Разработка и стандартизация гелей на основе сухих экстрактов растительного сырья винограда культурного (Vitis vinifera L) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Хахулина, Марина Александровна

• Хахулина, Марина Александровна
• кандидат фармацевтических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Хахулина, Марина Александровна

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. Обзор литературы.

1.1 Стоматологические гели для лечения заболеваний полости рта

1.2 Перекисное окисление липидов. Антиоксиданты

1.3 Флавоноиды как антиоксиданты. Полифенольный комплекс винограда культурного (Vitis vinifera L)

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ I

Экспериментальная часть. Пояснение к эксперименту. Раздел 1 Материалы исследования

Раздел 2 Характеристика материалов и объектов исследования

Раздел 3 Приборы и методики исследования

Глава П. Фармакогностическое изучение гребней грозди и нового сырьевого источника «семена винограда» культурного (Vitis vinifera L).

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ П

Глава HI. Получение и оценка качества экстрактов семян и гребней грозди винограда культурного (Vitis vinifera L).

3.1 Технология получение сухих экстрактов

3.2 Оценка качества полученных экстрактов 59 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ Ш

Глава IV. Разработка и исследование стоматологических гелей с экстрактом семян и гребней грозди винограда культурного (Vitis vinifera L).

4.1 Оценка физико-химической совместимости ингредиентов

4.2 Технология изготовления гелей

4.3 Результаты измерения водородного показателя (рН) гелей и их вязкости по Брукфильду

4.4 Результаты микробиологической оценки стабильности гелей

4.5 Результаты антиоксидантной активности изучаемых гелей

4.6 Результаты оценки подлинности полученных гелей

4.7 Результаты количественного определения полифенольных соединний в гелях по методу Фолина-Чиокальтеу

4.8 Результаты оценки стабильности гелей в процессе хранении 88 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ IV

Глава V. Сравнительный анализ катехннов водно-спиртового извлечения, сухих экстрактов винограда и гелей на их основе методом ВЭЖХ. 93 ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ V 109 ОБЩИЕ ВЫВОДЫ 110 Список литературы 112 Приложения

Список сокращений

АОА — антиоксидантная активность

БАВ - биологически активное (ые) вещество(а)

ВОЗ - Всемирная Организация Здравоохранения

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГОСТ - государственный общероссийский стандарт

ГСО - государственный стандартный образец

ГФ - государственная фармакопея

ЖЛФ - жидкая (ие) лекарственная(ые) форма(ы)

JIPC - лекарственное растительное сырье

ЛС - лекарственное средство

ЛФ - лекарственная (ые) форма(ы)

М.м. - молекулярная масса

ПОЛ - перекисное окисление липидов

ПЭГ - полиэтиленгликоль (и)

ПЭО - полиэтиленокид (ы)

РСО - рабочий стандартный образец

СФМ - спектрофотометрия

ТСХ - хроматография в тонких слоях сорбента

ТУ - технические условия

ТХУ - трихлоруксусная кислота

ТЭ- тролоксовый эквивалент

УФ свет - ультрафиолетовый свет

УФ-СФМ - спектрофотометрия в ультрафиолетовой области спектра ФС - фармакопейная статья ACN - ацетонитрил

DPPH - дифенилпикрилгидразил (название радикала и метода)

Na -КМЦ - натрий карбоксиметилцеллюлоза red/ox - окислительно-восстановительная реакция

ТЕАС - антиоксидантная активность в эквивалентах тролокса

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и стандартизация гелей на основе сухих экстрактов растительного сырья винограда культурного (Vitis vinifera L)»

Актуальность темы

В настоящее время число воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости рта среди населения заметно возросло. Для лечения и профилактики часто используют жидкие лекарственные формы - ополаскиватели, растворы, бальзамы, существенным недостатком которых является кратковременность воздействия на пораженные участки, а значит, и увеличения кратности приема пациентами для обеспечения терапевтического эффекта. Гели, чаще используемые пациентами, обладают адгезивными свойствами и локализуются в очаге поражения, что позволяет повысить эффективность лечения и снизить кратность приема. Ассортимент гелей в настоящее время невелик и представлен гелями на основе синтетических соединений. Гели на основе растительных экстрактов составляют небольшую долю среди стоматологических гелей. Поэтому разработка и анализ лекарственной формы «гели» с растительными экстрактами является актуальной задачей для современной стоматологии.

Кроме того, доказано, что в этиологии возникновения многих заболеваний, в том числе и заболеваний полости рта, одним из факторов является нарушение антиоксидантного баланса организма, что приводит к необходимости применять антиоксиданты, среди которых предпочтительнее натуральные.

