Экспрессия в гетерологичных системах генов химерных иммуноглобулинов и гена барстара тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Родин, Дмитрий Викторович

• Родин, Дмитрий Викторович
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Родин, Дмитрий Викторович

Список обозначений и сокращений з

Введение

Обзор литературы

1 Иммуноглобулин Е как возможный агент противоопухолевого иммунитета

1 Сведения о функциях иммуноглобулина Е

2 Инициация синтеза иммуноглобулина Е

3 Регуляторные функции иммуноглобулина Е

4 Иммуноглобулин Е и аллергическая реакция как факторы развития и ингибирования роста опухолей

5 Количественные оценки концентрации иммуноглобулинов в терапии

2. Генотерапия

1. Общее описание типов генотерапии

2 Основные направления клинического применения генотерапии

3 Химерные антитела как эффекторный белок терапии

4 Факторы, обеспечивающие эффективность генотерапии

2 4 1 Доставка генетического материала

2 4 2 Экспрессия генов

3. Эксперессия генов барстара и химерного иммуноглобулина 38 Резюме обзора литературы

Материалы и методы

Результаты и обсуждение

1. Создание генетической конструкции и анализ экспрессии гена барстара в фибробластах человека и в эмбрионе мыши

2. Баллистическая трансфекция

3. Экспрессия генов химерного ^Е в различных тканях и органах мышей, иммунный ответ на ксеногенные детерминанты

4. Вывод формулы подсчета количества экспрессированного химерного белка

5. Количественный анализ экспрессии химерного ^Е и иммунного ответа на ксеногенные детерминанты выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспрессия в гетерологичных системах генов химерных иммуноглобулинов и гена барстара»

В последние десяилетия одним из наиболее востребованных подходов в биологических и биомедицинских исследованиях стало создание генетических конструкций для экспрессии целевых белков непосредственно в жиом организме. В соответствии с конечными практическими приложениями этой методологии сформировались два основных направления - генотерапия и ДНК-иммунизация. Одним из наиболее востребованных направлений применения генотерапии является подход с применением интрател, который состоит во введении в организм генетических конструкций, кодирующих антитела с запрограммированными антигенсвязывающими и/или эффекторными функциями.

В связи с этим необходимо, с одной стороны, искать оптимальные способы введения в клетки чужеродных генов, а с другой - изучить закономерности экспрессии введенных генов в зависимости от типа ткани. Весьма важно также оценить иммунный ответ организма на ксеногенные детерминанты синтезирующихся рекомбинантных белков.

В настоящей работе исследовали генетические конструкции для экспрессии простых однодоменных и сложных мультидоменных белковых молекул. Последовательно рассмотрены генетические конструкции, необходимые для исследования in vivo экспрессии гена барстара; возможности качественной и количественной оценки экспрессии этого гена в человеческих фибробластах; экспрессия гена барстара клетками взрослого организма после трансфекции в клетки эмбриона на стадии морулы; возможность экспрессии генов химерных антител мышь-человек при введении генов in vitro и в клетки различных органов и частей тела мышей in vivo.

Были сконструированы плазмиды, несущие ген барстара под контролем эукариотических регуляторных элементов для его экспрессии в эукариотах.

На первом этапе исследования работа являлась поисковой. Было необходимо определить принципиальную возможность исследования экспрессии гена барстара в эукариотических системах. Работа выступала предтечей работ по созданию химерных полноразмерных иммуноглобулинов.

При работе с химерными мышь-человек иммуноглобулинами класса Е основной задачей было апробирование подхода к экспрессии генов иммуноглобулинов in vitro и in vivo. Конкретно - анализ экспрессии под гетерологичным промотором и оценка уровня биосинтеза целевого белка.

При использовании генов химерного мышь/человек IgE был оценен уровень биосинтеза целевого белка in vivo в различных тканях мыши: селезенке (иммунокомпетентный орган), печени (через печень проходит большой объем крови), подушках лап (не столь хорошо снабжаются кровью) и хрящевой ткани ушей (в любой хрящевой ткани движение молекул осуществляется исключительно за счет диффузии). Также была дана количественная оценка иммунного ответа организма на чужеродные антигенные детерминанты синтезированных антител. Получение таких данных было важно с точки зрения так называемой ДНК-иммунизации

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Молекулярная биология», Родин, Дмитрий Викторович

выводы

1. Созданы генетические конструкции для исследования экспрессии гена барстара в эукариотических системах; показано, что указанные конструкции эффективно экспрессируются в различных эукариотических системах.

