Деградация 2,4-дихлорфенола иммобилизованными и суспендированными клетками Bacillus cereus тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат технических наук Центер, Ирина Михайловна

• Центер, Ирина Михайловна
• кандидат технических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат технических наук Центер, Ирина Михайловна

Введение.

1. Литературный обзор.

I. Полихлорированные фенолы.

1. Общая характеристика полихлорированных фенолов.

1.1 Физико-химические свойства.

1.2 Токсичность.

1.3. Источники поступления.

2. Методы деградации полихлорированных фенолов

2.1. Фотохимические методы.

2.1.1. Прямой фотолиз.

2.1.2. Сенсибилизированный фотолиз.

2.1.3. Каталитический фотолиз.

2.1.4. Новые окислительные технологии.

2.2. Биологические методы.

II. Деградация полихлорированных фенолов иммобилизованными клетками.

1. Общие сведения о цеолитах.

2. Адсорбционные методы иммобилизации микробных клеток. Взаимодействие минералов с микроорганизмами.

3. Применение иммобилизованных клеток для очистки сточных вод.

2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объекты исследований.

2.2. Методы исследований.

2.1.1. Микробиологические методы.

2.2.1.1. Определение численности клеток.

2.2.1.2. Размеры клеток.

2.2.1.3. Методика приготовления питательных сред для культивирования микроорганизмов.

2.2.1.4. Изучение морфологии бактерий.

2.2.1.5. Окраска жгутиков по Леффлеру.

2.2.1.6. Метод раздавленной капли.

2.2.1.7. Протеолитические свойства микроорганизмов.

2.2.1.8. Определение сероводорода.

2.2.1.9. Определение аммиака.

2.2.1.10. Определение индола.

2.2.1.11. Определение редуцирующей способности.

2.2.1.12. Определение сахаролитической способности.

2.2.1.13. Определение каталазы.

2.2.1.14. Определение антагонистической активности.

2.2.1.15. Обнаружение капсулы и определение ее природы.

2.2.2. Физико-химические методы анализа.

2.2.2.1. Спектрофотометрическое определение полихлорфенолов

3. АДСОРБЦИОННАЯ ИММОБИЛИЗАЦИЯ КЛЕТОК BACILLUS С ERE US НА ПРИРОДНЫХ ЦЕОЛИТАХ

3.1. Исследование влияния природных цеолитов на морфологокультуральные и физиолого-биохимические характеристики Bacillus cereus.

3.2. Исследование влияния 2,4-ДХФ на морфолого-культуральные характеристики культуры Bacillus cereus.

3.3. Определение токсичности природных цеолитов и 2,4-ДХФ.

3.4. Характеристики сорбции Bacillus cereus природными цеолитами

4. БИОДЕГРАДАЦИЯ 2,4-ДХФ ИММОБИЛИЗОВАННЫМИ И СУСПЕНДИРОВАННЫМИ КЛЕТКАМИ BACILLUS CEREUS.

5. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ИНТЕРМЕДИАТОВ МЕТОДОМ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ. сю

6. БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ СХЕМА ОЧИСТКИ СТОЧНЫХ ВОД С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ МИКРООРГАНИЗМА-ДЕСТРУКТОРА

ПОЛИХЛОРИРОВ АННЫХ ФЕНОЛОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Деградация 2,4-дихлорфенола иммобилизованными и суспендированными клетками Bacillus cereus»

Актуальность работы.

Признание озера Байкал, как участка мирового природного наследия, накладывает на мировое сообщество и, в первую очередь, на Россию обязательства по сохранению озера для будущих поколений людей. Среди органических акваэкотоксикантов особую опасность для экосистемы озера представляют полихлорированные фенолы. Согласно разработанному «Перечню вредных веществ, вредных для экосистемы озера Байкал», полихлорированные фенолы относятся к категории «особо опасных» веществ, содержание которых в воде озера Байкал и его притоков недопустимо [1]. В действительности же, на Байкальском целлюлозно-бумажном комбинате (БЦБК) полихлорфенолы образуются при хлорной отбелке целлюлозы и обнаруживаются в воде озера Байкал, в зоне сброса очищенных сточных вод [2]. Присутствие полихлорфенолов в бассейне реки Селенги, главного притока озера, обусловлено локальными антропогенными и природными источниками [3]. Особенностью этих соединений является высокая токсичность для акваэкосистем, способность к биоаккумуляции, относительная устойчивость к разложению в окружающей среде. Поэтому, актуальной является проблема их принудительной деградации, с целью защиты окружающей среды.

