Генетический полиморфизм ИЛ-13 и его рецептора у больных бронхиальной астмой тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Мазурина, Светлана Александровна

• Мазурина, Светлана Александровна
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мазурина, Светлана Александровна

ГЛАВА 1. ВВЕДЕНИЕ.

Цель исследования:.

Задачи исследования:.

Научная новизна и практическая значимость.

Положения, выносимые на защиту:.

ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Индукция синтеза IgE при бронхиальной астме.

2.1.1. Механизм перестройки генов иммуноглобулинов на синтез IgE.

2.1.2. Механизмы регуляции синтеза IgE in situ.

2.1.3. Участие регуляторных Т—клеток в механизмах переключения изотипов.

2.2. Аллергический фенотип при бронхиальной астме.

2.2.1. Роль ИЛ-13 в регуляции эозинофилъного воспаления.

2.2.2. Роль ИЛ-13 в развитии субэпителиального фиброза.

2.2.3. Роль ИЛ-13 в регуляции гиперпродукции слизи.

2.2.4. Роль ИЛ-13 в развитии гиперреактивности бронхов.

2.3. Генетический полиморфизм при бронхиальной астме.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.1. Исследуемый материал.

3.2. Реагенты и тест-системы.

3.3. Методы исследования.

3.3.1. Выделение ДНК.

3.3.2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

3.3.3. Определение полиморфизма методом ПДРФ (полиморфизм длин рестрикционных фрагментов).

3.3.4. Определение полиморфизма масс-спектрометрическим методом.

3.3.5. Твёрдофазый имму но ферментный анализ.(ELISA).

3.3.6. Оценка интерферонового статуса.

3.3.7. Статистические методы.

ГЛАВА 4. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1. Характеристика групп больных бронхиальной астмой на основании клинико-иммунологического исследования.

4.2. Исследование полиморфизма генов ИЛ-13 и ИЛ-4Яа.

4.2.1. Ассоциация исследуемых SNP с заболеваемостью атопической бронхиальной астмой.

4.2.2. Ассоциация генетического полиморфизма ИЛ-13 и ИЛ4Яа с повышенным содержанием общего IgE.

4.2.3. Ассоциация генетического полиморфизма ИЛ-13 с повышенным содержанием сывороточного ИЛ-13.

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ГЛАВА 6. ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Генетический полиморфизм ИЛ-13 и его рецептора у больных бронхиальной астмой»

