Совершенствование ветеринарно-санитарного контроля безопасности и качества производства мясных консервов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.06, кандидат ветеринарных наук Горобчук, Елена Алексеевна

• Горобчук, Елена Алексеевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Горобчук, Елена Алексеевна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Мясные консервы. Проблема безопасности и качества

1.2. Методы контроля безопасности и качества сырья и продукции биотехнологии

1.3. Ветеринарно-санитарный контроль при производстве консервов

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Цель и задачи исследований

2.2. Материалы и методы исследований

2.2.1. Контроль качества сырья, мясных консервов и санитарного состояния объектов консервного производства

2.2.2. Определение S. typhimurium и ботулинического токсина на основе индикаторных иммунохроматографических элементов

2.2.3. Идентификация микробных контаминаций сырья на основе

ПЦР с последующей ДНК-гибридизацией

2.3. Результаты исследований

2.3.1. Ветеринарно-санитарная оценка производства мясных консервов

2.3.1.1. Ветеринарно-санитарная оценка объектов консервного цеха

2.3.1.2. Контроль безопасности мясного и растительного сырья для производства мясных консервов

2.3.1.3. Исследование качества и безопасности мясных консервов

2.3.2. Совершенствование идентификации Е. coli, S. typhimurium, Staph, aureus в мясном и растительном сырье на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией

2.3.3. Разработка методики идентификации S. typhimurium и выявления ботулинического токсина с помощью индикаторных иммунохроматографических тест-систем в консервном производстве

2.3.3.1. Испытания чувствительности иммунохроматографического метода на чистой культуре S. typhimurium

2.3.3.2. Определение чувствительности индикаторного иммунохроматографического элемента для выявления ботулинического токсина

2.3.3.3. Испытания иммунохроматографического метода по обнаружению S. typhimurium и ботулинического токсина в лабораторных условиях

2.3.3.4. Результаты испытания иммунохроматографического метода для выявления S. typhimurium и ботулинического токсина в консервном производстве

2.3.4. Расчет предполагаемой экономической эффективности от внедрения иммунохроматографического метода для контроля консервного производства

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование ветеринарно-санитарного контроля безопасности и качества производства мясных консервов»

Актуальность темы. Развитие современной мясной промышленности связано с производством продуктов не только кратковременного, но и длительного срока годности, при котором осуществляется наиболее эффективное использование мясного сырья. К такому виду продукции относятся стерилизованные мясные консервы, основное преимущество которых заключается в возможности длительного хранения без потерь питательных и вкусовых качеств. Наряду с этим, главной составной частью безопасности и качества выпускаемой консервной продукции служат показатели ветеринарно-санитарного состояния перерабатываемого сырья, производственных помещений, оборудования и соблюдение установленных требований к технологическим процессам. При этом методы оценки качества продукции консервного производства требуют значительных затрат времени и материалов, что и побуждает к проведению научно-исследовательских работ по изысканию новых и совершенствованию действующих методов с целью сокращения времени исследования и получения качественных и достоверных результатов.

На сегодняшний день перспективными представляются методы ДНК- и иммунодиагностики (А.Я. Самуйленко, 2003; И.Г. Гламаздин, 2003; А.Ф. Валихов, И.Н. Комарова, 2004; В.В. Светличкин, 2005; С.П. Ярков и др., 2007; R. Higuchi et al., 1992; С.С. Huang, Т.М. Pan, 2005), позволяющие проводить анализ термообработанной продукции, идентифицировать возбудителей и определять их токсины, но вместе с тем, требующих их усовершенствования.

Особого внимания требуют микробиологические методы исследования объектов ветеринарного надзора. Это связано с тем, что в практических условиях ветеринарные лаборатории выполняют значительный объем работ, связанных с бактериологическим контролем санитарного состояния производства (Л.Б. Сметанина и др., 2004; Ю.Г. Костенко, 2006; М.А. Шикина, 2006).

Важным элементом закона «О техническом регулировании» является тезис о не введении в заблуждение потребителей, поэтому на стадиях приемки мясного сырья необходимо проводить его идентификацию, чтобы мясные консервы, их компонентный состав соответствовал требованиям технических регламентов, национальных и отраслевых стандартов (В .Г. Версан, 2003; А.Я. Калинин, 2003). г

В связи с изложенным, совершенствование контроля показателей безопасности и качества производства мясных консервов на основе ускоренных, чувствительных и специфичных методов является актуальной задачей.

Научная новизна Разработаны методические подходы для оценки > качества и безопасности сырья, готовой продукции, а также ветеринарно-санитарного состояния объектов консервного производства на основе ускоренных методов ДНК- и иммунодиагностики. Разработаны и испытаны методики для выявления S. typhimurium и ботулинического токсина с помощью индикаторных иммунохроматографических элементов (ИИХЭ), включающие модифицированные этапы пробоподготовки с использованием дифференциального центрифугирования. Определена чувствительность, специфичность разработанных методов. Усовершенствована методика одновременной индикации Е. coli, S. typhimurium, Staph, aureus на основе амплификации с неспецифическими праймерами и последующей ДНК-гибридизацией со специфическими ДНК-зондами. Установлена корреляция результатов исследований, полученных с использованием общепринятых и предлагаемых методик, что доказывает возможность их комплексного или раздельного применения для обеспечения ветеринарно-санитарного контроля качества консервного производства.

Практическая ценность

На основании результатов исследований разработаны «Методические рекомендации по индикации сальмонелл группы В в сырье растительного и животного происхождения, мясных консервах и объектах внешней среды на основе индикаторных иммунохроматографических элементов» (п.п. 5.1, 6.2.1, 6.2.2, 6.3) (утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии 11.12.2008 г.). Материалы исследований включены в проект Национального стандарта Российской Федерации «Растительная продукция и корма, зерно. Экспресс-метод обнаружения специфичных белков». Научные разработки используются в учебном процессе по курсу «Ветеринарная санитария» и «Товароведение», а также на курсах повышения квалификации ветеринарных врачей.

