Экспрессия опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 и XIAP у больных множественной миеломой в процессе интенсивной терапии и аутотрансплантации тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат медицинских наук Гапонова, Татьяна Владимировна

• Гапонова, Татьяна Владимировна
• кандидат медицинских наук
• 2011

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Гапонова, Татьяна Владимировна

Список используемых сокращений.

Введение.

Глава 1. Обзор литературы.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика больных.

2.2.Схемы химиотерапии, проводимой у больных, включенных в исследование.

2.3.Критерии эффективности проводимой терапии.

2.4. Методы исследования.

Глава 3. Экспрессия опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 и XIAP у первичных больных множественной миеломой.

3.1 Экспрессия генов PRAME, WT1 и XIAP у больных множественной миеломой до начала лечения.

3.2 Взаимозависимость экспрессии генов PRAME, WT1 и XIAP с клинико-лабораторными характеристиками ММ.

Глава 4. Экспрессия опухолеассоциированных генов у больных ММ на различных этапах интенсивной терапии.

4.1. Влияние экспрессии генов PRAME, WT1 и XIAP на эффективность индукционной терапии по программе VAD.

4.2. Взаимосвязь экспрессии генов PRAME, WT1, XIAP и противоопухолевого ответа на бортезомиб, применявшейся в качестве препарата первой линии терапии.

4.3. Взаимосвязь экспрессии генов PRAME, WT1, XIАР и противоопухолевого ответа на бортезомиб, применявшийся в качестве препарата второй линии терапии.

4.4. Сопоставление изменений экспрессии опухолеассоциированных генов на фоне различных схем индукционной терапии.

4.5. Изменение уровня экспрессии генов PRAA4E, WT1 и XIAP в результате высокодозной химиотерапии мелфаланом с последующей трансплантацией аутологичных стволовых клеток.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 и XIAP у больных множественной миеломой в процессе интенсивной терапии и аутотрансплантации»

Актуальность проблемы.

Внедрение в клиническую практику программ высокодозной химиотерапии множественной миеломы (ММ) в конце 80-х гг XX века позволило значительно оптимизировать результаты лечения. Так, интенсивная индукция на ранних этапах лечения с последующей высокодозной консолидацией, включающей трансплантацию аутологичных гемопоэтических стволовых клеток (ауто ТГСК), обеспечивает достижение не только клинико-гематологической, но и иммунохимической ремиссии у значительного числа пациентов. Полные ремиссии (ПР) достигаются у 2475% больных ММ, получающих соответствующую терапию, достаточный опухолевый ответ, включающий полные и частичные ремиссии - у 75- 95%. При этом медиана сохранения стойкого противоопухолевого эффекта после аутотрансплантации составляет 24-35 мес., а 5-летний период без признаков прогрессии заболевания переживают от 10 до 30% больных.[21]

Следующий, качественно новый этап в лечении ММ обусловлен внедрением в клиническую практику таких новых лекарственных препаратов, как ингибиторы протеасом (бортезомиб) и иммуномодуляторы (талидомид, леналидомид). Сочетание препаратов, воздействующих на молекулярные механизмы миеломной клетки, с высокодозной химиотерапией позволяет достичь дальнейшего улучшения результатов лечения. Так, применение высокодозного протокола по программе «Тотальная терапия — III» с включением в схему индукции бортезомиба и талидомида/леналидамида позволило группе исследователей из Университетского госпиталя Арканзаса добиться 56% безрецидивной выживаемости в течение 2-х лет после завершения лечения. Тем не менее, ММ является пока еще биологически неизлечимым заболеванием. Резистентность опухолевого процесса к адекватному терапевтическому воздействию, некурабельный рецидив болезни, выход опухоли из-под химиотерапевтического контроля - все это лежит в основе так называемых неудач в лечении.

В основе опухолевого роста и формирования механизмов лекарственной резистентности, как правило, лежит нестабильность генома опухоли. [37] Последовательность случайных генетических событий в опухолевых клетках, в совокупности приводящая к нарушению процессов дифференцировки клеток и бесконтрольному делению вследствие блокирования апоптоза, обусловливает прогрессирующее течение опухолевого заболевания. В регуляции механизма программированной гибели клеток принимает участие большое число как апоптотических, так и антиапоптотических белков и, в конечном счете, их соотношение предопределяет: будет клетка жить или погибнет. [100]

В начале 1990-х годов в злокачественно трансформированных гемопоэтических клетках была обнаружена' аномальная экспрессия ряда генов, получивших общее название С/Т (cancer/testis), так как в норме их транскрипция присуща главным образом клеткам семенников [157]. Одним из представителей данного семейства, часто экспрессирующимся при онкогематологических заболеваниях, является ген PRAME, обладающий антиапоптотическим действием и являющийся устойчивым коингибитором ядерных рецепторов семейства RAR.

Кроме того, известен целый ряд так называемых опухолеассоциированных генов, принимающих участие в- механизмах регулирования клеточного цикла и клеточной дифференцировки. Среди них отмечен ген WT1, вследствие мутации приобретающий свойства доминантного онкогена.

