Диагностика Y-вируса картофеля и штаммовый состав патогена в Среднем Поволжье тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.07, кандидат наук Вологин, Семен Германович

• Вологин, Семен Германович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Вологин, Семен Германович

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Вирусные болезни картофеля

1.2 Характеристика вирусов картофеля

1.2.1 Х-вирус картофеля

1.2.2 М-вирус картофеля

1.2.3 Вирус скручивания листьев картофеля

1.2.4 У-вирус картофеля

1.3 Диагностика вирусных патогенов

1.3.1 Визуальное выявление вирусов

1.3.2 Метод биологического тестирования

1.3.3 Электронная микроскопия

1.3.4 Иммунобиологические методы диагностики

1.3.5 Молекулярно-генетические методы исследования

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объект исследования

2.2 Учетные точки исследований

2.3 Способы разрушения растительного материала

2.4 Преаналитическая подготовка растительного материала

2.5 Условия выращивания растений в защищенном грунте

2.6 Идентификация штаммовой принадлежности УВК

2.7 Искусственное заражение растений картофеля и табака

2.8 Методика проведения ИФА

2.9 Перечень реактивов использовавшихся

при проведении ИФА

2.10 Методика проведения ОТ-ПЦР

2.11 Конструирование олигонуклеотидных праймеров и определение нуклеотидной последовательности ДНК

2.12 Математическая обработка результатов

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Преаналитическая подготовка растительного материала для проведения диагностических исследований

3.1.1 Анализ структуры листовых и клубневых проб

картофеля

3.1.2 Влияние состава биоматериала и условий температурного хранения

3.1.3 Влияние буферных соединений

3.1.4 Действие антисептических соединений

3.1.5 Алгоритм преаналитической подготовки

биоматериала

3.2 Мониторинг вирусных патогенов в условиях

открытого грунта

3.3 Диагностика вирусов в меристемных линиях картофеля

3.4 Биометрический анализ данных ИФА

3.4.1 Анализ неинфицированных образцов

3.4.2 Расчет величины порогового значения

3.4.3 Анализ У2?/£-инфицированных образцов

3.5 Структура популяции YBK в Среднем Поволжье

3.5.1 Оценка частоты распространения серотипов вируса

3.5.2 Идентификация изолятов YBK

3.5.3 Идентификация возбудителя кольцевого некроза

клубней картофеля

3.5.4 Поиск сайтов рекомбинации в геноме изолятов YBK

3.5.5 Анализ нуклеотидной последовательности СР-гена и

белка оболочки УВК

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностика Y-вируса картофеля и штаммовый состав патогена в Среднем Поволжье»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы. Растения картофеля {Solanum tuberosum L.) в силу своих биологических особенностей подвержены инфицированию различными вирусами. В естественных условиях возделывания картофель поражается 37 видами вирусных патогенов [Salazar, 1996]. Y-вирус картофеля (YBK) относится к роду Potyvirus семейства Potyviridae. Патоген широко распространен во всем мире и относится к числу наиболее вредоносных агентов поражающих картофель, а также других культурных представителей семейства пасленовых: томат, перец и табак. Согласно оценкам, инфицирование YBK приводит к снижению урожайности картофеля на 30-90% [Struik, Wiersema, 1999]. Основной путь передачи YBK связан со сложным пищевым поведением насекомых - крылатых тлей, осуществляющих неперсистентный перенос патогена. В инфицированных растениях картофеля вирус проникает в клубни, с помощью которых в условиях аграрного производства может распространяться на обширные территории. К причинам широкого распространения YBK в настоящее время относят: нарушение агротехнических приемов возделывания картофеля, использование зараженного семенного материала, а также несовершенство методов обнаружения патогена [Иванюк и др., 2005].

Область диагностики и идентификации вирусов является важным элементом в сфере защиты растений от болезней. Современные системы ведения семеноводства картофеля на оздоровленной безвирусной основе предусматривают применение диагностического контроля вирусного поражения на различных этапах семеноводческого процесса с целью своевременного удаления инфицированных партий посадочного материала из агропромышленного производства [Замалиева, 2009]. Также методы лабораторной диагностики применяются в ходе селекционного процесса при создании сортов картофеля устойчивых к YBK [Салихова и др., 2012].

В последние годы в России разработаны тест-системы для обнаружения вирусов картофеля, основанные на методах иммуноферментного анализа [Бобкова и др., 2003; Комаров и др., 2013], иммунохроматографического анализа [Вызова и др., 2009], полимеразной цепной реакции [Рязанцев, Завриев, 2009], а также гибридизации нуклеиновых кислот [Drygin et al., 2007]. Данные работы, в основном, посвящены аналитическому этапу исследований: разработке новых или усовершенствованию существующих протоколов проведения сложных биохимических реакций, лежащих в основе диагностики. При этом, остаются не достаточно исследованными аспекты, связанные с преаналитическим состоянием исследуемого биологического материала: условиями его обработки и хранения, а также особенностями накопления вирусных патогенов в различных растительных тканях. Несомненно, что все перечисленные факторы оказывают значительное влияние на результаты лабораторной диагностики. Кроме того, в настоящее время практически не уделяется внимание вопросам, связанным с постаналитическим этапом диагностических исследований фитопатогенов. Публикации на эту тему немногочисленны [Sutula et al, 1986; Козлов и др., 1993; Обручков, Васильев, 1993]. В тоже время, статистическая обработка данных вносит большой вклад в процесс интерпретации результатов лабораторной диагностики [Свежова и др., 2008].

В настоящее время большую значимость приобретает фитосанитарный мониторинг, предусматривающий оценку видового и штаммового состава вирусов растений. Известно, что YBK обладает сложной популяционной структурой. Описано несколько штаммов вируса [Smith, Dennis, 1940; De Bokx, Huttinga, 1981; Beczner etal., 1984; Chrzanowska, 1987; Le Romancer et al., 1994; Blanco-Urgoiti et al., 1998; Chikh Ali et al., 2008; Chikh Ali et al., 2010], индуцирующих образование различных симптомов на растениях картофеля, а также различающихся по серологическим и молекулярно-

генетическим свойствам. Наибольшую угрозу для агропромышленного производства представляют штаммы, индуцирующие некротическое поражение клубней картофеля, приводящие к значительному снижению их товарного вида и пищевой ценности [Вайдеманн и др., 1999; Иванюк и др., 2005]. Также серьезную опасность несут рекомбинантные формы YBK, характеризующиеся высокой эффективностью переноса с помощью насекомых [Verbeek et al., 2010]. В результате быстрого распространения рекомбинантных штаммов, способных к индукции некрозообразования, многие сорта картофеля потеряли свою привлекательность для сельскохозяйственного производства [Basky, 2002].

В Средневолжском регионе России сосредоточены значительные площади посадок семенного и товарного картофеля. Кроме того, здесь функционирует ряд крупных селекционных и семеноводческих учреждений. В связи с этим, исследование аспектов связанных с лабораторной диагностикой и фитосанитарным мониторингом популяционного состава YBK на территории данного региона является актуальным.

Цель и задачи исследования. Целью работы явилось установление особенностей диагностического выявления YBK и штаммового состава патогена в Среднем Поволжье.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Усовершенствовать процесс подготовки растительного материала для диагностического обнаружения YBK.

2. Изучить уровень распространения YBK и других вирусных патогенов в растениях картофеля открытого грунта, а также в меристемных линиях in vitro.

3. Осуществить биометрический анализ данных ИФА, полученных при диагностике YBK.

4. Исследовать штаммовый состав вируса на территории Среднего Поволжья.

Научная новизна. Впервые установлен эффект повышения достоверности результатов лабораторной диагностики при использовании комплекса преаналитических факторов: однократного цикла замораживания-оттаивания разрушенной листовой ткани растений, а также внесения в состав листовых и клубневых проб картофеля мертиолята натрия и тиосалициловой кислоты. С помощью биометрического анализа выявлено существование взаимосвязи между результатами ИФА и процессом распространения патогена в вегетативных поколениях картофеля. Впервые на территории Среднего Поволжья обнаружена циркуляция штаммов УВЫ^™ и УВВ^'т, индуцирующих развитие симптомов кольцевого некроза клубней картофеля. На территории европейской части России показано распространение изолятов УВК, обладающих рекомбинантной формой генома.

Практическая значимость работы. Полученные результаты могут быть применены в испытательных лабораториях системы Россельхознадзора и Россельхозцентра, а также в учреждениях, связанных с семеноводством и селекцией картофеля. Разработанный алгоритм преаналитической подготовки исследуемого материала используется в ГНУ ТатНИИСХ при диагностическом выявлении вирусов в системе семеноводства картофеля на оздоровленной основе.

Охарактеризованные изоляты УВК могут быть использованы в селекционных исследованиях при создании форм растений устойчивых к патогену, а также могут быть применены при создании диагностикумов и контрольной панели образцов, предназначенной для оценки качества работы диагностических тест-систем.

Связь работы с научными программами и собственный вклад автора. Работа проводилась в соответствие с темами 04.15.01 и 04.15.02 Программы фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению агропромышленного комплекса Российской

Федерации на период 2006-2010 и 2011-2015 гг. Научные положения диссертации и выводы базируются на результатах собственных исследований автора, проводившихся на протяжении 2005-2013 гг.

Положения выносимые на защиту.

1. Алгоритм пробоподготовки растительного материала, повышающий эффективность диагностических исследований методом ИФА.

2. Зависимость данных ИФА от продолжительности распространения YBK в ряду вегетативных поколений картофеля.

3. Структура патогена на территории Среднего Поволжья, представленная изолятами, проявляющими свойства штаммов YBK°, YBKft YBF?m, YBBf'm и обладающими рекомбинантной формой генома.

