Фармако-токсикологическая и биологическая оценка ускорителя ферментации УФ-1 для переработки органических отходов животноводства тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.04, кандидат биологических наук Матросова, Лилия Евгеньевна

• Матросова, Лилия Евгеньевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Матросова, Лилия Евгеньевна

w ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Физические и химические методы переработки органического сырья.

• 1.2. Переработка отходов животноводства и птицеводства биологическими методами.

1.3. Роль микроорганизмов и грибов в детоксикации микотоксинов. ф 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Изучение биологических свойств штаммов микроорганизмов, входящих в состав ускорителя ферментации (УФ-1).

3.1.1. Изучение биологических свойств Actinomyces fradiae-96.

3.1.2. Изучение биологических свойств Candida krusei-96.

3.2. Изучение безвредности препарата.

3.2.1. Фармако-токсикологическая оценка УФ-1.

3.2.1.1. Определение острой токсичности УФ-1.

3.2.1.2 Изучение субхронической токсичности УФ-1 в опытах на белых крысах.

3.2.1.3. Изучение хронической токсичности УФ-1 в опытах на белых

1 крысах.

3.2.1.4. Изучение влияние УФ-1 на функциональное состояние центральной нервной системы.

3.2.1.5. Изучение влияния УФ-1 на функциональное состояние печени.

3.2.1.6. Изучение раздражающего и аллергизирующего действия

УФ-1.

3.2.1.7. Изучение пирогенного действия УФ-1.

3.2.1.8. Изучение канцерогенного действия УФ-1.

3.2.1.9. Изучение эмбриотоксического и тератогенного действия УФ-1.

3.3. Изучение действия УФ-1 на патогенные микроорганизмы.

3.3.1. Оценка обеззараживающего действия УФ-1 в отношении E.coli 0126.

3.3.2. Оценка обеззараживающего действия УФ-1 в отношении Salmonella typhimurium 371.

3.4. Оценка детоксицирующего действия УФ-1 в отношении Т-2 токсина.

3.4.1. Изучение обезвреживающего действия УФ-1 на органические отходы, экспериментально контаминированные Т-2 токсином.

3.4.2. Изучение обезвреживающего действия УФ-1 на корма, экспериментально контаминированные Т-2 токсином.

3.5. Методы контроля качества УФ-1.

3.6. Определение срока годности УФ-1.

3.7. Изучение эффективности УФ-1 в производственных условиях.

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармако-токсикологическая и биологическая оценка ускорителя ферментации УФ-1 для переработки органических отходов животноводства»

Актуальность темы. Неотъемлемой частью любого цивилизованного общества наряду с производством продукции промышленного, бытового и сельскохозяйственного назначения является образование как жидких, так и твердых отходов. Наибольшую экологическую и эпизоотическую опасность представляют отходы сельскохозяйственных предприятий, в частности навоз и помет, отличающиеся высоким содержанием экологически опасных веществ -аммиака, сероводорода, меркаптана, фенола и др.

Вместе с тем, в сельском хозяйстве существует значительная потребность в органических отходах агропромышленного комплекса, содержащих достаточное количество питательных элементов, представляющих ценный сырьевой материал для получения высокоэффективных удобрений и других продуктов, необходимых народному хозяйству.

Внесение навоза и помета в почву без предварительной обработки является неприемлемым, в связи с возможным содержанием экотоксикантов (тяжелых металлов, пестицидов, микотоксинов и т.д.), медикаментозных препаратов и других загрязнителей. К тому же, с фекалиями животных не исключается выделение возбудителей инфекционных и инвазионных болезней, которые относительно длительное время сохраняют жизнеспособность и вирулентность. Так, например, возбудители сальмонеллеза сохраняют жизнеспособность в навозе 92-157 сут, туберкулеза - 457 сут, листериоза -более 160 сут, вирус болезни Марека - свыше 6 месяцев, яйца и личинки гельминтов в свином навозе сохраняются 12-15 месяцев, в навозе крупного рогатого скота - 7-8 месяцев. По данным Всемирной организации здравоохранения навоз является источником передачи более 100 видов возбудителей болезней животных, в том числе опасных для человека (Романенко H.A. и др., 1981). Почва после внесения органических отходов в значительной степени обсеменяется микрофлорой, что создает определенную экологическую и санитарную опасность (Тюрин В.Г., 2004). Следует также отметить, что использование органических отходов без переработки нецелесообразно, поскольку при хранении в течение 2-3 месяцев потери азота в ^ них могут составлять 50-60 % (Мыц Е.А., 1996; Фомин Ю.И., 1996; Morse D., 1994; Dosch P., Gutser R., 1995; Menzi H. et al., 1995; Estavillo J. et al., 1996). Значительным недостатком внесения в почву отходов является тот факт, что, с одной тонной навоза или помета в почву попадает 12 миллионов семян сорных растений (Попов П.Д., 1997).

В этой возникшей дилемме важным для науки и практики является разработка биотехнологических процессов утилизации органических отходов, обеспечивающих организацию эффективных, безотходных и природоохранных технологий биоконверсии навоза и помета.

Перспективным и современным методом переработки органических отходов является биологический, с использованием специфических популяций микроорганизмов.

Во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте г.Казань (Тремасов М.Я., Сергейчев А.И.) на основе выделенных из почвы в 1996 г. микроорганизмов разработан препарат, получивший название УФ-1, использование которого ускоряет процесс утилизации различного вида органического сырья, в том числе экскрементов животных, птиц и человека.

Однако, не изученными оставались морфологические, физиолого-w биохимические и патогенные свойства микроорганизмов, входящих в состав УФ-1, параметры безвредности, обеззараживающие и обезвреживающие действия, не обоснованы дозы препарата.

Работа является частью комплексных заданий НИР по теме «Разработка мероприятий по ликвидации в очагах поражения последствий воздействия экотоксикантами» (№ гос. регистрации 01200202603).

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось Ф изучение биологических свойств микроорганизмов, входящих в состав УФ-1; определение параметров безвредности, обеззараживающего и обезвреживающего действия препарата и эффективности использования его для переработки органических отходов агропромышленного комплекса в ^ высококачественное экологически чистое органическое удобрение.

В соответствии с поставленной целью были определены следующие задачи:

• изучить морфологические, культуральные, биохимические и * патогенные свойства микроорганизмов, входящих в состав УФ-1;

• изучить острую, субхроническую, хроническую токсичность, раздражающее, аллергизирующее, пирогенное, канцерогенное, эмбриотоксическое и тератогенное действия УФ-1;

Ф • изучить обезвреживающее действие УФ-1 в отношении патогенных микроорганизмов и микотоксинов;

• разработать методы контроля качества препарата;

• оценить эффективность использования УФ-1 для переработки органических отходов агропромышленного комплекса и провести анализ качества получаемого удобрения

Научная новизна. Впервые изучены морфологические, физиолого-биохимические и патогенные свойства штаммов микроорганизмов, входящих в состав препарата УФ-1. Выявлено, что они обладают сахаролитической, протеолитической, уреазной и каталазной активностью, не образуют ^ сероводород и индол, не обладают амилолитической активностью и патогенными свойствами. Штаммы паспортизированы и депонированы во «Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве» (ФГУ ВГНКИ). Установлено отсутствие выраженной острой и хронической токсичности; пирогенных и раздражающих свойств; отдаленных эффектов действия УФ-1. Выяснена эффективность использования УФ-1 для обеззараживания и обезвреживания Ф органических отходов контаминированных микроорганизмами, микотоксинами. Предложены методы контроля качества препарата и разработана технология утилизации органических отходов сельскохозяйственных предприятий в высококачественное экологическое чистое органическое удобрение. Экспериментально обоснованы дозы препарата.

По материалам диссертационной работы подготовлены и представлены в Федеральный институт промышленной собственности 2 заявки на выдачу патентов на изобретения:

Штамм Actinomyces fradiae-96 для переработки органических отходов животноводства и птицеводства» (заявка №2005109042 (010708) от 29.03.2005 г.);

Способ получения органического удобрения» (заявка №2005109044 (010710) от 29.03.2005 г.).

