Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при немелкоклеточном раке легкого тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Степанова, Евгения Владиславовна

  • Степанова, Евгения Владиславовна
  • кандидат медицинских науккандидат медицинских наук
  • 2002, Москва
  • Специальность ВАК РФ14.00.14
  • Количество страниц 129
Степанова, Евгения Владиславовна. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при немелкоклеточном раке легкого: дис. кандидат медицинских наук: 14.00.14 - Онкология. Москва. 2002. 129 с.

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Степанова, Евгения Владиславовна

Список сокращений

Введение

Часть I. Обзор литературы

Глава 1. Молекулярно-биологические маркеры: понятие, роль в канцерогенезе.

Глава 2. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при раке легкого. Часть О. Результаты собственных исследований и нх обсуждение

Глава 1. Материалы и методы исследования

Глава 2. Экспрессия молекулярно-биологических маркеров 55 при НМРЛ

Глава 3. Клиническое значение определения молекулярно- 82 биологических маркеров при НМРЛ

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Онкология», 14.00.14 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия молекулярно-биологических маркеров при немелкоклеточном раке легкого»

Актулльмость темы

Для злокачественных опухолей легкого характерна стремительная прогрессия, агрессивное течение заболевания и низкая выживаемость больных. Совокупная статистика данных многочисленных авторов показывает, что, несмотря на совершенствование хирургического метода, 5-летний срок в целом переживают 20-30% радикально оперированных больных, и заметной тенденции к улучшению данных результатов не наблюдается. Общепризнанно, что основными факторами, влияющими на продолжительность жизни онкологических больных, являются распространенность опухоли и ее гистологическая структура. Однако, используя традиционные факторы прогноза, часто невозможно предсказать вероятность и сроки появления метастазов в каждом конкретном случае.

За последние несколько десятилетий достигнут значительный прогресс в понимании молекулярной биологии клетки. Стали известны многие механизмы контроля клеточного деления и смерти, поддержания генетической стабильности, пути передачи сигнала от рецепторов в ядро и т.д. Оказалось, что изменения некоторых белков, участвующих в этих процессах, может приводить к трансформации клеток. Такие структурные и функциональные особенности, определяемые в опухолевой ткани, получили название молекулярно-биологических (молекулярных) маркеров опухолевого роста [Коган Е.А., 1992, 1997].

Одним из современных путей совершенствования прогнозирования течения рака легкого и оптимизации лечебной тактики является изучение присутствия молекулярно-биологических маркеров в ткани опухоли. Наличие/отсутствие в опухолевых клетках определенных маркеров может приводить к тому, что опухоли, сравнимые по распространенности (по классификации TNM), различаются по агрессивности течения заболевания.

Наиболее ранними событиями в процессах канцерогенеза и прогрессировании опухолей, являются нарушение механизмов пролиферации и апоптоза (программированной клеточной гибели) в опухолевых клетках.

Одним из методов определения пролиферативной активности (ПА) опухоли служит индекс Ki-67-положительных клеток. Ki-67 является негистонным белком, который обнаруживается в ядрах во время поздней Gi, S, G2, и М, но не в G0 фазе клеточного цикла [GerdesJ., 1984].

Ключевыми белками, участвующими в управлении апоптозом, являются белки семейства Вс1-2 и супрессор опухолевого роста Р53.

Супрессор опухолевого роста, р53, известен как один из главных белков, регулирующий прохождение клеткой клеточного цикла. Активность р53 требуется для активации некоторых форм апоптоза, и его мутации могут быть ассоциированы с агрессивностью течения заболевания и устойчивостью опухолевых клеток к хнмио- или лучевой терапии. Мутации гена р53 - одни из самых распространенных нарушений, которые находят во всех типах опухолей человека [Greenblatt M.S., 1994].

Имеются данные, что трансмембранный белок HER2/neu с молекулярной массой 185 кД, являющийся аналогом рецептора фактора роста эпидермиса и обладающий тирозинкиназной активностью определяет прогноз, по крайней мере, в опухолях молочной железы и яичников.

Многие противоопухолевые агенты, включая цитотоксические препараты (ингибиторы топоизомераз 1 и 11 типа, ДНК-активные препараты, такие, как цисплатин), действуют, индуцируя апоптоз в клетках-мишенях [Dive С., 1991]. Было показано, что индукция апоптоза химиопрепаратами происходит через CD9S (Fas/APO-1) рецептор-лигандную систему [Friesen С., 1997]. Нарушение экспрессии CD9S рецептора в опухолевых клетках может приводить к их ускользанию от иммунологического ответа и блокированию запуска апоптоза, индуцированного химиотерапией.

Неоангиогенез или формирование новых микрососудов на основе уже существующей в ткани сети сосудов, является необходимым для роста опухоли и развития метастазов [Folkman J , 1997]. Фактор роста эндотелия сосудов (VEGF, vascular endothelial growth factor), является главным фактором, индуцирующим образование новых сосудов в опухоли путем стимулирования деления и миграции эндотелиальных клеток близлежащих сосудов [Ferrara N., 1997]. Экспрессия VEGF в злокачественных опухолях ассоциирована с увеличением метастазирования, и укорочением безрецидивной выживаемости.

Однако до сих пор идентификация маркеров для более точного прогноза течения заболевания и определения адекватной терапии является еще открытой проблемой для больных раком легкого. Исследование прогностических маркеров в комплексе со всеми подходами, которые обычно доступны в клинической практике, в будущем поможет выбрать наиболее эффективные методы лекарственной терапии индивидуально для каждого больного.

Цель работы

Целью настоящей работы явилось изучение экспрессии некоторых молекулярно-биологических маркеров (р53, Вс1-2, Вах, Кл-67, НЕ112/пеи, СШ5Ь и УЕОИ) при немелкоклеточном раке легкого (НМРЛ) и оценка возможности их индивидуального или комплексного использования для прогнозирования течения злокачественного процесса.