Апробация работы. Основные положения диссертации представлены на XI Международной школе-конференции молодых ученых «Биология-наука XXI века» (Пущино, 2007), IX Международной конференции «Биология клеток растений in vitro» (Зеленоград, 2008), научно-практической конференции «Картофелеводство: результаты, инновации, практический опыт» (Москва, 2008), Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы сельскохозяйственной науки и практики в современных условиях и пути их решения» (Казань, 2009), Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Инновационные разработки молодых ученых - АПК России» (Казань, 2010), Международной научно-практической конференции «Состояние и перспективы научных исследований по картофелеводству, овощеводству и бахчеводству» (Алматы, 2011), III международного симпозиума «Клеточная сигнализация у растений» (Казань, 2011), Международной научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Вклад молодых ученых в инновационное развитие АПК России» (Екатеринбург, 2012), Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых и специалистов «Проблемы и перспективы аграрной науки в России» (Саратов, 2012), Всероссийской научно-

практической конференции «Научное обеспечение агропромышленного комплекса России» (Казань, 2012), VI Всероссийской конференции молодых ученых «Стратегия взаимодействия микроорганизмов и растений с окружающей средой» (Саратов, 2012), I международного симпозиума «Молекулярные аспекты редокс-метаболизма растений» (Казань, 2013), научной конференции «Молекулярно-генетические подходы в таксономии и экологии» (Ростов-на-Дону, 2013), Всероссийской научной конференции с международным участием «Биотехнологии: наука и практика, инновации и бизнес» (Астрахань, 2013)

Публикации. По теме диссертационного исследования опубликовано 20 научных работ, из них 2 статьи в ведущих рецензируемых изданиях.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Вирусные болезни картофеля

Первые описания болезней картофеля, индуцированных вирусными патогенами, относятся ко второй половине XVIII века. В Нидерландах были выявлены симптомы скручивания листьев растений картофеля, приводившие к значительному падению урожайности. В публикациях того времени подобное состояние получило название «вырождения», «истощения» или «старения» растений [Лоусон, Стейс-Смит, 2005]. Было отмечено, что из клубней пораженных болезнью всегда вырастали слабые растения. Позднее, массовое вырождение посадок картофеля было обнаружено в Великобритании, Франции и Германии [Лоусон, Стейс-Смит, 2005].

На раннем этапе исследований было описано три типа вырождения картофеля, которые характеризовались мозаичностью, полосчатостью и скручиванием листовых пластинок. Была установлена вирусная природа данных заболеваний [Quanjer et al, 1916: цит. по Лоусон, Стейс-Смит, 2005], а также роль насекомых в их передаче [Schulz, Folsom, 1923]. Позднее было описано семь морфологических проявлений вирусных болезней на картофеле: мягкая мозаика, складчатая мозаика, скручивание листьев, мозаичное закручивание листьев, морщинистая мозаика, полосчатость и некрапчатая курчавая карликовость [Schulz, Folsom, 1923].

Важным открытием стало обнаружение явления латентного инфицирования [Johnson, 1925] при котором материал, полученный от внешне здоровых растений картофеля, вызывал проявления вирусной болезни у других видов растений.

Дальнейший прогресс в изучении вирусов картофеля был связан с работой Смита [Smith, 1931а] в которой было показано, что большинство мозаичных болезней картофеля связано с комплексным поражением несколькими вирусами. Смиту удалось обнаружить, что инфицирование, проведенное механическим уколом иглы и заражение с помощью насекомых,

приводило к появлению различных симптомов. Вирус, передаваемый с помощью механического повреждения и индуцировавший некротические поражения концентрической формы на листьях табака, был обозначен символом «X». Патоген, инфицировавший растения с помощью насекомых и приводивший к развитию мозаичных симптомов на листьях табака, был отмечен символом «Y» [Smith, 193 lb]. В настоящее время данные патогены хорошо охарактеризованы и идентифицированы как Х- и Y-вирусы картофеля (ХВК, YBK), являющиеся типичными представителями родов Potexvirus и Potyvirus.

Также Смитом был сделал важный вывод о том, что сходные симптомы заболевания могут быть вызваны различными вирусами, а инфицирование различных видов растений одним и тем же патогеном может приводить к развитию различных симптомов. Был предложен метод позволяющий проводить дифференцировку мозаичных вирусов [Smith, 1931а] который включал проведение заражения с помощью тли Myzus persicae, а также предполагал использование растений-индикаторов и растений-«фильтров» относящихся к семейству Solanaceae.

В последствии традиция использования отдельных букв алфавита в номенклатуре вирусов картофеля была продолжена. Инфекционный агент индуцировавший развитие морщинистой мозаики получил название А-вируса картофеля (АВК) [Murphy, Mackay, 1932], псевдосетчатого некроза-F-eupyc картофеля (FBK) [Clinch et al., 1936], а симптомы мозаики аукубы -G-eupyc картофеля (GBK) [Clinch et al, 1936].

Дальнейшая идентификация новых вирусов поражающих картофель стала возможной при применении иммунобиологических методов исследования. Не смотря на довольно широкий разброс иммуногенной активности, характерный для вирусов растений [Гнутова, 1993], диагностические антисыворотки были получены для большинства известных вирусных патогенов. В процессе создания диагностической антисыворотки к

АВК был идентифицирован новый инфекционный агент - S-eupyc картофеля (SBK) [De Bruyn Ouboter, 1952]. Дальнейшее диагностическое изучение показало широкое распространение этого патогена во всем мире. Также с помощью серологического метода был идентифицирован М-eupyc картофеля (МВК) [Bagnall et al, 1956], морфологические проявления которого на растениях картофеля и растениях-индикаторах были описаны позднее.

Новые возможности применения серологического метода появились с момента разработки и активного использования моноклональных антител [Kohler, Mistem, 1975]. С их внедрением стало возможным проводить тонкую дифференциальную диагностику штаммового разнообразия вирусов растений. В настоящее время серологически различающиеся штаммы описаны у YBK, ХВК, МВК и SBK [Jones, 1990; Hataya et al., 1994; Verhoeven, Roenhorst, 1995; Cavileer et al, 1998].

Применение метода электронной микроскопии обеспечило возможность получения данных о форме и размере вирусных частиц. Оказалось, что подавляющее большинство вирусов поражающих картофель обладают нитевидной формой вириона [Метьюз, 1973]. К их числу относятся Y-, A-, X-, S- и М- вирусы картофеля, а также другие вирусные патогены, цикл развития которых протекает в клетках фотосинтезирующих тканей растений. Полиэдрической формой вириона обладает вирус скручивания листьев картофеля (ВСЯК), инфекционный цикл которого протекает во флоэмной ткани растений.

1.2 Характеристика вирусов картофеля

В настоящее время описано 54 вида вирусных патогенов, способных инфицировать растения картофеля, однако лишь 37 видов поражают данную культуру в естественных условиях аграрного производства [Salazar, 1996]. Такие вирусы, как YBK, ХВК, МВК и BCJIK являются широко распространенными во всех частях земного шара. Представители данной группы инфекционных агентов являются первично-специфическими

патогенами картофеля, однако при этом могут инфицировать другие виды семейства пасленовых, а также ряд сорных растений относящихся к другим семействам [Brunt etal., 1996].

1.2.1 Х-вирус картофеля

Х-вирус картофеля (.ХВК) относится к роду Potexvirus семейства Flexiviridae. Вирионы нитевидной формы. Длина частиц 445-775 нм, диаметр частиц 11-15 нм [Гнутова, 1993].

Геном вируса представлен линейной, одноцепочечной молекулой (+)-смысловой РНК. Длина генома составляет 6435 нуклеотидов [Skryabin et al., 1988]. Концевые участки геномной РНК подвергаются постранскрипционной модификации: 5-конец РНК кэпирован, З'-конец содержит поли(А) последовательность [Brunt et al., 1996]. Геномная РНК содержит 5 открытых рамок считывания, с которых нарабатывается структурный негликозилированный белок оболочки (25 кДа), а также пять неструктурных полипептидов с молекулярными массами 8, 12, 15, 40 и 44 кДа [Гнутова, 1993]. При развитии инфекционного процесса ХВК в растительных тканях образует включения в виде слоистых агрегаций или бусовидных пластин. Образование данных включений не связано с накоплением вирусного белка оболочки [Brunt et al., 1996]. Показано, что при поражении ХВК происходит значительная дегенерация хлоропластов листа, граны и ламеллы теряют четкость. Цитоплазматическая мембрана разрушается, идет процесс плазмолиза с формированием зон содержащих везикулы [Гнутова, 1993].

На растениях картофеля пораженных ХВК симптомы болезни варьируют. Их проявление зависит от сортовых особенностей, штамма вируса, условий окружающей среды и проявления синергизма при смешанных типах инфекции [Лебенштейн, 2005]. Обычно поражение патогеном приводит к развитию крапчатой мозаики листовой ткани. В ряде случаев - к некротизации верхушки растения.

В настоящее время известно несколько штаммов, различающихся по

способности преодолевать устойчивость генов Nx и Nb у различных сортов картофеля. Патологические признаки штаммов коррелируют с их серологическими свойствами. Штаммы, авирулентные на сортах картофеля несущих ген Nx выявляются моноклональными антителами к Х-типу белка оболочки, в то время как вирулентные диагностируются специфическими антителами к B-типу капсидного белка [Querci etal., 1995].

Инфицирование ХВК приводит к снижению урожая на 10-25% [Struik, Wiersema, 1999]. В случае микст-инфицирования, сопряженного с YBK, потери урожайности достигают 50 % [Лебенштейн, 2005].

