Эпизоотологический анализ и контроль эффективности вакцинопрофилактики бешенства животных в Республике Татарстан тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Самерханов, Ильнур Иршатович

• Самерханов, Ильнур Иршатович
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Самерханов, Ильнур Иршатович

ВВЕДЕНИЕ..................................................................................................................................................3

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ......................................................................................................................8

1.1 Анализ данных по изучению распространённости бешенства в мире и России............................................................................................................................................................8

1.2 Характеристика и биологические свойства возбудителя бешенства... 15

1.3 Современные аспекты лабораторной диагностики и эпизоотологического мониторинга бешенства............................................................21

1.4 Меры борьбы и профилактики бешенства........................................................................25

1.5 Заключение по обзору литературы..........................................................................................29

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ..................................................................................30

2.1 Материалы и методы............................................................................................................................30

3. Результаты собственных исследований............ ... 34

3.1 Географические и климатические особенности Республики Татарстан........................................................................................................................................................34

3.2 Анализ эпизоотической ситуации и усовершенствование системы профилактики бешенства в Республике Татарстан 37

3.3 Иммунобиологические свойства эпизоотических штаммов вируса бешенства........................................................................................................................................................47

3.4 Оценка эффективности профилактики бешенства сельскохозяйственных, домашних и диких плотоядных животных..........51

3.5 Разработка синтетических олигонуклеотидных праймеров для выявления генома вируса бешенства....................................................................................63

3.6 Разработка способа выявления РНК вируса бешенства с помощью с синтетических олигонуклеотидных праймеров в ОТ-ПЦР..............................64

4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ........................................................................................................................................72

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ....................................................................................73

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ..............................74

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ............................................................................................................75

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ....................................................77

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА..................................................102

ПРИЛОЖЕНИЯ........................................................................................................................................104

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Эпизоотологический анализ и контроль эффективности вакцинопрофилактики бешенства животных в Республике Татарстан»

ВВЕДЕНИЕ

Бешенство (Rabies) - острая вирусная инфекция природно-очагового характера, относится к группе особо опасных болезней, общих для человека и животных. Несмотря на определенные достижения в изучении бешенства, тенденция роста распространения данной инфекции в различных регионах Российской Федерации и стран СНГ остается важной проблемой ветеринарии и медицины [77].

Во многих субъектах Российской Федерации осложнение эпизоотической ситуации по бешенству обусловлено резкой активизацией природных очагов этой инфекции, приведших к увеличению заболеваемости диких плотоядных и домашних животных, а в отдельных регионах и регистрации случаев заболевания людей с летальным исходом [4, 13, 64].

Наиболее эффективным и гуманным методом борьбы с природным бешенством, обеспечивающим устойчивость животных к заражению является оральная вакцинация [37, 61]. Эффективность оральной иммунизации диких животных в борьбе с этой болезнью подтверждена в Европейских странах [63, 172]. В настоящее время в странах Евросоюза в результате проведения широкомасштабных кампаний оральной вакцинации регистрируются только спорадические случаи заболевания бешенством среди диких животных [118].

В условиях России проведение полномасштабных кампаний по оральной вакцинации затруднительно, как по техническим причинам, так и по финансовым соображениям. Оценка современного эпизоотического состояния по бешенству диктует необходимость комплексного рассмотрения закономерностей эпизоотии и его особенностей в конкретных условиях. Поэтому научно подтвержденные противоэпизоотические мероприятия должны основываться на изучении биологических свойств возбудителя бешенства, циркулирующего в регионе, и особенностей краевой эпизоотологии этого зооноза. В частности, ухудшение обстановки по бешенству в Республике Татарстан (РТ) за последнее время требует подробного изучения закономерностей проявления природного и городского

бешенства в республике, выделения местных штаммов вируса бешенства и мониторинга напряженности иммунитета продуктивных, домашних и диких животных.

Степень разработанности темы исследования. Республика Татарстан (РТ) относится к разряду неблагополучных регионов по бешенству в Приволжском Федеральном округе Российской Федерации и характеризуется регулярным проявлением спорадических случаев бешенства в популяции сельскохозяйственных, домашних и диких животных.

Изучением эпидемиологии и эпизоотологии бешенства на территории РТ в разные годы занимались, А.М. Гулюкин (2012), А.Н. Чернов (2013), Н.А. Хисматуллина (2016).

Ухудшение обстановки по заболеваемости бешенством животных в РТ за последние годы обусловлено снижением изучения эпизоотологических процессов в республике. Эффективность вакцинопрофилактики животных дикой фауны диктует необходимость продолжения изучения эпизоотической ситуации по бешенству на территории Республики Татарстан, выявление факторов, способствующих распространению инфекции среди диких, домашних и сельскохозяйственных животных и определение прогноза заболеваемости на основе выявленных особенностей эпизоотических процессов.

Цель и задачи исследования. Целью исследований явилось изучение эпизоотической ситуации и оценка эффективности профилактики бешенства у сельскохозяйственных, домашних и диких плотоядных животных в Республике Татарстан.

Поставленная цель решалась следующими задачами:

1. Проанализировать эпизоотическую ситуацию по бешенству и профилактические мероприятия в Республике Татарстан с учетом климатических и географических особенностей;

2. Изучить иммунобиологические свойства изолятов уличного вируса бешенства, выделенных в Республике Татарстан;

3. Оценить напряженность иммунитета к бешенству у сельскохозяйственных, домашних и диких плотоядных животных в Республике Татарстан в период с 2012 по 2016 гг.;

4. Разработать синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) для выявления и идентификации вируса бешенства.

Научная новизна. Впервые изучена эпизоотическая ситуация по бешенству в РТ за 2010-2016 гг., при этом установлена распространенность и уровень заболеваемости среди сельскохозяйственных, домашних и диких животных, сезонность и периодичность проявления инфекции и составлена карта эпизоотической ситуации по бешенству Республики Татарстан. Изучены биологические и антигенные свойства изолятов вируса бешенства, выделенных от разных видов животных на территории РТ.

Проведена оценка поствакцинального иммунитета у сельскохозяйственных, домашних и диких плотоядных животных на территории РТ за 2012-2016 гг.

Впервые разработаны и предложены для внедрения в ветеринарную практику синтетические олигонуклеотидные праймеры для молекулярно-генетических исследований по индикации вируса бешенства методом ОТ-ПЦР. Новизна проведенных исследований подтверждена патентом РФ на изобретение (патент РФ № 2575088 от 02.10.2014г.).

Теоретическая и практическая значимость. Полученные данные дают возможность оценить и прогнозировать современную эпизоотическую ситуацию по бешенству в Республике Татарстан. Картографирование неблагополучных районов позволит выявить потенциальных переносчиков по численности и плотности их расселения в природных очагах, организовать противоэпизоотические, ветеринарно-санитарные мероприятия, используя различные средства специфической профилактики.

Изучение биологических свойств изолятов вируса бешенства и определение их патогенности, вирулентности, антигенности имеет важнейшее эпизоотическое значение.

Практическая значимость работы определяется тем, что в результате проведенных исследований разработаны: «Рекомендации по купированию первичных очагов бешенства» (19.11.2014г.), «Методические указания по индикации возбудителя бешенства с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полимеразной цепной реакции обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР)» (01.08.2016г.), информационное научно-популярное издание «Защити себя от бешенства» (26.04.2013г.), издана памятка по профилактике бешенства для населения, которые рассмотрены и одобрены научно-методическим и ученым советом ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ». В ветеринарную практику РТ внедрен способ выявления РНК вируса бешенства с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в ОТ-ПЦР.

Методология и методы исследований. Для выполнения поставленных задач и достижения цели диссертационной работы применяли эпизоотологические, клинические, серологические, вирусологические, культуральные, молекулярно-генетические методы исследования и метод экспериментального заражения восприимчивых животных.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- особенности эпизоотического состояния по бешенству в Республике Татарстан в период с 2010 г. по 2016 г. Картографирование территории Республики по интенсивности распространения заболевания;

- иммунобиологические и антигенные свойства эпизоотических штаммов вируса бешенства;

- результаты изучения эффективности вакцинопрофилактики бешенства животных;

- разработка синтетических олигонуклеотидных праймеров для индикации возбудителя бешенства методом ОТ-ПЦР.

Степень достоверности и апробация результатов исследований подтверждается многократными экспериментами, проведенными с применением стандартизированных методик и сертифицированного оборудования, анализа результатов с использованием методов статистической обработки данных.

Результаты материалов диссертации опубликованы в статьях и обсуждались на научных конференциях с ведущими специалистами в данной области.

Основные результаты диссертации представлены и изложены на ежегодных отчетах и научных сессиях за 2012-2017 гг. ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»; Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология и качество жизни» (Москва, 2014); Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы контроля инфекционных болезней животных» (Покров, 2014); II Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные достижения ветеринарной медицины и биологии - в сельскохозяйственное производство» (Уфа, 2014); XII Межгосударственной научно-практической конференции «Вклад государств-участников содружества независимых государств в обеспечение санитарно-эпидемиологического благополучия населения в современных условиях» (Саратов, 2014); Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы контроля инфекционных болезней животных» (Покров, 2014); конференции молодых ученых и специалистов (Казань, 2014); IX Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Молекулярная диагностика - 2017» (Москва, 2017).

Публикации результатов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 13 научных работ, в том числе 5 статей входящих в перечень журналов, рекомендованных ВАК РФ. По результатам исследований получен 1 патент РФ на изобретение.

Структура и объем работы. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов исследований, заключения, списка цитируемой литературы и приложений. Работа изложена на 124 страницах, содержит 13 таблиц и 13 рисунков. Список литературы включает 210 ссылок в том числе 88 иностранных.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Анализ данных по изучению распространенности бешенства

в мире и России

Восприимчивость к заболеванию всех видов теплокровных млекопитающих, чрезвычайная опасность для людей привлекают к бешенству большое внимание ученых и практиков медицины и ветеринарии [1, 41].

Бешенство известно с глубокой древности. Описание этого заболевания встречается в кодексе законов Вавилона за 2300 лет до нашей эры и в памятниках письменности за 3000 лет до нашей эры. Древние индийцы, арабы, евреи и другие народы также знали об этой страшной болезни. Были обнаружены рисунки бешеных собак, сделанные египтянами. Во II в. н. э. врачи применяли как профилактическую меру против бешенства хирургическое удаление тканей в месте укуса и прижигание ран раскаленным железом [41, 95].

Ввиду известных особенностей и зоонотической природы в наше время бешенство приобрело существенный социальный аспект и остается объектом постоянного повышенного внимания международных организаций медицинского и ветеринарного профиля (ВОЗ, ФАО, МЭБ) [58].

Заболевание значительно распространено практически на всех континентах. Исторически свободны от инфекции Австралии, Новая Зеландия, Антарктида, некоторые острова Океании, Мавритания, Мальта, Мальдивские острова и другие. Полуостровные государства Англия, Скандинавия, Испания, Португалия, Япония, Малайзия, Сингапур, Тайвань и др. благодаря строгим карантинным мероприятиям свободны от бешенства. Нозоареал бешенства, расположенный на разных по площади и природным факторам территориях, находится в состоянии постоянной эволюции. Недавно были обнаружены штаммы лиссаподобных вирусов в Великобритании и Австралии, которые ранее считались свободными от рабического вируса [82, 121, 124, 128].

Вместе с тем, несмотря на ежегодный учет ВОЗ случаев бешенства, полных и точных данных по всему миру нет, так как во многих странах регистрация бешенства необязательна. Поэтому мировая официальная статистика носит только обобщенный характер, позволяющая проследить лишь основные тенденции распространения инфекции.

Особенно сложная ситуация в Африке, Азии и Латинской Америке, где регистрируют городской тип бешенства. В Европе классическое бешенство регистрируют в основном в восточной части, в Западной Европе оно практически ликвидировано [199, 209].

Анализ данных Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) относительно регистрации случаев бешенства в европейских странах с 2005 по 2016 годы показывает, что своевременное и качественное проведение мер борьбы и профилактики болезни обеспечивает стойкое благополучие по бешенству таких стран, как Великобритания, Япония, Финляндия, Нидерланды, Франция, Швейцария, Бельгия и Люксембург. После реализации успешных мер борьбы с болезнью благополучием характеризуется ситуация в Германии, Венгрии, Словакии, Польше. Ситуация по бешенству остается длительно и стабильно неблагополучной по заболеванию на территории таких стран, как Российская Федерация, Украина, Беларусь, Хорватия и Литва [180]. Сложная ситуация по бешенству в Эстонии, Латвии, Молдавии (рис. 1).

