Получение рекомбинантных штаммов Aspregillus awamori - продуцентов ферментов для эффективной конверсии полисахаридов зернового сырья при производстве спирта тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.07, кандидат технических наук Середа, Анна Сергеевна

  • Середа, Анна Сергеевна
  • кандидат технических науккандидат технических наук
  • 2011, Москва
  • Специальность ВАК РФ05.18.07
  • Количество страниц 210
Середа, Анна Сергеевна. Получение рекомбинантных штаммов Aspregillus awamori - продуцентов ферментов для эффективной конверсии полисахаридов зернового сырья при производстве спирта: дис. кандидат технических наук: 05.18.07 - Биотехнология пищевых продуктов (по отраслям). Москва. 2011. 210 с.

Оглавление диссертации кандидат технических наук Середа, Анна Сергеевна

Оглавление

Список сокращений

Введение

1. Литературный обзор

1.1 Технология производства пищевого спирта

1.2 Ферменты, участвующие в гидролизе зернового сырья при производстве спирта

1.3 Продуценты глюкоамилаз

1.4 Методы получения штаммов-продуцентов промышленных ферментов

2. Материалы и методы исследования

2.1 Штаммы грибов - продуцентов глюкоамилазы

2.2 НГ-мутагенез и выделение niaD" мутантов как реципиентов для плазмидной трансформации

2.3 Селекционные и ферментационные среды

2.4 Получение штаммов-реципиентов A. awamori

2.5 Плазмидные конструкции

2.6 Получение протопластов, трансформация и селекция

2.7 Условия облучения

2.8 Тесты на стабильность продукции глюкоамилазы

2.9 Определение активности ферментов

2.10 Анализ состава ферментных препаратов

2.11 Вискозиметрический метод определения общей эндодеполимеразной активности ксиланаз

2.12 Исследования по биокатализу некрахмальных полисахаридов зернового сусла комплексными ферментными препаратами, полученными на основе рекомбинантных штаммов Aspergillus awamori

2.13 Структура теоретических и экспериментальных исследований

3. Результаты и их обсуждение

3.1 Выделение стабильного варианта штамма A. awamori

3.2 Получение высокоэффективных штаммов A. awamori - продуцентов глюкоамилазы методом плазмидной трансформации

3.3 Получение высокоэффективных штаммов A. awamori — продуцентов ферментов, гидролизующих НПС и фитиевую кислоту методом плазмидной трансформации

3.4 Влияние индуктора на продуктивность рекомбинантных штаммов А. awamori

3.5 Поддержание коллекции рекомбинатных штаммов A. awamori

3.6 Исследование биоконверсии некрахмальных полисахаридов зернового сусла комплексными ферментными препаратами, полученными на основе высокоэффективных рекомбинантных штаммов Aspergillus awamori

3.7 Масштабирование процесса культивирования рекомбинантных штаммов Aspergillus awamori в промышленных условиях

3.8 Испытания ферментного препарата глюкоамилазы в спиртовом производстве

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биотехнология пищевых продуктов (по отраслям)», 05.18.07 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение рекомбинантных штаммов Aspregillus awamori - продуцентов ферментов для эффективной конверсии полисахаридов зернового сырья при производстве спирта»

По традиционной технологии производства спирта для разжижения крахмала зернового сырья применяют ферментные препараты амилолитического действия: а-амилазы и глюкоамилазы. Для повышения выхода конечного продукта и более полноценного использования растительного сырья активно применяют ферменты целлюлолитического комплекса, гидролизующие некрахмальные полисахариды [1].

На российском рынке представлены в основном импортные ферментные препараты, это связано с отсутствием в России современного рентабельного биотехнологического производства из-за недостаточного уровня активности имеющихся промышленных штаммов. I

В мировой практике высокоактивные технические ферментные препараты получают на основе генно-модифицированных рекомбинантных штаммов. Генно-инженерные технологии позволяют не только увеличивать продуктивность микроорганизмов, но и получать ферментные препараты с заданными свойствами [2]. Концепция получения рекомбинантных штаммов методом генетической инженерии состоит из трех основных этапов:

• Получение стабильного штамма-реципиента;

• Создание универсальной трансформационной и экспрессионной системы;

• Получение высокоэффективных рекомбинантных штаммов.

С целью создания импортозамещающей, конкурентоспособной технологии промышленного производства технических ферментов для конверсии зернового сырья в ГНУ ВНИИПБТ совместно с кафедрой химической энзимологии Химического факультета МГУ им. М.В. Ломоносова, рядом институтов РАН и частных компаний был получен высокоактивный мутантный штамм А. статоп М-2002 (ВКМ Р-377Ш). Данный штамм является промышленным продуцентом глюкоамилазы, обладающей а-(1-4) и а

1-6) активностью, что делает этот фермент ключевым в процессах осахаривания крахмалсодержащего сырья и мальтодекстринов в спиртовой и крахмалопаточной промышленности [3]. Штамм А. статоп М-2002 в настоящее время является наиболее продуктивным из штаммов, используемых для получения глюкоамилазы в России.

Увеличение уровня стабильной экспрессии глюкоамилазы штамма А. сматоп М-2002 и создание на его основе рекомбинантных штаммов -продуцентов ферментов, гидролизующих НПС, позволит получить конкурентоспособные ферментные препараты для эффективной конверсии зернового сырья. Это снизит их себестоимость и приведет к повышению рентабельности производства ферментных препаратов.

Целыо исследований являлось получение рекомбинантных штаммов -продуцентов ферментов для эффективной конверсии зернового сырья на основе промышленного штамма А аматоп М-2002 (ВКМ Р-377Ш).

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

• Получить стабильный реципиеитный штамм для проведения дальнейших генно-инженерных работ по повышению его биосинтетической способности.

• Создать универсальную систему экспрессии генов.

• Получить высокоэффективные рекомбинантные штаммы с заданными свойствами и разработать методики поддержания полученных рекомбинантных штаммов.

• На основе полученных рекомбинантных штаммов наработать опытные образцы ферментных препаратов (ФП).

• Изучить компонентный и биохимический состав полученных ФП и их гидролитическую способность по отношению к полисахаридам зернового сырья.

• Исследовать эффективность применения новых ФП в спиртовом производстве.

Похожие диссертационные работы по специальности «Биотехнология пищевых продуктов (по отраслям)», 05.18.07 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Биотехнология пищевых продуктов (по отраслям)», Середа, Анна Сергеевна

4. Выводы

1. Комбинацией методов селекции и индуцированного мутагенеза-получен стабильный мутантный. штамм A. awamori 6804 с уровнем активности* глюкоамилазы в культуральной жидкости 580+20 ед/см-3.

2. На основе штамма A. awamori 6804 получен ауксотрофный штамм-реципиент A. awamori 6804-19 для проведения плазмидной трансформации с целью получения рекомбинантных штаммов - продуцентов глюкоамилазы и НПС-гидролизующих ферментов.

3. Разработана методика протопластирования и трансформации штамма-реципиента A. awamori 6804-19. Создана универсальная система экспрессии генов для A. awamori на основе промотора и терминатора гена глюкоамилазы (glaA) A. awamori 6804.

4. Методами генной инженерии получены рекомбинантные штаммы, обладающие повышенной активностью целевых ферментов, необходимых для эффективной конверсии полисахаридов зернового сырья:

A. awamori amyR-T-19, A. awamori Т-14 и A. awamori Т-29 с увеличенной продукцией глюкоамилазы на 30 %;

A. awamori Xyl-15 и A. awamori Xyl-21, ксиланазная активность которых увеличена в 3 раза по сравнению с исходным штаммом;

A. awamori EGI-46 и A. awamori EGI-73, у которых уровень синтеза эндоглюканазы увеличился в 4-6 раз;

A. awamori Phy-7 и A. awamori Phy-39, фитазная активность которых увеличена в 300 раз при сохранении глюкоамилазной активности на уровне контроля.

