Механизмы регуляторного действия пролинсодержащих олигопептидов на показатели гемостаза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат биологических наук Черкасова, Ксения Анатольевна

• Черкасова, Ксения Анатольевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Черкасова, Ксения Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ.г.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современные представления о регуляторных взаимодействиях свертывающей и нротнвосвертывающей систем крови.

1.2. Роль тромбоцитарных рецепторов в адгезии и агрегации тромбоцитов.

1.3. Модуляция гемостатических реакций in vitro и in vivo пролин-содержащими пептидами и возможные источники их биосинтеза.

1.4. Использование прапарата Семакс в медицине.

1.4.1. Пролин- содержащий препарат Семакс.

1.4.2. Применение препарата Семакс.

Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Материалы и методы исследования.

2.1.1. Используемые препараты.

2.1.2. Объекты исследования.

2.1.3. Методы исследования функционального состояния тромбоцитов.

2.1.4. Метод определения активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ).

2.1.5. Метод определения фибриногена.

2.1.6. Метод определения а2антиплазминов в плазме с использованием хромогенного субстрата s-2251.

2.1.7. Метод определения общей фибринолитической активности, активности плазмина и тканевого активатора плазминогена эуглобулиновой фракции плазмы на стандартных фибриновых пластинках.

2.1.8. Определение ХНа- калликреин-зависимого фибринолиза.

2.1.9. Определение суммарной активности системы протеина С.

2.1.10. Определение активности антитромбина III.

2.1.11. Определение активности фактора ХШа

2.1.12. Методика создания тромбов. J.

2.2. Собственные результаты.

2.2.1. Влияние препарата Семакс (MEHFPGP) и простейших пролинсодержащих пептидов на показатели плазменного гемостаза крыс.

2.2.2. Функциональная активность тромбоцитов крыс при действии

Семакса in vivo и in vitro.

2.2.3 Влияние in vivo Семакса и трипептида PGP на процесс тромбообразования у крыс.

2.2.4. Применение Семакса для коррекции системы гемостаза у пациентов с острыми и медленно прогрессирующими нарушениями мозгового кровообращения.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы регуляторного действия пролинсодержащих олигопептидов на показатели гемостаза»

Актуальность проблемы: Исследования влияния биологически активных пептидов на многие физиологические функции организма осуществляются уже в течение нескольких десятилетий. Однако до настоящего времени интерес к ним не только не ослабевает, но с каждым годом растет, распространяясь практически на все отрасли биологии и медицины.

Полученные в результате развития медико-биологических технологий данные о структуре, молекулярных аспектах биосинтеза, разнообразии функций регуляторных пептидов и кооперативности их действия послужили основой для фундаментальных исследований по выяснению влияния этих веществ на активность нервной, эндокринной, иммунной систем, на процессы дыхания, пищеварения, памяти, поведенческие реакции и др.

Все большую значимость для медицины приобретают работы, связанные с выяснением роли физиологически активных пептидов в патогенезе заболеваний.

И, наконец, исследование этих веществ интересно и перспективно с практической точки зрения, поскольку многие природные пептиды и их синтетические агонисты и антагонисты используются при патологических состояниях в качестве профилактических и лечебных препаратов.

В настоящее время особое внимание уделяется изучению механизмов действия фармакологических средств, полученных на основе синтетических и природных пептидов на гемостаз, канцерогенез, апоптоз, ноцицепцию, протекторное действие на слизистые оболочки, функцию нервной, эндокринной, пищеварительной и других систем организма (1; 10; 11; 13; 53; 58; 69: 88:97; 113: 125: 130: 149; 159; 163).

В литературе имеются сообщения об ингибировании тромбоцитарной функции, свертывающей активности тромбина и процесса 6 полимеризации фибрина регуляторными пептидами, содержащими специфическую аминокислотную последовательность адгезивных белков Arg-Gly-Asp, пролин и глицин. Ведутся исследования механизма действия простейших и наиболее устойчивых пролинсодержащих пептидов, таких как Pro-Gly и Gly-Pro, трипеитидов Pro-Gly-Pro и Boc-Gly-Pro-Arg-OMe, более сложного пептида Met-Gly-His-Phe-Pro-Gly-Pro (препарат Семакс, разрешенный к клиническому применению в качестве лекарственного ноотропного средства) на показатели гемостаза в условиях in vivo и in vitro в норме и патологии (11; 13; 39; 71; 82; 102; 114; 115; 145). Однако эти данные еще не достаточно систематизированы и не редко противоречивы.

Таким образом, изучение механизма влияния пролинсодержащих олигопептидов на процессы регуляции гемокоагуляции и фибринолиза является актуальной задачей и в перспективе найдет применение в клинической практике.

Цель настоящего исследования - изучить регуляторное действие пролинсодержащих олигопептидов на показатели плазменного и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза, а так же на процесс тромбообразования в эксперименте и при клинической патологии.

Задачи исследования:

1. Изучить в динамике влияние пролинсодержащих олигопептидов (препарата Семакс, трипептида Pro-Gly-Pro и смеси дипептидов Pro-Gly+Gly-Pro) на антикоагулянтную и фибринолитическую активность крови.

2. Выявить изменения функциональной активности тромбоцитов, вызываемые пролинсодержащими пептидами в условиях in vitro и in vivo.

3. Установить характер влияния пролинсодержащих олигопептидов на процесс тромбообразования in vivo.

4. Исследовать показатели плазменного и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у больных с острыми (острый ишемический 7 инсульт) и хроническими (дисциркуляторная энцефалопатия) нарушениями кровообращения мозга при лечении препаратом Семакс.

