5%;

2. Показано, что мРНК изоформы «R» гена ache присутствует во всех исследуемых органах и тканях Rattus norvegicus. Статистически достоверное различие в уровне экспрессии мРНК изоформ гена ache отмечено в поперечно-полосатой мускулатуре задних конечностей, где уровень экспресии мРНК изоформы «R» в 2 раза меньше по сравнению с мРНК изоформы «Т»;

3. Выявлены различия в экспрессии мРНК гена бутирилхолинэстеразы (bche) в органахи тканях Rattus norvegicus: уровень экспрессии мРНК гена bche в ткани диафрагмы в 4,2 раза, в мозге - в 4,9 раза, а в сердце - в 183,5 раза выше, чем в мышце EDL. Установлена отрицательная зависимость уровня экспрессии мРНК изоформ гена ache по отношению к мРНК гена bche;

4. Разная степень гликозилирования АХЭ Rattus norvegicus и образование гетероолигомеров в комплексе с якорными белками (коллаген Q и богатый пролином мембраносвязанный белок - PRiMA) не влияет на активность фермента в присутствии ингибитора С-547.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ланник, Наталья Ивановна, 2012 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аникиенко К. А. Новый класс ингибиторов холинэстераз тетраалкиламмониевые производные 6-метилурацила: особенности взаимодействия с холинэстеразами разных групп животных /Аникиенко К.А., Бычихин Е.А., Курочкин В.К., Резник B.C., Акамсин В.Д., Галяметдинова И.В. // Доклады РАН. - 2001. - Т. 376, №6. - С. 818 - 822

2. Басова Н.Е. Алкиламмониевые эфиры хлорбензойных кислот - новая группа содержащих сложноэфирную связь обратимых ингибиторовхолинэстераз разных животных / Басова Н.Е., Розенгарт Е.В. // ДАН - 2005. - Т. 402, №4. - С. 551 - 554

3. Горбунов С.М. Влияние ингибирования бутирилхолинэстеразы у мышей на острую токсичность некоторых антихолинэстеразных веществ /Горбунов С.М., Резник B.C. // Токсикологический вестник - 2009, №1, С. 23 - 26

4. Зобов В.В. Алкиламмониевые производные урацила: токсикологическое и нейрофизиологическое исследование. // Дисс. доктор биол. наук. - М: ГосНИИОХТ, -2006. - 260 с.

5. Зобов В.В. Фосфорилированные и тетраалкиламмониевые производные урацила: безопасность и избирательность миорелаксантного действия / Зобов В.В., Петров К.А., Аслямова A.A. // Современные проблемы токсикологии -2004. -№3. - С. 25-33

6. Ковязина И.В., Петров К.А., Зобов В.В. Особенности действия тетраалкиламмониевого производного 6-метилурацила на потенциалы концевой пластинки мышц разного функционального типа / Ковязина И.В., Петров К.А., Зобов В.В. // Доклады РАН.-2004. -Т. 399, №5. - С. 712 - 714

7. Петров К.А. Исследование механизма действия тетраалкиламмониевого

производного 6-метилурацила в синапсах дыхательной и локомоторной

мышц крысы // Дисс. кандидата биол. наук. - М: ГосНИИОХТ, - 2006. -114 с.

8. Резник B.C. Новый класс ингибиторов холинэстераз: тетраалкиламмониевые производные 6-метилурацила и аллоксазина // Доклады РАН. -1998, -Т. 362, - С. 68 - 70

9. Резник B.C. Новый класс ингибиторов холинэстераз: тетраалкиламмониевые производные 6-метилурацила и аллоксазина /Резник

B.C., Аникиенко К.А., Курочкин В.К. // Доклады РАН. -1998, -Т. 362, №1, -

C. 68-70.

10. Фармакология миорелаксантов//Под ред. Д.А. Харкевича. - М.: Медицина 1989.-288 С.

11. Abramochkin D.V. Mechanisms of cardiac muscle insensitivity to a novel acetylcholinesterase inhibitor C-547 / Abramochkin D.V., Petrov K.A., Zobov V.V., Iagodina L.O., Nikol'skii E.E., Rozenshtraukh L.V. // J. Cardiovasc. Pharmacology - 2009, - V. 53, - P. 162-166.

12. Aldunate R. Structural and functional organization of synaptic acetylcholinesterase / Aldunate R., Casar J.C., Brandan E., Inestrosa N.C. // Brain Research Reviews - 2004, -V. 47, - P. 96 - 104

13. Anderson A.A. Morphoregulation by acetylcholinesterase in fibroblasts and astrocytes / Anderson A.A., Ushakov D.S., Ferenczi M.A., Mori R., Martin P., Saffell J. A. // Journal of cellular physiology - 2008, - V. 215, - P. 82-100

14. Angus L.M. Role of intronic E- and N-box motifs in the transcriptional induction of the acetylcholinesterase gene during myogenic differentiation / Angus

L.M., Chan R.Y., Jasmin B.J. // Journal of cell Biochemistry - 2001, - V. 276, - P. 17603 - 17609

15. Arnosti D.N. Transcriptional enhancers: intelligent enhanceosomes or flexible billboards? / Arnosti D.N., Kulkarni M.M. // Journal of cell Biochemistry- 2005, - V. 94, - P. 890 -898

16. Atanasova E. Novel messenger RNA and alternative promoter for murine acetylcholinesterase / Atanasova E., Chiappa S., Wieben E., Brimijoin S. // Journal of cell Biochemistry - 1999, - V. 274, - P. 21078 - 21084

17. Auletta J.T. Molecular basis of inhibition of substrate hydrolysis by a ligand bound to the peripheral site of acetylcholinesterase /Auletta J.T., Johnson J.L., Rosenberry T.L. //Chemico-Biological Interactions - 2010, - V. 187, - P. 135 -

141

18. Aziz-Aloya R. Promoter elements and alternative splicing in the human AChE gene / Aziz-Aloya R., Sternfeld M„ Soreq H. // Prog, brain research - 1993, - V.

