Определение жирных кислот в сапропеле методом хромато-масс-спектрометрии с применением водной вибромагнитной экстракции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Тюнина, Марина Александровна

• Тюнина, Марина Александровна
• кандидат химических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат химических наук Тюнина, Марина Александровна

Список сокращений

Введение

Глава 1 Обзор литературы

1.1 Химический состав органического вещества сапропелей

1.2 Липиды сапропелей и способы их выделения

1.3 Определение свободных и связанных жирных кислот в липидных комплексах

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Определение жирных кислот в сапропеле методом хромато-масс-спектрометрии с применением водной вибромагнитной экстракции»

Актуальность работы. Липиды, входящие в состав различных видов природного сырья, обладают биологической активностью и находят применение для создания новых водорастворимых лекарственных средств, пищевых добавок, в традиционных методах грязелечения, в косметологии. Считается, что биологическое действие липидов обусловлено наличием в их структуре свободных и связанных жирных кислот (ЖК). Традиционным методом их выделения является экстракция с применением различных органических растворителей. Наиболее часто для этих целей используют метод Фолча с применением в качестве экстрагентов спирт - хлороформных смесей. В настоящее время приоритетным является разработка новых экологически безопасных, ресурсоэффективных методов экстракции с применением воды в качестве экстрагента. Меньшая экстракционная способность воды по сравнению с органическими растворителями требует более жёстких условий для эффективного извлечения целевых компонентов. В этой связи поиск оптимальных условий экстракции ЖК невозможен без разработки новых экспрессных и высокочувствительных методов их аналитического контроля. К числу таких методов относится метод хромато-масс-спектрометрии.

В качестве возобновляемого природного сырья для выделения липидов перспективно использование сапропелей. В Томской области такими запасами обладает «Санаторий «Чажемто». В нативном виде они широко применяются для курортного грязелечения как в санаториях Томской области, так и РФ, поскольку содержат широкий спектр биологически активных соединений. Однако химический состав этих сапропелей, содержащих липиды, изучен недостаточно. В значительной степени это связано с отсутствием высокочувствительных методик анализа, включающих эффективные стадии выделения целевых компонентов. Для повышения 5 эффективности извлечения липидов из сапропелей в работе исследована возможность применения водной вибромагнитной экстракции. В этой связи разработка современных методик определения ЖК для изучения химического состава природного сырья, в том числе водных экстрактов сапропелей, является актуальным.

Работа выполнена в рамках заказа Министерства образования и науки РФ «Создание препаративных методов выделения и анализа биологически активных соединений из природных объектов и биологических жидкостей» 2008 - 2011 гг., № 01200903882; хоздоговорной работы «Создание технологии переработки сапропеля в продукт специального назначения путем вибромагнитного воздействия» № 862 по заказу ОГУЗ «Санаторий «Чажемто» (2011 г.).

Объект исследования - сапропель озера Карасёвое (Томская область «Санаторий «Чажемто»).

Предмет исследования - биологически активные липидные соединения, в том числе жирные кислоты (Сю:п - С24:п)

Цель работы - разработка методики определения жирных кислот в сапропеле методом хромато-масс-спектрометрии с применением водной вибромагнитной экстракции.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

1. Применить водную вибромагнитную экстракцию с целью интенсификации стадии выделения жирных кислот из сапропелей для их последующего определения методом хромато-масс-спектрометрии.

2. Определить рабочие условия (время вибромагнитного воздействия, соотношение сапропель - вода) и оценить эффективность извлечения жирных кислот из сапропелей посредством водной вибромагнитной экстракции методами гравиметрии и хромато-масс-спектрометрии.

3. Разработать методику определения жирных кислот методом хромато-масс-спектрометрии с применением стандартных образцов фирмы Sigma, включающую выбор условий хроматографического разделения кислот ненасыщенного ряда, расчет относительных коэффициентов чувствительности и оценку метрологических характеристик.

4. Применить разработанную методику для оценки содержания свободных и связанных жирных кислот в сапропеле озера Карасёвое и экстрактах на его основе.

Научная новизна работы:

1. Разработана новая методика эффективного извлечения жирных кислот из сапропелей методом водной экстракции в условиях вибромагнитного воздействия.

2. Создана методика определения жирных кислот на примере сапропеля озера Карасёвое методом хромато-масс-спектрометрии, включающая стадию пробоподготовки с применением вибромагнитной экстракции. Правильность методики доказана сопоставлением результатов анализа стандартного образца фирмы Sigma.

