Биологические свойства изолятов Listeria monocytogenes, выделенных из различных объектов и территорий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат ветеринарных наук Суняйкин, Александр Иванович

• Суняйкин, Александр Иванович
• кандидат ветеринарных наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Суняйкин, Александр Иванович

Список сокращений.

1 Введение.

1.1 Актуальность темы.

1.2 Цель и задачи исследований.

1.3 Научная новизна работы.

1.4 Практическая значимость результатов исследования.

1.5 Основные положения диссертационной работы, выдвигаемые на защиту.

1.6 Апробация и публикация результатов.

1.7 Личный вклад автора в выполнении работы.

1.8 Структура и объем диссертации.

2 Обзор литературы.

2.1 Распространение листерий в природе.

2.2 Экология листерий.

2.3 Таксономия листерий.

2.4 Культурально-морфологические свойства L. Monocytogenes.

2.5 Биохимические свойства листерий.

2.5.1 Гемолитическая активность.

2.5.2 Лецитиназная активность.

2.6 Антигенные свойства листерий.

2.7 Чувствительность L. Monocytogenes к воздействию специфических фагов.

2.8 Факторы патогенности листерий.

2.9 Факторы персистенции бактерий.

2.10 Патогенность листерий.

2.11 Генетическая вариабельность листерий.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биологические свойства изолятов Listeria monocytogenes, выделенных из различных объектов и территорий»

1.1 Актуальность темы

Проблема листериоза до настоящего времени остается актуальной. Это обусловлено широкой распространенностью листерий в природе, полиморфизмом клинических проявлений болезни, высоким уровнем летальности при генерализированных формах инфекции, а так же экономическим ущербом, наносимым сельскому хозяйству заболеваемостью и падежом животных. Интерес ученых и клиницистов к этой инфекции обусловлен также и многочисленными эпидемическими вспышками пищевого листериоза у человека, связанными с употреблением в пищу продуктов, контаминированных л истерия ми в таких развитых странах, как Франция, США, Канада, Германия, Испания и т.д. [И. С. Тартаковский; 2000].

Существующие в настоящее время схемы осуществления надзора^ за листериозом рассматривают все выделенные изоляты L. monocytogenes как в равной степени патогенные, однако-многочисленные наблюдения показали, что вирулентность различных штаммов варьирует [S. Roche, et al., 2004; Москаленко В. Ф., 2006; G. Buchrieser, 2004]. Как правило, снижение вирулентности возбудителя наблюдают при нахождении его в сапрофитической фазе развития. Большинство эпидемических вспышек пищевого листериоза этиологически связаны с относительно узкой филогенетической группой изолятов внутри вида Listeria monocytogenes, характеризующихся- принадлежностью к сероварам 4Ь, 1/2а, 1/2с и 1/2Ь. При этом все основные вспышки пищевого листериоза и спорадические случаи у людей вызваны штаммами серовара 4Ь. На основании этого рядом ученых высказано предположение о вероятном наличии у штаммов данного серовара уникальных вирулентных свойств. Наряду с высоковирулентными в природе выявляются низковирулентные изоляты L. monocytogenes с так называемым «неинвазивным» фенотипом, роль которых в эпидемическом и эпизоотическом процессах до конца остается не ясной. Также пока остаются невыясненными особенности биологических свойств L. monocytogenes, обитающих в разных экологических условиях. Таким образом, вопрос о патогенных свойствах листерий, выделяемых из различных объектов, является актуальным.

Работы последних десятилетий показывают, что L. monocytogenes претерпевает адаптационные изменения, особенно под воздействием антропогенных факторов (бесконтрольное применение антибиотиков, консервантов, дезинфицирующих средств и т.п.), которые выражаются в изменении биологических свойств. В основном они проявляются резистентностью к антибактериальным препаратам определенных групп, способностью формировать биопленки, появлением авирулентных и слабовирулентных мутантов [Т. И. Карпова, С.А.Ермолаева, 2001; С. Morvan et al., 2010; S. A. Granier et al., 2010; S. Monden et al., 2010; S. Roche et al., 2004; I. Secic, 2010].

Учитывая вышеизложенное, изучение биологических свойств изолятов L. monocytogenes, выделенных из различных источников и на разных территориях позволит отследить изменение фенотипических и генетических характеристик культур, расширить спектр тестов внутриродовой дифференциации листерий, усовершенствовать схемы индикации и идентификации данного патогена, выявить ведущие внутривидовые варианты L. monocytogenes, характерные для сапрофитической и паразитической фазы его развития.

