Иммобилизованные на полимерных носителях гликозидазы - катализаторы гидролиза гетерополисахаридов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.15, кандидат химических наук Ожимкова, Елена Владимировна

  • Ожимкова, Елена Владимировна
  • кандидат химических науккандидат химических наук
  • 2009, МоскваМосква
  • Специальность ВАК РФ02.00.15
  • Количество страниц 139
Ожимкова, Елена Владимировна. Иммобилизованные на полимерных носителях гликозидазы - катализаторы гидролиза гетерополисахаридов: дис. кандидат химических наук: 02.00.15 - Катализ. Москва. 2009. 139 с.

Оглавление диссертации кандидат химических наук Ожимкова, Елена Владимировна

Введение

1 Литературный обзор

1.1 Гидролитические ферменты

1.1.1 Гликозидазы

1.1.2 Ферментный комплекс Tricho derma viride

1.2 Ксиланазы

1.2.1 Общая характеристика ксиланаз

1.2.2 Механизм каталитического действия

1.2.3 Применение ксиланаз

1.3 Иммобилизация ферментов

1.3.1 Методы иммобилизации ферментов

1.3.2 Практическое использование иммобилизованных ферментов

1.3.3 Иммобилизация гликозидаз

1.4 Растительные олигосахариды

1.4.1 Общая характеристика олигосахаридов

1.4.2 Применение растительных олигосахаридов

1.4.3 Получение олигосахаридов

1.5 Ферментативный гидролиз полисахаридов

1.5.1 Общая характеристика растительных полисахаридов

1.5.2 Ультразвуковая экстракция полисахаридов из растительного сырья

1.5.3 Применение растительных полисахаридов

1.5.3.1 Полисахариды валерианы лекарственной

1.5.3.2 Полисахариды льна обыкновенного

2 Методы и методики экспериментов и анализов

2.1. Выбор объекта исследований

2.2 Методики получения субстратов

2.2.1 Экстракция полисахаридов валерианы лекарственной

2.2.2 Методы анализа и контроля процесса экстракции полисахаридов валерианы лекарственной

2.2.2.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография

2.2.2.2 Инфракрасная Фурье - спектроскопия

2.3 Экстракция полисахаридов льна

2.3.1 Обоснование выбора сорта льна

2.3.1.1 Определение концентрации гликанов в экстрактах

2.3.1.2 Определение содержания редуцирующих Сахаров

2.3.1.3 Динамическое светорассеяние

2.3.2 Методика ультразвуковой экстракции полисахаридов

2.3.3 Методы анализа и контроля ультразвуковой экстракции полисахаридов семян льна

2.3.3.1 Определение сухого остатка

2.3.3.2 Измерение вязкости экстрактов

2.4 Методика проведения кислотного гидролиза полисахаридов льна и валерианы лекарственной

2.5 Методика получения катализаторов

2.5.1 Характеристика носителей

2.5.2 Синтез катализаторов

2.5.2.1 Методика получения каталитических систем на основе SEPABEADS ЕС-ЕР

2.5.2.2 Методика получения каталитических систем на основе SEPABEADS ЕС-НА

2.5.2.3 Расчет степени адсорбции и иммобилизации ферментного препарата

2.6 Определение оптимальных условий и кинетических параметров действия ферментного комплекса Trichoderma viride

2.7 Гидролиз полисахаридов льна ферментным комплексом 72 Trichoderma viride

2.8 Определение оптимального катализатора

2.9 Подтверждение полиферментной активности каталитической системы

2.10 Физико-химические методы исследования образцов катализаторов

2.10.1 Рентгенофотоэлектронная спектроскопия

2.10.2 Исследование поверхностных характеристик катализаторов низкотемпературной адсорбцией азота

