Токсичность родентоброма (бромадиолона) для мышевидных грызунов и метод его определения в технических продуктах и отравленных приманках тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.06, кандидат ветеринарных наук Бричко, Наталья Анатольевна

• Бричко, Наталья Анатольевна
• кандидат ветеринарных наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Бричко, Наталья Анатольевна

1. Введение. 3

2. Обзор литературы.

2.1. Антикоагулянты, как средства борьбы с мышевидными грызунами. 8

2.2. Токсичность антикоагулянтов для грызунов и сельскохозяйственных животных. 12

2.3. Изменения, происходящие в организме животных при отравлении антикоагулянтными родентицидами. 16

2.4. Сведения по отдаленным эффектам для антикоагу-лянтных родентицидов - производных кумарина. 23

2.5. Характеристика бромадиолона. 25

2.6. Методы определения в препаратах, отравленных приманках и тканях животных производных 4-оксикумаринов. 29

3. Собственные исследования.

3.1. Материалы и методы. 35

3.2. Определение ряда параметров токсичности родентоброма отечественного синтеза.

3.2.1. Установление параметров острого действия. 40

3.2.2. Оценка местного и кожно -резорбтивного и сенсибилизирующего действия. 45

3.2.3. Определение коэффициента кумуляции. 49

3.2.4. Определение избирательности действия по Кит. 53

3.2.5. Оценка мутагенного действия бромадиолона (родентоброма) методом анателофазного анализа клеток костного мозга лабораторных белых мышей.

3.3. Изучение клинических, паталогоморфологических и гистологических изменений в организме животных при отравлении родентобромом.

3.3.1 .Клинические признаки отравления родентобромом. 57

3.4. Разработка аналитической методики определения бромадиолона (родентоброма) в образцах технических продуктов отечественного производства и препаративной форме «Родентан».

3.4.1. Подбор условий для определения бромадиолона (родентоброма) с помощью ВЭЖХ на стандартных растворах и определение его в образцах технических продуктов. 70

3.4.2. Разработка метода определения родентоброма в парафиновых блоках. Определение содержания в опытных партиях препарата «Родентан». 82

4. Обсуждение результатов. 90

3.3.2. Патоморфологические изменения.

3.3.3. Гистологические изменения.

5. Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Токсичность родентоброма (бромадиолона) для мышевидных грызунов и метод его определения в технических продуктах и отравленных приманках»

Актуальность темы. Защита животноводческих ферм и индивидуальных хозяйств от синантропных грызунов до сих пор представляет собой одну из актуальных проблем ветеринарной науки и практики.

Грызуны наносят огромный экономический ущерб народному хозяйству, уничтожая продукты питания, корма для сельскохозяйственных животных, посевы культурных растений, портят постройки, тару, технические электрические сети. Одна серая крыса ежедневно поедает 30-100 г. зерна, домовая мышь - 38 г. зерна. (Вашков В.И., 1952). Кроме этого, синантропные грызуны являются переносчиками возбудителей инфекционных и инвазионных заболеваний, опасных для человека и животных, таких как туляремия, бруцеллез, лептоспироз, листериоз, ящур, болезнь Ауески, сибирская язва, рожа свиней, бешенство, болезнь со доку, трихофития, трихинеллез, псевдотуберкулез, сальмонеллез и целый ряда других болезней. (Поляков A.A., 1975). Ежегодно только в Москве регистрируют 150-200 случаев укусов крысами. За многие века крысы и мыши приспособились существовать рядом с людьми, т.е. вести синантропный образ жизни. И все это время человечество изобретало все новые, изощренные методы борьбы с ними. Но, не смотря на затрачиваемые усилия, численность грызунов не уменьшается, более того, за несколько поколений они вырабатывают иммунитет к ядам, учатся обходить ловушки и осваивают все новые территории. С появлением 3 резистентных особей многие родентициды утрачивают свою эффективность, поэтому постоянно разрабатываются и внедряются, все более эффективные препараты.

Для борьбы с грызунами на животноводческих фермах широко используются такие препараты как фосфид цинка, крысид, зоокумарин, ратиндан, бактокумарин и некоторые другие. Особенно широкое применение получили так называемые антикоагулянты, относящиеся к двум химическим группам 4-оксикумарина и 1,3 - индандиона.

Однако, все родентициды предназначенные для уничтожения грызунов, относятся к классу высокотоксичных соединений и могут быть причиной отравления человека и животных. Поэтому, для предупреждения нежелательных последствий для каждого соединения, согласно нормативным документам, определяют его родентицидные свойства, ряд параметров токсичности. Для контроля над производством разрабатывают методики определения в препаративных формах. Ставят опыты для получения сведений об изменениях происходящих в организме животных в результате воздействия на них нового соединения.

