Повышение диагностической эффективности питательных сред для культивирования микобактерий туберкулеза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат биологических наук Ионина, Светлана Владимировна

• Ионина, Светлана Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ионина, Светлана Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Современные представления о строении микобактерий туберкулеза.

1.2. Бактериологическая диагностика туберкулеза.

1.3. Методы обработки биологического материала для выделения микобактерий туберкулеза.

1.4. Питательные среды для культивирования микобактерий туберкулеза.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы.

2.2. Результаты исследований.

2.2.1. Приготовление питательных сред с использованием биологических добавок и минерального комплекса.

2.2.1.1. Среды с использованием дрожжевой суспензии.

2.2.1.2. Среды с использованием оксидата торфа.

2.2.1.3. Среды с использованием вытяжек из золы древесины березы.

2.2.1.4. Среды с использованием соевого молока, оксидата торфа и вытяжек из золы древесины березы.

2.2.1.5. Среды с использованием вытяжек из золы древесины березы и оксидата торфа.

2.2.2. Изучение скорости роста различных видов микобактерий на коммерческих и опытных питательных средах.

2.2.2.1. Скорость и интенсивность роста M.bovis (шт. 8, ВИЭВ) на различных питательных средах.

2.2.2.2. Скорость и интенсивность роста М.tuberculosis (шт. H37Rv) на различных питательных средах.

2.2.2.3. Скорость и интенсивность роста M.avium (шт. 780, ВИЭВ) на различных питательных средах.

2.2.2.4. Скорость и интенсивность роста М.БП^тайз (культура ГНУ ИЭВСиДВ) на различных питательных средах.

2.2.3. Изменение ростовых свойств питательных сред (опытных и коммерческих) при различных сроках и условиях их хранения.

2.2.4. Сравнительный анализ диагностической ценности питательной среды ИЭВСиДВ и коммерческих сред при посеве биоматериала лабораторных животных, зараженных патогенными микобактериями туберкулеза.

2.2.5. Диагностическая эффективность плотных питательных сред при изоляции микобактерий из биоматериала больных туберкулезом сельскохозяйственных животных.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Повышение диагностической эффективности питательных сред для культивирования микобактерий туберкулеза»

Актуальность темы

Туберкулез крупного рогатого скота -инфекционное, хронически протекающее заболевание человека и животных, представляющее одну из первостепенных проблем здравоохранения и приводящее к большим потерям среди поголовья сельскохозяйственных животных (М.П. Зыков, 1976, 1978; В.П. Шишков, В.П. Урбан, 1991, 1998; A.C. Донченко, 1998; H.A. Шкиль, 1998).

В настоящее время существует обширный комплекс бактериологических технологий для обнаружения «бактерий Коха» в биологическом материале животных. Однако, микробиологическая диагностика, методической основой которой является выявление культуры возбудителя, занимает одно из главных мест, так как их выделение очень важно для проведения дальнейших специальных ветеринарных мероприятий, и включает в себя различные аспекты: микроскопический, культуральный и биологический. Каждый из указанных методов имеет свои преимущества и недостатки (А.И. Каграманов, 1967; В.И. Голышев-ская, Н.И. Фадеева, 1987; Г.Ф. Коромыслов, 1998).

Считается, что одним из наиболее чувствительных методов индикации возбудителя туберкулеза из биологического материала животных является культуральный, так как позволяет получать положительные результаты при наличии малого количества микобактерий в исследуемом материале. Его эффективность во многом зависит от методов предварительной обработки биологического материала, так как обнаружение микобактерий в нем является одним из наиболее достоверных и информативных показателей, которому принадлежит решающая роль в диагностике туберкулеза. Непосредственно после открытия возбудителя туберкулеза было распространено мнение Р. Коха, согласно которому этот возбудитель является строгим паразитом и размножение его возможно только в животном организме. Г.Д. Павловский (1888) показал, что для этой цели можно использовать растительный субстрат - глицериновый картофель с 0,5%-ным раствором соды. Тем самым было доказано, что поиски искусственных питательных сред для выращивания микобактерий туберкулеза являются перспективными (Н.М. Рудой, 1975; Т.Ф. Оттен и др., 1987).

В.И. Голышевская, Н.И. Фадеева (1987) высказали гипотезу, что скорость роста микобактерий туберкулеза определена генотипом данного возбудителя и ускорение их роста возможно только при искусственном его изменении, что является малоосуществимым. Но перспективным направлением, в данном случае, может быть конструирование питательных сред, направленных на сокращение сроков роста микобактерий туберкулеза.

Основные направления поиска путей усовершенствования бактериологической диагностики туберкулеза сводятся, в настоящее время, к следующим этапам: подбору наиболее эффективного способа обработки биоматериала, способствующего максимальному высвобождению микобактерий туберкулеза, созданию более эффективных питательных сред и разработке оптимальных физических режимов культивирования микобактерий туберкулеза (Т.Ф. Оттен и др. Д987).

