Экспрессия белков области pX вируса Т-клеточного лейкоза человека I типа в клетках Escherichia coli и перспективы использования рекомбинантных белков в диагностике тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Сусова, Ольга Юрьевна

• Сусова, Ольга Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Сусова, Ольга Юрьевна

Перечень условных сокращений. 3

Введение. 5

ГЛАВА I. Обзор литературы

1. Эпидемиология HTLV-I и ассоциация с заболеваниями человека. 10

1.1. Злокачественная Т-клеточная лимфома взрослых (ATL). 12

1.2. Тропический спастический парапарез (TSP).

1.3. Другие заболевания, ассоциированные с HTLV-I.

2. Молекулярно-биологическая характеристика HTLV-1. 15

2.1. Белки HTLV-1. 17

2.2. Структура LTR. 24

3. Регуляция генной экспрессии и репликации HTLV-I

3.1. Трансактивирующие свойства Tax.26

3.2. Tax и апоптоз.30

3.3. Rex-белок как негативный регулятор вирусной генной экспрессии. 32

4. Диагностическая значимость антител к Tax- и Rex-белкам.37

ГЛАВА II. Материалы и методы.

Раздел 1. Материалы.45

Раздел 2. Методы. 49

ГЛАВА III. Результаты собственных исследований

Раздел 1. Молекулярное клонирование и экспрессия продуктов гена rex в клетках Е. coli. Клон рСО 1-2.

1.1. Клонирование фрагмента гена rex HTLV-I в вектор рАТН. Клон рСО-1-2. 61

1.2. Клонирование фрагмента гена rex HTLV-I в вектор рЕХ. Клон рСО-2-1.

1.3. Выделение рекомбинантного RexHTLV-I и использование его для иммунизации кроликов.63

1.4. Тестирование продуктов гена rex HTLV-I в клеточных линиях методом иммуноблоттинга.64

Раздел 2. Молекулярное клонирование и экспрессия продуктов гена tax HTLV-I в клетках E.coli. 68

2.1. Клонирование N-терминальной области гена tax HTLV-I в векторах рАТН и pMAL-c: клоны рСО-3-5, рСО-8-1 и рСО-16. 70

2.2. Клонирование С-терминальной области гена tax HTLV-I в векторах рАТН и pMAL. КлонырСО-5-1 ирСО-14. 74

2.3. Клонирование почти полноразмерного гена tax HTLV-I в векторных системах рАТН, pMAL-c и pMAL-p. Клоны рСО-12-20, рСО-13-8-с и рСО-13-4-р. 76

2.4. Клонирование С-терминальной области гена tax HTLV-I в вектор pMAL-c: получение клона рСО-15-3. 87

2.5. Получение иммунной кроличьей сыворотки к рекомбинантному белку клона рСО-15

2.6. Попытки протеолитического разделения рекомбинантного белка рСО-15-3 фактором Ха. Получение клона pCO-15-3cRI.97

ГЛАВА IV. Обсуждение.99

ВЫВОДЫ. 109

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия белков области pX вируса Т-клеточного лейкоза человека I типа в клетках Escherichia coli и перспективы использования рекомбинантных белков в диагностике»

Актуальность темы

Вирус Т-клеточного лейкоза человека I типа (HTLV-I) является онкогенным ретровирусом, этиологически ассоциированным с особой формой лейкоза/лимфомы у инфицированных людей, получившей название острого Т-клеточного лейкоза взрослых (ATL). Заболевание развивается после длительного латентного периода и характеризуется злокачественным течением. Существуют убедительные доказательства ассоциации HTLV-I с тропическим спастическим парапарезом (TSP). Предполагают, также, что HTLV-I участвует в развитии ряда неонкологических заболеваний, таких как атрофическая миелопатия, увеиты, инфекционные дерматиты, полимиозиты, артриты и т.д.

Исследованиями нашей лаборатории вирусного канцерогенеза РАМН проводилось изучение уровня инфицированности HTLV-I среди населения России и других стран бывшего СССР. Очаги HTLV-I -носительства были обнаружены в Дальневосточном регионе России на о. Сахалин, Туркменистане и Грузии. Эти исследования позволили выявить несколько семей, инфицированных HTLV-I, у одного из членов которой был диагностирован случай Т-клеточного лейкоза взрослых, ассоциированный с HTLV-I - первый выявленный случай этого заболевания на территории бывшего Советского Союза. Кроме того, факт вирусоносительства доказан также в Латвии, Казахстане и г. Москве.

Накопленные данные убедительно указывают на необходимость проведения исследований в данной области и важность массового контроля HTLV-I-инфекции среди доноров крови, представителей различных групп риска. Это позволит осуществить контроль за инфицированными лицами и остановить дальнейшее распространение инфекции. Дальнейший же рост числа инфицированных лиц приведет к существенному возрастанию уровня заболеваемости и смертности среди носителей вируса, заметному сокращению банка донорской крови, накоплению в человеческой популяции генома HTLV-I.

Как известно, геном вируса содержит уникальную консервативную область рХ, локализованную между геном env и З'-LTR вируса, которая играет важную роль в посттранскрипционной регуляции и активации вируса. Область рХ HTLV-I кодирует транскрипционный активатор Tax, посттрансляционный регулятор Rex, а также малоизученные белки Rof и Tof. На ранней фазе жизненного цикла вируса Tax начинает экспрессироваться одним из первых вирусных белков и запускает механизм клеточной пролиферации через инициацию транскрипции IL-2 и рецептора IL-2Ra. Важным направлением в изучении HTLV-I являются исследования роли Tax в реализации опухолевого потенциала HTLV-I, в частности наличие антител к Tax у HTLV-I-позитивных доноров. В научной литературе обсуждается роль этой области генома ретровируса в трансформации и малигнизации Т-клеток человека. Несмотря на огромную работу с белками Tax и Rex HTLV-I, проводимую исследователями других стран, многое еще остается неясным и малоизученным.

Несмотря на длительный период изучения HTLV-I, в мире до сих пор отсутствуют эффективные способы профилактики инфекции. В массовой диагностике HTLV-I-инфекции в качестве антигенов используют лизаты вирус-продуцирующих клеточных линий. В настоящее время происходит переоценка состава скринирующих тест-систем на HTLV-I, так как наиболее известные коммерческие тест-системы выявляют антитела только к структурным белкам вируса и не включают Тах-рекомбинантные белки. В тоже время поиск Тах-специфических антител имеет важное диагностическое значение. Так, японские исследователи в своих работах сообщали, что присутствие антител к Tax в грудном молоке HTLV-I-инфицированных женщин повышало риск передачи вируса их детям. Существуют данные, что наличие антител к Tax повышает вероятность передачи вируса партнеру при половых контактах. Кроме того, обнаружено, что транскрипционный активатор Tax HTLV-I включается в процесс трансформации Т-клеток. Поэтому, вероятно, выявление антител к Tax у здоровых HTLV-I-носителей может не только подтверждать инфекцию данного индивида, но и говорить о стадии предлейкоза, таким образом играя прогностическую роль. Кроме того, в 1989 году появились первые сообщения о серонегативном носительстве HTLY-I, сопровождающиеся наличием антител только к продукту гена tax. Повторное тестирование сывороток крови доноров с использованием наиболее чувствительных методов, в том числе ПЦР, показало, что, например, в американском банке крови существуют HTLV-I-позитивные, имеющие только анти-Тах-антитела образцы крови [209]. Поэтому, тестирование сывороток крови на наличие антител к Tax в настоящее время является актуальным.