Задачи исследования

1. Исследовать экспрессию молекулярно-биологических маркеров (р53, Вс1-2, Вах, Кл-67, НЕЯ2/пеи, С095Ь и УЕОР) в клетках НМРЛ различных гистологических типов с помощью иммуногистохимического метода.

2. Сопоставить результаты тестирования с традиционными клиническими и морфологическими характеристиками опухоли с целью оценки возможного влияния молекулярно-биологических маркеров на биологическое поведение опухоли.

3. Оценить возможную прогностическую значимость экспрессии молекулярно-биологических маркеров при НМРЛ.

Научная новизна

Была исследована панель молекулярно-биологических маркеров, связанных с пролиферацией, апоптозом и ангиогенезом (р53, Вс1-2, Вах, Кл-67, НЕЯ2/пеи, СЭ95Ь и УЕвЕ), при НМРЛ. Изучены особенности экспрессии и взаимного влияния маркеров на прогрессию плоскоклеточного и аденогенного рака легкого. Проведен анализ наиболее информативных критериев прогноза течения заболевания и риска появления метастазов при НМРЛ различных типов. Впервые установлено, что совместная экспрессия р53 и УЕвР в опухолевой ткани имеет высокую прогностическую значимость для 5-летней безрецидивной выживаемости больных НМРЛ.

Научно-практическая значимость

Использование в патологоанатомической практике определения молекулярно-биологических маркеров позволит прогнозировать течение немелкоклеточного рака легкого при хирургическом лечении и химиотерапии. Оценка совместной экспрессии р53 и УЕвР при НМРЛ 1-И стадии имеет важное прогностическое значение для выделения группы повышенного риска метастазирования.

Разработаны и внедрены в медицинскую практику новые прогностические факторы НМРЛ, что содействует рациональному лечению больных.

Похожие диссертационные работы по специальности «Онкология», 14.00.14 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Онкология», Степанова, Евгения Владиславовна

выводы

1. Ядерное окрашивание антителами к р53 выявлено в 57% случаев НМРЛ и коррелировало с ухудшением 5-летней безрецидивной выживаемость больных. Локализация опухоли и степень ее дифференцировки не коррелируют с экспрессией р53.

2. Экспрессия Вс1-2 была обнаружена чаще при плоскоклеточном раке - 31 %, чем при аденокарциноме - 8 % случаев. Экспрессия Вах определена в 58% случаев аденокарциномы и в 22 % случаев плоскоклеточного рака легкого. Дисбаланс про- и антиапоптотических факторов в аденокарциноме и плоскоклеточном раком лекгого может свидетельствовать о различной роли Вс1-2 и Вах в патогенезе этих опухолей.

3. Пролиферативная активность плоскоклеточного рака была значительно выше, чем аденокарциномы (р<0,000001). Выявлен различный уровень регуляции пролиферативной активности при плоскоклеточном раке и аденокарциноме легкого. При плоскоклеточном раке индекс Кь67 прямо коррелировал с экспрессией Вс1-2, а при аденокарциноме - с присутствием р53 и С095Ь.

4. Больные, имеющие метастазы в перибронхиальные лимфоузлы, имеют высокую частоту экспрессии УН С) К и СР95Ь в первичной опухоли по сравнению с больными, не имеющими метастазы в регионарные лимфоузлы.

5. Определение экспрессии р53 и VEGF может давать прогностическую при ранних стадиях (MI) немелкоклеточного рака легкого. Совместная экспрессия р53 и VEGF в опухолевой ткани является прогностическим критерием для 5-летней безрецидивной выживаемости больных HMPJI Г—II стадии. Группу повышенного риска метастазирования составляют p53+VEGF+ и низкого риска метастазирования - p53"VEGF" больные.

6. При плоскоклеточном раке легкого 1Б стадии больные с фенотипом p53*VEGF"Bcl-2+ имеют наиболее благоприятный прогноз (5-летняя безрецидивная выживаемость составила 100 %), группа p53VEGF+Bcl-2" имеет плохой прогноз (5-летняя безрецидивная выживаемость - 0 %).

7. Экспрессия Вах при Illa стадии аденокарциномы легкого предсказывала более благоприятный прогноз, чем при отсутствии экспрессии этого белка (медиана безрецидивной выживаемости составила 6 месяцев у Вах' и 36 месяцев у Вах+ больных; р<0,005).

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для исследования возможной роли молекулярно-биологических маркеров в патогенезе НМРЛ и прогнозировании течения злокачественного процесса методами иммуногистохимии была изучена экспрессия р53, Bcl-2, Вах, CD95L, HER2/neu, VEGFa и пролиферативной активности (Ki-67 индекс). Исследование проводилось на парафиновых блоках плоскоклеточного РЛ T2N0M0 и аденокарциномы различной степени злокачественности (I-Illa стадии). Все больные были прослежены в течение 5 лет или до появления метастазов.

При исследовании выявлено окрашивание опухолевых ядер антителами к р53 в 57,4% случаев, тогда как нормальные клетки стромы и инфильтрирующие опухоль лимфоциты не окрашивались антителами к р53. Экспрессия р53 не ассоциировалась с какими-либо клинико-патологическими характеристиками опухоли (стадией, поражением лимфоузлов дифференцировкой, гистологическим типов опухоли, полом). Экспрессия р53 была не достоверно ниже при Ша стадии аденокарциномы, что может косвенно говорить о накоплении «нулевых» мутаций р53. Таким образом, оценка статуса р53 с помощью ИГХ может давать информацию о биологическом поведении опухоли только на ранних стадиях туморогенеза (стадии 1-Й).