Особенности эпизоотологии и эпидемиологии бешенства начали формироваться в период после второй мировой войны, который ознаменовался возникновением и распространением бешенства в Европе. Рыжие лисицы являются главными распространителями бешенства и наиболее восприимчивым видом в Европейских странах. Кроме того, немаловажную роль в распространении болезни играют енотовидные собаки, популяция которых в Европе увеличивается [125, 136, 201].

Рисунок 1 - Динамика изменения числа случаев бешенства животных в Европе, за период с 2005-2015 гг.

На территории Российской Федерации (РФ) бешенство регистрируется ежегодно. На протяжении десятков лет сформировались стойкие очаги этого заболевания среди диких животных, в ряде регионов России регистрируется городское бешенство, поддерживаемое и распространяемое бездомными плотоядными, прежде всего собаками [4, 116, 117].

Наибольшее количество неблагополучных населённых пунктов в РФ отмечены в 2010 г. - в Белгородской, Брянской, Воронежской, Пензенской областях и Республиках Татарстан и Башкортостан; в 2011 г. - в Московской, Смоленской, Челябинской областях и Республике Татарстан; в 2012 г. - в Московской и Республике Татарстан; в 2013 г. - в Оренбургской, Челябинской и Белгородской областях и Республике Татарстан; в 2014 г. - в Липецкой, Саратовской, Белгородской областях и Республике Татарстан и в 2015 г. в Московской, Липецкой областях и Республике Татарстан (табл. 1) [117, 121].

Таблица 1 - Количество неблагополучных населённых пунктов в РФ

за 2010-2015 гг.

Наименование регионов 2010 год 2011 год 2012 год 2013 год 2014 год 2015 год Всего

Белгородская 243 300 125 668

Брянская 246 246

Воронежская 187 187

Липецкая 119 148 267

Московская 235 288 169 692

Оренбургская 195 195

Пензенская 178 178

Смоленская 200 200

Саратовская 124 124

Челябинская 107 171 278

Республика Башкортостан 273 273

Республика Татарстан 213 118 244 231 118 193 1117

Из данных, представленных в таблице 1, за 2010-2015 гг. следует, что наибольшее количество неблагополучных пунктов по бешенству зарегистрировано в Республике Татарстан, Московской и Белгородской областях. В большинстве случаев бешенство отмечается у диких животных.

В основном случаи бешенства выявляли у диких млекопитающих. Изучение видовой структуры животных, заболевших бешенством за 2010-2016 гг., показало увеличение числа доли лисиц в этой патологии, которое повлекло к повышению заболеваемости бешенством кошек и собак [4, 81, 98, 112].

По данным официальной статистики, за последние 5 лет бешенство регистрировали во всех семи Федеральных округах РФ. Заболеваемость животных бешенством в РФ в схематичном виде представлена на рисунке 2. Максимальное количество неблагополучных пунктов регистрировалось в Центральном ФО

(наиболее неблагополучными являлись Белгородская, Липецкая, Брянская, Московская, Тамбовская, Тверская и др. области), на втором месте - Приволжский ФО, на третьем - Южный и Уральский ФО, минимальное количество неблагополучных пунктов регистрировалось в Дальневосточном ФО [6, 12, 121].

Рисунок 2 - Заболеваемость бешенством в Федеральных округах РФ

Ситуация по заболеваемости бешенством в Приволжском Федеральном округе за 2015 год характеризовалась как крайне неблагополучная. Наиболее неблагополучным регионом была Республика Татарстан, где регистрированы 255 неблагополучных пунктов (н.п.), второе место занимает Саратовская область - 114 н.п., третье - Удмуртская Республика - 97 н.п. Общее число неблагополучных пунктов составило 1038. Основной вклад в рост неблагополучия и заболеваемости бешенством вносят домашние и дикие плотоядные животные. Несмотря на, то что разделяют бешенство природного и городского типов, между ними поддерживается четкая взаимосвязь [29, 30].

Анализ эпизоотической ситуации по бешенству животных в России за 2015 год показало, что заболевание установили в 62 субъектах РФ. В таблице 2,

представлены данные о поступлении материала по видам животных и выявленных положительных случаях в динамике за период 2010-2016 гг.

За 2015 год на территории Российской Федерации зарегистрировано 3739 случаев заболевания бешенством, что на 1586 (42%) случаев больше, чем в 2014 г. Из этого числа заболело 466 сельскохозяйственных животных, 846 собак, 549 кошек, 1670 диких плотоядных и 171 пушных зверей. Удельный вес числа случаев регистрации бешенства на территории России среди сельскохозяйственных, домашних и диких животных за 2015 год выглядит следующим образом: на диких животных, среди которых основным источником распространения бешенства являются лисы, приходится 48,8%, доля домашних животных (собаки, кошки) составляет 37,9%, сельскохозяйственных животных -12,4%.

Статистика заболеваемости бешенством представителей дикой фауны по сезонам года во многом обусловлена особенностями биологии хищников, составляющих природный резервуар бешенства, и в основном имеет схожий характер в разных географических зонах: увеличение напряженности наблюдается в осенний-зимний и зимний-весенний период, снижение напряженности - в летнее время. Сезонность бешенства домашних и сельскохозяйственных животных коррелирует с природным [6, 45, 46, 52, 91].

Таким образом, природное бешенство распространено в различных географических зонах и зависит от взаимовлияния биотических факторов, в первую очередь, от многообразия характера передвижения диких животных, переносчиков рабического вируса. Большинство представителей диких животных способны мигрировать как внутри популяции, так и внутри ареала. Участились случаи бешенства, при преднамеренном или случайном переносе особей-носителей рабического вируса какого-либо вида за пределы их родного местообитания.

Таблица 2 - Анализ эпизоотической ситуации по бешенству животных в России 2010-2015 гг.

Вид животных 2010 год 2011 год 2012 год 2013 год 2014 год 2015 год

п + п + п + п + п + п +

Лошади 41 18 43 18 32 11 65 18 27 10 51 14

Крупный рог. скот 498 288 642 287 626 299 1104 358 770 211 941 387

Мелкий рог. скот 59 38 154 46 124 34 313 38 120 32 148 60

Свиньи 6 3 11 3 19 3 87 2 172 51 24 5

Пушные звери 162 65 187 65 830 175 1810 148 1229 201 756 171

Промысловые и дикие животные 5540 1114 3919 1540 4166 1367 6250 1450 4332 918 5548 1671

Собаки 752 599 5506 597 5177 455 7124 700 4762 399 4911 846

Кошки 2289 470 2691 425 3165 432 3586 442 3394 310 4252 549

Прочие виды 511 36 605 25 856 48 792 35 552 21 504 36

ИТОГО: 9858 2631 13758 3006 14995 2824 21131 3191 15358 2153 17105 3739

Примечание:

- п - количество исследованных животных

- + - положительный результат

Также имеет значение постепенное изменение видового состава животных в определенной местности вследствие жизнедеятельности человека и воздействием его на экологию, либо превалированием животных одного вида над другими вследствие их значительного размножения [55, 96, 160].

Учитывая чрезвычайную важность проблемы глобализации бешенства в мире, существует необходимость постоянного проведения эпизоотологического мониторинга и изучения этой особо опасной инфекции в зоне Республики Татарстан.

1.2 Характеристика и биологические свойства возбудителя бешенства

Вирус бешенства принадлежит огромному семейству рабдовирусов (Rhabdoviridae), которое включает род Lyssavirus, Vesikulovirus, Nucleorhabdovirus, Ephemerovirus, Cytorhabdovirus.

Наибольший интерес вызывает вирус классического бешенства рода Lyssavirus в семействе Rhabdoviridae, отряд Mononegavirales. В пределах рода выделяют двенадцать генотипов [84, 101].

Знание структуры и функций белков, их расположение в вирионе позволяет понять механизм репликации вируса и патогенез болезни, а также определить подходы к лечению, созданию вакцин и диагностических препаратов.

Вирион вируса бешенства пулевидной формы, размером 180х80 нм. Нуклеокапсид вириона покрыт белково-липидной оболочкой с поверхностными шипами. Репродукция вируса происходит в цитоплазме нервных клеток [202].

Геномная РНК несегментированная одноцепочечная негативно спиральная с длиной около 12 тыс. п.о. и м.м. 3500 - 4600 кД кодирует такие белки как G, N М и L [191, 195]. Из них белок О с самой большой молекулярной массой 65-70 кД представляет собой гликопротеин образующий структурную основу для поверхностных отростков, выступающих из мембранных белков, способствующих адсорбции вирионов на поверхность клеток.

О-белок обладает способностью индуцировать образование вируснейтрализующих антител, антигемагглютининов и создает иммунитет к

заражению вирусом бешенства. В связи с этим, нейтрализующие антитела против гликопротеина играют главную роль в иммунных реакциях [146, 202].

Следующий белок N, с молекулярной массой 57кД - групповой антиген практически для всех представителей лиссавирусов, изолированных из различных частей света.

По результатам современных исследований белок N вступает в перекрестные реакции между различными родственными ему вирусами, выявляется методом флуоресцирующих антител (МФА), в реакциях связывания комплемента (РСК) и диффузионной преципитации (РДП) [168, 169]. Установлено, также что нуклеопротеин формирует клеточный иммунитет, в связи с этим N- белок может быть потенциальным дополнительным компонентом при создании вакцин против различных генотипов [67, 148].

Высокомолекулярный L-белок и NS-белок, содержатся в вирионе в незначительном количестве, являются компонентами транскриптазы, обеспечивают транскрипцию и репликацию. Кроме того, белок NS выполняет конформационную роль. Матричный белок М примыкает к нуклеокапсиду и является негликозилированным белком вирусной оболочки.

Установлен генетический плеоморфизм гена нуклеопротеида бешенства, причем идентифицировано по крайней мере 12 филогенетических линий в соответствии с географической локализацией хозяина [151, 191].

ВОЗ рекомендует классификацию вирусов бешенства, на основе различий гликопротеинового компонента, по которой дифференцируют 6 генотипов. Большинство уличных и фиксированных штаммов вируса бешенства, в этом числе и штамм «CVS», относят к 1 генотипу; Lagos bat вирус летучих мышей выделенный в Нигерии, в Центрально-Африканской Республике и Гвинее, в Зимбабве - ко 2-му генотипу. Представителем 3-го генотипа является вирус Mokola, выделенный в Нигерии, в Камеруне, Республике Центральной Африки, в Зимбабве; 4-го генотипа - вирус Duvenhage; 5-го генотипа - European Bat Lyssa Virus 1 и 6-го генотипа - European Bat Lyssa Virus 2.

Филогенетическим анализом гена нуклеопротеина 82 представителей

вирусов бешенства подтверждено наличие 6 генотипов рода лиссавирус. В дополнение, на австралийском континенте также был выделен вирус бешенства 7-го генотипа от летучих мышей, отличающийся от всех 6 генотипов бешенства [13, 14, 101, 103].

Считают, что вариативность антигенных свойств изолятов бешенства обусловлена особенностями экологической ниши. Селимов М.А. (1978) предложил типологию разновидностей вируса уличного бешенства на основе эволюционно экологического принципа: I - обычный вирус собачьего бешенства; II - вирус африканского собачьего бешенства; III - вирус лисьего природного бешенства; IV - вирус американского бешенства летучих мышей; V- вирус дикования песцов или арктического бешенства; VI - вирус мышевидных грызунов в Центральной Европе; VII - вирусы, землеройки, летучих мышей и насекомых в Африке [84, 86, 87, 103].

Антигенность компонентов вириона. Анализ отдельных фракций вируса бешенства показал, что белки вириона распределены таким образом: О - 47%, М1 и М2 - соответственно 8,5 и 10,5%, а рибонуклеопротеид - 34%. «Сердцевина» вириона содержит 12,5% белка О, 59,4% белка нуклеокапсида, 12,5% белка М1 и 15,6% белка М2. Иммунизация животных различными дозами белка О индуцировала образование вирусспецифических антител, обладающих способностью нейтрализовать вирус, которые были в 3,5 - 80 раз выше, чем при иммунизации белками «сердцевины» вириона. Животные, иммунизированные препаратами нуклеокапсида, не приобретали резистентности к последующему заражению вирусом бешенства. Уровень резистентности животных, иммунизированных цельным вирусом был в 9 - 24 раз выше, чем при иммунизации смесью белков О, М1 и М2. В сыворотках крови животных, иммунизированных цельным вирусом выявлялись антитела, как к белку, так и к нуклеокапсиду [27, 39, 40].

