Разработка технологии и стандартизация лекарственных форм препарата на основе метаболитов лактобактерий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.01, кандидат фармацевтических наук Сорокина, Юлия Васильевна

• Сорокина, Юлия Васильевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Сорокина, Юлия Васильевна

ВВЕДЕНИЕ

Список сокращений

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Лактобактерии: биологические свойства, функции и лекарственные препараты

1.2. Свойства метаболитов лактобактерий.

1.3. Технологические разработки лекарственных препаратов на основе бактериальных метаболитов.

Глава 2. Объекты и методы исследований

2.1. Объекты.

2.2. Методы исследований.

2.2.1. Физико-химические методы.

2.2.2. Микробиологические методы.

2.2.3. Статистические методы.

Глава 3. Получение и сравнительное изучение свойств нативного и концентрированного ультрафильтратов культуральной жидкости лактобактерий штамма L. plantarum 8Р-АЗ

3.1. Выбор параметров концентрирования УКЖЛ.

3.2. Изучение физико-химических параметров нативного и концентрированного УКЖЛ.

3.2.1. Определение плотности, титруемой кислотности и рН

3.2.2. Влияние процесса концентрирования на азотистый состав УКЖЛ

3.2.3. Исследование состава органических кислот в нативном и концентрированном УКЖЛ

3.2.4. Определение состава аминокислот методом бумажной хроматографии и с помощью высокоскоростного аминокислотного анализатора

3.3. Сравнительная оценка бактериотропного действия нативного и концентрированного УКЖЛ.

3.3.1. Изучение специфической (пробиотической) активности.

3.3.2. Изучение антагонистической активности

3.3.3. Оценка антибактериального действия.

3.3.4. Исследование влияния нативного и концентрированного УКЖЛ на чувствительность микроорганизмов к антибиотикам.

Выводы по главе.

Глава 4. Разработка технологии и оценка качества мягких лекарственных форм препарата на основе метаболитов лактобактерий.

4.1. Технология и оценка качества суппозиториев вагинальных, содержащих концентрат УКЖЛ

4.1.1. Исследование влияния составов суппозиторных масс на качество лекарственных форм с концентрированным УКЖЛ

4.1.2. Оптимизация технологии суппозиториев с концентратом УКЖЛ.

4.1.3. Исследование реологических параметров суппозиторных

4.1.4. Составление технологической схемы производства суппозиториев с концентратом УКЖЛ.

4.1.5. Стандартизация суппозиториев с концентратом УКЖЛ.

4.2. Технология и оценка качества мази защитного действия-.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии и стандартизация лекарственных форм препарата на основе метаболитов лактобактерий»

Актуальность темы. В настоящее время наблюдается расширение номенклатуры пробиотических препаратов. Перспективным направлением в этой области является разработка пробиотиков метаболитного типа. Данная группа пробиотиков осуществляет регулирование симбионтных отношений организма человека и его микрофлоры за счет компенсации метаболитов и создает благоприятные условия для развития собственной микрофлоры. Про-биотики метаболитного типа представляют собой препараты заместительной терапии и практически не оказывают побочных действий (Грачева Н.М., 2007).

Один из препаратов, содержащих микробные метаболиты, широко используемый на отечественном фармацевтическом рынке - Хилак - форте (Меркле ГмБХ, Германия). Препарат представляет собой капли для приема внутрь и содержит в своем составе концентрат продуктов метаболизма саха-ролитических (Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Enterococcus faecalis) и протеолитических (Escherichia coli) микроорганизмов (беззародышевые водные субстраты продуктов обмена веществ). В его состав дополнительно введены молочная, фосфорная и лимонная кислоты, сорбат калия, сбалансированный состав буферных солей (кислый фосфорнокислый натрий и калий), лактоза и ряд аминокислот.

В Пермском НПО «Биомед» (Несчисляев В.А., Чистохина Л.П., 2004) разработан способ получения препарата «Микростим» на основе метаболитов Lactobacillus plantarum 8Р-АЗ. В ходе исследований установлена выраженная пробиотическая и антимикробная активность препарата. При изучении влияния метаболитного препарата на иммунную систему установлена его иммуномодулирующая активность при пероральном и интравагинальном применении.

Для разработки технологии и стандартизации лекарственных форм препарата «Микростим» необходимо изучение состава ультрафильтрата культуральной жидкости лактобактерий и условий его концентрирования, что определило актуальность проведенных исследований. Особенно актуальным является создание мягких лекарственных форм на основе метаболитов лактобактерий для профилактики и терапии гинекологических заболеваний.

Цель настоящего исследования - разработка технологии и оценка качества мягких лекарственных форм (вагинальных суппозиториев и мази защитного действия) пробиотического препарата на основе метаболитов лактобактерий штамма-продуцента L. plantarum 8Р-АЗ. Основные задачи исследования:

1. Получить экспериментальные серии УКЖЛ штамма L. plantarum 8Р-АЗ, подобрать оптимальные условия и отработать способ его подготовки (концентрирование) для получения лекарственных форм.

2. Провести сравнительное изучение физико-химических и биологических характеристик нативного (исходного) и концентрированного УКЖЛ.

