Физиолого-экологические характеристики одноклеточной водоросли Closteriopsis acicularis var. Africana hind. применительно к биологической системе жизнеобеспечения человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.32, кандидат биологических наук Левинских, Маргарита Александровна

• Левинских, Маргарита Александровна
• кандидат биологических наук
• 1983

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Левинских, Маргарита Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

П. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Объект исследований

2.2. Экспериментальные установки и режимы культивирования.

2.3. Изучаемые параметры и методы их изучения

Ш. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКС1ШРИМЕНТ0В И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Некоторые особенности минерального питания клостериопсис

3.1.1. Изучение зависимости роста и развития клостериопсис от источника, азота в среде

3.1.2. Определение диапазона допустимых значении рН

3.1.3. Изучение возможности культивирования клостериопсис на среде с добавлением диализата мочи

3.2. Исследование физиолого-экологических оптимутлов среды.

3.2.1. Исследование влияния температуры на рост и фотосинтез культуры клостериопсис

3.2.2. Исследование влияния,освещенности на рост и фотосинтез клеток клостериопсис

3.2.3. Изучение зависимости фотосинтеза водорослей от концентрации углекислоты в атмосфере

3.2.4. Исследование влияния различных концентрации кислорода в атмосфере на фотосинтез клостериопсис

3.3. Разработка технологии непрерывного культивирования

3.3.1. Изучение потребностей клеток клостериопсис в биогенных элементах

3.3.2. Непрерывное культивирование с рециркуляцией среды

3.4. Исследование функциональных характеристик культуры клостериопсис

3.4.1. Продуктивность клостериопсис при различных релсимах культивирования

3.4.2. Морфо'-физиологические характеристики культуры клостериопсис

3.4.3. Химический состав биомассы

3.4.4. Биохимический состав клеток клостериопсис

3.4.5. Ас с имиляцио нный коэффициент и коррелятивная зависимость между накоплением биомассы, поглощением углекислоты и выделением кислорода

3.4.6. Состав и количество пигментов

3.5. Материальный баланс интенсивной культуры клостериопсис

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Физиолого-экологические характеристики одноклеточной водоросли Closteriopsis acicularis var. Africana hind. применительно к биологической системе жизнеобеспечения человека»

Идея создания системы жизнеобеспечения человека на основе биологического круговорота веществ принадлежит К.Э.Циолковокому (1954). В современной биоценологии она трактуется как идея формирования динамически устойчивой многокомпонентной системы, обладающей основными свойствами естественных биоценозов (Шепелев, Мелешко, 1973; Одум, 1975). Ее реализация во многом связана с рациональным выбором видовой структуры сообщества включаемых в систему организмов, и, в частности, с видовой структурой звена фотоавтотрофных организмов - определяющего звена системы.

Как известно, первые теоретические и экспериментальные исследования биорегенеративных систем проведены на одноклеточных водорослях рода Chlorella. Выбор этого объекта был обусловлен хорошей изученностью и высокими урожаями водорослей, получаемыми при массовом производственном культивировании, и был сведен лишь к селекции термофильных и устойчивых к неблагоприятным условиям среды штаммов (Sorokin, Myers, 1953; Владимирова, 1966; Кордш, 1966).

Детальное изучение хлореллы позволило выявить и решить ряд проблем, связанных со специфическими требованиями биологических систем жизнеобеспечения (БСЖО) человека. Общими усилиями советских ученых (Ничипорович и др., 1962; Семененко и др., 1962; Мелешко, 1964; Терсков и др., 1964) и зарубежных (Myers, Brown, 1961; Sorokin, Krauss, 1965 и др.) были решены вопросы получения высокой продуктивности водорослей и заложены основы создания высокопродуктивных реакторов, разработана технология непрерывного культивирования водорослей с возвратом питательной ср'еды фЛелешко и др., 1967; Лебедева и др., 1968), исследованы функциональные характеристики высокопродуктивной популяции водорослей и рассчитан материальный баланс (Мелешко и др., 1967). Все это явилось основой для создания функционального звена системы замкнутого круговорота веществ на основе хлореллы и позволило перейти к этапу моделирования систем.

Исследования разработанных к настоящему времени экспериментальных моделей систем, где фотосинтетическое звено представлено одновидовой популяцией хлореллы, показали, что в таких моделях за счет регенерации веществ полностью обеспечивается потребность человека в кислороде и воде и-на. 8% - в пище. Общий коэффициент регенерации веществ в системе составляет около 83% (Шепелев и др., 1974). Помимо этого, водоросли выполняют в системе роль гидробиологического фильтра очистки атмосферы от всех водорастворимых примесей, которые не только поглощаются в водной среде, но и утилизируются водорослями и сопутствующей микрофлорой.

В результате изучения функциональных характеристик созданных моделей БОШ) человека выявлены основные требования к фото-автотрофному звену системы и определены пути возможной оптимизации его. Одним из наиболее реальных путей расширения функций звена в системе является увеличение доли биомассы водорослей в пищевом рационе человека (Шепелев и.др., 1972).

Использование биомассы одноклеточных водорослей, как и высших растений, в рационе питания человека в значительной степени зависит от разнообразия их видового состава и, следовательно, пищевых свойств. Исследования в области одноклеточных водорослей до последнего времени ограничивались 2-3 представителями рода Chlorella, не обладающих сколько-нибудь существенными различиями в их пищевых свойствах. Возможность широкого использования биомассы хлореллы в моделируемых системах ограничена, из-за низкого содержания углеводов и трудно разрушаемой клеточной оболочки и связанной с этим низкой перевариваемостью биомассы. Кроме того, возможности одного какого-либо вида всегда ограничены, особенно если речь идет об обеспечении человека. Расширение видового разнообразия фотоавтотрофного звена за счет видов, различающихся по биохимическому составу, позволит увеличить объем биомассы водорослей в пищевом рационе космонавтов. Это в свою очередь увеличит эффективность фотоавтотрофиого звена и системы в целом. Отсюда вытекает необходимость поиска, селекции и введения в интенсивную культуру новых форм одноклеточных водорослей.

В последние годы идет систематическое и планомерное освоение новых объектов с целью их дальнейшей практической реализации в замкнутых экологических системах и для промышленного фотосинтеза. Внимание исследователей стаж привлекать некоторые представители сине-зеленых водорослей: анацистис (Галкина и др., 1967), анабена, (Антонин, 1969), спирулина (Пиневич и др., 1970), синехококкус (Трубачев и др., 1977). Были предприняты попытки использования для интенсивного культивирования и некоторых жгутиковых водорослей. Особый интерес представляют природные формы жгутиковых, не имеющие клеточной стенки, такие как дуналиелла (Абдуллаев, Семе-ненко, 1974), эвглена (Мелешко и др., 1933) и безоболочные мутанты жгутиковых (Владимирова и др., 1933). Следует отметить большое разнообразие химического состава их биомассы, в особенности запасаемых веществ, а с ледова,1тельно, и ее пищевой ценности.

Исследования, проведенных в ИМБП МЗ СССР в последние годы, показа,ли, что среди водорослей разных таксономических групп имеются формы, удовлетворяющие требованиям БСЖО человека. Ранее в ШБП были введены в интенсивную культуру и исследованы до уровня функционального звена системы такие формы водорослей, как хламидомонада, спирулина и эвглена. Продуктивность их несколько ниже, чем у хлореллы, но, по-видимому, может быть повышена по мере их дальнейшего изучения. Потенциальные возможности новых форм водорослей хорошо иллюстрируются на примере хламидомонады. Детальные исследования этой водоросли позволили выявить до сих пор неизвестную зависимость продуктивности от количества фосфора в клетках водорослей. Эта зависимость была реализована в условиях непрерывной культуры и позволила получить устойчивую продуктивность хламидомонады, вполне соизмеримую с продуктивностью наиболее перспективных штаммов хлореллы (Мелешко и др., 1977).

Было з^становлено, что исследованные формы водорослей обладают большими различиями в составе биомассы. Например, в составе биомассы хламидомонады содержится до 50% углеводов на сухое вещество, среди которых основное место занимают крахмалоподобные вещества (Антонян и др., 1973 ). Клетки спирулины и эвглены характеризуются высоким содержанием бежа (до 55%) с оптимальным аминокислотным составом (Антонян и др., 1983).

Полученные результаты позволяют оценить перспективность поиска и введения в интенсивную культуру новых ранее не исследованных форм водорослей. Следует отметить, что отбор видов для БСЖО человека по специальным критериям как самостоятельный этап исследований отсутствовал, а природный материал изучен еще недостаточно. Эта проблема актуальна не только в космической биологии, ее успешное решение оказывает положительное влияние на разработку всей проблемы производственного фотобиосинтеза для пополнения пищевых и кормовых ресурсов на нашей планете.

Перед нами была поставлена задача ввести в интенсивную культуру новую форму хлорококковых водорослей - Closteriopsis acicularis var. africana Hind. - и изучить ее балансовые характеристики применительно к БСЖО человека. Эта форма водорослей была отобрана в нашей лаборатории в результате сравнительного изучения 10 различных видов водорослей, полученных из коллекции Прата (ЧССР). Она привлекла внимание наличием легко разрушаемой клеточной оболочки,более высоким по сравнению с хлореллой содержанием углеводов в биомассе и большими размерами клеток (Сычев, 1980). Ранее эта форма не была предметом лабораторных исследований.

При изучении клостериопсис нами были использованы общие методические подходы и основные этапы исследований, разработанные ранее для хлореллы (Мелешко, 1976).

В задачу наших исследований входили следующие вопросы:

1. Исследование фвиолого-экологических оптимумов среды для плотных популяций клостериопсис, культивируемых в конкретных биокультиваторах со свойственными им биотехническими параметрами;

2. Разработка метода непрерывного культивирования, удовлетворяющего требованиям замкнутого массообмена;

3. Исследование основных функциональных характеристик высокопродуктивной культуры клостериопсис и их динамики во времени;

4. Расчет материального баланса высокопродуктивной популяции как возможного функционального звена системы с замкнутым круговоротом веществ.

Настоящая работа выполнена под руководством доктора биологических наук Ганны Иосиповны Мелешко, которой автор горячо благодарен за постоянную помощь и ценные советы. Автор также благодарен д.тл.н. Шепелеву Е.Я., к.б.н. Литонян А.А., к.х.н. Лебедевой Е.К., Сычеву В.Н., консультациями которых он многократно пользовался при выполнении работы. Автор признателен всем сотрудникам лаборатории за помощь в проведении экспериментов.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Систематическое положение и распространение. Представители хлорококковых водорослей, ставшие в настоящее время объектами массовых культур и различного рода физиологических исследований, относятся к числу наиболее простых форм, утративших способность к половому процессу и образованию зооспор и размножающихся только автоспорами. Все это сводит к минимуму количество морфологических признаков, служащих у'них для разграничения родов и видов. Значительно затрудняет исследования систематического плана и чрезвычайно сильная изменчивость формы и размеров клеток у хлорококковых водорослей.

В связи с этим в литературе имеются различные толкования систематического положения многих родов и видов хлорококковых. Именно так обстоит дело с систематикой морфологически сходных водорослей p.p.Ankistrodesmus, Closteriopsis и др. Эти водоросли относятся к отд. Chlorophyta, кл. Chlorococcophyceae, пор. Chlorococcales, сем. AnkistrocLesmaceae.

Семейство Ankistrodesmaceae Korsch. 1953 объединяет 13 родов (Legnerova, 1965; Hindak, 1970, 1977).В последние годы большую работу по изучению данного семейства провел чехословацкий ученый Ф.Хиндак. В его работе (1977) приведен ключ для определения родов сем. Ankistrodesmaceae, а также описание отдельных родов и видов.

К роду Closteriopsis Lemmerman 1899 относятся водоросли, имеющие свободно-плавающие, одиночные, узко-веретеновидные или слегка дуговидно-изогнутые клетки. Водоросли размножаются автоспорами, образующимися в количестве 2-16. Наиболее характерным признаком, отличающим этот род от p.Ankistrodesmus является отсутствие у клеток оболочки из слизи. В зависимости от наличия и числа пиреноидов морфологически похожие водоросли разделяются на три рода: p. Monoraphidium - пиреноиды отсутствуют, p. Keratococcus - I пиреноид, p. Closteriopsis - 2 и более пиреноидов (Hindak, 1977).

В состав p. Closteriopsis входят три вида: C.acicularis, С.longissima - и С.pehri.

На территории СССР виды p. Closteriopsis и их разновидности отмечены в озерах Болыиеземельной тундры (Гецен и др., 1978), в водоемах Череповецкого района Вологодской области (Полянский, 1950), в озерах Полесья (Сретенская, I960), в рыбоводных прудах Латвийской ССР (Киселев, 1959), в водоемах Винницкой области (Рад-зимовский, 1934), в p.p. Днепр, Припять, Десна (Кортиков, 1953); в Придунайских и Приднестровских районах северо-западной части Черного моря (Иванов, I960), в Днепровско-Бугском лимане (Прийма-ченко, 1956), в различных водоемах Молдавии (Обух, 1978), в прудах Северного Прикаспия (Фокина, 1977), Разновидности C.acicularis и С.longissima широко распространены в водоемах различного типа -каналах, в водах рисовых полей, прудах рыбхозов - на территории Средней Азии (Эргашев, 1977, 1979 и др.), также они отмечены в дельтовых протоках р. Селенги и в заливе Провал о. Байкал (Поповская, I960, 19606), в различных водоемах Якутии (Комаренко, Васильева, 1978), в озере Ханка (Журкина, 1959), в Кучулинском водоеме на Дальнем Востоке (Кухаренко, 1978). Следует отметить, что в отечественной литературе виды этого рода часто относят к роду Ankistrodesmus, указывая название "Closteriopsis" как синоним (Коришков, 1953; Эргашев, 1977, 1979 и др.). Иностранные авторы сообщают об обнаружении этих водорослей в Чехословакии (Hindak, 1977), Венгрии (Hajdu, 1975), Австрии (Wawrik, 1977), ГДР (Heynig, 1980).

Водоросли p. Closteriopsis являются обычными в водоемах США (Smith., 1933; Whitford, Schumacher, 1969) и Индии (Pandey et al, I981 и др.).

- 12

Таким образом, виды p. Closteriopsis - широко распространенные водоросли пресноводно-солоноватоводных прудов, водохранилищ, медленно текущих рек. В водоемах постоянно встречаются в планктоне, иногда достигая доминирующего положения (Догадина., 1973; Фокина, 1977; Elder et al., 1979).

C.acicularis и С.longissima в природе развиваются преимущественно в воде гидрокарбонатного класса со слабощелочной реакцией и, как следствие этого, низкой концентрацией железа, при Т=Ю-31°С (Поповская, 1980а; Фокина, 1977; Гецен и др., 1978; Ку-хареико, 1978;.Эргашев, 1977, 1979). Эти водоросли способны переносить большую мутность воды (Иванов, I960; Нуркина, 1959), повышение рН до 10 и высокую концентрацию солей (Приймаченко, 1956 ; Kiss, 1964).

Водоросли как фотоавтотрофные организмы нуждаются для своего развития в наличии в первую очередь световой энергии, источников углерода и необходимых минеральных веществ. Кроме того, на. жизнедеятельность водорослей оказывают влияние такие физико-химические факторы внешней среды, как температура, рН среды и ее химический состав, концентрация углекислоты и кислорода в воздухе и некоторые другие. При искусственном культивировании требуется детальное изучение зависимости роста и развития водорослей от этих факторов.

Минеральное питание. Данные по составу питательных сред для культивирования водорослей p. Closteriopsis в литературе отсутствуют .