Цели и задачи исследования

В массовой диагностике HTLV-I-инфекции в качестве антигенов используют лизаты вирус-продуцирующих клеточных линий, что дает большое количество неопределенных результатов. Молекулярно-биологические методы, такие как ПЦР и методы молекулярной гибридизации, имеют ограниченное применение, так как они дорогостоящие, трудоемкие и требуют специфических лабораторных условий для работы. Кроме того, высокая чувствительность метода ПЦР является как преимуществом, так и в некоторых случаях недостатком метода, вследствии возможной контаминации тестируемых образцов ДНК и других компонентов ПЦР. Поэтому для совершенствования диагностических тестов на HTLV-I, одним из перспективных Л направлений является генно-инженерный подход для создания рекомбинантных белков в качестве вирус-специфических антигенов. Учитывая низкий уровень экспрессии Tax в HTLV-1-инфицированных клетках, а также слабый гуморальный иммунный ответ на Tax в сыворотках крови у HTLV-I-инфицированных лиц, мы поставили перед собой задачу получить эффективную экспрессию этого белка в клетках E.coli для получения рекомбинантного Tax в препаративных количествах.

Цель настоящей работы заключалась в молекулярном клонировании фрагментов генов tax и rex HTLV-I в плазмидные векторы, экспрессии этих генов в клетках E.coli и использование полученных рекомбинантных белков в диагностических и экспериментальных целях.

Для выполнения работы необходимо было решить следующие задачи:

1) Клонировать различные фрагменты генов tax и rex HTLV-I в плазмидных бактериальных векторах.

2) Подобрать оптимальные условия экспрессии рекомбинантных белков в составе этих векторов и бактериальные штаммы.

3) Отработать методы выделения и очистки полученных рекомбинантных белков.

4) Оценить диагностическую значимость рекомбинантного белка гена tax на панели HTLV-I-позитивных сывороток.

5) Исследовать определенные группы лиц на наличие антител к белку Tax HTLV-I в сыворотках крови.

6) Получить гипериммунные кроличьи сыворотки к наиболее перспективным реко.мбинантным продуктам.

Научная новизна

Научная новизна данной работы заключается в том, что в настоящей работе для клонирования генов tax и rex HTLV-I были я использованы несколько вариантов плазмидных векторов с различными типами промоторов, которые не использовались ранее для экспрессии белков Tax и Rex HTLV-I. Были проанализированы особенности экспрессии аминотерминальной, карброкситерминальной областей Tax, а также почти полноразмерной молекулы Tax HTLV-I в клетках E.coli. Впервые в России был получен рекомбинантный белок Tax с хорошими диагностическими свойствами, подобраны оптимальные условия его экспрессии и сравнительно дешевый одноэтапный метод выделения. Тах-гибридный белок успешно был использован для обнаружения антител к Tax HTLV-I, которые не выявлялись тестами массового скрининга, таким образом существенно улучшена диагностика инфекции HTLV-I. Впервые были предприняты попытки экспрессировать аминотерминальную область гена tax HTLV-I в клетках E.coli. Полученные данные позволили проанализировать возможные причины неудач, связанные с отсутствием экспрессии этих гибридных белков в бактериальных клетках. Полученные конструкции предполагается в будущем использовать в качестве молекулярно-биологических зондов. Это также расширит возможности клонирования фрагментов генов tax и rex HTLV-I в новые прокариотические и эукариотические векторы.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Сусова, Ольга Юрьевна

выводы

1. В результате молекулярного клонирования генов tax и rex HTLV-I получена коллекция плазмидных клонов, содержащих различные фрагменты области рХ HTLV-I в векторных системах рАТН, pMAL и рЕХ. Обнаружено, что система pMAL является наиболее удобной для клонирования белка Tax HTLV-I.

2. На основе вектора рАТН сконструирован клон рСО-1-2, способный экспрессировать рекомбинантный белок антранилат-синтаза-Rex в клетках E.coli. Гибридный белок характеризуется высоким уровнем экспрессии и стабильными свойствами. Используя белок клона рСО-1-2, получена кроличья анти-сыворотка со сравнительно низким титром антител к Rex, что указывает на низкую иммуногенность Rex HTLV-I.

3. В составе векторов рАТН и pMAL экспрессированы 4 варианта Тах-рекомбинантных белков, содержащих как почти полноразмерный Tax HTLV-I (клон рСО-12-20), так и различные фрагменты его С-терминальной области (клоны рСО-15-3, рСО-14 и рСО-5-1). Подобраны оптимальные условия экспрессии рекомбинантных белков в составе этих векторов и бактериальные штаммы.

4. Для рекомбинантных белков клонов рСО-15-3, рСО-14 и рСО-1-2 отработаны оптимальные методы выделения и очистки.

5. Использование векторной системы pMAL дало возможность получить высокостабильный рекомбинантный белок клона рСО-15-3, содержащий С-терминальную область гена tax HTLV-I (167 ам.к.), характеризующийся высоким уровнем экспрессии, стабильностью, при сравнительно дешевом способе одноэтапного хроматографического выделения.

6. Тестирование рекомбинантного белка клона рСО-15-3 на панели HTLV-I-позитивных сывороток позволило выявить антитела к Tax в 40% случаев. Использование этого же белка при тестировании образцов сывороток крови лиц групп риска на присутствие антител к Tax HTLV-I показало его высокую диагностическую ценность.

7. Не обнаружено экспрессии р;екомбинантных белков клонов рСО-3-5, рСО-8-1 и рСО-16, содержащих N-терминальную область гена tax HTLV-I, сконструированных как на основе вектора рАТН, так и pMAL, что возможно свидетельствует о существовании механизма инактивации экспрессии рекомбинантного Тах-полипептида, связанного с присутствием в N-терминальной области гена tax HTLV-I нуклеотидных последовательностей во многом определяющих регуляторные функции трансактиватора Tax.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Сусова, Ольга Юрьевна, 2000 год

1. Гурцевич В.Э., Сенюта Н.Б. /HTLV-I: структурные особенности генома,биологические, свойства и филогенетический анализ./ ВИЧ/СПИД и родственные проблемы 1997,1, № 1, с.52-60.

2. Гурцевич В.Э., Сенюта Н.Б., Пивник А.В. и др. / Первый диагносцированный в СССР случай Т-клеточного лейкоза взрослых (ATL) с выраженным иммунным ответом к HTLV-I. / Вопр. онкол. 1991, 37,5, с.563-567.

3. Павлиш О.А. Вирус Т-клеточного лейкоза в России: сероэпидемиологические, вирусологические и молекулярно-биологические исследования. Автореф. дис. докт. медиц. наук 1999, Москва.

4. Санков М.Н. Клонирование и экспрессия генов структурных белков HTLV-I в бактериях Escherichia coli. Автореф. дис. канд. биол. наук ~ 1995.

5. Сенюта Н.Б., Яковлева Л.С., Степина В.Н.и др. /Антитела к HTLV-I в сыворотках доноров крови, проживающих в республиках Средней Азии и Казахстана./ Вопр. вирусол. ~ 1991, 4, с.328-331.