3. Разработать состав и технологию суппозиториев вагинальных и мази защитного действия на основе концентрированного УКЖЛ.

4. Оценить качество полученных лекарственных форм метаболитного препарата и провести стандартизацию суппозиториев вагинальных с концентрированным УКЖЛ.

Научная новизна работы. Предложен способ подготовки исходного субстрата для получения лекарственных форм метаболитного препарата. Определены оптимальные параметры концентрирования нативного УЮКЛ на вакуум-выпарной установке, позволяющие значительно улучшить технологические свойства и сохранить биологическую активность.

Изучен качественный и количественный состав исходного и концентрированного УКЖЛ. Показано, что все действующие вещества сохраняются при концентрировании и их количество увеличивается пропорционально степени сгущения. У концентрированного УЮКЛ установлена пробиотическая, противомикробная активность, а также определено его влияние на чувствительность L. plantarum 8Р-АЗ и Е. coli М-17 к ряду антибиотиков.

С помощью метода математического планирования, а также реологических исследований выбраны оптимальный состав и технология вагинальных суппозиториев. Показана возможность определения противомикробной активности МЛФ метаболитного препарата микрометодом серийных разведений.

Практическая значимость. Разработана рациональная технология МЛФ препарата на основе УКЖЛ, что позволяет расширить номенклатуру и повысить потребительские свойства метаболитных пробиотиков.

Составлено изменение (накопительная ведомость изменений № 24 от 18 декабря 2008 г.) к промышленному регламенту на производство лактобак-терина сухого (регистрационный номер ГИСК им. Л.А. Тарасевича № 156704), включающее концентрирование бактериальной взвеси лактобактерий методом ультрафильтрации для получения клеточной взвеси и бесклеточной культуральной жидкости (УКЖЛ).

Результаты исследований внедрены в учебный процесс ГОУ ВПО ПГФА кафедры промышленной технологии лекарств с курсом биотехнологии (акт внедрения от 18 апреля 2008 г.).

На защиту выносятся результаты экспериментального и теоретического обоснования технологии и стандартизации мягких лекарственных форм препарата на основе метаболитов лактобактерий.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Межрегиональной научно-практической конференции «Экспериментальные и клинические исследования новых лекарственных средств», посвященной 85-летию со дня рождения А.С. Саратикова (Томск, 2006); на второй российско-китайской Международной конференции по фармакологии (Пермь, 2006); Всероссийской научно-практической конференции «Вакцинология 2006. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней» (Москва, 2006); на четвертом съезде общества биотехнологов России им. Ю.А. Овчинникова (Пущино, 2006); Международном конгрессе «Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Фундаментальные аспекты» (Санкт-Петербург, 2007); Региональной конференции ■молодых ученых с международным участием «Современные проблемы экологии, микробиологии и иммунологии» (Екатеринбург — Пермь, 2007); Всероссийской научно-практической конференции «Создание и перспективы применения медицинских иммунобиологических препаратов», посвященной 110-летию филиала ФГУП «НПО «Микроген» (Пермь, 2008)

Автор выражает благодарность сотрудникам отделения препаратов бактериотерапии Пермского филиала НПО «Биомед» канд. мед. наук Чисто-хиной Л.П., а также д. мед. наук Маслову Ю.Н. (ПГМА) за содействие в проведении микробиологических исследований; д. хим. наук Чекрышкину Ю.С. •и канд. тех. наук Якушеву P.M. (Институт УРО РАН технической химии) за помощь в проведении реологических исследований и определении состава органических кислот УКЖЛ; д. фарм. наук Петриченко В.М. за оказание помощи в изучении аминокислотного состава УКЖЛ.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

БАД - биологически активная добавка ГОСТ — государственный стандарт качества ГФ - государственная фармакопея ЖКТ — желудочно-кишечный тракт ЛЖК — летучие жирные кислоты МГД — моноглицериды дистиллированные МЛФ — мягкая лекарственная форма Мм - молекулярная масса

МПК — минимальная подавляющая концентрация СОЖ — смазочно-охлаждающая жидкость ТУ - технические условия

УКЖЛ - ультрафильтрат культуральной жидкости лактобактерий

ФС — фармакопейная статья

ФСП — фармакопейная статья предприятия

Заключение диссертации по теме «Технология лекарств и организация фармацевтического дела», Сорокина, Юлия Васильевна

Общие выводы

1. Получены экспериментальные серии нативного УКЖЛ, установлены оптимальные параметры концентрирования: температура 90 °С и разрежение 0,04-0,05 МПА.

2. Проведено сравнительное изучение физико-химических характеристик исходного и концентрированного УКЖЛ. Установлено, что при концентрировании кислотность возрастает в пределах от 15 до 19 раз. Значения плотности увеличиваются в 1,1- 1,2 раза. рН всех серий концентрированного УКЖЛ по сравнению с нативным УКЖЛ остаются неизменными, что свидетельствует о сохранении буферных свойств, растворов при сгущении. Определено содержание низкомолекулярных пептидов, общего азота, а также качественный и количественный состав органических и аминокислот. Все действующие вещества сохраняются при концентрировании и их количество увеличивается пропорционально степени сгущения.

