Диагностика минимальной остаточной болезни при острых лимфобластных лейкозах у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.12, кандидат наук Безнос, Ольга Алексеевна

• Безнос, Ольга Алексеевна
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Безнос, Ольга Алексеевна

Оглавление

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Введение

1.2 Методы оценки МОБ

1.3 Иммунологические подходы к детекции МОБ при В-ОЛЛ

1.3.1 В-клеточный онтогенез в основе диагностики В-ОЛЛ

1.3.2 15-й день терапии индукции ремиссии

1.3.3 Иммунологические основы детекции клеток МОБ в конце терапии индукции ремиссии (29-33-й дни) и на более поздних сроках терапии

1.3.3.1 ЛАИФ, выявляемые на основании различий в уровнях экспрессии антигенов

1.3.3.2 ЛАИФ, выявляемые на основании экспрессии антигенов не свойственных линии дифференцировки

1.3.3.3 ЛАИФ, выявляемые на основании асинхронной экспрессии антигенов

1.3.4 Оценка МОБ в условиях таргетной терапии

1.3.5 Сравнительная характеристика проточно-цитометрических протоколов детекции МОБ при В-ОЛЛ

1.4 Иммунологические основы детекции МОБ при Т-ОЛЛ

1.4.1 Т-клеточный онтогенез в основе диагностике ОЛЛ из Т-линейных предшественников и выявлении клеток МОБ

1.4.2 Проточно-цитометрические протоколы мониторинга МОБ при Т-ОЛЛ

1.5 Заключение

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Группы больных

2.2 Химиотерапевтические режимы

2.3 Методы оценки иимунофенотпа бластных клеток при диагностике и мониторинге МОБ

2.4 Алгоритм оценки МОБ при В-ОЛЛ

2.5 Алгоритм оценки МОБ при Т-ОЛЛ

2.6 Статистическая обработка результатов исследования

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

ГЛАВА 3 В-ЛИНЕЙНЫЕ ОЛЛ

3.1 Иммунологическая характеристика бластных клеток при первичной диагностике как основа мониторинга МОБ

3.1.1 Общая характеристика

3.1.2 Основные иммунологические критерии аберрантности бластов. Экспрессия антигенов СБ58 и СБ38

3.1.3 Дополнительные иммунологические критерии аберрантности бластов

3.2 Иммунофенитипическая характеристика бластных клеток в рецидиве заболевания

3.3 Морфо-иммунологическая характеристика образцов костного мозга при оценке МОБ на 15-й день терапии

3.3.1 Общая характеристика образцов

3.3.2 Характеристика образцов костного мозга с точки зрения морфологических критериев ответа на терапию

3.3.3 Сопоставление различных иммунологических протоколов оценки МОБ на 15-й день терапии

3.3.4 Иммунологические подходы к выявлению В-линейных предшественников в образцах КМ на 15-й день терапии

3.3.5 Иммунофенотип клеток МОБ на 15-й день терапии

3.3.6 Технические особенности проточно-цитометрической оценки МОБ на 15-й день терапии

3.3.7 Клиническое значение оценки МОБ на 15-й день терапии

3.4 Проточно-цитомерическая оценка клеток МОБ на 33-й день терапии

3.4.1 Морфо-иммунологическая характеристика образцов костного мозга при оценке МОБ на 33-й день терапии

3.4.2 Иммунологические критерии оценки МОБ на 33 день терапии

3.4.3 Клиническое значение определения МОБ на 33-й день терапии

3.5 Морфо-иммунологическая характеристика образцов костного мозга при

оценке МОБ на 78-й день терапии

3.6 Мониторинг МОБ в рецидиве В-ОЛЛ

3.6.1 Оценка МОБ после I блока противорецидивной терапии (35-й день)

3.6.2 Мониторинг МОБ в условиях таргетной противорецидивной терапии

ГЛАВА 4 Т-ЛИНЕЙНЫЕ ОЛЛ

4.1 Иммунологическая характеристика бластных клеток при первичной диагностике

4.2 Иммунологические подходы к оценке МОБ при Т-ОЛЛ

4.3 МОБ на 15-й день терапии

4.3.1 Общая характеристика образцов костного мозга для оценки МОБ

4.3.2 Морфо-иммунологическая характеристика образцов костного мозга с точки зрения критериев ответа на терапию

4.3.3 Клиническое значение МОБ на 15-й день терапии при Т-ОЛЛ

4.4 МОБ на 33-й день терапии

4.4.1 Общая характеристика образцов костного мозга для оценки МОБ

4.4.2 Морфо-иммунологическая характеристика образцов костного мозга с точки зрения критериев ответа на терапию

4.5 Сопоставление иммунологических алгоритмов оценки МОБ при

Т-ОЛЛ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСИКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностика минимальной остаточной болезни при острых лимфобластных лейкозах у детей»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Ключевым фактором прогноза и основой стратификации больных острыми лимфобластными лейкозами (ОЛЛ) в настоящее время является наличие или отсутствие небольшого числа лейкозных клеток, сохранившихся после терапии.

Остаточные опухолевые лимфобласты, присутствующие в костном мозге больных на разных этапах лечения получили название минимальная остаточная болезнь (МОБ).

У детей, страдающих острым лимфобластным лейкозом принципиальным, с точки зрения прогноза является клиренс лейкозных клеток в ходе 1-ой фазы индукционной химиотерапии или, иначе говоря, уровень циркулирующих лимфобластов после второй недели лечения. На данном этапе возможно выявление когорты пациентов, у которых интенсивность химиотерапии первой линии может быть снижена.

Оценка количества клеток МОБ на этапе терапии консолидации и более поздних сроках лечения позволяет стратифицировать больных и выявить пациентов группы высокого риска, нуждающихся в значительной интенсификации лечебных программ, включая трансплантацию костного мозга.

Как обязательная часть протоколов лечения оценка МОБ на 15-й день индукционной химиотерапии впервые прозвучала в протоколах AIEOP-BFM-ALL 2008. (Dworzak M.N., 2002). Тогда и был введен новый параметр - оценка количества лейкозных бластов в костном мозге, оказавшийся наиболее стабильным (достоверным) прогностическим фактором. В настоящее время пороговым уровнем является 0,01% лейкозных бластов среди миелокариоцитов (Basso G., 2009).

Стандартно клетки МОБ при острых лимфобластных лейкозах выявляются двумя методами: молекулярным методом с использованием полимеразной цепной реакции или иммунологически с использованием проточной цитометрии. Несмотря на то, что молекулярные методы имеют более высокую

чувствительность, серьёзным их недостатком является длительность синтеза и валидации молекулярных зондов. Это делает невозможным использование молекулярных методов на ранних, самых важных для прогноза, этапах лечения больного. Поэтому приоритет в выявлении клеток МОБ отдаётся иммунологическим методам.

В основу иммунологических протоколов выявления МОБ, осуществляемых методом многоцветной проточной цитометрии, положено 2 основных принципа.

Первый принцип основан на том, что лейкозные клетки имеют уникальные иммунофенотипические характеристики, отличающие их от нормальных костномозговых аналогов. Данный специфический или иначе аберрантный иммунофенотип опухолевой клетки обозначают термином лейкоз-ассоциированный иммунофенотип (ЛАИФ).

Аберрантный иммунофенотип при острых лимфобластных лейкозах описан достаточно давно, еще в 1980-х годах и только сравнительно недавно был применен для диагностики и мониторинга клеток МОБ. Использование 6-8 цветной проточной цитометрии на основании ЛАИФ позволяет на настоящее время детектировать до 10-4-10-5 клеток МОБ среди миелокариоцитов. (Basso G., 2009, Dworzak M.N., 2002, van Dongen J.J., 2015).

Наиболее детально описаны возможные иммунофенотипические аберрации лейкозного клона при В-линейных острых лимфобластных лейкозах (В-ОЛЛ). Для ряда антигенов выявлена гиперэкспрессия на опухолевой клетке в сравнении с нормальными костномозговыми аналогами (CD58, CD10, CD9). Для других антигенов на опухолевых лимфобластах напротив характерно снижение экспрессии в сравнении с нормальными В-линейными предшественниками (В-ЛП) (CD38, CD44, CD11a, CD45RA). Таким образом, оптимальный подбор комбинаций моноклональных антигенов для одновременной оценки экспрессии 6-8 антигенов на уровне одной клетки позволяет с высокой точностью и чувствительностью выявлять клетки МОБ методом проточной цитометрии среди 100000 и более миелокариоцитов более чем в 95% случаев острых лимфобластных лейкозов.

Использование данного подхода к выявлению клеток МОБ возможно на всех этапах химиотерапии острого лимфобластного лейкоза, включая и оценку циторедукции на 15 день индукционной химиотерапии и оценку полноты ремиссии к моменту окончания индукционной химиотерапии.

В первых исследованиях МОБ на основании ЛАИФ использовалась четырехцветная проточная цитометрия с оценкой 2-3 проб, в зависимости от внутреннего протокола лаборатории (COG, AIEOP-BFM-ALL) и клинических протоколов лечения больных. (Borowitz M.J., 2008, Basso G., 2009). В дальнейшем по мере совершенствования цитометрических методик и доступности новых флуорохромов панели были расширены до 6-8 антигенов на пробу.

Реализация данного подхода как в случае В-ОЛЛ, так и в случае Т-линейных острых лимфобластных лейкозов (Т-ОЛЛ) возможна только в случае детального иммунофенотипирования первичной опухоли и выявления специфических ЛАИФ опухолевых клеток для каждого больного на этапе диагностики.