Особый интерес представляет также ген-ингибитор апоптоза XIAP, являющийся наиболее мощным ингибитором каспаз из всего семейства ингибиторов апоптоза IAP. Экспрессия XIАР определяется во всех клетках здоровых людей, гиперэкспрессия гена часто обнаруживается в опухолевых клетках [59,144,150]:

В течение последнего времени был опубликован ряд работ, показавших возможность использования указанных генов в качестве маркеров опухолевого клона при острых лейкозах. В некоторых исследованиях было также обнаружено, что гиперэкспрессия PRAME, WT1 и XI.АР непосредственно связана с резистентностью опухоли к проводимой химиотерапии. Учитывая достаточно частую экспрессию указанных генов при ММ (от 30% до 60% по литературным данным), несомненный интерес представляет изучение роли указанных генов в формировании опухолевого фенотипа и их возможное прогностическое значение в определении особенностей течения заболевания и чувствительности ММ к проводимому лечению.

Цель исследования.

Определить экспрессию генов PRAME, WT1 и ШАР у больных множественной миеломой в дебюте заболевания и в процессе интенсивной терапии как факторов прогноза течения заболевания.

Задачи:

• Изучить экспрессию PRAME, WT1 и XIAP у первичных больных множественной миеломой.

• Проанализировать изменение экспрессии генов на фоне индукционной химиотерапии по схеме VAD и терапии биологическими препаратами направленного действия (бортезомиб).

• Проанализировать экспрессию генов на фоне высокодозной консолидации с последующей аутотрансплантацией.

• Выявить закономерности экспрессии генов PRAME, WT1 и XIАР, определяющие результаты лечения цитостатическими и биологическими препаратами направленного действия (ингибитор протеасом).

• Определить параметры экспрессии опухолеассоциированных генов, влияющие на безрецидивную выживаемость после аутотрансплантации.

Научная новизна.

• Установлена частота экспрессии и гиперэкспрессии опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 и ШАР у первичных больных множественной миеломой.

• Выявлена корреляция между выраженностью экспрессии опухолеассоциированных генов и достижением ответа на индукционную терапию.

• Выявлено снижение уровней экспрессии генов PRAME и WT1 по мере уменьшения опухолевой массы в результате индукционной полихимиотерапии.

• Обнаружено повышение уровня экспрессии гена-ингибитора апоптоза XIAP у больных множественной миеломой во время проведения индукционной химиотерапии по схеме VAD, в большей степени у пациентов с резистентной формой заболеваниям

• Отмечено, что исходная гиперэкспрессия ЖАР не является фактором неблагоприятного прогноза в отношении проведения индукционной терапии бортезомибом, в то время как при стандартной химиотерапии гиперэкспрессия этого гена коррелирует со снижением частоты общего ответа на лечение.

• Установлена возможность использования показателя экспрессии генов PRAME и WT1 для мониторинга минимальной остаточной болезни у больных множественной миеломой.

Научно-практическая ценность работы.

• Разработаны методы детекции экспрессии опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 и ЖАР с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени.

• Показана целесообразность использования показателей экспрессии генов PRAME и WT в качестве молекулярных маркеров опухоли у больных множественной миеломой.

• Определено, что исходная гиперэкспрессия генов PRAME, WT и XIAP, является фактором, свидетельствующим о целесообразности проведения индукционной терапии препаратом бортезомиб.

Положения, выносимые на защиту.

1. У больных множественной миеломой в дебюте заболевания экспрессия опухолеассоциированных генов PRAME, WT1 выявляется более, чем в 60% и 20% случаев, соответственно.

2. Ген-ингибитор апоптоза XIAP гиперэкспрессируется более чем у 70% первичных больных множественной миеломой.

3. Гиперэкспрессия генов PRAME, WT1 и XIAP, выявленная на момент диагностики заболевания, не коррелирует с клинико-лабораторными характеристиками, определяющими стадию заболевания.

4. Выраженный противоопухолевый ответ, достигнутый в результате индукционной терапии, сопровождается снижением уровня экспрессии опухолеассоциированных генов.

5. Опухолеассоциированные гены PRAME, WT1 могут быть использованы в качестве маркеров минимальной остаточной болезни у больных множественной миеломой.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Гапонова, Татьяна Владимировна

Выводы

1. У первичных больных ММ экспрессия опухолассоциированных генов PRAME и WT1 выявляется в 68,9% и 24,4% случаев (соответственно), при этом частота гиперэкспрессии составляет 35,5% и 24,4%. Гиперэкспрессия гена-ингибитора апоптоза XIАР на момент диагностики обнаружена у 75,5% больных.

2. Показано, что; значимый противоопухолевый ответ на индукционную и высокодозную консолидирующую терапию сопровождается снижением уровня экспрессии гена PRAME.

3. Исходная гиперэкспрессия гена PRAME коррелирует с резистентностью к химиотерапии по схеме VAD и терапии препаратом бортезомиб.

4. Исходная гиперэкспрессии гена XIAP коррелирует с резистентностью к VAD-химиогерапии, однако;, не обуславливает резистентность к терапии бортезомибом.

5. После выполнения высокодозной консолидации и трансплантации аутологичных стволовых клеток экспрессия гена PRAME у 80% больных отсутствовала или не превышала нормальных значений. У 20% больных сохранялась гиперэкспрессия гена PRAME. Гиперэкспрессия гена PRAME коррелировала с сокращением срока, безрецидивной выживаемости (медиана 11,5 месяцев против 26 месяцев).,

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Гапонова, Татьяна Владимировна, 2011 год

1. Абелев Г.И. механизмы дифференцировки и опухолевый рост//Биохимия.-2000.-С.127-140.

