Гидрофобизованные препараты водорастворимых физиологически активных белков тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.15, кандидат химических наук Тюрина, Ольга Петровна

• Тюрина, Ольга Петровна
• кандидат химических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат химических наук Тюрина, Ольга Петровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. КОВАЛЕНТНАЯ ГИДРОФОБИЗАЦИЯ БЕЛКОВ/ПЕПТИДОВ

1.1. Методы ковалентной гидрофобизации белков/пептидов

1.1.1. Использование фосфолипидов.

1.1.2. Ацилирование белков/пептидов производными органических кислот и аминов.

1.2. Среды для ковалентной гидрофобизации белков/пептидов, производными жирных кислот.

1.3. Влияние ковалентной гидрофобизации на физико - химические свойства белков/пептидов

ГЛАВА 2. НЕКОВАЛЕНТНАЯ ГИДРОФОБИЗАЦИЯ БЕЛКОВ ФОСФОЛИПИДАМИ

2.1. Классификация и физико-химические характеристики фосфолипидов.

2.1.1. Модельные системы липидов.

2.1.2. Основные фазовые состояния водно-липидных смесей.

2.1.3. Методы изучения полиморфизма липидов.

2.1.4. Методы определения средних размеров липидных агрегатов

2.1.5. Агрегация липидных везикул.

2.2. Комплексообразование водорастворимых белков с фосфолипидами

2.2.3. Влияние нековалентной гидрофобизации фосфолипидами на активность и стабильность белков

ГЛАВА 3. КОВАЛЕНТНАЯ И НЕКОВАЛЕНТНАЯ

ГИДРОФОБИЗАЦИЯ БЕЛКОВ КАК СПОСОБ УВЕЛИЧЕНИЯ ИХ СРОДСТВА К МЕМБРАНЕ И ПРОНИКНОВЕНИЯ ВНУТРЬ КЛЕТОК.

ГЛАВА 4. ВОДОРАСТВОРИМЫЕ БЕЛКИ - BPTI И ТРИПСИН КАК ОБЪЕКТЫ ГИДРОФОБИЗАЦИИ

4.1. Структура и свойства молекул BPTI и трипсина.

4.2. Перспективность гидрофобизации BPTI и трипсина.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 5. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

5.1. Исходные вещества.

5.2. Методы исследования

5.2.1. Модификация BPTI производиыми жирных кислот:

A) в системе ДОХ-Н?()-диоксан.

Б) в системе обращенных мицелл АОТ-НтО-октан.

B) в среде органических растворителей ДМСО-ДМФА-диоксаи-пиридин.

5.2.2. Отделение BPTI, ацилированного производными жирных кислот, от нативного белка путем изоионного осаждения .;.

5.2.3. Определение содержания аминогрупп в ацилированных препаратах BPTI.'.

5.2.4. Модификация BPTI фосфатидилэтаноламином с помощью водорастворимого карбодиимида.

5.2.5. Получение мультиламеллярных и моноламеллярных везикул

5.2.6. Получение комплексов трипсина с фосфолипидными препаратами.

5.2.7. Получение комплексов BPTI с фосфолипидными препаратами (мультиламеллярными везикулами и малыми моноламеллярными везикулами).•.'.

5.2.8. Определение содержания фосфолипидов по методу Васьковского

5.2.9. Определение содержания белка в гидрофобизованных препаратах

A) метод Бредфорд

Б) метод Jloypu

B) модифицированный метод Jloypu

5.2.10. Определение активности трипсин-липидных комплексов.

5.2.11. Определение антитриптической активности

A) ацилированных препаратов BPTI.

Б) BPTI-липидных комплексов.

B) BPTI-липидных комплексов в присутствии ДОХ.

5.2.12. Фазовое распределение гидрофобизованных препаратов BPTI и трипсина в системе вода-тритон Х-114.

5.2.13. Электрофорез препаратов белков в полиакриламидном гече (Ds-Na-электрофорез и электрофорез в системе Reisfeld)

5.2.14. Определение константы ингибирования эластазы лейкоцитов человека препаратами BPTI.

5.2.15. Гель-фильтрация комплексов BPTI с малыми моноламеллярными везикулами (ММВ).

5.2.16. Измерение зависимости светорассеяния малых моноламеллярных везикул (ММВ) от концентрации ВРТ1.

5.2.17. Вторая производная спектров УФ поглощения ацилированных препаратов ВРТ1.

5.2.18. Регистрация спектров флуоресценции трипсина и трипсин липидных комплексов.

5.2.19. Определение размера ММВ методом квази-упругого светорассеяния.

5.2.20. Определение размера МЛВ и белок-липидных комплексов методом турбидиметрии.

5.2.21. Метод 31Р-ЯМР спектроскопии высокого разрешения.

5.2.22. Метод 31РЯМР спектроскопии широких линий.

5.2.23. Изучение захвата ацилированных препаратов ВРТ1 монослоем

Сасо-2 клеток.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

ГЛАВА 6. КОВАЛЕНТНАЯ ГИДРОФОБИЗАЦИЯ ВРТ1 6.1. Ацилирование ВРТ1 производными жирных кислот

6.1.1. Реакционные среды ацилирования ВРТ1.

6.1.2. Влияние органических растворителей на свойства нативного препарата ВРТ1.#

6.1.3. Выбор оптимальных условий для модификации ВРТ1 и выделения ацилированных препаратов в среде органических растворителей

6.1.4. Сравнительные характеристики гидрофобизованных препаратов

ВРТ1.

6.1.5. Ингибирование эластазы лейкоцитов человека препаратами ВРТ1.

6.1.6. Изучение захвата препаратов ВРТ1 монослоем Сасо-2 клеток

6.2. Модификация ВРТ1 фосфатидилэтаноламином с помощью карбодиимида.;.

ГЛАВА 7. НЕКОВАЛЕНТНАЯ ГИДРОФОБИЗАЦИЯ ВРТ1 И

ТРИПСИНА.

7.1. Характеристика липидных препаратов.

7.1.1. Состав фосфолипидного экстракта сои (ЛП-1).

7.1.2. Состав фосфолипидного экстракта сои, обработанного 0,1 М

N.аС1 (ЛП-2).

7.1.3. Модельные системы фосфолипидов.

7.1.4. Размер фосфолипидных агрегатов липидных препаратов сои в воде.

7.1.5. Структурная организация липидных препаратов сои в воде

7.2. Комплексообразование BPTI и трипсина с соевыми липидами

7.2.1. Гель-фильтрация BPTI-липидных комплексов.

7.2.2. Изучение агрегации ММВ под действием BPTIметодом турбидиметрии.

7.2.3. Оптимизация параметров комплексообразования BPTI и трипсина с соевыми фосфолипидами

7.2.4. Влияние трипсина и BPTI на размер и структуру фосфолипидов

7.2.5. Изучение гидрофобности белок-липидных комплексов.

7.2.6. Изучение состава трипсин- и BPTI-липидных комплексов.