Атопическая бронхиальная астма является хроническим воспалительным заболеванием дыхательных путей, в основе которого лежит атопия с увеличенным уровнем общего IgE. Это хроническое воспаление ведет к развитию гиперчувствительности путей в ответ на различные стимулирующие симптомами дыхательных факторы и сопровождается бронхиальной повторяющимися обструкции. обратимой о Современные представления генетической предрасположенности предполагают, что для развития клинической формы этого заболевания требуется наличие в генотипе индивида определенных аллельных вариантов генов, формирующих неблагоприятный наследственный фон, реализующийся под действием факторов внешней среды патологическим фенотипом. Сложность схемы наследования не позволяет точно установить гены, ответственные за развитие данной патологии, и исследования в этой области продолжаются, нося, в основном, накопительный характер. В этой связи интересной выглядит концепция исследования однонуклеотидных замен, известных также как SNP.. SNP single nucleotide polymorphisms, это однонуклеотидные позиции в геномной ДНК, для которых в популяции имеются различные варианты последовательностей в соответствующих генотипе индивида являются генах и их сочетания в к различным предрасполагающими заболеваниям, в т. ч. и к астме. Число генов-кандидатов предрасположенности астме достаточно велико, однако, исходя к бронхиальной из характерных для особенностей развития этого заболевания, интересными исследования являются гены, ответственные за индукцию синтеза IgE одного из основных иммунологических маркеров данного заболевания. К таким генам относятся гены интерлейкинов (ИЛ) и их рецепторов. Известно, что центральным цитокином аллергического ответа является ИЛ-4, активирующий транскрипцию генного локуса тяжелой цепи типа е иммуноглобулинов, тем самым, индуцируя переключение изотипов с М на Е в В-клетках. ИЛ-13 другой, синтезируемый Т-клетками цитокин, который как и ИЛ-4 активирует В-клетки к продукции IgE, независимо от ИЛ-4 [105]. Многочисленные исследования показали, что ИЛ-13 является ключевым цитокином в инициировании астмы у экспериментальных животных [19, 51]. Действие ИЛ-13, осуществляется посредством взаимодействия со своим рецептором на поверхности клеток. Рецептор ИЛ-13 представляет гетеродимерный комплекс, состоящий из а-цепи, общей с рецептором к ИЛ-4 (ИЛ4Ыа) и самостоятельной цепью RJI13Ral. При этом ИЛ13Яа1 является связывающей, в то время как ИЛ4Яа осуществляет Полиморфизм трансдукцию сигнала внутрь клетки [11, 74, генов ИЛ-13 и ИЛ-4Ка определяет и 144]. разнообразие с фенотипических атопией и астмой. Так, проявлений функций ИЛ-13 ассоциирован первые аллельные варианты были определены промоторном участке гена ИЛ-13 С-1055Т [96]. Позднее открыты новые полиморфизмы два в интронах (G+543C в первом интроне и Т+1922С в третьем) и два в кодирующей части гена (A+2043G и А+2579С в транслируемом и З-нетранслируемом регионе, соотв., четвертого экзона) [11]. Найдена ассоциация генотипа Т/Т в участке -1055 от старт-кодона гена ИЛ-13 и увеличенной продукцией этого цитокина [134]. В японской и европейских популяциях была выявлена ассоциация полиморфизма A+2043G (Argl30Gln замена 130 аминокислоты ИЛ-13) с атопической астмой и увеличенным уровнем сывороточного IgE [49,50]. Цитоплазматический вариант замены аминокислоты аргинина на глутамин в положении 551(Gln576Arg), обусловленный полиморфизмом +1902 в гене ИЛ4Яа, был обнаружен при изучении индивидуумов с экземой и гипер-IgE синдромом в популяции британцев [90]. В противоположность этому низкий уровень IgE, ассоциированный с Arg576Gln заменой был обнаружен в популяции немцев [78]. Другой полиморфизм G+398A (аминокислотная замена Ile50Val) в гене HJI4Ra, единственный найденный экстрацеллюлярный вариант рецептора у человека, ассоциирован с бронхиальной астмой, повышенным уровнем общего IgE и IgE-антител к аллергенам клеща домашней пыли [91]. Цель исследования: Исследовать полиморфизм генов ИЛ-13 (С-1055Т и Argl30Gln) и a-цепи его рецептора KJI4Ra (Ile50Val и Gln576Arg) у атопической заболеванием и ИЛ-13. бронхиальной астмой, выявить их больных с ассоциацию и такими иммунологическими маркерами, как IgE Задачи исследования: 1. различной Сформировать степени группы больных бронхиальной и астмой с тяжести, группы здоровых пациентов аллергическим ринитом.Определить в сыворотках исследуемых групп содержание общего IgE, ИЛ-13, ИЛ-4, ИЛ-10 и ИНФу. 3. Провести типирование по гену ИЛ-13 относительно замены С на Т в положении -1055 промоторной области и G на А в +2044 положении кодирующей области гена. 4. Провести типирование по гену ИЛ4Яа относительно замен А на G в положениях +398 и +1902 в кодирующей области. 5. Провести анализ связи выявленных полиморфизмов с заболеванием бронхиальной астмой и показателями IgE и ИЛ-13. Научная новизна и практическая значимость. Впервые на территории РФ среди жителей г. Москвы проведено исследование генетического полиморфизма, ИЛ-13 и ИЛ4Яа по некоторым однонуклеотидным заменам, а также проанализированы его ассоциации с заболеванием атопической бронхиальной астмой и повышенным содержанием общего IgE. Показано, что частота встречаемости аллелей в группе больных астмой, характеризующихся сниженными показателями ИФН-а,-у, ИЛ-10 и ИЛ-13 на фоне повышенного содержания ИЛ-4, общего и специфических IgE, не отличается от таковых частот в группе здоровых лиц. Отмечено отсутствие ассоциации отдельных замен (С-1055Т, Argl30Gln, Gln576Arg, Ile50Val) с заболеваемостью повышенным содержанием общего IgE в исследуемых группах. Выявлена ассоциация промоторного полиморфизма гена ИЛ-13 с повышенным содержанием сывороточного ИЛ-13 у больных астмой в сравнении со здоровой группой.Получены данные об ассоциации полиморфных замен С-1055Т и Argl30Gln ИЛ-13 с заболеванием бронхиальной астмой и повышенным содержанием общего IgE. Для изученных вариантов ИЛ4Яа выявлено отсутствие ассоциации комбинации Ile50Val и Gln576Arg с заболеваемостью астмой и повышенным содержанием общего IgE. Полученные сведения дают информацию как о роли отдельных генов в развитии атопической бронхиальной астмы и содержании общего IgE, так и о гетерогенности данной группы. Кроме того, данные об отсутствии ассоциации отдельных полиморфных замен с заболеванием и повышенным содержанием общего IgE указывают на актуальность дальнейшего анализа комбинаций генотипов различных исследуемых полиморфизмов. Изучение полиморфных вариантов генов ключевых цитокинов будет способствовать выяснению роли генетической составляющей в развитии данного заболевания и могут быть учтены в создании системы ранней диагностики аллергических и других мультифакторных заболеваний. Положения, выносимые на защиту: 1. При исследовании генетического полиморфизма в промоторной и кодирующей областях ИЛ-13 у больных атопической бронхиальной астмой выявлена ассоциация комбинации С-1055Т и Argl30Gln с заболеванием и повышенным содержанием общего IgE, тогда как эти отдельные однонуклеотидные замены не связаны с этими признаками. При этом установлена ассоциация промоторного полиморфизма С-1055Т гена ИЛ-13 с повышенным содержанием сывороточного ИЛ-13 у больных астмой в сравнении со здоровыми лицами.При определении кодирующих полиморфных вариантов гена ИЛ4Яа не выявлено ассоциации отдельных замен (Ile50Val и Gln576Arg) и их комбинаций с заболеваемостью атопической БА и повышенным содержанием общего IgE. 10