При сравнительном изучении роста водорослей p. Ankistrodesms на различных минеральных средах показано, что оптимальными для разных видов являются среды Ягужинского (Смирнов, 1953; Музафаров и др., 1977),Бенеке (Алеев, 1932; Русина, 1961), Тамиыя (Шоякубов,

1980), Чо-IO (Подсосный, Малышева, 1981), модифицированная среда Бристоля (Kobayashi, 1974; Prat et al., 1972).

Эти среды различаются по составу и концентрации питательны}: элементов. Общим для них является использование в качестве источника азота нитратов. Культивируются водоросли p.Ankistrodesmus и на средах, содержащих в качестве источника азота аммонийный ион (Паламарь-Мордвинцева, 1969; Бердыкулов, Нуриева, 1980).

Азот - важнейший биогенный элемент. Хлорококковые водоросли способны усваивать азот как из неорганических, так и из органических соединений. Они могут использовать в качестве источника азота нитраты, нитриты, аммонийный неорганический азот и гидроксиламин (Syrett, 1955, 1956). Изучая отношение различных одноклеточных водорослей к источникам азота Проктор (1957) показал, что Chlorella и Scenedesnrus отдают известное предпочтение аммонийному иону. Преимущественное поглощение аммонийного иона перед нитратным при их совместном присутствии в питательной среде установлено рядом авторов (Myers, Cramer, 1948; Schuler et al., 1953). При использовании в качестве источника азота азотнокислого аммония наблюдается сначала быстрое усвоение аммонийного иона, после полного поглощения которого водоросли начинают интенсивно использовать нитраты. Более того, клетки водорослей, уже прекратившие ассимиляцию нитратов, еще могут поглощать ажюнийный азот ( Syrett, 1955).

Хлорококковые водоросли усваивают и различные формы органического азота (Algeus, 1948, 1950; KirkD., Kirk М., 1978).

Изучено влияние различных источников азота на рост, развитие и накопление белка у A.falcatus (Алеев, 1932) и у A.braunii (Пала-марь-Мордвинцева, Костлан, 1965; Палагларь-Мордвинцева, 1969). Было установлено, что эти водоросли лучше всего растут при использовании в качестве источника азота органических и фосфорнокислых солей аммония, пептона, мочевины и гликокола. Минеральные соли аммония оказывают на исследованные водоросли резко угнетающее действие в результате подкисления среды при поглощении nhJ иона. При сравнении влияния нитратов калия и кальция установлено, что они способствуют примерно одинаковому приросту числа клеток и биомассы. Битритные формы азота в условиях проведенных опытов оказались токсичными для обоих видов.

Особое внимание, уделено изучению скорости роста, развития и биохимического состава водорослей при использовании в качестве источника азота мочевины.

Интенсивность роста на мочевине у большинства хлорококковых водорослей выше, чем на нитратном и аммонийных фонах питания (Пи-невич и др., ISSI; Тагеева и др., 1967 и др.).

Цикл развития хлорококковых водорослей также зависит от формы азотного питания. Длительность цикла развития Chi.pyrenoidosa (Спекторов, Никольская, 1971) на аммонийном и амидном источниках азота составляла, 7-8 часов, а на нитратном-9-10 часов. Эти авторы указывают, что число автоспор, образующихся в материнской клетке, на аглмошшном и амидном фоне всегда было низке, чем на нитратном. При этом размер образующихся автоспор также различался: автоспоры при аммонийной и амидной форме азотного питания были крупнее, чем при нитратной. Однако большинством авторов получены противоположные данные. Длительность цикла развития в вариантах с мочевиной и нитратами была одинаковой, но на среде с мочевиной происходило увеличение числа автоспор, выходящих из одной материнской клетки (Тагеева и др., I9S7; Kitoh, Hori, 1968; Галкина, 1969;Максимов, 1969).

Многими исследованиями доказано, что и биохимический состав меток зависит от использованного источника азота. Шампиньи (1958) показала, что введение в питательную среду мочевины ведет к накоплению в клетке водорослей лизина и аргинина и к значительному общему увеличению органического азота,. Азот лизина, аргинина и лейцина составляет при этом до QQ% от общего азота. При ассишляции нитратов, в отличие от этого, накапливается глютаминовая кислота.

Увеличение содержания органического азота в клетке при выращивании хлорококковых водорослей на мочевине отмечают многие авторы (Баславская, Феофарова, 1959; Ласка, 1965; Тагеева. и др., 1967 и др.). В то же время имеются сведения об одинаковом накоплении азота клетками хлореллы в условиях непрерывного культивирования на средах с мочевиной и нитратами (Гительзон и др., 1954).

Содержание общего и белкового азота у A.braunii, выращиваемого на средах с мочевиной, на, 1,5-3$ выше, чем на среде с нитратным азотом (Паламарь-Мордвинцева, Костлан, 1965; Максимов, 1969). Содержание белков у A.braunii на нитратном фоне достигает 32,5/о, а, на карбамидном 49,3$. Форма источника азота существенно не влияет на уровень водорастворимых углеводов и направленность его изменения yA.braunii. Содержание общего фосфора всегда несколько повышено в клетках A.braunii на средах с мочевиной по сравнению с культурой на нитратном азоте (Максимов, 1969).

Следует отметить, что водоросли p. Ankistrode sinus, как и другие хлорококковые, способны утилизировать продукты жизнедеятельности человека и животных (Рерберг, Воробьева., 1964; Берды-кулОв и др., 1977; Шоякубов и др., 1930).

В литературе по физиологии и биохимии водорослей имеется небольшое количество работ, характеризующих влияние фосфора на продуктивность и обмен веществ одноклеточных водорослей (Згуровская, 1970; Мелешко и др., 1977). Влияние различных концентраций фосфора в среде на рост, интенсивность фотосинтеза, биохимический состав A.braunii изучено Максимовым (1968). Показано, что оптимальной концентрацией фосфора для роста и развития A.braunii в экстенсивных условиях является 47,8 мг/л. Исключение' из питательной среды фосфора не вызывает немедленного прекращения биосинтеза клеточного материала, но приводит к его постепенному замедлению. При удалении фосфора из среды внутриклеточных запасов его хватает для увеличения биомассы в 5,5 раз. При этом дефицит фосфора начинает сказываться, когда его концентрация в клетках падает до 0,2-0,3%. Аналогичные данные получены при изучении проявлении фосфорного голодания у водорослей p. Ankistrodesmus Пирсоном с сотрудниками (1952).

При выращивании A.braunii на среде, лишенной фосфора., уменьшается содержание как общего, так и белкового, азота, а также количество водорастворимых Сахаров (Максимов, 1968, 1969). Имеются данные о значительном накоплении астаксантина водорослями p. Ankistrodesmus в условиях длительного фосфорного голодания (Dersch, I960).

Оптимальной концентрацией калия для выращивания A.braunii на карбамидном источнике азота является 0,6-6,0 мг/л, а на нитратном - 499 мг/л. Дефицит калия существенно не влияет на уровень водорастворимых углеводов, при этом несколько ослабляется синтез белка и незначительно повышается содержание фосфора в биомассе (Максимов, 1969).

При изучении влияния магния на рост и развитие A.acicularis установлено, что размножение клеток требует больше магния, чем это необходимо дла нарастания биомассы (Величко, 1965). Наблюдалась прямая зависимость между продуктивностью культуры и содержанием магния в среде в диапазоне его концентраций от 48 до 243 мг/л.

В опытах Паламарь-Мордвинцевой Г.М. (1968) показано, что количество железа, необходимое для роста и развития A.braunii и повышающее его продуктивность, колеблется в пределах 0,5-3,0 мг/л FeSC>4-7H20. Концентрация 3 мг/л FeSO^• 7^0 является критической, начиная с которой повышение концентрации железа в растворе вызывает морфологические изменения клеток, свидетельствующие об избытке железа. Концентрация сульфата железа от 80 до 280 мг/л оказывает сильное ядовитое воздействие на A.braunii, которое проявляется в развитии опухолей, побледнении и отмирании клеток.

При купоросованш водоемов с целью рек дезинфекции, установлено, что водоросли p. Scenedesmus и p. Ankistrodesmus устойчивы против Си SO^ в концентрации 0,3-0,8 мг/л. Концентрация меда при этом несколько выше, чем концентрация меди, угнетающая рост других водорослей (Герасимов, 1937). При дальнейшем увеличении концентрации меди в растворе (10~4 м Си (Ш^)2) у A.braunii наблюдалось образование гигантских клеток с толстой стенкой и множеством ядер. Эти клетки содержали центриоли, которые не обнаружены в нормальных клетках (Kushner et al., 1981).

Образование гигантских многоядерных клеток у дводорослей p. Ankistrodesmus также может вызывать повышенная концентрация рубидия (Pirson, Lorenzen, 1966).

Анализ приведенных фактов показывает, что в известной нагл литературе практически отсутствуют данные по составу питательных сред для нормального роста и развития водорослей p. Closteriopsis. Вопросы минерального питания водорослей p. Ankistrodesmus изучены лучше, однако опыты проводились с экстенсивно растущими культурами. Тем не менее анализ этих данных позволил нам выбрать питательную среду для первых опытов по лабораторному выращиванию изучаемой формы водорослей. рН среды. Данные о влиянии кислотности среды на рост и развитие водорослей p. Closteriopsis в проанализированной нами литературе не обнаружены.

Работами Кесслера (Kessler, 1962, 1967) показано, что среди водорослей в пределах одних и тех же таксонов имеются формы с резко различным отношением к рН питательного раствора. Данным автором исследована нижняя граница рН для роста 22 штаммов, относящихся к 6 видам p. Ankistrodesmus, и показано, что она колеблется от 3,5 до 6,0 (Kessler, 1967).

Согласно исследованиям Алеева Б.С. (1932), работавшего с A.falcatus оптимальными значениями рН для роста этого вида являются значения от 6,9 до 7,3, при этом рН=5,0 угнетает рост водоросли. Аналогичные данные получены при изучении A.hraunii (Паламарь-Мордвинцева, Ко стлан, 1965). В данной ра.боте указывается, что при выращивании A.braunii на, среде с рН=4,5 наблюдалось обесцвечивание и увеличение зернистости содержимого клеток.

Литературные данные о морфогенетическом действии кислотности среды ра.зличны. Показано, что некоторые колониальные виды p.p. Ankistrodesmus и Scenedesmus на средах с высоким значением рН образуют большое количество одиночных клеток (Schlichting, Bruton, 1970; Trainor, 1970). Б то же время имеются сведения о сильной агрегации клеток Chlorella vulgaris под влиянием щелочной реакции среды (Malis-Arad et al., 1980). По мнению авторов, агрегация клеток при высоких значениях рН связана с тем, что автоспоры не могут отделиться от материнской клеточной стенки, что и приводит к образованию конгломератов, представляющих собой несколько поколений клеток.

Варна с соавторами (1974), изучавшие влияние рН на рост Sc.acutiformis в интенсивных условиях культивирования, указывают на отсутствие морфогенетического действия кислотности среды.

Имеются данные о влиянии рН среды на биохимический состав водорослей p. Ankistrodesmus. Показано, что низкие значения рН вызывают преобразования виолаксантина в зеаксантин у гетеротрофно растущей культуры Ankistrodesmus (Starosta, 1970; цит. по Soeder, Stengel, 1974). Уровень полифосфатов и других фосфоорганических соединений у водорослей p. Ankistrodesmus также зависит от кислотности среды (Ullrich., 1972).

В литературе имеются данные о существенном влиянии величины рН среды на. устойчивость солей в растворе. В щелочной среде обнаруживается недостаток железа, что связано с химическим осаждением его из раствора и адсорбцией на аморфных осадках фосфатов кальция и магния (Hopkins, Warn - 1925; Минеева, 1963). При высоком значении рН в неусвояемую форму для водорослей переходит марганец, молибден, бор (iTakamura, 1964). Даже в слабощелочной среде имеет место образованием трехзамещенных фосфатов алюминия, марганца, железа, магния, меда и цинка (Лебедева и др., 1965; Упитис, Пакалне, 1965; Мелешко, 1966; Лебедева и др., 1968).

Величина рН среды имеет важное значение для углеродного fcolfoldy, 1962; Мелешко и др., 1975; Белянин, Болсуновский, 1980;

Richmond et al.,I982) и азотного питания водорослей ( Eisele, Ullrich, 1977) и для сохранения веществ в круговороте (Мелешко и др., 1975). Следовательно, стабилизация рН среды в диапазоне оптимальных значений является необходимым условием для получения воспроизводимых характеристик водорослей.

Таким образом, применительно к изучаемой нами форме водорослей мы не обнаружили в литературе данных по составу питательных сред, оптимальной концентрации биогенных элементов в средах и по возможному диапазону рН среды для обеспечения максимальной скорости роста водорослей. Все это исключало и наличие данных по потребности клеток в биогенных элементах, неообходимых при введении новой формы водорослей в фотоавтотрофное звено БОЛЮ человека.

Температура. При исследовании проблем фотоавтотрофного звена БСЕО на основе одноклеточных водорослей было установлено, что в его состав выгоднее включать термофильные штаммы. Это объясняется тем, что при выращивании культур больших'плотностей водоросли облучают светом высоких интенсивностей, но только 20-25$ поглощенной радиации идет на фотосинтез, остальная световая энергия трансформируется в тепловую. Также было показано, что использование термофилов удоб нее, так как они имеют более высокий темп размножения (Владимирова и др., 1962; Владимирова,, Семененко, 1962).

При изучении хлорококковых водорослей было установлено, что термофильные штаммы водорослей с температурным оптимумом порядка 32-34°С в природе распространены довольно широко (Трухин, 1964, 1966). Однако высокотермофильные штаммы, имеющие оптимум 36° и выше, были встречены только в условиях жаркого климата.

По данным Трухина Н.В. (1966), распределение тремофильных штаммов среди некоторых родов хлорококковых водорослей следующее: p. Ankistrodesmus - 32$, p. Chlorella - 40$, p. Scenedesmus - 69^. При изучении 22 штаммов, пршадлежащих к 6 видам p. Ankistrodesmus было установлено, что ни один из них неспособен к росту при Т=3£Рс (Kessler, 1977). Температура 38° вызывала прекращение роста у водорослей p.p. Ankistrodesmus и Monoraphidium при культивировании в лабораторных условиях (Payer et al., 1980). В опытах Смирнова Н.Н. (1953) показано, что A.acicularis нормально развивался после двухчасовой экспозиции при Т=40°С, но не выдерживая дальнейшего повышения температуры. Согласно данным Эргашева А.Э. (1977), клетки A.minutissimus прекращали рост и размножение при 30-35°С. В лабораторных условиях эти водоросли обычно выращиваются при температуре 25-28°С (Кондратьева, Громов, 1972; Бердыкулов и др., 1980).

Предварительные исследования показали, что и исследуемая нами форма водорослей не является высокотермофильной. При экстенсивном культивировании установлено, что температурный оптимум этого штамма лежит в пределах 35° (Сычев, 1980).

Влияние температуры на фотосинтез и рост водорослей в значительной степени модифицируется воздействием других факторов внешней среды. В частности имеется обширная литература, посвященная изучению взаимного влияния температуры и света на уровень фотосинтетической активности водорослей (Sorokin, Krauss, 1962; Федоров и др., 1968; Smayda, 1969; Guerri et al., 1981 и др.). Способность видоизменять реакцию на воздействие температуры в зависимости от уровня освещенности характерна И ДЛЯ водорослей p. Ankistrodesmus. По наблюдениям Бердыкулова Х.А. с соавторами (1977), оптимальной температурой для роста и развития A.angustus при интенсивности освещения в 10 клк является Т=20°С, при интенсивности в 15 клк -- 25°С, при интенсивности 18-20 клк - 30°С. Аналогичные данные получены при исследовании процессов роста четырех штаммов водорослей p. Anlistrodesmus (Bednarz, Novak, 1971).