98, - P. 147-153

19. Bataini F. Protein kinase c signal transduction regulation in physiological and pathological aging / Bataini F., Pascale A. // Ann. N.Y. Acad. Sci. - 2005, - V. 1057,-P. 177-192

20. Belbeoc'h S. Elements of the C-terminal t peptide of acetylcholinesterase that determine amphiphilicity, homomeric and heteromeric associations, secretion and degradation / Belbeoc'h S„ Falasca C„ Leroy J., Ayon A., Massoulie J., Bon S. // Europian journal of biochemistry -2004,-V. 271,-P. 1476- 1487

21. Bernard V. Distinct localization of collagen Q and PRiMA forms of acetylcholinesterase at the neuromuscular junction / Bernard V., Girard E„ Hrabovska A., Camp S., Taylor P., Plaud B„ Krejci E. // Molecular and cellular

neuroscience - 2011, - V. 46, - P. 272 - 281

22. Birikh K.R. Interaction of "readthrough" acetylcholinesterase with RACK1 and PKCII correlates with intensified fear-induced conflict behavior / Birikh K.R., Sklan E.H., Shoham S., Soreq H. //PNAS - 2003, - V. 100, - P.283 - 288

23. Black B.L. Multiple roles for the MyoD basic region in transmission of transcriptional activation signals and interaction with MEF2 / Black B.L., Molkentin J.D., Olson E.N. // Molecular Cell Biology - 1998, - V. 18, - P. 69 - 77

24. Blundon J.A. Presynaptic gating of postsynaptically expressed plasticity at mature thalamocortical synapses / Blundon J.A., Bayazitov I.T., Zakharenko S.S. // Journal of Neuroscience - 2011, - V. 31, - P. 16012 - 16025

25. Bolognesi M.L. Multitargeted drugs discovery: balancing anti-amyloid and anticholinesterase capacity in a single chemical entity / Bolognesi M.L., Bartolini M„ Tarozzi A., Morroni F„ Lizzi F„ Milelli A., Minarini A., Rosini M„ Hrelia P.,

Andrisano V., Melchiorre C. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2011, - V. 12, - P. 93 -98

26. Boberg D.R. Molecular forms of butyrylcholinesterase and obesity / Boberg D.R., Furtado-Alle L., R.R. Souza, Chautard-Freire-Maia E.A. // Genetics and Molecular Biology - 2010, - V. 33, - P. 452 - 454

27. Bonizzoni P. ASPIC: a novel method to predict the exon-intron structure of a gene that is optimally compatible to a set of transcript sequences / Bonizzoni P, Rizzi R, Pesole G. // BMC Bioinformatics. - 2005, - V. 34, - P. 153 - 156

28. Borroto-Escuela D.O. Muscarinic acetylcholine receptors inTeracting proteins (mAchrips): targeting the receptorsome / Borroto-Escuela D.O., Agnati L.F., Fuxe K., Ciruela F. //Curr Drug Targets - 2011, - V. 18, - P. 238 - 243

29. Bosgra S. Toxicodynamic analysis of the inhibition of isolated human acetylcholinesterase by combinations of methamidophos and methomyl in vitro / Bosgra S., van Eijkeren J.C., van der Schans M.J., Langenberg J.P., Slob W. // Toxicol appl pharmacology - 2009, - V. 236, - P. 1-8

30. Bourne Y. Structural insights into conformational flexibility at the peripheral site and within the active center gorge of AChE / Bourne Y., Radi'c Z., Kolb H.C., Sharpless K.B., Taylor P., Marchot P. // Chemico-Biological Interactions - 2005, -V. 157,-P. 159-165

31. Bowie J.U. A method to identify protein sequences that fold into a known three-dimensional structure / Bowie J.U., Luthy R., Eisenberg D. // Science - 1991, -V. 12,-P. 164-170

32. Burstein S.A. Megakaryocytopoiesis in culture: modulation by cholinergic mechanisms / Burstein S.A., Adamson J.W., Harker L.A. // J. Cell Physiol. -1980,-V 54,-P. 201 -208

33. Camp S. Acetylcholinesterase expression in muscle is specifically controlled by a promoter-selective snhancesome in the first intron / S., De Jaco A., Zhang L., Marquez M., De La Torre B., Taylor P. // The journal of neuroscience - 2008, - V. 28,-P. 2459-2470

34. Castrignano T. ASPIC: a web resource for alternative splicing prediction and transcript isoforms characterization / Castrignano T., Rizzi R., Talamo I.G., De Meo P., Anselmo A., Bonizzoni P., Pesole G. // Nucleic Acids Research - 2006, -V. 34,-P. 440-443

35. Cea-del Rio C.A. M3 muscarinic acetylcholine receptor expression confers differential cholinergic modulation to neurochemically distinct hippocampal basket cell subtypes / Cea-del Rio C.A., Lawrence J.J., Tricoire L., Erdelyi F., Szabo G., McBain C.J. //Journal of Neuroscience - 2010, - V. 30, № 17 - p. 6011 - 6024

36. Cesa L.C. Specificity determinants of allosteric modulation in the neuronal nicotinic acetylcholine receptor: a fine line between inhibition and potentiation / Cesa L.C., Higgins C.A., Sando S.R., ICuo D.W., Levandoski M.M. // Mol Pharmacol. - 2011, - V. 7, - P. 765 - 773

37. Chan R.Y. An intronic enhancer containing an N-box motif is required for synapse- and tissue-specific expression of the acetylcholinesterase gene in skeletal muscle fibers / Chan R.Y., Boudreau-Larivie're C., Angus L.M., Mankal F.A., Jasmin B.J. // Neurobiology - 1999, - V. 96, - P. 4627 - 4632

38. Chen V.P. The PRiMA-linked cholinesterase tetramers are assembled from homodimers. Hybrid molecules composed of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase dimmers are up-regulated during development of chicken brain/ Chen V.P., Xie H.Q., Chan W. B., Leung K. W., Chan L., Choi R.Y., Bon S., Massoulie J., Tsim K.K. // The journal of biological chemistry - 2010, - V. 285,-P. 27265-27278

39. Chen V.P. The assembly of proline-rich membrane anchor (prima)-linked acetylcholinesterase enzyme glycosylation is required for enzymatic activity but not for oligomerization / Chen V.P., Choi R.Y., Chan W.B., Leung K.W., Guo J.Y., Chan G.L., Luk W.W., Tsim W.K. // The journal of biological chemistry -2011,-V. 286,-P. 32948-32961

40. Chitlaru T. Overloading and removal of N-glycosylation targets on human acetylcholinesterase: effects on glycan composition and circulatory residence time

/ Chitlaru T., Kronman C., Velan B., Shafferman A. // Biochem. J. - 2002, - V. 363,-p. 619-631

41. £okugra§ A.N. Butyrylcholinesterase: structure and physiological importance // Turkish Journal of Biochemistry - 2003, - V. 28, - P. 54 - 61

42. Cohen C. Effect of chemical modification of recombinant human acetylcholinesterase by polyethylene glycol on its circulatory longevity / Cohen C., Kronman C., Chitlaru T., Ordentlich A., Velan B., Shafferman A. // Biochem. Journal - 2001, - V. 357, -p. 795 - 802

43. Cummings J.L. The role of cholinergic agents in the management of behavioural disturbances in Alzheimer's disease // Neuropsychopharmacology -2000,-V. 3,-P. 21-29

