Фармакогностическое исследование манжетки обыкновенной травы свежей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Черемных Елена Васильевна

• Черемных Елена Васильевна
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Черемных Елена Васильевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. СВЕДЕНИЯ О РАСТЕНИЯХ РОДА ALCHEMILLA L. (БОТАНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА, ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ, ПРИМЕНЕНИЕ), ПЕРСПЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СВЕЖЕГО И БИОСТИМУЛИРОВАННОГО СЫРЬЯ

1.1. Ботаническая характеристика манжетки обыкновенной

1.2. Химический состав Alchemilla vulgaris L

1.3. Применение манжетки обыкновенной в медицине

1.4. Перспективность использования свежего сырья

1.5. Биогенные стимуляторы

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Микроскопический метод анализа

2.2.2. Методы химического анализа

2.2.3. Физико-химические методы анализа

2.2.3.1. Бумажная хроматография (БХ)

2.2.3.2. Хроматография в тонком слое сорбента (ТСХ)

2.2.3.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ)

2.2.3.4. Метод ультраэффективной жидкостной хроматографии /МС

2.2.3.5. Спектрофотометрический метод

2.2.4. Физические методы анализа

2.2.5. Технологические методы

2.2.6. Методы фармакологического исследования

2.2.6.1. Диуретическая активность

2.2.6.2. Острая токсичность

2.2.6.3. Фармакологическая активность in vitro

2.2.7. Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. АНАТОМО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МАНЖЕТКИ ОБЫКНОВЕННОЙ ТРАВЫ СВЕЖЕЙ

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

2

ГЛАВА 4. ОБОСНОВАНИЕ СПОСОБОВ ПЕРЕРАБОТКИ СВЕЖЕГО СЫРЬЯ

ALCHEMILLA VULGARISL, С ЦЕЛЬЮ ПОЛУЧЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ

4.1. Получение сока

4.2. Влияние сроков фильтрации на содержание БАВ

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА НЕКОТОРЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КАЧЕСТВА ДЛЯ СТАНДАРТИЗАЦИИ МАНЖЕТКИ ОБЫКНОВЕННОЙ ТРАВЫ СВЕЖЕЙ

5.1. Определение влажности, золы общей, золы нерастворимой в хлористоводородной кислоте

5.2. Определение содержания примесей

5.3. Разработка показателей качества манжетки обыкновенной травы свежей по содержанию сока в сырье и сухого остатка

5.4. Идентификация БАВ манжетки обыкновенной травы свежей с помощью качественных реакций

5.5. Идентификация фенольных соединений методом бумажной хроматографии в соке нативном и соках из сырья биостимулированного 7 дней и 14 дней

5.6. Идентификация фенольных соединений, сока нативного и соков из биостимулированного сырья манжетки обыкновенной, методом тонкослойной хроматографии

5.7. Качественное и количественное определение аминокислот в нативном соке манжетки травы методом ВЭЖХ

5.8. Идентификация фенольных соединений сока из сырья биостимулированного 7 дней методом ультраэффективной жидкостной хроматографии

5.9. Исследование элементного состава сока нативного и из сырья биостимулированного 7 и 14 дней рентгенофлуоресцентным методом

5.10. Количественный анализ манжетки обыкновенной травы свежей

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ ДИНАМИКИ НАКОПЛЕНИЯ БАВ СОКА МАНЖЕТКИ ОБЫКНОВЕННОЙ ТРАВЫ СВЕЖЕЙ

6.1. Влияние факторов внешней среды на содержание сока в манжетки обыкновенной траве свежей

6.2. Влияние фазы вегетации на содержание БАВ сока манжетки обыкновенной травы

6.3. Суточная динамика накопления БАВ сока манжетки обыкновенной травы

6.4. Влияние биостимуляции (низких положительных температур) на

содержание БАВ сока манжетки обыкновенной травы свежей

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ГЛАВА 7. ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ

7.1. Исследование безопасности сырья

7.2. Диуретическая активность

7.4. Антирадикальная активность

ВЫВОДЫ К ГЛАВЕ

ОБЩИЕ ВЫВОДЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ, ИСПОЛЬЗОВАННЫХ В ДИССЕРТАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Приложение

Приложение

Приложение 3. Акты о внедрении результатов диссертационного исследования

Приложение 4. Патент на изобретение «Способ получения средства с диуретической активностью»

Приложение 5. Проект фармакопейной статьи на новый вид ЛРС «Манжетки обыкновенной трава свежая»

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое исследование манжетки обыкновенной травы свежей»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности.

Большое внимание в последние годы уделяется фитохимическим и фармакологическим исследованиям лекарственных растений применяемых в официнальной и народной медицине. Одно из направлений фармакогностического изучения — это стандартизация лекарственного растительного сырья с разработкой усовершенствованных методик количественного определения биологически активных веществ (БАВ).

Работы последних лет, расширили представление о химическом составе и фармакологическом действии манжетки обыкновенной травы (Андреева В.Ю. и др., 2000, 2011, Баева В. М. и др., 2007, Зорина Е.В., 2009, Мурин И.И. 2011, Тге^ай^а А. и др., 2012). Качественный и количественный анализ, показал, что в манжетки обыкновенной траве содержатся флавоноиды, аминокислоты, дубильные вещества, аскорбиновая кислота, макро и микроэлементы.

Анализ литературных данных показал, что в народной медицине разных стран, манжетки обыкновенной трава широко используется как кровоостанавливающее, ранозаживляющее, гипотензивное, антимикробное, противовирусное средство (Злобин А.А. и др., 2011, Андреева В.Ю. и др., 2011, Филиппова Е. И. и др., 2015, ТаМг S. и др., 2015,Vitkova А. и др., 2015, Мазуркова Н. А. и др., 2019).

Классически используют лекарственное растительное сырье в высушенном виде и затем из него готовят разнообразные лекарственные средства. Но с давних времен известно об использовании свежих растений. Еще в эпоху развития фармации появились галеновые препараты-соки, отжатые из сочных растений. В арабской медицине использовали сгущенные соки растений - рообы. Особенностью таких препаратов является их способность обеспечивать оптимальную биологическую доступность действующих веществ. В настоящее время активно изучается свежее растительное сырье это: горца почечуйного трава свежая, эхинацеи пурпурной трава свежая, калины обыкновенной плоды свежие, боярышника полумягкого плоды свежие (Гудкова А.А. и др., 2017, Лысенко Т.А. 2022, Куркин, В.А. и др., 2020).

5

Исследуются соки, полученные из: крапивы двудомной листьев, подорожника большого листьев, мать-и-мачехи обыкновенной листьев; чистотела большого травы; лопуха корней; лимонника китайского плодов, бузины травянистой плодов; каллизии душистой побегов и др. (Оленников Д.Н. и др., 2008, Кинцурашвили К. М. и др., 2008, Хаджиева З. Д. и др., 2010, Фатыхова Д. Г. и др., 2010, Бадальян З. В. и др., 2014, Лежнева Л.П. 2011). Свежие лекарственные растения используют в гомеопатической практике. Особенностью свежего сырья является необходимость его переработки сразу после заготовки. Согласно ГФ если немедленная переработка невозможна, то ЛРС охлаждают, замораживают или консервируют спиртом. При этом влияние низких положительных температур (охлаждение) на качественный и количественный состав БАВ в лекарственном растительном сырье (ЛРС) недостаточно изучен, в связи с этим представляется актуальным проведение анализа ЛРС на вариабельность химического состава.

Химический состав свежего сырья манжетки обыкновенной травы изучен недостаточно, отсутствуют методики стандартизации. В связи с этим актуальность изучения свежего сырья манжетки обыкновенной травы с целью разработки нормативной документации очевидна.

Цель и задачи исследования. Целью работы являлось фармакогностическое исследование манжетки обыкновенной травы свежей.

Задачи исследования:

1. Изучить анатомо-диагностические признаки свежего сырья;

2. Разработать лабораторную схему получения сока манжетки обыкновенной травы;

3. Разработать показатели качества манжетки обыкновенной травы свежей;

4. Изучить химический состав манжетки обыкновенной травы свежей и сока манжетки обыкновенной травы;

5. Разработать методики качественного и количественного анализа БАВ сока манжетки обыкновенной травы свежей;

6. Изучить фармакологическую активность манжетки обыкновенной травы свежей сока;

7. Разработать и оформить проект Фармакопейной статьи (ФС) «Манжетки обыкновенной трава свежая».

Научная новизна работы. Предложен новый вид ЛРС - Манжетки обыкновенной трава свежая.

Проведено фармакогностическое изучение образцов манжетки обыкновенной травы свежей, разработаны показатели качества для ее стандартизации. Изучена динамика накопления БАВ по фазам развития растения. Изучена суточная динамика, влияние места обитания на содержание БАВ. Установлены оптимальные сроки заготовки сырья. Изучено влияние низких положительных температур (+4°С) на химический состав и фармакологическую активность соков из манжетки обыкновенной травы. Установлены отличия в количественном содержании БАВ в нативном соке (СН) манжетки обыкновенной травы, и соке из сырья, выдержанного при низких положительных температурах.

На основании проведенных исследований, предложена схема получения сока из манжетки обыкновенной травы свежей в условиях лаборатории. Разработана и валидирована методика количественного определения суммы флавоноидов сока манжетки обыкновенной травы. Определена диуретическая активность сока из сырья биостимулированного 7 суток. Изучена антирадикальная активность соков манжетки обыкновенной травы.

Теоретическая и практическая значимость работы. Изучен

химический состав и биологические активности манжетки обыкновенной травы

свежей. Выявлена возможность, использования манжетки обыкновенной травы

свежей как нового вида сырья. Установлены оптимальные сроки заготовки

сырья с наибольшим содержанием БАВ. Результаты фармакогностического

исследования включены в проект ФС «Манжетки обыкновенной трава свежая».

Проведена оценка качества и стандартизация сырья по содержанию суммы

флавоноидов. Определена антирадикальная активность сока манжетки

7

обыкновенной травы. Доказана диуретическая активность сока из сырья биостимулированного в течение 7 дней.

Предложен способ получения средства с диуретической активностью. Получен патент Российской Федерации «Способ получения средства с диуретической активностью» № 2792378.

Степень достоверности результатов исследований. Результаты исследований обработаны статистически, разработанная методика валидирована, эксперименты выполнялись в достаточной повторности на множестве образцов. Статистическая обработка результатов проводилась по методике, описанной в Государственной фармакопее Российской Федерации XV.

Положения, выносимые на защиту:

1. Результаты анатомического исследования (микроскопические признаки свежего исследуемого ЛРС);

2. Обоснование способов переработки свежего сырья в условиях лаборатории (получения сока из сырья);

3. Результаты фитохимического исследования и стандартизации манжетки обыкновенной травы свежей;

4. Исследования БАВ сока манжетки обыкновенной травы свежей;

5. Результаты изучения динамики накопления БАВ манжетки обыкновенной травы свежей сока;

6. Исследования фармакологической активности сока манжетки обыкновенной травы свежей.