6. Степина В.Н., Сенюта Н.Б., Бакиева Н.Б. и др. / Серологическое и молекулярно-биологическое изучение вируса Т-клеточного лейкоза в (HTLV-I) Туркменистане./ Вопросы вирусологии-1996, № 4, с. 174-178.

7. Сырцев А.В. Экспрессия продуктов генов env и gag HTLV-I в E.coli, их анализ и использование для экспериментальных и диагностических целей. Дис. канд. мед. наук- 1995, с. 153.

8. Яковлева Л.С., Павлиш О.А., Тупицин Н.Н., Гурцевич В.Э./ Варианты взаимодействия вируса Т-клеточного лейкоза человека (HTLV-I) с В-клетками лимфобластоидных линий./ Вопросы вирусол. 1992, № 5-6, с. 232-235.

9. Ямашита М, Сенюта Н.Б., Павлиш О.А. и др./ Распространение и филогенетический анализ изолятов HTLV-I, персистирующих на Дальнем Востоке России./ Молекулярная биологш 1995, 29, 5, с. 1172-1182.

10. Adachi Y, Copeland TD, Takahashi С, et alJ Phosphorylation of the rex protein of HTLV-l./JBiol Chem. 1992, 267, p. 21977-21981.

11. Adoud M., Dombrovsky A., Feldman G. et al. / Regulatory elements and leukemogenicity of Human T-Cell Leukemia Viruses type-1 and type-II./ J. of Vir.Dis., 1994, Vol.l,№3,p. 31-49

12. Ahmed Y.F., Gilmartin G.M., Hanly S.M. et all The HTLV-I Rex Response Element mediates a novel form of rnRNA polyadenylation./ Cell, 1991, Feb. 22, Vol.64, p.727-737

13. Ahmed YF, Hanly SM, Malim MH, et alJ Structure-function analyses of the HTLV-I rex and HIV-I rev RNA response elements: insights into the mechanism of rex and rev action./ Genes Dev 1990,4, p. 1014-1022.

14. Akiyama Y, Ito K./ Sec Y protein, a membrane-embedded secretion factor of E.coli, is cleaved by the Omp T protease in vitro./ Biochem. Biophys. Res. Commun. 1990, 167, p. 711-715.

15. Albrecht В., Collins ND., Newbound Gc., et all Quantification of human T-cell lymphotropic virus type I proviral load by quantitative competitive polimerase chain reaction./ J Virol Methods 1998, 75(2), p. 123-140.

16. Alexandre C, Charnay P, Verrier В./ Transactivation of Krox-20 and Krox-24 promoters by the HTLV-I tax protein through common regulatory elements./ Oncogene -1991, 6, p. 51-57.

17. Ando Y, Nakano S, Saito K, et «/./Transmission of adult T-cell leukemia retrovirus (HTLV-I) from mother to child: Comparison of bottle- with breast-fed babies./ Jpn J Cancer Res 1987, 78, p. 322-324.

18. Anonymous./ Licensure of screening tests for antibody to human T-lymphotropic virus type I./ MMWR 1988, Vol. 37, № 48, p. 736-747.

19. Ballaun C., Farrington G.K., Dobrovnik M. et ah /Functional analysis of Human T-Cell Leukemia Virus Type I rex-Response Element: Direct RNA Binding of Rex Protein correlates with in vivo activity./ J. Virology 1991, Aug., p.4408-4413

20. Baranger AM, Palmer CR, Hamm MK, et al./ Mechanism of DNA-binding enhancement by the human T-cell leukaemia virus transactivator Tax./ Nature 1995, 376, p. 606-608.

21. BarShira A, Panet A, Honigman A./ An RNA secondary structure juxtaposes two remote genetic signals for HTLV-I RNA З'-end processing./ J Virology 1991, 65, p. 51655173.

22. Bartoe J.T., Albrecht B, Collins N.D. et all Functional role of pX open reading frame II of human T-lymphotropic virus type I in maintenance of viral loads in vivo./ J. Virol., 2000, Feb., 74 (3), p.1094-1100

23. Beraud C, Lombard-Platet G, Michal Y, et all Binding of the HTLV-I Tax 1 transactivator to the inducible 21 bp enhancer is mediated by the cellular factor HEB1./ EMBOJ- 1991, 10, p. 3795-3803.

24. Black А.С., Chen I.S.Y., Arrigo S. et al.l Regulation of HTLV-II gene expression by rex involves positive and negative cis-acting elements in the 5' long terminal repeat./ Virology, 1991, 181,p.433-444

25. Black A.C., Ruland C.T., Yip M.T. et al.l HTLV-II rex binding and activity require an intact splice donor site and specific RNA secondary structure./ J. Virology,1991,65,p. 6645-6653

26. Bogerd H, Greene WC./ Dominant negative mutants of HTLV-I rex and human immunodeficiency virus type I rev fail to multimerize in vivo./ J Virology 1993, 67, p. 2496-2502.

27. Bogerd H.P., Tiley L.S., Cullen B.R./ Specific binding of the Human T-Cell Leukemia Virus Type I rex protein to a short RNA sequence located within the Rex-Response Element./ J.Virology, 1992, Dec., p.7572-7575

28. Bohnlein E, Siekevitz M, Ballard DW, et al.f Stimulation of the HIV-1 enhancer by the HTLV-I tax gene product involves the action of inducible cellular proteins./ J Virology- 1988, 63, p. 1578-1586.

29. Bohnlein S., Pirker P., Hofer L. et al. / Transdominant repressors for Human T-Cell Leukemia Virus Type I Rex and Human Immunodeficiency Virus Type I Rev function. / J.Virology, 1991, Jan.,p.81-88

30. Bolton Wv, Wylie BR, Kenrick KG, et alt HTLV-I and blood donors./ The Lancet 1989, 10, p. 1324-1325.

31. Born M, Helm K, Wernicke D, et al.l Presens of antibodies to human lymphoma-leukemia virus (HTLV-I) in germans with symptoms of the acquired immunodeficiency syndrome (AIDS)./ J Med Virol 1985, 15, p. 57-63.

32. Cann AJ, Chen ISY./ Human T-cell Leukemia virus type-I and II. In: Fields BN, Knipe DM.(eds)./ Virology 1990, 2nd edition. Chapter 52, Raven Press LTD. New York, p. 1501-1527.

33. Cann JA, Chen ISY./ Human T-cell Leukemia virus types I and II./ Fields Virology- 1996, ch.59,p. 1849-1880.

34. Caputo A, Haseltine WA./ Reexamination of the coding potential of the HTLV-I pX region./ Virology 1992, 188, p. 618-627.

35. Chen Y-M, Chen S-H, Fu C-Y, et alJ Antibody reactivities to tumor-suppressor protein p53 and HTLV-I Tof, Rex and Tax in HTLV-I-infected people with differing clinical status./ Int J Cancer 1997, 71, p. 196-202.

36. Chen Y-M., Okayama A., Lee T-H., et all Sexual transmission of human T-cell leukemia virus type I associated with the presence of anti-Tax antibody./ PNAS USA -1991, Vol.88, p. 1182-1186.

37. Chlichlia K, Moldenhauer G, Daniel PT, et alJ Immediate effects of reversible HTLV-I tax function: T-cell activation and apoptosis./ Oncogene 1995, 10, p. 269-277.

