Диагностическое значение различных микромицетов, выделенных из ногтевых пластин тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.24, кандидат медицинских наук Пупкова, Марианна Андреевна

• Пупкова, Марианна Андреевна
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Пупкова, Марианна Андреевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Микромицеты - возбудители онихомикоза.

1.1.1. Современные подходы к интерпретации результатов микологического исследования.

1.1.2. Молекулярно-генетические методы при диагностике онихомикоза.

1.1.3. Гистологическое исследование ногтевой пластины.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностическое значение различных микромицетов, выделенных из ногтевых пластин»

Наиболее частыми возбудителями онихомикоза являются первичные патогены- — дерматомицеты (Trichophyton rubrum, Т. inter digitale, Т. tonsurans и др.). Условно-патогенные микромицеты - дрожжевые {Candida spp. и др.) и нитчатые недерматомицеты (Scopulariopsis spp., Fusarium spp., Aspergillus spp., Acremonium spp. и др.) также могут играть важную роль в возникновении этого заболевания, и их доля в этиологической структуре онихомикоза, по данным разных авторов, составляет 2-48% и 5^5-59,1% соответственно [14, 22, 97]. Такие вариации в этиологии связывают с особенностями климато-географических зон, а также с различными подходами к интерпретации данных, полученных при лабораторном исследовании [96].

В случае выделения нитчатых недерматомицетов и дрожжей имеются объективные трудности- при интерпретации результатов культурального исследования патологического* материала (ногтевых пластин): Поскольку ногтевые пластины не являются стерильным субстратом, то возможна, контаминация на разных-этапах проведения материала от пациента до чашки Петри при посеве, а кроме того, дрожжи рода Candida входят в состав, нормобиоты нашего организма. - Это может привести к гипер- или гиподиагностике онихомикоза, обусловленного нитчатыми недерматомицетами и/или дрожжами.

В" настоящее время используют несколько методов исследования соскобов с ногтевой-пластины, от традиционных, предложенных несколько десятков лет назад и актуальных в. настоящее время, до новейших разработок в связи с внедрением методов молекулярной биологии в диагностику онихомикоза. Вместе с тем, применение молекулярно-генетических методов не дало ответ на вопрос о клинической значимости-нитчатых-недерматомицетов и дрожжей при онихомикозе [35].

Существует несколько подходов к оценке клинического значения-нитчатых недерматомицетов и дрожжей, выделенных при исследовании ногтевых пластин. Одни авторы считают, что при выделении недерматомицета необходимо подтверждение вида при повторном посеве; другие - предлагают ограничиться однократным посевом с подсчетом количества выросших колоний, признавая истинным возбудителем' недерматомицет, выросший в 5-ти точках из 20-ти засеянных кусочков ногтевой пластины или в 11—ти из 15—ти; третьи предлагают забирать материал однократно, но из трех пораженных областей измененного ногтя; четвертые - сочетать культуральную диагностику с гистологическим исследованием ногтевой пластины [56, 73, 91, 96].

Следует признать, что в большинстве публикаций авторы сообщают данные "об этиологии онихомикоза, вызванного нитчатыми недерматомицетами и дрожжами, полученные наиболее простым методом, т.е. с помощью критерия простой ассоциации. При этом любой микромицет, выделенный при посеве патологического материала, расценивают в качестве возбудителя, независимо-от результата микроскопии патологического материала [78].

Есть мнение, что- для выяснения роли нитчатых недерматомицетов и дрожжей в < этиологии онихомикоза необходимо, исследовать их кератиназную активность. Причем, единых подходов к ее выявлению в диагностике онихомикоза не предложено [21, 80]. Следовательно, вопрос об этиологической роли-нитчатых- недерматомицетов и дрожжей при онихомикозе остается открытым, поскольку реальные возбудители заболевания изучены недостаточно, так как универсального подхода1 к оценке клинической значимости нитчатых недерматомицетов и- дрожжей - в мире сегодня не существует. Очевидно, необходимы усилия специалистов по достижению консенсуса в области лабораторной диагностики онихомикоза.