Апробация работы

Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

4-й Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины и ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйственной продукции» (М.: МГУПБ, 2002);

- 5-й Международной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины, ветеринарно-санитарного контроля и биологической безопасности сельскохозяйственной продукции» (М.: МГУПБ, 2004);

- VI Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (М.: МГУПБ, 2007 г.);

Международной научно-практической конференции преподавателей, молодых ученых и аспирантов аграрных вузов РФ «Актуальные проблемы современного аграрного производства» (М.: РУДН, 2008 г.);

7 - VII Международной научной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (М.: МГУПБ, 2008 г.).

Основные положения, выносимые на защиту

1. Ветеринарно-санитарная оценка мясного и растительного сырья, готовой продукции и объектов консервного производства.

2. Совершенствование идентификации Е. coli, S. typhimurium, Staph, aureus из мясного и растительного сырья для t производства консервов на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией.

3. Разработка методики идентификации S. typhimurium с помощью индикаторных иммунохроматографических тест-систем.

4. Методические подходы к определению ботулинического токсина в мясных консервах с помощью индикаторных иммунохроматографических элементов.

Публикации. Результаты исследований отражены в 10- научных работах, в том числе 3 статьях - в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

За проект «Разработка экспресс-методов определения микробных контаминаций в продукции, технологическом оборудовании мясоперерабатывающих предприятий на основе иммунохроматографии» в 2007 году был получен грант ассоциации «Университетский комплекс прикладной биотехнологии».

Структура и объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложений.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза», Горобчук, Елена Алексеевна

выводы

1. Усовершенствован контроль качества и безопасности мясного сырья и вырабатываемых из него консервов на основе ускоренных методов иммунохроматографии и амплификации' с последующей ДНК-гибридизацией. Показана высокая специфичность, экспрессность методов и корреляция результатов исследований с общепринятыми бактериологическими методами.

2. Общая бактериальная обсемененность поверхностей ограждающих конструкций и оборудования консервного цеха к концу рабочей недели находилась в пределах от (1,10±0,05)-105 до (4,74±0,23)-10? КОЕ/см . После проведения влажной дезинфекции 2%-м< раствором РИК-Д этот показатель снижается от (1,6±0,07)-102 до (2,74±0,13>102 КОЕ/см2.

3. Установлена зависимость бактериальной обсемененности водопроводной питьевой воды, поступающей в. консервный цех. В весенний и осенний периоды года на момент отбора проб в 7,1-12,5 % случаев выявлены бактерии группы кишечных палочек, хотя количество мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов находилось в пределах нормы (от 44,3±2,1 до 47,5±2,5 КОЕ/см3). В летний.и зимний сезоны года в воде патогенные микроорганизмы не обнаружены.

4. Общая бактериальная обсемененность мясного сырья, используемого для производства консервов находится в пределах допустимой нормы. Однако в мясе, поступающем в блоках, выявлены бактерии группы кишечных палочек в 3,6-4,7 % случаев.

5. Усовершенствована методика на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией, позволяющая с высокой специфичностью проводить одновременную индикацию Е. coli, S. typhimurium и Staph, aureus в мясном и растительном сырье, а также сокращающая, по сравнению с общепринятым бактериологическим методом, время анализа в 2,3 раза.

6. Разработаны методики выявления S. typhimurium и ботулинического токсина с помощью индикаторных иммунохроматографических элементов, чувствительность которых составляет 1,0-105 м.к./г и 3 нг/мл соответственно.

7. Установлена возможность практического применения индикаторных иммунохроматографических элементов для проведения исследований, в т.ч. и скрининговых, по выявлению сальмонелл в мясном, растительном сырье и объектах консервного производства, а также ботулинического токсина в готовой продукции в течение 1-2 ч.

8. Предполагаемый экономический эффект за счет применения индикаторных иммунохроматографических элементов при выявлении сальмонелл и ботулинического токсина составит 99,6 и 351,8 тыс. руб. соответственно на 1000 исследований.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

Методические рекомендации «Индикация сальмонелл группы В в сырье растительного и животного происхождения, мясных консервах и объектах внешней среды на основе индикаторных иммунохроматографических элементов», (утверждены Отделом ветеринарной медицины Россельхозакадемии, 11 декабря 2008 года).

Методические рекомендации могут быть использованы в производственных лабораториях и лабораториях при продовольственных рынках, базах и других объектах ветеринарного надзора для ветеринарно-санитарной экспертизы сырья и продуктов растительного происхождения.

3. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время важное значение приобретает своевременная ветеринарно-санитарная экспертиза сырья и продуктов животного происхождения. Это связано с защитой животных и человека от опасных зоонозных заболеваний, возбудители которых могут контаминировать мясо, яйца, субпродукты и продукты их переработки.

Следует обратить особое внимание на тот факт, что более 60% сырья животного происхождения импортируется в нашу страну из Европы, Азии, Америки и других стран, не всегда благополучных по инфекционным и инвазионным заболеваниям. В этой связи специальные ветеринарные и медицинские службы проводят мониторинг эпизоотического состояния отдельных регионов и стран, а также осуществляют контроль безопасности и качества- завозимой продукции непосредственно на местах закупок или таможенных терминалах. Тем не менее, имеют место случаи регистрации импорта некачественной продукции в ветеринарно-санитарном отношении.

С целью снижения- зависимости от стран-экспортеров животноводческой продукции, а также получения качественного и безопасного мясного сырья многие мясоперерабатывающие предприятия входят в состав крупных объединений, так называемых* холдингов, имеющих свои животноводческие хозяйства по выращиванию и откорму крупного рогатого скота, свиней, овец и птицы. Такая организация агропромышленного комплекса позволяет в определенной' мере восполнить дефицит пищевого сырья животного происхождения и получить существенный экономический и социальный эффект. В то же время дальнейшее развитие отечественного животноводства, особенно свиноводства и птицеводства открывает возможность в ближайшие годы получать продукцию более качественную по сравнению с импортной.