Заключение диссертации по теме «Кормление сельскохозяйственных животных и технология кормов», Суняйкин, Александр Иванович

5. ВЫВОДЫ

1. Установлено, что наименьшая вариабельность проявления феноти-пических признаков характерна для культур, изолированных от восприимчивых животных, а наибольшая - для изолятов, выделенных из организма естественно резистентных животных (шиншилла, пятнистый олень, пастбищные клещи).

2. Штамм ы/изоляты L. monocytogenes имеют различия в продукции гемолитически активных веществ (листериолизина О). Из 16 изученных культур 5 экспрессировали гемолизины на низком уровне, а 10 — на среднем. Изо-лят, выделенный от пятнистого оленя, не вызывал деградации красных кровяных телец.

3. Корреляционным анализом установлена прямая сильная взаимосвязь (г>0,5) показателей вирулентности культур (LDioo и LD50) для белых аут-бредных мышей с однородностью популяции (форма колоний) и уровнями продукции основных экспрессируемых факторов патогенности (листериолизина О и фосфолипазы С).

4. Выделение изолятов, содержащих в популяции 95-98% клеток в S-форме, с высоким (средним) уровнем экспрессии листериолизина О и фосфолипазы С свидетельствует о принадлежности их к вирулентным культурам.

5. Штаммы/изоляты L. monocytogenes имеют различия по вирулентности для белых аутбредных мышей. По показателю LDioo 9 культур являлись вирулентными, 5 - умеренновирулентными и 2 - авирулентными. По показателю LD50 5 культур признаны высоковирулентными, 6 - вирулентными, 3 - умеренновирулентными и 2 - авирулентными.

6. Разработана схема дифференциации листерий по показателям вирулентности, которая позволяет объективно оценивать патогенные свойства культур L. monocytogenes и распределять их на группы.

7. При изучении генетической вариабельности изолятов L. monocytogenes с помощью метода REA PFGE выявлены 8 пульс-электротипов. Три пульс-электротипа являются общими для нескольких изолятов, циркулировавших на территории бывшего СССР в период с 1943 по 1976 г., 1 пульс-электротип образован, возможно, родственными изолятами, а 4 пульс-электротипа - уникальны.

8. Выявление идентичных пульс-электротипов для изолятов, выделенных в Украинской и Татарской СССР, в Краснодарском крае и Читинской области, в Украинской СССР и Новосибирской области свидетельствует об общности их происхождения.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. На основании проведенных исследований разработаны и рекомендуются в практику научно-исследовательских учреждений «Методические рекомендации по комплексной оценке культур Listeria monocytogenes на основе изучения фенотипических и генетических характеристик», которые утверждены директором ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии 07.07.2010 г.

2. Составлены генетические паспорта на изученные культуры L. monocytogenes.

4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В данной работе представлены результаты исследования биологических свойств изолятов L. monocytogenes, выделенных в пространственно отдаленных регионах в различные промежутки времени, как из объектов внешней среды, так и различных биологических объектов, относящихся к разным семействам и видам.

Предварительное изучение сформированной рабочей коллекции культур листерий показало, что большинство из них (за исключением изолята № 41 -06) являлись типичными представителями своего вида. В основном культуры принадлежали к I серологической группе, что согласовывалось с данными отечественных ученых о преимущественной изоляции на территории РФ культур L. monocytogenes I серогруппы [К.Н. Шлыгина, 1963; JI.A. Буренкова, 1962].

Известно, что вирулентные штаммы бактерий состоят на 95-100% из клеток, формирующих на твердых питательных средах колонии S-формы. В наших исследованиях также было установлено, что популяции большинства вирулентных для белых аутбредных мышей культур состояли на 88,87 - 99,32% из клеток S-форм. Популяции авирулентных культур листерий, наоборот, были представлены преимущественно RS - и R-формами, что подтвердило существующую взаимосвязь между формой колоний и вирулентностью (коэффициент корреляции 0,62). Как правило, гетероморфизм был присущ изолятам, выделенным от естественно резистентных животных (пятнистый олень, шиншилла, пастбищные клещи), которые являются лишь носителями возбудителя листе-риоза. Давление факторов неспецифического иммунитета на листерии в организме этих животных, скорее всего, приводит к изменчивости патогена, которая проявляется в расщеплении популяции на S- и R-формы и, соответственно, снижении патогенности.