3. Микробиологическими исследованиями подтверждена пробиотиче-ская активность в отношении Lactobacillus plantarum 8Р-АЗ и Lactobacillus acidophilus КЗШ24 исходного и концентрированного УКЖЛ. Установлено, что к действию концентрированного УКЖЛ чувствительны как грамположи-тельные, так и грамотрицательные микроорганизмы. Показана возможность совместного применения концентрированного УКЖЛ при антибиотикотера-пии.

4. В ходе оптимизации по плану греко-латинского квадрата и реологических исследований определен оптимальный состав суппозиториев вагинальных с концентратом УКЖЛ. Установлено, что на высвобождение молочной кислоты , влияют вид эмульгатора и способ его введения, а на термостабильность - вид суппозиторной основы. Наибольшее высвобождение молочной кислоты наблюдали при использовании эмульгатора Т-2 и введении его в водную и липофильную фазу.

5. Разработана технологическая схема производства суппозиториев и проведена стандартизация (составлена спецификация), а также определен срок годности лекарственной формы (срок наблюдения) - 1 год.

6. Показана возможность использования концентрированного УКЖЛ в составе мази защитного действия.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Сорокина, Юлия Васильевна, 2009 год

1. Авдеев, В.Г. Пробиотики и пребиотики в лечении заболеваний желудочно-кишечного тракта / В.Г. Авдеев // Клин, фармакология и терапия. -2006.-№ 1.-С. 36-40.

2. Альберт, А. Константы ионизации кислот и оснований / А. Альберт, Е. Сержент. -М. : Химия, 1964. 180 с.

3. Андреева, И.В. Доказательства обоснованности профилактического применения пробиотиков / И.В. Андреева // Фарматека. 2006. - № 6. - С. 5661.

4. Аркуша, А.А. Исследование структурно-механических свойств мазей с целью определения оптимума консистенции: автореф. дис. . канд. фарм. наук / А.А. Аркуша. Харьков, 1982. - 18 с.

5. Барышников, Е.Н. Запоры в практике гастроэнтеролога / Е.Н. Барышников, В.Г. Румянцев // Consilium medicum. 2007. - Т. 9, № 7. - С. 38-43.

6. Белобородова, Н.В. Метаболиты анаэробных бактерий (летучие жирные кислоты) и реактивность макроорганизма / Н.В. Белобородова, С.М. Бе-лобородов // Антибиотики и химиотерапия. 2000. - Т. 45, № 2. - С. 28-35.

7. Блинкова, Л.П. Бактериоцины: критерии, классификация, свойства, методы выявления / Л.П. Блинкова // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2003. - № 3. - С. 109-113.

8. Бондаренко, В.М. Иммуностимулирующее действие лактобактерий, используемых в качестве основы препаратов пробиотиков / В.М. Бондаренко, Э.И. Рубакова, В.А. Лаврова // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 1998. - № 5. - С. 107-112.

9. Бондаренко, В.М. Метаболитные пробиотики: механизмы терапевтического эффекта при микроэкологических нарушениях / В.М. Бондаренко // Consilium medicum. 2005. - Т. 7, № 6. - С. 437-443.

10. Бондаренко, В.М. Поликомпонентные пробиотики: механизм действия и терапевтический эффект при дисбиозах кишечника / В.М. Бондаренко // Фарматека. 2005. - № 20. - С. 46-54.

11. Бондаренко, В.М. По поводу нового подхода к классификации фармакопейных лекарственных пробиотических препаратов, биологически активных добавок к пище и продуктов функционального питания / В.М. Бондаренко // Фарматека. 2007. - № 2. - С. 62-64.

12. Бондаренко, В.М. Пробиотики, пребиотики и синбиотики в терапии и профилактике кишечных дисбиозов / В.М. Бондаренко, Н.М. Грачева // Фарматека. 2003. - № 7. - С. 56-63.

13. Бондаренко, В.М. Стабилизирующее действие метаболитного про-биотика Хилак форте на нормальную микрофлору кишечника / В.М. Бондаренко // Фарматека. 2005. - № 1. - С. 36-43.

14. Бухарин, О.В. Межбактериальные взаимодействия / О.В. Бухарин, Б.Я. Усвяцев, JI.M. Хуснутдинова // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2003. - № 4. - С. 3-8.

15. Вахитов, Т.Я. Концепция пробиотического препарата, содержащего оригинальные микробные метаболиты / Т.Я. Вахитов, JT.H. Петров, В.М. Бондаренко // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2005. - № 5. - С. 108-114.

16. Влияние препарата Хилак форте и его комбинации с антибиотиками на слизистую оболочку толстой кишки, ее контаминацию кампилобактерия-ми и криптоспоридиями / И.Т. Щербаков, Н.М. Грачева, Н.И. Леонтьева и др. // Фарматека. 2006. - № 6. - С. 101-105.

17. Влияние пробиотических энтерококков на рост Streptococcus agalac-tiae / Е.И. Ермоленко, А.Ю. Черныш, И.В. Марцинковская, А.Н. Суворов // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2007. - № 5. - С. 7377.