При иммунизации очищенными препаратами рибонуклеопротеида происходило образование комплементсвязывающих антител и антител, выявляемых в тесте иммунофлуоресценции. При последовательной очистке

препаратов вириона по мере потери способности рибонуклеопротеида индуцировать образование нейтрализующих антител относительно возрастала способность вызывать образование антител, выявляемых в РСК. При ультрацентрифугировании инфекционная активность надосадка была равна 0,0014 % от исходного уровня, но комплементсвязывающая активность при этом сохранялась на 100%. Животные, иммунизированные указанной надосадочной жидкостью, имели резистентность, соответствующую только 3,8 % от уровня резистентности животных, иммунизированных исходным, инактивированным Р-пропиолактоном вируса бешенства [8, 45, 55].

Патогенез бешенства. Основной путь передачи возбудителя бешенства -укус, возможно заражение трансплацентарно, ректально, орально, аэрогенно (летучие мыши), трансмиссивно (иксодовые клещи), при трансплантации и пластических операциях [11, 68, 84, 205].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Самерханов, Ильнур Иршатович, 2018 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абдрахманов, С.К. Визуализация и анализ ветеринарно-географического распространения бешенства с использованием гис-технологий / С.К.Абдрахманов, И.И. Сытник, Ш.Ж. Турсункулов // Мат. V Международная науч.-практ. конф. (17-18 марта 2010 г.). - Барнаул: Изд-во АГАУ, 2010. - Кн. 3. - С. 283-286.

2. Авилов, В.М. Эпизоотическое состояние и эффективность проводимых мероприятий против бешенства животных в России / В.М. Авилов, А.А. Гусев, А.В. Савин // Ветеринария. - 2002. - № 6. - С. 3-6.

3. Апалькин, В.А. Бешенство животных в России. Особенности современной эпизоотической обстановки / В.А. Апалькин, В.А. Ведерников, И.В. Балдина [и др.] // Ветеринария. - 2004. - № 12. - С. 12-14.

4. Арутюнова, И.П. Бешенство антропургического типа - проблема больших городов / И.П. Арутюнова, Е.И. Будкин, О.М. Швец, И.В. Ермилов // Ветеринарная патология. - 2010. - № 1(32). - С. 17-20.

5. Бакулов, И.А. Рекомендации по методике эпизоотологического исследования / И.А.Бакулов, Г.Г.Юрков, А.П.Песковацков, В.А.Ведерников // - Покров, 1975

- С.75.

6. Балахонов, С.В. Эпидемиологическая обстановка и профилактика зоонозных и природно-очаговых инфекционных болезней в Сибири и на Дальнем востоке / С.В. Балохонов, М.В. Чеснокова, Е.И. Андаев [и др.] // ЖМЭИ. - 2013. - № 1.

- С. 62-66.

7. Балдина, И.В. Эпизоотологические основы совершенствования профилактики бешенства в Московском регионе: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / Балдина Ирина Владимировна. - М., 2004. - 29 с.

8. Баньковский, Д.О. Иммунобиологические свойства штамма ERA G333 вируса бешенства для изготовления оральной антирабической вакцины: автореф. дис.

... канд. биол. наук: 06.02.02 / Баньковский Денис Олегович. - Щелково, 2010. - 19 с.

9. Бардина, Н.С. Бешенство в России. Оценка риска: информационно -аналитический обзор / Н.С. Бардина, М.А. Титов, А.К. Караулов и др. -Владимир: ФГУ «ВНИИЗЖ», 2008. - 80 с.

10. Белик, Е.В. Эпизоотическая ситуация по бешенству на территории Владимирской области (2005-2009): информационно - аналитический обзор / Е.В. Белик, С.А. Дудников, А.В. Бельчихина и др. - Владимир: ФГУ «ВНИИЗЖ», 2010. - 134 с.

11. Белоусова, Р.В. Ветеринарная вирусология / Р.В. Белоусова, Э.А. Преображенская, И.В. Третьякова. - М.: Колос, 2007. - 424 с.

12. Бельчихина, А.В. Ретроспективный анализ эпизоотической ситуации по бешенству животных на территории Владимирской области / А.В. Бельчихина, М.А. Шибаев, С.А. Дудников // Ветеринария сегодня. - 2013. - №2 1(4). - С. 4953.

13. Ботвинкин, А.Д. Антигенные варианты вируса бешенства, связанные с заболеваниями людей в России и странах ближнего зарубежья / А.Д. Ботвинкин, М.А. Селимов, М.А. Штыкова, В.В. Хозинский // Современные проблемы рабиологии. - М.: 1998. - С. 34.

14. Ботвинкин, А.Д. Антигенная характеристика полевых штаммов вируса бешенства из различных районов СССР с помощью анти нуклеокапсидных моноклональных антител / А.Д. Ботвинкин, М.А. Селимов, Е.В. Клюева, Л.Я. Грибанова, Н.А. Хисматуллина // ЖМЭИ. - 1990. - № 1. - С. 50-54.

15. Ботвинкин, А.Д. Арктическое бешенство в России - трансформация парадигмы // 13-й Международный конгресс по приполярной медицине: матер.конгресса. Кн. 2. - Новосибирск, 2006. - С. 33-34.

16. Ботвинкин, А.Д. Итоги изучения антигенного разнообразия вируса бешенства на территории бывшего СССР / А.Д. Ботвинкин, И.В. Кузьмин, Н.А. Хисматуллина // Ветеринарная патология. - 2004. - № 3. - С. 117-126.

17. Ботвинкин, А.Д. Итоги изучения роли рукокрылых в распространении вируса бешенства в СССР / А.Д. Ботвинкин // Рукокрылые. Морфология, экология, эхолокация, паразиты, охрана: матер. Всесоюз. семинара. - Киев, 1985. - С. 138-141.

18. Бусыгин, К.Ф. Диагностика бешенства методом флуоресцирующих антител / К.Ф. Бусыгин // Тез.докл. Всесоюз. конф. - Казань, 1983. - С. 136.

19. Бусыгин, К.Ф. Применение метода диффузионной реакции преципитации в агаре - геле для изучения специфичности иммунных сывороток / К.Ф. Бусыгин // Ученые записки КГВИ. - 1964. - Т. 90. - С. 144-149.

20. Бучнев, К.Н. Диагностика бешенства с применением реакции преципитации в агаровом геле / К.Н. Бучнев, М.М. Шахматов, В.Л. Титов [и др.] // Ветеринария. - 1963. - № 3. - С. 66-70.

21. Ведерников, В.А Бешенство животных в Российской Федерации / В.А. Ведерников, И.В. Балдина, А.А. Шабейкин [и др.] // Вакцинация. - 2005. - № 1. - С. 15.

22. Ведерников, В.А. Краткая характеристика обстановки по бешенству животных, сложившейся в России в сентябре 2010 года / В.А. Ведерников, И.В. Балдина // Ветеринарная жизнь. - 2010. - № 21. - С.

23. Всемирная организация здравоохранения Бешенство [Электронный ресурс]. -Информационный бюллетень. - 2013. - № 99.- июль. - Режим доступа: http: //www.who. mt/mediacentre/factsheets/fs099/ru/mdex.htm

24. Гасанов, Э.Н. Эпидемиологическая ситуация и профилактика бешенства / Э.Н. Гасанов // Ветеринарная медицина. - 2011. - № 10. - С. 25

25. ГОСТ СССР 26075-84 (СТ СЭВ 3452-8). Животные сельскохозяйственные. Методы лабораторной диагностики бешенства. - М.: Государственный комитет СССР по стандартам, 1984. - 12 с.

26. Грибенча, С.В. Получение моноклональных антител к нуклеопротеину вируса бешенства / С.В. Грибенча, А.Ю. Козлов, Л.В. Костина, А.Л. Елаков [и др.] // Вопросы вирусологии. - 2013. - № 5. - С. 38-43.

27. Грибенча, С.В. Рабдовирусы / С.В. Грибенча, Д.К. Львов. - В кн.: Львов Д.К., ред. Медицинская вирусология. - М.: МИА, 2008. - С. 586-594

28. Груздев, К.Н. Бешенство животных / К.Н. Груздев, В.В. Недосеков. - М.: «АКВАРИУМ», 2001. - 304 с.

29. Груздев, К.Н., Возможность исследования альтернативных методов оценки антирабических вакцин / К.Н. Груздев, В.В. Недосеков, И.Ф. Вишняков [и др.] // Инфекционные и инвазионные болезни: матер. Межд. научно-практ. конф., посвящ. 70-летию образования зооинженерного факультета. - Казань, 2000. -С. 49.

30. Гулюкин, А.М. Изучение иммунного статуса организма собак, вакцинированных против бешенства / А.М. Гулюкин, Н.А. Хисматуллина, А.З. Гафарова [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2012. - Т. 211. - С. 53.

31. Гулюкин, А.М. Изучение связи заболеваемости бешенством животных с плотностью популяций диких животных / А.М. Гулюкин, Н.А. Хисматуллина // Актуальные проблемы болезней, общих для человека и животных: матер. Всерос. науч. - практ. конф. с Междунар. участием, посвящ., 60-летию ФКУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумной институт Роспотребнадзора». - Ставрополь, 2012. - С. 90-91.

32. Гулюкин, А.М. Иммуноферментная оценка эффективности вакцинопрофилактики бешенства / А.М. Гулюкин, Н.А. Хисматуллина, А.Л. Елаков [и др.] // Ветеринария и кормление - 2012. - № 6. - С. 26-27

33. Гулюкин, А.М. Контроль эффективности вакцинопрофилактики бешенства с помощью блок-иммуноферментной тест-системы / А.М. Гулюкин, Н.А. Хисматуллина, А.Л. Елаков // Научные основы производства и обеспечения качества биологических препаратов для АПК: матер. Межд. науч. - практ. -конф. - Щелково, 2012. - С. 185.

34. Гулюкин, А.М. Оценка эффективности вакцинопрофилактики бешенства с помощью иммуноферментной тест-системы / А.М. Гулюкин, Н.А.

Хисматуллина, А.Н. Чернов [и др.] // Биотехнология: экология крупных городов: матер. Московской Межд. науч. - практ. конф. 15-17 марта. - М., 2010. - С. 465-466.

35. Дудников, С.А. Лисы как маркер риска при бешенстве: Часть I. Эпизоотологические аспекты / С.А. Дудников - Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов: труды Межд. науч. - практич. конф. посвящ. 45-летию института. - Покров: ВНИИВВиМ, 2003. - С. 73.

36. Дудников, С.А. Лисы как маркер риска при бешенстве: Часть II. Противоэпизоотические мероприятия. / С.А. Дудников. - Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов: труды Межд. науч. - практ. - конф., посвященной 45-летию института. - Покров: ВНИИВВиМ, 2003. - С. 75.

37. Елаков, А.Л. Антирабические вакцины для животных, применяемых в России / А.Л. Елаков // Ветфарм. - 2013. - №4. - C. 32-34.

38.Елаков, А.Л. Стандартизация контроля антирабических вакцин / А.Л. Елаков, В.И. Уласов, В.С. Иванов // Актуальные проблемы здоровья скота, завозимого в Россию в рамках национального проекта «Развитие агропромышленного комплекса», 28-30 ноября 2008 г.: матер. Межд. конф. - Казань, 2007. - С. 5457.

39. Жестерев, В.И. Иммунобиологические свойства штамма РБ-71/10 вируса бешенства / В.И. Жестерев, О.Г. Лаптева, М.А. Филатова // Вестник РАСХН. -2008. - № 4. - С. 61.

40. Жестерев, В.И. Штаммы вируса бешенства и их практическое значение /В.И. Жестерев, О.Г. Лаптева // Болезни диких жив-х.: труды междунар.науч.-практ. конф. - Покров, 2004. - С. 35-37.

41. Заволока, А.А. О регулировании численности бездомных животных из-за проблем с бешенством / А.А. Заволока // VetPharma. - 2013. - №4.- С. 25-27.

42. Зайковская, А.В. Летучие мыши - носители лиссавирусной инфекции в Новосибирской области и Алтайском крае / А.В. Зайковская, В.А. Терновой,

A.A. Томиленко, А.М. Шестопалов // Тез.докладов всерос. конф. «Сибирская зоологическая конференция». - Новосибирск, 2004. - С. 375.

43. Иванов, А.В. Бешенство: этиология, эпизоотология, диагностика: учебно -методическое пособие в иллюстрациях / А.В. Иванов, Н.А. Хисматуллина, А.Н. Чернов, А.М. Гулюкин. - М.: Колос, 2010. - 54 с.

44. Иванов, А.В. Диагностика и профилактика бешенства животных / А.В. Иванов, Н.А. Хисматуллина, Р.Х. Юсупов, А.Н. Чернов. - М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2007. - 60 с.