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мазурина, Светлана Александровна, 2008 год

1. Балаболкин И.И. Бронхиальная астма у детей. Медицина; 2003, с 145

2. Григорян С.С., Майоров И.А., Иванова A.M., Ершов Ф.И. Оценка интерферонового статуса людей по пробам цельной крови. Вопросы вирусологии 1988; 33 (4): 433-436.

3. Казначеев В. А. Гервазиев Ю. В. Роль полиморфизма генов цитокинов и их рецепторов в развитии атопической бронхиальной астмы. Астма. 2004; №1 с. 73-84

4. Карунас A.C., Измайлова А.Р., Загидуллин Ш.З.,. Хуснутдинова Э.К. Анализ ассоциации полиморфных вариантов генов цитокинов с бронхиальной астмой в республике Башкортостан. Цитокины и воспаление, 2007, № 4

5. Лакин Г.Ф. Биометрия. 3-е изд. Высш. школа, 1990, с. 203

6. Флепс Дж. Статистические методы для изучения таблиц долей и пропорций. Финансы и статистика, 1989, с 319

7. Фрейдин М. Б., Кобякова О. С., Огородова Л. М. и др. Наследуемость уровня общего интерлейкина-5 и полиморфизм С-703Т гена IL5 у больных бронхиальной астмой. Бюлл. эксп. биол. мед. 2000, 129(1), 50-52.

8. Фрейдин М.Б., Пузырев В.П., Огородова Л.М. и др. Полиморфизм генов интерлейкинов и их рецепторов: популяционная распространенность и связь с атопической бронхиальной астмой. Генетика. 2002, 38, 1710-1718.

9. Хаитов P.M., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г Иммунология: Учебник для студентов вузов. Изд. 2-е, М, 2002.

10. Ярилин А. А., Донецкова А.Д. Регуляторные FoxP3+ Т-клетки и их роль при аллергии. Российский аллергологический журнал. 2005, 2, 2226.

11. Ahonen C et al. The CD40-TRAF6 axis controls affinity maturation and the generation of long-lived plasma cells. Nature Immunol. 2002, 3, 451-156.

12. Akdis CA, Blesken T, Akdis M, Wiithrich B, Blaser IC. Role of interleukin 10 in specific immunotherapy. J Clin Invest. 1998, 102(1), 98106.

13. Andrews AL, Nasir T, Bucchieri F, Holloway JW, Holgate ST, Davies DE. IL-13 receptor alpha 2: a regulator of IL-13 and IL-4 signal transduction in primary human fibroblasts. J Allergy Clin Immunol. 2006, 118(4), 858-65.

14. Arima K, Sato K, Tanaka G, Kanaji S, Terada T, Honjo E, Kuroki R, Matsuo Y, Izuhara K. Characterization of the interaction between interleukin-13 and interleukin-13 receptors. J Biol Chem. 2005 , 280(26), 24915-22.

15. Bai T. R. Abnormalities an airway smooth muscle in fatal asthma. Am. Rev. Respir. Dis. 1991, 143, 441-443.

16. Basaki Y., Ikizawa K., Kajiwara K., Yanagihara Y. CD40-mediaied tumor necrosis factor receptor-associated factor signaling upregiilates IL-4-induced germline Ce transcription in a human B cell line. Arch. Biochem. Biophys. 2002, 405, 199-204.

17. Blease, K., C. Jakubzick, J. Westwick, N. Lukacs, S. L. Kunkel, C. M. Hogaboam. Therapeutic effect of IL-13 immunoneutralization during chronic experimental fungal asthma. J. Immunol. 2001, 166, 5219-5224.

18. Bober, L. A., M. J. Grace, C Plughese-Sivo, T. A. Waters, L. M. Sullivan, and S. K. Narula. Human IL-10 reduces the number of IL-4-induced IgE B cells in cultures of atopic mononuclear cells. Int. Arch Allergy1.munol. 1994, 105, 26-31.

19. Borggrete T., Keshavarzi S., Gross B., Wabl M., Jessberger R. Impaired IgE response in SWAP-70-deficient mice. Eur. J. Immunol. 2001, 31, 2467-2475.