7.2.7. Зависимость активности трипсина от концентрации его комплексов с липидами.

7.2.8. Изучение активности трипсин- и BPTI-липидных компле>ссв в присутствии детергентов.,.

7.2.9. Исследование стабильности трипсина в составе комплексов с липидами.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Гидрофобизованные препараты водорастворимых физиологически активных белков»

Одной из важных проблем фармакологии является создание лекарственных препаратов с повышенной адсорбцией на мембранах и проникновением внутрь клеток. Отвечающая этим требованиям системы доставки белковых и пептидных лекарственных средств обычно получают путем гидрофобизации, которая основана на взаимодействии белков и полипептидов с компонентами мембраны (фосфолипидами, жирными кислотами и т.д.) или их производными.

Данная работа посвящена разработке методов ковалентной и нековалентной гидрофобизации водорастворимых белков на примере основного панкреатического ингибитора протеиназ (ВРТ1) и трипсина, которые нашли широкое применение в качестве лекарственных средств.

Систематическое изучение физико-химических свойств липидизированных препаратов ВРТ1 и трипсина, их биологической активности и взаимодействия с клетками позволит выявить общие закономерности процессов гидрофобизации водорастворимых белков и сделать обоснованные предположения о путях повышения эффективности лекарственного воздействия данных белков. 9

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Заключение диссертации по теме «Катализ», Тюрина, Ольга Петровна

151 ВЫВОДЫ

1. Разработан метод ковалентной гидрофобизации водорастворимых белков производными жирных кислот в смеси органических растворителей. С использованием 1Ч-гидроксисукцинимидного эфира олеиновой и стеариновой кислот в системе диметилсульфоксид-диметилформамид-диоксан-пиридин получены активные гидрофобизованные препараты ВРТ1 с высоким выходом, содержащие от 1 до 3 аминогрупп, ацилированных остатками жирных кислот.

2. Увеличение гидрофобности ацилированных препаратов ВРТ1 по сравнению с нативным показано спектральным методом, их распределением в двухфазной системе тритон Х-114- вода и их захватом монослоем Сасо-2 клеток.

3. Оптимизирован метод конъюгации водорастворимых белков с фосфатидилэтаноламином с использованием бифункционального агента — карбодиимида. На примере ВРТ1 синтезированы высокоактивные конъюгаты с высоким выходом, содержащие от 30 до 45 молекул фосфатидилэтаноламина на молекулу белка.

4. Разработан метод нековалентной гидрофобизации водорастворимых белков мультиламеллярными везикулами фосфолипидов, основанный на явлении агрегации МЛВ под действием белков. Получены комплексы на примере ВРТ1 и трипсина с липидными препаратами из сои.

5. Найдено, что состав белок-липидных комплексов зависит от рН среды образования и содержания отрицательнозаряженных компонент в липидных препаратах. Продемонстрировано влияние белков на структурную организацию водных дисперсий липидных препаратов, изначально формирующих в водной среде две фазы — бислой и изотропную.

6. Исследована зависимость активности ВРТ1- и трипсин-липидных комплексов от добавления 2,5 % ДОХ, от времени хранения ВРТ1-липидных комплексов в в щелочном растворе и от концентрации трипсин-липидных комплексов. Сделан вывод об отсутствии инактивации молекул белков при комплексообразовании и восстановлении активности белков в составе комплексов вплоть до 70 % в условиях, близких к физиологическим в дуоденальном содержимом.

7. Показано, что комплексообразование трипсина с липидами сои стабилизирует белок, предотвращая его автолиз.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Тюрина, Ольга Петровна, 2000 год

1. Sinha D. and Karush F. Attachment to membranes of exogenous immunoglobulin conjugated to a hydrophobic anchor. Biochem. Biophys. Res. Communs., 1979, v. 90, p.554-560.

2. Бурлакова Е.Б. Липиды, структура, биосинтез, превращения и функции. М., Наука, 1977, с. 16-27.

3. De Kruijff В. and Cullis P.R. Cytochrome с specifically induces non-bilayer structures in cardiolipin-containing model membranes. Biochim. Biophys. Acta, 1980, v. 602, p.477-490.

4. Несмеянова M.A. О возможном участии кислых фосфолипидов в транслокации секретируемых белков через цитоплазматическую мембрану бактерий. Мол. Биол., 1982, т. 16, с. 821-828.

5. Sinha D. and Karush F. Specific reactivity of lipid vesicles conjugated with oriented anti lactose antibody fragments. Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 684, p. 187.

6. Jansons V.K. and Mallet P.L. Targeted liposomes: a method for preparation and analysis. Anal. Biochem., 1981, v. Ill, p. 54-68.

7. Weissig V. A new hydrophobic anchor for the attachment of proteins to liposomal membranes. FEBS Lett., 1986, v. 202, p. 86-95.

8. Thompson N.L., Brien A.A. and McConnel H.M. Covalent linkage of a synthetic peptide to a fluorescent phospholipid and its incorporation into supported phospholipid monolayers. Biochem. Biophys. Acta, 1984, v. 772, p. 10-15.

9. Bogdanov A.A., Klibanov A.L. and Torchilin V.P. Protein immobilization on the surface of liposomes via carbodiimide activation in the presence of N-hydroxysulfosuccinimide. FEBS Lett., 1988, v. 231, p. 381-384.

10. Niedermann G., Weissig V., Sternberg B. and Lasch J. Carboxyacyl derivatives of cardiolipin as four-tailed hydrophobic anchors for the covalent coupling of hydrophilic proteins to liposomes. Biochim. Biophys. Acta, 1991, v. 1070, № 2, p. 401-408.153

11. Левашов А.В., Кабанов А.В., Хмельницкий Ю.Л., Березин И.В., Мартинек К. Химическая модификация белков водо-нерастворимыми реагентами. Докл. АН СССР, 1984, т. 278, с. 246-249.

12. Goldmacher V.S. Immobilization of protein molecules on liposomes. Anchorage by artificially bound unsaturated hydrocarbon tails. Biochem. Pharmacol., 1983, v. 32, p. 1207-1210.

13. Москвичев Б.В., Поляк М.С. Иммобилизованные ферменты, Изд-во Университет МГУ, 1991, с. 45.

14. Plou F.J. and Ballesteros A. Acylation of subtilisin with long fatty acyl residues affects its activity and thermostability in aqueous medium. FEBS Lett., 1994, v. 339, p. 200204.

15. Ohshima A., Narita H. and Kito M. Phospholipid reverse micelles as a milieu of an enzyme reaction in an apolar system. J. Biochem., 1983, v. 93, p. 1421-1425.

16. Кабанов A.B., Клибанов А.Л., Торчилин В.П., Мартинек К., Левашов А.В. Эффективность ацилирования аминогрупп белка хлорангидридами жирных кислот в системе обращенных мицелл АОТ в октане. Биоорган. Химия, 1987, т. 13, с. 1321-1324.