38. Clarke M, Gelman E, Reitz Jr./ Homology of human T-cell leukemia virus envelope gene with class I HLA gene./ Nature 1983, v. 305, p 60-62.

39. Coates S., Harris A., Keitelman E., et all Serological reactivity of recombinant HTLV-I proteins./ J Cell Biochem. 1989, Suppi. 13B,p.266

40. Coates S., Harris A., Parkes D., et alJ Serological evaluation of Escherichia coli -expressed human T cell leukemia virus type I env, gag p24 and tax proteins./ J Clin. Microbiology - 1990, p. 1139-1142.

41. Collins N.D., Newbound G.C., Albrecht B. et all Selective ablation of human T-celllymphotropic virus type I pl2I reduces viral infectivity in vivo./Blood, 1998,Jun, 15, 91 (12), p.4701-4707

42. Delamarter RB, Carr J, Saxton EH. / HTLV-I viral-associated myelopathy after blood transfusion in a multiple trauma patient./ Clin Orthop 1990, 260, p. 191-194.

43. Dokhelar M-C, Pickford H, Sodroski J, et alJ HTLV-I p27rex regulates gag and env protein expression./ J. Acq. Imm. Defic. Sindr., 1989, Vol.2, 5, p. 431-440.

44. Ehrlich GD, Glaser JB, Abbot MA, et alJ Detection of anti HTLV-I Tax antibodies in HTLV-I enzyme-linked immunosorbent assay - negative individuals./ Blood -1989, Vol 74, 3, p. 1066-1072.

45. Ferrer A, Aparicio C, Nogues N, et al. / Expression of catalytically active radish 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase in Esherichia coli./ FEBS Lett 1990, 18,266(1-2), p. 67-71.

46. Foulkes NS, Borrelli E, Sassone-Corsi P./ CREM gene: use of alternative DNA-binding domains generates multiple antagonists of cAMP-induced transcription./ Cell -1991,64, p. 739-749.

47. Franchini G./ Molecular mechanisms of human T-cell leukemia/lymphotropic virus type I infection./ Blood 1995, 86, p. 3619-3639.

48. Fujii M, Sassone-Corsi P, Verma IM./ C-fos promoter trans-activation by the taxi protein of human T-cell leukemia virus type I./ PNAS USA 1988, 85, p. 8526-8530.

49. Fujii M, Tsuchiya H, Chuhjo T, et al.l Interaction of HTLV-I Taxi with p67srf causes the aberrant induction of cellular immediate early genes through CarG boxes./ Genes Dev. 1992, 6, p. 2066-2076.

50. Fujii M, Tsuchiya H, Seiki M./ HTLV-I Tax has distinct overlapping domains for transcriptional activation and for enhancer specificity./ Oncogene 1991, 6, p. 2349-2352.

51. Fujisawa J, Seiki M, Kiyokawa T, et al.l Functional activation of long terminal repeat of human T-cell leukemia virus type I by transactivator./ PNAS USA 1985, 82, p. 2277-2281.

52. Fujisawa J, Seiki M, Sato M, et all A transcriptional enhancer of HTLV-I is responsible for trans-activation mediated by p40x of HTLV-I./ EMBO J. 1986, 5, p. 713718.

53. Fujisawa J, Toita M, Yoshimura T, et a/./The indirect association of human T-cell leukemia virus Tax protein with DNA results in transcriptional activation./ J Virology -1991, 65, p. 4525-4528.

54. Furukawa Y, Fujisawa J, Osame M, et ah / Frequent clonal proliferation of HTLV-I (HTLV-I)-infected T cell in HTLV-I-associated myelopathy (HAM-TSP)./ Blood 1992, 80, p. 1012-1016. 108

55. Gessain A, Francis H, Sonan T, et al. / HTLV-I and tropical spastic paraparesis in Africa./Lancet 1986, 2, p.698. 116

56. Gessain A, Gallo R, Franchini G./ Low degree of human T-cell leukemia/lymphoma virus type I genetic drift in vivo as a means of monitoring viral transmission and movement of ancient human populations. / J Virology 1992, Vol. 66, p. 2288-2295.

57. Gessain A, Malet Ch, Robert-Lamblin J, et al.l Serological evidence of HTLV-I but not HTLV-II infection in ethnic groups of Northern and Eastern Siberia J J Acq Imm Def Synd and Hum Retrovirology 1996, 11,4, p.413-414.

58. Gibbs WN, Lofters WS, Campbell M, et al. /Non-Hodgkin lymphoma in Jamaica and its relation to adult T-cell leukemia lymphoma./ Ann Intern Med 1987, 106, p. 361368.

59. Gitlin SD, Dittmer J, Reid RL et al.l The molecular biology of human T-cell leukemia virus./ Cullen B, ed, Frontiers of Molecular Biology, Oxford, Oxford University Press 1993, p. 159-192.

60. Gitlin SD, Lindholm PF, Marriott S, et al./ Transdominant human T-cell lymphotropic virus type I Tax mutant that fails to localize to the nucleus./ J Virology -1991, 65, p.2612-2621.

61. Gonzalez GA, Yamamoto KK, Fisher WH, et all A cluster of fhosphorylation sites on the cyclic AMP-regulated nuclear factor CREB predicted by its sequence./ Nature -1989, 337, p. 749-752.

62. Gotoh YL, Sugamura K, Hinuma Y.l Healhty carriers of a human retrovirus, adult T-cell leukemia virus (ATLV): demonstration by clonal culture of ATLV-carrying T-cells from peripheral blood./ PNAS USA 1982, 79, p. 4780-4782.

63. Goubau P., Desmyter J, Ghesquiere J, et alJ HTLV-II among pygmies./ Nature ~ 1992, V 359, p.201. 10Г

64. Grassmann R, Berchtold S., Aepinus C. et al. /In Vitro Binding of Human T-Cell Leukemia Virus rex Proteins to the rex-Response Element of Viral Transcripts./ J. Virology, July 1991, p.3721-3727

65. Green PL, Yip MT, Xie Y, et al./ Phosphorylation regulates RNA binding by the human T-cell leukemia virus rex protein./ J Virology 1992, 66, p. 4325-4330.

66. Gurtsevitch V, Senyuta N, Shih J, et al. / HTLV-I family infection in Turkmenistan./ IXth International Conference on AIDS, Berlin 1993, p.268.

67. Gurtsevitch V, Senyuta N, Stepina V, et al. / HTLV-I familian infection in different regions of the Former Soviet Union (FSU). / AIDS research and human retroviruses. (Tenth Anniversary volum), 1994, V.10,4, p. 487.

68. Gurtsevitch V, Senyuta N, Stepina V, et all HTLV-I among Native People of Far Eastern Regions of Russia./ XthInternational Conference on AIDS. Yokohama 1994, V.l, p. 134.

69. Gurtsevitch V, Senyuta N, Pavlish O, et alJ HTLV-I positive case of ATL in Georgia (formely USSR)./ Int. J Cancer - 1992, № 51, p. 835-836. 11Г

70. Gurtsevitch V, Senyuta N, Shih J, et alJ HTLV-I infection among Nivkhi people in Sakhalin./Int J Cancer 1995, № 60, p. 432-433.

71. Hai T, Liu F, Coukos WJ, et alJ Transcription factor ATF cDNA clones: an extensive family of leucine zipper proteins able to selectively form DNA-bindingheterodimers./ Genes Dev. 1989, 3, p. 2083-2090.