Скорость роста различных видов микобактерий туберкулеза на питательных средах составляет 8-12 недель. Поэтому создание новых питательных сред, позволяющих сокращать сроки появления первых генераций микобактерий, является актуальной задачей, так как ускоряет окончательную постановку диагноза путем изоляции микобактерий, что важно для разработки дальнейших мероприятий профилактики и ликвидации туберкулеза сельскохозяйственных животных.

Цель и задачи исследований

Цель исследований - повысить диагностическую эффективность питательных сред для культивирования микобактерий туберкулеза и разработать новую, экономичную плотную питательную среду, позволяющую в более короткие сроки получить рост микобактерий туберкулеза.

Задачи исследований:

1) приготовить различные варианты питательных сред с использованием биодобавок и растительного минерального комплекса;

2) сравнить скорость роста различных видов микобактерий на сконструированных опытных питательных средах в сравнении с коммерческими питательными средами (контрольные);

3) изучить влияние различных условий и сроков хранения на ростовые свойства сконструированных опытных питательных сред в сравнении с коммерческими питательными средами;

4) оценить диагностическую эффективность (информативность) опытных и коммерческих сред при посеве на них биологического материала от лабораторных животных и крупного рогатого скота.

Научная новизна

Разработана новая яичная питательная среда (ИЭВСиДВ) с использованием биологической добавки, стимулирующей рост микобактерий как референтных штаммов, так и патогенных культур возбудителя туберкулеза, выделенных из биологического материала животных.

Впервые в качестве заменителя солевого раствора, применяемого во всех плотных яичных питательных средах, использован сложный минеральный комплекс растительного происхождения. На питательную среду подана заявка на патент «Среда для культивирования микобактерий туберкулеза» (№ 2000126439,2000).

Практическая ценность

В результате подбора состава различных питательных сред и изучения их диагностической эффективности в сравнении с коммерческими питательными средами (Финн-2, Левенштейна-Йенсена, Гельберга, и Фаст-ЗЛ) разработана новая плотная яичная питательная среда - ИЭВСиДВ. При посеве на такую среду биологического материала от лабораторных и сельскохозяйственных животных достигнуты высокая чистота посева, ускорение интенсивности роста мико-бактерий туберкулеза.

Питательная среда ИЭВСиДВ предложена для бактериологической диагностики туберкулеза в научно-исследовательских и практических учреждениях ветеринарного и медицинского профиля.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Ионина, Светлана Владимировна

3. выводы

1 .Питательные среды Финн-2 и Фаст-ЗЛ, наиболее часто используемые в бактериологической диагностике туберкулеза, мало отличаются по информативности друг от друга. Первые генерации колоний М.Ы^б (шт. 8, ВИЭВ) появляются на среде Финн-2 на 10,1±0,23, на среде Фаст-ЗЛ - на 11,5±0,20 сутки, а М.шЬегси1оз15 (шт. НЗЖу) - на среде Финн-2 на 9,1±0,41, на среде Фаст-ЗЛ - на 11,4±0,33 сутки. Скорость роста М.аушт (шт. 780, ВИЭВ) на среде Финн-2 составляет 9,3±0,54, на среде Фаст-ЗЛ - 7Д±0,35 суток. Сроки появления роста М.Ьоу1б выделенных из биоматериала сельскохозяйственных животных составляют на среде Финн-2 21,4±0,90, а на Фаст-ЗЛ - 23,1±0,97 суток.

2. При разработке опытных вариантов сред использовали различные биологические и минеральные добавки. Добавление в среду дрожжевой суспензии в концентрациях 1, 0,75, 0,5, 0,25 и 0,1% не привело к ускорению роста ми-кобактерий туберкулеза. При замене в среде Гельберга коровьего молока на соевое в количестве 25 и 50мл скорость роста микобактерий совпадала с показателями, полученными на среде Гельберга. Стимулирующим эффектом на рост микобактерий обладал оксидат торфа и вытяжки из золы древесины березы.

3. При посеве М.Ытэ (шт. 8, ВИЭВ), М.шЬегси1оз1з (шт. Н37Яу) на питательные среды Финн-2, Фаст-ЗЛ и опытные варианты сред с биодобавками и минеральным комплексом установлено, что наилучшими ростовыми свойствами для них обладает вариант с использованием вытяжки из золы древесины березы и оксидата торфа. Для М.аушт (шт.780, ВИЭВ) предпочтительней использовать коммерческие плотные питательные среды Финн-2 и Фаст-ЗЛ.

Рост М.Ьоу1б (шт. 8, ВИЭВ) появлялся на опытном варианте питательной среды на 6,2±0,11, М.шЬегси^э (шт.Н3711у) - на 5,3±0,24, М.аушт (шт.780, ВИЭВ) - на 10,4±1,65 сутки. Рост М.Бте^айБ (культура ГНУ ИЭВСиДВ) на всех средах появлялся на 2 сутки. Опытный вариант питательной среды был назван средой «ИЭВСиДВ».