17. Hornebeck W., Moczar Е., Szecsi J. and Robert L. Fatty acid peptide derivatives as model compounds to protect elastin against degradation by elastases. Biochem. Pharmacology, 1985, v. 34, p. 3315-3321.

18. Bijsterbosch M.K., Schouten D. and van Berkel T.J. Synthesis of the dioleoyl derivative of iododeoxyuridine and its incorporation into reconstituted high density lipoprotein particles. Biochemistry, 1994, v. 33, p. 14073-14080.

19. Гауптман 3., Грефе Ю., Ремане X. "Органическая химия" М: Химия, 1979, с. 595.

20. Lapidot Y., Rappoport S., Wolman Y. Modified aminoacyl-tRNA. 3. A general procedure for the synthesis of dipeptidyl transfer RNA. J. Lipid Research, 1967, v. 8, p. 142-145.154

21. Shorn M., Atsushi S., Keigo Y. Lipophilic peptide synthesis of lauroylthyrotropin-releasing hormone and its biological activity. Pharm. Res., 1991, v. 8, № 5, p. 649-652.

22. Visser L. and Blout E. R. The use of p-nitrophenyl N-tert-butyloxycarbonyl-L-alaninate as substrate for elastase. Biochem. Biophys. Acta, 1972, v. 268, p. 257-260.

23. Максименко A.B. Модифицированные препараты супероксидцисмутазы и каталазы для защиты сердечно-сосудистой системы легких. Успехи Совр. Биологии, 1993, т. 113, с. 351-364.

24. Ekrami Н.М., Kennedy A. and Shen Wei-Chiang. Water-soluble fatty acid derivatives as acylating agents for reversible lipidization of polypeptides. FEBS Lett., 1995, v. 371, p. 283-286.

25. Vogt Т. С. В., Killian J. A., Demel R. A. and Kruijff B. Synthesis of acylated gramicidins and the influence of acylation on the interfacial properties and conformation behavior о gramicidin A. Biochim. Biophys. Acta, 1991, v. 1069, p. 157-164.

26. Turner A.J. Lipid modification of protein. Oxford University Press., 1992, p. 210.

27. Gordon J.I., Duronio R.J., Rudnick D.A., Adams S.P. and Gokel G.W. Protein N-myristoylation. J. Biol. Chem., 1991, v. 266, p. 8647-8650.

28. Wilcox C., Hu J.S. and Olson E.N. Acylation of proteins with myristic acid occurs cotranslationally. Science, 1987, v. 238, p. 1275-1278.

29. Sefton B.M. and Buss J.E. The covalent modification of eukaryotic proteins with lipid. J. Cell Biology, 1987, v. 104, p. 1449-1453.

30. Gaudin Y., Tuffereau C., Benmansour A. and Flamand A. Fatty acylation of rabits virus proteins. Virology, 1991, v. 184, p. 441-444.

31. Торчилин В.П., Клибанов A.JI. Способ улучшения связывания гидрофильного белка с липосомами. Биоорган. Химия, 1980, т. 6, с. 791-793.

32. Melik-Nubarov N.S., Shikshnis V.A., Slepnev V.I., Shchegolev A.A., and Mozhaev V.V. Correlation of enzyme thermostability and its surface hydrophobicity (using a modified alpha-chymotrypsin as an example). Mol. Biol., 1990, v. 24, № 2, p. 346-57.155

33. Kozlova N.O., Bruskovskaya I.B., Melik-Nubarov N.S., Yaroslavov A.A. and Kabanov V.A. Catalytic properties and conformation of hydrophobized a-chymotrypsin incorporated into bilayer lipid membrane. FEBS, 1999, v. 461, p. 141-144.

34. Robert S., Domurado D., Thomas D. and Chopineau J. Optimization of RNase A artificial hydrophobization in AOT reversed micelles. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1993, v. 196, p. 447-454 .

35. Peng Q.Q. and Luisi P.L. The behavior of proteases in lecithin reverse micelles. Eur. J. Biochem., 1990, v. 188, p. 471-480.

36. Поверхностно-активные вещества. Справочник под ред. А.А.Абрамзона, Изд-во Университет МГУ, 1979.

37. Левашов А.В. Катализ ферментами в системе обращенных мицелл. Дисс. . докт.хим.наук. М., 1990.

38. Мартинек К., Левашов А.В., Клячко Н.Л., Березин И.В. Принципы стабильности ферментов в среде органических растворителей. ДАН СССР, 1977, т. 236, с. 920. 923.

39. Кабанов А.В., Наметкин С.Н., Левашов А.В., Мартинек К. Биол. мембраны, 1985, т. 2, с. 985-995.

40. Белова А.Б., Можаев В.В., Левашов А.В., Сергеева М.В., Мартинек К., Хмельницкий Ю.Л. Биохимия, 1991, т. 56, с. 1923-1945.

41. Muneaki Н., Kanji Т. and Yoshiaki К. Covalent modification of insulin by fatty acid derivatives. Pharm. Res., 1989, v. 6, № 2, p. 171-175.

42. Huang A. Characterization of antibody covalently coupled to liposomes. Biochim Biophys. Acta, 1982, v. 684, p. 140.

43. Ando Y, Inoue M., Utsumi Т., Morino Y. and Araki S. Synthesis of acylated SOD derivatives which bind to the biomembrane lipid surface and dismutate extracellular superoxide radicals. FEB, 1988, v. 240, p. 216-220.

44. Szoka F. and Papahadjopoulos D. Comparative properties and methods of preparation of lipid vesicles. Annu. Rev. Biophys. Bioeng., 1980, v. 9, p. 467-508.

45. Mueller P., Chien T.F. and Rudy B. Formation and properties of cell-size lipid bilayer vesicles. Biophys. J., 1985, v. 44, p. 375-381.

46. DeamerW. and Uster P.S. Liposome preparation: methods and mechanism, 1984, In: Liposomes (M.J. Ostro, Ed.), pp. 27-51, Marcel Dekker, New York.156

47. Hope M.J., Bally M.B., Mayer L.D., Janoff A.S. and Cullis P.R. Generation of multilamellar and unilamellar phospholipid vesicles. Chem. Phys. Lipids, 1986, v. 40, p. 89-107.

48. Huang C.-H. Studies on phosphatidylcholine vesicles. Formation and physical characteristics. Biochemistry, 1969, v. 8, p. 344-351.

49. Goormaghtigh E. and Scarborough G.A. Density-based separation of liposomes by glycerol gradient centrifugation. Anal. Biochemistry, 1986, v. 159, p. 122-131.

50. Enoch H.G. and Strittmatter P. Formation and properties of 1000-A diameter, single-bilayer phospholipid vesicles. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1976, v. 76, p. 145-149.

51. Mimms T., Zampighi G., Nozaki Y., Tanford C. and Reynolds J.A. Phospholipid vesicle formation and transmembrane protein incorporation using octyl glucoside. Biochemistry, 1981, v. 20, p. 833-840.