Заключение диссертации по теме «Микология», Пупкова, Марианна Андреевна

ВЫВОДЫ

1. Установлен спектр микромицетов (дерматомицетов, нитчатых недерматомицетов, дрожжей и их ассоциаций), изолированных от пациентов с онихомикозом в Санкт-Петербурге (стоп - 77,4%, 9,7%, 10,5% и 2,4% соответственно; кистей -20%, 3,3% и 73,4% и 3,3% соответственно): а) дерматомицеты: на стопах - Т. rubrurn (67,7%), Т. tonsurans (7,3%) и Т. interdigitale (2,4%); на кистях - Т. rubrum (16,7%) и Т. tonsurans (3,3%). б) нитчатые недерматомицеты: на стопах - Acremonium sp. (0,8%), Aspergillus spp. (3,2%), Chaetomium globosum (1,7%), Fusarium spp. (3,2%) и Scopulariopsis brevicaulis (0,8%); на кистях — Fusarium spp. (3,3%). в) дрожжи: на стопах - Candida spp. (9,7%) и Trichosporon spp. (0,8%); на кистях - Candida spp. (70,1%) и Trichosporon spp. (3,3%). г) микромицеты в ассоциациях: на стопах Trichophyton rubrum и Acremonium sp. (1,6%), Acremonium sp. и Scytalidium hyalinum (0,8%); на кистях - Candida sp. и Exophiala sp. (3,3%).

2. Микромицеты, выделенные из ногтевых пластин у больных онихомикозом, обладают различной кератиназной активностью: дерматомицеты -выраженной, нитчатые недерматомицеты - от выраженной до слабой и дрожжевые организмы — слабой или совсем не проявляют активности.

3.- Адгезия и-инвазия дерматомицетами, нитчатыми недерматомицетами или дрожжами здоровой ногтевой пластины на модели ex vivo является показателем способности микромицетов поражать кератинизированные ткани и может служить одним из критериев патогенности микромицета.

4. Воспроизведение роста культур нитчатых недерматомицетов и дрожжей в повторных посевах в сочетании с определением кератиназной активности (на модели инвазии грибом ногтевых пластин ex vivo) — основной критерий в разграничении клинически значимых патогенов и контаминантов при онихомикозе.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

• При диагностике онихомикоза рекомендуется проводить исследование патологического материала с помощью люминесцентной (калькофлюор белый) или световой микроскопии с применением раствора KOH+DMSO+MQTKRtnom,m синий.

• При культуральном методе исследования соскобов с ногтевых пластин предпочтение следует отдавать «классическому» методу с повторными заборами патологического материала и последующими посевами.

• Метод ПЦР-дагностики (тест-система «ТрифАм») рекомендуется использовать только для комплексной диагностики онихомикоза, обусловленного дерматомицетами (дополнительно к микроскопическому и культуральному).

• Для установления этиологической роли нитчатых недерматомицетов и/или дрожжей при онихомикозе целесообразно проведение теста на инвазию грибом ногтевой пластины на модели ex vivo.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Пупкова, Марианна Андреевна, 2010 год

1. Боровиков В.П. STATISTICA: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов. // СПб.: Питер. 2001. - 656 с.

2. Глушко Н. И., Файзуллина Е.В. Особенности фермментообразующих свойств у грибов рода Trichophyton. // Материалы первого всероссийского конгресса по медицинской микологии. Москва: Научная Академия Микологии, 2003.-Т. 1.-С. 16-18.

3. Дудка И.А., Вассер С.П., Элланская И.А. и др.. Методы экспериментальной микологии. Справочник. // Киев. «Наукова думка». -1982.-С. 210-211.

4. Блинов Н.П. Рецензия на книгу «Биология дерматофитов и других кератинофильных грибов». Под ред. Р.К.С. Кушвага и X. Гуарро. // Проблемы Медицинской Микологии. 2000. - Т.2, №4. - С. 50-58.

5. Блинов Н.П., Васильева Н.В., Разнатовский К.И. Дерматомикозы, или поверхностные микозы кожи и ее придатков волос и ногтей. Лабораторная диагностика. // Проблемы Медицинской Микологии. -2008. - Т.10, №1. - С. 27-34.

6. Блинов Н.П. Дерматомицеты (Лекция). Учебное пособие // СПб.: КОСТА. -2010.-48 с.

7. Кожичкина Н.В. Плесневой онихомикоз (диагностика, клиника, лечение, профилактика). // Автореф. дис. канд. мед. наук. М., 2005. - 98 с.

8. Ломоносов К.М., Цыкин А.А. Онихомикоз: этиология, диагностика, клиническая картина и лечение. // РМЖ. 2007. - № 19. - С. 1371-1376.