Биологический метод, основанный на применении активных микроорганизмов-деструкторов, в большинстве случаев является наиболее экономически обоснованной альтернативой химическим и физико-химическим методам. Причем, эффективность биологической обработки повышается при иммобилизации клеток микроорганизмов, что широко используется в практике при очистке промышленных стоков [4].

Весьма перспективным является применение метода адсорбционной иммобилизации на неорганическом носителе - природных цеолитах, обладающих биологической активностью, кислотоустойчивостью и уникальным сочетанием адсорбционных, катионообменных и каталитических свойств. Природные цеолиты также обладают способностью интенсифицировать клеточные процессы, но механизмы их цитотоксического и активирующего действия остаются неясными [5].

В связи с этим, несомненный интерес представляет исследование воздействия цеолитов на микробные клетки и возможности их использования в качестве носителя для иммобилизации микроорганизмов-деструкторов с целью интенсификации биологической очистки сточных вод, содержащих полихлорфенолы. Ранее, из ила пруда-аэратора БЦБК была выделена и идентифицирована как Bacillus cereus новая культура, обладающая наибольшим деструктивным потенциалом по отношению к 2,4-дихлорфенолу [6].

Поэтому, обоснованной и актуальной представляется проблема обезвреживания токсичных полихлорфенолов с применением новых микроорганизмов-деструкторов, иммобилизованных на природных цеолитах.

Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Байкальского института природопользования СО РАН по научному направлению подпрограммы СО РАН 17.7. «Защита атмосферы, природных вод и почв» и являлась частью проекта «Разработка физико-химических основ новых высокоэффективных технологий обезвреживания стойких органических загрязнителей природных и сточных вод».

Цель работы. Исследование процесса иммобилизации на природных цеолитах культуры Bacillus cereus (далее В.cereus) и разработка биотехнологического способа обезвреживания полихлорированных фенолов с использованием иммобилизованных и суспендированных клеток.

Основные задачи:

• исследовать влияние природных цеолитов Холинского месторождения Республики Бурятия на морфолого-культуральные и физиолого-биохимические характеристики В. cereus\

• определить характеристики сорбции клеток В. cereus природными цеолитами Холинского месторождения;

• исследовать процесс иммобилизации клеток В. cereus на природных цеолитах, получить иммобилизованные клетки В. cereus-,

• изучить кинетику биодеградации 2,4-ДХФ иммобилизованными на природных цеолитах и суспендированными клетками В. cereus;

• идентифицировать продукты биодеградации 2,4-ДХФ и оценить их токсичность;

• разработать биотехнологическую схему очистки сточных вод с использованием иммобилизованных клеток В. cereus.

Научная новизна работы. В работе показана возможность использования природных цеолитов Холинского месторождения (Республика Бурятия) в качестве матрицы для иммобилизации микроорганизмов В. cereus. Исследован механизм сорбции клеток В. cereus на природных цеолитах Холинского месторождения. Продемонстрирована способность иммобилизованных на природных цеолитах клеток В. cereus разлагать 2,4-ДХФ в статических условиях. Методом хромато-масс-спектрометрии идентифицированы основные продукты биодеградации 2,4-ДХФ данным микроорганизмом и установлена их нетоксичность. Выявлена перспективность применения иммобилизованных клеток культуры В. cereus для эффективной утилизации полихлорированных фенолов.

Практическая значимость. Получены иммобилизованные клетки микроорганизма-деструктора полихлорфенолов В. cereus с использованием природных цеолитов Холинского месторождения (Республика Бурятия), определены оптимальные условия их иммобилизации. Показано, что после иммобилизации клетки сохраняют деструктивную активность по отношению к 2,4-ДХФ.

Проведены укрупненные производственные испытания разработанной технологии очистки сточных вод от полихлорфенолов (ЗАО «Кондитерпром», г. Улан-Удэ (Акт испытаний №1 от 17.07.2007г.)).

Результаты исследований включены в отчеты Байкальского института природопользования СО РАН по проекту 17.7 приоритетного направления СО РАН «Разработка физико-химических основ новых высокоэффективных технологий обезвреживания стойких органических загрязнителей природных и сточных вод», экспедиционным грантам СО РАН, гранту федеральной целевой программы "Интеграция науки и высшего образования России на 2002-2006 годы" (2004 г.) «Комбинированное фотолитическое и биологическое окисление хлорированных фенолов с применением ультрафиолетовых эксиламп емкостного разряда», гранту Правительства Республики Бурятия для молодых ученых на выполнение НИР по теме «Инновационная технология обезвреживания промышленных стоков, содержащих хлорфенолы» (2005 г.), гранту ФЦНТП РИ-19.0/001/014 «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники» на 2002-2006 годы «Разработка инновационной окислительной технологии деградации фенольных пестицидов иммобилизованными микроорганизмами» (2006 г.).