2. Выведена формула подсчета количества экспрессированного in vivo химерного белка в присутствии антител к видоспецифичным детерминантам.

3. При введении генов методом баллистической трансфекции определены условия экспрессии генов химерного IgE в различных тканях и органах мышей in vivo - с точки зрения иммунного ответа на ксеногенные детерминанты экспрессирующихся генов и возможности проведения ДНК-иммунизации.

4. На примере экспрессии генов химерного IgE, трансфицированных в различные ткани и органы мышей (введение методом баллистической трансфекции), оценены возможности ДНК-иммунизации, а также установлено, что иммунный ответ на ксеногенные детерминанты не зависит ни от типа ткани, в которой экспрессировался чужеродный ген, ни от его количества.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Родин, Дмитрий Викторович, 2006 год

1. Биологический энциклопедический словарь Под ред МС Гилярова М: «Советская Экциклопедия», 1989

2. Sutton В.J., Gould H.J. The human IgE network, Nature, 1999, V.366, p.421-428

3. Vernersson M. The rise and fall of IgE, Uppsala University, 2002

4. Chang T.W. Developing antibodies for targeting immunoglobulin and membrane-bound immunoglobulin E, Allergy Asthma Proc, 2006, V.27, #2 (Suppl 1): 7-14

5. Blank U., Jouvin M.H., Guerin-Marchand C., Kinet J.P. The high-affinity IgE receptor: lessons from structural analysis, Med Sci, 2003, V.19, #1, p. 63-9

6. Roitt I., Essential Immunology, 6th edition, 1997

7. Mills PK, Beeson WL, Fraser GE, Philips RL Allergy and cancer: organ site-specific results from Adventist health study Am. J. Epidemiol. 1992 136: 287-295

8. Szczeklik A, Jawien J, Stadler BM, Radwan J, Piwowarska W, Dziatkowiak A Possible relationship between IL-6 and response of IgE to surgical trauma Ann. NY Acad. Sci. 1995 762:477-479

9. Szczeklik A., Jawien J. IgE in acute phase response to surgical stress, Clin Exp Allergy, 1996, V.26, p.303-307lO.Szczeklik A., Jawien J. Possible role of IgE in acute-phase response, Allergy, 1997, V.52, p.l 149-1150

10. Kapmen G.T., Poulsen L.K., Nielsen H.J., Schulze S., Petersen L.J. IgE levels in surgery: effect of ranitidine and prednisolone, Allergy, 1999, V.54, p.l 71-176

11. Navarro-Zorraquino M., Lozano R., Deus J., Pastor C., Larrad L., Tejero E., Roman J., Palacios M.J., Torcal J., Salinas J.C. Determination of the IgE postoperative variation as a measure of surgical injury, World J Surg, 2001, V.25, p.585-591

12. Smith J.K., Krishnaswamy G.H., Dykes R., Reynolds S., Berk S.L. Clinical manifestations of IgE hypogammaglobulinemia, Ann Allergy Asthma Immunol, 1997, V.78, p.313-318

13. Schoettler J.J., Schleissner L.A., Heiner D.C. Familial IgE deficiency associated with sinopulmonary disease, Chest, 1989, V.96, p.516-521

14. Levy D.A., Chen J. Healthy IgE-deficient person, N Engl J Med, 1970, V.283, p.541

15. Wesrman S., Gustavsson S., Heyman B. Early explanation of secondary B cells after primary immunization with antigen complexed with IgE, Scand J Immunol, 1997, V.46, p. 10-15

16. Heyman B. Regulation of antibody responses via antibodies, complement, and Fc receptors, Annu Rev Immunol, 2000, V.18, p.709-737

17. Gould H., Br Med Bui, 2000, V.56, p.908-924

18. Nowak-Wegrzyn A., Sampson H.A. Food allergy therapy, Immunol Allergy Clin North Am, 2004, V.24, #4, p.705-725

19. Oettgen H.S., Geha R.S. IgE regulation and roles in asthma pathogenesis, J Allergy Clin Immunol, 2001, V.107, #3, p.429-441