В основу второго принципа детекции остаточных опухолевых В-лимфобластов положен факт полной элиминации В-ЛП в костном мозге в ходе 2-х первых недель лечения. На других болезнях, нежели лейкозы, был подтвержден факт высокой чувствительности CD19+CD10+ и/или CD34+ В-ЛП к кортикостероидам (Igarashi, H., 2005). На примере Т-ОЛЛ установлено, что количество данных клеток в костном мозге к моменту окончания индукционной химиотерапии не превышает 0,01%.

Данный принцип применим только в отношении оценки клиренса опухолевых клеток на 15 день индукционной химиотерапии у детей с острыми лимфобластными лейкозами из В-линейных предшественников. Метод легко воспроизводим и менее дорогостоящ в сравнении с многоцветной проточной цитометрией, поскольку для его реализации достаточно оценки всего лишь трех антигенов — CD19, CD10 и CD34.

В ходе отработки данного метода был предложен пороговый уровень клеток МОБ в костном мозге - более 0,01% среди мононуклеаров.

Анализ МОБ при Т-ОЛЛ до сих пор остается предметом обсуждения и в большинстве лабораторий. С точки зрения детекции клеток МОБ при острых лимфобластных лейкозах из Т-линейных предшественников (Т-ЛП) принципиальным является факт отсутствия предшественников Т-клеток в костном мозге. (J.J.M. van Dongen, 1988). Таким образом, как и в случае оценки циторедукции лейкемических бластов на этапе середины индукционной химиотерапии при В-ОЛЛ, достаточно выявления предшественников Т-клеток среди миелокариоцитов на основании сочетания маркеров зрелых Т-клеток (sCD3, CD7, CD5, CD4, CD8) и иммунофенотипических признаков, характерных для тимических стадий (sCD3-cyCD3+/ CD1a+/CD4+CD8+/TdT+). Однако применение стероидов в лечении детей с ОЛЛ приводит к созреванию лейкозных бластов, поэтому клетки МОБ могут иметь более зрелый иммунофенотип в сравнении с исходной опухолью. Соответственно в отношении детекции МОБ при Т-ОЛЛ требуется дальнейшая отработка и стандартизация панелей.

Определенные проблемы имеются и при количественном анализе клеток МОБ с использованием проточно-цитометрических подходов.

Длительное время продолжалась дискуссия относительно знаменателя подсчета клеток МОБ - мононуклеары (МНК) или миелокариоциты (ядросодержащие клетки, ЯСК).

Понятно, что миелокариоциты наиболее оптимальная привязка, однако оценка на мононуклеары позволяет проводить анализ большего количества клеток и делает чувствительность проточной цитометри близкой к молекулярным методам детекции МОБ.

Принципиальным моментом, к сожалению не учтеным в настоящее время в Европейских протоколах детекции МОБ, является проблема исключения из анализа при проточной цитометрии событий, представляющих собой, так называемый дебрис, что может отразиться на точности количественного подсчета клеток МОБ. С этой целью возможно использование ДНК-связывающих, нуклеотропных красителей семейства Syto, например Syto16. Фактически Syto16+ клетки это все миелокариоциты, и пересчет количества клеток целевой популяции

(Т-, В-клетки) на клетки костного мозга может быть осуществлен достаточно легко (Borowitz M.J., 2009).

Таким образом, данная работа, основанная на значительном клиническом материале, позволяет оценить возможности применения и практической значимости иммунологических подходов к выявлению клеток МОБ у больных острыми лимфобластными лейкозами с использованием методов проточной цитометрии.

Цель настоящего исследования является усовершенствование диагностики минимальной остаточной болезни при ОЛЛ у детей методом проточной цитометрии.

Задачи исследования:

1. Дать сравнительную характеристику и оценить воспроизводимость трех- и многоцветной проточной цитометрии при детекции МРБ на этапе индукционной химиотерапии (15 и 33 дни) при В-линейных острых лимфобластных лейкозах.

2. Сопоставить данные морфологического и иммунологическогоисследований костного мозга при оценке МОБ.

3. Определить частоту аберантного иммунофенотипа бластных клеток (по CD38 и CD58) и значение его при определении МОБ.

4. Выявить наиболее частые признаки аберрантности бластных клеток на основании иммунофенотипа бластов при первичной диагностике с использованием многоцветной проточной цитометрии.

5. Оценить возможности выявления МОБ методом проточной цитометрии при Т-линейных острых лимфобластных лейкозах.

6. Отработать цитометрические протоколы определения МОБ при острых лимфобластных лейкозах с целью оценки полноты ремиссии.

Научная новизна

В результате проведенного исследования впервые на большом клиническом материале установлены морфо-иммунологические параллели в оценке минимальной остаточной болезни.

Впервые соотнесены особенности первичного иммунофенотипа опухолевых клеток и остоточных бластов. Показана роль многоцветной проточной цитометрии и значение подробной иммунофенотипической характеристики опухолевых лимфобластов на этапе диагностики для отбора индивидуальных ЛАИФ, используемых в дальнейшем для мониторинга МОБ.

Для 15-го дня химиотерапии индукции ремиссии, как наиболее значимой точки оценки ответа на лечение у детей, отобраны наиболее эффективные комбинации моноклональных антител, выявляющие В-линейные предшественники. Так в случае пре-пре-В иммуноподварианта ОЛЛ В-ЛП следует выявлять на основании экспрессии на СЭ19+ В-клетках АГ СЭ10 и/или СЭ34, а также сочетания ядерной ТёТ и цитоплазматических СЭ22 в случае про-В иммуноподварианта, в пределах ядросодержащей или мононуклеарной фракции КМ.

Оценка количества клеток МОБ начиная с 33-го дня и на более поздних сроках базируется на выявлении В-ЛП с аберрантным иммунофенотипом, установленным при первичной диагностике.

Проанализирована частота аберрантного иммунофенотипа СВ58++СВ381о№/-опухолевых В-лимфобластах при первичной диагностике. Данный фенотип выявляется только у 54,3% больных. В качестве альтернативных маркеров аберрантности в остальных случаях оценка количества клеток МОБ основывается на выявлении популяций СВ58++СБ10++, СВ381о№СБ10++ , СВ123+СБ811о№, частота которых при первичной диагностике соствляет 72,7%, 55,0% и 85,7% соответственнно.

В ходе исследования разработан алгоритм детекции МОБ у больных, получающих таргетную терапию анти-СЭ19 моноклональными антителами

(блинатумомаб). Ввиду утраты экспрессии СЭ19 выявление В-ЛП и их характеристика должны проводиться в пределах ТёТ+суСЭ22+ В-клеток.

Показана возможность иммунологической детекции МОБ при Т-ОЛЛ. С учетом особенностей Т-клеточного онтогенеза на всех этапах терапии Т-ОЛЛ оценка МОБ основывается на определении числа Т-линейных предшественников с иммунофенотипом суСБ3+ СВ7+;++ бшСБЗ-.

На всех этапах лечения иммунологический мониторинг МОБ должен проводиться под морфологическим контролем, а ПЦ протокол должен включать оценку количества ЯСК образца на основании нуклеотропных красителей семейства Бую.

Получены клинически значимые данные. На основании данных ПЦ выявлена группа больных (11,5%) с МОБ-негативным статусом на 15-й день индукции ремиссии, у которых возможно рассмотрения вопроса о снижение доз антрациклинов с учетом данных клинической стратификации. Группу плохого прогноза составили 4,6% пауиентов. У 60,0% больных констатирован МОБ-негативный статус к 33-му дню лечения. Также, вывлена группа больных с медленным ответом на терапию (7 больных с МОБ-негативностью к 78-дню).

Теоретическая и практическая значимость

Показана роль подробной иммунофенотипической характеристики опухолевых бластов на этапе диагностики для отбора индивидуальных критериев (ЛАИФ) для дальнейшего мониторинга МОБ. Отобраны наиболее эффективные комбинации МКА как для оценки В-ЛП на различных этапах терапии, так и для характеристики ЛАИФ. Разработан алгоритм оценки МОБ в услових таргетной терапии анти-СБ19 МКА (блинатумомаб).

Показана возможность оценки МОБ при Т-ОЛЛ на основании выявления Т-ЛП с иммунофенотипом СВ7+;++суСВ3+вшСВ3-.

Определена роль морфологическиго исследования КМ, как контроля иммунологической оценки МОБ.

Методология и методы диссертационного исследования

В исследование включено 186 пациентов с ОЛЛ, проходившими первичную диагностику и мониторинг МОБ на базе лаборатории иммунологии гемопоэза централизованного клинико-лабораторного отдела НИИ клинической онкологии ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минзрава России с 2006 по 2017 год. Все больные получали лечение на базе отделения химиотерапии гемобластозов НИИ детской онкологии и гематологии ФГБУ «НМИЦ онколгии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России.

Группу больных с острым лимфобластным лейкозом из В-линейных предшественников составили 155 пациентов в возрасте от 1 года до 18 лет, среди них 78 мальчиков (48,7%) и 82 девочки (51,3%). Группу острых лимфобластных лейкозов из Т-линейных предшественников составил 31 пациент в возрасте от 2 до 17 лет, среди них 26 мальчиков (83,9%) и 5 девочек (16,1%). Лечение проводилось по протоколам ALL IC BFM 2002 и 2009.