В связи с имеющимся спросом, в последнее десятилетие на российском рынке появился целый ряд новых дератизационных средств, которые производятся не только в нашей стране, но и в большом количестве завозятся из-за рубежа. Одним из них является антикоагулянт второго поколения БРОМАДИОЛОН. На 1-ое апреля 2001 года в РФ зарегистрировано 8 родентицидных препаратов содержащих в качестве действующего вещества (д.в.) 4 бромадиолон. В настоящее время в Московском химико-технологическом институте им. Д.И. Менделеева синтезирован по оригинальной схеме аналог бромадиолона, получивший название родентоброма и на его основе разработан препарат "Родентан". Однако его токсикологические свойства не изучены. До последнего времени не разработан достаточно простой и чувствительный метод определения соединения в препаративной форме. В связи с этим большое значение приобретают вопросы определения бромадиолона в указанном объекте и проведение ряда токсикологических исследований.

Цель и задачи исследований. Цель исследований -разработка аналитической методики определения родентоброма в образцах технических продуктов и парафиновых блоках. Проведение токсикологической оценки родентоброма и изучение его биологического действия на лабораторных животных.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить характер биологического действия соединения родентобром на организм животных в опытах с лабораторными животными.

2. Определить ряд параметров токсичности родентоброма отечественного синтеза.

3. Подобрать условия для определения родентоброма методом ВЭЖХ на стандартных растворах.

4. Определить родентобром в образцах технических продуктов.

5. Изыскать способ экстракции и очистки родентоброма при определении его в парафиновых блоках.

6. Провести количественный анализ на содержание родентоброма в опытных партиях препарата "Родентан".

Научная новизна. Впервые определен ряд токсикологических параметров соединения родентобром в опытах на белых мышах и крысах. Изучена клиническая картина интоксикации, паталогоанатомические, гистологические изменения в организме животных при его воздействии. Разработана методика определения родентоброма в техническом продукте и препаративной форме. Методика определения родентоброма основана на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектором. Предназначена для отечественного прибора "Милихром" с использованием недорогих и доступных реактивов.

Практическая ценность работы. На основании экспериментально подобранных условий хроматографирования и разработанного способа извлечения родентоброма из парафиновых блоков составлены "Методические рекомендации по определению родентоброма в парафиновых блоках, предназначенных для борьбы с синантропными грызунами". Метрологическая характеристика метода: минимально -детектируемое количество родентоброма 5 мкг/мл, степень обнаружения 70 ± 5%. (Утв. Отделением ветеринарной медицины РАСХН 06.06.2001г.).

Апробация работы.

Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- заседании Ученого Совета ВНИИВСГЭ (1997-2001 гг.);

- межлабораторном совещании ВНИИВСГЭ (2002г.).

Публикации. Результаты исследований отражены в трех научных работах.

Структура и объем работы.

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, списка используемой литературы и приложения.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза», Бричко, Наталья Анатольевна

5. Выводы

1. Определена острая токсичность родентоброма для белых мышей и крыс. При однократном введении в желудок Ы)50 технического родентоброма для мышей составляет 1,83 ± 0,28 мг/кг, для крыс 1,24 ±0,16 мг/кг. Таким образом, родентобром по своей токсичности для мышевидных грызунов не уступает зарубежному бромадиолону и может применяться для дератизации в концентрациях, рекомендованных для бромадиолона.

2. При введении в коньюктиву глаза кролика масляно -спиртового раствора родентоброма в концентрации 50 мг/л, а также его нанесении на выстриженную кожу животных не было выявлено раздражающего и сенсибилизирующего действия препарата. Родентобром при его нанесении на кожу в дозе 50мг/кг живой массы вызывает гибель мышей.

3. При ежедневном введении внутрь белым мышам масляно-спиртового раствора родентоброма в нарастающих дозах от 1/10 1Ю5о(0,183 мг/кг) суммарная доза, вызвавшая гибель 50% особей была определена равной 1,0065 мг/кг. Коэффициент кумуляции -0,55 мг/кг, что дает основание отнести родентобром к веществам чрезвычайно кумулятивным.

4. Клиническая картина интоксикации у мышей и крыс развивается через 4-5 часов, после однократного введения внутрь родентоброма и проявляется угнетением, бледностью слизистых оболочек, и кровотечениями из естественных отверстий, образованием подкожных гематом. Специфическим признаком интоксикации является замедление времени свертывания крови в 5-6 раз.

5. Паталогоанатомические изменения при отравлении родентобромом характеризуется образованием кровянистого эксудата в брюшной и грудной полостях, обширными кровоизлияниями в стенки кишечника, мышцы, подкожную клетчатку.

6. Методом ана - телофазного анализа клеток костного мозга белых мышей не было выявлено мутагенного действия родентоброма при однократном введении внутрь в дозе, составляющей ХА ЬБ50

7. Подобраны условия разделения и количественного определения родентоброма посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии с Уф-детектором на приборе "Милихром-2". При использовании колонки КАХ 3.64.3., 64 мм х 2 мм, сорбента - Силасорб 600 5,0 мкм и Сепарон х С^, зернением 8 мкм, 120 мм х 2 мм, подвижной фазой смеси ацетонитрил : вода : уксусная кислота (80 : 20 : 2), при скорости течения подвижной фазы 100 мкл/мин, родентобром выходит на хроматограмме в виде двух пиков с временем удерживания 3 и 4 мин. Максимальная чувствительность достигается при использовании УФ-детектора с длиной волны 282 нм. При введении в колонку Юмкл стандартного раствора родентоброма в метаноле максимально детектируемая концентрация сотавляет 1 мкг/мл.