20. Borggrete T., Wabl M., Akhmedov A.T., Jessberger R.A. B-cell specific DNA recombination complex. J. Biol Chem. 1998, 273, 1702517035.

21. Burchard EG, Silverman EK, Rosenwasser U, Borish L, Yandava C, Pillari A, Weiss ST, et al. Association between a sequence variant in the IL-4 gene promoter and FEV(l) in asthma. Am J Respir Crit Care Med. 1999, 160, 919-922.

22. Cameron LA, Durham SR, Jacobson MR, et al. Expression of IL-4, Ce RNA, and Ie RNA in the nasal mucosa of patients with seasonal rhinitis: effect of topical corticosteroids. J Allergy Clin Immunol. 1998, 101, 330-336.

23. Chen C.L. et al. RAG2-/-, Ikß-/- chimeras display a psonasiform skin disease. J.Invest. Detrmatol. 2000, 115, 1124-1133.

24. Chen W, Jin W, Hardegen N, Lei KJ, Li L, Marinos N, McGrady G, Wahl SM. Conversion of peripheral CD4+CD25- naive T cells to CD4+CD25+ regulatory T cells by TGF-beta induction of transcription factor Foxp3. J Exp Med. 2003, 198(12), 1875-1886.

25. Cheng G. et al. Involvment of CRAF1, a relative of TRAP, in CD40 signaling. Science. 1995, 267, 1494-1498.

26. Cohn L, Homer RJ, MacLeod H, et al. Th2-induced airway mucus production is dependent on IL-4Ralpha, but not on eosinophils. J Immunol. 1999, 162, 6178-6183.

27. Cohn L, Tepper JS, Bottomly K, Cutting edge: IL-4-independent induction of airway hyperresponsiveness by Th2, but not Thl, cells. J1.munol. 1998, 161, 3813-3816.

28. Delphin SJ, Stavnezer J. Characterization of an interleukin 4 (IL-4) responsive region in the immunoglobulin heavy chain germline epsilon promoter: regulation by NF-IL-4, a C/EBP family member and NF-kappa B/p50. J Exp Med. 1995, 181, 181-192.

29. Doherty TM, Kastelein R, Menon S, et al. Modulation of murine macrophage function by IL-13. J Immunol. 1993, 151, 7151-7160.

30. Duetsch, G. et al. STAT6 as an asthma candidate gene: polymorphism-screening, association and haplotype analysis in a Caucasian sib-pair study. Hum.Mol.Genet. 2002, 11(6), 613-21.

31. Durham SR, Gould HJ, Thienes CP, et al. Expression of e germ-line gene transcripts and mRNA for the e heavy chain of IgE in nasal B cells and the effects of topical corticosteroid. Eur J Immunol. 1997, 27, 2899-2906.

32. Fujieda S, Diaz-Sanchez D, Saxon A. Combined nasal challenge with diesel exhaust particles and allergen induces in vivo IgE isotype switching. Am J Respir CellMol Biol. 1998, 19, 507-512.

33. Fukushi J, Ono M, Morikawa W, Iwamoto Y, Kuwano M. The activity of soluble VCAM-1 in angiogenesis stimulated by IL-4 and IL-13. J Immunol. 2000, 165(5), 2818-2823.

34. Ganzer U, Bachert U. Localisation of IgE synthesis in immediate-type allergy to the upper respiratory tract. Otorhinolaryngology. 1988, 50, 257264.

35. Gao PS, Mao XQ, Baldini M, Roberts MH, Adra CN, Shirakawa T, Holt PG, Martinez FD, Hopkin JM. Serum total IgE levels and CD 14 on chromosome 5q31. Clin Genet. 1999, 56, 164-165.

36. Gavett SH, O'Hearn DJ, Karp CL, et al. Interleukin-4 receptor blockade prevents airway responses induced by antigen challenge in mice. AM J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 1997, 272, 253-261.

37. Gervaziev YV, Kaznacheev VA, Gervazieva VB Allelic polymorphisms in the interleukin-4 promoter regions and their association with bronchial asthma among the Russian population. Int Arch Allergy Immunol. 2006, 141(3), 257-64.

38. Ghaffar O, Laberge S, Jacobson MR, et al. IL-13 mRNA and immunoreactivity in allergen-induced rhinitis: comparison with IL-4 expression and modulation by topical glucocorticoid therapy. Am J Respir Cell Mol Biol. 1997, 17, 17-24.

39. Global Strategy for Asthma Management and Prevention. 2007

40. Graves PE, Kabesch M, Halonen M, et al. A cluster of seven tightly linked polymorphisms in the IL-13 gene is associated with total serum IgE levels in three populations of white children. J Allergy Clin Immunol. 2000, 105, 506-513.