2. Абраменко И. В., Белоус Н. И., Мисюрин A.B. Экспрессия гена PRAME при миеломной болезни/ЛГерапевтический архив.- 2004.-Ж7-С.35- 40.

3. Андреева Н.Е. Вялотекущая множественная миелома/ЯТроблемы гематологии.-1983.-№4.-С.55-58.

4. Барлоги Б., Эпстайн Дж., Сельваньягам П., Алексаниан Р. Плазмоклеточная миелома II. Новое в диагностике и лечении заболевания//Гематология и трансфузиология.-1992.-№7-8.-С.ЗЗ-39.

5. Барышников А.Ю. Программированная клеточная смерть (апоптоз)//Клиническая онкогематология под редакцией! М.А.Волковой.-2001 .-С.34-41.

6. Воробьев А.И. Общий патогенез гемобластозов//Руководство по гематологии. Под редакцией академика А.И. Воробьева-2007.-Т.1.-С.147- 150.

7. Жеребцова В.А., Сурин B.JL, Менделеева Л.П. Молекулярный мониторинг МРБ при ММ//Проблемы гематологии и переливания крови.-2006.-С.2.

8. Козинец Г.И., Мокеева P.A., Касаткина В.В.и соавт. Пролиферация плазматических клеток при множественной миеломеавторадиографическое исследование)//Гематология итрансфузиология.-1986.-Т.31 .-№7.-С. 13—17.

9. Ю.Кузнецов С.В. Апоптоз и некоторые механизмы его регуляции// Проблемы гематологии.-1998.-№2.-С.22-27.

10. Татосян A.F., Зуева Э.Ш. Механизмы активации онкогенов// Клиническая гематология под редакцией М.А.Волковой.-2001.-Т. 2.-С.22-28.

11. Alt F.W., Oltz Е.М., Young F., et al: VGJ recombination. Immunol. Today 1992; 13: 306-313.

12. Anderson K.C. Targeted therapy for multiple myeloma// Semin.Hematol.-2001.-Vol.38.-P.286—294.

13. Andrade VC, Vettore A, Felix R ete al. Prognostic impact of cancer/testis antigen expression in advanced stage multiple myeloma patients//Cancer Immunity.-2008.-Vol.8.-P.2-9.

14. Attal M., Harousseau J.L., Stoppa A-M. A prospective, randomized trial of autologous bone marrow transplantation and chemotherapy in multiple myeloma.//N. Engl. J. Med.-1996.-Vol.335.-P.9r-97.

15. Baird P.N., Simmons P.J. Expression-of the Wilms tumor gene (WT1) in normal hemopoiesis//Exp. Hematol.-1997.Vol 25.-P312-320.

16. Bakkus M.H., Heirman C., Van Riet Г., et al. Evidence that multiple myeloma Ig heavy chain VDJ genes contain somatic mutations but show no intraclonal variation//Blood.-1992.-Vol.80.-P.2326-2335.

17. Bakkus M.H.C., Van-Rirt I. Evidence that the clonogenic cell in multiple myeloma originates from pre-switched but somatically mutated B-cell//Br. J. haematol.-1994.-Vol.87.-P.68-74.

18. Barlogie B., Alexanian R., Dicke K.A., et al. High-dose chemoradiotherpy and autologous bone marrow transplantation for resistans multiple myeloma//Blood.-1987.-70.-P.869-872.

19. Barl9gie B., Jagannath S., Desican K.R. Total Therapy with Tandem Transplants for Newly Diagnsed Multiple Myeloma/ZBlood.-1999.-93 .-P.55-65.

20. Barlogie B., Shaughnessy J., Tricot G., et al. Treatment of multiple myeloma//Blood.-2004.-103.-P.20-32.

21. Barragan E., Cervera J., Bolufer P., et al. Prognostic implications of Wilms tumor gene (WT1) expression in-patients with de novo acute myeloid leukemia//Haematologica.-2004.-89.-P.926-933.

22. Bataille R., BoccadoroM., Klein B. et al. C-reactive protein and beta2 microglobulin produce a sample and powerful myeloma staging system//Blood.-1992>80.-P.733—737.

23. Bataille R., Durie B.G.M., Grenier J. et al. Prognostic factors and' staging in multiple myeloma: A reappraisal//.!. Clin: Oncol.-1986.-4.-P.80-87.

24. Bataille R., Durie B.G.M., Grenier J. Serum beta 2 microglobulin and survival duration in multiple myeloma: A simple reliable marker for staging.//Br. J. Haematol.-1983.-55.-P.439—447.

25. Bataille R., Lourdan M., Zhang X. et al. Serum levels of interleukin-6, a potent myeloma cell growth factor, as a reflect of disease severity plasma cell dyscrasia//J. Clin. Invest.-1984.-84.-P.2008-2011.

26. Beauvais D.M., Burbach B.J., Rapraeger AC. The syndecan-1 ectodomain regulates {alpha}v{beta}3 integrin activity in human mammary carcinoma cells.//J. Cell. Biol.-2004.-167.-P. 171-181.

27. Bergsagel D.L., Wong О., Bergsagel P.L. Benzene and multiple myeloma: appraisal of scientific evidence/ZBlood.-1999.-94.-1174-1182

28. Bernfield M., Gotte M., Park P.W. et al. Functions of cell surface heparan sulfate proteoglycans//Ann. Rev. Biochem.-1999.-68.-P.729-77.

29. BGM Durie, J-L Harousseau, JS Miguel et all. Международные единые критерии ответа при множественной миеломе/ZLeukemia!-2006.-20.-Р.1467-1473.