Практическая ценность работы. Предложен и внедрен в производство препарат УФ-1 для переработки различного вида органического сырья в высококачественное экологически чистое органическое удобрение. На основании полученных данных, разработаны и утверждены в установленном порядке следующие нормативно-технические документы (см. приложение 1 и 2):

Методические рекомендации по борьбе с микотоксикозами животных в Самарской области», утвержденные руководителем управления реализации целевых программ в животноводстве МСХ и продовольствия Самарской области (1.03.2004);

Технические условия ТУ 9291-00-00492374-04 «Органическое удобрение на основе УФ-1 технологии», утвержденные заместителем Министра сельского хозяйства и продовольствия РТ по земледелию (15.06.2004).

Апробация работы. Основные материалы диссертационной работы доложены и одобрены на научных сессиях ФГНУ ВНИВИ (г. Казань) по итогам НИР за 2002-2004 г.г., ежегодных республиканских, межрегиональных, всероссийских, международных научно-практических конференциях: «Актуальные проблемы инфекционной патологии животных» (Владимир,

2003), «Повышение устойчивости и эффективности агропромышленного производства в Сибири: наука, техника, практика» (Кемерово 2003), «Дождевые черви и плодородие почв» (Владимир, 2004), «Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии» (Москва, 2004), «Состояние и проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии в животноводстве» (Чебоксары,

2004), «Актуальные проблемы агропромышленного комплекса» (Казань, 2004), «Проблемы экотоксикологического, радиационного и эпизоотологического мониторинга» (Казань, 2005), «Успехи медицинской микологии» (Москва,

2005), «Агробиотехнологии и экологическое земледелие» (Владимир, 2005).

Публикация результатов исследования. Основные положения диссертации изложены в 11 работах, опубликованных в журналах «Био», «Ветеринарный врач» и материалах научно-практических конференций.

Основные положения, выносимые на защиту:

- препарат УФ-1 для переработки органических отходов животноводства и птицеводства в экологически чистое органическое удобрение;

- показатели качества и безопасности препарата УФ-1.

Объем и структура диссертации. Материалы диссертации изложены на 151 страницах компьютерного текста и включают введение, обзор литературы, материалы и методику исследований, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список использованной литературы, приложения. Работа иллюстрирована 38 таблицами, 6 рисунками. Список использованной литературы содержит 240 источника, в том числе 86 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная фармакология с токсикологией», Матросова, Лилия Евгеньевна

ВЫВОДЫ

1. На основе микроорганизмов, выделенных из почвы, разработан ® препарат - ускоритель ферментации (УФ-1) для переработки (в течение 30-40 сут в летний период и 40-50 сут - в зимний) различного вида органического сырья в высокоэффективное экологически чистое органическое удобрение.

2. Входящие в состав УФ-1 штаммы микроорганизмов (Actinomyces щ fradiae-96 и Candida krusei-96) обладают выраженной сахаролитической, протеолетической, каталазной и уреазной активностью. Actinomyces fradiae-96 и Candida krusei-96 не патогенны для животных.

3. УФ-1 по ГОСТ 12.1.007.76 относится к 4 классу - малоопасные ф вещества. Препарат не обладает кумулятивным, раздражающим, пирогенным, канцерогенным, эмбриотоксическим и тератогенным действиями. Не оказывает отрицательного влияния на функциональное состояние печени и центральной нервной системы. Показатель реакции специфического лизиса лейкоцитов у Ф подопытных животных составляет 12,4±0,5%, что свидетельствует о слабо выраженной аллергической реакции УФ-1.

4. Выявлено обеззараживающее действие УФ-1 на патогенные микроорганизмы: Е. coli 0126 и Sal. typhimurium 371. Наиболее выраженное обеззараживающее действие отмечается при внесении в субстрат УФ-1 в объеме 0,02 мл/кг (4 тыс. микр. кл./кг), позволяющий полностью обеззаразить

• субстрат, экспериментально контаминированный Е. coli на 25-ые, a Sal. typhimurium - на 20-ые сутки. В контрольных пробах значительных изменений в содержании микроорганизмов, не наблюдается.

5. В опытах in vitro установлено детоксицирующее действие УФ-1 на Т-2 токсин. Полное обезвреживание свиного навоза, экспериментально контаминированного Т-2 токсином, при внесении в субстрат УФ-1 в концентрации 4 тыс. микр. кл./кг, наступает на - 8 сут, навоза крупного рогатого скота - на 5 сут. Более низкие концентрации препарата (1 и 2 тыс. микр. кл./кг) обеспечивают обезвреживание навоза на 8 сут.

6. Разработана технология переработки органических отходов в высококачественное экологически чистое органическое удобрение с содержанием азота, фосфора и калия в свином навозе 2,49-3,1; 1,18-1,39 и 2,02,1%; навозе крупного рогатого скота - 2,2-2,5; 1,6-1,7; 2,5-2,8%; птичьем помете - 3,9-4,4; 1,7-1,8; и 2,73-3,15% соответственно. В получаемом конечном продукте отсутствовала патогенная микрофлора, яйца и личинки гельминтов при наличии их в исходном субстрате.

7. Внесение в почву полученного с использованием УФ-1 удобрения положительно влияет на ее агрохимические свойства: увеличивает содержание подвижного фосфора - (Р2О5), обменного калия - (К2О), снижает величину гидролитической и обменной кислотности и повышает сумму поглощенных оснований и степень насыщенности почвы основаниями.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Предложен для внедрения в производство новый препарат -ускоритель ферментации УФ-1, позволяющий круглогодично, независимо от температурных условий перерабатывать различное органическое сырье в высокоэффективное экологически чистое органическое удобрение.

2. Для производства препарата используются выделенные из почвы в 1996 г. штаммы Actinomyces fradiae - 96 - ДЕП/ВГНКИ и Candida krusei - 96 -ДЕПУВГНКИ. Штаммы паспортизированы и депонированы во «Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве» (ФГУ ВГНКИ).

3. Разработана и утверждена в установленном порядке нормативно-техническая документация:

Методические рекомендации по борьбе с микотоксикозами животных в Самарской области», утвержденные руководителем управления реализации целевых программ в животноводстве МСХ и продовольствия Самарской области (1.03.2004);

Технические условия ТУ 9291-00-00492374-04 «Органическое удобрение на основе УФ-1 технологии», утвержденные заместителем Министра сельского хозяйства и продовольствия РТ по земледелию (15.06.2004).

Заключение

В последнее время, в связи с ухудшением экологической обстановки во всем мире, все острее встают вопросы, связанные с переработкой органических отходов сельскохозяйственных предприятий. Несмотря на значительную опасность, которые представляют органические отходы для окружающей среды, здоровья человека и животных, до сих пор не найдено наиболее оптимального метода их переработки. Помимо экскрементов животных и птиц особую опасность представляют отходы растениеводства, контаминированные экотоксикантами, в частности микотоксинами. Корма, содержащие микотоксины выше ПДК, подлежат утилизации. Наиболее приемлемым использование отходов агропромышленного комплекса является переработка их в удобрение, позволяющие перевести хозяйства в безотходные производства.

Вышеизложенное, послужило обоснованием поставленных задач, решению которых посвящена настоящая работа.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ

Работа проводилась в 2002-2005 годах в лаборатории микотоксинов ФГНУ Всероссийский научно-исследовательский ветеринарный институт (г. Казань), а также в условиях животноводческих и птицеводческих хозяйств РФ, в соответствии с тематическим планом НИР, определенных Департаментом ветеринарии по теме «Разработка мероприятий по ликвидации в очагах поражения последствий воздействия экотоксикантами» (№ гос. регистрации 01200202603, инв. №02200300377).

Ускоритель ферментации (УФ-1) представляет собой прозрачную, светло-желтого цвета жидкость со специфическим запахом, полученный на основе ассоциации почвенных микроорганизмов: Actinomyces fradiae-96 и Candida krusei-96. Идентификацию данных штаммов проводили, с использованием определителя бактерий Берджи (1997), а также монографий под редакцией Красильникова Н.А. «Биология отдельных групп актиномицет» (1965) и Реброва Р.Н. «Грибы рода Candida при бактериальных инфекциях» (1979).

Биологическая оценка препарата проводилась с учетом определения морфологических (форма и размеры клеток), тинкториальных (способности к окраске анилиновыми красителями), физиологических (характер роста культуры на жидких и плотных питательных средах, ферментация углеводов и многоатомных спиртов, уреазная и каталазная активность, образование конечных продуктов распада белков) и патогенных свойств, входящих в состав УФ-1 микроорганизмов. Исследования проводили, руководствуясь принятыми в микробиологии методами (Лабинская А.С., 1963; Байрак В.А. и др., 1980; Сидоров М.А. и др., 1995).

