Конструирование продуцентов рекомбинантных белков Р72, Р30 и Р54 вируса африканской чумы свиней тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.02, кандидат биологических наук Казакова, Анна Сергеевна

  • Казакова, Анна Сергеевна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2013, Покров
  • Специальность ВАК РФ03.02.02
  • Количество страниц 135
Казакова, Анна Сергеевна. Конструирование продуцентов рекомбинантных белков Р72, Р30 и Р54 вируса африканской чумы свиней: дис. кандидат биологических наук: 03.02.02 - Вирусология. Покров. 2013. 135 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Казакова, Анна Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

1 ВВЕДЕНИЕ

1.1 Актуальность работы

1.2 Степень разработанности проблемы

1.3 Цели и задачи исследования

1.4 Научная новизна результатов исследований

1.5 Теоретическая и практическая значимость работы

1.6 Апробация результатов работы

1.7 Соответствие диссертации паспорту научной специальности, по

которой она рекомендуется к защите

1.8 Публикации

1.9 Объем и структура диссертации

1.10 Основные положения, выносимые на защиту

1.11 Личный вклад автора в выполнение работы

2 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1 Африканская чума свиней: историческая справка и проблемы 15 иррадикации

2.2 Структура вируса АЧС

2.3 Свойства белков вируса АЧС

2.4 Использование рекомбинантных белков в разработке 30 современных средств диагностики и специфической профилактики АЧС

2.5 Заключение по обзору литературы

3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 38 3.1 Материалы

3.1.1 Штаммы вируса АЧС

3.1.2 Препараты вирусной ДНК

3.1.3 Плазмидные векторы и бактериальные штаммы

3.1.4 Культуры клеток

3.1.5 Образцы патологического материала

3.1.6 Сыворотки крови 39 3.1.7Моноклональные антитела

3.1.8 Антигены

3.1.9 Животные

3.1.10 Растворы и реактивы

3.1.11 Лабораторное оборудование

3.2 Методы

3.2.1 Молекулярно-биологические исследования

3.2.2 Компьютерный анализ нуклеотидных и аминокислотных 44 последовательностей

3.2.3 Методы белкового анализа

3.2.4 Получение специфических сывороток к рекомбинантным 45 белкам рЗО и р54 вируса А ЧС

3.2.5 Иммуноферментный анализ (ИФА)

3.2.6 Постановка реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ)

3.2.7 Постановка реакции задержки гемадсорбции (РЗГАд)

3.2.8 Статистическая обработка результатов исследований

3.3 Результаты собственных исследований

3.3.1 Клонирование и экспрессия генов В646Ь (р72), СР204Ь (рЗО) и 47 Е183Ь (р54) вируса А ЧС

3.3.1.1 Подбор праймеров и оптимизация условий ПЦР для синтеза 48 полноразмерных копий генов В646Ь, СР204Ь и Е183Ь вируса АЧС

3.3.1.2 Клонирование гена В646Ь вируса АЧС и его центрального 54 фрагмента

3.3.1.3 Клонирование гена СР204Ь вируса А ЧС

3.3.1.4 Клонирование гена Е183Ь вируса АЧС

3.3.1.5 Конструирование продуцентов полноразмерного 61 рекомбинантного белка р72 и его конформационного эпитопа (Р72е)

3.3.1.6 Конструирование продуцентов рекомбинантного белка рЗО

3.3.1.7 Конструирование продуцентов рекомбинантного белка р54

3.3.1.8 Экспрессия генов B646L, CP204L и E183L в Е. coli

3.3.1.9 Очисткарекомбинантных белковр72, р72е, рЗО ир54

3.3.2 Изучение возможности использования рекомбинантных белков 76 р72 up72е в диагностических целях

3.3.3 Усовершенствование продуцента конформационного эпитопа 77 рекомбинантного белка рЗО (Ree рЗОе)

3.3.4 Изучение возможности использования рекомбинантных белков 79 р 72е и рЗОе в диагностике А ЧС

3.3.5 Получение моноспецифических сывороток к рекомбинантным 83 белкам рЗО, рЗОе и р54 и изучение их свойств

3.3.5.1 Использование рекомбинантных белков рЗО, рЗОе и р54 для 83 получения моноспецифических сывороток

3.3.5.2 Изучение биологических свойств моноспецифических сывороток 87 к рЗ 0 и р54 in vitro

3.3.6 Филогенетический анализ нуклеотидных 91 последовательностей генов CP204L и E183L

3.4 Обсуждение собственных исследований

4 ВЫВОДЫ

5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

6 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ 109 ПРИЛОЖЕНИЯ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АБТС (ABTS) - 2,2'-азино-ди[3-этилбензотиазолин-6-сульфоновая кислота] (2,2'-azino-bis[3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid]) АГ - антиген AT - антитело

АЧС - африканская чума свиней

БСА (ВSA) - бычий сывороточный альбумин (bovine serum albumin)

ВАЧС - вирус африканской чумы свиней

ВБА - вирус болезни Ауески

ВБТ - вирус болезни Тешена

ГАдЕ - гемадсорбирующая единица

ГЛА - гидролизат лактальбумина

ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии - Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной вирусологии и микробиологии Российской академии сельскохозяйственных наук ДНК (DNA) - дезоксирибонуклеиновая кислота

ДСН-ПААГ электрофорез (SDS-PAGE) - электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия- (sodium dodecyl sulfate Polyacrylamide gel electrophoresis)

ЗФР - забуференный физиологический раствор ИФА - иммуноферментный анализ ИЭОФ - иммуноэлектроосмофорез кДа - килодальтон

ККМС - клетки костного мозга свиньи

КРС - крупный рогатый скот

KT - комнатная температура, 25 ± 0,5°С

КТМБР-т - казеин-трис-мертиолятный буферный раствор с 0.05% Твин-20 КЧС - классическая чума свиней M - моль

м.м. - молекулярная масса

МГС - мультигенное семейство нм - нанометр

нт (nt) - нуклеотид (nucleotide) ОП - оптическая плотность

ОРС (ORF) - открытая рамка считывания (open reading frame) п.о. (bp) - пар оснований (base pairs)

ППК-666 - перевиваемая культура клеток почек поросёнка

ПХ - пероксидаза хрена

ПЦР - полимеразная цепная реакция

ПЭГ - полиэтиленгликоль

РАСХН - Российская академия сельскохозяйственных наук РЗГАд - реакция задержки гемадсорбции РН - реакция нейтрализации

РНИФ - реакция непрямой иммунофлуоресценции РНК - рибонуклеиновая кислота мРНК - матричная РНК

РРСС - репродуктивно-респираторный синдром свиней

РФ - Российская Федерация

ТК~ - вирус, дефектный по гену тимидинкиназы

ТК - тимидинкиназа

т.п.о. - тысяч пар оснований

ТФ ИФА (ELISA) - твердофазный иммуноферментный анализ (enzyme-linked immunosorbent assay)

ТЦД50 - 50%-ная тканевая цитопатическая доза

ФБР (PBS) - фосфатный буферный раствор (phosphate buffered saline)

ФБР-т - ФБР, содержащий 0.05% Твин-20

ФБР-т-БСА - ФБР, содержащий 0.05% Твин-20 и 1% БСА

ФИТЦ (FITC) - флюоресцеина изотиоцианат (Fluorescein isothiocyanate)

ФЦБР - фосфатно-цитратный буферный раствор

ЦПД - цитопатическое действие

ЦТЛ - цитотоксические Т-лимфоциты

ЭДТА (EDTA) - этилендиаминтетрауксусная кислота (Ethylenediaminetetraacetic acid)

ЭПС (ЭР) - эндоплазматическая сеть (эндоплазматический ретикулум)

CBD - целлюлозосвязывающий домен (cellulose-binding domain)

CV-1 - перевиваемая линия клеток почки африканской зеленой мартышки

е - эпитоп (epitope)

F - прямой праймер (forward)

IPTG - изопропил - (3 - D - 1- тиогалактопиранозид (Isopropyl P-D-1-thiogalactopyranoside)

lg - логарифм с основанием 10 (десятичный логарифм) dNTPs - дезоксирибонуклеотидтрифосфаты R - обратный праймер (reverse) SOB-среда - Super optimal broth medium

TEMED - Ы,К,№,1Ч'-тетраметилэтан-1,2-диамин (N,N,N',N'-tetramethylethane-l,2-diamine)

TNF-a - фактор некроза опухоли a

X-Gal - 5-Бром-4-хлор-3-индолил-Ь-Б-галактозид

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Вирусология», 03.02.02 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Конструирование продуцентов рекомбинантных белков Р72, Р30 и Р54 вируса африканской чумы свиней»

1 ВВЕДЕНИЕ

1.1 Актуальность работы. Африканская чума свиней (АЧС) - вирусная инфекционная болезнь диких и домашних свиней различных пород, характеризующаяся высокой летальностью и контагиозностью, сверхострым, подострым, острым и хроническим течением, передающаяся от больных животных и вирусоносителей контактным, алиментарным путём, а также трансплацентарно, вызывая аборты и гибель плодов у супоросных свиноматок.

В Российской Федерации (РФ) АЧС регистрируется с 2007 года и на протяжении последних лет страна является зоной стационарного неблагополучия по данному заболеванию [1, 4, 9, 10, 25, 41, 64].

Отсутствие надежных профилактических средств против АЧС обусловлено уникальностью структуры вируса и свойств его белков.

Для вируса характерно наличие как иммуносупрессирующих белков, так и белков - модуляторов морфогенеза [49, 100]. Кроме того, его геном содержит гены, отвечающие за своеобразную «мимикрию» вируса [161], а его CD2v белок [54], по данным P.C. Kay-Jackson и соавт. (2004), ответственен за повышение инвазивности макрофагов в отношении вируса [190].

