Физиологические особенности иммунного статуса и микрофлоры влагалища и кишечника в норме и при урогенитальной инфекции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Ищенко, Ольга Юрьевна

• Ищенко, Ольга Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ищенко, Ольга Юрьевна

введение;.

Глава1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Количественный состав и физиологическая роль влагалищного микробиоценоза.

1.2 Количественный состав и физиологическая роль нормальной микрофлоры кишечника.

1.3 Гуморальные и клеточные иммунные реакции организма.

1.4 Понятие об урогенитальной инфекции как о причине ухудшения репродуктивного здоровья женщин.

1.5 Биологические препараты как одно из направлений профилактики и коррекции физиологических функций микрофлоры кишечника и влагалища.

Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИ.

2.1 Материалы исследований.

2.2 Методы исследований.

2.2.1 Микроскопические методы исследования биологического материала из женских половых органов.

2.2.2 Методы оценки качественных и количественных показателей микрофлоры влагалища и кишечника.

2.2.3 Методы исследования различных звеньев иммунитета.

2.3 Техника безопасности.

2.4 Статистическая обработка результатов.

Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Оценка показателей микрофлоры влагалища, кишечника и параметров иммунного статуса здоровых женщин.

3.2. Оценка показателей микрофлоры влагалища, кишечника и параметров иммунного статуса женщин группы риска.

3.3. Оценка показателей микрофлоры влагалища, кишечника и параметров иммунного статуса у женщин с урогенитальной инфекцией.

3.4 Немедикаментозная профилактическая коррекция изменений микрофлоры влагалища и кишечника у обследуемых женщин.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиологические особенности иммунного статуса и микрофлоры влагалища и кишечника в норме и при урогенитальной инфекции»

Оценка физиологического состояния иммунного статуса, микробиоценоза кишечника и влагалища у здоровых женщин представляет собой важный аспект исследований, так как является отправным моментом для сравнения данных показателей при патологии.

На современном этапе микрофлору кожи, желудочно-кишечной, урогенитальной систем рассматривают как один из основных факторов, обеспечивающих стабильность гомеостаза организма [51].

Нарушения качественного и/или количественного содержания представителей нормальной микрофлоры организма, происходящие под воздействием различных факторов, влекут за собой адаптивные или необратимые изменения в соответствующем микроэкологическом звене, именуемые термином "дисбиоз" или "дисбактериоз".

Система антиинфекционной устойчивости (резистентности) организма обязательно включает не только микробный, но и иммунный статус. Однако до сих пор вопрос о состоянии этих систем, как у здоровых женщин, так и у пациентов с воспалительными заболеваниями генитального тракта, несмотря на большое количество исследований, остается не решенным [3,93,156,168].

Широкое распростронение дисбиотических состояний и воспалительных заболеваний репродуктивного тракта и дисбиозов кишечника, вызываемых условно - патогенной микрофлорой делает необходимым контроль за состоянием нормальной микрофлоры и коррекцию нарушенного микробиоценоза как важный этап профилактики воспалительных заболеваний генитального тракта.

В связи с этим оценка физиологического состояния иммунного статуса, микробиоценоза влагалища и толстого кишечника у здоровых женщин представляет важный и актуальный аспект исследований.

Цель и задачи исследования

Целью исследования явилось изучение физиологических особенностей состояния иммунного статуса и микроэкологии (влагалища, толстого кишечника) у здоровых женщин, женщин группы риска и женщин с воспалительными заболеваниями генитального тракта. Обоснование комплексной немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений в данных системах гомеостаза.

Исходя из цели, данной работы, нами были определены следующие задачи исследования:

1. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса здоровых женщин;

2. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин составивших группу риска;

3. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин с урогенитальными инфекциями;

4. дать оценку эффективности немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений у женщин группы риска.

Научная новизна работы

Впервые дана комплексная оценка особенностей иммунологических (иммунный статус) и микробиологических показателей (влагалища и кишечника) у здоровых женщин.

Произведен сочетанный анализ иммунологических и микробиологических показателей (влагалища и кишечника) у женщин имеющих специфические условия труда (группа риска).

Доказана и научно обоснована необходимость немедикаментозной профилактики микробиоценоза влагалища и кишечника у женщин имеющих специфические условия труда (группа риска).

Произведена оценка и сравнение этих показателей у здоровых женщин и женщин с урогенитальной инфекцией. Показаны изменения микробиологической и иммунологической защиты организма у женщин с урогенитальной инфекцией.

На основании определения комплекса бактериологических исследований доказана необходимость оценки состояния микробиологических показателей (влагалища и кишечника) у женщин с урогенитальной инфекцией.

На основании проведенных микробиологических исследований, впервые установлена прямая положительная корреляционная связь между дисбалансом микрофлоры влагалища и кишечника у женщин группы риска и женщин с урогенитальной инфекцией.

Теоретическая и практическая значимость работы

Результаты проведенных исследований позволяют производить сравнительную оценку состояния иммунного и микробного статуса организма здоровых женщин и женщин, страдающих урогенитальной инфекцией.

Результаты исследований являются обоснованием для немедикаментозной коррекции микробиологических и иммунных расстройств у женщин группы риска.

Результаты работы могут быть использованы практическими врачами для применеия коррекции микробиологических и иммунологических расстройств женщин группы риска.

Полученные данные могут представлять интерес для научно-практических учреждений, занимающихся проблемами профилактики и коррекции функциональных растройств организма в целом.

Данные исследований могут быть использованы в образовательных программах и курсах при чтении лекций по физиологии для студентов и врачей на биологических и медицинских кафедрах

Подготовлены материалы для широкого круга слушателей (студентов, населения).

Апробация диссертационного материала

Материалы исследования доложены на семинарах кафедры нутрициологии РУДН (2001-2004г.); научно-практической конференции "Современные аспекты интегральной медицины", г.Судак (2002г.); научно-практической конференции "Фитотерапия и курортология", г.Симферополь (2002г.); семинаре "Вопросы инфектологии в акушерстве и гинекологии", г.Севастополь (2002г.); семинаре "Репродуктивное здоровье женщин", г.Севастополь (2002г.); научно-практической конференции "Здоровое питание населения России", г.Москва (2003г.); 5-ом Славяно-Балтийском национальном форуме, г.Санкт-Петербург (2003г.); научно-практической конференции "Современные технологии фитонутрициологии в акушерстве,гинекологии и педиатрии", РУДН, г.Москва (2003г.). 1-ой международной конференции "Современные аспекты реабилитации в медицине", Ереван (2003г.), журнале "Вопросы питания"(2005г.).

Публикации: по материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 121 страницах компьютерного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания методов исследования, результатов работы, заключения и выводов, списка литературы. Изложение материала проиллюстрировано 18 таблицами, 5 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Ищенко, Ольга Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Сравнительный анализ физиологических особенностей иммунитета и микробиоценоза влагалища и кишечника выявил различия в этих системах у здоровых женщин, женщин группы риска и женщин с урогенитальной инфекцией.

2. Показана зависимость состава микрофлоры влагалища от состава микрофлоры кишечника. Установлено, что у практически здоровых женщин состояние нормального биоценоза влагалища наблюдается в 51,1% случаев, биоценоз промежуточного типа (который также считается нормой) у 48,9%. Показано, что в составе биоценоза влагалища доминируют лактобактерии в 88,8% случаев (7,2+0,14 lg КОЕ/мл) по сравнению с бифидобактериями, найденными у 50% женщин (5,6+0,11 lg КОЕ/мл), патогенные бактерии по количеству не превышали предельно допустимых норм.

3. Установлено, что в кишечнике здоровых женщин содержание бифидобактерий преобладало над лактобациллами и выявлялось у 100% женщин (количество бифидобактерий 9,07+0,24 lg КОЕ/г, количество лактобацилл 7,9+0,22 lg КОЕ/г). Уровень условно патогенной микрофлоры соответствовал нормативным показателям. По сравнению с уровнями промышленных регионов и урбанизированных городов количественные величины лакто- и бифидобактерий у женщин были выше.

4. Исследование биоценоза влагалища женщин группы риска выявило высокую частоту (90%) выделения лактобактерий, среднее количество лактобактерий составило 6,14+0,17 lg КОЕ/мл, бифидобактерии обнаруживались у 40% женщин в количестве 4,24+0,18 lg КОЕ/мл, что достоверно ниже, чем у практически здоровых женщин основной группы (р<0,05). Имелась тенденция к повышению условно патогенных бактерий.

5. Показаны заметные изменения биоценоза кишечника женщин группы риска по сравнению с группой здоровых женщин: невысокая численность лактобактерий до 7,06+0,12 lg КОЕ/г, снижение уровня бифидобактерий (8,03+0,20 lg КОЕ/г) и стрептококков до 3,33+0,8 lg КОЕ/г (р<0,01), повышение концентрации энтерококков до 5,20+0,14 lg КОЕ/г (р<0,05), увеличение грамположительных спорообразующих палочек рода Clostridium (5,51+0,12 lg КОЕ/г, р<0,05) и грибов рода Candida 3,26±0,16 lg КОЕ/г.