18. Воробьев, А.А. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции / А.А. Воробьев, Е.А. Лыкова // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 1999. - № 6. - С. 102-105.

19. Воробьева, Л.И. Антимутагенные свойства бактерий (обзор) / Л.И. Воробьева, С.К. Абилев // Прикл. биохимия и микробиология. 2002. - Т. 8, №2.-С. 115-127.

20. Выбор оптимальных условий получения гидролизатов молочнокислых бактерий термокислотным способом / М.В. Гаврилин, Г.В. Сеньчукова, С.П. Сенченко и др. // Хим.- фарм. журн. 2007. - Т. 41, № 2. - С. 54-56.

21. Гинекология: национальное руководство / под ред. В.И.Кулакова, И.Б. Манухина, Г.М. Савельевой. М. : ГЭОТАР-Медиа, 2007. - 1072 с.

22. Гинцбург, А.Л. «Quorum sensing» или социальное поведение бактерий / А.Л. Гинцбург, Т.С. Ильина, Ю.М. Романова // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2002. - № 5. - С. 86-93.

23. Государственный реестр лекарственных средств. Т. II (по состоянию на 1 января 2006 г.) : официальное издание. Минздрав РФ, 2006. — 1472 с.

24. Государственная Фармакопея XI: Вып. 1 Общие методы анализа. -М. : Медицина, 1987. 333 с.

25. Грачева, Н.М. Метаболические антибиотики: перспективы применения в клинике / Н.М. Грачева, О.С. Партии // Фарматека. 2007. - № 20. - С. 36-39.

26. Действие препарата аутостимуляторов роста Escherichia coli М-17 (Актофлор) на рост чистых и'смешанных культур бактерий / Т.Я. Вахитов, О.Ю. Яшина, JI.H. Петров, А.М.Королюк // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2000. - № 3. - С. 20-24.

27. Доль, М. Пробиотики и их значение для организма / М. Доль // Биол. медицина. 2007. - № 1. - С. 11-14.

28. Дроздова, И.Л. Аминокислоты фиалки полевой и донника рослого / И.Л. Дроздова, Р.А. Бубенчиков // Фармация. 2003. - № 5. - С. 14-15.

29. Егоров, Н.С. Бактериоцины. Образование, свойства, применение / Н.С. Егоров, И.П. Баранова // Антибиотики и химиотерапия. 1999. - Т. 44, № 6. - С. 33-40.

30. Зрячкин, Н.И. Новый подход к классификации пребиотиков, про-биотиков и синбиотиков / Н.И. Зрячкин // Фарматека. 2007. - № 2. - С. 58-61.

31. Изучение состава препарата, полученного на основе гидролизатов молочнокислых бактерий / В.А. Самойлов, Н.М. Гостищева, Г.В. Сеньчукова и др. // Хим.- фарм. журн. 2005. - Т. 39, № 3. - С. 51-52.

32. Иммунобиологические препараты и перспективы их применения в инфектологии / Г.Г. Онищенко, В.А. Алешкин, С.С. Афанасьев, В.В. Поспелова; под ред. Г.Г. Онищенко, В.А. Алешкина, С.С. Афанасьева, В.В. Поспеловой. М. : ГОУ ВУНМЦ МЗ РФ, 2002. - 608 с.

33. Инструкция по освоению системы обработки данных Aqilent Chem-Station Фирма Aqilent Technologies / Каталожный номер G 2070-91115. Редакция: 06/03. Документ издан в Германии. 211 с.

34. Исследование антибактериального действия Канефрона Н / Н.И. Аверьянова, В.В. Козлова, П.В. Косарева и др. // Фармация. 2007. - № 1. -С. 41-44.

35. К вопросу концентрирования бактериальных суспензий в производстве препаратов для бактериотерапии / В.А. Несчисляев, С.В. Логинов, Д.А. Харченко, Н.Б. Кравцова // Эксперим. и прикл. иммунология: тез. докл. на-учн. конф. Пермь, 1991. - С. 22.

36. Калинина, Е.В. Дисбиоз: современные возможности коррекции / Е.В. Калина // Аптеч. бизнес. 2006. - № 9. - С. 40-42.

37. Калмыкова, А.И. Пробиотики: Терапия и профилактика заболеваний. Укрепление здоровья / А.И. Калмыкова. Новосибирск, 2001. - 208 с.

38. Каширская, Н.Ю. Значение пробиотиков и пребиотиков в регуляции кишечной микрофлоры / Н.Ю. Каширская // Рус. мед. журн. 2000. — Т. 8, № 13.-С . 572-575.

39. Квасников, Е.И. Молочнокислые бактерии и пути их использования /Е.И. Квасников, О.А. Нестеренко. М. : Наука, 1975. - 384с.

40. Комплексное применение препарата «Хилак форте» и антибиотиков и их действие на микрофлору кишечника / Н.М. Грачева, А.А. Аваков, А.Ф. Гаврилов и др. // Новые лекарств, препараты : экспресс-информ. 2006. -Вып. 1. - С. 15-23.

41. Конев, Ю.В. Болезни кишечника. Дисбиозы и их коррекция / Ю.В. Конев // Consilium medicum. 2005. - Т. 7, № 6. - С. 432-437.