3. Получены новые данные о жирнокислотном составе сапропеля озера Карасёвое и экстрактов на его основе («Паста-пелоид» и «Водный коллоидный экстракт»).

Практическая значимость работы:

1. Создан и запатентован вибромагнитный экстрактор «Многофункциональное устройство для переработки природного органического сырья в жидкой среде», позволяющий эффективно и экологически безопасно выделять жирные кислоты из природных сапропелей.

2. С применением водной вибромагнитной экстракции интенсифицирована стадия пробоподготовки сапропелей и разработана методика определения жирных кислот методом хромато-масс-спектрометрии.

3. Разработанный способ водной вибромагнитной экстракции нашёл практическое применение для получения экстрактов на основе сапропеля озера Карасёвое (Томская область): «Паста-пелоид» и «Водный коллоидный экстракт». Первый экстракт предназначен в качестве косметического средства, для лечения кожных заболеваний; отмечен серебряной медалью на 5-й Биотехнологической выставке-ярмарке «РосБиоТех - 2011», г. Москва. Второй экстракт может быть использован как субстанция для получения косметических и лекарственных средств; способ получения отмечен бронзовой медалью на 23-й Международной выставке изобретений, инноваций и технологий «1ТЕХ 2012», Малайзия.

4. Разработанная методика определения жирных кислот методом хромато-масс-спектрометрии может быть положена в основу временной фармакопейной статьи при утверждении полученных экстрактов в качестве лекарственных препаратов, а также использоваться для контроля качества природного сырья и для экспертизы препаратов на основе пелоидов.

Научные положения, выносимые на защиту:

1. Методика эффективного и экологически безопасного выделения полярных органических соединений из сапропеля методом вибромагнитной экстракции с применением воды в качестве экстрагента.

2. Методика хромато-масс-спектрометрического определения насыщенных и ненасыщенных жирных кислот в сапропелях (в виде метиловых эфиров) в режиме селективного ионного мониторинга по характеристическим ионам с учетом значений коэффициентов относительной чувствительности; результаты сравнительного определения жирных кислот с использованием стандарта фирмы Sigma.

3. Результаты тестирования реальных объектов (сапропель озера

Карасёвое, экстракты «Паста-пелоид» и «Водный коллоидный экстракт») на 8 содержание свободных и связанных жирных кислот методом хромато-масс-спектрометрии с применением водной вибромагнитной экстракции.

Апробация работы. Основные положения, изложенные в работе, доложены и обсуждены на следующих научных конференциях: IV Международная конференция «Экстракция органических соединений» (2010 г., Воронеж); XV Международная экологическая конференция «Экология России и сопредельных территорий» (2010 г., Новосибирск); Всероссийская конференция с элементами научной школы «Проведение научных исследований в области синтеза, свойств и переработки высокомолекулярных соединений, а также воздействия физических полей на протекание химических реакций» (2010 г., Казань); II Международная научно-практическая конференция молодых ученых «Ресурсоэффективные технологии для будущих поколений» (2010 г., Томск); Международная научно-практическая конференция «Химия и жизнь» (2011, 2012 гг., Новосибирск); VI Всероссийская конференция молодых ученых, аспирантов и студентов с международным участием «Менделеев - 2012. Аналитическая химия» (2012 г., Санкт-Петербург); IV Всероссийская научная конференция с международным участием «Новые достижение в химии и химической технологии растительного сырья» (2012 г., Барнаул); Общероссийская с международным участием научная конференция «Полифункциональные химические материалы и технологии» (2012 г., Томск).

Публикации. По результатам исследований опубликовано 3 статьи в журналах из перечня ВАК, 1 патент, 14 материалов конференций и тезисов докладов.

Личный вклад. Автор принимал непосредственное участие в постановке цели и задач исследования, планировании и проведении экспериментальных работ, обработки и обсуждении результатов, формулировании выводов, написании публикаций. Автор принимал участие в создании вибромагнитного экстрактора, разработке способа водной 9 экстракции, получении экстрактов на основе сапропеля и оформлении необходимой документации для прохождения сертификации. Автор являлся непосредственным разработчиком методики хромато-массспектрометрического определения жирнокислотного состава в сочетании с водной вибромагнитной экстракцией липидов из сапропеля.