Известно, что полифенольный комплекс экстрактов винограда обладает высокой антиоксидантной активностью. Основным сырьевым источником получения полифенольного комплекса являются отходы винодельческой промышленности, включающие жом и гребни грозди винограда, которые в настоящее время достаточно изучены. Большую часть отходов составляют семена винограда, которые можно рассматривать как перспективный источник полифенольного комплекса.

Цель и задачи исследования

Целью исследования является изучение химического состава экстракта из нового сырьевого источника семян винограда и рекомендованного экстракта гребней грозди для разработки и стандартизации лекарственной формы «гели» на их основе.

Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

1. Провести предварительное фармакогностическое изучение гребней грозди и семян винограда культурного;

2. Исследовать химический состав экстрактов из гребней грозди и семян винограда в соответствии с НД и на основе проведенного анализа обосновать перечень показателей качества для стандартизации экстрактов;

3. Провести сравнительный анализ БАВ водно-спиртового извлечения из сырьевого источника и полученных экстрактов и гелей с целью оценки сохранности основных БАВ и на основе полученных данных рекомендовать показатели стандартизации экстрактов и гелей на их основе;

4. Разработать состав нового стоматологического геля;

5. Исследовать антиоксидантную активность исходных экстрактов и гелей на их основе;

6. Изучить антимикробную активность гелей;

7. Обосновать на основе проведенных исследований показатели качества для лекарственной формы «гели».

Научная новизна. Впервые изучен фитохимический состав нового перспективного растительного сырья «семена винограда» и предложены показатели стандартизации исходного сырья и сухого экстракта на его основе.

Разработан оригинальный состав стоматологических гелей на основе сухих экстрактов растительного сырья винограда культурного.

Впервые показана биологическая активность сухого экстракта нового предлагаемого сырья «семена винограда».

Показана сохранность биологически активных соединений (катехинов, проантоцианидинов) сухих экстрактов семян и гребней грозди винограда в предложенной лекарственной форме, разработанной для использования в стоматологии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1.Результаты фармакогностического изучения впервые предлагаемого растительного сырья «семена винограда»;

2. Результаты сравнительного анализа основных действующих веществ в экстрактах и гелях, определение идентичности состава и сохранности действующих веществ в лекарственной форме;

3. Результаты разработки состава геля на основе экстракта семян и гребней грозди винограда, обладающий антиоксидантной и антимикробной активностью;

4. Разработка показателей качества гелей. Практическая значимость работы и внедрение в практику

На основании проведенных исследований разработаны и предложены: в Патент РФ №2351313 «Состав для лечения заболеваний полости рта»; в проект ФС на «Винограда культурного семена высушенные»;

9 проект ФС на «Винограда культурного семян экстракт сухой»; проект ФС на «Гель винограда семян экстракта сухого для наружного применения 2%».

Апробация работы. Основные положения работы доложены на: в XIV Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство», г.Москва, октябрь, 2006г.; IV Российской научно-практической конференции «Актуальные проблемы инноваций с нетрадиционными природными ресурсами и создания функциональных продуктов», г. Москва, июнь, 2007г.; • VIII международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке. Современные концепции болезней цивилизации», г.Москва, ноябрь, 2007г.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Хахулина, Марина Александровна

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

1. Проведен фармакогностический анализ сырья гребней грозди и семян винограда культурного, в результате которого выявлены наиболее значимые диагностические признаки, рекомендованные для включения в НД. Проведены качественные реакции. Определены числовые показатели.

2. Исследован химический состав сухих экстрактов семян и гребней грозди винограда. Экстракты удовлетворяют показателям качества, предусмотренным НД. В результате проведенного анализа обоснованы и предложены показатели качества экстракта нового растительного сырья «семена винограда» и предложены дополнительные показатели качества для экстракта гребней грозди винограда.

3. Проведен сравнительный анализ содержания катехинов в водно-спиртовом извлечении из сырья винограда и полученных экстрактов и гелей методом ВЭЖХ. Показано, что катехин является доминирующим соединением в изученных образцах даже после двух лет естественного хранения, в то время как галловая кислота является продуктом гидролиза и может разрушаться в ЛФ. Показана целесообразность и предложена методика количественного определения суммы полифенольных соединений в экстрактах семян и гребней грозди винограда и в гелях на их основе в пересчете на ГСО катехин.