46. Dani J. A. Overview of nicotinic receptors and their roles in the central nervous system // Biol Psychiatry - 2001, - V. 49, - P. 166 - 174

44. Darvesh S. Neurobiology of butyrylcholinesterase / Darvesh S. Hopkins D.A., Geula S. // Nature reviews neuroscience - 2004, - V. 4, - P. 131-138

45. Deprez P. Two heparin-binding domains are present on the collagenic tail of asymmetric acetylcholinesterase / Deprez P., Inestrosa N.C. // J Biol Chem. -1995, - V. 270, -P. 11043 - 11046

46. Deschenes-Furry J. The RNA-binding protein HuR binds to acetylcholinesterase transcripts and regulates their expression in differentiating skeletal muscle cells / Deschenes-Furry J., Belanger G., Mwanjewe J., Lunde J.A., Parks R.J., Perrone-Bizzozero N., Jasmin B.J. // Journal of Biological Chemistry -2005, - V. 280, - P. 25361-25368

47. Dori A. ARP, the Cleavable C-terminal peptide of "readthrough" acetylcholinesterase, promotes neuronal development and plasticity / Dori A., Soreq H. // Journal of Molecular Neuroscience - 2006, - V. 28, - P. 247 - 255

48. Dvir H. The synaptic acetylcholinesterase tetramer assembles around a polyproline II helix / Dvir H., Harel M., Bon S., Liu W., Vidal ML, Garbay C., Sussman J.L., Massoulie J., Silman I. // The EMBO Journal - 2004, - V. 23, - P. 4394 - 4405

48. Dvir H. Acetylcholinesterase: From 3D structure to function / Dvir H., Silman I., Harel M., Rosenberry T.L., Sussman J.L. // Chemico-Biological Interactions -2010,-V. 187,-P. 10-22

50. Farchia N. Peripheral site acetylcholinesterase blockade induces RACK1-associated neuronal remodeling/ Farchia N., Ofek K., Podoly E., Donge H., Xiange Y., Diamant S., Livnah O., Lie J., Hochnera B., Lue W.-Y., Soreq H. // Neurodegener Dis. - 2007, - V. 4, - P. 171 - 184

51. Farlow M. Controlled trial of tacrine in Alzheimer's disease / Farlow M., Gracon S.I., Hershey L.A. // J. Am. Med. Assoc. - 1992, - V. 268, - P. 2523 -2529

52. Feng G. Genetic analysis of collagen Q: roles in acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase assembly and in synaptic structure and function / Feng G., Krejci E., Molgo J., Cunningham J.M., Massoulie J., Sanes J.R // The Journal of Cell Biology - 1999, - V. 144, - P.1349 - 1360

53. Feng H.Y. A retrospective review of 15 patients with familial myasthenia 56. gravis over a period of 25 years / Feng H.Y., Liu W.B., Luo C.M., Yang L.X., Fang W., Qiu L., Huang X., Li Y., Huang R.X. // Neurological Science — 2011, — V. 5,-P. 234-245

54. Fuentes M.E. Control of acetylcholinesterase gene expression during myogenesis / Fuentes M.E., Taylor P. // Neuron - 1993, - V. 10, - P. 679 - 687

55. Funakoshi, H. Muscle-derived neurotrophin-4 as an activity-dependent trophic signal for adult motor neurons / Funakoshi, H., Belluardo, N., Arenas, E., Yamamoto, Y., Casabona, A., Persson, H., and Ibanez, C. F. // Science - 1995, -V. 268,-P. 1495 - 1499

56. Fu A. K. Muscle-derived neurotrophin-3 increases the aggregation of acetylcholine receptors in neuron-muscle co-cultures / Fu A. K., Ip, F. C., Lai, K. O., Tsim, K. W., // Neuroreport - 1997, - V. 8, - P. 3895 - 3900

57. Getman D.K. The human gene encoding acetylcholinesterase is located in the long arm of chromosome 7/ Eubanks J.H., Camp S., Evans G.A., Taylor P. //Am.

J. Hum. Genet. - 1992, - V. 51, - P. 170 - 177

100

58. GiacobiniE. Cholinesterase inhibitors stabilize Alzheimer's disease // Annails New York academy of science - 2006, - V. 45, - P. 321 - 327

59. Giacobini E. Cholinesterase inhibitors: new roles and therapeutic alternatives // Pharmacol Res. - 2004, - V. 50, - P. 433 - 440

60. Girard E. Butyrylcholinestrase and the control of synaptic responses in acetylcholinesterase knockout mice / Girard E., Bernard V., Krejci E. // Life Sciences - 2007, - V. 80, - p. 2380 - 2385

61. Grisaru D. Structural roles of acetylcholinesterase variants in biology and pathology /Grisaru D., Sternfeld M., Eldor A., Glick D., Soreq H. // Eur. J. Biochem. - 1999, - V. 264, - P. 672 - 686

62. Grisaru D. ARP, a peptide derived from the stress-associated acetylcholinesterase variant has hematopoietic growth promoting activities / Grisaru D., Deutsch V., Shapira M. // Mol. Med. - 2001, - V. 7, -p. 93-105

63. Grutter T. Nicotinic receptors in wonderland /Grutter Т., Changeux J.-P. // Trends Biochem. Sei. - 2001, - V. 26, - P. 459 - 462

64. Guarisco J.A. In vivo oxime administration does not influence Ellman acetylcholinesterase assay results / Guarisco J.A., O'Donnell J.C., Skovira J.W., McDonough J.H., Shih T.M. // Toxicol Mech Methods. - 2009, - V. 19, - P. 379 -385

65. Guerra M. Acetylcholinesterase and molecular interactions at the neuromuscular junction / Guerra M., Cartaud A., Cartaud J., Legay C. // Chemico-Biological Interactions - 2005, - V. 157, - P. 57 - 61

66. Gupta S. Discovery of dual binding site acetylcholinesterase inhibitors identified by pharmacophore modeling and sequential virtual screening techniques /Gupta S., Fallarero A., Järvinen P., Karlsson D., Johnson M.S., Vuorela P.M., Mohan C.G., // Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters - 2011, - V. 21, - P. 1105-1112

67. Haigh J.R. Advantages of the WRAIR whole blood Cholinesterase assay: comparative analysis to the micro-Ellman, Test-mate ChE, and Michel (DeltapH)

assays / Haigh J.R., Lefkowitz L.J., Capacio B.R., Doctor B.P., Gordon R.K. // Chem Biol Interact. - 2008, - V. 175, - P. 417 - 420