4. При хранении питательных сред Финн-2, Фаст-ЗЛ и ИЭВСиДВ при низких температурах (+4°С) диагностическая информативность их сохраняется в течение одного месяца. Хранение питательных сред Финн-2, Фаст-ЗЛ и ИЭВСиДВ при высоких температурах (±22°С) нецелесообразно. Ростовые свойства сред в указанных условиях снижаются через 20 дней, а в дальнейшем среды высыхают.

5. При посеве биоматериала морских свинок экспериментально зараженных М.Ытэ (шт. 8, ВИЭВ) первичный рост заражающего штамма возбудителя туберкулеза на среде ИЭВСиДВ появлялся на 10,5±0,34, на среде Финн-2 - на 14,6±0,25, на Фаст-ЗЛ - на 17,2±1,12 сутки.

6. При посеве биоматериала больных туберкулезом коров на плотную питательную среду ИЭВСиДВ первичный рост М.Ы^э (шт.8, ВИЭВ) отмечали на 16,6±0,57 сутки, что на 5,6±0,54 суток раньше в сравнении с коммерческими питательными средами Финн-2 и Фаст-ЗЛ.

7. Питательная среда ИЭВСиДВ дешевле коммерческой среды Финн-2 на 40% и по своему составу значительно отличается от известных коммерческих сред тем, что она дополнительно содержит вытяжку из золы древесины березы и оксидат торфа.

4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Проведенные исследования позволяют сделать вывод об использовании среды ИЭВСиДВ для культивирования эталонных штаммов микобактерий и индикации возбудителя туберкулеза из биоматериала лабораторных и сельскохозяйственных животных в ветеринарных и медицинских научных лабораториях.

Среда ИЭВСиДВ одобрена для внедрения на подсекции ветеринарной медицины Россельхозакадемии «Проблемы инфекционной патологии животных в регионе Сибири и Дальнего Востока» (протокол № 13 от 20 октября 2000г). Материалы по бактериологической диагностике включены в «Методические рекомендации по диагностике туберкулеза животных» (ВИЭВ, 2001).

Среда ИЭВСиДВ была апробирована в Якутской республиканской ветеринарной испытательной лаборатории, где было дано заключение, что она обладает повышенными ростовыми свойствами и увеличивает эффективность лабораторной диагностики туберкулеза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ионина, Светлана Владимировна, 2001 год

1. Аликаева А.П. Методика исследования кормов, фекалий, почвы и другого материала из внешней среды для выявления микобактерий // Бюл. ВИЭВ. -М., 1979.-Вып. 34.-С. 41-45.

2. Андроникашвили Е.Д., Исмагулова Г.Д., Качанова H.H. Улучшение бактериологической диагностики туберкулеза с помощью новых питательных сред // Проблемы туберкулеза. 1987. - № 12. - С. 43 - 46.

3. Аникин В.А., Бирюков В.В., Сенехова Т.И. Системный поиск комплекса физических режимов при приготовлении питательных сред для культивирования микобактерий туберкулеза // Лабораторное дело. 1980. - № 9. - С. 557 - 560.

4. Аникин В.А. Разработка и оптимизация сред для культуральной диагностики туберкулеза на основание препаратов микробиологического синтеза: Автореф. канд. дис. - Москва, 1987. - 23 с.

5. Балаклеевская A.A. Влияние некоторых биологически активных веществ на рост и развитие некоторых туберкулезных микобактерий. Автореф. канд. дис. - Москва, 1987. - 23 с.

6. Батуро А.П. Сравнительное изучение некоторых элективных питательных сред // Проблемы туберкулеза. 1962. - № 3. - С. 56 - 58.

7. Бегак Т.Я. Сравнительные результаты использования разных питательных сред для выращивания микобактерий туберкулеза //Вопросы раннего выявления, диагностики и лечения больных туберкулезом в условиях сельской местности. Кишинев, 1977. - С. 123 - 127.

8. Билько И.П. Методика сочетанного микро и макрокультивирования микобактерий туберкулеза на яичных средах с использованием дисков агарового геля // Проблемы туберкулеза. - 1989. - № 7. - С. 59 - 62.

9. Билько И.П. Выращивание микобактерий на питательных средах с синтетически плотной основой // Проблемы туберкулеза. -1985. № 7. - С. 62 - 64.

10. Боганец Н.С. Совершенствование бактериологической диагностики туберкулеза. Автореф. канд. вет. наук. - Казань, 1986. - 20 с.

11. Борташевич Т.А., Душкевич А.К. Сравнительная ценность питательных сред при выращивание микобактерий туберкулеза из материала от больных // Лабораторное дело. 1976. - № 7. - С. 434 - 436.