Белок р72 является основным структурным компонентом капсида вириона и мажорным белком вируса АЧС, который продуцируется на поздних стадиях инфекции [105]. Исследованиями ультраструктуры вириона, проведенными R.G. Escudero и соавт. (1998), установлено, что р72 - основной капсидный белок, локализирующийся между двумя слоями липопротеидной оболочки во внеклеточных вирусных частицах [99].

Белок рЗО также входит в состав внутренней мембраны вирусной частицы и по структуре представляет собой фосфопротеин [59]. По данным Р. Gomez-Puertas с соавт. (1998), совместное введение белков рЗО и р54 вызывает образование протективных антител у животных. При экспериментальном заражении свиней, иммунизированных рекомбинантными белками, вирулентным вирусом (штамм

El5) наблюдались либо задержка течения инфекционного процесса, либо полное прекращение развития инфекции и выздоровление животных [189].

Структурный белок р54 -трансмембранный гликопротеин. Он является одним из поверхностных белков, и выявляется на позднем этапе репродукции вируса. Этот белок обеспечивает прикрепление вируса АЧС к клетке хозяина. Его молекулярная масса у различных изолятов варьирует от 24 до 28 кДа [77].

Во ВНИИВВиМ проведены значительные исследования по изучению биологии возбудителя. Н.И. Митиным, В.А. Бурлаковым, В.М. Балышевым и др. разработаны живые вакцины на основе аттенуированных штаммов против I-IV сероиммунотипов вируса АЧС. В.М. Колосовым, A.B. Киселевым и др. установлено, что вирус АЧС гетерогенен по составу генома, физико-химическим свойствам, патогенности, антигенности и способности индуцировать гемадсорбцию. И.В. Федорищевым, Ю.О. Селяниновым, С.Ж. Цыбановым разработаны методы классификации штаммов, основанные на генетических и фенотипических свойствах вируса.

Поскольку использование живых вакцин против АЧС может привести к длительной персистенции вируса среди свиней, основными мерами борьбы с распространением болезни являются ранняя диагностика, ликвидация очагов, вынужденный убой животных и строгие карантинные мероприятия [24]. При данном подходе к иррадикации АЧС разработка и совершенствование высокочувствительных методов ранней диагностики с использованием рекомбинантных белков являются первоочередными задачами.

1.2 Степень разработанности проблемы. Для диагностики АЧС методом ТФ ИФА во ВНИИВВиМ Л.Я. Цыбановой (1985) и В.О. Копытовым (2004) разработаны наборы на основе культуральных антигенов вируса АЧС («Набор диагностикумов для твердофазного иммуноферментного анализа при болезни свиней») и экспериментальный образец набора на основе рекомбинантного белка рЗО («Набор диагностических препаратов на основе рекомбинантного антигена вируса африканской чумы свиней для ТФ ИФА») соответственно.

Использование рекомбинантных антигенов для диагностики перспективное направление, преимуществом которого является биологическая и экологическая безопасность, относительная дешевизна, четкая воспроизводимость результатов и приближающаяся к 100% точность анализа. Возможность применения рекомбинантных белков для диагностики АЧС продемонстрировано J.M.P. Freije и соавт. (1993): вариант ТФ ИФА на основе рекомбинантного р72 позволил с 95% достоверностью дифференцировать положительные сыворотки от негативных [113].

Разработанный M.I. Vidal и соавт. (1997) конкурентный метод ТФ ИФА на основе моноклональных антител к vp73 [65] дал возможность прижизненно выявлять персистентно инфицированных вирусом АЧС свиней по наличию антител в сыворотке крови. Его применение позволяет установить их присутствие даже в образцах с низким титром специфических антител.

Таким образом, конструирование продуцентов рекомбинантных белков: Ree р72, р72е и рЗО в векторе pET23b(+); Ree рЗО, Ree р54 на основе плазмиды рЕТ32Ь(+), анализ эффективности их применения для выявления антител к вирусу АЧС и изучения его морфогенеза является впервые разрабатываемым направлением.

1.3 Цели и задачи исследования. Основной целью данной работы являлось конструирование продуцентов рекомбинантных белков р72, рЗО и р54 вируса африканской чумы свиней и изучение их характеристик.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1) сконструировать продуценты рекомбинантных белков р72, рЗО и р54;

2) получить рекомбинантные белки р72, рЗО и р54;

3) отработать параметры очистки полученных рекомбинантных белков;

4) изучить возможность использования Ree р72 и рЗО для определения антител в сыворотках и плазме крови и селезенке больных и инфицированных вирусом АЧС свиней в ТФ ИФА;

5) получить моноспецифические сыворотки к Rec рЗО и р54;

6) определить применимость полученных моноспецифических сывороток к Rec рЗО и р54 в реакциях непрямой иммунофлуоресценции и задержки гемадсорбции;

7) провести филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей генов, кодирующих рЗО и E183L (р54).

1.4 Научная новизна результатов исследований. Впервые в РФ клонированы гены B646L (р72) вируса АЧС штамма Magadi, CP204L (рЗО) изолята Krasnodar 2008 и штамма Magadi, E183L (р54) штаммов Magadi, NVL-1, КК-262 и изолята Armenia 2007 и сконструированы продуценты рекомбинантных белков вируса АЧС: Rec р54 (штаммов Magadi и NVL-1) на основе плазмид рЕТ23Ь(+) и рЕТ32Ь(+); полноразмерного Rec р72 и р72е (штамма Magadi) в векторе рЕТ23Ь(+); полноразмерного Rec рЗО (изолята Krasnodar 2008 и штамма Magadi) в векторе рЕТ32Ь(+).

Впервые определены и депонированы в GeneBank нуклеотидные последовательности гена E183L (р54) штаммов и изолятов вируса АЧС: Armenia

2007 (JQ771681), Krasnodar 2008 (JQ771683), Elbrus 2008 (JQ771682), Stavropol

2008 (JQ771686), Orenburg 2009 (JQ771684) и Rostov 2009 (JQ771685), и проведен сравнительный анализ их гомологии с использованием программ BioEdit 6.0.7. [68] и MEGA 5.05 [134].

При проведении филогенетического анализа установлено, что 102 исследуемых последовательностей гена, кодирующего р54 штаммов и изолятов вируса АЧС, группируются в субкластеры, соответстветствующие сероиммунотиповой классификации, разработанной во ВНИИВВиМ [38, 22, 35, 36, 199].

Получен клон клеток Е. coli pTT9/ASFVp30 для высокоэффективной экспрессии Rec рЗОе, пригодный для изготовления диагностических препаратов (патент на изобретение № 2463343, бюл. № 28 от 10.10.2012), депонированный в коллекции микроорганизмов ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии (инв. № 2966).

Данная работа является одним из этапов изучения структурных и функциональных особенностей белков вируса АЧС: выяснения их роли в патогенезе болезни и использования в качестве компонентов диагностических наборов.

1.5 Теоретическая и практическая значимость работы. Получены продуценты рекомбинантных белков, позволяющие получить препаративные количества высокооочищенных Ree р72, р72е, рЗО, рЗОе и р54.

Подобраны условия сенсибилизации Ree рЗОе и р72е, позволяющие выявлять антитела к вирусу АЧС в полевых сыворотках и сыворотках от экспериментально зараженных вирусом АЧС свиней в непрямом варианте ТФ ИФА, повысить специфичность реакции и увеличить ее чувствительность в 4-8 раз по сравнению с таковой «Набора диагностикумов для твердофазного иммуноферментного анализа при африканской чуме свиней».

Разработана методика получения моноспецифической сыворотки к рекомбинантному белку рЗО вируса АЧС.

Получены моноспецифические сыворотки к Ree рЗОе и рЗО, пригодные для использования в реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ).

1.6 Апробация результатов работы. Материалы диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии (2008-2013 гг.), на Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» (УГСХА, Ульяновск, 2009 г.), на конференции молодых ученых «Актуальные проблемы инфекционной патологии ветеринарной медицины» (ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии, Покров, 2009 г.), на Международной конференции «Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов» (ВНИТИБП, Щелково, 2009 г.), на 11-ой Международной научно-практической конференции «Аграрная наука и образование на современном этапе развития: опыт, проблемы и пути их решения» (УГСХА, Ульяновск, 2010 г.), на 4 Международном конгрессе по вакцинам

(Австрия, Вена, 2010 г.), на Международной научно-практической конференции «Ветеринарная медицина XXI века: инновации, опыт, проблемы и пути их решения» (УГСХА, Ульяновск, 2011 г.), на заседании в рамках Международного курса по трансграничным болезням животных в Центре по болезням животных (США, остров Плам, 2011 г.), на конференции молодых ученых «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику» (ФГБУ «ВНИИЗЖ», Владимир, 2012 г.).

1.7 Соответствие диссертации паспорту научной специальности, по которой она рекомендуется к защите. В соответствии с формулой специальности 03.02.02 Вирусология, охватывающей проблемы исследования вирусов, их химического состава, генетики, морфологии, морфогенеза, а также проблемы противовирусного иммунитета, разработку средств диагностики, вызываемых вирусами заболеваний, включая области исследований: изучение химического состава, структуры и строения вирусов, антигенных свойств вирусов; исследование морфологии и морфогенеза вирусов, особенностей репродукции вирусов и их взаимоотношений с восприимчивыми к вирусам клетками; проблемы генной инженерии; разработку диагностики и совершенствование лабораторных диагностических систем, в диссертационной работе приведены исследования по конструированию продуцентов Е. соИ, экспрессирующих рекомбинантные белки, пригодные для использования в диагностических реакциях, описан метод получения и свойства моноспецифических сывороток к рекомбинантным белкам р54 и рЗО, которые использованы для изучения особенностей репродукции вируса АЧС и диагностических исследований.

Результаты научного исследования соответствуют пунктам паспорта специальности - 2, 3, 5, 10.

1.8 Публикации. Основные результаты исследований опубликованы в семнадцати научных работах в открытой печати, в том числе три статьи в изданиях, рекомендованных ВАК РФ, и один патент на изобретение.