Апробация работы. Результаты работы представлялись на международных и региональных конференциях и симпозиумах: «Проблемы устойчивого развития региона» (г. Улан-Удэ, 2004), «Научные основы сохранения водосборных бассейнов: междисциплинарные подходы к управлению природными ресурсами» (г. Улан-Удэ - Улан-Батор, 2004), «Кожа и мех в XXI веке: технология, качество, экология, образование» (г. Улан-Удэ, 2006), «Трансграничные аспекты использования природно-ресурсного потенциала бассейна реки Селенги в новой социально-экономической и геополитической ситуации» (г. Улан-Удэ, 2006), «Участие молодых ученых, инженеров и педагогов в разработке и реализации инновационных технологий» (г. Москва, 2006), Всероссийская конференция молодых ученых «Экология в современном мире: взгляд научной молодежи» (Улан-Удэ, 2007), IV школа-семинар молодых ученых России «Проблемы устойчивого развития региона» (Улан-Удэ, 2007).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 8 работ. Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, четырех глав, выводов и списка использованных источников (135 наименований). Работа изложена на 123 страницах машинописного текста, иллюстрирована 28 рисунками и 10 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Центер, Ирина Михайловна

ВЫВОДЫ:

1. Установлено, что природные цеолиты не оказывают угнетающего действия на клетки В. cereus вследствие нейтральности сорбента и нетоксичности его по отношению к бактериальной клетке. Показан стимулирующий эффект воздействия природных цеолитов на физиолого-биохимические свойства клеток В. cereus.

2. Определена сорбционная активность природных цеолитов Холинского месторождения по отношению к клеткам В. cereus. Адсорбция клеток В. cereus на поверхности природных цеолитов происходит за счет белковых капсул. Средняя степень адсорбции клеток В. cereus на природных цеолитах составила 86%.

3. Разработан способ иммобилизации клеток микроорганизма В. cereus, получены иммобилизованные клетки.

4. Установлено, что скорость деградации 2,4-ДХФ иммобилизованными на природных цеолитах клетками В. cereus выше в 1,9 раза скорости деградации 2,4-ДХФ суспендированными клетками в статических условиях.

5. С помощью хромато-масс-спектрометрии идентифицированы продукты биодеградации 2,4-ДХФ. Найдено, что основным продуктом биодеградации 2,4-ДХФ является нетоксичная фталевая кислота.

6. Разработана биотехнологическая схема очистки сточных вод, содержащих 2,4-ДХФ, при исходной концентрации до 300 мкМ, с использованием иммобилизованных на природных цеолитах клеток В. cereus.

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Центер, Ирина Михайловна, 2007 год

1. Перечень веществ, вредных для экосистемы озера Байкал. Проект. М., МПР РФ, 2004.

2. Бейм A.M., Белявцева Г.В., Горохова В.Г., Горохов А.Г., Бабкин В.А. Хлорорганические соединения, поступающие в Байкал со сточными водами Байкальского целлюлозно-бумажного комбината // Химия в интересах устойчивого развития, 1997. Т.5, №4 - С. 383-392.

3. Батоев В.Б., Нимацыренова Г.Г., Дабалаева Г.С., Палицына С.С. Оценка загрязненности хлорированными фенолами бассейна реки Селенги // Химия в интересах устойчивого развития, 2005, Т. 13, №1 -С. 31-35.

4. Пирог Т.П., Шевчук Т.А., Волошина И.Н., Грегирчак Н.Н. Использование иммобилизованных на керамзите клеток нефтеокисляющих микроорганизмов для очистки воды от нефти // Прикладная биохимия и микробиология, 2005. Т.41, №1 - С.58-63.

5. Фалилеева О. Ю. О исследовании молочнокислых бактерий и природных сорбентов для получения препарата профилактического действия: Автореф. дис. на соискание ученой степени канд. биол. наук / ВСГТУ.- Улан-Удэ, 1999.-21 с.

6. Kiefer M. C., Hengraprom S., Knuteson S., Environmental Engineering Chemistry II: Environmental Organic Chemistry, Organochlorines: Analysis of the Chlorophenol Group, 1998.

7. Agency for Toxic Substances and Disease Registry (ATSDR), Toxicological Profile for Chlorophenols. Atlanta, GA: U.S. Department of Health and Human Services, Public Health Service, 1999.