Структура и объем диссертационной работы. Диссертация состоит из введения, 4 глав, выводов, 4 приложений и списка использованной литературы. Материалы диссертации изложены на 121 странице, включают 16 таблиц, 33 рисунка. Список использованной литературы включает 103 наименования.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Тюнина, Марина Александровна

выводы

1. Разработана новая экологически безопасная методика выделения жирных кислот из природного сырья (сапропеля) с применением вибромагнитного воздействия и воды в качестве экстрагента. Оптимизированы условия экстракции: соотношение сапропель - вода 1:3, время вибромагнитного воздействия - 120 минут.

2. Методом сканирующей электронной микроскопии показано, что интенсификация стадии экстракции жирных кислот из сапропелей в условиях вибромагнитного воздействия связано со значительным диспергированием исходного сырья. Кроме того, методом хромато-масс-спектрометрии показано увеличение количества экстрагируемых из сапропеля жирных кислот (от 5 до 13) с одновременным увеличением их суммарного содержания в 30 раз.

3. Разработана методика определения жирных кислот в сапропелях методом хромато-масс-спектрометрии: выбраны условия хроматографического разделения метиловых эфиров насыщенных и ненасыщенных жирных кислот; рассчитаны относительные коэффициенты чувствительности для метиловых эфиров стеариновой, олеиновой, линолевой и линоленовой кислот. Нижняя граница определяемых концентраций насыщенных и ненасыщенных ЖК составляет 0,05 и 0,1 мкг/мл соответственно, предел обнаружения насыщенных ЖК - 0,01 мкг/мл, ненасыщенных ЖК - 0,03 мкг/мл. Проведена оценка правильности методики с применением стандартного образца фирмы Sigma.

4. Методика определения жирных кислот методом хромато-массспектрометрии с применением водной вибромагнитной экстракции протестирована при анализе сапропеля озера Карасёвое и экстрактов на его основе. Проведена идентификация ЖК и оценка их количественного содержания в режиме селективного ионного мониторинга по характеристическим пикам с применением эталонного образца фирмы Sigma. Правильность результатов анализа доказана межлабораторной прецизионностью полученные данные в пределах погрешности согласуются с результатами анализа лаборатории ЭКЦ УМВД г. Томска.

5. Разработанный метод вибромагнитной экстракции может быть применён в процессе пробоподготовки для интенсификации извлечения различных классов органических соединений для их последующего определения с использованием различных экстрагентов.

6. Метод водной вибромагнитной экстракции липидных соединений применен для получения продуктов «Паста-пелоид» и «Водный коллоидный экстракт» из сапропеля озера Карасёвое, предназначенных для косметологии и бальнеологии. Методика определения жирных кислот методом ГХ-МС может быть положена в основу временной фармакопейной статьи на получаемые препараты.

4.5 Заключение

Вибромагнитную экстракцию липидных соединений водой можно использовать в условиях пробоподготовки для определения жирных кислот методом хромато-масс-спектрометрии. Результаты определения жирных кислот, также как и липидов, свидетельствуют об интенсификации водной вибромагнитной экстракции.

Важным моментом для газовой хроматографии является подбор условий разделения хроматографических пиков с близкими индексами удерживания Ковача, а именно, для метиловых эфиров жирных кислот с одинаковым числом атомов углерода, но с разным количеством кратных связей. Удовлетворительное разделение хроматографических пиков позволяет значительно повысить точность результатов измерений, что играет значительную роль, если существуют строго регламентированные рамки концентраций, например, в фармакопейных статьях на препараты, содержащие биологически активные липидные соединения.

В большинстве случаев для количественных расчетов метиловых эфиров жирных кислот используют стандарт эфира одной кислоты, относительно которого рассчитывают концентрации и для насыщенных, и для ненасыщенных кислот, что не достаточно корректно, поскольку коэффициенты чувствительности для них различны.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Тюнина, Марина Александровна, 2013 год

1. Сапропелевые ресурсы Томской области и перспективы их освоения / В.

2. К. Бернатонис и др. // Высокие технологии добычи, глубокой переработки и использования озерно-болотных отложений : тез. докл. Междунар. науч.-практ. конф., Томск, 12-15 марта 2003 г. Томск, 2003. -С. 15-16.

3. Лопотко М. 3. Озера и сапропель / М. 3. Лопотко. Минск : Наука итехника, 1978. 88 с.