Экспрессия Вс1-2 нами была обнаружена в 19% НМРЛ, значительно чаще при плоскоклеточном раке, чем при аденокарциноме (р=0,007). Экспрессия проапоптотического белка этого семейства - Вах определялась в 41% случаев НМРЛ, и была значительно выше в аденокарциномах, чем при эпидермоидном раке (р= 0,0002). Такой дисбаланс про- и антиапоптотических факторов в аденокарциноме и плоскоклеточном РЛ может свидетельствовать о различной роли Вс1-2 и Вах в патогенезе этих опухолей.

Экспрессия УЕОК - одного из основных стимуляторов ангиогенеза, была найдена в цитоплазме опухолевых клеток в 47% случаев НМРЛ. Экспрессия У!:ОР наблюдалась также на эндотелиальных клетках сосудов опухолевой ткани в 63% аденокарциномы и обратно коррелировала с присутствием УЕСП; на опухолевых клетках (р=0,04).

Повышенная экспрессия НЕК2/пеи на мембране опухолевых клеток выявлена в 21% случаев аденокарциномы и ассоциировалась с присутствием р53, с количеством р53 положительных клеток и интенсивностью окраски антителами к р53.

Синтез С0951, может использоваться опухолью для ускользания от иммунного ответа и способствовать метастазированию и лимфоузлы. Однако экспрессия СР95Ь опухолевыми клетками не является единственным и достаточным механизмом для ингибирования опухолью инфильтрирующих лимфоцитов.

Исследование показало, что пролиферативная активность плоскоклеточного рака была значительно выше, чем аденокарциномы (37% и 4,2%, соответственно). Статистический анализ выявил, что пролиферативная активность аденокарциномы и плоскоклеточного рака зависит от разных молекулярных маркеров. Так, ПА плоскоклеточного рака коррелировала с экспрессией Вс1-2 в опухолевой ткани, а в аденокарциноме - с присутствием р53 и CD95L (р=0,069).

Таким образом, подводя итог первой части исследования, нами была обнаружены различные нарушения экспрессии молекулярно-биологических маркеров при HMPJ1, и показано возможное участие Вс1-2 в прогрессировании плоскоклеточного рака легкого, а р53 и Вах - при аденокарциноме легкого.

Исследование прогностического значения маркеров при HMPJ1 показал, что экспрессии VEGF и р53 в опухолевой ткани может быть независимыми признаками укорочения безрецидивной выживаемости наряду с поражением регионарных лимфоузлов.

Многофакторный пропорциональный анализ Кокса показал, что VEGF и р53 являются независимыми маркерами БВ в группе больных I стадии. Другие показатели: пол, дифференцировка, кл инико-анатом ическая форма, распространенность опухоли, гистологическое строение, экспрессия Вс1-2, Вах и пролиферативная активность не оказывали значимого влияния на развитие отдаленных метастазов в нашем исследовании.

Экспрессия VEGF наблюдалась в 24% в группе без метастазов и в 68% в группе с метастазами. Медиана БВ в группе VEGF+ составила 18 месяцев, а в группе VEGF' больных медиана достигнута не была.

Экспрессию р53 также находят чаще в группе больных с появлением метастазов (р=0,007). Медиана БВ в группе без накопления р53 также не была достигнута, а в группе с накоплением р53 составила 21 месяц (р=0,01).

При плоскоклеточном раке легкого экспрессия Вс1-2 имеет сильную тенденцию к ассоциации с лучшим прогнозом (медиана не была достигнута в группе Вс1-2+, и составила 20,5 месяцев в группе Вс1-2; р=0,12), чего нельзя сказать об общей группе HMPJ1 и аденокарциноме.

При анализе группы больных аденокарциномой ШД стадии обнаружено, что больные с экспрессией Вах имеют лучший прогноз, чем без нее (р<0,001). Так, медиана БВ в группе Вах+ составила 36 месяцев, а в группе Вах - 6 месяцев.

Таким образом, опредление молекулярно-биологических маркеров при немелкоклеточном раке легкого может быть использовано для выделения группы больных с повышенным риском метастазирования (р53+УЕОР+ больные), которым показано назначение адъювантной химиотерапии даже при I стадии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Степанова, Евгения Владиславовна, 2002 год

1. Абелев Г.И. Механизмы дифференцировки и опухолевый ростобзор). //Биохимия 2000,65: 127-138.

2. Давыдов М.И., Полоцкий Б.Е. Рак легкого. //Москва, «Радикс» 1994.

3. Зборовская И.Г., Татосян А.Г. Молекулярно-генетические маркерыпри раке легкого: онкогены и гены супрессоры. //Новое в терапии рака легкого. Под ред. Н.И.Переводчиковой.

4. Коган Е. Межклеточные взаимодействия при опухолевом росте. Вкн. «Межклеточные взаимодествия». //Москва, «Медицина», 1995. 127-189.

5. Коган Е.А., Жак Г., Кайзер У., Шилли М., Виттен А., Шурман М.,

6. Шерер А., Хавеманн К Иммуногистохимия биомолекулярных маркеров рака легкого. // Архив патологии 1997, 6: 23-30.

7. Коган Е.А., Мазуренко Н.Н., Юшков П.В. Тришкина Н.В., Киселев

8. Ф.Л. //Иммуногистохимия клеточных онкогенов при предраке и раке легкого. Архив патологии 1990, 3-11.

9. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевыхсупрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза (обзор). //Биохимия 2000, 65: 5-33.

10. Нормантович В.А. Рак легкого: тенденции в диагностики и лечении.

11. Русский медецинский жернал 1998, 6 №10: 635-642.

12. Павлов А.С., Пирогов А.И., Трахтенберг А.Х. //Лечение ракалегкого. Москва 1979.

13. Полоцкий Б.Е. Рак легкого. //Диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук, Москва, 1995.

14. Руководство по иммуногистохимической даигностике опухолей человека. Под редакцией С.В.Петрова, Н^Г.Райхлина. //Казань, 2000.