Научная новизна исследования: Впервые проведенный сравнительный анализ действия различных пролинсодержащих олигопептидов и препарата Семакс на показатели плазменного и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза у экспериментальных животных позволил определить наиболее эффективные антитромботические агенты, выявить механизм действия и точки приложения этих веществ в регуляции системы гемостаза и тромбообразования.

В результате проведенной работы научно обоснована и экспериментально доказана целесообразность коррекции гемостаза у больных с острой и хронической ишемией мозга препаратом Семакс.

Теоретическая и практическая значимость работы: Впервые проведен анализ действия ноотропного препарата Семакс на плазменный и сосудисто-тромбоцитарный гемостаз у больных острым ишемическим инсультом и дисциркуляторной энцефалопатией. Представленные результаты могут служить основой для расширения показаний по применению ноотропного препарата Семакс для профилактики и лечения больных тромбозами и нарушениями системы гемостаза.

Положения, выносимые на защиту:

1. Антитромботическое действие пролинсодержащих пептидов и препарата Семакс, обусловлено активацией антитромбоцитарных факторов и антикоагулянтно-фибринолитической системы крови.

2. Применение ноотропного препарата Семакс в терапии больных дисциркуляторной энцефалопатией обеспечивает коррекцию нарушений плазменного и сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.

Публикации: По теме диссертации опубликовано 12 работ. Апробация работы: Основные результаты работы были представлены на: Конкурсе молодых ученых VI Национальной конференции «Атеротромбоз 8 и артериальная гипертензия» (Россия, Москва, 23 марта 2001); 6th Meeting of the European Haematology Association (Germany, Frankfurt, 23 June 2001); XVIII Съезде физиологического общества имени И.П. Павлова (Россия, Казань, 25-28 сентября 2001); совместной межкафедральной конференции кафедры общей патологии и патофизиологии РМАПО и лаборатории защитных систем крови им. проф. Б. А. Кудряшова кафедры физиологии человека и животных биологического факультета МГУ им. М. В. Ломоносова (06 мая 2002); 7th Congress of the European Haematology Association (Italy, Florence, 07 June 2002). 9

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Черкасова, Ксения Анатольевна

выводы

1. Действие на первичный гемостаз пролинсодержащих пептидов MEHFPGP (Семакс) и PGP существенно различается при аппликации in vitro и in vivo. In vitro пептиды Семакс и PGP в диапазоне концентраций ТО"4 - 10~8 М не изменяли агрегационную активность отмытых тромбоцитов крыс при использовании различных индукторов (АДФ, коллаген, тромбин, ристоцитин). In vivo интраназальное введение крысам препарата Семакс (1 мг/кг ежедневно, в течение 7 дней) вызывало, начиная с 3-его дня, снижение функциональной активности отмытых тромбоцитов крыс. Степень снижения агрегации тромбоцитов зависела от используемого индуктора: коллаген вызывал максимальный эффект.

2. Многократное введение крысам препаратов Семакс и PGP (интраназально, 1 мг/кг ежедневно, в течение 7 дней) выявило, начиная с 3-его дня: а) повышение антикоагулянтной активности плазмы крови и уровня антитромбина III; б) резкое увеличение общей фибринолитической активности вследствие повышения активности плазмина, активатора плазминогена и снижения уровня а2-антиплазминов плазмы крови; в) снижение активности свертывающего фактора XIIIa крови. Эффекты сохранялись в течение 3-х дней после отмены препаратов.

3. Интраназальное введение крысам смеси дипептидов PG +GP, пептидов PGP и Семакс (1 мг/кг ежедневно, в течение 5 дней) приводило к активации функции фибринолитической системы. Семакс вызывал наибольшее повышение тканевого активатора плазминогена и снижение уровня а2-антиплазминов плазмы крови по сравнению с PGP и смесью PG +GP.

114

4. Впервые установлен высокий антитромботический эффект препаратов Семакс и PGP (интраназально, 1 мг/кг, ежедневно в течение 5 дней) на модели экспериментального тромбообразования.

5. Применение препарата Семакс (интраназально, 600 мкг/день, в течение 1 Of дней) в комплексной терапии больных дисциркуляторной энцефалопатией приводило к нормализации антикоагулянтной активности, концентрации антитромбина III, уровня протеина С, показателя фактор ХНа - зависимого фибринолиза, фибринолитической активности плазмы крови и снижению скорости индуцируемой коллагеном агрегации тромбоцитов.

6. Механизм антитромботического действия регуляторных пептидов Семакс и PGP включает активацию антитромбоцитарных и антикоагулянтно - фибринолитических систем плазмы крови. При исследовании показателей плазменного и сосудисто - тромбоцитарного гемостаза у больных дисциркуляторной энцефалопатией установлен регуляторный, положительный противосвертывающий эффект Семакса.

115

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Черкасова, Ксения Анатольевна, 2002 год

1. Субстрат шшмш—» пептид + pNa (паранитроанилин).

2. Образец инкубируют при 37° 3-6 мин 0,6 мл. 1 0,6 мл.

3. Плазмин смешивают и инкубируют 20 сек, 37°С 0,2 мл. 03.8-2251 смешивают и инкубируют 120 сек, 37°С 0,2 мл. 0

4. Уксусная кислота 50%, быстро перемешивают 0,1 мл. 0,1 мл.

5. Абрамова М.А., Самонина Т.Е., Ашмарин И.П. Пролич и простейшие пролинсодержащие фрагменты нейропептидов модулируют черезцентральные и переферические механизмы состояние слизистой желудка //1.' I

6. Нейрохимия.-1996. Т.13. - вып. 3. - С.209-214.