20. Yamaguchi M., Sayama K., Yano K., Lantz C., Noben-Trauth N. et al J Immunol, 1999, V.162, #9, p.5455-5465

21. Mills P.K., Beeson W.L., Fraser G.E., Phillips R.L. Allergy and cancer: organ site-specific results from the Adventist Health Study, Am J Epidemiol, 1992, V.136, #3, p.287-295

22. Gould H.J., Sutton B.J., Beavil A.J., Beavil R.L., McCloskey N., Coker H.A., Fear D., Smurthwaite L. The biology of IGE and the basis of allergic disease, Annu Rev Im, 2003, V.21, p.579-628

23. Fisherman E.W. Does the allergic diathesis influence malignancy?, J Allergy, 1960, V.31, p.74-78

24. Mackay W.D. The incidence of allergic disorder and cancer, Br J Cancer, 1966, V.20, p.434-437

25. Ure D.M.J. Negative association between allergy and cancer, Scot Med J, 1969, V.14, p.51-54

26. McK.ee W.D., Arnold C.A., Perlman M.D. A double-blind study of the comparative incidence of malignancy and allergy, J Allergy, 1967, V.39, p.294-301

27. Meers P.D., Allergy and Cancer, Lancet, 1973, V.l, p.884-885

28. Vena J.E., Bona J.R., Byers T.E., Middleton E. Jr, Swanson M.K., Graham S. Allergy-related diseases and cancer: an inverse association, Am J Epidemiol, 1985, V.122, #1, p.66-74

29. Wang H., Rothenbacher D., Low M., Stegmaier C., Brenner H., Diepgen T.L. Atopic diseases, immunoglobulin E and risk of cancer of the prostate, breast, lung and colorectum, Int J Cancer, 2006, V.l 19, #3, p.695-701

30. Gould H.J., Mackay G.A., Karagiannis S.N., O'Toole C.M., Marsh P.J., Daniel B.E., Coney L.R., Zurawski V.R. Jr., Joseph M., Capron M., Gilbert

31. M., Murphy G.F., Korngold R. Comparison of IgE and IgG antibody-dependent cytotoxicity in vitro and in a SCID mouse xenograft model of ovarian carcinoma, Eur J Immunol, 1999, V.29, #11, p.3527-3537

32. Nagy E., Berczi I., Sehon A.H. Growth inhibition of murine mammary carcinoma by monoclonal IgE antibodies specific for the mammary tumor virus, Cancer Immunol Immunother, 1991, V.34, p.63-69

33. MacGlashan D.W.Jr,, Mckenzie-White J., Chichester K., Bochner B.S., Davis F.M., Schroeder J.T., Lichtenstein L.M. In vitro regulation of FcsRIa expression on human basophils by IgE antibody, Blood, 1988, V.91, p. 16331634

34. Gould H.J., Mackay G.A. et a! Eur J Imm, 1999, V.29, p.3527-3537

35. Баранов B.C. «Соросовский образовательный журнал», 1999, №3, с. 1-640.3еленин А.В., Кайгородов В.А., Прасолов B.C. Генотерапия сегодня изавтра, Мол биол, 1998, Т.32, №2, с.219-228

36. Culver K.W. Gene therapy: a handbook for physicians, 1994

37. Molecular and Cell Biology of Human Gene Therapeutics, 1995

38. Gura T. Science, 1995, V.270, p.575-577

39. Siatskas C., Chan J., Field J., Murphy K., Nasa Z., Toh B.H., Alderuccio F. Gene therapy strategies towards immune tolerance to treat the autoimmune diseases, Curr Gene Ther, 2006, V.6, #1, p.45-58

40. Dzau V.J. Predicting the future of human gene therapy for cardiovascular diseases: what will the management of coronary artery disease be like in 2005 and 2010?, Am J Cardiol, 2003, V.92, p.32-35

41. LÍ S., Tokuyama T., Yamamoto J., Koide M., Yokota N., Namba H. Potent bystander effect in suicide gene therapy using neural stem cells transduced with herpes simplex virus thymidine kinase gene, Oncology, 2005, V.69, #6, p.503-508

42. Muller F.J., Snyder E.Y., Loring J.F. Gene therapy: can neural stem cells deliver?, Nat Rev Neurosci, 2006, V.7, #1, p.75-84

43. Yates F., Daley G.Q. Progress and prospects: gene transfer into embryonic stem cells, Gene Ther, 2006, V.13, #20, p.1431-1439