8. Environmental Handbook. Volume III: Compendium of environmental standards Chlorophenols, 1995.

9. Ю.Белоусова М.Я., Авгуль T.B., Сафронова H.C. Основные свойства нормируемых в водах органических соединений. М.: Наука, 1987. 104 с.

10. П.Федоров JI.A., Мясоедов Б.Ф. Диоксины: химико-аналитические аспекты проблемы // Успехи химии, 1990. Т. 59. № 11 - С. 1818-1866.

11. Бартулевич Я., Ягов Г.В. Методы определения ПАУ в объектах окружающей среды // Питьевая вода, 2001. № 6 - С. 11.

12. Перечень рыбохозяйственных нормативов: предельно допустимых концентраций (ПДК) и ориентировочно безопасных уровней воздействия (ОБУВ) вредных веществ для воды водных объектов, имеющих рыбохозяйственное значение, М.: Изд-во ВНИРО, 1999.

13. СанПиН 2.1.4.559-96. Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества: Санитарные правила и нормы, М.: Информационно-издательский центр Госкомсанэпиднадзора России, 1996.- 111 с.

14. Crommentuijn Т., Sijm D., J. de Bruijn, К. van Leeuwen, E. van de Plassche. Maximum permissible and negligible concentrations for some organic substances and pesticides // Environm. Management, 2000. № 58 - pp. 297-312.

15. Ambient Water Quality Guidelines For Chlorophenols (Overview Report). Canada: Ministry of Water, Land and Air Protection, 1997.

16. Bright D., Hodson P., Lehtinen K.-J., McKague В., Rodgers J., Solomon K. Evaluation of Ecological Risks Associated with the Use of Chlorine Dioxide for the Bleaching of Pulp, 1993.

17. Juuti S., Vartiainen Т., Joutsenoja P., Ruuskanen J. Volatile organochlorine compounds formed in the bleaching of pulp with CIO2 // Chemosphere, 1996. -№33-pp. 437-448.

18. Елин E.C. Фенольные соединения в биосфере. Новосибирск: Издательство СО РАН, 2001. - 392 с.

19. McNaught D.C., Beim A.M. Ecotoxicological assessment of treated effluents on phytoplankton and zooplankton of Lake Baikal // Siberian J. Ecol., 1997. -№ 2-pp. 199-203.

20. Белявцева Г.В., Горохова В.Г., Бабкин B.A., Бейм A.M. Идентификация токсичных хлорорганических соединений, поступающих в озеро Байкал со сточными водами целлюлозного производства // География и природные ресурсы, 1993. № 3 - С. 77-80.

21. Белявцева Г.В., Дубовенко Ж.В. Хлорорганические вещества в донных отложениях Южного Байкала // География и природные ресурсы, 1994. -№ 2-С. 61-64.

22. Артемова Н.Б., Барам Г.И., Надобнов С.В. Накопление хлорфенолов в рыбах приемных водоемов предприятий целлюлозной промышленности // Доклады Академии наук, 1989. Т. 309, № 2 - С. 508-511.

23. Барам Г.И., Маринайте И.И., Надобнов С.В. Групповое определение хлорфенолов в желчи рыб как тест на загрязнение водоема стоками предприятий целлюлозной промышленности // Журнал физической химии, 1991. -Т. 65, №12 С. 3369-3374.

24. Stepanova L. I., Glaser V. M., Savinova Т. I., Kotelevtsev S. V., Savva D. Accumulation of Mutagenic Xenobiotics in Fresh Water Lake Baikal and Marine Hornoya Island Ecosystems // Ecotoxicology, 1999. № 8 - pp. 8396.

25. WHO. World Health Organization, Environmental Health Criteria Monograph (EHC), Environmental Health Criteria 93. Chlorophenols other than pentachlorophenol, 1989.

26. The United Kingdom Marine Special Areas of Conservation (SACs), Project Report, 2001.

27. Gribble G. W. The diversity of naturally produced organohalogens // Chemosphere, 2003. № 52 - pp. 289-297.

28. Ballschmiter K. Pattern and sources of naturally produced organohalogens in the marine environment: biogenic formation of organohalogens // Chemosphere, 2003. № 52 - pp. 313-324.

29. Keene W.C. The Natural Chemistry of Inorganic Chlorine in the Lower Atmosphere: A Potential Source for Organochlorine Compounds, The Natural Chemistry of Chlorine in the Environment. Euro Chlor publication, 1999.

30. Asplund G., Grimvall A. Organohalogens in Nature // Environ. Sci. Technol., 1991.-Vol.25, №8-pp. 1347-1350.

31. Flodin C., Ekelund M., Boren H., Grimvall A. Pyrolysis-GC/AED and pyrolysis-GC/MS analysis of chlorinated structures in aquatic fulvic acids and chlorolignins // Chemosphere, 1997 Vol.34, №11 - pp. 2319-2328.

