Клиническое течение и особенности местного иммунитета при вульвовагинальном кандидозе у беременных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.01, кандидат медицинских наук Мальбахова, Екатерина Тимуровна

• Мальбахова, Екатерина Тимуровна
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Мальбахова, Екатерина Тимуровна

Список использованных сокращений.

Введение.

Глава 1. Проблема вульвовагинального кандидоза в современном акушерстве и гинекологии (обзор литературы).

Глава 2. Материалы и методы исследования.

Глава 3. Результаты собственных исследований.

3.1 Клиническая характеристика обследованных женщин

3.2. Течение беременности и родов у женщин с ВВК.

3.3. Особенности течения ВВК у беременных.

3.4. Исследование обсемененности грибами влагалища, родового и видового состава дрожжевой микрофлоры у беременных. Оценка корреляции этих показателей с тяжестью течения

3.5. Оценка чувствительности дрожжей к ряду противогрибковых препаратов; сравнение с ретроспективными данными за

3.6. Исследование некоторых показателей местного иммунитета во взаимосвязи с течением ВВК у беременных

3.7. Исследование некоторых биохимических показателей во влагалищном отделяемом во взаимосвязи с течением ВВК у беременных

3.8. Оценка эффективности проводимого лечения ВВК у беременных.

Глава 4. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническое течение и особенности местного иммунитета при вульвовагинальном кандидозе у беременных»

Актуальность темы

Вульвовагинальный кандидоз наиболее часто встречается среди женщин детородного возраста, причем по данным I.D. Sobel, 75% женщин в течение жизни имеют хотя бы один, а 40-45% — два и более эпизода кандидоза мочеполовых органов [Sobel J.D., 2000]. Особое внимание уделяют хронической рецидивирующей форме вульвовагинального кандидоза, так как от 5 до 15% женщин репродуктивного возраста страдают этим заболеванием, причем число таких случаев неуклонно растет, а терапия представляет большие трудности [Климко Н.Н., Мирзабалаева А.К. с соавт., 2007]. Особенностью данной инфекции является длительное течение, возможность распространения на другие органы и системы с развитием в 20-30% случаев генерализованных форм кандидоза у иммунокомпроментированных больных [Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В., 2000]. Факторами, способствующими развитию дрожжевой инфекции, считают: наличие основных заболеваний (инфекционных, эндокринопатических, аутоиммунных и др.); механические травмы; химические факторы (применение кортикостероидов, цитостатиков, антибиотиков, оральных контрацептивов); физиологические факторы [Прилепская В.Н., 2006]. Среди физиологических факторов к наиболее важным относится беременность. Установлено, что с наступлением беременности вероятность возникновения кандидоза влагалища увеличивается в несколько раз и составляет 30-40%) [Орджоникидзе Н.В., 2004]. Причинами этого считают резкое изменение местного иммунитета и уровня секретируемых гормонов, однако многое неизвестно в механизмах развития дрожжевого вульвовагинита [Mendling W., 2007]. Так, например, до сих пор не ясно, какой из показателей иммунитета является наиболее значимым, и не доказано, какими факторами обусловлен переход симбиотической дрожжевой культуры в патогенную, а острого течения вульвовагинита - в хроническое.

Из всего множества факторов местного иммунитета можно выделить несколько из них, которые непосредственно взаимодействуют с клетками оппортунистических дрожжей — это фагоцитирующие клетки [Nomanbhoy F et al., 2002], иммуноглобулины^ВагошБе et al., 2004] и антимикробные пептиды (АМП - эндогенные антибиотики) [Valore E.V. et al., 2002, 2006]. Оценку фагоцитоза нейтрофилами и макрофагами принято проводить in vitro [Vonk, Alieke G. et al., 2002], однако нам не удалось обнаружить публикаций, посвященных действию этих клеток на дрожжи in vivo. Известна особенность иммунитета слизистых оболочек, относящаяся к преимущественной продукции секреторного IgA [Сухих Г.Т, Ванько JLB., 2003], однако в секретах слизистых оболочек половых путей человека содержится больше IgG, чем slgA [Mestecky, J. et al., 2005]. Но данные о взаимосвязи уровней иммуноглобулинов и кандиданосительством при ВВК немногочисленны и противоречивы [de Carvalho R.J. et al., 2003; Kurnatowska A. et al., 2002; Mestecky, J. et al., 2005].

Однако и фагоцитоз и иммуноглобулины давно изучаемые и широко известные параметры иммунитета, а АМП и их действие как объект исследования в медицинских науках стали использоваться не так давно и изучены мало.