В 142 случаях (88,8%) диагностика проводилась в дебюте заболевания. В 18 случаях (11,2%) - в рецидиве болезни. При этом 5 пациентов прослежены как дебюте, так и в рецидиве заболевания.

Диагноз острого лейкоза устанавливался по совокупности морфоцито-химического и иммунофенотипического (многопараметровая проточная цитометрия) исследований пунктата костного мозга.

В группе В-ОЛЛ у 142 (88,8%) больных был использован 3-х цветный проточно-цитометрический протокол. У 18 (11,2%) больных иммунофенотипирование проводилось согласно 8-цветным протоколам консорциума EuroFlow.

В группе Т-ОЛЛ у 27 больных иммунофенотипирование проводилось с использованием 3-цветного проточно-цитометрического протокола. У 2-х больных использован 4-5-ти цветный проточно-цитометрический протокол. В соответствии с рекомендациями консорциума EuroFlow иммунофенотипирование было проведено у 2 больных.

Мониторинг минимальной остаточной болезни проводился в 3-х временных точка согласно рекомендациям лечебного протокола. При мониториге МОБ каждый пунктат был охарактеризован морфологически и иммунологически.

Проанализирован 341 образец костного мозга больных с В-ОЛЛ на различных этапах терапии. На 15-й день терапии оценено139 образцов костного мозга: для 59 образцов применен 3-х цветный проточно-цитометрический протокол, для 68 — 4-6 цветный и для 12 пунктатов костного мозга — 8-цветный. На 33-й день лечения проанализировано 148 пунктатов костного мозга, из них 51 методом 3-х цветной проточной цитометрии, 79 с использованием 4-6 цветного протокола и 18 образцов охарактеризованы с применением 8-цветной проточной цитометрии. По окончании терапии индукции консолидации оценено 54 образца костного мозга: 3 пунктата проанализированы с использованием 3-х цветного протокола, 38 — 4-6 цветным и 13 образцов оценены согласно 8-цветному проточно-цитометрическому протоколу.

Также в исследование включен анализ 56 образцов костного мозга больных с Т-ОЛЛ на различных этапах лечения. На 15-й день терапии оценено 30 образцов костного мозга: 9 с использованием 3-х цветной проточной цитометрии, 19 — 4-6 цветной и для 2 пунтатов примене протокол 8-цветного анализа. На 33-й день лечения проанализировано 26 образцов кстного мозга: 6 с применением 3-х цветного проточно-цитометрического протокола, 18 пунтатов проанализировано с использованием 4-6 цветной проточной цитометрии и для 2 образцов применен 8-цветный протокол.

Статистический анализ проведен с использование статистического пакета IBM-SPSS Statistics - 17. Оценка параметрических данных проведена по средством сравнения средних величин с использованием критерия Стьюдента. Непараметрические данные сравнивалить по критерию % Пирсона при помощи построения таблиц сопряженности.

Положения, выносимые на защиту

1. Иммунологическая оценка количества клеток МОБ при ОЛЛ у детей обязательна на 15-й, 33-й и 78-й дни лечения. На всех этапах диагностики МОБ необходим морфологический контроль и включение в проточно-цитометрические протоколы нуклеотропных красителей для оценки количества ядросодержащих клеток образца

2. Критерии аберрантрости лейкозных клеток должны устанавливаться на этапе первичной диагностики В-ОЛЛ (расширенное иммунофенотипирование). Наиболее часто используемый для оценки количества клеток МОБ иммунофенотип CD58++CD38low/- установлен только у 54,3% больных. В остальных случаях экспрессия этих антигенов на опухолевых В-лимфобластах соответствовала норме.

3. Оценка количества клеток МОБ на 15-й день индукционной химиотерапии при В-лин ОЛЛ должна быть основана на определении числа В-линейных предшественников (протокол St. Jude), поскольку количество В-линейных предшественников с аберрантным фенотипом CD58++CD38low/- на 15-й день совпадало с числом CD10+/CD34+ В-клеток только в 36,4% случаев. В случае про-В иммуноподварианта ОЛЛ оценка количества клеток МОБ целесообразна на основании выявления популяции cyCD22+nuTdT+ В -линеных предшественников.

4. На основании данных проточной цитометрии у 11,5% больных на 15-й день индукционной химиотерапии установлен МОБ-негативный статус, что позволило рассомтреть вопрос о снижении доз антрациклинов у данных больных с учетом клических факторов прогноза без риска развития рецидива.

5. Оценка количества клеток МОБ начиная с 33-го дня и далее, должна основываться на выявлении В-линейных предшественников с аберрантным иммунофенотипом. В качестве дополнительных к CD58/CD38 маркеров аберрантности целесообразно использовать CD58++CD10++, CD38lowCD10++ ,

СВ123+СВ811о№, СВ9++СВ811о№, СБ66с+ частота которых при первичной диагностике составляет 72,7%, 55,0%, 85,7%, 87,5% и 75,0% соответственно.

6. С учетом данных проточной цитометрии на 33-й день химиотерапии МОБ-негативный статус констатирован у 60,0% больных и ни у кого не выявлено 10,0 или более процентов бластных клеток в костном мозге.

7. На 78-й день согласно данным многоцветной проточной цитометрии у 64,3% больных установлена МОБ-негативность, при этом у 7 больных зафиксирован медленный ответ на терапию.

8. В случае использования таргетных препаратов (анти-СЭ19) выявление В-линейных предшественников и их характеристика должны проводиться на основании экспрессии суСЭ22 и пиТёТ ввиду утраты экспрессии СЭ19.

9. Оценка количества клеток МОБ при Т-лин ОЛЛ на всех сроках мониторирования основывается на определении числа Т-линейных предшественников с иммунофенотипом СВ7+;++вшСВ3- в пределах суСЭ3+ популяции.

10. С учетом данных проточной цитометрии на 15-й и 33-й дни индукционной химиотерапии при Т-ОЛЛ полной лейкемической циторедукции не получено ни у одного больного.

Степень достоверности и апробация результатов

Диссерация апробирована и рекомендована к защите 17 ноября 2017 года на совместной научной конференции с участием лаборатории иммунологии гемопоэза, лаборатории клинической иммунологии, отделения химиотерапии гемобластозов НИИ клинической онкологии, отделения химиотерапии гемобластозов и отделения реанимации и интенсивной терапии НИИ детской онкологии и гематологии, лаборатории клеточного иммунитета НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России.

Результаты диссертационной работы были представлены на XXII Всеросийской научно-практической конференции с международным участием

«Теория и практика клинической лабораторной диагностики» (Москва, 2017) -конкурс молодых ученых (второе место), XIV международной конференции «Иммунология гемопоэза» (Суздаль, 2017).

Структура и объем диссертации

Диссертаия изложена на 175 страницах машинописного текста, содержит 46 рисунков, 50 таблиц и состоит из введения и 4 глав: «Обзор литературы», «Материалы и методы», «В-линейные ОЛЛ», «Т-линейные ОЛЛ», заключения, выводов, парктических рекомендаций и списка литературы. Список литературы содержит 152 литературных источника, из них 9 отечественных и 143 зарубежных.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Введение

Оценка эффективности терапии является неотъемлемой частью современных протоколов по лечению острых лимфобластых лейкозов (ОЛЛ) у детей [9, 23]. Ответ на лечение зависит от множества факторов, таких как: клинико-биологические свойства заболевания, дозы химиопрепаратов и их взаимодействия, а также индивидуальной способности каждого пациента метаболизировать антилейкемические препараты [111].

Успешное лечение ОЛЛ во многом обусловлено стратификацией больных в соответствии с группами риска [6]. Стандартное определение группы риска проводится в зависимости от возраста ребенка, инициального уровня лейкоцитов в периферической крови, иммунофенотипа лейкозных бластов, а также результатов цитогенетического и молекулярно-генетического анализов.

В современных протоколах терапии ОЛЛ у детей помимо стандартных факторов прогноза предусмотрена возможность углубленной риск-стратификации больных с учетом оценки количества остаточных бластов в костном мозге (КМ) — минимальной остаточной болезни (МОБ).

Клиническое значение определения МОБ, как независимого фактора прогноза показано еще в ранних исследованиях группы Berlin-Frankfurt-Munster (BFM) — ALL-REZ BFM P95/96 [51].

Современные терапевтические протоколы таких исследовательских групп как AIEOP-BFM и COG выделяют три группы риска в соответствии с уровнем МОБ. Стандартная группа риска - это наличие до 0,1% клеток МОБ среди миелокариоцитов. В промежуточную группу риска включаются больные с уровнем остаточных бластов от 0,1 до 10,0% в КМ. В группу высокого риска включаются больные с количеством клеток МОБ 10,0% и более.

При этом прогностическая значимость различных уровней МОБ показана только для 15-го и 33-го дня терапии [G. Basso, 2009, M. Borowitz, 2008]. Во временном окне на уровне терапии индукции консолидации (72-78 дни лечения)

исследования проводились с учётом так называемого МОБ-негативного (МОБ-) и МОБ-позитивного (МОБ+) статуса. За пороговое значение во всех временных точка принимается 0,01% клеток МОБ среди миелокариоцитов.

Оценка МОБ на разных этапах терапии решает определенные клинические задачи. Одним из первых параметров оценки раннего ответа на терапию является морфологически определяемое количество бластных клеток в периферической крови на 8-й день преднизолоновой фазы индукционной химиотерапии. Группу хорошего ответа и благоприятного прогноза составляют больные с редукцией бластов ниже 1000 клеток/мкл. Данный параметр учитывается в риск-стратификации протоколов группы Л1ЕОР-ББМ-ЛЬЬ [116].