72. Hall WW, Liu CR, Schneewind O, et al. / Deleted HTLV-I provirus in blood and cutaneous lesions of patients with mycosis fungoides./ Science 1991, 253, p. 317-320.

73. Heger P., Rosorius O., Koch C. et al. / Multimer Formation Is Not Essential for Nuclear Export of Human T-Cell Leukemia Virus Type I Rex trans-Activator Protein./ J. Virology, Nov. 1998, p.8659-8668

74. Hidaka M., Inoue J.,Yoshida M./ Post-transcriptional regulator (rex) of HTLV-I initiates expression of viral structural proteins but suppresses expression of regulatory proteins./ EMBO, 1988, Vol.7, № 2, p.519-523

75. Hino S, Doi H, Yoshikuni H, et al / HTLV-I carrier mothers with high-titer antibody are at high risk as a source of infection./ Jpn J Cancer Res (Gann)- 1987, 78, p. 1156-1158.

76. Hinuma Y, Komoda H, Chosa T, et al./ Antibodies to adult T-cell leukemia-virus-associated antigen (ATLA) in sera from patients with ATL and controls in Japan: a nationwide seroepidemiologic study./ Int J Cancer 1982, 29, p.631-635.

77. Hinuma Y, Nagata К, Hanaoka M, et al./ Adult T-cell leukemia antigen in an ATL cell line and detection of antibodies to the antigen in human sera./ PNAS USA 1981, v. 78, p. 6476-6480.

78. Hinuma Y. / Seroepidemiology of adult T-cell leukemia virus (HTLV-I/ATLV): origin of virus carriers in Japan./ AIDS Res. 1986, 2, p. 517-522.

79. Hirata M., Ikematsu H., Nakashima K., et all Higher expression levels of alternatively spliced pX mRNA in human T lymphotropic virus type I asymptomatic carriers positive for antibodies to p40tax protein./ J Infect Dis - 1995, 172(4), p. 1098-1102.

80. Hofer L., Weichselbraun I., Quick S. et alJ Mutational analysis of the Human T-Cell Leukemia Virus Type I trans- acting rex gene product./ J. Virology, 1991, June, p.3379-3383

81. Hope T.J., Bond B.L., McDonald et al. / Effector domains of Human Immunodeficiency Virus Type I Rev and Human T-Cell Leukemia Virus Type I Rex are functionally interchangeable and share an essential peptide motif./ J. Virology, 1991, Nov., p. 6001-6007

82. Huang K, Huang Q, Wildung MR et alJ Overproduction, in Esherichia coli, of Soluble Taxadiene Synthase, a Key Enzyme in the Taxol Biosynthetic Pathway./ Protein Expr Purif- 1998, 13, p. 90-96.

83. Inoue J, Itoh M, Akizawa T, et alJ HTLV-I rex protein accumulates unspliced RNA in the nucleus as well as in cytoplasm./ Oncogene 1991,6, p. 1753-1757.

84. Inoue J-I, Seiki M, Taniguchi T, et al.l Induction of interleukin-2 receptor gene expression by p40x encoded by human T-cell leukemia virus type I./ EMBO J -1986, 5, p. 1883-1888.

85. Jeang K-T, Chiu R, Santos E, et all Induction of the HTLV-I LTR by Jun Occurs through the Tax-responsive 21-bp elements./ Virology 1991, 181, p. 218-227.

86. Jeang K-T, Widen SG, Seemes Oj, et al.l HTLV-I trans-activator protein, Tax, is a trans-repressor of the human (3-polymerase gene./Science 1990, 247, p.1082-1084.

87. Kajiyama W, Kashiwagi S, Ikematsu H, et al /Intra-familial transmission of adult T-cell leukemia virus./ J Infect Dis- 1986, 154, p. 851-857.

88. Kamihira S., Toriya K., Amagasaki Т., et all Antibodies against p40tax gene product of Human T-lymphotropic vims type I (HTLV-I) under various conditions of HTLV-I infection./ Jpn.J Cancer Res-1989, 80, p.1066-1071.

89. Kanamori H., Suzuki N., Siomi H. et all HTLV-I p27(rex) stabilizes human interleukin-2 receptor alpha chain mRNA./ EMBO J, 1990, 9, p.4161-4166

90. Kaplan JE, Osame M, Kubota H, et al / The risk of development of HTLV-I-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis among persons infected with HTLV-I./ J Acquir Immune Defic Syndr 1990, 3, p. 1096-1101.

91. Kashiwagi S., Kajiyama W., Hayashi J., et al/ Antibody to p40tax protein of Human T-cell leukemia virus I and infectivity./ J Infect Dis 1989, 161, p.426-429.

92. Kellerman О К, Ferenchi Т. / Maltose -binding protein from E.coli./ J Methods in Enzymology 1982, 90, p. 459-463.

93. Kelly K, Davis P, Mitsuya H, et all A high proportion of early response genes are constitutively activated in T-cells by HTLV-I./ Oncogene 1992, 7, p. 1463-1470.

94. Kinoshita K, Hino S, Amagasaki T, et all Demonstration of adult T-cell leukemia virus antigen in milk from three sero-positive mothers./ Gann 1984, 75, p. 103-105.

95. Kitajima Т., Itamura S., Hamakado Т., et al.l Synthesis of proteins in Escherichia coli immunoreactive with sera from individuals infected with human T-cell leukemia virus type 1.1 Mol Cell Probes 1988, 2,39-46.

96. Kiyokawa T, Seiki M, Iwashita S, et al.l p27x-III and p21x-III, proteins encoded by the pX sequence of human T-cell leukemia virus type 1.1 PNAS USA, 1985, Vol. 82, p. 8359-8363.

97. Kline RL, Brothers T, Halsey N, et al./ Evaluation of enzyme immunoassays for antibody to human T-lymphotropic viruses type I/II./ The Lancet 1991, Vol.337, p.30-33.

98. Koralnik I, Fullen J, Franchini./ The pl2!, pl3n and рЗО11 encoded by human T-cell leukemia/lymphotropic virus type I open reading frames I and II are localized in three different cellular compartments./ J Virology 1993,67, №1, p. 2360-2366.

99. Koralnik I.J., Gessain A., Klotman M.E. et all Protein isoforms encoded by the pX region of human T-cell leukemia/ lymphotropic virus type I./ PNAS USA, 1992, Sep, 15, 89 (18), p. 8813-8817

100. Kroviarski Y, Cochet S, Martineau P, et al. / Evaluation of several affinity chromatographic supports for the purification of maltose-binding protein from Esherichia coliJ J Chromatograph 1993, 633, p. 273-280.

101. Kubota S., Nosaka Т., Cullen B.R. et all Type I Rev and Human T-Cell Leukemia Virus Type I Rex on nucleolar targeting signals./ J. Virology, Vol.65, № 5, p.2452-2456

102. Kuroda N, Washitani Y, Shiraki H, et alJ Detection of antibodies to human T-lymphotropic virus type I by using syntetic peptides J Int J Cancer 1990, 45, p. 865-868.

103. Lai RB, Giam CZ, Coligan JE et all Differential immune responsiveness to the immunodominant epitopes of regulatory proteins ( tax and rex ) in human T-cell lymphotropic virus type I associated myelopathy./ J Infect Dis - 1994, 169 (3), p.496-503.