44. Kay M.A., Liu D., Hoogerbrugge P.M. Gene therapy, Proc Natl Acad Sci USA, 1997, V.94, #24, p.12744-12746

45. Roberts J.P. Transcription controls segmentation clock gene, Scientist, 2002, V.16, #20, p.45

46. Smith K.T., Shepherd A.J., Boyd J.E., Lees J.M., Gene Delivery Systems for Use in Gene Therapy: An Overview of Quality Assurance and Safety Issues, Gene Therapy, 1996, V.3, p. 190-200

47. Expert Reviews in Molecular Medicine, 1999, Cambridge University Press

48. Cavazzana-Calvo M., Hacein-Bey S., de Saint Basile G, et al. Gene therapy of human severe combined immunodeficiency (SCID)-Xl disease, Blood, 2000, V.96, p.590

49. Rosen F.S. Successful Gene Therapy for Severe Combined Immunodeficiency The New England Journal of Medicine, 2002, V.346, #16, p.1241-1243

50. Wade N, Patient Dies While Undergoing Gene Therapy, The New York Times, 1999, September 29

51. Koehler G., Milstein C. Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity, Nature, 1975, V.256, p.493-497

52. Jones P.T., Deat P.H., Foote J. Neuberger M.S., Winter G. Nature, 1986, V.321, p.522-525 b

53. Gura S. Therapeutic antibodies: Magic bullets hit the target, Nature, 2002, V.417, p.584 586

54. Wolff J. A., Malone R. W., Williams P., Chong W., AcSadi G., Jani A., Felgner P. L. Direct Gene Transfer into Mouse Muscle in Vivo, Science, 1990, V.247, #4949, p.1465-1468

55. Schreurs M.W., de Boer A.J., Figdor C.G., Adema G.J., Genetic vaccination against the melanocyte lineage-specific antigen gplOO induces cytotoxic T lymphocyte-mediated tumor protection, Cancer Res, 1998, V.58, #12, p.2509-2514

56. Taubes G. Science 1997 05 Dec V.278, 1711-1714

57. Donnelly J.J., Friedman A., Martinez D., Montgomery D.L., Shiver J.W., Motzel S.L., Ulmer J.B., Liu M.A. Preclinical efficacy of a prototype DNA vaccine: enhanced protection against antigenic drift in influenza virus, Nat Med, 1995, V.l, #6, p.583-587

58. Johnston S.A., Barry M.A. Vaccine, 1997, V.15, #8, p.808-809

59. Schuler K., Lu C., Chang H.D., Croft M., Zanetti M., Gerloni M.

60. Circumvention of MHC class II restriction by genetic immunization, Vaccine, 2001, V.20, #3-4, p.630-634

61. Фаворова O.O. Соросовский образовательный журнал, 1997, №2, с.21-27

62. Culver K.W. Gene therapy: a handbook for physicians, NY:May Ann Liebert Inc Publ, 1994, p.l 17

63. Marr R.A., Hitt M., Muller W.J., Gauldie J., Graham F.L. Int J Oncol, 1998, V.12, #3, p.509-515

64. Лещинская И.Б. Соросовский образовательный журнал, 1996, №1, с.32-39

65. Weisz В., David A.L., Gregory L.G., Perocheau D., Ruthe A., Waddington S.N., Themis M., Cook Т., Coutelle C., Rodeck C.H., Peebles D.M. Targeting the respiratory muscles of fetal sheep for prenatal gene therapy for

66. Duchenne muscular dystrophy, Am J Obstet Gynecol, 2005, V.193, #3, p.l 105-1109

67. Chuah M.K., Collen D., VandenDriessche T. Clinical gene transfer studies for hemophilia A, Semin Thromb Hemost, 2004, V.30, #2, p.249-256

68. Densmore C.L. Advances in noninvasive pulmonary gene therapy, Curr Drug Deliv, 2006, V.3, #1, p.55-63

69. Koehler D.R., Martin В., Corey M., Palmer D., Ng P., Tanswell A.K., Hu J. Readministration of helper-dependent adenovirus to mouse lung, Gene Ther, 2006, Jan 26 Epub ahead of print.