В последние десятилетия с ростом числа и разнообразия иммунодефицитных состояний в человеческой популяции параллельно происходит переход микроорганизмов из категории сапротрофов в категорию условно патогенных. В 1980 г. было известно 10 видов 4-х родов клинически значимых дрожжей [Jawetz Е., 1980], в 1987 г. — 18 видов 5-ти родов [Hurley R., 1987], а в 1998 г. - уже 36 видов 9-ти родов [Ahearn D.G., 1998]. Наиболее часто слизистые оболочки гениталий населяют дрожжи рода Candida, особенно С. albicans, однако, встречаются также Rhodotorula sp., Saccharomycopsis sp., Pichia sp., а возможно и многие другие. Учитывая растущий список клинически значимых видов диагностика вульвовагинального кандидоза, основанная только на клинических проявлениях, без применения лабораторных исследований, таких как микроскопия отделяемого и культуральное исследование, ведет не только к неадекватной терапии и увеличению числа резистентных штаммов, но и к росту хронических, рецидивирующих форм заболевания.

На основании вышеизложенного очевидно, что периодическое мониторирование родовой/ видовой принадлежности и чувствительности штаммов дрожжей, выделяемых от пациентов с острым и хроническим вульвовагинитом имеет важное фундаментальное и прикладное значение. Изучение взаимосвязи между обсемененностью, тяжестью течения и некоторыми показателями иммунитета должно способствовать уточнению механизмов трансформации симбиотической дрожжевой микрофлоры в патогенную и уточнить звенья патогенеза данного заболевания.

Цель и задачи исследования

Цель исследования: оптимизация тактики ведения беременных женщин с вульвовагинальным кандидозом на основании определения взаимосвязи между клиническим течением заболевания у беременных, дрожжевой микрофлорой влагалища и показателями местного специфического иммунитета.

Задачи исследования:

1. Определить особенности клинической картины и характера течения ВВК во время беременности в современных условиях.

2. Изучить исходы беременности и родов у женщин с ВВК.

3. Определить видовой состав дрожжевой микрофлоры влагалища и ее чувствительность к антимикотическим препаратам в современных условиях и сравнить с ретроспективными данными за 10 лет.

4. Исследовать показатели местного иммунитета - фагоцитоз, иммуноглобулины и антимикробные пептиды — во взаимосвязи с течением ВВК у беременных женщин.

5. Оценить влияние проводимого лечения ВВК у беременных на клинические, микробиологические и иммунологические показатели.

Научная новизна

Впервые изучены показатели местного противогрибкового иммунитета — фагоцитоз, специфические иммуноглобулины и совокупная противогрибковая активность антимикробных пептидов (лактоферрин, кальпротектин, лизоцим, секреторный ингибитор лейкопротеазы, кателицидины, дефензины) — во взаимосвязи с тяжестью течения ВВК и показателями состояния дрожжевой популяции в данном локусе.

Показано, что именно совокупная активность антимикробных пептидов является первой линией местного иммунитета в противогрибковой защите влагалища.

Впервые показано, что низкий уровень антимикробной активности АМП является одной из причин наиболее частого возникновения заболевания во время беременности.

Проведение видовой идентификации изолятов, полученных от беременных пациенток с ВВК, более современными методами показало снижение удельного веса С. albicans и расширение родового состава дрожжей. Практическая значимость

Выявление некоторых особенностей течения ВВК при беременности: стертость клинической картины, зависимость тяжести течения от формы течения заболевания и ее связь с микробиологическими показателями позволит проводить раннюю, более точную диагностику заболевания у беременных и, соответственно, адекватное лечение

На основании полученных данных по чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам было показано снижение активности таких популярных в акушерско-гинекологической практике препаратов, как азолы, и, напротив, повышение активности полиенов.

Среди прочих показателей местного иммунитета именно совокупная противогрибковая активность антимикробных пептидов может быть использована в качестве прогностического параметра и маркера перехода острой формы ВВК в хроническую.

Положения, выносимые па защиту:

1. Клиническая картина ВВК при беременности носит стертый характер: типичные симптомы ВВК выявлялись достоверно реже, чем вне беременности; частота клинических симптомов превышала частоту предъявления типичных жалоб в среднем в 3 раза. Тяжесть течения ВВК у беременных напрямую связана с обилием дрожжевых клеток при микроскопии (г = 0,968) и частотой положительных культуральных тестов (г = 0,982) и достоверно выше при хронической форме, чем при первичной острой.

2. Выделенные штаммы относились к 3 родам: Rhodotorula sp. (5,9 %), Debaryomyces sp. (17,6 %) и Candida sp. (76,5%). Наиболее широко применяемые в акушерско-гинекологической практике препараты азольного ряда (клотримазол, кетоконазол, флюконазол, итраконазол) показали снижение активности в отношении клинических изолятов дрожжевых грибов в 2 раза за последние 10 лет, тогда как препараты полиенового ряда (пимафуцин и леворин) проявили повышение активности в 2,7 раза.