6. Найдена прямая положительная корреляция между нарушениями в микробиоценозах влагалища и кишечника у женщин группы риска (коэффициент корреляции 0,8, р< 0,01).

7. Установлено, что в лейкограмме здоровых женщин содержание лимфоцитов, лейкоцитов, нейтрофилов, моноцитов эозинофилов соответствовали норме. Показано, что иммунорегуляторный индекс здоровых женщин соответствовал 1,30+0,09, уровни субпопуляций лимфоцитов (CD4+, CD8+) соответствовали также варианту нормы. Выяснено состояние гуморального звена иммунитета у здоровых женщин: IgA 1,65+0а1,6г/л, IgM 1,08±0,13г/л, IgG 12,2±0,41г/л. Исследование аналогичных показателей у женщин группы риска не выявило заметных отклонений в гуморальном и клеточном звеньях иммунитета от нормы.

8. Установлены сдвиги иммунного статуса (гуморального и клеточного) у женщин с урогенитальной инфекцией по сравнению с теми же показателями женщин группы риска. Выявлены изменения микрофлоры влагалища и кишечникам в сторону дисбиоза при УГИ, так нормоценоз наблюдался у 25,6% женщин, промежуточный тип микробиоценоза - у 26,7% женщин, дисбиоз влагалища - у 32,2% женщин. Воспалительные проявления со стороны влагалища в форме вагинита были выявлены у 15,5% обследованных женщин.

9. Показана целесообразность использования препарата "Коллоидное серебро" "Флоралдофилус" для коррекции микрофлоры влагалища и кишечника женщин группы риска, поскольку данные системы в первую очередь подвержены влиянию неблагоприятных факторов (профессиональных, стрессовых, экологических и т.д.). Установлено увеличение количества бифидобактерий в кишечнике с 8,03±0,20 lg КОЕ/г до 9,82±0,12 lg КОЕ/г, лактобактерий с 7,06±0,12 lg КОЭ/г до 8,06±0,22 lg КОЕ /г, количество эшерихий, энтерококков, стафилококков, клостридий. Дрожжеподобных грибов p.Candida значительно снижалось, т.е. микрофлора кишечника в группе риска характеризовалась как нормальная.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В заключении необходимо отметить важность проведения исследования физиологического состояния микробиоценоза влагалища, кишечника и иммунного статуса у здоровых женщин в условиях определенного региона с целью определения варианта нормативных показателей.

Целью исследования явилось изучение физиологических особенностей состояния иммунного статуса и микроэкологии (влагалища, толстого кишечника) у здоровых женщин, женщин группы риска и женщин с воспалительными заболеваниями генитального тракта, для определения варианта нормативных показателей. Обоснование комплексной немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений в данных системах гомеостаза.

В задачи данного исследования входило:

1. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса здоровых женщин;

2. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин составивших группу риска;

3. изучить особенности состояния микрофлоры влагалища, микрофлоры кишечника и параметров иммунного статуса у женщин с урогенитальными инфекциями;

4. дать оценку эффективности немедикаментозной коррекции, выявленных отклонений у женщин группы риска.

Для решения поставленных задач были применены адекватные методы исследования, состоящие из микроскопических и микробиологических исследований микрофлоры влагалища; микробиологических методов исследования микрофлоры кишечника; методов исследования параметров иммунологического статуса; комплексный анализ на наличие возбудителя Chl.Trachomatis в организме женщин, состоящий из иммунофлюоресцентного, иммуноферментного и цитологического исследований.

В ходе исследования были получены результаты, которые будут способствовать профилактике патологических изменений в организме женщин.

Под наблюдением находилось 210 женщин, из них 90 человек - здоровые женщины, они составили основную группу, 30 человек - женщины группы риска и 90 человек — женщины, составившие группу с УГИ (урогенитальные инфекции).

Наши исследования показали, что биоценоз влагалища у здоровых небеременных женщин репродуктивного возраста (основная группа), характеризовавшийся доминированием лактобацилл, отсутствием грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов, наличием единичных лейкоцитов и «чистых» эпителиальных клеток, наблюдали в 51,1% Подобная картина отражала типичное состояние нормального биотопа влагалища.

Биоценоза влагалища, характеризовавшийся умеренным или незначительным количеством лактобацилл, наличием грамположительных кокков, грамотрицательных палочек; с наличием незначительной лейкоцитарной реакцией, обнаружением моноцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, наблюдали в 48,9% случаев и определили как промежуточный тип, который является пограничным типом и часто наблюдается у здоровых женщин, редко сопровождаясь субъективными жалобами и клиническими проявлениями.

При исследовании видового состава влагалищной микрофлоры у женщин основной группы выяснено, что в микрофлоре доминируют молочнокислые бактерии и главным образом - лактобациллы у 80 из 90 обследованных (88,8%) и бифидобактерии - у 45 (50%), которые также относятся к представителям нормального микробиоценоза влагалища или рассматриваются как компенсирующие микроорганизмы при снижении уровня лактофлоры. Концентрации молочнокислых бактерий, в сравнении с литературными данными, были выше и составили соответственно 7,2*0,14 lg КОЕ/мл и 5,6*0,11 lg КОЕ/мл.

Концентрации высеваемых условнопатогенных микроорганизмов достоверно были ниже показателей приводимых в литературе. Так из факультативных анаэробов и аэробов чаще всего обнаруживались стафилококки (30%) в концентрации 2,8*0,23 lg КОЕ/мл, стрептококки высевались у 21,6% в концентрации 2,38*0,28 lg КОЕ/мл. Также у женщин наиболее часто во влагалище обнаруживались непатогенные коринебактерии (47,7%) в концентрации 2,65*0,33 lg КОЕ/мл. Из грамотрицательных бактерий были высеяны эшерихии - у 8 обследованных (8,8%) на уровне 2,72*0,25 lg КОЕ/мл. Сравнительно редко (у 16,6% обследованных) обнаруживали грибы p.Candida, в концентрации 2,69*0,16 lg КОЕ/мл

Гарднереллы (G. Vaginalis) у здоровых женщин не обнаружены, однако в литературе имеются данные, что у 6-60% женщин гарднереллы могут обнаруживаться в количествах <4 lg КОЕ/мл [50,127].

Результаты, полученные нами в этой группе, свидетельствуют, что нормальная микрофлора влагалища представлена различными анаэробными и аэробными видами микроорганизмов, среди которых преобладают анаэробные виды лактобацилл. У некоторой части женщин встречаются бифидобактерии, кишечная палочка, стафилококки и другие виды, составляющие нормальный биоценоз влагалища, обеспечивающий, прежде всего антагонистическую функцию против чужеродных бактерий.

Сравнительный анализ показателей микроценоза влагалища здоровых женщин и данными, приведенными в литературе

1,8,91618,34,44,52,61,166,176182] , выявил некоторые особенности, которые выражались в увеличении концентрации лактобактерий, снижении концентрации стафилококков, коринебактерий и отсутсвии гарднерелл.

На количественные показатели молочнокислых бактерий в микрофлоре кишечника в значительной степени влияет характер используемой диеты. Изучение диет обследуемых женщин показало доминирование в рационе питания кисломолочных и растительных продуктов над мясными. Так, при исследовании микрофлоры кишечника женщин основной группы среди индигенной флоры бифидобактерии преобладали над лактобациллами и выявлялись у 100% женщин (в количествах соответственно 9,07*0,24 lgKOE/r и 7,9*0,22 lgKOE/r). Данные показатели не противоречили нормам, приведенным в литературе [19,38,173], однако, были достоверно выше по сравнению с уровнями данных микроорганизмов у жительниц промышленных регионов и крупных урбанизированных городов.

Таким образом, достаточно высокие уровни молочнокислых бактерий можно обьяснить с одной стороны особенностями питания женщин в условиях региона, с другой - более благоприятными экологическими условиями данного региона.

Дальнейшее изучение микрофлоры кишечника также демонстрирует влияние кисломолочно-растительного рациона питания, выражающееся в сниженой концентрации клостридий по сравнению с литературными данными [38,64] (соответственно 4,6*0,09 lgKOE/r, 6-7 lgKOE/r), хотя процент выявляемое™ составляет 30%, что выше данных приведенных в литературе, это не противоречит тому, что повышение численности клостридий происходит при несбалансированной диете с преобладанием в пищевом рационе мясной пищи. Уровни грамположительных кокков - стрептококков и стафилококков, входящих в состав факультативной микрофлоры, соответствовали нормальным показателям приводимым в литературе. Обнаружение дрожжеподобных грибов p.Candida в составе микрофлоры кишечника обследуемых женщин в 48,8% соответствовало уровню 2,72*0,11 lgKOE/r, что так же является вариантом нормы, хотя процент выявляемоси был достоверно выше данных приведенных в литературе [38,39,43,60].