41. Grunig, G., M. Warnock, A. E. Wakil, R. Venkayya, F. Brombacher, D. M. Rennick, D. Sheppard, M. Mohrs, D. D. Donaldson, R. M. Locksley, D. B. Corry. Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma. Science. 1998, 282, 2261-2263.

42. Grunstein MM, Hakonarson H, Leiter J, et al. IL-13-dependent autocrine signaling mediates altered responsiveness of IgE-sensitized airway smooth muscle. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2002, 282, 520-528.

43. Hall I. P., Wheatley A., Wilding P., Liggett S. Association of the Glu27 32-adrenoreceptor polymorphism with lower airway reactivity in asthmatic subjects. Lancet. 1995, 345, 1213-1214.

44. Hall IP, Wheatley A, Christie G, McDougall C, Hubbard R, Plelms PJ. Association of CCR5 delta32 with reduced risk of asthma, Lancet. 1999, 354, 1264-1265.

45. Heinzmann A, Plesnar C, Kuehr J, Forster J, Deichmann KA, Common polymorphisms in the CTLA-4 and CD28 genes at 2q33 are not associated with asthma or atopy. Eur J Immonogenet. 2000, 27, 57-61.

46. Hellquist HB, Karlsson MG, Rudblad S, et al. Activated T cells in the nasal mucosa of patients with grass-pollen allergy: a pilot study. Rhinology. 1992, 30, 57-63.

47. Hershey GK, Friedrich MF, Esswein LA, Thomas ML, Chatila TA. The association of atopy with a gain-of-function mutation in the alpha subunit of the interleukin-4 receptor. N Engl J Med. 1997, 337, 1720-1725.

48. Hilton DJ,Orchansky PL, Ayres SD, Schrader JW., An interleukin (IL)-13 receptor lacking the cytoplasmic domain fails to transduce IL-13-induced signals and inhibits responses to IL-4, J Biol Chem. 1997 272(36):22940-7

49. Hizawa N, Yamaguchi E, Jinushi E, Kawakami Y. A common FCER1B gene promoter polymorphism influences total serum IgE levels in a Japanese population. Am J Respir Crit Care Med. 2000, 161, 906-909.

50. Holloway JW, Dunbar PR, Riley GA, Sawyer GM, Fitzharris PF, Pearce N, Le Gros GS, Beasley R: Association of beta2-adren-ergic receptor polymorphisms with severe asthma. Clin Exp Allergy. 2000, 30, 1097-1103.

51. Iciek LA., Dolphin S.A., Slavnezer J. CD40 cross-linking induces Is germline transcripts in B cells via activation of NF-kB: synergy with IL-4 induction. J.Immunol. 1997, 158, 4769-4779.

52. Ilium P, Balle V. Immunoglobulins in nasal secretions and nasal mucosa in perennial rhinitis. Acta Otolaryngol. 1978, 86, 135-141.

53. Ishida T et al. Identification of TRAF6, a novel tumor necrosis factor receptor-associated factor protein that mediates signaling from an ammo-terminal domain of the CD40 cytoplasmic region. J.Biol. Chem. 1996, 271,28745-28748.

54. Ishida T.K. et al. TRAF5, a novel tumor necrosis factor receptor-associated factor family protein, mediates CD40 signaling. Proc. Nail. Acad. Sci. USA 1996, 93, 9437-9442.

55. Jabara H. et al. The binding site for TRAF2 and TRAF3 but not for TRAF6 is essential for CD40-mediated immunoglobulin class switching. Immunity 2002, 17, 265-276.

56. Jeannin P, Lecoanet S, Delneste Y, Gauchat JF, Bonnefoy JY. IgE versus IgG4 production can be differentially regulated by IL-10. J Immunol. 1998, 160(7), 3555-3561.

57. Kawashima T, Noguchi E, Arinami T, Yarnakawa-Kobayashi K, Nakagawa H, Otsuka F, Hamaguchi H. Linkage and association of an interleukin 4 gene polymorphism with atopic dermatitis in Japanese families. J Med Genet. 1998, 35, 502-504.

58. Kelly-Welch AE, Hanson EM, Boothby MR, Keegan AD. Interleukin-4 and interleukin-13 signaling connections maps. Science. 2003, 300, 1527-8.

59. Kruse S., Japha T., Tedner M. et al. The polymorphisms S503P and Q576R in the interleukin-4 receptor a gene are associated with atopy and influence the signal transduction. Immunology. 1999, 96, 365-371.

60. Kruse, N., Tony, H.P. Sebald, W. Conversion of human interleukin-4 into high affinity antagonist by a single amino acid replacement. EMBO J. 1992, 11,3237-3244.