2.11 Методы клинических испытаний олигосахаридов валерианы

2.12 Использованные реактивы

3 Результаты экспериментов и их обсуждение

3.1 Экстракция гетерополисахаридов из растительного сырья

3.1.1 Анализ полисахаридов валерианы лекарственной

3.1.1.1 Характеристика полисахаридных экстрактов методом ВЭЖХ

3.1.1.2 Характеристика полисахаридных экстрактов методом ИК спектроскопии

3.1.2 Экстракция полисахаридов льна

3.1.2.1 Обоснование выбора сорта льна

3.1.2.2 Определение оптимальных условий и методы контроля ультразвуковой экстракции полисахаридов льна

3.1.3 Результаты кислотного гидролиза полисахаридов валерианы лекарственной и льна обыкновенного

3.2 Оптимизация состава катализаторов

3.3 Результаты физико-химические исследований

3.3.1 Инфракрасная Фурье спектроскопия

3.3.2 Рентгенофотоэлектронная спектроскопия образцов

3.3.3 Исследование поверхностных характеристик образцов

3.4 Определение условий проведения экспериментов по гидролизу гетерополисахаридов

3.5 Определение условий действия иммобилизованного ферментного комплекса Trichoderma viride

3.6 Определение кинетических характеристик катализатора Н2-М-Е

3.7 Операционная стабильность катализатора Н2-М-Е

3.8 Результаты клинических испытаний 123 Выводы 125 Список использованных источников 127 Приложение А

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Катализ», 02.00.15 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммобилизованные на полимерных носителях гликозидазы - катализаторы гидролиза гетерополисахаридов»

В последнее время растительные олигосахариды находят все более широкое применение в различных отраслях пищевой промышленности: при производстве различных напитков (фруктовые воды, чаи и пр.), молочных продуктов (йогуртов, мороженого, порошкового молока), а также при создании пребиотичеких и симбиотических продуктов питания, при производстве кондитерских изделий (желе, кексы, мармелады и т.д.). Что касается непищевого использования олигосахаридов, то они успешно применяются при создании систем доставки лекарственных средств и различных биоимплантов, а также в косметической промышленности.

На сегодняшний день существует несколько основных способов получения олигосахаридов: непосредственное выделение из растительного сырья; химический и ферментативный синтез из моносахаридов, а также гидролиз (кислотный и ферментативный) растительных полисахаридов, при этом особого внимания заслуживает энзиматическая деградация гетерополисахаридных субстратов иммобилизованными ферментами. Разработано довольно много методов иммобилизации ферментов, тем не менее, нельзя выделить метод, который был бы эффективен для всех ферментов. Одним из методов иммобилизации является ковалентное закрепление фермента на полимерных носителях, которые должны обладать рядом свойств: механическая прочность, высокая химическая стойкостью и невысокая стоимость.

В промышленности широко используются моноферментные каталитические системы гидролиза крахмалистых гомополисахаридов. Однако естественными компонентами пищевого рациона человека всегда являлись частично деградируемые кишечной микрофлорой гетерополисахариды, продукты гидролиза которых оказывают многосторонние положительные эффекты на здоровье человека. В рационе современного человека доля подобных соединений существенно уменьшилась и это связано, прежде всего, с тем, что гетерополисахариды рассматриваются как балластные компоненты лекарственного и пищевого растительного сырья, наличие и содержание которых не нормируется, а их главный исочник - отходы переработки зерновых культур и дикорастущих растений игнорируются, что приводит к развитию дисбактериозов у большинства жителей развитых стран и широкому распространению иммунодефицитных состояний. Решить данную проблему можно только с использованием полифункциональных ферментативных систем, позволяющих эффективно получить необходимые фракции низкомолекулярных продуктов гидролиза для использования их в качестве функционально активных компонентов пищи. В связи с этим, создание и установление свойств стабильных катализаторов на основе иммобилизованных на твердом полимерном носителе комплекса ферментов для гидролиза гетерополисахаридов является актуальным, перспективным и экономически выгодным направлением исследований.