7. Андреенко Г.В. Современные данные о химии и физиологии фибриногена// Успехи современной биологии. 1974. - Т.77. - № 1. - С.51.

8. Андреенко Г.В. Фибринолиз: современное состояние проблемы // Реферативный сборник. Серия Медицина, выпуск Гематология. 1997. - № 1.С. 6-12.

9. Андреенко Г.В., Карабасова М.А., Лютова Л.В. и др. Методы исследования фибринолитической системы крови. М.: МГУ. - 1981. - С. 132.

10. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж. и др. Молекулярная биология клетки. -М.: Мир. 1994. - Т.2. - С.487-512.

11. Асташкин Е.И., Беспалова Ю.Б., Гривенников И.А. Изучение влияния Семакса на Ca -ответы нейтрофилов человека // Доклады Академии Наук. 2000. - Т. 374.-№ 3. - С. 401-403.

12. Ашмарин И.П., Каменский A.A., Шелехов С.Л. Действие фрагмента адренокортикотропного гормона АКТГ(4-10) на обучение белых крыс при положительном подкреплении // Докл. АН СССР. 1978. - Т. 240. - № 5. -С. 1245.

13. Ашмарин И.П., Каразеева Е.П., Ляпина Л.А., Самонина Г.Е. Регуляторная активность простейших пролинсодержащих пептидов PG, GP, PGP и GPGG и возможные источники их биосинтеза. // Биохимия. -1998. Т. 63. - вып. 2. - С. 149-155

14. Ашмарин И.П., Незавибатько В.Н., Мясоедов Н.Ф. и др. Ноотропный аналог адренокортикотропина 4-10- Семакс (15-летний опыт разработки и116изучения) // Журнал высшей нервной деятельности им. И. П. Павлова. -1997. Т.47. - вып. 2. - С. 420-430.

15. Ашмарин И. П., Ляпина JI. А., Пасторова В. Е., Кудряшов Б. А. Действие регуляторных пептидов с различной биологической активностью на процесс полимеризации фибрина и неферментативный фибринолиз.I

16. Нейрогормоны гипофиза, гормоны гипоталамуса, либерины, АКТГ и его аналоги // Вопр. Мед. Химии. 1991. - Т. 37. - № 1. - С.85-86.

17. Ашмарин И.П., Ляпина Л.А., Пасторова В.Е. Модуляция гемостатических реакций in vitro и in vivo представителями семейств регуляторных пептидов // Вестник РАМН. 1996. - № 6. - С.50-58.

18. Ашмарин И.П., Пасторова В.Е., Ляпина Л.А. и др. Влияние тафцина на полимеризацию фибрина in vitro и систему гемостаза при внутривенном введении здоровым животным // Известия АН СССР. 1991. - № 1. - С.302-305.

19. Ашмарин И.П., Пасторова В.Е., Ляпина Л.А. Влияние простейших пролинсодержащих пептидов на функциональную активность противосвертывающей системы и первичного гемостаза // Бюлл. эксп. биол.и мед. 1998. - Т. 125. - № 5. - С.496-499.

20. Балуда В.П., Балуда М.В., Деянов И.И., Тлепшуков И.К.// Физиология системы гемостаза. М., 1995.

21. Баркаган З.С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза.- М., Ньюдиамед. 1999. - 217с.

22. Басанова A.B., Баскова И.П., Завалова Л.Л. Регуляторы тромбоцитарно- сосудистого и плазменного звеньев гемостаза из кровососущих (обзор) // Биохимия. 2002. - Т. 67. - вып. 1. - С. 167-176.

23. Волков A.B., Заржецкий Ю.В. и др. Терминальные состояния и постреанимационная патология организма: патофизиология, клиника, профилактика и лечение. М. - 1992. - С.69-76.

24. Гривенников И.А., Долотов О.В., Гольдина Ю.И. Факторы пептиднойприроды в процессах пролиферации, дифференцировки и поддержания1.!жизнеспособности клеток нервной системы млекопитающих //

25. Молекулярная биология. 1999. - Т.ЗЗ. - № 1. - С. 120-126.

26. Гусев Е.И., Скворцова В.И., Мясоедов Н.Ф. и др. Эффективность Семакса в остром периоде полушарного ишемического инсульта (клиническое и электрофизиологическое обоснование) // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 1997. - № 6. - С. 26-34.

27. Добровольский А.Б., Титаева Е.В. Система фибринолиза: регуляция активности и физиологические функции ее основных компонентов // Биохимия. 2002. - Т. 67. - вып. 1. - С. 116-126.

28. Дугина Т.Н., Киселева Е.В., Чистов И.В., Умарова Б.А., Струкова С.М. Рецепторы семейства PAR- связующее звено процессов свертывания крови и воспаления (обзор) // Биохимия. 2002. - Т. 67. - вып. 1. - С. 77-87.

29. Заец Т.Я., Потапова A.A., Руднева В.В., Лобанова И.В. Применение препарата семакс в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта // Кремлевская медицина. Клинический вестник. 2001. - № 2.

30. Зубаиров Д.М. Молекулярные основы свертывания крови и тромбообразования. Казань: Фэн. - 2000.

31. Иванов Ю.В. Ультраструктурные изменения в поджелудочной железе крыс с острым панкреатитом после введения Семакса // Экспериментальная и клиническая фармакология. 2000. - Т. 63. - № 6. -С. 37-38.

32. Королева М.В., Мейзеров Е.Е., Незавибатько В.Н. и др. Влияние гептапептида Семакс на электроэнцефалограмме человека // Бюллетень1.Bэкспериментальной биологии и медицины. 1996. - Т.121. - № 1. - С. 116117.