32. Hodin F., Boren H., Grimvall A. Formation of chlorophenols and related compounds in natural and technical chlorination processes // Water Science Technology, 1991. Vol.24, № 3/4 - pp. 403-410.

33. Miiller G. Sense or ло-sense of the sum parameter for water soluble «adsorbable organic halogens» (AOX) and «absorbed organic halogens» (AOX-S18) for the assessment of organohalogens in sludges and sediments // Chemosphere, 2003. №52 - pp. 371-379.

34. Grimvall A. Natural Organochlorines in Precipitation and Surface Waters. The Natural Chemistry of Chlorine in the Environment. Euro Chlor publication, 1999.

35. Аюкаев Р.И., Петров Е.Г., Аюкаев P.P. Проблемы удаления гумусовых веществ из поверхностных и подземных вод в России // Вода и Экология, 2000. № 1 с. 10-12 .

36. Орлов Д.С. Гуминовые вещества в биосфере // Соросовский образовательный журнал, 1997. №2 с.56-63 .

37. The Natural Chemistry of Chlorine in the Environment. A Series of Overviews by a Panel of Independent Scientists. Brussel: World Chlorine Council, 1999.

38. Peuravuori J., Paaso N., Pihlaja K. Sorption behavior of some chlorophenols in lake aquatic humic matter // Talanta, 2002. №56 - pp. 523-538.

39. Burrows H.D., M. Canle L, Santaballa J.A., Steenken S. Reaction pathways and mechanisms of photodegradation of pesticides // J. Photochem. Photobiol. B: Biology, 2002. №67 - pp. 71-108.

40. Getoff N., Solar S. // Radiation Physics and Chemistry, 1986. №28 - p. 443.

41. Vollmuth S., Zajc A., Niessner R. // Environmental Science and Technology, 1994. №28 - p. 1145.

42. Pandiyan Т., Martinez Rivas O., Orozco Martinez J., Burillo Amezcua G., Martinez-Carrillo M.A. Comparison of methods for the photochemical degradation of chlorophenols // J. Photochem. Photobiol. A: Chemistry, 2002-№146-pp. 149-155.

43. Benitez F. Javier, Acero Juan L., J. Real F., Garcia J. Kinetics of photodegradation and ozonation of pentachlorophenol // Chemosphere, 2003. -№51-pp. 651-662.

44. Tarasenko V.F., Chernov E.B., Erofeev M.V., Lomaev M.I., Panchenko A.N., Skakun V.S., Sosnin E.A., Shitz D.V. UV and VUV excilamps excited by glow, barrier and capacitive discharges // Appl. Phys. A Suppl., 1999. -N69.-pp. 327-S329.

45. Zhang J.-Y., Boyd I.W. Lifetime investigation of excimer UV sources // Applied Surface Science, 2000. №168 - pp. 296-299.

46. Baum G., Oppenlander T. Vacuum UV - oxidation of chloroorganic compounds in an excimer flow through photoreactors // Chemosphere, 1995. -Vol.30, №9-pp. 1781-1790.

47. Bazyl O.K., Kopylova T.N., Sokolova I.V., Sosnin E.A., Svetlitchnyi V.A., Tarasenko V.F., Tchaikovskaya O.N. Improvement of photodecomposition methods of phenol containing ecotoxicants in aqueous media // Proceedings SPIE, 2002. Vol.4147 - pp. 240-244.

48. Vialaton D., Richard C. Phototransformation of aromatic pollutants in solar light: Photolysis versus photosensitized reactions under natural water conditions // Aquat. Sci., 2002. №64 - pp. 207-215.

49. Vialaton D., Richard C., Baglio D., Paya-Perez A-B. Phototransformation of 4-chloro-2-mrthylphenol in water: influence of humic substances on the reaction // J. Photochem. Photobiol. A: Chemistry, 1998. №119 - pp. 3945.

50. Silva M.I., Burrows H.D., Miguel M.G., Formosinho SJ. Tris-2-2'-bipyridylruthenium (II) peroxydisulphate as a photosensitizer in the oxidative degradation of 4-chlorophenol // Ber. Bunsenges. Phys. Chem., 1996. -№100 -pp. 138-143.

51. Axelsson A.-K., Dunne L.J. Mechanism of photocatalytic oxidation of 3,4-dichlorophenol on T\02 semiconductor surface // J. Photochem. Photobiol. A: Chemistry, 2001. №144 - pp. 205-213.