45. Иванов, А.В. Изучение биологических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства / А.В. Иванов, Р.Х. Юсупов, Н.А. Хисматуллина [и др.] // Научные основы обеспеченности защиты животных от экотоксических, радионуклидов и возбудителей опасных инфекционных заболеваний: матер. Международ. симпозиума Часть 3. - 2005. - № 3. - С. 90-92.

46. Иванов, А.В. Иммунологический и эпизоотолого - эпидемиологический мониторинг бешенства в Республике Татарстан / А.В. Иванов, Н.А. Хисматуллина, А.Н. Чернов [и др.] // Биотехнология. Токсикологическая, радиационная и биологическая безопасность России: матер. Межд. науч. -практ. конф. - Казань, 2010. - С. 382-388.

47. Иванов, А.В. Эпизоотологический и иммунологический надзор за бешенством / А.В. Иванов, Н.А. Хисматуллина, А.М. Гулюкин // Ветеринарный врач. -2010. - № 4 (17). - С. 3-6.

48. Иванов, А.В. Эпизоотолого - эпидемиологический надзор за бешенством: методическое руководство / А.В. Иванов, Н.А. Хисматуллина, Р.Х. Юсупов и др. - Казань, ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», 2007. - 95 с.

49. Иванов, В.С. Состояние и перспективы борьбы с бешенством животных и человека / В.С. Иванов, П.П. Кузнецов, Е.Э. Школьников // Вестник РАСХН. -2000. - № 2. - С. 63-65.

50. Истомина, М.А. Совершенствование методов прижизненной диагностики и оценки эффективности вакцинопрофилактики бешенства / М.А. Истомина // Ветеринарный врач. - 2011. - № 4. - С. 17-20.

51. Клюкина, В.И. Иммуноферментная тест - система для определения уровня иммунитета у вакцинированных против бешенства кошек и собак / В.И. Клюкина, П.В. Рахманин, А.В. Проничев // Ветеринария и кормление. - 2008.

- № 3. - С. 12-14.

52. Клюкина, В.И. Эпизоотическая ситуация и оценка эффективности вакцинации собак против бешенства методом ИФА / В.И. Клюкина, О.С. Захарченко, Н.А. Бондарева // Научные основы производства и обеспечения качества биологических препаратов для АПК: матер. Межд. науч. - практ. - конф. -Щелково, 2012. - С. 212.

53. Колбасов, Д.В. Использование биотехнологических методов при создании инновационных средств диагностики, профилактики и лечения инфекционных болезней животных / Д.В. Колбасов // Вестник РАСХН. - 2011. - № 1. - С. 42-43.

54. Крюков, С.В. Особенности эпизоотического процесса и меры борьбы с бешенством в Кировской области / С.В. Крюков, Н.В. Мельник, В.Н. Боровой, С.Г. Дресвянникова, Н.А. Хисматуллина // Ветеринарный врач. - 2011. - № 3.

- С. 7-10.

55. Кузьмин, И.В. Лиссавирус с необычной антигенной структурой, выделенный от летучей мыши на юге Кыргызстана / И.В. Кузьмин, А.Д. Ботвинкин, С.Н. Рыбин, А.В. Баялиев // Вопросы вирусологии. - 1992. - № 5 - 6. - С. 256-259.

56. Леонова, Г.Н. Изоляция и изучение лиссавируса, вызвавшего летальную инфекцию у человека в Приморском крае / Г.Н. Леонова, С.И. Беликов, И.Г. Кондратьев [и др.] // Актуальные проблемы природной очаговости болезней: матер.Всерос. конф. с международным участием, посвящ. 70-летию теории академика Е.Н. Павловского о природной очаговости болезней (24-25 ноября 2009 г., Омск). - Омск: ИЦ «Омский издательский центр», 2009. - С. 115-117.

57. Лешкевич, А.Л. Бешенство в мире по - прежнему остается серьезной и неразрешенной проблемой [Электронный ресурс] / А.Л. Лешкевич // Пресс -релизы. - 2012. - Режим доступа:

58. Макаров, В. В. Актуальные проблемы бешенства: природная очаговость, методология исследования и контроля в центре России / В. В. Макаров, А. А. Воробьев // Ветеринарная патология. - 2004. - № 3 (10). - С. 102-116.

59. Макаров, В.В. Бешенство: очерк мирового назоареала и общие элементы контроля / В.В. Макаров //Ветеринарная паталогия. - 2002. - №1 - С. 12-20.

60. Макаров, В.В. Ветеринарная эпидемиология распространенных инфекций / В.В. Макаров, О.И. Сухарев, А.А. Коломыцев // Вестник РАСХН. - 2009. - № 2. - С. 71.

61. Макаров, В.В. Оральная вакцинация лисиц против бешенства безальтернативна / В.В. Макаров // Вестник РАСХН. - 2010. - № 2. - С. 57-58.

62. Метлин, А.Е. Меры борьбы с бешенством животных [Электронный ресурс] / А.Е. Метлин // Режим доступа: http://www.kubanvet.ru/journal 15755582.html

63. Метлин, А.Е. Молекулярно-биологические характеристики полевых изолятов и аттенуированных штаммов вируса бешенства: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / Метлин Артем Евгеньевич. - Владимир, 2004. - 27 с.

64. Метлин, А.Е. Оральная вакцинация диких плотоядных животных против бешенства / А.Е. Метлин, С.С. Рыбаков, В.В. Михалишин // Ветеринария. -2009. - № 8. - С. 18-25.

65. Министерство природных ресурсов и экологии Российской Федерации [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.mnr.gov.ru/maps

66. Молодкин, А.В. Перспективы использования моноклональных антител для диагностики бешенства животных / А.В. Молодкин, Н.А. Назаров, Н.М. Михайлина, А.О. Шепеляковская [и др.] // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. - Т. 7. - Владимир: Издательство ООО «Транзит-ИКС», 2009. - С. 43-50.

67. Молодкин, А.В. Сравнительная оценка эффективности препаратов очищенного вируса бешенства и его гликопротеина для определения уровня антирабических антител в иммуноферментном анализе / А.В. Молодкин, Н.М. Михайлина, Е.В. Яковлева // Актуальные вопросы аграрной науки и образования. - Ульяновск, 2008. - Т 4. - С. 72.

68. Нафеев, А.А. Эпидемиологические проблемы профилактики бешенства у человека / А.А. Нафеев, Д.А. Хакимова, Г.М. Айнутдинова, В.И. Аббязова [и др.] // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2011. - № 6. - С. 48.

69. Недосеков, В.В. Обнаружение антител к вирусу бешенства иммунопероксидазным монослойным методом / В.В. Недосеков, И.Ф. Вишняков, В.И. Жестерев, В.М. Балышева [и др.] // Проблемы инфекционной патологии с/х животных: матер. Межд. конф., посвящ. 100-летию открытия вируса ящура. - Владимир, 1997. - С. 181-182.

70. Недосеков, В.В. Разработка и совершенствование средств и методов диагностики бешенства животных и контроля эффективности антирабических вакцин / В.В. Недосеков, И.Ю. Хухоров // Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов: труды Межд. науч. - практ. конф., посвящ. 45-летию института. - Покров: ВНИИВВиМ, 2003. - С. 46.

71. Недосеков, В.В. Разработка и совершенствование средств и методов диагностики бешенства животных и контроля эффективности антирабических вакцин: автореф. дис. ... докт. вет. наук: 16.00.03 / Недосеков Виталий Владимирович. - Покров, 2003. - 47 с.

72. Непоклонов, А.Е. Эпизоотическая ситуация по зооантропозоонозным заболеваниям в Российской Федерации / А.Е Непоклонов, Н.А. Еременко // Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов: тр. Межд. науч. -практ. конф., посвящ. 45-летию создания ВНИИВВиМ. - Покров, 2003. - Часть 4.1 - С. 148-158.

73. Пантюшенко, М.С. Использование полимеразной цепной реакции для выявления полевых изолятов вируса бешенства / М.С. Пантюшенко, М.А.

Наумкина, В.В. Недосеков, И.Ф. Вишняков [и др.] // Современные проблемы рабиологии: тез.докл. науч. конф. - М.: 1998. - С. 26-27.

74. Пашкина, Ю.В. Рабическая инфекция: зоны риска и территориальные границы в условиях РФ в целом и в отдельных регионах / Ю.В. Пашкина, В.В. Сочнев // Ветеринарная патология. - 2005. - № 4. - С. 68-72.

75. Полещук, Е.М. Бешенство в Российской Федерации / Е.М. Полещук, Г.Н. Сидоров, Д.Г. Сидорова, Н.М. Колычев: информационно-аналитический бюллетень. - Омск, 2009. - 46 с.

76. Полещук, Е.М. Бешенство диких животных на юге Восточной Сибири в начале XXI века // Е.М. Полещук, А.Д. Ботвинкин, С.Е. Ткачев, Г.Н. Сидоров [и др.] // Журнал инфекционной патологии. - 2010. - № 17 (3). - С. 112-114.

77. Полещук, Е.М. Бешенство животных в России в 2007-2011 гг. / Е.М. Полещук, Г.Н. Сидоров, Е.С. Березина // Российский ветеринарный журнал. - 2012. - № 6. - С. 8-12.

78. Полещук, Е.М. Западно-Кавказский лиссавирус рукокрылых: отсутствие вакцинной защиты // Е.М. Полещук, И.В. Кузьмин, С.В. Газарян, А.Д. Ботвинкин // Р1есо^. - 2003. - № 6. - С. 67 - 71.

79. Полещук, Е.М. Итоги изучения антигенного и генетического разнообразия вируса бешенства в популяциях наземных млекопитающих России / Е.М. Полещук, Г.Н. Сидоров, С.В. Грибенча // Вопросы вирусологии. - 2013. - Т. 58. - № 3. - С. 9-16.

80. Пономарёв, А.П. Совершенствование метода очистки и концентрирования вируса бешенства / А.П. Пономарёв, Н.А. Назаров, С.С. Рыбаков [и др.] // Нейроинфекции: бешенство, губкообразная энцефалопатия КРС, Крейтцфельда-Якоба и др. прионные болезни; листериоз, болезнь Ауески, болезнь Тешена: матер.междунар. конф. - Покров, 2001. - С. 49-51.

81. Рождественский, И.К. Эпизоотическая ситуация по карантинным и особо опасным болезням животных в Российской федерации за 2009 год / И.К.

Рождественский, О.Б. Литвинов, А.Н. Мачнев [и др.] // Ценовик - 2010. - № 5. - С. 6-7.

82. Сайт Роспотребнадзора РФ [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http:// rospotrebnadzor.ru/news.

83. Самуйленко, А.Я. Инфекционная патология животных: В 2т. / Самуйленко А.Я., Соловьева Б.В., Непоклонова Е.А., Воронина Е.С. - М.: Академкнига, 2006. - 1911 с.

84. Санитарные правила СП 3.1.096-96. Ветеринарные правила ВП13.3.1103-96 «Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Бешенство» (утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 31.05.1996 № 11, Минсельхозпродом РФ 18.06. 1996 №23).

85. Сафонов, Г.А. Перспективы искоренения случаев бешенства в Российской Федерации / Г.А. Сафонов, Е.М. Хрипунов // Вестник РАСХН. - 2011. - № 5. -С. 67.

86. Селимов, М.А. Лиссаподобный вирус Юли и идентификация его с помощью антинуклеокапсидных моноклональных антител (НК МКАТ) /М.А.Селимов, А.Г.Татаров, А.Д.Ботвинкин, Л.И.Куликова, Н.А.Хисматуллина // Rabies information Exchange. - USA. -June. - 1987. -P. 5 - 15.

87. Селимов, М.А. Новые данные о распространении Р-41 положительных штаммов рабического вируса в арктическом и внеарктическом регионах / М.А. Селимов, А.Д. Ботвинкин, В.В. Хозинский, Л.Я. Грибанова // ЖМЭИ. - 1994. -№ 2. - С. 53-56.

88. Сидоров, Г.Н. Аспекты исторического развития природных очагов бешенства в Европе и Северной Азии / Г.Н. Сидоров // Ветеринарная патология. - 2002. -№ 1. - С. 21-25.

89. Сидоров, Г.Н. Природные очаги бешенства в России в XX - начале XXI веков / Г.Н. Сидоров, Е.М. Полещук, Д.Г. Сидорова // Ветеринарная патология. -2004. - № 3(10). - С. 86-101.

90. Сидоров, Г.Н. Эпизоотический процесс бешенства: роль диких млекопитающих, периодичность / Г.Н. Сидоров, Д.Г. Сидорова, Н.М. Колычев // Сибирский вестник сельскохозяйственных наук. - 2008. - № 12. - С. 67-73.