Для изготовления консервов направляют сырье не только, благополучное в ветеринарно-санитарном отношении, но и мясо, полученное от убоя больных животных (туберкулез, бруцеллез, рожа и др.). В этой связи можно предположить, что объекты консервного цеха (ограждающие конструкции, оборудование, инструменты и дрО обсеменены различной микрофлорой, в т.ч. патогенной. С целью проверки этого предположения нами было проведено достаточно большое количество микробиологических исследований объектов консервного цеха, а также используемой* водопроводной питьевой воды, мясного сырья и готовой продукции. При этом было исследовано 224 смыва с поверхностей ограждающих конструкций, технологического оборудования и инструментов. Исследованиями установлена высокая; бактериальная обсемененность пола (4,74±0,23) 105 КОЕ/см2, нижних частей стен (3,25±0,17)-105 КОЕ/см2, транспортера (1,89±0,09)-105 КОЕ/см2 и

5 2 напольных тележек (3,50±0,16)-10 КОЕ/см . В их числе выявлены бактерии группы кишечных палочек; в; 10-20 % и сульфитредуцирующие клостридии в 7-10 % случаев; В то же время обсемененность технологического оборудования: ниже примерно в два раза, что можно объяснить их санитарной обработкой в конце каждой рабочей смены.

При ветеринарно-санитарной оценке цеха важное значение имеет микробиологическая безопасность мясного- сырья. Результаты выполненных нами исследований показали, что свинина и говядина, направляемые для изготовления консервов, имеют общую бактериальную обсемененность, не превышающую допустимую^ норму. Так в пробах свинины и говядины замороженной в полутушах количество КОЕ/г не превышало (0,98±0,06)-104, замороженной в блоках - (2,84±0,11)-105 и охлажденной - (0,92±0,04)-103. Следует отметить, что эти данные, свидетельствуют о невысокой, общей микробной загрязненности мясного сырья. Однако необходимо иметь в виду, что во время его размораживания, временного хранения, транспортировки и обвалки может

91 происходить резкое размножение остаточных микроорганизмов, так как мясное сырье является для них оптимальной питательной средой. Особенно необходимо обращать внимание на исключение сальмонелл и токсигенных анаэробов.

Помимо микробиологического контроля мясного сырья важное значение имеет определение его видовой принадлежности. Фальсификацию некоторых видов мяса органолептически определить I сложно (например, мясо в блоках), а в ряде случаев, невозможно. Особенно это относится к случаям, когда мясо измельчено, смешано со специями, консервантами, что приводит к изменению цвета, запаха и консистенции. В таких случаях применяются гистологические, иммунологические методы и методы на основе ДНК-диагностики.

Анализ методов определения видовой принадлежности мяса показал, что перспективным является иммунологический метод. Испытание метода иммунодиффузии с применением тест-системы серии ORBIT, PRIME, SOFT показало полную его специфичность - четкую идентификацию свинины от мяса других видов животных.

При производстве мясных консервов в обязательном порядке в качестве специй применяют перец молотый, горошком и лавровый лист. В ряде случаев в качестве добавки используют растительные ингредиенты, такие как репчатый лук и морковь. Учитывая, что они также могут быть обсеменены различной патогенной микрофлорой, нами проведен их бактериологический контроль на исключение бактерий группы кишечных палочек, мезофильных анаэробов, термофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов. Полученные результаты анализа подтверждают вывод о ■ необходимости входного бактериологического контроля выше перечисленных ингредиентов.

Например, общая бактериальная обсемененность моркови не превышала (в

КОЕ/г) (5,2±0,3>104, лука - (1,7±0,08>103. При этом из сушеной моркови, в одном случае из 36, выявлены сульфитредуцирующие микроорганизмы. Из

92 растительных добавок не были выделены бактерии группы кишечных палочек, термофильные аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы.

Таким образом, результаты исследований мясного сырья- и добавляемых в консервы ингредиентов свидетельствуют об их соответствии требованиям нормативных документов по микробиологическим характеристикам.

При ветеринарно-санитарной оценке консервного производства, учитывают не только микробную загрязненность объектов цеха и используемого сырья, но и конечного продукта, т.е. консервов. По данным некоторых исследователей, несмотря на- жесткий режим стерилизации, в ряде случаев' в консервах выявляют различные микроорганизмы. По нашим данным исследованные 50 банок консервов* показали их полную стерильность. Однако качество * консервов- оценивается не только по микробиологическим показателям, но и химическим. При, подборе режимов стерилизации учитывают не только тепловой режим, но-и его влияние на денатурацию белка мяса. Чем выше температура стерилизации и ее продолжительность, тем ниже содержание белка в консервированном продукте. Выполненными химическими, исследованиями" консервов «Говядина тушеная» и «Свинина тушеная» установлено, что в первых содержание белка составляет 17,3±0,52 %, а во вторых - 14,5±0,55 % при содержании жира 17,8±0,71 % и 31,6±1,5 % соответственно. Исследования показали, что консервы отличаются высоким содержанием протеина* при-минимальном содержании жира.

Одним из важнейших условий санитарного^ благополучия консервного производства является его обеспечение качественной питьевой водой, используемой'в,технологических процессах. Вода должна соответствовать ГОСТ 18963-73 «Вода питьевая. Методы санитарнобактериологического анализа». При наличии в воде микроорганизмов в количествах, превышающих показатели ГОСТа неизбежно обсеменение

93 поверхностей технологического оборудования, инструментов, консервной тары и, в конечном итоге, сырья и готовой продукции.