Вирус передается при механическом контакте и инокуляцией соком больного растения. Не передается через ботанические семена. Трансмиссия с помощью насекомых-переносчиков отсутствует. Имеются сообщения о передаче патогена зооспорами грибов Synchytrichiun endobioticum [Nienhaus, Stille, 1965] и Phytophtora infestans [Али, 2011].

1.2.2 М-вирус картофеля

M-eupyc картофеля (МВК) относится к роду Carlavirus семейства Flexiviridae. Вирусные частицы обладают нитевидной формой размером 650 нм. Диаметр вириона 12 нм. Геном представлен одной однонитевой (+)-смысловой молекулой РНК, включающей 8534 нуклеотида [Zavriev et al, 1991]. Геномная РНК состоит из 6 открытых рамок считывания, кодирующих полипептиды с молекулярным размером 11, 34, 7, 12, 25 и 223 кДа [Гнутова, 1993]. Вирусный капсид включает около 1800 единиц белка оболочки, обладающего молекулярной массой 34 кДа. Описано существование серологически-различающихся штаммов МВК [Cavileer et al, 1998]. Показано, что N-терминальный фрагмент белка оболочки экспонирован на поверхности вирусной частицы и содержит основные антигенные детерминанты, распознаваемые различными моноклональными антителами [Ткаченко, 2003]. Филогенетический анализ, проведенный на основании нуклеотидных последовательностей СР-гена, показал, что все известные

изоляты вируса дифференцируются на северо-американскую и европейскую субгруппы патогена [Xu et al., 2010].

В пораженных растениях вирионы МВК выявляются в виде агрегатов и паракристаллических образований рассеянных по цитоплазме клеток паренхимной ткани и ситовидных трубок. Также в инфицированных тканях идентифицированы внутриклеточные включения неправильной формы, состоящие из вирусных частиц, эндоплазматического ретикулума, рибосом и везикул [Edwardson, Christie, 1997].

Трансмиссия МВК осуществляется многими видами тлей по неперсистентныму пути переноса. Вирус не передается через ботанические семена. Экспериментально передается с помощью механической инокуляции [Brunt etal, 1996].

1.2.3 Вирус скручивания листьев картофеля

Вирус скручивания листьев картофеля (BCJIK) относится к роду Poleovirus семейства Luteoviridae. Нуклеокапсид изометрической формы, длина вириона 690 нм. Диаметр частиц 24 нм. [Brunt et al., 1996].

Геном представлен линейной одноцепочечной молекулой РНК, размером 5987 нуклеотидов [Mayo, 1989], которая ковалентно связана с N-концом VPg белка. Известно два структурных полипептида с молекулярным весом 7 и 26,3 кДа [Rowhani, Stace-Smith, 1979]. Геномная последовательность содержит 8 открытых рамок считывания, разделенных на два кластера. Изоляты вируса серологически не различимы [Гнутова, 1993].

Развитие вируса протекает только в клетках флоэмной ткани. В связи с этим концентрация BCJIK в инфицированном растении бывает низкой и диагностическое определение в листовом и клубневом материале бывает затруднительным [Loebenstein et al, 1997].

При поражении вирусом у растений картофеля наблюдается хлороз и сильное скручивание долей листьев вдоль средней жилки, что объясняется избыточным накоплением углевода каллозы. Переполнение клеток листьев

углеводами приводит к подавлению нормальных физиологических процессов и, прежде всего, фотосинтеза. Кроме того, вирус нарушает нормальный обмен фитогормонов, вследствие чего возникают различного рода тератоморфы: превращение вегетативных органов в генеративные, чрезмерная кустистость и карликовость [Дьяков и др., 2001].

Вирус передается только персистентно с помощью тлей-переносчиков. При механических инокуляциях, ботаническими семенами и пыльцой вирус не передается [Brunt et al., 1996].

Во многих странах возделывающих картофель патоген занимает одно из первых мест по вредоносности. Снижение урожайности при инфицировании вирусом достигает 70 %, при этом значительно снижается содержание крахмала в клубнях [Дынник, Попкова, 1997].

1.2.4. Y-вирус картофеля

Y-eupyc картофеля ( YBK) является типичным представителем рода Potyvirus, относящегося к семейству Potyviridae. Вирионы нитевидные, гибкие. Длина вирусных частиц 500-900 нм, диаметр 12-15 нм [Гнутова, 1993].

YBK обладает широким кругом растений-хозяев и способен инфицировать 41 вид, относящихся к четырем семействами [Брант, 20056]. Патоген распространен повсеместно и наносит значительный экономический ущерб. Согласно различным оценкам потери урожая достигают 30-90% [Struik, Wiersema, 1999; Анисимов, 2004]. Уровень падения урожайности зависит от вирусной нагрузки, времени прошедшего с момента заражения, штамма вируса, а также от уровня устойчивости возделывающегося сорта картофеля.

Вирус переносится неперсистентно многими видами крылатых тлей, том числе Myzus persicae, Macrosiphum euphorbiae, Aphis nasturtii, A. frangulae, A. fabae и др. В настоящее время в качестве потенциальных векторов YBK рассматривается 65 видов тлей [Pelletier et al., 2012]. Высокая

концентрация вируса в растении значительно увеличивает вероятность его переноса с помощью насекомых.

Генетический материал вируса представлен одной молекулой одноцепочечной (+)-смысловой РНК, обладающей размером 9,7 тыс. п.н. [Robaglia et al, 1989]. Вирусная РНК содержит 5'-NTR нетранслируемый регион и З'-полиаденированный участок. Область 5'-NTR включает 144 нуклеотида и является ковалентно-связанной с вирусным FPg-белком. Нетранслируемый З'-UTR регион не является абсолютно необходимым для процесса инфицирования, однако он играет важную роль в индукции симптомов заболевания, а также защищает вирусный геном от действия клеточных РНКаз [Robaglia et al, 1989].

Геном YBK содержит одну открытую рамку считывания. Вся последовательность вирусной РНК транслируется в один полипротеин размером 368 кДа [Dougherty, Carrington, 1988]. Данный полипротеин подвергается протеолитическому процессингу с помощью вирусных протеаз Nia, НС-Pro и Р1, с образованием ряда многофункциональных белков [Garcia et al., 1990]. К их числу относятся: Р7-белок, хелперный компонент-протеиназа (НС-Pro), РЗ-бе лок, 6К1-белок, белок цилиндрического включения (CIb), бК2-бепок, геном-связывающийся белок (VPg), малый белок ядерного включения-протеаза (Nía-Pro), большой белок ядерного включения (Nib) и белок оболочки (CP) [Dougherty, Carrington, 1988; Talbot, 2004]. Структурными белками YBK являются только CP- и VPg-полипептиды, выявляющиеся на поверхности вирусных частиц. Остальные белки являются неструктурными, обеспечивающими жизнедеятельность и инфекционный цикл вируса.

Наибольший интерес, с точки зрения лабораторной диагностики YBK, представляет CP-белок. Полипептид имеет массу 36 кДа и состоит из 267 аминокислотных остатков. Белок является основным элементом энкапсидации вируса. Вирусная частица содержит около 2 ООО молекул CP-

белка. Терминальный N-регион белка является высоковариабельным. Аминокислотная последовательность основной области и С-терминального участка является более консервативной. Известно, что N-терминальная область транспонирована на поверхности вириона и содержит высоко консервативный DAG мотив. Результаты исследований, проведенных с помощью сайт-направленного мутагенеза показали, что данный мотив имеет важное значение для афидо-опосредованной передачи вируса [Atreya et al., 1995]. Выявлено, что аминокислотное окружение DAG мотива может оказывать определенное влияние на эффективность вирусного переноса [Lopez-Moya, Pirone, 1998]. Также показано, что CP-белок принимает участие в процессах ближнего и дальнего транспорта вирусных частиц по растению [Doljaetal., 1995].

Инфекционный цикл YBK протекает в цитоплазме растительных клеток. При этом отмечается образование трехмерных кристаллических включений (CIB), наличие которых считается важным фенотипическим признаком поражения видами рода Potyvirus [Брант, 20056]. При поражении происходят значительные изменения в структуре органелл. Наблюдается гипертрофированность митохондрий и сокращение числа крист [Тулегенов, 1989]. Существенные изменения претерпевают хлоропласты: граны и ламеллы дегенерируют, возникает большое количество липофильных глобул, оболочка органелл разрушается, наблюдается процесс везикуляции [Тулегенов, 1989].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Вологин, Семен Германович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Али, Х.Х. Взаимодействие X вируса картофеля с РИ^орЬШга тГез1ап8 и особенности их распространения: автореф. дисс. ... канд. биол. наук: 06.01.07 / Х.Х. Али; РГАУ-МСХА им. К.А. Тимирязева. - М., 2011. - 23 с.

2. Алон, Й. Коммерческое использование иммуноферментного анализа (ЕЫБА-теста) и лаборатория испытания семян // Й. Алон, И.Б. Зеев //Вирусные и вирусоподобные болезни и семеноводство картофеля. - СПб: Инновационный центр защиты растений, 2005. - С. 173-180.

3. Амелюшкина, Т.А. Влияние комплекса агроприемов на урожай, количественный выход и качество оригинального семенного картофеля в условиях центрального региона России: автореф. дисс.... канд. с.-х. наук: 06.01.05 / Т.А. Амелюшкина; ВНИИКХ. - М., 2009. - 18 с.

4. Анисимов Б.В. Эффективные средоулучшающие и защитные агроприемы, ограничивающие распространение вирусных болезней при выращивании оригинального и элитного семенного картофеля / Б.В. Анисимов, С.М. Юрлова, О.С. Хутинаев //Современные тенденции и перспективы инновационного развития картофелеводства: материалы научно-практической конференции. - Чебоксары: Агро-Инновации, 2011. — С. 49-52.