15. Ставровская А.А. Клеточные механизмы множественной лекарственной устойчивости опухолевых клеток. //Биохимия 2000, 65: 112-126.

16. Трахтенберг А.Х., Самоходский Е.В. //Диагностика и лечение начального центрального рака легкого. Хирургия 1987,9: 54-59.

17. Харченко В.П., Кузьмин И В. Рак легкого. //М., Медицина, 1994.

18. Чумаков П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью (обзор). //Биохимия 2000, 65: 34-47.

19. Abu-Jawdeh GM., Faix JD., NilofT J., et al. Strong expression of vascular permeability factor (vascular endothelial growth factor) and its receptors in ovarian borderline and malignant neoplasms. //Lab invest 1996, 74. 1105-1115.

20. Allred DC., Harvey JM„ Berardo M„ Clark GM. //Mod Pathol 1998 11: 155-168.

21. Anseletti CA„ Lucchi M., G.Fontanini, A.Mussi, A.Chella, A.Ribechini,

22. S.Vignati, G.Bevilacqua. Prognostic significance of tumoral angiogenesis in completely resected late stage lung carcinoma (stage IIIA-N2). //Cancer 78 (1996) 409-415

23. Apolinario R.M., P.van der Valk, J.S.de Jong, W.Deville, J.van Ark

24. Ashkenazi A., Dixit V.M. Apoptosis control by death and decoy receptors. //Curr Opin Cell Biol 1999, 11: 255-260.

25. Ashkenazi A., Dixit VM. Death receptors: Signaling and modulation. //Science 1998, 281: 1305-1308.

26. Ben-Ezra JM., Komstein MJ., Grimes MM., (Crystal G. Small cell carcinomas of the lung express the Bcl-2 protein. //Am J Pathol 1994 5: 1036-1040.

27. Bouck N. Stellmach V., Hsu SC. How tumors become angiogenic. //Adv Cancer Res 1996,69: 135-174.

28. Brambilla E . Gazzeri S., Moro D., et al. Immunohistochemical study of p53 in human lung carcinomas. //Am J Pathol 1993 143: 199-220.

29. Brambilla E., Nagoescu A., S.Gazzeri, S.Lantuejoul, D.Moro,

30. C.Brambilla, J-L Coll. Apoptosis-related factors p53, Bcl-2, and Bax in neuroendocrine lung tumors. //Am. J. Pathol. 149(1996) 1941-1952)

31. Brown LF., Gaudi AJ., Schnitt SJ., et al. Vascular permeability factor/vascular endothelial growth factor and vascular stroma formation in neoplasia: insights from in situ hibridisation studies. //J Histochem Cytochem 1998,46: 569-575.

32. Bull HA., Brickell PM., Dowd PM. Scr-related protein tyrosine kinases are physically associated with the surface antigen CD36 in human dermal microvascular endothelial cells. //FEBS Lett 1994, 351: 41-44.

33. Caamano J., Ruggeri B., Momiki S., Sickler A., Zhang SY., Klein-Szanto AJP. Detection of p53 in primaty lung tumors and non-small-cell lung carcinoma cell lines. //Amer J Pathol 1991, 139: 839-845.

34. Chambers AF., Matrisian LM. Changing views of the role of matrix metalloproteinases in metastasis. //J Natl Cancer Inst 1997, 89: 12601270.

35. Chen Y, Sato M., Fujimura S., et al. Expression of Bcl-2, Bax and p53 proteins in cancerogenesis of squamous cell lung cancer. //Anticancer Res 1999,19: 1351-1356.

36. Cheng E.H.-Y., Kirsch D.G., R.J.Clem, R.Ravi, M.B.Kastan, S.Bedi,

37. K.Ucno, J. M. Hard wick Conversion of Bcl-2 to a Bax-like death effector by caspases. //Science 278 (1997) 1966-1968.

38. Chinnaiyan AM., Prasad U., Shankar S., Hamstra DA.,Shanaiah M., Chenevert TL., Ross BD., Rehemtulla A. //Proc Natl Acad Sci USA 2000, 97:1754-1759.

39. Costa A., R.Silvestrini, C.Mochen, C.Lequagle, P.Borrachi, A.Faranda, G.Vessecchia, G.Ravasi. P53 expression, DNA ploidy and S-phase cell fraction in operaleble loccally advanced non-small-cell lung cancer. //Br.J. Cancer. 73 (1996) 914-919

40. Coussens LM., Werb Z. Matrix metalloproteinases and the development of cancer. //Chem Biol 1996, 3: 895-904

41. Craft PS., AL.Harris. Clinical prognostic significance of tumourangiogenesis. //Ann.Oncol.5 (1994) 305-311.

42. Dameron K., O.Volpert, M.Tainski, N.Bouck. Control of angiogenesis in fibroblasts by p53 regulation of thrombospondin-l. //Science 265 (1994) 1582-1584.

43. Dameron KM., Volpert OV., Tainsky MA., Bouck N. Control of angiogenesis in fibroblasts by p53 regulation of thrombospondin-l. //Science 1994, 265: 1582-1584.

44. Dive C., Hickman JA. Drug-target interactions: only the first step in the commitment to a programmed cell death? //Br. J. Cancer 1991, 64: 192-196.

45. Dive C., Hickman JA. Drug-target interactions: only the first step in thecommitment to a programmed cell death? //Br. J. Cancer 64, 192-196 (1991).

46. Elstein K. H., et al. Factors affecting flow cytometric detection of apoptotic nuclei by DNA analysis. //Cytometry 21. 170-176 (1995)

47. Evan GE., Brown L„ Whyte M„ Harrington E. //Curr Opin Cell Biol 1995, 7. 825-834.

48. Fadok V. A., et al. Exposure of phosphotidylserin on the surface of apoptotic lymphocytes triggers specific recognition and removal by macrophages. //J. Immunol. 148. 2201-2216 (1992)

49. Fedi P., Tronick SR., Aaronson SA. Growth factors. In Cancer Medicine, JF. Holland, RC.Bast, DL.Morton, E.Frei, DW.Kufe, RR.Weichselbaum, eds. //(Baltimore, MD: Williams and Wilkins). 1997:41-65.