3. Основным фактором местного противогрибкового иммунитета является суммарная активность антимикробных пептидов. Уровень совокупной противогрибковой активности АМП (26,9%) у беременных и его взаимосвязь с тяжестью течения достоверно ниже, чем у небеременных (43,9%), что может являться одной из причин наиболее частого возникновения заболевания во время беременности. Данный показатель может быть использован в качестве прогностического при оценке рисков хронизации процесса.

Апробация работы

Основные положения работы доложены на XV международном конгрессе «XV Congress of European Mycologists» , Санкт-Петербург, сентябрь 2007г.; на V Всероссийском конгрессе по медицинской микологии «Успехи мед. Микологии», Москва, март 2008 г. Апробация диссертации была проведена на совместном заседании кафедры акушерства, гинекологии, перинатологии и репродуктологии ФППОВ ММА им. И.М. Сеченова и апробационной комиссии ФГУ «Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И.Кулакова Росмедтехнологий» 02 февраля 2009 г.

Гранты

В рамках работы был получен грант DAAD (Германское общество академических обменов) совместно с Ernst Schering Foundation для прохождения научной стажировки и выполнения части работы на базе медицинского университета Charite, г. Берлин, Германия.

Публикации результатов исследования

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 3 работы в журналах, рекомендуемых ВАК.

Публикации результатов исследования

По теме диссертации опубликовано 10 научных работ, в том числе 3 работы в журналах, рекомендуемых ВАК.

Внедрение результатов работы в практику

Результаты исследования внедрены в клиническую практику в отделениях ФГУ «Научного центра акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И.Кулакова» Росмедтехнологии.

Структура и объем диссертации

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, 4 глав, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа изложена на 130 стр. компьютерного текста, содержит 22 таблицы и 22 рисунка. Библиография включает 118 литературных источника, в том числе 29 — отечественной и 89 — зарубежной литературы.

Заключение диссертации по теме «Акушерство и гинекология», Мальбахова, Екатерина Тимуровна

выводы

1. Клиническая картина ВВК при беременности носит стертый характер: типичные симптомы ВВК обнаруживаются достоверно реже, чем вне беременности (р < 0,01) - зуд в 1,9 раза; жжение в 4 раза и творожистые выделения в 1,6 раза; частота обнаружения клинических симптомов заболевания превышала частоту предъявления типичных жалоб в 2,9 раза. Тяжесть течения ВВК у беременных при хроническом рецидивирующем течении заболевания в 1,6 раза выше, чем при первичном остром.

2. Тяжесть течения ВВК у беременных напрямую связана с обилием дрожжевых клеток при микроскопии (г = 0,968) и частотой положительных культуральных тестов (г = 0,982). При хроническом вульвовагинальном кандидозе показатели микроскопии и культуральных тестов в 1,4 и 1,9 раза соответственно превышали таковые при первичном остром ВВК. ;

3. У беременных с хронической рецидивирующей формой ВВК в родах в 55,5% отмечались разрывы мягких родовых путей, из них в 21,1% разрывы шейки матки, в 16,7% разрывы стенок влагалища и 11,1% разрывы задней спайки влагалища.

4. Большинство полученных изолятов дрожжевых грибов относились к роду Candida (76,5 %) , кроме того, 17,6 % обнаруженных дрожжей были идентифицированы как Debaryomyces hansenii, а 5,9 % Rhodotorula sp. Сравнение чувствительности клинических изолятов дрожжевых грибов к 12 противогрибковым препаратам показало, что за последние 10 лет произошло снижение чувствительности к препаратам азольной группы в среднем в 2 раза и повышение чувствительности к полиеновым препаратам в 2,7 раза.

5. Фагоцитоз не является значимым параметром местного противогрибкового иммунитета, т.к. его уровень, не коррелировал ни с тяжестью течения ВВК (г = 0,216), ни с другими исследуемыми показателями. Частота встречаемости и уровень местных специфических противокандидозных IgG-антител проявляли высокую степень прямой корреляции с тяжестью течения ВВК (г — 0,798) и обсемененностью (г = 0,772), а также проявляли высокую степень обратной корреляции с совокупной противогрибковой активностью вагинального отделяемого (г = - 0,950). Т.е. IgG отражают тяжесть течения ВВК, но не оказывают прямого противогрибкового действия.

6. Совокупная противогрибковая активность АМП находится в обратной корреляционной взаимосвязи с тяжестью течения ВВК у беременных (г — - 0,741), с показателями микроскопии и культуральных тестов. Т.е. совокупная противогрибковая активность, представленная суммой действия антимикробных пептидов, является ведущим фактором местного противогрибкового иммунитета.