5. Анисимов, Б.В. Фитопатогенные вирусы и их контроль в семеноводстве картофеля (Практическое руководство) / Б.В. Анисимов. - М.: ФГНУ Росинформагротех, 2004. - 80 с.

6. Ассан, С. Афидофильные вирусы картофеля и усовершенствование мер борьбы с ними: дисс. ... канд. биол. наук: 06.01.11 / С. Ассан. -М, 2000. - 116 с.

7. Блоцкая, Ж.В. Вирусные, вироидные и фитоплазменные болезни картофеля / Ж.В. Блоцкая. - Минск: Технология, 2000. - 119с.

8. Бобкова, А.Ф. Пиротест — метод иммуноферментного анализа вирусов картофеля / А.Ф. Бобкова, А.Н Блинцов, Чирков С.Н.// Аграрная Россия. -2003.-№3.-С. 23-27.

9. Брант, A.A. Основные вирусы заражающие культуру картофеля /А.А.Брант // Вирусные и вирусоподобные болезни и семеноводство картофеля. - СПб: Инновационный центр защиты растений, 2005а. - С. 1319.

10. Брант, A.A. Потивирусы /А.А.Брант // Вирусные и вирусоподобные болезни и семеноводство картофеля. - СПб: Инновационный центр защиты растений, 20056. - С. 19-25.

11. Вызова, H.A. Разработка иммунохроматографических тест-систем для экспрессной детекции вирусов растений / H.A. Бызова, И.В. Сафенкова, С.Н. Чирков, A.B. Жердев, А.Н. Блинцов, Б.Б. Дзантиев, И.Г. Атабеков // Прикладная биохимия и микробиология - 2009. - № 2. - С . 225 - 231.

12. Вайдеманн, X. JI. Новый опасный штамм вируса Y картофеля в Европе / X. JI. Вайдеманн, Д. Шпаар, Ж. В. Блоцкая // Изв. Акад. Аграрных наук Респ. Беларусь. - 1999. - Т. 1. - С. 48-51.

13. Гера, А. Определение и идентификация вирусов картофеля / А. Гера, Ш. Марко//Вирусные и вирусоподобные болезни и семеноводство картофеля. - СПб: Инновационный центр защиты растений, 2005. - С. 146-155.

14. Гнутова, Р.В. Серология и иммунохимия вирусов растений / Р. В. Гнутова. - М.: Наука, 1993. - 301 с.

15. ГОСТ 29267-91. Картофель семенной. Оздоровленный исходный материал. Приемка и методы анализа. - М.: Стандартинформ, 1991. - 12 с.

16. Дашкевич, В.К. Оптимизация методики проведения иммуноферментного анализа на основе реагентов собственного производства по определению вирусов картофеля/ В.К. Дашкевич, Е.В. Радкович, Г.Н. Гуща // Актуальные проблемы защиты картофеля, плодовых и овощных

культур от болезней, вредителей и сорняков: Материалы международной конференции. - Минск, 2005.- С. 54-60.

17. Демчук, И.В. Эффективность оздоровления сортов картофеля методами биотехнологии / И.В. Демчук, Н.М. Зарицкий, И.В. Волкова // Картофелеводство: сб. науч. тр.-Минск, 2011.-Т. 19.- С. 221-229.

18. Досон, Р. Справочник биохимика: Пер с англ. / Р. Досон, Д. Эллиот, У. Эллиот, К. Джонс. - М.: Мир, 1991. - 544с.

19. Дынник, В.В. Картофель: вирусные, бактериальные и грибные болезни. Альбом характерных признаков и симптомов / В.В. Дынник, К.В. Попкова. - Пущино: ПВАК, 1997. - 50 с.

20. Дьяков, Ю.Т Общая и молекулярная фитопатология / Ю.Т. Дьяков, O.JI. Озерецковская, В.Г. Джавахия . - М.'.Общество фитопатологов, 2001. -302 с.

21. Евстигнеева, Т.А. Эффективность индукторов болезнеустойчивости против Y-вируса картофеля / Т.А. Евстигнеева, H.A. Павлова // Вестник защиты растений. - 2010. - №4. - С. 47-55.

22. Зайнуллин, A.A. Использование современных методов тестирования Y-вируса картофеля в пробирочных растениях / A.A. Зайнуллин, A.C. Зайнуллина, Ф.Ф. Замалиева [и др.] //Вестник защиты растений.-2002.- №3.-С 37-41.

23.Зайнуллин, A.A. Определение вируса картофеля М с применением тест-системы на основе ОТ-ПЦР / A.A. Зайнуллин, A.C. Зайнуллина // Селекция. Семеноводство. Технология производства картофеля: сборник научных трудов Координационного совета НИУ Урала, Западной Сибири, Поволжья и Северного Казахстана. - Челябинск: ЮНИИПОК, 2003. - С. 62-64. 24. Зайцев, Б.Н. Применение атомно-силовой микроскопии для изучения сорбции антител и захвата поверхностного антигена гепатита В на поверхности иммунологических планшет / Б.Н. Зайцев, И.В. Юдина, А.Н. Канев // Биотехнология. - 2006. - №1. - С. 89-96.

25. Замалиева, Ф.Ф. Почвенные вирусы и совершенствование системы семеноводства картофеля на оздоровленной основе в Республике Татарстан: автореф. дисс.... канд. биол. наук: 06.01.11 / Ф.Ф. Замалиева; ВИЗР. - СПб, 1995.- 15 с.

26. Замалиева, Ф.Ф. Биологическое обоснование защиты от заражения вирусами оздоровленного семенного картофеля в Республике Татарстан: дисс. ... докт. с.-х. наук: 06.01.11, 06.01.05 / Ф.Ф. Замалиева; ВИЗР. - СПб, 2009. - 308 с.

27. Захарова, Г.С. Пероксидаза из корней хрена: модулирование свойств химической модификацией белковой глобулы и гемма / Г.С. Захарова, И.В. Упоров, В.И. Тишков // Успехи биологической химии - 2011. - Т. 51. - С. 3764.

28. Защита картофеля от болезней вредителей и сорняков / Б.В. Анисимов, Г.Л. Белов, Ю.А. Варицев [и др.].-М.:Картофелевод, 2009. - 272 с.

29. Иванюк, В.Г. Защита картофеля от болезней, вредителей и сорняков / В.Г. Иванюк, С.А. Банадысев, Г.К. Журомский . — Минск: Белпринт, 2005. -696 с.

30. Кастальева, Т.Б. Оптимизация методики определения вируса желтой карликовости ячменя с помощью иммуноферментного анализа / Т.Б. Кастальева, К.А. Можаева // Вестник защиты растений. - 2002. - № 2. - С. 49-54.

31. Козлов, Л.П. Фотометрическая оценка иммуноферментных реакций при диагностике вирусов картофеля и возможность их автоматической регистрации / Л.П. Козлов, Т.И. Полякова, В.Е. Курочкин // Вирусные эпифитотии и пути их предупреждения: сборник научных трудов. - СПб.: ВИЗР, 1993.-С. 82-86.

32. Козырева, Н.И. Нематоды семейства ТпсЬоёопёае и их роль в распространении вирусных болезней на картофеле в Московской области:

автореф. дисс. ... канд. биол. наук: 03.00.19 / Н.И. Козырева; ИПЭиЭ им. А.Н. Северцова - М., 2008. - 24 с.

33. Комаров, А.Б. Современные диагностические иммуноферментные тест-системы для определения вирусных, бактериальных и грибных патогенов картофеля / А.Б. Комаров, А.Н. Блинцов, С.Н. Еланский // Генетические и агротехнические ресурсы повышения качества продовольственного и технического картофеля: сборник материалов третьей научно-практической конференции. - М., 2013. - С. 27-30.

34. Кретович, B.JI. Основы биохимии растений / B.JI. Кретович. - М.: Высшая школа, 1971.-464 с.

35. Лакин, Г.Ф. Биометрия /Г.Ф. Лакин. - М.: Высшая школа, 1990. - 350 с.

36. Лебенштейн, Г. X вирус картофеля // Г. Лебенштейн // Вирусные и вирусоподобные болезни и семеноводство картофеля. - СПб: Инновационный центр защиты растений, 2005. - С. 25-29.

37. Лоусон, Р.Х. Исторические перспективы исследования вирусов картофеля / Р.Х. Лоусон, Р. Стейс-Смит // Вирусные и вирусоподобные болезни картофеля. - СПб.: Инновационный центр защиты растений, 2005. -С. 5-12.

38. Молекулярная клиническая диагностика. Методы / под ред. С. Херрингтона, Дж. Макги - М.: Мир, 1999.- 558 с.

39. Мусин, С.М. Разработка метода для определения ВВКК и создания диагностикума с нерадиоактивной меткой / С.М. Мусин, В.В. Бойко, Б.В. Анисимов //Актуальные проблемы современного картофелеводства. - М.: ВНИИКХ, 1997.- С. 56-78.

40. Мэтьюз, Р. Вирусы растений / Р. Мэтьюз. - М.: Мир, 1973. - 600 с.

41. Назмиева, P.P. Приемы повышения качества оздоровленного семенного картофеля в условиях вирусного инфекционного фона в

Республике Татарстан: автореф. дисс. ... канд. с.-х. наук: 06.01.05 / P.P. Назмиева; ВНИИКХ. - М., 2006. - 20 с.

42.0бручков, B.C. Биологические особенности YBK и способы его идентификации на основных пасленовых культурах: автореф. дисс. ... канд. биол. наук: 06.01.11 / B.C. Обручков; ВИЗР. - СПб, 1993. - 23 с.

43. Обручков, B.C. Интерпретация результатов ИФА и оценка диагностической информативности разных вариантов этого теста / B.C. Обручков, C.B. Васильев // Вирусные эпифитотии и пути их предупреждения: сборник научных трудов. - СПб.: ВИЗР, 1993. - С. 86-95.