91. Сидорова, Д.Г. Бешенство в Восточной Сибири в XX начале XXI веков / Д.Г. Сидорова, Г.Н. Сидоров, Е.М. Полещук [и др.] // Бюллетень ВосточноСибирского науч. Центра Сиб. Отд-я РАМН. - 2007. - № 3(55). - С. 168-172.

92. Сидорова, Д.Г. Пространственно - временная характеристика эпизоотий бешенства в России, и экологическое обоснование этих явлений за последние полвека / Д.Г. Сидорова, Е.М. Полещук // Диагностика, лечение и профилактика болезней животных в условиях Сибири и Урала: матер. 7-й Межрегион. науч. - практ. конф., посвящ. 180-летию аграрной науки Сибири.

- Омск, 2008. - С. 241-250.

93. Сливко, И.А. Возможные причины неудачи оральной антирабической иммунизации диких плотоядных животных в Российской Федерации / И.А. Сливко, Г.А. Сафонов, Е.М. Хрипунов [и др.] // Ветеринария. - 2013. - №2 10. -С. 27-31.

94. Сологуб, Т.В. Выявление антител к вирусу бешенства методом ингибирования твердофазного ИФА / Т.В. Сологуб, В.Н. Никитин, Н.Ф. Вишняков // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии. - Покров, 1992.

- Часть 2 - С. 261-262.

95. Султанова, А. Получение антигена вируса бешенства. Материалы Республиканской научно-теоретической конференции «Сейфуллинские чтения-11: Молодежь и наука». - 2015. - Т.1, ч.1. - С. 282-283.

96. Сургучева, Л.М. Мониторинг эпизоотической ситуации по бешенству животных на территории Российской Федерации / Л.М. Сургучева, О.Б. Литвинов // Ценовик. - 2011. - С. 91-93.

97. Сухарев, О.И. Тенденции распространения бешенства в восточной европе/ А.М. Гулюкин [и др.] // Ветеринария. - 2008. - № 7. - С. 20-22.

98. Сухарьков, А.Н. Анализ эффективности оральной вакцинации против бешенства животных в дикой среде на примере некоторых регионов Российской Федерации / А.Ю. Сухарьков, А.Н. Назаров, А.Е. Метлин [и др.] // Труды Федерального центра охраны здоровья животных. Т. 8. - Владимир: ООО «Транзит-ИКС», 2010. - С. 57-63.

99. Сухарьков, А.Ю. Методические указания по обнаружению флуоресцентным методом антибиотиков тетрациклинового ряда в тканях зубов и костей животных для контроля поедаемости оральных антирабических вакцин / А.Ю. Сухарьков, Е.В. Чернышова, А.Е. Метлин и др. - Москва, 2010. - 11с.

100. Сухарьков, А.Ю. Оценка поедаемости оральных антирабических вакцин / А.Ю. Сухарьков, Е.В. Чернышова, А.Е. Метлин // Ветеринария. - 2011. - № 11.

- С. 31-34.

101. Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных: под ред. Сюрина В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьева Б.В. и др. - М, 2004. - С. 4-64

102. Таршис, М.Г. Математические методы эпизоотологии /М.Г.Таршис, В.М. Константинов // - М.: Колос. - 1975. - С. 174.

103. Тимиргалеев, Р.В. Усовершенствование методов идентификации вируса бешенства и выявления антирабических антител: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 и 03.00.07 / Руслан Владимирович Тимиргалеев. - Казань, 2006.

- 24 с.

104. Тучков,И.В. Получение рекомбинантного белка гликопротеина вируса бешенства «Москва 3253»/ И.В. Тучков, О.А. Волох, М.Н. Киреев, А.К. Никифоров//Биотехнология. Взгляд в будущее. - 2013. - С.355 - 340.

105. Хадарцев, О.С. Бешенство в Российской Федерации в 2000-2005 гг.: информационный бюллетень / О.С. Хадарцев, Ю.М. Федоров, Н.Я. Жилина, Б.Л. Черкасский [и др.] - М.: Роспотребнадзор, 2006. - 38 а

106. Хисматуллина, Н.А. Идентификация и изучение биологических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства / Н.А. Хисматуллина, М.М. Каримов, Т.А. Савицкая [и др.] // Ученые записки Казанской государственной

академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2004. - Т. 178. - С. 156162.

107. Хисматуллина, Н.А. Изучение биологических и молекулярно -генетических свойств эпизоотических изолятов вируса бешенства, циркулирующих на территории Татарстана / Н.А. Хисматуллина, Т.Х. Фаизов, Н.И. Ермакова [и др.] // Биотехнология. Токсикологическая, радиационная и биологическая безопасность России: матер. Межд. науч. - практ. конф. -Казань, 2010. - С. 497-499.

108. Хисматуллина, Н.А. Контроль эффективности вакцинопрофилактики бешенства с помощью блок-иммуноферментной тест-системы / Н.А. Хисматуллина, А.Л. Елаков, В.В. Сабирова, А.З. Гафарова // Научные основы производства и обеспечения качества биологических препаратов для АПК: матер. Межд. науч. - практ. конф., Щелково, 2012. - С. 181-187.

109. Хисматуллина, Н.А. Методические указания по лабораторной диагностике бешенства, утв. ДВ МСХ и П РФ 14.05.97 г. / Н.А. Хисматуллина, Р.Х. Юсупов, С.Р. Янбарисова, А.Н Чернов, Ш.А. Тятигачев, М.А. Селимов, А.Г. Татаров, В.Я. Кармышева, Л.И. Кондакова.

110. Хисматуллина, Н.А. Разработка и применение блок - иммуноферментной тест-системы для контроля эффективности вакцинопрофилактики бешенства / Н.А. Хисматуллина, А.М. Гулюкин, В.В. Сабирова, А.З. Гафарова, А.Л. Елаков // Ветеринарная медицина: межвед. тематич. науч. сб. - Харьков, 2012. - Вып. 96. - С. 64-66.

111. Хисматуллина, Н.А. Эпизоотическая ситуация и профилактика бешенства лисиц на территории Татарстана / Н.А. Хисматуллина, А.Н. Чернов, Р.Х. Юсупов [и др.] // Ветеринарный врач. - 2005. - № 1. - С. 53-57.

112. Хисматуллина, Н.А. Эпизоотическая ситуация по бешенству животных в республике Татарстан за 2009-2015 гг / Н.А Хисматуллина, А.Н Чернов А.Ф Авзалова [и др.] // Ветеринарная патология. - 2016. - №2. - С. 12-17.

113. Хрипунов, Е.М. Бешенство диких животных, особенности его распространения / Е.М. Хрипунов, В.И. Жестеров, С.Д. Евсеева [и др.] // Нейроинфекции: бешенство, губкообразная энцефалопатия КРС, Крейтфельдта-Якоба и другие прионные болезни; листиреоз, болезнь Ауески, болезнь Тешина: матер. Межд. науч. - практ. конф. - Покров, 2001. - С. 37.

114. Хрипунов, Е.М. Разработка антирабической вакцины для перорального применения /Е.М. Хрипунов, Н.Б. Исакова, С.Д. Евсеева [и др.] // Диагностика,профилактика и меры борьбы с особо опасными, экзотическими изооантропонозными болезнями животных: матер. междунар. науч. -практ.конф. - Покров, 2000. - С. 85-88.

115. Цыбанов, Я.С. Разработка тест - системы для индикации арктического бешенства на основе методов анализа генома: автореф. дисс. ... канд. биол. наук 03.00.06 / Цыбанов Ярали Содномович. - Покров, 2001. - 24 с.

116. Черкасский, Б.Л. Эпидемическая ситуация и меры профилактики бешенства / Б.Л. Черкасский, О.С. Хадарцев, А.А. Мовсесянц // Вет. и мед.аспекты зооантропонозов. - Покров, 2003. -Часть I. - С. 98.

117. Чернов, А.Н. Эпизоотологический мониторинг и разработка средств диагностики бешенства, болезни ауески и бруцеллеза: автореф. дис. ... докт. биол. наук: 06.02.02 / Альберт Николаевич Чернов. - Уфа, 2013. - 47 с.

118. Чернышова, Е.В. Эпизоотическая ситуация по бешенству в России и анализ эффективности антирабической вакцинации среди домашних животных, вывозимых за границу / Е.В. Чернышова, Н.А. Назаров, А.Е. Метлин // Ветеринария сегодня. - 2013. - №4. - С. 49 - 51.

119. Чернышова, Е.В. Методические указания по определению вируснейтрализующих антител к вирусу бешенства в сыворотках крови животных в реакции нейтрализации в культуре клеток ВНК-21 (FAVN) / Е.В. Чернышова, Н.А. Назаров, А.Е. Метлин. - Владимир, 2011. - 23 с.

120. Шмаров, М.М. Индукция протективного иммунного ответа у мышей, вакцинированных рекомбинантным аденовирусом птиц CELO,

экспрессирующим гликопротеин G вируса бешенства / М.М. Шмаров, И.Л. Тутыхина, Д.Ю. Логунов [и др.] // ЖМЭИ. - 2006. - № 4. - С. 69-71.

121. Эпизоотическая ситуация и меры профилактики бешенства [Электронный ресурс]. - Режим доступа: hhhp//77.rospotrebnadzor.ru/index.php/press-centr.

122. Янбарисова, С.Р. Особенности эпизоотической ситуации и меры борьбы с бешенством диких животных в Республике Башкорстан / С.Р. Янбарисова, Ш.А. Тятигачев, Н.А. Хисматуллина // Ветеринарный врач. - 2008. - № 6. - С. 21.

123. Amann, R. A new rabies vaccine based on recombinant Orf virus (Parapoxvirus) expressing the rabies virus glycoprotein / R.Amann, J.Rohde, U.Wulle, D.Conlee, R.Raue, O.Martinon, H.Rziha // J. Virol. - 2013. - 87. - №3. - P. 1618-1630.

124. Arai, Y.T. Antibody responses induced by immunization with a Japanese rabies vaccine determined by neutralization test and enzyme - linked immunosorbent assay / Y.T. Arai, M. Kimura, Y. Sakaue [et al.] // Vaccine. - 2002. - V. 20. - № 19-20. -P. 2448-2453.

125. Arai, Y.T. Epidemiology of rabies virus and other lyssaviruses / Y.T. Arai // Nippon Rinsho. - 2005. - V. 63. - № 12. - P. 2167-2172.

126. Atanasiu, P. Animal inoculation and the Negri body. The Natural History of rabies./ P.Atanasiu // - T.1. Baer G.M. Ed.- Academic Press.- New York, 1975. -P.373.

127. Bankovskiy, D. Immunogenicity of the ERA G 333 rabies virus strain in foxes and raccoon dogs / D. Bankovskiy, G. Safonov, Y. Kurilchuk // Dev. Biol. - 2008. - V. - 131. - P. 461-466.

128. Bhandari, S. Epidemiology and control of Rabies in Nepal [Electronic resource] / Shrawan Bhandari. - 2005. - Access mode: hhhp: // homepage.usask.ca/-shb292/ rabies in nepal. pdf.

129. Bingham, J. Ante-mortem diagnosis of human rabies by the skin biopsy technique: three case reports from Zimbabwe / J. Bingham, P. Mlambo // J. Med. -1995. - V. 41. - № 8. - P. 258-260.

130. Bingham, J. Canine rabies ecology in southern Africa / J. Bingham // Emerg. Infect. Dis. - 2005. - V. 11. - № 9. - P. 1337-1342.

131. Black, E.M. A rapid RT-PCR method to differentiate six established genotypes of rabies and rabies-related viruses using TaqMan technology / E.M. Black, J.P. Lowings, J. Smith [et al.] // J. Virol. Meth. - 2002. - V. 105. - № 1. - P. 25-35.

132. Black, E.M. Molecular methods to distinguish between classical rabies and the rabies-related European bat lyssaviruses / E.M. Black, L.M. McElhinney, J.P. Lowings [et al.] // J. Virol. Meth. - 2000. - V. 87. - № 1 - 2. - P. 123-131.

133. Boldbaatar, B. Molecular epidemiology of rabies virus in Mongolia, 2005-2008 / B. Boldbaatar, S. Inoue, N. Tuya [et al.] // J. Infect. Dis. - 2010. - V. 63. - P. 358363.

134. Botvinkin, A.D. Novel lyssaviruses isolated from bats in Russia / A.D. Botvinkin, E.M. Poleshuk, I.V. Kuzmin [et al.] // Emerg. Infect. Dis. - 2003. - № 9 (12). - P. 1623-1625.