7. У беременных уровень совокупной противогрибковой активности АМП (26,9%) и его взаимосвязь с тяжестью течения ВВК достоверно ниже, чем у небеременных (43,9%), что может быть одной из основных причин наиболее частого возникновения заболевания во время беременности.

8. Оценка эффективности лечения ВВК у беременных показала, что снижение суммы симптомов ВВК и обсемененности сопровождались достоверным увеличением противогрибковой активности АМП вагинального отделяемого в 3,4 раза (р < 0,01), которое не зависело от используемого антимикотического препарата.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ Необходимо выделять в группу риска по развитию латентных форм рецидивирующего ВВК, беременных имеющих в анамнезе неоднократные эпизоды ВВК, т.к. течение заболевания у женщин с хроническим ВВК во время беременности может носить клинически стертый характер течения в сочетании с высокой патологической активностью дрожжей.

Учитывая высокую частоту рецидивов ВВК у беременных во 2 и 3 триместрах, а также высокую частоту разрывов мягких тканей влагалища во время родов у женщин, страдающих хронической рецидивирующей формой ВВК необходимо проводить обязательное микробиологическое исследование (нативная микроскопия и культуральное исследование) перед предполагаемым сроком родов и при необходимости провести санацию влагалища.

Препаратом выбора для лечения вульвовагинального кандидоза во время беременности, является препараты полиенового ряда, т.к. изучение чувствительности дрожжей к противогрибковым препаратам и сравнение их с данными 10-летней давности, показало снижение активности таких широко используемых в акушерско-гинекологической практике препаратов, как препараты азольного ряда (клотримазол, кетоконазол, флюконазол, итраконазол) и, напротив, повышение активности препаратов полиенового ряда (пимафуцин и леворин).

В качестве маркера перехода острой формы ВВК в хроническую и определения тактики дальнейшей терапии заболевания может быть использовано определение совокупной противогрибковой активности антимикробных пептидов. Данное исследование может быть внедрено в практическое здравоохранение, как доступный и не дорогостоящий метод исследования местного иммунитета.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Мальбахова, Екатерина Тимуровна, 2009 год

1. Анкирская, А.С. Некоторые аспекты лечения урогенитального кандидоза/ Анкирская А.С.и др. // Вест. Росс, ассоц. акуш.-гинекол. 2000. — N 1. — С. 106-109.

2. Аравийский, Р.А. Диагностика микозов: монография/ Р.А.Аравийский, Н.Н.Климко, Н.В.Васильева// б.и. Спб. 2004; стр. 185

3. Арзуманян В.Г. Аллергенсодержащий препарат из дрожжей Malassezia 1 spp./ В.Г. Арзуманян и др. // Бюллетень эксперим.биологии имедицины. 2000.- N 11 - С.548-551

4. Акопян, Т.Э. Бактериальный вагиноз и вагинальный кандидоз у беременных (диагностика и лечение)Текст.:диссертация канд. мед. наук: 14.00.01/ Акопян Тамара Эдуардовна; [НЦАГ и П РАМН], 1996.-23с. -Биьлиогр.: с.3-4.

5. Байрамова, Г.Р. Современные подходы к терапии вульвовагинального кандидоза / Г.Р.Байрамова // Гинекология -2005- Том 07,N 3

6. Бабьева, И.П.Методы выделения и идентификации дрожжей: монография / И.П.Бабьева, В.И. Голубев // М. Пищевая промышленность.-1979.-С.52.

7. Буслаева, Г.Н. Вульвовагинальный кандидоз/ Г.Н.Буслаева, Г.Н.Каск// б.и.-2001-С. 51-56

8. Вульвовагинальный кандидоз. Руководство для врачей Н.В.Кунгуров, В.Н. Прилепская, Г.Р. Байрамова / НЦАГиП -Москва, 2005 17-18с.

9. Захарова, Т.П. Вульвовагинальный кандидоз. Проблемы и решения./ Т.П. Захарова // Consilium medicum. Экстравыпуск. — Симпозиум «Микозы. Рациональная фармакотерапия» 2004. - С. 10-14.

10. Касабулатов, Н.М. Вагинальный кандидоз./ Н.М. Касабулатов // Русский медицинский журнал- 2003 -№17-С.16-19.

11. Кисина, В.И. Первичный и рецидивирующий кандидозный вульвовагинит: патогенез, терапия и профилактика./ В.И. Кисина // Гинекология -2004- Том 6 №4 - С. 26-28

12. Кира, Е.Ф. Бактериальный вагиноз/ Е.Ф.Кира — СПб.: НЕВА-ЛЮКС, 2001. —364 с.