61. Kuhn, R., Rajewski, K., Miller, W. Generation and analysis of IL-4 deficient mice. Science. 1991, 254, 707-710.

62. Kuperman D, Schofield B, Wills-Karp M, et al. Signal transducer and activator of transcription factor 6 (Stat6)-deficient mice are protected from antigen-induced airway hyperresponsiveness and mucus production. J Exp Med. 1998, 187, 939-948.

63. Kuperman DA, Huang X, Koth LL, et al. Direct effects of interleukin-13 on epithelial cells cause airway hyperreactivity and mucus overproduction in asthma. Nat Med. 2002, 8, 885-889.

64. Laporte JC, Moore PE, Baraldo S, et al. Direct effects of interleukin-13 on signaling pathways for physiologic responses in cultured human airway smooth muscle cells. Am J Respir Crit Care Med. 2001, 164, 141-148.

65. Larche, M., D. S. Robinson, A. B. Kay. The role of T lymphocytes in the pathogenesis of asthma. J. Allergy Clin. Immunol. 2003, 111, 450-463.

66. Lee SG, Kim BS, Kim JH, Lee SY, Choi SO, Shim JY, Hong TJ, Hong SJ. Gene-gene interaction between interleukin-4 and interleukin-4 receptor alpha in Korean children with asthma. Clin Exp Allergy. 2004 34(8): 1202-8.

67. Leung TF, Tang NL, Chan IH, Li AM, Ha G, Lam CW. A polymorphism in the coding region of interleukin-13 gene is associated with atopy but not asthma in Chinese children. Clin Exp Allergy. 2001 31(10): 1515-21.

68. Li L, Xia Y, Nguyen A, et al. Effects of Th2 cytokines on chemokine expression in the lung: IL-13 potently induces eotaxin expression by airway epithelial cells. J Immunol. 1999, 162, 2477-2487.

69. Liu X, Kohyama T, Wang H, Zhu YK, et al. Th2 cytokine regulation of type I collagen gel contraction mediated by human lung mesenchymal cells. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2002, 282, 1049-1056.

70. McKenzie GJ, Emson CL, Bell SE, et al. Impaired development of Th2 cells in IL-13 deficient mice. Immunity. 1998, 9, 423-432.

71. Messner B., Stutz A.M., Albrecht B., Peiritsch S., Woisetschlager M. Cooperation of binding sites for STAT6 and NF-KB/rel in the lL-4-induced up-regulation of the human IgE germline promoter. J. Immunol. 1997, 159, 3330-3337.

72. Mitchell TJ, Walley AJ, Pease JE, Venables PJ, Wiltshire S, Williams TJ, Cookson WO. Delta 32 deletion of CCR5 gene and association with asthma or atopy. Lancet. 2000, 356, 1491-1492.

73. Mitsuyasu H, Izuhara K, Mao XQ, Gao PS, Arinobu Y, Enomoto T, Kawai M, Sasaki S, Dake Y, Hamasaki N, Shirakawa T, Hopkin JM. Ile50Val variant of IL4R alpha upregulates IgE synthesis and associates with atopic asthma. Nat Genet. 1998, 19, 119-120.

74. Mitsuyasu, H., Yanagihara, Y., Mao, X.-Q., et al. Dominant effect of Ile50Val variant of the human IL-4 receptor a-chain in IgE synthesis. J. Immunol., 1999, 162, 1227-1231

75. Moffatt MF, Schou C, Faux JA, Cookson WO. Germline TCR-A restriction of immunoglobulin E responses to allergen. Immunogenetics. 1997,46,226-230.

76. Moore PE, Church TL, Chism DD, et al. IL-13 and IL-4 cause eotaxin release in human airway smooth muscle cells: a role for ERK. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 2002, 282, 847-853.

77. Mueller TD, Zhang JL, Sebald W, Duschl A., Structure, binding, and antagonists in the IL-4/IL-13 receptor system., Biochim Biophys Acta. 2002, 1592(3):237-50.

78. Nelms K, Keegan AD, Zamorano J, Ryan JJ, Paul WE. The IL-4 receptor: signaling mechanisms and biologic functions. Annu Rev Immunol. 1999;17:701-38.

79. Noguchi E, Shibasaki M, Arinami T, Takeda K, Yokouchi Y, Kawashima T, Yanagi H, Malsui A, Hamaguchi H. Association of asthma and the interleukin-4 promoter gene in Japanese, Clin Exp Allergy. 1998, 28, 449453.

80. Oiso N, Fukai K, Ishii M: Interleukin 4 receptor alpha chain polymorphism Gln551Arg is associated with adult atopic dermatitis in Japan. Br J Dermatol. 2000, 142, 1003-1006.

81. Oettgen H. C. IgE regulation and roles in asthma pathogenesis J Allergy Clin Immunol 2001 V 107 (3) p. 429-441

82. Pantelidis P, Jones MG, Welsh KI, Taylor AN, du Bois RM. Identification of four novel interleukin-13 gene polymorphisms. Genes Immun. 2000, 1(5), 341-5.