1.9 Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 125 страницах машинописного текста и состоит из разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты исследований, обсуждение собственных исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы, включающий 41 отечественный и 163 иностранных источников (в том числе 24 электронных ресурса), дополнена 7 приложениями. Диссертация иллюстрирована 19 таблицами и 34 рисунками.

1.10 Основные положения, выносимые на защиту:

1) рекомбинантные клоны Е. coli, несущие гены, кодирующие р72е и рЗОе, экспрессируют белки, пригодны для выявления антител к вирусу АЧС;

2) нуклеотидные последовательности гена, кодирующего р54, имеют максимальную гомологию 100% у штаммов и изолятов, имеющих происхождение с территории Российской Федерации и Республики Армения;

3) моноспецифические сыворотки получены к Ree р54 и рЗО и пригодны для изучения особенностей репродукции вируса АЧС.

1.11 Личный вклад автора в выполнение работы. Представленные в диссертационной работе экспериментальные исследования, теоретический и практический анализ полученных результатов проведены автором самостоятельно в ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии в 2008-2012 гг. по плановым тематикам НИР и в рамках гранта РФФИ № 12-04-31378 «Рекомбинантные белки вируса АЧС для изучения основ его иммуногенности и патогенности» (Договор № 12-04-31378V12 от 22.10.2012), руководителем которого соискатель является. Отдельные этапы выполнены при практической и консультативной помощи к.в.н. О.В. Капустиной; к.б.н. Т.Э. Южук; сотрудников лабораторий Диагностики, Биотехнологии, Музейных штаммов, Биофизики и Научно-экспериментального отдела ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии, а также сотрудников ФГБУН НИИ ФХМ ФМБА России: к.х.н. Т.А. Акопиан и к.б.н. Е.С. Кострюковой.

Похожие диссертационные работы по специальности «Вирусология», 03.02.02 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Казакова, Анна Сергеевна

4 ВЫВОДЫ

1. Сконструированы продуценты рекомбинантных белков р72, рЗО и р54, которые по своей антигенной активности идентичны соответствующим вирусиндуцированным белкам вируса АЧС и пригодны для получения моноспецифических сывороток.

2. Полученные Ree р72 и р72е, экспрессируемые в Е. coli, по специфичности связывания не уступают соответствующему антигену вируса АЧС. Титры референс-сывороток I-IV серотипов со специфическим культуральным и Ree р72 и р72е составляют в ТФ ИФА от 1:1000 до 1:16000.

3. Полученные Ree рЗО и рЗОе, экспрессируемые в Е. coli, по эффективности связывания не уступают специфическому антигену вируса АЧС. Титры референс-сывороток I-IV серотипа в ТФ ИФА с рекомбинантными антигенами рЗО и рЗОе в 4-8 раз превышают таковые для специфического антигена и составляют от 1:2000 до 1:32000.

4. Использование смеси Ree рЗОе и р72е в соотношении 1:1 позволяет выявлять в ТФ ИФА специфические антитела к вирусу АЧС в сыворотках крови свиней, зараженных низковирулентным штаммом вируса, на 7-10 сутки. Титр антител к рЗО к 10-15 суткам достигает максимального уровня 1:1280-1:5120, а титр антител к р72 - 1:40-1:80. Использование смеси указанных рекомбинантных белков позволяет выявлять в ТФ ИФА антитела в пробах селезенки и пробах плазмы крови свиней, инфицированных высоко вирулентными изолятами вируса АЧС, погибших на 5 и 7 сут., соответственно.

5. Получены моноспецифические сыворотки к Ree рЗО, которые позволяют выявлять наличие вируса АЧС в культуральных тест-препаратах в РНИФ в разведении 1:128-1:256.

6. Моноспецифические сыворотки к Ree рЗО в РЗГАд в разведении 1:80 ингибируют репродукцию вируса АЧС двух исследованных серотипов на 2,0±0,29 lg ТЦД 5о/см^ не зависимо от его сероиммунотиповой принадлежности, а моноспецифические сыворотки к Ree р54 в разведении 1:40 снижают Л репродукцию вируса АЧС на 1,5±0,31 lg ТЦД 5о/см только гомологичного сероиммунотипа.

7. Филогенетический анализ структуры гена CP204L (рЗО) по методу «ближайших соседей» выявил 100% гомологии его нуклеотидной последовательности изолятов Krasnodar 2008 и Georgia 2007/1, а филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей гена E183L (р54) позволил выявить совпадение их распределения по гено- и сероиммуногруппам -I, II, III, IV, VII и VIII группам сероиммунотиповой классификации.

5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Рекомбйнантные белки рЗО, рЗОе, р72 и р72е, а также их смесь рекомендованы для использования в диагностических исследованиях для определения антител в сыворотках крови и селезенке больных и инфицированных вирусом АЧС свиней.

2. Филогенетический анализ нуклеотидной последовательности гена E183L предложен для предварительного определения сероиммуногруппы вируса АЧС.

3. «Методические положения по получению моноспецифической сыворотки к рекомбинантному белку рЗО вируса африканской чумы свиней», утвержденные академиком - секретарем Россельхозакадемии A.M. Смирновым (10.11.2011 г.), рекомендованы для получения моноспецифических сывороток и моноклональных антител, используемых для выявления вируса АЧС и изучения его морфогенеза in vitro в научно-исследовательских учреждениях и диагностических лабораториях.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Казакова, Анна Сергеевна, 2013 год

6 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Активные вспышки АЧС на территории Российской Федерации (на 15.10.2012)/ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fsvps.rU/fsvps-docs/ru/iac/asf/2012/l 5102012Z07.pdf. - Загл. с экрана.

2. Африканский бородавочник// Википедия Свободная энциклопедия [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://ru.wikipedia.0rg/wiki/E0p0flaB04HHK. - Загл. с экрана.

3. Балышев, В.М. Изучение гетеротиповых взаимодействий штаммов вируса АЧС ин витро и ин виво / В.М. Балышев, И.В Федорищев, М.В. Салина // Вирус, болезни с.-х. животных. - Владимир, 1995. - С.230.

4. В Конаковском районе продолжают выявлять случаи АЧС/ Российский экономический еженедельник «Афанасий-биржа». Новости ONLINE. Тверская служба новостей. Здоровье. 22.10.2012 [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.afanasy.biz/news/health/index.php7ELEMENT Ю=49561. - Загл. с экрана.

5. Власова, H.H. Изменчивость вируса АЧС при его пассировании в культурах клеток/ H.H. Власова, Н.Г. Кожанов, В.М. Колосов// Тез. докл. научн. конф. ВНИИВВиМ. -Покров,1985. - Т.1. - С.192-193.

6. Власова, H.H. Сравнительный рестрикционный анализ препаратов ДНК вируса АЧС/ H.H. Власова, J1.A. Дятлова, Н.Г. Кожанов, В.М. Колосов // Тез. докл. научн. конф. ВНИИВВиМ. - Покров, 1983. - С.92-94.

7. География АЧС и типовая гетерогенность возбудителя болезни/ В.М. Балышев, В.А. Книзе, С.Ж. Цыбанов [и др.]//Проблемы инфекционных и инвазионных болезней в животноводстве на современном этапе: тезисы докладов МВА им. К.И. Скрябина. - М., 1999. -С.92-94.

8. Гловер, Д. Новое в клонировании ДНК. Методы. - М.: Мир,1989. - С. 209-236.

9. Динамика неблагополучия по АЧС в популяции с/х животных и диких кабанов (2007 -2012 гг.)/ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fsvps.ru/fsvps-docs/ru/iac/asf/2012/15102012/graph.pdf. - Загл. с экрана.

10. Информационное сообщение №207 от 23 октября 2012 г./ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fsvps.ru/fsvps/download/attachinent/1160/EIA ЕР WNF ALERT 207.pdf. - Загл. с экрана.

11. Кистеухая свинья// Википедия Свободная энциклопедия [Электронный ресурс]. -Режим доступа: http://ru.wikipedia.org/wiki/Kиcтeyxaя свинья. - Загл. с экрана.

12. Козлова, Д.И. Современные проблемы африканской чумы свиней/ Д.И. Козлова, В.А. Бесхлебнов/ ВНИИТЭИСХ. - М.,1980. - 60 с.

13. Колонцов, A.A. Локализация мажорных полипептидов вируса АЧС и вирусассоциированных ферментов в структуре вирионов / A.A. Колонцов // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. - 1995. -№3. - С.34-38.

14. Копытов, В.О. Клонирование и экспрессия генов структурных белков рЗО и р72 вируса африканской чумы свиней: дис. ... канд. биол. наук: 03.00.06: защищена 23.12.04 / Копытов Валерий Олегович. - Покров, 2004. - 140 с.

15. Лакин, Г.Ф. Биометрия/ Г.Ф. Лакин. - Высшая школа, 1980. - 352 с.

16. Макаров, В.В. Апоптоз в системе вирус африканской чумы - мононуклеарные фагоциты свиньи/ В.В. Макаров// Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. -1995. -№3. -С.38-43.

17. Макаров, В.В. Реакции вируса африканской чумы свиней с антителами и причины отсутствия нейтрализации/ В.В. Макаров, М.С. Малахова, H.A. Власов// Доклады ВАСХНИЛ. -1991. -№12.-С.27-31.

18. Носик, H.H. Лабораторная диагностика вирусных инфекций/ H.H. Носик, В.М Стаханова// Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2000. - Т.2. - №2. -С.70-78.

19. Пантюшенко, М.С. Клонирование гена структурного белка Vp73 вируса африканской чумы свиней (АЧС)/ М.С. Пантюшенко, С.Ж. Цыбанов// Вирусные болезни сельскохозяйственных животных: тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции/ ВНИИЗЖ. - Владимир, 1995. - С.25.

20. Пат. №2121002. Способ дифференциации и идентификации изолятов и штаммов вируса африканской чумы свиней/ И.Ф. Вишняков, Ю.О. Селянинов, С.Ж. Цыбанов, H.H. Власова, М.С. Пантюшенко, Е.К. Сенечкина. - №2121002. - 1997.