12. Варенко Ю.С., Ластков O.A., Бескровный П.С. Способ ускорения выращивания микобактерий туберкулеза // Лабораторное дело. 1980. - № 1. - С. 45 - 48.

13. Варенко Ю.С., Бескровный П.С., Ластков O.A. Модификация метода Калфина для выращивания микобактерий // Проблемы туберкулеза. 1978. -№3.-С. 74-76.

14. Ветеринарная лабораторная практика. М.: Изд-во сельскохозяйственной лит-ры, журналов и плакатов, 1963. - Том 1. - С. 19.

15. Вуль С.М., Морейн Е.М., Турбинер Г.В., Злотникова Т.Г. Высевае-мость микобактерий туберкулеза из различного патологического материала // Проблемы туберкулеза. 1967. - № 5. - С. 78 - 82.

16. Голышевская В.И., Фадеева Н.И. Совершенствование методов микробиологической диагностики туберкулеза // Сб. науч. тр. ЦНИИ туберкулеза. -М., 1987.-Т. 45.-С. 77-82.

17. Голышевская В.И., Попеску Т.Т. Совершенствование микробиологической диагностики туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1989. - № 10. - С. 38 - 40.

18. Гордиенко В.А., Либерштейн И.И. Кладовая белка: Рассказы о сое. -М.: Колос, 1969.-151 с.

19. Данилова М.В., Надирова И.М., Кудрявцев В.И. Лиофилизация бактерий //Методы хранения коллекционных культур микроорганизмов: Сб. науч. тр. / АН СССР. М., 1967. - С. 119 - 136.

20. Денисова Н.Н, Ляпунова А.Н., Чайкина Т.Н., Бриллиантова С.А. Характеристики роста микобактерий туберкулеза на плотной безаспарагиновой среде Финн-2 // Лабораторное дело. 1977. - № 3. - С. 171 - 172.

21. Добрего В.А. Результаты бактериологических исследований на туберкулез с применением отечественных безаспарагиновых сред // Актуальные вопросы микробиологии туберкулеза. Москва, 1975. - С. 162 - 165.

22. Должанский В.М., Милованова Е.В. Диагностическая ценность микробиологических методов выявления возбудителя туберкулеза при исследование мокроты различного характера // Лабораторное дело. -1979. № 9. - С 542 - 545.

23. Донченко В.Н., Писаренко E.H., Протодьяконова Г.П. Влияние условий культивирования на интенсивность роста микобактерий // Диагностика и специфическая профилактика бруцеллеза и туберкулеза: Сб. науч. тр.

24. ВАСХНИЛ. Сиб. отд ние. ИЭВС и ДВ. - Новосибирск, 1988. - С. 38 - 42.

25. Донченко A.C., Донченко В.Н. Туберкулез крупного рогатого скота, верблюдов, яков, овец и пантовых оленей. Новосибирск: Изд - во РАСХН. Сиб. отд - ние, 1994. - 354 с.

26. Донченко В.Н., Донченко A.C., Воробьева Н.И. Выделение мико-бактерий из тканей животных // Профилактика и оздоровление животных от туберкулеза и бруцеллеза: Сб. науч. тр. / ВАСХНИЛ. Сиб. отд ние. ИЭВС и ДВ.-Новосибирск, 1988.-С. 28-31.

27. Драбкина P.O. Микробиология туберкулеза. М.: Медгиз, 1963. - 245 с.

28. Дукаревич Б.И. Справочник по минеральным удобрениям. М.: Московский рабочий, 1976. - 192 с.

29. Емельяненко П.А., Дунаев Г.В., Кудлай, Д.Г. Полтев В.И., Ротов В.И., Рягин С.Т., Рягузов С.И., Тарасевич И.В., Чепуров К.П., Любашенко С.Я., Матвиенко Б.А. Ветеринарная микробиология. М.: Колос, 1982. - 304 с.

30. Животные и птицы сельскохозяйственные ГОСТ 26072-89 (CT СЭВ 3457-81).-М. 1989,- 13 с.

31. Зыков М.П. Микробиология туберкулеза. Ленинград: Мед - на, Ленинград, отд - ние, 1976. - 160 с.

32. Зыков М.П. Потенциально-патогенные микобактерии и лабораторная диагностика микобактериозов. М.: Мед - на, 1978. - 175 с.

33. Иванова H.A. Выживаемость микобактерий туберкулеза при хранение культур при комнатной температуре на среде Левенштейна Йенсена //Бюл. ВИЭВ.-М., 1981.-Вып. 43.-С. 16-19.

34. Иерусалимский Н.Д. Основы физиологии микроорганизмов. М.: Издательство АН СССР, 1963. - 244 с.

35. Иерусалимский Н.Д. Азотистое и витаминное питание микроорганизмов. М. - Л.: Издательство АН СССР, - 1949. - 167 с.