30. Blade J., Samson D., Reece D., et al. Criteria for evaluating disease response and progression in patients with multiple myeloma treated by high-dose therapy and haematopoietic stem cell transplantation//Br. J. Haematol.-1998.-l 02.-P.1115-1123.

31. Borset M., Hjorth-Hansen H., Seidel C. et al. Hepatocyte growth factor and its receptor c-met in multiple myeloma//Blood.-1996.-88.-P.3998-4004.

32. Borset M., Waage A., Brekke O.L., Heiseth E. TNF and IL-6 are. potent growth factors for OH-2, a novel human myeloma cell line.//Eur.J:Haematoh-1994.-53 :-P.31-37.

33. Boyapati A., Kanbe E., Zhang D.E. p53 alterations in myeloid leukemia//Acta Haematol:-2004.-111 .-P. 100-106.

34. Вгеппе A.-T., Baade Ro Т., Waage A. et ah Interleukin'21 is a growth and survival factor for human myeloma cells//Blood.-2002.-99.-P.3756—3762.

35. Burington B:, Barlogie В., Zhan F., et al. Tumor cell Gene expression changes following Short-term in vivo exposure to single agent chemotherapeutics are related to survival in Multipal Myeloma//Clin Cancer Res.-2008.-14(15).-P.4821 4829.

36. Call K.M., Glaser Т., Ito C.Y., et al. Isolation and characterization of a zinc finger polypeptide gene at the human chromosome 11 Wilms tumor locus//Cell.-1990.-60.-P.509-520.

37. Cavo M., Zamagni E., Tosi P., et al. First-line therapy with thalidomide and dexamethasone in preparation for autologous stem cell transplantation for multiple myeloma//Haematologica.-2004.-89.-P.826-831.

38. Chen F., Castranova V., Shi X. New insights into the role of Nuclear Factor-KB in cell growth regulation//Am. J. Pathol.- 2001.-159.-P.387-397.

39. Chiusa L., Francia de Cell P., Campisi P., et al. Prognostic value of quantitative analysis of WT1 gene transcripts in adult acute lymphoblastic leukemia//Haematologica.-2006.-91 .-P.270-271.

40. Condomines M, Hose D, Raynaud P et al. Cancer/testis genes in multiple myeloma: expression patterns and prognosis value determined by microarray analysis//.! Immunol.-2007.-178.-P3307-3315.

41. Creiner J., Ringhoffer M., Simikopinko O., et al. Simultaneous expression of different immunogenic antigens in acute myeloid leukemia//Exp. Hematol.-2000l-28.-P. 1413-1422.

42. D'Amato R.J., Loughnan M.S., Flynn E., Folkman J. Thalidomide is an inhibitor of angiogenesis/ZProc. Natl. Acad. Sci. US A.-1994.-91.-P.4082-4085.

43. Dalton W.S. The tumor microenvironment: focus on myeloma//Cancer Treat. Rev.-2003.-29.-P. 11-19.

44. Damiano J. S., Cress A. E., Hazlehurst L.A. Cell Adhesion Mediated Drug Resistance (CAM-DR): Role of Integrals and Resistance to

45. Apoptosis in Human Myeloma Cell Lines//Blood.-1999.-93.-P. 16581667.

46. Davies F.E., Raje N., Hideshima T., et al. Thalidomide and immunomodulatory derivatives augment natural killer cell cytotoxicity in multiple myeloma//Blood.-2001 .-98.-P210-216.

47. Derksen P.W., Keehnen R.M., Evers L.M. et al. Cell surface proteoglycan syndecan-1 mediates hepatocyte growth factor binding and promotes Met signaling in multiple myeloma//Blood.-2002.-99.-P.1405—1410.

48. Desplaniques G, Giuliani N, Dilsignore R et al. Impact of XIAP protein levels on the survival of myeloma cells//Haematologica.-2009.- 94.-P.87-93.

49. Deveraux Q.L., Takahashi R., Salvesen G.S., et al. X-linked IAP is a direct inhibitor of cell-death proteases//Nature.-1997.-388.-P.300-304.

50. Drach J., Gattringer C., Glassl H. et al. The biological and clinical significance of the Ki-67 growth fraction in multiple myeloma//Hematol. Oncol.-1992.-10.-№2.-P. 125-134.

51. Durie B.G., Salmon S.E., A clinical stading system for multiple myeloma. Correlation of measured myeloma cell mass with presenting clinical features, response to treatment, and survival//Cancer.-1975.-36-P.842-854.

52. Durie B.G.M., Stock-Novack D., Salmon S.E. et al. Prognostic value of pretreatment serum beta2 microglobulin in myeloma: A Southwest Oncology Group study//Blood.-1990.-75.-P.823—830.

53. Epping M.T., Bernards R. A causal role for the Human tumor antigen prreferntially expressed antigen of Melanoma in cancer//Cancer Res.-2006.-66 (22).-P. 10639- 10642.

54. Evan G., Liltlewood T. A matter of life and cell death//Science.-1998.-281.-P.1317-1322.

55. Fonseca R., Blood E., Rue M., et al. Clinical and biologic implication of recurrent genomic aberration in myeloma//Blood.-2003.-101.-P.4569-4575.

56. Fonseca R., Debes-Marun C.S., Picken E.B., et al. The recurrent IgH translocations are highly associated with nonhyperdiploid varian multiple myeloma//Blood.-2003.-102.-P.2562-2567.