Показатели лейкоформулы соответствовали значениям, приводимым в литературе: леикоциты 6,01*0,18 '10 \ лимфоциты 1,63*0,23 "10 7л (30,33* 4,7%), нейтрофилов 60,3*4,9%, моноциты 5,57* 2,3%, эозинофилы 3,4* 0,85%.

Процент фагоцитирующих нейтрофилов составил 77,13*3,4%, фагоцитарный индекс (ФИп) - среднее число фагоцитированных бактерий в одном нейтрофиле - был 6,7*0,72. Таким образом, процент нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз, способность нейтрофилов к поглощению и перевариванию чужеродных веществ явились выражением полноценной защитной реакции организма со стороны фагоцитарного звена.

При изучении клеточного и гуморального звеньев иммунитета средние уровни данных параметров не выходили за границы рекомендуемых пределов приведенных в литературе [115,121], хотя большинство показателей были приближены к нижним значениям данных пределов.

Общее содержание Т-лимфоцитов (CD3+) соответствовало - 1,29+0,14"10 7л и 56,2+3,42%; субпопуляции Т-лимфоцитов - Т-хелперы (CD4+) 0,65+0,1*10 7л и 35,2+2,6%; Т-супрессоры (CD8+) - 0,58±0,09 т07л, 28,0±2,77%; В-лимфоциты (CD22+) - 0,20+0,5'109/л, 12,65+1,81%. Уровни сывороточных имуноглобулинов, характеризующих функциональную активность В-лимфоцитов составили: JgA 1,65+0,16 г/л> JgM 1,08+0,13 г/л , JgG 12,2+0,41 г/л. Помимо определения численности популяций и субпопуляций, важное значение придается вычислению показателя CD4+/ CD8+ - так называемого хелперно-супрессорного отношения, в группе здоровых женщин данный показатель соответствовал 1,30+0,09.

У женщин группы риска, по результататам микроскопических исследований, ключевые клетки не обнаружены. Подсчет в мазках лейкоцитов показал: лейкорея (количество лейкоцитов в содержимом влагалища от 10 до 100) установлена у 10 (38,6%) женщин группы риска и у 67 (81,1%) женщин группы с УГИ. У женщин группы риска, как во влажных мазках, так и в препаратах, окрашенных по Граму во всех наблюдениях (100%) обнаруживаются эпителиальные клетки, характерные для конкретной фазы менструального цикла, и длинные прямые палочки, по своему морфологическому строению напоминающие типичные формы лактобактерий (93,4%).

У женщин группы риска истинный нормоценоз отмечался у 26,6%, еще 46,6% женщин имели незначительные сдвиги в составе микрофлоры влагалища, не затрагивающие основных ее представителей (лактобацилл) и не сопровождающиеся клиническими симптомами патологического процесса, что позволило определить данное состояние как промежуточный тип вагинального биоценоза и отнести его к варианту нормы. У 26,7% обследованных женщин обнаружен дисбиоз влагалища, характерным признаком которого было исчезновение или резкое снижение количественного содержания лактобацилл в содержимом влагалища и отсутствие симптомов воспалительного процесса.

Таким образом, у 73,3% женщин группы риска наблюдали нормальную картину влагалищного микробиоценоза. Однако выявленный дисбиоз у 26,7% указывает на то, что практически здоровые женщины должны проходить диспансерное обследование у гинеколога не реже 1 раза в полгода, для возможной наиболее ранней диагностики и выявления различных гинекологических заболеваний.

При более глубоком изучении вагинального микроценоза установлено, что у женщин группы риска наблюдается высокая частота (90%) выделения лактобактерий - микроорганизмов доминирующих в вагинальной микрофлоре. Среднее количество лактобактерий составило 6,14+0,17 lg КОЕ/мл, что было достоверно ниже чем в основной группе (р<0,05), у 10% женщин группы риска количество лактобактерий было менее 5 lg КОЕ/мл. Бифидобактерии обнаруживались в 40% (до 4,24+0,18 lg КОЕ/мл), что было достоверно ниже чем у женщин основной группы (р<0,05). Стрептококки обнаружены у 23,3% женщин в концентрации 2,67+0,35 lg КОЕ/мл. У 26,7% обследованных женщин группы риска из содержимого влагалища были выделены стафилококки (до 3,40+0,4 lg КОЕ/мл), в 13,3% случаев обнаруживались в невысоких количествах (до 3,55+0,08 lg КОЕ/мл) коринеподобные микроорганизмы, энтерококки - 10% (до 2,33+0,62 lg КОЕ/мл), эшерихии в 10% (до 2,07+0,8 lg КОЕ/мл). Относительно часто обнаруживались дрожжеподобные грибы рода Candida (70%), в концентрации превышающую концентрацию у женщин основной группы (3,24+0,19 lg КОЕ/мл).

Таким образом, исследование влагалищного микробиоценоза у женщин группы риска показало доминирование нормальных уровней защитной флоры над условно-патогенными бактериями (хотя уровни защитной микрофлоры были достоверно ниже таковых в основной группе) и достоверное увеличение концентраций стафилококков, коринебактерий и грибов p.Candida.

При изучении микрофлоры кишечника установлено, что почти каждая вторая (49,6%) обследованная пациентка имела изменения кишечного биоценоза.

Изучение микробиоценоза толстого кишечника женщин группы риска выявило снижение уровня защитной флоры по бифидобактериям (8,03+0,20 lg КОЕ/г) у 100% обследуемых.

Для лактобактерий была характерна высокая частота выявления (100%), однако численность их была не высокой (до 7,06+0,12 lg КОЕ/г lg). В 12,2% случаев в кишечнике женщин группы риска присутствовали в больших количествах (5,51+0,12 lgKOE/r) грамположительные спорообразующие палочки рода Clostridium. Увеличение концентрации бактерии рода Clostridium (р<0,05), по-видимому, связано со снижением концентрации молочнокислых бактерий. Дрожжеподобные грибы рода Candida в данной группе встречались в 100% случаев (3,26+0,16 КОЕ/г). Обнаружение у всех женщин увеличенного роста грибов рода Candida так же свидетельствует о нарушениях межвидовых соотношений микроорганизмов в кишечнике женщин группы риска.

В результате проведенного микробиологического скрининга установлено, что у 26,7% женщин наблюдались отклонения от нормального состава микрофлоры влагалища, а у 49,6% диагностированы изменения кишечного биоценоза. При этом 26,7% женщин имели сочетанные изменения микрофлоры влагалища и кишечника. Эубиотическое состояние соответствующих микроценозов обнаружено только 50,4% из общего числа обследованных женщин группы риска.

Анализ результатов изучения микробиоценоза кишечника и влагалища у одних и тех же обследованных группы риска показал, что существует корреляционная зависимость между изменениями микробных популяций в этих экологических нишах (коэффициент корреляции 0,8, р<0,01).

Таким образом, результаты, полученные в проведенных исследованиях, позволяют сделать следующие выводы:

- у женщин группы риска наблюдаются изменения со стороны микробиоценоза влагалища и кишечника;

- имеется прямая корреляция между эубиозом влагалища и желудочно-кишечного тракта. Микрофлора кишечника является более чувствительной и динамичной экологически чистой по сравнению с микрофлорой влагалища, она раньше реагирует на неблагоприятные факторы, воздействующие на организм женщины.

Вследствие неоднородности полученных результатов возникла необходимость выделения факторов, оказывающих наибольшее влияние на состояние микробной системы у женщин группы риска.

Учитывая, что группу риска составили женщины, работающие в инфекционной больнице, то дисбактериальное изменение микрофлоры в этой группе, по-видимому, можно объяснить с точки зрения профессиональной вредности (работа с антибиотиками, хлорной известью и другими препаратами, оказывающими угнетающее действие на микрофлору).

Изучение иммунологических параметров у женщин группы риска не выявило каких-либо существенных особенностей от соответствующих показателей в основной группе.