13. Климко Н.Н. Микозы: диагностика и лечение. Руководство для врачей. / Н.Н. Климко-М.,б.и. 2007.- с. 335

14. Кулаков, В.И. Актуальные проблемы антимикробной терапии и профилактики инфекций в акушерстве, гинекологии и неонатологии/ В.И. Кулаковой др.// Акушерство и гинекология, 2004. №1. - С.3-6

15. Куперт, А.Ф. Особенности клиники и лечения вагинального кандидоза у беременных в зависимости от вида грибов рода Candida /А.Ф. Куперт и др. //Гинекология 2004. - Том 6. - №4 - С. 31

16. Орджоникидзе, Н.В. Вульвовагинальный кандидоз в акушерской практике/ Н.В. Орджоникидзе // Гинекология 2004. - том 6. - №4 - С. 1416

17. Паников, И.С. Количественные исследования динамики отмирания голодающих микроорганизмов/ И.С. Паников и др.// Микробиология -1988г. том 57 - № 6 - С. 983-991

18. Прилепская, В.Н. Вульвовагинальный кандидоз: современные методы лечения / В.Н. Прилепская //Практическая гинекология./ Под ред. В.И.Кулакова, В.Н.Прилепской М.: МЕДпресс-информ, 2006 - 412с.

19. Саттон, Д. Определитель патогенных и условно патогенных грибов/ Д. Саттон, А.Фотергилл, М.Ринальди // М.: «Мир» -2001 г.- 468 С.

20. Сергеев, А.Ю. Кандидоз: природа инфекции, механизмы агрессии и защиты, лабораторная диагностика, клиника и лечение/ А.Ю.Сергеев, Ю.В. Сергеев // М. : Триада-Х, 2000. с. 247-250

21. Сметник, В.П. Опыт применения микофлюкана (флуконазола) для лечения кандидозного вульвовагинита/ В.П. Сметник, JI. А. Марченко, Г.Е. Чернуха// Лечащий врач. 2004. - №2.- С.10-14

22. Сухих, Г.Т. Иммунология беременности / Г.Т. Сухих, JI.B. Ванько // М.: Издательство РАМН, 2003. С. 91-114

23. Тихомиров, A.JI. Пробиотики в комплексном лечении кандидозного вульвовагинита/А.Л. Тихомиров, Ч.Г. Олейник//Эффективная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии- 2007. -№4., стр. 13-17

24. Торчинов A.M. Смешанные урогенитальные инфекции у женщин: диагностика и комплексная терапия/А.М.Торчинов, М.В.Мазуркевич// Consilium medicum Гинекология. - 2008. №6 том 10, с. 23-26

25. Тютюнник, В.Л. Вагинальный кандидоз у беременных: этиология, патогенез, клиника, диагностика, лечение. Фарматека 2003; 11:

26. Шабашова, Н.В. Особенности иммунитета слизистых оболочек полости рта и женской половой сферы при кандидозе/ Н.В. Шабашова, Е.К. Фролова // Проблемы медицинской микологии. 2005 - Т.7, №2.- С.70

27. Шабашова, Н.В. Некоторые аспекты иммунного ответа клеток слизистой оболочки влагалища при хроническом рецидивирующем кандидозегениталий у женщин/ Н.В. Шабашова и др. // Проблемы медицинской микологии, 2006.- № 2 С. 97-98.

28. Ahearn, D.G. Malassezia Baillon / D.G.Ahearn, R.B. Simmons // The Yeasts, A Taxonomic study.- Ed. By Kurtsman C.P., Fell J.W.- Elsevier.- 1998.- P.782.

29. Allen-Davis J.T. Assessment of vulvovaginal complaints: accuracy of telephone triage and in-office diagnosis/ J.T. Allen-Davis et al. // Obstet Gynecol 2002 99 - P. 18-22

30. Asticcioli S. Reccurent vulvovaginal candidiasis: prevalens antifungal susceptibility patterns and genotyping of different species./ S. Asticcioli et al.// Clinical microbiology and infection, 2004 -vol.l0(suppl.3) -P.266

31. Bals R, Epithelial antimicrobial peptides in host defense against infection // Respiratory Research 2000 1 - P. 141-150

32. Barousse M.M. Vaginal yeast colonisation, prevalence of vaginitis, and associated local immunity in adolescents/ M.M. Barousse et al. // Sex Transm Infect 2004 80- P. 48-53

33. Belcher RW An electron microscopic study of phagocytosis of Candida albicans / R.W. Belcher, J.E. Carney, F.G. Monahan // Lab Invest 1973 29 -P. 620-627

34. Boskey E.R. Origins of vaginal acidity: high D/L lactate ratio is consistent with bacteria being the primary source./ E.R. Boskey et al.// Human Reproduction — 2001 Vol. 16-No. 9-P. 1809-1813

35. Brabin L. Factors affecting vaginal pH levels among female adolescents attending genitourinary medicine clinics / L. Brabin et al. // Sexually Transmitted Infections 2005 - 81 - P. 483-487

36. Brandtzaeg, P. The leucocyte protein LI (calprotectin): a putative nonspecific defence factor at epithelial surfaces/ P. Brandtzaeg et al.// Advances in Experimental Medicine & Biology 1995 - 371A - P. 201-6.