Известно, что на фоне экстремальных температур интенсивный свет (оптимальный для роста культуры при оптимальной температуре) выступает как фактор, приводящий к фотоингибированию развития и роста числа клеток в культуре (Семененко и др., 1967). Таким образом, одновременное повышение интенсивности света и температуры не всегда способствует увеличению продуктивности культуры. 0 проявлении этой закономерности и у водорослей p. Ankistrodesmus говорят данные Бердыкулова Х.А. с соавторами (1980). При исследовании условий культивирования A.angustus и A.braunii установлено, что водоросли нормально растут и развиваются при Т=25°С и интенсивности освещения 10-15 клк. Одновременное повышение температуры до 30-35°С и освещенности до 30-40 клк вызывало пожелтение и прекращение роста культур этих микроводорослей.

Как показано рядом авторов (Sorokin, Myers, 1957; Trainor, Burg, 1965; Семененко и др., 1967 и др.), оптимальными и запретными для процессов роста и деления клеток водорослей являются более низкие температуры, чем для фотосинтеза. Так, в работе Семененко В.Е. с соавторами (1967) приведены характеристики верхней границы температуры для функций роста и фотосинтеза сы^р.к. Температура, способствующая максимальному накоплению биомассы, у этого штамма о «Щ. оказалась на 4 ниже, чем температура, обеспечивающая максийьный уровень фотосинтеза.

При изучении температурных и световых кривых роста культуры Chl.sp.K с целью определения взаимодействия и оптимальных сочетании этих факторов применительно к условиям интенсивной культуры было обнаружено, что при крайних высоких экстремальных температурах в сочетании с определенной освещенностью в культуре появляются гигантские клетки, в 5-6 раз превышающие их размеры в норме (Владимирова и др., 1966). Установлено, что этот эффект определяется разобщением согласованного взаимодействия функций клетки: блокированием процессов развития и деления при сохранении в течение определенного времени функциональной активности фотосинтетического аппарата и роста клетки (Оемененко и др., 1967). Указанный эффект разобщения клеточных функций развития и фотосинтеза под воздействием высоких температур наблюдался многими авторами (Спек-торова, 1966; Soeder, Stengel, 1974; Казаков и др., 1974).

Суммируя приведенные литературные данные, следует отметить, что изучение влияния температуры на рост, развитие и фотосинтез хлорококковых водорослей являлось темой многих исследований. Однако, данных о воздействии температурного фактора на процессы жизнедеятельности водорослей p. Closteriopsis нами в литературе не обнаружено .

Свет. Из большого разнообразия меняющихся факторов внешней среды свет, его интенсивность и спектральный состав являются наиболее действенными факторами, определяющими интенсивность процессов фотосинтеза и роста растений.

Каких-либо сведений о влиянии освещенности на продуктивность водорослей p. Closteriopsis в литературе нами не обнаружено.

Порог светового насыщения для клеток хлореллы оказался очень низким: для мезофильных форм от 5 до 10 клк, для термофильных от 15 до 20 клк (Myers, 1946, Sorokin, Myers, 1953; Sorokin, Krauss, 1958, 1961; Степанова, 1963; Минеева, 1963). При повышении интенсивности света до 50 клк наблюдается обесцвечивание клеток, а при освещенности 70 клк происходит быстрое разрушение пигментов (Sironwal, Kandler, 1958; Richardson et al., 1983). Следует отметить, что уменьшение количества фотосинтетических пигментов является способом адаптации водорослей p. Chlorella к высоким интенсивно стям света. Другим типом адаптации к свету является Cyclotella - тип. У водорослей этого типа адаптивная реакция выражается в изменении активности или концентрации фотосинтетических ферментов (Jorgensen , 1969). Водоросли p. Ankistrodesimis относятся к Chlorella-типу. Так, у A.falcatus var.acicularis при освещенности 3 клк содержание хлорофилла "а" составляет 1,42 мг на 10 клеток, а при освещенности 30 клк - 0,61 мг.

Низкая величина светового насыщения для клеток хлореллы оказалась серьезным препятствием для применения плотных суспензий водорослей в практике и использования мощных источников света, в том числе и солнечного. Поэтому существенным шагом при решении указанного вопроса являлось открытие возможности использования эффекта прерывистого света при культивировании водорослей (Кок, 1956). Изучая выход фотосинтеза на вспышку света разной длительности, исследователи показали, что чем выше интенсивность вспышки, тем длиннее могут быть темновые периоды. Отсюда был сделан вывод о том, что чем выше интенсивность освещения, тем плотнее может быть суспензия водорослей, если ее турбулентное перемешивание создает условия, эквивалентные прерывистому освещению. Действительно, на практике оказалось, что при интенсивном перемешивании плотных суспензий порог светового насыщения может быть значительно повышен. Величина светового насыщения для таких культур оказалась различной и колебалась в пределах от 40 до 150 клк; она была тесно связана с такими условиями культивирования как скорость перемешивания, плотность суспензии и толщина высвечиваемого слоя (оптическая плотность),

Gaucher et al., IS60; Терсков и др., I9S4; I9S5; Мележо, 1966; Семененко и др., 1966а; Беляшш и др., 1967, 1972).

Наиболее существенную роль для величины светового насыщения имеет плотность суспензии. Увеличение плотности приводит к повышению величины светового насыщения (Терсков и др., 1964; Мелешко, 1966). При исследовании физиологических особенностей A.angustus было показано, что световое насыщение зависит от плотности следующим образом: при плотности 15 млн клеток/мл - 8-10 клк, при 30 млн/мл - 15 клк, при 45-60 млн/мл - 18-20 клк (Бердыкулов и др., 1977; Цузашаров и др., 1977).

Установлено, что насыщающая интенсивность складывается как средняя величина из большого диапазона разных уровней освещенности в разных слоях суспензии от оптимальной до величин, значительно превышающих истинное насыщение для данного вида, и штамма (Мележо, 1966; Филипповскиы и др., 1967). Общая скорость фотосинтеза в таких культурах слагается из отдельных скоростей для разных клеток и является интегральной величиной. Таким образом, применение интенсивного перемешивания водорослей позволило значительно увеличить плотность суспензии с одновременным повышением освещенности далеко за пределы интенсивностей, призванных в физиологии насыщающими в суспензиях малой плотности.

Характер кривых зависимости фотосинтеза и роста от освещенности в значительной степени определяется помимо указанных факторов также температурой (Sorokin, Krauss, 1962; Семененко и др., 1967; Smayda, 1969), осмотическим давлением раствора. (Мс Comdie, I960; Smayda, 1969), концентрацией питательных элементов в среде (Maddux, Jones, 1964) и стадией жизненного цикла водорослей (letzher, Lorenzen, I960; Sorokin, 1960).

Анализ приведенных фактов. показал, что хотя влияние освещенности на рост и развитие водорослей изучено хорошо, данных по зависимости интенсивности фотосинтеза изучаемой формы водорослей от воздействия этого фактора среды нами в литературе не обнаружено.

Углеродное питание. Особое место в ряду факторов внешен среды, определяющих скорость роста водорослей, занимает обеспеченность культуры углекислотой, которая является основным источником углерода при фотосинтезе. Данных по зависимости скорости роста водорослей p.p. Closteriopsis и Ankistrodesmus от концентрации углекислоты нами в литературе не обнаружено.

Величина насыщающей концентрации углекислоты в воздухе при культивировании хлореллы, колеблется по определению различных исследователей от 0,02% (Emerson, Green, 1938) до 5-7% (Мелешко, Красотченко, 1965).

Данные по величине ингибирующей концентрации COg также различны: от 0,7% (Emerson, Green, 1938) до 20% (Мелешко, Красотченко, 1965).

Следует отметить, что не все указанные величины COg характеризуют физиологический оптимум клеток хлореллы по углекислоте. В одних случаях (Emerson, Green, 1938) данные получены при исследованиях суспензии хлореллы малой плотности, где градиенты среды отсутствовали или были очень малы. Они действительно характеризуют физиологические особенности клеток хлореллы по отношению к концентрации углекислоты. В других случаях (Мелешко, Красотченко, 1965; Семененко и др., 19666), исследования проводились с суспензиями большой плотности, и полученные данные характеризуют не столько физиологические особенности клеток хлореллы, сколько условия культивирования. В результате исследований плотных культур водорослей с использованием мощных световых потоков было установлено, что чем выше плотность суспензии и ее продуктивность, тем больше величина насыщающей концентрации углекислоты в воздухе (Мелешко, Красотченко, 1965; Мелешко, 1966). При этих условиях уменьшается удельный объем среды, приходящийся на каждую клетку. Это в свою очередь, приводит к сокращению наличного запаса растворенной углекислоты в зоне каждой клетки, что неизбежно сопряжено с уменьшением общей поверхности этой индивидуальной "сферы питания", через которую осуществляется приток новых молекул углекислоты.

Помимо плотности суспензии, величина насыщающей концентрации углекислоты определяется рядом внутренних и внешних факторов, а также их взаимодействием. К внутренним факторам относятся таксономическая принадлежность водорослей (Brown, Tregunna, 1967) и стадия развития клеток CDamija, 1966; Pirson, Lorenzen, 1966; Мещерякова, 1975).

Внешние факторы, определяющие скорость потребления углекислоты и ее насыщающую концентрацию, включают интенсивность освещения (Мелешко, 1966; Семененко и др., 19666; Мещерякова, 1975), температуру (Nakamura, Miyachi, 1980), рН суспензии (Brown, Tregunna, 1967; Kaven, 1970), концентрацию кислорода (Turner, Brittain, 1962).

Установлено также, что оптимальный реши углеродного питания каждой клетки может быть обеспечен не только за счет повышения парциального давления углекислоты в воздухе, но и путем увеличения удельной площади контакта суспензии с воздушной смесью (Мелешко, 1966; Семененко и др., 19666). Величина насыщающей концентрации СС^ зависит от способа выращивания водорослей и конструкции реактора. Так, скорость роста по числу клеток у A.pseudomirabilis увеличивалась в 3-4 раза при выращивании в колбах с барботажем воздуха (0,03^ СОо) против скорости роста без продувки (Подсосонный, Малышева, 1931).

Согласно исследованиям последних лет, концентрация СО2 определяет не только общую скорость ассимиляции углерода, но и играет существенную роль в формировании фотосинтетического аппарата. Комплексная оценка фотосинтетического аппарата клеток хлореллы (по содержанию хлорофилла, активности ферментных систем, скорости фотосинтеза) , адаптированных к различным концентрациям GOg - 0,02% и 2%, показала, что повышенные концентрации углекислоты способствуют формированию фотосинтезирующего аппарата, обеспечивающего более высокую энергетическую эффективность фотосинтеза (Мещерякова, 1975).

Имеются сведения о том, что у клеток Chl.emersonii адаптированных к 0,03% СО^, фиксация углекислоты происходит в цикле С^ -дикарбоновых кислот (цикл Хэтча - Слэка), а у клеток, адаптированных к Ъ% COg - в цшше Cg (Beardall, Raven, 1981). У клеток, адап-тировашых к 0,03% COg, увеличен мембранный потенциал и внутриклеточная концентрация углерода неорганических соединений. При исследовании A.braunii и других хлорококковых водорослей шжазано, что клетки, адаптированные к низким концентрациям COg, активно поглощают HGOg, а клетки, адаптированные к высоким концентрациям COg, поглощают только углекислоту (Findenegg, 198O).

Здесь следует отметить, что растворенная в питательной среде углекислота не является единственным источником углерода при авто-трофном питании водорослей. Как и другие водные растения, водоросли способны усваивать связанную углекислоту в виде бикарбонатных и карбонатных ионов. Способность к поглощению ионов угольной кислоты значительно различается у разных групп водорослей (Борш, 1970; Raven, 1970). Использование различных источников углеродного питания позволяет регулировать динамику водорослевого сообщества (Белянин, Болсуновский, 1980; Richmond et al., 1982).

Замена углекислоты бикарбонатами и карбонатами дает возможность выращивать водоросли без дополнительного барботирования, а это, в свою очередь, с шикает материальные за,траты при массовом культивировании водорослей. Однако, если молекулярная COg легко 2диффундирует через клеточную стенку, транспорт НСО3 и С0д связан с дополнительным привлечением энергии (Рабинович, 1953; Raven, 1970). Опытами Русиной О.Н. (1961) установлено, что КНСОд и NaHGO^ в концентрации 0,75 г/л могут частично заменить углекислоту для роста A.falcatus, но при этом наблюдается снижение продуктивности на 30%. Болгарские ученые установили, что при интенсивном режиме культивирования Scenedesmus acutus возможна замена С0^ на ион НСС§. При этом прирост биомассы уменьшался приблизительно на Q%, содержание белков и углеводов было неизменно, наблюдалась тенденция к увеличению длительности жизненного цикла (Георгиев, Аврамова, 1977;;Георгиев и др., 1977).

Таким образом, величины насыщающей и ингибирующей фотосинтез водорослей концентрации углекислоты зависят от ряда внутренних и внешних факторов. Оценку этих величин необходимо проводить применительно к конкретным условиям культивирования водорослей в биокультиваторах определенной конструкции.

Кислород. В природных экосистемах среди факторов внешней среды наибольшее регуляторное действие на фотосинтетический метаболизм углерода оказывают, очевидно, освещение и концентрация СОр, которые часто находятся при лимитирующих значениях. Особое место занимает кислород, концентрация которого не подвергается большим колебаниям, однако его действие на субстратном и энергетическом уровнях существенно модифицируется сдвигами в значениях двух вышеназванных факторов. 1

Влияние парциального давления кислорода на фотосинтез имеет большое значение при выращивании растений в замкнутых объемах, где возможны значительные колебания концентрации кислорода. Таким образом, и при культивировании водорослей в БСНО человека приходится учитывать этот фактор.

Впервые ингибирунцее влияние повышенного содержания кислорода в воздухе на фотосинтез хлореллы было отмечено Варбургом (1920).

Он наблюдал снижение фотосинтеза хлореллы при повышении парциального давления кислорода с 15 до 760 мм рт.ст. Эффект Варбурга затем неоднократно подтверждался в опытах с водорослями различных таксономических групп (ГУсев, 1962; Pope, 1975; Ogawa et al., 1980; Merrett, Armitage, 1982 и др.). В частности, для ряда штаммов хлореллы было показано, что интенсивность фотосинтеза находится в прямой зависимости от концентрации кислорода в газовой фазе (Turnen, Brittain, 1962; Мелешко и др., 1973; Shelp, Canvin, 1980). При этом, повышение концентрации кислорода в воздухе с 21 до 40% приводило к снижению фотосинтеза в среднем на 30% при интенсивном культивировании (Мелешко и др., 1973). Дальнейшее увеличение концентрации кислорода до 65% вызывало обесцвечивание культуры и ее гибель. Снижение содержания кислорода в атмосфере реактора с 21 до 5% способствовало усилению фотосинтеза на 20-25%. Согласно исследованиям других ученых, некоторые водоросли сохраняют неизменную продуктивность при увеличении парциального давления кислорода как в интервале от 3-5 до 21% (BearcLall, Morris, 1975; Merrett, Armitage, 1932 и др.), так и при более высоких величинах (Fedina, 1980; Watts Pirt, Pirt, 1980 и др.). Наконец, установлено, что процесс фотосинтеза штамма Chlorella sorokiniana ОКБ устойчив к концентрации кислорода в атмосфере около 100% (wagner, Welch, 1969; Pulich, Ward, 1973). По-видимому, реакция водорослей на различные концентрации кислорода в аэрируемой смеси существенным образом зависит от генотипических свойств штамма. Следует отметить, что повышенная устойчивость к воздействию этого фактора характерна не только для некоторых низших растений, но и для высших растений с фиксацией С02- в цикле С4-дикарбоновых кислот (Parkinson et al., 1973; Quebedeaux Hardy, 1973).