21. Перзашкевич, B.C. Сравнительная характеристика методов очистки вируса африканской чумы свиней в градиентах плотности сахарозы и перколла/ B.C. Презашкевич, В.В. Кадетов, Т.В. Тимофеева// Актуальные проблемы вирусологии: тезисы докладов научной конференции/ Институт микробиологии и вирусологии Национальной академии наук. - п. Гвардейский, 1994. - С.21-22.

22. Принципы классификации изолятов вируса африканской чумы свиней/ И.Ф. Вишняков, A.B. Киселёв, Ю.И. Петров, Л.Л. Черятников, В.М. Балышев, Ю.П. Моргунов// Актуальные проблемы вирусологии: тезисы докладов научной конференции/ Институт микробиологии и вирусологии Национальной академии наук. - п. Гвардейский, 1994. - С.25-26.

23. Прогноз в области создания вакцин нового поколения для вакцинопрофилактики и вакцинотерапии инфекционных и неинфекционных болезней [Электронный ресурс]. - 2008. -Режим доступа: http://www.remedium.ru. - Загл. с экрана.

24. Профилактика и меры борьбы с африканской чумой свиней/ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fsvps.ru/fsvps/news/asf/faq.html? language=ru#6. - Загл. с экрана.

25. Распространение АЧС по территории Российской Федерации (данные на 15.10.2012)/ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fsvps.rU/fsvps-docs/ru/iac/asf/2012/l 5102012/01 .pdf. - Загл. с экрана.

26. Селянинов, Ю.О. Анализ генов отдельных клонов изолята вируса африканской чумы свиней/ Ю.О. Селянинов, H.H. Власова, М.С. Пантюшенко// Актуальные проблемы вирусологии: тезисы докладов научной конференции/ Институт микробиологии и вирусологии Национальной академии наук. - п. Гвардейский, 1994. - С. 18-19.

27. Селянинов, Ю.О. Физическое картирование генома вируса африканской чумы свиней/ Ю.О. Селянинов, Е.К. Сенечкина// Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 1995. - №2. - С.37-39.

28. Селянинов, Ю.О. Физическое картирование геномов вирулентного и авирулентного вариантов вируса АЧС/ Ю.О. Селянинов, С.Ж. Цыбанов, Е.К. Сенечкина// Актуальные проблемы вирусологии: тезисы докладов научной конференции/ Институт микробиологии и вирусологии Национальной академии наук. - п. Гвардейский, 1994. - С. 19-20.

29. Селянинов, Ю.О. Сравнительный анализ геномов двух штаммов вируса АЧС с различными иммунобиологическими свойствами/ Ю.О. Селянинов, B.C. Перзашкевич, В.М. Балышев// Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных: материалы международной научно-практической конференции/ВНИИВВиМ. - Покров, 1998. - С.60-61.

30. Селянинов, Ю.О. Сравнительный анализ штаммов вируса АЧС/ Ю.О. Селянинов, И.Ф. Вишняков, В.М. Балышев, С.Ж. Цыбанов// Диагностика, профилактика и меры борьбы с особо опасными и экзотическими болезнями животных: материалы международной научно-практической конференции/ВНИИВВиМ. - Покров, 1998. - С.59-60.

31. Селянинов, Ю.О. Вирус африканской чумы свиней: физическое картирование генома штаммов/ Ю.О. Селянинов, В.М. Балышев, С.Ж. Цыбанов// Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2000. - №5. - С.75-76.

32. Середа, АД. Идентификация изолятоспецифического глико-полипептида вируса африканской чумы свиней / АД. Середа, В.В. Макаров// Ветеринария. - 1992. - №1. - С.22-24.

33. Середа, АД. Серологические и физико-химические свойства ГП 110-140 вируса африканской чумы свиней/ АД. Середа, Е.Г. Анохина, Л.Г. Фугина, В.В. Макаров// Ветеринария. - 1993. - №1. - С.26-28.

34. Середа АД. Физико-химический полиморфизм вирусной популяции и дефектные

интерферирующие частицы вируса африканской чумы свиней/ А.Д. Середа, H.A. Власов, В.В. Макаров// Вестник РАСХН. - 1997. - №5,- С.67-70.

35. Сероиммунологическая классификация природных изолятов вируса африканской чумы свиней/ И.Ф. Вишняков, Н.И. Митин, Ю.И. Петров, JI.JI. Черятников, A.B. Киселев, В.А. Бурлаков, В.М. Балышев, И.В. Федорищев, Ю.П. Моргунов// Актуальные вопросы ветеринарной вирусологии: материалы науч.-практ. конф. ВНИИВВиМ «Классическая чума свиней - неотложные проблемы науки и практики». - Покров, 1995. - С.141-143.

36. Сероиммунологическая принадлежность вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации/ В.М. Балышев, Ю.Ф. Калантаенко, М.В. Болгова, Е.Ю. Прудникова// Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2011. - №5. - С.52-53.

37. Сравнительный рестрикционный анализ и физическое картирование изолятов вируса АЧС/ И.Ф. Вишняков, С.Ж. Цыбанов, Ю.О. Селянинов, P.M. Чумак, В.И. Жестерев, A.B. Киселев, Ю.И. Петров, В.А. Мещанин// Актуальные проблемы вирусологии: тезисы докладов научной конференции/ Институт микробиологии и вирусологии Национальной академии наук. - п. Гвардейский, 1994. - С.26-28.

38. Схема классификации вируса АЧС/ Н.И. Митин, В.М. Балышев, И.В. Федорищев, A.A. Шевченко, Ю.И. Петров// Материалы научной конференции ВНИИВВиМ. - Покров, 1986. -Т.1. - С.69-73.

39. Филогенетический анализ полевых изолятов вируса африканской чумы свиней/ И.М. Калабеков, A.A. Елсукова, А.Г. Шендрик, С.Ж. Цыбанов, Д.В. Колбасов, К. Галлардо, Е. Мартин, М. Ариас// Ветеринария. - 2010. -№5- С.31-33.

40. Функциональная роль гликозилирования вирусных компонентов/ В.В. Макаров, А.Д. Середа, A.A. Пиря [и др.]// Вопр. вирусологии. - 1992. - №.5-6. - С.267-270.

41. Эпизоотическая ситуация по АЧС на территории Российской Федерации в 2012 г. (по данным на 15.10.2012 г.)/ Официальный сайт Россельхознадзора [Электронный ресурс]. -Режим доступа: http://www.fsvps.ru/fsvps-docs/ru/iac/asf/2012/15102012/06.pdf. - Загл. с экрана.

42. African swine fever// Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals: Office International des Epizooties. - Paris, France, 2004. - 5th ed. - P.l 178.

43. African swine fever diagnosis. Role of the new tests/ M. Arias, M. Pastor, J.M. Escribano [et al.]// Proc. Workshop Coordinat. Agricult. Res. - Lisbon, 1993.- P.185-189.

44. African swine fever virus DNA: deletions and additions during adaptation to growth in monkey kidney cells/ E. Tabares, I. Olivares, G. Santurde, M.J. Garcia, E. Martin, M.E. Carnero// Arch. Virol. - 1987. - Vol.97. - P.333-346.

45. African swine fever virus isolate, Georgia, 2007/ R.J. Rowlands, V. Michaud, L. Heath, G.

Hutchings, C. Oura, W. Vosloo, R. Dwarka, T. Onashvili, E. Albina, L.K. Dixon// Emerging Infectious Diseases. -2008. - Vol.14. -№12. - P. 1870-1874.

46. African swine fever virus encodes a CD2 homolog responsible for the adhesion of erythrocytes to infected cells/ J.M. Rodriguez, R.J. Yanez, F. Almazan, E. Vinuela, J.F. Rodriguez// J. Virol. - 1993a. - Vol.67. - P.5312-5320.

47. African swine fever virus encodes a serine protein kinase which is packaged into virions/ S. Baylis, A.A.H. Banham, S. Vydelingum, L.K. Dixon, G.L. Smith// J. Virol. - 1993a. - Vol.67. -P.4549-4556.

48. African swine fever virus protein p54 interacts with the micro tubular motor complex through direct binding to light-chain dynein/ C. Alonso, J. Miskin, B. Hernaez [et al.]// J. Virol. -2001. - Vol.75, №20. - P.9819-9827.

49. African swine fever virus proteins involved in evading host defence systems/ L.K. Dixon, C.C. Abrams, G. Bowick, L.C. Goatley, P.C. Kay-Jackson, D. Chapman, E. Liverani, R. Nix, R. Silk, F. Zhang//Vet. Immunol. Immunopathol. - 2004. - №100. - P. 117-134.

50. African swine fever virus structural protein p72 contains a conformational neutralizing epitope/ M.V. Borca, P. Irusta, C. Carrillo [et al.]// Virology. - 1994. - Vol.201, №2. - P.413-418.

51. Aguero, M. Analysis of naturally occurring deletion variants of African swine fever virus: multigene family 110 is not essential for infectivity or virulence in pigs/ M. Aguero, R. Blasco, P. Wilkinson, E. Vinuela//Virology. - 1990. - Vol.176. - P. 195-204.

52. Amino acid sequence and structural properties of protein pl2, an african swine fever virus attachment protein/ A. Alcami, A. Angulo, G. Lopez-Otin [et al.]// J. Virol. - 1992. - Vol.66. - P.3860 - 3868.

53. An African swine fever virus gene with similarity to the proto-oncogene bcl-2 and the Epstein-Barr virus gene BHRF1/ J.G. Neilan, Z. Lu, C.L. Afonso, G.F. Kutish, M.D. Sussman, D.L. Rock// J. Virol. - 1993a. - Vol.67. - P.4391-4394.

54. An African swine fever virus gene with similarity to the T-lymphocyte surface antigen CD2 mediates hemadsorption/ M.V. Borca, G.K. Kutish, C.L. Afonso, P. Irusta, C. Carrillo, A. Brun, M. Sussman, D.L. Rock// Virology. - 1994b. - Vol.199. - P.463-468.