Так в лейкограмме не было достоверных различий между показателями содержания лейкоцитов 5,77*0,24 109/л, абсолютного количества лимфоцитов 1,78*0,1109/л и эозинофилов 3,23-0,17%. В отношении относительного количества лимфоцитов 40,8*3,7% можно говорить о достоверном увеличении клеток у женщин группы риска (р<0,01). Относительное и абсолютное содержание нейтрофилов (2,18*0,9 10 9/л и 59,7*5,2%) имело тенденцию к снижению по сравнению с показателями у женщин основной группы. Процентное содержание моноцитов было достоверно ниже (3,47 * 0,25%), чем в основной группе (р<0,05). Изучение иммунологических параметров у женщин группы риска не выявило каких-либо существенных особенностей от соответствующих показателей в основной группе. Абсолютная концентрация Т-лимфоцитов (CD3+) не имела достоверных различий в обеих группах. Относительное содержание этих клеток имело тенденцию к незначительному снижению в группе риска. Содержание CD4+ соответствовало уровням в основной группе, что свидетельствует о нормальной хелперной активности Т-лимфоцитов. Уровень супрессорных клеток (CD8+) в группе риска имел тенденцию к снижению, но существенно не отличается от показателей основной группы (0,51*0,13 109/л и 0,58*0,08 109/л, соответственно). Соотношение концентраций CD4+ и CD8+, которое характеризует иммунорегуляторный индекс (ИРИ) было практически одинаково в обеих группах (1,30*0,09 и 1,31*0,04 соответственно). Абсолютное и относительное содержание В - лимфоцитов (CD22+) не имело значимых различий, по сравнению с показателями в основной группе. Содержание сывороточного JgA в группе риска было увеличено до 2,1*0,07 г/л (в основной группе 1,65*0,16 г/л), в то же время показатели содержали JgG и JgM в группе риска не имели существенных различий с показателями в основной группе.

Таким образом, показатели клеточного и гуморального иммунитета у женщин составивших группу риска существенно не отличались от показателей основной группы. Однако имелись особенности, которые нельзя отнести к патологическим изменениям, поскольку они находились в пределах допустимых норм и не всегда были статистически достоверными.

Полученные результаты микробиологических и иммунологических показателей у женщин группы риска сравнивали с результатами обследований женщин с урогенитальной инфекцией (группа с УГИ), с целью отграничения норм от патологии.

Индикацию C.trachomatis, как возбудителя и причины урогенитальной инфекции у обследуемых женщин мы проводили одновременно цитологическим, иммуноферментным, иммунофлюоресцентным методами.

Диагноз хламидийной инфекции устанавливали, на основании клинической картины заболевания и данных лабораторных методов исследований, врачи женских консультаций (Огнева С.И., Булатова Э.А., Виноградова Н.А.).

Стабильное обнаружение нейтрофилов во влагалище женщин группы с УГИ показывает, что инфекция является воспалительным процессом. Лейкорея может быть объяснена усиленной транссудацией лейкоцитов через дистрофически измененную слизистую оболочку влагалища. У женщин группы с УГИ также в 100% случаев в мазках обнаруживались эпителиальные клетки, соответствующие фазе менструального цикла, но лактобактерии наблюдали только в 59 (65,6%) случаях. У14(15,5%) пациенток в группе женщин с УГИ были обнаружены ключевые клетки.

У обследуемых женщин группы с УГИ нормоценоз влагалища обнаружен у 25,6%, промежуточный тип у 26,7% незначительное повышение количества лейкоцитов (10-30 в поле зрения). У 32,2% обнаружен дисбиоз влагалища. Следует отметить, что у 15,5% женщин с вагинитом бактериоскопическим методом регистрировали сплошное поле зрение лейкоцитов, значительный дефицит эпителиальных клеток и бактерий.

У 3 (3,3%) женщин обнаружены трихомонады, дрожжеподобные грибы выявлены у 17 (18,8%) пациенток

Полученные данные говорят о том, что у женщин с УГИ (в данном случае хламидийная инфекция) может наблюдаться нормальный (физиологический) микробиоценоз влагалища.

Сравнительный анализ вагинальной микрофлоры в группе женщин с УГИ показал наличие нарушений в её составе по сравнению с данными показателями в группе риска.

Лактобактерии выявлялись только в 50% случаев, а их концентрация составила лишь 4,6+0,19 lg КОЕ/мл исследуемого материала (р<0,05). Бифидобактерии выявлялись у 21,1% женщин, но в незначительных количествах (2,24+0,14 lg КОЕ/мл) (р<0,05). В то же время повышались количество и частота выявления бактерий, относящихся к категории условно-патогенных микроорганизмов. У 21,1% значительно увеличивалось количество энтерококков до 4,16+0,23 lg КОЕ/мл (р<0,05), у 26,7% высевались коринебактерии. Выявлялись, характерные для бактериальных вагинозов, грамотрицательные не спорообразующих анаэробные бактерии - гарднереллы (у 15,5%). Грибы рода Candida выявлялись у 63,3 % женщин в концентрациях достоверно превышающие таковые в группе риска ( соответственно 4,6+0,13 lg КОЕ/мл и 3,2410,19 lg КОЕ/мл) (р<0,05).

Анализ микрофлоры репродуктивного тракта женщин группы с УГИ показал, что патологический материал у 25 (27,7%) женщин наряду с хламидиями включал одного клинически значимого представителя условно-патогенной микрофлоры. У 64 (71,1%) на фоне хламидийной инфекции выявлялось более 2 видов условно-патогенных возбудителей, обычно присутствующей во влагалище здоровых женщин. В норме их концентрация очень не велика, а вирулентность низкая. В связи с этим для проявления их патогенных свойств необходимы высокие концентрации, которые обычно превышают Ю4КОЕ на 1мл влагалищного отделяемого.

У 14(15,5%) женщин микробные ассоциации кроме хламидий включали G.Vaginalis, частота выделения генитальных микоплазм составила 7,7%. У женщин группы риска микоплазмы не обнаружены. Нами выделялись два вида генитальных микоплазм: Mycoplasma hominis и Ureaplasma urealyticum.

Таким образом, микроэкология репродуктивного тракта при урогенитальных инфекциях в отличие от здоровых женщин и женщин, составивших группу риска, характеризовалась снижением обсемененности влагалища лактобациллами — основными представителями нормальной микрофлоры — и, как следствие, снижением колонизационной резистентности. В результате увеличивалось количество условно-патогенных бактерий. Данные наблюдения совпадают с исследованиями других авторов, освещенными в литературе. Полученные результаты указывают на целесообразность и необходимость коррекции дисбиотических нарушений урогенитальной микрофлоры при инфекции.

При определении содержания представителей эубиоза кишечника установлены как количественные, так и качественные изменения состава кишечной микрофлоры у обследуемых женщин.

Анализируя состояние микробиоценоза кишечника женщин группы с УГИ было выявлено выраженное снижение уровня защитной флоры по бифидо-у

100% и лактобактериям у 67,7% женщин (соответственно до 7,10*0,09 lg КОЕ\г и до 5,52*0,11 lg КОЕ/г, р<0,01), с одной стороны, и повышение концентрации условно патогенных бактерй: энтерококков у 10% женщин (до 8,11*0,06 lg КОЕ/г), стафилококков у 100% (4,46*0,14 lg КОЕ/г) (р<0,01), клостридий у 77,8% (до 6,25*0,41 lg КОЕ/г), грибов рода Candida у 46,7% (до 4,05*0,15 lg КОЕ/г) - с другой.

Проведенные исследования показали, что в лейкограмме обследуемых женщин обнаружены различия в абсолютном количестве лимфоцитов (группа риска - 1,78*0,1г/л, группа с УГИ - 2,28*0,17г/л), нейтрофилов (соответственно 2,18*0,9 и 3,55*0,31%, р<0,05) и эозинофилов (соответственно 2,23*0,17%, 4,51*0,13%, р<0,05).

Процент нейтрофилов, вступивших в фагоцитоз, достоверно был ниже, чем в группе риска (62,01*1,32 и 79,86*2,9 соответственно) (р<0,01). При анализе фагоцитарного числа, выяснилось, что оно превышало таковое в группе риска (10,8*0,46 и 7,61*0,65 соответственно) (р<0,01). Сниженная способность нейтрофилов к завершению фагоцитоза демонстрировалась индексом бактерицидности, который в основной группе составлял лишь 69,51*1,06%, а в группе риска - 90,9*6,65% (р<0,01).

В группе с УГИ имелась тенденция к снижению абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов (CD3+). Содержание CD4+, также было сниженным, что свидетельствует о снижении хелперной активности Т-лимфоцитов. Абсолютный уровень супрессорных клеток (CD8+) в группе с УГИ был снижен, но существенно не отличается от показателя группы риска (0,49*0,18 109/л и 0,51*0,13 109/л, соответственно). Иммунорегуляторный индекс (ИРИ) был снижен по сравнению с данными показателями в группе риска (1,01*0,1 и 1,31*0,04. соответственно). Абсолютное и относительное содержание В -лимфоцитов (CD22+) не имело значимых различий, по сравнению с показателями в обследуемых группах. Содержание сывороточного

JgA в группе с УГИ было снижено 1,55*0,13 г/л (в группе риска 2,1 *0,07 г/л), в то же время показатели содержали JgG в группе с УГИ были выше чем в группе риска (14,2*0,37 г/л и 12,2*1,58 г/л соответственно), уровень JgM так же имел тенденцию к повышению 1,33*0,12 г/л (в группе риска 1,18 *0,2 Г/Л).

При определении содержания представителей эубиоза кишечника установлены как количественные, так и качественные изменения состава кишечной микрофлоры у обследуемых женщин.