Выполненные нами микробиологические исследования показали, что вода, поступающая в консервный цех, в весенний и осенний сезоны года не отвечает установленным санитарно-гигиеническим требованиям, так как в ней обнаруживаются бактерии группы кишечных палочек. Полученные данные свидетельствуют об имевшем место неудовлетворительной дезинфекции воды на стадии водоподготовки или бактериальной обсемененности внутренней поверхности водопроводной системы на момент отбора проб. Поэтому в пробах воды, отобранной из чана для охлаждения консервов, выявлены эти же микроорганизмы. В то же время в пробах воды, взятой из чана для проверки герметичности консервов, патогенные микроорганизмы обнаружены не были. Это связано с высокой температурой воды, поддерживаемой постоянно на уровне 85-87 °С.

Вторая и основная часть нашей работы была посвящена усовершенствованию некоторых методов ветеринарно-санитарного контроля мясного сырья и объектов консервного производства.

Микробиологические методы исследования объектов ветеринарного надзора также требуют усовершенствования с целью ускорения анализов и повышения уровня достоверности получаемых результатов. Это объясняется тем, что в практических условиях ветеринарные лаборатории выполняют значительный объем работ, связанных с бактериологическим контролем санитарного состояния производства. Например, в консервном производстве необходимо осуществлять входной контроль мясного сырья и выходной — готовой продукции, периодически проводить исследования смывов с поверхностей производственных помещений, технологического оборудования, инструментов, транспортных средств, тары и воздуха помещений. Применяемые для этого микробиологические методы хотя и достоверны, но их воспроизведение требует значительных затрат времени и материалов. В этой связи в нашей стране и за рубежом постоянно

94 методов контроля с целью снижения времени исследования и получения специфичных и достоверных результатов. Учитывая это, нами была усовершенствована методика выделения и идентификации Е. coli, S. typhimurium и Staph, aureus на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией. В методику были включены последовательно проводимая гомогенизация пробы, элюирование и подращивание культур, центрифугирование, элюирование полученного осадка в буфере с лизоцимом и протеиназой К. ДНК осаждали этанолом. В дальнейшем осуществляли амплификацию ликвота с неспецифическими нуклеотидными праймерами, меченными биотином и гибридизацию ампликонов со специфическими ДНК-зондами на мембранных нитроцеллюлозных фильтрах. Испытание усовершенствованного метода в такой модификации показало высокую специфичность выявления вышеприведенных микроорганизмов из мясного сырья, специй и растительных добавок. Методика позволяет получить результаты- анализа через 17-18 ч.

Выделение некоторых микроорганизмов возможно не только на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией, но с применением индикаторных иммунохроматографических элементов

ИИХЭ). Этот метод относительно новый в лабораторной практике и в основном применяется для определения некоторых веществ в биологических материалах. Основное достоинство метода — специфичность и быстрота получения результата исследования. Поэтому в литературе встречается определение иммунохроматографического анализа, как метод сухой иммунохимии, стрип-тест, QuikStrip cassette, QuikStrip dipstick, экспресс-тест или экспресс-анализ. Исходя из этого, в последние годы проводятся исследования по модификации иммунохроматографического метода для экспрессной индикации некоторых возбудителей особо опасных заболеваний, как сап, сибирская

95 язва, туляремия, чума и др. на примере чистых культур (Волох О.Х. и др., 2005; Ярков С.П. и др., 2003, 2007 и др.).

Нами так же были проведены эксперименты по установлению возможности применения иммунохроматографического метода для индикации сальмонелл из мясного и растительного сырья, а также объектов консервного цеха и выявления. ботулинического токсина" из мясных консервах. При выполнении данной работы необходимо было разработать методы отбора проб, последовательность их обработки^ для дальнейшего исследования, а также выполнить другие действия с учетом-чувствительности и специфичности исследуемых материалов. Для получения достоверного результата часть тест-материалов была искусственно обсеменена S. typhimurium, а другая (не обсемененная)-служила контролем. В результате иммунохроматографического анализа было четко выявлено наличие сальмонеллезного антигена в говядине. В то же время при испытании иммунохроматографического метода в тест-материалах не был выявлен ботулинический токсин, что особенно важно для мясных консервов.

На заключительной стадии, работы были проведены широкие производственные испытания усовершенствованного иммунохроматографического метода. Результаты исследований подтвердили результаты анализа, полученные в лабораторных опытах.

Таким образом, результаты выполненных исследований позволяют заключить, что разработанные усовершенствованные методы позволяют получать результаты исследований с высокой специфичностью, многократным ускорением процесса исследований даже в полевых условиях при наименьших затратах труда и материалов. Мясное сырье (говядина и свинина) для производства консервов благополучно в ветеринарно-санитарном отношении, но в 3,6-4,7 % случаев были обнаружены БГКП. Вода, используемая в консервном производстве, требует постоянного санитарно-микробиологического контроля в соответствии с действующими нормативными документами

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Горобчук, Елена Алексеевна, 2009 год

1. Алехина Л.Т. Технология мяса и мясопродуктов / Л.Т. Алехина, А.С. Большаков. М.: Агропромиздат, 1988. - 576 с.

2. Бабарин В.П. Справочник по стерилизации консервов / В.П. Бабарин, Н.Н. Мазохина-Порошнякова, В.И. Рогачев. М.: Колос, 1987. 271с.

3. Бармаш А.И. О хранении мясных консервов / А.И. Бармаш, З.М. Чуйкова // Все о мясе. 2003. - № 2. - С. 28-31.

4. Белов Ю.П. Разработка и внедрение системы управления безопасностью пищевых продуктов НАССР // Мясное дело. 2005. -№ 10.-С. 58.

5. Большаков А.С. Исследование качества консервов, выработанных из мяса говядины различной > стадии автолиза / А.С. Большаков, Л.М. Алигаджиева // Хранение и переработка сельхозсырья. 1997. - № 11. -С. 34.

6. Бурыкина И.М. Система НАССР на предприятиях промышленности: программа внутреннего контроля / И.М. Бурыкина, М.В. Щемелева, Г.В. Хитрова // Молочная промышленность. 2004. - № 5. - С. 16-17.