Апробация результатов исследования. Результаты исследований были доложены на научно- практических конференциях: VIII Международной научно-практической конференции «Беликовские чтения» (2020г.), Х Международной научной конференции молодых ученых «Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения» (Москва: ВИЛАР, 2022), Научно-практической конференции с международным участием «Создание новых лекарств -от идеи до производства» (Пермь, ПГФА, 2021 г.), XII

Международной научной конференции молодых ученых «Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения» (Москва: ВИЛАР, 2024),

Публикация материалов исследования. По теме диссертации опубликовано 9 работ, из них 2 в журналах, рекомендуемых ВАК Министерства науки и высшего образования Российской Федерации, 1 статья в международной базе данных (Scopus), получен 1 патент Российской Федерации на изобретение.

Личный вклад автора. Все приведенные экспериментальные данные получены самим автором. Автором выполнены исследования, разработана схема получения соков из свежей травы манжетки и из сырья подвергшегося биостимуляции. Разработаны методики стандартизации свежего сырья. Автором предложен проект ФС на новый вид лекарственного растительного сырья «Манжетки обыкновенной трава свежая». Автор участвовал в сборе и обработке результатов исследований, в подготовке публикаций научных работ, в оформлении диссертации.

Внедрение результатов в практику. Результаты исследования химического состава манжетки обыкновенной травы свежей, разработанная методика количественного определения флавоноидов в соке из свежего сырья используются в учебном процессе кафедры фармакогнозии федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации. Результаты работы внедрены в практику работы ООО «Натуральные добавки» для оценки качества сырья, содержащего флавоноиды.

Разработан проект фармакопейной статьи «Манжетки обыкновенной трава свежая».

Соответствие диссертации паспорту научной специальности.

Изложенные в диссертационной работе, научные положения, соответствуют

формуле паспорта специальности 3.4.2. фармацевтическая химия,

фармакогнозия, а именно областей исследования по пунктам 2, 3 и 6. Пункт 2 -

Формулирование и развитие принципов стандартизации и установление

9

нормативов качества, обеспечивающих терапевтическую активность и безопасность лекарственных средств; пункт 3- Разработка новых, совершенствование, унификация и валидация существующих методов контроля качества лекарственных средств на этапах их разработки, производства и потребления; пункт 6 - Изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе.

Связь темы исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена на кафедре фармакогнозии ФГБОУ ВО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздрава России в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ.

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 136 страницах, данные представлены в 20 таблицах и на 36 рисунках.

7 глав диссертационной работы содержат; введение, обзор литературы, описание методов и объектов, результаты и обсуждение собственных исследований, заключение и список используемой литературы, состоящий из 125 источников, среди которых 35 иностранные. В приложениях к работе представлены акты внедрения кафедры фармакогнозии ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России, акт внедрения в практику работы ООО «Натуральные добавки», проект фармакопейной статьи «Манжетки обыкновенной трава свежая», патент на изобретение «Способ получения средства с диуретической активностью» № 2792378.

В главе 1 представлен обзор литературы отечественных и зарубежных

авторов, в работах описаны исследования лекарственного растительного сырья

и препаратов из манжетки обыкновенной травы. В обзоре литературы дана

ботаническая характеристика Alchemilla vulgaris L, представлены сведения о

химическом составе и фармакологической активности ЛРС и препаратов из

манжетки обыкновенной травы. Отражена актуальность и перспективность

10

использования свежего сырья, и использование технологии биогенной стимуляции ЛРС с целью получения новых лекарственных препаратов.

В главе 2 описаны объекты и методы исследования свежего сырья Alchemilla vulgaris L.

В главе 3 отражены результаты анатомо-диагностического анализа надземной части манжетки обыкновенной свежей.

В главе 4 аргументированы способы переработки свежего сырья в лабораторных условиях.

В главе 5 приведены результаты экспериментов, в которых установлены числовые показатели качества сырья, такие как, влажность, зола общая, зола не растворимая в хлористоводородной кислоте, так же определены нормы содержания частей сырья, изменивших окраску и органической примеси. Представлены результаты изучения химического состава сока из манжетки обыкновенной травы свежей. Идентифицированы фенольные соединения с помощью бумажной хроматографии, тонкослойной хроматографии, ультраэффективной жидкостной хроматографии. Исследован элементный состав сока манжетки обыкновенной травы свежей и из сырья подвергшегося биостимуляции. Разработана методика количественного определения флавоноидов.

В 6 главе показана динамика накопления БАВ в соках свежего сырья.

В 7ой главе представлены исследования по изучению фармакологической активности ЛРС.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. СВЕДЕНИЯ О РАСТЕНИЯХ РОДА

ALCHEMILLA L. (БОТАНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА, ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ, ПРИМЕНЕНИЕ), ПЕРСПЕКТИВНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СВЕЖЕГО И БИОСТИМУЛИРОВАННОГО СЫРЬЯ

1.1. Ботаническая характеристика манжетки обыкновенной

Вид - манжетка обыкновенная (Alchemilla vulgaris) L. Род - Манжетка

(Alchemilla), относится к семейству Розовые (Rosaceae), подсемейство -Rosoideae, триба - Sanquisorbae.

Народные названия манжетки обыкновенной: дамская мантия, грудная трава, недужная, грудница, лапа медвежья, богова слёзка, лапка гусиная, росичка, росник обыкновенный, росянка и др.

Род манжетки насчитывает более 600 видов, широко распространенных в Европе, Азии, Индии, Африке, Америке. Разграничение видов внутри рода Alchemilla L. затруднено из-за гибридизации, автономных апомиксов и полиплоидии [24-27]. В России в настоящее время описано около 166 видов, произрастающих на большей части Европейской территории, на Урале и в Сибири [28-34]. Чкалов А.В., и др. на территории Свердловской области выявили 62 вида манжеток, а во флоре Пермского края - 79 видов, Республики Тыва - 34 вида рода Alchemilla L. [35-39].

Манжетки произрастают на различных почвах, но предпочитают слабокислые, влажные почвы, полуоткрытые пространства, опушки леса, луга, обитают по берегам рек, болот [30, 31, 40]. Род Alchemilla L. распространен в лесной зоне, в зоне субальпийских и альпийских гор.

Растения рода манжетка (Alchemilla L.) принадлежат к числу апомиктических групп, (апомиксис- сочетание полового и неполовых способов образования семян) генетический материал при передаче почти не изменяется, а все случайные различия закрепляются у каждого растения навсегда [31]. В одном месте могут произрастать несколько микровидов (их генотипы не зависят от условий окружающей среды), при заготовке в полевых условиях идентифицировать и разделить их невозможно [41]. Alchemilla vulgaris L. рассматривают как комплекс апогамных видов, с незначительными

морфологическими отличиями, такими, как форма, размер листовой пластинки, характер и степень опушения. Только в генеративный период можно определить микровидовую принадлежность. У апогамных видов A. vulgaris L. строение многолетних органов и цветоносов имеют общие признаки [30, 42].

Манжетка обыкновенная имеет моноподиальное розеточное двухосное строение [43]. Корневище (ось первого порядка) манжетки горизонтальное до 20см, постоянно с одного конца нарастает, с другого отмирает, возможно, ветвление корневища в генеративный период, с формированием боковых вегетативных побегов [42, 44].

На корневище формируются розетки длинночерешковых листьев, широко - почковидной формы. Волнистая листовая пластинка с крупнозубчатым краем рассечена на 7-11 лопастей. Степень волнистости, длина главных жилок, количество боковых и краевых жилок, формы краевых лопастей, количество зубцов лопастей являются существенными признаками.

Форма черешка в поперечном сечении, длина, толщина черешка прикорневых листьев отмечаются как таксономические признаки, но большую значимость имеют признаки опушения черешка (характер опушения, направление волосков или отсутствие опушения) [30, 24, 45]. Признак опушения так же имеет значимость при описании листа (густота, жесткость, длина волосков).

Цвет листьев от желто-зеленого, бледно зеленого, до темно зеленого. Признак цвета согласно Frohner,1975 изменчив, виды, произрастающие рядом, имеют различия в цвете листьев [31, 45].

Стебель однолетний, удлиненный, ветвящийся, с удлиненными междоузлиями формируется в пазухах прикорневых листьев [43].

На размер растения оказывают влияние экологические факторы, растения могут быть менее 20 см и достигать 90см [42, 30].

Листья, расположенные у основания стебля - короткочерешковые, верхние - сидячие с зелеными прилистниками, влагалищные. Листовая пластинка 3-5 лопастная. Верхние листья имеют небольшие размеры с крупнозубчатым краем.

Соцветие манжетки состоит из трех различно устроенных элементов:

1. Уровень общего соцветия рацемозное фрондозное закрытое соцветие;

2. Единичные соцветия - симподиально супротивно ветвящиеся побеги с редуцированными листьями (брактеями), данное соцветие - цимозное брактеозное закрытое;

3. Цимозное эбрактеозное закрытое соцветие представлено элементарными монохазиями.

Соцветия манжетки можно описать как соцветия монохазиев собранные в тирс, имеющие строение по типу завитка или извилины [30].

Манжетке обыкновенной свойственно цветение дважды в год [44].

У данного рода Alchemilla L. широко распространена аномалия цветков (так как он является апогамным видом), показана высокая изменчивость цветков от местообитания [46].

Цветки колокольчатые, мелкие, удлиненные. Строение цветка у всех видов схоже: четырехчленный цветок, чашечка с подчашием, венчик не развит. Чашелистики яйцевидной или треугольной формы. Форма гипантия колокольчатая или обратнояйцевидная, в верхней части гипантия прикреплены4 тычинки. Гиницей апокарпный [46]. Плод - орешек с оболочкой из гипантия [50].

Ресурсоведческие исследования позволили сделать заключение о том, что сырьевая база манжетки обыкновенной в Пермском крае перспективна для промышленной заготовки сырья [6].

1.2. Химический состав Alchemilla vulgaris L.

Манжетки обыкновенной трава содержит комплекс биологически активных веществ: флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, аминокислоты, кумарины, дубильные вещества, аскорбиновую кислоту, полисахариды, макро и микроэлементы [1-8, 48, 49]. Изучением химического состава манжетки обыкновенной занимаются активно ученые из разных стран. Содержание БАВ определяют в разных высушенных органах растения, в водных, спиртовых извлечениях, экстрактах.

Таблица 1.