В рамках протокола Л1ЕОР-ББМ-ЛЬЬ 2000 при анализе более 3000 пациентов детского возраста, страдающих ОЛЛ из В-линейных предшественников (В-ОЛЛ) была показана прогностическая значимость МОБ на 15-й день индукционной химиотерапии. Так, количество клеток МОБ в КМ в середине терапии индукции ремиссии наиболее полно отражает первичный ответ на лечение [38], в то время как клиренс бластов на 8-й день - это только ответ на стероиды [113]. При этом было установлено, что большое значение имеет эффект первой линии терапии [57]. Важно отметить, что интенсивность проводимых режимов полихимиотерапии приводила к развитию серьезных долговременных побочных эффектов и перелеченности больных [69, 93, 98, 100, 112, 117]. Таким образом, именно с учетом МОБ на 15-й день стало возможным выявление группы больных с хорошим ответом на терапию, которым возможно снизить дозы антрациклинов с целью уменьшения частоты развития осложнений и улучшения качества жизни [122, 128]. В настоящее время редукция доз антрациклинов с учетом количества клеток МОБ на 15-й день индукционной химиотерапии предусмотрена протоколами группы ББМ (протокол ББМ-ЛЬЬ-1С 2009).

В конце индукционной химиотерапии (29-33-й дни) происходит окончательное распределение больных на группы риска с учетом всех факторов прогноза. [14, 38, 49, 122]. Клиническое значение опеределения МОБ и ее взаимное влияние на остальные факторы прогноза подробно проанализировано

Machael J. Borowitz et al., (Children oncology group (COG), 2008). В исследовании, включавшем 2143 пациента с ОЛЛ из В-линейных предшественников, оценено значение МОБ конца терапии индукции. Четко показано, что в МОБ-негативной группе частота ранних рецидивов составила 6,8%, против 28,0% в МОБ-позитивной (р<0,001). Аналогичной была ситуация в отношении поздних рецидивов — 4,6% против 24,0% (р<0,001). При анализе влияния МОБ в сочетании с цитогенетическими особенностями на прогноз, результаты 5-летней безсобытийной выживаемости были выше в МОБ-негативной группе (р<0,001). Данная тенденция сохраняется и в группе высокого риска (р=0,004). И хотя до конца изучить подобные сложные взаимодействия различных факторов прогноза пока не удалось, определенно ясно одно, что МОБ является независимым решающим фактором прогноза, вне зависимости от наличия или отсутствия остальных [14].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Безнос, Ольга Алексеевна, 2017 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Белевцев, М.В. Определение остаточных опухолевых клеток в костном мозге детей с В-линейным острым лимфобластным лейкозом методом проточной цитометрии. / М.В. Белевцев, В.П. Савицкий, Н.Н. Савва и соавт. // Клин. лаб. диагн. — 2006. —№. 10. — С. 42-46

2. Бойченко, Э. Г. Острый лимфобластный лейкоз из ранних предшественников Т-клеток. / Э. Г. Бойченко, А. М. Попов, Т. А. Макарова и соавт. // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. — 2015. — Т. 14. — №. 1. — С. 38-45

3. Гривцова Л. Ю. Оценка минимальной резидуальной болезни при острых лимфобластных лейкозах из В-линейных предшественников у детей методом трехцветной проточной цитометрии. / Л. Ю. Гривцова, А. В. Попа, Н. А. Купрышина и соавт. // Иммунология гемопоэза. — 2008. — Т. 2. — С. 8-33

4. Гривцова, Л. Ю. К дальнейшей стандартизации определения остаточных бластных клеток в костном мозге детей с В-линейными острыми лимфобластными лейкозами на 15-й день индукционной терапии. / Л.Ю. Гривцова, А. В. Попа, И. Н. Серебрякова и соавт. // Иммунология гемопоэза. — 2011. — N. 1. — C. 35-54

5. Клиническая онкогематология / Под ред. М.А. Волковой — М: Медицина. — 2007. — 1120 с.

6. Ланцковский, Ф. Детская гематология и онкология. / Ф. Ланцковский.

— М: Лори. — 2005. — C. 766

7. Луговская, С.А. Иммунофенотипирование в диагностике гемобластозов. / С.А. Луговская, М.Е. Почтарь, Н. Н. Тупицын — М: Каф. КЛД.

— 2005. — С. 55-69

8. Попов, А. М. Острые лейкозы: различия иммунофенотипа бластных клеток и их неопухолевых аналогов в костном мозге. / А.М. Попов, Т.Ю. Вержбицкая, Л.Г. Фечина и соавт. // Клиническая онкогематология. 2016. — Т. 9.

— №. 3. — С. 302-313

9. Попов, А. М. Стандартизация определения минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии у детей с В-линейным острым лимфобластным лейкозом. Опыт работы российско-белорусской кооперативной группы. / А.М. Попов, М.В. Белевцев, Е.В. Боякова и соавт. // Онкогематология. 2016. — Т. 11. — № 4. — С. 64-73

10. Barrena, S. Aberrant expression of tetraspanin molecules in B-cell chronic lymphoproliferative disorders and its correlation with normal B-cell maturation. / S. Barrena, J. Almeida, M. Yunta, et al. // Leukemia. — 2005. — Vol. 19. — N. 8. — P. 1376-1383

11. Basso, G. Risk of relapse of childhood acute lymphoblastic leukaemia is predicted by flow cytometric measurement of residual disease on day 15 bone marrow. / G. Basso, M. Veltroni, M. G. Valsecchi, et al. // J Clin Oncol. — 2009. — Vol. 27. — N. 31. — P. 5168-5174

12. Boccuni, P. CD66c antigen expression is myeloid restricted in normal bone marrow but is a common feature of CD10+ early B-cell malignances. / P. Boccuni, R. Di Noto, C. Lo Pardo et al. // Tissue Antigens. — 1998. — Vol. 52. — N. 1. — P. 1-8

13. Bodger, M. P. A monoclonal antibody specific for immature human hemopoietic cells and T lineage cells. / M. P. Bodger, G. E. Francis, D. Delia et al. // J Immunol. — 1981. — Vol. 127. — N. 6. — P. 2269-2274

14. Borowitz, M. Clinical significance of minimal residual disease in childhood acute lymphoblastic leukemia and its relationship to other prognostic factors: a Children's oncology group study / M.J. Borowitz, M. Devidas, S. P. Hunger et al. // Blood. — 2008. — Vol. 111. — N.12. — P. 5477-5485

15. Borowitz, M. J. Comparison of diagnostic and relapse flow cytometry phenotypes in childhood acute lymphoblastic leukemia: implications for residual disease detection: a report from the children's oncology group. / M. J. Borowitz, D. J. Pullen, N. Winick et al // Cytometry B Clin Cytom. — 2005. — Vol. 68. — N. 1. — P. 18-24

16. Borowitz, M. J. Myeloid antigen coexpression in childhood acute lymphoblastic leukemia. / M. J. Borowitz, J. J. Shuster, V. J. Land et al. // N Engl J Med. — 1991. — Vol. 325. — P. 1379 (correspondence)

17. Boucheix, C. Immunophenotype of adult acute lymphoblastic leukemia, clinical parameters and outcome: An analysis of a prospective trial including 562 tested patients (LALA87). / C. Boucheix, B. David, C. Sebban et al. // Blood. — 1994. — Vol. 84. — N. 5. — P. 1603-1612

18. Bradbury, L. E. CD19/CD21 signal transducing complex of human B lymphocytes includes the target of antiproliferative antibody-1 and Leu-13 molecules. / L. E. Bradbury, G. S. Kansas, S. Levy et al. // J. Immunol. — 1992. —Vol. 149. — N. 9. — P. 2841-2850

19. Bradstock, K. F. Immunological monitoring of residual disease in treated thymic acute lymphoblastic leukaemia. / K. F Bradstock, G. Ganossy, N. Tidman et al. // Leuk. Res. — 1981 — Vol. 5. — N. 4-5. — P. 301-309

20. Breit, T. M. Extensive junctional diversity of gamma delta T-cell receptors expressed by T-cell acute lymphoblastic leukemias: implications for the detection of minimal residual disease. / T.M. Breit, I.L. Wolvers-Tettero, K. Hahlen et al. // Leukemia. — 1991. — Vol.5. — N. 12. — P. 1076-1086

21. Bruggemann, M. Improved assessment of minimal residual disease in B cell malignancies using fluorogenic consensus probes for real-time quantitative PCR. / M. Bruggemann, J. Droese, I. Bolz, et al. // Leukemia. — 2000. — Vol. 14. — N. 8. — P. 1419-1425

22. Bullens, D.M. Effects of co-stimulation by CD58 on human T cell cytokine production: a selective cytokine pattern with induction of high IL-10 production. / D. M. Bullens, K. Rafiq, L. Charitidou et al. // Int Immunol. — 2001. — Vol. 13. — N. 2. — P. 181-191

23. Campana D. Role of minimal residual disease monitoring in adult and pediatric acute lymphoblastic leukemia. / D. Campana // Hematol Oncol Clin North Am. — 2009. — Vol. 23. — N. 5. — P. 1083-1098

24. Campana, D. Determination of minimal residual disease in leukaemia patients. / D. Campana // Br. J. Haematol. — 2003. — Vol. 121. — N. 6. — P. 823-838

25. Campana, D. Human B cell development. I. Phenotypic differences of B lymphocytes in the bone marrow and peripheral lymphoid tissue. / D. Campana, G. Janossy, M. Bofill et al. // J Immunol. — 1985. — Vol. 134. — N. 3. — P. 1524-1530

26. Cantu-Rajnoldi, A. Co-expression of myeloid antigens in childhood acute lymphoblastic leukemia: Relationship with the stage of differentiation and clinical significance. / A. Cantu-Rajnoldi, M. C. Putti, M. Saitta, et al. // Br J Hematol. — 1991.