70. Malik P., Arumugam P.I. Gene Therapy for {beta}-Thalassemia, Hematology (Am Soc Hematol Educ Program), 2005, p.45-50

71. Bank A., Dorazio R., Leboulch P. A Phase I/II Clinical Trial of {beta}-Globin Gene Therapy for {beta}-Thalassemia, Ann NY Acad Sci, 2005, V.1054, p.308-316

72. Агол В.И. Соросовский образовательный журнал, 1997, №4, с. 11-16

73. Агол В.И. Соросовский образовательный журнал 1997, №9, с.27-31

74. Tang D., DeVit М., Johnston S.A. Nature, 1992, V.356, p. 152-154

75. Pertmer T.M., Eisenbraun M.D., McCabe D., Prayaga S.K., Fuller D.H., Haynes J.R. Vaccine, 1995, V.13, p.1427-1430

76. Barry M.A., Johnston S.A. Vaccine, 1997, V.15, p.788-791

77. Yang N-S., Sun W.H., McCabe D. Mol Med Today, 1996, V., p.476-481

78. Biewenga J.E., Destree O.H., Schrama L.H. J Neurosci Methods, 1997, V.71, p.67-75

79. Mahvi D.M., Sondel P.M., Yang N.S., Albertini M.R., Schiller J.H., Hank J., Heiner J., Gan J., Swain W., Logrono R. Hum Gene Ther, 1997, V.8, p.875-891

80. Mahvi D.M., Burkholder J.K., Turner J., Culp J., Malter J.S., Sondel P.M., Yang N.S. Hum Gene Ther, 1996, V.7, p. 1535-1543

81. Chen S.Y., Bagley J., Marasco W.A. Hum Gene Ther, 1994, V.5, p.595-601

82. Колесников B.A., Зеенина И.А., Семенова M.JI., Шафей Р., Зеленин А.В. Журн биол разв, 1995, Т.6, с.467-480

83. Xiong S., Gerloni M., Zanetti M. Proc Natl Acad Sei USA, 1997, V.94, p.6352-6357

84. Zelenin A.V., Kolesnikov V.A., Tarasenko O.A., Shafei R.A., Zelenina I.A., Mikhailov V.V. et al. FEBS Letters, 1997, V.414, p.319-322

85. Conry R.M., LoBuglio A.F., Kantor J., Schlom J., Loechel F., Moore S.E., Sumerel L.A., Barlow D.L., Abrams S., Curiel D.T. Cancer Res, 1994, V.54,p.l 164-1168

86. Davis H.L., Whalen R.G., Demeneix B.A. Hum Gene Ther, 1993, V.4, p.151-159

87. Raz E., Carson D.A., Parker S.E., Parr T.B., Abai A.M., Aichinger G., Gromkowski S.H., Singh M., Lew D., Yankauckas M.A., Baird S.M., Rhodes G.H. Proc Natl Acad Sei USA, 1994, V.91, p.9519-9523

88. Wang B., Ugen K., Srikantan V., Agadjanyan M., Dang K., Refaeli Y., Sato A., Boyer J., Williams W., Weiner D. Proc Natl Acad Sei USA, 1993, V.90,p.4156-4160

89. Huygen K., Content J., Denis O., Montgomery D.L., Yawman A.M., Deck R.R., DeWitt C.M., Orme I.M., Baldwin S., D'Souza C., Drowart A.,1.zes E., Vandenbussche P., Van Vooren J-P., Liu M.A., Ulmer J.B. Nat Med, 1996, V.2, p.893-898

90. Tascon R.E., Colston M.J., Ragno S., Stavropoulos E., Gregory D. Nat Med, 1996, V.2, p.888-892

91. Sedegah M., Hedstrom R., Hobart P., Hoffman S.L, Proc Natl Acad Sci USA, 1994, V.91, p.9866-9870

92. Doolan D.L., Sedegah M., Hedstrom R.C., Hobart P., Charoenvit Y., Hoffman S.L. J Exp Med, 1996, V.183, p. 1739-1746

93. Xu D., Liew F.Y. Protection against leishmaniasis by injection of DNA encoding a major surface glycoprotein, gp63, of L. major, Immunology, 1995, V.84, #2, p.173-176

94. Cooper M.J., Lippa M., Payne J.M., Hatzivassiliou G., Reifenberg E., Fayazi B., Perales J.C., Morrison L.J., Templeton D., Piekarz R.L., Tan J. Proc Natl Acad Sci USA, 1997, V.94, p.6450-6455

95. Shiraishi M, Kusano T, Hara J, Hiroyasu S, Shao-ping M, Makino Y, Muto Y Adenovirus-mediated gene transfer using in-situ perfusion of the liver graft, Transpl Int, 1997, V.10, #3, p.202-206