Содержание биологически активных соединений в сырье манжетки

обыкновенной

п/п Вид извлечения (экстрагент) Группа БАВ Литер атурн ый источ ник

1 Спиртовые извлечения из надземной части манжетки Водно-спиртовой экстракт из надземной части Фенольные соединения, дубильные вещества, фенолкарбоновые кислоты Полисахариды, микроэлементы, каротиноиды, аскорбиновая кислота, кумарины Флавоноиды (рутин, кверцетин, апигенин, лютеолин, и их гликозиды) Кумарины (эскулетин, эскулин, умбеллиферон и скополетин) Фенолкарбоновые кислоты (синаповая, кофейная, п-кумаровая, феруловая, хлорогеновая и эллаговая) Полисахариды, пектиновые вещества и гемицеллюлозы Аминокислоты: аргинин, гистидин, лизин, аспарагиновая, глутаминовая кислота, аланин, и др. Микроэлементы 1-3

2 Водные, спиртовые извлечения Фенолкарбоновые кислоты (галловая, хлорогеновая, кофейная и коречная). Флавоноиды (рутин, гиперозид, кверцетин, кемпферол). 5, 28,48

Настой, порошок из травы Микроэлементы 20 аминокислот 49 4

3 Экстракт (экстрагент -метанол) Флавоноидные гликозиды Фенольные компоненты Левоглюкозенон, спирост-8-ен-11- он, 3-гидрокси, этанол, 2-(9-октадеценилокси), 2,7-дифенил-1,6диоксопиридазино [4,5:2,3] пирроло, Эстра-1,3,5(10)-триен-17Р- ол, Октадеканал,2-бром, Этил 9,12,15-октадекатриенот, 3-пиридинкарбоновая кислота,2,7,10-трис(ацетилокси)-1, 5НЦиклопропа [3,4] бенз[1,2-е] азулен-5-он, Стигмастан-3,5-диен и токоферол. 50 12 60

4 Сухой экстракт Флавоноиды (рутин), полисахариды, аскорбиновая кислота, макро и микроэлементы. Аминокислоты: лейцин, метионин, треонин, лизин, аланин, глицин, аспарагиновая и глутаминовая кислоты 6

5 Настой Фенольные соединения (преимущественно рутин), полисахариды, аминокислоты, макро- и микроэлементы 7, 51

6 Экстракт (экстрагент -этанол) Кверцетин и цинарозид 52

Продолжение таблицы 1

№ п/п Вид извлечения/ (экстрагент) Группа БАВ Литер атурн ый источ ник

7. Водно- этанольный экстракт Галловая кислота 53

8. Экстракты Флавонолгликозиды: кверцетин 3-глюкуронид, кверцетин 3-глюкозид (изокверцитрин), 3-рутинозид (рутин) и 3-арабинозид, а также кемпферол 3-(6"-п-кумарил) - глюкозид Эллаготонины -димеры агримонина и левигатин Полифенольные соединения 54, 55 56- 59

9. Ацетон / водные экстракты из листьев, включая стебли Реёипси^т и agrimoniin, и другие мономерные и олигомерные эллагитаннины. Галловая и хлорогеновая кислоты. Гликозиды кверцетина (гексозид-глюкуронид кверцетина и гексозид кверцетина). Гликозиды флавонола (кверцетин- ферулоилгексоза и кверцетин-гексозид-дезоксигексозид) 61

10 Гидрофильный экстракт Эллаговая и галловая кислоты, катехин Гагримониин, педункулагин 62

11 Экстракт из высушенного сырья (ээкстрагент-этанол) Экстракт из свежей травы (экстрагент-этанол) Экстракт из корней (экстрагент-этилацетат) Около 20 соединений (авикулярин, катехин, галловая, гентизиновая, феруловая кислоты и кумарин эскулетин) Не менее 30 соединений, из которых идентифицированы: рутин, авикулярин, кверцетин, кемпферол и катехин Катехины лейкоантоцианы 13, 63

12 Экстракт из травы и корней (экстрагент -метанол) В свежих надземных и подземных органах Флавоноиды, танины, фенолокислоты Эллагитанины (агримонин, педункулагин и левигатин) 64

Как видно из таблицы 1, в препаратах, полученных из высушенного

сырья манжетки обыкновенной, определены разные группы БАВ, вещества

16

полифенольной природы (флавоноиды, в основном рутин, фенолкарбоновые кислоты, олиготанины) доминирует среди этих групп.

В качестве сырья для получения экстрактов и настоев в большинстве случаев использовали манжетки обыкновенной траву, и в единичных исследованиях в качестве сырья использовали подземные органы [13, 63, 64].

1.3. Применение манжетки обыкновенной в медицине.

В народной медицине многих стран Alchemilla vulgaris L. широко применяется в качестве лекарственного средства как вяжущее, противовоспалительное, кровоостанавливающее, антисептическое,

ранозаживляющее, мочегонное, кроме этого, в Европе манжетки трава используется как официнальный вид [56, 65-67]. Для внедрения в научную медицину данного вида сырья, требуется научное обоснование традиционного использования Alchemilla vulgaris L. чем в последние годы активно занимаются ученые из разных стран, исследуя химический состав и фармакологические активности манжетки. Благодаря наличию разных групп биологических веществ, лекарственные растения оказывают многостороннее действие на патологические процессы. Фитопрепараты обладают большей эффективностью при хронических заболеваниях, используются в комплексном лечении. В лекарственных растениях рода Alchemilla L. наличие флавоноидов и дубильных веществ обуславливают противовоспалительную активность, антисептическое, антимикробное действие [56, 58, 68]. Вайс, 2004 предлагает использовать листья манжетки в комплексной терапии воспалительных заболеваний органов малого таза [65].

В народной медицине многих стран виды Alchemilla L. используют для лечения ран, острой диареи, дисменореи [8, 56]. Результаты исследований показали наличие регенерирующей активности экстрактов манжетки обыкновенной для лечения ран и язв [69-72].

Извлечения, экстракты из манжетки травы относится к классу не

токсичных и обладают антиметостатическим действием, авторы описывают

иммуномодулирующее действие с противоопухолевой активностью [5, 59, 7317

75]. Антипролиферативную активность в отношении раковых клеток, антибактериальную и противогрибковую активности проявили экстракты из манжетки корней [64].

Мурин, 2011 в своих работах описывает противоопухолевую и антиметастатическую активность настоя в отношении карциномы легкого Льюис [7].

Изучалась гипогликемическая, гиполипедимическая и

иммунокоррегирующая активности настоев и сухого экстракта манжетки травы, витаминная активность, капилляроукрепляющее действие полифенольного комплекса травы Alchemilla L. [6].

Была исследована возможность использования экстрактов этого растения для профилактики инфаркта миокарда. Влияние на реологические параметры крови авторы связывают с наличием в сырье экдистероидов а также макро- и микроэлементов [3].

Антиоксидантную активность манжетки обыкновенной травы ученые из разных стран связывают с фенольными соединениями, которые присутствуют в ЛР [9, 12, 70, 76-82]. Фенольные и полифенольные компоненты участвуют в окислительно - востановительных процессах, нейтрализуя активные формы кислорода [83].

Бородин, 2008 в своей работе описывает лимфотропные свойства (стимулирование в клетках лимфоидных органов белок синтезирующий аппарат и митохондрии) некоторых растений, в том числе и у манжетки обыкновенной, за счет полифенольного комплекса в ее составе. Предлагает использовать манжетку обыкновенную в профилактических и реабилитационных мероприятиях в качестве лимфостимулируещего средства при эндо (экзо) токсикозах [84]. Шевцов и др. изучали возможность использования водного извлечения из манжетки корней в качестве дополнительного средства при лечении синдрома длительного сдавливания для ускорения процесса восстановления [85].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Черемных Елена Васильевна, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Андреева, В. Ю. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной Alchemilla vulgaris L.s.l / В. Ю. Андреева, Г. И. Калинкина // Химия растительного сырья, 2000. - № 1. - С. 85-88.

2. Андреева, В. Ю. Исследование химического состава надземной части манжетки обыкновенной Alchemilla vulgaris L.S.L. / В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина // Химия растительного сырья, 2000 - №2. - С. 79-85.

3. Андреева, В. Ю. Оценка элементного состава некоторых видов лекарственного растительного сырья, произрастающих на территории Томской области и предлагаемых к использованию в кардиологической практике / В. Ю. Андреева, А. С. Ангаскиева // Химия растительного сырья, 2011. - №2.-С. 149-151.

4. Баева, В. М. Изучение аминокислотного состава порошка и настоя травы манжетки / В. М. Баева, И. И. Мурин // Традиционная медицина, 2007. - № 1(8). - С. 53-56.

5. Баева, В. М. Изучение полифенолов травы манжетки / В.М. Баева, С.А. Сасов // Фармация, 2007. - № 8. - С. 9-10.

6. Зорина, Е. В. Фармакогностическое изучение видов рода Alchemilla L. Пермского края: автореф. диссерт. на соиск. уч. степ.канд. фармацевт. наук :15.00.02 / Зорина Елена Владимировна; Пермь, 2009. - 21с.

7. Мурин, И. И. Фитохимическое и фармокологическое изучение травы манжетки: автореф. диссерт. на соиск. уч. степ.канд. фармацевт. наук: 14.04.02. / Мурин Илья Игоревич; Москва, 2011.-25с.

8. Trendafilova, A. Flavonoid glycosides from Bulgarian endemic Alchemilla achtarowii Paw l / A. Trendafilova, M. Todorova, A.Gavrilova [et al.] // Biochemical Systematics and Ecology, 2012. - Vol. 43. - P. 156-158.

9. Злобин, А. А. Антиоксидантная и антимикробная активность пектинов ряда растений европейского севера / А. А. Злобин, Е. А. Мартинсон, Ю. С. Оводов // Известия Коми научного центра УрО РАН. - Сыктывкар, 2011. - Вып.3(7). - С.33-37.

10.Филиппова, Е. И. Противовирусные свойства препарата на основе суммы флавоноидов манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris L.) в отношении вируса гриппа / Е. И. Филиппова, Т. А. Кукушкина, И. Е. Лобанова [и др.] // Фундаментальные исследования, 2015. - Вып. 2. - С. 5139-5144

11.Takir, S. Vasorelaxant and blood pressure lowering effects of Alchemilla vulgaris: A comparative study of methanol and aqueous extracts / S. Takir, IH. Altun, B. Sezgi [et al.] // Pharmacogn Mag, 2015. -Vol. 11(41). - P. 163169.

12.Vitkova, A. Influence of species composition on total phenolic content and antioxidant properties of herba Alchemillae / A. Vitkova, M. Nikolova, M, Delcheva [et al.] // Bulgarian Journal of Agricultural Science, 2015. - Vol. 21 (№ 5). - P. 990-997.