44. Прокофьев, Л.С. Распространение, вредоносность и особенности проявления вируса PVY картофеля в лесостепи Среднего Поволжья / JI.C. Прокофьев, М.Н. Кинчарова // Вестник защиты растений. - 2012. - № 3. - С. 38-44.

45. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение прикладных программ STATISTIC А /О.Ю. Реброва - М.: МедиаСфера, 2002.-312 с.

46. Родькина, И.А. Изучение устойчивости у трансгенных растений картофеля с геном белка оболочки YBK при первичном и вторичном инфицировании / И.А. Родькина, Г.А. Яковлева // Картофелеводство: сборник научных трудов. - Минск, 2000. - Вып. 10. - С. 147-154.

47. Романова, С.А. Y-вирус картофеля на Дальнем Востоке (штаммовый состав, вредоносность и эпидемиология) / С.А. Романова, Ю.Г. Волков, H.H. Какарека [и др.] //Фитосанитарное оздоровление экосистем: материалы Второго съезда по защите растений. - Спб.: ВИЗР, 2005. - Т.1. - С. 205-207.

48. Рязанцев Д.Ю. Эффективный метод диагностики и идентификации вирусных патогенов картофеля / Д.Ю. Рязанцев, С.К. Завриев // Молекулярная биология - 2009. - Т. 43. - С. 558-567.

49. Саламатова, Т.С. Физиология растительной клетки / Т.С. Саламатова. - JL: Изд-во Ленинград, ун-та, 1983. - 283 с.

50. Салихова, 3.3. Оценка межвидовых гибридов картофеля по хозяйственно-ценным признакам и устойчивости к фитофторозу и вирусам / 3.3. Салихова, Е.А. Гимаева, 3. Сташевски // Вестник Казанского государственного аграрного университета. - 2012. - Т. 23. - № 1. — С. 145151.

51. Самсонова, JI.H. Диагностика вирусных фитоплазменных болезней овощных культур и картофеля / JI.H. Самсонова, А.Е. Цыпленков, Т.А. Якуткина. - СПб: Инновационный центр защиты растений, 2001. - 48 с.

52. Самуилов, В.Д. Иммуноферментный анализ / В.Д. Самуилов // Соросовский образовательный журнал. - 1999. - № 12. - С. 9-15.

53. Сафин, Р.И. Научные основы повышения продуктивности картофельного агроценоза / Р.И. Сафин. - Казань: ЦОП, 2001. - 157 с.

54. Свежова, Н.В. Методы математической обработки данных в иммуноферментном анализе / Н.В. Свежова, , В.Е. Шаркова, Д.В. Громов, В.А. Головаченко, Д.Г. Полынцев // Клиническая лабораторная диагностика.

- 2008. - № 1.-С. 3-9.

55. Семеноводство картофеля. Контроль качества. Сертификация. (Методическое пособие) / под ред. A.B. Коршунова, Б.В. Анисимова. - М, 2002.-335 с.

56. Созонов, А.Н. Вирус Y картофеля в Северо-Западном регионе РФ: распространение, штаммовый состав и профилактика вызываемых им заболеваний: автореф. дисс. ... канд. биол. наук: 06.01.11 / А.Н. Созонов; ВИЗР.-СПб, 2005.-19 с.

57. Список пестицидов и агрохимикатов, разрешенных к применению на территории Российской Федерации. 2012 год // Защита и карантин растений.

- 2012. - № 4 (Приложение). - 578 с.

58. Ткаченко, Т.Ю. Антигенная структура белков оболочки двух украинских штаммов М-вируса картофеля: автореф. дисс.... канд. биол. наук:

02.00.10 / Т.Ю. Ткаченко; Ин-т биоорган, химии и нефтехимии HAH Украины. - Киев, 2003. - 20 с.

59. Томас, P.E. Выделение и очистка вирусов картофеля / P.E. Томас, В.К. Каниевски // Вирусные и вирусоподобные болезни и семеноводство картофеля.-СПб: Инновационный центр защиты растений, 2005.- С. 156-172.

60. Трофимец JI.H. Метод антигенно-активных подложек при электронно-микроскопической диагностике мозаичных вирусов картофеля / JI.H. Трофимец, М.М. Чеголина //Доклады ВАСХНИЛ. - 1970. - № 10. - С. 1113.

61. Трускинов, Э.В. Вирусологическая оценка мировой коллекции картофеля / Э.В. Трускинов, Д.В. Фролова // Вестник защиты растений. -2002. -№ 1.-С. 22-26.

62. Тулегенов, Т.А. Надежность растительных организмов при потивирусных инфекциях / Т.А. Тулегенов,. - Алма-Ата: Наука, 1989.- 144 с.

63. Упадышев, М.Т. Вирусные болезни и современные методы оздоровления плодовых и ягодных культур: автореф. дисс. ... докт. с.-х. наук: 06.01.07/ М.Т. Упадышев; ВСТИСП Россельхозакадемии. - М., 2011. -48 с.

64. Уромова, И.П. Агробиологическое и экологическое обоснование приемов возделывания картофеля, полученного методом апикальной меристемы, в условиях Волго-Вятского региона: автореф. дисс.... докт. с.-х. наук: 06.01.00, 03.00.16 / И.П. Уромова; Брянская ГСХА. - Брянск, 2009. -40 с.

65. Фолимонова, С.Ю. Идентификация штамма Y-вируса картофеля, вызывающего кольцевой некроз клубней, с помощью иммуноспецифической ПЦР / С.Ю. Фолимонова, A.C. Фолимонов, A.A. Аграновский, И.Г. Атабеков // Доклады РАСХН. - 1998. - № 5. - С. 16-17.

66. Харченко, Л.Т. Сравнительное изучение способов выращивания растений картофеля, свободных от вирусов X, S, М, Y из тканей вирозных

растений: автореф. дисс. ... канд. с.-х. наук: 06.01.05 / JI.T. Харченко; НИИКХ. - Коренево, 1971.-21 с.

67. Шуберт, Й. К проблеме диагностики штаммов Y-вируса картофеля / Й. Шуберт, Ф. Рабенштайн, М. Хрцановска, Д. Шпаар // Вестник защиты растений. - 2004. - №3. - С. 3-10.

68. Agindotan, О. Simultaneous detection of potato viruses, PLRV, PVA, PVX and PVY from dormant potato tubers by TaqMan real-time RT-PCR / O. Agindotan, J.P. Shiel, P.H. Berger // Journal of Virological Methods. - Vol. 142. -2007.

69. Alayash, A.I. Redox reactions of hemoglobin and myoglobin: biological and toxicological implications / A.I. Alayash, P.P. Rakesh, E.C. Robert // Antioxidants & Redox Signaling - 2001. - Vol. 3. - № 2. - P. 313-327.- P. 1-9.

70. Al-Mrabeh, A. Aphid-Borne Viruses of Potato: Investigations into Virus/Host/Vector Interactions, Serological Detection Using Recombinant Antibodies and Control Strategies: A thesis submitted in partial fulfillment of the requirements for the degree of Doctor of Philosophy (PhD) / A. Al-Mrabeh; the University of Newcastle School of Biology. - 2010. - 308 p.

71. Atreya, C.D. A point mutation in the coat protein abolishes aphid transmaissibility of a potyvirus / C.D. Atreya, B. Raccah, T.P. Pirone // Virology. - 1990. - V. 178. - P. 161-165.

72. Atreya, P.L. Mutational analysis of the coat protein N-terminal amino acids involved in potyvirus transmission by aphids / P.L. Atreya, J J. Lopez-Moya, M. Chu, C.D. Atreya, T.P. Pirone // J. Gen. Virol. - 1995. - Vol. 76. - P. 265-270.

73. Badarau, C.L. The influence of samples incubación on detection of PLRV and the effect of some extraction buffer's additives on the detection of Potato viruses S, Y, A, X and S by ELISA technique/ C.L. Badarau, N.Cojocaru, S.N. Rusu, M. Ionosu, K. Petrusca // Analele Univ. din Oradea.- 2009. - Т. XVI. - № 2. -P. 15-19.

74. Bagnall, R.H. Potato viruses M, S and X in relation to interveinal mosaic of Irish Cobbler variety / R.H. Bagnall, R.H. Larson, J.C. Walker // Wisconsin Agr. Expt. Sta. Res. Bull. - 1956. - Vol. 198. - P. 1-45.

75. Baldauf, P.M. Biological and serological properties of Potato virus Y isolates in northeastern United States potato / P.M. Baldauf, S.M. Gray, K.L. Perry // Plant Dis. - 2006. - V. 90. - P. 559-566.

76. Basky, Z. The relationship between aphid dynamics and two prominent potato viruses (PVY and PLRV) in seed potatoes in Hungary / Z. Basky // Crop Protection. - 2002. -V. 21. - P. 823-827.

77. Bawden, F. Varietal differences in susceptibility to potato virus Y / F, Bawden, B. Kassanis // Ann. Appl. Biol. - 1946- Vol. 33 - P. 46-50.

78. Beczner, L. Studies on the etiology of tuber necrotic ringspot disease in potato / L. Beczner, J. Horvath, I. Romhanyi, H. Forster // Potato Res. -1984.-V. 27.-P. 339-352.

79. Bergervoet, J.H. Multiplex microsphere immuno-detection of potato virus Y, X and PLRV / J.H. Bergervoet, J. Peters, van Bechover [et al.] // J. Virol. Methods. - 2008. - Vol. 149. - №1. - P. 63-68.

80. Blanco-Urgoiti, B. Characterization of potato potyvirus Y (PVY) isolates from seed potato batches. Situation of NTN, Wilga and Z isolates / B. Blanco-Urgoiti, M. Tribodet, S. Leclerc // European Journal of Plant Pathology. - 1998. -V. 104.-P. 811-819.