Одним из косвенных доказательств естественной аттенуации штамма под прессингом иммунной1 системы может служить первый случай выделения на территории РФ авирулентной культуры листерий из головного мозга пятнистого оленя. До настоящего времени не представляется возможным проведение ее полной идентификации. С одной стороны, отсутствие у данной культуры фе-нотипического выражения in vitro продукции основных факторов патогенности (LLO и Pic С) и авирулентность для белых мышей позволяют отнести ее к виду L. innocua, с другой стороны - наличие в ее геноме «молчащего» Hly-гена и некоторых генов интерналина, присущих патогенным листериям (неопубликованные данные), свидетельствуют о принадлежности ее к виду L. monocytogenes. По крайне мере, выявленные феномены свидетельствуют о сложных филогенетических и эволюционных взаимоотношениях между этими двумя видами. О выделении негемолитичных слабо- и авирулентных культур листерий также сообщают S. Roche с соавторами (2004), Т. И. Карпова, С. А. Ермолаева (2001) и группа норвежских исследователей во главе с I. Secic (2010). Причем до настоящего времени роль таких культур в этиологии листе-риоза человека остается неясной.

За реализацию патогенных свойств листерий ответственность несут гены патогенности, локализованные как и у большинства бактерий, на, так называемых, «островках патогенности». Особый интерес для изучения у листерий представляют два основных экспрессируемых фактора патогенности — листериолизин О (LLO) и фосфатидилспецифичная фосфолипаза С (Pic С). Для тестирования этих факторов in vitro применяют однослойные среды, содержащие питательную основу и субстрат. Классически для качественной оценки гемолитической и лецитиназной активности бактерий принято использовать кровяные и желточные агары, однако, как уже отмечалось выше (разд.3.3.2.1 и 3.3.2.2) эти среды имеют ряд недостатков. В своих исследованиях мы применили разработанную ранее двухслойную среду СОГАЛ [патент на изобретение № 2318022 от 27.02.2008 г.], коммерческий ALOA-arap и предложенный нами метод полуколичественной оценки экспрессии этих факторов [И. Ю. Егорова, Ю. О. Селянинов, 2005]. Использованные нами среды и подходы позволили установить межштаммовые различия в синтезе гемолизинов и фосфолипаз у изучаемых культур и выявить взаимосвязь между уровнем продукции этих ферментов и степенью патогенности культур. Результаты показали, что чем выше уровень продукции гемолизинов и фосфолипаз, тем выше вирулентность культур листерий (г>0,6).

В современных условиях, когда воздействие антропогенных факторов на среду обитания патогенов является существенным, выживание и поддержание популяции листерий в природе достигается за счет адаптационных изменений патогена (как уже указывалось выше). Одним из таких факторов является формирование устойчивости к антимикробным препаратам. Современные данные свидетельствуют о том, что листерии приобретают резистентность ко многим современным препаратам из группы фторхинолонов, цефалоспоринов, пени-циллинов, тетрациклинов, аминогликозидов и др. Результаты наших исследований подтверждают эти данные. Ни у одного из исследуемых штам-мов/изолятов, циркулирующих на территории бывшего СССР и ФРГ в период с 1943 по 1976 г.г., когда еще эти препараты для терапии инфекционных заболеваний животных в ветеринарной практике не применялись, не обнаружено устойчивости к ним.

Одним из механизмов сохранения возбудителя в межэпизоотический период считается его способность к персистенции. Персистенция или длительное переживание патогена в экологической нише (организме хозяина) широко распространенное явление и ее следует рассматривать как одну из наиболее интересных и интенсивно разрабатываемых проблем микробиологии. Это обусловлено тем, что расшифровка механизмов бактериальной персистенции открывает перспективы для решения таких вопросов, как понимание природы бактерионосительства, выявление причинно-следственных связей дисбиозов, совершенствование диагностических препаратов и, наконец, создание основ микроэкологического мониторинга объектов внешней среды [Бухарин О. В., Усвяцов Б. Я, 1996; Прозоровский С. В. и др., 1981]. На биомолекулярном уровне персистенция характеризуется способностью микроорганизма вырабатывать специфические функционально активные вещества, так называемые факторы персистен-ции. Известно, что к ним относятся антилизоцимная, антикомплементарная, ан-тиинтерфероновая, ДНК (РНК) — азная, антикарнозиновая, антиглобулиновая, антигистонная и другие активности. Из персистентных свойств у листерий изучали антикомплементарную, антилизоцимную и ДНК-азную активности. К сожалению, выявить данный вид активностей у листерий не удалось и это может свидетельствовать либо о более сложных механизмах персистенции листерий как внутриклеточных патогенов, либо о необходимости совершенствования уже существующих методов оценки персистентных свойств патогенов, либо разработки совершенно новых подходов с учетом биологических особенностей листерий.