Морфологические и тинкториальные свойства штаммов устанавливали путем микроскопирования мазков из агаровых или бульоных культур, окрашенных по Граму. Величину микроорганизмов определяли световой микроскопией с использованием окулярного микрометра АМ-9-2. Высчитывали среднее арифметическое значение от измерения 20 клеток.

Культуральные свойства микроорганизмов изучали по характеру их роста в жидких (МПБ) и на плотных (сусло-агар) питательных средах, после инкубирования посевов в термостате в течение 24-48 часов, при температуре 37°С. Посевы на плотных питательных средах просматривали как невооруженным глазом, так и под световым микроскопом «Биолам». Определяли их размеры, форму, характер краев, прозрачность, консистенцию колоний. Характеризуя рост микроорганизмов в жидких питательных средах, учитывали наличие пленки, осадка, степень помутнения МПБ.

При изучении биохимических свойств штаммов использовали: МПБ с индикаторными бумажками пропитанными уксусно-кислым свинцом (определение сероводорода), реактив Эрлиха (выделение индола); среды Гисса содержащие различные углеводы и многоатомный спирт; агар Кристенсена (уреазная активность); МПЖ (протеолитическая активность); МПА с 0,2%-ным растворимым крахмалом (амилолитическая активность). Каталазную активность данных микромицетов изучали путем суспендирования культуральной массы в 3 %-ной перекиси водорода на предметном стекле. Кроме этого, каталазную активность тестировали непосредственно у выросших культур на сусло-агаре. Для этого на поверхность культуры на скошенном агаре наносили несколько капель 3 %-ной перекиси водорода. Наличие каталазы оценивали по появлению пузырьков газа (атомарный кислород, отщепленный каталазой от перекиси водорода).

Патогенные свойства Actinomyces fradiae-96 и Candida krusei-96 изучали путем подкожного и внутрибрюшинного введения белым мышам 0,5-1 мл взвеси микроорганизмов в МПБ, с содержанием в 1 мл 100, 200, 500 млн. и 1 млрд. микр. кл.

По истечению 7 суток для проведения микробиологических исследований внутренних органов по 5 мышей убивали декапитаций, с предварительным эфирным наркозом.

Изучение фармако-токсикологических свойств УФ-1 включало определение острой, субхронической, хронической токсичности, раздражающего, аллергизирующего, пирогенного, а также канцерогенного, эмбриотоксического и тератогенного действий.

Исследования проводили на лабораторных животных (белые мыши, крысы, морские свинки, кролики), содержащихся в условиях вивария института. Перед проведением каждого опыта - животных, по принципу аналогов (одинаковая живая масса, возраст, пол), делили на опытные и контрольные группы. Кормление и содержание животных опытных групп не отличалось от контрольных.

Изучение безвредности препарата проводили согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (М., 2000) с учетом «Методических рекомендаций утвержденных управлением государственного контроля лекарственных средств и медицинской техники Минздрава России» (29.12.1997) и одобренных фармакологическим государственным комитетом Минздрава России (протокол №13 от 25 декабря 1997), а также «Методических указаний по определению токсических свойств препаратов, применяемых в ветеринарии и животноводстве» (М., 1988).

Острую токсичность УФ-1 оценивали на белых мышах и белых крысах. Препарат вводили в желудок атравматическим зондом однократно как в виде рабочего раствора, так и в нативном виде. На данный опыт было использовано 45 белых мышей массой 18-20 г и 30 белых крыс массой 150-160 г, обоего пола, разделенных на контрольные и опытные группы. Схема введения УФ-1 белым мышам и крысам представлена ниже:

1 группа - УФ-1 - препарат (0,5 мл для мышей, 5 мл для крыс); г-Г—------г----------

41 '

2 группа - УФ-1 в рабочем растворе (0,5 мл для мышей, 5 мл для крыс);

3 группа - контроль, вводили физиологический раствор.

За животными вели наблюдение в течение 14 суток, в период этого времени определяли их вес, оценивали общее состояние (характер приема корма и воды, поведенческие реакции).

Через 7 суток после введения УФ-1 по 5 животных из каждой группы убивали декапитацией с предварительным эфирным наркозом. После убоя проводили диагностическое и микробиологическое исследования внутренних органов.

Изучение кумулятивного действия УФ-1 проводили с использованием теста «субхронической токсичности», предложенного 1лт Я.К. е! а1. (1961).

Изучение влияния УФ-1 на функциональное состояние печени проводили с использованием гексеналовой пробы и определения активности гепатоспецифических ферментов. Активность аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови определяли методом Рейтмана-Френкеля (Кондрахин И.П. и др., 2004).

В ходе проведения гексеналовой пробы регистрировали время наступления сна, его продолжительность, период пробуждения и засыпания. Время наступления сна устанавливали по переходу животного в «боковое положение», а период пребывания животных в этом положении рассматривали как продолжительность сна. Интервал с момента введения гексенала до момента перехода животного в боковое положение регистрировали как период засыпания, а выход животного из бокового положения с последующими движениями как период пробуждения.

Функциональное состояние нервной системы при многократном воздействии УФ-1 оценивали в опытах на белых крысах, с использованием тест-метода «открытое поле», предложенного Во1з81ег ОН. е! а1. (1964). Через 24 ч после последнего введения препарата, каждое животное помещали на площадку квадратной формы, разделенную на квадраты (длина сторон 15 см) и три концентрические зоны с отверстием на пересечении сторон квадратов диаметром 2,5 см. В течение 3 мин проводили наблюдение за состоянием двигательной (число пересечения линий) и исследовательской (число заглядываний в отверстие) активностью.

Раздражающее действие ускорителя ферментации определяли, согласно «Методических указаний по изучению раздражающих свойств и обоснованию ПДК избирательно действующих раздражающих веществ в воздухе рабочей зоны», утвержденных Минздравом СССР (М., 1980).

Определение аллергизирующего действия препарата проводили в соответствии с Методическими указаниями МУ 1.1.578-96 «Требования к постановке экспериментальных исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы», утвержденных Минздравом России (М., 1997).

Для этого у животных опытных и контрольных групп в лейкоцитарные меланжеры набирали кровь до метки 0,5. Затем в первые меланжеры до метки 1 добавляли 5 %-ный раствор лимоннокислого натрия, приготовленного на физиологическом растворе (контрольные пробы), во вторые до той же метки УФ-1 и 5 %-ный раствор лимоннокислого натрия (1:1). Меланжеры встряхивали и инкубировали при 37 °С в течение 2-х часов. В последующем в меланжеры до метки 11 набирали 5%-ный водный раствор уксусной кислоты, подкрашенный метиленовым синим.

После подсчета абсолютного количества лейкоцитов в счетной камере Горяева рассчитывали показатель реакции специфического лизиса лейкоцитов по формуле:

П^тттт л КОНТРОЛЬ - Л ОПЫТ о/

РСЛЛ= -- х 100 %, где:

Л контроль

Л контроль-количество лейкоцитов в меланжере без УФ-1;

Л опыт-количество лейкоцитов после инкубации в опытном меланжере с УФ-1.

Пирогенность препарата изучали в опытах на 6 кроликах массой 2,3±0,3 кг, разделенных на опытную и контрольную группу, по методике описанной Першиным Г.Н. (1971).

Канцерогенные свойства препарата определяли согласно «Методическим рекомендациям по исследованию канцерогенных свойств фармакологических и лекарственных средств» (М., 1988).

Изучение эмбриотоксического действия УФ-1 проводили согласно «Методических указаний по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияния их на репродуктивную функцию», утвержденным Минздравом СССР (М., 1986).

Для выявления тератогенного эффекта опытных животных убивали в конце беременности. Плоды взвешивали, измеряли их длину. Исследования проводили под бинокулярной лупой, разместив плоды в чашки Петри с физиологическим раствором. Далее плоды разделяли на 2 группы, одну фиксировали в жидкости Буэна в течение недели и использовали для послойной оценки макроструктуры внутренних органов по методу Willson, 1965 в модификации отдела эмбриологии ИЭМ АМН СССР. Вторую - использовали для изучения развития скелета методом Dawson, 1926, для этого плоды фиксировали в 96% - ном спирте в течение 7 суток, затем погружали в 1 % раствор КОН для просветления мягких тканей эмбриона с дальнейшим помещением его на 3 сут в раствор ализарина для окрашивания скелета в интенсивный красно-фиолетовый цвет и растворы для предупреждения загнивания.