104. Landschulz WH, Johnson PF, McKnight SL./ The leucine zipper: a hypothetical structure common to a new class of DNA binding proteins./ Science 1988, 240, p. 17591764.

105. Leonard WJ, Depper JM, Uchiyama T, et al I A monoclonal antibody that appears to recognise the receptor for human T cell growth factor: partial characterization of the receptor./ Nature 1983, 300, p. 267-269.

106. Leung K, Nabel G./ HTLV-I transactivator induces IL-2 receptor expression through an NFkB like factor./ Nature - 1988, 333, p. 776-778.

107. Lin K, Kurland I, Xu LZ, et al / Expression of mammalian liver glycolytic/gluconeogenic enzymes in Esherichia coli: recovery of active enzyme is strain and temperature dependent./ Protein Expr Purif- 1990, 1(2), p. 169-176.

108. Lindholm PF, Reid RL, Brady JN./ Extracellular Taxi protein stimulates tumor necrosis factor-p and immunoglobulin kappa light chain expression in lymphoid cells./ J Virology- 1992, 66, p. 1294-1302.

109. Lolli F, Fredrikson S, Kam-Hansen S, et al. /Increased reactivity to HTLV-I in inflammatory nervous system diseases./ Ann Neurol- 1987,22, p. 67-71.272

110. Maniatis T, Fritch E, Sambrook J./ Molecular cloning. Cold Spring Harbor Lab. Press, NY, 1982.

111. Markham PD, Salahuddin SZ, Kalyanaraman VS, et al. / Infection and transformation of fresh human umbilical cord blood cells by multiple sources of human T-cell leukemia-lymphoma virus (HTLV-I)./ Int J Cancer 1983, 31, p. 413-420.

112. Marriott SJ, Lindholm P, Brown KM, et al.l A 36-kilodalton cellular transcription factor mediates an indirect responsive element in the viral long terminal repeat./ Mol. Cell. Biol- 1990, 10, p. 4192-4201.

113. Marriott SJ, Trinh D, Brady JN./ Activation of interleukin-2 receptor alpha expression by extracellular HTLV-I Taxi protein: a potential role in HTLV-I pathogenesis./ Oncogene 1992, 7, p. 1749-1755.

114. Marston F.A.O. / The purification of eukaryotic polypeptides synthesized in Esherichia coli.l JBiochem. 1986, 240, p. 1-12.

115. Matsumoto M, Nomuta K, Matsumoto T, et al.l Adult T-cell leukemia-lymphoma in Kagoshima District, southwestern Japan: clinical and hematological characteristics./ Jpn J Clin Oncology 1979, 9, p.325-336.

116. Matsuoka M, Hagiya M, Hattori T, et al. /Gene rearrangements of T-cell receptor b and с chains in HTLV-I infected primary neoplastic T-cells./ Leukaemia 1988, 2 p. 8490.

117. Matthews M-A. H, Markowitz R-B, Dynan WS./ In vitro activation of transcription by the human T-cell leukemia virus type I Tax protein./ Mol. and Cell.Biology 1992, Vol.12, 5, p. 1986-1996.

118. Meinl E, Fickenscher H, Thome M, et al.l Anti-apoptotic strategies of lymphotropic viruses J Immunology today 1998, 18, 10 , p. 474-479.

119. Miyoshi I., Kubonishi I, Yoshimoto S, et al.l Type С virus particles in a cord T-cell line derived by cocultivating normal cord leukocytes and human leukemic T-cells./ Jpn. J. Cancer Res. 1981, v. 72, p.967-971.

120. Monplaisir N, Neisson-Vernant C, Bouillot M, et al.l HTLV-I maternal transmission in Martinique, using serology and polymerase chain reaction./ AIDS Res hum Retroviruses 1993, 9, p. 869-874.

121. Mulloy JC, Kislyakova T, Cereseto A, et al.l Human T-cell lymphotropic/leukemia virus type I Tax abrogates p53 induced cell cycle arrest and apoptosis through its CREB/ATF functional domain./ J Virology - 1998, p. 8852-8860.

122. Nagashima K, Yoshida M, Seiki. M./ A single species of pX mRNA of HTLV-I encodes trans-activator p40x and two other phosphoproteins./ J Virology 1986, 60, p. 394399.

123. Nagia К and Thogersen HC.I Generation of (3-globin by sequence-specific proteolysis of hybrid protein produced in Escherichia coli./ Nature- 1987, 309, p. 810-812.

124. Nakano S, Ando Y, Ichijo M, et й/./Search for possible routes of vertical and horizontal transmission of adult T-cell leukemia virus./ Gann 1984, 75, p. 1044

125. Nam SH, Kidokoro M, Shida H, et alJ Processing of gag precursor polyprotein of HTLV-I by virus-encoded protease. / J Virol 1988, 62, p. 3718-3728.

126. Noraz N, Benichou S, Madaule P, et alJ Expression of HTLV-I env and tax recombinant peptides in yeast: identification of immunogenic domains./ Virology 1993, 193, p. 80-88

127. Nyborg JK, Dynan WS./ Interaction of cellular proteins with the HTLV-I transcriptional control region. Purification of cellular proteins that bind the 21-base pair repeat elements./ J Biol Chem 1990, 265, p. 8230-8236.

128. Orita S., Saiga A., Takagi S. et all A novel alternatively spliced viral mRNA transcribed in cells infected with human T-cell leukemia virus type I is mainly responsible for expressing p21X protein./ FEBSLetters, 1991, 295, p.127-134

129. Orita S., Tokagi S., Saiga A. et al.l Human T- cell leukaemia virus type I p21X mRNA: constitutive expression in peripheral blood mononuclear cells of patients with adult T- cell leukaemia./ J. General Virology, 1992, 73, p.2283-2289

130. Osame M, Kumamoto I, Izumo S, et al. HTLY-I-associated myelopathy (HAM): epidemiology, clinical features and pathomechanism.// Advances in adult T-cell leukemia and HTLV-I research.// Gann. Monogr 1992, 39, p. 57-68.

131. Osame M, Matsumoto M, Usuku K, et al. / Chronic progressive myelopathy associated with elevated antibodies to human T-lymphotropic virus type I and adult T-cell leukemia-like cells J Ann Neurol- 1987, 21, p. 117-122. 364

132. Palmeri D. , Malim M. H./ The Human T-Cell Leukemia Vims Type I posttranscriptional trans-activator rex contains a nuclear export signal./ J. Virology, 1996, Sept, p.6442-6445

133. Paul NL, Millet I, Ruddle NH./ The lymphotoxin promoter is stimulated by HTLV-I tax activation of NF-кВ in human T-cell lines./ Cytokine 1993, 5,p. 372-378.

134. Pavlish O, Syrtsev A, Susova O, et al. Env, gag and tax HTLV-I recombinant proteins: significance for diagnostics. 2-nd International Conference "AIDS, Cancer and Human Retroviruses", St-Petersburg, 1993, p.24.

135. Popovic M, Lange-Wantzin G, Sarin R, et al.! Transformation of human umbilical cord blood T cells by human T-cell leukemia/lymphoma./ PNAS USA 1983, 80, p. 5402-5406.