83. Patuzzo C, Trabetti E, Malerba G, Martinati LC, Boner AL, Pescollderungg L, Zanoni G, Pignatti PF. No linkage or association of the IL-4Ralpha gene Q576R mutation with atopic asthma in Italian families. J Med Genet. 2000, 37, 382-384.

84. Polvi A., West A., Kinos R. et al. Development of Asthma-Immuno Chip for gene expression studies of asthma and other immune mediated diseases. Am. J. Hum. Genet. 2000, 67, 382.

85. Pope SM, Brandt EB, Mishra A, et al. IL-13 induces eosinophil recruitment into the lung by an IL-5 and eotaxin-dependent mechanism. J Allergy Clin Immunol. 2001, 108, 594-601.

86. Pullen S.S. et al. High-affinity interactions of tumor necrosis factor receptor-associated factors (TRAFs) and CD40 require TRAF trimerization and CD40 mullimerization. Biochemistry. 1999,38, 10168-10177.

87. Punnonen, J., R. de Waal Malefyt, P. van Vlasselaer, J.-F. Gauchat, and J. E. de Vries. IL-10 and viral IL-10 prevent IL-4-induced IgE synthesis by inhibiting the accessory cell function of monocytes. J. Immunol. 1993, 151, 1280-1289.

88. Qiu G, Stavnezer J. Overexpression of BSAP/Pax-5 inhibits switching to IgA and enhances switching to IgE in the 1.29 muB cell line. J Immunol. 1998, 161, 2906-2918.

89. Reihsaus E, Innis M, Maclntyre N, Liggett SB. Mutations in the gene encoding for the beta 2-adrenergic receptor in normal and asthmatic subjects. Am J Respir Cell Mol Biol. 1993, 8, 334-339.

90. Richter A, Puddicombe SM, Lordan JL, et al. The contribution of interleukin (IL)-4 and IL-13 to the epithelial-mesenchymal trophic unit in asthma. Am J Respir Cell Mol Biol. 2001, 25, 385-391.

91. Rosa-Rosa L, Zimmermann N, Bernstein JA, Rothenberg ME, Khurana Hershey GK: The R576 IL-4 receptor alpha allele correlates with asthma severity. J Allergy Clin Immunol. 1999, 104, 1008-1014.

92. Rosenwasser U, Klemm DJ, Dresback JK, Inarnura H, Mascali JJ, Klinnert M, Borish L Promoter polymorphisms in the chromosome 5 gene cluster in asthma and atopy. Clin Exp Allergy. 1995, 25, 74-78, discussion. 95-76.

93. Rothman PSC, Li B, Gorham L, Glimcher F, Alt M, Boothby M. Identification of a conserved lipopolysaccharide-plus-interleukin 4-responsive element located at the promoter of germline epsilon transcripts. Mol Cell Biol. 1991,11, 5551-5561.

94. Sanak M, Pierzchalska M, Bazan-Socha S, Szczeklik A. Enhanced expression of the leukotriene C(4) synthase due to overactive transcription of an allelic variant associated with aspirin-intolerant asthma. Am J Respir Cell Mol Biol. 2000, 23, 290-296.

95. Sha W.C., Liou H.C., Tuomanen E.I., Baltimore D. Targeted disruption of the p50 subunit of NF-KBleads to multilocal defects in immune responses. Cell. 1995, 80, 321-330.

96. Sengler C. et al. Interactions between genes and environmental factors in asthma and atopy: new developments Respir.Res. 2002 V3 (1) p.7

97. Shi HZ, Li S, Xie ZF, Qin XJ, Qin X, Zhong XN. Regulatory CD4+CD25+ T lymphocytes in peripheral blood from patients with atopic asthma. Clin Immunol. 2004, 113(2), 172-178.

98. Shirakawa T, Li A, Dubowitz M, Dekker JW, Shaw AE, Faux JA, Ra C, Cookson WO, Hopkin JM. Association between atopy and variants of the beta subunit of the high-affinity immunoglobulin E receptor. Nal Genet. 1994, 7, 125-129.

99. Shirakawa T, Mao XQ, Sasaki S, Enomoto T, Kawai M, Morirnoto K, Hopkin J. Association between atopic asthma and a coding variant of Fc epsilon R1 beta in a Japanese population letter. Hum Mot Genet. 1996, 5, 2006.

100. Singer M, Lefort J, Vargaftig BB. Granulocyte depletion and dexamethasone differentially modulate airways hyperreactivity, inflammation, mucus accumulation, and secretion induced by rmIL-13 or antigen. Am J Respir Cell Mol Biol. 2002, 26, 74-84.

101. Small P, Barrett D, Frenkiel S, et al. Local specific IgE production in nasal polyps associated with negative skin tests and serum RAST. Ann Allergy. 1985, 55,736-739.