68. Harel M. Quaternary ligand binding to aromatic residues in the active-site gorge of acetylcholinesterase /Harel M., Schalk I., Eheret-Sabatier L., Bouet F., Goeldner M., Hirth C., Axelsen P.H., Silmanii I., Sussman J.L. // Proc. Natl. Acad. Sci. - 1993, - V. 90, - P. 9031 - 9035

69. Higuchi O. Molecular mechanisms underlying the formation of neuromuscular junction / Higuchi O., Yamanashi Y. // Brain Nerve - 2011, - V. 63, - P. 649 -655

70. Jarvie E.M. Potentiation by cholinesterase inhibitors of cholinergic activity in rat isolated stomach and colon /Jarvie E.M., Cellek S., Sanger G.J. // Pharmacol Res. - 2008, - V. 58, - P. 297 - 301

71. Johnson J.L. Inhibitors tethered near the acetylcholinesterase active site serve as molecular rulers of the peripheral and acylation sites / Johnson J.L., Cusack B., Hughes T.F., McCullough E.H., Fauq A., Romanovskis P., Spatola A.F., Rosenberry T.L. // BC Papers in Press - 2003, - V. 25, - P. 245 - 261

72. Jones C.K. Muscarinic and nicotinic acetylcholine receptor agonists and allosteric modulators for the treatment of Schizophrenia / Jones C.K., Byun N., Bubser M. // Neuropsychopharmacology - 2011, - V. 28, - P. 659 - 667

73. Joy X. Muscle induces neuronal expression of acetylcholinesterase in neuron-muscle, co-culture / Joy X., Jiang S., Roy C., Choi Y., Siow N.L., Lee H.C., David C., Wan C., Karl W., Tsim K. // The Journal of Biological Chemistry - 2003, - V. 46, - P. 45435 -45444

74. Karamova N.S. Genotoxicity study of a new tetraalkylammonium derivative of 6-methyluracil (agent No. 547). / Karamova N.S., Ivanchenko O.B., Ilinskaya O.N., Zobov V.V., Reznik V/S. //. Arch Toxicol. - 2002, - V. 76, - P. 122 - 126

75. Kawashima K. Extraneuronal cholinergic system in lymphocytes / Kawashima K., Fujii T. // Pharmacol. Ther. - 2000, - V. 86, - P. 29 - 48

76. Knapp M.J. 30 week randomized controlled trial of high-dose tacrine in patients with Alzheimer's disease / Knapp M.J., Knopman D.S., Solomon P.R. // J. Am. Med. Assoc. - 1994, - V. 271, -P. 985 -991

77. Kovarik Z. Acetylcholinesterase active centre and gorge conformations analysed by combinatorial mutations and enantiomeric phosphonates / Kovarik Z., Radi' Z., Berman H.A., Simeon-Rudolf V., Reineer E., Taylor P. // Biochemical Journal - 2003, - V. 373, - P.33 - 40

78. Krogh A. Using database matches with for HMMGene for automated gene detection in Drosophila // Genome Res. - 2000, - V. 10, - P. 523 - 528

79. Kua J. Studying enzyme binding specificity in acetylcholinesterase using a combined molecular dynamics and multiple docking approach / Kua J., Zhang Y., McCammon J.A. //Journal of Ammerican Chemistry - 2002, - V. 124, - P. 8260 -8267

80. Kua J. Studying the roles of W86, E202, and Y337 in binding of acetylcholine to acetylcholinesterase using a combined molecular dynamics and multiple docking approach / Kua J., Zhang Y., Eslami A.C., Butler J.R., McCammon J.A. // Protein Science - 2003, - V. 12, - P. 2675 - 2684

81. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage // Nature - 1970, - V. 227, - P. 680 - 685

82. Le Novere N. Models of the extracellular domain of the nicotinic receptors and agonist- and Ca2+ -binding sites /Le Novere N., Grutter T., Changeux J.-P. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA - 2002, - V. 99, - P. 3210 - 3215

83. Legay C. Expression of a cDNA-encoding glycolipid-anchored form of rat acetylcholinesterase / Legay C., Bon S., Massoli'e J. // FEBS Letters - 1993, - V. 315,-P. 163-166

84. Legay C. Cloning and expression of a rat acetylcholinesterase subunit: generation of multiple molecular forms and complementarity with a Torpedo collagenic subunit / Legay C., Bon S., Vernier P., Coussen F., Massoli'e J. // Journal of Neurochem. - 1993, - V. 60, - P. 337 - 345

85. Legay C. Developmental regulation of acetylcholinesterase transcripts in the mouse diaphragm: alternative splicing and focalization /Legay C., Huchet M., Massoli'e J., Changeux J.-P. // European Journal of Neuroscience - 1995, - V. 7, -P. 1803- 1809

86. Legay C. Stability and secretion of acetylcholinesterase forms in skeletal muscle cells / Legay C., Mankal F.A., Massoli'e, J., Jasmin B.J. // J. Neurosci. -1999, - V. 19, - P. 8252 - 8259

87. Legay C. Why so many forms of acetylcholinesterase? // Microscopy research technique - 2000, - V. 49, - P. 56 - 72

88. Lester D.B., Rogers T.D., Blaha C.D. Acetylcholine-dopamine interactions in the pathophysiology and treatment of CNS disorders / Lester D.B., Rogers T.D., Blaha C.D. //CNS Neurosci Ther. - 2010, - V. 16, - P. 137 - 162

89. Leung K. W. Restricted localization of proline-rich membrane anchor (PRiMA) of globular form acetylcholinesterase at the neuromuscular junctions -contribution and expression from motor neurons /Leung K. W., Xie H. Q., Chen V.P., Mok M.K., Chu G.Y., Choi R.Y., Tsim K.K. // FEBS Journal - 2009, - V. 276, -p. 3031 -3042

90. Lev-Lehman E. Immature human megakaryocytes produce nuclear-associated acetylcholinesterase /Lev-Lehman E., Deutsch L., Eldor A. // Blood - 1997, - V. 89,-P. 3644-3653

91. L'Honore A. Identification of a new hybrid serum response factor and myocyte enhancer factor 2-binding element in MyoD enhancer required required for MyoD expression during myogenesis / L'Honore A., Rana V., Arsic N., Franckhauser C., Lamb N.J., Fernandez A. // Mol Biol Cell - 2007, - V. 18, - P. 1992 - 2001

92. Li Y. REMO: A new protocol to refine full atomic protein models from C-alpha traces by optimizing hydrogen-bonding networks / Li Y., Zhang Y. // Proteins - 2009, - V. 76, - P. 665 - 676