9. Разнатовский К.И., Родионов А.Н., Котрехова Л.П. Дерматомикозы. Руководство для врачей. // Издательский дом СПбМАПО. 2003. - 159 с.

10. Реброва О.В. Статистический анализ медицинских данных с помощью пакета программ «Статистика». // Москва: Медиа Сфера. 2002. - 380 с.

11. Родионов А. Н. Грибковые заболевания кожи: руководство для врачей (2-е изд.). — СПб: Издательство «Питер». — 2000. -288 с.

12. Сергеев А.Ю, Щербо С.Н., Богуш П.Г. и др.. Успехи медицинской микологии. // М., 2006. Т. 8. - С. 105-106.

13. Сергеев А.Ю. Грибковые заболевания ногтей. 2-е изд. // М.: Национальная академия микологии, 2007. 156 с.

14. Сергеев В.Ю. Совершенствование лабораторной диагностики онихомикозов на основе метода полимеразной цепной реакции. // Автореф. дис. . .канд. мед. наук М., 2008. - 24 с.

15. Халдин А.А., Новоселов B.C., Новоселов А.В. Онихомикозы: проблемы терапии и пути их решения. // РМЖ. 2008. - Т. 16, № 8. - С. 556-561.17. " ПГёклаков Н. Д. Болезни ногтей. // М., 1975. 216 с.

16. Юнкеров В.И., Григорьев С.Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. Лекции для адъюнктов и аспирантов. //СПб.: ВмедА, 2005. 266 с.

17. Allpress J., Mountain D.G., Gowland P.C. Production, purification and characterization of an extracellular keratinase from Lysobacter NCIMB 9497. // Letters in Applied Microbiology. 2002. - № 34. - P. 337-342.

18. Anbu P., Gopinath S.C.B., Hilda A. et al.. Secretion of keratinolytic enzymes and keratinolysis by Scopulariopsis brevicaulis and Trichophyton mentagrophytes: regression analysis. I I Can. J. Microbiol. 2006. - № 52. - P. 1060-1069.

19. Baran R. Hay R.J., Haneke E. et al.. Onychomycosis. The current approach to diagnosis and therapy. 2nd edition, 2006. — 160 p.

20. Barlow A.J.E., Chattaway F.W.W. Attack of chemically modified keratin by certain dermatophytes. // J Invest Dermatol. 1955. - № 24. - P. 65-74.

21. Beifuss B., Bezold G., Gottlöber P. et al.. Direct detection of five common dermatophyte species in clinical samples using a rapid and sensitive 24-h PCR-ELISA technique open to protocol transfer. // Mycoses. 2009. - V. 29, № 7. - P.537-540.

22. Böckle B., Galunsky B., Müller R. Characterization of a keratinolytic serine proteinase from Streptomyces pactum DSM 40530. // Appl. Env. Microbiology. 1995. - V/61, №10. - P. 3705-3710.

23. Bressollier P. Letourneau F., Urdaci M. et al.. Purification and characterization of a keratinolytic serine proteinase from Streptomyces albidoflavus. //Appl. Env. Microbiology. 1999. - V.' 65, № 6. - P. 25702576.

24. Brillowska-Däbrowska A., Nielsen S.S., Nielsen N.V. et al.. Optimized 5hour multiplex PCR test for the detection of tinea unguinum: performance in a routine PCR laboratory. // Medical Mycology. 2010. - №48. - P. 828-831.

25. Brouta F., Descamps F., Monod M. et al.. Secreted metalloprotease gene family of Microsporum canis. // Infection and Immunity. 2002. - P. 56765683.

26. Budak A., Macura A.B., Mazur T. et al.. Fungal species isolated from skin and nail lesions of hands and feet of patients suspected of mycotic infection. // Mykosen. 1987. -№ 30. - P. 434-439.

27. Chang A., Wharton J., Tarn S. et al.. A modified approach to the histologic diagnosis of onychomycosis. // J Am Acad Dermatol. 2005. - № 57. - P. 849-853.

28. Crespo Erchiga V. Casanas Carrillo C., Ojeda Martos A. et al.. Examen direct versus culture. Etude sur 1115 cas de dermatomycoses. // J Mycol Med. -1999.-№9.-P. 154-157.