7. Бутко М.П. Организация и современные методы проведения ветеринарно-санитарной экспертизы. Киев 1984.

8. Бутник В.А. О стерилизации консервов / В.А. Бутник, Ю.В. Клоков, Г.В. Купец, В.П. Нино // Хранение и переработка сельхозсырья. — 2000.-№ 10.-С. 64-65.

9. Бычкова И.Б. Сравнение эффективности молекулярно-биологических и культуральных методов при контроле качества пищевых продуктов / И.Б. Бычкова, Н.Р. Ефимчикова // Свиноферма. 2006. - № 6. - С. 45.

10. Версан В.Г. Актуальные проблемы введения в действие Федерального закона «О техническом регулировании» // Стандарты и качество. — 2003. № 5. - С. 30-32.

11. Верхивкер Я.Г. Экспресс-методы контроля качества готовых пищевых продуктов / Я.Г. Верхивкер, О.В. Переверзова // Пиво и напитки. -2005.-№2.-С. 102-103.

12. Гельфанд С.Ю. Основы управления качеством консервного производства / С.Ю. Гельфанд. М.: Агропромиздат, 1987. 208 е.

13. Гигиенические требования безопасности и пищевой' ценности пищевых продуктов — Санитарно-эпидемиологические правила и нормативы. СанПиН 2.3.2.1078-01. М.: Минздрав России, 2002. - с.

14. Гламаздин И.Г. Иммунитет, иммунодиагностика и этиопатогенетическая терапия при гельминтозах жвачных: Отчет по Российской координационной НТП заданию 3. ВИГИС / И.Г. Гламаздин, Н.Ю.Сысоева, Г.Л. Верховская // М., 2003.

15. ГОСТ Р 51705.1-2001. Системы качества. Управление качеством пищевых продуктов на основе принципов ХАССП. М.: Издательство стандартов, 2001.-е.

16. Денисова Е.А. Разработка метода дифференциального определения вегетативных и L-форм бактерий в объектах "ветеринарно-санитарного контроля и окружающей среды с использованием ДНК-гибридизации // Сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ. 2001. - Т.111. - С. 69-73.

17. Долгов В.А. Методические аспекты оценки качества и безопасности пищевой продукции и продовольственного сырья / В.А. Долгов, С.А. Лавина // Здоровое питание населения России: материалы 7-го всероссийского конгресса. -М., 2003. С.162.

18. Донченко Л.В. Безопасность пищевой продукции / Л.В. Донченко, В.Д. Надыкта // М.: Пищепромиздат, 2001. С.525.

19. Езерская Е.Я. Иммуноферметный анализ видоспецифичных мышечных- белков. КРС и свиней / Е.Я. Езерская, В.А. Галочкин // Труды ВНИИ физиологии, биохимии и питания с.-х. животных. — 2002. — Т.41. — С. 113-121.

20. Закон «О техническом регулировании» и практика подтверждения соответствия // Мясная технология. 2003. - № 11. — С. 10-11.

21. Зонин В.Г. Современные тенденции европейского, рынка готовых блюд / В.Г. Зонин // Всероссийский технологический форум. Современные технологии и оборудование в пищевой промышленности. 2006. - С.32.

22. Зонин В.Г. Современная технология мясных консервированных продуктов / В.Г. Зонин. СПб.: Профессия, 2008. 224 с.

23. Иванкин А.Н. Современные методы оценки качества и безопасности мясного сырья и мясопродуктов / А.Н. Иванкин, Т.Г. Кузнецова // Все о мясе. 2005. - № 4. - С. 26-30.

24. Инструкция по санитарной обработке технологического оборудования и производственных помещений на предприятиях мясной промышленности. -М.: ВНИИМП, 2003. 189 с.

25. Инструкция о порядке санитарно-технического контроля консервов на производственных предприятиях, оптовых базах, в розничной торговле и на предприятиях общественного питания № 01-19/9-11. -М., 1993.

26. Ивлева О.А. Закон о техническом регулировании система, регулирующая интересы государства и предпринимателей // Пищевая и перерабатывающая промышленность Казахстана. - 2005. - № 3. - С. 26.

27. Кайм. Г. Технология переработки мяса. Немецкая практика / Г. Кайм — СПб.: Профессия, 2006. 488 с.

28. Клевакин В.М. Санитарная микробиология пищевых продуктов / В.М. Клевакин, В.В. Карцев. JL: Медицина, 1986. - 175с.

29. Комаров А.А. Определение видовой принадлежности тканей жвачных животных / А.А. Комаров, И.Л. Обухов, М.Ю. Сорокина, А.Н. Панин // Ветеринария. 2000. - №3. - С. 59-62.

30. Комарова И.Н. ПЦР — современный метод выявления фальсификации мясного сырья и продуктов / И.Н. Комарова, И.Г. Серегин, А.Ф. Валихов //Мясная индустрия. 2004. -№2. - С. 37-41.

31. Консервы. Метод определения промышленной стерильности. ГОСТ 30425 97. Минск. - С. 31 - 45.

32. Кривононосов М.В. Организация защиты качества продуктов питания / Международный медицинский журнал: Харьков, 1998. № 4. - С. 104-106.

33. Кругляков Г.Н. Товароведение мясных и яичных товаров. Товароведение молочных товаров и пищевых концентратов / Г.Н. Кругляков, Г.В. Круглякова. М.: Маркетинг, 2001.- С. 203-220.

34. Лемеш В.М. Контроль безопасности при производстве мясных продуктов на основе принципов НАССР / В.М. Лемеш, М.М: Алексин // Мясное дело. 2006. - № 2. - С. 72-74.

35. Лисицын А.Б. Анализ причин бомбажа консервов на предприятиях / А.Б. Лисицын, Л.Б. Сметанина, З.М. Чуйкова, Т.В. Грачева, С.В. Карпова, Ю.Г. Костенко, Т.С. Шагова // Все о мясе. 2000. - № 2. - С. 49-55.