Ингибирующее влияние повышенного содержания кислорода в воздухе на фотосинтетическую продуктивность проявляется в различной о степени в зависимости от воздействия некоторых факторов внешней среды. Так, насыщающая фотосинтез концентрация СОр способствует снижению эффекта Варбурга в пределах концентрации от 5 до 21% (Бойченко, Ефимцев, 1879; Dohler, 1981). Наблюдаемое в этих условиях влияние 0^ на фотосинтез, по-видимому, может отражать его действие непосредственно на механизм этого процесса, ибо скорость фотодыхания значительно снижается при насыщающих концентрациях С02 (Wilson, Calvin, 1955; Вийль и др., 1972).

Имеются литературные данные о снижении эффекта Варбурга при высоких интенсивностях освещения (Кутюрин и др., 1964; Карабаев и др., 1977; Максимова и др., 1978). Значение света для фотосинтеза сводится главным образом к его энергетической роли; поэтому можно предположить, что действие кислорода в определенной степени зависит от энергообеспеченности клетки. Подтверждением этого, по-видимому , является факт снижения ингибирующего влияния под действием на клетки хлореллы экзогенной АТФ (Карабаев и др., 1977).

Как показали исследования болгарских ученых, эффект Варбурга может модифицироваться при использовании различных источников азота (Fedina, 1980; Вычкова-Радева, Ваклинова, 1981). Так, при культивировании Scenedesmus obli-quus на среде с нитратом калия его фотосинтез оказался гораздо устойчивее к воздействию 40% кислорода в газовой фазе, чем при выращивании на аммонийном источнике.

Установлено, что с увеличением парциального давления кислорода сильнее подавляется выделение 0^, чем поглощении COg (Карабаев и др., 1977). Таким образом, ассимилящгонный коэффициент культуры, выращиваемой при повышенных концентрациях кислорода, увеличивается.

В литературе имеются данные и о влиянии повышенного содергания кислорода в газовой смеси на восстановленность органического вещества клеток (Spoehr, Milner, 1949), а также на содержание биогенных элементов в клетках водорослей и концентрацию растворимых органических соединений (Мелешко и др., 1973). Это свидетельствует о том, что данный фактор оказывает влияние не только на уровень фотосинтетической активности клеток, но и на их метаболизм.

Таким образом, проведенный анализ литературы, посвященной изучению влияния различных концентраций кислорода на фотосинтетическую активность водорослей, показал, что несмотря на достаточную изученность вопроса в целом, данные по зависимости интенсивности фотосинтеза водорослей сем. Ankistrodesmaceae от концентрации Og в атмосфере отсутствуют.

Продуктивность. По имеющимся литературным данным, водоросли p.Closteriopsis не являлись объектами массового культивирования. Водоросли других родов сем.Ankistrodesmaceae выращивались как в лабораторных условиях, так и под открытым небом.

При культивировании водорослей p.Ankistrodesmus в лабораторных условиях (температура 25-28°С, освещенность 5-10 клк, барботаж воздухом с добавлением 0,3-5,0% СОр) показано, что продуктивность различных штаммов составляла от 0,1 до 1,0 г/л«сутки (Паламарь--Ыордвинцева., 1969; Bednarz, Novak, 1971; Кондратьева, Громов, 1972; Zahid et al., 1981} Genthrer, 1983).

При выращивании под открытым небом урожай водорослей p.Ankistrodesmus за сутки колебался от 8-10 г/м^ (Бердыкулов и др., 1980) до 54 т/ь? (Grobellaar, 1982) в зависимости от используемого штамма, установки и климатических условий.

Продуктивность Eirchneriella obesa 447, другого представителя сем.Ankistrodesmaceae, при культивировании под открытым небом в условиях Ленинградской области составила 10,7 г/м^.сутки, 2 в то время как в лабораторных условиях она была равна 36 г/м «сутки (Верзилин и др., 1979).

Таким образом, продуктивность водорослей во всех случаях экстенсивного культивирования была низкой и зависела от условий выращивания. Данных по интенсивному культивированию водорослей этого семейства нами в литературе не обнаружено.

Биохимиче ский с о с тав. Литературных данных по биохимическому составу водорослей из рода Closteriopsis нами не обнаружено. Состав биомассы водорослей p. Ankistrodesmus изучен достаточно хорошо применительно к условиям накопительных культур, выращиваемых в экстенсивных условиях.

Следует отметить, что биохимия водорослей изучается по многим направлениям. Основными являются исследование кормовой и пищевой ценности биомассы водорослей, сравнительное изучение биохимических свойств организмов различных таксономических групп и изучение фундаментальных вопросов биологического сздлорецулирования и биосинтеза фотосинтезирующих организмов. Водоросли p. Ankistrodesmus использовались в научно-исследовательских работах при решении вопросов по всем этим направлениям.

Одной из важных характеристик штамма является его кормовая ценность, определяющаяся количественным и качественным составом белка. Содержание бежа в биомассе водорослей p. Ankistrodesmus определяли только при выращивании культур в экстенсивных условиях. Так, уA.falcatus содержание белка составляло 64-69$$ от сухого веса (Русина, 1961; Пахомова, 1963), у A.angustusиA.braunii -51,0-54,9$$ (Бердыкулов и др., 1980), yA.septosus - 30,9$, у A.braunii- 30,5$, yA.sp. - 33,2$ (Кондратьева, Громов, 1972). Таким образом, содержание белка в биомассе этих водорослей колеблется от 30 до 69$$ от сухого веса в экстенсивных условиях выращивания.

Аминокислотный состав суммарного белка был исследован у A.falcatus. Согласно полученным данным, содержание в белке лизина составляло 5,28%, гиотидина - 3,38$ аргинина - 14,77$, аспараги-новой кислоты - 4,80$, серина - 4,16$, глицина - 7,34$, глютамино-вой кислоты - 7,04$, треонина - 5,27$, аланина - 10,77$, тирозина

- 1,21$, метионина - 0,98$, валина. - 4,10$, фенилаланина - 1,68$, изолейцина - 7,17$, цистина - 1,55$, а также в незначительных количествах обнаружены триптофан, пролин, цитруллин, — аминомасля-ная кислота (Пахомова, 1963).

Сравнительно мало изучены количественный и качественный состав углеводов у водорослей p. Ankistrodesmus. Согласно исследованиям Кондратьевой Л.Д. и З^эомова Б.В. (1972), общее содержание углеводов у A.septosus - 9,4$, у A.braunii - 12,6$, у A.sp.

- 12,4$ от сухого веса клетки. Было проведено подробное исследование углеводного состава A.braunii (Шнюкова, 1980). Общее содержание углеводов у этого вида 8,6-10,0$$. При изучении качественного состава углеводов A.braunii идентифицированы следующие фракции от общей их суммы: спирторастворимые - 24,5-40,2$, водорастворимые -2,5-10,5$$, запасные - 2,3-14,8$$, гемицеллюлоза и пектиновые -22,6-41,4$$, клетчатка - 10,1-27,3$$ (Шнюкова, 1980). Колебания в содержании углеводов отдельных фракций автор объясняет зависимостью от сезона культивирования водорослей.

Определение содержания липидов у водорослей p. Ankistrodesmus проводилось многими исследователями. Паламарь-Мордвинцева Г.М. (1969), работавшая с культурой A.braunii, указывает, что содержание липидов у этого вида колеблется от 9 до 13$ от сухого веса. При анализе биохимического состава трех видов p. Ankistrodesmus установлено, что липиды составляют от 25,9 до 36,4$ от сухого веса (Кондратьева, Громов, 1972).

В опытах Бердыкулова Х.А. с соавторами (1980) показано, что содержание ЛИПИДОВ yA.angustus и A.braunii равно 26,0-28,0$ при выращивании в лабораторных условиях и 15,7-18,5$ при выращивании в открытых лотковых установках. Снижение содержания липидов в биомассе А.angustus и A.braunii, выращенных в открытых установках, авторы объясняют увеличением интенсивности освещения (до 50-60 клк). По мнению Рахимова А. и Исмаилходжаева Б. (1977), количество липидов в клетках A.angustus может колебаться от 17,6 до 31,5% в зависимости от условии культивирования. Биохимический состав клеток водорослей изменяется и в зависимости от возраста культуры. Отмечено, что содержание липидов у A.braunii составляло 18,6% у 4-не-дельной культуры и 33,7% у 7-недельной культуры (Williams, Г-fcMillan, 1961). Количество ненасыщенных липидов у данного штамма A.braunii оказалось равным 17,1% от суммы липидов, насыщенных - 61,5%, гли-церола - 6,8%. Авторы приводят следующую характеристику жирных кислот: линолевая - 13%, олеиновая - 54%, пальмитиновая - 33%, следы каприновой, лауриновой, пальмитолеиновой и пр.

Содержание липидов, стеролов, свободных жирных кислот зависит также от условий питания культуры. Так, количество липидов у A.braunii при автотрофных условиях составляет 27,5% от сухого вещества, при миксотрофных - 13,9%, при гетеротрофных - 17,7% (Wright et al., 1980). Показано, что коэффициент насыщенности при этом колеблется от 0,37 при гетеротрофных условиях до 0,45-0,53 при автотрофном и миксотройном культивировании.

Особенности жирнокислотного состава липидов различных классов у A.braunii были изучены Парниковым В.Н. (1979). Установлено, что коэффициент насыщенности эфиров стеринов - 0,51, триглицеридов -0,85, свободных жирных кислот - 0,71.

Биохимия водорослей изучается не только с целью установления их питательной ценности, но и с целью дополнения характеристик отдельных таксонов. В настоящее время систематика хлорококковых водорослей крайне несовершенна. Одна, из причин такого положения состоит в том, что до сих пор, особенно для родов и видов, основным и часто единственным методом различения таксонов является морфологический метод (Голлербах и др., 1961). Большое значение для систематики имеют сравнительные исследования культуральных свойств различных водорослей, изучение их биохимии.

Одной из биохимических характеристик обособленности таксонов является содержание у них определенных количеств нуклеиновых кислот, а также отношение суммы пуриновых оснований к сумме пиримиди-новых.

Как показано рядом автором (Пахомова, 1963; Пиневич, Никифорова, 1963; Hellmann, Kessler, 1974), суша, гуанина и цитозина у водорослей p. Ankistrodesmus составляет 58-70% от всех нуклеоти-дов, т.е. они принадлежат к ГЦ-типу.

С целью выработки физиологических и биохимического критериев таксономии p. Ankistrodesmus была проведена серия экспериментов по изучению гидрогеназной активности, способности к синтезу вторичных каротиноидов, способности к разжижению желатины и пр. Показано, что все 22 изученных штамма p. Ankistrodesmus проявляют гидрогеназную активность, способны синтезировать вторичные каро-тиноиды (астаксантин) и разжижать желатину (Kessler, Czygan, 1967), выдерживают понижение рН до 3,5-5,5 (Kessler, 1967; Guminski et al., 1933), неустойчивы к 1-2% концентрации NaCl в питательной среде и неспособны к росту при 33°С (Kessler, 1977), синтезируют эфирные масла в концентрации 0,2-0,7% (Liersch, 1976), неспособны гидролизовать крахмал (Kessler, I960).

С этой же целью было предпринято изучение состава фотосинте-тически активных пигментов у хлорококковых водорослей (Варасова и др., 1965), в том числе и 3 видов p. Ankistrodesmus (A.braunii, A.falcatus, A.nannoselene). Количество пигментов у них оказалось равным 1,6-4,5% от сухого вещества клеток, процентное содержание пигментов от их общего количества варьировало в следующих цредачах: хлорофилла "а" - 50,9-70,7%%, хлорофилла "б" - 12,8-28,5%%, каротина - 2,1-4,0%%, лютеина - 4,9-12,4%%, виолаксантина - 1,6-4,6%%, неоксантина - 1,7-3,5%%.

Анализ приведенных фактов показывает, что в состав водорослей p. Ankistrodesmus, ближайших в систематическом плане к видам p. Closteriopsis, входят все необходимые для питания гетеротрофных организмов вещества.

Таким образом, при знакомстве с основными литературными источниками, посвященными изучению одноклеточных водорослей, мы не обнаружили каких-либо данных, касающихся изучаемой наш формы водорослей - Closteriopsis acicularis var. africana Hind. 0 момента ее выделения из природы и описания Ф.Хиндаком (1970) она, по-видимому, не была предметом изучения. Однако, анализ литературы, посвященной близкому роду, показал перспективность водорослей p. Closteriopsis для использования в биологических системах жизнеобеспечения, а изучение литературы по проблемам заглкнутых экологических систем позволило нам выявить те задачи, которые необходимо решить при введении новой формы водорослей в фотоавтотрофное звено БСКО человека.

- 37

II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

Заключение диссертации по теме «Авиационная, космическая и морская медицина», Левинских, Маргарита Александровна

ВЫВОДЫ

1. Введена в интенсивную культуру и исследована до уровня функционального звена БС20 человека новая перспективная форма одноклеточных водорослей Closteriopsis acicularis var. africana Hind.

2. Изучены условия минерального питания и показано, что клетки клостериопсис способны расти и размножаться с одинаковой скоростью на средах, содержащих азот в разных формах - амидной, аммонийной, нитратной, а также диализат мочи человека в различных разведениях.

3. Разработана и реализована в длительных экспериментах замкнутая технология непрерывного выращивания водорослей. Она основана на использовании созданных сбалансированных корректирующих растворов и найденной корреляции между приростом биомассы водорослей и поглощением биогенных элементов. Она обеспечила поддержание концентрации биогенных элементов в среде и рН в заданных пределах.

4. Исследованы физиолого-экологические оптимумы среды для суспензии высокой плотности и получены данные по функциональной зависимости скорости роста и размножения клостериопсис от температуры, освещенности, концентрации углекислоты и кислорода. Изученная форма термофильна (оптимум лежит в диапазоне 34-36°С) и светолюбива (световое насыщение достигается при освещенности о

225-240 вт/м ФАР), т.е. способна расти и размножаться при высокой напряженности факторов внешней среды.

5. Показано, что скорость фотосинтеза не зависит от концентрации 02 в атмосфере в диапазоне 20-50%. В диапазоне концентраций 5-20% интенсивность фотосинтеза снижается пропорционально содержанию 09 в атмосфере.

6. Установлена зависимость накопления отдельных биогенных элементов и пигментов в клетках от степени интенсификации процесса выращивания. В интенсивных условиях культивирования при высокой продуктивности в составе клеток достоверно снижается содержание азота, калия, магния, пигментов.

7. Реализовано оптимальное сочетание основных факторов среды, позволяющее получить высокую и устойчивую продуктивность водорослей. Она составляла 9,28+1,40 г/л в сутки и оказалась близкой к продуктивности наиболее перспективных штаммов хлореллы применительно к идентичным условиям культивирования.

8. Установлено, что состав биомассы зависит от условий культивирования. При выращивании водорослей в интенсивных условиях при высокой освещенности состав биомассы характеризуется более высоким содержанием (46% на сухой вес) углеводов, представленных преимущественно крахмалом, что. выгодно отличает биомассу клостериопсис от хлореллы.

9. На основе полученных результатов по основным функциональным характеристикам интенсивной культуры клостериопсис (продуктивность, химический и биохимический состав биомассы, элементный состав органического вещества, ассимиляционный коэффициент, качественный состав и количество пигментов, морфология клеток и состояние культуры) и их устойчивости при непрерывном культивировании рассчитан материальный баланс высокопродуктивной популяции клостериопсис, необходимый для определения функций и места водорослей в БСЯО человека.