52. Aeno M., Tanford C. and Reynolds J.A. Phospholipid vesicle formation using nonionic detergents with low monomer solubility. Kinetic factors determine vesicle size and permeability. Biochemistry, 1984, v. 23, p. 3070-3076.

53. Alpes H., Allman K., Plattner H., Reichert J., Riek R. and Schulz S. Formation of large unilamellar vesicles using alkyl maltoside detergents. Biochim. Biophys. Acta, 1986, v. 862, p. 294-302.

54. Parente R. A. and Lentz B.R. Phase behavior of large unilamellar vesicles composed of synthetic phospholipids. Biochemistry, 1984, v. 23, p. 2353-2362.

55. MacDonald R.I. and MacDonald R.C. Lipid mixing during freeze-thawing of liposome membranes as monitored by fluorescence energy transfer. Biochim. Biophys. Acta, 1983, v. 735, p. 243-251.

56. Papahadjopoulos D., Vail W.J., Jacobson K. and Poste G. Cochleate lipid cylinders: formation by fusion of unilamellar lipid vesicles. Biochim. Biophys. Acta, 1975, v. 394, p. 483-491.

57. Kantor H.L. and Prestegard J.H. Fusion of phosphatidylcholine bilayer vesicles; role of free fatty acid. Biochemistry, 1978, v. 17, p. 3592-3597.

58. Scotto A.W. and Zakim D. Reconstitution of membrane proteins. Spontaneous association of integral membrane proteins with preformed unilamellar lipid bilayers. Biochemistry, 1985, v. 24, p. 4066-4075.157

59. Hauser H., Gains N. and Muller M. Yesiculation of unsonicated phospholipid dispersions containing phosphatidic acid by pH adjustment: physicochemical properties of the resulting unilamellar vesicles. Biochemistry, 1983, v. 22, p. 4775-4781.

60. Yoshikawa W., Akutsu H. and Kyogoku Y. Light-scattering properties of osmotically active liposomes. Biochim. Biophys. Acta, 1983, v. 735, p. 397-406.

61. Cullis PR. and de Kruijff B. Lipid polymorphism and the functional roles of lipids in biological membranes. Biochim. Biophys. Acta, 1979, v. 559, p. 399-420.

62. Janiak M.J., Small D.M. and Shipley G.G. Nature of the thermal pretransition of synthetic phospholipids: dimyristoyl- and dipalmitoy 11 ecithin. Biochemistry, 1976, v. 15, p. 4575-4580.

63. Franks N.P. Structural analysis of hydrated egg lecithin in cholesterol bilayers. X-ray diffraction. J. Mol. Biol., 1976, v. 100, p. 345-358.

64. Schmidt F.O., Bear R.S. and Clark G. X-ray diffraction studies on nerve. Radiology, 1935, v. 25, p. 131-151.

65. Finean J.B. and Burge R.E. The determination of the Fourier transform spectroscopy of the myelin layer from a study of swelling phenomena. J. Mol. Biol., 1963, v. 7, p. 672682.

66. Blaurock A.F. and Worthington C.R. Treatment of low angle X-ray database from planar and concentric multilayer structures. Biophys. J., 1966, v. 6, p. 305-312.

67. Shipley G.G. Recent X-ray diffraction studies of biological membrane components. Biological Membranes, 1973, v. 2, p. 1-89.158

68. Deamer D.W., Leonard R., Tardieu A. and Branton D. Lamellar and hexagonal lipid phase visualized by freeze-etching. Biochim. Biophys. Acta, 1970, v. 219, p. 47-60.

69. Verklej A.J., Humbel В., Studer D. and Muller M. Lipid particle systems visualized by thin-section electron microscopy. Biochim. Biophys. Acta, 1985, v. 812, p. 591-594.

70. Cullis P.R. and de Kruijff B. Polymorphic phase behaviour of lipid mixtures as detected by 31P NMR. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v. 507, p. 207-218.

71. Burnell E.E., Cullis P.R. and de Kruijff B. Effects of tumbling and lateral diffusion on31phosphatidylcholine model membrane P-NMR lineshapes. Biochim. Biophys. Acta, 1980, v. 603, p. 63-69.

72. Saunders L. Molecular aggregation in aqueous dispersions of phosphatidyl and lysophosphatidylcholines. Biochim. Biophys. Acta, 1966, v. 125, p. 70-75.

73. Ю.А. Овчинников. Биоорганическая химия. M.Просвещение, 1987, с. 815

74. Henderson Т.О., Glonek Т. and Myers Т.С. Phosphorus-31 nuclear magnetic resonance spectroscopy of phospholipids. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 623-628.

75. Seddon J.M. Structure of the inverted hexagonal (Нц) phase, and non-lamellar phase transitions of lipids. Biochim. Biophys. Acta, 1990, v. 1031, p. 1-71.

76. Schurtenberger P. and Hauser H. Characterization of size distribution of unilamellar vesicles by gel filtration, quasielastic light scattering and electron microscopy. Biochim. Biophys. Acta, 1984, v. 778, p. 470-480.

77. Larrabee A.L. Time-dependent changes in the size distribution of distearoylphosphatidylcholine vesicles. Biochemistry, 1979, v. 18, p. 3321-3326,

78. Povaliy T.M., Popova E.G. and Gusev S.A. New method of all membrane cholesterol marking for scanning electron microscopy. Scanning, 1991, v. 13, p. 249-253.

79. Hallett F.R., Watton J. and Krijgsman P. Vesicle sizing. Number distribution by dynamic light scattering. Biophys. J., 1991, v. 59, p. 357-362.

80. Кленин В.И., Щегалев С.Ю., Лаврушин В.И. Характеристические функции светорассеяния дисперсных систем. Издательство Саратовского Университета, 1977, с. 176.159

81. Berne B.J. and Pecora W.R. Dynamic light scattering, Ed. Wiley J., Elsevier Science, New York, 1976, Chap 10.

82. Warner G. Theory of light scattering from vesicles. Colloid Polym. Sci., 1983, v. 261, p. 508-519.

83. Lasic D.D. Liposomes: from physics to applications, Ed. Thompson V., 1993, Elsevier Science, Amsterdam-London-N.Y.-Tokyo, p. 210.

84. Kachar B., Fuller N. and Rand R.P. Morphological responses to calcium-induced interaction of phosphatidylserine-containing vesicles. Biophys. J., 1986, v. 50., p. 779788.

85. Leventis R., Gagne J., Fuller N., Rand R.P. and Silvius J.R. Divalent cation induced fusion and lipid lateral segregation in phosphatidylcholine-phosphatidic acid vesicles. Biochemistry, 1986, v. 25, p. 6978-6987.

86. Wilschut J. and Hoekstra D. Membrane Fusion: lipid vesicles as a model system. Chem. Phys. Lipids, 1986, v. 40, p. 145-166.

87. Akabas M.H., Cohen F.S. and Finkelstein A. Separation of the osmotically driven fusion event from vesicle-planar membrane attachment in a model system for exocytosis. J. Cell Biol., 1984, v. 98, p. 1063-1071.