57. Fu J., Jin Y, Arend L.J. Smac3, a novel Smac/DIABLO splicing variant, attenuates the stability and apoptosis-inhibiting activity of X-linked inhibitor of apoptosis, protein//J. Biol. Chem.-2003.-278.-P. 52660-52672.

58. Gaiger A, Schmid D, Heinze G, Linnerth B, Greinix H, Kalhs P, et al.Detection of the WT1 transcript by RT-PCR in complete remission has no prognostic relevance1 in de novo acute myeloid* leukemia//Leukemia.-1998.-12.-P. 1886-94.

59. Gaiger A., Reese V., Disis M.L. et al. Immunity to WT1 in the animal model- and in patients with acute myeloid' leukemia//Blood.-2000.-96(4).-P. 1480-1489.

60. Garcia-Gila M., Cabanas C., Garcia- Pardo A. Analysis of the activation state of a4bl integrin in human B cell lines derived from myeloma, leukemia or lymphoma//FEBS Lett.-1997.-418.-P.337-340.

61. Gastinne T., Leleu X., Duhamel A. et al. Plasma cell growth fraction using Ki-67 antigen expression identifies a subgroup of multiple myeloma patients displaying short survival within the ISS stage I//Eur. J. Haematol.-2007.-79.-№4-P.297-304.

62. Georgii-Hemming P., Wiklund HJ., Ljunggren O., Nilsson K. Insulinlike growth factor I is a growth and. survival factor in human multiple myeloma cell lines//Blood.-1996.-88.-P.2250-2258.

63. Goellner S., Steinbach D., Schenk T., et al. Childhood acute myelogenous leukemia: Association between PRAME, apoptosis- and MDR- related gene expression//Eur. J of Cancer.-2006.-42.-P.2807-2814.

64. Greaves M.F.//Cancer. Surveys.-1982.-1.-P. 189-204.

65. Greipp P.R., Lust J.A., O'Fallon W.M. et al. Plasma cell labeling index and beta2 microglobulin predict survival independent of thymidine-kinase and C-reactive protein in multiple myeloma//Blood:-1993.-81.-P.3382—3387.

66. Greipp P.R., Lust J.A., O'Fallon W.M. et al. Plasma cell labeling index and beta2 microglobulin predict survival independent of thymidine-kinase and C-reactive protein=in multiple myeloma//Blood.-1993.-81.-P.3382—3387.

67. Guikema J.E.J., Hovenga S., Vellenga E. et- al. GD27 is heterogeneously expressed in multiple myeloma: low CD27 expression^ in patients with high-risk disease//Br. J. Haematol.-2003.-121.-P.36-43.

68. Gupta D:, Treon S.P., Shima Y. et al. Adherence of multiple myeloma cells to bone marrow stromal cells upregulates vascular endothelial growth factor secretion: therapeutic applications//Leukemia.-2001.-15.-P.1950-1961.

69. Haber D.A., Sohn R.L., Buckler A.J., et al. Alternative splicing and genomic structure of the Wilms tumor gene WTl//Proc. Natl. Acad. Sei USA.-1991 .-88.-P.9618-9622.

70. Hallek M., Bergsagel P. L., Anderson K.C. Multiple myeloma: increasing evidence for a multistep transformation process/ZBlood.-1998.-Vol.91 .-№ 1 .-P.3-21.

71. Hatta Y, Takeuchi T, Saitoh T et al. WT1 expression level and clinical factors in multiple myeloma//J Exp Clin Cancer Res.-2005.-24.-P.595-599.

72. Heckman C., Mochon E., Arcinas M., et al. The WT1 protein is a negative regulation of the normal bcl-2 allele in t(14;18) lymphomas//J Biol Chem.-1997.-272.-P. 19609-19614.

73. Hideshima T., Bergsagel P.L , Kuehl W.M. et al. Advances in biology of multiple myeloma: clinical applications//Blood.-2004.-104.-607-618.

74. Hideshima T., ChauhanD., Hayashi T. et al. The biological sequelae of stromal' cell-derived factor—1 alpha in multiple myeloma//Mol. Cancer Ther.-2002.-1 .-P.539—544.

75. Hideshima T., Chauhan D., Shima Y., et al. Thalidomide and its analogs overcome drug resistance of human multiple myeloma cells to conventional threpy//Blood.-2000.-96.-P.2943-2950.

76. Hideshima T., Raje N., Richardson P.G., et al. A review of lenalidomide in combination with dexamethasone for the treatment of multiple myeloma//Ther Clin Risk Manag.-2008.-4(l).-P.129-136.

77. Hideshima T., Richardson P. Anderson K.C. Novel therapeutic approaches for multiple myeloma//Immunological Reviews.-2003.-194.-P. 164-176.

78. Hjorth-Hansen H., Waage A., Borset M. Interleukin-15 blocks apoptosis and induces proliferation of the human myeloma cell line OH-2 and freshly isolated myeloma cells//Brit. J. Haematol.-1999.-106.-P.28-34.

79. Holclic M., Korneluk R. G. X-chromosome-linked Inhibitor of Apoptosis (XIAP)//Nature Reviews Molecular Cell Biology.-2001.-2.-P.550-556.

80. Hosen N., Sonoda Y., Oji Y., et al. Very low frequencies of human normal CD34+ haematopoietic progenitor cells expression the Wilms tumor gene WT1 at levels similar to those in leukemia cells//Br. J. Haematol.-2002.-116.-P.409-420.