8. Разработан способ определения родентоброма в парафиновых блоках. Принцип метода основан на экстракции пестицида этанолом, очистке экстракта с помощью бумажного фильтра и набора НФ-13 с последующим анализом посредством ВЭЖХ. С УФ-детектором. Предел обнаружения 1,7 мг/кг.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Бричко, Наталья Анатольевна, 2002 год

1. Алексеева О.Г., Шумская Н.Г. Принципы нормирования химических аллергенов. В кн.: Принципы предельно допустимых концентраций. М., 1970, с. 275-280.

2. Алов И.А., Казаньев В.В. О судьбе отставших хромосом и микроядер. Цитология, 1969, т. 187, №1, с. 191 -193.

3. Альбов С.А., Хляп Л.А. Список зарегистрированных средств борьбы с грызунами. РЭТ - инфо, №3, 1996, с.25.

4. Балина Е.С., Тимофеевская Л.А. К вопросу применения показателей поведенчиских реакций в токсикологических исследованиях. Гигиена и санитария. 1978, №7, с.54-59.

5. Березовский О.И. Классификация опасности родентицидов и профилактика их воздействия. Гигиена и санитария. 1998, № 2, с. 41-45.

6. Березовский О.И. Методические рекомендации по оценке эффективности, токсичности и опасности родентицидов. М., 1995.

7. Березовский О.И. Санитарно-токсикологическая оценка родентицидных средств из группы антикоагулянтов. Канд. дисс., М.,1998.

8. Боков А.Н., Гуськова С.И., Гуськова Е.П., Масько В.И. Использование анафазного метода учета хромосомных перестроек в костном мозге при гигиенической оценкемутагенного эффекта. Гигиена и санитария. 1974, №8, с.17-20.

9. Болоховец М.Ф. Родентицидные свойства производных индандиона и кумарина и разработка методов определения зоокумарина. Канд. дисс., М., 1978.

10. Бричко H.A. Исследование антикоагулянта второго поколения бромадиолона. Материалы международной научной конференции «Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии (дезинфекция, дезинсекция, дератизация) -М., 1999.

11. Бричко H.A. Определение ряда параметров токсичности дератизационного соединения родентоброма (бромадиолона). Проблемы ветеринарной санитарии и экологии. - Сб. научн. трудов ВНИИВСГЭ. Т. 115., М., 2002.

12. Быковский В.А., Николаева H.H., Сегал P.JI. Антикоагулянтные родентициды и грызуны-коменсалы.-Агрохимия. 1990, №6, с.104-123.

13. Быковский В.А., Николаева H.H. Исследования серых крыс на устойчивость к традиционным ратицидам и испытание новых препаратов. IV съезд Всесоюз.териол. о-ва: Тез. докл. М., 1986, Т. 3, с. 367-368.

14. Быковский В.А., Пегельман С.Г. Влияние токсиканта и патогена на плодовитость грызунов. Грызуны: Материалы V Всесоюз. совещ. М, Наука, 1980, с.388-390.

15. Василос А.Ф. Цитотоксические и цитогенетические свойства пестицидов. Кишенев, «Штиинца», 1980.

16. Волкова О.В., Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой. М., 1971.

17. Вильнер A.M. Кормовые отравления. Д., «Колос», 1974.

18. Гамбарян П.П., Дукельская Н.М. Крыса. М., 1955.

19. Гвинерия И.С., Шавладзе Н.С. Токсичность и токсикодинамика ратиндана и зоокумарина.- Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений. ВНИИГИНТОКС. Киев, 1968.

20. ГОСТ 12.1.007-76. ССБТ. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности. Гос. стандартов. М., 1976.

21. Дезинфекционные средства. Часть 3. Родентицидные средства. Справочник. М., 2001.

22. Дмитров В.В., Джуров А., Антонов С. Диагностика отравлений животных. М., Агропромиздат, 1986.

23. Друммонд Д., Реннисон Б. Выявление резистентности грызунов к антикоагулдянтам. -Бюл. ВОЗ. 1974. Т.48, № 2.

24. ЕВРОТОКС Европейское общество токсикологов. -Токсикологический вестник. 1995, №1.

25. Елизарова О.Н. Определение пороговых доз промышленных ядов при пероральном введени. 1971.

26. Ермаков В.В., Болоховец М.Ф. Газохроматографическое определение зоокумаринав патматериале. В сб.: Методические рекомендации по определению пестицидов в объектах ветеринарного надзора. ВАСХНИЛ, М., 1981.

27. Жолдакова З.И. Обоснование условий перехода от пороговых к максимально недействующим дозам. Гигиена и санитария. 1987, №3, с.61-63.

28. Заева Т.Н., Мальцева М.М., Тимофиевская Л.А., Рыльников В.А., Березовский О.И., Родионова Р.П., Рысина Т.З., Панкратова Г.П., Котова H.A., Юрченко В.В. Методические подходы к токсикологической оценке средств дератизации. -РЭТ-инфо, 1994, №12 с.9-13.