33. Королева М.В., Мейзеров Е.Е., Незавибатько В.Н. и др. Изучение анальгетического действия препарата Семакс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1996. - Т.122. - № 11. - С.527-529. ■

34. Кост Н.В., Соколов О.Ю., Габаева М.В. и др. Ингибирующее действие Семакса и Селанка на энкефалиндеградирующие ферменты сыворотки крови человека // Биоорганическая химия. 2001. - Т.27. - № 3. - С. 180183.

35. Кубатиев A.A. Тромбоз. / В кн. Патологическая физиология под ред. Адо А.Д., Новицкого В.В. Томск. - 1994.

36. Кубатиев A.A. Тромбоцитарный гемостаз, гипотезы, факты, концепции (актовая речь). Российская Медицинская Академия Последипломного Образования // М. 1995. - С. 19

37. Кудряшов Б.А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и ее свертывания. М: 1975. - С.487

38. Кудряшов Б.А., Шапиро Ф.Б., Ломовская Э.Г., Ляпина Л.А. Значение АКТГ для процесса образования комплексных соединений гепарина в крови при иммобилизационном стрессе // Физиол. журн. СССР им. И.М.Сеченова. 1975. - Т.61. - № 2. - С.244-250.

39. Левицкая Н.Г., Клейменов А.Н., Петросян М.Т. и др. Влияние низкомолекулярных пептидов на процесс перехода фибриногена в фибрин //Бюлл. экспер. биол. и мед. 1987. - Т. 111. - № 7. - С. 190-192.

40. Левицкая Н.Г., Себенцова Е.А., Глазова Н.Ю. и др. Исследование нейротропной активности продуктов ферментативной деградации Семакса // Доклады Академии Наук. 2000. - Т. 372. - № 2. - С. 268-271.

41. Ляпина Л.А., Пасторова В.Е., Каменский A.A., Мясоедов Н.Ф.,Ашмарин И.П. Комплекс гепарин-"Семакс", его влияние на119антикоагулянтные и фибринолитические свойства плазмы крови животных. // Вопр. биол. мед. и фарм химии. 2000. - № 3. - С.33-36.

42. Мясоедов Н.Ф., Скворцова В.И., Насонов E.JL и др.//Изучение механизмов нейропротективного действия Семакса в остром периодеишемического инсульта // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С.I

43. Корсакова. 1999. - Т.99. - № 5. - С. 15-19. !

44. Орлов A.B., Хомутов А.Е., Мухина И.В. и др. Влияние Семакса и его смеси с гепарином на работу изолированного сердца крысы после тотальной ишемии // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1999.-Т. 128.-№ 11. - С.494-496.

45. Панченко Е.П., Добровольский А.Б. Тромбозы в кардиологии. Механизмы развития и возможности терапии. М.: Спорт и культура. -1999.-464 с.

46. Пасторова В.Е., Ляпина JI.A., Смолина Т.Ю., Ашмарин И.П. Антикоагулянтные и фибринолитические эффекты простейших пролинсодержащих пептидов // Известия РАН, сер. биол. 1998. - № 3. -С.1-5.

47. Патрушев Л.И. Генетические механизмы наследственных нарушений гемостаза (обзор) // Биохимия. 2002. - Т. 67. - вып. 1. - С. 40-55.

48. Пономарева-Степная М.А., Незавибатько В.Н., Антонова Л.В.,и соавт. Аналог АКТГ(4-7) -стимулятор обучения пролонгированного действия // Хим.-фарм. Журн. 1984. - В 7. - С.790.120

49. Струкова С.М. Гуморальные гомеостатические системы при воспалении.- В кн.: Воспаление. Руководство / Под ред. Серова В.В., Паукова B.C. М.: Медицина. - 1995. - 640с.

50. Струкова С.М., Киреева Е.Г., Спирова С.М. и др. Иммунорегулятор аг тимозин-ингибитор ферментативной активности а-тромбина // ДАН СССР. 1989. - Т.306. - № 1. - С.229-232.

51. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э. и др. Основы биохимии / Пер. с англ. -М.: Мир. 1981. Т.З. - С.1467-1497.

52. Хугаева В.К., Александрии В.В. Зависимость терапевтического эффекта пептидного препарата Семакс от степени тяжести ишемии мозга // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1997. - Т. 124. - № 7. - С.39-42.

53. Шиффман Фред Дж. Патофизиология крови. Под общей редакцией акад. Наточина Ю.В. / Пер.с англ.- М.-СПб.: БИНОМ-Невский Диалект. -2000. 448 с.

54. Яровая Г.А., Блохина Т.Б., Нешкова Е.А. Контактная система. Новые представления о механизмах активации и биорегулирующих функциях (обзор) // Биохимия. 2002. - Т. 67. - вып. 1. - С. 16-29.

55. Яснецов В.В., Крылова И.Н., Попов В.М. Коррекция ноотропами нарушений процессов обучения и памяти, вызванных некоторыми экстремальными воздействиями // Экспериментальная и клиническая фармакология. 1996. - Т. 59. - № 3. - С.20-23.

56. Яснецов В.В., Правдивцев В.А., Крылова И.Н. и др. Влияние Семакса и АКТГ(5-10) на импульсную активность центральных нейронов //121

57. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1998. - Т. 125. - № 3. - С. 304-306.