13.Мазуркова, Н. А. Исследование противовирусной активности экспериментальных образцов препаратов, полученных из травы и корней Alchemilla vulgaris L. в отношении вирусов осповакцины и оспы мышей / Н. А. Мазуркова, М. А. Проценко, Е. И. Филиппова [и др.] // Разработка и регистрация лекарственных средств, 2019.- Вып. 8(4). С. 9-15.- D0I:10.33380/2305-2066-2019-8-4-9-15.

14.Гудкова, А. А. Свежая трава горца почечуйного: разработка проекта фармакопейной статьи / А. А. Гудкова, А. С. Чистякова, А. А. Сорокина [и др.] // Фармация, 2017. - Т. 66. - № 8. - С. 3-8.

15. Лысенко, Т. А. Сравнительное изучение влияния сока плодов калины обыкновенной, настоя плодов калины и водорастворимых гранул на основе сока калины на противовоспалительную активность у лабораторных животных // Международный научно-исследовательский журнал, 2022. - №8 (122). - DOI: 10.23670/IRJ.2022.122.99.

16. Куркин, В. А. Разработка подходов к стандартизации свежих плодов боярышника полумягкого / В. А. Куркин, И. Х. Шайхутдинов, О. Е. Правдивцева [и др.] // Вопросы биологической, медицинской и

фармацевтической химии, 2020. - Т. 23. - № 3. - С. 37-42. - DOI 10.29296/25877313-2020-03-07.

17.Оленников, Д. Н. Химический состав сока каллизии душистой (Callisia fragrans Wood.) и его антиоксидантная активность (invitro) / Д. Н. Оленников, И. Н. Зилфикаров, А. А. Торопова [и др.] // Химия растительного сырья, 2008. - № 4. - С. 95-100.

18.Кинцурашвили, К. М. Физико-химические показатели и аминокислотный состав сока из ягод бузины травянистой (Sambucus edulus l.) / К. М. Кинцурашвили, В. Г. Хведелидзе, Р. Г. Мелкадзе // Химия растительного сырья, 2008. - № 3. - С. 93-96.

19. Хаджиева, З. Д. Изучение возможности медицинского применения фитокомплексов крапивы и солодки в форме гранул / З. Д. Хаджиева, Л. П. Лежнева, З. Б. Тигиева // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация, 2010. -№ 16(87). - С. 114-119.

20.Фатыхова, Д. Г. Исследование антигенотоксических свойств соков растений Chelidonium majus L., Plantago major L. и Tussilago farfara L / Д. Г. Фатыхова, Н. С. Карамова, Й. Р. Абдрахимова [и др.] // Экологическая генетика, 2010. - Т. 8. - № 2. - С. 56-65.

21. Бадальян, З. В. Разработка технологии и фармакологические исследования нативного сока подорожника / З. В. Бадальян, А. М. Темирбулатова, Э. Ф. Степанова. // Известия Самарского научного центра Российской академии наук, 2014. - Вып. 16, № 1-3. - С. 718720.

22.Лежнева, Л. П. Реализация лечебных свойств фитокомилекса из свежесобранных листьев крапивы при разработке лекарственных форм // Современные проблемы науки и образования, 2011. - № 2. -С. 24.

23. Государственная фармакопея Российской Федерации /МЗ РФ. XV изд. [Электронный ресурс] URL: https: //docs. rucml. ru/feml/pharma/v 14/vol 1/

24.Frohner, S. Zur infragenerischen Gliederung der Gattung Alchemilla L. in Eurasien // Gleditschia, 1986. - Vol. 14. - P. 49.

25. Gehrke, B. Molecular phylogenetics of Alchemilla, Aphanes and Lachemilla (Rosaceae) inferred from plastid and nuclear intron and spacer DNA sequences, with comments on generic classification // Molecular phylogenetics and evolution, 2008. -Vol. 47. P.1030-1044. - DOI: 10.1016/j.ympev.2008.03.004

26. Rono, P. C. Initial Complete Chloroplast Genomes of Alchemilla (Rosaceae): Comparative Analysis and Phylogenetic Relationships // Frontiers in genetics, 2020. -Vol. 11. -DOI: 10.3389/fgene.2020.560368.

27.Жукова, О. В. Онтогенетические спектры ценопопуляций Alchemilla vulgaris L.S.L / О. В. Жукова, С. М. Иванов, Н. В. Глотов // Вестник Удмуртского университета. Серия «Биология. Науки о Земле», 2014. -№2. С.14-21.

28.Баева, М. С. Фармакогностическое изучение лекарственных растений с использованием молекулярно-биологических методов: автореф. дис. докт. фармацевт. наук: 15.00.02 / Баева Вера Михайловна; Москва, 2009. - 48 с.

29.Филимонова, Т. В. Анализ видов рода Alchemilla L. Мурманской области: систематика, география, экология: автореф. дис. на соиск. учен.степ. канд. биол. наук : специальность 03.00.05 / Филимонова Татьяна Владимировна; С.-Петерб. гос. ун-т. - Санкт-Петербург, 2007. -С. 16

30.Чкалов, А. В. Идентификация представителей рода Alchemilla L. Нижегородского Поволжья: учебно-методическое пособие / А. В. Чкалов. Нижний Новгород: ННГУ им. Н. И. Лобачевского, 2012. - 46 с.

31.Чкалов, А. В. Новые виды Alchemilla (Rosaceae) из Среднего Поволжья // Бот.журн. - 2011. - Т. 96, № 12. - С. 1633-1643.

32. Тихомиров, В. Н. Род Манжетка / В. Н. Тихомиров, А. А. Нотов, Л. В. Петухова [и др.] // Биологическая флора Московской области / под ред.

B.Н. Павлова, В.Н. Тихомирова. - М., 1995. - Вып. 10. - С. 83-118

33. Тихомиров, В. Н. Краткий обзор системы рода Alchemilla L. (Rosaceae) во флоре Восточной Европы (бывшая европейская часть СССР) // Бюл. МОИП. Отд. биол., 1998. - Т. 103, вып. 2. - С. 59-63.

34.Юзепчук, С. В. Новые виды и список манжеток уральской флоры // Ботанические материалы Гербария БИН АН СССР, 1955. - Т. 17. - С. 242-259.

35.Чкалов, А. В. Род Alchemilla L. во флоре Свердловской области / А. В. Чкалов, А. С. Третьякова, М. С. Князев [и др.] // Turczaninowia. - 2019. -Т. 22. - № 4. - С. 172-209. - DOI 10.14258/turczaninowia.22.4.17.

36. Чкалов, А. В., Пакина Д. В. Род AlchemillaL. (Rosaceae) во флоре Пермского края // Turczaninowia, 2019. - Т. 22, вып. 1. - С. 109-142. -DOI: 10.14258

37. Чкалов, А. В. Род Alchemilla L., 1753 (Rosaceae) во флоре республики Тыва (Россия, Южная Сибирь) // Acta Biologica Sibirica, 2019. - №. 1. -

C. 33-43.

38.Чкалов, А. В. Находки новых и редких видов рода Alchemilla L. (Rosaceae) в Республике Башкортостан / А. В. Чкалов, Д. В. Пакина // Бюл. МОИП. Отд. биол., 2018. -Т. 123, № 3. - С. 80-82.

39.Москвина, Н. В. Род Alchemilla L. - Манжетка // Иллюстрированный определитель растений Пермского края. - Пермь, 2007. -С. 467-479.

40. Чкалов, А. В. Видовой состав и эколого-ценотическая характеристика Манжеток (Alchemilla L.) в локальных флорах нижегородского Поволжья: автореф. дис. канд. биолог.наук : 03.00.16 / Чкалов Андрей Вячеславович ; Нижний Новгород, 2009.-20 с.

41.Глазунова, К. П. Род Alchemilla L. (Rosaceae) - классический объект для изучения факультативного апомиксиса // Эмбриология цветковых растений: терминология и концепции. - Т. 3 СПб.: Мир и семья, 2000. -С. 206-214

1UU

42.Жукова, О. В. Популяционное исследование микровидов манжетки Alchemilla vulgaris L.s.L, Rosaceae: автореф. дис. канд. биолог.наук : 03.00.05 / Жукова Ольга Валерьевна; Казань, 2008. - 24с.

43.Нотов, А. А. Архитектурные единицы, аксиальность и их таксономия последствия в Alchemillinae / А. А. Нотов, Т. В. Кузнецова // Wulfenia. -Вып. 11. 2004- С. 85-130.

44.Петухова, Л. В. Онтогенез и структура систем побегов манжетки пастушьей // Бюл. МОИП. Отд. биол. 1977. - Т. 82., вып. 3. - С. 120-129.

45.Fröhner, S. Kritik an der europäischen Alchemilla-Taxonomie // Feddes Repert,1975. - Bd. 86. - P. 119-169.

46.Нотов, А. А. Особенности расположения аномальных цветков на цветоносах Alchemilla monticola Opiz / А. А. Нотов, Е. А. Андреева // Вестн. ТвГУ. Сер. Биология и экология, 2007. - Вып. 6, №22 (50). - С. 205-216.

47.Тихомиров, В. Н. Род Манжетка — Alchemilla L. // Флора Вост. Европы / отв. ред. и ред. тома Н. Н. Цвелев. - СПб., 2001. - Т. 10. - С. 470-531.

48.Баева, В. М. Изучение полифенольного состава водных извлечений травы некоторых видов манжетки / В. М. Баева, А. М. Можайский. // Фармация, 2001. - № 5. - С. 25-26.

49.Баева, В. М. Микроэлементный состав травы манжетки // Материалы научно-практической конференции МЗ РФ «Традиционные методы лечения - основные направления и перспективы развития». 14-16 мая 1998. - М., 1998. - С. 109.

50.D'Agostino, M. Flavonoid glycosides of Alchemilla vulgarisL. / M. D'Agostino, I. Dini, E. Ramundo // Phytotherapy Research, 1998. -Vol. 12. -P. 162-163.

51.Мурин, И. И. Элементный состав травы и настоя манжетки / И. И. Мурин, В. М. Баева // Фармация, 2009. - № 7. - С. 23-25.

52.Лесовая, Ж. С. Разработка методики количественного определения флавоноидов в траве манжетки обыкновенной Alchemilla vulgaris L.S.l / Ж. С. Лесовая, Д. И. Писарев, О. О. Новиков [и др.] // Научные

ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация, 2010. - № 22-2(93). - С. 145-149. - EDN NDAWKL.

53.Condrat, D. Qualitative and quantitative analysis of gallic acid in Alchemilla vulgaris, Allium ursinum, Acorus calamus and Solidago virga-aurea by chip-electrospray ionization mass spectrometry and high performance liquid chromatography / D. Condrat, C Mosoarca, A. D. Zamfir // Cent.eur.j.chem, 2010. -Vol. 8. - P. 530-535.