Цель работы заключается в разработке эффективных катализаторов гидролиза растительных гетерополисахаридов на основе иммобилизованного гликолитического ферментного комплекса гриба Trichoderma viride.

Для достижения поставленной цели в диссертационной работе решались следующие задачи: теоретический анализ методов иммобилизации ферментов и обоснование выбора исходных компонентов каталитической системы;

- оптимизация состава разрабатываемой каталитической системы; исследование оптимальной каталитической системы физико-химическими методами для формулировки гипотезы о структуре полученного катализатора;

- теоретическое обоснование выбора источников гетерополисахаридов и разработка эффективного метода экстракции гликанов из растительного сырья;

- экспериментальное исследование кинетики гидролиза растительных гетерополисахаридов на оптимальном катализаторе;

- расчет кинетических параметров процесса каталитического гидролиза гликанов и определения условий реакции, при которых достигается максимальное накопление олигосахаридов в реакционной среде.

Научная новизна и практическая значимость работы. В работе теоретически обоснована и экспериментально подтверждена целесообразность использования полимерных носителей для иммобилизации гликолитического ферментного комплекса гриба Trichoderma viride. Впервые изучено влияние модификации носителя на активность и стабильность полученных катализаторов, а также проведен сравнительный анализ синтезированных катализаторов на основе двух различных полимерных носителей. На основе модифицированного глутаровым альдегидом носителя получена каталитическая система, сохраняющая активность в течение 10 циклов. На основании экспериментальных данных определены кинетические параметры процессов ферментативного гидролиза ксилана, полисахаридов льна обыкновенного и валерианы лекарственной оптимальной каталитической системой. Подобраны оптимальные условия реакций гидролиза гетерополисахаридов для накопления максимального количества три- и пентаолигосахаридов в реакционной среде. Впервые предложены эффективные методики получения доступных гетерополисахаридов, являющиеся перспективными субстратами для ферментативного получения олигосахаридов. Доказана эффективность использования ультразвукового воздействия на процесс экстракции полисахаридов льна, что позволяет существенно сократить время экстракции.

Апробация работы. Основные положения диссертационной работы докладывались на следующих конференциях: XI, XII Региональных Каргинских чтениях - Областной научно-технической конференции молодых ученых "Физика, химия и новые технологии" (Тверь, 2005, 2006), Международных конференциях молодых ученых "Живые системы и биологическая безопасность населения" (Москва, МГУ ПБ, 2006, 2008), V и VI Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2008, 2009 гг.), XV и XVI Международных конференциях студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (Москва, 2008, 2009 г.), на втором Международного форуме «Аналитика и аналитики» (Воронеж, 2008), XIII Международной Пущинской школы-конференции молодых ученых «Биология-наука XXI века» (Пущино, 2009).

1 Литературный обзор

Похожие диссертационные работы по специальности «Катализ», 02.00.15 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Катализ», Ожимкова, Елена Владимировна

выводы

1) Разработан и обоснован способ получения гетерогенной каталитической системы на основе гидролитического ферментного комплекса гриба Trichoderma viride. Для синтезированного катализатора подобраны оптимальные условия процесса гидролиза различных гетерополисахаридов. Установлено, что иммобилизация не приводит к изменению оптимальных условий действия фермента. Определено оптимальное соотношение компонентов каталитической системы «носитель— модификатор-фермент», а также обосновано время синтеза катализатора.

2) Методом ИК-Фурье-спектроскопии показано, что существуют прочные ковалентные связи между носителем, модификатором и ферментным комплексом, что определяет стабильность полученной каталитической системы при многократном использовании.

3) Исходя из анализа кинетических зависимостей и значений констант скоростей была выдвинута гипотеза о некоторых особенностях механизма гидролиза гетерополисахаридов на разработанном гетерогенном катализаторе в том числе о незначительном влияние иммобилизации на распределение относительных активностей внутри ферментного комплекса. Каталитическая система пригодна для повторного использования (не менее 10 раз) и может быть использована для гидролиза растительных гликанов с целью получения олигосахаридов различной степени полимеризации.