В ходе экспериментов определялись гематологические и биохимические показатели крови, регистрировался прирост массы тела животных. Количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, СОЭ определяли по общепринятым методам (Кудрявцев A.A., Кудрявцева JI.A., 1974), глюкозы ортотолуидиновым методом, общего белка - рефратометрически (Антонов Б.И. и др., 1991).

Схемы и условия проведения экспериментов, вид и количество использованных животных, дозы и кратность применения препарата приведены в соответствующих разделах работы.

Общий объем проведенных исследований представлен в таблице 1.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Матросова, Лилия Евгеньевна, 2005 год

1. Азнаев В., Бикбулатов 3., Маликова М. Протеиновая кормовая добавка "Гармония" //Комбикормовая промышленность. 1996. - № 6. - 21-23 с.

2. Антонов Б.И., Яковлева Т.Ф., Дерябина В.И. и др. Лабораторные исследования в ветеринарии. Биохимические и микологические: Справочник. М.: Агропромиздат, 1991. - 288 с.

3. Артюшин A.M., Твердюков А.П., Афтеньев П.В. О новых технологиях получения органических удобрений и биосредств // Тезисы докладов Междунар. науч. техн. конф. «Биотех - 95». - Днепропетровск. - 1995. -С.37-39.

4. Архипченко И.А., Попова Ю.Н., Солнцева И.Э. и др.• Микробиологические процессы при экстенсивном компостировании свиного навоза // Доклады Российской академии сельскохозяйственныхнаук.-2001,- №1.-С.31-33.

5. Архипченко И.А., Салкинойа-Салонен М., Карякина Ю.Н. и др. Изучение трех микробных удобрений из отходов животноводства // Мат. II Междунар. науч. практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». -Владимир. - 2004. - С. 165-166.

6. Байрак В.А., Беляев В.М., Гительсон С.С. и др. Практикум по ветеринарной микробиологии. М.: Колос, 1980. - 216 с.

7. Баранников В.Д. Охрана окружающей среды в зоне промышленного животноводства. М.: Россельхозиздат, 1985. - 118 с.

8. Башкиров О.Г., Марченков Ф.Ф. Увеличение продуктивности бройлеров и кур-несушек с помощью пробиотического препарата «Био Плюс 2 Б» // Био. 2003. - №8. - С. 9-12.

9. Баяндина Г.В. Интенсивный откорм свиней с использованием в рационе муки из личинок синантропных мухи // Переработка органических отходов животноводства биологическим способом. Новосибирск. -1981.-С.З-9.

10. Белов А.Д., Киршин В.А., Лысенко Н.П. и др. Радиобиология. М.: Колос, 1999. - С. 347-349

11. Белянчиков H.H., Белехов И.П., Симарев Ю.А. Способ получения органического удобрения // Патент №1625859 РФ. Заявлено 26.12.1988. Заявка №4662493/15. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 07.02.1991.

12. Блажева Е.Г., Балунцов В.М. Получаване на биогаз о свинки тор // Год. Софийския Унив. «Климент Охридски». София. - 1995. - Т.85. - С. 101108.

13. Блинов В.А. Биотехнология. Саратов: ОГУП РИК Полиграфия Поволжья, 2003. - 196 с.

14. Болотецкий Н.М., Кодолова О.П., Нефедов Т.Н. и др. О технологии получения гибридных линий навозного червя Eisenia foetida // Тезисы докладов II Междунар. конф. по биоконверсии органических отходов. -Ивано Франковск. - 1992. - С. 17-18.

15. Бондаренко Н.Ф., Вагин Б.И., Гак Е.З. и др. Электрохимический методобеззараживания сточных вод животноводческого комплекса // Совершенствование технологических процессов и рабочих органовфмашин в растениеводстве и животноводстве. 1993. - С. 56-60.

16. Борисенко А.Е., Мирская Е.Е., Борисенко Е.Г. Изменение мутагенной активности среды, содержащей афлатоксин Bi в результате жизнедеятельности дрожжей // Гигиена и санитария. 1990. - №12 - С.4547.

17. Вальков В.И. Влияние биоперегноя и минеральных удобрений на урожай зеленой массы овса // Биологическая утилизация отходов животноводстваи пути использования продуктов переработки. Новосибирск. - 1982. -С.41-46.

18. Веротченко М.А., Терещенко А.П., Злочевский Ф.И. Биопереработка свиного навоза основа получения хитина и хитозана // Аграрная Россия. - 2000.-№ 5. - С.57-59.

19. Глазков И.К., Голосов В.Г., Николаев Ю.А. Способ приготовления

20. Ш биокомпостов // Патент №2230721 РФ. Заявлено 21.02.2001. Заявка2001104602/12. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 20.06.2004.

21. Глушко Н.И., Лукашков В.М., Шахбазова E.H. Разработка, свойства и клиническое применение грибковых аллергенов // Казанский медицинский журнал. 1998. - Т.79. - №5. - С.327-333.

22. Гоготов И.Н. Роль биоудобрений в плодородии почв // Мат. II Междунар. науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». Владимир. -2004.-С.139-141.

23. Горобец А.И. Результаты применения ЭМ-технологии при выращиваниигороха // Надежда планеты. 2001. - №8 С.З.

24. Горячкин Г.М. Эффективность новых экологически чистых органических удобрений при выращивании картофеля // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 1995. - №1. - С.25-27.

25. Гребешок H.H., Орлова С.С. Действие биоперегноя на почвенную и патогенную микрофлору в посадках огурца // Биологическая утилизация отходов животноводства и пути использования продуктов переработки. -Новосибирск. 1982. - С.3-9.

26. Гринблат Г.Я. Ферментированные отходы свиноферм качественное удобрение // Биотехнология вторичных органических субстратов. - Рига 1990.-С. 13-18.

27. Гришаев И.Д., Розов A.A., Андрюнин Ю.И. Обеззараживание навоза в крупных животноводческих комплексах // Ветеринария. 1972. - №3. -С. 34-36.

28. Гудилин И.И., Баяндина Г.В. Использование в рационе откармливаемых свиней нового белкового корма, полученного от биологической переработки навоза // Переработка свиного навоза личинками сапрофагов. Новосибирск. - 1976. - Т.98. - С.71-89.

29. Гудилин И.И., Баяндина Г.В. Влияние личинкосодержащего препарата (ЛСП-М) на продуктивность маток, рост и развитие поросят // Совершенствование методов кормления и содержания сельскохозяйственных животных. Новосибирск. - 1995. - С.47-52.

30. Гудилин И.И., Фридчер A.A. Влияние муки из личинок синантропных мух на рост, развитие и мясные качества хряков // Переработка органических отходов животноводства биологическим способом. -Новосибирск. 1981. - С.9-18.

31. Гудилин И.И., Фридчер A.A. Влияние муки из личинок комнатной мухи Musca domestica на воспроизводительные качества хряков // Биологическая утилизация отходов животноводства и пути использования1.продуктов переработки. Новосибирск. - 1982. - С. 18-24.

32. Гулей A.B. Применение ЭМ-препаратов при выращивании крупного рогатого скота // Надежда планеты. 2001. - №6. - С.5-10.

33. Данильченко A.B., Бобров Ю.В. Использование ЭМ-препаратов в животноводстве на Харьковщине // Надежда планеты. 2001. - №7. -С.3-4.

34. Девеговда Г. Связывание микотоксинов откуда берутся этерифицированные глюкоманнаны // Feedinq times. 1999. - Vol.4. -№3. - С.12-14.

35. Девис Т. Хозяйственное использование животноводческих стоков в экологическом земледелии М.: Прогресс-Пангея. - 1992. - С. 110-126.

36. Диндорого В.Г. Полевой опыт применения ЭМ-технологии на яровых зерновых культурах в институте растениеводства им. Юрьева УААН // Мат. I Междунар. конф. «Эффективные микроорганизмы. Реальность и перспективы». Воронеж. - 2000. - С. 19-21.