4. Впервые разработан состав нового стоматологического геля на основе сухих экстрактов семян и гребней грозди винограда (Vitis vinifera L). Экспериментальным путем установлены концентрации всех компонентов геля, позволяющие проявлять заявленные свойства.

5. Исследована антиоксидантная активность экстрактов и гелей на их основе. Установлено, что экстракты обладают антиоксидантной активностью, которая в 2,1 раза больше у семян, чем у гребней грозди винограда. Антиоксидантная активность 2% гелей с экстрактом семян винограда несколько больше, чем 2% гелей с экстрактом гребней грозди винограда.

6. Изучена антимикробная активность гелей. Гели на основе альгината натрия с концентрацией консерванта Гермаль плюс 0,5 % обладают выраженным антибактериальным действием в отношении штаммов: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus faecalis, Candida albicans.

7. На основе проведенных исследований обоснованы и предложены показатели качества гелей: внешний вид, цвет, запах, однородность, рН водной вытяжки, микробиологическая чистота, антиоксидантная активность, реакции подлинности и количественное определение.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Хахулина, Марина Александровна, 2010 год

1. И.В. Алексеева, JI.H. Олешко, T.JI. Малкова, В.И. Панцуркин Разработка состава и технологии мази для лечения II фазы раневого процесса // Фармация.-2004.-№ 1,- С.34-37.

2. Андреева В.Ю., Калинкина Г.И. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной // Химия растительного сырья. -2000.-№1. -С.85-88

3. Аркуша А.А. Исследование структурно-механических свойств мазей с целью определения оптимума консистенции: Автореф. дисс канд. фарм. наук. Харьков, 1982. -23с.

4. Багирова B.JL, Демина Н.Б., Кулинченко Н.А. Мази. Современный взгляд на лекарственную форму // Фармация. -2002. № 2. -С. 24-26

5. Беленко E.JL, Иванченко В.И., Левченко С.В. Исследование качественного и количественного состава биополимеров в ягодах столового винограда // Виноград и вино России.-1994.- вып.2.- С.23-26

6. Величковский Б.Т. Молекулярные и клеточные основы экологической пульмонологии // Пульмонология.-2000.-т.10.- №3 .-С. 10-15

7. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соров-ский образовательный журнал.-2000.-т.б.- №12.-С.13-19

8. В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук Биоллогически активные вещества лекарственных растений. -Новосибирск:Наука, 1990. 333с.

9. Гладышев В.В. Изучение влияния состава носителей мазевых лекарственных форм на их реологические свойства // Актуальные вопросы медицины и било-логии.- 1997.-С.359-363

10. ГОСТ 29188,0-91 «Изделия парфюмерно-косметические. Правила приемки, отбор проб. Методы органолептических испытаний»

11. ГОСТ 7983-99 «Зубные пасты. ОТУ»

12. ГОСТ Р 51577-2000 «Средства гигиены полости рта жидкие. ОТУ»

13. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 1. Общие методы анализа/

14. МЗ СССР. -11-е изд., доп. М.: Медицина, 1987. -336с.

15. Государственная Фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье / МЗ СССР. -11-е изд., доп. М.: Медицина, 1989. -400с.

16. Грудянов А., Овчинникова В. Воспалительные заболевания полости рта: современные подходы к профилактике и лечению // Фармацевтический вестник. -2003. -№37. -С.20-21

17. Грядунов А.И., Дмитриева Н.А., Овчинникова В.В. Оценка эффективности локального применения препарата "Метрогил-дента" при воспалительных поражениях пародонта // Пародонтология. -2002. -№3(24). -С.30-32

18. Дадали В.А. Процессы перикисного окисления в организме и природные антиоксиданты. // «Введение в частную микронутриентологию» / под ред. Ги-чева Ю.П. и Огановой Э. Новосиб, 1999.-С.240-263

19. Дадали В.А., Маконов В.Г., Кулеба В.А., Шабров Н.В. Биохимические основы микронутриентологии. -С-Пб: С-Пб ГМА им. И.М.Мечникова. -2002.-172с.

20. Даровская Е.И. Разработка и исследование мазей с этаденом на гидрофильных основах: Автореф. дис.канд. фарм. наук. -1992. -22с.

21. Дубинина Е.Е., Шугалей И.В. Окислительная модификация белков // Успехи современной биологии.-1993 .-т.11.- №1.-С.71-81

22. Дубов В.А. Сравнительное изучение Солкосерила, Мундизала и Перидон-тона в лечении заболеваний слизистой оболочки полости рта // РМЖ. -2000. -том 8. -С.15-16

23. Евстратова К.И., Купина Н.А., Малахова Е.Е. Физическая и коллоидная химия / Под ред. К.И. Евстратовой. М.: Высшая школа, 1990. -487с.