37. Bullen J.J. Role of iron in bacterial infection/ J.J. Bullen, H.J. Rogers, E. Griffiths // Curr. Top. Microbiol. And Immunol. 1978 - Vol. 80 - P. 1-35.

38. Atlas of Clinical Fungi / G.S. de Hoog, J. Guarro // Centraalbureau voor Schimmelcultures. 1995.- C.205-238.

39. Demirezen S. Relationship between the morphology of Candida cells and vaginal discharge / S. Demirezen, MS. Beksac// New Microbiologica 2004. -27(2).-P. 173-6

40. Djeu, J Y. Function associated with IL-2 receptor-beta on human neutrophils. Mechanism of activation of antifungal activity against Candida albicans by IL-2. / J Y. Djeu, J H. Liu, S. Wei et al. // Journal of Immunology 1993. - 150(3). -P. 960-70.

41. Doumas, S. Anti-Inflammatory and antimicrobial roles of secretory leukocyte protease inhibitor / Doumas S., Kolokotronis A., Stefanopoulos P.// Infection and Immunity-2005. Vol. 73 - No. 3 - P. 1271-1274

42. Draper, D. Levels of vaginal secretory leukocyte protease inhibitor are decreased in women with lower reproductive tract infections/D. Draper et al.// American Journal of Obstetrics & Gynecology 2000. - 183(5) - P. 1243-1248.

43. Ellison, R.T. Lactoferrin and transferrin damage of the gram-negative outer membrane is modulated by Ca+2 and Mg+2. / R.T. Ellison et al. // J. Gen. Microbiol 1990. - Vol. 136 - P. 1437-1446.

44. Feng Z. Human Beta-defensins: Differential Activity against Candidal Species and Regulation by Candida albicans / Feng Z. et al.// J Dent Res 2005. -84(5).-P. 445-450

45. Fidel, PL Jr Immunity to Candida. / PL Fidel Jr // Oral Dis 2002. - 8(Suppl 2).-P. 69-75

46. Fidel, PL Jr Immunity in vaginal candidiasis./ PL Fidel Jr // Current Opinion in Infectious Diseases-2005.- 18.-P. 107-111

47. Fidel, PL Jr History and Update on Host Defense Against Vaginal Candidiasis /PL Fidel Jr // American Journal of Reproductive Immunology 2007. -Volume 57 - Issue 1 - P. 2 - 12

48. Frohm Nilsson, M. The Human Cationic Antimicrobial Protein (hCAPI8), a Peptide Antibiotic, Is Widely Expressed in Human Squamous Epithelia and Colocalizes with Interleukin-6 / Frohm Nilsson, M. et al. // Infect Immun. — 1999.-67(5).-P. 2561-2566

49. Garcia — Tamayo, J An electron microscopic investigation on the pathogenesis of human vaginal trichomoniasis / J. Garcia Tamayo, JT Nunez - Montiel, de HP. Garcia // Acta Cytol - 1978. - 22 - P. 47-455

50. Garcia — Tamayo, J Human genital candidiasis. Histochemistry, Scanning and transmission Electron microscopy / J. Garcia — Tamayo, G. Castillo, A.J. Martinez // Acta Cytologica 1982. - Vol 26. - No 1. - P. 7-14

51. Ghannoum M.A. Antifungal agents: mode of action, mechanisms of resistance, and correlation of these mechanisms with bacterial resistance / M.A.Ghannoum, L.B. Rice // Clinical Microbiology Reviews.-1999.-V12.-N4.-P.501-517

52. Giraldo, P. Vaginal Colonization by Candida in Asymptomatic Women With and Without a History of Recurrent Vulvovaginal Candidiasis/ P. Giraldo et al.// Obstet Gynecol -2000. 95. - P. 413-416

53. Milligan G.N. Effect of Candidate Vaginally-Applied Microbicide Compounds on Recognition of Antigen by CD4+ and CD8 /G.N. Milligan et al.// Biology of reproduction 2004. - 71 - P. 1638-1645

54. Hiemstra, P. Antibacterial activity of leukoprotease./ P. Hiemstra et al. II Infect. Immun 1996. - 64. - P. 4520-4524

55. Hurley R. Yeast as human and animal pathogens/ R. Hurley, J.de Louvois, A.Mulhall // In: The Yeasts. In: "The Yeasts" Eds. Rose A.H., Harrison J.S. 2nd edn.- V.l. "Biology of yeasts" -Acad.Press.-London.-1987.- P.207-256.