Данные изменения в микроэкологии репродуктивного тракта у женщин с урогенитальной инфекцией, вероятно, изначально являются предрасполагающим фактором, как для размножения патогенной микрофлоры, так и для проникновения и размножения возбудителя Chi. trachomatis в организм женщины.

Таким образом, микрофлора кишечника является более чувствительной и динамичной по сравнению с микрофлорой влагалища, она раньше реагирует на неблагоприятные факторы, воздействующие на организм женщины.

Дабы предотвратить возникновение инфекционного процесса, связанного с нарушениями в данных системах гомеостаза у практически здоровых женщин группы риска необходимо проводить профиллактическую коррекцию измененных параметров микрофлоры влагалища и кишечника.

Вышеизложенное определило актуальность поиска нетоксичных, «природных», препаратов для коррекции дисбиотических нарушений микрофлоры влагалища и кишечника и восстановление измененных параметров иммунного ответа у женщин группы риска, т.е. использование немедикаментозных методов.

С этой целью, нами в совместной работе с кафедрой Клинической нутрициологии Российского Университета Дружбы Народов и врачами женских консультаций Огневой С.И., Булатовой Э.А., Виноградовой Н.А., был использован двухэтапный метод коррекции, основным принципом которого является создание оптимальных физиологических условий восстановления микрофлоры влагалища, кишечника и иммунитета.

С этой целью были использованы препараты "Коллоидное серебро", "Флоралдофилус", изготовленные по рецептуре кафедры Клинической нутрициологии Российского Университета Дружбы народов, фирмой "Альтера-Холдинг" (Россия) (per. № 5.10/28275 от 25.12.2001 и № 5.08.07/2842 от 17.05.2001, выданные МОЗ).

Пациентки принимали "Коллоидное серебро" как бактерицидное средство по одной чайной ложке один раз в день во время еды, разведенное в воде или соке.

Второй этап предусматривал использование бактерийного биологического препарата для коррекции вагинальной и кишечной микрофлоры. В данной работе мы применяли капсулированный препарат "Флоралдофилус" по 1 капсуле 2 раза в день, в течение месяца.

После проведенной коррекции было проведено повторное лабораторное обследование. Обследование проводили по критериям, которые имели отклонения. В микробиоценозе влагалища до профилактической коррекции у 70% женщин группы риска были обнаружены повышенные концентрации грибов p. Candida 3,24±0,19 lg КОЕ/мл, в повторном исследовании уровень данного показателя составил 2,10±0,14 lg КОЕ/мл (р<0,05). Увеличивалось количество лактобактерий до 6,9±0,2 lg КОЕ/мл (до коррекции 6,14±0,17 lg КОЕ/ мл ), снижались концентрации 2,7±0,26 lg КОЕ/мл коринебактерий (до коррекции 3,55*0,8 lg КОЕ/мл), стафилококков до 3,0±0,9 lg КОЕ/г(до коррекции 3,40*0,4 lg КОЕ/мл) ( рис. 1)

Применение препаратов "Коллоидное серебро", "Эхинацея " и "Флоралдофилус" позволило восстановить у женщин группы риска нормальный микробный статус кишечника.

Так, увеличивалось количество бифидобактерий (9,82±0,12 lg КОЕ/г, до коррекции 8,03±0,20 lg КОЕ/г) (р<0,01), лактобактерий (8,06±0,22 lg КОЕ/г, до коррекции 7,06±0,12 lg КОЕ/г). Количество стрептококков - увеличивалось; энтерококков наоборот, значительно уменьшалось после проведенной немедикаментозной коррекции. Снижалось количество дрожжеподобных грибов p.Candida до 2,37*0,18 КОЕ/г (до коррекции 3,26±0,16 lg КОЕ/г). В целом, после завершения приема препарата - синбиотика IV поколения -микрофлора кишечника в группе риска стала соответствовать уровням, принимаемым за норму (основная группа).

Полученные результаты позволяют сделать вывод о целесообразности проведения профилактической коррекции влагалищного и кишечнного биоценоза препаратами "Коллоидное серебро" и "Флоралдофилус" у практически здоровых женщин группы риска с целью предупреждения возникновения заболеваний, связанных с нарушениями в данных системах гомеостаза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ищенко, Ольга Юрьевна, 2005 год

1. Анкирская А.С., Муравьева В.В. Видовой состав и некоторые биологические свойства лактобацилл при различных состояниях микроэкологии влагалища //Акушерство и гинекология.-2000.-№3.-С.26-28.

2. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических. исследованиях.-Л.-1962.-130с.

3. Батыршина С.В. Патогенетические аспекты терапии женщин, больных урогенитальным хламидиозом //Российский журнал кожных и венер. болезней.-1998.-№1.С.58-62.

4. Башмакова М.А. и соавт. Актуальные микробиологические и клинические проблемы хламидийных инфекций.- М.Д990.-С.72-75.

5. Беляков Н. М. Иммунная система слизистых //Иммунология.-1997.-№4.-С.7-13.

6. Бенджамин Г. Популяный справочник естественного лечения. М.:"Педагогика-пресс".-1994.-С. 15-20.

7. Березняков И.Г. Резистентность к антибиотикам: причины, механизмы, пути преодоления //Клиническая антибиотикотерапия.-2001.-№4(12)-С. 18-22.

8. Берлев Н.В. и соавт. Особенности микробиоценоза влагалища у беременных с хроническими заболеваниями женских половых органов //Вестник Рос. ассоц. акуш.-гин.-1998.-№2.-С.88-92.

9. Бодяжина В.И. Хронические неспецифические воспалительные заболевания женских половых органов.-М.,1987.

10. Бондаренко В.М. и соавт. Иммуностимулирующее действие лактобактерий, используемых в качестве основы препаратов пробиотиков //Журнал микробиологии. 1998. -№5. С.107-112.

11. П.Буткова О.И. Эффективность применения препарата Echinacea compositum S у женщин с отягощенным акушерским анамнезом, с учетом иммунного статуса организма //Биологическая терапия. 2002. - №3. - С.26-31.

12. Бурова А.А. и соавт. Основные свойства возбудителя хламидиоза и его роль в развитии инфекций урогенитального тракта //Журнал микробиологии. -1999.-№4.-С. 107-111.

13. Бутов Ю.С. и соавт. Влияние ровамицина и циклоферона на течение урогенитального хламидиоза //Российский журнал кожных и венерических болезней.-1998.-№1.-С.53-56.

14. Бутов Ю.С. и соавт. Некоторые клинические и иммуннологические показатели у супружеских пар, страдающих хламидиозом //Российский журнал кожных и венерических болезней.-1998.-№4.-С.55-58.

15. Буторова Л.И., Каменин А. В. Возможности коррекции нарушения кишечного микробиоценоза лактолуозой //Российский журнал гастоэнтерологии, гепатологии, колопроктологии.-2001 .-№1 .-С.79-83.

16. Бухарин О.В. Коррекция дисбиоза рупродуктивного тракта женщин с помощью эстриол-содержащего препарата //Журнал микробиологии, эпидемиологии, иммуноллогии.-2000.-№2.-С. 100-102.

17. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина; Екатеринбург: УРО РАН, 1999.-365с.

18. Бухарин О.В. и соавт. Факторы персистенции микрофлоры при воспалительных заболеванях внутренних женских половых органов // Вестник Рос.ассоц. акуш.-гин.-1998.-№3.-С.62-65.

19. Василевская Л.С. Влияние характера питания и некоторых других факторов на внешнесекреторную функцию печени: автореф. Дис.канд. мед. наук.-М., 1968.-20 с.

20. Василенко В.В. Дисбактериоз — синдром раздраженного кишечника: эссе-анализ проблемы //Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии.-2000.-№6.-С. 10-13.

21. Ващенко С.Н., Дранник Т.Н. и соавт. Анализ клинико-иммунологических эффектов и обоснование целесообразности применения комплексной терапии убольных хроническим мочеполовым хламидиозом. /Лмунолопя та аллероголопя. -2003. -№2.-С.48 -51.

22. Венцивский Б.М. Аспекты амбулаторного лечения воспалений половых органов у женщин //Здоров'я Укрши.-2002.-№6.-С.25-26.

23. Верткин А.Л., Машарова А.А. Синдром раздраженного кишечника и кишечный дисбактериоз. Синонимы ли это? //Международный медицинский журнал.-2002.-№1.-С.35-39.

24. Воробьев А.А., Лыкова Е.А. Бактерии нормальной микрофлоры: биологические свойства и защитные функции //Журнал микробиологии.-1999,-№6.-С.102-105.

25. Герасимов Н.М. и соавт. Новая класификация хламидий и её значение для практики //ИППП. 2001.- №1.-С.14-18.

26. Глазкова Л.К., Герасимова Н.М. Современные аспекты хламидийной инфекции //Заболевания передаваемые половым путем.-1996.-№4.-С.9-12.