42. Конев, Ю.В. Нарушение микробиоценоза кишечника и его лечение / Ю.В. Конев // Справ, поликлин, врача. 2007. - № 7. - С. 34-38.

43. Конь, И.Я. Пробиотические и кисломолочные продукты в питании детей раннего возраста / И.Я. Конь // Лечащий врач. 2007. - № 1. - С. 8-12.

44. Курепина, Н.Е. Микроцины: природа и генетическое детерминирование / Н.Е. Курепина, И.А. Хмель // Молекулярная генетика, микробиология и вирусология. 1986. - № 4. - С. 3-9.

45. Лобзин, Ю.В. Дисбактериоз, или полезны ли антибиотики / Ю.В. Лобзин, С.М. Захаренко, К.П. Плотников. СПб. : Спец. Лит, 2002. - 190 с.

46. Мавзютов, А.Р. Бактериальный вагиноз: этиопатогенетические аспекты / А.Р. Мавзютов, К.Р. Бондаренко, В.М. Бондаренко // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2007. - № 6. - С. 93-99.

47. Мази на основе жидких бактериальных культур и культуральных жидкостей лактобацилл / Е.И. Молохова, В.А. Несчисляев, И.В. Фадеева, Л.П. Чистохина // Человек и лекарство: тез. докл. VII Рос. нац. конгр. М., 2000.-С. 616.

48. Малкоч, А.В. Значение пребиотиков для функционирования кишечной микрофлоры / А.В. Малкоч, С.В. Бельмер, Т.В. Гасилина // Рус. мед. журн. -2008.-Т. 16, №3.-С. 151-153.

49. Малов, В.А. Микробиоценоз желудочно-кишечного тракта: современное состояние проблемы / В.А. Малов, Н.М. Гюлазян // Лечащий врач. -2007.-№ 6.-С. 10-13.

50. Маянский, А.Н. Микробиология для врачей (очерки патогенетической микробиологии) / А.Н. Маянский. Н. Новгород. : Изд-во Нижегород. гос. мед. акад., 1999. - 400 с.

51. Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2т. / М.Д. Машков-ский. М. : Новая Волна, 2001. - Т. 2. - 608 с.

52. Метаболиты Bacillus subtilis как новые перспективные пробиотиче-ские препараты / М.Ю. Волков, Е.И. Ткаченко, Е.В. Воробейчиков, А.В. Синица // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2007. - № 2. -С. 75-79.

53. Микробная экология влагалища / Л.И. Кафарская, О.В. Коршунова, Б.А. Ефимов и др. // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. -2002.-№6.-С. 91-99.

54. Минушкин, О.Н. Дисбактериоз кишечника: современное состояние проблемы / О.Н. Минушкин // Consilium medicum. 2007. — Т. 9, № 67. - С. 59-64.

55. Митрохин, С.Д. Дисбактериоз: современные представления. Диагностика возможности лечения / С.Д. Митрохин // Антибиотики и химиотерапия. -2004. Т. 49, № 7. - С. 23-33.

56. Молекулярные основы продукции и действия бактериоцинов / Л.П. Блинкова, М.Л. Альтшулер, Е.С. Дорофеева, О.Б. Горобец // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2007. - № 2. - С. 97-103.

57. Молохова, Е.И. Выбор состава и оценка качества мазевой композиции с лактобациллами / Е.И. Молохова, В.А. Несчисляев // Фармация в XXI веке: инновации и традиции: тез. докл. междунар. науч. конф. СПб., 1999. -С. 64.

58. Молохова, Е.И. Лекарственные препараты в терапии бактериального вагиноза / Е.И. Молохова, В.Н. Тарасевич, Л.П. Чистохина // Фармация. -2000. № 2. - С. 21-22.

59. Молохова, Е.И. Новые мазевые основы на базе культуральных жидкостей лактобацилл / Е.И. Молохова, Л.П. Чистохина, В.А. Несчисляев // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции : материалы конф. Пятигорск, 2003. - С. 139-141.

60. Молохова, Е.И. Разработка состава суппозиториев с лактобактери-ном / Е.И. Молохова, В.Н. Тарасевич, В.А. Несчисляев // Фармация. 1994. -№2.-С. 28-30.

61. Молохова, Е.И. Экспериментально-теоретическое обоснование составов, технологии и стандартизация лекарственных форм биопрепаратов : дис. . д-ра. фарм. наук / Е.И. Молохова. — Пермь, 2003. 396с.

62. Муравьев, И.А. Исследования реологических свойств гидрофильных мазей глицирама / И.А. Муравьев, Т.Ю. Манджиголадзе // Фармация. -1997. -№ 1.-С.15-17.

63. Мухина, Ю.Г. Иммунная система и микрофлора кишечника у детей. Обоснование функционального питания / Ю.Г. Мухина, М.И. Дубровская, Л.И. Кафарская // Фарматека. 2006. - № 2. - С. 22-27.

64. Назарова, Е.К. Микробиоценоз влагалища и его нарушения. Этиология, патогенез, клиника, лабораторная диагностика / Е.К. Назарова, Е.И. Гиммельфарб, Л.Г. Созаева // Антибиотики и химиотерапия. — 2002. Т. 47, № 4. - С. 34-42.