5. На основе новых рекомбинантных штаммов A. awamori 6804, А. awamori Т-14, A. awamori Т-29, A. awamori Xyl-15 и A. awamori EGI-73 наработаны опытные образцы концентрированных ферментных препаратов и проведены сравнительные исследования их гидролитической способности по отношению к полисахаридам зернового сырья. Установлено, что концентрация глюкозы при использовании ферментных препаратов, полученных из рекомбинантных штаммов A awamori Xyl-15 и A. awamori EGI-73, в 1,5 раза выше, чем при использовании препарата из родительского штамма A. awamori 6804. Данный эффект связан с гидролизом некрахмальных полисахаридов ферментами целлюлолитического Hi гемицеллюлолитического действия, синтезируемыми рекомбинантными штаммами.

6. Исследовано влияние новых комплексных ферментных препаратов глюкоамилазы, полученных на основе рекомбинантных штаммов, на реологические и биохимические свойства зернового сусла и бражки. Показано, что их применение способствует улучшению реологических свойств сусла, обеспечивая снижение вязкости в 1,2 - 1,3 раза, повышению выхода целевого продукта на 1,2 %, по сравнению с ферментным препаратом, полученным на основе родительского штамма.

7. Проведены производственные испытания технологии- культивирования высокоэффективных рекомбинантных штаммов A. awamori amyR-T-19 и А. awamori Xyl-15 - продуцентов глюкоамилазы и ксиланазы. Полученные результаты свидетельствует об успешном масштабировании технологии получения препаратов глюкоамилазы и ксиланазы в промышленных условиях.

8. Применение комплексных ферментных препаратов глюкоамилазы, полученных на основе новых высокоактивных рекомбинантных штаммов, положительно влияет на экономические показатели процесса производства спирта за счет снижения расхода фермента на осахаривание, повышения выхода спирта на 0,7-1,2% и снижения технологических потерь сырья. Экономическая эффективность от производства 100 т комплексного ферментного препарата глюкоамилазы на основе новых рекомбинантных штаммов составит порядка 15-20 млн. руб.

3.9 Заключение

В результате проведенных исследований с использованием эффективных методов селекции, индуцированного мутагенеза и генно-инженерных технологий получены новые рекомбинантные штаммы А. сматоп, обладающие повышенной активностью ферментов, необходимых для эффективной конверсии полисахаридов зернового сырья.

На диаграмме (рис. 29) приведены обобщенные результаты экспериментальных исследований по получению новых рекомбинантных штаммов А. ам>атоп.

Я Глюкоамилаза ■ Ксиланаза ■ КМЦ-аза II Бета-глюканаза ■ Фитаза 1 I а 5

Л^» Л^« а\\ашоп алуатоп а »-а топ а »а топ а\\атоп ажипоп а\\атоп а «а топ

М-2002 6804 атуК-Т- Т-29 Т-14 Ху1-15 ЕС1-73 РЬу-7

19

Рисунок 29 - Целевые активности ферментов в КЖ штаммов А. <шатоп: А. аматоп М-2002 - исходный штамм, продуцент глюкоамилазы;

А. амгатоп 6804 — стабильный кобальтовый мутантный штамм, продуцент глюкоамилазы;

А. сматоп атуЯ-Т-19 — рекомбинантный штамм, полученный в результате трансформации плазмидой рА№2я/и>>К., продуцент глюкоамилазы; А. аматоп Т-29 - рекомбинантный штамм, полученный в результате трансформации плазмидой рвА-вА, продуцент глюкоамилазы;

А. сматоп Т-14 - рекомбинантный штамм, полученный в результате трансформации плазмидой рвА-ОА, продуцент глюкоамилазы; А. ам>атог\ Ху1-15 - рекомбинантный штамм, полученный в результате трансформации плазмидой рОА- Ху1, продуцент глюкоамилазы и ксиланазы;

А. статоп ЕС1-73 - рекомбинантный штамм, полученный в результате трансформации плазмидой рвЛ- Ев, продуцент глюкоамилазы и эндоглюканазы; А. статоп РЬу-7 - рекомбинантный штамм, полученный в результате трансформации плазмидой рвА- РЬу, продуцент глюкоамилазы и фитазы

Штаммы А. статоп атуЯ-Т-19 и А. статоп Ху1-15 депонированы во Всероссийской коллекции микроорганизмов (ВКМ) ИБФМ им. Г.К.Скрябина РАН.

Анализ биохимического состава ферментативного комплекса на основе тестирования активности ферментов по специфичности их действия, а также результаты фракционного состава при храмотографическом разделении ферментных препаратов подтвердил увеличение глюкоамилазной активностей и наличие сопутствующих ксиланазной, эндоглюканазной и фитазной активностей у новых рекомбинантных штаммов А. ам-атоп.

Показана эффективность использования ферментных препаратов, полученных на основе новых рекомбинантных штаммов А. статоп в производстве спирта для улучшения реологических свойств сусла и увеличения выхода спирта. В результате исследований оптимизирована традиционная технологическая схема производства этанола вследствие применения комплексных ФП, полученных на основе новых рекомбинантных штаммов А. статоп (рис. 30).

Рисунок 30 - Процессуальная схема технологии этанола на основе комплексных ФП глюкоамилазы

Основные разработанные способы повышения эффективности технологии производства и применения новых ферментных препаратов, на основе высокоактивных рекомбинантных штаммов А. статоп по сравнению с

1 существующими технологиями представлены в таблице (табл. 42).

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Середа, Анна Сергеевна, 2011 год

1. Римарева, Л.В. Ферментные препараты для спиртовой промышленности. Сб. Пути совершенствования технологического процесса производства спирта, М. : 2001.-С. 17.2. 194. Waites, Michael J. Industrial microbiology: an introduction. Medical, 2008. -288 p.

2. Патент РФ №2245364 от 27.01.2005.4. www.m-bizportal.ru

3. Фараджева, Е.Д., Федоров, В.А. Общая технология бродильных производств. -М.: Колос, 2002.-408 с.

4. Jacques, К.А. The Alcohol Textbook / К.А. Jacques, Т.Р. Lyons, D. R. Kelsall. -4th edition. Nottingham University Press. 2003. - 448 p.

5. Bothast, Rodney J. New technologies in biofuel production (http://gisceu.net/PDF/U361 .pdf).

6. Туршатов M. В. Разработка энергосберегающей технологии этилового спирта на основе новых способов подготовки сырья. Диссертация на соискание ученой степени канд. тех. наук. М., 2009. 132 с.

7. Сотников, В. А., Федоров, А. Д., Гамаюрова, В. С., Котельникова, Н. И., Котельников, М. В. Способ низкотемпературного разваривания крахмалистого сырья в производстве спирта // Производство спирта и ликероводочных изделий. 2002. №1. Р. 13-15.

8. Лукерченко, В. Н. Технология и оборудование интенсивных производств спирта Текст. : монография / В.Н.Лукерченко. М. : Моск. гос. ун-т им. М.В. Ломоносова, 2003.-451 с.

9. Грачева, И.М. Технология ферментных препаратов / И. М. Грачева, А. Ю. Кривова. М.: Элевар, 2000. - 512 с.

10. Pandey, A., Nigam, P. Advances in. microbial amylases // Biotechnol. Appl. Biochem. 2000. V. 31. P. 135-152.

11. Диксон, M. Ферменты Текст. : в 3-х т. / Пер с англ. J1.M. Гинодмана, М. И. Левянт; Под ред. В.К. Антонова, А.Е. Браунштейна. М : Мир, 1982. 14. Ingle, М.В:, Erickson,- R.J. Bacterial a-amylases // Adv. Appl. Microbiol. 1978. V. 24. - P. • 257-279.

12. Ingle M.B., Erickson R.J. Bacterial a-amylases.// Adv. Appl. Microbiol., 1978, V. 24, P. 257 279.

13. Ratanakhanokchai, K., Kaneko, J., Kamio, Y., Izaki, K. Purification and properties of a maltotetraose and maltotriose producing amylase from Chloroflexus aurantiacus // Appl. Environ. Microbiol. 1992. V. 58. P. 2490-2494.