54. Ernst, E. ESCOP Monographs: The Scientific Foundation for Herbal Medicinal Products (2nd edn) // Focus on Alternative and Complementary Therapies, 2010.-Vol.15. P.71-72.-D0I:10.1111/j.2042-7166. 2010.tb05951. x.

55.Mandrone, M. Identification of a Collagenase-Inhibiting Flavonoid from Alchemilla vulgaris Using NMR-Based Metabolomics / M. Mandrone, A. Coqueiro, F. Poli [et al.]// Planta medica, 2018. - Vol. 84(12-13). P.941-946. - DOI: 941-946. doi:10.1055/a-0630-2079.

56.Tadic, V. Lady's mantle (Alchemilla vulgaris L., Rosaceae): A review of traditional uses, phytochemical profile, and biological properties / V. Tadic, N. Krgovic, A. Zugic // Natural Medicinal Materials, 2020. - Vol.40. - P. 6674.

57.Jain, S. Assessment of total phenolic, flavonoid content and in vitro antioxidant properties of Alchemillia vulgaris (lady's mantle) / S. Jain, A. Yadav, & R. Gothalwal // Journal of Advanced Scientific Research, 2021. -Vol. 12. -P. 205-209. - D0I:10.55218/JASR.s1202112422

58.Kanak, S. Phenolic Composition and Antioxidant Activity of Alchemilla Species / S. Kanak, B. Krzeminska, R. Celinski [et al.] // Plants (Basel, Switzerland), 2022. - Vol. 11. 27p. - D0I:10.3390/plants11202709

59.Jelaca, S. Traditional Use of Alchemilla vulgaris: Genoprotective and Antitumor Activity In Vitro / S. Jelaca, Z. Dajic-Stevanovic, N. Vukovic [et al.] // Molecules (Basel, Switzerland), 2022. - Vol. 27(23). - P. 8113. -DOI: 10.3390/molecules27238113.

1U2

60.Altameme, H.J.M. Analysis of bioactive phytochemical compounds of two medicinal plants, equisetum arvense and Alchemila valgaris seeds using gas chromatography-mass spectrometry and fourier-transform infrared spectroscopy / H.J.M. Altameme, I. H. Hameed // Malaysian Applied Biology, 2015. - Vol. 44(4). - P. 47-58.

61.Dukstein, S. M. Phenolic Constituents from Alchemilla vulgaris L. and Alchemilla mollis (Buser) Rothm. at Different Dates of Harvest / S. M. Dukstein, E. Lotter, U. Meyer [et al.] // Zeitschrift fur Naturforschung, 2012. - Vol.67. P.529-540. - DOI: 10.5560/ZNC.2012.67c0529.

62.Fecka, I. Development of chromatographic methods for determination of agrimoniin and related polyphenols in pharmaceutical products // Journal of AOAC INTERNATIONAL, 2009. - Vol. 92, Issue 2. -P. 410-418. -DOI: 10.1093/jaoac/92.2.410.

63.Мазуркова, Н. А. Изучение противогерпетической активности экстрактов манжетки обыкновенной (Alchemilla vulgaris L.) / Н. А. Мазуркова, Т. А. Кукушкина, Г. И. Высочина [и др.] // Разработка и регистрация лекарственных средств, 2016. - Вып. 14. - С. 118-127

64.Ibrahim, O.H.M. Phytochemical Characterization, Antimicrobial Activity and In Vitro Antiproliferative Potential of Alchemilla vulgaris Auct Root Extract against Prostate (PC-3), Breast (MCF-7) and Colorectal Adenocarcinoma (Caco-2) Cancer Cell Lines / O.H.M. Ibrahim, K.A.M. Abo-Elyousr, K. A. Asiry [et al.] // Plants (Basel, Switzerland), 2022. - Vol. 11(16). - P. 2140. -DOI: 10.3390/plants11162140

65.Вайс, Р. Ф., Финтельманн Ф. Фитотерапия. Руководство / Пер. с нем. Ю. Коршикова. М.: Медицина, 2004. - С. 552.

66.Dimins, F. Antioxidant characteristics of Latvian herbal tea types / F. Dimins, V. Mikelsone, M. Kaneps // Proceedings of the Latvian Academy of Sciences, Section B: Natural, Exact and Applied Sciences, 2013. - Vol. 67(4/5). - P. 433-436. -DOI:10.2478/prolas-2013-0067.

67.Лобанова, И. Е. Виды рода Alchemilla l. (Rosaceae): химический состав, биологическая активность, использование в медицине (обзор) / И. Е.

1U3

Лобанова, Г. И. Высочина, Н. А. Мазуркова [и др.] // Химия растительного сырья. 2019. №1. С. 5-22. DOI: 10.14258/jcprm.2019014032 68.Boroja, T. The biological activities of roots and aerial parts of Alchemilla vulgaris L. / T. Boroja, V. Mihailovic, J. Katanic [et al.] // S. Afr. J. Bot.,

2018. - Vol. 116. - P. 175-184. - DOI: 10.1016/j.sajb.2018.03.007. 69.Shrivastava, R. Treatment of Aphthous Stomatitis with topical Alchemilla

vulgaris in glycerine / R. Shrivastava, GW. John // Clin Drug Investig, 2006. - Vol. 26(10). - P. 567-57.

70.Choi, J. Effect of herbal mixture composed of Alchemilla vulgaris and Mimosa on wound healing process / J. Choi, Y-G. Park, M-S. Yun [et al.] // Biomed Pharmacother, 2018. - Vol. 106. - P. 326-332.

71.Valcheva-Kuzmanova, S. Protective effects of Aronia melanocarpa juices either alone or combined with extracts from Rosa canina or Alchemilla vulgaris in a rat model of indomethacin-induced gastric ulcers / S. Valcheva-Kuzmanova, P. Denev, M. Eftimov [et al.] // Food Chem. Toxicol, 2019. -Vol. 132. - DOI: 10.1016/j.fct.2019.110739.

72.Tasic-Kostov, M. Towards a modern approach to traditional use: in vitro and in vivo evaluation of Alchemilla vulgaris L. gel wound healing potential / M. Tasic-Kostov, I. Arsic, D. Pavlovic [et al.] // Journal of ethnopharmacology,

2019. - Vol. 238. - DOI: 10.1016/j.jep.2019.03.016.

73.Патент № 2425690 C1 Российская Федерация, МПК A61K 36/73, B01D 11/02, A61P 43/00. Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью: № 2010114834/15: заявл. 14.04.2010: опубл. 10.08.2011 / Сасов С.А., Баева В.М., Мурин И.И.; заявитель Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ГОУВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздравсоцразвития России).

1U4

74.Vlaisavljevic, S. Alchemilla vulgaris agg. (Lady's mantle) from central Balkan: antioxidant, anticancer and enzyme inhibition properties / S. Vlaisavljevic, S. Jelaca, G. Zengin [et al.] // RSC advances, 2019. - Vol. 9(64). - P. 37474-37483. - DOI:10.1039/c9ra08231j.

75.Moqidem, Y. Evaluation of the Anticancer Potential of Alchemilla vulgaris Extract Against Human Neuroblastoma Cells // The American University in Cairo, AUC Knowledge Fountain; Cairo, Egypt, 2021.

76.Nikolova, M. Phenolic acids and free radical scavenging activity of Alchemilla jumrukczalica pawl / M. Nikolova, I. Dincheva, A. Vitkova [et al.] // IJPSR, 2012. - Vol. 3(3). - P. 802-804.

77.Kiselova, Y. Correlation between the in vitro antioxidant activity and polyphenol content of aqueous extracts from Bulgarian herbs / Y. Kiselova,

D. Ivanova, T. Chervenkov [et al.] // Phytother Res., 2006. - Vol. 20(11). -P. 961-5. - DOI: 10.1002/ptr.1985.

78.Ernst, E. ESCOP Monographs: The Scientific Foundation for Herbal Medicinal Products (2nd edn) // Focus on Alternative and Complementary Therapies, 2010. -Vol. 15. - P. 71-72. - DOI: 10.1111/j.2042-7166. 2010.tb05951.x

79.Shilova, I. Neuroprotective Properties of Common Lady's Mantle Infusion / I. Shilova, N. Suslov, I. Samylina [et al.] // Pharmaceutical Chemistry Journal, 2020. - Vol. 53. P.1059-1062. - DOI:10.1007/s11094-020-02122-0.

80.Neagu, E. Assessment of acetylcholinesterase and tyrosinase inhibitory and antioxidant activity of Alchemilla vulgaris and Filipendula ulmaria extracts /

E. Neagu, G. Paun, A. Camelia [et al.] // Journal of the Taiwan Institute of Chemical Engineers, 2014. - Vol. 52. P.1-6. -DOI: 10.1016/j.jtice.2015.01.026.

81. Зверев, Я.Ф. Флавоноиды как перспективные природные антиоксиданты / Я.Ф. Зверев, В.М. Брюханов // Бюллетень медицинской науки, 2017. -№1 (5). С.20-27.

82.Boroja, T. Alchemilla vulgaris L. as a potential source of natural antioxidants / T. Boroja, V. Mihailovic, J. Katanic [et al.] // Zb. Rad., 2014. - Vol. 19. -P. 233-237.

83.Биохимия растений / Л.А. Красильникова, О.А. Авксентьева, В.В. Жмурко, Ю.А. Садовниченко - Харьков: Торсинг, 2004. -224 с

84.Бородин, Ю. И. Теоретические предпосылки профилактической лимфологии и здоровье человека в Сибири // Сибирский научный медицинский журнал, 2008. - №5. С. 14-17.

85.Шевцов, А. Р. Морфология селезенки в норме, при моделировании синдрома длительного сдавления и в условиях применения полифенолов манжетки обыкновенной / А. Р. Шевцов, В. А. Головнев, И.. А. Голубева // Вестник НГУ. Серия: Биология, клиническая медицина, 2006. - Т.4. вып.3. - С. 62-65.

86.Toprak, A. Comparable effects of the different extracts of the same plants on blood pressure and vascular tone / A. Toprak, S. Takir // The Pharmaceutical and Chemical Journal, 2017. - Vol. 4(5). - P. 57-65.

87.Canli, K. Antimicrobial screening of Alchemilla vulgaris herbs and flowers / K. Canli, A. Yetgin, O. §im§ek [et al.] // International Journal of Pharmaceutical Science Invention ISSN (Online), 2017. - Vol. 6 Iss. 2. - P. 13-16.

88.Патент № RU 2 680 528 C1. Фитосредство, обладающее мембраностабилизирующим действием при гипоксии головного мозга: начало действия 07.09.2018 / Шилова И.В., Суслов Н.И., Самылина И.А., Баева В.М.