135. Botvinkin, A.D. Rabies in the Mongolian steppes / A.D. Botvinkin, D. Otgonbaatar, S. Tsoodol [et al.] // Dev. Biol. - 2008. - V. 131. - P. 199-205.

136. Botvinkin, A.D. The diversity of rabies virus in Russia demonstrated by antinucleocapsid monoclonal antibody application and limited gene sequencing / A.D. Botvinkin, I.V. Kuzmin, L.M. McElhinney [et al.] // Dev. Biol. - 2006. - V. 125. - P. 79-90.

137. Bourhy, H. Ecology and evolution of rabies in Europe / H. Bourhy, B. Kissi, L. Audry // J .Gen. Virol. - 1999. - V. 80. - № 10. - P. 2545-2557.

138. Bourhy, H. The origin and phylogeography of dog rabies virus. / H. Bourhy, J. Reynes, E. Dunham [et al.] // J. Gen. Virol. - 2008. - № 89. - P. 2673-2681.

139. Bruyere, V. Oral rabies vaccination of foxes with one or two delayed distributions of SAG2 baits during the spring / V. Bruyere, P. Vuillaume, F. Cliquet [et al.] // Vet. Res. - 2000. - Vol. 31. - P. 339-345.

140. Cliquet, F. Assuring the quality and sustainability of a rabies dog vaccination programme: Vaccination, rabies surveillance and post-vaccination monitoring.

Cliquet F., Barrat J. Rabies Control - Towards Sustaiable Prevention at the Source. 2012, 169-176.

141. Cliquet, F. Development of a fluorescent antibody virus neutralization test (FAVN test) for the quantitation of rabies - neutralizing antibody / F. Cliquet, M. Aubert, L. Sagne // J. Immunol. Methods. - 1998. - V. 212. - № 1. - P. 79-87.

142. Cliquet, F. Development of a qualitative indirect ELISA for the measurement of rabies virus - specific antibodies from vaccinated dogs and cats / F. Cliquet, L.M. McElhinney, A. Servat // J. Virol. Methods. - 2004. - V. 117. - P. 1-8.

143. Cliquet, F. ELISA test for rabies antibody titration in orally vaccinated foxes sampled in the fields / F. Cliquet, L. Sagne, J.L. Schereffer [et al.] // Vaccine. - 2000. V. 18. - № 28. - P. 3272-3279.

144. Cliquet, F. Neutralising antibody titration in 25,000 sera of dogs and cats vaccinated against rabies in France, in the framework of the new regulations that offer an alternative to quarantine / F. Cliquet, Y. Verdier, L. Sagne [et al.] // Rev. sci. tech. off. int. Epiz. - 2003. - V. 22. - № 3. - P. 857-886.

145. Crepin, P. Intravitam diagnosis of human rabies by PCR using saliva and cerebrospinal fluid / P. Crepin, L. Audru, Y. Rotivel [et al.] // J. Clin. Microbiol. -1998. - V. 36. - № 4. - P. 1117-1121.

146. Dietzschold, B. Techniques for the purification of rabies virus, its subunits and recombinant products / B. Dietzschol / M.M. Kaplan, H. Koprowski, F.X. Meslin // Laboratory techniques in rabies Eds. - Geneva: WHO, 1996. - P. 175-179.

147. Eckman, H. Rabies control and animal welfare. Eckman H., Vallentine S., Hiby E. Rabies Control - Towards Sustainable Prevention at the Source. 2012, 151-156.

148. El Harrak, M. Epidemiological factors and control of rabies in north Africa [Electronic resource] - / El Harrak M. // Global conference on Rabies Control towards sustainable prevention at the Source Incheon (Republic of Korea) 7-9 september. - 2011. - Access mode: www.oie.int/eng/A.../ Чанчунь % 20Tu.pdf

149. Fekadu, M. Sickness and recovery of dogs challenged with a street rabies virus after vaccination with a vaccinia virus recombinant expressing rabies virus N protein

/ M. Fekadu, J.W. Sumner, J.H. Shaddock [et al.] // J. Virol. - 1992. - V. 66. - № 5. - P. 2601-2604.

150. Fekadu, M. Immunogenicity, efficacy and safety of an oral rabies vaccine (SAG-2) in dogs / M. Fekadu, S.L. Nesby, J.H. Shaddock [et al.] // Vaccine. - 1996. - V. 14. - № 8. - P. 465-468.

151. Fooks, A.R. Molecular tools for rabies for rabies diagnosis in animals. Fooks A.R., Mc Elhinney L.M., Horton D., Banaard A.C., Johnson N.I., Marshton D., Freuling C., Hoffmann B., Tu C., Fehlner-Gardiner C., Sabeta C.T., Cliquet F., Müller T., Rupperecht C.E. Rabies Control - Towards Sustainabl Prevention at the Source. 2012, 75-85.

152. Fooks, A.R. Rabies antibody testing and the UK pet travel scheme / A.R. Fooks, L.M. Mc Elhinney, S.M. Brookes [et al.] // Vet. Rec. - 2002. - Vol. 150. - P. 428430.

153. Franka, R. Quantification of the effectiveness of laboratory diagnostics of rabies using classical and molecular-genetic methods / R. Franka, S. Svrcek, M. Madar [et al.] // Veter. Med. - 2004. - Vol. 49. - P. 259-267.

154. Heaton, P.R. Detection and identification of rabies and rabies-related viruses using rapid-cycle PCR / P.R. Heaton, L.M. Mc Elhinney, J.P. Lowings // J. Virol. Methods. - 1999. - № 81. - P. 63-69.

155. Johnston, J.J. Evaluation and significance of tetracycline stability rabies vaccine baits / J.J. Johnston, T.M. Primus, T. Buettgenbach // Journal of Wildlife Diseases. -2005. - V. 41. - № 3. - P. 549-558.

156. Kasempimolporn, S. Detection of rabies virus antigen in dog saliva using a latex agglutination test / S. Kasempimolporn, W. Saengseesom, B. Lumlertdacha, V. Sitprija // J. Clin.Microbiol. - 2000. - V. 38. - № 8. - P. 3098-3099.

157. Khismatullina, N.A Epizootic situation and fox rabies prophylaxis in Tatarstan /N.A. Khismatullina, R.H. Yusupov, A.V. Ivanov, A.N. Chernov, M. Sh. Zaydullin // Dev. Biol. Basel, Karger. - 2006. - V. 125. - P. 41-49.

158. King, A. The rabies viruses of bats / A. King, P. Davies, A. Lawrie // Vet. Microbiol. - 1990. - № 23. - P. 165-174.

159. Knoop, E.V. Evaluation of a commercial rabies ELISA as a replacement for serum neutralization assays as part of the pet travel scheme and oral vaccination campaigns of foxes / E.V. Knoop, C.M. Freuling, J. Kliemt [et al.] // Berl. Munch. Tierarztl. Wochenschr. - 2010. - V. 123. - № 7-8. - P. 278-285.

160. Kuzmin, I.V. The rhabdo viruses: biodiversity, phylogenetics, and evolution / I.V. Kuzmin, I.S. Novella, R.G. Dietzgen [et al.] // Infect. Genet. Evol. - 2009. - № 9 (4). - P. 541-553.

161. Kuzmin, I.V. Arctic and Arctic-like rabies viruses: distribution, phylogeny and evolutionary history / I.V. Kuzmin, G.J. Hughes, A.D. Botvinkin [et al.] // Epidemiol. Infect. - 2008. - № 136. - P. 509-519.

162. Kuzmin, I.V. Complete genomes of Aravan, Khujand, Irkut and West Caucasian bat viruses, with special attention to the polymerase gene and non-coding regions / I.V. Kuzmin, X. Wu, N. Tordo [et al.] // Virus Res. - 2008. - № 136 (1-2). - P. 8190.

163. Kuzmin, I.V. Molecular epidemiology of terrestrial rabies in the former Soviet Union // I.V. Kuzmin, A.D. Botvinkin, L.M. Mc Elhinney [et al.] // J. Wildlife Dis.

- 2004. - № 40 (4). - P. 617-631.

164. Kuzmin, I.V. Phylogenetic relationships of Irkut and West Caucasian bat viruses within the Lyssavirus genus and suggested quantitative criteria based on the N gene sequence for lyssavirus genotype definition / I.V. Kuzmin, G.J. Hughes, A.D. Botvinkin [et al.] // Virus. Res. - 2005. - V. 111. - № 1. - P. 28-43.

165. Lytle, A.G.B cell infection and activation by rabies virus-based vaccines /A.G.Lytle, J.E.Norton, C.L. Dorfmeier, S.Shen, Mc. Gettigan// J.P. J. Virol. - 2013.

- 87 - №16. - P. 9097-9110

166. Madhusudana, S.N. Rapid diagnosis of rabies in humans and animals by a dot blot enzyme immunoassay / S.N. Madhusudana, J.P. Paul, V.K. Abhilash [et al.] // Int. J.Infect. Dis. - 2004. - Vol. 8. - P. 339-345.

167. Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals // OIE Terrestrial Manual, 2008. - Part 2. - section 1. - chapter 2.1.13. - P. 304-323.

168. McElhinney, L.M. Diagnostic tools for the detection of rabies virus - L.M. McElhiney, A.R. Fooks, A.D. Radford // EJCAP - 2008. - V. 18. - № 3. - P. 224231.

169. Meslin, F.X. Laboratory Techniques in Rabies / F.X. Meslin, M.M. Kaplan, H. Koprowski // Laboratory techniques in rabies. WHO. 4-th ed. - Geneva, 1996. - P. 9-27.

170. Metlin, A E Genetic heterogeneity of Russian, Estonian and Finnish field rabies viruses / A.E. Metlin, K. Rybakov, S. Gruzdev [et al.] // Arch. Virol. - 2007. - № 152. - P. 1645-1654.

171. Metlin, A.E. Monoclonal antibody characterization of rabies virus isolates from Russia, Finland and Estonia / A.E. Metlin, J. Cox, S.S. Rybacov [et al.] // J. Vet. Med. - 2004. - V. 51. - P. 94-96.

172. Müller, T. Rabies elimination in Europe - A success story / T.Müller, P.Demetriou, J.Moyanagh, F.Cliquet, A.R. Fooks, F.J.Conraths, T.C.Mettenleiter, C.Freuling //Rabies Control - Towards Sustainabl Prevention at the Source. - 2012. - P. 31-43.

173. Nadin - Davis, S.A. A molecular epidemiological analysis of the incursion of the raccoom strain of rabies - virus into Canada / S.A. Nadin - Davis, F. Muldoon, A.E. Wandeler // Epidemiol. Infect. - 2006. - V. 134. - № 3. - P. 534-547.

174. Nadin - Davis, S.A. Identification of regional variants of the Canadian province of Ontario / S.A. Nadin - Davis, G.A. Casey, A. Wandeler // Gen. Virol. - 1993. -V. 74. - № 5. - P. 829-837.

175. Nadin, S.A. Molecular and antigenic characterization of rabies viruses from Iran identifies variants with distinct epidemiological origins / S.A. Nadin - Davis, S. Simani, J. Armstrong, A. Fayaz [et al.] // Epidemiol. Infect. - 2003. - V. 131. - P. 777-790.

176. Nagaraj, T. Ante mortem diagnosis of human rabies using saliva samples: Comparison of real time and conventional RT-PCR techniques / T. Nagaraj, J.P. Vasanth, A. Desai [et al.] // J. Clin. Virol. - 2006. - V. 36. - № 1. - P. 17-23.

177. Nicholson, K.G. Enzyme-linked immunosorbent Assay: A Reaped Reproducible. Test for the Measurement of Rabies Antibody / K.G. Nicholson, H. Prestage // J. Med. Virol. - 1982. - P. 43-49.

178. Papaneri, Amy B. A replication-deficient rabies virus vaccine expressing Ebola virus glycoprotein is highly attenuated for neurovirulence/ A.B.Papaneri, C.Wirblich, J.A.Cann, K.Cooper, P.B.Hahrling, M.J.Schnell, J.E.Blaney // Virol. -2012. - 434. - №1. -P. 18-26.

179. Picard-Meyer, E. Development of a hemi-nested RT-PCR method for the specific determination of European bat lyssavirus 1: Comparison with other rabies diagnostic methods / E. Picard-Meyer, V. Bruyere, J. Barrat [et al.] // Vaccine. - 2004. - Vol. 22. - P. 1921-1929.

180. Rabies Bulletin Europe http [Electronic resource]. - Access mode: //www.who -rabies - bulletin.org.

181. Rabies Control - Towards Sustainabl Prevention at the Source. 2012, 31-43.

182. Rosatte, R.C. Management of raccoons (Procyon lotor) in Ontario, Canada: do human intervention and disease have significant impact on raccoon populations? /R.C. Rosatte // Mammalia. - 2000. - Vol. 64. - P. 369-390.