24. Елизарова В.М., Дроботько Л.Н., Страхова С.Ю. Профилактика и лечение заболеваний слизистой оболочки полости рта. // РМЖ. 1999. - т.7. - С.919-20.

25. Еремина А.В.«Фитохимическое изучение и стандартизация сухих экстрактов некоторых продуктов переработки винограда культурного (Vitis vinifera L.) и биологически активных добавок на их основе» / Дис М.,2004-182с.

26. А.В.Еремина, В.Ю. Решетняк, М.О. Везиршвили Определение полифеноль-ного состава сухого экстракта гребней винограда методом ВЭЖХ // Химико-фармацевтический журнал.- 2004.-№3.- С. 26-28

27. А.И.Журбин «Ботаника с основами общей биологии» М.»Медицина», 1968 -500с.

28. Запрометов М. Н,, Биохимия катехинов, М., 1964; Биохимия фенольных соединений, под ред. Дж. Харборна, пер. с англ., М., 1968.

29. Н.Ф. Данилевский, Е.А. Магид, Н.А. Мухин, В.Ю. Миликевич. Заболевания пародонта / под ред. Н.Ф. Данилевского. М.: Медицина.-1993. - 320с.

30. B.C. Иванов. Заболевания пародонта. -М.: Медицина, 1981. -256с

31. Иванова В.А., Тиунов Л.А. Роль глутатиона в процессах детоксикации // Вестник АМИ СССР.-1988.-№1.-С.62-69

32. Карпухина Г.В., Эмануэль Н.М. Классификация синергических смесей ан-тиоксидантов и механизмов синергизма //Доклдады АН ССр.-1984-т.276.- №5.-С.1163-1167

33. И.И. Краснюк. Фармацевтическая технология: Технология лекарственных форм. М.: Издательский центр «Академия».- 2004. 464с.

34. Кодрян B.C. Анатомическое строение лозы винограда (Vitis vinifera) // Бота-ничекие исследования.- 1989.-вып.4.- С.103-115

35. Колхир В.К., Минаева М.Ф, Быков В.А. Новые подходы к поиску и разработке фитопрепаратов //Материалы IV международного Съезда «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». -С-Пб, 2002.-С.409-414

36. П.А. Кьосев. Полный справочник лекарственных растений. -М.: ЭКСМО-Пресс.- 2001.-992с.

37. Панкин В.З, Тихазе А.Л, Беликов Ю.П. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечно-сосудистой системы // Кардиология. -2000.-№7.-С.48-61

38. Л.Е. Леонова, В.И. Панцуркин, И.В. Алексеева Апробация нового препарата для местного лечения воспалительных заболеваний пародонта // Проблемы стоматологии.- 2005.- № 3.- С. 10-12.

39. Н.В.Курякина, О.А. Алексеева, Т.А. Третьякова, В.Г. Макарова. Лекарственные растения и продукты пчеловодства, применяемые в стоматологии. — М.: Мед. книга, Н. Новгород: НГМА.-2000. -282с.

40. Лекарственные растения Государственной Фармакопеи. М.:АНМИ.-2003.-534с.

41. Магин Д.В., Измайлов Д.Ю., Попов И.Н., Левин Г., Владимиров Ю.А. Фо-тохемилюминесценция как метод изучения антиоксидантной активности в биологических системах. Математическое моделирование // Вопросы медицинской химии". -2000.-Т.4.-С.65-68.

42. Макарова М.Н. Антиоксидантная активность флавоноидов, их олигокомпо-нентных комбинаций и полифенолсодержащих препаратов в эксперименте.- СП.- 2002. Дисс.- 173с.

43. Майорова А.В., Кондратьева Т.С. Разработка геля с сухим экстрактом арники // Сб.ст «Фарм.наука в решении вопросов лекарственного обеспечения» .-М.-1998.- Ч.1.-С.305-309

44. Маринина Т.Ф., Савченко Л.Н., Пищков Е.Г. Перспективы разработки и использования стоматологических лекарственных форм // Химико-фармацевтическое производство. -1996. -вып. 1. -С. 31-37

45. Машковский М.Д. Лекарственные средства.- 2т. -14-е изд. М.: Новая волна.- 2000. -608с.