14. Grootegoed, J. A., Lauwers, A. M., Heinen, W. Separation and partial purification of extracellular amylase and protease from Bacillus caldolyticus // Arch. Microbiol. 1973. V. 90. P. 223.

15. Kobayashi, Т., Kamekura, M., Kanlayakrit, W., Ohnishi, H. Production, purification and characterization of an amylase from the moderate halophile Micrococcus varians subspecies halophilus II Microbios. 1986. V. 46. P. 165.

16. Yuzuru Suzuki and Tetsuro Imai. Bacillus stearothermophilus KP 1064 puilulan hydrolase // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1985. V. 21. P. 20-26.

17. Yuzuru Suzuki and Kazumi Oishi. A relationship between efficiencyof isomaltosaccharide hydrolysis and thermostability of six Bacillus oligo-1,6-glucosidases // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1989. V. 31. P. 32-37.

18. Kim, I-Ch., Cha, J-H., Kim, J-R., Jang, S-Y., Seo, B-Ch., Cheong, T-K., Lee, D.S., Choi, Y.D., Park, K-H. Catalytic properties of the cloned amylase from Bacilluslicheniformis II J. Biol. Chem. 1992. V. 267(31). P. 22108-22114.i

19. Bealin-Kelly, F., Kelly, C. T., Fogarty, W. M. The oc-amylase of the caldoactive bacterium Bacillus caldovelox // Biochem. Enzymol. 1990. V. 1. P. 149-158.

20. Nakano, M., Chaen, H., Sugimoto, T., Miyake, T. Maltohexaose and maltopentaose-forming amylase, and its preparation and uses // US Patent: 5.739.024. 1998.

21. Ben Ali, M., Mhiri, S., Mezghani, M., Bejar, S. Purification and sequence analysis of the B.stearothermophilus US100 II Enz. Microb. Technol. 2001. V. 28. -P. 537-542.

22. Takasaki, Y. Production of maltohexaose by a-amylase from Bacillus circulans G- II Agric. Biol. Chem. 1982. V. 46. P. 1539-1547.

23. Ilayashi, T., Akiba, T., Horikoshi, K. Production and purification of new maltohexaose-forming amylase from alkalophilic Bacillus sp. H-167II Agric. Biol. Chem. 1988. V. 52. P. 443-448.

24. Fogarty, W. M., Bourke, A. C., Kelly, C. T., Doyle, E. M. A constitutive maltotetraose-producing amylase from Pseudomonas sp. IMD 353II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1994. V. 42. P. 198-203.

25. Kim, T. U., Gu, B. G., Jeong, J. Y., Byun, S.M., Shin, Y.C. Purification and haracterization of a maltotetraose forming alkaline a-amylase from an alkalophilic Bacillus sp. GM8901 // Appl. Environ. Microbiol. 1995. V. 61. P. 3105 - 3112.

26. Chary, S. J., Reddy, S. M. Starch degrading enzymes of two species of Fusarium //Folia Microbiol. 1985. V. 30. -P. 452.

27. Gupta, R., Gigras, P., Mohapatra, H., Goswami, V. K., Chauhan, B. Microbial a-amylases: a biotechnological perspective // Process Biochemistry. 2003. V. 38(11). -P. 1599-1616 (18).

28. Leveque, E., Janecek, S., Haye, B., Belarbi, A. Thermophilic archaeal amylolytic enzymes II Enzym. Microb. Tech. 2000. V. 26(1). P. 3 - 14.

29. Milner, J. A., Martin, D. J., Smith, A. Two-stage inocula for the production of alpha-amylase by Bacillus amyloliquefaciens II Enz. Microbiol. Techno1. 1997. V. 21. -P. 382 -386.

30. Bose, K., Das, D. Thermostable alpha-amylase production using Bacillus • licheniformis NRRL B14368 // Ind. J. Exp. Biol. 1996. V. 34(12). P. 1279 - 1282.

31. Hwang, K. Y., Song, H. K., Chang, C., Lee, J., Lee, S. Y., Kim, K. K., Choe, S., Sweet, R. M., Sub, S. W. Crystal structure of thermostable a-amylase from Bacillus licheniformis refined at 1,7 A resolution // Mol. Cells. 1997. V. 7(2). P. 251 - 258.

32. Khajeh, K., Naderi-Manesh, H., Ranjbar, B., Moosavi-Movahedi, A. A., Nemat-Gorgani, M. Chemical modification of lysine residues in Bacillus a-amylases: effect on activity and stability // Enz. Microb. Technol., 2001, V. 28, P. 543 549.

33. Declerck, N., Machius, M., Wiegand, G., Huber R., Gaillardin, C. Probing structural determinants specifying high thermostability in Bacillus licheniformis alpha-amylase //J. Mol. Biol. 2000. V. 301(4). P. 1041 - 1057.

34. Duran-Paramo, E., Garcia-Kirchner, O., Hervagault, J. F., Thomas, D., Barbotin, J. N. Alpha-amylase production by free and immobilized Bacillus subtilis II Appl. Biochem. Biotechnol., 2000. V. 84 86. - P. 479 - 485.

35. Yuguo, Z., Zhao, W., Xiaolong, C. Alpha-amylase production by Bacillus subtilis with dregs in an external-loop airlift bioreactor // Biochem. Eng. J. 2000. V. 5(2). P. 115-121.

36. Stredansky, M., Kremnicky, L., Sturdik, E., Feckova, A. Simultaneous production and purification of Bacillus subtilis alpha-amylase // Appl. Biochem. Biotechnol. 1993. V. 38(3). P. 269 - 276.

37. Haddaoui, E., Chambert, R., Petit-Glatron, M. F., Lindy, O., Sarvas, M. Bacillus subtilis alpha-amylase: the rate limiting step of secretion is. growth phase-independent.// FEMS Microbiol. Lett. 1999. V. 173(1). P. 127 - 131.

38. Narang, S., Satyanarayana, T. Thermostable alpha-amylase production' by an extreme thermophile Bacillus thermooleovorans II Lett. Appl. Microbiol. 2001'. V'. 32(1).-P. 31-35.

39. Chakraborty, K., Bhattacharyya, B. K., Sen, S. K. Purification and' characterization of a thermostable alpha-amylase from Bacillus stearothermophilus I I Folia Microbiol (Praha). 2000. V. 45(3). P. 207-210.

40. Hamilton, L. M., Kelly, C. T., Fogarty, W. M. Purification and properties of the raw starch degrading a-amylase of Bacillus s/?.IMD434 // Biotechol Lett. 1999. V.21. -P.lll 115.

41. Lin, L. L., Chyau, C. C., Hsu, W. H. Production and properties of a raw-starch-degrading amylase from the thermophilic and alkaliphilic Bacillus sp. TS-23 // Biotech. Appl. Biochem. 1998. V. 28. P. 61 - 68.

42. Ebisu, S., Mori, M., Takagi, H., Kadowaki, K., Yamagata, H., Tsukagoshi, N., Udaka, S. Production of a fungal protein, Taka amylase A, by protein-producing Bacillus brevis HPD31 //J.Ind. Microbiol. 1993. V. 11.-P. 83 -88.

43. Ivanova, V. I., Dobreva, E. P., Emanuilova, E. I. Purification and characterization of a thermostable alpha-amylase from Bacillus licheniformis // J. Biotech. 1993. V. 28 (2-30). -P. 277-289.

44. Femi-Ola, T. O., Olowe, B.M. Characterization of alpha amylase from Bacillus subtilis BS5 isolated from Amitermes evuncifer silvestri // Res. J. Microbiol. 2011. V. 6. -P. 140-146.

45. Paquet, V., Croux, C., Goma, G., Soucaille, P. Purification and characterization! of the extracellular alpha-amylase from Clostridium acetobutylicum ATCC 824 // Appl. Environ. Microbiol. 1991. V. 57(1). P. 212-218.