Р Е К 0 М Е Н Д А Ц И И

I. Изученная форма водорослей - Closteriopsis acicularis var. africana Hind. - может быть рекомендована в качестве компонента фотоавтотрофного звена, основанного на фотосинтезе одноклеточных водорослей, для БСЖО человека. Ее включение в состав звена уже действующих моделей (дополнительно к хлорелле) позволит увеличить долю биомассы в рационе питания за счет высокого содержания углеводов и сбалансировать газообмен между автотрофным и гетеротрофным звеньями в системе за счет более высокой величины ассимиляционного коэффициента клостериопсис.

2. Клостериопсис может быть рекомендована и для производственного культивирования, которое базируется на утилизации энергии Солнца и направлено на решение задачи пополнения пищевых и кормовых ресурсов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ Выбор объектов для первых теоретических и экспериментальных исследований биорегенеративных систем не исходил из каких-либо специальных критериев, которые к тому времени не были еще сформулированы. Он был обусловлен накопленной информацией о физиологии и биохимии водорослей рода Хлорелла, являвшихся с давних пор классическим объектом при изучении различных биологических процессов. Используя хлореллу в качестве модельного объекта исследований удалось решить целый ряд физиолого-экологических проблем, связанных с созданием выс ок о продук тивных фотосинтетических систем, функциональных звеньев, замкнутых экологических систем и моделей БСЖО человека.

Одним из существенных достижений этого этапа исследований является определение основных требований системы к фотосинтетическому звену. Показано, что если регенерация атмосферы и воды в системе может быть обеспечена элементарно простыгл звеном, включающим одно видовую высокопродуктивную популяцию организмов, то обеспечение трофических связей оказывается невозможным в этих условиях. Например, в созданных в настоящее время экспериментальных моделях БСЖО на основе хлореллы использование ее биомассы в пищевом рационе составляет всего 8-10$ от общего веса. Это нельзя объяснить лишь какими-то конкретными недостатками этой водоросли, возможности одного вида недостаточны, чтобы обеспечить полностью разнообразные пищевые потребности человека. Отсюда, молено сделать вывод, что автотрофное звено-определяющее звено системы - должно быть многовидовым. При этом, чем разнообразнее по своим характеристикам будут виды в него входящие, тем полнее такое звено сможет обеспечить связи в системе, в том числе и трофические.

Отбор видов водорослей по специальным критериям, как самостоятельный этап исследовании, отсутствовал при создании БСЖО человека, а природный материал водорослей изучен еще недостаточно. Поэтому создание многовидового звена упирается прежде всего в отсутствие достаточного арсенала хорошо изученных,удовлетворяющих требованиям БСЖО человека одноклеточных водорослей. Таким образом, поиск новых форм водорослей является на данном этапе одной из важных задач.

Нами введена в интенсивную культуру и исследована до уровня функционального звена новая зеленая одноклеточная водоросль Closteriopsis- acicularis var.africana Hind. , ceM.Ankistrodesmaceae. Ранее эта форма не являлась предметом исследований, после выделения из природы она хранилась в коллекции Прата, (ЧССР).

Выполненная работа является первым в литературе комплексным исследованием различных сторон метаболизма клостериопсис применительно к разным режимам культивирования. Исследована зависимость скорости роста клостериопсис от основных факторов среды таких, как температура, освещенность, рН среды, концентрация углекислого газа и кислорода в атмосфере и определены оптимальные значения этих факторов для роста и развития. Установлено, что изученная форма водорослей привода для интенсивного культивирования. Она, способна расти и размножаться в суспензиях высокой плотности в условиях прерывистого освещения, которое создается в результате интенсивного перемешивания суспензии. Клетки клостериопсис способны переносить высокую напряженность факторов среды. Устойчивость их к интенсивности этих факторов и диапазону их колебаний примерно такая же, как это было обнаружено ранее для хламидомонады, и несколько ниже, чем установлено для термофильных штаммов хлореллы.

Изучаемая форма водорослей оказалась термофильной с оптимальной температурой роста и развития в диапазоне 34-36°С. Экстремальная температура, при которой прекращается деление клеток, а фотосинтез еще продолжается, оказалась ниже, чем для хлореллы и хламидомонады, и лежит в диапазоне 37-39°С в зависимости от величины освещенности культуры. У нее также, как и других форм зеленых водорослей, температура для. фотосинтеза и размножения разная. При температуре выше оптимальной величины происходит разобщение нормальных клеточных функций роста и размножения, в результате чего наблюдается гипертрофированный рост клеток. Это свидетельствует о том, что при изучении зависимости скорости фотосинтеза от температуры результаты должны обязательно подтверждаться и уточняться еще и по приросту числа клеток.

Клостериопсис оказалась светолюбивой и устойчивой к повышенным интенсивностям света культурой. Это позволило выращивать ее при уровнях освещенности, намного превышающих порог светового насыщения, найденный для водорослей из того же семейства и характеризующий физиологические особенности клеток. Световое насыщение при высокой плотности суспензии достигается при интенсивности 9 освещения 225-240 вт/м" шАР. Повышение этого порога возможно при увеличении весовой плотности суспензии. Однако, в отличие от хлореллы и хламидомонады, у клостериопсис была выявлена зависимость ее характеристик, помимо продуктивности, от величины освещенности культуры. При переходе с низкой освещенности на высокую продуктивность ее увеличивалась в 8,2 раза, что примерно равно величинам, найденным для других водорослей при культивировании в идентичных условиях. Одновременно с этим изменялся метаболизм водорослей. В частности, снижалось поглощение биогенных элементов из среды и их содержание в биомассе, особенно таких как азот, калий, магний. Изменялся и состав биомассы в сторону увеличения содержания углеводов при эквивалентном снижении количества белка. Это в свою очередь приводило и к изменению величины ассимиляционного коэффициента, которая, как известно, связана теснейшим образом с восстановленностью органического вещества. Такое изменение метаболизма водорослей при увеличении освещенности в пределах светового насыщения ранее не были отмечены для других форм водорослей. Переход на интенсивные условия культивирования приводил и к изменению количества хлорофилла в клетках. Содержание его уменьшалось при высокой интенсивности света почти в два раза по сравнению с экстенсивными условиями выращивания. При этом все эти изменения происходили на фоне высокой и устойчивой продуктивности культуры и при нормальных морфофизиологических характеристик клеток водорослей.

Таким образом, при переходе к высоким интенсивноетям света помимо продуктивности, выгодно изменялись и другие характеристики: увеличивалось содержание углеводов при уменьшении содержания белка, что важно для системы с дефицитом углеводов; повышался ассзмиляционный коэффициент, приближаясь к дыхательному коэффициенту человека; уменьшалось содержание хлорофилла в клетках. Низкое содержание хлорофилла, в клетках представляет интерес для БСЖО с двух точек зрения: во-первых, приводит к улучшению оптических свойств плотных популяций водорослей, что позволяет использовать -энергию света с более высоким КПД, а во-вторых, хлорофилл является нежелательным компонентом при использовании биомассы водорослей в пищевых целях. Следует отметить, что при экстенсивном культивировании состав биомассы и содержание хлорофилла в клетках близко к найденным для хлореллы величинам. Следовательно, при промышленном культивировании, где условия близки к экстенсивным, эта форма также может найти применение для получения кормовых высокобелковых веществ.

Продуктивность клостериопсис оказалась практически равной продуктивности наиболее перспективных штаммов хлореллы и хламидомонады. Для наших условий она превышала 9,0 г/л«сутки, и была устойчивой как в'разных опытах, так и режимах культивирования. Нам кажется, что в дальнейшем она может быть повышена путем оптимизации условий среды и, в частности, минерального питания. В этом направлении исследования должны быть продолжены по пути изучения зависимости скорости роста водорослей от концентрации отдельных элементов в среде, что не входило в зада,чу данной работы.

Данные по зависимости интенсивности фотосинтеза клостериопсис от концентрации углекислоты в воздухе не отличались от результатов, полученных для других форм зеленых водорослей. Насыщающая концентрация углекислоты в воздухе зависела от интенсивности фотосинтеза, т.е. от скорости убыли растворенной углекислоты из среды. Чем выше была, интенсивность фотосинтеза, тем выше и величина насыщающей концентрации.

При изучении влияния концентрации кислорода в атмосфере на фотосинтез водорослей были получены оригинальные данные. Скорость роста водорослей не изменялась при концентрации кислорода в воздухе в пределах 19-50$, и только при снижении-ее ниже 19$ наблюдалось постепенное повышение интенсивности фотосинтеза, которое продолжалось линейно со снижением концентрации 02 до 4,5$ (минимальная в нашем опыте). Полученные результаты показали, что эта форма водорослей исключительно устойчива к высоким концентрациям кислорода, что выгодно отличает ее от изученных ранее других зеленых водорослей - хлореллы и хламидомонады, для которых скорость фотосинтеза снижается пропорционально повышению концентрации 02 вплоть до полного прекращения роста при 50-55$ 02 в воздухе.

Одной из основных характеристик является состав биомассы водорослей. Наши исследования показали, что у клостериопсис он зависит от условии культивирования. При экстенсивных условиях -он близок к составу биомассы хлореллы и спирулины и характеризуется высоким содержанием белка при равных долях углеводов и липидов. В интенсивных условиях при высокой продуктивности культуры состав биомассы отличается высоким содержанием углеводов и низким содержанием бежа. При этом, углеводы представлены в основном крахмалом, что позволяет судить о их высокой пищевой ценности. Состав биомассы в пределах отдельных режимов (экстенсивного и интенсивного) культивирования оказался устойчивым.

Учитывая все эти положительные характеристики клостериопсис, а также наличие разработанного нами метода непрерывного непроточного культивирования, данная форма водорослей может быть рекомендована для включения в состав фотоавтотрофного звена БСЖО. Ее включение позволит оптимизировать функциональные характеристики звена и соответственно системы в целом. Для расчета фувдций в системе и сопряжения материальных потоков внутри звена представлен материальный баланс, который получен при изучении функциональных характеристик высокопродуктивной популяции водорослей клостериопсис.

Наличие этих данных позволяет говорить о готовности объекта к выполнению отдельных функций в составе БСЖО человека.

В заключение следует отметить, что изучение одноклеточных водорослей применительно к БСЖО человека не только актуальная проблема прикладного характера в космической биологии. Ее успехи оказывают большое влияние на разработку проблемы производственного фотосинтеза, который базируется на утилизации энергии Солнца и направлен на решение пищевых и кормовых проблем на нашей планете.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Левинских, Маргарита Александровна, 1983 год

1. Абдуллаев А.А., Семененко В.Е. Интенсивная культураDunaliella salina Теad. и некоторые ее физиологические характеристики. -Физиол.раст., 1974, т.21, вып. 6, с. II45-II54.

2. Алеев Б.С. К физиологии и экологии сапробных водорослей (К физиологии питания A. falcatus Half. )• М.: Госстройиздат, 193224 с.

3. Антонян А.А. Некоторые характеристики интенсивной культуры Anabaena variabilis. В кн.: Управляемый биосинтез и биофизика популяций. Красноярск: Наука, 1969, с. 7-3.

4. Антонян А.А., Лебедева Е.К., Галкина Т.Б. и др. Состав биомассы хламидомонады при различных условиях культивирования. В кн.: Управление биосинтезом микроорганизмов. Красноярск: Наука, 1973, с. 81-82.

5. Аринушкина Е.В. Руководство по химическому анализу почв. М.: изд-во МГУ, 1969 491 с.

6. Баславская С.С., Куликова Р.Ф., Маркарова Е.Н. и др. Изучение фосфорного обмена протококковых водорослей. Науч.докл.высш. ж., биол.науки, 1966, № 2, с. 144-148.

7. Баславская С.С., Феофарова Н.Б. Некоторые данные о росте и составе Scenedesmus quadricauda (Тигр.) ВгеЪ. в условиях аммиачного и нитратного питания. Научн.докл.высш.шк., биол. науки, 1959, JS I, с. 147-153.

8. Белозерский А.И., Проскуряков Н.И. Практическое руководство по биохимии растений. М.: Советская наука, 1951 388 с.

9. Белянин В.II., Болсуновский А.Я. Регулирование видового состава двухкомпоиентного сообщества водорослей в эксперименте.

10. В кн.: Параметрическое управление биосинтезом микроводорослей. Новосибирск: Наука, 1980, с. 72-80.

11. Белянин В.Н., Волкова Э.К., Трубачев И.Н. и др. Продуктивность и биохимический состав хлореллы на различных уровнях освещенности и азотного лимитирования. Физиол.раст., 1975, т. 22, вып. I, с. 55-62.

12. Белянин В.Н., Терсков И.А., Сидько Ф.Я. Эффективность использования лучистой энергии в условиях плотностатного культивирования микроводорослей. В кн.: Непрерывное и управляемое культивирование микроорганизмов. М.: Наука, 1967, с. 82-87.

13. Бердыкулов Х.А., Агзамов А., Нуриева Д. Подбор условий культивирования и некоторые физиологические особенности

14. Ankistrodesmus angustus." Узб.биол.журн., 1977, }?. 3, с. 16-18.

15. Бердыкулов Х.А., Нуриева Д.А. Массовое культивирование некоторых зеленых микроводорослей в открытых установках. Узб.биол. журн., 1980, J£ 3, с. 40-42.

16. Бердыкулов Х.А., Рахимов А.Р., Нуриева Д.А. и др. Массовое культивирование некоторых зеленых микроводорослей в лабораторных и открытых установках. В кн.: Култивирование и применение микроводорослей в народном хозяйстве. Ташкент: фан, 1980,с. I3I-I33.

17. Бойченко В.А., Ефимцев Е.И. 1'1нгибирова,ние активности фотосистемы II у хлореллы при высоких концентрациях кислорода. Физиол. раст., 1979, т. 26, вып. 4, с. 815-823.

18. Борш Э.Т. 0 развитии протококковых водорослей в средах с различным содержанием бикарбоната натрия. В кн.: Биологические процессы в морских и континентальных водоемах. Кишинев: Штиинца, 1970, с. 54.

19. Варасова Н.Н., Васильева В.Е., Пиневич В.В. Фотосинтетически активные пигменты протококковых водорослей и влияние на них условий выращивания. Вест. ЛГУ, сер.биол., 1965, 15, вып. 3, с. 97-104.

20. Величко И.М. Роль магния, кальция и железа в продуктивности некоторых зеленых водорослей. Автореферат канд. диссертации, Киев, 1965 - 16 с.

21. Верзилин Н.Н., Маслов 10.И. Изучение физиолого-биохимических характеристик Euglena gracilis в интенсивной культуре.

22. В кн.: Материалы IX Всесоюзного рабочего совещания по вопросам круговорота веществ в замкнутой системе на основе жизнедеятельности низших организмов. Киев: Наукова думка, 1976, с. 24-25.

23. Вийль 10.А., Лаыск, В.Ойя, Т.Пярншс. Стимулирующее действие кислорода на фотосинтез. Докл. АН СССР, 1972, т. 204, Гз 5, с. 520-526.

24. Владимирова М.Г. Изучение физиологических характеристик одноклеточных водорослей в условиях интенсивной культуры. Автореферат канд. диссертации, Л., 1966 - 20 с.

25. Владимирова М.Г., Кованова.Е.С. Влияние интенсивности света и температуры на вынос азота из среды и накопление его в биомассе хлореллы в условиях интенсивной культуры. В кн.: Управляемый биосинтез. М.: Наука, 1966, с. I5I-I58.