46. Медуницин Н.В. Иммунологическая безопасность медицинских биологических препаратов // Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии.- М., 1997.-С.119

47. Мизина П.Г. Фитопленки в фармации // Фармация.-2000.-№5-6.-С.38-40

48. П.Г.Мизина, В.А.Куркин, И,П.Жданов, В.А.Быков. Антибактериальная активность некоторых аппликационных лекарственных форм с растительными компонентами // Растительные ресурсы.-2001.-т.37.- вып 4.-С.97-99

49. Мошков К.А., Яковлев А.С. Маслов В.Г. Биоорганическая химия.-1980.-т.6.-№3.-С.413-425

50. Панкрушева Т.А. Экспериментально-теоретическое обоснование создания мягких лекарственных форм на полимерных основах производных целлюлозы: Дисс. д-ра фарм. Наук.-Курск, 1995. -326с.

51. Перцев И.М., Даценко Б.М., Гунько В.Г. Многокомпонентные мази на гидрофильной основе // Фармация. -1990. т.39. -№5. -С.73-76

52. Патент РФ 2147223 А 61 К 7/26 Средство для лечения заболеваний паро-донта и способ его получения / Куркин В.А., Бурова Е.М., Ежков В.И., Авдеева Е.В., Куркина А.В. -1997.

53. Патент РФ 2167641 А 61 К 6/00 Хаимский З.М. Средство для лечения заболеваний пародонта и десен и способ его приготовления.- 1999.

54. Подколзин А.А, Мегреладзе А.Г., Донцов В.И.Системы атиоксидантной защиты организма и старение // Профилактика старения.-2000.-вып.З.1. С. 15-20

55. А.И. Тенцова и М.Т. Алюшина. Полимеры в фармации М.: Медицина -1985.-251с.

56. Практикум по биохимии растений / С.М. Шипарев, С.С.Медведев, Е.И. Шарова, О.В. Танкелюн /Под ред. В.В. Полевого, С.М. Щипарева. -С-Пб.: Изд-во С-Петербургского ун-та.- 1996.-200с.

57. Приходько JI.А., Артемьев А.И. Современные упаковочные материалы и упаковки для мазей // Фармация. -1989. т.37-№2. -С.82-84

58. Пучкова Л.В., Алейникова Т. Л, Вербина И.А. // Биохимия.-1993.-т.5 8.-№2.-С.1892-1901

59. Родопуло А.К. Ароматизирующие вещества винограда // Прикладная биохимия и микробиология. 1990.- т.26.-вып.5. -С.579-589

60. А.Е. Романов, М.М. Давыдова, О.А. Гусева // Пародонтология. -2003. -№1(26). -С. 63-68.

61. Руководство к практическим занятиям по заводской технологии лекарственных форм / Г.П.Градунова, Л.М.Козлова, Т.П.Литвинова; под ред. А.И.Тенцовой. М.: Медицина.- 1986. -272с.

62. Рыбаков А.И., Банченко Г.В. Заболевания слизистой оболочки полости рта. -М.: Медицина.- 1978. -232с.

63. Савицкая С.Б., Зарума Л.Е., Чалый Л.Ф. Вспомогательные вещества, которые используются в технологии лечебно-косметических кремов // Фармацевтический журнал.-1997.- №4 С. 52-56

64. Саипов Б.Х. Изменение дубильных и красящих веществ винограда в процессе созревания. // Труды НИИ садоводства, виноградорства и виноделия.-1977.- вып 38.- С. 159-163

65. Сапин М.Р., Этинген А.Е. Иммунная система человека.- М. Медицина, 1996.-396с.

66. Серегин А. Эффективная защита слизистой оболочки рта // РМЖ.- 2000.-№1.- т. 8.-С.89-101

67. Скрипникова Т.П., Богашова ЛЛ.Применение антибактериального препарата «Стоматидин» в комплексной терапии основных стоматологических заболеваний." Полтава.- 2002.-49с.

68. Смирнов Л.Д., Дюмаев К.М. в-Оксипроизводные шестичленных азотистых гетероциклов. Синтез, ингибирующая активность и биологические свойства // Химико-фармацевтический журнал.-1982.-№4.-С.412-428

69. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармакология.-М.-2000.-186с.