89.Сергунова, Е. В. Способ консервации и содержание биологически активных веществ в плодах и отварах черники // Фармация, 2013. - № 6. - С. 21-23.

90.Нестерова, Н. В. Влияние способа консервации на содержание биологически активных веществ плодов яблони / Н. В. Нестерова, И. А. Самылина // Фармация, 2017. - Т. 66. - № 3. - С. 24-26.

91.Патент 2 698 325 Рос. Федерация. Сок из свежих плодов боярышника мягковатого, обладающий диуретической активностью: № 2019114928: заявл.15. 05.2019: опубл. 26.08.2019 / Куркин В. А., Зайцева Е. Н., Правдивцева О. Е., Шайхутдинов И. Х.

92.Сергунова, Е. В. Влияние способов консервации на качество лекарственного растительного сырья // Сеченовский вестник, 2015. - № 1(19). - С. 69-70.

93.Олефир, Ю. В. Соки растений и лекарственные препараты на их основе: вопросы стандартизации и контроля качества / Ю. В. Олефир, Е. И. Саканян, Н. С. Терешина [и др.] // Химико-фармацевтический журнал, 2018. - Т. 52. - № 4. - С. 35-39. - D0I:10.30906/0023-1134-2018-52-4-35-39.

94.Степанова, Э. Ф. Совершенствование технологии и стандартизация сиропа подорожника большого / Э. Ф. Степанова, З. В. Бадальян, А. М. Темирбулатова [и др.] // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Медицина. Фармация, 2012. - № 10-3(129). - С. 84-89.

95.Оленников, Д. Н. Химический состав сока алоэ древовидного (Aloe arborescens Mill.) и его антиоксидантная активность (in vitro) // Химия растительного сырья, 2010. - №. 3. - С. 83-90. - DOI: 10.24412.

96.Взорова, Л.Н. Фармакогностическое изучение и стандартизация травы эхинацеи пурпурной свежей и препарата на ее основе: автореферат дис. канд. фармацевт. наук: 15.00.02 / Взорова Людмила Николаевна; Москва, 2002 .25с.

97.Шантанова, Л. Н. Актопротекторные свойства сока из побегов Callisia fragrans L / Л. Н. Шантанова, Д. Б. Раднаева, Е.Н. Цыбикова // Сибирский медицинский журнал (Иркутск), 2008. - Т. 81. - № 6. - С. 8588.

98.Пеклина, Г. П. Владимир Петрович Филатов - выдающийся ученый офтальмолог и его вклад в изучение тканевой терапии / Г.П. Пеклина, Н.

Г. Антипов, С. В. Мокиенко [и др.] // Norwegian Journal of Development of the International Science. 2020. №41-1 С.38-45.

99.Яковец, О.Г. Фитофизиология стресса: Курс лекций / О.Г. Яковец; рец.: В.П. Шуканов, Н.А. Лемеза. - Минск: БГУ, 2009. - С.101.

100.Бадальян, 3. В. Изучение возможности совершенствования технологии сока подорожника /3. В. Бадальян, Э. Ф. Степанова, А. М. Темирбулатова [и др.] // Успехи современного естествознания, 2011. -№ 1 - С. 32-33.

101.Зилфикаров, И.Н. Современные аспекты фармакогностического и биохимического изучения суккулентного сырья алоэ древовидного и каллизии душистой / И. Н. Зилфикаров, Д. Н. Оленников, Т. А. Ибрагимов [и др.] // Щелково: Издатель Мархотин П.Ю., 2013. - 192 с. -ISBN 978-5-00038-022-2.

102.Еремина, А. А. Исследование влияния процесса биостимуляции листьев Aloe Vera и Aloe arborescens по методу В. П. Филатова на суммарное содержание антраценпроизводных в нативном соке // Шаг в науку, 2020. - № 2. - С. 17-20.

103.Ибрагимов, Т. И. Фитохимическое исследование и усовершенствование стандартизации сырья и препаратов алоэ древовидного и каллизии душистой: автореф. дис. канд. фарм. наук: 14.04.02 / Ибрагимов Тимур Алгасанович; Пятигорск, 2011. - 24 с

104.Нестеров, Г. В. Влияние процесса ферментации на показатели качества листьев ольхи видов Alnus incana (L.) Moench и Alnus glutinosa (l.) Gaerth / Г. В. Нестеров, Т.М. Литвинова, С.В. Кондрашев // Медико-фармацевтический журнал Пульс, 2020. - Т. 22. - № 3. - С. 67-71. - DOI 10.26787/nydha-2686-6838-2020-22-3-67-71.

105.Нехорошева, А.В. Влияние процесса ферментации на химический состав растительного сырья, получаемого из листьев осины обыкновенной / А.В. Нехорошева, С.В. Нехорошев, А. А. Дренин [и др.] // Химия растительного сырья, 2019. -№2. - С. 251-259.

106.Абдрахимова, Й. Р. Стресс-индуцированные изменения содержания антиоксидантов в листьях растений разных видов / Й. Р. Абдрахимова, Ю. А. Цветкова // Ученые записки Казанского государственного университета. Серия: Естественные науки, 2007. - Т. 149. - № 2. - С. 7583.

107.Куркин, В. А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов (факультетов): для студентов, обучающихся по специальности 060108 (040500) - "Фармация" / В. А. Куркин; М-во образования и науки Российской Федерации [и др.]. - 2-е изд., перераб. и доп. - Самара: Офорт, 2007. - 1239 с.

108.Муравьева, Д. А. Фармакогнозия: учебник. - 4-е изд., перераб. и доп. / Д. А. Муравьева, И. А. Самылина, Г. П. Яковлев // М.: Медицина, 2002. - С. 620-621.

109.Куркина, А. В. Флавоноиды фармакопейных растений: монография // Самара: ООО «Офорт», ГБОУ ВПО Сам ГМУ Минздравсоцразвития России, 2012. - 290 с.

110.Брюханов, В. М. Методические подходы к изучению функции почек в эксперименте на животных / В. М. Брюханов, Я. Ф. Зверев, В. В. Лампатов [и др.] // Нефрология, 2009. - Вып. 13, №.3. - С.52-62.

111.Берхин, Е.Б. Методы изучения влияния новых химических соединений на функцию почек // Хим.-фармац. журн, 1977. - Т.11, № 5. - С. 3-11.

112.Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. Под ред. Хабриева Р.У., М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005. - 832с.

113.ГОСТ 32644-2014. Методы испытания по воздействию химической продукции на организм человека. Острая пероральная токсичность -метод определения класса острой токсичности. 2015.

114.Миронов, А. М. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств; Ч.1. /А. М. Миронов - Москва: Гриф и К, 2012. -944 с.

115.Черемных, Е. В. Влияние способов получения сока манжетки обыкновенной на содержание полифенольных соединений / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Белоногова // Электронный ресурс Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения Москва: ВИЛАР, 2022 С. 361-365 116. Черемных, Е. В. Разработка показателей качества свежей травы манжетки обыкновенной. / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Белоногова // Научно-практическая конференция с международным участием «Создание новых лекарств - от идеи до производства»: Сборник материалов (15 декабря 2021 года) Пермь, ПГФА, 2021.с. 118121.

117.Черемных, Е. В. Влияние факторов внешней среды на содержание сока в свежей траве манжетки / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Белоногова [и др.] // Беликовские чтения: материалы VIII Всероссийской научно-практической конференции. Пятигорск, 2020. С. 303-307.

118.Товчига, О. В. Влияние лекарственных растений на выделительную функцию почек / О. В. Товчига, С. Ю. Штырголь // Экспериментальная и клиническая фармакология, 2009. - Том 72 (3). - С. 50-59.

119.Халматов, Х. Х. Растения Узбекистана с диуретическим действием // Медицина, Ташкент, 1979. - 180 с.

120. Черемных, Е. В. Влияние биостимуляции травы манжетки обыкновенной свежей на химический состав и антиоксидантную активность сока / / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Белоногова // Вестник Смоленской государственной медицинской академии, 2023. -Т.22 (4). - С. 229-235. - DOI: 10.37903/vsgma.2023.4.31 EDN: YJSBTZ.

121.Черемных, Е. В. Химический состав сока манжетки обыкновенной / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Белоногова // Вестник ПГФА, 2018. с. 174-177

122.Черемных, Е. В. Аспекты стандартизации сока травы манжетки

обыкновенной (Alchemilla vulgaris) / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д.

110

Белоногова // Разработка и регистрация лекарственных средств. 2022; 11(4): 99-104. https://doi.org/10.33380/2305-2066-2022-11-4m-99-104 123.Черемных, Е. В. Определение сроков заготовки манжетки обыкновенной травы свежей по содержанию флавоноидов и дубильных веществ / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Белоногова // Электронный ресурс Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения Москва: ВИЛАР, 2024 С. 283-288 124.Патент РФ на изобретение 2792378. - (заявка №2022118117 от 04.07.2022 г.) «Способ получения средства с диуретической активностью» / Е. В. Черемных, Е. В. Зорина, В. Д. Бояршинов. В. Д. Белоногова, Т. А. Юшкова. - Решение о выдаче 21.03.2023г. 125.Черемных, Е. В. Диуретическая активность соков травы манжетки обыкновенной свежей / Е. В. Черемных, В. Д. Бояршинов, Е. В. Зорина [и др.] //Медицина 2024. 12(2) с. 64-70. ёо1: 10.29234/2308-9113-2024-122-64-70

ПРИЛОЖЕНИЕ

Приложение 1.