55. An african swine fever virus virulence-associated gene NL-S with similarity to the herpes simplex virus ICP34.5 gene/ L. Zsak, Z. Lu, G.F. Kutish [et al.]// J. Virol. - 1996. - Vol.70, №12. -P.8865-8871.

56. Analysis of the complete nucleotide sequence of african swine fever virus/ R.J. Yanez, J.M. Rodriguez, M.L. Nogal [et al.]// Virology. - 1995. - Vol.208, №1. - P.249-278.

57. An atypical strain of swine fever virus in Portugal/ Peste porcine africaine provoquee par une souche different (Souche L) de la souche classique/ J. Manso-Ribeiro, J.A. Rosa Azevedo, M.J.O.

Texeira, M.C. Braco Forte, A.M. Rodríguez Ribeiro, E. Oliveira, F. Noronha, C. Grave Perreira, J. Dias Viagrio//Bull. Off. Int. Epiz. - 1958. - Vol.50. - P.516-534.

58. Andrés, G. African Swine Fever Virus Polyproteins pp220 and pp62 Assemble into the Core Shell / G. Andrés, A. Alejo, J. Salas, M.L. Salas// J. Virol. - 2002. - Vol.76, №24. - P. 1247312482.

59. Andres, G. Characterization of two african swine fever virus 220-kDa proteins: a precursor of the major structural protein pi50 and an oligomer of phosphoprotein p32/ G. Andres, C. Simon-Mateo, E. Vinuela// Virology. - 1993. - Vol. 194. - P.284-293.

60. Angulo, A. Comparison of the sequence of the gene encoding African swine fever virus attachment protein pi2 from field virus isolates and viruses passaged in cell culture/ A. Angulo, E. Vinuela, A. Alcami// J. Virol. - 1992. - Vol.66. - P.3869-3872.

61. A nonessential african swine fever virus gene UK is a significant virulence determinant in domestic swine/ L. Zsak, E. Caler, Z. Lu [et al.]// J. Virol. - 1998. - Vol.72, №2. - P.1028-1035.

62. Antigenic and immunogenic properties of a chimera of two immunodominant African swine fever virus proteins/ M.G. Barderas, F. Rodriguez, P. Gomez-Puertas, M. Aviles, F. Beitia, C. Alonso [et al.]// Arch. Virol. - 2001. - Vol. 146, №9. - P. 1681 -91.

63. Antigenic properties and diagnostic potential of African swine fever virus protein pp62 expressed in insect cells/ C. Gallardo, E. Blanco, J.M. Rodriguez, A.L. Carrascosa, J.M. Sanchez-Vizcaino// J. Clin. Microbiol. - 2006. - Vol.44. - №3. - P.950-956.

64. Arias, M. African Swine Fewer Eradication: The Spanish model / M. Arias, J.M. Sanchez-Vizcaino // Trends in Emerging Viral Infections of Swine. 1st .edn. Ed. A. Morilla, К. Jin and J. Zimmerman. - Ames (Iowa, USA): Iowa State University Press;2002. - P. 133-139.

65. A solid-phase enzyme linked immunosorbent assay using monoclonal antibodies, for the detection of african swine fever virus antigens and antibodies/ M.I. Vidal, M. Stiene, J. Henkel, U. Bilitewski, J.V. Costa, A.G. Oliva// J. Virol. Methods. - 1997. - Vol. 66, №2. - P. 211-218.

66. Basic local alignment search tool/ S.F. Altschul, W. Gish, W. Miller, E.W. Myers, D.J. Lipman// J. Mol. Biol. - 1990. - Vol.215. - P.403-410.

67. Baylis, S.A. African swine fever virus encodes a gene with extensive homology to type II DNA topoisomerases/ S.A. Baylis, L.K. Dixon, S. Vydelingum, G.L. Smith// J. Mol. Biol. - 1992. -Vol.228. - P.1003-1010.

68. BioEdit sequence alignment editor [version 6.0.7]/ T. Hall// Ibis Therapeutics [Электронный ресурс]. - Carlsbad, CA, USA, 2004. - Режим доступа: http://\v\vw.mbio.ncsu.edu/BioEdit/bioedit.html. - Загл. с экрана.

69. Birnboim, Н.С. A rapid alkaline extraction method for the isolation of plasmid DNA/ H.C. Birnboim// Methods Enzymol. - 1983. - Vol.100. - P.243 - 255.

70. Black, D.N. Purification and physicochemical characteristics of african swine fever virus/ D.N. Black, F. Brown//J. Gen. Virol. - 1976. - Vol.32. - P. 509-518.

71. Blasco, R. Variable and constant regions in African swine fever virus DNA/ R. Blasco, M. Aguero, J.M. Almendral, E. Vinuela// Virology. - 1989a. - Vol.168. - P.330-338.

72. Bool, P.H. Le diagnostic par immunofluorescence de la peste porcine Africana/ P.H. Bool, A. Ordas, C. Sanchez-Botija// Rivista Del Patronato De Biologia Animal. - 1970. - Vol.14. - P.115-132.

73. Brookes, S.M. Intracellular virus DNA distribution and the acquisition of the nucleoprotein core during African swine fever virus particle assembly: ultrastructural in situ hybridisation and DNase-gold labeling/ S.M. Brookes, A.D. Hyatt, T. Wise, R.M. Parkhouse// Virology. - 1998a. -Vol.249.-P.175-188.

74. Bulimo, W.D. An ARID family protein binds to the African swine fever virus encoded ubiquitin conjugating enzyme UBCvl/ W.D. Bulimo, J.E. Miskin, L.K. Dixon// FEBS Letters. - 2000. -Vol.471.-P.17-22.

75. Camacho, A. Protein p22 of african swine fever virus: an early structural protein that is incorporated into the membrane of infected cells/ A. Camacho, E. Vinuela// Virology. - 1991. -Vol.181.-P.251-257.

76. Chapman, D.A.G. Comparison of the genome sequences of nonpathogenic and pathogenic African swine fever virus isolates/ D.A.G. Chapman, V. Tcherepanov, C. Upton, L.K. Dixon// J. Gen. Virol. - 2008. - Vol.89. - P.397-408.

77. Characterization and molecular basis of heterogeneity of the african swine fever virus envelope protein p54 / F. Rodriguez, C. Alcaraz, A. Eiras [et al.]// J. Virol. - 1994. - Vol.68. - P.7244-7252.

78. Characterisation of p30 a highly antigenic membrane and secreted protein of african swine fever virus / C.L. Afonso, C. Alcaraz, A. Brun [et al.]// Virology. - 1992. - Vol.189, №1. - P.368-373.

79. Characterization of pathogenic and non-pathogenic african swine fever virus isolates from Ornithodoros erraticus inhabiting pig premises in Portugal/ F.S. Boinas, G.H. Hutchings, L.K. Dixon [et al.]// J. Gen. Virol. - 2004. - Vol.85. - P.2177-2187.

80. Cobbold, C. A virally encoded chaperone specialized for folding of the major capsid protein of African swine fever virus/ C. Cobbold, M. Windsor, T. Wileman// J. Virol. - 2001. -Vol.75.-P.7221-7229.

81. Comparative Sequence Analysis of Genes Encoding Outer Proteins of African Swine Fever Virus Isolates from Different Regions of Russian Federation and Armenia/ N.N. Vlasova, A.S. Kazakova, A.A. Varentsova, T.A. Akopian, E.S. Kostryukova// International Journal of Virology and Molecular Biology [Электронный ресурс]. - 2012. - Vol.1. - №1. - P.1-11. - Шифр

Информрегистра: doi: 10.5923/j. ijvmb.20120101.01. - Режим доступа: http://www.sapub.org/iournal/archive.aspx?iournalid=1061&issueid=403. - Загл. с экрана.

82. Comparison of a radioimmunoprecipitation assay to immunoblotting and ELISA for detection of antibody to an african swine fever virus/ C.I. Alcaraz, M. De Diego, M.J. Pastor [et al.]// J. Vet. Diagn. Invest. - 1990. - Vol.2. - P. 191-196.

83. De Boer, C.J. Immunology of african swine fever/ C.J. De Boer, J.C. Pan, W.R. Hess// J. Amer. Vet. Med. Ass. - 1972. - Vol.160, №4. - P. 528-532.

84. De Kock, G. Swine fever in South Africa/ G. De Kock, E.M. Robinson, J.J.G. Keppel// Onderst. J. vet. Sci. anim. Indust. - 1940. - Vol.14. - P.31-93.

85. De Tray, D.E. African swine fever - interim report/ D.E. De Tray// Bull. Epiz. Dis. Afr. -1960.-Vol.8.-P.217-223.

86. Development of tools for the control of African swine fever virus/ European Animal Health and Welfare Research Collaborative working group// Research Project Database. - AGL2007-66441-C03-02. - Режим доступа: http://database.scar-cwg-ahw.org/?w=view&id=507#asfv. - Загл. с экрана.

87. Dixon, L.K. Current approaches for african swine fever virus vaccine development/ L.K. Dixon// Presentation [Электронный ресурс]. - 2011. - Режим доступа: http://www.slideshare.net/ILRI/current-approaches-for-african-swine-fever-virus-vaccine-development. - Загл. с экрана.

88. Dixon, L.K. Genetic diversity of African swine fever virus isolates from soft ticks ( Ornithodoros moubata ) inhabiting warthog burrows in Zambia/ L.K. Dixon, P.J. Wilkinson// J. Gen. Virol. - 1988. - Vol.69. - P.2981-2993.

89. Dixon, L.K. The structure and function of the african swine fever genome/ L.K. Dixon// Rev. Sci. tech. Off. int. Epiz. - 1986. - Vol.5. - №2. - P.469-475.

90. DNA polymerase X of African swine fever virus: insertion fidelity on gapped DNA substrates and AP lyase activity support a role in base excision repair of viral DNA/ R. Garcia-Escudero, M. Garcia-Diaz, M.L. Salas, L. Blanco, J. Salas// J. Mol. Biol. - 2003. - Vol.326. - P. 14031412.