70. Степанова Э.Ф., Сысуев Е.Б., Сысуев Б.Б., Евсеева С.Б. Реологические исследования профилактических защитных мазей //Сб.науч.трудов «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции».-вып 60, -Пятигорск.-2005.- С.151-153

71. Степуро И.И. Антиоксидантные свойства витаминов и их комплексов с белками крови //Вопросы медицинской химии.-1992.-т.38, №4.-С.26-33

72. Стуруа З.Ш., Мехузла Н.А. Фенольный состав винограда и продуктов его переработки // Виноград и вино России.- 1997.- С.26-28

73. Тиунов Л.А.Механизмы естественной детоксикации и антиоксидантной защиты // Вестник РАН.-1995.-№3.-С.9-13;

74. Тахтаджян А.Л. Жизнь растений в шести томах.- М.: Просвещение,- 1984. -340с.

75. ТУ 9176-050 -46865780-04 «Комплекс полифенолов гребней винограда (Kill В)», сухой экстракт.

76. ТУ 9176-051 -46865780-04 «Экстракт красного вина».

77. Улитовский С.Б. Зубные пасты. С-Пб.: Изд-во "Человек".-2001. - 272с.

78. Улитовский С.Б. Прикладная гигиена полости рта // Новое в стоматологии. -2000. -№6. -С.30-34

79. Уткина Е.А. Зависимость антиоксидантной активности флавоноидов от их физико-химических характеристик в различных системах: Дисс. -М, 2005-101 с.

80. Ушаков Р.В., Царев В.И. Микрофлора полости рта и ее значение в развитии стоматологических заболеваний // Стоматология для всех. -1998. -№ 3 (4). -С.22-24.

81. Фролов Ю.Г. Курс коллоидной химии.-М.: Химия, 1982.-400с.

82. Хасанов В.В., Рыжова Г.Л., Мальцев Е.В. Методы исследования антиокси-дантов // Химия растительного сырья.- 2004.- №3.- С.63-75.

83. Хржановский В.Г. Курс общей ботаники. М.: Высш. шк, 1982. -544с.

84. Чижова Е.Т., Михайлова Г.В. Медицинские и лечебно-косметические мази. -М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999. -404с.

85. Янковский О.Ю. Токсичность кислорода и биологические системы (эволюционные, экологические и медико-биологические аспекты). -С-Пб: Игро,2000.-294с.

86. Ярополов А.Н. Механизмы антиокидантного действия церулоплазмина // Доклады академии наук СССР.-1986.-т.291.-№1.-с.237-241

87. Acker van S.A, Ballen van G.P, Berg van D.J et al. Influence of iron chelation on the antioxydant activity of flavonoids // Biochem.Pharm.-1998.Vol.56.-P.935-945

88. Bagchi D., Sen CK. Antiangiogenic,antioxidant and anticarcinogenic properties of a Novel Anthocyanin -Kich Berry // Biochemistry, 2004- P. 69

89. Bagchi D Comparative in vitro and in vivo Free Radical Scavenging Abilities of Grape Seed Proanthocyanidins and Selected antioxidants // Federation of American Societies for Experimental Biology Conference, New Orleans, 1997

90. Bagchi D, et al., Oxygen Free Radical Scavenging Abilities of vitamins С and E and Grape Seed Proanthocyanidin extract in vitro // Research Communications in molecular pathology and prarmacology. -1997.-V.95.-P.170-189

91. Bate-Smith E.C. /Mochemistiy-1954.-V.58.-P.122

92. Bate-Smith E.C. Haemanalysis of tannins: The concept of relative astringency // Phytochemistry. 1973. -V. 12. - P. 907-912

93. Bate-Smith , E. Phytochemistry of procyanidins. Phytochemistry, 1975. V. 14. P.l 107-1113.

94. Benzie I.F., Strain I.I. The ferric reducing ability of plasma (FRAP) as a measure of «antioxidant power»: the FRAP assay // Analytical Biochemistry.-1996.-V.239.-P.70-76.

95. Blois M.S. Antioxidant determination by the use of a stable free radical // Na-ture.-1958.-V.26.-P.1198-1200.

96. Buijnsters M., Bicanic D., Mihai Chirtoc M., Nicoli M.C., Min-Kuo Y. Evaluation of antioxidative activity of some antioxidants by means of a Combined Opto-thermal Window and DPPH Free Radical Colorimetry // Analytical Sciences.2001.V. 17. P.544-546

97. Cao G., Sanchez-Moreno C., Prior R.L. Procyanidins, anthocyanins and antioxidant capacity in wines // Faseb Journal. 2000. V. 14. P.564-567

98. Castella L, Rigoulet M, Penicaund L. Mitochondrial ROS metabolism : modulation by uncoupling proteins // IUBMB Life.-2001.-V.52.-P.181-188

99. Dubick, M., Omaye, S. Evidence for grape, wine and tea polyphenols as modulators of atherosclerosis and ischemic heart disease in humans. Journal of Nutraceut-icals Functional-and Medical Foods 2001. V. 3. P.67-93

100. Escribano M.T., Guerra M.T. et al. Proanthocyanidin composition in skin and seed from grapes // Polyphenols. 1994. - V.23. - P. 223-226.