88. Lucy J. A. and Ahkong Q.F. An osmotic model for the fusion of biological membranes. FEBS Lett., 1986, v. 199, p. 1-11.

89. Feigenson G.W. On the nature of calcium ion binding between phosphatidylserine lamellae. Biochemistry, 1986, v. 25, p. 5819-5825.

90. Wilschut J. and Hoekstra D. Membrane fusion: from liposomes to biological membranes. TIBS, 1984, v. 9, p. 479-483.

91. McDonald R.I. Membrane fusion due to dehydration by polyethylene glycol, dextran, or sucrose. Biochemistry, 1985, v. 24, p. 4058-4066.

92. Sugar I.P., Foster W. and Neumann E. Model of cell electrofusion: membrane electroporation, pore coalescence and percolation. Biophys. Chem., 1987, v. 26, p. 321335.160

93. Kim J. and Kim H. Fusion of phospholipid vesicles induced by a-lactalbumin at acidic pH. Biochemistry, 1986, v. 25, p. 7867-7874.

94. Morgan C.G., Fitton J.E. and Yianni Y.P. Fusogenic activity of 8-hemolysin from Staphylococcus aureus in phospholipid vesicles in the liquid-crystalline phase. Biochim. Biophys. Acta, 1986, v. 863, p. 129-138.

95. Murata M., Nagayama K. and Ohnishi S. Membrane fusion activity of succinylated melittin is triggered by protonation of its carboxyl groups. Biochemistry, 1987, v. 26, p. 4056-4062.

96. P. Геннис. Биомембраны: молекулярная структура и функции. М.: Мир, 1997, 622 с.

97. Nicholls P. and Malviya A.N. External and internal binding of cytochrome с by liposomes. Biochem. Soc. Trans., 1973, v. 1, p. 372-375.

98. Smith R., Separovic F., Milne T.J., Whittaker A., Bennett F.M., Cornell B.A. and Makriyannis A. Structure and orientation of the pore-forming peptide, melittin, in lipid bilayers. J. Mol. Biol., 1994, v.241, p. 456-466.

99. Batenburg A.M., Van Esch J.H. and de Kruijff B. Melittin-induced changes of the macroscopic structure of phosphatidylethanolamines. Biochemistry, 1988, v. 27, p. 2324-2331.

100. Dempsey C.E. The actions of melittin on membranes. Biochim.Biophys.Acta, 1990, v. 1031, p. 143-161.

101. McKnight C.J., Rafalski M. and Gierasch L.M. Fluorescence analysis of tryptophan-containing variants of the lamB signal sequence upon insertion into a lipid bilayer. Biochemistry, 1991, v. 30, № 25, p. 6241-6246.

102. Moll T.S. and Thompson Т.Е. Semisynthetic proteins: model systems for the study of the insertion of hydrophobic peptides into preformed lipid bilayers. Biochemistry, 1994, v. 33, № 51, p. 15469-15482.

103. Zhang Y., Lewis R.N., McElhaney R.N. and Ryan R.O. Calorimetric and spectroscopic studies of the interaction of Manduca sexta apolipophorin III with161zwitterionic, anionic, and nonionic lipids. Biochemistry, 1993, v. 32, № 15, p. 39423952.

104. Gericke A., Smith E.R., Moore D.J., Mendelsohn R. and Storch J. Study of interaction between fatty acid binding protein and model membrane. Biochemistry, 1997, v. 36, №27, p. 8311-8317.

105. Ito M., Feng J., Tsujino S., Inagaki N., Inagaki M., Tanaka J., Ichikawa K., Hartshorne D.J. and Nakano T. Interaction of smooth muscle myosin phosphatase with phospholipids. Biochemistry, 1997, v. 36, № 24, p. 7607-7614.

106. Jung J.E. and Kim H. Interaction of water-soluble form of apoproteolipid of bovine brain myelin with phospholipid vesicles. J. Biochem., 1990, v. 107, № 4, p. 530-534.

107. Batenburg A.M., Hibbeln J.C., Yerkleij A.J. and de Kruijff B. Melittin induces Hn phase formation in cardiolipin model membranes. Biochim. Biophys. Acta, 1987, v. 903, № 1, p. 142-154.

108. Mendz G.L., Miller D.J. and Ralston G.B. Interactions of myelin basic protein with palmitoyllysophosphatidylcholine: characterization of the complexes and conformations of the protein. Eur. Biophys. J., 1995, v. 24, № 1, p. 39-53.

109. Sackmann E. Physical foundations of the molecular organization and dynamics of membranes. Biophysics, Springer-Verlag, New-York, 1983, p. 425-457.

110. Pearson L.T., Edelman J. and Chan S.I. Statistical mechanisms of lipid membranes: protein correlation functions and lipid ordering. Biophys. J., 1984, v. 45, p. 863-871.

111. Mouritsen O.G., Bloom M. and Mattress A. Model of lipid-protein interactions in membranes. Biophys. J., 1984, v. 46, p. 141-153.

112. Peschke J., Riegler J. and Mohwald H. Quantitative analysis of membrane distortions induced by mismatch of protein and lipid hydrophobic thickness. Eur. Biophys. J., 1987, v. 14, p. 385-391.

113. Sackmann E., Kotulla R. and Heiszler F.-J. On the role of lipid bilayer elasticity for the lipid-protein interaction and the indirect protein-protein coupling. Can. J. Biochem. Cell Biol., 1984, v. 62, p. 778-788.162

114. Morrow M.R., Huschilt J.C. and Davis J.H. Simultaneous modeling of phase and calorimetric behaviour in an amphiphilic peptide/phospholipid model membrane. Biochemistry, 1985, v. 24, p. 5396-5406.

115. Pearson L.T., Chan S.I., Lewis B.A. and Engelman D.M. Pair distribution functions of bacteriorhodopsin and rhodopsin in model bilayers. Biophys. J., 1983, v. 43, p. 167174.

116. Yu K.-Y., Baldanare J.J. and Chien H. Physical-chemical studies of phospholipids and poly(amino acids) interactions. Biochemistry, 1974, v. 13, p. 4375-4381.

117. Hartmann W. and Galla H.J. Binding of polylysine to charged bilayer membranes. Molecular organization of lipid/peptide complex. Biochim. Biophys. Acta, 1978, v. 509, p. 474-490.

118. Hartmann W., Galla H.J. and Sackmann E. Direct evidence of charge-induced lipid domain structure in model membranes. FEBS Lett., 1977, v. 78, p. 169-172.

119. De Kruijff B. and Cullis P.R. The influence of poly-L-lysine on phospholipid polymorphism. Biochim. Biophys. Acta, 1980, v. 601, p. 235-240.

120. Killian J.A. and de Kruijff B. Importance of hydration for gramicidin-induced hexagonal Hn phase formation in dioleoylphosphatidylcholine model membranes. Biochemistry, 1985, v. 24, p. 7890-7898.