4. Кудашев И. Г. Сапропели Томской области: геология, генезис, ресурсы иперспективы их использования : дис. .канд. геол.-минерал, наук / И. Г. Кудашев. Томск, 2004. - 148 с.

5. Medicinal soap : Inter, pat. WO 2005/070385 Al (Electronic resource) / R.

6. Bevan (US) ; Applicant: Zander corporation ltd ; agent: Forreser ketley & CO. Pub. date 04.08.2005. - 17 p. - Access from „Questel".

7. Хохлова О. Б. Аквальная и субаквальная трансформация органическоговещества // Высокие технологии добычи, глубокой переработки и использования болотно-озерных отложений : тез. докл. Междунар. науч.-практ. конф., Томск, 12-15 марта 2003 г. С. 89-94.

8. Озерно-болотные отложения Томской области: ресурсы и проблемыиспользования / В. К. Бернатонис и др. // Материалы региональной конференции геологов Сибири, Дальнего Востока и Северо-Востока России. Томск, 2000. - Т. 2. - С. 160-161.

9. Комаров А. В. Использование природных ресурсов в Томской области //

10. Материалы региональной конференции геологов Сибири, Дальнего Востока и Северо-Востока России. Томск, 2000. - Т. 2. - С. С. 35-36.

11. Дмитрук С. Е. Фармацевтические аспекты использования пелоидов

12. Томской области / С. Е. Дмитрук и др. // Бюллетень СО РАМН. 2001. -№ 3. - С. 101-104.

13. Платонов В. В. Особенности химического состава и биологическаяактивность сапропелей / В. В. Платонов, О. С. Половецкая // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2012. - № 1. -4 с.

14. Плаксин Г. В. Термохимическая переработка озерных сапропелей: состав и свойства продуктов / Г. В. Плаксин, О. И. Кривонос // Рос. хим. ж. -2007.-Т. 51.-№4. С. 140-147.

15. Кривонос О. И. Разработка нового подхода к комплексной переработкесапропеля : Автореф. дис. . канд. хим. наук / О. И. Кривонос. Омск, 2012.- 18 с.

16. Адеева Л. Н. Определение химического состава сапропеля / Л. Н. Адееваи др. // Химия и химическая технология. 2009. - Т. 53. - № 3. С. 121123.

17. Нурмухаметова Е. А. Химическое изучение сапропеля / Е. А.

18. Нурмухаметова и др. // Омский науч. вестн. 2006. - № 3 (37). - С. 164-168.

19. Химический состав фракций органического вещества сапропеля / 3. В.

20. Семёнова и др. // Химия и химическая технология: Матер, докл. Всерос. научн.-практ. конф. г. Иркутск, 11-13 октября 2006 г. Иркутск: Изд-во ИрГТУ, 2006. С. 84.

21. Семёнова 3. В. Химический состав пиридиновых экстрактов сапропеля

22. Иркутской области / 3. В. Семёнова и др. // Химия твердого топлива. -2010.-№2.-С. 70-74.

23. Способ получения концентрата сапропеля : пат. 2005478 Рос. Федерация :

24. А61К35/10 / А. Ш. Бышевский, А. П. Потапов, С. Б. Гембаржевский, Е. А. Чирятьев ; заявитель Тюм. гос. мед. ин-т ; патентообладатель С. Б. Гембаржевский. № 5025084/14 ; заявл. 25.02.1992 ; опубл. 15.01.1994.

25. Muri G. Organic matter and lipids in sediments of Lake Bled (NW Slovenia):

26. Source and effect of anoxic and oxic depositional regimes / G. Muri, S. G. Wakeham // Organic Geochemistry. 2006. - V. 37. - P. 1664-1679.

27. Filley T. R. An isotopic biogeochemical assessment of shifts in organic matterinput to Holocene sediments from Mud Lake, Florida / T. R. Filley at.al. // Organic Geochemistry. 2001. - V. 32. - P. 1153-1167.

28. Исматова P. P. Качественный анализ основных групп БАВ, содержащихсяв торфе и сапропели // Фундаментальные исследования. Российская академия естествознания. 2007. - № 10. - С. 42.

29. Исматова Р. Р. Химическое изучение фенольных соединений торфа исапропели // Фундаментальные исследования. Российская академия естествознания. 2007. - № 10. - С. 43.