81. Brunt, A. Viruses of Plants / A. Brunt, K. Crabtree, M. Dallwitz, A. Gibbs, L. Watson. - Wellingford: CAB Inernational, 1996. - P. 44-53.

82. Bushell, M. Hijacking the translation apparatus by RNA viruses / M. Bushell, P. Sarnow // J. Cell Biol. - 2002. - Vol. 158. - P. 395-399.

83.Bystricka, D. Oligonucleotide-based microarray: A new improvement in microarray detection of plant viruses / D. Bystricka, O. Lenz, I. Mraz [et al.] // J. Virol. Methods.-2005.-Vol. 128.-P. 176-182.

84. Cassells, A. The elimination of potato virus X, Y, S and M in meristem and explant cultured of potato in the preseuce of virazole / A. Cassells, R. Long // Potato Res.- 1982.- Vol. 25.-№ 3.-P.165-173.

85. Cavileer, T.D. A new strain of potato carlovirus M / T.D. Cavileer, R.C. Clark, D.L. Corsini, P.H. Berger // Plant Dis. - 1998. - Vol. 82. - P. 98-102.

86. Celebi-Toprak, F. A new gene, Nytbr, for hypersensitivity to Potato virus Y from Solarium tuberosum maps to chromosome IV / F. Celebi-Toprak, S.A. Slack, M.M. Jahn // Theor. Appl. Genet. - 2002. - Vol. 104. - P. 669-674.

87. Cerovska, N. Production of monoclonal antibodies to potato virus Y NTN strain and their use for strain differentiation / N.Cerovska // Plant Pathol. - 1998. - Vol. 47. - P. 505-509.

88. Chikh Ali, M. The simultaneous differentiation of Potato virus Y strains including the newly described strain PVY (NTN-NW) by multiplex PCR assay / M. Chikh Ali, T. Maoka, K.T. Natsuaki, T. Natsuaki // J. Virol. Methods. - 2010. -Vol. 165.-P. 15-20.

89. Chikh Ali, M. Whole Genome Sequence and Characterization of a Novel Isolate of PVY Inducing Tuber Necrotic Ringspot in Potato and Leaf Mosaic in Tobacco / M. Chikh Ali, T. Maoka, K. T. Natsuaki // J. Phytopathology. - 2008. -V. 156.-P. 413-418.

90. Chrzanowska, M. Importance of different strains of PVY in potato production and breeding program in Poland / M. Chrzanowska // Proceedings of the 11th EAPR Virology Section Meeting. - 2001. - p. 12-14.

91. Chrzanowska, M. Nowe izolaty wirusa Y zagrazajace ziemniakom w Polsce / M. Chrzanowska // Hodowla Roslin I Nasiennictwo. - 1987. - T. 5-6. - S. 8-11.

92. Clark, M.F. Characteristics of the microplate method of enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of plant viruses / M.F. Clark, A.N.Adams // Journal of General Virology. - 1977. - Vol. 34. - P. 475-483.

93. Clinch, P.E.M. A study of the aucuba or yellow mosaics of the potato / P.E.M. Clinch, J.B. Loughnane, P.A. Murphy // Sci. Proc. Royal. Dublin Soc. NS.-1936.-Vol. 21.-P. 431-448.

94. Cockerham, G. Genetical studies on resistance to potato viruses X and Y / G. Cockerham // Heredity. - 1970. - Vol. 25. - P. 309-348.

95. Cuevas, J.M. Phylogeography and molecular evolution of Potato virus Y / J.M. Cuevas, A.Delaunay, J.C. Visser, D.U. Bellstedt, E. Jacquot, S.F. Elena // PLoS ONE. - 2012. - Vol. 7. - № 5. - e37853.

96. De Bokx, J.A. Hostplants of the potato virus YN (tobacco veinal necrosis virus) / J.A. De Bokx // T. Pl-ziekten. - 1961. - Vol. 67. - P. 273-277.

97. De Bokx, J.A. Potato virus Y / J. A. De Bokx, H. Huttinga // Descriptions of Plant Viruses; eds. B. D. Harrison, A. F. Murant. - Wellesbourne: Commonwealth Mycological Institute, Kew and Association of Applied Biologists, 1981.-№.242-P. 27-33.

98. De Bokx, J.A. Symptom development on A6 following inoculation with various viruses // J.A. De Bokx, M.S. Chrzanawska // Potato Res. - 1972. - Vol. 15.-P. 146-159.

99. Boonham, N. Strain specific recombinant antibodies to potato virus Y potyvirus / N. Boonham, I. Barker // J. Virol. Meth. -1998. - Vol. 74. - P. 193199.

100. De Bruyn Ouboter, M.P. A new potato virus / M.P. De Bruyn Ouboter // Proc. Conf. Potato Virus Diseases. - Wageningen -Lisse, 1952. - P. 83-84.

101. Dedic, P. A shift of PVY strain spectrum at potatoes in CR in the course of past years / P.Dedic, J.Ptacek, N.Cerovska // 13 th triennial meeting of the Virology Section of the European Association for Potato Research. - Coylumbridge, Aviemore, UK. - 2007. - P. 59.

102. Dedic, P. Survey of PVY strains/variants in seed-potato multiplied in Czech Republic in last two years / P. Dedic, N. Cerovska, T. Moravec, J. Matousek, J.

Ptacek // 14th triennial meeting of the Virology Section of the European Association for Potato Research (EAPR). - 2010. - V. 5. - P. 20.

103. Derrick, K. Quantitative assay for plant viruses using serologically specific electron microscopy / K. Derrick // Virology. - 1973. - Vol. 56. - № 2. - P. 652653.

104. Dolja, V.V. Capsid protein determinants involved in cell-to-cell and long distance movement of tobacco etch potyvirus / V.V. Dolja, R. Haldeman, A.E. Montgomery, K.A. Vandenbosch, J.C. Carrington // Virol. - 1995. - Vol. 206. -P. 1007-1016.

105. Domingo, E. RNA virus mutations and fitness for survival / E. Domingo, JJ.Holland//AnnuRev.Microbiol.- 1997.-Vol. 51.-P. 151-178.

106. Dougherty, W. G. Expression and function of polyviral gene products / W. G. Dougherty, J. C. Carrington // Annu. Rev. Phytopathology - 1988. - V. 26. - P. 123-143.

107. Drygin, Yu.F. High-sensitive technologies for molecular diagnostics of potato virus and viroid infections / Yu.F. Drygin, S.N. Chirkov, O.A. Kondakova [et al.] // Potato Production and Innovative Technologies. - Wageningen: Acad. Publishers, 2007. - P. 274-285.

108. Edwardson, J.R. Viruses infecting peppers and other solanaceous crops/ J.R. Edwardson, R.G. Christie//Monogr. Agric. Exp. Stn. Univ. Florida.-1997.-Vol. 1.-106-123.

109. Ellis, P. Production of monoclonal antibodies for detection and identification of strains of potato virus Y / P. Ellis, R. Stace-Smith, G. Bowler, D. J. Mackenzie // Canadian J. Plant Pathol. - 1996. - V. 18. - P. 64-70.

110. Feki, S. Interaction between tobacco Ribulose-l,5-biphosphate Carboxylase/Oxygenase large subunit (RubisCO-LSU) and the PVY Coat Protein (PVY-CP) / S. Feki, M.J. Loukili, R. Triki-Marrakchi [et al.] // European Journal of Plant Pathology.- 2005. - Vol. 112 - № 3. - P. 221-234.

111. Feki, S. Molecular phylogeny and genetic variability of the Potato Virus Y (PVY) strains on the CP-encoding region / S. Feki, L. Bouslama // Ann. Microbiol. - 2008. - V. 58. - P. 433-437.

112. Garcia, J. A. Mutational analysis of the plum pox potyvirus polyprotein processing by the NIa protease in Escherichia coli / J. A. Garcia, S. Lain, M. T. Cervera, J. L. Riechmann, M. T. Martin // J. Gen. Virology. - 1990. - V. 71. - P. 2773-2779.

113. Garcia-Arenal, F. Variability and genetic structure of plant virus populations / F. Garcia-Arenal, A. Fraile, J.M. Malpica // Annu Rev. Phytopathol. - 2001.-Vol. 39.-P. 157-186.

114. Glais, L. RFLP mapping of the whole genome of potato viral isolates representative of different biological groups of potato virus Y / L. Glais, M. Tribodet, J.P. Gauthier, S. Astier-Manifacier, C. Robaglia, C. Kerlan // Arch. Virol. - 1998. - Vol. 143. - P. 2077-2091.

115. Gunasinghe, U. B. Association of potato virus Y gene products with chloroplasts in tobacco / U. B. Gunasinghe, P.H. Berger // Mol. Plant Microbe Interact. - 1991. - Vol. 4. - P. 452-457.

116. Hataya, T. Characterization and strain identification of a potato virus Y isolate non-reactive with monoclonal antibodies specific for the ordinary and necrotic strains / T. Hataya, A.K. Inoue, K. Oshima, F. Shikata //Intervirology. -1994.-V. 37.-P. 12-19.

117. Hu, X. Sequence characteristics of potato virus Y Recombinants / X. Hu,A.V. Karasev, C.J. Brown and J. H. Lorenzen // Journal of General Virology. -2009. - V. 90. - P. 3033-3041.

118. Jacquot, E. A single nucleotide polymorphism based technique for specific characterization of Y° and YN isolates of Potato virus Y (PVY) / E. Jacquot, M. Tribodet, F. Croizat, V. Balme-Sinibaldi, C. Kerlan // J. Virol. Methods - 2005. -Vol. 125.-P. 83-93.