65. Несчисляев, В.А. Новый пробиотический препарат «Микростим» /

66. B.А. Несчисляев, Г.М. Сафонова, Л.П. Чистохина // Пробиотические организмы — современное состояние вопроса и перспективы использования: материалы междунар. науч. практ. конф. - М., 2002. - С. 49.

67. Несчисляев, В.А. Пробиотики: микробиологические и технологические аспекты получения, контроля и конструирования препаратов: дис. д-ра. мед. наук / В.А. Несчисляев. Пермь, 2005. - 277 с.

68. Несчисляев, В.А. Технологические перспективы в производстве препаратов для бактериотерапии / В.А. Несчисляев, Н.Б. Кравцова // Актуальные вопросы медицинской биотехнологии: материалы науч. конф. — Томск, 1991.-С. 133-134.

69. Нижевич, А.А. Пробиотики в лечении острых инфекционных диарей у детей: проблемы и перспективы / А.А. Нижевич, В.Р. Амирова // Урал, мед. журн. 2006. -№ 5. - С. 13-17.

70. Парфенов, А.А. Аминокислоты травы пустырника пятилопастного / А.А. Парфенов, Н.С. Фурса // Фармация. 2007. - № 7. - С. 6-7.

71. Пастухова, В.А. Эффективность Хилак форте при коррекции микроэкологических нарушений в кишечнике у детей с атопическими дерматитами / В.А. Пастухова, О.В. Зайцева, М.Д. Ардатская // Фарматека. 2007. - № 6.1. C. 78-82.

72. Перспективные разработки по созданию новых лекарственных форм препаратов бактериотерапии / Е.И. Молохова, В.А. Несчисляев, Г.А. Панкратова и др. // Современная вакцинология : тез. докл. II междунар. конф.-Пермь, 1998.-С. 146-147.

73. Поздеев, O.K. Медицинская микробиология / O.K. Поздеев; под ред. В.И. Покровского. 3-е изд., стереотип. - М. : ГЭОТАР-Медиа, 2005. - 768 с.

74. Потапов, А.С. Применение пробиотиков врачами общей практики / А.С. Потапов, Н.Л. Пахомовская, С.И. Полякова // Справ, поликлин, врача. -2007. № 6. - С. 45-49.

75. Потенциометрическое определение констант диссоциации мезато-на и адреналина / С.И. Карпов, М.В. Матвеева, В.Ф. Селеменев и др. // Хим.- фарм. журн. 2005. - Т. 39, № 12. - С. 47-50.

76. Потенциометрическое титрование в анализе водных извлечений / Н.Н. Федоровский, А.И. Марахова, А.А. Сорокина, О.В. Ольшанская // Фармация. 2008. - № 2. - С. 15-16.

77. Прилепская, В.Н. Нарушение микробиоценоза влагалища, пути его коррекции / В.Н. Прилепская, Г.Р. Байрамова // Гинекология. 2007. - Т. 9, № 4. - С. 25-27.

78. Пробиотики в коррекции дисбиозов // Урал. мед. журн. 2005. - № 6.-С. 55-56.

79. Проблемы создания лекарственных форм препаратов лакто- и би-фидобактерий / Е.И. Молохова, В.А. Несчисляев, B.C. Пучнин и др. // Человек и лекарство: тез. докл. II Рос. нац. конгр. М., 1995. - С. 321.

80. Радзинский, В.Е. Роль Actimel в восстановлении нарушенного микробиоценоза половых органов беременных / В.Е. Радзинский, И.М. Ордиянц // Фарматека. 2006. - № 2. - С. 62-65.

81. Разветвленные антимикробные пептиды / А.Ю. Хрущев, А.И. Каш-паров, JI.B. Клименко, Ю.В. Митин // Биоорг. химия. 2007. - Т. 33, № 6. - С. 588-592.

82. Реологические свойства мазей с полиненасыщенными жирными кислотами микробиологического происхождения / И.В. Кутузова, Ю.В. Степанов, Н.К. Бабанова, А.И. Тенцова // Фармация. 1991. - № 2. - С. 30-35.

83. Роль биологических свойств вагинальных лактобацилл в процессах колонизации / С.В. Черкасов, Т.М. Забирова, А.В. Сгибнев, И.В. Черкасов // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2003. - № 4. — С. 6164.

84. Ручкина, И.Н. Место пробиотиков в концепции функционального питания / И.Н. Ручкина, Д.В. Усенко // Consilium medicum. 2007. - Т. 9, № 7. - С. 54-58.

85. Савицкая, И.С. Подавление мутагенной активности метаболитов кишечника при нормобиоцеозе / И.С. Савицкая, В.М. Бондаренко // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2008. - № 3. - С. 53-58.

86. Санитарно-микробиологический контроль в пищевой и фармацевтической промышленности / В.А. Галынкин, Н.А. Заикина, К.А. Каграманова и др. СПб., 2004. - 248с.

87. Северьянова, JI.A. Современные представления о действии аминокислоты L-лизина на нервную и иммунную регуляторные системы / Л.А. Северьянова, М.Е. Долгинцев // Человек и его здоровье. 2007. - № 2. - С. 6779.