30. Исматова Р. Р. Идентификация каротиноидных пигментов в сапропели //

31. Фундаментальные исследования. Российская академия естествознания. -2007.-№ 10.-С. 44.

32. Исматова Р. Р. К вопросу о химическом составе пеоидов Томской области

33. Р. Р. Исматова и др. // Вестник Башкирского университета. 2007. -№ 1.-С. 32-33.

34. Юдина Н. В. Параметры оценки биологической активностиорганического вещества сапропелей / Н. В. Юдина и др. // Химия растительного сырья. 1998. - № 4. - С. 33-38.

35. Карелина О. А. Витаминные комплексы экологически чистых сапропелейозер сибирского региона : дис. . канд. биол. наук / О. А. Карелина. -Томск, 1999.- 116 с.

36. Кириченко К. А. Жирнокислотный состав общих липидов высшихводных растений из реки Ангары / К. А. Кириченко и др. // Химия растительного сырья. 2011. - № 2. - С. 97-102.

37. Comparison of supercritical carbon dioxide and Soxhlet extraction of lipidsfrom a brown seaweed, Sargassum hemiphyllum / P. С. K. Cheung et.al. // J. Agric. Food Chem. 1998. - V. 46. - P. 4228-4232.

38. Holser R. A. Extraction of lipids from flax processing waste using hot ethanol /

39. R. A. Holser, D. E. Akin // Industrial crops and products. 2008. - V. 27. - P. 236-240.

40. Аминина H. M. Состав и возможности использования бурых водорослейдальневосточных морей / Н. М. Аминина и др. // Вестник ДВО РАН. -2007.-№6. -С. 123-130.

41. Хотимченко С. В. Инозидсодержащий сфинголипид из краснойводоросли Gracilaria verrucosa / С. В. Хотимченко, В. Е. Васьковский // Биоорганическая химия. 2004. - Т. 30, № 2. - С. 190-194.

42. Ultrasound extraction and thin layer chromatography-flame ionizationdetection analysis of the lipid fraction in marine mucilage samples / M. Mecozzi et.al. // J. of Chromatography A. 2002. - V. 963. - P. 363-373.

43. Effects of light intensity, CO2 and nitrogen supply on lipid class composition of

44. Dunaliella viridis / F. J. L. Gordillo et.al. // J. of Applied Phycology. -1998.-V. 10.-P. 135-144.

45. Lipid extraction from biomass using co-solvent mixtures of ionic liquids andpolar covalent molecules / G. Young, F. Nippgen et.al. // Separation and purification technology. 2010. - V. 72. - P. 118-121.

46. Comparison of several methods for effective lipid extraction from microalgae /

47. J.-Y. Lee et.al. // Bioresource technology. 2010. - V. 101. - P. 575-577.

48. Ткач H. П. Сезонные изменения жирнокислотного состава у литоральныхгаммарид (Crustacea, Amphipoda) / Н. П. Ткач, Р. У. Высоцкая, В. Ф.

49. Брязгин // Современные проблемы науки и образования. Российская академия естествознания. 2007. - № 5. - С. 18-23.

50. Имбс А. Б. Выделение и характеристика сверхдлинноцепочечныхненасыщенных альдегидов из пресноводной губки Lubomirskia baicalensis / А. Б. Имбс, A. JL Верещагин // Биоорганическая химия. -2005. Т. 31, № 6. - С. 651-656.

51. Назаров П. В. Состав липидов лечебных грязей / П. В. Назаров, М. А.

52. Исаев // Вопр. курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. 2003. - № 5. - С. 46-47.

53. Исследование золя водных извлечений чаги. XI. Липиды водногоизвлечения чаги / М. А. Сысоева и др. // Химия растительного сырья. -2008. -№3.- С. 119-122.

54. Ruiz J. Improvement of a solid phase extraction method for analysis of lipidfractions in muscle foods / J. Ruiz et.al. // Analytica Chimica Acta. 2004. -V. 520.-P. 201-205.

55. Extraction and characterization of lipids from Antractic krill (Euphausiasuperba) / J. C. Gigliotti et.al. // Food Chemistry. 2011. - V. 125. - P. 1028-1036.

56. Цыпленков К. В. Оптимизация технологии процесса извлечения липидовиз илово-сульфидной грязи // Химия в интересах устойчивого развития. 2010. —№ 18. - С. 87-94.