52. Tseng J.M., Huang C.P. Removal of chlorophenols from water by photocatalytic oxidation // Water Science Technology, 1991. №23 - pp. 377-387.

53. Djebbar K., Sehili T. Kinetics of heterogeneous photocatalytic decomposition of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid over titanium dioxide and zinc oxide in aqueous solution // Pestic. Sci., 1998. №54 - pp. 269-276.

54. Legrini O., Oliveros E., Braun A.M. Photochemical processes for water treatment // Chem. Rev., 1993. №93 - pp. 671-698.

55. Kim S-M., Vogelpohl A. Degradation of organic pollutants by Photo-Fenton-Process // Chem. Eng. Technol., 1998. Vol. 21, №2 - pp. 187-191.

56. Hirvonen A., Trapido M., Hentunen J., Tarhanen J. Formation of hydroxylated and dimeric intermediates during oxidation of chlorinated phenols in aqueous solution // Chemosphere, 2000 №41 - pp. 1211-1218.

57. Fukushima M., Tatsumi K. Degradation pathways of pentachlorophenol by photo-Fenton systems in the presence of iron (III), humic acid, and hydrogen peroxide // Environ. Sci. Technol., 2001. №35 - pp. 1771-1778.

58. Benitez F.J., Beltran-Heredia J., Acero J.L., Rubio F. J. Contribution of free radicals to chlorophenols decomposition by several advanced oxidation processes // Chemosphere, 2000. №41 - pp. 1271-1277.

59. Mazellier P., Bolte M., 3-Chlorophenol elimination upon excitation of dilute1. У Airon (III) solution: Evidence for the only involvement of Fe(OH) // Chemosphere, 2001. №42 - pp. 361-366.

60. Yeber M.C., Rodriguez J., Freer J., Baeza J., Duran N., Mansilla H.D. Advanced oxidation of a pulp mill bleaching wastewater // Chemosphere, 1999.-Vol.39, №10-pp. 1679-1688.

61. Маркушева T.B., Журенко Е.Ю., Кусова И.В. Бактерии-деструкторы фенола и его хлорированных производных. Уфа: Гилем, 2002. 108 с.

62. Соляникова И.П., Головлева JI.A. Фенол гидроксилазы: современное состояние вопроса (Обзор) // Биохимия, 1999. Т. 64, № 4 - С. 437-446.

63. Финкелыитейн З.И., Баскунов Б.П., Головлев E.JL, Моисеева О.В., Вервурт Ж., Ритьенс И., Головлева JI.A. Зависимость превращения хлорфенолов родококками от положения и числа атомов хлора в ароматическом кольце // Микробиология, 2000 Т.69, №1 - С.49-57.

64. Genthner B.R.S., Price II W.A., Pritchard Р.Н. Anaerobic degradation of chloroaromatic compounds in aquatic sediments under a variety of enrichment condition // Applied and environmental microbiology, 1989. -№55-pp. 1466-1471.

65. Takeuchi R., Suwa Y., Yonezawa Y. Anaerobic transformation of chlorophenols in methanogenic sludge unexposed to chlorophenols // Chemosphere, 2000. №41 - pp. 1457-1462.

66. Atuanya E.I., Purohit H.J., Chakrabarti T. Anaerobic and aerobic biodegradation of chlorophenols using UASB and ASG bioreactors // World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2000. -№16 pp. 95-98.

67. Моисеева O.B., Линько E.B., Баскунов Б.П., Головлева JI.A. Деградация 2-хлорфенола и 3-хлорбензоата Rhodococcus opacus lcp I I Микробиология, 1999. T.68, №4. - С. 461-466.

68. Шадрин A.M., Белицкий И. А., Балтухин В.П. Природные цеолиты Сибири и возможности их применения в сельском хозяйстве // Применение цеолитовых туфов в сельском хозяйстве, 1990. № 1 С. 49.

69. Кодама Т., Накахара Т., Омори Т., Бинх Н.Т., Хашино К., Минода И. // Сб. тез. Рост микроорганизмов на С соединениях. - Пущино. - 1977. С. 213-215.

70. Шадрин A.M. О перспективах применения цеолитовых туфов при охране окружающей среды // Природные цеолиты в социальной среде и охране окружающей среды, 1990. № 2 С. 36-42.

71. Баурмистров В.А., Рачковская JI.H., Ровнина А.К. и др. Специфические иммуносорбенты для профилактики и лечения вирусных заболеваний // Сб. тез. Природные материалы на службе человека. Новосибирск. -1997. - С.169-171.

72. Рыбникова В.И., Закиева М.И. Очистка фенолсодержащих геотермальных вод иммобилизованными микроорганизмами // Химия и технология воды, 1990.Т.12, №9 С.857-858.