29. Заева Г.Н., Мальцева М.М., Тимофиевская Л.А., Березовский О.И., Тощигин Ю.В., Родионова Р.П., Рысина Т.З., Панкратова Г.П. Котова H.A., Ревазова Ю.А. Токсиколого-гигиенические критерии оценки опасности родентицидов. .РЭТ-инфо. 1995, №2(14), с.6-10.

30. Заева Г.Н., Мальцева М.М., Рыльников В.А., Хляп J1.A., Березовский О.И., Рысина Т.З., Родионова Р.П., Котова H.A., Тимофиевская Л.А., Леви М.И. Критерии оценки опасности родентицидов. РЭТ-инфо. 1996, №2(18), с.6-9.

31. Зацепин В.Г. Дифенацин в водных приманках для уничтожения крыс. Труды ВНИИВСГЭ. 1991 (1992), Т.91, ч.2.

32. Информация фирмы «Шеринг», ФРГ.

33. Каган Ю.С. Коэффициент кумуляции как количественный показатель кумулятивного действия ядов. Фармакология и токсикология. Киев, 1964.

34. Каган Ю.С. Кумуляция, критерии и методы ее оценки, прогнозирование хронических интоксикаций. В кн.: Принципы и методы установления ПДК вредных веществ в воздухе производственных помещений. М., 1970, с.46-63.

35. Каспаров A.A., Саноцкий И.В. Токсикометрия химических веществ, загрязняющих окружающую среду. -М., 1986.40.

36. Кассандрова О.Н., Лебедев В.В. Обработка результатов наблюдений. М.,- 1970.

37. Касьяненко А.Г., Королева Н.С. Оценка генетической опасности пестицидов. Пущино, 1977.

38. Кибардин С. А., Макаров К. А. Тонкослойная хроматография в органической химии. М., 1978.

39. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: Справочное издание. Курилов Н.В., Малахов и др. М., Агропромиздат, 1985.

40. Кожно-резорбтивное действие. В кн.: Токсикометрия химических веществ. Под ред. Саноцкого И.В. М., 1970, с.205-212.

41. Козлов А.Н., Сальников М.И., Лаврентьев С.А., Жабина E.H. Токсичность родентицидов-антикоагулянтов для поросят. Ветеринария. 1991, №2.

42. Козловская Л.В., Николаев А.Ю. Учебное пособие по клиническим лабораторным методам исследования. М., 1984, с. 22-109.

43. Количественный анализ хроматографическими методами. Под ред. Э. Кэц. М., Мир. 1990.

44. Кошевая Г.И., Баранова A.M. Клинико-морфологические изменения у свиней при отравлении ратинданом. -Физиологические особенности свиней и проблемы их выращивания в условиях промышленной технологии. 1987, с.49-51.

45. Красовский Г.Н., Авалиани C.JL, Жолдакова З.И., Косяков В.В. Система критериев комплексной оценки опасности химических веществ, загрязняющих окружающую среду. -Гигиена и санитария. 1992, №9-10, с. 15-17.

46. Красовский Г.Н., Егорова Н.А., Жолдакова З.И., Дура Д. Среднее время гибели животных как параметр для прогнозирования хронической токсичности веществ. Гигиена и санитария. 1994.

47. Лабораторные исследования в ветеринарии: химико-токсикологические методы. Под ред. Антонова Б.И. М., «Агропромиздат», 1989.

48. Лапко B.C. Эффективные методы борьбы с грызунами и насекомыми. Мясная промышленность. 1993, №4, с.20-21.

49. Левин В.Г. Динамика изменений в организме обыкновенных полевок, затравленных фентолацином.-Зап. Ленингр. с.-х. ин-та. 1971. Т. 156, с. 125-130.

50. Малашенко A.M., Суркова Н.И., Семенов Х.Х. Определение мутагенности химических соединенийгинетический скрининг) на лабораторных мышах. -Методические указания. М., «Медицина», 1977.

51. Материалы фирмы «Ай-Си-Ай».

52. Материалы фирмы «БВР Кейзинг Корпорейшн (США)». Об эффективности и токсичности дифасинона (дифенацина). 1991.58. Материалы фирмы «Реанал».

53. Материалы французской фирмы «Poussel uclaf».

54. Материалы швейцарской фирмы «Сиба-Гейги».

55. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М, 1994, т.2, с. 78-85.

56. Мельников H.H., Новожилов К.В., Белан С.Р. Справочник. Пестициды и регуляторы роста растений. М., «Химия». 1995.

57. Мельников H.H. Пестициды. М., «Химия», 1987.

58. Меркулов Г.А. Краткий курс паталого-гистологической техники. Л., 1982.

59. Методические рекомендации по установлению допустимых остаточных количеств пестицидов в кормах для сельскохозяйственных животных. Разработаны д.в.н. Таланов Г.А., д.в.н. Аббасов Т.Г., к.в.н. Малинина O.A., проф. Баймурадовым Т.Б., Кенигсбергом Я.Э.

60. Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде. Под ред. Клисенко М.А. М., «Колос», 1983.

61. Методические рекомендации по определению мутагенной активности ветеринарных препаратов. М., 1983.

62. Методические рекомендации по оценке мутагенности новых лекарственных средств. ФК МЗ РФ, М., 1994.