57. Превращения липидов при механохимической деструкции лечебной грязи

58. Н. В. Юдина и др. // Химия в интересах устойчивого развития. 2010. -№ 18. - С. 95-99.

59. Голушкова Е. Б. Природа нейтральных азоторганических соединений влипидах современного осадка континентального типа / Е. Б. Голушкова, Т. А. Сагаченко, В. Н. Буркова // Известия Томского политехнического университета. 2003. - Т. 36, № 6. - С. 36-38.

60. Giacometti J. Gas chromatographic determination of fatty acids contained indifferent lipid classes after their separation by solid-phase extraction / J. Giacometti et.al. // J. of Chromatography A. 2002. - V. 976. - P. 47-54.

61. The application of ultrasound energy to increase lipid extraction throughput ofsolid matrix samples (flaxseed) / A. H. Metherel et.al. // Prostaglandins, leukotrienes and essential fatty acids. 2009. - V. 81. - P. 417-423.

62. Государственная Фармакопея Российской Федерации. 12 изд. - М. :

63. Науч. центр экспертизы средств медицинского применения, 2007. Ч. 1. - 704 с.

64. Федосеева Л. М. Изучение липидного состава надземной части Донникалекарственного (Melilotus officinalis L.) произрастающего в Алтайском крае / Л. М. Федосеева, Т. А. Харлампович // Химия растительного сырья. 2011. - № 4. - С. 213-218.

65. Ямансарова Э. Т. Состав нейтральных липидов масла жома облепихи

66. Hippophae Rhamnoides L.) / Э. Т. Ямансарова и др. // Вестн. Башкир, ун-та. 2008. - Т. 13, № 1. - С. 18-19.

67. Comparative study on total lipid determination using Soxhlet, Roese-Gottlieb,

68. Bligh & Dyer, modified Bligh & Dyer extraction methods / P. Manirakizaet.al. // Journal of food composition and analysis. 2001. - V. 14. - P. 93100.

69. Балдаев P. Применение ультразвука / P. Балдаев, В. Раджендран, П.

70. Паланичами. М. : Техносфера, 2006. - 576 с.

71. Мартовщук В. И. Извлечение липидов из низкомасличного растительногосырья с применением ультразвука / В. И. Мартовщук и др. // Новые технологии. 2011. - № 1. - С. 17-19.

72. Mechanistic assessment of microalgal lipid extraction / A. Ranjan et.al. // Ind.

73. Eng. Chem. Res. 2010. - V. 49. - P. 2979-2985.

74. Applications and opportunities for ultrasound assisted extraction in the foodindustry A review / K. Vilkhu et.al. // Innovative food science and emerging technologies. - 2008. - V. 9. - P. 161-169.

75. Improved extraction of vegetable oil under high-intensity ultrasound and/ormicrowaves / G. Cravotto et.al. // Ultrasonics Sonochemistry. 2008. - V. 15.-P. 898-902.

76. Гончаревич И. Ф. Теория вибрационной техники и технологии / И. Ф.

77. Гончаревич, К. В. Фролов. М. : Наука, 1998. - 320 с.

78. Корнеева Н. Н. Особенности вибрационного перемешиваниямногокомпонентных сред / Н. Н. Корнеева // Вестник АГТУ. 2006. - № 2.-С. 31-34.

79. Мищенко В. Я. Моделирование процесса экстракции пектиновых веществиз растительного сырья с применением вибрационного воздействия / В. Я. Мищенко, Е. В. Мищенко // Изв. Самар. науч. центра РАН. 2009. -Т. 11, №5(2).-С. 472^74.

80. Яцун С. Ф. Использование вибрационного воздействия в процессахмассообмена / С. Ф. Яцун, В. Я. Мищенко, Е. В. Мищенко // Изв. высш. учеб. заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Технические науки. -2008.-№5.-С. 99-101.

81. Яцун С. Ф. Влияние вибрационного воздействия на процесс экстракции впищевой промышленности / С. Ф. Яцун и др. // Известия высших учебных заведений. Пищевая технология. 2009. - № 4. - С. 70-72.

82. Кузнецова С. А. Получение арабиногалактана, дигидрокверцетина имикрокристаллической целлюлозы с использованием механохимической активации / С. А. Кузнецова и др. // Химия в интересах устойчивого развития.-2005.-№ 13.-С. 261-269.