81. Hu S., Yang X. Cellular inhibitor of apoptosis 1 and 2 are ubiquitin ligases for the apoptosis inducer Smac/DIABLO//J. Biol. Chem.-2003.-278.-P. 10055-10060.

82. Huang Y., Park Y.C., Rich R.L., et al. Structural basis of caspase inhibition by XIAP: differential roles of the linker versus the BIR domain//Cell.-2001 .-104.-P.781-790.

83. Humphries M.J. Integrin structure//Biochem. Soc. Trans.-2000.-28,-P.311-339.

84. Joazeiro C.A., Weissman A.M. RING finger proteins: mediators of ubiquitin ligase activity//Cell.-2000.-102.-P.549-552.

85. Kanavaros P.,. Stefanaki K., Vlachonikolis J: et al. Immunohistochemical expression of the p53, p21\waf-l, Rb, pl6 and Ki-67 proteins in multiple myeloma//Anticancer Res.-2000.-20.-N6B.-P.4619—4625.

86. Kavano M., Hirano T., Matsuda T. et al. Autocrine generation and essential requirement' of BSF/IL-6 for human multiple myeloma//Nature.-1988.-332.-P.83-85.

87. Kawano M.M., Huang N., Harada H. et al. Identification of immature and mature myeloma cells in the bone marrow of human myelomas//Blood.-1993.-82.-P.564— 570.

88. Klein B., Zhang XG., Jourdan M. et al. Paracrine rather than autocrine regulation of myeloma-cell growth and differentiation by interleukin-6//Blood.-l 989.-73.-P.517-526.

89. Kool M., van der Linden M., de Haas M., et al. MRP3, an organic anion transporter able to transport anti-cancer drugs//Proc. Natl. Acad. Sci.USA.-1999.-96.-P.6914-6919.

90. Kumar S., Rajkumar S.V., Kimlinger T. et al. CD45 expression by bone marrow plasma cells in multiple myeloma: clinical and biological correlation//Leukaemia.-2005.-19.-N8-P. 1466-1470.

91. Kyle R.A., Child J.A., Durie B.G.M. Criteria for the classification of monoclonal gammapathies, multiple myeloma, and related disorders: a report of the international Myeloma Working Group//Br.J.Haematol.-2003.-12 l-P.749-757.

92. Kyle R.A., Garton J.P. Spectrum of IgM monoclonal gammopathy in 430 cases//Mayo ClinProc.-1987.-62.-P;719-731.

93. Kyle R.A., Gertz M:A., Witzig T. E. et al. Review of 1027 Patients With Newly Diagnosed Multiple Myeloma//Mayo. Clin. Proc.-2003.-78.-P.21-331

94. Lee J.S., Scala S., Matsumoto Y., et al. Reduced drug accumulation and multidrug resistance in human breast cancer cells without associated P-glycoprotein or MRP overexpression//J Cell Biochem.-1997.-65.-P.513-526.

95. Leilst M., Jäättelä M. Four deaths and funeral: from caspases to alternative mechanisms//Nature Reviews Molecular Cell Biology.-2001.-2.-P.589-598. t

96. Leilst M., Jäättelä M. Four deaths and funeral: from caspases to alternative mechanisms//Nature Reviews Molecular Cell Biology.-2001.-2.-P.589-598.

97. Lu Z.Y., Zhang X.G., Wijdenes J. et al. Interleukin 10 is a growth factor for human myeloma cells//Blood.-1995.-85.-P.2521-2527.

98. Luque R., Garcia-Trujillo J.A., Camara C. et al. CD106 and activated-CD29 are expressed on myelomatous bone marrow plasma cells and their downregulation is associated with tumour progression//Br. J. Haemat.-2002.-l 19.-P.70-78.

99. MacFarlane M., Merrison W., Bratton S.B., et al. Proteasome-mediated degradation of Smac during apoptosis: XIAP promotes Smac ubiquitination in vitro//J. Biol. Chem.-2002.-277.-P.36611-36616.

100. Malpas J.S., Bergsagel P.L., Kyle R., et al. Myeloma. Biology and management//3-rd Ed. Newcastle.-2004.-P.163-194.

101. Mateo G., Castellanos M., Rasillo A. et al. Genetic Abnormalities, and Patterns of Antigenic Expression* in Multiple Myeloma//Clin. Cancer Res.-2005.-ll.-N10-P.3661—3667.

102. Matsushita M, Yamazaki R, Ikeda H, Kawakami. Y. Preferentially expressed antigen of melanoma (PRAME) in the development of diagnostic and»- therapeutic methods for hematological-malignancies//Leuk Lymph.-2003 .-44.-3 .-P:439-444.

103. Matsushita M., Yamazaki R., Ikeda H. et al. Preferentally expressed antigen of Melanoma (PRAME) in the development of diagnostic and therapeutic metods for hematological malignancies//Leukemia&Lymphoma.-2003.-44.-3 .-P.439-444.

104. McElwan T.J., Powles R.L. High-dose intravenous melphalan for plasma-cell leukemia and myeloma//Lancet.-1983.-l.-P.822-824.

105. Michigami T., Shimizu N., Williams P.J. et al. Cell-cell contact between marrow stromal cells and myeloma cells via VCAM-1 and a(4)b(l)-integrin enhances production of osteoclast—stimulating activity//Blood.-2000.-96.-P. 1953—1960.