Существующие в настоящее время схемы осуществления надзора за листериозом рассматривают все выделенные изоляты L. monocytogenes как в равной степени патогенные. Однако наблюдения некоторых авторов показали, что вирулентность различных штаммов варьирует [S. Roche et al., 2004; С. Buchrieser, 2004; Москаленко В. Ф., 2006]. Как правило, патогенность культур листерий принято определять путем постановки кератоконъюнктивальной пробы на морских свинках. Эта качественная реакция позволяет дифференцировать листерии на патогенные и непатогенные и не позволяет объективно оценить уровень патогенности каждого из штаммов. Для объективной оценки вирулентности культур определяют показатели LDioo и LD50. Однако в России до настоящего времени не существует единой схемы дифференциации штаммов листерий внутри вида по этим показателям. Проведя анализ показателей LD10o и LD50 для белых аутбредных мышей, мы разработали схему дифференциации изолятов L. monocytogenes по вирулентности, которая позволила нам распределить их на 3-5 групп, в зависимости от того какой показатель был взят за основу. Примененный нами подход позволяет проводить межштаммовую дифференциацию изолятов патогенных листерий и может быть использован при проведении эпизоотического (эпидемиологического) анализа вспышек листериоза среди животных и человека.

Изучение фенотипических свойств изолятов листерий при помощи классических, вновь разработанных и усовершенствованных микробиологических методов позволило выявить у них различия в проявлении ряда признаков. Однако использованные методы не отражали полной картины вариабельности популяций, не выявляли степени генетического родства между исследуемыми культурами и их специфических особенностей. Поэтому для решения этих вопросов нами было проведено изучение генетической вариабельности культур сформированной рабочей коллекции.

В последние годы для типирования наиболее значимых в эпидемиологическом отношении штаммов L. monocytogenes разработаны молекулярно-генетические методы - гель - электрофорез в переменном поле (REA PFGE), мультилокусное секвенирование (мультилокусное секвенирование-типирование - MLST),

В российской литературе встречаются данные о типировании с использованием данных методов в основном клинических изолятов от человека и культур, выделенных из пищевой продукции, смывов с объектов окружающей среды в результате проведения мониторинговых исследований или эпидемиологического анализа случаев возникновения листериоза у человека. Работ посвященных изучению генетического разнообразия культур листерий, выделенных от различных животных (сельскохозяйственных, домашних, диких) практически нет. Встречаются сообщения о генотипировании штаммов L. monocytogenes, изолированных от морских гидробионтов [Е. А. Зайцева и др., 2007].

Использование двух крупнощепящих рестриктаз Smal и Apal позволило нам выявить 8 пульс-электротипов, причем некоторые из них были общими для нескольких штаммов, а другие выявляли различия между исследуемыми штам-мами/изолятами и особенности некоторых из них. Какой-либо взаимосвязи между источником выделения и пульс-электротипом мы не установили, лишь изоляты, выделенные от грызунов являлись генетически родственными. Однако мы обнаружили 100% сходство в распределении фрагментов ДНК для нескольких изолятов, циркулировавших на территории бывшего СССР в период с 1943 по 1976 г.г. Причем эти изоляты формировали 4 группы.

Итак, проведенные молекулярно-биологические исследования позволили выявить геномный полиморфизм штаммов/изолятов L. monocytogenes и установить идентичность распределения рестрицированных фрагментов ДНК для нескольких культур, выделенных в Украинской, Татарской СССР и Новосибирской области, а также Краснодарском крае и Читинской области. Последнее является свидетельством общности их происхождения.

Таким образом, в результате проведенных комплексных исследований с использованием как традиционных, так и разработанных в последнее десятилетие методик, изучены биологические свойства культур L. monocytogenes, выделенных из различных объектов в разные промежутки времени на географически отдаленных территориях.

Разработанные нами подходы и полученные данные могут быть использованы для сравнения коллекционных культур листерий со свойствами современных изолятов, циркулирующих на территории РФ и за рубежом; оценки эпизоотической значимости выделяемых изолятов листерий; разработки средств специфической профилактики и совершенствования схем лабораторной диагностики.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Суняйкин, Александр Иванович, 2010 год

1. A.C. № 1564191 СССР. Способ определения антиинтерфероновой активности микроорганизмов / О. В. Бухарин, В. Ю. Соколов. Открытия №18,15.05.1990.

2. Бакулов, И. А. Бактериологический контроль пищевых продуктов на наличие листерий. Методическое пособие / И. А. Бакулов. Ульяновск, 1999. -78 с.

3. Бакулов, И. А. Листериоз сельскохозяйственных животных / И. А. Бакулов. М.: Колос, 1967.- 296 с.

4. Бакулов, И. А. Листериоз как пищевая инфекция: вопросы диагностики и профилактики. Учебное пособие / И. А. Бакулов.- Ульяновск.- 1991.-С 23-29.

5. Бойко, А. В. Рибонуклеазная активность бактерий как фактор пер-систенции некоторых возбудителей сапронозных инфекций / А. В. Бойко, О. В. Бойко // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 1997.-№4.-С. 71-73.