63. Методические рекомендации по исследованию канцерогенных свойств фармакологических и лекарственных средств. МЗ СССР, ФК. М., 1988.

64. Методические рекомендации по оценке эффективности, токсичности и опасности родентицидов. Утв. Госкомсанэпиднадзором РоссииN0 1-19/127-17. М.,1985.

65. Методические рекомендации по токсикометрии. -Совместное издание СЭВ, ЮНЭП, МРПТХВ. М., 1987.

66. Методические указания по гигиенической оценке новых пестицидов. Утв. № 4263-87 от 13.03.1987.

67. Методические рекомендации по оценке степени опасности пестицидов (гигиеническая классификация). Утв. Госкомсанэпиднадзором Росии.№ 01-19/126-17 от 15.08.1996.

68. Немченко Л.С., Кардаш А.И., Обухов П.А., Быковский В.А. Из опыта работы с антикоагулянтными родентицидами. -Защита растений. 1990, №12, с.9-10.

69. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б., Ибрагимов А.К. Ядовитые животные и растения СССР. М., Высшая школа, 1990.

70. Патологоанатомическая диагностика вирусных болезней животных. Под ред. Н.И. Архипова. М., «Колос», 1984.

71. Пегельман С.Г. Биологическое последствие родентицидов на грызунов. Экология. 1993, №2, с. 38-44.

72. Пегельман С.Г., Дмитриева И.Р. Стимулирующее действие малых доз родентицидов на величину выводка восточноевропейской полевки.- Защита растений от вредителей и болезней в условиях интенсивного возделывания с.-х. культур. 1987, с.54-58.

73. Пегельман С.Г., Малюгина Л.П. Действие некоторых родентицидов на кур. Экология. 1988, с. 32-35.

74. Перечень веществ, продуктов, производственных процессов, бытовых и природных факторов, канцерогенных для человека. (Г.Н. 1.1. 029-95), утв. Госкомсанэпиднадзором России (Постановление №7 от 08.06. 1995).

75. Перечень химических и биологических веществ, прошедших государственную регистрацию в Российском регистре потенциально опасных химических и биологических веществ. М., 1998.

76. Перри С., Амос Р., Брюер П. Практическое руководство по жидкостной хроматографии. М., «Мир», 1974.

77. Поляков A.A. Ветеринарная дезинфекция. М., «Колос» 1975.

78. Постановление Госкомсанэпиднадзора России №7 от 21.09.1994. « о запрещении применения неокрашенных родентицидных приманок». М., 1994.

79. Проблема пороговости в токсикологии. Под ред. проф. Г.Н. Красовского. М., 1979.

80. Прозоровский В.Б. Использование метода наименьших квадратов для пробит-анализа кривых летальности. -Фармакология и токсикология. 1962, №1, с. 115-120.

81. Рекомендации по защите крупных животноводческих хозяйств и комплексов от синантропных грызунов. М., 1982.

82. Сахно В.М. Сравнительная характеристика классической чумы свиней и отравления зоокумарином. Вестник ветеринарии. 1997, №1, с.101-104.

83. Серая крыса: Систематика, экология, регуляция численности. Отв. Ред. тома акад. В.Е. Соколов, доктор биологических наук Е.В. Карасева, М., «Наука»., 1990.

84. Скворцов Ф.Ф., Болоховец М.Ф., Траханов Д.Ф. Токсическое действие комбинированного препарата холекумара на синантропных грызунов. Дезинфекция и санитария продуктов животного происхождения. М., 1985, с. 139-149.

85. Соколов В.Е., Ляпунова K.JL, Зинкевич Э.П. Химическая коммуникация серой крысы (Rattus norvegicus Berk) -Ферономы и поведение. М., Наука, 1982, с.162-179.

86. Список пестицидов и агрохимикатов разрешенных к применению на территории Российской Федерации. М., 2001.

87. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования. Под ред. проф. Е.А. Кост. М., 1975.

88. Справочник по пестицидам (гигиена применения и токсикология). Под ред. Павлова А.Е. Киев, «Урожай», 1986.

89. Стыскин EJL, Ициксон Л.Б., Брауде Е.В. Практическая высокоэффективная жидкостная хроматография. М., «Химия» 1986.

90. Ташева М. Механизм действия родентицидов и их влияние на окружающую среду и здоровье человека. Растит. Защита. 1996, №2, с. 18-19.

91. Тажибаев А. Изучение фентолацина и разработка эффективных методов его применения для дератизации животноводческих ферм. Канд. дисс.,1971.

92. Токсикология новых промышленных химических веществ. Под.ред. проф. Летавета A.A., доктора мед. наук Саноцкого И.В. «Медицина» Ленинградское отделение. 1967.

93. Токсикометрия химических веществ, загрязняющих окружающую среду. Под ред. доктора мед. наук, проф. Каспарова A.A., доктора мед. наук Саноцкого И.В. М. 1986.

94. Траханов Д.Ф. Амус готовая отравленная приманка (сравнительная оценка токсичности приманок; опыты на грызунах и домашних животных). - Фармакология. Токсикология. 1996, №11, Т.4, с.35.