136. Proudfoot N./ Poly(A) Signals./ Cell, 1991, Feb, 22, Vol.64, p.671-674

137. Rimsky L, Dodon MD, Dixon EP, et alJ Trans-dominant inactivation of HTLV-I and HIV-I gene expression by mutation of the HTLV-I Rex transactivator./ Nature 1989, 341, p. 453-456.

138. Rimsky L, Hauber J, Dukovich M, et alJ Functional replacement of the HIV-1 rev protein by the HTLV-I rex protein./ Nature 1988, 335, p. 738-740.

139. Roithmann S, Pique C, Le Cesne A, et alJ The open reading frame I (ORF I)/ORF II part of the human T-cell leukemia virus type I X region is dispensable for p40tax, p27reX, or envelope expression./ J Virology 1994, 68, p. 3448-3451.

140. Rudolph DL, Coligan JE, Lai RB, et all Detection of antibodies to trans-activator protein (p40taxl) of human T-cell lymphotropic virus type I by a synthetic peptide- based assay./ Clin Diagn Lab Immunol 1994, 1(2), p. 176-181.

141. Saggioro D, Majone F, Forino M, et al./ Tax protein of human T-lymphotropic virus type I triggers DNA damage./ Leuk. Lymph. 1994, 12, p. 281-286.

142. Saiga A, Aono Y, Imai J, et al.l Presence of antibodies to p21X and/or p27 rex proteins in sera from human T-cell leukemia virus type I infected individuals./ J Virol Methods - 1996, 57 (2), p. 157-168.

143. Sambrook J, Fritsch E, Maniatis Т./ Molecular cloning. A laboratory manual (second edition)./ Cold Spring Harbor Lab. Press.- 1989.

144. Sauter M, Mueller-Lantzsch N./ Characterization of an Epstein-Barr virus nuclear antigen 2 variant (EBNA 2B) by specific sera./ Virus Res. 1987, 8, p. 141-152.

145. Sawada T, Tohmatsu J, Obara T, et al. /High risk of mother-to-child transmission of HTLV-I in p40tax antibody-positive mothers./ Jpn J Cancer Res 1989, 80, p. 506-508.

146. Seiki M, Hatton S, Hirayama Y, et al.l Human adult T-cell leukemia virus complete nucleotide sequence of the provirus genome integrated in leukemia cell DNA./ PNAS USA 1983, 80, p. 3618-3622.

147. Seiki M, Hikikoshi A, Yoshida M, et al.l Expression of the pX gene of HTLV-I general splicing mechanism in the HTLV family./ Science 1985, 228, 4707, p. 1532-1534.

148. Seiki M., Inoue J., Hidaka M. et al.l Two cis-acting elements responsible for post-transcriptional trans-regulation of gene expression of human T-cell leukemia virus type I./ PNAS USA 1988, 85, p. 7124-7128.

149. Semmes OJ, Jeang K-T./ HTLV-I Tax is a zinc-binding protein: role of zinc in Tax structure and function./ Virology 1992, 188, p. 754-764.

150. Semmes OJ, Jeang K-T./ Mutational analysis of human T-cell leukemia virus type I Tax: regions necessary for function determined with 47 mutant protein./ J Virology -1992, Dec., p. 7183-7192.

151. Senyta N, Pavlish O, Gurtsevitch V./ Case of adult T-cell leukemia in HTLV-I infected family in Georgia, USSR./ Lancet 1991, 338, p. 1394.

152. Senyta N, Syrtsev A, Yamashita M, et al.l Seroepidemiologic and phylogenetic studies of HTLV-I infection in 2 countries of Caspian sea region./Int J Cancer 1998, 77, p. 488-493.

153. Shimotohno К, Takano M, Miwa M, et al.l Structure of the pX protein deduced of a cDNA clone of pX mRNA in cells infected with human T-cell leukemia virus type 1.1 Gann Jap J Cancer Res 1985, 76,1 4, p.241-244.

154. Shimoyama M, Minato K, Tobinai K, et al. / Atypical adult T-cell leukemia-lymphoma: diverse clinical manifestations of adult T-cell leukemia-lymphoma./ Jpn J Clin Oncol- 1983, 13, p. 165-187.

155. Shimoyama M. /Diagnostic criteria and classification of clinical subtypes of adult T-cell leukemia-lymphoma. A report from the lymphoma study group (1984-1987)./ Br J Haematol- 1991, 79, p. 437.

156. Siomi H, Shida H, Nam SH, et all Sequence requirements for nucleolar localization of human T-cell leukemia virus type I pX protein, which regulates viral RNA processing./ Cell 1988, 55, p. 197-209.

157. Sliwkowski M., Teramoto Y., Ferrer R., et all Characterization of human T cell leukemia virus type I p40X protein expressed in E.coli./ Adv. Gene Tech. - 1988, 8,p.228

158. Smith JA 1989, Quantitation of proteins, in Current Protocols in Molecular Biology, Ausebel, FM et al.(eds) Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York, pp. 10.1.1.-10.1.3.

159. Smith M.R. and Greene W. C. / Molecular Biology of the Type I Human T-Cell Leukemia Virus (HTLV-I) and Adult T-Cell Leukemia./ J. Clin. Invest., Vol.87, March 1991, p.761-766

160. Sodroski J.I The human T-cell leukemia virus (HTLV-I) transactivator (Tax) protein./ Biochimica et Biophysica Acta 1992, 1114, p.19-29.

161. Sodroski JG, Rosen CA, Haseltine WA./ Trans-acting transcriptional activation of the long terminal repeat of human T-lymphotropic viruses in infected cells./ Science -1984, 225, p. 381-385.

162. Stong RC, Korsmeyer SJ, Parkin JL, et all Human acute leukemia cell line with the t(4;ll) chromosomal rearrangement exhibits В lineage and monocytic characteristics./ Blood- 1985, 65, p. 21-31.

163. Straus D, Gilbert W./ Chicken triosophosphate isomerase complements in Escherichia coli deficiency./ PNAS USA 1985, 82, p. 2014-2018.

164. Sugamura K, Hinuma Y.I human Retroviruses: HTLV-I and HTLV-II./ The retroviridae 1993, Vol. 2, ch. 7, p.399-434.

165. Sullivan MT, Williams AE, Fang CT, et al.l Transmission of human T-lymphotropic virus types I and II by blood transfusion: a retrospective study of recipients of blood components./ Arch Intern Med- 1991, 151, p. 2043-2048.

166. Susova O, Pavlish O, Scherbak L, Gurtsevitch V. Expression of the HTLV-I Rex and Tax recombinant proteins in E.coli. Xth International Conference on AIDS. Yokohama, 1994, v.l,p,137.

167. Susova O, Scherbak L, Pavlish O, Gurtsevich V. Some peculiarities of N- and C-terminal region p40 TAX HTLV-I protein expression in E.coli. 3-rd International Conference "AIDS, Cancer and Related Problems", St. Petersburg, Russia, 1995, p.61.

168. Suzuki T, Hirai H, Murakami T, et al./ Tax protein of HTLV-I destabilizes the complexes of NF-кВ and 1кВ-а and induces nuclear translocation of NF-кВ for transcriptional activation./ Oncogene 1995, 10, p. 1199-1207.