50. Finlay CA. P53 loss of function implications for the processes of immortalization and tumorigenesis VBioessays 1992, 14:557-560.

51. Foley KP, Eisenman RN. Two MAD tails: what the recent knockouts of Madl and Mxl tell us about the MYC/MAX/MAD network. //Biochem Biophys Acta 1999, 1423: M37-47.

52. Folkman J. Tumor angiogenesis. In Cancer Medicine, JF. Holland, RC.Bast, DL.Morton, E.Frei, DW.Kufe, RR.Weichselbaum, eds. //(Baltimore, MD: Williams and Wilkins). 1997: 181-204.

53. Fontanini G., D.Bigini, S.Vignati, F.Basolo, A.Mussi, M.Lucchi,

54. S.Chine, CA.Angeleti, AL.Harris, G.Bevilacqua. Microvessel count predicts metastatic disease and survival in non-small cell lung cancer. //J. Pathol. 177(1995)57-63.

55. Fontanini G., S.Vignati, D.Vigini, A.Mussi, M.Lucchi, C.A.Angeletti,

56. F.Basolo, G.Bevilacqua. Bcl-2 protein: a prognostic factor inversely correlated to p53 in non-small-cell lung cancer. //Br. J. Cancer 71 (1995) 1003-1007.

57. Fontanini G.,Vignati S., Lucchi M , et al. Neoangiogenesis and p53 protein in lung cancer: their prognostic role and their relation with vascular endothelial growth factor (VEGF) expression. //Br J Cancer 1997, 75: 1295-1301.

58. Fraizier W., C.Prater, D.Jaye, M. Kösfeld. Interactions of thrombospondin with cells. Thrombospondins: biological function for structural motifs. In: J.Lahav (ed.), //Thrombospondin. CRC Press, Boca Raton, FL pp. 91-109 (1993)

59. Fukushige S., K.Matsubara, M-C.Yoshida et al. Localization of a novel v-erbB related gene, c-erbB-2, on human chromosome 17 and its amplification in a gastric cancer cell line. //Mol.Cell. Biol. 6 (1986) 955-958.

60. Fulda S.,et al. The CD95 (APO-l/Fas) system mediates drug-induced apoptosis in neuroblastoma cells. //Cancer Res. 57, 3823-3829 (1997)

61. G.Casey, M.E.Lopez, J.C.Ramos, S.J.Plummer, M.J.Arboleda,

62. M.Shaughnessy, B.Karl an, D.J.Slamon. DNA sequence analysis of exons 2 through 11 and immunohistochemical staining are required tod iect all known p53 alterations in human malignancies. //Oncogene 13 (1996) 1971-1981.

63. Gasparini G., Pozza F , Harris AL. Evaluating the usefulness of new prognostic and predictive indicators in node-negative breast cancer patients. Hi Natl Cancer Inst 1993, 85: 1206-1219.

64. Gazzeri S., Brambilla E., Caron de Fromentel C., Gouyer V., Moro D., Perron P., Berger F., Brambilla C. p53 genetic abnormalities and myc activation in human lung carcinoma. //Int J Cancer 1994, 58: 24-32.

65. Giatromanolaki A., M.Kuokuorakis, K.O'Byme, S.Fox, R.Whitehouse,

66. D.Talbot, AL.Harris, KC.Gatter. Angiogenesis is a significant prognostic marker in operable non-small cell lung cancer. //J. Pathol. 179(1995) 80-88.

67. Gibson SB., Oyer R., Spalding AC., Anderson SM., Johnson GL. //Mol Cell Biol 2000, 20: 205-212.

68. Golstein P. //Curr. Biol. 1997. 7: 27-59

69. Gorczyca W. et al. The cell cycle related differences in susceptibility of HL-60 cells to apoptosis induced by various antitumor agents. //Cancer Res. 53.3186-3192 (1993)

70. Graziano S. Non-small cell lung cancer: clinical value of new biologicalpredictors. //Lung Cancer 17 (1997) 37-58.

71. Green DR, Reed JC. Mitochondria and apoptosis. //Science 1998, 281:1309-1312.

72. Greenblatt M S., W.P.Bennett, MK.Hollstein, C.C.Harris. Mutations inthe p53 tumor suppressor gene: clues to cancer etiology and molecular pathogenesis. //Cancer Res. 54 (1994)4855-4878.

73. Hayflick L. Mortality and immortality at the cellular level. A review. //Biochemistry 1997, 62: 1180-1190.

74. Higashiyama M., O.Doi, K.kodama, H.Yokouchi, S.Nakamori,

75. R.Tateishi. bcl-2 oncoprotein in surgically resected nonsmall cell cancer: possibly favorable prognostic factor in association with low incidence of distant metastasis. //J.Surg.Oncol. 64 (1997) 48-54.

76. Hiyoshi H., Matsuno y., Kato H., Shimasato Y., Hirohashi S. Clinicopathological significance of nuclear accumulation of tumor-suppressor gene p53 product in primary lung cancer. //Jap J Cancer Res 1992, 83: 101-106.

77. Iggo R., Gatter K., Bartek J., Lane D., Harris AL. Increased expression o mutant forms of p53 oncogene in phimary lung cancer. //Lancet 1990, 335: 657-659.

78. Itoh N. et al. The polypeptide encoded by the cDNA for human cell surface antigen Fas can mediate apoptosis. //Cell 66, 233-243 (1991)

79. Itoh N„ Nagata S. A novel protein domain required for apoptosis: mutational analysis of human Fas antigen. Hi. Biol. Chem. 268, 10932-10937(1993)

80. Jiang S.X., T.Kameya, Y.Sato, N.Yanase, H.Yoshimura, T.Kodama.

81. Bcl-2 protein expression in lung cancer and close correlation with neuroendocrine differentiation. //Am.J.Pathol. 148 (1996) 837-846.