— Vol. 79. — N. 1. — P. 40-43

27. Carsetti, R. Peripheral development of B cells in mouse and man. / R. Carsetti, M. M. Rosado, H. Wardmann. // Immunol Rev. — 2004. — Vol. 197. — P. 179-91.

28. Cave, H. Clinical significance of minimal residual disease in childhood acute lymphoblastic leukemia: European Organization for Research and Treatment of Cancer-Childhood Leukemia Cooperative Group. / H. Cave, J. van der Werff ten Bosch, S. Suciu, et al. // N Engl J Med. — 1998. — Vol. 339. — N. 9. — P. 591-598

29. Chen, J. S. Identification of novel markers for monitoring minimal residual disease in acute lymphoblastic leukemia. / J. S. Chen, E. Coustan-Smith, T. Suzuki et al. // Blood. — 2001. — Vol. 97. — N. 7. — P. 2115-20

30. Childs, C. C. Myeloid surface antigen positive acute lymphoblastic leukemia: Immunophenotypic, ultrastructural, cytogenetic and molecular characteristics. / C. C. Childs, C. Hirsch-Ginsberg, R. S. Walters et al. // Leukemia. — 1989. — Vol. 3.

— N. 11. — P. 777-783

31. Ciudad, J. Detection of abnormalities in B-cell differentiation pattern is a useful tool to predict relapse in precursor-B-ALL. / J. Ciudad, J. F. San Miguel, M. C. Lopez-Berges et al. // Br. J. Haematol. — 1999 — Vol. 104. N. 4. — P. 695-705

32. Ciudad, J. Prognostic value of immunophenotypic detection of minimal residual disease in acute lymphoblastic leukemia. / J. Ciudad, J. F. San Miguel, M. C. Lopez-Berges et al. // J. Clin. Oncol. — 1998. — Vol. 16. — N. 12. — P. 3774-3781

33. Clavell, L. A. Fouragent induction and intensive asparaginase therapy for treatment of childhood acute lymphoblastic leukemia. / L. A. Clavell, R. D. Gelber, H. J. Cohen, et al. // N Engl J Med. — 1986. — Vol. 315. — N. 11. — P. 657-663

34. Conter, V. Molecular response to treatment redefines all prognostic factors in children and adolescents with B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia: results in 3184 patients of the AIEOP-BFM ALL 2000 study. / V. Conter, C. R. Bartram, M. G. Valsecchi, et al. // Blood. — 2010. — Vol. 115. — N. 16. — P. 3206-3214

35. Coustan-Smith, E. A simplified flow cytometry assay identifies children with acute lymphoblastic leukemia who have a superior clinical outcome. / E. Coustan-Smith, R. C.Ribeiro, P. Stow // Blood. — 2006. — Vol. 108. — N. 1. — P. 97-102

36. Coustan-Smith, E. Clinical importance of minimal residual disease in childhood acute lymphoblastic leukemia. / E. Coustan-Smith, J. Sancho, M.L. Hancock et al. // Blood. — 2000. — Vol. 96. — N. 8. — P. 2691-2696

37. Coustan-Smith, E. Immunological detection of minimal residual disease in children with acute lymphoblastic leukaemia. / E. Coustan-Smith, F.G. Behm, J. Sanchez et al. // Lancet. — 1998. — Vol. 351. — N. 9102. — P. 550-554

38. Coustan-Smith, E. Prognostic importance of measuring early clearance of leukemic cells by flow cytometry in childhood acute lymphoblastic leukemia. / E. Coustan-Smith, J. Sancho, F.G. Behm et al. // Blood. — 2002. — Vol. 100 — N. 1. — P. 52-58

39. Crist, W. M. Clinical features and outcome in childhood T-cell leukemia-lymphoma according to stage of thymocyte differentiation: a Pediatric Oncology Group Study. / W. M. Crist, J. J. Shuster, J. Falletta, et al. // Blood. — 1988. — Vol. 72. — N. 6. — P. 1891-1897

40. Crist, W. M. Philadelphia chromosome positive childhood acute lymphoblastic leukemia: Clinical and cytogenetic characteristics and treatment outcome. APediatric Oncology Group study. / W. M. Crist, A. Carrol, J. Shuster et al. // Blood. — 1990 — Vol. 76. — N. 3. — P. 489-494

41. d'Auriol, L. In vitro amplification of T cell gamma gene rearrangements: a new tool for the assessment of minimal residual disease in acute lymphoblastic

leukemias. / L. d'Auriol, E. Macintyre, F. Galibert et al. // Leukemia. — 1989. — Vol. 3. — N.2. — P. 155-158

42. De Waele, M. Different expression of adhesion molecules on CD34+ cells in AML and B-lineage ALL and their normal bone marrow counterparts. / M. De Waele, W. Renmans, K. Jochmans, et al. // Eur J Haematol. — 1999. — Vol. 63. — N. 3. — P. 192-201.

43. Decker, T. Immunostimulatory CpG-oligonucleotides cause proliferation, cytokine production, and an immunogenic phenotype in chronic lymphocytic leukemia B cells. / T. Decker, F. Schneller, T. Sparwasser et al. // Blood. — 2000. — Vol. 95. — N. 3 — P. 999-1006.

44. Delabie, J. The antigenpresenting cell function of Reed-Sternberg cells. / J. Delabie, W. C. Chan, D. D. Weisenburger, et al. // Leuk Lymphoma. — 1995. — Vol. 18. — N. 1-2. - P. 35-40.

45. Drexler, H. G. Review of the incidence and clinical importance of myeloid antigen-positive acute lymphoblastic leukemia. / H. G. Drexler, E. Thiel, W. D. Ludwig // Leukemia. — 1991. — Vol. 5. — N. 8. — P. 637-345

46. Dworzak, M. Four-color flow cytometric investigation of terminal deoxynucleotidyl transferase-positive lymphoid precursors in pediatric bone marrow: CD79a expression precedes CD19 in early B-cell ontogeny. / M. Dworzak, G. Fritsch, G. Froschl et al. // Blood. — 1998. — Vol. 92. — N. 9. — P. 3203-3209

47. Dworzak, M. N. Flow cytometric assessment of human MIC2 expression in bone marrow, thymus, and peripheral blood. / M. N. Dworzak, G. Fritsch, P. Buchinger et al. // Blood. — 1994. — Vol. 83. — N. 2. — P. 415-425

48. Dworzak, M. N. Standardization of flow cytometric minimal residual disease evaluation in acute lymphoblastic leukemia: multicentric assessment is feasible. / M. N. Dworzak, G. Gaipa, R. Ratei et al. // Cytometry B Clin Cytom. — 2008. — Vol. 74. — N. 6. — P. 331-340

49. Dworzak, M.J. Prognostic significance and modalities of flow cytometric minimal residual disease in childhood acute lymphoblastic leukemia. / M.J. Dworzak, G. Froshl, D. Printz et al. // Blood. — 2002. — Vol. 99. — N. 6. — P. 1952-1958

50. Dworzak, M.N. Austrian Berlin-Frankfurt-Munster Study Group. Prognostic significance and modalities of flow cytometric minimal residual disease detection in childhood acute lymphoblastic leukemia. / M.N. Dworzak, G. Froschl, D. Printz et al // Blood. — 2002 — Vol. 99. — N. 6. — P. 1952-1958

51. Eckert, C. Minimal residual disease after induction is the strongest predictor of prognosis in intermediate risk relapsed acute lymphoblastic leukaemia -Long-term results of trial ALL-REZ BFM P95/96 / C. Eckert, A. Stackelberg, T. KarlSeeger et al. // European Journal of Cancer. — 2013. — Vol. 49. — P. 1346- 1355

52. Faber, J. Terminal deoxynucleotidyl transferase-negative acute lymphoblastic leukemia. / J. Faber, H. Kantarjian, M. W. Roberts et al. // Arch Pathol Lab Med. — 2000. — Vol. 124. — N. 1. — P. 92-97

53. Fearon, D. T. The CD19/CR2/TAPA-1 complex of B lymphocytes: linking natural to acquired immunity. / D. T. Fearon, R. H. Carter // Annu. Rev. Immunol. — 1995. — Vol. 13. — P. 127-149.