26. Владимирова М.Н., Клячко-Гурвич Г.Л., Курносова. Т.А. и др. Сравнительная характеристика роста и направленности биосинтеза различных штатов хлореллы в условиях азотного голодания.

27. Изучение роста и продуктивности. Физиол. раст., 1968, т. 15, вып. 6, с. 993-1001.

28. Владимирова М.Г., Семененко В.Е. Интенсивная культура одноклеточных водорослей. М.: изд-во АН СССР, 1962 59 с.

29. Владимирова М.Г., Семененко В.Е., Жукова, Т.С. и др. Сравнительное изучение зависимости роста и фотосинтетической продуктивности мезофильного и термофильного штаммов хлореллы от интенсивности света и температуры. В кн.: Управляемый биосинтез.

30. М.: Наука, IS66, с. 93-103.

31. Владимирова М.Г., Семененко В.Е., Ничипорович А.А. Сравнительное изучение продуктивности различных форм одноклеточных водорослей. В кн.: Проблемы космической биологии. М.: Наука, 1962, т. 2, с. 314-325.

32. Бычкова,-Радева Р., Ваклинова С. Ефект на кислорода върху раз-витието на Scenedesmus obliquus L. отгледан на нитратен и амониев азшт. Физиол.раст. (НРБ), 1981, т. 7, JI> I, с. 16-22.

33. Галкина Т.Б. Влияние некоторых условий культивирования хлореллы на морфологические особенности клеток. В кн.: Управляемый биосинтез. М.: Наука, 1966, с. 140-145.

34. Галкина Т.Б. Динамика состава популяции хлореллы при различных условиях культивирования. В кн.: Материалы У1 Всесоюзного рабочего совещания по вопросам круговорота веществ в замкнутой системе. Киев: Наукова, думка, 1969, с. 98-100.

35. Галкина Т.Б., Кашковский И.И., Куралова О.А. и др. Некоторые характеристики роста и газообмена водоросли Anacystis nidulans в интенсивной культуре. В кн.: Проблемы космической биологии. М.: Наука, 1967, т. 7, с. 480-486.

36. Георгиев Д., Аврамова. С. Изследвания върху асимилирането на би-карбонатния йон от Scenedesmus acutus в процеса на фотосин-тезата. Прилок.микробиол. (НРБ), 1977, J5 7, с. 88-92.

37. Георгиев Д., Аврамова С., Николов Н.Н. Фотосинтетично използу-ване на бикарбонатния йон при интенизивно култивиране на Scenedesmus acutus. Растен.наука (НРБ), 1977, Т. 14, № 8, с. 38-45.

38. Герасименко Л.М., Горюнова С.В. Плазменно-ядерное отношение и продуктивность клеток Chlorella vulgaris Beyr. Микро-биол., 1974, т. 43, вып. 3, с. 463-467.

39. Герасимов П.А. Влияние сернокислой меди на водоросли группы

40. Protococcales. Микробиол., 1977, т. 6, вып. I, о. 37-46.

41. Гецен М.В. (ред.) Флора и фауна водоемов Европейского Севера: на примере озер Большеземельской тундры. Л.: Наука, 1978,- 189 с.

42. Гительзон И.И., Терсков И.А., Ковров Б.Г. и др. О формах азотного питания хлореллы в условиях непрерывного культивирования.-Б кн.: Управляемое культивирование микроорганизмов. М.: Наука, 1964, с. 47-55.

43. Голлербах М.М., Подгорная Л.С., Стрельникова Н.И. Основные вопросы систематики протококковых водорослей как объектов массовой культуры. В кн.: Тезисы докладов Всесоюзного совещания по культуре одноклеточных водорослей. Л.: изд-во ЛГУ, 1961,с. 37-40.

44. Горюнова С.В., Герасименко Л.М., Пушева М.А. Роль нуклеотидпеп-тидов в клеточном делении водорослей. М.: Наука, 1930 199 с.

45. Гусев М.В. Влияние растворенного кислорода на развитие сине-зеленых водорослей. Докл. АН СССР, 1962, т. 147, Jp 4, с.47-54.

46. Гусева К.А. Цветение воды, его причины, прогноз и меры борьбы с ним. Труды Всесоюзного гидробиологического общества, 1952, т. 4, с. 3-92.

47. Догадина Т.В. Эколого-систематический обзор протококковых водорослей сточных вод. Научн.докл.высш.шк., биол.науки, 1973,1. J5 2, с. 50-56.

48. Ермаков А.И. (ред.). Методы биохимических исследований растений. Л.: Наука, 1972, с. 58-67.

49. Журкина. В.В. 0 фитопланктоне озера Ханка. Сообщ. Дальневосточ. фил. СО АН СССР, 1956, вып. II, с. 85-90.

50. Зайцева Г.Н., Афанасьева Т.П. Количественное определение углеводов методом нисходящей хроматографии на бумаге. Биохимия, 1957, т. 22, вып. 16, с. 1035-1042.

51. Згуровская Л.Н. Содержание хлорофилла и скорость деления клеток у некоторых водорослей в зависимости от обеспеченности питательных сред фосфором. Гидробиол. журн., 1970, т.6, !>- I,с. 50-55.

52. Иванов А.И. Особенности калественного состава и количественного распределения фитопланктона, Северо-западной части Черного моря. Тр. Всесоюзн. гидробиол. общ-ва, I960, т.10, с.132-196.

53. Карабаев М.К., Глаголева Т.А., Заленский О.В. Влияние кислорода на фотосинтез хлореллы. Бот.журн., 1977, т.62, Г? 6,с. 802-810.

54. Киселев И.А. Обзор фитопланктона рыбоводных прудов Латвийской ССР и некоторые данные о фитопланктоне прудов Литовской ССР.-В кн.: Труды йн-та биологии АН Латв. ССР, т.8, Рыбное хозяйство внутренних водоемов Латв. ССР, 1959, вып.З, с.359-367.

55. Ковров Б.Г., Белянин В.Н. Зависимость роста микроводорослей от концентрации углекислоты. Докл. АН СССР, 1968, т.182, .■£ 3, с.705-708.

56. Комаренко Л.Е., Васильева И.И. Пресноводные водоросли водоемов Якутии. М.: Наука, 1978 283 с.

57. Кондратьева Л.Д., Громов Б.В. Продуктивность некоторых водорослей в лабораторной культуре. Вестник ЛГУ, сер. биол., 1972, вып.1, с.159-161.

58. Кордюм В.А. Перспективы массового выращивания водорослей в целях получения кормовой биомассы. В кн.: Управляемый биосинтез. ГЛ.: Наука, 1966, с.61-68.

59. Коршиков А.А. Визначник присноводных водорослей УТОР, т.У, подаласс протококковых (Protococcinea ), Киев: изд-во АН УРСР, с. 233-290.

60. Кузнецов В.И., Басаргин Н.Н., Мясшцева Л. Г. Усовершенствование метода определения серы в растительных объектах по Шенингеру. Агрохимия, 1988, JS 3, с. 134-137.

61. Кутюрин В.М., Улугбекова М.В., Назаров Н.М. Изменение наблюдаемой скорости фотосинтеза Scenedesmus obliquus с ростом концентрации кислорода в среде. Докл. АН СССР, 1964, т.154, №3, с. 725-727.

62. Лебедева Е.К., Мелешко Г.И., Галкина, Т.Б. и др. Стабилизация концентрации элементов минерального питания при длительном культивировании хлореллы с возвратом среды. Космич. биол. мед., 1963, В 3, с. 16-22.

63. Лебедева Е.К., Мелешко Г.И.f Шахова А.Н. Потребление элементов минерального питания клетками хлореллы в интенсивной культуре. В кн.: Проблемы космической биологии. М.: Наука, 1965, т. 4, с. 687-693.

64. Максимов В.А. Вплив умов фосфорного живления на picT, продуктивность та деяк1 процесси обмлду у протококовоз! водорост1 Ankistrodesirrus "braunii Brunnth . Укр. бот. журн., 1968,т.25, JS 6, с. 15-22.

65. Максимов В.А. Биохимические изменения у некоторых видов хлорококковых водорослей в зависимости от решила фосфорного и калийного тетания. Автореферат канд. диссертации, 1969, Киев - 30 с.

66. Максимова И.В., Камаева С.С., Максимов В.Н., Зависимость эффекта Варбурга у Chlorella pyrenoidosa шт.82 от интенсив- • ности света. Научн. докл. высш. шк., Биол. науки, 1978, 8,с. I07-116.

67. Мелешко Г.И. К вопросу о повышении фотосинтетической продуктивности хлореллы в установках для биологической регенерации воздуха. В кн.: Проблемы космической биологии. М.: Наука, 1964, т.З, с. 410-414.

68. Мелешко Г.И. Физиолого-экологические характеристики популяции хлореллы как звена закрытой системы круговорота, веществ. -Автореферат канд. диссертации, М., 1966 28 с.

69. Мелешко Г.И. Некоторые характеристики популяции хлореллы как звена замкнутой экологической системы. В кн.: Проблемы создания замкнутых экологических систем. М.: Наука, 1967, с. 73.

70. Мелешко Г.И., Антонян А.А., Казаков А.И. и др. Исследование влияния повышенных концентраций кислорода на метаболизм хлореллы. Космич. биол. мед., 1973, т.7, j) 2, с. 41-44.

71. Мелешко Г.И., Антонян А.А., Покровская Е.И. и др. Экспериментальное обоснование условий интенсивного культивирования эвглены цримешттельно к БСЖО человека (Научный отчет ИМЕЛ МЗ СССР по теме й 7313). М., 1900 142 с.

72. Мелешко Г.И., Красотченко Л.М. Условия углеродного питания хлореллы в интенсивной культуре. В кн.: Проблемы космической биологии, гл.: Наука, 1965, т.4, с. 676-682.

73. Мелешко Г.И., Красотченко Л.М., Лебедева Е.К. Особенности регенерации атмосферы в закрытых объемах с помощью фотосинтеза одноклеточных водорослей. Космич. биол. мед., 1931, т.13, J5 6, с. 53-62.

74. Мелешко Г.И., Лебедева Е.К., Антонин А,А. и flp.Chlamydomonas reinhardii 449 в условиях интенсивной культуры. В кн.: Экспериментальная альгология, Труды Петергофского биол. ин-та,

75. Л.: изд-во ЛГУ, 1977, с. 47-67.

76. Мелешко Г.И., Лебедева Е.К., Галкина Т.Е. О балансе макроэлементов при интенсивном культивировании хлореллы. В кн.: Управляемый биосинтез. М.: Наука, 1966, с. 122-127.

77. Мелешко Г.И., Лебедева Е.К., Галкина Т.Е. и др. Стабилизация рН среды и баланса веществ в системе культивирования хлореллы. В кн.: Проблемы создания биолого-технических систем жизнеобеспечения человека. Новосибирск: Наука СО, 1975, с.199-206.

78. Мелешко Г.И., Лебедева Е.К., Курапова О.А. и др. Длительное • культивирование хлореллы с прямым возвратом среды. Космич. биол. мед., 1967, J р. 4, с. 28-32.

79. Мещерякова А.Л. Влияние концентрации растворенной СО^ на скорость роста и фотосинтез хлореллы в условиях интенсивной культуры. Автореферат канд. диссертации, М., 1975 - 25 с.

80. Минаева Л.А. Зависимость фотоавтотрофного и хемотрофного способа существования одноклеточных зеленых водорослей от различных физико-химических условий. Автореферат канд. диссертации,1. М., 1963 18 с.

81. Муза,шаров A.M., Бердыкулов Х.А., Агзамов А. и др. Некоторые физиологические особенности нового штамма Ankistrodesmus angustus в массовой культуре. В кн.: Культивирование и применение микроводорослей в народном хозяйстве. Ташкент: Фан,1977, с. 32-34.

82. Ничипорович А.А., Семененко В.Е., Владимирова М.Г. Интенсификация фотосинтетической продуктивности культуры одноклеточных водорослей. Изв. АН СССР, 1962, сер. биол., 1962, $ 2,с. 163-172.

83. Обух П.А. Хлорококковые водоросли Молдавии. Кишинев: Штиинца,1978, с. 45.

84. Одум 10. Основы экологии. М.: Мир, 1975 740 с.

85. Паламарь-Мордвинцева Г.М. Потреба АнкЗстродесмуса Брауна (Ankistrodesmus braunii Brunnth. ) в зал1з1. Укр. бот. журн. , 1968, т.25, J2 I, с. 21-28.

86. Палатрь-Мордвинцева, Г.М. Азотне живлення Ankistrodesmus braunii Brunnth. Укр. бот. журн., 1969, т.26, В 4, с.64-69.

87. Паламарь-Мордвинцева Г.М., Костлан Н.В. Вплив рйзних джерел-азоту на розвиток i утворення 6ijnca у Ankistrodesmus braunii Brunnth. Укр. бот. журн., 1965, т.22, J? 4, с. 91-96.

88. Паламарь-Мордвинцева Г.М., Петенко К.П., Полиморфизм в Ankistrodesmus braunii Brunnth. . II. Укр. бот. журн., 1966, т.23, JS 2, с. 60-65.

89. Паршшсов В.Н. 0собливост1 жпрнокислотного складу окремних клаciB л!п1д1в npOTOKOKKOBOi B0fl0p0CTi Ankistrodesmus braunii Brunnth. -Укр. бот. журн., 1979, т.36, й 2, с. II7-II9.

90. Пахомова М.В. Биохимические исследования некоторых видов водорослей. Автореферат канд. диссертации, М., 1963 - 31 с.

91. Пиневич В.В., Верзилин Н.И., Маслов Ю.И. Влияние различныхисточников азота на рост и накопление массы Chlorella pyrenoi-dosa . Вестник ЛГУ, сер. биол., IS6I, т.9, вып.2, с. 16-26.

92. Пиневич В.В., Верзилин Н.Н., Михайлов А. А. Изучение spirulina platensis нового объекта высокопродуктивного культивирования. - Физиол.рас., 1970, т.17, вып.5, с. 1037-1045.

93. Пиневич В.В., Никифорова Л.Ф. Некоторые данные по нуклеотидно-му составу и содержанию ДНК и РНК у некоторых протококковых водорослей. Весник ЛГУ, сер. биол., 1964, т.12, вып.З,с. 97-104.

94. Плохинский Н.А. Биометрия. И.: изд-во МГУ, 1970, с. 33-34.

95. Полянский В.И. К флоре Череповецкого района Вологодской области. Труды Бот. ин-та АН СССР, сер.2, 1950, вып. 6, с.88-125.

96. Поповская Г.И. 0 фитопланктоне дельтовых проток р. Селенги. -Изв. Сиб. отд. Ml СССР, I960 a, JS 3, с. 71-80.

97. Поповская Г.И. Фитопланктон залива. Провал озера, Байкал. -Изв. Сиб. отд. АН СССР, I960 б, .Ь 9, с. 145-156.

98. Приймаченко А.Д. Фитопланктон Днепровско-Бугского лимана. Киев: изд-во АН УССР, 1956, с.59.

99. Протасова Н.Н., Кефели В.А. Фотосинтез и рост высших растений, их взаимосвязи и корреляции. В кн.: Физиология фотосинтеза. М.; Наука, 1962, с. 251-270.

100. Рабинович Е. Фотосинтез. М.: изд-во Иностран. лит., 1951, т.1 648 с.

101. Рабинович Е. Фотосинтез. М.: изд-во Иностр. лит., 1853, т.2 651 с.

102. Радзимовский Д. До характеристики фз.топланктону водойм Вшни-чини. Журн. Bio-зоол.циклу Всеукр. АН, 1934, т.З, J3 7,с.21-52.

103. Рахимов А., Исмаилходжаев Б. 0 некоторых биологических особенностях Ankistrodesmus angustus Bern, в интенсивной культуре. В кн.: Систематика, экология водорослей и грибов Средней Азии. Ташкент: Фан, 1931, с.70-74.