106. Miller, L.K. An exegesis of LAPs: salvation and'surprises from BIR motifs//Trends Cell. Biol.-1999.-9.-P.323-328.

107. Mitsiades CS, Mitsiades N, Poulaki V et al. Activation of NF-kappaB and upregulation of intracellular anti-apoptotic proteins via the IGF-1/Akt signaling in human multiple myeloma cells: therapeutic implications//©ncogene.-2002.-21.-P.5673-83.

108. Moehler T.M., Neben K., Ho A.D., Goldschmidt H. Angiogenesis in hematologic malignancies//Ann. Hematol.-2001.-80.-P.695-705.

109. Moreau P., Robillard N., Avet-Loiseau H. et al. Patients with GD45 negative multiple myeloma receiving high-dose therapy have a shorter survival than those with CD45 positive multiple myeloma//Haematologica.-2004.-89.-P.547—551.

110. Nakagawa Y, Abe S, Kurata M et al. IAP family protein expression correlates with poor outcome of multiple5 myeloma patients in association with chemotherapy-induced overexpression of multidrug resistance genes//Am J Hematol.-2006.-81.-P.824-83k

111. Nakatani K., Sakane H., Thompson DA., et al. Identification of a human AKT3 (protein kinase b gamma) which contains the regulatory serine phosphorylation site//Biochem Biophys Res Commun.-1999.-257.-P.906-910.

112. Nicholson, D.W. Apoptosis. Baiting death inhibitors//Nature.-2001.-410.-P.33-34.

113. Norfolk D.} Child J.A., Cooper E.H. et al. Serum beta 2 microglobulin in myelomatosis: Potential value in stratification and monitoring//Br. J. Cancer.-1979.-39.-P.510-515.

114. Oh Y., Gucev Z., Ng L., Muller H.L., Rosenfeld R.G. Antiproliferative actions of insulin-like growth factor binding protein (IGFBP)-3 in human breast cancer cells//Prog. Grow. Fact. Res.-1995.-6.-P.503—512.

115. Ong Y.L., McMullin M.F., Bailie KEM, et al. High bax expression is a good prognostic indicator in acute myeloid leukemia//Br. J Haematol.-2000.-111 .-P. 182-189.

116. Perez-Simon J.,A., Garcia-Sanz R., Tabernere M.D., et al. Prognostic value of numerical chromosomal aberrations in multiple myeloma: a FISH analysis of 15 different chromosoms//Blood.-1998.~91.-P.3366-3371.

117. Proto-Siqueira R., Figueiredo- Pontes. L.L., Panepucci R.A. et al. PRAME is a membrane and cytoplasmic protein aberrantly expressed in chronic lymphoid leukemia and mantle cell lymphoma/ZLeukemia Research.-2006.-30.-P. 1333-1339.

118. Qin Y, Zhu H, Jiang B et al. Expression patterns of WT1 and PRAME in acute myeloid leukemia patients and their usefulness for monitoring minimal residual disease//LeukResearch.-2009.-33.-P.384-390.

119. Rajkumar S.V., Leong .T, Roche P.C., et al. Prognostic value of bone marrow angiogenesis in multiple myeloma//Clin. Cancer Res.-2000.-6.-P.3111-3116.

120. Rapraeger A.C. The coordinated regulation of heparan sulfate, syndecans and cell behavior//Curr. Opin. Cell Biol.-1993.-5.-P.844-853.

121. Rawstron A., Barrans S., Blythe D. et al. Distribution of myeloma plasma cells in peripheral blood and bone marrow correlates with CD56 expression//Br. J. Haematol.-1999.-104.-P. 138-143.

122. Reiman T., Seeberger K., Taylor B.J., et al. Persistent preswitch clonotypic myeloma cells correlate with decreased survival: evidence for isotype switching within the myeloma clone//Blood.-2001.-98.-P.2791-2740.

123. Richardson P. G., Blood E., Mitsiades C. S., et al. A randomized phase 2 study of lenalidomide therapy for patients with relapsed or relapsed and refractory multiple myeloma//Blood.-2006.-108.-10.-P.3458-3464.

124. Ridley R.C., Xiao H., Hata H. et al. Expression of syndecan regulates human myeloma plasma cell adhesion to type I collagen/ZBlood.-1993 .-81 .-P.767-774.

125. Riedel D.A., Pottern L.M. The epidemiology of , multiple myeloma//Hematol Oncol Clin North Am.-1992.-6.-P.225-247.

126. Rivera M.N., Haber D.A. Wilms tumor: connecting tumorogenesis and organ development in the kidney//Nat. Rev. Cancer.-2005.-5.-P.699-712.

127. Ross D.D. Novel mechanisms of drug resistance in leukemia//Leukemia:-2002.-14.-P.467-473.

128. Ross D.D., Yang W., Abruzzo L.V., et al. Atypical multidrug resistance: breast cancer resistance protein messenger RNAexpression in mitoxantrone-selected cell lines//J Natl. Cancer Inst.1999.-91.-P.429-433.

129. Saatchi C, Caglayan A, Kocyigit I et al. Expression of WT1 gene in multiple myeloma patients at diagnosis: is WT1 gene expression a useful marker in multiple myeloma//Hematology.-2010.-Vol.l5.-Nl.-P.39-41.

130. Sahota S.S., Garand R., Mahroof R. et al. V(H) gene analysis of IgM-secreting myeloma indicates an origin from a memory cell undergoing isotype switch events//Blood.-1999.-Vol.94.-P. 1070-1146.