54. Fink, F. M. Prognostic significance of myeloid associated antigen expression on blast cells in children with acute lymphoblastic leukemia. / F. M. Fink, U. Koeller, H. Mayer et al. // Med Pediatr Oncol. — 1993. — Vol. 21. — N. 5. — P. 340346

55. Flohr, T. International BFM Study Group (I-BFM-SG). Minimal residual disease-directed risk stratification using real-time quantitative PCR analysis of immunoglobulin and T-cell receptor gene rearrangements in the international multicenter trial AIEOP-BFM ALL 2000 for childhood acute lymphoblastic leukemia. / T. Flohr, A. Schrauder, G. Cazzaniga et al // Leukemia. — 2008. Vol. 22. — N. 4. — P. 771-782

56. Fronkova, E. Minimal residual disease (MRD) analysis in the non-MRD-based ALL IC-BFM 2002 Protocol for childhood ALL: is it possible to avoid MRD testing? / E. Fronkova, E. Mejstrikova, S. Avigad, et al. // Leukemia. — 2008. — Vol. 22. — N. 5. — P. 989-997

57. Gaynon, P. S. Early response to therapy and outcome in childhood acute lymphoblastic leukemia: a review / P. S. Gaynon, A. A. Desai, B. C. Bostrom et al. // Cancer. — 1997. — Vol. 80. — N.9. — P. 1717-1726

58. Gelin, C. The E2 antigen, a 32 kd glycoprotein involved in T-cell adhesion processes, is the MIC2 gene product. / C. Gelin, F. Aubrit, A. Phalipon et al. // Embo J.

— 1989. — Vol. 8. — N. 11. — P. 3253-3259

59. Gokburget, N. Long-term relapse-free survival in a phase 2 study of blinatumomab for the treatment of patients with minimal residual disease in B-lineage acute lymphoblastic leukemia. / N. Gokburget, G. Zuqmaier, M. Klinger et al. // Haematologia, — 2017. — Vol. 102. — N. 4. — P. e132-e135

60. Goldberg, J. M. Childhood T-cell acute lymphoblastic leukemia: the Dana-Farber Cancer Institute acute lymphoblastic leukemia consortium experience. / J. M. Goldberg, L. B. Silverman, D. E. Levy, et al. // J Clin Oncol. — 2003. — Vol. 21. — N. 19. — P. 3616-3622

61. Gollob, J. A. CD2-CD58 interaction and the control of T-cell interleukin-12 responsiveness: adhesion molecules link innate and acquired immunity. / A. J. Gollob, J. Ritz // Ann N Y Acad Sci. — 1996. — Vol. 795. — P. 71-81.

62. Greaves, M. F. Antisera to acute lymphoblastic leukemia cells. / M. F. Greaves, G. Brown, N. T. Rapson et al. // Clin Immunol Immunopathol. — 1975. — Vol. 4. — N. 1. — P. 67-84

63. Greaves, M.F. Lineage promiscuity in hemopoietic differentiation and leukemia. / M. F. Greaves, L. C. Chan, A. J. W. Furley et al. // Blood. — 1986. — Vol. 67. — N. 1. — P. 1-11

64. Guillaune, N. CD66c expression in B-cell acute lymphoblastic leukemia: strength and weakness. / N. Guillaune, D. panther, I. Vaida et al. // Int J Lab hematol. — 2011. — Vol. 33. — N. 1. — P. 92-96

65. Guyotat, D. Myeloid surface antigen expression in adult acute lymphoblastic leukemia. / D. Guyotat, L. Campos, Z. H. Shi et al. // Leukemia. — 1990.

— Vol. 4. — N. 9. — P. 664-666

66. Hamilton, G. A. Characterization of a human endocrine tissue and tumor-associated Ewing's sarcoma antigen. / G. Hamilton, E. J. Fellinger, I. Schratter et al. // Cancer Res. — 1988. — Vol. 48. — N. 21. — P. 6127-6131

67. Hansen-Hagge, T.E. Detection of minimal residual disease in acute lymphoblastic leukemia by in vitro amplification of rearranged T-cell receptor delta chain sequences. / T.E. Hansen-Hagge, S. Yokota, C.R. Bartram // Blood. — 1989. — Vol. 74. — N. 5. — P.1762-1767

68. Higuchi, Y. CD38 expression by hematopoietic stem cells of newborn and juvenile mice. / Y. Higuchi, H. Zeng, M. Ogawa et al. // Leukemia. — 2003. — Vol. 17. — N. 1. — P. 171-174

69. Hitchcock-Bryan, S. The impact of induction anthracycline on long-term failure-free survival in childhood acute lymphoblastic leukemia. / S. Hitchcock-Bryan, R.D. Gelber, J.R. Cassady. // Medical and Pediatric Oncology. — 1986. — Vol. 14. — N. 4. — P. 211-215

70. Hoffman, L. M. Blinatumomab, a bi-specific anti-CD19/CD3 BiTE® antibody for the treatment of acute lymphoblastic leukemia: perspectives and current pediatric applications. / L. M. Hoffman, L. Gore // Front Oncol. — 2014. — Vol. 4. www.frontiersin. org

71. Horvath, G. CD19 is linked to the integrin-associated tetraspans CD9, CD81, and CD82. / G. Horvath, V. Serru, D. Clay et al. // J Biol Chem. — 1998. — Vol. 273. — N. 46. — P. 30537-30543

72. Hsu, S. M. Phenotypic expression of T lymphocytes in thymus and peripheral lymphoid tissues. / S. M. Hsu, E. S. Jaffe // Am J Pathol. — 1985. — Vol. 121. — N. 1. — P. 69-78

73. Igarashi, H. Early lymphoid progenitors in mouse and man are highly sensitive to glucocorticoids. / H. Igarashi, K. L. Medina, T. Yokota et al. // Int Immunology. — 2005. — Vol. 17. — N. 5. — P. 501-511

74. Imai, T. Enhanced expression of LFA-3 on human T-cell lines and leukemic cells carrying human T-cell-leukemia virus type 1. / T. Imai, Y. Tanaka, K. Fukudome, et al. // Int J Cancer. — 1993. — Vol. 55. — N. 5. — P. 811-816.

75. Jaffe, E.S. Introduction and overview of the classification of the lymphoid neoplasms. / E. S. Jaffe, N. L. Harris, H. Stein et al. // Who classification of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues. — 2008. — P. 158-166

76. Janossy, G. Cellular phenotypes of normal and leukemic hemopoietic cells determined by analysis with selected antibody combinations. / G. Janossy, F.J. Bollum, K.F. Bradstock, J. Ashley // Blood. — 1980. — Vol. 56. — N. 3. — P. 430-431

77. Janossy, G. The reliability of cytoplasmic CD3 and CD22 antigen expression in the immunodiagnosis of acute leukemia: A study of 500 cases. / G. Janossy, E. Coustan-Smith, D. Campana // Leukemia. — 1989. — Vol. 3— N. 3. — P. 170-180

78. Jordan, C.T The interleukin-3 receptor a chain is a unique marker for human acute myelogenous leukemia stem cells. / C.T Jordan, D. Upchurch, S.J. Szilvassy et al. // Leukemia. — 2000. — Vol. 14. — N. 10. — P. 1777-1784.

79. Kalina, T. EuroFlow Consortium (EU-FP6, LSHB-CT-2006-018708). EuroFlow standardization of flow cytometer instrument settings and immunophenotyping protocols. / T. Kalina, J. Flores-Montero, V.H. van der Velden et al. // Leukemia. — 2012. — Vol. 26. — N. 9. — P. 1986-2010

80. Kalina, T. Myeloid antigens in childhood lymphoblastic leukemia: clinical data point to regulation of CD66c distinct from other myeloid antigens. / T. Kalian, M. Vaskova, E. Mejstrikova et al. // BMC Cancer. — 2005. — Vol. 5. — N. 38

81. Klinger, M. Immunopharmacologic response of patients with B-lineage acute lymphoblastic leukemia to continuous infusion of T cell-engaging CD19/CD3-bispecific BiTE antibody blinatumomab. / M. Klinger, C. Brandl, G. Zuqmaier et al. // Blood. — 2012. — Vol. 119. — N. 26. — P. 6226-6233

82. Krampera, M. Methodological approach to minimal residual disease detection by flow cytometry in adult B-lineage acute lymphoblastic leukemia. / M. Krampera, O. Perbellini, C. Vincenzi, et al. // Haematologica. — 2006. — Vol. 91. — N. 8. — P. 1109-1112

83. Kurec, A. S. Significance of aberrant immunophenotypes in childhood acute lymphoid leukemia. / A. S. Kurec, P. Belair, C. Stefanu et al. // Cancer. — 1991.

— Vol. 67. — N. 12. — P. 3081-3086

84. Lauria, F. Increased expression of myeloid antigen markers in adult acute lymphoblastic leukemia patients: Diagnostic and prognostic implications. / F. Lauria, D. Raspadori, G. Martinelli et al. // Br J Haematol. — 1994. — Vol. 87. N. 2. — P. 286292

85. Lee, K. J. Clinical use of blinatumomab for B-cell acute lymphoblastic leukemia in adults. / K. J. Lee, V. Chow, A. Weissman et al. // Ther Clin Risk Manag.

— 2016. — Vol. 12. — P. 1301-1310

86. Lee, R. V. CD58 Expression Decreases as Nonmalignant B Cells Mature in Bone Marrow and Is Frequently Overexpressed in Adult and Pediatric Precursor B-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia. / R. V. Lee, R. C. Braylan, L. M. Rimsza // Am J Clin Pathol. — 2005. — Vol. 123. — N. 1. — P. 119-124

87. Letarte, M. Common acute lymphocytic leukemia antigen is identical to neutral endopeptidase. / M. Letarte, S. Vera, R. Tran et al. // J Exp Med. — 1988. — Vol. 168. — N. 4. — P. 1247-1253

88. Levy, R. A human thymus-leukemia antigen defined by hybridoma monoclonal antibodies. / R. Levy, J. Dilley, R. I. Fox et al. // Proc Natl Acad Sci U S A.

— 1979. — Vol. 76. — N. 12. — P. 6552-6556.