58. Asazuma N., Ozaki Y., Satoh К. et al. Glycoprotein Ib-von Willebrand factor interactions activate tyrosine kinases in human platelets // Blood. 1997. - V.90.-№ 12. - P. 4789-4798I

59. Ashmarin I.P., Samonina G.E., Zheliaznik N.Ia., Bakaeva Z.V. Protective effect of peptide PGP on gastric mucosa // Dokl. Akad. Nauk. 1999. - V.368. -№ 5.-P. 709-710.

60. Asselin J., Knight C.G., Farndale R.W., et al. Monometric (glycine-proline-hydroxyproline) 10 repeat sequence is a parttial agonist of the platelet collagen receptor glycoprotein VI // Biochem. J. 1999. - V.339. - Pt 2. - P.413-418.

61. Bajusz S.,Barabas E.,Fauszt I.,et al. Active site-directed thrombin inhibitors: alpha-hydroxyacyl-prolyl-arginals.New orally active stable analogs of D-Phe-Pro-Arg-H // Bioorg. -Med. -Chem. 1995. - V. 3. - № 8. - P. 1079-1089.

62. Barker P.L., Bullens S., Bunting S. et al. Cyclic RGD peptide analogues as antiplatelet antithrombotics // J. Med. Chem. 1992. - V.35. - P.2040-2048.

63. Barnes M.J., Knight C.G., Farndale R.W. The collagen- platelet interaction // Curr. Opin. Hematol. 1998. - V.5. - № 5. - P.314-320.

64. Beardsley D.S. Platelet membrane glycoproteins: role in primary hemostasis and component antigens // Yale. J. Biol. Med. 1990. - V.63. - № 5. -P.469-475.

65. Bella J., Brodsky В., Berman HM. Hydration structure of a collagen peptide // Structure. 1995. - V.3. -№ 9. - P.893-906.122

66. Bermpohl F., Loster K., Reutter W., Baum O. Rat dipeptidyl peptidase IV (DPP IV) exhibits endopeptidase activity with specificity for denatured fibrillar collagens //FEBS Lett. 1998. - V.428. -№ 3. - P. 152-156. <

67. Bidwell E. Fibrinolysis of human plasma // Biochem. J. 1953. - V. 55. -P.497.i

68. Born G.V. Aggregation of blood platelets by ADP and its reversal // Nature. 1962.-V. 194.-P.927-929.

69. Butler W.T. Chemical studies on the cyanogen bromide peptides of rat skin collagen // Biochemistry. 1970. - V.9. - P.44.

70. Butler W.T., Ponds S.L. Chemical studies on the cyanogen bromide peptides of rat skin collagen. Amino acid sequence of 1-CB4 // Biochemistry. 1971. -V. 10 - № 11.- P.2076-2081.

71. Calverley D.C., Kavanagh T.J., Roth G.J. Human signaling protein 14-3-3zeta interacts with platelet glycoprotein lb subunits Iba and Ib(3 // Blood. -1998. V.91. -№ 4. - P. 1295-1303.

72. Calvete J.J. Clues for understanding the structure and function of a prototypic human integrin: the platelet glycoprotein Ilb/IIIa complex // Thromb. Haemost.- 1994.-V.72.-P.1-15.

73. Carrel R.W., Christey P., Boswel D.R. Serpins: antithrombin and other inhibitors of coagulation and fibrinolysis. Trombosis and hemostasis / Verstraete M. et al. Leuven: Leuven Univ. Press. - 1987. - P. 1-15.

74. Chen H, Locke D, Liu Y, Liu C, Kahn ML. The Platelet Receptor GPVI Mediates Both Adhesion and Signaling Responses to Collagen in a Receptor Density-dependent Fashion // J. Biol. Chem. 2002. - V.277. - № 4. - P.3011-3019.123

75. Chen X.C., Hua Z.C., Zhu D.X. A low molecular weight urokinase derivative with enhanced fibrin affinity // Biochem. -Mol. -Biol. -Int. 1996. -V.39. - № 4. - P.797-803.

76. Chiang T., Wang Y.,Kang E., Role of recombinant protein of the plateletreceptor for type I collagen in the realease of nitric oxide during platelet ! 'i aggregation // Trom. Res. 2000. - V. 100. - P.427-432.

77. Clemetson K.J., Clemetson J.M. Platelet collagen receptors // Thromb. Haemost. 2001. -V.86. - P. 189-197.

78. Cox D., Aoki T., Seki J. et al. The pharmacology of integrins // Med. Res. Rev. 1994.-V. 14.-P. 195-228.

79. Deng S.J., Bickett D.M., Mitchell J.L. et al. Substrate sprcificity of human collagenase-3 assessed using a phage displayed peptide library // J. Biol. Chem. -2000. V.275. - № 27. - P. 1977-1983.

80. De Wied D., Jolles J. Neuropeptides derived from pro-opiocortin: behavioral, physiological and neurochemical effects // Physiol. Rev. 1982. -V.62. - № 3. - P.976.

81. Duckers H.S., Verheragen J., Gispen W.H. The neurotrophic analogue of ACTH(4-9), Org 2766, protects against experimental allergic neuritis // Brain. -1993. V.l 16. - Pt 5. - P.1059-1075.

82. Emsley J, Cruz M, Handin R, Liddington R. Crystal structure of the von Willebrand Factor Al domain and implications for the binding of platelet glycoprotein lb // J. Biol. Chem. 1998. - V.273. - № 17. -P. 10396-10401.