88. Сенченко, С.П. Разработка методов анализа и оптимизация состава лекарственного препарата на основе гидролизата молочнокислых бактерий: автореф. дис. . канд. фарм. наук. / С.П. Сенченко. Пятигорск, 2006. — 24 с.

89. Серова, Г. Одна капсула и миллионы полезных бактерий / Г. Серова // Фарм. ведомости. 2002. - № 11. - С. 25-27.

90. Скворцов, В.В. Дисбиоз кишечника и антибиотик-ассоциированная диарея, диагностика и лечение / В.В. Скворцов // Лечащий врач. 2008. - № 2. - С. 43-47.

91. Состав и биологическая активность экзометаболитов Escherichia coli М-17 / Т.Я. Вахитов, Е.Н. Момот, О.Н. Шалаева, Л.Н. Петров // Журн. микробиологии, иммунологии и эпидемиологии. 2003. - № 6. - С. 20-25.

92. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / под ред. М.О. Биргера. М. : Медицина, 1982. -464 с.

93. Татюник, В.Л. Патогенез, диагностика и методы лечения бактериального вагиноза / В.Л. Татюник // Фарматека. 2005. - № 2. - С. 20-24.

94. Титова, А.В. Изучение антибактериального действия низкомолекулярного поликатионного пептида варнерина на антибиотикорезистентныештаммы Staphylococcus epidermidis.: автореф. дис. .канд. биол. наук / А.В. Титова. Пермь, 2002. — 23 с.

95. Топчий, Н.В. Проблема дисбиоза в общей семейной (врачебной) практике / Н.В. Топчий // Фарматека. 2007. - № 8-9. - С. 46-52.

96. Топчий, Н.В. Проблема дисбиоза и здоровье семьи / Н.В. Топчий // Фарматека. 2007. - № 20. - С. 59-66.

97. Урсова, Н.И. Хилак форте: новое направление в коррекции дис-бактериоза кишечника у детей / Н.И. Урсова, Г.В. Римарчук, К.И. Савицкая // Фарматека. 2005. - № 2. - С. 25-29.

98. Урсова, Н.И. Пробиотики в комплексной коррекции дисбактериоза кишечника у детей / Н.И. Урсова // Лечащий врач. 2008. - № 1. - С. 12-13.

99. Усенко, Д.В. Возможности использования пробиотического продукта Actimel в педиатрии / Д.В. Усенко, А.В. Горелов // Фарматека. 2006. -№ 5.- С. 83-87.

100. Фармацевтическая микробиология / В.А. Галынкин, Н.А. Заикина, В.И. Кочеровец и др. М. : Арнебия, 2003. - 352 с.

101. Фиев, Д.Н. Применение бактериального экстракта Escherichia coli Уро-Ваксома© в лечении и профилактике неосложненной инфекции мочевых путей / Д.Н. Фиев, А.З. Винарсв // Фарматека. 2006. - № 10. - С. 15-18.

102. ФС 42-3874-99 Физико-химические, химические, физические и иммунохимические методы контроля иммунобиологических препаратов. 23 с.

103. ФСП 42-05047298054 Лактобактерин сухой / Введ. 13.10.06. до 13.10.11.-15 с.

104. Хамм, М. Основы здорового питания / М. Хамм, Б. Лангер // Биол. медицина. 2007. - № 2. - С. 60-63.

105. Хайгер, Д. Высокоэффективный капиллярный электрофорез. Введение № документа: 5968-9963 Е. март 2000г. : перевод с англ. Б.П. Лапина. -115 с.

106. Чистохина, Л.П. Иммунобиологическая характеристика препарата «Микростим» на основе метаболитов лактобактерий: дис. . канд. мед. наук / Л.П. Чистохина. Пермь, 2004. - 171 с.

107. Шаршунова, М. Токослойная хроматография в фармации и клинической биохимии в двух частях / М. Шаршунова, В. Шварц, Ч. Михалец. М. : Мир, 1980.-629 с.

108. Шендеров, Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание: в 2 т. Т. I. : Микрофлора человека и животных и ее функции. / Б.А. Шендеров. М. : ГРАНТЪ, 1998. - 288 с.

109. Шендеров, Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание: в 2 т. Т. II. : Социально-экологические и клинические последствия дисбаланса микробной экологии человека и животных. / Б.А. Ше-недеров. М. : ГРАНТЪ, 1998. - 416 с.

110. Цагарейшвили, Г.В. Биофармацевтические, фармакокинетические и технологические аспекты создания мягких лекарственных форм: ректальные препараты / Г.В. Цагарейшвили, В.А. Головкин, Т.А. Грошовый. Тбилиси. : «Мецниереба», 1987. - 263 с.

111. Anderson, R. The significance and potential molecular mechanism of gastrointestinal barrier homeostasis / R. Anderson // Scand. J. Gastroenterol. -1997.-Vol. 32, № l.-P. 1073-1083.

112. Antihypertensive effect of extract of Lactobacillus casei in patients with hypertension / K. Nacajima et al. // J. Clin. Biochem. Nutr. 1995. - Vol. 18. -P. 181-187.