89. Lucio, P. BIOMED-I concerted action report: flow cytometric immunophenotyping of precursor B-ALL with standardized triple-stainings. BIOMED-1 Concerted Action Investigation of Minimal Residual Disease in Acute Leukemia: International Standardization and Clinical Evaluation. / P. Lucio, G. Gaipa, E. G. van Lochem et al. // Leukemia. — 2001. — Vol. 15. — N. 8. — P. 1185-1192

90. Lucio, P. Flow cytometric analysis of normal B cell differentiation: a frame of reference for the detection of minimal residual disease in precursor-B-ALL. / P. Lucio, A. Parreira, M. W. van den Beemd et al. // Leukemia. — 1999 — Vol. 13. N. 3.

— P. 419-427

91. Ludwig, W. D. Immunophenotypic features of childhood and adult acute lymphoblastic leukemia: Experience of the German multicenter trials ALL-BFM and GMALL. / W. D. Ludwig, A. Reiter, H. Loeffler et al. // Leuk Lymphoma. — 1994. — Vol. 13. — suppl 1. — P. 71-76

92. Ludwig, W. D. Incidence and prognostic significance of immunophenotypic subgroups in childhood acute lymphoblastic leukemia: experience of the BFM study 86. / W. D. Ludwig, J. Harbott, C. R. Bartram, et al. // Recent Results Cancer Res. — 1993. — Vol. 131. — P. 269-282

93. Meadows, A.T. Potential long-term toxic effects in children treated for acute lymphoblastic leukemia. / A.T. Meadows , L.L. Robison, J.P. Neglia et al. // New English Journal of Medicine. — 1989. — Vol. 321. — N. 26. — P. 1830-1831

94. Min Xia. Key Markers of Minimal Residual Disease in Childhood Acute Lymphoblastic Leukemia / Min Xia, Hong Zhang, Zhenghua Lu et al. // J Pediatr Hematol Oncol. — 2016. — Vol. 38. — N. 6. — P. 418-422

95. Moricke, A. Riskadjusted therapy of acute lymphoblastic leukemia can decrease treatment burden and improve survival: treatment results of 2169 unselected pediatric and adolescent patients enrolled in the trial ALL-BFM 95. / A. Moricke, A. Reiter, M. Zimmermann, et al. // Blood. — 2008. — Vol. 111. — N. 9. — P. 4477-4489

96. Munoz, L. Sierra Interleukin-3 receptor a chain (CD123) is widely expressed in hematologic malignancies. / L. Munoz, J.F. Nomdedeu, O. Lopez et al. // Haematologica. — 2001. — Vol. 86. — N. 12. — P. 1261-1269

97. Muzzafar, T. Aberrant Underexpression of CD81 in Precursor B-Cell Acute Lymphoblastic Leukemia Utility in Detection of Minimal Residual Disease by Flow. / T. Muzzafar, L. J. Medeiros, S. A. Wang et al. // Cytometry Am J Clin Pathol — 2009. — Vol. 132. — N. 5. — P. 692-698

98. Ochs JJ. Neurotoxicity due to central nervous system therapy for childhood leukemia. American Journal of Pediatric Hematology/Oncology. — 1989. — Vol. 11. — N. 1. — P. 93-105

99. Owaidah, T.M. Expression of CD66c and CD25 in acute lymphoblastic leukemia as a predictor of the presence of BCR/ABL rearrangement. / T.M. Owaidah,

F. I. Rawas, M. F. Al Khayatt et al. // Hematol Oncol Stem Cell Ther. — 2008. — Vol. 1. — N. 1. P. 34-37.

100. Packer, R.J. Long-term sequelae of cancer treatment on the central nervous system in childhood. / R.J. Packer, A.T. Meadows, Rorke L.B. et al.// Medical and Pediatric Oncology. — 1987. — Vol.15. — N. 5. — P. 241-253

101. Pedreira, C. E. EuroFlow Consortium. Overview of clinical flow cytometry data analysis: recent advances and future challenges / C. E. Pedreira, E. S. Costa, Q. Lecrevisse et al // Trends Biotechnol. — 2013. — Vol. 31. — N. 7. — P. 415-425

102. Pongers-Willemse, M. J. Real-time quantitative PCR for thedetection of minimal residual disease in acute lymphoblastic leukemia using junctional region specific TaqMan probes. / M.J. Pongers-Willemse, O.J. Verhagen, G.J. Tibbe et al. // Leukemia. — 1998. — Vol. 12. — N. 12. — P. 2006-2014

103. Porwit-MacDonald, A. BIOMED-1 Concerted Action report: Flow cytometric characterization of CD7+ cell subsets in normal bone marrow as a basis for the diagnosis and follow-up of T cell acute lymphoblastic leukemia (T-ALL). / A. Porwit-MacDonald, E. Bjorklund, P. Lucio et al. // Leukemia. — 2000. — Vol. 14. — N. 5. — P. 816-825

104. Przepiorka, D. FDA Approval: Blinatumomab. / D. Prepiorka, C. W. Ko, A. Deisseroth et al. // Clin Cancer Res. — 2015. — Vol. 21. — N. 18. — P. 4035-4039

105. Pui, C. H. Biology and clinical significance of cytogenetic abnormalities in childhood acute lymphoblastic leukemia. / C. H. Pui, W. M. Crist, A. T. Look // Blood. — 1990. — Vol. 76. — N. 8. — P. 1449-1463

106. Pui, C. H. Clinical and biologic relevance of immunologic marker studies in childhood acute lymphoblastic leukemia. / C. H. Pui, F. G. Behm, W. M. Crist // Blood. — 1993. — Vol. 82. — N. 2. — P. 343-362

107. Pui, C. H. Clinical characteristics and treatment outcome of childhood acute lymphoblastic leukemia with the t(4;11)(q21;q23): A collaborative study of 40 cases. / C. H. Pui, L. S. Frankel, A. J. Carroll et al. // Blood. — 1991. — Vol. 77. — N. 3. — p. 440-447

108. Pui, C. H. Clinical significance of CD10 expression in childhood acute lymphoblastic leukemia. / C. H. Pui, G. K. Rivera, M. L. Hancock et al. // Leukemia. — 1993. — Vol. 7. — N. 1. — P. 35-40.

109. Pui, C. H. Treatment of acute lymphoblastic leukemia. / C. H. Pui, W. E. Evans // N Engl J Med. — 2006. — Vol. 354. — N. 2. — P. 166-178

110. Pui, C.H. Characterization of childhood acute leukemia with multiple myeloid and lymphoid markers at diagnosis and at relapse. / C. H. Pui, S. C. Raimondi, D. R. Head et al. // Blood. — 1991. — Vol. 78. N. 5. — P. 1327-1337

111. Pui, C.H. Childhood acute lympoblastic leukemia: current status and future perspective / C.H. Pui, D. Campana, W.E. Evans // Lancet Oncol. — 2001. — Vol. 2. — N. 10. — P. 597-607

112. Pui, C.H. Secondary acute myeloid leukemia in children treated for acute lymphoid leukemia. / C.H. Pui, F.G. Behm, S.C. Raimondi, et al. // New English Journal of Medicine. — 1989 — Vol. 321. — N. 3. — 136-142

113. Ratei, R. Monitoring treatment response of childhood precursors B-cell acute lymphoblastic leukemia in the AIEOP-BFM-ALL 2000 protocol with multiparameter flow cytometry: predictive impact of early blast reduction on the remission status after induction / R. Ratei, G. Basso, M. Dworzak et al. // Leukemia. — 2009. — Vol. 23. — N. 3 — P. 528-534

114. Res, P. Developmental stages in the human thymus. / P. Res, H. Spits // Semin Immunol. — 1999. — Vol. 11. — N. 1. — P. 39-46

115. Reuss-Borst, M. A. Adhesion molecules on CD34+ hematopoietic cells in normal human bone marrow and leukemia. / M. A. Reuss-Borst, H. J. Buhring, G. Klein, et al. // Ann Hematol. — 1992. — Vol. 65. — N. 4. — P. 169-174.

116. Riehm, H. Corticosteroid-dependent reduction of leukocyte coumt in blood as a prognostic factor in acute lymphoblastic leukemia in childhood (therapy study ALL-BFM 83) / H. Riehm, A. Reiter, M. Schrappe // Klin Pediatr. — 1987. — Vol. 199. — N.3 — P. 151-160

117. Rimm, I. J. Brain tumors after cranial irradiation for childhood acute lymphoblastic leukemia. / I.J. Rimm, F.C. Li, N.J. Tarbell et al. // Cancer. — 1987. — Vol. 59 — N. 8 — 1506-1508

118. Romero-Ramirez, H. CD38 expression in early B-cell precursors contributes to extracellular signal-regulated kinase-mediated apoptosis. / H. Romero-Ramirez, M. T. Morales-Guadarrama, R. Pelayo et al. // Immunology. — 2014. — Vol. 144. — N. 2. — P. 271-281

119. Roshal, M. Immaturity associated antigens are lost during induction for T cell lymphoblastic leukemia: implications for minimal residual disease detection. / M. Roshal, J. R. Fromm, S. Winter et al. // Cytometry B Clin Cytom. — 2010. — Vol. 78.