36. Ильиных Л.А. Сравнительное изучение модификации яичной питательной среды для выделения и культивирования микобактерий туберкулеза // Разработка средств и методов борьбы с туберкулезом животных. Новосибирск, 1990.-С. 45-49.

37. Каграманов А.И. Учение о возбудителе туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1967. - № 11. - С. 21 - 26.

38. Кадочкин A.M. Дифференциация и идентификация микобактерий // Ветеринария. 1984, - № 9. - С. 62 - 63.

39. Калфин Е.Х. Ускоренный метод выделения культур микобактерий туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1962. - № 5. - С. 46 - 48.

40. Кассич Ю.Я., Борзяк А.Т., Кочмарский А.Ф. Туберкулез животных и меры борьбы с ним. Киев: Урожай, 1990. - 304 с.

41. Каримова JIM. Дифференциация микобактерий на питательных средах // Морфология, физиология, патология и терапия животных и пушных зверей клеточного содержания. Омск, 1997. - С. 88 - 91.

42. Каталымов М.В. Микроэлементы и микроудобрения. M.-JL: Химия, 1965.-304 с.

43. Клименко М.Т., Гинзбург Т.С. Результативность биологического и культурального методов исследования при диагностике туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1987. -№ 8. - С. 45 - 47.

44. Ковалев Г.К. Качественная оценка ферментации углеводов и спиртов микобактериями туберкулеза // Проблемы туберкулеза. -1968. № 2. - С. 40 - 44.

45. Коваль Н.И. Перспективы улучшения состав питательных сред для бактериологической диагностики туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1977.-№9.-С. 70-75.

46. Коваль Н.И. Сравнительная оценка питательных сред различного состава при микробиологической диагностике туберкулеза // Лабораторное дело. 1980. - № 5. - С. 315 - 316.

47. Коган Б.И. Субмикроскопическая организация микобактерий при воздействии туберкулостатических препаратов. Автореф. канд. дис. - Новосибирск, 1990. - 19 с.

48. Козулицына Т.И., Макаревич Н.М., Финкель Е.А. Лиофилизиро-ванные питательные среды для выделения микобактерий туберкулеза из патологического материала // Лабораторное дело. 1985. - № 12. - С. 47 - 51.

49. Колокшанский В.А., Колокшанская Л.Б. К лабораторной диагностике туберкулеза крупного рогатого скота // Ветеринария. 1974. - № 10. - С. 119 - 123.

50. Коронелли Т.В., Фадеева Н.И. Культивирование микобактерий и условно-патогенных микобактерий на среде с н-алканами // Проблемы туберкулеза. 1986.-№ 9. - С.44 - 47.

51. Коронелли Т.В. Липиды микобактерий и родственных микроорганизмов. М.: Издательство МГУ, 1984. - 160 с.

52. Косенко В.Е. Кадочкин A.M., Тажгалиев Н.М. Влияние обработки патологического материала (химическими веществами) на высеваемость микобактерий туберкулеза // Ветеринария. 1984. - № 5. - С.67 - 68.

53. Космодамианский В.И. Бактериология и патогенез туберкулеза. -Л.: Медгиз, Ленинград, отд ние, 1950. - 192 с.

54. Кравченко М.А., Приходько Л.В. Опыт применения питательных сред с различным составом для выявления микобактерий туберкулеза // Тр. Московского НИИ туберкулеза. 1988. - Т. 112. - С. 35 - 40.

55. Кузьмин В.В., Иванчиков М.Ф. Лабораторно-практические занятия по ветеринарной микробиологии. М.-Л.: Государственное изд - во сельскохозяйственной лит - ры, 1953. - 116 с.

56. Кульговеня П.С. Сравнительная оценка питательных сред Гельбер-га и Левенштейна-Йенсена для выделения микобактерий из бактериологически отрицательного патологического материала // Здравоохранение Белоруссии. 1970.-№ 2.-С.60 - 61.

57. Лабораторная диагностика туберкулеза. Омск, 1988. - 68 с.

58. Лабораторные методы исследования в ветеринарии. М: Сель-хозгиз, 1954. - 646 с.

59. Макаревич Н.М., Благодарный Я.А., Кадочкин A.M., Лотоцкая P.A., Лесиченко Г.И., Ильина Т.Б., Загоржинский П.Ю., Блехман И.М. Совершенствование методов выделения и диагностики кислотоустойчивых микобактерий // Тр. ВИЭВ. 1985. - Т. 63. - С. 26 - 31.

60. Макаревич Н.М., Дорожкова И.В. Пути совершенствования современных методов диагностики туберкулеза // Бюл. ВИЭВ. -1983. Вып. 51. - С. 24 - 28.

61. Мартма О.В. Ускоренный метод культивирования туберкулезных микобактерий // Ветеринария. 1958. - № 3. - С. 74 - 76.