73. Шунгит, цеолит, фильтры для очистки воды. http://www.promc.ru/ceolite/characteristics.htm

74. Гвоздяк П.И., Моголевич Н.Ф., Куликова Н.И., Романова Е.А., Нездойминов В.И. Очистка фенолсодержащих сточных вод закрепленными микроорганизмами // Химия и технология воды, 1989. Т.11, №1 С. 73-75.

75. Sabhi S., Kiwi J. Degradation of 2,4-dichlorophenol by immobilized iron catalysts // Chlorophenols degradation on Nafion-Fe films. 2001. C.1994-2002.

76. Китова A.E., Кувичкина Т.Н., Аринбасарова А.Ю., Решетилов А.Н. Деградация 2,4-динитрофеиола свободными и иммобилизованными клетками // Прикладная биохимия и микробиология, 2004. Т.40, №3 -С.307-311.

77. Биотехнология. Принципы и применение. Под ред. И. Хиггинса. Д. Беста, Д. Джонса.- М.: Изд-во "Наука" , 1988.479 с.

78. Быков В.А., Крылов И.А., Манаков М.Н. Биотехнология. Микробиологическое производство биологически активных веществ и препаратов. М.: Наука, 1987. 151 с.

79. Ростмистров М.Н., Гвоздяк П.И., Ставская С.С. Микробиология очистки воды. Киев: Изд-во "Наука", 1978. 267 с.

80. Дубровский B.C., Виестур Э.У. Метановое сбраживание сельскохозяйственных отходов. Рига: Изд-во "Знание" , 1988. 303 с.

81. Lettingas C.S., Van Velson W., Hobma W. et al. // Biotechnolog. Bioeng., 1980. T. 22. C. 699-734.

82. Гвоздяк П.И. Иммобилизованные клетки в биотехнологии. Пущино, 1988. С. 56-61.

83. Сиденко В.П., Мордвинова Д.И., Яроцкая Н.Е. и др. // Микробиологический журнал, 1987. Т. 48. С. 26-29.

84. Синицын А.П., Райнина Е.И., Лозинский В.И., Спасов С.Д. Иммобилизованные клетки микроорганизмов. М.: Изд-во МГУ, 1994. 288 с.

85. Нецепляев С.В., Панкратов А.Я. Лабораторный практикум пищевых продуктов животного происхождения. М.: Агропромиздат, 1990. 233 с.

86. Перт С. Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.: Мир, 1978.-331 с.

87. Руководство к практическим занятиям по микробиологии / Под ред. Н.С. Егорова. М.: Изд-во МГУ, 1995. - 224 с.

88. Нетрусов А.И. Практикум по микробиологии. М.: Издательский центр "Академия", 2005. - 608 с.

89. Землянухин А.А. Малый практикум по биохимии. Воронеж: Изд-во ВГУ, 1985.- 128 с.

90. Панкратов А.Я., Григорьев B.C., Кащенко P.JI. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. М.: Изд-во "Пищевая промышленность", 1975.-218 с.

91. Wang Si-Jing, Loh Kai-Chee. Facilitation of cometabolic degradation of 4-chIorophenoI using glucose as an added growth substrate // Biodegradation, 1999. №10 - pp. 261-269.

92. В. Б. Батоев, В.Ж. Цыренов, Г.Г. Нимацыренова, Е.Г. Инешина, Г.С. Дабалаева, И.М. Почерней. Деструкция хлорфенолов микроорганизмами пруда-аэратора Байкальского ЦБК // Экология и промышленность России 2004, № 9 - С. 22 - 24.

93. Te-Fu L. Но, James R. Borton, 1998. Toxicity changes during the UV treatment of pentachlorophenol in dilute aqueous solution // Water Research, v.32, № 2, pp.489-497.

94. Petanen Т., Romantschuk, M., 2002. Use of bioluminescent bacterial sensors as an alternative method for measuring heavy metals in soil extracts. // Analytica Chimica Acta, 456 (1), pp.55-61.

95. Walker C.H., Hopkin S.P., Sibly R.M. and Peakall D.B., 1996. Principles of Ecotoxicology. Tailor & Francis Ltd., London, UK.

96. BarthaR., 1986. //Mycrobial Ecology, v.12, pp. 155-172.

97. Leahy J.G., Colwell R.R., 1990. // Microbiology and Molecular Biology Reviews, v. 54, pp. 305-315.

98. Morgan P., Watkinson R., 1989. // Critical Reviews Biotechnology v. 8, pp.305-333.

99. Streinberg S.M., Poziomek E.J., Englemann W.H. and Rogers K.R., 1995. A review of environmental applications of bioluminescence measurements // Chemosphere 30, pp.2155-2197.