183. Rosatte, R.L. Acceptance of baits for delivery of oral rabies vaccine to raccoons // R.L. Rosatte, K.F. Lawson // Journal of Wildlife Diseases. - 2001. - V. 37. - № 4.

- P. 730-739.

184. Rupprecht, C. Oral vaccination of wildlife against rabies: Opportunities and challenges in prevention and control / C. Rupprecht, C. Hanlon, D. Slate // Dev. Biol.

- 2004. - Vol. 119. - P. 173-184.

185. Rupprecht, C.T. Human infection due to a recombinant vaccinia -rabies glycoprotein virus / C.T. Rupprecht, L. Blass, K. Smith [et al.] // J Med. - 2001. - V. 345. - P. 582-586.

186. Sacramento, D. PCR technigue as an alternative method for diagnosis and molecular epidemiology of rabies virus / D. Sacramento, H. Bourhy, N. Tordo // Molecular and cellular probes. - 1991. - V. 5. - № 3. - P. 229-240.

187. Schneider, L.G. Application of Monoclonal Antibodies for Epidemiological Investigation and Oral Vaccination Studies. II. Arctic Viruses // Rabies in the tropics: Proceedings of the International Conference on Rabies Control in the Tropics. -Tunis, 1983. - Berlin: Springen-Verlag, 1985. - P. 47-59.

188. Schneider, L.G. The cornea test: a new method for the intra-vital diagnosis of rabies / L.G. Schneider // Zentrabl. Veterinaer. Med. - 1969. - V. 16. - №№ 1. - P. 2431.

189. Schumacher C.L. Criteria for parenteral and oral immunization of dogs against rabies. Rabies Control - Towards Sustainable Prevention at the Source, 2012, 87-93.

190. Selhorst, T. Cost-efficient vaccination of foxes (Vulpes vulpes) against rabies andthe need for a new baiting strategy / T. Selhorst, H. Thulke, T. Muller // Prev.Vet. Med. - 2001. - Vol. 51. - P. 95-109.

191. Selimov, M. Antigenic variation in rabies viruses of the USSR / M. Selimov, A. King, E. Kluyeva [et al.] // Rabies Inf. Exchange. - 1988. - №17. - P. 40-42.

192. Selimov, M.A. Rabies - Related Yuli - virus; identification with a panel of Monoclonal Antibodies / M.A. Silimov, A.G. Tatarov, A.D. Botvinkin [et al.] // Acta Virol. - 1989. - № 33. - P. 542.

193. Servat, A.A quantitative indirect ELISA to monitor the effectiveness of rabies vaccination in domestic and wild carnivores / A. Servat, M. Feyssaguet, I. Blanchard [et al.] // J. of Immunological Methods. - 2007. - V. 318. - P. 1-10.

194. Shah Muhammad, Ali A.Applications of nanoparticles for DNA based rabies vaccine/Ali A.Shah Muhammad, Sajid UmarKhan, ZeeshanAli, HaowenYang, KekeLiu, LanlanMao // J.Nanosci. and Nanotechnol - 2014. - 14. - 1. - P. 881-891.

195. Sissoeff, L. Stable trimerization of recombinant rabies virus glycoprotein ectodomain isrequired for interaction with the p75NTR receptor / L. Sissoeff, M. Mousli,P. England [et al.] // J. Gen. Virol. - 2005. - Vol. 86. - P. 2543-2552.

196. Smith, A. Bat rabies in the United Kingdom / A. Smith, J. Morris, N. Crowcroft // BML. - 2005. - V. 330. - P. 491-492.

197. Smith, J. Case report: Rapid ante-mortem diagnosis of a human case of rabies imported into the UK from the Philippines / J. Smith, L. McElhinney, G. Parsons, [et al.] // J. Med. Virol. - 2003. - V. 69. - № 1. - P. 150-155.

198. Stantic - Pavlinic, M. Vaccination against rabies and protective antibodies -comparison of ELISA and fluorescent antibody virus neutralization (FAVN) assays / M. Stantic - Pavlinic, P. Hostnik, S. Levicnik - Stezinar, L. Zaletel - Kragelj // Veterinarski Arhiv. - 2006. - V. 76. - № 4 - P. 281-289.

199. Talbi, C. Evolutionaru history and dynamics of dog rabies virus in western and central Africa / C. Talbi, E.C. Holmes, P. Benedictis [ et al.] // J. Gen. Virol. - 2009.

- V. 90. - № 4. - P. 783-791.

200. Tepsumethanon, V. Laboratory diagnosis of rabies in Bangkok and the Central Part of Thailand, 2001-2004 / V. Tepsumethanon, V. Sitprija // J. Med. Ass. Thailand Chot. Thangt. - 2005. - V. 88. - № 22. - P. 282-286.

201. Toma, B. Fox rabies in France / B. Toma // Euro Surveill. - 2005. - V. 10. - № 11. - P. 220-222.

202. Tordo, N. Structure of rabies virus / N. Tordo, O. Poch // Rabies. - Boston: Kluwer Academic Publishers, 1988. - P. 25-45.

203. Tordo, N. The polymerase chain reaction (PCR) technique for diagnosis, typing and epidemiological studies of rabies / N. Tordo, D. Sacramento, H. Bourhy // In: Kaplan M.M., Koprowski H., Meslin F. -X. Laboratory techniques in rabies Eds. -WHO. - Geneva, 1996. - P. 157-170.

204. Turmele, A.S. Host immunity to repeated rabies virus infection in big brown bats / A.S. Turmelle, F.R. Jackson, D. Green [et al.] // J. Gen. Virol. - 2010. - V. 91. - № 9. - P. 2360-2366.

205. Vora, N.M. Raccoon rabies virus variant transmission through solid organ transplantation /N.M. Vora, S.V. Basavaraju, K.A. Feldman [et al.] // JAMA. - 2013.

- Vol. 310.- P. 398-407.

206. Vos, A. Oral vaccination of foxes against rabies with SAD B19 in Europe, 19831998: Areview / A. Vos, T. Muller, P. Schuster [et al.] // Vet. Bull. - 2000. - Vol. 70. -P. 1-6.

207. Wakeley, P.R. Development of a real - time, TaqMan reverse transcription - PCR assay for detection and differentiation of Lyssavirus genotypes 1, 5, and 6 / P.R. Wakeley, N. Johnson, L.M. McElhinney [et al.] // J. Clin. Microbiol. - 2005. - V. 43. - № 6. - P. 2786-2792.

208. Wandeler, A.I. Oral immunization against rabies: afterthoughts and foresight /Wandeler A.I. // Schweiz. Arch. Tierheilkd. - 2000. - Vol. 142. - P. 455-462.

209. Winkler, W.G. Control of rabies in wildlife / W.G. Winkler, K. Bogel // Sci. Am.-1992. - Vol. 266. - P. 86-92.

210. Zhang, S. Oral vaccination of dogs (Canis familiaris) with baits containing the recombinant rabies - canine adenovirus type-2 vaccine confers long - lasting immunity against rabies / S. Zhang, Y. Liu, A. Fooks [et al.] // Vaccine. - 2008. - V. 26. - № 3. - P. 345-350.

СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА

Рисунки:

1. Динамика изменения числа случаев бешенства животных в Европе, за период с 2005-2015 гг. (с. 10).

2. Заболеваемость бешенством в Федеральных округах РФ (с. 12).

3. Общая схема научных исследований (с. 33)

4. Карта рельефа Республики Татарстан (с. 34).

5. Удельный вес заболеваемости среди животных разных видов в РТ (с. 37).

6. Случаи бешенства среди животных в Республике Татарстан за 2010-2016 годы (с41)

7. Инцидентность бешенства животных в РТ в динамике за 2010-2016гг. (с. 44).

8. Сезонность заболеваемости бешенством животных в РТ за период 2010-2016гг. (с. 45).

9. Антиген вируса бешенства в отпечатке головного мозга человека (с. 49).

10. а, б - образцы срезов костной ткани нижней челюсти лисиц, содержащие тетрациклин; в, г - образцы срезов зубов лисиц, содержащих тетрациклин

(с. 60, 61, 62).

11. д - образцы среза костной ткани нижней челюсти лисицы, не содержащий тетрациклин; е - образцы среза зуба лисицы, не содержащий тетрациклин

(с. 62, 63).

12. Электрофореграмма продуктов первого этапа амплификации (праймеры 755 п.н.), (с. 68).

13. Электрофореграмма продуктов второго этапа амплификации (праймеры 259 п.н.), (с. 70).

Таблицы:

1. Количество неблагополучных населённых пунктов в РФ за 2010-2015 гг. (с. 11).

2. Анализ эпизоотической ситуации по бешенству животных в России 2010-2015 гг. (с. 14).

3. Количество сельскохозяйственных животных по видам в РТ за 1996-2015 гг. (с. 43).

4. Результаты исследования патологического материала от различных видов животных (с. 48).

5. Результаты исследования 238 проб головного мозга от 6 видов мышевидных грызунов (с. 51)

6. Данные антирабической вакцинации сельскохозяйственных, диких и домашних животных в РТ за 2010 - 2016 гг. (общественный сектор), (с. 52).

7. Антирабическая вакцинация сельскохозяйственных, диких и домашних животных в РТ за 2010 - 2016 гг. (частный сектор), (с. 52).

8. Результаты оценки эффективности вакцинопрофилактики бешенства у КРС (с. 53, 54, 55).

9. Результаты оценки эффективности вакцинопрофилактики бешенства у собак, вакцинированных разными вакцинами (с. 56, 57).

10. Эффективность профилактики бешенства диких плотоядных животных (с. 58, 59).

11. Программа амплификации (с. 66).

12. Специфичность гнездовой ОТ-ПЦР к гену гликопротеина вируса бешенства (с. 67).

13. Сравнительная оценка эффективности биопробы на белых мышах и предлагаемого ОТ-ПЦР при исследовании образцов на бешенство (с. 71 ).

ПРИЛОЖЕНИЯ

российская федерация

(19)

J »

30

э о

V.

о

N

D

RU

ям

2 575 08813 С1

(51) МПК C12Q 1/68 C12N 15/11

(2006.01) (2006.01)

федеральная служба по интеллектуальной собственности

11-'ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

(21 )(22) Заявка: 2014139999/10, 02.10.2014

(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 02.10.2014

Приоритст(ы):

(22) Дата подачи заявки: 02.10.2014

(45) Опубликовано: 10.02.2016 Бюл. № 4

(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: SATO G. ЕТ AL., Rapid discrimination of rabies viruses isolated from various host species in Brazil by multiplex reverse transeription-polymerase chain reaction. J Clin Virol., 2005, v.33, no.4, p. 267-273. GUPTA P.K. ET AL., Preliminary report on a single-tube, non-interrupted reverse transeription-polymerase chain reaction for the detection of (см. ирод.)

Адрес для переписки:

420075, г. Казань, Научный городок. 2, ФГБУ "ФЦТРБ-ВНИВИ"

(72) Автор(ы):

Иванов Аркадий Васильевич (1Ш), Хисматуллина Наиля Анваровна (Яи), Усольцев Константин Валерьевич (1*10, Гулюкин Алексей Михайлович (1Ш), Александрова Наталья Михайловна (1Ш). Южаков Антон Геннадьевич (Яи), Сабирова Валентина Васильевна (Ии), Чернов Альберт Николаевич (1Ш), Иванов Александр Аркадьевич (1Ш), Забережный Алексей Дмитриевич (1Ш), Самерханов Ильнур Иршатович (1Ш), Паршикова Анна Владимировна (ИЩ Фаизов Тагир Хадиевич (1Ш)

(73) Патентообладатель(и): Федеральное бюджетное государственное учреждение "Федеральный Центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности" (ФГБУ "ФЦТРБ-ВНИВИ") (1Ш)

(54) НАБОР СИНТЕТИЧЕСКИХ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫХ ПРАЙМЕРОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ РНК ВИРУСА БЕШЕНСТВА И СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ РНК ВИРУСА БЕШЕНСТВА С ПОМОЩЬЮ СИНТЕТИЧЕСКИХ ОЛИГОНУКЛЕОТИДНЫХ ПРАЙМЕРОВ В ПОЛИМЕРАЗНОЙ ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ С ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПЦИЕЙ (ОТ-ПЦР)

(57) Формула изобретения

1. Набор синтетических олигонуклеотидных праймеров для выявления РНК вируса бешенства, отличающийся тем. что праймеры имеют нуклеотидные последовательности:

Гр_850_"р_гаЬу 5' ТТАСАСТТАТССАТССААСАТСССГ 3'. гр_850_йр_гаЬу 5' АСТСАСТСАСАССТСССТСССТ 3', Гр_350_ёр_гаЬу 5' ТСАСАССАААТТСАССАССТТСТ 3', гр_350_яр_гаЬу 5' АССТССССССААСТСТТАААСАЗ'.