121. Taraschi T.F., de Kruijff B„ Verkleij A. and Van Echteld C.J.A. Effect of glycophorin on lipid polymorphism: a 31P-NMR study. Biochim. Biophys. Acta, 1982, v. 685, p. 153-161.

122. Birell G.B. and Griffith O.H. Cytochrom c induced lateral phase separation in diphosphatidylcholineand cardiolipin spin-labelled model membrane. Biochemistry, 1976, v. 15, p. 2925-2929.163

123. De Kxuijff B. and Cullis P.R. Cytochrom C specifically induces nonbilayer structures in cardiolipin containing model membranes. Biochim. Biophys. Acta, 1980, v. 602, p. 477-490.

124. Fraser P.E., Rand R.P. and Deber C.M. Bilayer-stabilizing properties of myelin basic protein in dioleoylphosphatidylethanolamine systems. Biochim. Biophys. Acta, 1989, v. 983, №1, p. 23-29.

125. Habermann E. Bee and wasp venoms. Science, 1972, v. 177, p. 314-322.

126. Dawson C.R., Drake A.F., Helliwell J. and Hider R.C. The interaction of bee melittin with lipid bilayer membranes. Biochim. Biophys. Acta, 1987, v. 510, p. 75-86.

127. Dufourcq J., Faucon J.F., Fourche G., Dusseux J.L., Le Haire M. and Krzywicki G. Morphological changes of phosphatidylcholine bilayers induced by melittin: vesicularization, fusion, discoidal particles. Biochim. Biophys. Acta, 1986, v. 502, p. 33-48.

128. Epand R.M. and Sturtevant J.M. A calorimetric study of peptide-phospholipid interactions: the glucagon-dimyristoylphosphatidylcholine complex. Biochemistry, 1981, v. 20, p. 4603-4606.

129. Anantharamaiah G.M., Jones J.L., Brouillette C.G., Schmidt C.F. and Chung B.H. Studies of synthetic peptide analogs of the amphipathic helix: structures of complexes with dimyristoylphosphatidylcholine. J. Biol. Chem., 1985, v. 260, p. 10248-10225.

130. Clarke S. The size and detergent binding of membrane proteins. J. Biol. Chem., 1975, v. 250, p. 5459-5469.

131. Tatulian S.A., Biltonen R.L. and Tamm L.K. Structural changes in a secretory phospholipase A2 induced by membrane binding: a clue to interfacial activation. J. Mol. Biol. , 1997, v. 268, № 5, p. 809-815.

132. Slater S.J., Kelly M.B., Taddeo F.J., Rubin E. and Stubbs C.D. The modulation of protein kinase C activity by membrane lipid bilayer structure. J. Biol. Chem., 1994, V. 269, v 7, p. 4866-4871.164

133. Kent C., Carman G.M., Spence M.W. and Dowhan W. Regulation of eukaryotic phospholipid metabolism. FASEB J., 1991, v. 5, p. 2258-2266.

134. Collins D. and Cha Y. Interaction of recombinant granulocyte colony stimulating factor with lipid membranes: enhanced stability of a water-soluble protein after membrane insertion. Biochemistry, 1994, v. 33, № 15, p. 4521-4526.

135. Fleury L., Ollivon M., Puisieux F. and Barratt G. Preparation and characterization of dipalmitoylphosphatidylcholine liposomes containing interleukin-2. Braz. J. Med. Biol. Res., 1995, v. 28, № 5, p. 519-529.

136. Dabrowska A., Terlecki G., Czapinska E. and Gutowicz J. Interaction of bovine heart pyruvate kinase with phospholipids. Biochim. Biophys. Acta, 1995, v. 1236, p. 299-305.

137. Goldmann W.H., Niles J.L. and Arnaout M.A. Interaction of purified human proteinase 3 (PR3) with reconstituted lipid bilayers. Eur. J. Biochem., 1999, v. 261, p. 155-162.

138. Rourke A.M., Cha Y. and Collins D. Stabilization of granulocyte colony-stimulating factor and structurally analogous growth factors by anionic phospholipids. Biochemistry, 1996, v. 35, № 36, p. 11913-11917.

139. Bider M.D., Cescato R., Jeno P. and Spiess M. High-affinity ligand binding to subunit HI of the asialoglycoprotein receptor in the absence of subunit H2. Eur. J. Biochem., 1995, v. 230, p. 207-212.

140. Tanford C. The hydrophobic effect and the organization of living matter. Science, 1978, v. 200, p. 1012.

141. Kabanov A.V. Lipid modification of proteins and their membrane transport. Biochem. Mol. Biol. Internat. ,1993, v. 29, p. 944-947.

142. Kabanov A.B., Levashov A.V., Alakhov V.Y., Kravtsova T.N. and Martinek K. Lipid modification of proteins and their membrane transport. Collection Czech. Chem. Commun., 1989, v.54, p. 835-837.

143. Targeting of drugs, advances in system constructs. (Gregoriadis G., McCormack B. and Poste G„ Edc.) NATO ASI Series, 1994, p. 207.

144. Zalipsky S., Brandeis E., Newman M.S. and Woodle M.C. Long circulating, cationic liposomes containing amino-PEG-phosphatidylethanolamine. FEBS Lett., 1994, v. 353, p. 71-74.

145. Lee J. and Low P.S. Folate-mediated tumor cell targeting of liposome-entrapped doxorubicin in vitro.Biochem. Biophys. Acta, 1995, v. 1233, p. 134-144.

146. Швец В.И., Краснопольский Ю.М., Каплун А.П., Степанов А.Е. Биотехнологические подходы к развитию терапевтических и диагностических препаратов липидной природы. Вопр. Мед. Химии, 1997, т. 43, № 5, с. 416-424.

147. Szoka F.C. The future of liposomal drug delivery. Biotechnol. Appl. Biochem., 1990, v. 12, p. 496-500.

148. Торчилин, В.П., Клибанов, А.Л. Липосомы как средства направленного транспорта лекарств. Журн. Всесоюзного Хим. общества им. Менделеева, 1987, т. 32, с. 502-514.

149. Gregoriadis G; Florence А.Т. Liposomes and cancer therapy. Cancer Cells, .1991 v. 3, p. 144-146.

150. Peeters P.A.M., Claessens C.A.M., Eling W.M.C. and Crommelin D.J.A. Immunospecific targeting of liposomes to erythrocytes. Biochem. Pharmacol., 1988, v. 37, p. 2215-2222.

151. Forssen E.A. Liposomes as drug carriers. Ed. Gregoriadis G., Elsevier, New York, 1988, p. 180.

152. Gregoriadis G., Leathwood P.D. and Ryman B.E. Enzyme entrapment in liposomes. FEBS Lett., 1971, v. 14, p. 95-116.166

153. Gregoriadis G. and Ryman B.E. Fate of protein-containing liposomes injected into rats. An approach to the treatment of storage diseases. Eur. J. Biochem., 1972, v. 24, p. 485-498.