29. Dawber R.P.R. The ultrastructure and growth of human nails. // Arch Dermatol Res. -1980. № 269. - P. 197-204.

30. De Vries G.A. Keratinophilic fungi and their action. // Antonie van Leeuwenhoek. 1962. -№ 28. - P. 121-133.

31. Dominik T., Inhatowicz A., Kopylow H. et al.. Mycoflore of sand boxes in kindergardens in Szczecin. // Ekologia Polska. 1973. - № 21. - P. 901-923.

32. Ebihara M., "Makimura K., Sato K. et al.. Molecular detection of dermatophytes and nondermatophytes in onichomycosis by nested polymerase chain reaction based on 28S ribosomal RNA gene. // British Journal of Dermatoljgy. 2009.-№ 161.-P. 1038-1044. "

33. Ellis D.H. Watson A.B., Marley J.E. et al.. Non-dermatophytes in onychomycosis of the toenails. // British Journal of Dermatoljgy. 1997. — № 136. - P. 490^493.

34. El-Naghy M.A., El-Ktatny M.S., Fadl-Allah E.M. et al.. Degradation of chicken feathers by Chrysosporium georgia. II Mycopathologia. 1998. - № 143.-P. 77-84.

35. English M.P. The saprophytic growth of keratinophilic fungi on keratin. // Sabouraudia. 1963. - № 2. - P. 115-130.

36. English M.P. The saprophytic growth of non-keratinophilic fungi onkeratinized substrata and a comparison with keratinophilic fungi. // Trans Br

37. Mycol Soc. 1965. - № 48. - P. 219-235.

38. English M.P. The developmental morphology of the perforating organs and eroding mycelium of dermatophytes. // Sabouraudia. — 1968. № 6. - P. 218227.

39. English M.P. Destruction of hair by Chrysosporium keratinophilum. I I Transactions of the British Mycological Society. 1969. - № 52. - P. 247-255.

40. English M.P. Destruction of hair by two species of Chrysosporium. II Transactions of the British Mycological Society. 1976. - № 66. - P. 357-358.

41. English M.P. Nails and fungi. // British Journal of Dermatoljgy. 1976. - № 94.-P. 699-700.

42. Filipello Marchisio V. Curetti V., Cassinelli C. et al.. Keratinolytic and keratinophilic fungi in the soil of Papua New Guinea. // Mycopathologia. -1991.-№ 115. -P. 113-120.

43. Filipello Marchisio V., Fusconi A., Rigo S. Keratinolysis and its morphological expression in hair digestion by airbone fungi. // Mycopathologia. 1994. - № 127. - P. 103-115.

44. Filipello Marchisio V. Keratinophilic fungi: their role in nature and degradation of keratinic substrates. // Revista Iberoamericana de Micología. -2000.-P. 86-92.

45. Filipello Marchisio V., Fusconi A., Querio F.L. Scopulariopsis brevicaulis: a keratinophilic or a keratinolytic fungus? // Mycoses. 2000. - V. 43, № 7-8, P. 281-292.

46. Friedrich J., Gradisar H., Mandin D. et al.. Screening fungi for synthesis of keratinolytic enzymes. // Letters in Applied Microbiology. 1999. - № 28. - P. 127-130.

47. Gentles J.C. Laboratory investigations of dermatophyte infections of nails. // Sabouraudia. 1971. - № 9. - P. 149-152.

48. Greer D.L. Evolving role of nondermatophytes in onychomycosis. // Int J Dermatol. 1995. № 34. - 521-524.

49. Griffin D.M. Fungal colonization of sterile hair in contact with soil. // Trans Br Mycol Soc. 1960. - № 43. - P. 583-596.

50. Gromadzki S., Ramani R., Chaturvedi V. Evaluation of new medium for identification of dermatophytes and primary dimorphic pathogens. // J. Clin. Microbiol. 2003. - V. 41, № 1. - P. 467-468.

51. Gugnani H.C., Vijayan V.K., Tyagi P. et al.. Onychomycosis due to Emericella quadrilineata. II J Clin Microbiol. 2004. - V.42, № 2. - P. 914916.

52. Gupta A.K., Jain H.C., Lynde C.W. et al.. Prevalence and epidemiology of unsuspected onychomycosis in patients visiting dermatologists offices in Ontario, Canada a multicentre survey of 2001 patients. // Int.J. Dermatol. — 1997.-№26.-P. 783-787.