119. Jakab, G. Infectious in vivo and in vitro transcripts from a full-length cDNA clone of PVY-N605, a Swiss necrotic isolate of Potato virus Y / G. Jakab, E. Droz, G. Brigneti, D. Baulcombe, P. Malnoe // J. Gen. Virol. -1997. - V. 78. -P. 3141-3145.

120. Jeffries, C.J. FAO/IPGRI Technical Guidelines for the Safe Movement of Germplasm: No 19, Potato. / C.J. Jeffries // Food and Agriculture Organization of the United Nations. - Rome: International Plant Genetic Resources Institute, 1998.- 20 p.

121. Johnson J. Transmission of viruses from apparently healthy potatoes/ J. Johnson // Wis. Agr. Exp. Sta. Res. Bui. - 1925. - Vol. 63. - 12 p.

122. Jones, R.A.C. Strain group specific and virus specific hypersensitive reaction to infection with potexvirus in potato / R.A.C. Jones //Ann. Appl. Biol. -1990.-Vol. III.-P. 93-105.

123. Karasev, A.V. Genetic diversity of the ordinary strain of Potato virus Y (PVY) and origin of recombinant PVY strains / A.V. Karasev, X. Hu, C.J. Brown, C. Kerlan, O.V. Nikolaeva, J.M. Crosslin, S.M. Gray // Phytopathology. - 2011. -Vol. 101.-№7.-P. 778-785.

124. Kerlan, C. Variability of potato virus Y in potato crops in France / C. Kerlan, M. Tribodet, L. Glais, M. Guillet // J. Phytopathol. - 1999. - Vol. 147. -P. 643-651.

125. Kohler, G. Continuous cultures of fosed cell cesreting antibody of predefined specificity / G. Kohler, C. Milstein //Nature. - 1975. - Vol. 256. - № 5517.-P. 495 -497.

126. Kozlov, L.P. The occurrence and strain structure of potato virus Y in NW Russia / L.P. Kozlov, T.A. Yakutkina, A.N. Sozonov // Crop Protection Workshop Pests, diseases and weeds. - S.-Petersburg, 2003. - P. 26-27.

127. Le Hingrat, Y. Management of Potato Virus Y in seed potato production in France / Y. Le Hingrat, K.Charlet-Ramage, L. P. Glais // 17th Triennial

Conference Of the European Association for Potato Research. - Bra§ov, Romania. -2008.-P. 555-556.

128. Le Romancer, M. Biological characterization of various geographical isolates of Potato virus Y inducing superficial necrosis on potato tubers / M. Le Romancer, C. Kerlan, M. Nedellec // Plant. Pathol. - 1994. - Vol. 43. - P. 138144.

129. Leclerc, D. Biotinylated DNA probes for detecting virus Y and aucuba mosaic virus in leaves and dormant tubers of potato / Leclerc, D., Eweida, R.P. Singh, M.G. Abouhaidar//Potato Research.- 1992.-Vol. 35.-P. 173-182.

130. Loebenstein, G. Improved detection of potato leafroll luteovirus in leaves and tubers with a dioxigenin-labeled cRNA probe / G. Loebenstein, F. Akad, V. Filatov [etal.] //PlantDis. - 1997.-Vol. 81.-P. 489-491.

131. Lopez-Moya, J. J. Charge changes near the N terminus of the coat protein of two potyviruses affect virus movement / J.J. Lopez-Moya, T.P. Pirone // J. Gen. Virol.-1998.-V. 79.-P. 161-165.

132. Lorenzen, J.H. Whole genome characterization of Potato virus Y isolates collected in the western USA and their comparison to isolates from Europe and Canada / J.H. Lorenzen, T. Meacham, P.H. Berger, P.J. Shiel, J.M. Crosslin, P.B. Hamm, H. Kopp // Arch. Virol. - 2006a. - V. 151. - P. 1055-1074.

133. Lorenzen J.H. A multiplex PCR assay to characterize Potato virus Y isolates and identify strain mixtures / J.H. Lorenzen, L.M. Piche, N.C. Gudmestad, T. Meacham, P. Shiel, // Plant Dis. - 2006b. - V. 90. - P. 935-940.

134. Mayo, M. Nucleotide sequence of potato leafroll luteovirus RNA / M. Mayo, D. Robinson, C. Jolly, L. Hyman //J.Gen. Virol. - 1989. - Vol. 70. -P.1037-1051.

135. Moury, B. Evidence for diversifying selection in Potato virus Y and in the coat protein of other potyviruses / B. Moury, C. Morel, E. Johansen, M. Jacquemond // Journal of General Virology. - 2002. - V. 83. - P. 2563-2573.

136. Moury, B. dN/dS-based methods detect positive selection linked to tradeoffs between different strains in the coat protein of potato virus Y / B. Moury, V. Simon // Mol. Biol. Evol. - 2011. V. 28. P. 2707-2717.

137. Murphy, P.A. The compound nature of crinkle and its products by means of a mixture of virus / P.A. Murphy, R. McKay // Sei. Proc. Royal. Dublin Soc-1932. - Vol. 20. - P. 227-247.

138. Nie, X. A novel usage of random primers for multiplex RT-PCR detection of virus and viroid in aphids, leaves, and tubers / Nie X., Singh R.P. // J. Virol. Methods. - 2001. - Vol. 91. - P.37- 49.

139. Nie, X. Probable geographical grouping of PVYN and PVYN™ based on sequence variation in PI and 5'UTR of genome and methods for differentiating North American PVYN™ / X. Nie, R.P. Singh // J. Virol. Meth. - 2002. - Vol. 101.-P. 145-156.

140. Nie, X. Specific differentiation of recombinant PVYN:0 and PVYNTN isolates by multiplex RT-PCR / X. Nie, R.P. Singh // J. Virol. Meth. - 2003. - Vol. 113. -P. 69-77.

141. Nienhaus, F. Übertragung des Kartoffel-Virus durch Zoosporen von Synchytrichiun endobioticum / F. Nienhaus, B. Stille // Phytopatol. - 1965.-Vol.54.- P. 335-337

142. Nikolaeva, O.V. Epitope mapping for monoclonal antibodies recognizing tuber necrotic isolates of potato virus Y / O.V. Nikolaeva, DJ. Roop, S.B.F. Galvino-Costa, A.R. Figueira, S.M. Gray, A.V. Karasev // Am. J. Pot. Res. - 2012. -V. 89.-P. 121-128.

143. Otulak, K. Cytopathological potato virus Y structures during Solanaceous plants infection / K. Otulak, G. Garbaczewska // Micron. - 2012. - Vol. 43. - № 7. -P. 839-850.

144. Parks, P.D. Substrate recognition by the NIa proteinase of two potiviruses involves multiple domains: Characterization using genetically engineered hybrid

proteinase molecules / P.D. Parks, W.G. Dougherty // Virology. - 1991. - Vol. 192. -№ 1. ~P. 17-27.

145. PCR Application Manual: Roche Molecular Biochemicals.- 2000. - P.88-127.

146. PeHetier, Y. A new approach for the identification of aphid vectors (Hemiptera: Aphididae) of potato virus Y / Y. Pelletier, X. Nie , M.A. Giguere , U. Nanayakkara , E. Maw, R. Foottit // J. Econ. Entomol. - 2012. - Vol. 10. - № 6. -P. 1909-1914.

147. Piche, L.M. Diversity among Potato virus Y isolates obtained from potatoes in the United States / L.M. Piche, R.P. Singh, X. Nie, N.C. Gudmestad // Phytopathology- 2004.-Vol. 94.-P. 1368-1375.

148. Pompe-Novak, M. Potatao virus Y induced changes in the gene expression of potato (Solanum tuberosum L.) / M.Pompe-Novak, K. Gruden, S. Baebler, Krecic- H.Stres, M. Kovac, M. Jongsma, M. Ravnikar // Physiol, and Mol. PI. Path. - 2006. - Vol. 67. - P. 237-247.

149. Purcifull, D.E. Preservation of plant virus antigens by freeze-driynd / D.E. Purcifull, S.R. Christie, D.L. Bathelor // Phytopathology. - 1975. - Vol. 65. - P. 1202-1205.

150. Querci, M. Analisis of the resistance-breaking determinants of potato virus X (PVX) strain HB on different potato genotypes expressing extreme resistance to PVX/ M. Querci, D.C. Baulcombe, R.W. Goldbach, L.F. Salazar// Phytopatol. -1995.- Vol. 85.-P. 1003-1010.

151. Robaglia, C. M. Nucleotide sequence of potato virus Y (N strain) genomic RNA / C. M. Robaglia, M. Durand-Tardif, G. Tronchet // J. Gen. Virology. - 1989. -V. 70.-P. 935-947.

152. Robinson, D. Sensitivity and specificity of nucleic acid probes for potato ieafroll luteovirus detection / D. Robinson, J. Romero //J.Virol. Meth.-1991. - № 34.-P. 209-214.

153. Ross, H. Potato breeding - problems and perspectives / H. Ross // J. Plant Breed Suppl. - 1986.-Vol. 13.-№ l.P. 132-176.

154. Rowhani, A. Purification and characterization of potato leafroll virus / A. Rowhani, R. Stace-Smith // Virology. - 1979. - Vol. 98. - P. 45-54.

155. Salazar, L.F. Potato viruses and their control / L.F. Salazar. - Lima: Intern. Potato Center, 1996. - 214 p.

156. Schaad, M.C. VPg of tobacco etch potyvirus is a host genotype-specific determinant for long-distance movement / M.C. Schaad, A.D. Lellis, J.C. Carrington//J. Virology. - 1997a. - Vol. 71. -P. 8624-8631.