93. Li Y. Promoter elements and transcriptional control of Mouse

Acetylcholinesterase gene /Li Y., Camp S., Rachinsky T.,Getman D.,Taylor P. //

Journal of Biological Chemistry. - 1993, - V. 268, - P. 3563 - 3572

104

94. Li Y. Gene Structure of Mammalian Acetylcholinesterase /Camp S., Rachinsky T.,Getman D.,Taylor P. // Journal of Biological Chemistry. - 1991. - V. 266, - P. 23083 -23090

95. Liua W. Novel mutation and multiple mutations found in the human butyrylcholinesterase gene /Liua W., Chenga J., Iwasakia A., Imanishia H., Hada T. // Clinica Chimica Acta - 2002, - V. 326, - P. 193 - 199

96. Mack A. The key role of butyrylcholinesterase during neurogenesis and neural disorders: an antisense-5'butyrylcholinesterase-DNA study / Mack A., Robitzki A. // Progress in Neurobiology - 2000, - V. 60, - P. 607 - 628

97. Makalowska I. GeneMachine: gene prediction and sequence annotation /Makalowska I., Ryan J.F., Baxevanis A.D. // Bioinformatics - 2001, - V. 17, - P. 843 - 844

98. Martinez-Pena Y. Nicotinic Acetylcholine Receptor Stability at the NMJ Deficient in a-Syntrophin In Vivo /Martinez-Pena Y., Valenzuela I., Mouslim C., Pires-Oliveira M., Adams M.E., Froehner S.C., Aka aboune M. // J Neurosci. -2011,-V. 31,-P. 15586- 15596

99. Massoulie J. Cholinesterases and the basal lamina at vertebrate neuromuscular junctions /Massoulie J., Millard C.B. // Current Opinion in Pharmacology - 2009, -V. 9,-P. 316-325

100. Massouli'e J. The C-terminal peptides of acetylcholinesterase: Cellular trafficking, oligomerization and functional anchoring / Massouli'e J., Bon S., Perrier N., Falasca C. // Chemico-Biological Interactions - 2005, - V. 157, - P. 3 -14

101. McGehee D.S. Physiological diversity of nicotinic acetylcholine receptors expressed by vertebrate neurons / McGehee D.S., Role L.W. // Ann. Rev. Physiol. - 1995,-V. 57,-P. 521 -546

102. McCahill M. The RACK1 Scaffold protein: a dynamic cog in cell response / McCahill M., Warwicker J., Bolger G.B., Houslay M.D., Yarwood S.J. // Nolecular pharmacology - 2002, - V. 62, - p. 1261 - 1273

103. Meshorer E. Combinatorial complexity of 5' alternative acetylcholinesterase transcripts and products / Meshorer E., Toiber D., Zure D., Sahly I., Dori A., Cagnano E., Schreiber L., Grisaru D., Francois T., and Soreq H. // Journal of Biological Chemistry. - 2004. - V. 279, - P. 29740 - 29751

104. Meshorer E. SC35 promotes sustainable stress-induced alternative splicing of neuronal acetylcholinesterase mRNA /Meshorer E., Bryk B., Toiber D., Cohen J., Podoly E., Dori A., Soreq H. // Molecular Psychiatry - 2005, - V. 10, - P. 985 -997

105. Meshorer E. Virtues and woes of AChE alternative splicing in stress-related neuropathologies /Meshorer E., Soreq H. // TRENDS in Neurosciences - 2006, -V. 29,-P. 216-224

106. Merika M. Enhanceosomes / Merika M., Thanos D. // Curr. Opin. Genet. Dev. -2001,-V. 11,-P. 205 -208

107. Michel R.N. Neural regulation of acetylcholinesterase mRNAs at mammalian neuromuscular synapses /Michel R.N., Vu C.Q., Tetzlaff W., Jasmin B.J. // The Journal of Cell Biology - 1994, - V. 4, - P. 1061 - 1069

108. Milkani E. Analytical direct detection of acetylcholinesterase inhibitor binding with an enzyme-based surface plasmon resonance sensor / Milkani E., Lambert C.R., McGimpsey W.G. // Biochemistry - 2011, - V. 408, - P. 212 - 219

109. Mor I. Acetylcholinesterase-R increases germ cell apoptosis but enhances sperm motility / Mor I., Sklan E.H., Podoly E., Pick M., Kirschner M., Yogev L., Bar-Sheshet Itach S., Schreiber L., Geyer B., Mor T., Grisaru D., Soreq H. // J. Cell. Mol. Med. - 2008, - V. 12, - P. 479 - 495

110. Monte-Millán M. Dual Binding Site Acetylcholinesterase Inhibitors. Potential New Disease-Modifying Agents for AD /Monte-Millán M., García-Palomero E., Valenzuela R., Usán P., Austria C., Muñoz-Ruiz P., Rubio L., Dorronsoro I., Martinez A., Medina M. // Journal of Molecular Neuroscience - 2006, - V. 30, -P. 85-87

111. Morris J. Metrifonate benefits cognitive, behavioral, and global function in patients with Alzheimer's disease /Morris J., Cyrus P., Orazem J. // Neurology -1998,-V. 50,-P. 1222- 1230

112. Nalivaeva N.N. Post-translational modifications of proteins: Acetylcholinesterase as a model system / Nalivaeva N.N., Turner A.J. // Proteomics - 2001, - V. 1,-P. 735 -747

113. Nieto-Cerôn S. Thymus acetylcholinesterase activity is reduced in mice with congenital muscular dystrophy/ Nieto-Cerôn S., Campo L.F., Delgado E.M., Vidal C.J., Campoy F.J // Mol Neurosci. - 2006, - V. 30, - P. 49 - 50

114. Nijholt I. Stress-induced alternative splicing of acetylcholinesterase results in enhanced fear memory and long-term potentiation / Nijholt I., Farchi N., Kye M., Sklan E.H., Shoham S., Verbeure В., Owen D., Hochner В., Spiess J., Soreq H., Blank T. // Mol Psychiatry - 2004, - V. 2, - P. 174 - 183

115. Noureddine H. Acetylcholinesterase associates differently with its anchoring proteins ColQ and PRiMA / Noureddine H., Carvalho S., Schmitt C., Massoulie J., Bon S. // Journal of Bilolgical Chemistry - 2008, - V. 283, - P. 20722 - 20732

116. Noureddine H. Assembly of acetylcholinesterase tetramers by peptidic motifs from the proline-rich membrane anchor, PRiMA / Noureddine H., Schmitt C., Liu W., Garbay C., Massoulie J., BonS. //The journal of biological chemistry - 2007, -V. 282, p. 3487-3497

117. Ordentlich A. Substrate inhibition of acetylcholinesterase: residues affecting signal transduction from the surface to the catalytic center / Ordentlich A., Kronman C., Grosfeld H., Leitner M., Flashner Y., Cohen S., Barak D., Ariel N., Shafferman A., Velan B. // The EMBO Journal - 1992, - V. 11, - P. 3561 - 3568