83. Кузнецова С. А. Интенсификация процесса водной экстракцииарабиногалактана из древесины лиственницы / С. А. Кузнецова и др. // Химия растительного сырья. 2005. - № 1. - С. 53-58.

84. Supercritical С02 extraction of lipids and astaxanthin from Brazilian redspottedshrimp waste {Farfantepenaeus paulensis) / A. P. Sanchez-Camargo et.al. // The J. of Supercritical Fluids. 2011. - V. 56. - P. 164-173.

85. Кривонос О. И. Использование до- и сверхкритического диоксидауглерода для извлечения отдельных групп биологически активных веществ из сапропелей / О. И. Кривонос, Г. В. Плаксин //

86. Сверхкритические флюиды: теория и практика. 2010. - Т. 5, № 3. - С. 4-14.

87. Экстракция биологически активных жирных кислот из микроводоросли сиспользованием сверхкритического флюидного СОг-экстракционного процесса / Ш. А. Бикташев и др. // Вестн. Казан, технол. ун-та. 2011. -№ 17.-С. 251-253.

88. Supercritical С02 extraction of lipids from grain sorghum dried distillers grainswith solubles / L. Wang et.al. // Bioresource Technology. 2008. - V. 99. -P. 1373-1382.

89. The extraction and fractionation of specialty lipids using near critical fluids / O.

90. J. Catchpole et.al. // The J. of Supercritical Fluids. 2009. - V. 47. - P. 591-597.

91. Supercritical CO2 extraction of y-linoleic acid and other lipids from Arthrospira

92. Spirulina) maxima: Comparison with organic solvent extraction / R. L. Mendes et.al. // Food Chemistry. 2006. - V. 99. - P. 57-63.

93. Eller F. J. Supercritical CO2 extraction of fat: comparison of gravimetric and

94. GC-FAME methods / F. J. Eller, J. W. King // J. Agric. Food Chem. 1998. -V. 46.-P. 3657-3661.

95. Extraction and analysis of neutral lipids from activated sludge with and withoutsub-critical water pre-treatment / L. H. Huynh et.al. // Bioresource technology.-2010.-V. 101.-P. 8891-8896.

96. Сверхкритическая флюидная экстракция и ее применение дляопределения ультрамалых содержаний органических веществ в различных средах / И. Н. Глазков и др. // Сверхкритические флюиды : теория и практика. 2006. - Т. 1, № 1. - С. 52-65.

97. Горбатый Ю. Е. Сверхкритическое состояние воды / Ю. Е. Горбатый, Г.

98. В. Бондаренко // Сверхкритические флюиды : теория и практика. 2007. -Т. 2, №2.-С. 5-19.

99. Fernandez-Perez V. Superheated water extraction of cholesterol from solid food / V. Fernandez-Perez, M. D. Luque de Castro // Anal. Bioanal. Chem. -2003. V. 375, № 3. - P. 437-442.

100. Sun R. C. Comparative study of organic solvent and water-soluble lipophilicextractives from wheat straw I: yield and chemical composition / R. C. Sun, J. Tomkinson // J. Wood Sci. 2003. - V. 49. - P. 47-52.

101. Экстракция органических соединений ионными жидкостями / Ю. А.

102. Золотов и др. // Укр. хим. журн. 2006. - Т. 72, № 1/2. - С. 3-12.

103. Ионные жидкости новые растворители для экстракции и анализа / И. В.

104. Плетнев и др. // Журн. аналит. химии. 2003. - Т. 58, № 7. - С. 710711.

105. Ruiz-Gutierrez V. Update on solid-phase extraction for the analysis of lipidclasses and related compounds / V. Ruiz-Gutierrez, M. C. Perez-Camino // J. of Chromatography A.-2000.-V. 885.-P. 321-341.

106. Морозова H. С. Определение неэтерифицированных жирных кислот вбиологических образцах: различные способы пробоподготовки / Н. С. Морозова и др. // Вестник МИХТХ. 2012. - Т. 7, № 4. - С. 63-74.

107. Laffargue A. Development of solid-phase extraction and methylationprocedures to analyse free fatty acids in lipid-rich seeds / A. Laffargue et al. // Plant physiology and biochemistry. 2007. - V. 45. - P. 250-257.

108. Paik M-J. Separation of triacylglycerols and free fatty acids in microalgal lipidsby solid-phase extraction for separate fatty acid profiling analysis by gas chromatography / M-J. Paik et al. // J. of Cromatography A. 2009. - V. 1216.-P. 5917-5923.