100. Bulich A.A., Tung K.K. and Sheibner G., 1990. The luminescent bacteria toxicity test its potential as an in vitro alternative // J. Biolum. Chemilum. 5, pp.71-77.

101. Strachan G. et al. 2001. Use of bacterial biosensors to interpret the toxicity and mixture toxicity of herbicides in freshwater // Wat. Res., v. 35, № 14, pp.3490-3495.

102. Petanen T. et al. 2003. Assessing sediment toxicity and arsenite concentration with bacterial and traditional methods // Environmental Pollution 122, pp.407-415.

103. Cook, S.V., Chu, A., Goodman, R.H., 2000. Influence of salinity on Vibrio fisheri and /^-modified Pseudomonas fluorescens toxicity bioassays. // Environmentally Chemistry and Toxicology 19, pp. 2474-2477.

104. Pollumaa, L. et al., 2000. Toxicological investigation of soils with solid-phase flash assays: comparisation with other ecotoxicological tests. ATLA 28, pp. 461-472.

105. Sousa , S., Duffy, C., Weitz, H., Glover, L.A., Bar, E., Henkler, R., Killham, K., 1998. Use of /шг-modified bacterial biosensor to identify constrains to bioremediation of BETX-contaminated sites // Environ. Toxicol. Chem.17, pp. 1039-1045.

106. M. Kaushal Sharma, R.C. Sobti, 2000. Rec effect of certain textile dyes in Bacillus subtilis II Mutation Reseach 465, pp.27-38.

107. Hirano К., Hagiwara Т., Ohta Y., Matsumoto H., Kada Т., 1982. Rec-assay with spores of Bacillus subtilis with and without metabolic activation // Mutat. Res. 97, pp. 339-347.

108. Kada Т., Sadaie Y., Sakamoto Y., Hirano K., 1984. Use of the Bacillus subtilis rec-assay in environmental mutagen studies, in H. Ernest, Y. Chu, M.G. Walderico (Eds.) // Mutation, Cancer and Malformation, Plenum, New York, pp. 197-216.

109. McGrath R., Singleton I., 2000. Pentachlorophenol transformation in soil: a toxicological assessment // Soil Biology & Biochemistry 32, pp. 13111314.

110. Ruckdeschel G., Renner G., 1986. Effects of pentachlorophenol and some of its known and possible metabolites on fungi // Applied and Environmental Microbiology 51, pp. 1370-1372.

111. Walker G.C., 1984. Mutagenesis and inducible responses to DNA damage in Escherichia coli II Microbiol. Rev. 48, pp.60-93.

112. Sinclair G.M., Paton G.I., Mehard A.A. and Killham K., 1999. Lux-biosensor assessment of pH effects on microbial sorption and toxicity of chlorophenols // FEMS Microb. Lett. 174, pp.273-278.

113. Синицын А.П., Райнина Е.И., Бачурина Г.П. и др. -Иммобилизованные клетки в биотехнологии. Пущино, 1987. С. 86-95.

114. Иммобилизованные клетки и ферменты. Методы. Под ред. Д. Вудворда. М.: Изд-во МГУ, 1998. - 215 с.

115. Домбровская В.А., Оверченко М.Б. Биотехнология, 4. 1988, 5. С. 643-647.

116. Шурубикова А.А. Исследование влияния природных цеолитов на Saccharomyces cerevisiae для решения биотехнологических задач: Автореф. дис. на соискание ученой степени канд. биол. наук / ВСГТУ. -Улан-Удэ, 2004.-19 с.

117. Григорьев А.В., Картель Н.Т., Бондаренко В.М. и др. Адгезия патогенной микрофлоры на углеродных сорбентах // Микробиология -2001, №7 — С-11-13.

118. Малашенко Ю.Р., Гринберг Т.А. и др. Биотехнология, 3, 1987, 3. С. 383-390.

119. Биотехнология. Принципы и применение. Под ред. И. Хиггенса, Д.Беста, Д.Джонса. М., 1988. С. 479.

120. Beltran J. Н., Torregrosa J., Dominguez J.R., Gracia J. Treatment of black-olive wastewater by ozonation and aerobic biological degradation // Wat. Res., 2000. Vol. 34, N14. - pp. 3515-3522.

121. Solyanikova I.P., Golovleva L.A. Bacteria degradation of chlorophenols: pathway, biochemical, and genetic aspects // Journal of environmental science and health, 2004. -Vol. B39, N 3. pp. 333-346.