118. Paoletti F. Acetylcholinesterase in murine erythroleukemia (Friend) cells: evidence for megakaryocyte-like expression and potential growth-regulatory role of enzyme activity / Paoletti F., Mocali A., Vannucchi A.M. // Blood - 1992, -V.79, -p. 2873 -2879

119. Pan Y. Model of human butyrylcholinesterase (BChE) tetramer by homology modeling and dynamics simulation / Pan Y., Muzykaa J.L., Zhan C.G. // J Phys Chem B. - 2009, - V. 113, - P. 6543 - 6552

120. Parasuraman S. Effect of cleistanthin A and B on adrenergic and cholinergic receptors /Parasuraman S., Raveendran R. // Pharmacogn Mag. - 2011, - V. 7, № 27, - P. 243 - 247

121. Parmo-Folloni F. Two new mutations of the human BCHE gene (IVS3-14T>C and L574/&X576) /Parmo-Folloni F., Nunesa K., Lepienskia L.M., Mikamia L.R., Souzaa R.R., Tsuneto L.T., Petzl-Erler M.L., Chautard-Freire-Maia

E.A. // Chemico-Biological Interactions - 2008, - V. 175 - p. 135 - 137

122. Parnas M.L. Concordance of butyrylcholinesterase phenotype with genotype / Parnas M.L., Procter M., Schwarz M.A., Mao R., Gren D.G // Am J Clin Pathol -2011, - V. 135-p. 271 -276

123. Parnetti L. Changes in CSF acetyl- and butyrylcholinesterase activity after long-term treatment with AChE inhibitors in Alzheimer's disease / Parnetti L., Chiasserini D., Andreasson U., Ohlson M., Huls C., Zetterberg H., Minthon L., Wallin A.K., Andreasen N., Talesa V.N., Blennow K. // Acta Neurol Scand. -2011, - V. 124,-P. 122- 129

124. Patrick Masson P. Kinetic analysis of butyrylcholinesterase-catalyzed hydrolysis of acetanilides / Patrick Masson P., Froment M.T., Gillon E., Nachon

F., Darvesh S., Schopfer L.M. // Biochimica et Biophysica Acta - 2007, - V. 1774, -P. 1139-1147

125. Peng H.B. Acetylcholinesterase clustering at the neuromuscular junction involves perlecan and dystroglycan / Peng H.B., Xie H., Rossi S.G., Rotundo R.L. // The Journal of Cell Biology - 1999, - V. 145, - P. 911 - 921

126. Perry C. Complex regulation of acetylcholinesterase gene expression in human brain tumors /Perry C., Sklan E.H., Birikh K., Shapira M., Trejo L., Eldor A., Sore H. // Oncogene - 2002, - V. 21, - P. 8428 - 8441

127. Perrier A.L. PRiMA: the membrane anchor of acetylcholinesterase in the brain / Perrier A.L., Massoulie J., Krejci E. // Neuron - 2002, - V. 33, - P. 275 -285

128. Perry C. CREB Regulates AX3-R-Induced Proliferation of Human Glioblastoma Cells /Perry C., Sklan E.H., Soreq H. // Neoplasia - 2004, - V., -p. 279-286

129. Petrov K.A. Different sensitivity of miniature endplate currents of the rat extensor digitorum longus, soleus and diaphragm muscles to a novel acetylcholinesterase inhibitor C-547 / Petrov K.A., Kovyazina I.V., Zobov V.V., Bukharaeva E.A., Nikolsky E.E., Vyskocil F. // Physiol. Res. - 2006, - V. 55, - P. 585 -589

130. Pezzementi L. Evolution of Acetylcholinesterase and Butyrylcholinesterase in the Vertebrates: An Atypical Butyrylcholinesterase from the Medaka Oryzias latipes / Pezzementi L., Nachon F., Chatonne A. // PLoS ONE - 2011, - V. 6, - P. 1-16

131. Podoly E. The butyrylcholinesterase K variant confers structurally derived risks for Alzheimer pathology / Podoly E., Shalev D.E., Shenhar-Tsarfaty S., Bennett E.R., Assayag E.B., Wilgus H., Livnah O., Soreq H. // The journal of biological chemistry - 2009, - V. 284, - P. 17170 - 17179

132. Pontius J. U., Wagner L., Schuler G. D. UniGene: a unified view of the transcriptome / Pontius J. U., Wagner L., Schuler G. D. // National Center for Biotechnology Information. - 2003

133. Radi Z. Molecular basis of interactions of cholinesterase with tight binding inhibitors /Radi Z., Manetsch R., Krasi'nski A., Raushel J., Yamauchi J., Garcia C., Kolb H., Sharpless K.B., Taylor P. // Chemico-Biological Interactions - 2005, -V. 157-158,-P. 133-141

134. Radina M. Evidence for nonacetylcholinesterase targets of organophosphorus nerve agent: supersensitivity of acetylcholinesterase knockout mouse to VX lethality / Radina M., Zerlin M., Ullmer C., Pereira E., Lubbert H., Albuquerque

E., Maelicke A. // The journal of pharmacology and experimental therapeutics -2001,-V. 299,-P. 528-535

135. Randall W. R. Cloning and analysis of chicken acetylcholinesterase transcripts from muscle and brain / Randall W. R., Rimer M., Gouch N. R. // Biochimica et Biophysica Acta - 1994, - V. 121, - P. 453 - 456

136. Randall W. R. Cellular expression of a cloned, hydrophilic, murine acetylcholinesterase: evidence of palmitoylated membrane-bound forms // J. Biol. Chem. - 1994, - V. 269, - P. 12367 - 12374

137. Raskind M. The effects of metrifonate on the cognitive, behavioral and functional performance of Alzheimer's disease patients /Raskind M., Cyrus P., Ruzicka B„ Gulanski B.I. // J. Clin. Psychol. - 1999, - V. 60, - P. 318 - 325

138. Roelants F. The effect of a lidocaine test dose on analgesia and mobility after an epidural combination of neostigmine and sufentanil in early labor /Roelants F., Mercier-Fuzier V., Lavand'homme P.M. // Anesth Analg. - 2006, - V. 103, 1534 -1539

139. Ronco C. Huprine derivatives as sub-nanomolar human acetylcholinesterase inhibitors: from rational design to validation by x-ray crystallography / Ronco C., Carletti E., Colletier J.P., Weik M., Nachon F., Jean L., Renard P.Y. // ChemMedChem. - 2011, - V. 34, - P. 43-56