169. Suzuki T, Hirai H, Yoshida M./ Tax protein of HTLV-I interacts with the Rel homology domain of NF-кВ p65 and c-Rel proteins bound to the NF-кВ binding site and activates transcription./ Oncogene 1994, 9, p. 3099-3105.

170. Tajima K, Tominaga S, Kuroishi T, et al./ Geographical features and epidemiological approach to endemic T-cell- leukemia lymphoma in Japan./ Jpn J Clin Oncology 1979, 9, p. 495-504.

171. Tan TH, Jia R, Roeder RG./ Utilization of signal transduction pathway by human T-cell leukemia virus type I transcriptional activator./ J Virology 1989, 63, p. 3761-3768.

172. Tanaka Y., Masuda M., Yoshida A., et al./ An antigenic structure of the transactivator protein encoded by human T-cell leukemia virus type I (HTLV-I), as defined by a panel of monoclonal antibodies./ AIDS Res Hum Retroviruses - 1992, 8(2), p.227-235.

173. Toyoshima H., Itoh M., Inoue J.I., et al./ Secondary structure of the HTLV-I rex-responsive element is essential for rex regulation of RNA processing and transport of unspliced RNAs./ J.Virology, 1990, 64, p.2825-2832

174. Trentin B, Rebeyrotte N, Mamoun R./ An enzymatically active form of the HTLV-I reverse transcriptaseis encoded in Pro and Pol ORFs./ HERN: Abs. of third pathogenesis workshop. 28 Feb. 1998. Newsletter. 1999,6.

175. Tsujimoto A, Nyunoya H, Morita T, et al./ Isolation of cDNAs for DNA-binding proteins which specifically bind to a Tax-responsive enhancer element in the long terminal repeat of human T-cell leukemia virus type I./ J Virology 1991, 65, p. 1420-1426.

176. Tsukahara T, Kannagi M, Ohashi T, et al./ Induction of Bcl-x (L) expression by human T-cell leukemia virus type I Tax through NF-kappa В in apoptosis-resistant T-cell transfectants with Tax./ J Virology 1999, 73, 10, p. 7981-7987.

177. Unge Т., Solomin L., Melini M. et al./ The rex regulatory protein of human T-cell Lymphotropic virus type I binds specifically to its target site within the viral RNA./ PNAS USA, 1991, 88, p.7145-7149

178. Usuku K, Sonoda S, Osame M, et al./ HLA haplotype-linked high immune responsiveness against HTLV-I-associated myelopathy: Comparison with adult T-cell leukemia/lymphoma./ Ann. Neurol. 1988, 23, p. 143-150.

179. Virus Taxonomy. Sixth Report of the International Committee on Taxonomy of viruses. Ed. by Murphy F, etal. Springer- Verlag Wien, New York. 1995, p. 193-204.

180. Wagner S, Green MR./ HTLV-I tax protein stimulation of DNA binding of bZIP proteins by enhancing dimerization./ Science 1993, 262, p. 395-399.

181. Weichselbraun I, Berger J, Dobrovnik M, et al.l Dominant-negative mutants are clustered in a domain of the human T-cell leukemia virus type I Rex protein: implications for trans dominance./ J Virology 1992, 66, p. 4540-4545. A

182. Weichselbraun I, Farrington GK, Rusche JR, et al.l Definition of the human immunodeficiency virus type I Rev and human T-cell leukemia virus type I Rex protein activation domain by functional exchange./ J Virology 1992, 66, p. 2583-2587. В

183. Weickert MJ, Pagratis M, Curry SR, et al. / Stabilization of apoglobin by low temperature increases yield of soluble recombinant hemoglobin in Esherichia coli.l Appl Environ Microbiol ~ 1997, 63 (11), p. 4313-4320.

184. White K.N., Nosaka Т., Kanamori H. et alJ The nucleolar localisation signal of the HTLV-I protein p27rex is important for stabilisation of IL-2 receptor alpha subunit mRNA by p27rex./ Biochem Biophys Res Commun., 1991, 175, p.98-103

185. Wilkinson DL, Harrison RG / Predicting the solubility of recombinant proteins in Esherichia coli.l Bio/technology 1991, 9, p. 443-448.

186. Yamada T, Yamaoka S, Goto T, et al./ The human T-cell leukemia virus type I Tax protein induces apoptosis which is blocked by the Bcl-2 protein./ J Virology 1994, 68, p. 3374-3379.

187. Yamashita M, Ido E, Miura T, et al.l Molecular epidemiology of HTLV-I in the world./ AIDS hum Retrovirus 1996, V 13, p. 124-131.

188. Yip MT, Chen ISY./ Modes of transformation by human T-cell leukemia viruses./ Mol. Biol. Med. 1990, 7, p.33-44.

189. Yokota Т., Cho M-J, Tachibana N., et all The prevalence of antibody to p42 of HTLV-I among ATLL patients in comparison with healthy carriers in Japan./ Int. J Cancer -1989, 43, p.970-974.

190. Yoshida M, Fujisawa J./ Positive and negative regulation of HTLV-I gene expression and their roles in leukemogenesis in ATL. Advances in adult T-cell leukemia and HTLV-I research./ Gann Monograph 1992, 39, p. 217-235.

191. Yoshida M, Osame M, Kawai H, et al.l Increased replication of HTLV-I in HTLV-I associated myelopathy./ Ann Neurol. - 1989,26, p. 331-335.

192. Yoshida M, Seiki M, Hattori S, et я/./Genome structure of human T-cell leukemia virus and its involvement in the development of adult T-cell leukemia./ In " Human-T-cell Leukemia/ Lymphoma Vims", ed. RC Gallo, ME Essex, and L Gross 1984, p.141-148.

193. Yoshida M, Suzuki T, Fujisawa J, et al.l HTLV-I oncoprotein Tax and cellular transcription factors./ Current Topics in Microbiology and Immunology 1995, 193, p. 7989.

194. Yoshida M., Inoue J., Fujisawa J. et al. /Molecular mechanisms of regulation of HTLV-I gene expression and its association with leukemogenesis./ Genome, Vol.31, № 2, 1989, p.662-667

195. Yoshida M./ HTLV-I Tax: regulation of gene expression and disease./ Trends in Microbiology- 1993, Vol. 1, 4,p. 131-135.

196. Yoshimura T, Fujisawa J, Yoshida M./ Multiple cDNA clones encoding nuclear proteins that bind to the tax-dependent enhancer of HTLV-I: All contain a leucine zipper structure and basic amino acid domain./ EMBO J. 1989, 9, p.2537-2542.

197. Zhao L-J, Giam С-ZJ Human T-cell lymphotropic vims type I (HTLV-I) transcriptional activator, Tax, enhances CREB binding to HTLV-I 21-base-pair-repeats by protein-protein interaction./ PNAS USA 1992, 89, p. 7070-7074.

198. Zhou Z-A, Adachi Y, Maki M, et al.l Expression of post-transcriptional regulatory gene of HTLV-I, rex, in Escherichia coli./ Virus genes 1989, 3,2, p. 153-158.

199. Zucker-Franklin D, Gorman JG./ HTLV-I provirus in seronegative healthy blood donors./ The Lancet 1997, Vol 349, 5, p.999.

200. Zucker-Franklin D, Pancake BA, Marmor M, et al.l Reexamination of human T-cell lymphotropic virus (HTLV-I/II) prevalence./ PNAS USA 1997, Vol. 94, p.6403-6407.