46. Shih, N. J., Labbe, R. G. Purification and characterization of an extracellular alpha-amylase from Clostridium perfringens type A // Appl. Environ.' Microbiol. 1995, V. 61(5). -P. 776-1779.

47. Pompeyo, C. C., Gömez, M. S., Gasparian, S., Morlon-Guyot, J. Comparison of amylolytic properties of Lactobacillus amylovorus and of Lactobacillus amylophilus II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1993. V. 40. P. 266 - 269.

48. Liebl, W., Stemplinger, I., Ruile, P. Properties and gene structure of the Thermotoga maritima alpha-amylase AmyA, a putative lipoprotein of a hyperthermophilic bacterium // J. Bacteriol. 1997. V. 179(3). -P. 941 -948.

49. Khoo, S. L., Amirul, A-A., Kamaruzaman, M., Nazalan, N., Azizan, M. N. Purification and characterization of a-amylase from Aspergillus flavus II Folia Microbiol. 1994. V. 39. P. 392-398.

50. Michelena, V. V., Castillo, F. J. Production of amylase by Aspergillus foetidus on rice flour medium and characterization of the Enzyme // J. Appl. Bacteriol. 1984. V.56.-P. 395.

51. Bhella, R. S., Altosaar, I. Purification and some properties of the extracellular a-amylase from Aspergillus awamori II Can. J. Microbiol. 1985. V. 31. P. 149.

52. Olutiola, P. O. a-Amylolytic activity of Aspergillus chevahen from mouldy maize seeds // Indian Phytopathol. 1982. V. 35. P. 428.

53. Heese, O., Hansen, G., Höhne, W.E., Körner, D. A thermostable alpha-amylase from Thermoactinomyces vulgaris: purification and characterization // Biomed. Biochim. Acta. 1991. V. 50(3). -P. 225-232.

54. Norouzian, D., Akbarzadeh, A., Scharer, J. M., Young, M. M. Fungal glucoamylases // Biotech. Adv. 2006. V. 24. P. 80 - 85.61. www.chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/

55. Marín-Navarro, J., Polaina, J. Glucoamylases: structural and' biotechnological aspects // Appl. Microbiol. Biotechnol. /Accepted: 23 November 2010. SpringerVerlag 2010.

56. Sauer, J., Sigurskjold, B. W., Christensen, U., Frandsen, T. P., Migorodskaya, E., Harrison, M., Roepstorff, P., Svensson, B. Glucoamylase: structure/function relationships, and protein engineering // Biochim. Biophys. Acta.2000. V. 1543. P. 275-293.

57. Svensson, B., Larsen, K., Svendsen, I., Boel, E. The complete amino acid sequence of the glycoprotein, glucoamylase Gl, from Aspergillus niger II Carlsberg. Res. Commun. 1983. V. 48. P. 529 - 544.

58. Svensson, B., Larsen, K., Gunnarsson, A. Characterization of glucoamylase G2 from Aspergillus niger II Eur. J. Biochem. 1986. V. 154. P. 497 - 502.

59. Svensson, B., Hespersen, H., Sierks, M.R., MacGregor,' E.A. Sequence homology between putative raw-starch bindingdomains from different starch-degrading enzymes//Biochem. J. 1989. V. 264. -P. 309-311.

60. Boraston, A. B., Bolam, D. N., Gilbert, H. J., Davies, G. J. Carbohydrate-binding modules: fine-tuning polysaccharide recognition // Bio-chem. J. 2004. V. 382. -P. 769-781.

61. Rodríguez-Sanoja, R., Oviedo, N., Sánchez, S. Microbial starch-binding domain // Curr. Opin. Microbiol. 2005. V. 8. P. 260 - 267.

62. Machovic, M., Janecek, S. Starch-binding domains in the post-genome era // Cell. Mol. Life. Sei. 2006 b. V. 63. P. 2710-2724.

63. Lin, S. C., Liu, W. T., Liu, S. H., Chou, W.I., Hsiung, B. K., Lin, I. P., Sheu, C. C., Chang, M. D. T. Role of the linker region in the expression of Rhyzopus oryzae glucoamylase II BMC. Biochem. 2007. V. 8. P. 9.

64. Sevcik, J., Solovicová, A., Hostinová, E., Gasperik, J., Wilson, K., Dauter, Z. Structure of glucoamylase from Saccharomycopsis fibuligera at 1.7 Á resolution // Acta. Crystallogr. Sect. D. 1998. V. 54. -P. 854-866.

65. Adam, A. C., Latorre-Garcia, L., Polaina, J. Structural analysis of glucoamylase encoded by the STA1 gene of Saccharomyces cerevisiae (var. diastaticus) // Yeast. 2004. V. 21. -P. 379-388.

66. Aleshin, A. E., Feng, P. H., I-Ionzatko, R. B., Reilly, P. J. Crystal structure and evolution of prokaryotic glucoamylase 11 J. Mol. Biol. 2003. V. 327. — P. 61 73.

67. Coutinho, P. M., Reilly, P. J. Glucoamylase structural, functional and evolutionary relationships // Protein Struct. Funct. Genet. 1997. V. 29. P. 334 -347.

68. Frandsen, T. P., Fierobe, H. P., Svensson, B. Engineering specificity and stability in glucoamylase from Aspergillus niger in protein engineering in industrial biotechnology // In: Alberghin L, editor. Amsterdam: Harwood Academic. 1999. P. 189-206.

69. Reilly, P. J. Protein engineering of glucoamylase to improve industrial properties; a review // Starch. 1999. V. 51. P. 269 - 274.

70. Suresh, C., Dubey, A. K., Srikanta, S., Kumar, U. S. Characterization of starch hydrolyzing enzyme of Aspergillus niger II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1999. V. 51. -P. 673-675.

71. Pazure, J., Knull, H. R., Cepure, A. Glucoamylase: structure and properties of the two forms of glucoamylase from Aspergillus niger II Carbohydr. Res. 1971. V. 20. -P. 83-96.

72. Ueda, S. Fungal glucoamylase and raw starch digestion // TIBS. 1981. P. 8990.

73. Spinelli, B. B. L., Lourdes, M., Polizeli, T. M., Terenzi, II.F., Jorge, J. A. Biochemical characterization of glucoamylase from the hyper producer exo-1 mutant strain of Neurospora crassa IIFEMS Microbiol. Lett. 1996. V. 138. P. 173 - 177.

74. Norouzian, D., Rostami, K., Nouri, I. D., Saleh, M. Subsite mapping of purified glucoamylases I, II, III produced by Arthrobotrys amerospora ATCC 34468 // World J. Microbiol. Biotechnol. 2000. V. 16. -P. 155 161.

75. Ono, K., Shintani, K., Shikata, S. Competitive studies of various molecular species in Aspergillus niger glucoamylase // Agric. Biol. Chem. 1988. V. 52(7). P. 1699-1706.

76. Ali, S., Hossain, Z., Mahmood, S., Alam, R. Characterization of glucoamylase of Aspergillus terrues II J. Appl. Bacteriol. 1991. V. 71. P. 144 - 46.

77. Ghosh, A., Chatterjee, B., Das, A. Purification and characterization of glucoamylase of Aspergillus terrues NA-170 mutant I I J. Appl. Bacteriol. 1991. V. 71.-P. 162-169.

78. Thorsen, T. S., Johnsen, A. H., Josefsen, K., Jensen, B. Identification and characterization of glucoamylase from the fungus Thermomyces lanuginosus II Bioch. Bioph. Acta. / Proteins & Proteomics. 2006. V. 1764(4). P. 671 - 676.

79. King, N. J. The Glucoamylase of Coniophora cerebella II Biochem. J. 1967. V. 105.-P. 577-583.

80. Kaji, A., Sato, M., Kobayashi, M., Murao, T. Acid-stable glucoamylase produced in medium containing sucrose by Corticium rolfsii // J. Agric. Chem. Soc. Jpn. 1976. V. 50. -P. 509-517.