82. Jiang S.X., Y.Sato, S.Kuwao, T.Kameya. Expression of bcl-2 oncogeneprotein is prevalent in small cell carcinomas. //J Pathol 177 (1995) 135-138.

83. Johnson JP. Cell adhesion molecules of the immunoglobin supergene family and their role in malignant transformation and progression of metastatic disease. //Cancer Metastasis Rev 1991, 10: 11-22.

84. Kaiser U., M.Schilli, U.Haag, K.Neumann, H.Kreipe, E.Kogan,

85. K.Havemann. Expression of bcl-2-protein in small cell lung cancer. //Lung Cancer 15 (1996) 31-40.

86. Kalra R., AM.Jones, J.Kirk, GE.Adams, U.Stratford. The effect ofhipoxia on acquired drug resistance and response to epidermal growth factor in Chinese lung fibroblasts and human breast cancer cells in vivo. //Int J. Cancer 54 (1993) 650-655.

87. Kawai T., M.Suzuci, S.Kono, N.Shinomiya, M.,Rocutanda, K.Takagi, T.Ogata, S.Tamai. Proliferating cell nuclear antigen and Ki-67 in lung carcinoma. //Cancer 74 (1994) 2468-2475.

88. Kawai T., Suzuki M., Kono S., Shinomiya N., Rokutana m., Takagi K, Ogata T., Tamai S. Proliferating cell nuclear antigen and Ki-67 in lung carcinoma. Correlation with DNA flow cytometric analysis. //Cancer 1994, 74. 2468-2475.

89. Kawasaki M., Y.Nakanishi, J.Yatsunami, K.Takayama, S.Ochiai, P.Xinhai, K.Kuwano, N.Hara. p53 immunostaining predictive chemosensitivity in non-small cell lung cancer: a preliminary report. //Cancer J. Sci. Am. 4 (1996) 217.

90. Kawasaki M., Y.Nakanishi, J.Yatsunami, K.Takayama, S.Ochiai, P.Xinhai, K.Kuwano, N.Hara. p53 immunostaining predictive chemosensitivity in non-small cell lung cancer: a preliminary report. //Cancer J. Sci. Am. 4 (1996) 217.

91. Kawasaki M., Y.Nakanishi, K.Kuwano, K.Takayama, C.Kiyohara, N.Hara. Immunohistohemically detected p53 and P-glycoprotein predict the response to chemotherapy in lung cancer. //Eur.J.Cancer 9 (1998) 1352-1357.

92. Kern J A., R J.C.Slebos, B.Top, S.Rodenhuis, D.Ladger, R.A.Robinson,

93. D.Weiner, D.A.Schwartz. C-erbB-2 expression and codon 12 K-ras mutations both prdict shortened survival for patients with pulmonary adenocarcinomas. //J.Clin.Invest. 93 (1994) 516-520.

94. Keurbitz SJ., BS.Plunkett, WV.Walsh, MB.Kastan. Wild-type p53 is a cell cycle check-point determinant following irradiation. //Proc. Natl.Acad. Sei. USA 89 (1992) 7492-7496.

95. Kischkel F., et al. Cytotoxicity-dependent APO-l(Fas/CD95)-associated proteins from a death-inducing signaling complex (DISC) with the receptor. //EMBO J. 14, 5579-5588 (1995)

96. Kishimoto Y., Murakami Y., Shiraishi M., Hayashi K., Sekiya T. Aberrations of the p53 tumor-suppressor gene in human non-small-cell carcinomas of the lung. //Cancer Res 1992, 53 : 4799-4804.

97. Kitagawa Y., F.Wong, P.Lo, M.Elliott, L.M.Verbürgt, J.C.Hogg, M.Daya. Overexpression of Bcl-2 and mutations in p53 and K-ras in resected human non-small cell lung cancers. //Am.J.Respir.Cell.Mol.Biol. 15 (1996) 45-54.

98. Koomagi R., Volm M. Expression of Fas (CD95/APO-1) and Fas ligand in lung cancer, its prognostic and predictive relevance. //Int J Cancer 1999, 84(3): 239-243.

99. Koopman G., et al. AnnexinV for flow cytometric detection of phosphatidylserine expression of B cell undergoing apoptosis. //Blood. 84. 1415-1420(1994)

100. Kubota Y„ RE.Petras, KA.Easley, TW.Bauer, RR.Tubbs, VW.Fazio. Ki-67-determined growth fraction versus standard staining and grading parameters in colorectal carcinoma: a multivariate analysis. //Cancer 70(1992) 2602-2609.

101. Lanny J., S.Lowe, E.Licitra, J.Liu, T.Jacks. p53-independent apoptosis induced by paclitaxel through an indirect mechanism. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94 (1997) 9679-9683.

102. Leech SH., Olie RA., Gautschi O , et al. Induction of apoptosis in lung-cancer cells following bcl-xL antisense treatment. //Int J Cancer 2000, 15:570-576.

103. Leedy DA., DR.Trune, JD. Kronz, N.Weidner, JI. Cohen. Tumorangiogenesis< the p53 antigen and cervical metastasis in squamous carcinoma. //Otolaringol. Head Neck Surg. 111 (1994) 417-422.

104. Levine A.J. p53, the cellular gatekeeper for growth and division. //Cell88(1997) 323-331.

105. Lotem J., Sachs L. Control of apoptosis in hematopoiesis and leukemia by cytokines, tumor suppressor and oncogenes. //Leukemia 1996, 10: 925-931.