37. Диндорого В.Г., Попов С.И., Полеско Ю.А. и др. Изучение эффективности применения ЭМ-препарата на сельскохозяйственных культурах // Надежда планеты. 2001. - №10. - С.3-4

38. Елин E.H. Новый вид биогумуса и его использование // Картофель и овощи. 2002. - №6. - С.25

39. Елисеев A.M. Результаты испытания препарата «Байкал-ЭМ-1» на свинокомплексе межхозяйственного объединения «Южное» // Надежда планеты. 2001. - №7. - С.10-12.

40. Ерина Т.Э., Смирнов В.Н., Винаров А.Ю. Биотехнология переработкиотходов животноводства и птицеводства в органическое удобрение // Мат. междунар. науч. конф. «Биотехнология на рубеже 2 тысячелетий». -Саранск. 2001. - С.89-90.

41. Еськов А.И., Касатиков В.А., Русакова И.В. и др. Агроэкологические аспекты производства и применения вермикомпостов // Мат. II Междунар. науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». Владимир. -2004. -С.131-133.

42. Ефимов Д. Переработка помета методом биоферментации // Птицеводство. 1993. - №1. - С.20-21.

43. Житин Ю.И., Алипатова О.В. Способ обеззараживания навоза // Патент №2081864 РФ. Заявлено 03.04.1995. Заявка №95104821/13. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 20.06.1997.

44. Зайцев К.П. Использование экскрементов птиц и крупного рогатого скота для приготовления кормовых дрожжей // Доклады ВАСХНИЛ. 1975. -№ 8. - С.25-26.

45. Зариня Д.Я., Дубова Л.Я., Дижбите Т.Н. и др. Подбор микробных ассоциаций и разработка способов компостирования мелкодисперсных древесных отходов // Мат. II Междунар. науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». Владимир. - 2004. - С. 116.

46. Захаров П.В. Выживаемость яиц свиной аскариды в объектах окружающей среды // Ветеринария. 1993. - №3. - С.15-17.

47. Имангулов Ш.А., Лысенко В.П. Кормовая ценность сухого обеззараженного помета для цыплят-бройлеров // Передовой научно-производственный опыт в птицеводстве. «Экспресс-информ». - 1992.4. С.27-31.

48. Каленюк И.В. Влияние препаратов «Тамир» и «Байкал-ЭМ-1» на очистку сточных вод // Мат. I Междунар. конф. «Эффективные микроорганизмы. Реальность и перспективы». Воронеж. - 2001. - С.63-65.

49. Калинина О.Ю. Сравнение свойств компостов и вермикомпостов, полученных из органических отходов // Мат. по изучению русских почв. -1999. -№1. -С.68-72.

50. Капотина Л.Н., Стрельникова Т.Л., Матвеев М.В. и др. Биологическая деструкция мазута биопрепаратами серии «Биодеструктор» // Тезисы докладов Междунар. конф. «Фундаментальные и прикладные проблемы биотехнологии». -М. Нижний Новгород. - 2001. - С.41-42.

51. Классен В.И. Омагничивание водных систем. М.: Химия, 1982. - 272 с.

52. Клачкова Ю.Ф., Мысова Г.А. Обеззараживание помета кур при анаэробной ферментации в стендовых установках // Сб. науч. трудов ВНИИ вет. санитарии, гигиены и экологии. 1996. - Т.101. - С. 105-109.

53. Кобзиста О.П., Зайченко О.М. Мжробюлопчна шакпващя Т-2 токсину // Соврем, пробл. токсикол. 2001. - №1. - С. 39-41.

54. Ковалев А.А., Кожевникова А.Н. Прогноз и реальности производства биогаза из отходов животноводства. М.: С.-х. теплоэнергетика, 1992.1. С.44-45.

55. Ковалев A.A., Марсагишвили Г.П. Режимы работы биогазовых установок в сельскохозяйственном производстве // Науч. труды ВНИИ электрификации сельского хозяйства. 1995. - Т.82. - С. 107-114.

56. Ковалев H.A., Белянко Л.В. Ветеринарно-санитарные аспекты обеззараживания навозных стоков ускоренными электронами // Изв. Академии аграрных наук Беларуссии. 1995. - №1. - С.86-90.

57. Ковалев Н.Г. Биоконверсия отходов животноводства // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2003. - №2. - С.28-30.

58. Ковалев Н.Г., Рабинович Г.Ю. Микробиологические особенности аэробной биоферментации // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 1999. - №3. - С.23-25.

59. Кондрахин И.П., Архипов A.B., Левченко В.И. Методы ветеринарной клинической лабораторной диагностики. М.: Колос, 2004. - 520 с.

60. Красильников H.A. Биология отдельных групп актиномицетов. М.: Наука, 1965. - 371 с.

61. Кудрявцев A.A., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. М.: Колос, 1974.-399 с.

62. Кыдралиева К. А., Жоробекова Ш.Ж. Способы биоконверсии органического сырья // Агрохимический вестник. 2003. - №1. - С.40.

63. Лабинская A.C. Практикум по микробиологическим методам исследованиям. М.: Медгиз, 1963. - 463 с.

64. Лазарчик В.М., Головков A.M., Лазарчик В.Е. и др. Вермикомпосты на основе разных субстратов // Агрохимический вестник. 2005. - №3. -С.14-17.

65. Лукьянов A.K. Влияние биоперегноя на урожай и качество плодов томата в полиэтиленовых тоннелях // Переработка органических отходов животноводства биологическим способом. Новосибирск. - 1981. - С.99 -105.

66. Лысенко В.П. Переработка отходов птицеводства. Сергиев Посад. -ВНИТИП, 1998.- 146 с.

67. Лысенко В.П. Подготовка, переработка помета на птицефабриках и использование его в земледелии. Сергиев Посад. - ВНИТИП, 2001. -108 с.

68. Лысенко В.П. Перспективные технологии и оборудование для реконструкции и технического перевооружения в птицеводстве. М.: ФГНУ Росинформагротех, 2002. - 540 с.

69. Максимова Н.П., Лысак В.В., Блажевич О.В. и др. Штамм Pseudomonas putida М-продуцент // Акту ал. пробл. соц.-гуманит. и естеств. наук. -Минск.-1991.-С.153 154.

70. Малинин А.Л., Папушников А.К. Применение препарата «Байкал-ЭМ-1» при выращивании крупного рогатого скота // Надежда планеты. 2001. -№4. - С. 15.

71. Малофеев В.И. Технология безотходного производства в птицеводстве-М.: Агропромиздат, 1988,- С.80.

72. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987. - 368 с.

73. Мерзлая Г.Е. Методика и результаты исследований эффективности компостов и вермикомпостов // Мат. II Междунар. науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». Владимир. - 2004. - С. 150-152.

74. Мерзлая Г.Е., Мишунина М.П., Нестерович И.А. Положительное действие биогумуса на дерново-подзолистой почве при выращивании кукурузы // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 1994. - №6. -С.19-20.

75. Мёрзлая Г.Е., Слизовская Н. А. Применение сброженного куриного помёта в качестве удобрения // Анаэробная биологическая обработкасточных вод. Кишинев. - 1988. - С.159-160.

76. Методические указания МУ 2163-80 «К постановке исследований по изучению раздражающих свойств и обоснованию предельно допустимых концентраций избирательно действующих раздражающих веществ в

77. Ф воздухе рабочей зоны», утвержденные Минздравом СССР, (М., 1980).

78. Методические указания по изучению эмбриотоксического действия фармакологических свойств и влияние их на репродуктивную функцию, утвержденные нач. управления по внедрению новых лекарственных средств и медицинской техники Минздравом СССР, (М., 1986).

79. Могылдя В.М., Шаларь В.М., Диб Ж. Отбор и оценка штаммов # микроводорослей для выращивания на сточных водах животноводческихкомплексов // Теорет. и прикл. аспекты изуч. флоры Молдавии. -# Кишинев. 1989. - С. 83-85.

80. Монастырский O.A., Ярошенко В.А. Влияние биопрепаратов натразвитие и токсинообразование полевых штаммов Fusarium qraminearum // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2002. -№3. - С.22-23.

81. Морозов Н.В. Биометоды охраны поверхностных вод от загрязнения сточными водами животноводческих стоков. Казань: - Каз. пед. института, 1997. - 162 с.

82. Морозов Н.В. Экологическая биотехнология: очистка природных и сточных вод макрофитами. Казань: - Каз. пед. института, 2001. - 396 с.