96. Newton D.L., Ryback S.M. Antibody targeted therapeutics for lymphoma: new focus on the CD22 antigen and RNA, Expert Opin Biol Ther, 2001, V. 1, #6, p.995-1003

97. Glinka E.M., Edelweiss E.F., Sapozhnikov A.M., Deyev S.M. Gene 2005, in press

98. SchreiberG., Buckle A.M., FershtA.R. Structure, 1994, V.2, #10, p.945-951

99. Deyev S.M., Yazynin S.A., Kuznetsov D.A., Jukovich M., Hartley R.W. Ribonuclease-charged vector for facile direct cloning with positive selection, Mol Gen Genet, 1998, V.259, #4, p.379-382

100. Jucovic M., Hartley R.W. Protein-protein interaction: a genetic selection for compensating mutations at the barnase-barstar interface, Proc Natl Acad Sci USA, 1996, V.93, #6, p.2343-2347

101. Jucovic M., Hartley R.W. In vivo system for the detection of low level activity barnase mutants, Protein Eng, 1995, V.8, #5, p.497-499

102. Kershaw M.H. et al Oncol Res, 1998, V.10, #3, 133-142

103. Gould H.J., Mackay G.A. et al Eur J 1mm, 1999, V.29, p.3527-3537

104. Sutton B.J., Gould HJ. The human IgE network, Nature, 1999, V.366, p.421-428

105. Reali E. et al Cancer Res, 2001, V.61, #14, p.5517-5522

106. Gould H.J. et al Annu Rev Im, 2003, V.21, p. 579-628

107. Kamiya T., Sugio S., Yamanouchi K., Kagitani Y. Secretion of active Fc fragments of immunoglobulin E directed by the yeast invertase signal sequence in mammalian cells, J Exp Med, 1996, V.180, #4, p.297-308

108. Nechansky A., Ruf C., Pursch E., Wasserbauer E., Stampfli M.R., Pachlopnik J.M., Stadler B.M., Kricek F. Interaction of human IgE with Fc epsilon RI alpha exposes hidden epitopes on IgE, Int Arch Allergy Immunol, 1999, V.120, #4, p.295-302

109. Радько Б.В. Автореферат диссертации на соискание научной степени канд. биол. наук. М.: ИМБ, 1998

110. Прасолов B.C., Чумаков П.М. Мол биол, 1988, Т.22, с. 1678-1687

111. Zelenin A.V., Alimov A.A., Titomirov A.V., Kazansky A.V., Gorodetsky S.I., Kolenikov V.A. FEBS Lett, 1991, V.280, p.94-96

112. Колесников В.А., Зеленина И.А., Семенова M.JI., Шафей Р., Зеленин А.В. Онтогенез, 1995, Т.26, с.467-480

113. Кэтти Д., Райкундалия Ч. Антитела. Методы. Под ред. Д.Кэтти. М: Мир 1991 с 73

114. Barsky V., Perov A., Tokalov S., et al J Biomol Screen, 2002, V,7, p.247-257

115. Barry M.A., Johnston S.A. Biological features of genetic immunization, Vaccine, 1997, V.15, #8, p.788-791

116. Yang N-S., Sun W.H., McCabe D. Mol Med Today, 1996, p.476-481

117. Deyev S.M., Lieber A., Radko B.V., Polanovsky O.L. Appl Biochem Biotechnol, 1994, V.47, #2-3, p.143-155

118. Biewenga J.E., Destree O.H., Schrama L.H. J Neurosci Methods, 1997, V.71, p.67-75

119. Колесников В.А., Зеленина И.А., Семенова М.Л., Шафей Р., Зеленин А.В. Онтогенез, 1995, Т.6, с.467-480

120. Sundaram P., Xiao W., Brandsma K.L. Nucl Acids Research, 1996, V.24, p.1375-1377

121. Yang N-S., Sun W.H., McCabe D. Mol Med Today, 1996, V. p.476-481

122. Mahvi D.M., Sondel P.M., Yang N.S., Albertini M.R., Schiller J.H., Hank J., Heiner J., Gan J., Swain W., Logrono R. Hum Gene Ther, 1997, V.8, p.875-891

123. Pertmer T.M., Eisenbraun M.D., McCabe D., Prayaga S.K., Fuller D.H., Haynes J.R. Vaccine, 1995, V.13, p.l427-1430