Результаты бумажной хроматографии соков манжетки обыкновенной травы в системе н-бутанол - уксусная кислота - вода (4 1:2) ___

№ ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции БУВ 4:1:2 Предполагаемый класс

п.п СН СБ 7 СБ 14 в УФ-свете в видимом свете соединений

без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида

1. - - 0,04 ярко-желтая желто-зеленая темно-желтая флавоны без 5-ОН группы

2. 0,07 0,08 - лимонно-желтая усиливается светло-желтая светло коричневая флавоны/флавонолы

3. - - 0,07 — — ярко-желтая светло коричневая изофлавоноиды

4. - - 0,10 ярко-желтая желто-зеленая желтая светло коричневая лафвоны, содержащие свободную 3-ОН-группу

5. 0,10 - - лимонно-желтая ярко-желтая желтая светло коричневая флавоны/флавонолы

6. 0,12 ярко-желтая желто-зеленая ярко лимонно.-желтая

7. - - 0,13 ярко-светлая усиливается лимонно-желтая

8. 0,16 0,16 0,16 лимонно-желтая усиливается желтая светло коричневая

9. - - 0,19 ярко-светлая усиливается желто-голубая светло коричневая флавоны/флавонолы

10. 0,22 - - светло-желтая желто-зеленая желто-голубая светло коричневая

11. - 0,22 - лимонно-желтая лимонно-желтая желто-голубая светло коричневая

12. 0,26 - - желтая зеленая желтая флавоноиды

13. 0,28 0,26 0,25 — — желто-голубая п-кумаровая кислота или

№ ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции БУВ 4:1:2 Предполагаемый класс

п.п СН СБ 7 СБ 14 в УФ-свете в видимом свете соединении

без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида

др. коричные кислоты

№ п.п ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции БУВ 4:1:2 Предполагаемый класс соединений

СН СБ 7 СБ 14 в УФ-свете в видимом свете

без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида

14. - - 0,26 светло-желтая светло-желтая желто-голубая метилированные флавоноиды

15. - 0,28 - - ярко-желтая желтая флавоноиды

16. 0,29 - - светло-желтая усиливается желто-зеленая, флюорисцирующая флавоны/флавонолы

17. 0,31 - - желтая желтая желтая метилированные флавоноиды

18. - 0,32 - желто-голубая усиливается - фенольное соединение

19. - - 0,32 светло-желтая усиливается -

20. 0,34 - - светло-желтая усиливается желто-голубая агликоны флавонов/ флавонолов

21. 0,38 0,35 - желтая желтая желто-голубая

22. - - 0,36 светлая желто-голубая - фенольное соединение

23. - 0,40 - желтая ярко желто-зеленая светло-желтая флавоноиды

24. 0,41 - желтая лимонно-желтая флавоноиды

25. 0,43 - - - светло-желтая ярко-желтая флаваноны

26. 0,46 0,44 - голубая голубая желто-зеленая, флюорисцирующая светло желтая флавонол-5-гликозиды

27. 0,45 лимонно-желтая лимонно-желтая желтая метилированные флавоноиды

28. - 0,48 - светло-зеленая желто-зеленая ярко желто-зеленая светло-желтая 5-ОСН3 -замещенный кверцетин

29. - - 0,49 лимонно-желтая лимонно-желтая лимонно-желтая метилированные флавоноиды

30. 0,50 - - светло-желтая желто-зеленая ярко-желтая флавонолы

31. - - 0,52 светло-желтая усиливается ярко-светло-желтая лимонно-желтая

32. - 0,55 - - желтая желтая флавоноиды

№ п.п ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции БУВ 4:1:2 Предполагаемый класс соединений

СН СБ 7 СБ 14 в УФ-свете в видимом свете

без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида

33. - 0,55 - коричневая желтая ярко-желтая лимонно-желтая рутин

34. 0,57 0,6 - — желтая ярко лимонно-желтая лимонно-желтая флавоноиды

35. 0,57 - - коричневая желтая ярко-желтая лимонно-желтая гликозиды флавонолов

36. 0,59 — лимонно-желтая желто-зеленая флавоноиды

37. - - 0,62 - - желто-зеленая — изофлавоноиды

38. 0,63 - - — желто-зеленая желтая — флавоноиды

39. - - 0,66 желто-зеленая желто-зеленая желто-голубая - агликоны флавонов/ флавонолов

40. 0,66 - - — голубая — — П-кумаровая кислота и подобные соединения

41. - 0,66 - — желтая желтая флавоноиды

42. 0,68 0,67 - - - желтая гликозиды изофлавонов

43. - - 0,71 голубая усиливается — — производные коричной кислоты

44. 0,73 - - — голубая — — связанные производные коричной кислоты

45. 0,73 голубая не изменяется желто-голубая метилированные производные коричной кислоты

46. 0,77 светло-голубая светло-голубая — — метилированные флавоноиды

47. 0,79 0,80 0,81 фиолетовая усиливается — — фенолкарбоновые кислоты

48. 0,83 0,84 0,86 — — светло-желтая изофлавоноиды

№ п.п ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции БУВ 4:1:2 Предполагаемый класс соединений

СН СБ 7 СБ 14 в УФ-свете в видимом свете

без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида

21 18 22

0,56 коричневая желтая желто-зеленая рутин

0,49 коричневая желтая желтая цинарозид

0,67 ярко-желтая ярко-желтая желто-зеленая кверцетин

0,80 коричневая желтая желто-зеленая/ лимонная лютеолин

Результаты бумажной хроматографии соков манжетки обыкновенной травы в системе уксусная кислота - вода (15:85).

№ ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции УВ 15:85 Предполагаемый класс

п. СН СБ7 СБ14 в УФ-свете в видимом свете соединений

п без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида 2% раствор алюминия хлорида

0,01 - 0,01 желтая желтая светло-желтая желтая метоксифлавонолы (агликоны)

0,01 ярко-желтая ярко-желтая желто-зеленая ярко-желтая кверцетин

3. 0,03 0,03 розовая ярко-желтая ярко-желтая желтая флавоноиды

4. 0,04 коричневая желтая желтая светло-желтая гликозиды флавонолов

5. 0,06 - лимонно-желтая лимонно-желтая желтая гликозиды флавонолов

6. 0,06 - желтая светло-желтая флавоноиды

7. 0,09 0,09 коричневая ярко-желтая ярко-желтая желтая флавонол-3 -гликозиды

№ ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции УВ 15:85 Предполагаемый класс

п. СН СБ7 СБ14 в УФ-свете в видимом свете соединений

п без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида 2% раствор алюминия хлорида

8. 0,10 0,10 коричневая коричневая желтая желтая метилированные флавонолы

9. 0,14 коричневая желтая ярко-желтая желтая флавонол-3 -гликозиды

10. 0,15 коричневая коричневая желто-зеленая светло-желтая агликоны метоксифлавонов

11. 0,16 0,16 коричневая желтая ярко-желтая желтая агликоны флавонолов

12. 0,19 коричневая коричневая желтая желтая метоксифлавоны

13. 0,20 0,21 коричневая желтая желтая желтая флавоны/флавонол-3 -

14. 0,22 коричневая желтая желтая желтая гликозиды

15. 0,23 коричневая желтая ярко-желтая желтая

16. 0,23 коричневая коричневая ярко-желтая желтая агликоны метоксифлавонов

17. 0,26 коричневая желтая ярко-желтая желтая флавонол-3 -гликозиды

18. 0,26 желто-коричневая желто-коричневая желтая светло-желтая агликоны метоксифлавонов

19. 0,28 коричневая желтая ярко-желтая желтая флавонол-3 -гликозиды

20. 0,29 — — желтая желтая гликозиды изофлавонов

21. 0,30 0,30 светло-желтая голубая светло-желтая светло-желтая флавон-5-гликозиды

22. 0,31 — — светло-желтая светло-желтая гликозиды изофлавонов

23. 0,31 голубая усиливается — — фенолкарбоновые кислоты

24. 0,31 — - фиолетовая —

25. 0,32 лимонно-желтая желто-зеленая — — флавоны без 5-ОН группы

26. 0,34 светло-желтая усиливается желто-голубая агликоны флавонов/флавонолов

27. 0,34 желтая усиливается светло-желтая бледно- желтая флавонолы

№ ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции УВ 15:85 Предполагаемый класс

п. СН СБ7 СБ14 в УФ-свете в видимом свете соединений

п без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида 2% раствор алюминия хлорида

28. 0,34 светлая светлая - - коричные кислоты

29. 0,37 желтая усиливается желтая - фенольное соединение

30. 0,37 светло-желтая усиливается светло-желтая

31. 0,38 желтая усиливается желтая светло - желтая флавонолы

32. 0,40 желтая желтая желтая светло- желтая флавонолы

33. 0,42 фиолетово-голубая голубая - - фенолкарбоновые кислоты

34. 0,43 0,43 светло-голубая желто- голубая/зеленая желто-зеленая - флавон-5-гликозиды

35. 0,44 фиолетово-голубая голубая желто-зеленая светло- желтая флавон-5-гликозиды

36. 0,45 фиолетово-голубая фиолетово-голубая желтая светло- желтая дигидрохалконы

37. 0,46 0,46 светло-желтая усиливается св. желтая светло- желтая флавонолы

38. 0,49 - - светло-желтая - гликозиды изофлавонов

39. 0,50 фиолетовая усиливается желтая - флавон-5-гликозиды

40. 0,51 0,50 - - светло-желтая гликозиды изофлавонов

41. 0,52 светло-желтая усиливается светло-желтая фенольное соединение

42. 0,63 - голубая - - корчные кислоты (п-кумаровая кислота)

43. 0,65 фиолетово-голубая усиливается желто-голубая фенолкарбоновые кислоты (кофейная кислота)

44. 0,66 - голубая - - коричные кислоты

45. 0,71 голубая усиливается - - фенолкарбоновые

46. 0,73 светлая усиливается - - кислоты

47. 0,73 голубая усиливается - -

№ ЯГ зон адсорбции Окраска зон адсорбции УВ 15:85 Предполагаемый класс

п. СН СБ7 СБ14 в УФ-свете в видимом свете соединений

п без обработки пары аммиака 2% раствор алюминия хлорида 2% раствор алюминия хлорида

48. 0,76 голубая голубая — — 3,5 -диметоксифлавонолы

49. 0,80 0,82 светло-желтая усиливается голубая светло - желтая фенольные соединения

50. 0,81 голубая усиливается — — фенолкарбоновые

51. 0,87 голубая усиливается — — кислоты

52. 0,88 лимонно-желтая усиливается — — фенольные соединения

53. 0,88 желтая желтая желто-зеленая метилированные флавоноиды или другие виды замещения фенольных групп

21 24 19

0,02 коричневая желтая лимонно-желтая ярко желто-зеленая лютеолин

0,06 коричневая ярко-желтая желтая ярко лимонно -желтая цинарозид

0,01 ярко-желтая ярко-желтая ярко желто-зеленая ярко желто-зеленая кверцетин

0,44 коричневая желтая ярко желто-зеленая ярко желто-зеленая рутин

Приложение 2.