101. Flanzy, С . Oenologie. Fondements scientifiques et technologiques. Lavoisier Paris, Tec&Doc 1998

102. Gao G.H., Alessio H.M., Cutler P.G. Oxygen Radical Absorbency Capacity Assay for Antioxidants // Free Radicals In Biology and Medicine.-1993.-V.3.-№ 14.-P.303-311.

103. Ghiseli A., Serafini M., Maiani G., Azzini E., Ferro-Luzzi A. A fluorescence-based method for measuring total plasma antioxidant capability // Free Radicals In Biology Anc Medicine. 1995.V. 18.P/.29-36.

104. Hagerman, A., Riedl K., Jones et al. High molecular weight plant polyphenolics (tannins) as biological antioxidants / Journal of Agricultural and Food Chemistry. 1998.V. 46. P. 1887-1892

105. Honda Y. Cellular and molecular biology of ischemic retina. Nippon Ganka Gakkai Zasshi.-1996, №100(12).-P.937-955

106. Hradzina G. Anthocyanins. The flavonoids: advances in research // Ed. J. B. Harborn. London. New-York. 1982. - P. 135-188.

107. Jayaprakasha GK, Selvi T, Sakaria KK. Antibacterial and antioxidant activities of grape (Vitis vinifera) seed extracts// Food Res Int.- 2001 .-№36.-P.l 17-122

108. Kandaswami C, Middleton E. J. Flavonoids as antioxydants // Natural Antioxy-dants: Chemistry, Health effects, and Applications.-1997.-P. 174-203

109. Kanner J, Frankel E, Granit R, German B, Kinsella JE: Natural antioxidants in grapes and wines. J Agric Food Chem, 1994; 42: 64-69.

110. Krasovska A., RosiakP., Czkapiak K., Lukaszewier M. Chemiluminescence detection of peroxyl radicals and comparison of antioxidant activity of phenolic compounds // Current topics in Biophysics.-2000.-V.24.-P.89-95.

111. Labuda J., Buscova M., Heilerova L., Caniova-Ziakova A., Brandsteterova E., Mattusch J., Wennrich R. Detection of Antioxidative Activity of Plant Etracts at the DNA-Modified Screen-Printed Electrode//Sensors.-2002.-V.2.-P.l-10

112. Laparra, J., Michaud, J., Masquelier, J. Action of oligomeric procyanidins on vitamin С deficient gurinea opig. / Bull. Soc. Pharm. Bordeaux. 1979.V. 118. P.7-13

113. Lawrence J. Porter, Liana N. Hrstich and Bock G. Chan. The conversion of pro-cyanidins and pridelphinidins to cyaniding and delphinine // Phytochemistry.-1986.-V.25. -№1. P.223-230

114. Magniapane H, Thomson J, Salter A, Brown S, Bell GD, White DA: The inhibition of the oxidation of low density lipoprotein by (+)-catechin, a naturally occurring flavonoid. Biochem Pharmacol, 1992; 43: 445-450.

115. Mandel I.D. The new toothpastes // CDA Journal. 1998.- V.26.- № 3.-P.186-190

116. Marsh PO. Dentifrices containing new agents for the control of plaque and gingivitis. Microbiological aspects //J Clin Periodontal.- 1991.-№18.-P.482

117. Modem nutrition in health and disease, editors Shils M.E., Olson J.A.- 1998, p.269

118. Molyneux P. The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxidant activity // J.Sci.Technol.- 2004.- V.26.- №2.- P.211-219.

119. Moran J, Addy M. The antibacterial properies of some commercially available toothpastes in vitro//Br DentJ.- 1984.-V. 156.-P. 175-178

120. Mills S, Bone K. Principles and Practiceof Phytotherapy // Modern Herbal Medicines.- 2000.-p.361

121. Narayana K.R., Reddy M.S., Chaluvadi M.R., Krishara D R Bioflavonoids classification pharmacologycal biochemical effects and therauptic potential // Indian journal of pharmacology-2001.-V.33.-P.2-16

122. Nijveldt, R., Nood, E., Hoorn, D. et al. Flavonoids: a review of probable mechanisms of action and potential applications. / American Journal of Clinical Nutrition. 2001. V.74, p.418-425

123. Oszmianski J, Lee CY: Isolation and HPLC determination of phenolic compounds in red grapes. Am J Enol Vitic, 1990; 41:204-205.