81. Tsuboi, A., Yamasaki, Y., Suzuki, Y. Two forms of glucoamylase from Mucor rouxianus II Agric. Biol. Chem. 1974. V. 38. P. 543 - 550.

82. Aquino, A. G., Jorge, J. A., Tercnzi, H. F., Polizeli, M. L. Thermostable glucose-tolerant glucoamylase. produced1 by the thermophilic fungus Scytaliditim thermophiliimi II Folia Microbiol. 2001. V. 46(1). P. 11 -16.

83. Paszczynski, A., Fiedurek, Ji, Ilczuk, Z., Ginalskaj G. The influence of proteases on the activity of glucoamylase from Aspergillus niger G II Appl. Microbiol. Biotechnol. 1985. V. 22(6). P. 434 - 437.

84. Miah, M. N. N., Ueda, S. Multiplicity of Glucoamylase of Aspergillus oryzae Part 2. Enzymatic and Physicochemical1 Properties of Three Forms of Glucoamylase // Starch. 1977. V. 29 (7). P. 235 - 239:

85. Pandey, A. Glucoamylase Research: An Overview // Starch1. 1995. V. 47(11).1. P. 439-445.

86. Close, A., Chatterjee, B. S., Das, A. Characterization of glucoannylaserom Asperigillus terreus 4 IIFEMS. Microbiol. Lett. 1990. V. 66(1-3). P. 345 - 349.

87. Takeda, Y., Matsui, H., Tanida, M., Takao, S., Ghiba, S. Purification and Substrate Specificity of Glucoamylase of Paecilomyces varioti AHU 9417 // Agric. Biol. Chem. 1985. V. 49(6).-P. 1633-1641.

88. Mot, R. D., Van, Oudenduck, E., Verachtert, H. Purification and characterization of an extracellular ' glucoamylase from the yeast Candidatsukuboensis CBS 6389 // Antonie van Leeuwenhoek. 1985. V. 51(3). P. 275 -287.•I103. www.biokemi.org

89. Collins, T., Gerday, Ch., Feller, G. Xylanases, xylanase families andextermophilic xylanases // FEMS Microbiol. Rew. 2005. V. 29. P. 3 - 29.i

90. Carbohydrate Active Enzymes database and URL (http://www.cazy.org/)

91. Biely, P., Vrsanska, M., Tenkanen, M., Kluepfel, D. Endo-p-1,4-xylanase families: differences in catalytic properties // J. Biotechnol. 1997. V. 57. P. 151 -166.

92. Biely, P. Diversity of microbial endo-l,4-(3-xylanases. In Applications of Enzymes to lignocellulosics / Mansfield S.D., Saddler J.N. (eds.) // Amer. Chem. Soc. Washington. 2003. P. 361 - 380.

93. Polizeli, M. L., Rizzatti, A. C. S., Monti, R., Terenzy, H. F., Jorge, J. A., Amorim, D. S. Xylanases from fungi: properties and industrial applications // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2005. V. 67. P. 577 - 591.

94. Beg, Q. K., Kapoor, M., Mahajan, L., Hoondal, G. S. Microbial xylanases and their industrial applications: a review // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2001. V. 56. -P. 326-338.

95. Cleemput, G., Hessing, M., Van Oort, M., Deconynck, M., Delcour, J. A. Purification and characterization of p-D-xylosidase and an endo-xylanase from wheat flour//Plant. Physiol. 1997. V. 113. -P. 377-386.

96. Dekker, R. F. H., Richards, G. N. Purification, properties and mode of action of hemicellulase produced by Ceratocystis paradoxa II Carbohydr. Res. 1975. V. 39. -P. 97-114.

97. Kimura, I., Sasahara, H., Tajima, S. Purification and characterization of two xylanases and an arabinofuranosidase from Aspergillus sojae II J. Ferment. Bioengin. 1995. V. 804. -P. 334-339.

98. Gubits, G. M., Haltrich, D., Latal, В., Steiner, W. Mode ofdepolymerysation of hemicellulose by varius mannanases and xylanases in relation their ability to bleach softwood pulp // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1997. V. 47. P. 658 - 662.

99. Belancic, A., Scarpa, J., Peirano A., Diaz, R., Steiner, J., Eyzayuirre, J. Pénicillium purpurogenum produces several xylanases: purification and properties of two of the enzymes // J. Biotechnol. 1995. V. 41. P. 71-79.

100. Синицына, О. А., Окунев, О. H., Серебряный, В. А., Вавилова, Е. А., Винецкий, Ю. П., Синицын, А.П. Рекомбинантная эндо-1,4-р-ксиланаза Pénicillium canescens// Биохимия. 2003. Т. 68. Вып. 12.-С. 1631 1638.

101. Singh, S., Reddy, Р., Haarhoff, J., Biely, P., Janse, В., Pillay, В., Pillay, D., Prior, B. A. Relatedness of Thermomyces lanuginosus strains producing a thermostable xylanase // J. Biotechnol. 2000. V. 81. P. 119 - 128.

102. Марков, А. В. Свойства ферментных комплексов, продуцируемых мутантными штаммами Trichoderma reese. II Диссер. на соискание уч. степени кандидата хим. наук. М. : МГУ. 2003. -201 с.

103. Tenkanen, H., Puls, J., Poutanen, К. Two major xylanases of Trichoderma reesei И Enz. Microb. Technol. 1992. V. 14. -P. 566-574.

104. Dey, D., Hinge, J., Shendye, A., Rao, M. Purification and properties of extracellular endo-xylanases from alkalophilic thermophilic Bacillus sp. // Can. J. Microbiol. 1992. V. 38. -P. 436-442.

105. Ratankhanokchai, K., Kyu, K.L., Tantichareon, M. Purification and properties of a xylan-binding endoxylanase from alkaliphilic Bacillus sp. strain K-l // Appl. Environ. Microbiol. 1999. V. 65. P. 694 - 697.

106. Morales, P., Madrarro, A., Flors, A., Sendra, J. M., Gonzalez, J. A. P. Purification and characterization of a xylanase and arabinofuranosidase from Bacillus polymyxa II Enz. Microb. Technol. 1995. V. 17. P. 424 - 429.

107. Breecia, J. D., Baigori, M. D., Castro, G. R., Sineriz, F., Hatti-Kaul, R. Purification and charcacterization of a thermostble xylanases from Bacillus amyloliquefaciens// Enz. Microb. Technol. 1998. V. 22. P. 42-49.

108. Gupta, S., Bhushan, B., Hoondal, G. S. Isolation, purification and characterization of xylanase from Staphylococcus sp. SG-13 and its application in biobleaching of kraft pulp // J. Appi. Microbiol. 2000. V. 88. P. 325 - 334.

109. Winterhalter, C., Liebel, W. Two extremely thermostable xylanases of the hyperthermophilic bacterium Thermotoga maritama MSB8 // Appl. Environ. Microbiol. 1995. V. 61. -P. 1810-1815.

110. Hurlbert, J.C., Preston 3rd, J. F. Functional characterization of a novel xylanase from corn strain of Erwinia chrysanthemi I I J. Bacteriol. 2001. V. 183. P. 2093 — 2100.

111. Collins, T., Meuwis, M. A., Stals, I., Claeyssens, M., Feller, G., Gerday, C. A novel family 8 xylanase: functional and physicochemical characterization // J. Biol. Chem. 2002. V. 277. -P. 35133-35139.

112. Li, X. L., Zhang, Z. Q., Dean, J. F. D., Eriksson, K. E. L., Ljungdahl, L. G. Purification and characterization of a new xylanases (APX-II) from the fungus Aureobasidium pullulans Y-2311-1 // Appl. Environ. Microbiol. 1993. V. 59. P. 3213-3218.