95. Траханов Д.Ф., Бричко В.Ф., Гараев И.М., Новокшонов Г.И., Крысы и мыши и борьба с ними. Ижевск. 1994.

96. Траханов Д.Ф. Еще раз об антикоагулянтах для истребления крыс и мышей. Сб. научн. Трудов ВНИИВСГЭ. Т. 97, М., 1995, с.94-99.

97. Траханов Д.Ф. Массовые отравления свиней с признаками геморрагического диатеза. Пробл. вет. санитарии. М., 1992, ч.2. с.99-113.

98. Тремасов М.Я., Равилов А.З., Титив В.В., Юсупов Р.Х., Сергейчев А.И., Титова В.Ю., Сметов П.К., Ильясова Г.Х., Титова В.В., Юсупова Г.М., Хисамутдинов Ф.Ф. Случай отравления свиней зоокумарином.- Ветеринария. 1996, № 11, с.6-8.

99. Хмельницкий Г.А., Локтионов В.Н., Полоз Д.Д. Ветеринарная токсикология. М., ВО "Агропромиздат". 1987.

100. Шаршунова М., Шварц В., Михалец Ч. Тонкослойная хроматография в фармации и клинической биохимии. М., 1980.

101. Экспресс методы определения опасности химических веществ. М., 1978.

102. Ягодовский В.В., Тощигин Ю.В. К вопросу об эколого-гигиенических аспектах применения родентицидных средств. -РЭТ-инфо 1993, №7, с.2-8.

103. Addison B.J. Improved metod for high-pressure liquid chromatographic determination of chlorpacinone in mouse tissue. -J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1982, № 65, P.1299-1301.

104. Baumler W. Uber die Wirksamkeit verschiedener Antikoagylantien gegen schädliche Nagetiere. Pflanzenschutz, Umweltschutz. 1985, №58, S.90-93.

105. Bentley E.W., Larte J. J. Hyg. Camb. 1959, V.57, P.135.

106. Bullard W.R., Holguin G., Peterson E.J. Determination of chlorphacinone and diphenadione residues in biological materials. -J. Agric. Food Chem. 1975, №23, P. 72-74.

107. Chalermchaikit T., Felice J.L., Murphy J.M. Simultaneous determination of eight anticoagulant rodenticides in blood serum and liwer. J. Anal. Toxicol. 1993, №17, 56-61.

108. Daenens P., Van Boven M. Separation of some therapeutically important coumarins and related compounds by thin-layer chromatography. J. Chromatogr. 1971, № 57, P. 319-321.

109. Dyssegard A. Intoxication with dicoumarin and its derivatives. -Nordisk veterinaer-medicin. 1952, № 10, P.4.

110. Enders E. Chemider Pflanzenschutz- und Schädlingsbekämpfungsmittel. Bd.l. B.: Springer-Verlag. 1970, S. 634.

111. Fauconnet V., Pouliguen H., Pinault L. Reversed-Phase HPLC Determination of eight anticoagulant rodenticides in animal liver. . J. Anal. Toxicol. 1997, №21, P. 548-553.

112. Feinsod F.M., Allam J., Ragai A., Saah A,J. Rodenticide -induced signs simulating Rift valley fever in scheep and goats in Egypt. Veter. Ree. 1986, T. 118, № 10, P.270-272.

113. Felice J.L., Chalermchaikit T., Murphy J.M. Multicomponent determination of 4-hydroycoumarin anticoagulant rodenticides in blood serum by liguid chromatography with fluorescence detection. . J. Anal. Toxicol. 1991, №15, P. 126-129.

114. Freud J. The Effect of Baraffin oil and Mucobacteria on Antibody. Formation and Sensitization. An. J.Clin Path. 1951, P. 7-21.

115. Gemmeke H. Untersuchungen zur Gefahrdung von Eulen bei der Nagetierbekampfung mit Rattenkodern (Rodentizide). Mitt. Biol. Bundesanst. Land - Forstwirtsch, Berlin. 1996.

116. Geisel O., Stanienda O. Vergiftungen beim Steinmarder(Martes foina) durch ein Rodentizid. Jagdwiss. 1981, №27, P.57-60.

117. Giban J. Proc. Vertebr. Pest. Cont., 6 meet. 1974. P.263.

118. Gill J.E., Redfern R. Laboratory trials of seven rodenticides for use against the cotton rat (Sigmodon hispidus). J. Hug. 1980, № 85, S. 433-450.

119. Godfey M.E. Fcta Zool. Fennica. 1985, №173, P.209.

120. Grand M. Experimental results in a new anticoagulant rodenticide bromadiolone. - Phytiatrie - Phytopharmacie. 1976, № 25, P. 79-88.

121. Grolleau G. Paris G. Ann. Zool.-ecol. anim. 1975, №7. P.553.

122. Grolleau G. Le rodenticide anticoagulant bromadiolone est-il dangereux pour ies animaux predateurs et en particulier les rapaces? La De Tense des Végétaux. 1983, № 1-2, P.219-223.

123. Guide-lines of the use of the WHO recommended classification of pesticides by hazard. -Plant protect, bull. FAO. 1980.V.28. №l.P.l.