6. Брудастов, Ю. А. Антикомплементарная активность бактерий: ав-тореф. дис. . канд. мед. наук / Брудастов Ю. А. — Челябинск, 1992.- 22с.

7. Бухарин, О. В. Биомедицинские аспекты персистенции бактерий / О. В. Бухарин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии-1994.-№8.- Приложение. С. 4-13.

8. Бухарин, О. В. Персистенция патогенных бактерий: теория и практика / О. В. Бухарин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 2000.- № 4.- Приложение.- С. 4-7.

9. Бухарин, О. В. Антилизоцимный тест как маркер персистенции микроорганизмов / О. В. Бухарин, Б. Я. Усвяцов // Теоретическая и прикладная иммунология: тез. докладов 1 Всесоюз. конф. М., 1982. - С. 58-64.

10. Гершун, В. И. Распространение и жизнеспособность листерии в объектах внешней среды и влияние температурного фактора на их морфологические свойства / В. И. Гершун // Вопросы природной очаговости болезней,-Алма-Ата, 1981.-Вып. 12.-С. 78-89.

11. Дмитренко, Н. В. Основы статистической обработки результатов микробиологических и вирусологических исследований / Н. В. Дмитренко.-Покров, 1993.-38 с.

12. Домардский, И. В. Вирулентность бактерий как функция адаптации / И. В. Домардский // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1997. - №4.-С. 16-20.

13. Егорова, И. Ю. Методические рекомендации по определению гемолитической активности культур рода Listeria / И. Ю. Егорова, Ю. О. Селянинов. -Покров, 2005.-8 с.

14. Ермолаева, С. А. Изменение уровня экспрессии факторов вирулентности Listeria monocytogenes под влиянием внешних условий / С. А Ермолаева, Ю. Ф. Белый, И. С. Тартаковский // Молекулярная генетика микробиология и вирусология.- 2000.-№1.- С. 17-19.

15. Ермолаева, С. А. Ауторегуляция экспрессии секретируемых белков у L. monocytogenes / С. А. Ермолаева, Ю. Ф. Белый, И. С. Тартаковский // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 2000.-№5.-С.3-6.

16. Зайцева, Е. А. Микробиологическая характеристика Listeria monocytogenes, изолированных из различных источников в Приморском крае /

17. Е. А. Зайцева, Г. П. Сомов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 2006.- №2.- С. 3-6.

18. Зайцева, Е. А. Распространение Listeria monocytogenes среди мышевидных грызунов на территории приморского края / Е. А Зайцева, С. А.Ермолаева, Г. П. Сомов // Тихоокеанский медицинский журнал.- 2008.- № 2.- С. 6569.

19. Зайцева, Е. А. Система анализа микробиологических и молекуляр-но-генетических маркеров для выявления высоковирулентных'штаммов Listeria monocytogenes: автореф. дис. . докт. мед. наук: 03.02.03 / Зайцева Елена Александровна.- М.- 2010.- 40 с.

20. Зарифуллина, JL А. Антилизоцимная активность менингококков, автореф. дис. . канд. мед. наук / Зарифуллина JL А. Челябинск, 1986.- 26 с.

21. Идентификация листерий с помощью метода молекулярной ДНК — ДНК гибридизации / И. А. Бакулов, В. М. Котляров, Т. П. Турова, Н. Б. Ба-калдина, Т. JT. Иванова-// Молекулярная генетика микробиология и вирусоло-гия.-1987.- №7.- С.31-35.

22. Изменение морфологии листерий в зависимости от температуры инкубирования / Л. Г. Астапович, И. А. Бакулов, В. М. Котляров, 3. Н. Меньшикова, О. Ю. Сакович//Ветеринария.- 1966.-№ 10.- С. 14-17.

23. Калишин, Н. М. Листериоз крупного рогатого скота / Н. М. Кали-шин. Л.: Колос. - Ленинградское отделение, 1981.- С. 12 .

24. Карпеев, С. А. Материалы докл. науч. конф., поев. 40-летию ТАССР / С. А Карпеев, Ф. 3. Амфитеатров. Казань, I960.- С.75.

25. Котлярова, Г. А. Биологические свойства L-форм Listeria monocytogenes: автореф. дис. . канд. биол. наук: 03.096 / Котлярова Галина Александровна. — Покров, 1970. -20 с.

26. Красовский, В. В. Листериозная инфекция на Украине. Клиническая картина заболевания электронный ресурс.- Режим доступа: www.ecologylife.m/simpozium/listerioznaya-infektsiya-na-ukraine.html.- Загл. с экрана.