131. San Miguel J.F., Garcia-Sanz R., Gonzalez M. et al: A new staging system for multiple myeloma based on the number of S-phase plasma cells//Blood.-1995.-85.-P.448—455.

132. Sanz—Rodriguez F., Hidalgo A., Teixido J. Chemokine stromal cell-derived factor-la modulates VLA-4 integrin-mediated multiple myeloma cell1 adhesion to CS-l/fibronectin and VCAM-l//Blood.-2001 .-97.-P.346-351.

133. Schlessinger J., Plotnikov A.N., Ibrahimi O.A. et al: Crystal structure of a ternary FGF—FGFR-heparin complex reveals a dual role for heparin in FGFR binding and dimerization//Mol. Cell Endocrinol.2000.-6:-P.743—750:

134. Schwartz M.A., Ginsberg M.H. Networks and crosstalk: integrin signaling spreads//Nat. Cell. Biol.-2002.-4.-E65-E68.

135. Sezer O., Niemoller K., Eucker J. et al. Bone marrow microvessel density is a prognostic factor for survival in patients with multiple myeloma//Ann. Hematol.-2000.-79.-P.574—577.

136. Shain K.H., Landowski T.H., Dalton W.S. The tumor microenvironment as a determinant of cancer cell survival: a possible mechanism for de novo drug resistance//Curr. Opin. 0ncol.-2000.-12.-P.557-563.

137. Shou Y., Martelli M.L., Gabrea A., et al. Diverse karyotypic abnormalities of the c-myc locus associated with c-myc dysregulation and tumor progression in multiple myeloma//Proc. Natl. acad. Sci. USA.-2000.-97.-P.228-233.

138. Silke J., Ekert P.G., Day C.L. et al. Direct inhibitor of caspase 3 is dispensable for the anti-apoptotic activity of XEAP//The EMBO Jornal.-2001.-20.-12.-P.3114-3123.

139. Singhal S., Mehta J., Desikan R. et al. Antitumor activity of thalidomide in refractory multiple myeloma//N. Engl. J. Med.-1999.-341.-P.1565-1571.

140. Smadja N.V., Bastard C., Brigaudeau C., et al. Hypodiploidy is a major prognostic factor in. multiple myeloma//Blood.-2001.-98.-P.2229-2238.

141. Srinivasula S.M., Hedge R., Saleh A., et al. A conserved XIAP-interaction< motif in caspase-9 and Smac/DIABLO regulates caspase activity and apoptosis//Nature.-2001 .-410.-P. 112-116.

142. Sun Y. E 3 Ubiquitine ligases as Cancer Targets and Biomarkers//Neoplasia.-2006.-8.-P.645-654.

143. Tai Y.T., Podar K., Catley L. et al. Insulin-like growth factor-1 induces adhesion and migration in human multiple myeloma cells via activation of bl—integrin and phosphatidilinositol 3'-kinase/AKT signaling//Cancer Res.-2003.-63.-P.5850-5858.

144. Tamm I., Kornblau S.M., Segall H., et al. Expression-and prognostic Significance of IAP- Family genes in Human Cancer and Myeloid Leukemias//Clin. Cancer Res.-2000.-6.-P.1796-1803.

145. Tanaka Y., Kimata K., Adams D.H;, Eto S. Modulation of cytokine function by heparan sulfate proteoglycans: sophisticated models for the regulation of cellular responses to cytokines//Proc. Assoc. Am. Physicians.-1998.-110.-P.118- 125.

146. Valeria C. C. Andrade, Vettore A. L., et al. Prognostic impact of cancer/testis antigen expression in advanced' stage multiple myeloma patients//Cancer Immunity.-2008.-8.-P.2-10.

147. Vescio R.A., Cao J., Hong C.H: et al. Myeloma Ig heavy chain V region sequences reveal prior antigenic selection and marked somatic mutation but no intraclonal diversity//.!. Immunol.-1995.-Vol.155.-P.2487-2497.

148. Vivanco I., Sawyers C.L. The phosphatidilinositol 3-kinase — Akt pathway in human cancer. Nature reviews: cancer. 2002; 2: 489-501

149. Watari K., Tojo A., Nagamura-Inoue T., et al. Indefication of a melanoma antigen, PRAME, as a BCR/ABL inducible gene//FEBS Lett.-2000.-466.-P.367-371.

150. Wijdenes J., Vooijs W.C., Clement C. et al. A plasmacyte selective monoclonal antibody (B-B4) recognizes syndecan-l//Br. J. Haematol.-1996.-94.-P.318-323.

151. Xu J.L., Lai R., Kinoshita T. et al. Proliferation, apoptosis, and intratumoral vascularity in multiple myeloma: correlation with the clinical stage and cytological grade//J. Clin. Pathol.-2002.-55.-P.530-534.

152. Yaccoby S., Barlogie B., Epstein J. Primary myeloma cells growing in SCID-hu mice: a model for studying the biology and treatment of myeloma and its manifestations//Blood.-1998.-92.-P.2908-2913.

153. Yang L., Han Y, Saiz F.S. et al. A tumor suppressor and oncogene: the WT1 story//Leucemia.-2007.-21.-P.868-876.

154. Yang, Y, and Yu, X. Regulation of apoptosis: the ubiquitous way//FASEB J.-2003.-17.-P.790-799.