157. Schaad, M.C. Formation of plant RNA virus replication complexes on membranes: role of an endoplasmic reticulum-targeted viral protein / M.C. Schaad, P.E. Jensen, J. C. Carrington // EMBO J. - 1997b. - Vol. 16. - P. 4049-4059.

158. Schubert, J. Differentiation of Potato virus Y strains using improved sets of diagnostic PCR-primers / J. Schubert, V. Fomitcheva, J. J. Sztangret-Wisniewska // Virol Methods. - 2007. - V. 140. - P. 66-74.

159. Schulz, E.S. Transmission, variation and control of certain degeneration diseases of Irish potatoes / E.S.Schulz, D. Folsom // J. Agr. Res - 1923. - Vol. 25. -P. 143-147.

160. Seo, J.K. Mutational analysis of interaction between coat protein and helper component-proteinase of Soybean mosaic virus involved in aphid transmission / J.K. Seo, S.H. Kang, B.Y. Seo, J.K. Jung, K.H. Kim // Mol. Plant Pathol. - 2010. -V. 11.-P. 265-276.

161. Shukla, D.D. A novel approach to the serology of potyviruses involing affinity-purified polyclonal antibodies directed towards virus-specific N-termini of coat proteins / D.D. Shukla, J. Jilka, M. Tosic, R.E. Tord // J. Gen. Virol. - 1989. -Vol. 80.-№ l.-P. 13-23.

162. Shukla, D.D. Identification and classification of potyviruses on the basis of coat protein sequence data and serology. / D.D. Shukla, C. W.Ward // Archives of Virology.- 1989.-Vol. 106.-P. 171-200.

163. Singh, M. Evaluation of tuber-bearing Solanum species for symptomatology, as diagnostic hosts, and sources of immunity to potato virus Y necrotic strain (PVYN) / M. Singh, R.P. Singh, T.H. Somerville // Am. Potato J. -1994.-Vol. 71.-P. 567-579.

164. Singh, M. Nucleotide sequence and genome organization of a Canadian isolate of the common strain of potato virus Y (PVY°) / M. Singh, R.P. Singh // Can J. Plant Pathol. - 1996. - Vol. 18. - P. 209-224.

165. Singh, R.P. Discussion paper: The naming of Potato virus Y strains infecting potato / R.P. Singh, J.P.T. Valkonen, S.M. Gray, N. Boonham, R.A.C. Jones, C. Kerlan, J.Schubert // Arch. Virol. - 2008. - Vol. 153. - P. 1-13.

166. Skryabin, K.G. The nucleotide sequence of potato virus X RNA / K.G. Skryabin, A.S. Kraev, S.Y. Morozov, M.N. Rozanov, B.K. Chernov, L.I. Lukasheva, J.G. Atabekov //Nucleic Acids Res.-1988.- V.16.- P. 10929-10930.

167. Smith, K.M. Some notes on a suspected variant of Solanum virus 2 (potato virus 2) / K.M. Smith, R.W.G. Dennis // Annal. Appl. Biol. - 1940. - V. 27. - P. 65-70.

168. Struik, H.C. Seed potato technology / H.C. Struik, S.G. Wiersema. -Wageningen: Wageningen Press, 1999. - 383 p.

169. Sutula, C.H. Interpreting ELISA data and establishing the positive-negative threshold / C.H. Sutula, J.M. Gillett, S.M. Morrissey, D.C. Ramsdell // Plant Disease. - 1986. - Vol. 70. - №. 8. - P. 722-726.

170. Talbot, N.J. Plant-Pathogen Interaction. Annual. Plant Reviews Vol. 11. / N.J. Talbot.- Oxford: Blackwell Publishing, CRC Press, 2004. - 248 p.

171. Tan, M. Route of decomposition of thiomersal (thimerosal) / M. Tan, J. E. Parkin // Int. J. Pharm. - 2000. - Vol. 208. - №1-2. - P. 23-24.

172. Tian, Y. The current PVY population affecting potatoes in Finland / Y. Tian, S. Kirchner, J.P.T. Valkonen // 14th triennial meeting of the Virology Section of the European Association for Potato Research (EAPR). - 2010. - V. 5. -P. 60.

rT

173. Tomitaka, Y. A phylogeographical study of the Turnip mosaic virus population in East Asia reveals an 'emergent' lineage in Japan / Y. Tomitaka, K.Ohshima // Mol. Ecol. - 2006. - Vol. 15. - P. 4437-4457.

174. Tribodet, M. Characterization of Potato virus Y (PVY) molecular determinants involved in the vein necrosis symptom induced by PVYN isolates in infected Nicotiana tabacum cv. Xanthi / M. Tribodet, L. Glais, C. Kerlan, E. Jacquot // J. Gen. Virol. - 2005. - V. 86. - P. 2101-2105.

175. Turska, E. Occurence of the potato virus Y strains (PVY) during long-termmultiplication of some potato cultivars in Poland / E. Turska, U.Kaczmarek // 11th triennial meeting of the Virology Section of the European Association for Potato Research. - Havliekuv Brod - Toes , Czech Republic. - 2001. - P. 21-24.

176. Valkonen, J.P.T. Novel resistances to potyviruses in tuber-bearing potato species, and temperature-sensitive expression of hypersensitive resistance to potato virus Y / J.P.T. Valkonen // Ann. Appl. Biol. - 1997. - Vol. 130. - P. 91-104.

177. Valkonen, J.P.T. Resistance specificities to viruses in potato: standardization of nomenclature/ J.P.T. Valkonen, R.A.C. Jones, S.A. Slack, K.N. Watanabe // Plant Breed. - 1996. - Vol. 115. - P. 433-438.

178. Varveri, C. Potato Y Potyvirus Detection by Immunological and Molecular Techniques in Plants and Aphids / C. Varveri //Phytoparasitica. - 2000- Vol. 2.-№ 28, -P.243-251.

179. Verbeek, M. Determination of aphid transmission efficiencies for N, NTN and Wilga strains of potato virus Y / M. Verbeek, P. G. M. Piron, A. M. Dullemans, C. Cuperus, and R. A. A. van der Vlugt // Annals of Applied Biology. -2010. - V.156.-P.39-49.

180. Verhoeven, T.T. J. Virological risk accompanying the- increased interest in pepino (Solanum muricatum) / T.T. J. Verhoeven, J.W. Roenhorst // Proc. 8th Conf. Virus. Dis. Vegetables. - Prague, 1995. - P. 109-112.

181. Visser, J. С. The Recent Recombinant Evolution of a Major Crop Pathogen Potato virus Y / J.C. Visser, D.U. Bellstedt, M.D. Pirie // PLOS ONE. - 2012. -V.7. - e50631.

182. Volkov, Yu.G. Characterization of a Novel Far-Eastern Potato Virus Y Isolates / Yu.G. Volkov, N.N. Kakareka, L.A. Balabanova, Z.N. Kozlovskaya, M.V. Sapotsky // Plant Pathology J. - 2009. - Vol. 8. - № 2. - P. 62-67.

183. Wei, T. Sequential recruitment of the endoplasmic reticulum and chloroplasts for plant potyvirus replication / T. Wei, T.S. Huang, J. McNeil [et al.] // J. Virol. - 2010. - Vol. 84. - P. 799-809.

184. Worobey, M. Evolutionary aspects of recombination in RNA viruses / M. Worobey, E.C. Holmes // J Gen. Virol. - 1999. - V. 80. - P. 2535-2543.

185. Xu, H. Genomic variability in Potato virus M and the development of RT-PCR and RFLP procedures for the detection of this virus in seed potatoes / H. Xu, J. D'Aubin, J. Nie // Virology Journal. - 2010. - Vol. 7. - P.25.

186. Yin, Z. Recombinants of PVY strains predominate among isolates from potato crop in Poland / Z. Yin, M. Chrzanowska, K. Michalak, H. Zagorska, E. Zimnoch-Guzowska // Journal of Plant Protection Research. - 2012. - V. 52. - P. 214-219.

187. Zavriev, S.K. The genome organization of potato virus M RNA / S.K. Zavriev, K.V. Kanyuka, K.E. Levay // J. Gen. Virol. - 1991. - Vol. 72. - P. 9-14.

188. Zheng, S. Potato virus Y isolate SL053 coat protein (cp) gene, partial cds [Electronic resource] / S. Zheng, Z. Liu // GenBank (NCBI). - 2006. - Режим доступа: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/EF063710, свободный.

189. Ziegler, A. Applications of recombinant antibodies in plant pathology / A. Ziegler, L. Torrance // Molecular Plant Pathology. - 2002. - Vol. 3. - P. 401-407.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АВК - А-вирус картофеля

ВСЛК - вирус скручивания листьев картофеля

ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота

ИФА — иммуноферментный анализ

кДа — килоДальтон

КНКК - кольцевой некроз клубней картофеля

п.н. - пара нуклеотидов

ОТ - обратная транскрипция

РНК — рибонуклеиновая кислота

РРК - разрушенные растительные компоненты

СВЧ - реакция сверхчувствительности

ПЦР - полимеразная цепная реакция

СР - белок оболочки

сШТР - дезоксирибонуклетидтрифосфаты НС-Рго - хелперный компонент-протеаза МВК — М-вирус картофеля Р1 - первый белок

Тпб-НО - трис(гидроксиметил)аминометан гидрохлорид

УР§ - геном-связывающийся белок

ХВК - Х-вирус картофеля

УВК - У - вирус картофеля

УВК° - У - вирус картофеля ординарный штамм

УВК — У - вирус картофеля штамм акропетального некроза

УВКЫ-У

- вирус картофеля штамм некроза жилок табака УВК™-У- вирус картофеля штамм ЫТЫ УВК14 0 - У- вирус картофеля штамм N¡0

вирус картофеля штамм \Vilga