113. Kesker, S.S. High activity xylanase from thermotolerant Streptomyces T7, cultural conditions and enzyme properties // Biotechnol. Lett 1992. V. 14. P. 481 -486.

114. Simpson, D. J., Fincher, G. В., Huang, A. H. C., Cameron-Mills, V. Structure and function of cereal and related higher plant (l,4)-p-xylan endohydrolases // J. Cereal Sci. 2003. V.37. P. 111 - 127.

115. Goesaert, H., Elliott, G., Kroon, P. A., Gebruers, K., Courtin, С. M., Robben, J.,' Delcour, J. A.,. Juge, N. Occurrence, of proteinaceous endoxylanase inhibitors кг cereals // Biochim. Biophys. Acta. 2004: V. 1696. P. 193 - 202.

116. Juge, N., Payan, F., Williamson, G. XIP-I, a xylanase inhibitor protein from wheat: a novel protein function // Biochim. Biophys. Acta. 2004. V. 1696(2). P. 203 -211.

117. Gebruers, K., Debyser, W., Goesaert, H., Proost, P., Van Damme, J., Delcour, J. A. Triticum aestivum L. endoxylanase inhibitor (TAXI) consists of two inhibitors, TAXI I and TAXI II, with different specificities // Biochem. J. 2001. V. 353. P. 239-244.

118. US Patent № 608056. Enzymes With Xylanase Activity From Aspergillus Aculeatus. 27.06.2000.

119. Xu, В., Janson, J.-C., Sellos, D. Cloning and sequencing of a molluscan endo-P-1,4-glucanase gene from the blue mussel Mytilus edulis // Eur. J. Biochem., 2001. V. 268.-P. 3718-3727.

120. Karlsson, J., Siika-aho, M., Tenkanen, M., Tjerneld, F. Enzymatic properties of the low molecular mass endoglucanases Cell2A (EG III) and Cel45A (EG V) of Trichoderma reesei//J. Biotechnol. 2002. V. 99. P. 63 - 68.

121. Schulein, M. Enzymatic properties of cellulases from Humicola insolens И J. Biotechnol. 1997. V. 57. P. 71 - 81.

122. Schou, C., Rasmussen, G., Kaltoft, M. В., Henrissat, В., Schulein, M. Stereochemistry, specificity and kinetics of the hydrolysis of reduced cellodextrins by nine cellulases // Eur. J. Biochem. 1993. V. 217. P. 947 - 953.

123. Saloheimo, M.5 Lehtovaara, P., Penttila, M., Teeri, T. T., Stahlberg, J.,

124. Vincken, J.-P., Beldman, G., Voragen, A. G. J. Substrate specificity of endoglucanases: what determines xyloglucanase activity? // Carbohydr. Res. 1997. V. 298. P. 299-310.

125. Chen, G., Du, J., Zhuang, L., Gao, P. Purification and properties of endoglucanases from Aspergillus aculeatus SM-L22 // Wei Sheng Wu Xue Bao. 2001. V. 41(4).-P. 469-474. '

126. Okada, G. Purification and properties of a cellulase from Aspergillus niger // Agric. Biol. Chem. 1985. V. 49. P. 1257 - 1265.

127. Ganju, R. K., Murthy, S. K., Vithayathil, P. J. Purification and functional characteristics of an endocellulase from Chaetomium thermophile var. coprophile II Carbohydr. Res. 1990. V. 197. P. 245 - 255.

128. Yoon, J. J., Cha, C. J., Kim, Y. S., Kim, W. Degradation of cellulose by the major endoglucanase produced from the brown-rot fungus Fomitopsis pinicola. // Biotechnol.Lett. 2008. V. 30. P. 1373 - 1378.

129. Mansfield, S. D., Saddler, J. N., Gubitz, G. M. Characterization of endoglucanases from the brown rot fungi Gloeophyllum sepiarium and Gloeophyllum trabeum II Enz. Microb. Technol. 1998. V. 23. P. 133 - 140.

130. S aha, B. C. Production, purification and properties of endoglucanase from a newly isolated strain of Mucor circinelloides II Process Biochem. 2004. V. 39. -P. 1871 -1876.

131. Chaabouni, S. E., Mechichi, T., Limam, F., Marzouki, N. Purification and characterization i of two low molecular weight endoglucanases produced by Pénicillium occitanis mutant pol 6 // Appl. Biochem. Biotechnol. 2005. V. 125(2). -P. 99-112.

132. Jeya, M., Joo, A., Lee, K. M., Sim, W., Oh, D. K., Kim, Y. S., Kim, I. W., Lee, J. K. Characterization of endo-/?-1,4-glucanase from a novel strain of Pénicillium pinophilum KM.T601 //Appl. Microbiol. Biotechnol. 2010. V. 85. P. 1005 - 1014.

133. Schulein, M. Enzymatic properties of cellulases from Humicula insolens// J. Biotechnol. 1997. V. 57. P. 71-81.

134. Takashima, S., Iikura, H., Nakamura, A., Hidaka, M., Masaki, H., Uozumi, T. Overproduction of recombinant Trichoderma reesei cellulases by Aspergillus oryzae and their enzymatic properties // J. Biotechnol. 1998. V.65. P. 163-171.

135. Claeyssens, M., Nerinckx, W., Piens, K. Carbohydrases from Trichoderma reesei and other microorganizms. Structure, biochemistry, genetics and applications. The Royal Society of Chemistry. 1998. 23 8p.

136. Lin, S. B., Stutzenberger, F. J. Purification and characterization of the major 3-1,4-endoglucanase from Thermomonospora curvata II J. Appl. Bacteriol. 1995. V. 79.-P. 447-453.

137. Lucas, R., Robles, A. M., Garca, T., De Cienfuegos, G. A., Glvez, A. Production, purification, and properties of an endoglucanase produced by the hyphomycete Chalara (Syn. Thielaviopsis) paradoxa CH32 // J. Agric. Food Chem. V. 49(1). -P. 79-85.

138. Shibuya, H., Kikuchi, T. Purification and characterization of recombinant endoglucanases from the pine wood nematode Bursaphelenchus xylophilus II Biosci. Biotechnol. Biochem. 2008. V.72 (5). P. 1325 - 1332.

139. Zyla, K. Phytase applications in poultry feeding: Selected issues // J. Animal Feed Science. 2001. V.10. -P. 247-258.

140. Vohra, A., Satyanarayana, T. Phytases: Microbal Sources, Production, Purification, and Potential Biotechnological Applications. Critical Reviews in Biotechnology. 2003. V. 23(1).-P. 29-60.

141. Bryant, R. J., Dorsch, J. A., Peterson, K. L., Rutger, J. N., Raboy, V. Phosphorus and Mineral Concentrations in Whole Grain and Milled Low Phytic Acid (Ipa) 1-1 Rice // Cereal Chem. 2005. V. 82(5). P. 517 - 521.

142. Wodzinski, R. J., Ullah, A. H. J. Phytase // Adv. Appl. Microbiol. 1996. V. 42. -P. 263-302.

143. Pandey, A., Szakacs, G., Soccol, C. R., Rodriguez-Leon, J. A., Soccol, V. T. Production, purification and properties of microbal phytases // Biores. Tech. 2001. V. 77.-P. 203-214.

144. Casey, A., Walsh, G. Identification and characterization of a phytase of potential commercial interest //J. Biotech.2004. V. 110. P. 313 - 322.

145. Ullah, A. H. J., Phillippy, B. Q. Substrate Selectivity in Aspergillus ficuum Phytase and Acid Phosphatases Using wyo-Inositol Phosphates // J. Agric. Food Chem. 1994. V. 42. P. 423 -425.

146. Greiner, R. Purification and Characterization of Three Phytases from Germinated Lupine Seeds (Lupinus albus Var. Amiga) II J. Agric. Food Chem. 2002. V. 50.-P. 6858-6864.

147. Whitaker, J. R., Voragen, A. G. J., Wong, D.W.S. Handbook of Food Enzymology. -NY. : Marcel Dekker Inc. 2003. 1052 p.