104. Рерберг М.С., Воробьева Т.И. Сравнительный рост протококковых водорослей на минеральных средах и органической среде "Б", В кн.: Управляемое культивирование-микроорганизмов. М.: Наука, 1964, с.ПО-119.

105. Русина О.Н. Некоторые вопросы массового культивирования протококковых водорослей. В кн.: Первичная продукция морей и внутренних вод. Минск: изд-во Мин. высш., ср.спец. и просо, обр. БССР, 1961, с.339-341.

106. Савкин В.И. Исследование процесса выделения человеком углекислого газа. В кн.: Проблемы создания замкнутых экологических систем. М.: Наука, 1967, с.114-118.

107. Сапожников. Д.И. (ред.) Пигменты пластид зеленых растений и методика их исследования. М-Л.: Наука* 1964 121 с.

108. Семененко В.Е., Владимирова М.Г., Кованова Е.С. и др. Динамика. и функциональная активность хлорофилла при адаптивных перестройках клеток хлореллы в интенсивной культуре. В кн.:

109. Материалы IX Всесоюзного рабочего совещания по вопросам круговорота веществ в замкнутых системах на основе жизнедеятельности низших организмов. Киев: Наукова. дутлка, 1976, с.121-125.

110. Семененко В.Е., Владимирова М.Г., Ничипорович А.А. Некоторые принципы интенсификации фотосинтетической продуктивности культуры одноклеточных водорослей. В кн.: Проблемы космической биологии. М.: Наука, 1962, т.2, с.326-338.

111. Седова Т.В. Основы цитологии водорослей. Л.: Наука, 1977 172 с.

112. Сидоренко Л.А. Некоторые физиолого-экологические характеристики хламидомонады как объекта биологических систем жизнеобеспечения человека. Автореферат канд. .диссертации, М., 1975 - 24 с.

113. Сиренко JI.А. Гетерогенность клеток водорослей в популяции и ее значение в адаптации к экстремальным факторам среды.

114. В кн.: Проблемы экологии Прибайкалья. Тезисы к Российскому республиканскому совещанию. Иркутск, 1979, с.103-104.

115. Смирнов Н.Н. Влияние различных химических, световых и температурных ре:шмов на развитие кормовых протококковых водорослей. Автореферат канд.диссертации, М., 1953 - 16 с.

116. Спекторов К.С. 0 взаимоотношении процессов роста и развития у Chlorella pyrenoidosa Pringsh. 82-Т. Автореферат канд. диссертации. М., 1968 - 30 с.

117. Спекторов К.С., Никольская Т.В. 0 влиянии формы азотного питания на биологические показатели цикла развития у Chlorella pyrenoidosa Pringsh. 82-Т. Физиол.раст., 1971, т.18, вып. 2, с.289-298.

118. Спекторова Л.В. Синхронные культуры как метод сравнения потенциальной продуктивности штаммов хлореллы. Автореферат канд.диссертации, М., 1966 - 16 с.

119. Спекторова Л.В. Определение потенциальной продуктивности у Chlorella методом синхронных культур. Бот.яурн., 1967, т.52, вып. I, с.73-81.

120. Спекторова Л.В., Клешнин А.Ф., Спекторов К.С. Исследование динамики процесса фотосинтеза на интактных суспензиях синхронных культур хлореллы. Физиол.раст., 1968, т.15, вып.1, с.26-33.

121. Срэценская Н. . Пратакокавыя водарасщ. саяалак Беларускага Палесся. Becni АН БССР, сер.б ял.навук, I960, J2 I,с.32-39.

122. Степанова A.M. Влияние светового фактора на рост и фотосинтез хлореллы. Вестник ЛГУ, сер.-биол., 1963, т.21, J3 4,с.72-85.

123. Тагеева С. В., Коршунова В. С., Михневич M.JI. Рост и развитие культуры Chlorella pyrenoidosa Pringsh. 82-Т в зависимости от формы азотного питания. В кн.: Проблемы создания замкнутых экологических систем. М.: Наука, I9S7, с.78-91.

124. Терсков И.А., Гительзон И.И., Сидько Ф.Я. и др. Интенсивное непрерывное культивирование хлореллы в илотностатном режиме при различной освещенности. В кн.: Управляемое культивирования микроводорослей. М.: Наука, 1964, с.55-84.

125. Терсков И.А., Гительзон И.И., Сидько Ф.Я. и др. Блотностат-ное непрерывное культивирование хлореллы при различных ос-вещенностях. В кн.: Проблемы космической биологии, 1965, т.4, с.683-686.

126. Троицкая О.В. К морфологии и систематике протококковых во-дорослой. В кн.: Споровые растения. Л.: изд-во АН СССР, 1933, вып. I, с.115-246.

127. Трубачев И. Н., Барашков В, А., Калачева, Г. С. и др. Одноклеточные водоросли потенциальный источник пищевого сырья. Крастоярск: Ин-т физики СО АН СССР, 1977 - 89 с.

128. Трухин Н.В. Продуктивность протококковых водорослей, выделенных из различных географических районов. Автореферат канд.диссертации, 1,1., 1964 - 16 с.

129. Трухин Н.В. Сравнительная оценка продуктивности роста протококковых водорослей в условиях массовой культуры. В кн.: Продуцирование и круговорот органического вещества во внутренних водоемах. М-Л.: Наука., 1963, с.216-221.

130. Трухин Н.В., Микрякова. Т.®. Влияние температуры и интенсивности света на. направленность биосинтетических процессов у термофильного штамма хлореллы. Физиол.раст., 1969, т.16, вып. 6, с.1002-1007.

131. Упитис В.В., Пакалне Д.С. Действие железа на рост и химический состав одноклеточных водорослей. В кн.: Микроэлементы и продуктивность растений. Рига: изд-во АН Латв.ССР, 1965, с.127-137.

132. Фокина О.В. Хлорококковые водоросли прудов Северного Прикас-пия. В кн.: Ботаническая география Северного Прикаспия. JE.: Наука, 1977, с.80-90.

133. Федоров В.Д., Максимов В.II., Хромов В.М. Влияние света и температуры на первичную продукцию некоторых одноклеточных зеленых и диа.томовых водорослей. Физиол.раст., 1968, т. 15, вып. 4, с.640-651.

134. Филипповский 10.Н., Семененко В.Е., Ничипорович А.А. и др. Распределение лучистой энергии в популяции водорослей в связи с их фотосинтетической продуктивностью. Биоэнергетикаи биологическая спектрометрия. М.: Наука, 1967, с.231-241.

135. Циолковский К.Э. Исследование мировых пространств реактивными приборами. В кн.: К.Э.Циолковский, собр.соч., т.2, М.: Наука, 1954, с.100-139.

136. Цоглин Л.Н., Владимирова М.Г. Влияние особенностей жизненного цикла клетки на рост популяции микроводорослей. -Физиол.раст., 1973, т.20, вып. 5, с.960-966.

137. Цоглин Л.Н., Владимирова М.Г., Семененко В.Е. Математическое и экспериментальное моделирование процесса автоселекции микроводорослей в условиях проточного культивирования. -Физиол.раст., 1970, т.17, вып. 6, с.1129-1139.

138. Шьпокова Э.1. Вутлеводний склад культур деяких зеленых водорослей, його сезонная вч-сова м1нлив1сть. Укр,бот.журн., 1980, т.37, JS 2, с.1-6.

139. Шоякубов Р.Ш. 0 новом штамме протококковой водоросли Ankistrodesmus angustus Bern. В кн.: Культивирование и применение микроводорослей в народном хозяйстве. Ташкент: Фан, 1930, с.45-48.

140. Шоякубов Р.Ш., Абдуллаев А.А., Кутлиев Дж. 0 возможности использования нового штамма Ankistrodesmus angustus Bern.

141. УА-З-I в очистке сточных вод птицефабрики "Узбекистан". -В кн.: культивирование и применение микроводорослей в народном хозяйстве. Ташкент: Фан, 1930, с.48-49.

142. Эргашев А.Э. Протококковые водоросли Средней Азии. Ташкент: Фан, 1977 354 с.

143. Эргашев А.Э. Определитель протококковых водорослей Средней Азии. Ташкент: Фан, 1979, т.2, с.239-317.

144. Эргашев А.Э., Порядила С.Н., Айтбаев К. К культивированию Ankistrodesmus minutissimus Korschik. В кн.: Водоросли и грибы Средней Азии. Ташкент: Фан, 1974, вып. I, с.24-23.

145. Яаска В.Э. Зависимость продуктивности и химического состава некоторых штаммов протококковых водорослей от азотистого питания. Автореферат канд.диссертации, Тарту, 1965 - 23 с.

146. Algeus S. Further studies on the utilization of aspartic acid, succinamide and asparagine by green algae. Physiol, plant., 1950, v.3, N4, pp.102-10^.

147. Baker M.D., Mayfield C.I., Inniss W.P. et al. Toxicity of pH, heavy metals and bisulfite to a fresh water green algae.- Chemosphere, 1983, v.12, N1, pp. 35-44.

148. Barber J. Measurement of the membrane potencial and evidence for active transport of ions in Chlorella pyrenoidosa.- Biophim. biophys. Acta, 1968, v.I50, pp.618-625.

149. Barna A., Nagy-Toth F., Peterfi S. Influenta pH-ului asupra cresterii algei Scenedesmus acutiformis in culturi intensive.- 181

150. Contrib. bot. Univ. "Babes Bolyai", Сluj,1974, pp.149-155.

151. Baumeister W., Conrad D. Uber Bezienhungen zwischen der Nat-riumversorgung und dem Phosphathaushalt bei Scenedesmus ob-liquus (Turp.) Kuetz. Ber. Dtsch. bot.Ges., 1966, Bd.79, N1, s.15-26.

152. Beardall J., Morris I. Effects of environmental factors on photosynthesis patterns in Phaeodactylum tricornutum (Baci-llariophyceae). J.Phycol., 1975,v.II, N4,pp.450-454.

153. Birdsey B.C., Lynch Y.N. Utilization of nitrogen compounds by unicellular algae. Science, 1962, v. 157, N5552,pp.765-764.

154. Brown D.L., Tregunna E.B. Inhibition of respiration during photosynthesis by some algae. Can. J. Bot., 1967, v.45, pp. И55-И45.

155. Champigny M.L. Les amino-acides des Chlorella cultivtees en1 tpresence de No^k on d^'uree. Quatilas plant.et Mat.Vegetables, 1958, v. III/IV, pp. II5-I50.••#• • •

156. Dersch G. Mineralsalzmangel und Sekundarcarotinoidfe in Gru-nalgen.-Flora, I960, v.149, pp.566-605.

157. Dohler G. Einfluss von Sauerstoff auf die photosynthetische C02 Fixierung von Synechococcus. - Z-. Naturforsch. Ser. C., 1981, Bd.56, N1-2, s. 93-97.

158. Eisele R., Ullrich W.D. Effect of glucose and Co2 on nitrate uptake and coupled OH flux in Ankistrodesmus braunii. Plant Physiol., 1977, v.59, N1, pp.18-21.

159. Elder J.F., Fuller R.H., Home A.J. Physicochemical factors and their -effects on algal growth in a new southern California reservoir. Water. Resour. Bui., 1979, V.I5, N6, pp.1608-1617.

160. Emerson R., Arnold W. A separation of the reactions in photosynthesis by means of intermittent light.- J. Gen. Physiol., 1932, v. 15, pp.591-420.

161. Emerson R., Green L. Effect of hydrogen ion concentration on Chlorella photosynthesis.- Plant Physiol., I938,v*I3, HI, pp.157-167.

162. Fedina I.S. Effect of oxygen on the intensity of photosynthesis in Scenedesmus obliquus cultivated on nitrate and ammonium, nitrogen. -Докл. болг. Акад. наук, 1980, т.33,1. MI, с.1521-1524.

163. Findenegg G.R. Inorganic carbon transport in microalgae.II.

164. Uptake of HCo^ ions during photosynthesis of five micro-algal species. - Plant Sci.Lett., 1980, v.18, N3, pp.289-297

165. Fischer S., Simonis W. Tagesperiodische Schwankungen und lichtinduzierte Zunahme der Nitratreduktase-Aktivitat bei Synchronkulturen von Ankistrodesmus braunii. Z. Pflanzen-physiol., 1979, Bd.92, N2, s.I4-3-I52.

166. Fock H., Canvin D. Effects of oxygen and carbon dioxide on photosynthetic C^ evolution and Co2 uptake in sunflower and Chlorella* Photosynthetica, 1971, N5, pp.389-394.

167. Folfoldy L.J.M. On the role of the pH and inorganic carbon sources in photosynthesis in unicellular algae. Acta biol. Acad.sci.Hung., 1962, v.13, N2, pp.207-214.

168. Gaucher T.A., Beneit R.J., Bislecki A. Mass propagation of algae for photosynthetic gas exchange. J. Biochem.Microbiol. Technol. Eng., I960, N2, pp.339-359.-183

169. Genthner S.-R. Measurement of primary productivity in dense algal cultures. Can.J.Fish. Aquat. sci., I983,v.40, N6, pp.807-810.

170. Gotham J.J., Rhee G.-Y. Comparative kinetic studies nitrate-limited growth and nitrate uptake in phytoplankton in continuous culture. -J. Phycol., 1981, v.17, N4, pp.309-314.

171. Grobellaar J.V. Potential of algal production.- Water S.A., 1982, N2, pp.19-85.

172. Guerri M., Brunei L., Danta A. Interaction de la lumiereet de la temperature sur le taux de croissance de Scenedes-mus crassus. Ann. limnol., 1981, v.17, N2, pp.97-104.

173. Guminski S., Jurajda K., Tatkowska E. The influence of the redox potential of the medium on the growth of some Chloro-phyceae. Oceanologia (PRL), 1983, v.17, pp.29-33.

174. Hajdu L, Neue Taxa und Kombinationen bei den Grunalgen (Chlorophyta) aus Ungarn. Ann. Hist.-nat.Mus.Nat.Hung., 1975, Bd.67, s.25-30.

175. Hellmann V., Kessler E. Physiologische und Biochemische Beitr^ge zur Taxonomie der Gattungen Ankistroaesmus und Scenedesmus.III. Die Basenzusammenzetzung der DNS.- Arch. Mikrobiol., 1974, Bd.IOO, N3, s.239-242.

176. Heynig H. Interessante Phytoplankter aus Gewasseu des Bezirks Halle (DDR).III. Arch. Protisten K., 1980, Bd.I23, N3, s.349-357.

177. Hindak F. A contribution to the systematics of the family Ankistrodesmaceae (Chlorophyceae). Algol. Stud. (Trebon), 1970, N1, pp.7-32.

178. Hindak F. Studies on the chlorococcal algae (Chlorophyceae). I. Biol, prace, Bratislava, veda, 1977, XXIII(4),pp.77-117.

179. Hipkin С.R., Syrett P.J. Some effects of nitrogen-starvation on nitrogen and carbohydrate metabolism in Ankistrodesmus braunii.- Planta, 1977, v.133, pp.209-214.

180. Hopkins E.F., Wann F.B. The effect of the H-ion concentration on the availability of iron for Chlorella sp.- J. Gen. Physiol., 1925, v.9, N3, pp.205-210.

181. Jorgensen E.G. The adaption of plancton algae. IV. Light adaption in different algal species. Physiol. Plant., 1969, v.22, N6, PP.I307-I3I5.