2. Способ выявления РНК вируса бешенства, включающий проведение ОТ-ПЦР с олигонуклеотидными праймерами. отличающийся тем, что праймеры имеют нуклеотидные последовательности:

Гр_85()_»р_гаЬу 5' ТТАОАСТТАТСС.АТОСААСАТСССТ 3', гр_850_йр_гаЬу 5' АСТСАСТСАСАССТСССТСССТ 3', Гр_350_ёр_гаЬу 5' ТСАСАССАААГГСАОСАССТТСТЗ', гр_350_£р_гаЬу 5' АССТССССССААСТСТТАААСАЗ'

и синтезированы на консервативный ген гликопротеина. а ОТ-ПЦР проводят в два

7J

ГО СП -J сл о 00 00

о

/

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ Департамент научно-технологической политики и образования Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ТОКСИКОЛОГИЧЕСКОЙ, РАДИАЦИОННОЙ И БИОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ» (ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»)

по индикации возбудителя бешенства с помощью синтетических олигонуклеотидных праймеров в полнмеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

Казань 2016

удк 579.252.55:615.332:579.25:577.212.3

Методические указания по индикации возбудителя бешенства методом ОТ - ПЦР

Методические указания разработали: директор ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», к.в.н. А.И.Никитин, в.н.с., к.б.н. Н.М. Александрова, зам. директора по НИР и биологической безопасности А.Н. Чернов, зав. лаб. иммунологии, д.б.н. М.А. Ефимова, в.н.с., к.в.н. К.В. Усольцев, к.м.н. Г.Х. Муртазина, м.н.с. И.И. Самерханов.

Рецензент: зав. лаб. биохимии и молекулярно- генетического анализа, д.б.н., профессор Т.Х. Фаизов.

Методические указания предназначены для использования в научно-исследовательских организациях биологического, ветеринарного и медицинского профиля, а также в практической деятельности межрегиональных, республиканских, областных и районных ветеринарных и медицинских профильных лабораторий.

Методические указания рассмотрены и одобрены на заседании научно -методического совета ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» (протокол №Зот19.05.2016).

УТВЕРЖДАЮ

УТВЕРЖДАЮ

\

/

Нач-а^ьвйк ГУВ КМ РТ

А.Г.ХИСАМУТДИНОВ 7 клаш_2014 г.

[ЦТРБ-ВНИВИ», мрессор

¿В. ИВАНОВ

2014 г.

АКТ

о проведении исследований по оценке эффективности антирабической вакцинации крупного рогатого скота, принадлежащего ООО «Туган Як» МТФ М.Шинар Сабинского района Республики Татарстан

Мы, нижеподписавшиеся, зав. отделом биобезопасности, д.б.н. А.Н.Чернов, зав. лабораторией иммунологии и биохимии, д.б.н., профессор Н.А.Хисматуллина, начальник противоэпизоотического отдела ГУВ KM РТ A.C. Козлов, начальник РГВО Сабинского района РТ A.A. Шакиров, в.н.с., к.б.н. A.M. Гулюкин, с.н.с., к.б.н. В.В. Сабирова, м.н.с. И.И. Самерханов, н.с., к.в.н. А.Ф. Авзалова, составили настоящий акт о том, что провели исследования по оценке эффективности антирабической вакцинации крупного рогатого скота, принадлежащего ООО «Туган Як» МТФ М.Шинар Сабинского района Республики Татарстан.

Животные иммунизированы 17.09.2013 г. антирабической культуральной инактивированной вакциной «Рабиков» из штамма «Щелково-51» (производства ФГУП «Щелковский биокомбинат»). Дата взятия крови 16.06.2014 г.

Для исследования в лабораторию направлено 29 проб сывороток крови от крупного рогатого скота (KPC).

Исследования по оценке эффективности вакцинопрофилактики бешенства проводили с использованием «Иммуноферментной тест-системы для определения уровня антирабических антител в сыворотках крови

0560 1:400 2,5

0533 1:800 2,1

0526 1:1600 2,1

10501 1:1600 2,4

Референс-сыворотка, ВГНКИ, 20МЕ/мл 1:800 2,2

Как известно, защитный от бешенства титр антител составляет 0,5 ME/мл. Из данных таблицы видно, что специфические к вирусу бешенства антитела в сыворотках крови КРС через 9 мес. после вакцинации обнаружены в титрах от 1:400 до 1:1600 (Ксп=2,0 и более), что соответствует активности 10,0 - 40,0 ME/мл, то есть уровень антител обеспечивает защиту животных от бешенства.

А.Н. Чернов H.A. Хисматуллина A.C. Козлов A.A. Шакиров

A.M. Гулюкин

B.В. Сабирова И.И. Самерханов

А.Ф. Авзалова и биохимии, к.в.н. " I

УТВЕРЖДАЮ

АКТ

У «ФЦТРБ-ВНИВИ», профессор .В.ИВАНОВ

2013 г.

о проведении оценки иммунного .статуса собак после вакцинации различными

антирабическими вакцинами в сочетании с иммуностимуляторами, принадлежащих ветслужбе Зонального Центра кинологической службы МВД

по Республике Татарстан

от 27 февраля 2013 г.

ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»

(г. Казань) лаборатория иммунологии

Мы, нижеподписавшиеся, зав. отделом биобезопасности, д.в.н., профессор Х.Н Макаев, зав. лабораторией иммунологии, д.б.н., профессор Н.А.Хисматуллина, начальник ветслужбы Зонального Центра кинологической службы МВД по РТ А.О.Горлик, к.б.н. А.М.Гулюкин, с.н.с., к.в.н. А.З.Гафарова, с.н.с., к.б.н. В.В.Сабирова, м.н.с. И.И.Самерханов, составили настоящий акт о том, что провели исследования периферической крови и сывороток крови для оценки иммунного статуса собак, вакцинированных различными антирабическими вакцинами в сочетании с иммуностимулирующими препаратами.

Для профилактики бешенства собак использовали следующие вакцины: «Рабикан» (ФГУП «Щелковский биокомбинат»), «Мультикан-8» (ЗАО «НПО Нарвак», Москва), «Нобивак-Рабиес» («Интервет Интернэшнл»), «Эурекан» («Мериал», «Мепа1»/Лион, Франция) согласно наставлениям по их применению.

В качестве иммуностимулирующих препаратов применяли 12,5%-ный раствор циклоферона (производства ООО «Научно-технологическая фармацевтическая фирма «ПОЛИСАН», г. Санкт-Петербург) и 0,4%-ный раствор фоспренила (производства ЗАО «Микро-Плюс», г. Москва).

Животных разделили на 4 группы: собак 1 группы разделили на 3 подгруппы: животным 1 подгруппы вводили циклоферон в дозе 125 мг (1 мл)/гол., затем вакцинировали против бешенства вакциной «Нобивак ОНРР1Ь+1Ъ> (по 1 мл), п/к, в обе лопатки; собак 2 подгруппы вакцинировали против бешенства вакциной «Нобивак ОНРР1Ь+1Ъ> (по 1 мл), п/к, в обе лопатки при одновременном введении им циклоферона в дозе 125 мг

19

Заключение. Таким образом, сравнительный анализ эффективности вакцинации собак различными антирабическими вакцинами: «Мультикан-8», «Нобивак-Рабиес» и «Эурекан» в сочетании с циклофероном и фоспренилом показал достоверное увеличение количества лейкоцитов, преимущественно за счет увеличения числа лимфоцитов, в том числе Т- и В-лимфоцитов, а также повышение фагоцитарной активности нейтрофилов крови. Титры антител в исследуемых пробах сывороток крови собак, взятых через 21 и Б1 сут после вакцинации различными антирабическими вакцинами в сочетании с иммуностимулирующими препаратами, обеспечивают защиту животных от бешенства. Одинаковые результаты по эффективности антирабической вакцинации в сочетании с иммуностимуляторами получены с вакциной «Мультикан-8» в сочетании с циклофероном и фоспренилом, при этом максимальный титр специфических к вирусу бешенства антител отмечен через 51 сут после вакцинации - 1:800 (20,0 МЕ/мл).

Зав. отделом биобезопасности,

д.в.н., профессор -

Зав. лабораторией иммунологии, д.б.н., профессор -

Н.А.Хисматуллина

К.б.н. -

Начальник ветслужбы Зоналы кинологической службы МВД

А.О.Горлик

А.М.Гулюкин

А.З.Гафарова

С.н.с., к.в.н. -

С.н.с., к.б.н. -М.н.с. -

f

УТВЕРЖДАЮ

УТВЕРЖДАЮ

Начальник ГУВ КМ РТ

А.Г.ХИСАМУТДИНО /Я 2014 г.

Директор ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», , чл.-корр. РАЦ, пррфессор

: ' ' Xs

'Pi . а ¿еШ^'-А.В.ИВАНОВ

АКТ

о проведении исследований по оценке эффективности весенней и осенней вакцинации 2013 г. диких плотоядных животных против бешенства на территории Республики Татарстан

Мы, нижеподписавшиеся, зав. отделом биобезопасности, д.б.н. А.Н.Чернов, зав. лабораторией иммунологии и биохимии, д.б.н., профессор Н.А.Хисматуллина, начальник противоэпизоотического отдела ГУВ KM РТ A.C. Козлов, в.н.с., к.б.н. A.M. Гулюкин, с.н.с., к.б.н. В.В. Сабирова, н.с., к.в.н. А.Ф. Авзалова, м.н.с. И.И. Самерханов составили настоящий акт о том, что провели исследования по оценке эффективности весенней и осенней вакцинации 2013 г. диких плотоядных животных против бешенства на территории Республики Татарстан. Для оральной вакцинации диких плотоядных животных использовалась антирабическая вакцина «Рабивак-0/333», производства ОАО «Покровский завод биопрепаратов. Раскладку вакцины осуществляли вручную.

Исследования проведены в лаборатории иммунологии и биохимии ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ».

Объекты исследования: 145 проб головного мозга для диагностики бешенства, 145 проб глазной жидкости для определения титра антирабических антител, а также 145 проб костной ткани для определения тетрациклина из 38 районов Республики Татарстан.

Методы исследования и оборудование:

Метод иммунофлуоресценции (ИФ) проводили в прямом варианте по ГОСТу 26075-84 с использованием «Флуоресцирующего антирабического глобулина», разработанного ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ»,

ТУ 9388-027-00492374-2007, зарегистрированного в Российской Федерации № ПВР -1-4.9/00196 и сертифицированного в ФГБУ «ВГНКИ», г. Москва № РОСС RU.Bn01.H00352. Анализ проб мозга проводили на люминесцентном микроскопе Nikon (Japan).

В работе использовали также иммуноферментный анализ (ИФА). ИФА проводили на 96-луночных микротитрационных планшетах для иммунологических реакций из полистирола «Пл-Б-М»,

Из данных таблицы следует, что из 145 лисиц антирабическую вакцину получили 66 особей (положительные по тетрациклину в зубах или челюстях), что составило 45,5%. При этом в поле зрения люминесцентного микроскопа наблюдали тонкие кольца, полукольца или дуги желтого цвета. В препаратах, не содержащих тетрациклин, на равномерно светящемся поле, подобных образований не отмечено. Из 66 лисиц, получивших антирабическую вакцину, 51 особь выработала специфические к вирусу бешенства антитела (с титром антител в ИФА от 1:50 до 1:200 при Ксп более или равном 2,0, а также в реакции нейтрализации в культуре клеток более или равном 0,5 МЕ/мл), что составило 77,2 % от вакцинированных животных.

Таким образом, 77,2 % лисиц, вакцинированных антирабической вакциной защищены от заражения бешенством.

I Зав. отделом биобезопасности, д.б.н.

Зав. лабораторией иммунологии и биохимии, д.б.н., профессор

Н.А. Хисматуллина

Начальник противоэпизоотического отдела ГУВ КМ РТ

А.С. Козлов

Исполнители:

Ведущий научный сотрудник лаб. иммунологии и биохимии, к.б.н.

Старший научный сотрудник лаб. иммунологии и биохимии, к.б.н.

В.В. Сабирова

Научный сотрудник лаб. иммунологии и биохимии, к.в.н.

А.Ф. Авзалова

Младший научный сотрудник лаб. Иммунологии и биохимии

И.И. Самерханов

УТВЕРЖДАЮ