56. Jazayeri, A. A prospective study of vaginal pH as a predictor of preterm delivery/ Jazayeri, A. et al. // Journal of Maternal-Fetal & Neonatal Medicine — 2002.- 11(1).-P. 30-3.

57. Jawetz, E. Review of medical microbiology / E. Jawetz, J.L. Melnick, E.A. Adelberg // Lange Medical Publication, Los Altos, California.- 1980.- V.2-P.224-269.

58. Kavishvar, A. Candidacidal activity of a monoclonal antibody that binds with glycosyl moieties of proteins of Candida albicans/ A. Kavishvar, P.K. Shuckla // Medical Mycology 2006.- 44(2).- P. 159-167.

59. Laemmly, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacterial fage T4 / U.K. Laemmly // Nature.-1970.- V.227.- N 5259.-P.680-685.

60. Ledger, W.J. Difficulties in the diagnisis of Candida vaginitis/ W.J. Ledger et al. // Infect Dis Clin Pract 2000. - 9 - P. 66-69

61. Ledger, W.J. Vulvovaginal infections/ WJ.Ledger, S.S. Witkin // Washington : Asm-Press, 2007. 130 p. - P. 9-35

62. Loomans, H J. Histidine-based zinc-binding sequences and the antimicrobial activity of calprotectin./ H J. Loomans et al. // Journal of Infectious Diseases — 1998.- 177(3).-P. 812-4

63. Lowry, O.H. Protein measurement with Folin phenol reagent / O.H. Lowry et al. //J.Biol.Chem.- 1951.-V.193.- P.265-275.

64. Lulloff, S. J. Fungal susceptibility to zinc deprivation./ S. J. Lulloff, B. L. Hahn, P.G.Sohnle // Journal of Laboratory & Clinical Medicine 2004. -144(4). -P. 208-14.

65. Mardth, P-A. Facts and myths on recurrent vulvovaginal Candidosis: a review on epidemiology, clinical manifestations, diagnosis, pathogenesis and therapy / Mardth, P-A.// Int J STD AIDS 2002. - 13. - P. 522-539

66. Marquis, G. Fungi toxicity of muramidase, ultrastructural damage to Candida albicans. / G. Marquis et al. // Lab Investig. 1982. - 46. - P. 627-636

67. Marquis, G. Muramidase-mediated damage to Candida yeast cells: Histochemical and immunochemical characterization of accumulating wall-likematerial / G. Marquis et al. // Journal of Submicroscopic Cytology & Pathology 1993.-25(3).-P. 347-355

68. Mendling, W. Investigations by cell-mediated immunologic tests and therapeutic trials with thymopentin in vaginal mycoses / W. Mendling, U. Koldovsky // Inf Dis Obstet Gynecol 1996. - 4 - P. 225-31

69. Mendling W. Vaginose, vaginitis, zervizitis und salpingitis / W. Mendling // В.: Springer, 2007. p.11-12

70. Mestecky, J. Immunologic uniqueness of the genital tract: challenge for vaccine development. / J. Mestecky, Z.Moldoveanu, M. W. Russell// American Journal of Reproductive Immunology 2005. - 53(5). - P. 208-14

71. Mochon, A.B. Is a vaccine needed against Candida albicans'? / A.B. Mochon, J.E. Cutler .//Med. Mycol.- 2005. 43.- P. 97-115

72. Moon, J-Y. Expression and purification of a recombinant LL-37 from Escherichia coli / J-Y.Moon, K. Henzler-Wildman , A. R'amamoorthy// Biochimica et Biophysica Acta 2006. - 1758(9). - P. 1351-1358

73. Moraes, PS. Recurrent vaginal candidiasis and allergic rhinitis: a common association/ PS.Moraes et al.// Brazil. Ann Allergy Asthma Immunol. 1998. -81(2).-P. 165-169

74. Nomanbhoy, F. Vaginal and oral epithelial cell anti-Candida activity / F. Nomanbhoy et al. // Infection and Immunity 2002. - P.7081-7088

75. Okutomi, T. Anti-Candida activity of calprotectin in combination with neutrophils or lactoferrin / T.Okutomi et al. // Microbiology & Immunology — 1998.-42(11).-P. 789-93

76. Omaetxebarria, M. J. Antifungal and antitumor activities of a monoclonal antibody directed against a stress mannoprotein of Candida albicans

77. Omaetxebarria, M. J. et al.// Current Molecular Medicine (Hilversum) 2005. - 5(4). - P. 393-401

78. Oppenheim, J. Roles of antimicrobial peptides such as defensins in innate and adaptive immunity / J.Oppenheim et al. // Annals of the Rheumatic Diseases —2003.- 62-P. iil7