53. Gupta A.K., Cooper E.A., McDonald P. et al.. Inoculum counting (Walshe/English criteria) in the clinical diagnosis of onychomycosis caused by nondermatophytic filamentous fungi. // J Clin Microbiol. 2000. - № 39. - P. 2115-2121.

54. Gupta R., Ramnani P. Microbial keratinases and their perspective applications: an overview, // Appl Microbiol Biotechnol. 2006. - № 4. - P. 1— 13.

55. Gutcho S J. Microbial Enzyme Production. // Molecular nutrition. 1974— 456 p.

56. Hattori M., Yoshiura K., Negi M. et al.. Keratinolytic proteinase prodused by Candida albicans. II Sabouraudia: J Med Vet Mycology. 1984. - № 22. -P. 175-183.

57. Hilmioglu-Polat S., Metin D.Y., Inci R. et al.. Non-dermatophytic molds as agents of onychomycosis in Izmir, Turkey — a prospective study. // Mycopathologia. — 2005. — № 160.-P. 125-128.

58. Kanbe T. Molecular approaches in the diagnosis of dermatophytosis. // Mycopathologia. 2008. - V. 166, № 5-6. - P. 307-317.

59. Karimzadegan-Nia M., Mir-Amin-Mohammadi A.; Bouzari N. et al.. Comparison of direct smear, culture and histology for the diagnosis of onychomycosis. // Australasian Journal of Dermatology. 2007. - №48. - P. 18-21.

60. Kaul S., Sumbali G. Keratinolysis by poultry1 farm soil fungi. // Mycopathologia. 1997. - № 139. - P. 137-140.

61. Kaul S., Sumbali G. Production of extracellular keratinases by keratinophilic fungal species inhabiting feathers of living poultry birds (Gallus domesticus): A comparison. // Mycopathologia. 1999. - № 146. - P. 19-24.

62. Kunert J. Keratin decomposition by dermatophytes, I: sulfite production as a possible way of substrate decomposition. // Z Allg Microbiol. 1973. - V. 13,6.-P."489^498"

63. Kunert J. Biology of dermatophytes and other keratinophilic fungi. / R.K.S. Kushwaha, J. Guarro // Physiology of keratinophilic fungi. Bilbao: Revista Iberoamericana de Micología. 2000. - P. 77-85.

64. Kushwaha R. K. S., Gupta P. Relevance of keratinophilic fungi. // Current Science. 2008. -V. 94, № 6. - P.706-707.

65. Lawry M.A., Haneke E., Strobeck K. et al.. Methods for diagnosing onychomycosis: a comparative study and review of the literature. // Arch Dermatol.-2000.-№ 136.-P. 1112-1116.

66. Lin X., Lee C.-G., Casale E. et al.. Purification and characterization of a keratinase from a feather-degrading Bacillus licheniformis strain. // Applied Env. Microbiology. 1992. - V. 58, № 10. - P. 3271-3275.

67. Lin X., Tang J., Koelsch G. et al.. Recombinant Canditropsin, an extracellular aspartic protease from yeast Candida tropicalis. // J. Biol. Chem. 1993. -№ 268. - P. 20143-20147.

68. Marcondes N. R., Taira C.L., Vandresen D.C. et al.. New feather-degrading filamentous fungi. // Microb Ecol. 2008. - № 56. - P. 13-17.

69. Mercantini R., Marsella R., Moretto D. Onychomycosis in Rome, Italy. // Mycopathologia. 1996. - № 136. - P. 25-32.

70. Midgley G., Moore M.K., Cook C. et al.. Mycology of nail disorders. // J Am Acad Dermatol. 1994. - № 31. - P. 68-74.

71. Mitola G., Escalona F., Salas R. et al.. Morphological characterization of in-vitro human hair keratinolysis, produced by identified wild strains of Chrysosporium species. // Mycopathologia. 2002. - № 156. - P. 163-169.

72. Monod M., Capoccia S., Lechenne B. et al.. Secreted proteases from pathogenic fungi. // Int. J. Med. Microbiol. 2002 - № 292. - P. 405-419.

73. Monod M., Lechenne B., Jousson O. et al.. Aminopeptidases and dipeptidyl-peptidases secreted by the dermatophyte Trichophyton rubrum.ll Microbiology.-2005.-№ 151.-P. 145-155.