102. Song Z, Casolaro V, Chen R, et al. Polymorphic nucleotides within the human HJI-4 promoter that mediate overexpression of the gene. J.Immunol. 1996; 156, 424-429.

103. Stiitz A.M, Woisetschlager M. Functional synergism of STAT6 with either NF-kappa B or PU.l to mediate IL-4-induced activation of IgE germline gene transcription. J Immunol. 1999, 163, 4383-4391.

104. Sugai M. el al. Essential role of lcl2 in negative regulation of IgE class switching. Nature Immunol. 2003, 4, 25-30.

105. Sun X.H., Copeland M.G., Jenkins N.A., Baltimore D. Id proteins Idl and Id2 selectively inhibit DMA binding by one class of helix loop-helix proteins. Mot. Cell. Biol 1991, 11,5603-5611.

106. Suzuki I, Hizawa N, Yamaguchi E, Kawakami Y. Association between a C+33T polymorphism in the IL-4 promoter region and total serum IgE levels. Clin Exp Allergy. 2000, 30(12), 1746-9

107. Suzuki I, Yamaguchi E, Hizawa N, lloh A, Kawakami Y. A new polymorphism in the 5' flanking region of the human interleukin (IL)-4 gene. Immunogenetics. 1999, 49, 738-739.

108. Takeda K. et al. Essential role of State in IL-4 signalling. Nature. 1996, 380, 627-630.

109. Tan S, Hall IP, Dewar J, Dow E, Lipworth B. Association between beta 2-adrenoceptor polymorphism and susceptibility to bronchodilator desensitisation in moderately severe stable asthmatics. Lancet. 1997, 350, 995-999.

110. Thienes C.P. et al. The transcription factor B cell-specific activator protein (BSAP) enhances both IL-4- and CD40-mediated activation of the human 8 germline promoter. J.Immunol. 1997, 158, 5874-5882.

111. Vercelli D. Novel insights into class switch recombination. Curr Opin Allergy Clin Immunol. 2002, 2(2), 147-151.

112. Vercelli D. One cytokine, two isotypes: a trojan horse, pandora's box, and an evolving paradigm. Am J Respir Crit Care Med. 2000 ; 162: 86-90.

113. Walley, A.J., Cookson, W.O. Investigation of an interleukin-4 promoter polymorphism for associations with asthma and atopy. J Med Genet. 1996, 33,689.

114. Wang M, Xing ZM, Lu C, Ma YX, Yu DL, Yan Z, Wang SW, Yu LS. A common IL-13 Argl30Gln single nucleotide polymorphism among Chinese atopy patients with allergic rhinitis. Hum Genet. 2003 Oct; 113(5):387-90.

115. Wen FQ, Kohyama T, Liu X, et al. Interleukin-4- and interleukin-13-enhanced transforming growth factor beta-2 production in cultured human bronchial epithelial cells is attenuated by interferon-gamma. Am J Respir Cell Mol Biol. 2002, 26, 484-490.

116. Wills-Karp M, Luyimbazi J, Xu X, et al. Interleukin-13: central mediator of allergie asthma. Science. 1998, 282, 2258-2261.

117. Yan L, Galinsky RE, Bernstein JA, Liggett SB, Weinshilboum RM: Histamine N-methytransferase pharmacogenetics: association of a common functional polymorphism with asthma. Pharmacogenetics. 2000, 10, 261-266.

118. Yang M, Hogan SP, et al. IL-13 mediates airways hyperreactivity through the IL-4 receptor-alpha chain and STAT-6 independently of IL-5 and eotaxin. Am J Respir Cell Mol Biol. 2001, 25, 522-530.

119. Ying S, Durham SR, Jacobson MR, et al. T lymphocytes and mast cells express messenger RNA for interleukin-4 in the nasal mucosa in allergeninduced rhinitis. Immunology. 1994, 82, 200-206.

120. Ying S, Humbert M, Meng Q, et al. Local expression of e germline gene transcripts and RNA for the e heavy chain of IgE in the bronchial mucosa in atopic and nonatopic asthma. J Allergy Clin Immunol. 2001, 107,

121. Zhang W, Zhang X, Qiu D, Sandford A, Tan WC. IL-4 receptor genetic polymorphisms and asthma in Asian populations. Respir Med. 2007 101(1): 186-90.

122. Zhu Z, Homer RJ, Wang Z, et al. Pulmonary expression of interleukin-13 causes inflammation, mucus hypersecretion, subepithelial fibrosis, physiologic abnormalities, and eotaxin production. J Clin Invest. 1999, 102,

123. Zurawski, S.M., Vega, F. Jr., Huyghe, B, Zurawski G. Receptors for interleukin-13 and interleukin-4 are complex and share a novel component that functions in signal transduction. EMBO J. 1993, 12, 2663-2670.686.692.779.788.