113. Bogovic, M.B. Bacteriocinogenic activity of Lactobacilli isolated from cheese and baaby faeces / M.B. Bogovic, I.Rogelj // Food Technol. And Biotech-nol. 1999. - № 2. - P. 93-100.

114. Borriello, S.P. Microbial flora of the gastrointestinal tract / S.P. Bor-riello // Microbial metabolism in the difestive tract / Ed. M.J. Hill.- New York, 1986.-P. 3-15.

115. Brock, T.D. Biology of Microorganism. / Ed.M.T. Madigan, J.N. Mar-tinko, J. Parker. London: Prentice Hall Internacional, 1997. - 997 p.

116. Castellano, P. Mode of action of lactocin 705, a two- component bacte-riocin from Lactobacillus casei CRL 705 / P. Castellano, R.Raya, G. Vignolo // Intern. J. Food Microbiol. 2003. Vol. 85, № 1-2. - P. 35-43.

117. Complementary and overlapping selectity of the two-peptide bacterio-cins plantaricin EF and JK / G.N. Moll et al. // J. Bacteriol. 1999. - Vol. 181. -P. 4848-4852.

118. Cross, M.L. Anti-allergy properties of fermented foods : am important immunoregulatory mechanism of lactic acid bacteria ? / M.L. Cross, L.M. Stevenson, H.L. Gill // Intern. J. Immunopharmacol. 2001. - Vol. 1, № 5. - P. 891-901.

119. Diep, D.B. A bacteriocin — like peptide induces bacteriocin synthesis in Lactobacillus plantarum Cll / D.B. Diep, L.S. Havarstein, I.F. Nes // Mol. Microbiol. 1995. - Vol. 18 - P. 631-639.

120. Garneau, S. Two-peptide bacteriocins produced by lactic acid bacteria / S. Garneau, N.I. Martin, J. C. Vederas // Biochim. 2002. - Vol.84, № 5-6. - P. 577-592.

121. Grunewald, К. K. Serum cholesterol levels in rats fed fermented by Lactobacillus acidophilus / K.K. Grunewald // J. Food Sci. 1982. - Vol. 47. - P. 153-157.

122. Havell, E.A. The role of the flora in cytokine responses / E.A. Hav-ell // Microb. Ecol. Health and Disease. 1999. - № 2. - P. 104.

123. Lantibiotics : biosintesis, mode of action and applicacions / C. Van Kraaij et al. //Natur. Prod. Repts. 1999. - Vol. 16, № 5. - P. 575-587.

124. Lidbeck, A. Lactobacilli, anticarcinogenic activites and human intes-tinalal microflora / A. Lidbeck // Eur. J. Cancer. Prew. 1992. - Vol. 1, № 5. - P. 341-353.

125. MacFarlane, G.T. Human colonic microbiota : ecology, physiology and metabolic protential of intestinal bacteria / G.T. MacFarlane, S. MacFarlane // Scand. J. Gastroenterol. 1997. - Vol. 32, Suppl. 222. - P. 3-10.

126. Malolepsza-Jarmolowska, K. Studies on gynaecological hydrophilic lactic acid preparations. Part 3: Effects of the properties of methylcellulose gels / K. Malolepsza-Jarmolowska, A.A. Kubis // Pharmazie 2000. 55, № 8. - P. 160162.

127. Matzusaki T. Modulating immune responses with probiotic bacteria / T. Matzusaki, J. Chin // Immunol, and Cell. Biol. 2000. - Vol. 78, № 1. - p. 67-73.

128. Messens, W. Inhibitory substances produced by Lactobacilli isolated from sourdoughs a review / W. Messens, L.D. Vuyst // Intern. J. Food Microbiol. 2002. - Vol. 72, № 1-2. - P. 31-43.

129. Mode of action, purification and amino acid sequense of plantaricin С19, an anti-Listeria bacteriocin produced by Lactobacillus plantarum C19 / A. Atrin et al. // Intern. J. Food Microbiol. 2001. - Vol. 68. - P. 93-104.

130. Patent 5929109 USA, A61 K39/02, A61 К 45/00. Enhancing and stabilizing agent of the activity of Bifidus factor / M. Hiroharu, I. Kakuhai, K. Tsu-tomu. Filed dates 03.10.97; issued dates 27.07.99.

131. Patton, G.C. New developments in lantibiotic biosynthesis and mode of action / G.C. Patton, W.A. van der Donk // Curr. Opin. Micribiol. 2005, Vol. 8 -P. 543-551.

132. Sablon, E. Antimicrobial peptides of lactic acid bacteria: mode of action, genetics and biosynthesis / E. Sablon, B. Contreras, E. Vandamme // Adv. Biochem. Eng. Biotechnol. 2000. - Vol. 68. - P. 21-60.

133. Salminem, S. Gut flora in normal and disorderd states / S. Salminen, E. Isolauri, T.Onella // Chemother. 1995. - Vol. 41. - P. 5-15.

134. Sutter, V.L. Anaerobes as normal oral flora / V.L. Sutter // Rev. Infect. Dis. 1984. - Vol. 6, Suppl. 1. - P. 16-24.