148. Tye, A. J., Siu, F. K. Y., Leung, T. Y. C., Lim, B. L. Molecular cloning and the biochemical characterization of two novel phytases from B: subtiilis 168 and B. licheniformisH Appl. Microbiol. Biotechnol. 2002. V. 59. P. 190 - 197.

149. Shah, V., Parekh, L. J. Phytase from Klebsiella Sp. No. PG-2: Purification and properties // Ind. J. Biochem. Bioph. 1990. V. 27. P. 98 - 102.

150. Berka, R. M., Rey, M. W., Brown, K. M., Byun, T., Klotz, A. V. Molecular Characterization and Expression of a Phytase Gene from the Thermophilic Fungus Thermomyces lanuginosus // Appl. Environm. Microbiol. 1998. V. 64(11). P. 4423 -4427.

151. Zyla, K. Mould phytases and their application in the food industry // World J. Microbiol. Biotech. 1992. V. 8(42). P. 467 - 472.

152. Vohra, A., Satyanarayana, T. Purification and characterization of a thermostable and acid-stable phytase from Phichia anomala //World J. Microbiol. Biotechn. 2002. V. 18. -P. 687-691.

153. Casey, A., Walsh, G. Purification and characterization of extracellular phytase from Aspergillus niger ATCC 9142 // Biores. Technol. 2003. V. 86. P. 183-188.

154. Skowronski, T. Some Properties of Partially Purified Phytase from Aspergillus niger//Acta Microbiol. Pol. 1978. V. 27(1). P. 41 -48.

155. Sajidan, A., Farouk, A., Greiner, R., Jungblut, P., Muller, E. C., Borriss, R. Molecular and physiological characterization of a 3-phytase from soil bacterium Klebsiella sp. ASR1 // Appl. Microbiol. Biotechnol. 2004. V. 65(1). P. 110 - 118.

156. Gouka, R. J., Punt, P. J., van den Hondel, С. A. M. J. J. Efficient production of secreted proteins by Aspergillus: progress, limitations and prospects // Appl. Microbiol. Biotechnol.1997. V. 47. P. 1 - 11.

157. Pedersen, H., Beyer, M., Nielsen, J. Glucoamylase production, in batch; chemostat and fed-batch cultivations by an industrial strain of Aspergillus niger II Appl. Microbiol. Biotechnol. 2000 V. 53(3). P. 272 - 277.

158. Xiaochun, F., Runxiang, Q. I. U., Li, L. I. U., Guomin; T. Study on the molecular basis of glucoamylase overproduction of a mutant strain Aspergillus niger T21 // Science in China (Series C). 2001. V. 44(3). -P. 288 293.

159. Paulchamy, C. Solid-state cultivation of Aspergillus niger NCIM 548 for glucoamylase production on groundnut shell // The Internet J. Microbiol. 2008 V. 5. № 1.

160. Pandey, A., Selvakumar, P., Ashakumary, L. Glucoamylase production by Aspergillus niger on rice bran is improved by adding nitrogen sources // World J. Microbiol. Biotech. 2008. V. 10 (3). P. 348 - 349.

161. Anto, H., Trivedi, U. P., Patel, K.C. Glucoamylase production by solid-state fermentation using rice flake manufacturing waste products as substrate // Bioresour.Technol. 2006. V. 97. -P. 1161 1166.

162. Авторское свидетельство СССР N 800185, C12 D 13/10, 1981.

163. Авторское свидетельство СССР N 1259673, С12 N 9/34, 1982.

164. Авторское свидетельство СССР N 1271068, С12N 9/34, 1979.

165. Патент РФ №2196821 от 20.01.2003.

166. ГОСТ 20264.4-89. Препараты ферментные. Методы определения амилолитической активности / Издательство стандартов. 1989. —27 с.196. http://www.abercade.ru/research/industrynews/5709.html

167. Егоров, Н. С. Промышленная микробиология / Под ред. Егорова Н. С. -М. : Высш. шк. 1989.-688 с.

168. Дебабов, В. Г., Лившиц, В. А. Современные методы создания промышленных штаммов микроорганизмов // Кн. 2 в Учеб. пособие для вузов.

169. В 8 кн. под ред. Егорова Н. С., Самуилова В. Д. М. : Высш. шк. - 1988. - 208 с.

170. Щелкунов, С.Н: Генетическая инженерия / С.Н. Щелкунов. Новосибирск : Сиб. унив. изд-во, 2004: - 496 с.

171. Глик, Б. Молекулярная биотехнология: принципы и применение/ Б. Глик, Дж. Пастернак. М. : Мир, 2002. - 589 с.

172. Peberdy, J. F., Caten, С. E., Ogden, J'. E., Bennett, J. W. Applied molecular , genetics of fungi // Cambridge: Cambridge University Press. 1991. 187 p.

173. Ito, H., Fukuda, Y., Murata, K., Kimura, A. Transformation of intact yeast cells treated with alkali cations // J. Bacteriol. 1983. V. 153. P. 163 - 168.

174. Aleksenko, A. Y., Makarova, N. A., Nikolaev, I. V., Clutterbuck, A. J. Integrative and replicative transformation of Penicillium canescens with a heterologous nitrate-reductase gene // Curr. Genet. 1995. V. 28. P. 474-477.

175. Gruber, F., Visser, J., Kubicek, C. P., De Graaf, L. H. Cloning of the Trichoderma reesei pyrG gene and its use as a homologous marker for a high-frequency transformation system // Curr. Genet. 1990. V. 18. P. 447 - 451.

176. Mach, R. L., Schindler, M., Kubicek, C. P. Transformation of Trichoderma reesei based on the hygromycin В resistance using homologous expression signals // Curr. Genet. 1994. V. 25. P. 567 - 570.

177. Meyer, V., Mueller, D., Strowig, Т., Stahl, U. Comparison of different transformation methods for Aspergillus giganteus // Curr. Genet. 2003. V. 43. P. 371 -377.

178. Varadarajalu, L. P., Punekar, N. S. Cloning and use of sC as homologous marker for Aspergillus niger transformation // J. Microbiol: Methods. 2005. V. 61. P. 219 -224.

179. Verdoes, J. C., Punt, P. J., Van den Hondel, C. A. M: J. J. Molecular genetic strain improvement for the overproduction of fungal proteins by Filamentous fungi // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1995. V. 43. P. 195-205.

180. Cheevadhanarak, S., Renno, D.V., Saunders, G., Holt, G. Cloning and selective overexpression of an alkaline protease-encoding gene from Aspergillus oryzae // Gene 1991 V. 108. P. 151 - 155.

181. Ruttkowski, E., Khanh, N.Q., Wirsei, S., Wildhardt, G., Gottschalk, M. Expression of the a-amylase gene from Aspergillus oryzae in Aspergillus awamori. DECHEMA Biotechnology Conferences 3. VCH Verlagsgesellschaft Weinheim, Germany. 1989. P. 325 - 328.

182. Ward, M., Wilson, L. J., Kodama, K. H. Use of Aspergillus overproducing mutants, cured for the integrated plasmid, to overproduce heterologous proteins // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1993. V. 39. P. 738 - 743v

183. Christensen, T., Woeldike, H., Boel, E., Mortensen, S.B., Hjortshoej, K., Thim, L., Hansen, M. T. High level expression of recombinant genes in Aspergillus oryzae //J. Biotechnol. 1988. V. 6. P. 1419 - 1422.

184. Boel, E., Christensen, T., Woldlike, H. F. Process for the production of protein products in Aspergillus oryzae and a promoter for the use in Aspergillus // EPA. 1987.-P. 0 238 023

185. Sharif, F.A., Alaeddinoglu, N. G. Expression and overproductionof glucose oxidase in Aspergillus niger// Appl. Microbiol. Biotechnol. 1992. V. 38. -P. 115-116.