124. Pinhero R., Gopinadhan-Paliyath G., Paliyath G. Antioxidant and calmodulin-inhibitory activities of phenolic components in fruit wines and its biotechnological implications. Food Biotechnology. 2001, V.15: 3,179-192

125. Prieur С, Rigaud J, Cheynier V, Moutounet M: Oligmeric and polymeric pro-cyanidins from grape seeds. Phytochemistry 1994; 36: 791-784.

126. Revilla E, Alonco E, Kovac Y: The Content of catechins and procyanidins in grapes and wines as affectedby agroecological factors and technological practices, American Chemical Society, Washington, 1997, pp.69-80.

127. Rise-Evans C.A., Miller N.J. Structure -antioxidant activity relationships of fla-vonoids and phenolic acids // Free radical Biol.Med.-1996.-V.20, №7.-P.933-956

128. Sbaghi M 90-Day oral toxicity study of grape seed extract in rats // Food chem.-2004.-№ 52(4).-P.935-942

129. Scheie A. Modes of action of currently known chemical antiplaque agents other than chlorhexidine// J Dent.- 1989.-№68.-P.1609

130. Siebert KJ: Effects of protein-polyphend interactions on beverage haze, stabilization, and analysis. J Agric Food Chem 1999; 47:353-362.

131. Silva RC, Rigaud J, Cheynier V, Chemina A: Procyanidindinners and trimers from grape seeds. Phytochemistry 1991; 30: 1259-1264.

132. Silva RC, Darmon N, Fernandez Y, Mitjavila S: Oxygen free radical scavenger capacity in aqueous models of different procyanidins from grape seeds. J Agric Food Chem, 1991;39:1549-1552.

133. Singleton V. L: Grape and wine phenolics: background and prospects. In: Proceedings of the University of California, Davis, Grape and Wine Centenary Symposium, University of California, Davis, 1980, pp.215-227.

134. J-M. Souquet, B. Labarbe, C. le Guerneve, V. Cheyneir, and M. Moutounet Phenolic composition ofrgrape^stems // J. Agric. Food Chem. 2000. -V. 48. - P. 1076-1080!

135. Souquet, J.M., Cheynier, V., Mo utounet, M. The proanthocyanidins of grape. Bull. O.I.V. 2000 , 835-836, 602-609 \

136. Stephen KW, Saxton CA, Jones CL, et al. Controlofgingi.vitis and calculus by a dentifrice containing a zinc salt and triclosan// J Periodontol.- 1990.-V.61.-P.674.

137. Svingen В.A., Oneal F.O., Aust S.B. The mechanism of NADF-dependednt lipid peroxydation. The propagation of lipid peroxydation // J.Biol.Chem.-1979.-V.254(3), N°10.-P.5892-5899

138. Teissedre PL, Frankel EN, Waterhouse AL, Pele GH? German JB. Inhibition of iv-vitro human LDL oxidation by phenolic antioxidants from grapes and wines // J Sci FoodAgri.- 1996.-V. 70.-P.55-61.

139. Thorngate L, Singleton LT: Localization of procyanidins in grape seeds. Am J Enol Vitic 1994; 45:259-262.

140. Tubaro F., Ghiselli A., Rapuzzi P., Maiorino M., Ussoni F. Analysis of plasma antioxidant capacity by compedition kinetics // Free Radicals in Biology and Medicine.-1998.-V.24.-P. 1228-1234.

141. Уа1котут M, Kuusi T. Spectrophotometric assay for total peroxyl radical-trapping antioxidant potential in human serum // J.Lipid Res.-1997 -V.38.-P.823

142. Velioglu YS, Mazza G, Gao L, Oomah BD: Antioxidant activity and total phe-nolics in fruits, vegetables and grain products. J Agric Food Chem 1998; 46:41134117.

143. Wang X., Quinn P.J. Vitamin E and its function in membranes // Progress in lipid Research.-1999.-V.38.-P.309-336

144. Wendel A. Glutathion peroxidase Enzymatic basis of detoxication // Bio-chem.Pharmacol.Toxicol.: Ed by W.B.Jacoby.-Orlanto: Acad.Press.-1980.-Vol.l.-P.333-335

145. Yang В., Kotani A., Arai K.,Kush F.Estimation of the antioxidant activities of flavonoids from their oxidation potencials // Analytical Science (Japan).-2001.-V.17.-P.599-604