74. Monod M. Secreted Proteases from Dermatophytes. I I Mycopathologia. -2008. № 166. - P. 285-294.

75. Naka W., Hanyaku H., Tajima S. et al.. Application of neutral red staining for evaluation of the viability of dermatophytes and Candida in human skin scales. // J Med Vet Mycol. 1994. - № 32. - P. 31-35.

76. Negi M., Tsuboi R., Matsui T. et al.. Isolation and characterization of proteinase from Candida albicans: substrate specificity. // J. Investig. Dermatol. 1984. -№ 83. - P. 32-36

77. Rajak R.C., Parwekar S., Malviya H. et al.. Keratin degradation by fungi isolated from the grounds of a gelatin factory in Jabalpur, India. // Mycopathologia. 1991. - № 114. - P. 83-87.

78. Robert R., Pihet M. Conventional methods for the diagnosis of dermatophytosis. // Mycopathologia. 2008. - V. 166, № 5-6. - P. 295-306.

79. Ruffin P. Andrieu S., Biserte G. et al.. Sulfitolysis in keratinolysis: biochemical proof. // Sabouraudia. 1976. -№ 14. - P. 181-184.

80. Scherer W.P., McCreary J.P., Hayes W.W. The diagnosis of onychomycosis in a geriatric population. A study of 450 cases in south Florida. // J Am Podiatr Med Assoc. 2001. - № 91. - P. 456-464.

81. Scott J.A., Untereiner W.A. Determination of keratin degradation by fungi using keratin azure. // Medical Mycology. 2004. - № 42. - P. 239 -246.

82. Shemer A., Davidovici B., Grunwald M.H. et al.. New criteria for the• ilaboratory diagnosis of nondermatophyte moulds in onychomycosis. // British Journal of Dermatology. 2009. - № 160. - P. 37-39.

83. Shu-hui Tan C., Hoekstra E.S., Samson R.A. Fungi that cause superficial mycoses. Centraalbureau voor Schimmelcultures, Baarn. In collaboration with the Dr. Paul Janssen Medical Institute. 1994. - 108 p.

84. Summerbell R.C. Epidemiology and ecology of onychomycosis. // Dermatology. 1997. - № 194 (Suppl. 1). - P. 32-36.

85. Summerbell R.C., Kane J. Physiological and other special tests for identifying dermatophytes. // Laboratory handbook of dermatophytes. -Belmont CA: Star Publishing, 1997. P. 45-77.

86. Summerbell R.C. Nondermatophytic fungi causing onychomycosis and tinea // Laboratory Handbook of Dermatophytes. — Belmont CA: Star Publishing, 1997.-P. 213-259.

87. Summerbell R.C., Cooper E., Bunn U. et al.. Onychomycosis: a critical study of techniques and criteria for confirming the etiologic significance of nondermatophytes. // Medical Mycology. 2005. - № 43. - P. 39-59.

88. Thomas J., Jacobson G.A., Narkowicz C.K. et al.. Toenail onychomycosis: an important global disease Burden. // Journal of Clinical Pharmacy and Therapeutics. 2010. - № 35. - P. 497-519.

89. Vanbreuseghem R. Keratin digestion by dermatophytes: a specific diagnostic method. // Mycologia. 1952. - № 44. - P. 176-182.

90. Walker H.K., Dallas Hall W., Willis Hurst J. Clinical Methods, 3rd edition. The History, Physical, and Laboratory Examinations. // The Skin and Appendages. Nails. 1990.

91. Walshe M.M., English M.P. Fungi in nails. // British Journal of Dennatoljgy. 1966. - № 78. - P. 198-207.

92. Wawrzkiewicz K., Lobarzewski J., Wolski T. Intracellular keratinase of Trichophyton gallinae. // Medical Mycology. 1987. - V. 25, № 4. - P. 261 -268.

93. Wawrzkiewicz K., Wolski T., Lobarzewski J. Screening the keratinolytic activity of dermatophytes in vitro. // Mycopathologia. 1991. - № 114. - P. 18.

94. Weinberg J.M., Koestenblatt E.K., Tutrone W.D. et al.. Comparison of diagnostic methods in the evaluation of onychomycosis. // J Am Acad Dermatol. 2003". -№ 49. -P. 193-197.

95. Zaias N. The nail in health and disease. // MTP Press Limited International Medical Publisher Miami Beach. 1980.