27. Лабораторная диагностика листериоза животных и людей, меры борьбы и профилактики: методические рекомендации / Госагропром, МЗ СССР.-М., 1987.- 32 с.

28. Лабораторная диагностика листериоза животных и людей: методические рекомендации / Минздравмедпром РФ, Минсельхозпрод РФ.- М.,- 1996.28 с.

29. Лакин, Г. Ф. Биометрия. Учеб. пособие для биол. спец. вузов.- 3-е изд., перераб. и доп.- М.: Высш. школа, 1980.- 293 с.

30. Листерии и листериоз: монография / И. А. Бакулов, Д. А. Васильев, Д. В. Колбасов, Т. И. Кольпикова, Ю. О. Селянинов, И. Ю. Егорова. Ульяновск: УГСХА, 2008.- 168 с.

31. Лобан, К. М. БЖЭ. 3-е изд. / К. М. Лобан, В. П. Бисерина, И. В. То-роповцев, Г. В. Борисова. М., 1980.- С. 200-204.

32. Малеев, В. В. Опасные инфекции: листериоз / В. В. Малеев // Сестринское дело.- №4.- 2000.- 235 с.

33. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология / Л. Б Борисов, А. М. Смирнова, И. С. Фрейдлин и др. М.: Медицина, 1994.- 528 с.

34. Меньшикова, 3. Н. Актуальные вопросы ветеринарной медицины: электронно — микроскопическая идентификация листерий возбудителей пищевого листериоза / З.Н. Меньшикова, Е.В. Тищенко; ФГОУ ВПО Уральская ГАВМ.- 2005.- С. 68.

35. Меньшикова, 3. Н. Электронно-микроскопическое изучение морфологии листерий и эризипелотриксов: автореф. дис. . канд. биол. наук / Меньшикова Зинаида Николаевна. Покров, 1971г.- 24 с.

36. Метод определения антилизоцимной активности микроорганизмов / О. В. Бухарин, Б. Я. Усвяцов, А. П. Малышкин, Н. В. Немцева // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии.- 1984.-№2.-С. 27-28.

37. Минаева, Н. Э. Микробиологические аспекты эпидемиологии лис-териоза / Н. Э. Минаева, В. И. Ладный // Листериоз на рубеже тысячелетий: материалы Международного симпозиума.- Покров, 1999.- С. 137.

38. Москаленко, В. Ф. Биологические свойства и патогенный потенциал листерий, циркулирующих в Украине / В. Ф. Москаленко // Провизор.-1998.-№ 14,- С 58.

39. Новые методы идентификации Listeria monocytogenes / Т. И. Карпова, С. А. Ермолаева, И. В. Лопырев, Н. С. Бродинова, И. С. Тартаковский, X. А. Васкез-Боланд // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. 2001.-Т. 3, № 3.- С. 266-273.

40. Онищенко, Г. Г. Эпидемиология и профилактика листериоза: методические указания 3.1.7.1104-02 / Г. Г. Онищенко.- М., 2002.

41. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам / методические указания 4.2.1890-04 // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия.- 2004.- Т. 6, №4.- С 306-359.

42. Поздеев, О. К. Медицинская микробиология: учеб. пособие / О. К Поздеев; под ред. В. И. Покровского Изд. 4-е, испр. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006.-305 с.

43. Практическое применение листериозных фагов / И. А. Бакулов, Т. И. Кольпикова, Д. А. Васильев, А. В. Меркулов, В. М. Котляров. Ульяновск, 1998.-66 с.

44. Прозоровский, С. В. Ь-формы бактерий (механизмы образования, структура, роль в патологии) // С. В. Прозоровский, Л. Н. Кац, Г. Я. Каган.- М., 1981.- 175 с.

45. Сливко, В. В. Листереллез сельскохозяйственных животных / В. В. Сливко. Вологда, 1954.- 145с.

46. Сомов, Г. П. Сапрофитизм и паразитизм патогенных бактерий: экологические аспекты / Сомов Г. П., В. Ю. Литвин.- Новосибирск: Наука, 1988.208 с.

47. Сухотина, В. П. Выживаемость листерий в почвах под влиянием ризосферы некоторых растений: автореф. дис. . канд. вет. наук / В. П. Сухотина.-Новосибирск, 1978. 22 с.

48. Тартаковский, И. С. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностика / И. С. Тартаковский, В. В. Малеев, С. А. Ермолаева М.: Медицина для всех, 2002. - 200с.

49. Тартаковский, И. С. Листерии: роль в инфекционной патологии человека и лабораторная диагностика / И. С. Тартаковский // КМАХ. 2000.- Т 2, №2.- С 20-30.