124. Hoogeinboom I.L., Rammel G.C. Improved HPLC method for determining brodifacoum in animal tissues. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 1983, №31, P.239-243.

125. Hunter K. Determination of coumarin anticoagulant rodenticide residues in animal tissue by high performance liguid chromatography. I. Fluoresctnce detection using post-column technigues.- J. of Chromatography. 1983, № 270, P. 267-276.

126. Hunter K. Determination of coumarin anticoagulant rodenticide residues in animal tissue by high performance liguidchromatography. II. Fluoresctnce detection using ion-pair chromatography. J. of Chromatography. 1983, № 270, P. 277-283.

127. Hunter K. Reversed-phase ion-pair liguid chromatographic determination of chlorphacinone residues in animal tissues. J. Chromatogr. 1984, №229, P.405-414.

128. Hunter K. Hich-perfozmance liguid chromatographir strategies for the determination and confirmation of anticoagulant rodenticide residues in animaltissues. J. Chromatograph. 1985, №321, P.255-272.

129. Hunter K., Sharp S.A., Newton Q.A. Determination of d: ostereoisomers of bromadiolone an anticoagulant rodenticide in animal tissues by Hich-perfozmance liguid chromatography. -J.Chromatography. 1988, №435, P.83-95.

130. Kataranovski M., Kataranovski D., Dujic A. Increased serum activity of cytokines following topical application of rodenticides in rats. Meet. Fed. Eur. Biochem. Soc. 1993, № 4-9, P.82.

131. Kieboom J.A., Rammell G.C. Determination of brodifacom in animal tissue by HPLC. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 1981, №26, P.674-678.

132. Koppen B. Ligud Chromatographic determination bromdiolone in rodent baits. J. Assoc of Anal. Chem. 1990. V.73, №3, P.429-430.

133. Kuijpes Eugenie A.P., Hartigh J., Sevelkoul T. J. F., Wolff Frederik A. A Method for the simultaneus identification andguantitation of fine super warfarin rodenticides in human serum. -J. Anal. Toxicol. 1995, 19 №7, P.557-562.

134. Lim R.K., Rink K.G., Glass H.G. Soaje-Echague E. A nethod for the evaluation of cumulation and tolerance by the determination of acute and subchronic median effective doses. Arch. Intern. Pharmacodyn. 1961, №130, P.336-353.

135. Lechevin I.C., Grand M. Материалы фирмы «Lipha» о токсичности хлорфасииона. 1989, с.8.

136. Lorgue G. Toxicologie des raticides anticoagulants. La De'fense des Ve'getaux. 1982, №215, P.l 18-125.

137. Lund M., Lodal I. Current work at the Dantisch pest infestation laboratory, vertebrate department. Proceedings. Fernhurst, Haslemere, Sur. 1984.

138. Lund M. New rodenticides against anticoagulant resistance rats and mice. Bull. OEPP. 1977, Vol.7, № 2, P.503-508.

139. Lund M., Rasmussen A.M. Secondary poisoning hazards to stone martens (Martes foina) fed bromadiolone-poisoned mice. -Nordis Veterinaermedicin. 1986, №38, P. 241-243.

140. Maddaiah G.P., Balasubramanyam M., Purushotham K.R. Bromadiolone, a potent anticoagulant for the control of the house rat, Rattus.-Pesticides. 1988, T.22, №l,P.28-33.

141. Marh R.E., Howard W.E., Jackson W.B. Bromadiolone: a new toxicant for rodent control. Pest Control. 1980, vol. 48, №8, P.22-26.

142. MacNicol A.D. Pesticide resistance (strategies and tactics for managemen) Wash.: National Academy Press. 1986, P.87.

143. Medvedovici A., David F., Sandra P. Determination of the rodenticides warfarin, dipheadione and chlorphacinone in soil samples by HPLC-DAD. Talanta. 1997, №44, P.1633-1640.

144. Mendenhall V.M., Pank L.F., Secondary poisoning of Owls by anticoagulant rodenticides. The Wildlife Socidy Bulletin. 1980, №8, P. 311-315.

145. Mount E.M. Diagnosis and therapy of anticoagulant rodenticide intaxications. Vet. Clin. North Am.: Small Anim. Pract. 1988, №18, P.l 15-129.

146. Mundy D.E., Machin F.A. The multiresidue determination materials by high-performance liguid chromatography. J. Chromatogr. 1982, №234, 427-433.

147. Mura A.P., Papet Y., Lochon D. Reiss D. Rapid highperformance liguid chromatographic assay of chlorphacinone in human serum. J. Anal Toxicol. 1992, № 17, P. 179-181.

148. Murphy J.M., Ray C.A., Bailey E.M. High performance liguid chromatography method for detection of brodifacoum in serum. -Vet Hum. Toxicol. 1989, №31, P.228-230.

149. Nahas K. Kinetis and metabolism of bromadiolone, anticoagulant rodenticide, in wild Rattus norvegicus. Ph. D. Thesis. Claude Bernard University, Lyon. 1987.

150. Palazoglu M.G., Tor E.R., Holstege D.M., Caley F.D. Multiresiidue analysis of nine anticoagylant rodenticides in serum. J. Agr. Food Chem.1998, № 46, S. 4260-4266.