91. DNA Vaccination Partially Protects against African Swine Fever Virus Lethal Challenge in the Absence of Antibodies/ J.M. Argilaguet, E. Pérez-Martín, M. Nofrarías, C. Gallardo, F. Accensi, A. Lacasta, M. Mora, M. Ballester, I. Galindo-Cardiel, S. López-Soria, J.M. Escribano, P.A. Reche, F. Rodriguez// PLoS One [Электронный ресурс]. - 2012. - Vol.7, №9: e40942. - Шифр Информрегистра: doi:10.1371/journal.pone.0040942. - Режим доступа: www.plosone.org. - Загл. с экрана.

92. Doyle, P. African Swine Fever Virus Manipulated Into AIDS & CFS?/ P. Doyle [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://rense.com/general76/afrr.htm. - Загл. с экрана.

93. Duplicated genes within the variable right end of the genome of a pathogenic isolate of African swine fever virus/ S. Vydelingum, S.A. Baylis, C. Bristow, G.L. Smith, L.K. Dixon// J. Gen. Virol. - 1993. - Vol.74. - P.2125-2131.

94. Edelstein, R.M. Report on an Investigation into the suspected African swine fever outbreak in Karonga/ R.M. Edelstein// Livestock disease evaluation project. - Lilongwe, 1989.

95. Edelstein, R.M. African swine fever. Animal Health status in Malawi 1990/ R.M. Edelstein, D.O. Chinombo, A.W. Soldan// Livestock disease evaluation report. - Lilongwe, 1991.

96. Enhanced discrimination of African swine fever virus isolates through nucleotide sequencing of the p54, p72, and pB602L (CVR) genes/ C. Gallardo, D.M. Mwaengo, J.M. Macharia, M. Arias, E.A. Taracha, A. Soler, E. Okoth, E. Martin, J. Kasiti, R.P. Bishop// Virus Genes. - 2009. -№38.-P.85-95.

97. Enjuanes, L. Isolation and properties of the DNA of African swine fever (ASF) virus/ L. Enjuanes, A.L. Carrascosa, E. Vinuela// J. Gen. Virol. - 1976. - Vol.32. - P.479-492.

98. Escribano, J.M. Proteins specified by African swine fever virus V. Identification of immediate early, early and late proteins/ J.M. Escribano, E. Tabares// Arch. Virol. - 1987. - Vol.92. -P.221-238.

99. Escudero, R.G. Inducible Gene Expression from African Swine Fever Virus Recombinants: Analysis of the Major Capsid Protein p72/ R.G. Escudero, G. Andres, F. Almazan, E. Vinuela// J. Virol. - 1998. - Vol.72. - № 4. - P.3185-3195.

100. Expression at mRNA levels of cytokine and A238L gene in porcine blood-derived macrophages infected in vitro with African swine fever virus isolates of different virulence/ S. Gil, M. Spanlguolo, A. Canals [et al.]//Archives of Virology. - 2003. - №184. - P.2077-2097.

101. Expression, purification and applications of staphylococcal protein A fused to cellulose-binding domain/ E. Shpigel, A. Goldlust, A. Eshel [et al.]// Biotechnol. Appl. Biochem. - 2000. -Vol.31. - P. 197-203.

102. Family Asfarviridae/ L.K. Dixon, J.V. Costa, J.M. Escribano, D.L. Rock, E. Vinuela, P.J. Wilkinson/ In: M.H.V. Van Regenmortel, C.M. Fauquet, D.H.L. Bishop, E.B. Carestens, M.K. Estes, S.M. Lemon, J. Maniloff, M.A. Mayo, D.J. McGeoch, C.R. Pringle, R.B.F.A. Wickner, C.M. Murphy, D.H.L. Fauquet, S.A. Bishop, A.W. Ghabrial, G.P. Jarvis, M.D. Martelli (eds)// Virus taxonomy: Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. -Summers Academic Press, San Diego, 2000. - P.159-165.

103. Galindo, I. Characterization of the African swine fever virus protein p49: a new late structural polypeptide/ I. Galindo, E. Vinuela, A.L. Carrascosa// J. Gen. Virol. - 2000. - Vol.81. -P.59-65.

104. Garcia-Beato, R. Role of the host cell nucleus in the replication of African swine fever virus DNA/ R. Garcia-Beato, M.L. Salas, E. Vinuela, J. Salas// Virology. - 1992. - Vol.188. - P.637-649.

105. General morphology and capsid fine structure of african swine fever virus particles/ J.L. Carrascosa, J.M. Carazo, A.L. Carrascosa [et al.]// Virology. - 1984. - Vol.132. - P. 160-172.

106. Genotyping field strains of african swine fever virus by partial p72 gene characterization/ A.D. Bastos, M.L. Penrith, C. Cruciere [et al.]// Arch. Virol. - 2003. - Vol.148, №4. - P.693-706.

107. Greig, A. Studies on African swine fever/ A. Greig// Thesis for the Diploma of Fellowship of the Royal College of Veterinary Surgeous. - 1980.

108. Hairpin loop structure of african swine fever virus DNA/ A. Gonzalez, A. Talavera, J.M. Almendral [et al.]// Nucleic Acids Res. - 1986. - Vol.14. - P.6835-6844.

109. Hamdy, F.M. Enzime-linked immunosorbent assay for the diagnosis of African swine fever/ F.M. Hamdy, A.H. Dardiri// Vet. Rec. - 1979. - Vol.105. - P.445-446.

110. Hasslberger, S. AIDS, Chronic Fatigue: Modified African Swine Fever Virus Implicated?/ S. Hasslberger [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.newmediaexplorer.org/sepp/2005/04/28/aids_chronic fatigue modified african_swine fe ver virus implicated.htm#. - Загл. с экрана.

111. Hess, W.R. African swine fever/W.R. Hess// Virol. Monogr. - 1971. - Vol.9. -P.l-33.

112. Hess, W.R. African swine fever: a reassessment / W.R. Hess// Adv. Vet. Sci. сотр. Med. -1981.-Vol.25.-P.39-69.

113. High-level expression in Escherichia coli of the gene coding for the major structural protein (p72) of African swine fever virus/ J.M.P. Freije, M. Munoz, E. Vinuela, C. Lopez-OtinII Gene. - 1993. - Vol.123, №2. - P.259-262.

114. High level expression of the major antigenic African swine fever virus proteins p54 and p30 in baculovirus and their potencial use as diagnosis reagents/ J.M. Oviedo, F. Rodriguez, P. Gomez-Puertas [et al.]//J. Virol. Methods. - 1997. - Vol.64. - P.27-35.

115. Highly sensitive PCR assay for routine diagnosis of african swine fever virus in clinical samples/ M. Aguero, J. Fernandez, L. Romero [et al.]// J. Clin. Microbiol. - 2003. - Vol.41, №9. -p.4431-4434.

116. Highly specific confirmatory western blot test of african swine fever virus antibody detection using the recombinant virus protein p54/ C.I. Alcaraz, F. Rodriguez, J.M. Oviedo [et al.]// J. Virol. Methods. - 1995. -Vol.52. -P.l 11-119.

117. Hingamp, P.M. A ubiquitin conjugating enzyme encoded by African swine fever virus/ P.M. Hingamp, J.E. Arnold, R.J. Mayer, L.K. Dixon// EMBO J. - 1992. - Vol.11. - P.361-366.

118. Identification of an African swine fever virus gene with similarity to a myeloid differentiation primary response gene and a neurovirulence-associated gene of herpes simplex virus/ M.D. Sussman, Z. Lu, G.F. Kutish, C.L. Afonso, P. Roberts, D.L. Rock// J. Virol. - 1992. - Vol.66. -P.5586-5589.

119. Iyer, L.M. Common origin of four diverse families of large eukaryotic DNA viruses/ L.M. Iyer, L. Aravind, E.V. Koonin//J. Virol. - 2001. - Vol.75. - P. 11720-11734.

120. Iyer, L.M. Evolutionary genomics of nucleo-cytoplasmic large DNA viruses/ L.M. Iyer, S. Balaji, E.V. Koonin, L. Aravind// Virus. Res. - 2006. - Vol.117. - P. 156-184.

121. Jere, F.B.D. Epidemiology of African swine fever with particular reference to Malawi: M.Sc. Dissertation/ F.B.D. Jere// University of Edinburgh. - Edinburgh, 1991.

122. Kumar, S. Altered Order of Substrate Binding by DNA Polymerase X from African Swine Fever Virus/ S. Kumar, M. Bakhtina, M.-D. Tsai// Biochemistry. - 2008. - Vol.47. - P.7875-7887.

123. Kyhse-Andersen, J. Electroblotting of multiple gels:a simple apparatus without buffer tank for rapid transfer of proteins from Polyacrylamide to nitrocellulose/ J. Kyhse-Andersen// J. of Biochem. and Biophys. Methods. - 1984. - Vol.10. - №3/4. - P.203-209.

124. Laboratory diagnosis and disease occurrence in the current african swine fever eradication program in Spain 1989-1991/ S. Bech-Nielsen, M.L. Arias, J. Panadero [et al.]// Prevent Vet. Med. -1993.-Vol.17. -225-234.

125. Laemmli, U.K. Clevage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage Т4/ U.K. Laemmli// Nature. - 1970. - Vol.227. - P.680-685.

126. Lamarche, B.J. ASFV DNA Polymerase X is Extremely Error-Prone Under Diverse Assay Conditions and Within Multiple DNA Sequence Contexts/ B.J. Lamarche, S. Kumar, M.-D. Tsai// Biochemistry. - 2006. - Vol.45, №49. - P.14826-14833. - Шифр Информрегистра: doi: 10.102 l/bi0613325.

127. Larenaudie, B. La purification du virus de la peste porcine africaine par le fluorocarbone/ B. Larenaudie, J. Haag, В. Carnero//Bull. off. internat. epiz. - 1965. - Vol.63. - №5-6. - P.711-716.