62. Мельник Е.Г., Плоскирев Н.В., Розенблат В.М. Сравнительное изучение новой сухой аспарагиново-глициновой среды для выращивания микобактерий туберкулеза // ЖМИЭ. 1970. - № 7. - С. 63-65.

63. Методические рекомендации по изготовлению и использованию питательных сред и растворов для микробиологических целей, культитвирова-ния клеток и вирусов. М.: Мед - на, 1986. - 69 с.

64. Микробиологические методы исследования при инфекционных заболеваниях. М.: Медгиз, 1949. - 646 с.

65. Модель Л.М. Биология и биохимия туберкулезных микобактерий. М.: Издательство АМН СССР, 1952. - 248 с.

66. Мордовской Г.Г. Методы оценки ростовых свойств различных питательных сред для выращивания микобактерий туберкулеза // Тр. Московского НИИ туберкулеза. 1988. - Вып. 112. - С. 31 - 35.

67. Надирова И.М., Данилова М.В. Хранение бактериальных культур под минеральным маслом // Методы хранения коллекционных культур микроорганизмов: Сб. науч. тр. Институт микробиологии АН СССР. Москва, 1967.-С. 91-119.

68. Неделько Е.Я. Биохимическая характеристика семян сои сортов дальневосточных селекций. Автореф. канд. дис. - Владивосток, 1967. - 15 с.

69. Нуратинов P.A., Хамеков М.Х., Нажалов М.И. Высеваемость микобактерий на среде Финн « в различных модификациях // Бюл. ВИЭВ. - 1990. -Вып. 73 - 74. - С. 54 - 58.

70. Оттен Т.Ф., Макаревич Н.М., Лотоцкая P.A. Бактериологическая диагностика туберкулеза и микобактериозов // Сб. науч. тр. ЦНИИ туберкулеза. 1987. - Т. 45. - С. 82 - 88.

71. Перт С.Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.: Мир, 1978. - 331 с.

72. Пригода А.С., Муратов В.С. Современное состояние и перспективы получения и использования питательных сред // ВНИИ СЭНТИ Москва, 1989. -Вып. 8.-55 с.

73. Притулин П.И. Ускоренная микробиологическая диагностика инфекционных болезней животных и индикация патогенных микроорганизмов во внешней среде. М.: Россельхозиздат, 1966. 176 с.

74. Пушкарева В.Д., Каневская С.С. Влияние витамина Е (токоферола) на рост микобактерий туберкулеза в питательной среде // Проблемы туберкулеза. 1969. - № 5. - С. 50 - 52.

75. Розанов Н.И. Микробиологическая диагностика заболеваний сельскохозяйственных животных. М.: Сельхозгиз, 1952. - 508 с.

76. Рубан Е.А., Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1972. - 476 с.

77. Рубцова И.И. Измененные формы микобактерий в организме животных и их значение в бактериологической диагностике туберкулеза // Бюл. ВИЭВ. 1983. - Вып. 51. - С. 32 - 37.

78. Рудой Н.М. Туберкулез и бацилловыделение. М.: Мед - на, 1975.165 с.

79. Румачик И.И. Различное сочетание результатов аллергического, бактериологического и патологоанатомического исследований при туберкулезе // Межведомственный сборник Белорусского НИИ ветеринарии. -1990. Вып. 28. - С. 42 - 46.

80. Румачик И.И. Культуральное вьщеление микобактерий // Современные проблемы зоонозных болезней и пути их решения. Минск, 1987. - С. 80 - 81.

81. Рыскина Т.Е. О микробиологической диагностике туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1965. — № 12. - С. 66 - 67.

82. Руководство по туберкулезу. М.: Медгиз, 1959. - 462 с.

83. Самило Г.Н., Ромашева Е.Н. Пути повышения высеваемости и ускорения роста микобактерий туберкулеза на модифицированной среде Финн-2 // Проблемы туберкулеза. -1982. № 12. - С. 62 - 63.

84. Сафин М.А., Идрисов Г.З. Современные методы диагностики и ме-рьГборьбы с туберкулезом животных. Казань.: Таткнигоиздат, 1992. - 168 с.

85. Сафин МЛ., Идрисов Г.З. Туберкулез сельскохозяйственных животных и меры его профилактики. Казань: Изд - во Казанского вет. инст - та, 1990. - 78 с.

86. Сафонова С.Г., Голышевская В.И. Совершенствование микробиологической диагностики туберкулеза крупного рогатого скота // Бюл. ВИЭВ. -1990. Вып. 73 - 74.-С. 45 - 48.

87. Свиридов В.Д. Бактериологическая диагностика туберкулеза животных // Ветеринария. 1996. - № 5. - С. 26 - 28.

88. Соловьев П.П. Зола и ее применение на удобрение. М.: Сельхоз-гиз, 1952.- 111 с.