151. Poche R.M. Rodent tissue residue and secondary hazard studies with bromadiolone. Paper presented at the EPPO Conference on Rodents, Rome. № 7-11, September, 1987.

152. Poche R.M. The status of bromadiolone in the United States. -California Vertebrate Pest Committee, Sacramento. 1986, P. 6-15.

153. Puschner B.,Galey D.F., Holstege H.D., Palazoglu G.M. Sweet clover poisoning in dairy cattle in California. J. Am. Vet. Med. Assoc. 1998, №212, P.857-858.

154. Rau A.C., Murphy M. J., Du Vail M.D., Reagor J. C. Determination of brodifacum and bromadiolone residues in rodent and canine liver. An. J. Veter Res. 1989, T.56, № 4, P. 546-550.

155. Rengel I., Friedrich A. Detection of anticoagulant rodenticides (4-hydroxycoumarins) by thin-layer chromatography and reversed-phase high-performance liguid chromatography with fluorescence detection. Vet. Res. Commun. 1993, №17, P. 421-427.

156. Stejskal V., Kucerova Z., Zuska J. Ochr. Rostl. 1994, R30, №1, S.ll-13.

157. Sullivan D. Use of bromadiolone for the control of the Columbian ground sguirrel. Montana Department of Agriculture Technical Report. 1987, №87-2.

158. Sullivan D., Pond D.B. Determination of the environmental fate of ground sguirrel carcasses. Montana Department of Agriculture Technical Report. №86-3.

159. Quy R.J., Cowan D.P., Haynes P., Jnglis J.R., Swinney T. The inf luence of stored food on the effectiveness of farm rat control. -Brighton crop protection conf. pests and diseases, Farnham. 1992, №1, P. 291-300.

160. Tyuzi K. Interrelation between bait consumption, prolongation of protrombin time and decrease of blood capillary resistance by coumarin rodenticide, warfarin Nippon. Oyo Dobutsu Gaki Zasshin. 1960, №4, P.31-37.

161. The pesticide manual/Ed. Worthing C.R. 8 th ed. The Britisch Crop Protection Council. 1987, P.1077.

162. Telle H.J. Nachrichtenbl. Dtsch. Pflanzenschutzdienst. Braunschweig. 1955, Jg.9. H.4.S.61; H.5. S.93.

163. Vaziri A.S., Farid A. The comparative efficacy of two rodenticides against Rattus norvegicus Barkenhout and Nesokia indica Gray. Appl. Entomol. Phytopathol. 1995, vol. 62, №1/2, P. 21-23.

164. Vigh G.V.P.Z., Papp-Hites E., Hlavay J. Determination of chlorphacinone informulations by reversed-phase ion-pair chromatography. J.Chromatogr. 1981, №214, P.335-314.

165. Worthing C.R. The British Crop Protection Council. The pesticide manual. 1987.

166. Российская академия сельскохозяйственный наук Отделение ветеринарной медицины

167. Утверждаю академик секретарь отделения ветеринарной медицины РАСХН>>, А. М. Смирнов"^^1. I 0 6 -И:, 2001г.

168. Методические рекомендации по определению бромадиолона в парафиновых блоках, предназначенных для борьбы с синантропнымигрызунами.1. Москва 2001г.

169. Краткая характеристика вещества.

170. ЛД50 для крыс при введении через рот 1,24 мг/кг, для мышей 1,83 мг/кг. Коэффициент кумуляции 0,55.

171. Метрологическая характеристика метода.

172. Минимально- детектируемое количество бромадиолона на жидкостном хроматографе 5 мкг/мл. Степень обнаружения бромадиолона 70±5%.4. Приборы и посуда.

173. Жидкостной хроматограф высокого давления "Милихром 2" или другой аналогичный аппарат с УФ-детектором.

174. Колонка для жидкостной хроматографии Сепарон SG х С ig, зернение 8 мкм, 120мм х 2мм или аналогичные.

175. Весы аналитические лабораторные, ГОСТ 19419-74.44. Холодильник.

176. Баня водяная электрическая.46. Ступка фарфоровая.

177. Стеклянные колбы на 100 мл.

178. Воронки для фильтрования №5.

179. Бумага лабораторная фильтровальная, ГОСТ 7584-77.

180. Чашки фарфоровые выпаривательные №10.

181. Мерные цилиндры на 50 мл и 100 мл.

182. Пипетки на 1мл, 5мл, 10 мл.

183. Набор для фильтрации пробы НФ-13.5. Реактивы.

184. Вода дистиллированная, ГОСТ 6709-72.

185. Кислота уксусная, ледяная х.ч., ГОСТ 61-75.

186. Ацегонитрил х.ч. ТУ 6-09-3534-87.

187. Этанол ректификованный, ГОСТ 5962-67.

188. Спирт метиловый ч., ГОСТ 6995-77.

189. Подвижная фаза (элюент) ацетонитрил-вода-уксусная кислота (80:20:2).

190. Условия хроматографирования.

191. П и П1 сумма площадей пиков образца и стандарта;9. Требования безопасности.

192. Соблюдаются требования безопасности обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, а также при работе с электроприборами.