128. Leavitt, R. Impaired Intracellular Migration and Altered Solubility of Nonglycosylated Glycoproteins of Vesicular Stomatitis Virus and Sindbis Virus/ R. Leavitt, S. Schlesinger, S. Kornfeld// J. Biol. Chem. - 1977. - Vol.252. - №24. - P.9018-9023.

129. Leavitt, R. Tunicamycin Inhibits Glycosylation and Multiplication of Sindbis and Vesicular Stomatitis Viruses/ R. Leavitt, S. Schlesinger, S. Kornfeld// J. Virol. - 1977. - Vol.21. -№1,-P.375-385.

130. Localization of the african swine fever virus attachment protein pl2 in the virus particle by immunoelectron microscopy/ A.L. Carrascosa, I. Sastre, P. Gonzalez [et al.]// Virology. - 1993. -Vol.193. -P.460-465.

131. Malmquist, W. A. Haemadsorption and cytopathic effect produced by African swine fever virus in swine bone marrow and buffy coat cultures/ A.W. Malmquist, D. Hay// Amer. J. vet. Res. -I960.-Vol.21.-P.104-108.

132. Malmquist, W.A. Serologic and immunologic studies with African swine fever virus/ W.A. Malmquist// Amer. J. vet. Res. - 1963. - Vol.24. - P.450-459.

133. Manso-Ribeiro, J. Vaccination against ASF/ J. Manso-Ribeiro, J.L. Nunes-Petisca, F. Lopez-Frazao, M. Sobral// Bull. Off. Int. Epizoot. - 1963. - Vol.60. - P.921-937.

134. MEGA5: Molecular Evolutionary Genetics Analysis using Maximum Likelihood, Evolutionary Distance, and Maximum Parsimony Methods/ K. Tamura, D. Peterson, N. Peterson, G. Stecher, M. Nei, S. Kumar// Molecular Biology and Evolution. - 2011. - Vol.28. - P.2731-2739. -Шифр Информрегистра: doi:10.1093/molbev/msrl21

135. Meireles, M. Nucleotide sequence of the telomeric region of the African swine fever virus genome/ M. Meireles, J.V. Costa// Virology. - 1994. - Vol.203. - P. 193-196.

136. Modulation of the Structure, Catalytic Activity, and Fidelity of African Swine Fever Virus DNA Polymerase X by a Reversible Disulfide Switch/ M.W. Voehler, R.L. Eoff, W.H. McDonald, F.P. Guengerich, M.P. Stone// J. Biol. Chem. [Электронный ресурс]. - 2009. - Режим доступа: http://www.ibc.0rg/cgi/d0i/l 0.1074/ibc.M 109.012542. - Загл. с экрана.

137. Molecular characterization of African swine fever virus isolates originating from outbreaks in the Russian Federation between 2007 and 2011/ A. Malogolovkin, A. Yelsukova, C. Gallardo, S. Tsybanov, D. Kolbasov// Vet. Microbiol. - 2012. - P.l-5. - Шифр информрегистра: doi:10.1016/j.vetmic.2012.03.002.

138. Molecular cloning of African swine fever virus DNA/ V. Ley, J.M. Almendral, P. Carbonero, A. Beloso, E. Vinuela, A. Talavera// Virology. - 1984. - Vol.133. - P.249-257.

139. Molecular epidemiology of African swine fever in East Africa/ B.A. Lubisi, A.D. Bastos, R.M. Dwarka, W. Vosloo// Archives of Virology. - 2005. - №150. - P.2439-2452.

140. Molecular epidemiology of African swine fever virus studied by analysis of four variable genome regions/ R.J. Nix, C. Gallardo, G. Hutchings, E. Blanco, L.K. Dixon// Archives of Virology. -2006. -№151.- P.2475-2494.

141. Monoclonal antibodies specific for African swine fever virus proteins/ A. Sanz, B. Garcia-Barreno, M.L. Nogal, E. Vinuela, L. Enjuanes// J. Virol. - 1985. - Vol.54. - P.199-206.

142. Montgomery, R.E. On a form of swine fever occurring in British East Africa (Kenya Colony)/ R.E. Montgomery// J. Сотр. Pathol. - 1921. - Vol.34. - P.159-191, 243-262.

143. NCBI BLAST: a better web interface/ M. Johnson, I. Zaretskaya, Y. Raytselis, Y. Merezhuk, S. McGinnis, T.L. Madden// Nucleic Acids Res. - 2008. - Vol.36. - P.W5-W9.

144. Neal Burnette, W. Western Blotting: Electrophoretic transfer of proteins from sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels to unmodified nitrocellulose and radiographic detection with antibody and radioiodinated protein/ W. Neal Burnette// Anal. Biochem. - 1981. - Vol.112. - P.195-203.

145. Neutralizing antibodies to African swine fever virus proteins p30, p54, and p72 are not sufficient for antibody-mediated protection/ J.G. Neilan, L. Zsak, Z. Lu, T.G. Burrage, G.F. Kutish, D.L. Rock// Virology. - 2004. - Vol.319. - P.337- 42.

146. Neutralizing antibodies to different proteins of African swine fever virus inhibit both virus attachment and internalization/ P. Gomez-Puertas, F. Rodriguez, J.M. Oviedo [et al.]// J. Virol. - 1996. - Vol.70.-P.5689-5694.

147. Novagen pET System Manual 11th Edition. User Protocol TB055 Rev. С 0611JN 1-63. -Режим доступа: http://www.emdmillipore.com/chemdat/en CA/Merck-US-Site/USD/ViewProductDocuments-File?ProductSKU=EMD BIO-71867&DociimentTvpe=USP&DocumentId=/emd/biosciences/userprotocols/en-US/TB055.pdf&DocumentSource=GDS. - Загл. с экрана.

148. Novel Swine Virulence Determinant in the Left Variable Region of the African Swine Fever Virus Genome/ J.G. Neilan, L. Zsak, Z. Lu, G.F. Kutish, C.L. Afonso, D.L. Rock// J. Virol. -2002. - Vol.76. - №7. - P.3095-3104.

149. Nucleotide sequence and variability of the inverted terminal repetitions of african swine fever virus DNA/ I. de la Vega, A. Gonzalez, R. Blasco [et al.]// Virology. - 1994. - Vol.201, №1. -P.152-156.

150. Optimization and validation of recombinant serological tests for African swine fever diagnosis based on detection of the p30 protein produced in Trichoplusia ni larvae/ D.M. Perez-Filgueira, F. Gonzalez-Camacho, C. Gallardo [et al.]// J. clin. microbiol. - 2006. - Vol.44, JVb9. -P.3114-3121.

151. Ortin, J. Cross-links in African swine fever virus DNA/ J. Ortin, L. Enjuanes, E. Vinuela// J. Virol. - 1979. - Vol.31. - P.579-583.

152. Pan, I.C. Virulence in African swine fever: its measurement and implications/ I.C. Pan, W.R. Hess// Am J Vet Res. - 1984. - Vol.45, №2. - P.361-366.

153. Pini, A. African swine fever: an epizootiological review with special reference to the South African situation/ A. Pini, L.R. Hurter// J. S. Afr. Vet. Med. Assoc. - 1975. - Vol.46. - P.227-232.

154. Plowright, W. African swine fever: a retrospective view /W. Plowright// Rev.sci. tech. Off.int. Epiz. - 1986. - Vol.5. - №2. -P.455-468.

155. Plowright, W. African swine fever. Infectious diseases of livestock/ W. Plowright, G.R. Thomson, J.A. Neser/ In: J.A.W. Coetzer, G.R. Thomson, R.C. Tustin (eds)// Oxford University Press.

- Capetown, 1994. - P.568-599.

156. Plowright, W. Vector transmission of african swine fever virus / W. Plowright// Seminar on hog cholera/ classical swine fever and African swine fever / Commission of the European Communities. EUR. 5904 En., Brussel, Luxemburg. - 1977. - P.575-587.

157. Prados, F.J. Sequence and characterization of the major early phosphoprotein p32 of african swine fever virus/ F.J. Prados, E. Vinuela, A. Alcami// J. Virol. - 1993. - Vol.67. - P.2475-2485.

158. Protein masurement with the folin phenol reagents/ O.H. Lowry, M.G. Rosebrough, A.L. Farr [et al.]//J. Gen. Virol. - 1972. - Vol.14. - №1. - P.l 11-114.

159. Purification and properties of african swine fever virus/ A.L. Carrascosa, M. Del Val, J.F. Santaren [et al.]// J. Virol. - 1985. - Vol.54. - P.337-344.

160. Rapid and biologically safe diagnosis of african swine fever virus infection by using polymerase chain reaction/ Y. Steiger, M. Ackermann, C. Mettraux [et al.]// J. Clin. Microbiol. - 1992.

- Vol.30,№1. -P.l-8.

161. Regulation of Host Translational Machinery by African Swine Fever Virus/ A. Castello, A. Quintas, E.G. Sanchez, P. Sabina, M. Nogal et al.// PLoS, Pathog [Электронный ресурс]. - 2009.

- Vol.5,№8. - Шифр Информрегистра: el000562. - doi: 10.1371/journal.ppat. 1000562. - Режим доступа: http://www.plospathogens.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fiournal.ppat.1000562. -Загл. с экрана.

162. Replication of African swine fever virus DNA in infected cells/ G. Rojo, R. Garcia-Beato, E. Vinuela, M.L. Salas, J. Salas// Virology. - 1999. - Vol.257. - P.524-536.

163. Restriction site map of African swine fever virus DNA/ J.M. Almendral, R. Blasco, V. Ley, A. Beloso, A. Talavera, E. Vinuela// Virology. - 1984. - Vol.133. - P.258-270.

164. Rodriguez, F. Searching for an efficacious vaccine against the African swine fever/ F. Rodriguez [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.cresa.es/cresa3/default.asp?mod=strmenu01&anio::::::2007&sub=noticia38&idioma=en. -Загл. с экрана.

