Биологические эффекты полной и частичной инактивации функций соматического цитохрома C на модели генетически модифицированных мышей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.03, кандидат биологических наук Муфазалов, Ильгиз Альбертович

• Муфазалов, Ильгиз Альбертович
• кандидат биологических наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Муфазалов, Ильгиз Альбертович

1 ОГЛАВЛЕНИЕ.

2 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

3 ВВЕДЕНИЕ.

4ЮБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ^.8^

4111 Общая'характеристикащитохромагС.8^

4.2 Участие цитохрома С в анонтозе . 9>

4:211 Историявопроса^.

4.2.2 Мобилизация цитохрома С.:.16*

4.2.3 Транслокация.через внешнюю'мембрану.1'8>

4.2.5 Формированием функционирование апоптосомы.23*

4.3 Функции отдельных аминокислотных остатков в молекуле цитохрома С.

5'МАШЕРИАУ1БГ№.31!

5.1 Ферменты и. реактивы. 31!

5.2 Мыши и их генотипирование.

53 Радиоактивное мечение проб игСаузерн блот гибридизация;.

5.4 Выделение эмбрионов на разных сроках внутриутробного развития

5.5 Получение и культивирование эмбриональных фибробластов мыши>

5.6 Измерение экспрессии генов соматической и тестикулярной изоформ цитохрома С.

5.7 Секвенирование амплифицированных фрагментов ДНК.

5.8 Измерение скорости дыхани51 эмбриональных фибробластов мыши

5.9 I^нтотоксический тест.38;

5.10 Иммуноцигохимия.39т

5.11 Проточная цитофлуориметрия.

5.12 Гистологический анализ серийных срезов головного мозга.

5.13 Нейрофизиологические тесты.

5.14 Макроанатомический анализ развития некоторых лимфоидных органов.

6 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.

6.1 Получение мутагенезирующего конструкта для гомологичной рекомбинации.

6.2 Электропорация, отбор положительных клонов и инъекция в бластоцисты.

6.3 Получение мышей:с полной инактивацией функций цитохрома С . 50*

6.4!Особенности,биологии развития мышей с нарушенной экспрессией гена цитохромалС.

6.5 Получение мышей с частичной инактивациешфункции цитохрома*С

6.6 Особенности биологии мышей, экспрессирующих соматический^ цитохром С с заменой.лизина(В-72 положениинатриптофан.

6.6.1 Особенности биологии развития KW/KW мышей.

6.6.2 Особенности нейроанатомии KW/KW мышей.

6.6.3 Особенности нейрофизиологии KW/KW мышей.

6.6.4 Особенности развития некоторых лимфоидных органов KW/KW мышей.

6.7 Свойства эмбриональных фибробластов мыши (МЭФ) с частичной инактивацией функций цитохрома С.

6.7.1 Получение МЭФ из KW/KW мышейанализ экспрессии и локализации цитохрома G.

6.7.2 Изучение функции дыхания МЭФ.

6.7.3 Изучение действия различных проапоптотических индукторов на культуры МЭФ.