27. Гомберг Н.А. Эти коварные хламидии //Медицина для всех.-1997.-№ 1(2).-С.5-8.

28. Гомберг Н.А. и соавт. Обоснование иммунотерапии при лечении рецидивирующего урогенитального хламидиоза //И! И111.-2000.-№2.-С.З 0-35.

29. Горовиц Э.С. Хламидиоз человека и животных. Проблемы серологической диагностики: автореф. Дис. докт. мед. наук. М., 1986.-16 с.

30. Губергриц А.Я., Линевский Ю.В. Лечебное питание. Киев: "Выща школа".-1989.-398с.

31. Делекторский В.В., Яшкова Г.Н. Современное представление о роли хламидий в патологии урогенитального тракта: (клиника, диагностика, лечение). М., 1994.-25с.

32. Дзюбан Н. Ф. и соавт. Роль условно-патогенной флоры в развитии воспалительных заболеваний мочеполовой системы женщин //Клиническая антибиотикотерапия.-2001 .-№2/10.-С. 18-19.

33. Долго-Сабурова Ю.В., Мирзабалаева А.К. Лечение сочетанной кандидо-хламидийной инфекции у женщин репродуктивного возраста //Акушерство и геникология. -2002.- №1.-С.46-48.

34. Долгушин И. И., Телешова Л. Ф. Долгушина В. Ф. Местная противоинфекционная защита репродуктивного тракта женщин различного возраста //Журнал микробиологии.-2000.-№2.-С.86-89.

35. Домецка М.А. и соавт. Использование иммуноферментного метода для исследования антихламидийных сывороток //Вопросы вирусологии.-1985.-Т.ЗО, №4.-С.474- 477.

36. Евстюкова И.И., Пострушева Е.Н. Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения хламидийной инфекции //Акушерство и гинекология.-1995 .-№ 1 .-С. 18-21.

37. Ефимов Б.А. и соавт. Характеристика микрорганизмов, колонизирующих кишечник человека // Журнал микробиологии. 2002. №5. - С. 98-104.

38. Ефимов Б.А., Кафарская Л.И., Коршунов В.М. Современные методы оценки качественного и количественных показателей микрофлоры кишечника и влагалища // Журнал микробиологии. 2002. - №4. — С. 72-78.

39. Журавлева К.И. Статистика в здравохранении. М.: Медицина,-1981.-176с.

40. Захаренко Л.П. и соавт. Сравнительный анализ методов диагностики хламидиоза //Клиническая лабораторная диагностика.-2001.-№2.-С.36-38.

41. Зелинский А.А., Кожухарь А.В. Кандидоз: точки зрения. Одесса.: Астропринт, 2000.- 48 с.

42. Знаменский В.А., Дягтер Н.В. Микробиологическая диагностика кишечного и кожного дисбактериоза: Учебное пособие-М:ЦОЛИУВ,-1989.-28 с.

43. Иванютина Л.И., Белис Н.И. Микробиоценоз половых органов у женщин репродуктивного возраста //III международный конгресс. "Актуальные вопросы инфектологии в акушерстве и гинекологии», Одесса, 2000.-С.75.

44. Ищенко О.Ю., Орлова С.В., Василевская Л.С. Реабилитационные мероприятия при урогенитальном хламидиозе //материалы конференции "Современные аспекты реабилитации в медицине", Ереван.-2003.-С.158.

45. Ищенко О.Ю., Орлова С.В., Василевская Л.С.Клинико-иммунологическая оценка эффективности некоторых БАД к пище //материалы конференции "Здоровое питание населения России",Москва.-2003.-С.217-218.

46. Ищенко О.Ю., Орлова С.В., Василевская Л.С. Лабораторно-клиническая оценка эффективности некоторых БАД к пище //материалы 5-го СлавяноБалтийского научного форума, Санкт-Петербург.-2003.-С.71.

47. Ищенко О.Ю., Орлова С.В., Василевская Л.С. Немедикаментозная коррекция нарушений иммунитета при урогенитальном хламидиозе //Вестник Российского университета дружбы народов. Серия "Медицина".-2003.-С.161-168.

48. Калинина С.Н. И и соавт. Роль заболеваний, передающихся половым путем, в бесплодном браке //Урология и нефрология.-1997.-№1.-С.37-39.

49. КираЕ.Ф. Бактериальный вагиноз. СПб: ООО «Нева-Люкс»,2001.-364 с.

50. Кисина В.И. Роль нарушений экобиоценоза кишечника в патогенезе урогениталнього хламидиоза. Кремл. Нед. Клинический вестник.-1998.-№1.-С.76-79.

51. Кисина В.И. Микроценоз влагалища в норме и при вагинальных инфекциях: методы его коррекции. //Репродуктивное здоровье женщины. -2003.-№1(13).-С.72-76.

52. Клиническая иммунология. Рукокводство для врачей /под ред. А. В. Караулова.-М.:Мед. Инфор. Агентство, 1999.-604 с.

53. Клинческая иммунология и аллергология: в 3 томах. Пер. с нем ./под ред. Л. Йегера.-2-е изд.-М.: Медицина, 1990.-560с.

54. Ковальчук Л.В. и соавт. Функциональная активность нейтрофилов крови в острой фазе бронхиальной астмы //Иммунология.-2001.-№6(3).-С.309-311.

55. Корнацкая А.Г. и соавт. Микробиоценоз генитального тракта у женщин с хроническими воспалительными заболеваниями внутренних мполовых органов //Репродуктивное здоровье женщины -2003.-№ 2(14).-С.59-62.

56. Коршунов В.М.и соавт. Изучение бифидофлоры влагалища у женщин репродуктивного возраста//Журнал микробиологии,- 1998.-№4.-С.74-78.

57. Коршунов В.М. и соавт. Характеристика биологических препаратов и пищевых добавок для функционального питания и коррекции микрофлоры кишечника //Журнал микробиологии.-2000.-№З.С.86-91.

58. Коршунов О.В. и соавт. Применение биотерапевтических препаратов для коррекции микробного статуса у беременных женщин //Журнал микробиологии, эпидемиологии, иммунологии.-2000.-№2.-С.70-72.

59. Коршунов В.М. и соавт. Качественный состав нормальной микрофлоры кишечника у лиц различных возрастных групп //Журнал микробиологии.-2001 .-№2.-С.57-62.

60. Кудрявцева Л.В. и соав. Бактериальный вагиноз: Пособие для врачей. -Москва.-2001 .-43с.

61. Коршунов В.М.и соавт. Микроэкология желудочно-кишечного тракта. Коррекция микрофлоры при дисбактериозах кишечника. Учебное пособие. М., МЗРФ, 1999.

62. Куваева И.Б. Микроэкологическая система и ее значение в оценке эффективности биологически активных добавок и продуктов с пробиотическими свойствами //Вопросы питания.-2001.-№3.-С.З-6.

63. Куваева И.Б. Обмен веществ в организме и кишечная микрофлора.-Медицина, 1976.-248с.

64. Лазарева Е.Б. и соавт. Диагностика хламидийной и гарднерелезной инфекции у больных с острыми гинекологиечскими заболеваниями //Клиническая лабораторная диагностика.-1997.-№3.-С.21-23.

65. Леванова Л.А. и соавт. Возрастные особенности микробиоценоза кишечника у жителей г.Кемерово //Журнал микроб, эпидем. и иммун.-2001.-№3.-С.72-75.

66. Ленинджер А. Биохимия: Пер.с англ.-М.:Мир,1976.- 958с.

67. Липелис Г. Бактериальный вагиноз: критерии диагностики, принципы лечения //Здоров'я Укрши.-2002.-№6.-С.22.

68. Мавров И.И. Хламидийная инфекция как причина воспалительных заболеваний мочеполовых органов //Урология и нефрология.-1985.-№5.-С.11-13.

69. Мавров Г.И. Выявление хламидийной инфекции у больных с воспалительными заболеваниями мочеполовых органов с помощью твердофазного иммуноферментного анализа: Дис. канд. Мед. Наук.-Харьков., 1987.-167 с.

70. Мавров Г.И. Диагностика урогенинальных хламидиозов с помощью твердофазного иммуноферментного анализа //Дерматология и венерология.-К.:Здоровя,1987.-Вып.22.-С.73-77.

71. Мавров И.И. Половые болезни: Руководство для врачей, интернов и студентов.- Х.:Факт, 2002.-789с.

72. Манухин И.Б. и соавт. Хлам, инфекция у больных с заболеванием шейки матки //Акушерство и гинекология.-1991.-№6.-С.53-54.

73. Мартикойнен З.М., Чуранова З.И. //Клиническая лабораторная диагностика.- 1992.-№3-4.-С.4-6.

74. Медведев Б.И.и соавт. Клинические аспекты фагоцитоза. Казань: Магариф, 1993.-192 с.