106. Macchiarini P., G.Fontanini, MJ.Hardin, F.Squartini, CA.Angeletti.

107. Relation of neovascularisation to metastasis of small cell lung cancer. //Lancet 340(1992) 145-146.

108. Maclusky M, Baillie R, Chandrachud LM., Pendelton N., Schor AM. High levels of apoprosis are associated with impruved survival in non-small cell lung cancer. //Anticancer Res. 2000, 20: 2123-2128.

109. Mattern J., Koomagi R., Volm M. Association of vascular endothelial growth factor expression with intratumoral microvessel density and tumour cell proliferation in human epidermoid lung carcinoma. //Br.J.Cancer 73 (1996) 931-934.

110. Mattern J., Koomagi R., Volm M. Coexpression of VEGF and bFGF in human epidermoid lung carcinoma is associated with increase vessel density. //Anticancer Res. 17 (1997) 2249-2252.

111. McLaren R., Kuzu I., Dunnill M., Harris A., Lane D., Gatter KC. The relationship of p53 immunostaining to survival in carcinoma of the lung. //Br J Cancer 1992,66. 735-738.

112. Mekori Y. A., et al. IL-3 dependent murine mast cells undergo apoptosis on removal of 11-3. Prevention of apoptosis by c-kit ligand //J. Immunol. 151. 3775-3784(1993)

113. Micheau O., E.Solary, A.Hammann, F.Martin, M.T.Dimanche-Boitrel. Sensitization of cancer cells treated with cytotoxic drugs to fas-mediated cytotoxicity. //J.Natl.Cancer Inst. 89/11 (1997) 783-789

114. Micheau O., Solary E., Hammann A., Martin F., Dimanche-Boitrel M.T. Sensitization of cancer cells treated with cytotoxic drugs to fasmediated cytotoxicity. //J.Natl.Cancer Inst. 1997, 89/11: 783-789.

115. Mitsudomi T., Oyama T., Kusano T., Nakanishi R., Shirakusa T. Mutations of the p53 gene as predictor of poor prognosis in patients with non-small-cell lung cancer. Hi Natl Cancer Inst 1993, 85: 20182023.

116. Ohta Y., Y.Watanabe, S.Murakami, M.Oda, Y.Hayashi, A.Nonomura, Y.Endo, T.Sasaki. Vascular endothelial growth factor and lymph node metastisis in primary lung cancer. //Br.J.Cancer 76 (1997) 1041-1045.

117. Oshika Y., M.Nakamura, T.Tokunaga, Y.Fukushima, Y.Abe, Y.Ozeki, H.Tamaoki, Y.Ueyama. Multidrug resistance-associated protein and mutant p53 protein expression in non-small cell lung cancer. //Mod.Pathol. 11 (1998) 1059-1063.

118. Passlick B., Izbicki JR., Riethmuller G., et al. P53 in non-small cell lung cancer. //J Natl Cancer Inst 1994 86: 801-802.

119. Pepper MS., N.Ferrara, L.Orci, R.Montesano. Potent synergism between vascular endothelial growth factor and basic fibroblast growth factor in the induction of angiogenesis in vitro. //Biochem.Biophys.Res. Commun. 189 (1992) 824-831.

120. Perdomo JA., Y.Naomoto, M.Haisa, T.Fujiwara, M.Hamada, Y.Yasuoka, N.Tanaka. In vivo influence of p53 status on proliferation and chemoradiosensitivity in non-small-cell lung cancer. //J. Cancer Res. Clin. Oncol. 124 (1998) 10-18.

121. Pezzella F., H.Turley, I.Kuzu, M.F.Tungekar, M.S.Dunnil, C.B.Pierce, A.Harris, K.C.Gatter, D.Y.Mason, bcl-2 protein in non-small-cell lung carcinoma. //New Engl.J.Med. 329 (1993) 690-694.

122. Pittu RM., Marsters SA., Ruppert S., Donahue CJ., Moore A., Ashkenazi A. //J Biol Chem 1996, 271: 12687-12690.

123. Quinlan DC., Davidson AG., Summers CL„ Warden HE., Doshi HM. Accumulation of p53 protein correpates with a poor prognosis in human lung cancer. //Cancer Res 1992, 52. 4828-4831.

124. Rachwal W.J., P.F.Bongiomo, M.B.Orringer, R.l.Whyte, S P Ethier, D.G.Beer. Expression and activation of erbB-2 and epidermal growth factor receptor in lung adenocarcinomas. //Br.J.Cancer 72 (1995) 5664.

125. Rice GC., V.Ling, RT.Schimke. Frequencies of independent and simultaneous selection of Chines hamster cells for methotrexate and doxorubicin (adriamicin) resistance. //Proc. Natl. Acad Sci. USA 84 (1987) 9261-9264.

126. Scheurle D., Jahanzeb M., Aronsohn RS., Narayanan R. Her-2/neu expression in archival cell lung carcinomas using FDA-approved HercepTest. //Anticancer Res 2000, 20:3B 2091-2096.

127. Schneider P.M., M.-C.Hung, S.M.Chiocca, J.Manning, X.Zhao, K.Fang, J.A.Roth. Differential expression of the c-erb B-2 gene in human small cell and non-small cell lung cancer. //Cancer Res. 49 (1989) 4968-4971

128. Schwarting R. Little missed markers and Ki-67. //Lab. Invest. 68 (1993) 597-599.

129. Shi D„ He G„ Cao S„ Pan W„ H.Z.Zhang, D.Yu, M.C.Hung. Overexpression of the c-erb B-2/neu-encoded p 185 protein in primary lung cancer. //Mol.Carcinogen. 5 (1992) 213-218.

130. Shimasato Y. Pathology : Revised classification of epithelial tumors of the lung (WHO/IASLC). //In: Textbook of Lung Cancer. H.H.Hansen, ed. London, England, Martin Dunnitz, 2000, 125-140.