83. Морозов Н.М., Денисов В.А. Экологические требования к средствам механизации уборки и переработки навоза // Вестник Российской академии сельскохозяйственных наук. 2003. - №1. - С.21-24.

84. Морщакова Г.Н., Капотина Л.Н., Стрельникова Т.Л. Способ получения компоста // Патент №2197453 РФ. Заявлено 03.05.2001. Заявка №2001111635/13. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 27.01.2003.

85. Музафаров A.M., Шоякубов Р.Ш., Юнусов И.И. Способ биологической очистки сточных вод // Патент №925876 РФ. Заявлено 15.10.1980. Заявка №2992560/29-26. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 07.05.1982.

86. Мучкаева H.A., Доронина О.Д., Волкова Н.В. и др. Снижение содержания афлатоксинов в продовольственном сырье // Тезисы докладов 4 Всес. науч.-техн. конф. Кемерово. -1991. - Разд.1 - С. 199-200.

87. Мысова Г. А. Биотехнологические основы переработки отходов животноводства // Мат. Междунар. науч.-практ. конф. «Состояние и проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии вживотноводстве». 2004. - С. 163.

88. Мыц Е.А. Потери аммиачного азота из навоза и приготовленных по ® различным технологиям компостов в зависимости от сроков запашки //

89. Агрохимия. 1996. - №7. - С.74-76.

90. Никитин Д.П. Крупные животноводческие комплексы и окружающая среда. М.: Медицина, 1980. - 255 с.

91. Плященко С.И. Экологические проблемы животноводческих комплексов //Ветеринария. 1990. -№1. - С.17-20.

92. Пожарнов В.А. и др. Современные высокорентабельные биогазовые технологии и оборудование // Тезисы докладов Между нар. конф. «Чистая Россия 2002. Обращение с отходами - проблемы и решения XXI века». -М. - 2002. - С. 21-22.

93. Попиков JI.JI. Справочник по электрическим и ультразвуковым методам обработки материалов. Л.: Машиностроение, 1971. - 358 с.

94. Попкович Л.В. Влияние различных способов вермикомпостирования на экологическое качество копролита //. Мат. молодежного форума «Агробиотехнологии и экологическое земледелие». Владимир. - 2005. -С.50-53.

95. Пузанков А.Г., Мхитарян Г.А., Гришаев И.Д. Обеззараживание стоков животноводческих комплексов. -М.: Агропромиздат, 1986. 175 с.

96. Раецкая Ю.И., Птак И.Р., Колтыпин Ю.А. и др. Изучение химического состава навоза и продуктов его переработки // Вопросы утилизации бесподстилочного навоза на комплексах и фермах промышленного типа. -Дубровицы. 1975. - С. 19-27.

97. Реброва Р.Н. Грибы рода Candida при бактериальных инфекциях. М.: Медицина, 1979. - 256 с.

98. Рожков В.И., Марканова T.B. Использование препарата «Байкал-ЭМ-1» для профилактики заболеваний телят и свиней // Надежда планеты. -2001. -№4. С. 16.

99. Романенко H.A., Сурнин В.И., Хижняк Н.И. и др. Санитарная культура животноводческих ферм и комплексов. Краснодар.: Кн. изд-во, 1981.117 с.

100. Ручин А.Б., Ревин В.В., Рыскина H.H. Влияние биогумуса на продуктивность редиса в условиях закрытого грунта // Мат. молодежного форума «Агробиотехнологии и экологическое земледелие». Владимир. -2005. - С.32-33.

101. Садовникова JI.K., Баландина A.B. Восстановление нефтезагрязненных земель с использованием биотехнологических методов // Мат. II Междунар. науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». -Владимир. 2004. - С.232-234.

102. Сануси Д. Формирование урожая озимого тритикале при применении биопрепарата «Байкал-ЭМ-1» // Надежда планеты. 2001. - №4. - С.20-21.

103. Сидоренко О.Д. Биокомпост // Патент №2057103 РФ. Заявлено 02.11.1993. Заявка №93050107/15. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 27.03.1996.

104. Сидоров М.А., Скородумов Д.И., Федотов В.Б. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. М.: Колос, 1995. - 319 с.

105. Сидорова З.Н. Опыт применения ЭМ-технологии в свиноводстве // Надежда планеты. 2001а. - №1. - С. 12-17.

106. Сидорова З.Н. Препарат «Байкал-ЭМ-1» и выращивание сахарной свеклы

107. Надежда планеты. 20016. - №3. - С.6-7.

108. Сидорова З.Н. Цветоводство и ЭМ-технология // Надежда планеты. -2001в. №2. - С.14-16.

109. Сторожук Т.А., Кулакова А.Л., Потапенко И.А. Устройство для обеззараживания навозных стоков // Патент №2199848 РФ. Заявлено 13.02.2000. Заявка №2000174636/16. Зарегистр. в Госуд. реестре изобретений 27.02.2003.

110. Тарасов С.И. Эффективность применения сброженного навоза крупного рогатого скота в качестве органического удобрения // Агрохимия. -1991. №5. - С.96-102.

111. Тарасов С.И. О правомерности ограничений использования сброженного навоза, помета (эффлюента) в экологическом земледелии // Мат. II Междунар. науч.-практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». -Владимир. 2004. - С. 154-155

112. Татарчук О.П., Редько A.A., Хмара И.В. Использование биологических препаратов для подавления развития Aspergillus spp. // Труды Кубан. гос. аграр. ун-та. 2001. - №387. - С. 26-27,176.

113. Терещенко H.H., Бунина А.Б. К вопросу о природе ростостимулирующих и фунгистатических свойств вермикомпоста // Мат. II Междунар. науч.практ. конф. «Дождевые черви и плодородие почв». Владимир. - 2004. -С.144-149.

114. Тремасов М.Я., Сергейчев А.И., Думанская K.M. Применение системы SEF для получения органического удобрения // Мат. науч. конф. МГАВМиБ. М. - 1999. - С. 25-26.

115. Тремасов М.Я., Сергейчев А.И., Титова В.Ю. О проблеме утилизации органических отходов животноводства // Мат. Междунар. науч.-произв. конф. «Актуальные проблемы агропромышленного комплекса». -Казань. 2003. - 4.2. - С. 257-260.

116. Тюрин В.Г. Решение экологических проблем при подготовке и утилизации органических отходов животноводческих ферм и комплексов // Аграрная Россия. 2000. - № 5. - С.48-50.

117. Тюрин В.Г. Экологический мониторинг территорий животноводческих предприятий // Мат. Междунар. науч.-практ. конф. «Состояние и проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии в животноводстве». 2004. - С.240-244.

118. Тюрин В.Г., Мысова Г.А., Лысенко В.П. Санитарно-бактериологическое состояние органических удобрений, полученных на основе птичьегопомета//Ветеринария. 1999. - №6. - С.48-50.

119. Федулов Ю.П., Барчукова А.Я., Миргородский И.Ю. и др. Испытание ® препарата «Байкал ЭМ 1» на сельскохозяйственных культурах // Мат. 1

120. Всероссийской конф. «Практические испытания и применения препаратов серии ЭМ». Воронеж. - 2000. - С.3-7.

121. Филаретов А.И. Технология получения удобрений из навоза 0 сельскохозяйственных животных // Труды 3 Междунар. конф.

122. Энергообеспечение и энергосбережение в сельском хозяйстве». М. -2003. - Ч.З. - С.447-450.

123. Фомин Ю.И. Бомба, начиненная золотом, или еще раз к вопросу об ф утилизации отходов. М.: Колос, 1996. - 113 с.

124. Хоулт Д., Крига Н., Снита П. Определитель бактерий Берджи. Т.2. М.: Мир, 1997. - С.613-706.

125. Шаблин П.А. ЭМ-препараты и очистка растений от тяжелых металлов // Ш' Надежда планеты. 2001а. - №10. - С.5.

126. Шаблин П.А. ЭМ-технология надежда планеты // Сад и огород. - 20016. - №1,- С.23-25.

127. Ширц С.О. О защите окружающей среды в условиях современного животноводства// Сельское хозяйство за рубежом. 1973. - №8. - С.30-31.

128. Шония A.M. Генетические центры вермикультивирования. Современные • достижения биотехнологии. Ставрополь. - 1996. - С. 17-18.