83. Emsley J., Knight C.G., Farndale R.W. et al. Structural basis of collagen recognition by integrin ot2(3i // Cell. 2000. - V.101. - P.47-56.124

84. Esmon C.T. The regulation of natural anticoagulant pathways // Science. -1987. V.255. - P.1348-1354.

85. Evstigneeva R.P., Kubatiev A.A., Tkachenko S.B., Zheltukhina G.A. Hydrochloride of the peptide Boc-Gly-Pro-Arg-OMe- a selective inhibitor ofthrombin- and epinephrine-induced platelet aggregation // Dokl. Akad. Nauk. I1994. V.337. - № 5. - P.680-682.

86. Farrell D.H, Thiagarajan P., Chung D.W., Davie E.W. Role of fibrinogen alpha and gamma chain sites in platelet aggregation // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992,- V.89.-P.10729-10732.

87. Gaill F., Mann K., Wiedemann H., Engel J., Timpl R. Structural comparison of cuticle and interstitial collagens from annelids living in shallow sea-water and at deep-sea hydrothermal vents // J-Mol-Biol. 1995. - V.246. - № 2. - P.284-294

88. Gispen W.H. Melanopropins in axonal and demyelinating diseae ases //• • th1.ternational Society of Psychoneuroendocrinology, Proceedings 25 Congress

89. Seatlle WA USA. 1994. - P.29.

90. Highberger J.H. et al. Comparative studies on the amino acid sequence of the a2CB2 peptides from chick and rat skin collagens // Biochemistry. 1971. — V.10.-P.610.

91. Hoffman H., Greenberg Ch.S. The effect of fibrin polymerization inhibitorson quantitative measurements of plasma fibrinogen // Amer. J. Clin. Pathol. 1.I1987. V.88. - № 4. - P.490-493.

92. Hoffman S.W., Sutton R.L., Stein D.G. Effects of BIM-22015, an analog of ACTH 4-10, on functional recovery after frontal cortex injury // Behav. Neural. Biol. 1992. - V.57. - №2. - P. 157-166.

93. Huang T.F., Holt J.C., Kirby E.P., Niewiarowski S. Trigramin: primary structure and its inhibition of von Willebrand factor binding to glycoprotein Ilb/IIIa complex on human platelets // Biochemistry. 1989. - V.28. - P.661-666.

94. Iasnetsov V.V.,Krylova I.N., Provornova N.A. Pharmacological treatment of memory disorders caused by hypoxia and cerebral ischemia in rats // Aviakosm.-Ekolog.-Med. 1998. -V. 32. - № 1. - P.55-60.

95. Irvine D.J., Ruzette A.V., Mayes A.M., Griffith L.G. Nanoscale Clustering of RGD Peptides at Surfaces Using Comb Polymers. 2. Surface Segregation of Comb Polymers in Polylactide // Biomacromolecules. 2001. - V.2. - № 2. -P.545-556. '

96. Kang A., Gross J. Amino acid sequence of cyanogen bromide peptides from the amino-terminal region of chick skin collagen //Biochemistry. 1970. - V.9. -P.796.

97. Kaplan A.Ya., Kochetova A.G. Nezavibatko V.N. et al. Synthetic ACTH analogue semax effects on EEG and vigilange performance in human subjects // Neurosci. Res. Comm. 1996. - V. 19. - № 2. - P. 115-123.

98. Kini R.M.,Evans H.J. A noval approach to the design of potent bioactive peptides by incorporation of proline brackets: antiplatelet effscts of Arg-Gly-Asp peptides // FEBS Lett. 1995. - V.375. -№ 1. - -2. - P. 15-17.

99. Knight C.G., Morton L.F., Onley D.J. et al. Collagen- platelet interaction: Gly-Pro-Hyp is uniquely specific for platelet Gp VI and mediates platelet activation by collagen // Cardiovasc. Res. 1999. - V.41. - № 2. - P.450-457.

100. Kovacs G.L., De Wied D. Peptidergic modulation of learning and memory processes // Pharmacol. Rev. 1994. - V.46. - № 3. - P.269.127

101. Kudrjashov B.A., Lyapina L.A. Nonenzymatic fibrinolysis and its role in the organism. Thrombosis and thrombolysis. / Ed. E. I. Chazov, V.N.Smirnov.-Consultants Bureau. N. Y. - 1986. - P. 33-65.

102. Kunicki T.J. Platelet membrane glycoproteins and their function: anoverview // Blut. 1989. - V.59. - № 1. - P.30-34.j i

103. Labinaz M, Kilaru R, Pieper K, Marso SP, Kitt MM, Simoons ML, Califf

104. Laudano A.P., Doolittle R.P. Studies on synthetic peptides than bind to fibrinogen and prevent polymerization. Structural requirements number of binding sites and species differences // Biochemistry (Wash.). 1980. - V.19. -P.1013-1017.

105. Lauer-Fields J.L., Tuzinski K.A., Shimokawa Ki et al. Hydrolysis of triple-helical peptide models by matrix metalloproteinases // J. Biol. Chem. 2000. -V.275. -№ 18. -P.1328-1390.

106. Lecomte-Raclet L., Alemany M., Sequira-Le-Grand A. et al. New insights into the negative regulation of hematopoiesis by chemokine platelet factor 4 and related peptides // Blood. 1998. - V.91. - № 8. - P.2772-2780.

107. Lefkovits J., Plow E.F., Topol E.J. Platelet glycoprotein Ilb/IIIa receptors in cardiovascular medicine //N. Engl. J. Med. 1995. - V.332. - P.1553-1559.

108. Lewis S.D., Ng A.S., Lyle E.A., et al. Inhibition of thrombin by peptides containing lysil-a-keto carbonyl derivatives // Thromb. Haemost. 1995. - V.74. -№ 4.-P. 1107-1112.