165. Rodriguez, J.M. African swine fever virus-induced polypeptides in porcine alveolar macrophages and in Vero cells: two-dimensional gel analysis / J.M. Rodriguez, M.L. Salas, J.F. Santaren//Proteomics. - 2001. - Vol.1. - №11. - P. 1447-1456.

166. Rodriguez, J.M. African swine fever virus structural protein p54 is essential for the recruitment of envelope precursors to assembly sites/ J.M. Rodriguez, R. Garcia-Escudero, M.L. Salas, G. Andres// J. Virol. - 2004. - Vol.78. - P.4299-4313.

167. Rodriguez, J.M. Genes homologous to ubiquitin-conjugating proteins and eukaryotic transcription factor SII in African swine fever virus/ J.M. Rodriguez, M.L. Salas, E. Vinuela// Virology. - 1992. - Vol. 186. - P.40-52.

168. Rychlik, W. A computer program for choosing optimal oligonucleotides for filter hybridization, sequencing and in vitro amplification of DNA/ W. Rychlik, R.E. Rhoads// Nucleic Acids Res. - 1989. - Vol.17. - P.8543-8551.

169. Saitou, N. The neighbor-joining method: A new method for reconstructing phylogenetic trees/ N. Saitou, M. Nei// Mol. Boil. Evol. - 1987. - Vol.4. - P.406-425.

170. Salas, M. Asfrican swine fever {Asfarviridae)/ M. Salas/ In: R.G.W. Allan Granoff (ed.)// Encyclopedia of Virology. - London: Academic Press, 1999. - 1997 pp.

171. Sambrook, J. Condensed Protocols from Molecular Cloning: A Laboratory Manual/ J. Sambrook and D. Russell. - New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2006. - 700 pp.

172. Sampoli Benitez, B.A. In Silico Studies of the African Swine Fever Virus DNA Polymerase X Support an Induced-Fit Mechanism/ B.A. Sampoli Benitez, K. Arora, T. Schlicky// Biophysical Journal. - 2006. - Vol.90. - P.42-56.

173. Sanchez-Botija, C. Diagnosis of African swine fever by immunofluorescence/ C. Sanchez-Botija// Bull. Off. Int. Epiz. - 1970. - Vol.73. - P.1025-1044.

174. Sanchez-Botija, C. Estudio sobre la peste porcina africana en Espana/ C. Sanchez-Botija// Bull. off. internat. epiz. - 1962. - Vol.58. - P.707-727.

175. Sanchez-Botija, C. Laboratory manual for diagnosis on african swine fever/ C. Sanchez-Botija, A. Ordas. - Madrid, 1977.

176. Sanger, F. DNA sequencing with chain-terminating inhibitirs/ F. Sanger, S. Nicklen, A.R. Coulson// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1977. - Vol.74. - P.5463-5467.

177. Serodiagnosis of african swine fever using the recombinant protein p30 expressed in insect larvae/ M.G. Barderas, A. Wigdorovitz, F. Merelo [et al.]// J. Virol. Methods. - 2000. - Vol.89. -P.129-136.

178. Serological behaviour of isolated African swine fever virus / J.D. Vigario, A.M. Terrinha, A.L. Bastos, J.F. Moura-Nunes, Dante Marques, J.F. Silva// Arch. ges. Virusforsch. - 1970. - Vol.31. - P.387-389.

179. Simon-Mateo, C. Proteolytic processing in African swine fever virus: evidence for a new structural polyprotein, pp62 / C. Simon-Mateo, G. Andres, F. Almazan, E. Vinuela// J. Virol. - 1997. -Vol.71. - №8. - P.5799-5804.

180. Steyn, D.G. Preliminary report on a South African virus disease amongst pigs/ D.G. Steyn// 13th and 14th Reps. Dir. Vet. Educ. Res. - Union of South Africa, 1928. - P.415-428.

181. Studier, F.W. Protein production by auto-induction in high density shaking cultures/ F.W. Studier// Protein Expr Purif. - 2005. - Vol.41, №1. - P.207-34. - Режим доступа: http://www.biology.bnl.gov/cellbio/studier.html. - Загл. с экрана.

182. Sumption, K.J. Genetic comparison of African swine fever virus isolates rom Zambia and Malawi/ K.J. Sumption Doctor of Philosophy Thesis; University of Reading. - UK, 1992.

183. Sumption, K.J. Variable regions on the genome of Malawi isolates of African swine fever virus/ K.J. Sumption, G.H. Hutchings, P.J. Wilkinson, L.K. Dixon// J. Gen. Virol. - 1990. - Vol.71. -P.2331-2340.

184. Swofford, D.L. Phylogenetic inference/ D.L. Swofford, G.J. Olsen, P.J. Waddell, D.M. Hillis/ In: D.M. Hillis, C. Moritz, B.K. Mable (eds)// Molecular Systematics. - Sunderland, Massachusetts: Sinauer Associates Inc. - 1996. - 2nd edn. - P.407-514.

185. Systematic analysis of longitudinal serological responses of pigs infected experimentally with African swine fever virus/ A.L. Reis, R.M.E. Parkhouse, A.R. Penedos [et al.]// J. Gen. Virol. -2007. - Vol.88. - P.2426-2434.

186. Terminal and internal inverted repetitions in african swine fever virus DNA/ J.M. Sogo, J.M. Almendral, A. Talavera [et al.]// Virology. - 1984. - Vol.133. - P.271-275.

187. The 1996 epizootic of African swine fever in the Ivory Coast/ K. el Hicheri, C. Gomez-Tejedor, M.L. Penrith, G. Davies, A. Douati, G.J. Edoukou, K. Wojciechowski// Rev. Sci. Tech. -1998. - Vol.17. -P.660-673.

188. The african swine fever virus protein j4R binds to the alpha chain of nascent polypeptide-associated complex/ L.C. Goatley, Twigg S.R., Miskin J.E. et al. // J. Virol. - 2002. - Vol.76, №19. -P. 9991-9999.

189. The African Swine Fever Virus Proteins p54 and p30 Are Involved in Two Distinct Steps of Virus Attachment and Both Contribute to the Antibody-Mediated Protective Immune Response/ P. Gomez-Puertas, F. Rodriguez, J.M. Oviedo [et al.]// Virology. - 1998. - Vol.243. - P.461-471.

190. The CD2v protein of African swine fever virus interacts with the actin-binding adaptor protein SH3P7/ P.C. Kay-Jackson, L.C. Goatley, L. Cox, J.E. Miskin, R.M.E. Parkhouse, J. Wienands, L.K. Dixon//Journal of General Virology. - 2004. - №85. - P.119-130.

191. The structural protein p54 is essential for African swine fever virus viability/ F. Rodriguez, V. Ley, P. Gomez-Puertas, R. Garcia, J.F. Rodriguez, J.M. Escribano// Virus Res. - 1996. -Vol.40. - P.161-167.

192. Three African swine fever virus genes encoding proteins with homology to putative helicases of vaccinia virus/ S.A. Baylis, S.R. Twigg, S. Vydelingum, L.K. Dixon, G.L. Smith// J. Gen. Virol. - 1993b. - Vol.74. - P.1969-1974.

193. Towbin, H. Electrophoretic transfer of proteins from gels to nitrocellulose sheets: procedure and some applications/ H. Towbin, T. Staehelin, J. Gordon// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1979. - Vol.76. - P.4350-4354.

194. Transcriptional mapping of a late gene coding for the pl2 attachment protein of african swine fever virus/ F. Almazan, J.M. Rodriguez, A. Angulo [et al.]// J. Virol. - 1993. - Vol.67. - P.553-556.

195. Tulman, E.R. African Swine Fever Virus/ E. R. Tulman , G. A. Delhon , В. K. Ku , D. L. Roclc/ In: J.L. van Etten (ed.)// Lesser Known Large dsDNA Viruses. - Springer-Verlag: Berlin, Heidelberg, 2009. - P.43-87.

196. Variable and constant regions in african swine fever virus DNA/ R. Blasco, M. Aguero, J.M. Almendral [et al.]// Virology. - 1989. - Vol.168. - P.330-338.

197. Vinuela, E. African swine fever virus/ E. Vinuela// Curr. Top. Microbiol. Immunol. -1985.-Vol.116.-P.151-170.

198. ViralZone [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://viralzone.expasy.org/all by species/ 12.html. - Загл. с экрана.

199. Vlasova, N.N. Perspective of using the recombinant DNA-technology to control the spread of the African swine fever/ N.N. Vlasova, V.M. Balyshev, A.S. Kazakova// Procedia in Vaccinology [Электронный ресурс]. - 2011. - №4. - P.92-99. - Шифр Информрегистра: doi:10.1016/j.provac.2011.07.013. - Режим доступа: http://www.sciencedirect.com/science/iournal/1877282X. - Загл. с экрана.

200. Wardley, R.C. Lymphocyte responses to African swine fever virus infection/ R.C. Wardley, P.J. Wilkinson//Res. Vet. Sci. - 1980. - №28. - P.185-189.

201. Wesley, R.D. Genome relatedness among African swine fever virus field isolates by restriction endonuclease analysis/ R.D. Wesley, A.E. Tuthill// Prev. Vet. Med. - 1984. - Vol.2. -P.53-62.

202. Wiley, J. Statistics for Experimenters: Design, Innovation and Discovery/ J. Wiley/ In: G.E.P. Box, J.S. Hunter, W.G. Hunter (eds). - New York, 2005. - 2nd ed. - P.437-488.

203. Yu, M. Strong sequence conservation of african swine fever virus p72 protein provides the molecular basis for its antigenic stability/ M. Yu, C.J. Morrissy, H.A. Westbury// Arch. Virol. - 1996. -Vol.141. -P.1795-1802.

204. Zucas, A. La peste porcine africane/ A. Zucas, I. Haad, B. Larenandie// Coll. de Monograph. - Paris, 1967.-P. 114.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.