50. Тимофеева, Л. А., Головачева Л. Я., Трофименко Н. 3. Доклад Иркутского противочумного института. Т. 4. Иркутск, 1962.- С 208-210.

51. Триполитова, А. А. Листериоз / А. А. Триполитова, Г. В. Борисова.-Томск: Изд-во ТГУ, 1965.- 260 с.

52. Чернова, О. JI. Антилизоцимная активность стафилококков, выделенных при бактерионосительстве: автореф. дис. . канд. биол. наук. Челябинск, 1989. 26 с.

53. Хоулта, Дж. Определитель бактерий Берджи: в 2-х т., Т. 2 пер. с англ; под ред. Дж. Хоулта, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уильямса. М.: Мир, 1997. - С 573-577.

54. Antimicrobal resistance of Listeria monocytogenes human strains isolated since 1926 in France / C. Morvan, A. Moubareck, M. Leclercq, S. Bremont, P. Lecuit and A. Le Monnier Courvalin. Lirvo de actas do congresso: ISOPOL XVII. -Porto, 2010. -P.108.

55. Antimicrobal susceptibilities of Listeria monocytogenes isolated in Japan / S. Monden, A. Okutani, H. Suzuki, H. Asakura, A. Nakama, S. Igimi, Y. Okada and T. Maruyama. Lirvo de actas do congresso: ISOPOL XVII. Porto, 2010.- P.73.

56. Bacterial and viral inhibitioi and modulation of host defences / H. Smith, G. Falcone, M. Campa, G. M. Scott // Academic Press Inc. London, 1984.- P. 171190.

57. Belyi, Y. F. Intracellular parasitism of microorganisms / Y. F. Belyi // Springer-Verlag Gmb H and Co. KG. - 1996. - P. 87.

58. Blakdi S. and Muhly M. J. Infect. Immun. 1985. - Vol. 47. - P. 47- 51.

59. Braude, A. I. Microbial Perturbation of Host Defences / A. I. Braude, F. О'Grady, H. Smith (ed.) // Academic Press Inc. - London, 1981. - P. 13.

60. Carbon source regulation of virulence gene expression in Listeria monocytogenes / A. A. Milenbachs, D. P. Brown, M. Moors, P. Youngman // Mol. Microbiol.- 1997.- Vol. 23.- P. 1075-1085.

61. Cossart, P. Interactions of Listeria monocytogenes with mammalian cells during entry and actin-based movement: bacterial factors, cellular ligands and signaling / P. Cossart, M. Lecuit // EMBO J. 1998. - Vol. 17. - P. 3797- 3806.

62. Czuprynski, Charles J. Interaction of rat platelets with Listeria monocytogenes / Charles J. Czuprynski, Edward Balish // Infection and Immunity. 1981. -Vol. 33. -№. l.-P. 103-108.

63. Evidence that PrfA, the pleiotropic activator of virulence genes in Listeria monocytogenes, canbe present but inactive / A. Renzoni, A. Klarsfeld, S. Dramsi, P. Cossart//Infect. Immun. 1997.-Vol. 65.-P. 1515-1518.

64. Fulco O. J., Leggiardo R .J.; N. Y. State. J. Med. 1982. - Vol. 82. -№ 12.-P. 1857-1858.

65. Gouin, E. The virulence gene cluster of Listeria monocytogenes is also present in Listeria ivanovii, an animal pathogen, and Listeria seeligeri, a nonpathogenic species / E. Gouin, J. Mengaud, P.Cossart // Infect Immun.- 1994.- Vol. 62.- P. 3550-3553.

66. Halaas O. et al. J. Immunol.- 2000.- Vol. 164, № 4.- P. 2064-2069.

67. Hamon Y, Etude du pouvoir bacteriocinogene dans le genre Listeria. 2. Individualité et classification des bacteriocines en cause / Y. Hamon, Y. Peron // Annales De L Institut Pasteur. 1963. - Vol. 104. - № 1. - P. 55.

68. Hancock, R. E. Antagonist activity medicinal chemistry-38 / R. E. Hancock // Clin Inf Dis. 1998. - Vol. 27. - S. 93-99.

69. Hill, C. Listeriolysin S a second haemolysin with a role in the virulence of Listeria monocytogenes / C. Hill. Lirvo de actas do congresso: ISOPOL XVII. - Porto, 2010. - P. 24.

70. Inl A- but not Inl B-mediated internalization of Listeria monocytogenes by non-phagocytic mammalian cells needs the support of other internalins / B. Bergmann, D. Reffelsbauer, M. Kuhn et al. // Mol. Microbiol.- 2002.- Vol. 43.- P. 557575.