109. Li J.K., Wang N., Wu X.S. Gelatin nanoencapsulation of protein/peptide drugs using an emulsifier-free emulsion method // J.-Microencapsul. 1998. -V.15. -№ 2. -P.163-172.128

110. Lyapina L.A., Pastorova V.E., Samonina G.E., Ashmarin I.P. The effect ofi lprolil-glycil-proline (PGP) peptide and PGP-rich substances on haemostatic parameters of rat blood // Blood Coagul. Fibrinolysis. 2000. - V.l 1. - № 5. -P.409-414.

111. Mark K. et al. Direct evidence for a correlation between amino acid sequence and cross striation pattern of collagen // FEBS Lett. 1970. - V.ll. -P.105.

112. Mazzucato M., Marco L.D., Masotti A. et al. Characterization of the initial alpha-thrombin interaction with glycoprotein lb alpha in relation to platelet activation // J. Biol. Chem. 1998. - V. 131. - № 1. - P.49-62.

113. Monnet E, Fauvel-Lafeve F. A new platelet receptor specific to type III collagen. Type III collagen-binding protein // J. Biol. Chem. 2000. - V.275. -№ 15. - P.10912-10917.

114. Moroi M., Jung S.M. Platelet receptors for collagen // Thromb. Haemost. -1997. V.78. - № 1. - P.439-444.

115. Mullin JL, Gorkun OV, Binnie CG, Lord ST.Recombinant fibrinogen studies reveal that thrombin specificity dictates order of fibrinopeptide release // J. Biol. Chem. 2000. - V.275. - № 33. - P.25239-25246.

116. Mustard J.F., Perry D.W. Preparation of suspension of washed platelets from humans // Brit. J. Haematol. 1972. - V. 22. - № 2. - P. 193.

117. Nakamura T., Jamieson G.A., Okuma M. et al 11 Platelet adhesion to native type I collagen fibrils. Role of GPVI in divalent cation-dependent and -independent adhesion and thromboxane A2 generation // J. Biol. Chem. 1998.- V.273. № 8. - P.4338-4334.

118. Nakamura T., Kambayashi J., Okuma M., Tandon N.N. Activation of thei

119. GP Ilb-IIIa complex induced by platelet adhesion to collagen is mediated by both aipha2betal integrin and GP VI // J. Biol. Chem. 1999. - V.274 - № 17. -P.11897-11903.

120. Narayani R., Rao K.P. Polymer-coated gelatin capsules as oral delivery devices and their gastrointestinal tract behaviour in humans // J.-Biomater.-Sci.-Polym.-Ed. 1995. - V.7. - № 1.-P.39-48.

121. Neises B., Broersma R.Y., Tarnus C., et al. Synthesis and comparison of tripeptidylfluoroalkane thrombin inhibitors // Bioorg. Med. Chem. 1995. - V.3.- № 8. P.1049-1061.

122. Nonaka I, Katsuda S, Ohmori T, Shigehisa T, Nakagami T, Maruyama S. In vitro and in vivo anti-platelet effects of enzymatic hydrolysates of collagen and collagen-related peptides // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1997. - V.61. -№ 5. - P.772-775.

123. O'Brien J.R. Platelet aggregation: Part I Some effect of the adenosine phosphates, thrombin, and cocaine upon platelet adehesiveness // J. Clin. Path. -1962. V.15. - № 5. - P.446-452.

124. O'Brien J.R. Platelet aggregation: Part II Some results from a new method of study//J. Clin. Path. 1962. - V.15. - № 5. - P.452-455.

125. Perlot R.L. Jr., Shapiro I.M., Mansfield K., Adams C.S. Matrix regulation of skeletal cell apoptosis II: role of Arg-Gly-Asp-containing peptides // J. Bone. Miner. Res. 2002. - V. 17. - № 1. - P.66-76.

126. Phillips DR, Charo IF, Parise LV, Fitzgerald LA.

127. The platelet membrane glycoprotein Ilb-IIIa complex // Blood. 1988. - V.71. -№4. -P.831-843.130

128. Pierschbacher M.D., Ruoslahti E. Cell attachment activity of fibronectin can be duplicated by small synthetic fragments of the molecule // Nature. -1984. V.309. - P.30-33.

129. Plow E.F., McEver R.P, Coller B.S. et al. Related binding mechanisms forfibrinogen, fibronectin, von Willebrand factor, and thrombospondin on■ ) thrombin-stimulated human platelets // Blood. 1985. - V.66. - P.724-727.

130. Plow E.F., Srouji A.H., Meyer D. et al. Evidence that three adhesive proteins interact with a common recognition site on activated platelets // J.Biol. Chem. 1984. - Y.259. - P.5388-5391.

131. Polanowska -Grabowska R., Gear A.R. Role of cyclic nucleotides in platelet adhesion to collagen // Blood. 1994. - V. 83. - № 9. - P.2508-2515.

132. Potaman VN, Alfeeva LY, Kamensky AA, Nezavibatko VN. Degradation of ACTH/MSH(4-10) and its synthetic analog semax by rat serum enzymes: an inhibitor study // Peptides. 1993. - V. 14. - №3. -P.491-495.

133. Potaman V.N., Antonova L.V., Dubynin V.A. et al. Entry of the synthetic ACTH (4-10) analogue into the rat brain following intravenous injection // Neurosci. Lett. 1991.-V. 127.-№ 1.-P.133.

134. Qian Z.Y., Jolles P., Migliore-Samour D., Schoentgen F., Fiat A.M. Sheep kappa-casein peptides inhibit platelet aggregation // Calcif. Tissue. Int. 1995. -V.56. - № 5. - P.398-402.