89. Сосницкий А.И. Влияние желатиновой суспензионно протектив-ной среды на биологические свойства M.bovis // Актуальные проблемы туберкулеза и бруцеллеза сельскохозяйственных животных: Сб. науч. тр.

90. ВАСХНИЛ. Сиб. отделение. ИЭВС и ДВ. - Новосибирск, 1989. - С. 71 - 74.

91. Сосницкий А.И. Адаптация культур M.bovis к питательным средам // Бюл. ВИЭВ. 1987. - Вып. 64. - С. 43 - 46.

92. Сосновская Мартынова A.B., Пуйшене И.П. Применение модифицированной среды Левенпггейна - Иенсена для выделения микобактерий туберкулеза из патологического материала // Проблемы туберкулеза. -1973. - № 10. - С. 80 - 81.

93. Справочник по микробиологическим питательным средам. Махачкала: Дагестанское книжное издательство, 1984. - 97 с.

94. Степанова Л.А. Роль микроэлементов в питании микобактерий туберкулеза // Актуальные вопросы микробиологии туберкулеза: Сб. науч. тр. Московского НИИ туберкулеза. Москва, 1975. - Вып. 67. С. 95 - 101.

95. Субботина С.Г. Методика выделения и индикации микобактерий из материалов внешней среды // Бюл. ВИЭВ. 1979. - Вып. 34. - С. 31 - 33.

96. Сулейменов М.К. Структурно-биохимические особенности мико-бактёрий и устойчивость их к дезинфицирующим средствам. Автореф. канд. дис. - Москва, 1993. - 23 с.

97. Тажгалиев Н.М. Предварительная обработка патологического материала при диагностике туберкулеза сельскохозяйственных животных // Бюл. ВИЭВ. 1983. - Вып. 51. - С. 37 - 38.

98. Таллер JI.A. Совершенствование лабораторных методов выделения и идентификации микобактерий туберкулеза у крупного рогатого скота. Автореф. канд. дис. - Омск, 1995. - 19 с.

99. Тарков М.И. Микробиологические методы оценки искусственных питательных сред. Кишинев: Штиинца, 1972. - 166 с.

100. Телишевская Л.Я., Простяков А.П., Цыганкова С.И., Трусова Л.И. Контроль и стандартизация компонентов и питательных сред бактериальных культур // Бюл. ВИЭВ. 1983. - Вып. 49. - С. 83 - 90.

101. Техника и методика бактериологической диагностики туберкулеза (методические рекомендации). Якутск, 1988. - 20 с.

102. Тургенбаев К.А., Золотов B.C., Тамгабаева С.А. Предпосевная обработка патологического материала для культурального выявления микобактерий туберкулеза // Вестник сельскохозяйственной науки Казахстана. 1991. -№3.-С. 79-81.

103. Тузова Р.В. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птицы. Минск: Урожай, 1983. - 263 с.

104. Усович А.Т., Лебедев П.Т. Применение математической статистики при обработке экспериментальных данных в ветеринарии. Омск: ЗападноСибирское книжное издательство, 1970. - 44 с.

105. Финкель Е.А., Погребинская Ю.Б. Сухие питательные среды для диагностики туберкулеза. Фрунзе: Кыргызстан, 1977. - 130 с.

106. Финн Э.Р. Высеваемость микобактерий туберкулеза на различных средах и их сочетаниях // Лабораторное дело. 1970. - № 10. - С. 618 - 620.

107. Финн Э.Р. Среда для культивирования микобактерий туберкулеза. -Авторское свидетельство № 325879 от 12.10.1971.

108. Финн Э.Р. Пути повышения высеваемости и ускорения роста микобактерий туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1974. - № 12. - С. 72 - 75.

109. Финн Э.Р. Исследования в области совершенствования состав питательных сред для культивирования и дифференциации микобактерий туберкулеза // Диспансеризация больных туберкулезом и неспецифическими заболеваниями легких. Кишинев, 1981.-С. 207-215.

110. Финн Э.Р., Мошану Л.К. Использование модифицированной безас-парагиновой яичной среды № 2 с паранитробензойной кислотой для дифференциации микобактерий // Диагностика и дифференциальная диагностика туберкулеза. Кишинев, 1978. - С. 89 - 92.

111. Финн Э.Р. Пути повышения высеваемости и ускорения роста микобактерий туберкулеза в современных условиях их изменчивости. Автореф. канд. дис. - Кишинев, 1973. - 20 с.

112. Хайкин Б.Я., Боганец Н.С. Сравнительная оценка высеваемости и скорости роста микобактерий на питательных средах // Научно тех. бюллетень / ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ние. - Новосибирск, 1985. - № 30. - С. 34 - 37

113. Ходун Л.М. Оптимизация аллергической и лабораторной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота Автореф. доктор, дис. - Казань, 1997. - 31 с.