79. Patel, D.A. Risk factors for recurrent vulvovaginal candidiasis in women receiving maintenance antifungal therapy: results of a prospectiv e cohort study/ D.A. Patel et al. //Am.J. Obstet. Gynecol. — 2004. — Vol.190 №3 — P. 644653

80. Samaranayake, Y.H. The antifungal effect of lactoferrin and Iysozyme on Candida krusei and Candida albicans / Y.H. Samaranayake et al.// APMIS. -1997.- 105(11).-P. 875-83

81. Schneider, J.J. Human defensins / J.J. Schneider et. al // Journal of Molecular Medicine 2005. - 83(8). - P.587-95

82. Schnell, J.D. Are yeast in vaginal smears intracellular or extracellular? / J.D.Schnell, W.-H. Voight // Acta Cytologica 1976 - Vol. 20 - No. 4 - P. 343346

83. Sheehan, D.J. review. / D.J. Sheehan, C.A. Hitchcock, Sibley C.M.// Clinical Microbiology Reviews.-1999.- V12.- N1.- P.40-79.

84. Sobel J. D. Mucocutaneous candidiasis in Infectious diseases / J. D. Sobel.//2000 P. 116-124

85. Sobel, J.D. Fluconasol susceptibility of vaginal isolates obtained from women with complicated Cand. vaginitis: clinical implications / J.D. Sobel et al. // Antimicrob. Agents Chemother. 2003. - T.47.-№1. - P.34-38.

86. Sobel, J.D. Recurrent vulvovaginal candidiasis advanses in patogenesis and treatment./ J.D., Sobel // 3rd Trends in Medical Mycology. 2007. - Turin.

87. Sorensen, О. E. Processing of Seminal Plasma hCAP-18 to ALL-38 by Gastricsin: A novel mechanism of generating antimicrobial peptides in vagina / О. E. Sorensen et al. // J. Biol. Chem. 2003. - 278(31). - P. 28540 - 28546

88. Stamm, W.E. Evaluating Guidelines/ W.E. Stamm // Clinical Infectious Diseases 2007. - 44. - P.775-6.

89. Taggart, C.C. Inactivation of Human P-Defensins 2 and 3 by Elastolytic Cathepsins / C.C. Taggart et al. // The Journal of Immunology — 2003. 171. — P. 931-937

90. Tashjian, C.L. Immunofluorescence studies of Candida in human reticuloendothelial phagocytes/ C.L. Tashjian et al. // Am J Clin Pathol 1971. -56. P. 50-58

91. Tomee, J.F. Antileukoprotease: an endogenous protein in the innate mucosal defense against fungi / J.F. Tomee et al. // J. Infect. Dis. 1997 -176. — P. 740-747.

92. Tomee, J.F. Secretory leukoprotease inhibitor: a native antimicrobial protein presenting a new therapeutic option? / J.F. Tomee et al. // Thorax.-1998.-53(2).-P.l 14-6.

93. Valore, E.V. Antimicrobial components of vaginal fluid / E.V. Valore et al. // J Obstet Gynecol 2002. - 187. - P. 561-8

94. Viejo-Diaz, M. Effects of human lactoferrin on the cytoplasmic membrane of Candida albicans cells related with its candidacidal activity/ M. Viejo-Diaz, M.T. Andres, J.F. Fierro// FEMS Immunology & Medical Microbiology- 2004. 42(2). - P.l81-5

95. Voganatsi, A. et al. Mechanism of extracellular release of human neutrophil calprotectin complex/ A.Voganatsi et al.// Journal of Leukocyte Biology-2001.-70(1).-P. 130-4

96. Vonk, A.G. Phagocytosis and intracellular killing of Candida albicans blastoconidia by neutrophils and macrophages: a comparison of different microbiological test systems/ A.G.Vonk et al. // Journal of Microbiological Methods 2002. - 49(1). - P.55-62

97. Wu, Т.; Samaranayake, L. P.; Leung, W. K.; Sullivan, P. A. Inhibition of growth and secreted aspartyl proteinase production in Candida albicans by lysozyme //Journal of Medical Microbiology. 48(8). Aug., 1999. 721-730.

98. Wu, Т.; Samaranayake, L. P.; Leung, W. K.; Sullivan, P. A. Inhibition of growth and secreted aspartyl proteinase production in Candida albicans by lysozyme //Journal of Medical Microbiology. 48(8). Aug., 1999. 721-730.

99. Yarrow D. Methods for the isolation, maintenance and identification of yeasts// In: The Yeasts, A Taxonomic Study/ D. Yarrow // Ed.by KurtsmanC.P, Fell.J.W. Elsevier.- 1998.-P.77-100

100. Zasloff M Antimicrobial Peptides in Health and Disease / M Zasloff //The New England Journal of Medicine — 2002.- Number 1- Volume 347 — P. 1199-12001. MM e^.33 4$