186. Witteveen, C. F. B., Van de Vondervoort, P. J. I., Van den Broeck, H. C.,

187. Van Engelenburg, F. A. C., De Graaff, L. H., Hillebrand, M. H. B. C.3 Schaap, P. J., Visser, J. Induction of glucose oxidase, catalase, and lactonase in Aspergillus niger // Curr. Genet. 1993. V. 24. P. 408 - 416.

188. Khanh, N. Q., Ruttkowski, E., Leidinger, K., Albrecht, H., Gottschalk,

189. M. Characterization and expression of a genomic pectin methyl esterease-encoding gene in Aspergillus niger//Gene. 1991. V. 106. P. 71 -77.

190. Khanh, N. Q., Leidinger, K., Albrecht, H., Ruttkowski, E., Gottschalk,

191. M. Effects of promoters on the enhancement of pectinmethyl esterase expression in Aspergillus niger//Biotechnol. Lett. 1992. V. 14.-P. 1047-1052.

192. Bussink, H. J. D., Kester, H. C. M., Visser, J. Molecular cloning, nucleotide sequence and> expression of the gene encoding prepropotygalacturonase II of Aspergillus niger// FEBS Lett. 1990. V. 273. P. 127 - 130.

193. Bussink, H. J. D., Buxton, F. P., Visser, J. Expression and sequence comparison of the Aspergillus niger and Aspergillus tubigensis genes encoding polygalacturonase II // Curr. Genet. 1991a. V. 19. P. 467 - 474.

194. Bussink, H. J. D., Hombergh, J. P. T. W., Van den Ussel, P. R. L. A., Visser, J. Characterization of polygalacturonase-overproducing Aspergillus niger transformants // Appl. Microbiol. Biotechnol. 1992a. V. 37. P. 324 - 329.

195. Van Gorcom, R. F. M., Van Hartingsveldt, W., Van Paridon, P. A., Veenstra, A. E., Luiten, R. G. M., Selten, G. C. M. Cloning and expression of microbial phytase // EPA. 1990. № 0420358.

196. Hessing, J. K. M., Van Rotterdam, C., Verbakel, J. A. M., Roza, M., Maat, J., Gorcom, R. F. M., Van Hondel, C. A. M. J. J. Isolation and characterization of a 1,4-ß-endoxylanase gene of A awamori // Curr. Gennet. 1994. V. 26. P. 228-232.

197. Van Gorcom, R. F. M., Hessing, J. G. M., Maat, J., Roza, M., Verbakel, J.A. Xylanase production // World Patent Application 1992. 91/19782.

198. Kinghorn, J. R., Unkles, S. E. Inorganic nitrogen assimilation: molecular aspects. In Aspergillus: 50 years on; eds Martinelli S.D. and Kinghorn J.R. Elsevier, Amsterdam, P. 181-194.

199. Ward, O. P., Qin, W. M., Dhanjoon, N. J., Ye, J., Singh, A. Physiology and Biotechnology of Aspergillus II Adv. Appl. Microbiol. 2006. V. 58. P. 1 - 75.

200. Tsuchiya, K., Nagasjhiam, T., Yamamoto, Y., Gomi, K., Kitamoto, K., Umagai, C. High level secretion of calf chymosin using a glucoamylase prochymosin fusion gene in Aspergillus oryzae //Biosci. Biotechnol. Biochem. 1994. V. 58. P. 895 -899.

201. Jeenes, D. J., Marczinke, B., Mackenzie, D. A., Archer, D. B. A truncated glucoamylase gene fusion for heterologous protein secretion from A. niger II FEMS Microbiol. Lett. 1993. V. 107. P. 267-271.

202. Gouka, R. J., Punt, P. J., Hessing, J. G. M., Van den Hondel, C. A. M. J. J. Analysis of heterologous protein production in defined recombinant Aspergillus awamori strains // Appl. Environ. Microbiol. 1996. V. 62. P. 1951 - 1957.

203. Ward, P. P., Peddington, C. S., Cunnighham, G. A., Zhou, X., Wyatt, R. D., Conneely, O. M. A system for production of commercial quantities of human lactoferrin: A broad spectrum natural antibiotic // J. Biotechnol. 1995. V. 13. P. 498 -503.

204. Aleksenko, A. Y., Makarova, N. A., Nikolaev I. V., Clutterbuck, A. J. Integrative and replieative transformation off Pénicillium canescens with a heterologous nitrate-reductase gene // Curr: Genet. 1995. V.28. P. 474 - 478.

205. Punt, P. J., Oliver, R. P., Dingemanse, M. A., Pouwels, P. H., van den Hondel, C. A. Transformation of Aspergillus based on the hygromycin В resistance marker from Escherichia coli И Gene. 1987. V. 56. P. 117-124.

206. Sambrook, J., Russell, D. Molecular Cloning, A Laboratory Manual. New York: Cold Spring Harbor Lab. Press, 2001. p. 1.44.

207. Aslanidis, C., de Jong, P.J. Ligation-independent cloning of PCR products (LIC-PCR) // Nucleic Acid Research. 1990. V. 18. P. 6069-6075.

208. Tilburn, J., Scazzocchio, C., Taylor, G. G., Zabicky-Zissman, J. H., Lockington, R. A., Davies, R. W. Transformation by integration in Aspergillus nidulans II Gene. 1983. V. 26(1)-P. 205-221.

209. Синицын, А. П., Гусаков, А. В., Черноглазов, В. А. Биоконверсия лигноцеллюлозных материалов. М. : МГУ. 1995. 144 с.

210. Досон, Р., Элиот, Д., Элиот, У., Джонс, К. Справочник биохимика. М. : Мир, 1991.-543 с.

211. Патент РФ. 2002. № 2245364.

212. Hessing, J. G., van Rotterdam, С., Verbake, J. M., Roza, М., Маа, J., van Gorcom, R. F., van den Hondel, C. A. Isolation and characterization of a 1,4-beta-endoxylanase gene of A. awamori // Curr. Genet. 1994. V. 26. P. 228 - 232.

213. Casey, А., Wals, G. Purification and characterization of extracellular phytase from Aspergillus niger ATCC 9142 // Biores. Technol. 2003. V. 86. -P. 183-188.

214. ГОСТ 10840-64. Зерно. Методы определения натуры. М. : ИПК Изд-во Стандартов, 2001.

215. ГОСТ 10847-74. Зерно. Методы определения зольности. М. : Изд-во Стандартов, 1985.

216. ГОСТ 13586.5-93. Зерно. Метод определения влажности. Минск : Межгосударственный Совет по стандартизации метрологии и сертификации, 1993.

217. Boel, Е., Hjort, I., Svensson, В., Norris, F., Norris, К. Glucoamylases Gi and G2 from Aspergillus niger are synthesized from two different but closely related mRNAs //EMBO J. 1984. V. 3(5).-P. 1097-1102.

218. Tsukagoshi, N., Kobayashi, Т., Kato, M. Regulation of the amylolytic and (hemi-)cellulolytic genes in aspergilli // J. Gen. Appl. Microbiol. 2001. V. 47. P. 119.

219. Gwynne, D. I., Buxton, F. P. Genetically Engineered Secretion of Active Human Interferon and a Bacterial Endoglucanase from Aspergillus nidulans // Biotechnology. 1987. V. 5. -P. 713-719.

220. Verdoes, J. C., Punt, P. J., Stouthamer, A. H., Hondel, С. A. M. J. J. The effect of multiple copies of the upstream region on expression of the Aspergillus niger glucoamylase-encodinggene//Gene. 1994. V. 145.-P. 179-187.

221. Я хотела бы выразить глубокую благодарность д.т.н., проф. Римаревой Любови Вячеславовне за руководство при выполнении и написании диссертационной работы.

222. Выражаю глубокую и искреннюю признательность д.х.н., проф. Синицыну Аркадию Пантелеймоновичу, к.т.н. Цуриковой Нине Васильевне и к.х.н. Рожковой Александре Михайловне за помощь и руководство в выполнении диссертационной работы.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.