135. Ramesh C.V., Jayakumar R., Puvanakrishnan R. In vitro studies on a novel micelle-forming peptide with anticoagulant activity // Int.-J.-Pept.-Protein.-Res. 1995. - V.45. - № 4. - P.386-390.

136. Ravanat C., Freund M., Mangin P. et al. GPV is a marker of in vivo platelet activation study in a rat thrombosis model // Thromb. Haemost. - 2000. -V.83. - № 2. - P.327-333.

137. Schulman S.P., Goldschmidt-Clermont P.J., Topol E.J. et al. Effect ofintegrelin, a platelet glycoprotein Ilb/IIIa receptor antagonist, in unstable angina.1 )

138. A randomized multicenter trial // Circulation. 1996. - V. 94. - № 9. - P.2083-2089.

139. Squadrito F., Guarini S., Altavilla D., et al. Adrenocorticotropin reverses vascular dysfunction and protects against splanchnic artery occlusion shok // Br. J. Pharmacol. 1999. - V.128. - № 3. - P.816-822.

140. Stafford MJ, Atkinson BT, Watson SP, Pears CJ. Signalling components underlying platelet aggregation to a Ca2+ ionophore and a phorbol ester // Platelets. 2001. - V. 12. - № 8. -P.476-485.

141. Standker L., Sillard R., Bensch K.W., et al. In vivo degradation of human fibrinogen A alfa:detection of cleavage sites and release of antithrombotic peptides // Biochem.-Biophys.-Res.-Commun. 1995. - V.215. - № 3. - P.896-902.

142. Strand F.L., Zuccarelli L.A., Lee S.J. Melanotropic effect on nerve development and regeneration // International Society of Psychoneuroendocrinology, Proceedings 25th Congress Seatlle WA USA. -1994. -P.27.

143. Strickland D.K., Kessler C.M. Biochemical and functional properties of pG and pS // Clin. Chem. Acta. 1987. - V.170. - P. 1-24.

144. Teger-Nilsson A.C., Friberger P.A., Gyzander E. Determination of a new rapid plasmin inhibitor in human blood by means of a plasmin specific tripeptide substrate // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1977. - V. 37. - P. 403,

145. Tkachenko S.B., Kokriakov V.N., Ashmarin I.P., Kubatiev A.A. Protegrins-a new family of peptides of leukocytic origin, modulating the132functional activity of platelets // Dokl. Akad. Nauk. 1996. - V.347. - № 1. -P.126-128.

146. Topol E. Plow E.F. Clinical trials of platelet receptor inhibitors // Thrombos, Haemostas. 1993. - V.70. - № 1. - P.94-98.

147. Turitto V.T., Baumgartner H.R. Platelet-surface interactions. Hemostasisi i and Thrombosis. / Colman R.W., Hirsch J., Marder V.J., Salzman E.W. 2nd ed.

148. Philadelphia. Lippincott. 1987. - P.555-571

149. Ware J., Russell S., Ruggeri Z.M. Cloning of the murine platelet glycoprotein Iba gene highlighting species-specific platelet adhesion // Blood. Cells. Mol. Dis. 1997. - V.23. -№ 2. - P.292-301.

150. Watson S.P. Collagen receptor signalling in platelets and megakaryocytes. // Thromb. Haemost. 1999. - Y.82. - № 2. - P.365-376.

151. Watson S.P., Asazuma N., Atkinson B. et al. The role of ITAM- and ITIM-coupled receptors in platelet activation by collagen. // Thromb. Haemost. -2001. V.86. - P.276-288.

152. Weisel J.W., Nagaswami C., Vilaire G., Bennett J.S. Examination of the platelet membrane glycoprotein Ilb-IIIa complex and its interaction with fibrinogen and other ligands by electron microscopy // J. Biol. Chem. 1992. -V.267.-P. 16637-16643.

153. Wendt P. et al. The covalent structure of collagen. The amino-acid sequence of the 112-residues amino-terminal part of peptide ctiCB6 from calf skin collagen // Eur. J. Biochem. 1972. - V.30. - P.169.

154. Wessler S., Reiner S.M., Sheps M.C. Biologic assay of a thrombosis inducing ability in human serum. // J. Appl. Physiol. 1959. - V.14. - P.943-946.133

155. Westlin W.F. Integrins as targets of angiogenesis inhibition. // Cancer J. -2001. V.7. - Suppl 3. - S. 139-43.

156. Wu H, Li J, Peng L, Liu H, Wu W, Zhou Y, Hou Q, Kong D. Anti-human platelet tetraspanin (CD9) monoclonal antibodies induce platelet integrin alpha lib beta 3 activation in a Fc receptor-independent fashion. // Chin. Med. J.1.i

157. Engl.).-2001.-V.l 14.-№ 1. -P.14-18.

158. Xia T., Akers K., Eisen A.Z., Seltzer J.L. Comparison of cleavage site specificity of gelatinases A and B using collagenous peptides // Biochim.-Biophys.-Acta. 1996. - V. 1293. - № 2. - P.259-266.

159. Xu W., Xie Z., Chung D.W., Davie E.W. A novel human actin-binding protein homologue that binds to platelet glycoprotein Ibalpha // Blood. 1998. -V.92. -№ 4. - P.1268-1276.

160. Zheliaznik N.Ia., Samonina G.E., Sergeev V.I., Ashmarin I.P. Increased blood flow in the stomach as a possible mechanism of the anti-ulcer effect of Pro-Gly-Pro. // Biull. Eksp. Biol. Med. 2000. - V.129. - № 2. - P. 133-134.