129. Эрнст Л.К., Злочевский Ф.И., Ерохин В.А. и др. Энтомологический метод '# утилизации органических отходов животноводства, в частностисвиноводства // Аграрная Россия. 2000. - №5. - С.51-57.

130. Эрнст Л.К., Маленков А.Г., Шапира В.А. Оценка органического удобрения, полученного путем биологической переработки личинками комнатной мухи нативного свиного навоза // Бюллетень ВНИИ удобрений и агропочвоведение. 2001. - №14. - С. 188-189

131. Юрченко Г.Т. Методика научно-хозяйственных испытаний мобильнойустановки для обработки навоза жидким аммиаком. Нове в методах зоотехн. дослщжень. Харюв. - 1992. - 4.2 . - С. 211-214.

132. Яковлев A.A. Производство органо-минеральных удобрений на основе куриного помета // Мат. науч.-практ. конф. «Научно-технический прогресс в инженерной сфере АПК России». М. -1996. - С.24-26.

133. Ярных B.C. Ветеринарная санитария и проблемы экологии // Ветеринария. 1990. -№3. - С.3-6.

134. Andersson M. Performance of additives in reducing ammonia emissions from cow slurry. Lund. - 1994. - 45 pp.

135. Asaj A., Vucemilo M., Hadziosmanovic A. et al. Effect of calcium hypochlorite on water fecal suspensions in vitro // Vet. arch. 1992. - №6. -P.357-361.

136. Asmus F., Linke В., Dunkel H. Eingenschaften und diihgenvirkung von ausgefaiilter guile aus der biogasgewinnung // Arch. Acker Pflanzenbau Bodenk. 1988. - №8. - P.527-532.

137. Baserga U., Egger K., Wellinger A. Biogas aus Festmist. Entwicklung einer kontinuierlich betriebenen Biogasanlage zur Vergärung von strohreichem Mist // Tanikon. 1994. - 12 pp.

138. Campbell R. Biological control of soil-borne diseases // Pests and diseases.-1990. -P.607-615.

139. Chen В., Ji P., Mei R. Observation of hormones produced by yield increasing bacteria // In: 6 ^Int. Symp. Microb. Ecol. Barcelona 1992. - P. 258.

140. Cheng X., Kihaza J., Ying X. et al. A new antibiotic, tautomycetin // Antibiotics. 1989. - Vol.42. - №1. - P. 141-144.

141. Cole R., Dorner J., Blanlcenship P. Non-aflatoxigenic Aspergillus parasiticusstrains and their use in controlling aflatoxin contamination // Патент 5292661 США; Опубл. 08.03.94.

142. Cotty P. Method for the control or prevention of aflatoxin contamination using a non-toxigenic strain of Aspergillus flavus // Патент 5294442 США; Опубл.ф 15.03.94.

143. D' Mello J., Placinta C., MacDonald A. Fusarium mycotoxins: A review of global implications for animal health, welfare and productivity // Anim. Feed Sci. and Technol. 1999. - №3 - 4. - P.183-205.

144. Dawson, 1926 цит. по Маланину Л.П. и др. Ветеринарные препараты:

145. Справочник под ред. Третьякова А.Д. М.: Агропромиздат, 1988. - С.250-258.

146. Donker М., Eijsackers Н., Heimbach F. Ecotoxicology of soil organisms. Lewis. Boka Raton. 1994. - 470 pp.

147. Dosch P., Gutser R. Reducing N losses (NH3, N2O, N2) and immobilizationfrom slurry through optimized application techniques // Fertil. Res. 1995. -Vol.43.-№1.-P.165-171.

148. Ducotterd J. Biogaz: c/ est rentable // Nature Progr. 1996. - №148. - P.33 - 37.

149. Duvick J., Rood T.A. Zearalenone detoxification compositions and methods // Пат. 5962304 США; Опубл. 05.10.99.

150. Duxbury J. The significance of agricultural sources of greenhouse gases // Fertil. Res. 1994. - Vol. 38. - №2. - P. 151-163.

151. Dwairi I. Conserving toxic ammoniacal nitrogen in manure using natural zeolite tuff: A comparative study // Bull. Environ. Contain, and Toxicol.1998. -№1. -P.126-133.

152. Edwards C., Bohlen P. Biology and ecology of earthworms. London: Chapman and Hall, - 1996. - 380 pp.

153. Edwards C., Bohlen P. Biology and ecology of earthworms. London: Chapman and Hall, - 1996. - 426 pp.

154. El-Nezami H., Chrevatidis A., Auriola S. Removal of common Fusarium toxins in vitro by strains of Lactobacillus and Propionibacterium // Food Addit Contain. 2002. - Vol.19 - P.680-686.

155. Engler K., Coker R., Evans I. Uptake of aflatoxin Bi and T-2 toxin by two mycotoxin bioassay microorganisms: Kluyveromyces marxianus and Bacillus megaterium // Arch. Microbiol. 2000. - Vol.174. - №6. - P. 381-385.

156. Estavillo J., Gonzalez-Murua C., Rodriguez M. Effect of slurry on yield and N losses in a natural pasture // Proc. / 2. Congr. Europ. Soc. Agron. -Wellesbourne. 1996. - P. 406-407.

157. Estavillo J., Rodriguez M., Gonzalez-Muraa C. Nitrogen losses by denitrification and leaching in grassland // Fértil. Res. 1995. - Vol.43. - №1. -P. 197-201.

158. Galtier P. Biotransformation and fate of mycotoxins // J. Toxicol. Toxin Rev.1999. №3 - 4. -P.295-312.

159. Greig-Smith P., Becker H., Edwards P. et al. Ecotoxicology of earthworms.-Andower: Intercept, 1992. 269 pp.

160. Gutterson N. Microbial fimgicidesi recent approaches to elucidating mechanisms // CRC Crit. Rev. Biotechnol. 1990. - Vol.10. - №1. - P.69-91.

161. Haliniak J., Szymanski M., Uzar L. Utylizacja roznych typow gnojowic na drodze fermentacji metanowej // Zastosowanie metod filmowych ikomputerowych w badaniach roli lesnych. Warszawa. - 1992. - P.79-89.

162. Halpin D., Graneek B., Turnerwarwick M. et al. Extrinsic allergic alveolitis and ® asthma in a sawmill worker case report and reviev of the literaturen //

163. Occupât. Envirom. Med. 1994. - №3. -P.160-164.

164. Hermann J. Wartosc nawozowa gnojowicy dezynfekowanej roznymi chemikaliami // Zeszyty nauk. / Akad. Roln. Szczecin. - №172. - 1996.1. P.161-165.

165. Howie M. Dried poultry waste may be effective supplement to dry-rolled corn in finishing steer diets // Feedstuffs. 1997. - Vol.69. - №3. - P.14.

166. Hrubant G., Rhodes R. Death of fecal coliforms and mycobacterium 0 paratuberculosis during fermentation of corn and feedlot waste // Biol.

167. Wastes. 1989. -№2. -P.139-152.

168. Jayaswal R., Fernandez M., Schroeder R. Isolation and characterization of a Pseudomonas strain that restricts growth of various phytopathogenic fungi //

169. Apl. Environ. Microbiol. 1990. - Vol.56. - №4. - P. 1053-1058.

170. Jelinek A., Cespiva M., Pliva P. et al. Composting as possibility of toxic gases emissions reduction, mainly ammonia, generated during manure storage // Res. Agr. Eng.-2001. -№3.-P.82-91.

171. Jones P. Disease risks from pig slurry // Pig Faring. 1975. - P. 74-84.

172. Jordanoski N., Kuzmanovski D., Gorgievski S. Djelovanje koristenja siliranog• gnoja peradi u tovu rano odbijene janjadi // Krmiva. 1997. - Vol.39. - P.233-236, 239.

173. Juneja S., Doyra R. Biodégradation of eldrin and lindan by Rhizobia // Pesticides. 1978. - №12. - P.34-35.

174. Juris P., Tôth F., Laukova A. Survival of model bacterialm strains and helminth eggs in the course of mesophilic anaerobic digestion of pig slurry // Vet. med. 1996. №51. -P.149-153.

175. Kabak B., Var I. Binding of aflatoxin Mi by Lactobacillus and Bifidobacterium //Milchwissenschaft. 2004. - №5. - P.301-303.