— N. 3. — P 139-146

120. Sato, N. Expression and factor-dependent modulation of the interleukin-3 receptor subunits on human hematopoietic cells. / N. Sato, C. Caux, T. Kitamura et al. // Blood. — 1993. — Vol. 82. — N. 3. — P. 758-761

121. Sato, S. Regulation of B lymphocyte development and activation by the CD19/CD21/CD81/Leu 13 complex requires the cytoplasmic domain of CD19. / S. Sato, A. S. Miller, M. C. Howard et al. // J Immunol. — 1997. — Vol. 159. — N. 7. — P. 3278-3287

122. Schrappe M. Improved outcome in childhood acute lymphoblastic leukemia despite reduced use of anthracyclines and cranial radiotherapy: results of trial ALL-BFM 90. / M. Schrappe, A. Reiter, W.-D. Ludwig // Blood. — 2000. — Vol. 95.

— N. 11. — P. 3310-3320

123. Schrappe, M. Late MRD response determines relapse risk overall and in subsets of childhood T-cell ALL: results of the AIEOP-BFM-ALL 2000 study. / M. Schrappe, M. G. Valsecchi, C. R. Bartram et al. // Blood. — 2011. — Vol. 118. — N. 8.

— P. 2077-2084

124. Shipp, M. A. Molecular cloning of the common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA) identifies a type I1 integral membrane protein. / M. A. Shipp, N. E. Richardson, P. H. Sayre et al. // Proc Natl Acad Sci USA. — 1988. — Vol. 85. — N. 13. — P. 4819-4823

125. Shoham, T. The tetraspanin CD81 regulates the expression of CD19 during B cell development in a postendoplasmic reticulum compartment. / T. Shoham, R. Rajapaksa, C. Boucheix, et al. // J Immunol. — 2003. — Vol. 171. — N. 8. — P. 40624072

126. Skubitz, K.M. CD66c family members are associates with kinase activity in human neutrophils. / K.M. Skubitz, K.D. Campbell, K. Ahmed et al. // J. Immuol. — 1995. — Vol. 155. — N. 11. — P. 5382-5390

127. Sobol, R. E. Clinical importance of myeloid antigen expression in adult acute lymphoblastic leukemia. / R. E. Sobol, R. Mick, I. Royston et al. // N Engl J Med.

— 1987. — Vol. 316. — N. 18. — P. 1111-1117

128. Steinherz, P.G. Cytoreduction and prognosis in acute lymphoblastic leukemia the importance of early marrow response: report from the Childrens Cancer Group / Steinherz PG, Gaynon PS, Breneman JC et al. // Journal of Clinical Oncology.

— 1996. — Vol. 14. — N.2. — P. 389-398

129. Sugita, K. The KOR-SA3544 antigen predominantly expressed on the surface of Philadelphia chromosome-positive acute lymphoblastic leukemia cells is nonspecific cross-reacting antigen-50/90 (CD66c) and invariably expressed in cytoplasm of human leukemia cells. / K. Sugita, T. Mori, S. Yokota et al. // Leukemia.

— 1999. — Vol. 13. — N. 5. — P. 779-785

130. Szczepanski, T. Minimal residual disease in leukaemia patients. / T. Szczepanski, A. Orfao, V.H. van der Velden. // Lancet Oncol. — 2001. — Vol. 2 — N. 7. — P. 409-417

131. Tabernero, M. D. Adult precursor B-ALL with BCR/ABL gene rearrangements displays a unique immunophenotype based on the pattern of CD10, CD34, CD13 and CD38 expresssion. / M. D. Tabernero, A. M. Bortoluci, I. Alaejos et al. // Leukemia. — 2005. — Vol. 15. — N. 3. — P. 403-414

132. Tajima, F. Reciprocal expression of CD38 and CD34 by adult murine hematopoietic stem cells. / F. Tajima, T. Deguchi, J. H. Laver et al. // Blood. — 2001.

— Vol. 97. — N.9. — P. 2618-2624.

133. Tatsumi, T. Expression of adhesion molecules on myeloma cells. / T. Tatsumi, C. Shimazaki, H. Goto, et al. // Jpn J Cancer Res. — 1996. — Vol. 87. — N. 8. — P. 837-842.

134. Terstappen, L. W. Flow cytometric assessment of human T-cell differentiation in thymus and bone marrow. / L. W. Terstappen, S. Huang, L. J. Picker // Blood. — 1992. — Vol. 79. — N. 3 — P. 666-677

135. Topp, M. S. Long-term follow-up of hematologic relapse-free survival in a phase 2 study of blinatumomab in patients with MRD in B-lineage ALL. / M. S. Topp, N. Gokbuqet, G. Zuqmaier et al. // Blood. — 2012. — Vol. 120. — N. 26. — P. 51855187

136. Uckun, F. M. Biology and treatment of childhood T-lineage acute lymphoblastic leukemia. / F. M. Uckun, M. G. Sensel, L. Sun, et al. // Blood. — 1998. — Vol. 91. — N. 3. — P. 735-746

137. Uckun, F. M. Clinical features and treatment outcome of children with myeloid antigen positive acute lymphoblastic leukemia: A report from the Children's Cancer Group. / F. M. Uckun, H. N. Sather, P. S. Gaynon et al. // Blood. — 1997. — Vol. 90. — N. 1. — P. 28-35

138. Uckun, F. M. Regulation of human B-cell ontogeny. / F. M. Uckun // Blood. — 1990. — Vol. 18. — N. 76. — P. 1908-1923

139. Urbano-Ispizua, A. Clinical significance of the presence of myeloid associated antigens in acute lymphoblastic leukemia. / A. Urbano-Ispizua, E. Matutes, N. Vilamor et al. // Br J Haematol. — 1990. — Vol. 75. — N. 2. — P. 202-207

140. van der Velden V.H.J. Detection of minimal residual disease in hematologic malignancies by real-time quantitative PCR: principles, approaches, and laboratory aspects. / V.H.J. van der Velden, A. Hochhaus, G. Cazzaniga et al. // — Leukemia. — 2003. — Vol. 17. — N. 6. — P. 1013-1034

141. van der Velden, V.H. Age-related patterns of immunoglobulin and T-cell receptor gene rearrangements in precursor-B-ALL: implications for detection of minimal residual disease. / V.H. van der Velden, T. Szczepanski, J.M. Wijkhuijs et al. // Leukemia. — 2003. — Vol. 17. — N. 9. — P. 1834-1844

142. van der Velden, V.H. European Study Group on MRD detection in ALL (ESG-MRD-ALL). Analysis of minimal residual disease by Ig/TCR gene rearrangements: guidelines for interpretation of real-time quantitative PCR data. / V.H. van der Velden, G. Cazzaniga, A. Schrauder et al // Leukemia. — 2007. — Vol. 21. — N. 4. — P. 604-611

143. van Dongen, J. J. EuroFlow Consortium (EU-FP6, LSHB-CT-2006-018708). EuroFlow antibody panels for standardized n-dimensional flow cytometric immunophenotyping of normal, reactive and malignant leukocytes. / J. J. van Dongen, L. Lhermitte, S. Bottcher, et al // Leukemia. — 2012. — Vol. 26. — N. 9. — P. 19081975

144. van Dongen, J. J. Minimal residual disease diagnostics in acute lymphoblastic leukemia: need for sensitive, fast, and standardized technologies. / J. J. van Dongen, V. H. van der Velden, M. Bruggemann et al. // Blood. — 2015. — Vol. 125 — N. 26. — P. 3996-4009

145. van Dongen, J. J. Prognostic value of minimal residual disease in acute lymphoblastic leukaemia in childhood. / J. J. van Dongen, T. Seriu, E. R. Panzer-Grumayer, et al. // Lancet. — 1998. — Vol. 352. — N. 9142. — P. 1731-1738

146. Veltroni, M. Expression of CD58 in normal, regenerating and leukemic bone marrow B cells: implications for the detection of minimal residual disease in acute lymphocytic leukemia. / M. Veltroni, L. De Zen, M. C. Sanzari et al. // Haematologica. — 2003. — Vol. 88. — N. 11. — P. 1245-1252

147. Verhagen, O. J. H. M. Application of germline IGH probes in real-time quantitative PCR for the detection of minimal residual disease in acute lymphoblastic leukemia. / O. J. H. M.Verhagen, M.J. Willemse, W.B. Breunis et al. // Leukemia. — 2000. — Vol. 14. — N. 8. — P. 1426-1435

148. Webb, D. S. LFA-3, CD44, and CD45: physiologic triggers of human monocyte TNF and IL-1 release. / D. S. Webb, Y. Shimizu, G. A. Van Seventer, et al. // Science. — 1990. — Vol. 249. — N. 4974. — P. 1295-1297

149. Wiersma, S. D. Clinical importance of myeloid antigen expression in acute lymphoblastic leukemia of childhood. / S. D. Wiersma, J. Ortega, E. Sobel et al. // N Engl J Med. — 1991. — Vol. 324. — N. 12. — P. 800-808

150. Wolach, O. Blinatumomab for the Treatment of Philadelphia Chromosome-Negative, Precursor B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia. / O. Wolach, R. M. Stone // Clin Cancer Res. — 2015. — Vol. 21. — N. 19. — P. 4262-4269

151. Yamada, M. Detection of minimal disease in hematopoietic malignancies of the B-cell lineage by using third-complementarity-determining region (CDR-III)-specific probes. / M. Yamada, S. Hudson, O. Tournay et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. — 1989 — Vol. 86. — N. 13. — P. 5123-5127

152. Zoller M. Tetraspanins: push and pull in suppressing and promoting metastasis. / M. Zoller // Nat Rev Cancer. 2009. — Vol. 9. — N. 1 — P. 40-55