114. Ходун Л.М. Среда Фаст-ЗЛ для ускоренного выделения микобактерий туберкулеза // Ветеринария. 1996. - № 8. - С. 51 - 52.

115. Ходун Л.М., Таллер Л.А., Погуляева Л.В., Овсянов Н.И. Питательная среда для выделения из биоматериала животных и культивирования микобактерий туберкулеза. Авторское свидетельство № 2059728 от 10. 05.97.

116. Циммер Б.Я. К вопросу о влиянии методов обработки патологического материала на высеваемость микобактерий туберкулеза // Актуальные вопросы микробиологии туберкулеза: Сб. науч. тр. Московский НИИ туберкулеза.-Москва, 1975.-Вып. 67.-С. 113-116.

117. Цай Э.П., Скачкова В.В. Испытание новых отечественных безаспа-рагиновых сред для выращивания микобактерий туберкулеза // Здравоохранение Казахстана. 1973. - № 10. - С. 43 - 45.

118. Черкес Р.К. Руководство к практическим занятиям по микробиологическим исследованиям. М.: Медицина, 1980. - 307 с.

119. Черноградский И.П., Захаров В.Т. Безглицериновые среды для исследований при туберкулезе // Ветеринария. 1973. - № 4. - С. 113 - 115.

120. Черноградский И.П., Строгова Н.А., Горохова Т.В. Выращивание микобактерий туберкулеза на глицериновых и безглицериновых питательных средах // Проблемы туберкулеза. 1970. - № 8. - С. 65 - 67.

121. Чичибабин E.C. Совершенствование питательной среды для выращивания микобактерий туберкулеза // Проблемы туберкулеза. 1990. - № 5. -С. 51-52.

122. Чичибабин Е.С. Испытание питательной среды "Новая" (Мордовского) в практических условиях бактериологической лаборатории // Проблемы туберкулеза. 1983. - № 1. - С. 67 - 69.

123. Шаров А.Н. К вопросу диагностики туберкулеза // Ветеринария. -1982.-№9.-С. 16-17.

124. Шишков В.П., Урбан В.П. Туберкулез сельскохозяйственных животных. М.: Агропромиздат, 1991. - 255 с.

125. Щуревский В.Е., Косенко В.И., Тажгалиев Н.М. Использование различных химических веществ для обработки патологического материала и влияние их на высеваемость микобактерий // Бюл. ВИЭВ. 1987. - Вып. 64. -С. 15-19.

126. Ященко Т.Н., Мечева И.С. Руководство по лабораторным исследованиям при туберкулезе. М.: Мед - на, 1973. - 260 с.

127. Ященко Т.Н. Лабораторная диагностика туберкулеза. М.: Мед -на, 1969.-24 с.

128. Bridson S.U. A cameo of culture media in the history of microbiology // Abstr. JBMS Corgr. 1995 / Brit. J. Biomed. Sei 1996, 53, № 1. - p. 55.

129. Coletsos H.J. Milieux et modalités de cultur adaptes a la reanimation eta multiplication in vitro de mycobacterium tuberculosis de vitalité reduite de viabilité ephemer on en etat de quiescence // Ann. De l'Inst. Pasteur, 1960, 99,4. -p. 475 -495.

130. Cousins D.V., Fransis B.R., Gow B.Z. Advantages of a new agar me"" dium in the primary isolation of Mycobacterium bovis // Veter. Microbiol. 1989.1. T. 20. -№ l.-p. 89-95.

131. Dellage D. Laboratoire des mycobacteries et des mycoplasmes // Arch. Inst. Pasteur Tunis. 1994. - 71. - № 1 -2. - p. 165 - 173.

132. Eidus L., Lanyi. M. Laboratoriumsdiagnostik der Tuberculose // Bard, Leipzig. 1959.-124 p.

133. Joubert L., Prave V. Diagnostic différentiel bacterio-immunologique des mycobacteries au laboratoire // Inform, techn. Serv. Veter. 1975. - № 5. - p. 47 - 53.

134. Krebs A. Leitfaden zu bakteriologischen Untersuchungen bei Tuberculose // Ficher. Jena. - 1961. - 24 p.

135. Lugosi L. The method of culturing M. tuberculosis with use of freeze-died Loewenstern Jensen medium // Acta tuberc. scand. - 1959. - № 4. - p. 242 - 248.

136. Sabater I.F.G., Zaragoza I.M. F A simplo identification system for growing mycobacteria // Acta microbiol. Hung. 1993. - № 4. - p. 343 - 349.

137. Tuberculosis. Ed. by T.M. Shinnik. Berlin et al: Springer, 1996. - 215 s.

138. Wtiszfeiler I.G. Die Biologil und Variabilitae des Tuberculbakteriums und die atypischen Mycobacterien // Experimentelle und throretische Untersuchugen. Mit einem Kapital über die Mycobakteriophagen von E. Vandra. Budapest, Akad. Kiado, 1969.-312 s.