36. Лисицын А.Б. О техническом регулировании безопасности мяса и мясных продуктов / А.Б. Лисицын, П.П. Веселова // Мясная индустрия. 2004. - №• 11. - С. 28-30.

37. Лисицын А.Б. Современные аспекты теплового консервирования мясопродуктов / А.Б. Лисицын, Л.Б. Сметанина, Ю.Г. Костенко, Б.Е. Гутник, И.М. Чернуха, А.Н. Захаров. -М.:ВНИИМП, 2007. С.576.

38. Мазохина-Поршнякова Н.Н. Анализ и оценка качества консервов по микробиологическим показателям / Н.Н. Мазохина-Поршнякова, Л.П. Найденова. М.: Пищевая промышленность, 1977. - С. 51 - 54, 55 - 65, 69-111.

39. Макаренкова Г.Ю. Мировой опыт внедрения системы ХАССП показал. или что остается за кадром при разработке системы управления качеством / Г.Ю. Макаренкова, А.Н. Захаров // Все о мясе. -2005. -№ 1.-С. 48-51.

40. Макаренкова Г.Ю. Эффективное определение и мониторинг критических контрольных точек // Мясная индустрия. 2007.- № 2. -С. 7-10.

41. Мамаев М.А. Ускоренный анализ микробных контаминаций в мясе с использованием биотинилированных ДНК / Сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ. М., 1999. - Т. 107. - С. 72-77.л

42. Маниатис Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фритч, Дж. Сэмбрук. М.: Мир., 1994. -С. 159-172.

43. Муранова Ю.Л. Система НАССР гарантия стабильного выпуска качественной и безопасной продукции // Вестник «Аромарос-М», 2005. - № 4. - С. 6-7.

44. Мюнх Г.-Д. Микробиология продуктов животного происхождения / Г.-Д. Мюнх, X. Заупе. М.: Агропромиздат, 1985. - С. 473 - 484.

45. Николаева М.А. Идентификация и фальсификация пищевых-продуктов / М.А. Николаева, Д.С. Лычников, А.Н. Неверов. М.: Экономика, 1996. - С. 84-95.

46. Овруцкая И.Я. Термофильные облигатно-анаэробные микроорганизмы возбудители порчи консервов / И.Я. Овруцкая, М.В. Залашко // Ветеринария. - 1989. - № 3. - С. 93 - 97.

47. Окара А.И. О возможности и целесообразности использования полимеразной цепной реакции // Мясная индустрия. — 2004. № 9.— С. 28-29.

48. Олехнович А.А. Новый способ экспрессной оценки интегральной фальсификации пищевых продуктов / А.А. Олехнович, Л.Б. Корчагина, Т.В. Иванова, Е.А. Фомина // Здоровое питание населения России: материалы 7-го всероссийского конгресса. М., 2003. - С. 390.

49. Онищенко Г.Г. Организация ликвидации медико-санитарных последствий биологических, химических и радиационных террористических актов / Г.Г. Онищенко: практическое руководство. -М.: «Защита», 2005. С.83.

50. Орешкин Е.Ф. Снижение качества мясных консервов при хранении / Е.Ф. Орешкин, А.В. Устинова, С.В. Тимченко. М.: АгроНИИТЭИММП, 1992. - 24 с.

51. Писарева В.М. Видовая принадлежность мяса на основе ДНК-диагностики / В.М. Писарева, А.Б. Кононенко, А.В. Галкин, Е.Н. Морозова, Т.А. Тихомирова, С.А. Маргиева, Ю.Н. Соколова // Практик.- 2004. № 3-4. - С.30-33.

52. Роберте Г.Р. Безвредность пищевых продуктов / Г.Р. Роберте, Э.Х. Март. М.: Агропромиздат, 1986. - 287 с.

53. Рогачев В.И. Термоустойчивость микроорганизмов и разработка режимов стерилизации консервов / В.И. Рогачев, Н.Н. Мазохина. М., 1992.- 156 с.

54. Руководство по ветеринарно-санитарной экспертизе и гигиене производства мяса и мясных продуктов под редакцией Бутко М.П., Костенко Ю.Г. М.: "Антиква", 1994, с. 498- 509, 528 530.

55. Руководство по методам анализа качества и безопасности пищевых продуктов, под редакцией И.М. Скурихина, В.А. Тутеляна. М.: Брандес, 1998.-232 с.

56. Самуйленко А.Я. Иммуноферментный анализ в ветеринарной медицине/ А.Я. Самуйленко, Д.П. Кузнецов, С.В. Кузнецова// Ветеринария.- 2003.- № 12.- С.20-24.

57. Сафронова A.M. Анализ потребления мясопродуктов населением России / A.M. Сафронова, А.К. Батурин, M.JI. Старовойтов // Здоровое питание населения России: материалы 7-го всероссийского конгресса. -М., 2003.-С. 464-466.

58. Светличкин В.В. Совершенствование контроля качества и безопасности продуктов животного происхождения в соответствии с требованиями Федерального закона «О техническом регулировании» / Сб. науч. тр. ВНИИВСГЭ. М., 2005. - Т. 117. - С.134-139.

59. Сидоров М.А. Микробиология мяса и мясопродуктов / М.А. Сидоров, Р.П. Корнелаева. М.: Колос, 2000.- С. 185 - 197.

60. Смирнов A.M. Определение видовой принадлежности мяса и мясопродуктов / A.M. Смирнов, А.Н. Туник, В.В. Светличкин, В.М. Писарева, А.Б. Кононенко, Е.Н. Морозова // Ветеринария. 2005. - № 5.-С. 52-54.

61. Сметанина Л.Б. Обоснование режимов стерилизации с помощью автоматизированной системы контроля с определением оптимальных параметров и стерилизующего эффекта / Л.Б. Сметанина, А.Н.• Захаров; А.Б. Лисицын // Все о мясе. 2004. — №1. - С. 19-21.