131. Simony J., J-L. Pujol, M.Radal, E.Ursule, F-B.Michel, H.Pujol. In situ evaluation of growth fraction determined by monoclonal antibody Ki-67 and ploidy in surgically resected non-small cell lung cancers. //Cancer Res. 30 (1990) 4382-4387.

132. Simony J., Pujol J-L., M.Radal, E.Ursule, F-B.Michel, H.Pujol. In situ evaluation of growth fraction determined by monoclonal antibody Ki-67 and ploidy in surgically resected non-small cell lung cancers. //Cancer Res. 50 (1990) 4382-4387.

133. Solary E., Micheau O., Dimanche-Boitrel M.T. Role of the Fas/Fas-L system in the immune response to tumors and the resistance to cytotoxic drugs. //Bulletin du Cancer 1998, 85/8: 685-694.

134. Sporm MB. The war on cancer.// Lancet 1996, 347: 1377-1381.

135. Suzuki H., Takahashi T., Kurioshi T., Suyama M., Ariyoshi Y., Ueda R. p53 mutations in non-small-call lung cancer in Japan: association between mutations and smoking. //Cancer Res 1992, 52: 734-736.

136. Takahashi T. et al. Swapping between Fas and G-CSF receptor. Hi. Biol. Chem., in press.

137. Takanami 1., T.lmamura, T.Hashizume, K.Kikachi, Y.Yamamoto, T.Yamamoto, S.Kodaira. //Immunohistochemical detection of basic fibroblast growth factor as prognostic indicator in pulmonary adenocarcinoma. Jpn.J.Clin.Oncol. 26 (1997) 293-297.

138. Tanaka F., Kawano Y., Li M., et al. Prognostic significance of apoptotic index in completely resected non-small cell lung cancer. //J Clin Oncol 1999, 17: 2728-2736.

139. Tateishi M., T.Ishida, T.Mitsudomi, S.Kaneko, K.Sugimachi. Prognostic value of c-erb B-2 protein expression in human lungadenocarcinoma and squamous cell carcinoma. //Eur.J.Cancer 27 (1991) 1372-1375.

140. Teitz T., Wei T., Valentine MB., Vanin EF., Grenet J., Valentine VA., Behm FG„ Look AT., Lahti AT., Kidd VJ. //Nature Med 2000, 6: 529535.

141. Tolsma S., O.Volpert, D.Good, W.Frazier, P.Polverini, N.Bouck. Peptides from two separate domains of the matrix protein thrombospondin-1 have anti-angiogenic activity. //J. Cell Biol. 122 (1993)497-511.

142. Top B., Mooi WJ, klaver SG„ Boerrigter L., Wisman P., Elbers H., Visser S., Rodenhuis S. Comparative analysis of p53 gene mutations and protein accumulation in human non-small-call lung cancer, //lnt J Cancer 1995, 64: 83-91.

143. Tugekar MF, KC.Gatter, MS.Dunnill, DY Mason. Ki-67 immunostaining and survival in operable lung cancer. //Histopathology 19(1991)545-550.

144. Volm M , Koomagi R. Relevance of proliferative and pro-apoptotic factors in non-small-cell lung cancer for patients survival. //Br J Cancer 2000, 82(10): 1747-1754.

145. Volm M., Koomagi R. The implication of proliferation and apoptosis for lung cancer metastasis. //Oncol rep 1999, 6(2). 373-376.

146. Volm M., R.Koomagi, J.Mattern, G.Stammler. Prognostic value basic fibroblast growth factor and its receptor (FGFR-1) in patients with non-small cell lung carcinomas. //Eur. I. Cancer 33 (1997) 691-693.

147. Volm M., R.Koomagi, J.Mattern. Prognostic value of vascular endothelial growth factor and its receptor Fit-1 in squamous cell lung cancer. //Int.J.Cancer 74 (1997) 64-68.

148. Volm M., R.Koomagi. The implication of proliferation and apoptosis for lung cancer metastsisis. //Oncol. Rep. 2 (1999) 373-376

149. Walczak H„ Miller RE., Ariail K„ Gliniak B„ Griffith TS , Kubin M„ Chin W., Jones J., et al. //Nature Med 1999, 5: 157-163.

150. Walker C., Robertson L., Myskow M., Dixon G. Expression of the Bcl-2 protein in normal and displastic bronchial epitelium and lung carcinomas. //Br J Cancer 1995 1: 164- 169.

151. Weidner N. Intratumor microvessel density as a prognostic factor in cancer. //Am. J. Pathol. 147 (1995) 9-19.

152. Weidner N. Tumour angiogenesis: review of current applications in tumour prognostication. //Semin. Diagn. Pathol. 10 (1993) 302-313.

153. Weiner D.B., Nordberg J., Robinson R„ Nowell P C., A.Gazdar, M.I.Greene, W.V.Williams, J.A.Cohen, J.A.Kern. Expression of the neu gene-encoded protein (PISS1™) in human non-small cell carcinomas of the lung. //Cancer Res. 50 (1990) 421-425.

154. Yamaziki K., S.Abe, H.Takekawa, N.Sukoh, N.Watanabe, S.Ogura, I.Nakajima, H.Isobe, K.Inoue, Y Kawakami Tumor angiogenesis in human lung carcinoma. //Cancer 74 (1994) 2245-2250.

155. Yu D , Wang S.-S., Dulski K M., Tsai C.-M., G.L.Nicolson, M.-C.Hung. c-erbB-2/neu overexpression enhances metastatic potential of human lung cancer cells by induction of metastasis-associated properties. //Cancer Res.54 (1994) 3260-3266.

156. Zabrenetzky V., C.Harris, P.Steeg, D.Roberts. Expression of the extracellular matrix molecule thrombospondin inversely correlates with malignant progression in melanoma, lung and breast carcinoma cell lines. //Int.J.Cancer 59 (1994) 191-195.0

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.