154. Gregoriadis G. and Neerunjun D.E. Control of the rate of hepatic uptake and catabolism of liposome-entrapped proteins injected into rats. Possible therapeutic applications. Eur. J. Biochem., 1974, v. 47, p. 179-190.

155. Juliano R.L. and Stamp D. Effects of particle size and charge on the clearance of liposomes and liposome-encapsulated drugs. Biochem. Biophys. Res. Communs., 1975, v. 63, p. 651-670.

156. Ivey H.H. Liposomes and Immunobiology. Ed. Shmidt V., Elseiver, N.Y., 1980, p. 301.

157. Gregoriadis G. and Ryman B.E. Lysosomal localization of P-fructofuranosidase-containing liposomes injected into rats. Some implications in the treatment of genetic disorders. Biochem. J., 1972, v. 129, p. 123-140.

158. Allen T.M. and Hansen C. Pharmacokinetics of stealth versus conventional liposomes: effect of dose. Biochim. Biophys. Acta, 1991, v. 1068, p. 133-145.

159. Allen T.M., Hansen C. and Rutledge J. Liposomes with prolonged circulation times: factors affecting uptake by reticuloendothelial and other tissues. Biochim. Biophys. Acta, 1989, v. 981, p. 27-42.

160. Klibanov A.L., Maruyama K., Torchilin V.P. and Huang L. Amphipathic polyethyleneglycols effectively prolong the circulation time of liposomes. FEBS Lett., 1990, v. 268, p. 235-242.

161. Clinique H.J. Liposome as drug delivery system in the treatment of infections in patients with cancer. Infection, 1988, v. 16, № 3, p. 141-147.

162. Weinstein J.N. Liposomes and local hyperthermia: selective delivery of methotrexate to heated tumors. Science, 1979, v. 204, p. 188.

163. Марголис Л.Б., Намиот B.A., Клюкин Л.М. Сортировка клеток при использовании магнитолипосом. Биофизика, 1983, т. 28, с. 884.

164. Каплун А.П., Сон Л.В., Краснопольский Ю.М., Швец В.И. Липосомы и другие наночастицы как системы доставки лекарств. Вопр. Мед. Химии, 1999, т. 45, № 1, с. 3-12.167

165. Kassel В., Radicevic R., Berlow S., Peanasky R.J., Laskowski M.Sr. The basic trypsin inhibitor of bovine pancreas. I. An improved method of preparation and amino acid composition. J. Biol. Chem., 1963, v. 238, p. 3274-3286.

166. Wlodawer A., Nachman J., Gillilan, G. L., Gallagher W. And Woodward, C. Structure of form /III crystals of bovine pancreatic trypsin inhibitor. J.Mol.Biol., 1987, v. 198, p. 467-478.

167. Мосолов В.В. Белковые ингибиторы как регуляторы процессов протеолиза. М.: Наука, 1983, с. 39.

168. Березин И.В., Казанская Н.Ф., Ларионова Н.И. Взаимодействие четырех форм трипсина со специфическим субстратом и панкреатическим ингибитором. Биохимия, 1970, т. 35, с. 983-988.

169. Belorgey D., Dirrig S., Amouric M., Figarella С. And Bieth J.G. Inhibition of human pancreatic proteinases by mucus proteinase inhibitor, eglin с and aprotinin. Biochem. J., 1996, v. 313, p. 555-560.

170. Barthel T. and Kula M.-R. Rapid purification of DesPro(2)-Vall5-Leul7 aprotinin from the culture broth of a recombinant Saccharomyces Cerevisiae. Biotechnol. Bioeng., 1993, v. 42, p. 1331-1336.

171. Yu J.X., Chao L. and Chao J. Prostasin is a novel human serine proteinase from seminal fluid. Purification, tissue distribution, and localization in prostate gland. J. Biol. Chem., 1994, v. 269, № 29, p. 18843-18848.

172. Fritz H., Fink E. and Truscheit E. Kallikrein inhibitors. Federation Proceedings, 1979, v. 38, № 13, p. 2753-2759.

173. Rezaie A.R., Xuhua H. And Esmon C.T. Thrombomodulin increases the rate of thrombin inhibition by BPTI. Biochemistry, 1998, v. 37, p. 693-699.

174. Kassel B. Bovine trypsin-kallikrein inhibitor (Kunitz inhibitor, basic pancreatic trypsin inhibitor, polyvalent inhibitor from bovine organs). Methods Enzymol., 1970, v. 19, p. 844-852.

175. Schroeder D.D. and Shaw E. Chromatography of trypsin and its derivatives. Characterization of anew active form of bovine trypsin. J. Biol. Chem., 1968, v. 243, p. 2943-2949.168

176. Davis R. and Whittington R. Aprotinin. A review of its pharmacology and therapeutic efficacy in reducing blood loss associated with cardiac surgery. Drugs, 1995., v. 49, №6, p.954-983.

177. Robert S., Wagner B.K., Boulanger M. and Richer M. Aprotinin. Ann. Pharmacother., 1996, v. 30 № 4; p. 372-380.

178. Общее обезболивание при обширных хирургических операциях в онкологии. Методические рекомендации. М.; 1992.

179. Sharma J.N., Amrah S.S. and Noor A.R. Suppression of hypotensive responses of Captopril and enalapril by the kallikrein inhibitor aprotinin in spontaneously hypotensive rats. Pharmacology, 1995, v. 50, № 6, p. 363-369.

180. Quereshi A., Lamont J., Burke P., Grace P. and Bouchier-Hayes D. Aprotinin: the ideal anti-coagulant? Eur. J. Vase. Surg., 1992, v. 6 № 3, p. 317-320.

181. Wendel H.P., Heller W. and Gallimore M.J. Influence of heparin, heparin plus aprotinin and hirudin on contact activation in a cardiopulmonary bypass model. Immunopharmacology, 1996, v. 32, № 1-2, p. 57-61.

182. Жирнов О.П. Молекулярные механизмы протеолитического процессинга вирусных белков и проблема антивирусной химиотерапии и конструирования вакцин. Молекулярная биология, 1988, т. 22, Jte 3, с. 581-600.

183. Голяндо П.Б., Овчаренко A.B., Жирнов О.П. Ингибирование репродукции вируса гриппа апротинином. Вопросы вирусологии, 1992, т. 37, № 3, с. 144-146.

184. Жирнов О.П., Овчаренко A.B., Голяндо П.Б., Свиногеева Т.П., Долгова Г.В., Никитин A.B. Антивирусный аэрозоль апротинина. Общее воздействие на организм при ингалляционном введении. Антибиотики и химиотерапия, 1994, т. 39, № 5, с. 25-32.

185. Ларионова Н. И., Казанская Н. Ф., Митюшина Г. В., Блидченко Ю. А., Владимиров В. Г. Фармакокинетика основного поливалентного ингибитора протеаз, связанного с карбоксиметиловым эфиром декстрана. Хим. фарм. журнал, 1984, № 10, с. 1167-1172.