Химический состав сока манжетки из сырья биостимулированного 7 дней

1 2 3 4 5

Персикогенин-5-О-глюкоронид 7.41 310 492 сн3 1 3 н3с у^ ^^ °н °н Ю'' '""°н °н

Эллаговая кислота 7.84 369 302 °н °н

Блюмеатин В-3-О- диметилрамнозилглюкурон ид 8.37 303 682 сн3 ^ "сн3 хт« »

Кверцетин -3-О-глюкуронид 8.58 354 478 II ° °н

Кемпферол-3-О-глюкуронид 8.94 348 462 н°\ ° °н

1 2 3 4 5

Рамнетин-3-О-глюкуронид 10.62 354 492 сн3 ^ он он о ч,^Он но. 11 ^^ о он

Апигенин7-О-глюкуронид 10.87 338 446 он о но:: он о он

3 -Метоксиапигенин-7-О-глюкуронид 11.31 348 476 он о 1 II II Сн3 о ^^ он но. 11 ^^ о он

Кемпферид-3-О-глюкуронид 12.6 350 476 он о о1^он но ^^ 11 ^^ о он

Рамназин-3-О-глюкуронид 12.93 357 506 сн3 ^ ^ ^о. Дк. Г^ II II — сн3 11 о он о X „-он о 1"' но, ^^ II о он

Рамназин 19.5 356 330 „-сиз о .он сн3 Г| он о

Данные хроматографического исследования сока манжетки обыкновенной

травы биостимулированной 7 дней

Название Площадь пика Площадь в процентах Разрешение Количество тарелок

Протокатеховая 3.14 3.4084е+9 8.121 3.339 5609.180

кислота

Кверцетин 3-О- 3.79 1.2954е+9 3.087 6.483 10350.400

глюкуронилглюкозид

Х-257пт 4.58 6.1650е+8 1.469 5.607 20574.793

Рамнетин-3-О- 5.23 5.1529е+8 1.228 0.817 40439.000

глюкуронилглюкозид

Гесперетин-7-О- 5.35 9.6822е+8 2.307 4.210 12708.089

глюкоронид

Кверцетин-3-О-арабиноглюкозид 7.25 1.2668е+9 3.018 1.386 75318.836

Персикогенин-5-О- 7.41 1.0638е+9 2.535 3.534 76070.078

глюкоронид

Эллаговая кислота 7.84 5.9387е+9 14.150 1.477 19951.357

Х-256пт-370пт 8.20 5.0486е+8 1.203 0.934 34269.090

Блюмеатин В-3-О- 8.37 4.2800е+8 1.020 1.101 19961.172

диметилрамнозилглю

куронид

Кверцетин -3-О- 8.58 8.3909е+9 19.993 3.146 86975.445

глюкуронид

Кемпферол-3-О- 8.94 3.1917е+9 7.605 1.593 107443.664

глюкуронид

Рамнетин-3-О- 10.62 5.8173е+8 1.386 2.722 216854.031

глюкуронид

Апигенин7-О- 10.87 1.9473е+9 4.640 4.494 194269.453

глюкуронид

3 -Метоксиапигенин- 11.31 1.4931е+9 3.558 4.372 213769.375

7-О- глюкуронид

Кемпферид-3-О- 12.60 5.2970е+8 1.262 3.397 264662.937

глюкуронид

Рамназин-3-О- 12.93 6.7755е+9 16.144 13.381 248053.812

глюкуронид

Рамназин 19.50 4.6530е+8 1.109 - 385633.563

Приложение 3. Акты о внедрении результатов диссертационного исследования

УТВЕРЖДАЮ

Директор ООО «НАТУРАЛЬНА-ДОБАВКИ«

Груздева ЕВ-У/У/^ _

«24» декабря 24;Г.

АКТ

Внелрения результатов диссертационной работы Чсремных Елены Васильевны «Фармакогностическое исследование манжетки обыкновенной травы свежей)» на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности З.4.2.- «Фармацевтическая химия, фармакогнозия» в рабогу ООО "Натуральные добавки«.

Комиссия в составе: главного технолога Иваниовой Любови Витальевны, руководителя производства Виноградова Сергея Алексеевича, подтверждают использование исследований Чсремных Е.В, иа тему нФармакогностическое исследование манжетки обыкновенной травы свежей» при качественном и количественном анализе лекарственного растительного сырья, содержащего флапоноилы.

Мегодики являются экспрессными, нетрудоемкими, легко воспроизведнмыми

Внедрение результатов исследований Черемных Елены Васильевны повышают объективность анализа лекарственною растительного сырья.

Члены комиссии:

Иванцова Л.В., главный технолог

Виноградов С.А., руководитель производства

У I Ш'ЖДА!' >

Ппоое к: i utj^-У I i i' Ф1 ЬОУ НО IИ ФА

Л I. I

О внедрении результата диссерпаиионной poßoi ы ' кремимх I > *-• »■ Васильевны • Фармшсогностичсскос исследование маи*егки обыкновенной ip. снежей» на соискание ученой с тепе im канднда i фврыаисшичс »v наук im специальности 3.4 2 - «Фармацевты юскан хнмнд, фармакм» нозня- ил кафире фармакогнозии ФГЬОУ ВОПГФА Минздрава F vui.t

Комиссия в составе* сотрудиикоа кафедры фармаколтошн ФГ ПОУ чу í II ФА Минздрава России к. фарм.н. допета Курицына A U к фарм и. оиси га Блиновой (J.JI к фар« и. донен га .' у- мева Д.К.. подтн > использование исследовании Чсремных 1-В па -му Фармнки нистичсоос исследование манжетки обыкновенной « мим свсжсв о • бт • и « ессе С1>до1ггов 3 и 5 курсов при чтения текнин и пр"г<лснип m ктчеем занятий по вопросам качественною и коднчоственми«» шали^ лекарственно!о растительною сыры», содержащего ф im и . м и

члсны комиссии

Доцент кафедры фармакогнозии, Курица и \ И

к.фарм.н.

Доцем кафедры фармакогнозии, к.фарм и.

Доиент кафедры фармакогнозии кфарм.н.

Приложение 4. Патент на изобретение «Способ получения средства с диуретической активностью».

Приложение 5. Проект фармакопейной статьи на новый вид ЛРС «Манжетки обыкновенной трава свежая»

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

УТВЕРЖДАЮ Директор Центра фармакопеи и международного сотрудничества ФГБУ «Научный центр экспертизы средств медицинского применения»,

«_»_20_г

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Организация-разработчик:

Манжетки обыкновенной трава свежая ФС.

Вводится впервые

Alchemillae vulgaris herba recens

Срок введения установлен

с «_»_20_г

до «_»_20_г

Собранная в период цветения и начала плодоношения свежая трава многолетнего дикорастущего травянистого растения манжетки обыкновенной Alchemilla vulgaris, сем. розоцветных-Rosaceae

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Надземные цельные прикорневые листья, части стеблей с листьями, соцветиями, цветками и плодами. Листья длинночерешковые, широко - почковидной формы, листовая пластинка волнистая с крупнозубчатым краем рассечена на 7-11 лопастей. Черешки опушенные. Стебель с удлиненными междоузлиями. Нижние стеблевые листья - короткочерешковые, верхние - сидячие с зелеными прилистниками, влагалищные. Листовая пластинка 3-5 лопастная. У верхних листьев пластинка небольшая крупнозубчатая. Соцветие монохазиев построенные по типу завитка или извилины, собранные в тирс. Цветки колокольчатые, мелкие, удлиненные. Цветок четырехчленный, чашечка с подчашием, венчик не развит. Чашелистики яйцевидной или треугольной формы, листочки подчашия ланцетные или яйцевидно-ланцетные. Гипантий колокольчатый или обратнояйцевидный. Тычинок 4, прикрепляются к железистому диску в верхней части гипантия между чашелистиками напротив листочков подчашия. Гиницей апокарпный. Плодолистик на короткой ножке развивается внутри гипантия. Плод - орешек с оболочкой из гипантия. Цвет листьев от желто-зеленого, бледно зеленого, до темно зеленого. Цветки желто - зеленого цвета.

Микроскопические признаки. Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности, клетки верхнего эпидермиса имеют многоугольную форму со слабоизвилистыми стенками. Клетки нижнего эпидермиса с извилистыми утолщенными стенками, вдоль жилок расположены друзы оксалата кальция. Устьица на верхней и нижней стороне листа погруженные, овальной формы с узкой щелью окруженные 4- 5 околоустьичными клетками. Волоски простые, одноклеточные, толстостенные, погруженные в эпидермис у основания волоска клетки приподнимающиеся.

На микропрепарате поперечного среза черешка листа проводящая система представлена тремя сосудистыми пучками концентрической формы. Центральный медиальный пучок больше по размеру двух других латеральных.

Стебель в поперечном сечение округлый формы. Покровная ткань -эпидермис с погруженными в него простыми волосками. Проводящая система не пучкового типа, флоэма и ксилема расположены сплошным кольцом.

На микропрепарате цветка, на верхушке чашелистиков, располагаются простые одноклеточные волоски одиночные или небольшими пучками. Поверхность чашелистиков покрыта многочисленными друзами оксалата кальция.

Рисунок - Манжетки обыкновенной трава свежая

1 - фрагмент эпидермиса верхней стороны листа с устьицами клетки эпидермиса многоугольные со слабоизвилистыми стенками (400*);

2 -фрагмент эпидермисанижней стороны листа с друзами оксалата кальция и клетками эпидермиса с утолщенными, сильно извилистыми стенками (400*);

3 - трихомы простые одноклеточные, основание которых погружено в эпидермис листа (400*);

4 - фрагмент поперечного среза черешка листа с тремя сосудистыми пучками (100*);

5- фрагмент поперечного среза стебля, где флоэма и ксилема расположены сплошным кольцом (400*);

6 - фрагмент эпидермиса стебля с простыми одноклеточными волосками (100*);

7 - фрагмент чашелистика с простыми одноклеточными волосками, которые располагаются одиночно или небольшими пучками (100*);

8 - фрагмент чашелистика цветка с многочисленными друзами оксалата кальция (100*).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) рутина. Около 0,001г СО рутина растворяют в 10 мл спирта этилового 95% и перемешивают. Срок годности раствора 3 месяца, при хранении в хорошо укупоренной упаковке в прохладном защищенном от света месте.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 20мкл испытуемого сока (см. раздел «Количественное определение» получение сока) и 5мкл раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 60 минут смесью растворителей бутиловый спирт - уксусная кислота ледяная -вода (4:1:2), хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 - 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ - свете при длине волны 254 и 365 нм. На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорбции желто - коричневого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора в УФ - свете при X 365 нм должны обнаруживаться 5 зон адсорбции: два ярко желтых пятна флюоресцирующих в УФ, выше них -2 желто-зеленых пятна, и пятно коричневого цвета на уровне пятна СО рутина.

На хроматограмме испытуемого раствора в УФ - свете при X 254 нм должны обнаруживаться 5 зон адсорбции: желтое пятно, ярко желтое флюоресцирующее, два желтых пятна, и коричневое пятно на уровне СО рутина.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье - не менее 55% и не более 85% (в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности в лекарственном растительном сырье и лекарственны растительных препаратах»).

Зола общая. Цельное сырье - не более 4%

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье - не

более 1%.

Содержание сока. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье» (способ 1) - не менее - 24%.

Содержание сухого остатка. В соответствии с требованиями ОФС «Потеря в массе при высушивании» - не менее 5%.

Посторонние примеси

Части сырья, изменившие окраску. Цельное сырье - не более 5%. Органическая примесь. Цельное сырье - не более 2%.