75. Москаленко Е.П. Особенности местного иммунитета при ассоциированных с хламидиями хронических воспалительных заболеваний органов малого таза //Журнал микробиолгии.-2000.-№2.-С.89-92.

76. Морозова О.А. и соавт. Индикация микрофлоры человека в норме и при патологии с помощью лазерной флюоресценции//Журнал микробиологии.-2001.-№3.-С.57-60.

77. Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов: перев.с чешск.-М.:Медицина, 1985.-С.156-176.

78. Муравьева В.В. Микробиологическая диагностика бактериального вагиноза у женщин репродуктивного возраста: Дис. .канд.биол. наук,-М.,1997.

79. Назарова Е.К. и соавт. Микробиоценоз влагалища и его нарушения //Клиническая лабораторная диагностика, №2,2003, С.25-32.

80. Нарушева С.М. Урогенитальная хламидийная инфекция у женщин: Автореферат диссертации д-ра мед. наук.-М.-1996.-36 с.

81. Низова Н.Н.и соавт. Роль лактофлоры в восстановлении нормального микробиоценоза влагалища //Актуальные вопросы инфектологии в акушерстве и гинекологии. III международный конгресс. Одесса, 2000.-С.98-99.

82. Овчинников Н.М., Риджуей Дж. Лабораторная диагностика заболеваний, передающихся половым путем. М.:Медицина.1987.-320с.

83. Определитель бактерий Берги /Дж. Хоулт и др.-9 изд.-М.,1998.-Т1-2.

84. Орлова С.В. Формула здоровья. Каталог биологически активных добавок к пище.- М., 2000.-237 с.

85. Орлова С.В. Энциклопедия биологически активных добавок к пище.-М., 1998.-т.1,2.

86. Пальцев М.А., Аничков Н.М. Патологическая анатомия: Учебник. Т.2,4. М.: Медицина, 2001.-680 с.

87. Пинегин Б.В., Мальцев В.Н., Коршунов В. М. Дисбактериозы кишечника.-М., 1984.-170с.

88. Петров Р.В. и соавт. Оценка иммунного статуса человека: Метод. рекомендации.-М.,1984.-48с.

89. Позняк К.К. и соавт. Клинико-микробиологическая характеристика кишечного дисбактериоза у больных с генерализованными формами хламидиоза //С-Пб мед-биол. Конгр.25-30 мая.- 1997.-165с.

90. Погодин O.K. Хламидийная инфекция в акушерстве, гинекологии и перенатологии. Петрозаводск: Изд-во ПетрГУ, 1997.-168 с.

91. Покровский В.И. и соавт. Иммунология инфекционного процесса: Руководство для врачей. М.:Медицина,1994.-306с.

92. Передерий В.Г. и соавт. Иммунный статус принципы его оценки и коррекции иммунных нарушений: К.:Здоров'я.-1995.-211с.

93. Покровский В.И. и соавт. Современные представления об инфекционной патологии и основные направления совершенствования стратегии ее профилактики //Вестник РАМН.-2000.-№1.-С.З-7.

94. Понякина И.Д., Лебедев К.А. Метод розеткообразования Т- и В-иммунокомпетентных клеток. Возможности и ограничения. //Иммунология. -1983. -Т.4. -С. 10-20.

95. Петрова И.В. и соавт. Стандартизированные методы обследования иммунной системы человека (определение розеткообразующих клеток, иммуноглобулинов, гетерофильных антител и фагоцитоза): Методические рекомендации. М. -1981.-14 с.

96. Попов А.П. Лекарственные растения в народной медицине. К.: Здоров'я, 1968.-315с.

97. Прилепская В.Н., Анкирская А.С., Байрамова Г.Р. Вагинальный кандидоз. М.,1997.-89с.

98. Павлович С.А. Основы иммунологии: Учебн. пособие.- Мин.: Выш. Шк., 1997.-115с.

99. Радзинский В.Е.и соавт. Лекарственные растения и БАД в акушерстве и гинекологии. М.:Изд. РУДН,2002.-367с.

100. Радзинский В.Е. и соавт. Характеристика иммунного статуса у больных с рецидивирующим урогенитальным хламидиозом //Вестник Российской ассоциации акушеров гиекологов.-1999.-№1.-С.26-28.

101. Радзинский В.Е. и соавт. Факторы неспецифической защиты при хламидиозе //Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов.-1996.-№4.-С.105-112.

102. Растительные лекарственные средства; под ред. Масклотиной Н.П.-К.:Здоров'я,1985.-280 с.

103. Редько И.И. Сравнительная характеристика прямых микроскопических методов лабораторной диагностики хламидийной инфекции у новорожденных детей //Клиническая лабораторная диагностика.-1999.-№8.-С.34-35.

104. Ромашевский Н.В. и соавт. Микробиоценоз при урогенитальных расстройствах у женщин в постменапаузе //Вестник Российской ассоциации акушеров-гинекологов.-2000.-№ 1 .-С.78-82.

105. Руденко А.В. Урогенитальный хламидиоз: современные методы диагностики //Лабораторная диагностика.-1998.-№2(4).-С.З 8-42.

106. Руденко А.В., Крутликов В. Т. Иммуноферментный анализ. 30 лет диагностической практики //Лаборатороная диагностика.-1999.-№3.-С. 11-20.

107. Рюмин Д.В. Причины и профилактика рецидивов урогенитального хламидиоза у супружеских пар //Вестник Российского Университета дружбы народов. Сер. Мед, 1998.-№2.-С.55-59.

108. Савичева A.M., Башмакова М. А. Урогенитальный хламидиоз у женщин и его последствия. Под. Ред. Э.К.Айламазяна Н. Новгород.: Издательство НГМА, 1998.-182 с.

109. Савичева A.M. Акушерские и микробиологические аспекты патогенеза и диагностики генитального хламидиоза: Автор, дис. док. мед. наук. Л. 1991.-151с.

110. Саркисов С.Э. и соавт. Применение биотерапевтического агента «Жлемик» для коррекции микрофлоры при бактериальных вагинозах //Журнал микробиологии.-2000.-№1.-С. 88-90.

111. Селина Е.В. Роль сумамеда в лечении хламидийной инфекции урогенитального тракта //Materia medica.-1996.-№2(10).

112. Соколов Е.И. Клиническая иммунология.-М.:Медицина, 1998.-272с.

113. Семенова В.М. Клинико-эпидемиологическая характеристика хламидиозов //Российский медицинский журнал.-2000.-№1.-С.48-53.

114. Сидорова И.С., Черниенко И.Н. Внутриутробные инфекции: хламидиоз, микоплазмоз, герпес, цитомегалия.-1998.-№3.-С.7-13.

115. Соколова К.Я. и соавт. Аутофлора человека в норме и патологии и ее коррекция. Сборник научных трудов под ред. И.Н.Блохиной. Горький., 1988.-С.144-148.

116. Справочник по клиническим лабораторным методам исследования /под ред. Е. А. Кост.-М.: Медицина, 1975.-382 с.

117. Стеймиер Р., Эдельберг, Ингрэм Дж. Мир микробов.-М.,1979.-С.375-379.

118. Стефани Д.В., Вельтищев Ю.Е. Иммунология и иммунопатология детского возраста/Руководство для врачей.-М: Медицина, 1996.-348с.

119. Стрижаков А.Н., Подзолкова Н.М. Гнойные восполительные заболевания придатков матки.- М.,1996.-230с.

120. Стругар Й. Болезни, передающиеся половым путем //Журнал практического врача.-1998.-№2.-С.20.

121. Стукалова Е.Н., Подопрелова Е.К. Применение антигомотоксичных препаратов при лечении урогенитального хламидиоза //Биологическая терапия.-2000.-№2.-С.21-24.

122. Сушкова JI.B. Использование биологически активной добавки (БАД) «Флоравит Э» для профилактики и коррекции функциональных нарушений желудочно-кишечного тракта: Москва, 2003.-С.78 -82.

123. Тарасова JI.H., Григорьева Е.Г. Синдром хламидийной инфекции матери и новорожденного //Педиатрия.-1992.-№3.-С.39-42.

124. Торганова Е.Н. и соавт. Бактериальный вагиноз //Журнал микробиологии.-1999.-№4.-С .100-103.

125. Федотова Т.А.И соавт. Роль дисбактериоза кишечника в ормировании иммунной недостаточности //Иммунология.-2001.-№3.-С.41-44.

126. Фельдман Ю.М. и соавт. Оценка иммунного статуса человека //Лабораторное дело.-1994.-№ 10.-С. 16-19.

127. Фрейдин И.С. Методы изучения фагоцитирующих клеток при оценке иммунного статуса человека. Учебное пособие.-М.,1986.-32 с.

128. Фролов В.А. и соавт. Патологическая анатомия: Учебник. М.,1999.-С.593-600.

129. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Оценка иммунного статуса человека в норме и при патологии //Иммуннология.-2001.-№4.-С.4-6.

130. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Современные представления о защите организма от инфекций //Иммунология.-2000.-№1.-С.61-64.

131. Хаитов P.M. и соавт. Экологическая иммунология.-М.:Издательство ВНИРО, 1995.-219 с.

132. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммунная система желудочно-кишечного тракта: особенности строения и функционирования в норме и при патологии //Иммунология.-1997.-№5.-С.4-7.

133. Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммуномодуляторы и некоторые аспекты их клинического применения //Клиническая медицина.- 1996,-т.74, №8.-С.7-12.

134. Ханжин С.К. Использование тестов аллергодиагностики in vitro для изучения хламидийной инфекции: Дис. канд. Мед. Наук. Пермь., 1997.-96 с.

135. Хрянин А.А. Эпидемиология, диагностика и лечение урогенитального хламидиоза //Консилиум.-1999.-№3/6.-С.9-12.

136. Цевелев Ю.В., Кочеровец В.И., Кира Е.Ф. Анаэробная инфекция в акушерско-гинекологической практике.-СПб, 1995.-С.313.

137. Циммерман Я.С. О сущности понятия «дисбактериоз (дисбиоз) кишечника» и парвомерности использования этого термина //Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии.-2000.-№1.-С.81-84.

138. Чайка В.К., Севостьянова Т.Б. Состояние специфического иммунитета при хламидийной инфекции //Актуальные вопросы инфектологии в акушерстве и гинекологии. III международный конгресс Одесса, 2000.-С.132.

139. Шаткин А.А., Мавров И.И. Урогенитальные хламидиозы. Киев. - 1983.

140. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека //Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии.-1998.-№ 1 .-С.61 -65.

141. Шлыгин Г.К. Роль пищеварительной системы в обмене веществ. М.: Синергия, 2001.-С.40-41, 50-52.

142. Шютц Б. Киберстатус-возможности расширенной бактериологической диагностики стула//Биологическая терапия.- 1997.-№2.-С. 19-24.

143. Берегова Т.В., Фалалеева Т.М. Вылив лактульози на базальну та стимульовану шсулшом шлункову секрещю у щур1в //Вюник Кивського нвцюнального университету iMeHi Тараса шевченка. Ф1зюлогш. Проблеми регуляцп ф1зюлог1чних функцш. 2001.-№8.-С.8-9.

144. Захар1я К.А. и соавт. Пор1вняльна оцшка лабораторних метод1в д1агностики хламццозу //Лабораторна д1агностика.-2000.-№1.-С.43-49.

145. Круглпсов В.Т., Руденко А.В., Ромащенко О.В. Д1агностичне значения 1ммуноферментного анал1зу при уролопчних та г!неколопчних захворюваннях запального генезу //Лабораторна д1агностика.-2000.-№ 1 .-С.39-42.

146. Хламщ1оз в акушерсько-г1неколог1чнш практиц1. Методичн1 рекомендацИ Мш.охор.здор.Украин1.-Ки1в, 1999.

147. Фалалеева Т.М., Берегова Т.В. Вылив лактульози на стимульовану пстамшом, пентагастрином та карбохолшом шлункову секрещю у щур1в //Проблеми еколопчно1 та медично1 генетики i кл1нчно1 1мунологи , Ки1в-Луганськ-Харьив,-2002.- Т.43.-№4.-С.42-46.

148. Фалалеева Т.М., Берегова Т.В. Мехашзм выливу лактульози на шлункову секрецно. Экспериментальна та клшша ф1з1олог1я i 61ох1м1я. 2004. Т.25, №1, с.42-46.

149. Чекман 1.С.Фармакотерап1я дисбактер1озу кишечника// Врачебное дело.-2000.-№7-8.-С.6-11.

150. Arya O.P., Millinson H., Goodar A.D. Epidemiological and clinical correlates of chlamydiae infection of the cervix //J.Vener.Dis.-1981.-Vol.57,№2.-P.l 18-124.

151. Baranowski Z. Colloidal silver. New York., 1995.-18 p.

152. Bavoil P., Ohlin A., Schachter J. Role of disulphide bonding in outer membrane structure and permeabolity in Chlamidia trachom //Infect. Jmmunity.-1984.-Vol.44.-P.479-485.

153. Brolenshire M. K., Say P. J.Select Chlamidia and the importance of usethral site sampling to detect Chlamidia trachomatis in woman // Genitourin. Med.- 1997.-№6.-P.498-502.

154. Bell T.A. Chronic Chlamidia trachom. Infection in infantis JAMA., 1992.267:410.

155. Chlamidia control: Components of an effective control strategy to reduce the incedence of Chlamidia trachomatis. Patrich David M. Can. J. Hum. Sexual. 1997.-P. 143-150.

156. Dajsk Z. and all. Doxycycline compared with azithromycin for treating women with genital Chlamydia trochomatis infections : an incremental costeffectiveness analysis // Ann. Lintern. Med 1996. -Vol. 124(4). - P. 389 - 399.

157. Coldwell H.D., Kuo C.C. Purification of a Chlamydia trachomatis-specific antigen by immunoadsorbtion with monospecific antibody //Jimmunology.-1977.-Vol.298, №11.-P.787-789.

158. Fraidank H.M., Clad A., HerrA. S.et al. // Eur. J. Clin. Microbiol.Infect. Dis.-1995.-Vol. 15 3 .-P. 1063-1069.

159. Fuller R. Bifidobacteria microflora //J.Appl.Bacteriol.-1989.-V.66.-P.365-378.

160. Hentges D.J Epidemiologic stady in women //Fcad.Press.-N.Y.-1983.

161. Hertelius M.,Gorbach S.L., Molby R. et al. Chlamydia trachomatis //Ped.Nephrology.-1989.-V.3 .-P.443-447.

162. Knowledge O. Chi. Tr. Infection in genitourinary medicine clinic attenders //Sex Transmitt. Infec. 1999. 75, №1. P. 36-40.

163. Korshunov V.M. et al. Disease of genital tract //Microecol.Ther.-1984.-V.14.-P.281-282.

164. Korshunov V.M. et al. Infections disease of the female genital tract //J.Med.Microbiol-1996.-V.14.-P.281-282.

165. Koroku M., Kumamoto Y., Hirose T. et al. Epidemiologic stady of Chlamidia trachomatis infection in pregnant women // Sex Transm. Dis.l994.№6.P.329-331.

166. Kulturslay N. Human chlamidial infection/Ed.D.Serter.- Ismir,1997.-P.29-37.

167. Klaenhammer T.R. Bacteriocins of lactic acid bacteria. Biochimie. 1998, 70: 337-349.

168. Lennette E.N., Balows A., Hausler W.J. et al.// Manual of Clinical Microkbiology,3rd edn.-Washington,1980.-P.446-500.

169. Mahmoud E.A. and all. Epidemiological chlamydiae infection //Am.J.Obstet Ginecol.-1995.-V. 172-P. 1268-1272.

170. Mosier S., Nocao M., Herman M.et all. Lactic acid bacteria //Arch.Biochem.Biophys.-1991 .-V.287.-P. 160-166.

171. Noda H., Akasak N. and Ohsugi M. Biotin production by bifidobacteria. J.Nutr Sci Vitaminol 40,181-188,1994.

172. Novo J. et al. Intestinal bacterial of the female genital tract //J.Med.Microbiol.-1994.-V.56.-P. 128-130.

173. Nurminen M, Wahlstrom E at al. Microflora of the genital tract //Infect. Jmmunol.-1983.-Vol.44.-P. 609-613.

174. Schachter J. Chlamydial infections //N. Engl J. Of Hed.-1978.-V.298, №1-3. P.428-435.

175. Preinreich J.M. New Quinolone //Antibiotika Monitor, Austria.-1991.- №1.-P.44.

176. Sweet RL, Gybbs RS. Infections disease of the female genital tract. 2 ed. Baltimore: Williams and Wilkins. -1990.-P108-109.

177. Sozio J., Ness R.B. Chlamidia lower genital tract infection and spontaneous abortion // Diseases Obstet and Gunecol.-1998.-№l.-P. 8-12.

178. Stephenson J.M. Screening for genital chlamydial infection //British Medical Dulletin.-1998.-54(№1).-P.891-902.

179. Saltzman I.R., Russel R.M. Nutritional consequences of intestinal bacterial ovtrgrowth // Compr. Ther. -1994.-Vo.20.-P.23-30.

180. Ward M.E. Acta Patholojgics.-1995.- P.769-796.

181. Walker C.K., Kahn J.G. at al. Diagnosing Pelvic Inflamatoiy Disease: A Comprehensive Analysis and Considerations for Developing a New Model //J.of the American Medical Association.-1991.-V.266.-P.2594-2604.

182. Walker C.K., Peterson y. at ol. Pelvic Inflamatory Disease: Key Treatment issues and Options //J.of the American Medical Association.-1991,- V.266.-P.2605-2611.