182. Kessler E. Uber den Mechanismus der Nitratreduction von Griinalgen. Flora, 1953, N140, s.I-38.195* Kessler E. Fhysiologische und Biochemische Beitrage zur

183. Taxonomie der Gattungen Ankistrodesmus und Scenedesmus. II. Saureresistenz. Arch. Mikrobiol., 1967, Bd.58, N3, s.270-274.

184. Kessler E. Physiological and biochemical contributions to the taxonomy of the genera Ankistrodesmus and Scenedesmus.1.. Salt tolerance and thermophily.- Arch. Microbiol., 1977,1. V.II3, N1-2,pp.143-144.

185. Kessler E. Physiological and biochemical contributions to the taxonomy of the genera Ankistrodesmus and Scenedesmus. V. Starch hydrolysis and new assignment of strains. Arch. Microbiol., 1980, v.126, N1, pp.II-I4.

186. Kessler E., Czygan F.-C. Physiologische und Biochemische Beitrage zur Taxonomie der Gattungen Ankistrodesmus und Scenedesmus. I. Hydrogenase, Sekundar-Carotinoide und Gela-tine-Verflusigung. Arch. Mikrobiol., 1967, Bd.55, N4,s.320-326.

187. Kessler E., Soeder C. Biochemical contribution to the taxonomy of the genus Chlorella.- Nature, 1962, v.194, N4833, p.1096.

188. Kirk D.L., Kirk M.M. Amino acid and urea uptake in ten species of Chlorophyta. J. Phycol., 1978, v.14, N2, pp.198-203.

189. Kiss I. Morphologische Variabilitat und Zellteilungsformen einer Ankistrodesmus.- Art. Acta bot. Acad. sci.Hung., 1964, N10, pp.289-298.

190. Kitoh S, Hori S. Synchronous culture of Chlorella e'llipsoi-dea in a medium containing urea as a nitrogen source.- Ann. Kept. Radiat. Cent., 1968, N9, pp.77-80.

191. Kobayashi M. Control of cell division in a green alga Ankistrodesmus gracilis. Plant and Cell Physiol., 1974, v.15, N6, pp.1017-1026.

192. Kobayashi M., Ito M. Studies on the control of cell division in a green alga Ankistrodesmus gracilis (Chlorococcales).III. Induction synchrony with controlled division patterns.- Plant and Cell Physiol., 1979, v.20, N6, pp.II5I-II55.

193. Кок B. Photosynthesis in flashing light.- Biochim. Biophys. Acta, 1956, v.2I, pp.245-253.

194. Kolina T. Die Bedoutung des Chloroplasten fur die Taxonomie von Chlorococcalen Grtinalgen. Preslia, 1968, v.40, pp.342349.

195. Kushner D.J., Massalski A., Laube V.M. Effects of cadmium and copper on the ultrastrueture of Ankistrodesmus braunii and Anabaena 7120.- Microb. Ecol., 1981, v.7, H2, pp.I83-193.

196. Lafeber A., Steenbergen C.L.M. Simple device for obtaining synchronous cultures of algae. Nature, 1967, N215, pp.527531.

197. Legnerova J. The genera Ankistrodesmus Corda and Eaphidium kutzing and their position in the family Ankistrodesmaceae. Preslia, 1965, N37, pp.1-8.- 186

198. Liersch R. Uber das atherische 01 von Grunalgen. II. Die Oleder Gattungen Ankistrodesmus und Scenedesmus. Arch. Mikro-biol., 1976, Bd.I08, N3, s.313-315.

199. Mac Carthy J.J., Patterson G.M. Effect of cation level of the nutrient medium on the biochemistry of Chlorella. Plant Physiol., 1974, v.54, N2, pp.129-136.

200. Maddux W.S., Jones R.F. Some interactions of temperature, light intensity and nutrient concentration during the continuous culture of Nitzschia closterium and Tetraselmis sp. -Limnol. Oceanogr., 1964, N9, pp.79-86.

201. Malis-Arad S., Friedlandes M., Ben-Arie R. et al. Alkalinity-induced aggregation in Chlorella vulgaris. I. Changes in cell volume and cell-wall structure. Plant and Cell Physiol., 1980, v.2I, N1, pp.27-33.

202. Mc Combie C.D. Actions and interactions of temperature, light intensity and nutrient concentration of the green alga Chla-mydomonas reinhardii. J. Pish. Res. Bd. Can., I960, v.I7, pp.871-894.

203. Mc Millan R. Morphogenesis and polymorphismus of Ankistrodesmus sp. J. Gen. Microbiol., 1937, v.17, N3, pp.658-677.

204. Merret M.J., Armitage T.L. The effect of oxygen concentration on photosynthetic biomass production by algae.- Planta, 1982, v.155, N1, pp.95-96.

205. Metzner H., Lorenzen H. Untersuchungen uber den Photosynthese-Gaswechsel an vollsynchronen Chlorella-kulturen.- Ber.dt.bot. Ges., I960, v.73, s.410-417.

206. Morimura I. Synchronous culture of Chlorella.I. Kinetic analysis of the life cycle of Chlorella ellipsoidea as affected by changes of temperature and light intensity. Plant and Cell Physiol., 1959, v.I, pp.49-63.- 187

207. Myers J.J. Culture conditions and the development of the ' photosynthetic mechanism. IV. Influence of light intensity on photosynthetic characteristics of Chlorella-.- J. Gen. Physiol., 1946, v.29, pp.429-440.

208. Myers J.J., Brown A.H. Gas regeneration and food production in a closed ecological system. Washington: Nat. Council Publ, 1961, 893p.

209. Myers J.J., Cramer M. Nitrate reduction and assimilation in Chlorella. Metabolic conditions in Chlorella. J. Gen. Physiol. , 1948, v.32, N1, pp.I32-I4I.

210. Nakamura H. Chlorella food for animal husbandry. Tokyo: publ. by international Chlorella vulgaris union, 1964, 46Ip.

211. Nakamura Y., Miyachi S. Effects of temperature and Co2 concentration on photosynthetic Co2 fixation by Chlorella.-Plant and Cell Physiol., 1980, v.21, N5, pp.765-774.

212. Nilsen S., Johnsen 0. Effect of Co2 » 02 and diamax on photosynthesis and photorespiration in Chlamydomonas reinhardii (green alga) and Anacystis nidulans (Cyanobacterium, blue-green alga). Physiol. Plant., 1982, v.56, N3, pp.273-280.

213. Ogawa Т., Fujii Т., Aiba S. Effect of oxygen on the growth (yield) of Chlorella vulgaris. Arch. Microbiol., 1980,1. V.I27, N1, pp.25-31»

214. Olimid V. Influenta unor saruri minerale cu azot si fosfor asurpa acumularii biomasei la alge. An. Univ. Craiova Biol., sti., agr., 1973, N5, pp.92-95.

215. Pandey U.C., Tiwari G.I., Pandey D.C. Additions to the Algal-flora of Allahabad. VII. Chlorophyta, Chlorococcales.-Proc. Indian Nat. Sci. Acad., B, 1981, v.47, N2, pp.255259.

216. Pirson A. Ernahrungs und stoffwechselphy- siologische unter-suchungen an Pontinalis und Chlorella. Z. Botan., 1957, Bd.51, s.193-267.

217. Pirson A., Lorenzen H. Synchronized dividing algae. Ann. Rev. Plant Physiol., 1966, v.17, pp.459-458.

218. Pirson A., Tichy C., Wilhelmi G. Stoffwechsel und Mineral-salzernahrung einzelliger Grunalgen. I. Vergleichende Unter-suchungen au Mangelkulturen von Ankistrodesmus. Planta, 1952, v.40, pp. 199-255.

219. Pope D.H. Effect of light intensity, oxygen concentrationand carbon dibxide concentration on photosynthesis in algae.-Microb. Ecol., 1975, v.2, N1, pp.I-I6.

220. Prat S., Dvorakova J, Baslerova M. Cultures of algae in various media. Prague: Academia, 1972, pp.53-58.

221. Pratt R. Studies on Chlorella vulgaris.VIII. Influence on photosynthesis of prolonged exposure to sodium bicarbonate and potassium bicarbonate. Amer. J. Bot., 1945, v.30, N8, pp.626-630.

222. Prescott G.W. Algae of the Western Great Lakes Area. -Cranbook Inst. Sci., 1951, v.51, p.481.

223. Prescott G.M. A guide to the literature on ecology and life . histories of the algae. Bot. Rev., 1956, v.22, pp.167-240.

224. Proctor V.W. Preferential assimilation of nitrate by Haema-tococcus pluvialis. Amer. J. Bot,, 1957, v.44, N2, pp.141i43.

225. Pulich W.M., Ward C.H. Physiology and ultrastructure of an oxygen-resistant Chlorella mutant under heterotrophic conditions. Plant Physiol., 1973, v.51, N2, pp.337-344.

226. Quebedeaux В., Hardy R.W.F. Oxygen as a new factor controlling reproductive growth. Nature, 1973 > v.243, pp.477-484.

227. Raven J.A. Exogenous inorganic carbon sources in plant photosynthesis. Biol. Rev., 1970, v.45, pp.167-221.

228. Richardson K., Beardall J., Raven J.A. Adaptation of unicellular algae to ,irradiance$ an analysis of strategies. New Phytol., 1983, v.93, N2, pp.157-191.

229. Richmond A., Karg S., Boussiba S. Effects of bicarbonate and carbon dioxide on the competition between Chlorella vulgaris and Spirulina platensis. Plant and Cell Physiol., 1982, v.23, N8, pp.I4II-I4I7•

230. Senger H., Bishop N.I. The light dependent formation of nucleic acids in cultures of synchronized Chlorella. -Plant and Cell Physiol., 1966, v.7, pp.441-446.

231. Shelp B.J., Canvin D.T. Photorespiration and oxygen inhibition of photosynthesis in Chlorella pyrenoidosav Plant

232. Physiol., 1980,v.65, N5, pp.780-784.

233. Simonis W., Urbach \V. Uber eine Wirkung von Natrium-Ionen auf die Phosphataufnahme und die lichtabhangige Phosphory-lierung von Ankistrodesmus braunii. Arch. Mikrobiol., 1963, Bd.43, N3, s.265-286.

234. Sironwal C., Kandler 0. Photoxidation processes in normal green Chlorella cell. Biochim. Biophys. Acta, 1958, v.29,N2, PP.359-368.

235. Smayda T.J. Experimental observations on the influence of temperature, light and salinity on cell division of the marine diatom Detonula confervaceae (Cleve) Gran. J. Phycol., 1969, N5, pp.150-157.

236. Smith G.M. The fresh-water algae of the United States. London-N.Y.: Mc Graw-Hill book Co., 1933, p.508.

237. Soeder C., Stengel E. Physico-chemical factors affecting metabolism and growth rate. In: Algal physiology and biochemistry. Oxford: Blackwell, 1974, 989p.

238. Sorokin C. Injury and recovery of photosynthesis. The capacity of cells of different developmental stages to regenerate their photosynthetic activity. Physiol. Plant., I960, v.13, pp.20-35.

239. Sorokin C., Carbett M.K., Nishino S. Helical chloroplasts ina Stichococcus-type alga. J. Phycol., 1972, v.8, N2, pp.152156.

240. Sorokin C., Krauss R. The effect of light intensity on the growth rates of green algae. Plant Physiol., 1958, v.33,1. N2, pp.109-113.

241. Sorokin C., Krauss R. Relative efficiency photosynthesis the course of cell development.- Biochim. Biophys. Acta, 1961, v. 48, N2, pp.236-239.- 191

242. Sorokin С., Krauss R. Effects of temperature and illuminance on Chlorella growth uncoupled from cell division. -Plant Physiol., 1962, v.37, pp.37-42. 2-58. Sorokin C., Krauss R. The dependence of cell division in

243. Chlorella on temperature and light intensity. Am. J. Bot., 1965, v.52, N4, pp.331-339. 259» Sorokin C., Myers J. A high-temperature strain of Chlorella.-Science, 1953, v.117, N3039, pp.330*331.

244. Sorokin C., Myers J. The course of respiration during the life cycle of Chlorella cells.- J. Gen. Physiol., 1957, v.40, pp.579-584.

245. Spoehr H.A., Milner H.W. The chemical composition of Chlorella: effects of environmental conditions. Plant Physiol., 1949, v. 24, N1, pp.120-149.

246. Syrett P.J. The assimilation of ammonia and nitrate by nitrogenstarved cells of Chlorella vulgaris. I. The assimilation of small quantities of nitrogen. Physiol. Plant.,1955, v.8, N4, pp.924-928.

247. Syrett P.J. The assimilation of ammonia and nitrate by nitrogenstarved cells of Chlorella vulgaris. II. The assimilation of large quantities of nitrogen. Physiol. Plant.,1956, v.9, HI, pp.19-27.

248. Tamiya H, Synchronous culture of algae. Ann. Rev. Plant Physiol., 1966, v.I7, pp.1-26.

249. Throm G. Einfluj3 von Hemmstoffen und des Redoxpotentials auf die lichtabhangige Anderung des Membranpotentials bei Griffithsia setaceae. Z. Pfl.Physiol., 1971, Bd.64,s.281-296.

250. Toth Pr., Bercea V., Barna A.et al. The dynamics of photo-synthetic pigments and the productivity of some Scenedesmusspecies. Rev. roum. biol., Ser. biol. veg., 1980, N1, pp. 21-43.

251. Trainor F.R. Algal morphogenesis: nutritional factors. Ann. N.y. Acad. Sci., 1970, v.175, pp.749-756.

252. Trainor F.R., Burg C.A. Motility in Scenedesmus dimorphus, Scenedesmus obliquus and Coelastrum microporum. J. Phycol., 1965, N1, pp.15-18.

253. Turner J.S., Brittain E.G. Oxigen as a factor in photosynthesis. Biol. Rev. Cambridge Phil. Soc., 1962, v.37,pp.130-170.

254. Ullrich W.R. Einfluj? von Co2 und pH auf die ^2P-Markierungvon Polyphosphaten und organischen Baosphaten bei Ankistrodesmus im Licht. Planta, 1972, v.102, pp.37-54.

255. Wagner F.W., Weich B.E. Oxygen tolerant strain of Chlorella sorokiniana. J. Appl. Microbiol., 1969, v.17,pp.139-144.

256. Wanka P. Uber die Induktion der Zellteilung in synchronen Chlorella-kulturen.- Planta, 1968, v.79, N1, pp.65-77.и

257. Warburg 0. Uber die Geschwindigkeit der photochemischen-saurezersetzung in lebenden Zellen. II.- Biochem. Z., 1920, Bd.I03, s.188-217.

258. Watts Pirt M., Pirt S.J. The influence of carbon dioxide and partial pressures on Chlorella growth in photosynthetic steady-state cultures. J.Gen. Physiol., 1980, v.119, N2, pp.321-326.

259. V/awrik P. Neue und seltene- und Nannoalgen aus Teichen des Waldviertels. II. Arch. Protistenk., 1977, Bd.II9, s.407-417.

260. Whitford L.A., Schumacher G.J. A manual of the fresh-water algae in North Carolina. N.C.: Raleigh, 1969, p.48.

261. Williams V.R., Mc Millan R. Lipids of Ankistrodesmus brau--nii. Science, 1961, v.133, N3451, pp.459-460.

262. Wilson А.Т., Calvin M. The photosynthetic cycle Co2-depen-dent transients. J. Amer. Chem. Soc., 1955, v.77, N4, pp.5948-5997.

263. Wright D.C., Berg L.R., Patterson G.W. Effect of cultural conditions on the sterols and fatty acids of green alga.-Phytochemistry, 1980, v.19, N5, pp.783-785.

264. Zahid P.В., Sultana Т., Hussain W. A simplified technique for mass culture of unicellular algae. Рак. J. Sci. Ind. Res., 1981, v.24, N4, pp.145-147.