140. Rosenberry T.L. Acetylcholinesterase // Adv Enzymol Relat Areas Mol Biol. - 1975,-V. 43, - P.103 - 218

141. Rosenberry T.L. Strategies to resolve the catalytic mechanism of acetylcholinesterase // J Mol Neurosci - 2010, - V. 40, - P. 32 - 39

142. Rosenberry T.L. Strategies to resolve the catalytic mechanism of acetylcholinesterase // Journal of molecular neuroscience - 2010, - V. 40, - P. 32 -39

143. Roesenberry T. L. Acetylcholinesterase // In advances in enzymology and related areas of molecular biology - 1975, - V. 43, - P. 103-218

144. Rotundo R. Expression and localization of acetylcholinesterase at the neuromuscular junction // Journal of Neurocytology - 2003, - V. 32, - P. 743 -766

145. Roy A. I-TASSER: a unified platform for automated protein structure and function prediction / Roy A., Kucukural A., Zhang Y. // nature protocols - 2010, -V. 5,-P. 725 -738

146. Sa'ez-Valero J. Altered glycosylation of cerebrospinal fluid butyrylcholinesterase in Alzheimer's disease / Sa'ez-Valero J., Small D.H. // Brain Research - 2001, - V. 889, - P. 247 - 250

147. Salamone G. Cholinergic modulation of dendritic cell function / Salamone G., Lombardi G., Gori S., Nahmod K., Jancic C., Amaral M.M., Vermeulen M., Español A., Sales M.E., Geffner J. // J Neuroimmunol. - 2011, - V. 236, - P. 47 -56

148. Samochocki M. Galantamine is an allosterically potentiating ligand of neuronal nicotinic but not of muscarinic acetylcholine receptors / Samochocki M., Hoffle A., Fehrenbacher A., Jostock R., Ludwig J., Christner C. //The journal of pharmacology and experimental therapeutics - 2003, - V. 305, - P. 1024 - 1036

149. Sambrook, J. Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Nolan, C., ed) / Sambrook, J., Fritsh, E. F., Maniatis T. // Cold Spring Harbor, NY - 1989, - V. 1, -P. 7.10-7.11

150. Sanes J.R. Development of the vertebrate neuromuscular junction /Sanes J.R., Lichtman J.W. // Annu. Rev. Neurosci. - 1999, - V. 22, - P. 389 - 442

151. Shafferman A. Functional requirements for the optimal catalytic configuration of the AChE active center / Shafferman A., Barak D., Kaplan D., Ordentlich A., Kronmana C., Velan B. // Chemico-Biological Interactions - 2005, -V. 157, - P.123 - 131

152. Shakil S. Interaction of human brain acetylcholinesterase with

cyclophosphamide: a molecular modeling and docking study / Shakil S., Khan R.,

Tabrez S„ Alam Q„ Jabir N.R., Sulaiman M.I., Greig N.H., Kamal M.A. // CNS

Neurol Disord Drug Targets. - 2011, - V. 27, - P 674 - 681

111

153. Shan W.J. Synthesis, biological evaluation of 9-N-substituted berberine derivatives as multi-functional agents of antioxidant, inhibitors of acetylcholinesterase, butyrylcholinesterase and amyloid-(3 aggregation /Shan W.J., Huang L„ Zhou Q„ Meng F.C., Li X.S. // Eur J Med Chem. - 2011, - V. 5, - P. 99 -112

154. Shapira M. Genomic and transcriptional characterization of the human AChE locus: complex involvement with acquired and inherited diseases /Shapira M., Grant A., Korner M., Soreq H. // IMAJ - 2000, - V. 2, - P. 470 - 473

155. Shapira M. A transcription-activating polymorphism in the AChE promoter associated with acute sensitivity to anti-acetylcholinesterases /Shapira M., Tur-Kaspa I., Bosgraaf L., Livni N, Grant A.D., Grisaru D., Korner M., Ebstein R.P., Soreq H. // Hum. Mol. Genet. - 2000, - V. 9, - P. 1273 - 1281

156. Sikorav J.-L. Complex alternative splicing of acetylcholinesterase transcripts in Torpedo electric organ; Primary structure of the precursor of the glycolipid-anchored dimeric form. /Sikorav J.-L., Duval N., Anselmet A., Bon S., Krejci E., Legay C., Osterlund M., Reimund B., Massouli'e J. // EMBO. J. - 1988, - V. 7, -P. 2983 -2993

157. Silman I. Acetylcholinesterase: 'classical' and 'non-classical' functions and pharmacology /Silman I., Sussman J.L. // Current Opinion in Pharmacology -

2005,-V. 5,-P. 293 -302

158. Silva C. Molecular modeling, docking and ADMET studies applied to the design of a novel hybrid for treatment of Alzheimer's disease / Silva C., Campo V.L., Carvalho I., Taft C.A. / Journal of Molecular Graphics and Modelling -

2006,- V. 25,-P. 169-175

159. Sklan E.H. RACK1 has the nerve to act: structure meets function in the nervous system /Sklan E.H., Podoly E., Soreq H. // Progress in Neurobiology -2006,- V. 78,-P. 117-134

160. Srivatsan M. An analysis of acetylcholinesterase sequence for predicting mechanisms of its non-catalytic actions // Bioinformation - 2006, - V. 1, - P. 281 -284

161. Sternfeld M. Acetylcholinesterase enhances neurite growth and synapse development through alternative contributions of its hydrolytic capacity, core protein, and variable C termini /Sternfeld M., Ming G., Song H., Sela K., Timberg R, Poo M., Soreq H. // The Journal of neuroscience - 1998, - V. 18, - P. 1240 -1249

162. Sternfeld M. Excess "read-through" acetylcholinesterase attenuates but the "synaptic" variant intensifies neurodeterioration correlates / Sternfeld M., Shoham S., Klein O., Flores-Flores C., Evron T., Idelson G.H., Kitsberg D., Patrick J.W., Soreq H. // PNAS - 2000, - V. 97, - P. 8647 - 8652

163. Soreq H. Acetylcholinesterase: new roles for an old actor /Soreq H., Seidman S. // Nat. Rev. Neurosci. - 2001, - V. 2, - P. 294 - 302

164. Svoboda Z. Galantamine acetylcholinesterase activity in rat brain influenced by L-carnitine /Svoboda Z., Kvétina J., Herink J., Bajgar J., Bartosová L., Palickac V., Zivnyc P. // Biomed Pap Med - 2005, - V. 149, - P. 335 - 337

165. Tamuleviciute A. Muscarinic receptors: electrifying new insights /Tamuleviciute A., Brookfield R// J Physiol. - 2011, - V. 15, - P. 589 - 595

166. Tian Y. An electrochemical platform for acetylcholinesterase activity assay and inhibitors screening based on Michael addition reaction between thiocholine and catechol-terminated SAMs / Tian Y., Ye S., Shi X., Jing L., Liang C., Xian Y. // Analyst. - 2011, - V. 13, - P. 986 - 993