109. Масла растительные. Метод определения жирно-кислотного состава :

110. ГОСТ 30418-96. Введ. 01.01.1998. - Минск : Межгос. Совет по стандартизации, метрологии и сертификации, 1996. - II, 5 с.

111. Targeted quantitative analysis of fatty acids in atherosclerotic plaques by highsensitivity liquid chromatography/tandem mass spectrometry / C. Pettinella et.al. // J. of chromatography B. 2007. - V. 850. - P. 168-176.

112. Протасов В. В. Низкотемпературный щелочной гидролиз сложныхэфиров при различном исходном содержании воды в системе : дис. . канд. хим. наук / В. В. Протасов. Курск, 2005. - 187 с.

113. Tavakoli О. Squid oil and fat production from Squid wastes using subcriticalwater hydrolysis: free fatty acids and transesterification / O. Tavakoli, H. Yoshida // Ind. Eng. Chem. Res. 2006. - V. 45. - P. 5675-5680.

114. Грецкая H. M. Новый эффективный метод хроматомассспектрометрического анализа жирных кислот в виде их дансилгидразинов / Н. М. Грецкая и др. // Известия Тихоокеанского научно-исследовательского рыбохозяйственного центра. 2001. - Т. 129. С. 40-51.

115. Масла растительные и жиры животные. Определение методом газовойхроматографии массовой доли метиловых эфиров индивидуальных жирных кислот к их сумме : ГОСТ Р 51483-99. Введ. 01.01.2001. -Переизд. Сент. 2005 г. - М. : Госстадарт России, 2005. - III, 8 с.

116. Масла растительные и жиры животные. Получение метиловых эфировжирных кислот : ГОСТ Р 51486-99. Введ. 2001-01-01. - М. : Госстадарт России, 1999. - II, 6 с.

117. Statistical evaluation of an analytical GC/MS method for the determination oflong chain fatty acids / P. Campo et.al. // Talanta. 2006. - V. 68 - P. 888894.

118. Дейнеко И. П. Исследование химического состава коры сосны / И. П.

119. Дейнеко, И. В. Дейнеко, Л. П. Белов // Химия растительного сырья -2007.-№ 1.-С. 19-24.

120. Хасанов В. В. Состав жирных кислот и стероидов жирных масел / В. В.

121. Хасанов и др. // Химия растительного сырья. 2006. - № 3. - С. 27-31.in

122. Рудаков О. Б. Развитие метода интерпретации хроматограмм приидентификации растительных масел // Химия растительного сырья. -2001.-№4.-С. 77-82.

123. Струкова Е. Г. Количественное определение микробных сообществполости рта с использованием хромато-масс-спектрометрии микробных маркеров : Автореф. дис. . канд. хим. наук / Е. Г. Струкова. Томск, 2011.-20 с.

124. Охрана природы. Почвы. Методы отбора и подготовки проб дляхимического, бактериологического, гельминтологического анализа : ГОСТ 17.4.4.02-84. Введ. 01.01.86. - Переизд. Авг. 2008 г. - М. Стадартинформ, 2008. - 7 с.

125. Изделия косметические. Методы определения воды и летучих веществили сухого вещества : ГОСТ 29188.4-91. Введ. 01.01.1993. - Переизд. -М. : ИПК Изд-во стадартов, 2003. -1, 3 с.

126. Дёрффель К. Статистика в аналитической химии / К. Дёрффел. М. : Мир, 1994.-267 с.

127. Statistical evaluation of an analytical GC/MS method for the determination of long chain fatty acids / P. Campo et.al. // Talanta. 2006. - V. 68 - P. 888894.

128. Еще раз о пределах обнаружения и определения / JI. П. Экспериандова и др. // Журн. аналит. химии. 2010. - Т.65, № 3. - С. 229-234.

129. МНОГОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ УС 1POIH Т1ЮДДЯ ПЕРЕРАБОТКИ ПРИРОДНОГО OPÏ АНИЧ1Х КО Г О СЫРЬЯ В ЖИДКОЙ СРЕДЕ

130. П.т и 10(10 ыд.пе ид чи ) Государственное оораiouame,/иное учреждение высшего профессионального образования Томский государственный университет (1 ГУ ) (1W)1.1. V >УV