186. Стручков В.И., Григорян А.В., Гостинцев В.К. Протеолитические ферменты в гнойной хирургии. М.: Медицина, 1970, с. 408.

187. Машковский М.Д. Лекарственные средства, Изд-во Медицина, 1993, т. 2, с. 57.

188. Von Specht B.U. and Brendel W. Preparation and properties of trypsin and chymotrypsin coupled covalently to poly(N-vinylpyrrolidone). Biochim. Biophys. Acta, 1977, v. 484, p. 109-114.

189. Линденбаум Г.М., Миргородская О.А. Химическая модификация трипсина водорастворимыми декстранами. Прикл. Биохим. Микробиол., 1978, т. 14, № 5, с. 719-723.

190. Березин И.В., Казанская Н.Ф., Ларионова Н.И. К вопросу об определении константы равновесия реакции трипсин-ингибитор трипсина из легочной ткани крупного рогатого скота. Биохимия, 1070, т. 35, № 2, с. 261-269.

191. Chase Т. and Shaw Е. P-Nitrophenyl-p-guanidinobenzoate НС1: a new active site titrantfor trypsin. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1967, v. 29, p. 508-514.

192. Baugh R.J. and Travis J. Regulation of the leukocyte proteinases by the human plasma proteinase inhibitors. Biochemistry, 1976, v. 15, p. 836-841.

193. Кейтс M. Техника липидологии. M.: Мир, 1975, 138-164.

194. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография. М.: Мир, т. 1, 1981, с. 606.

195. Кабанов А.В. Химическая модификация водорастворимых белков (ферментов для придания им мембраноактивных свойств. Дисс. . канд.хим.наук М., 1987.

196. Сахаров И. Ю. Физико-химическое изучение модифицированных форм основного панкреатического ингибитора трипсина. Дисс.канд. хим. наук М. 1981

197. Fields R. The measurement of amino groups in proteins and peptides J. Biochem., 1971, v. 124, p. 581-590.

198. Ларионова Н.И., Казанская Н.Ф., Сахаров И.Ю., Березин И.В. Растворимые высокомолекулярные производные панкреатического ингибитора трипсина. Биохимия, 1979, т. 44, вып. 11, стр. 2033-2038.170

199. Svetashev V.I., Vaskovsky V.E. A simplified technique for thin-layer microchromatography of lipids. J. Chromatog. 1972. v. 65. p.451-455.

200. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal.Biochem. 1976, v. 72, p. 248-254.

201. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. and Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J. Biol. Chem., 1951, v. 193, p. 265-275.

202. Rodriguez-Vico F. A procedure for eliminating interferences in the Lowry method of protein determination. Anal. Biochem., 1989, v. 183, p. 275-278.

203. Schwert G.W. and Takenaka Y. A spectrophotometric determination of trypsin and chymotrypsin. Biochem. Biophys. Acta, 1955, v. 16, p. 570-576.

204. Bordier C. J. Phase separation of integral membrane proteins in Triton X-114 solution. J. Biol. Chem., 1981, v. 256, № 4, p. 1604-1607.

205. Reisfeld R.A., Lewis U.I. and Williams D.E. Disc-electrophoresis of basic proteins and peptides on polyacrylamide gels. Nature, 1962, v. 195, p. 281-290.

206. Fioretti E., Angeletti M. and Cottini M. T. Binding of basic pancreatic trypsin inhibito and related isoinhibitors to leukocytic elastase. Determination of thermodynamic parameters. J. Mol. Rec., 1989, v. 2, №. 3, p. 142-146.

207. Andrieux K., Lesieur S., Ollivon M. and Grabielle-Madelmont C. Methodology for vesicle permeability study by high-perfomance gel exclusion chromatography. J. Chromatogr. B. Biomed. Sci. Appl., 1998, v. 706, № 1, p. 141-147.

208. Шевченко A.A., Кост O.A., Казанская Н.Ф. Количественный метод оценки доступности водному растворителю остатков триптофана в молекуле белка. Биоорг. Химия, 1994, т. 20, с. 263-267.

209. Dlouha V., Pospisilova D., Meloun В. And Sorm F. On proteins XCIV. Primary structure of basic pancreatic trypsin inhibitor from beef pancreas. Collection Czech. Chem. Commun., 1965, v. 30, p. 1311-1315.

210. Скоупс P. Методы очистки белков. M.: Мир, 1985.

211. Bonnie М. and Merck М. Z. Inhibition of HLE by cis-unsaturated fatty acids. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1977, v. 75, №. 1, p. 194-199.171

212. Hoare D.J. and Koshland D.E. A method for the quantitative modification and estimation of carboxylic acid groups in proteins. J. Biol. Chem., 1967, v. 242, № 10, p. 2447-53.

213. Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика. М.: Мир, 1991, с. 481.

214. Rand R.P. and Gupta S.S. Cardiolipin forms hexagonal structures with divalent cations. Biochim. Biophys. Acta, 1972, v. 255, p. 484-493.

215. Wolf W.J. and Thomas B.W. Ion-exchange chromatography of soybean saponins. J. Cromatogr., 1971, v. 57, p. 281-293.

216. Владимиров Ю.А. Фотохимия и люминесценция белков. М.: Наука, 1965, 35-65с.

217. Bhamidipati S.P. and Hamilton J.A. Interactions lysopalmitoylphosphatidylcholine with phospholipids: a 13C and 31P NMR study. Biochemistry, v. 34, № 16, p. 5666-5677.

218. Liu D. and Huang L. Trypsin-induced lysis of lipid vesicles: effect of surface charge and lipid composition. Anal. Biochem., 1992, v. 202, p. 1-5.

219. Yagle P. Hydration and the lamellar to hexafonal II phase transition of phosphatidylethanolamine. Biochemistry, 1986, v. 25, p. 7518-7522.

220. Van Paridon P.A., de Kruijff В., Ouwerkerk R. and Wirtz K.W. Polyphosphoinositides undergo charge neutralization in the physiological pH range: a 31P-NMR study. Biochim.Biophys. Acta, 1986, v. 877, № 1, p. 216-219.

221. Farren S.B., Hope M.J. and Cullis P.R. Polymorphic phase preferences of phosphatidic acid: A 31P and 2H NMR study. Biochim. Biophys. Res. Communs,1983, v. Ill, p. 675-682.

222. White S.H. and Wimley W.C. Hydrophobic interactions of peptides with membrane interfaces. Biochim.Biophys.Acta, 1998, v. 1376, p. 339-353.

223. Кученкова O.E., Ярославов A.A., Кабанов B.A. Размер отрицательно заряженных липосом кардинально влияет на их поведение при взаимодействии с полилизином. ДАН, 1999, т. 369, № 6, с. 778-780.172

224. Foster R.L. Preparation and properties of a soluble trypsin-dextran conjugate Experientia, 1975, v. 31, № 7, p. 772-783.