167. Thullbery M.D. Differential localization of acetylcholinesterase in neuronal and non-neuronal cells /Thullbery M.D., Cox H.D., Schule T., Thompson C.M., George K.M. // J Cell Biochem - 2005, - V. 96, - P. 599 - 610

168. Tseng Y.Y. Protein Function and Binding Profile via Matching of Local Evolutionary and Geometric Surface Patterns // Tseng Y.Y., Dundas J., Liang J./ J. Mol. Biol. - 2009, - V. 387, - P. 451-464

169. Tsim K.K. Expression and localization of PRiMA-linked globular form acetylcholinesterase in vertebrate neuromuscular junctions /Tsim K.K., Leung K. W„ Mok K.W., Chen V.P., Zhu K.Y., Zhu T.T., Guo J.Y., Bi W.C., Zheng Y.Z.,

Lau T.W., Xie H.Q., ChoiC.Y. // Journal of Molecular Neuroscience - 2010, - V. 40,-P. 40-46

170. Vallès A.S. Chaperoning a7 neuronal nicotinic acetylcholine receptors /Vallès A.S., Barrantes F.J. // Biochim Biophys Acta. - 2011, - V. 22, - P. 231 - 239

171. Velan B. Substrate inhibition of acetylcholinesterase: residues affecting signal transduction from the surface to the catalytic center /Velan B., Ordentlich A., Kronman C., Grosfeld H., Leitner M., Flashner Y., Cohen S., Barak D., Ariel N., Shafferman A. // The EMBO Journal - 1992, - V. 11, - P. 3561 - 3568

172. Velan B. Structural modifications of the loop in human acetylcholinesterase /Velan B., Barak D., Arie N., Leitner M., Bino T., Ordentlich A., Shafferman A. // FEBS Letters - 1996, - V. 395, - P. 22 - 28

173. Vigny M. Active-site catalytic efficiency of acetylcholinesterase molecular forms in Electrophorus, Torpedo, Rat and Chicken / Vigny M., Bon S., Massoulie J., Leterrier F.C. // Eur. J. Biochem. - 1978, - V. 85, - P. 317 - 323

174. Wang M. Characterization and prediction of alternative splice sites / Wang M., Marin A. // Gene. - 2006. -V. 366, - P. 219-227

175. Wille T. Evaluation of 6,6'-dithionicotinic acid as alternative chromogen in a modified Ellman method-comparison in various species / Wille T., Thiermann H., Worek F. // Toxicol Mech Methods. - 2010, - V. 21, № 7, - P. 533 - 537

176. Woodruff-Pale D.S. Galantamine: effect on nicotinic receptor binding, acetylcholinesterase inhibition, and learning / Woodruff-Pak D.S., Vogel R.W., WenkG.L. // PNAS - 2001, - V. 98, - P. 2089 - 2094

177. Wu S. LOMETS: A local meta-threading-server for protein structure prediction / Wu S., Zhang Y. // Nucleic Acids Research - 2007, - V. 35, - P. 3375 -3382

178 Wu J. Naturally-expressed nicotinic acetylcholine receptor subtypes / Wu J., Lukas R.J. // Biochem Pharmacol. - 2011, - V. 82, - P. 800 - 807 179. Xie H.Q. Transcriptional regulation of proline-rich membrane anchor (PRiMA) of globular form acetylcholinesterase in neuron: an inductive effect of

neuron differentiation / Xie H.Q., Choi C.Y., Leung K.W., Chen V.P., Chu K.Y., Tsim K.K. // British research - 2009, - V. 1265, - P. 13 - 23

180. Xie H.Q. PRiMA directs a restricted localization of tetrameric AChE at synapses / Xie H.Q., Leung K.W., Chen V.P., Chan G.L., Xu S. L., Guo A.Y., Zhu K.Y., Zheng Y.Z., Bi C.W., Zhan Y.X., Chan K.P., Choi R.Y., Tsim K.K. // Chemico-Biological Interactions - 2010, - V. 187, - P. 78 - 83

181. Xie H.Q. Targeting acetylcholinesterase to membrane rafts. A function mediated by the proline-rich membrane anchor (PRiMA) in neurons / Xie H.Q., Liang D., Leung K.W., Chen V.P., Zhu K.Y., Chan W.K., Choi R.Y., Massoulie J., Tsim K.K. // The journal of biological chemistry - 2010, - V. 285, - P. 11537 -11546

182. Xu Y. Flexibility of aromatic residues in the active-site gorge of acetylcholinesterase: X-ray versus Molecular Dynamics / Xu Y., Colletier J.-P., Weik M., Jiang H., Moult J., Silman I., Sussman J.L. // Biophysical Journal -2008,-V. 95,-P. 2500-2511

183. Yao Q. Muscarinic acetylcholine receptor subtype expression in type vestibular hair cells of guinea pigs /Yao Q. Cheng H., Guo C., Zhou T., Huang X., Kong W. //J Huazhong Univ Sei Technolog Med Sei. - 2011, - V. 31, - P. 682 -686

184. Yoon S.Y. Intrathecal neostigmine reduces the zymosan-induced inflammatory response in a mouse air pouch model via adrenomedullary activity: involvement of spinal muscarinic type 2 receptors / Yoon S.Y., Kwon Y.B., Kim H.W., Roh D.H., Kang S.Y., Kim C.Y., Han H.J., Kim K.W., Yang I.S., Beitz A.J., Lee J.H. // Neuropharmacology - 2005, - P. 49, - P. 275 - 282

185. Yoon M.H. Pharmacologic interaction between cannabinoid and either Clonidine or neostigmine in the rat formalin test / Yoon M.H., Choi J.I. // Anesthesiology - 2003, - V. 99, - P. 701 - 707

186. Zhang Y. Role of the catalytic triad and oxyanion hole in acetylcholinesterase

catalysis: an ab initio QM/MM Study / Zhang Y., Kua J., McCammon J.A. //

Journal of Am. Chem. Soc. -2002,-V. 124, - P.10572 - 10577

115

187. Zhang D. The association of tetrameric acetylcholinesterase with ColQ tail: a block normal mode analysis / Zhang D., McCammon J.A. // PLoS Computational Biology - 2005, - V. 1 - p. 0484 - 0491

188. Zhang H.L. Mechanism of acetylcholine receptor cluster formation induced by DC electric field / Zhang H.L., Peng H.B. // PLoS One. - 2011, - V. 6, № 10, -P. 804-811

189. http: //www.ncbi.nlm.nih.gov/Genbank

190. http: //www.ncbi.nlm.nih.gov/unigene