176. Kakeya H., Takahashi-Ando N., Kimura M. Biotransformation of the mycotoxin, zearalenone, to a non-estrogenic compound by a ftmgal strain of clonostachys sp. // Biosci. Biotechnol. and Biochem. 2002. - №12. -P.2723-2726.

177. Karlovsky P., Maddox J., Giliam G. et al. Enzymatic degradation of Fusarium mycotoxins // Mitt. Biol. Bundesanst. Land- und Forstwirt. Berlin-Dahlem. -2000.-№377,-P.41.

178. Knox O., Killham K., Leifert C. Effects of increased nitrate availability on the control of plant pathogenic fungi by the soil bacterium Bacillus subtilis // Appl. Soil. Ecol. -2000. -№15. -P.227-231.

179. Koivikko A., Viander M., Lanner A. Use of the extended phadebas RAST panel in the diagnosis of mold allergy in asthmatic children // Allergy. — 1991. -№2.-P. 85-91.

180. Kubo T., Sugimoto H., Sugahara K. Loss of gross energy in drying excreta of hens // Anim. Sc. Technol. 1994. - Vol.65. - № 10. - P. 982-984.

181. Kuresoo M. Biomass vasikate ratsioonis // Loomakasvatus. Tartu. - 1993. - № 64.-P.37-41.

182. Larsen H., Munch B., Schlundt J. // Zentralbl. Hyg. and Umweltmes. 1994. -№5. - P.544-555.

183. Leinweber P. Belastung von Sandboden durch die Intensivtierhaltung in Nordwestdeutschland // Mitt. Dt. Bodenkundl. Ges. S.l. - 1996. - P.337-340.

184. Lim R., Rink K., Glass H. et al. // Arch, inter. Phar. Therapie. 1961. Vol.130. - № 3 - 4. - P.336.

185. Lorimor J. Manure management effects on surface and groundwater // Iowa state univ. Cooperative extension service. Ames (Iowa). 1996. - P. 126-128.

186. Maas R., Georgiou N., Polman T. et al. Aflatoxin Bj bioconversion by Aspergillus niger // Rev. med. vet. 1998. - №6. - P.572.

187. Martin M., Coughtrey P. Biological monitoring of heavy metal pollution. -London. N.Y.: Applied Science Publ. 1982. - P.475.

188. Matsumoto H., Ito T., Ueno Y. Toxicological approaches to the metabolites of Fusaria // XII Fate and distribution of T-2 toxin in mice // Ipn. I. Exp. Med. 48, 1978. P. 393-399.

189. Menzi H., Katz P., Frick R. Empirisches modell zur abschatzug der ammoiakverluste nach der gulleanwedug // Sclir. R. Verb. Dt. Landw. Unters. Forsch. - Anst. - Darmstadt. - 1995. - №40. - P. 257-260.

190. Moore P., Daniel T., Edwards D. et al. Evaluation of chemical amendments to reduce ammonia volatilization from poultry litter // Poultry Sc. 1996. -Vol.75.-№3.-P.315 -320.

191. Morse D. What /s your manure worth? // Proc. 33 Annu. Calif, dairy cattle day. -Ames. 1994. -P.39-44.

192. Nakayama K., Kato A., Ueno Y. et al. // Proc. Jpn. Assoc. Milcotoxicol. -1980.-V.12.-P. 30-32.

193. Okeudo N., Adegbola A. Utilisation of dried caged-hen manure and cassava peels for intensive sheep production // Trop. anim. Health Product. 1993. -Vol.25. - №4,- P.234-238.

194. Pacajova Z., Venglovsky J., Vucemilo M. et al. The effect of zeolites on bacterial counts in pig slurry // Vet. arch. 1997. - №2. - P.65-70.

195. Pelkonen P., Lan M., Wild C. et al. Epoxidation of aflatoxin Gi by mouse CYP 2As and inhibition of aflatoxin Bi toxity by substrates and inhibitors of SYP 2A5 in recombinant yeast cells // Hum. and Exp. Toxicol. 1995. -№10.-P. 834.

196. Plaixats J. Characterization of the effluent rusidee from anaerobic digestion of pig excreta for its utilization as fertilizer // Agrochimica. -1988. №32. -P.236-239.

197. Plym-Forshell L., Ekesbo I. Survival of salmonellas in urinead dry faeces from cattle a experimental study // Acta veter. scad. -1996. - Vol. 37. - №2. -P. 127-131.

198. Podile A., Dube H. Plant growth promotion activity of Bacillus subtilis // API.

199. Curr. Sci. 1988. - №57. - P.183-186.

200. Richardson M., Kokki M. Diagnosis and provention of fungal infection in the immunocom promized patient // Blood Rev. 1998. - №12. - P.241-254.

201. Romaniuk W. Pozuskiwanie biogazu w wyniku fermentacji metanowej gnojowicy oraz kompostowanie odpadow rolniczych // Przegl. Techn. roln. lesn. 1996. - №2. - P.10-12.

202. Sangiorgi F., Provolo G. Gestione dei reflui e ambiente // Riv. Suinic. 1997. -Vol.38. - №5.-P. 45-51.

203. Sarapatka B. The effect of anaerobic farmyard manure treatment on the survivalof some pathogenic organisms // Rostl. Vyroba. 1994. - P.349-357.

204. Sarhan A. Biological control of Fusarium root rot broad bean // Acta Phytopathol. and entomol. hung. 1989. - №24. - P.271-275.

205. Savolainen R. Ulfraviolet desinfection of cecondary effluents // Aqua fenn.-1999. №2,- P.211-218.

206. Shantha T. Influence of other microbes on aflatoxin production by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus // Indian J. Microbiol. 1991. - №2. - P.l 13120.

207. Shapira R., Nemerovsky L., Hamama Z. Detoxification of mycotoxins by probiotic bacteria // Phytoparasitica. 2004. - Vol.32. - №2. - P.210.

208. Sheppard S., Bembridge J., Holmstrup M. et al. Advances in earthworm ecotoxicology // Pensacola, SET AC. 1998. - 472 pp.

209. Shuval H., Jodice R., Consiglio M. et al. Controli of enteric micro-organisms by aerobic thermophilis composting of waster water sludge and agro-industry wastes // Zentralbl. Hyg. und Umweltmed. - 1990. - №5 - 6. - P.473.

210. Styriak I., Conkova E., Laciakovâ A. et al. Prevention of fumonisin production by microorganisms // Zivoc. vyroba. 1998. - №10. - P.449-452.

211. Takahashi A., Kimura M., Kakeya H. A novel lactonohydrolase responsible for tne detoxification of zearalenone: Enzyme purification and gene cloning // Biochem. J. 2002. - №1. - P. 1-6.

212. Tapio E., Pohto-Lahdenpera A. Interaction mellan antagonister och patogena svampar // Vaxtskyddsnotiser. 1989. - Vol.53. - №1. - P.12-18.

213. Ueno Y., Nakayama K., Ishii K. et al. // Appl. Environ. Microbiol. 1983. -Vol. 46.-P. 120-127.

214. Visconti A., Mirocha C. Identification of various T-2 toxin metabolites in chicken excreta and tissues // Applied and environmental microbiology. -1995. Vol.49.-P.1246-1250.

215. Willson, 1965 цит. по Маланину Л.П. и др. Ветеринарные препараты: Справочник под ред. Третьякова А. Д. - М.: Агропромиздат, 1988. - С.250-258.

216. Wolff J., Pastorek Z. Anaerobni fermentace s vyrobou bioplynu // Nas Chov. -1994. R.54. - № 10. - P.18.

217. Yoshida A., Takahashi H., Ishihara K. Tokyo nogyo daigaku nogaku shuhu // J. Agr. Sci. 2001. - №4. - P.340-347.

218. Yoshizawa Т., Swanson S., Miroha C. T-2 metabolites in the excreta of broilerоchickens administered H-labeled T-2 toxin // Applied and environmental microbiology. 1980. - Vol.39. - P.l 172-1177.

219. Zhang R., Yin Y., Sung S. et al. Anaerobic treatment of swine waste by the anaerobic sequencing batch beactor // Trans. ASAE. St. Joseph. - 1997. -Vol.40.-№3.-P.761-767.

220. Zhu J., Bundy D., Li X. et al. Reduction of odor and volatile substances in pig sturries by using pit additives // J. environm. Sc. Health. Pt. A. 1997. - Vol. 32.-№3.-P.605-619.