62. Тарасов К.И. Техническое регулирование в мясной отрасли в свете Федерального закона «О техническом регулировании» // Все о мясе. -2003. -№2.-С. 21-23.

63. Технологические рекомендации по производству мясных консервов // Современное мясоперерабатывающее производство. 2005. — № 3. — С. 26-29.

64. Флауменбаум Б.Л. Основы консервирования пищевых продуктов / Б.Л. Флауменбаум, С.С. Танчев. М.: Агропромиздат, 1996.-244 с.

65. Фрумгарц Л.Ф. Получение флуоресцентной меченой ДНК и использование ее в качестве зонда при молекулярной гибридизации / Л.Ф. Фрумгарц, С.М. Киприянов, С.М. Калачиков // Биоорганическая химия. 1986. -№ 11. - С. 1508-1513.

66. Хвыля С.И. Микроструктурный анализ, идентификация и фальсификация мясных продуктов// Пищевая промышленность. — 1998.-№5.-С. 68-69.

67. Херрингтон С. Молекулярная клиническая диагностика / С. Херрингтон, Дж. Макги. М.: Мир, 1999. - 558 с.

68. Хохлявин С.А. Система ХАССП в Европе и США: зарубежный опыт технического регулирования и его значение для России / С.А. Хохлявин, С.В. Михеева // Пищевая промышленность. 2006. - № 3. -С. 42-46.

69. Черняева М.Н. Анализ видовой принадлежности мяса и мясопродуктов // Ветеринария. 2001. - №6. - С.47-50.

70. Шепелев А.Ф. Товароведение и экспертиза мяса и мясных товаров/ А.Ф. Шепелев, О.И. Кожухова, А.С. Туров // Ростов-на-Дону:Март. -2001.-С. 79-93.

71. Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетический анализ биотопов. М.: Мир, 1999. - С. 395-425.

72. Шикина М.А. Контрольные критические точки при производстве мясных стерилизованных консервов: санитарно-микробиологическая оценка вспомогательных компонентов / М.А. Шикина, Ю.Г. Костенко // Все о мясе. 2005. - № 3.- С. 21-23.

73. Шикина М.А. Контрольные критические точки при производстве мясных консервов: санитарно-микробиологическая оценка мясного сырья / М.А. Шикина, Ю.Г. Костенко // Все о мясе. 2004. - № 4. - С. 31-33.

74. Шикина М.А. Санитарно-гигиенические условия производства мясных стерилизованных консервов и пути-их улучшения / М.А. Шикина, Ю.Г. Костенко, Н.Е. Белякина // Сб. докладов 9-й международной научной конференции памяти В.М. Горбатова. М., 2006.-С. 143-146.

75. Шикина М.А. Характеристика мясных консервов при развитии бомбажных явлений / М.А. Шикина, Ю.Г. Костенко, Т.Г. Кузнецова // Все о мясе. 2005. - № 2. - С. 35-37.

76. Ярков С.П. Индикация возбудителей особо опасных заболеваний с помощью иммунохроматографии и видеоцифрового анализа / С.П. Ярков, С.И. Третьяков, JI.A. Башарова, В.Н. Злобин // Вестник Российской АМН. №12. - 2007. - С. 22-26

77. Яшин Я.И. Анализ пищевых продуктов и напитков с помощью хроматографических методов / Я.И. Яшин, А.Я. Яшин // Здоровоепитание населения России: материалы 7-го всероссийского конгресса. -М., 2003.-С. 595-596.

78. Adessi С. Solid phase DNA amplification: characterisation of primer attachment and amplification mechanisms / C. Adessi, G. Matton, G. Turcatti, J. Mermod, P. Mayer, E. Kawashima // Nucleic Acids Research. -2000. p. 87.

79. Beard J. Gene probes Locate waterborne diseases // New Sci. 1987. - № 1562.-p. 237.

80. Berg Christiane. Kontrollen auf risikobasis // Fleischwirtschaft. 2006. 86.- № 1. — p. 21-25.

81. Berger C. In situ hybridization of mRNA molecule in single cells / C. Berger, F. Melchers // Annu rep., Basel Inst. Immunol, 1985. p. 1-10.

82. Bonaccorsi G. II principio di precauzione quale protagonista delle logiche di sicurezza alimentare nelle politiche della UF // Riv. Ital. Ig. — 2004. 64.- № 5. — p.16-17.

83. Calvo J.H. Random amplified polymorphic DNA fingerprints for identification of species in poultry pate / J.H. Calvo, P. Zaragoza, R. Osta // Poultry Sc. -2001. v. 80. - № 4. - p. 522-524.

84. Cherington M. Botulism: update and review. Semin. Nevrol., 2004. -24: 155-163.

85. Codex Alimentarius Volume Thirteen. Methods of analysis and sampling // Vol. 13, FAO, WHO, 1994. 134 p.

86. Corbisier P. Quantitative determination of Roundup Ready soybean (Glycine max) extracted from highly processed flour / P. Corbisier, Trapmann S., D. Gancberg, L. Hannes, Van Iwaarden P., G. Berben, H.

87. Schimmel, H. Emons // Anal Bioanal Chem. 2005. v.383. - № 2. - p. 282-290

88. Cranum P.E. The microbiological safety and quality of food / P.E. Cranum, T.C. Baird-Parker// Aspen Publishers, 2000. pp.1029-1056.

89. Eine differenzierte Betrachtung tut not // Fleischwirtschaft. 2005. 85. - № 12.-C. 52.

90. Fei S. Species identification of meats and meat products by PCR/ S. Fei, T. Okayama, M. Yamanoue, I. Nishikawa, H. Mannen// Anim.Sc. Technol. 1996. - v.67 - №10. - p. 900-905.

91. Harbing S. Detection of DNA via an ion channel switch biosensor / S. Harbing, M. Harbing // Analytical Biochemistry. 2000. - № 282. - p. 70-79.