71. Involvement of an active efflux system in the natural resistance of Pseudomonas aeruginosa to aminoglycosides / J. R. Aires, T. Kohler, H. Nikaido, and P. Plésiat // Antimicrob. Agents Chemother. 1999. - Vol. 43. - №11. - P. 2624-2628.

72. Leimeister-Wächter, M. Detection of listeriolysin, the thiol-dependent hemolysin in Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, and Listeria seeligeri /

73. M. Leimeister-Wächter, T. Chakraborty // Infect. Immun. 1989. - Vol. 57. - P. 23502357.

74. Leimeister-Wächter, M. The expression of virulence genes in Listeria monocytogenes is thermoregulated / M. Leimeister-Wachter, E. Domann, T. Chakraborty // J.Bacteriol.-1992. Vol. 174. - P. 947-952.

75. Listeria pathogenesis and molecular virulence determinants / J. A. Vaz-quez-Boland, M. Kuhn, P. Berche, T. Chakraborty, G. Dominguez-Bernal, W. Goe-bel, B. Gonzalez-Zorn, J. Wehland, J. Kreft // Clin. Microbiol. 2001. - Rev. 14. - P. 584-640.

76. Listeriolysin O is essential for virulence of Listeria monocytogenes: direct evidence obtained by gene complementation / P. Cossart, M. F. Vincente, J. Mengaud, F. Baquero, J. C. Perez-Diaz, P. Berche // Infect. Immun. 1989. - V. 57.- P. 3629-3636.

77. Low-virulence field Listeria monocytogenes strains belong to four phe-notypic groups / S. M. Roche, P. Gracieux, I. Albert, P. Velge // XV International Symposium on Problems of Listeriosis.- Uppsala, Swden, 2004.

78. Non-hemolytic and hypovirulent Listeria monocytogenes became hae-molytic and virulent after passage through mice /1. Secic, T. Lindback, L. M. Rorvik.- Lirvo de actas do congresso: ISOPOL XVII. Porto, 2010. - P. 102.

79. Nucleotide sequence of the lecithinase operon of Listeria monocytogenes and possible role of lecithinase in cell-to-cell spread / J. A. Vazquez-Boland, C. Kocks, S. Dramsi, et al. // Infect Immun. 1992.- 60.- P. 219-230.

80. Paterson, J. S. Flagellar antigens of organisms of the genus Listeria / J. S. Paterson //J. Path. Bact. 1939. - 48. - P. 25-32.

81. Paterson, J. S. The antigenic structure of organisms of the genus Listeria / J. S. Paterson // J. Pathol. Bacteriol. 1940. - Vol. 51. - P. 427-436.

82. Portnoy, D. A. Innate immunity to a facultative intracellular bacterial pathogen / D. A. Portnoy // Curr. Opn. Immunol. 1992. - Vol. 4. - P. - 20-24.

83. Production and nature of Listeria monocytogenes hemolysins / Augustine N. Njoku-Obi, Edward M. Jenkins, Jessie C. Njoku-Obi, Joanne Adams and Verdell Covington // J Bacteriol. 1963. - Vol. 86, №1. - P. 1-8.

84. Rocourt J., Grimont F., Grimont P. A. D., Seeliger H. P. R // Curr. Microbiol. 1982. - Vol. 7. - P. 383 - 388.

85. Schuchat, A. Epidemiology of Human Listeriosis / A. Schuchat, B. Swaminathan, C. V. Broome // Clin. Microbiol. 1991. - Rev. - 4. - P. 169-183.

86. Seeliger, H. P. R. Listeriosis / H. P. R. Seeliger // 1961. Karger, New York. - NY.

87. Seeliger H. P. Listeria and Law in "Listeria 1992, ISOPOZ XI" / H. P Seeliger // Copenhagen. 1992. - P. 1-6.

88. Shultz, Leonard D. Cytotoxicity of rabbit blood for Listeria monocytogenes. / Leonard D. Shultz, Martin S. Wilder // Infect. Immunity. 1971. - Vol. 4. -P. 701-708.

89. Smith, C.W. Demonstration of a capsular structure on Listeria monocytogenes / C. W. Smith, G. F. Metzger 11 Pathol. Microbiol. 1962. - Vol. 25. -P. 499-506.

90. Sneath P. H. A. Bergte's manual of Systematic bacteriology / P. H. A. Sneath, N. S. Mair, M. E. Holt J. G. Sharpe, //9th Ed.- Vol. 2.- 1986.- Williams & Wilkins.- Co. Baltimore. MD. P. 253.

91. The bvr locus of Listeria monocytogenes mediates virulence gene repression by Bglucosides / K. Brehm, M. T. Ripio, J. Kreft, J. A. Vazquez-Boland // J. Bacteriol.- 1999.- Vol. 181.- P. 5024-5032.