92. Heinzelmann R. Beurteilung von Eber-, Zwitter- und Kryptorchiden (Binneneber) fleisch.// Fleischwirtschaft. 1999. - № 9. - p. 34-39.

93. Herrick J. Quantifying single gene copy number by measuring fluorescent probe lengths on combed genomic DNA / Herrick J., Michalet X., Conti C., Schurra C., Bensimon A. // Proc. Natl. Acad. Sci. 2000. - v. 97 (1), p. 222-227.

94. Higuchi R. Kinetic PCR: Realtime monitoring of DNA amplification reactions / Higuchi, R., Fockler, C., Dollinger, G., and Watson, R. // Biotechnology. 1993. - № 11. - p. 1026-1030.

95. Higuchi R. Simultaneous amplification and detection of specific DNA sequences / Higuchi, R., Dollinger, G., Walsh, P.S., Griffith, R. // Biotechnology, 1992. № 10. - p. 413-417.

96. Huang С.С. Event-specific real-time detection and quantification of genetically modified Roundup Ready soybean / C.C. Huang, T.M. Pan // J. Agric. Food Chem. 2005. - v. 53. - № Ю. - p. 3833-3839.

97. Ivinson A.J. PCR in genetic diagnosis /Ivinson A.J., Taylor G.R. // PCR. A Practical approach (ed. M.J. Mc Pherson),, Oxford University Press, Oxford-N.Y.-Tokyo. 1991. - P. 15-27.

98. Karh H. Evalution of oligonucleotide probes for identification of shiga-like-toxin-producing Esherichia coli / H. Karh, T. Meyer // J. Clin Microbiol. 1998. - v. 27. - p.l 180-1186.

99. LeProust E. Digital light-detected synthesis. A microarray platform that permits rapid reaction optimization on a combinatorial basis / LeProust E., Pellois J., Yu P., Zhang H., Gao X. // Journal of Combinatorial-Chemistry. 2000. - № 2. - p. 349-354.

100. Martin R. Detection and quantification-of goats chees in ewes chees using a monoclonal antibody and two ELISA formats / Martin R., Haza A.I., Horales P. // J. Sc. Food Agr. 1997. - v.79. - №-7. - p. 35-41.

101. Muller Andre. Recent developments in instrumental analysis for food quality / Andre Muller, Hans Steinhart // Food chem. 2007. 101. - № 3. - C.l 132-1144.

102. Ouchterlony O. Progress in Allergy/ O'. Ouchterlony// 1958. v.6 -p.30.

103. Partis L. Evaluation of a DNA fingerprinting method for determining the species origin of meats/L. Partis, D. Guo, Z. Clark, T. Coldham, J. Murby//Meat Sc. 2000. - v.54 - №4. - p. 369-376.

104. Rehben H. Electrophoretic techniques for species identification of fishery products/ H. Rehben// Lebensm.Unters Forsch. 1990. -v. 191 -p. 1-38.

105. Ritter S.K. An eye on food // Chem. and Eng. News. 2005. 83. - № 27. - C. 28-34.

106. Schantz E.J. Properties and use of botulinum toxin and other microbial neurotoxins in medicine / E.J. Schantz, E.A.Johnson// Microbiol.rev. -1992.-vol. 56.-P. 80-99.

107. Scheu P. Evaluation of a PCR-ELISA for food testing: Detection of selected Salmonella serovars in confectionery products/ P. Scheu, A. Gasch, R. Zschaler, K. Berghof, F. Wilborn// Food Biotechnol. 1998. -v. 12-№ 1-2.-p. 1-12.

108. Shashi K. Sharma. Evaluation of lateral-flow Clostridium botulinum neurotoxin detection kits for food analysis / Shashi K. Sharma, B.S. Eblen, R.L. Bull, D.H. Burr // Applied and environmental microbiology.-2005.-vol. 71. № 7. -P. 3935-3941.

109. Seymour C. Electrophoresis thechnology: food and reverage analysis / C. Seymour // Food Tech. Europe. 1993. - № 9. - p. 127-152.

110. Swatland H.J. Early PSE detection.Ontario swine research rev // Guelph. -1997. p. 50-51.

111. Tani H. Quantification of genetically modified soybean by quenching probe polymerase chain reaction / Tani H., Noda N., Yamada K., Kurata S., Tsuneda S., Hirata A., Kanagawa T. // J Agric Food Chem.- 2005. № 6. - V. 53. - p. 2535-40.

112. Tartaglia M. Detection of bovine mitochondrial DNA in ruminant feeds: a molecular approach to test for the presence of bovine-derived material / Tartaglia M., Saulle E., Pestaloza S. // Journal of food protection. 1998. -vol. 61. - № 5. -p. 513-518.

113. Tyagi S. Wavelength-shifted molecular beacons / Tyagi S., Marras A.E., Kramer F.R. // Nature Biotechnology. 2000. -Vol.18. - p. 11911196.

114. Vermer W. Food safety: A key issue for consumers // Int. J. Dairy Technol.- 1998.-№l.-p. 11-14.

115. Vorschlage fuer Richt-und Warnwerte // Fleischwirtschaft. 2005. - № 10. - C. 54-55.

116. Wolf C. PCR-RFLP analysis of mitochondrial DNA: a reliable method for species identification / Wolf C., Rentsch, J. Hubner P. // J.agr.Food Chem. 1999. - v. 47. - № 4. - p. 1350-1355.

117. Yamanaka M. Sex identification of beef by polymerase chain reaction / Yamanaka M., Kudo Т., Itagaki Y., Sato S., Nakamura T. // Anim Sc.J.- 1999: v.70. - № 8. - p. 111-113.

118. Yoshimura T. Applicability of the quantification of geneticallymodified organisms to foods processed from maize and soy /

119. Yoshimura Т., Kuribara H., Matsuoka Т., Kodama Т., Iida M.,116

120. Watanabe Т., Akiyama H., Maitani Т., Furui S., Hino A. // J Agric Food Chem. 2005. - Mar 23. - p. 2052-2059.