4) Подобраны оптимальные условия проведения реакции для накопления максимального количества физиологически активных три- и пентаолигосахаридов в реакционной среде для каждого субстрата.

5) Клинические испытания показали перспективность использования фракции низкомолекулярных углеводов валерианы лекарственной в качестве иммуномодуляторов и пребиотиков.

6) Разработаны эффективные методики получения гетерополисахаридов из доступного растительного сырья. Метод ультразвуковой экстракции гликанов льна защищен патентом на изобретение РФ № 2358983.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Ожимкова, Елена Владимировна, 2009 год

1. Клесов, А.А. Ферментативный катализ: учеб. пособие для хим. спец. ун-тов. Ч. 2 / А.А. Клесов, И.В. Березин. М.: Московский гос. ун-т, 1984. -216 с.

2. Диксон, М. Ферменты / М. Диксон, Э. Уэбб. В 3-х т. - Пер. с англ. Т. 1-2. - М.: Мир, 1982. - 808 с.

3. Кислухина, О.В. Ферменты в производстве пищи и кормов / О.В. Кислухина. М.: Дели Принт, 2002. - 336 с.

4. Rhamnogalacturonase: a novel enzyme that degrades the hairy regions of pectins / H.A. Schols, С .Geraeds, S.-V. Leeuwen, F. Kormelink, A. Voragen // Carbohydr Res. 1990. - Vol. 206. - P. 105-115.

5. Aspergillus Enzymes Involved in Degradation of Plant Cell Wall Polysaccharides / S.L. Christgau, V. Kofod, T. Halkier, L. N. Anderson, M. Hockauf, K. Dorreich, H. Dalboge, and S. Kauppinen. //J. Biol. Chem. 1995. - Vol. 270. -P.27172-27178.

6. Petersen, T. The crystal structure of rhamnogalacturonase A from Aspergillus aculeatus: a right-handed parallel beta helix / T. Petersen, S. Kauppinen, S. Larsen II Structure. 1997. - Vol. 5 (4). - P. 533-544.

7. Characterization of recombinant ramnogalacturonan-l-rhamnopyranosyl-(l,4)-d-galactopyranosyl uronide lyase from Aspergillus aculeatus / M. Mutter, I. Colquhoun, G. Beldman, H. Schols, E. Bakx, A.Voragen // Plant Physiol. 1998. -Vol. 117. - P.141-152.

8. Vlugt-Bergmans, V. / Endo-Xylogalacturonan Hydrolase, a Novel Pectinolytic Enzyme / V.Vlugt-Bergmans, P. Meeuwsen, A.Voragen // Appl Environ Microbiol. 2000. - Vol. 66 (1). - P. 36 - 41

9. Endoxylogalacturonan Hydrolase and Endopolygalacturonases / G.Beldman, J.P. Vincken, H.A. Schols, A. Meeuwsen, M. Herweijer, A. Voragen //Biocatal Biotransformation. 2003. - Vol. 21. - P. 189 - 198.

10. Enzymatic degradation studies of xylogalacturonans from apple and potato, using xylogalacturonan hydrolase / J. Zandleven, G. Beldman, M. Bosveld, H. Schols, A. Voragen // Carbohydr Polym. 2006. - Vol. 65. - P.495 - 503.

11. Aspinall, G.O. Gum Tragacanth. Part I. Fractionation of the gum and the structure of tragacanthic acid / G.O. Aspinall, J. Baillie // Chem. Soc. 1963. - № 318. -P.1702-1714

12. Vlugt-Bermans, V. Endo-Xylogalacturonan hydrolase and Endopolygalacturonases, a Novel Pectinolytic Enzymes / V. Vlugt-Bermans// Appl. Environ. Microbiol. 2002. - Vol. 62 (4). - P. 26 - 31.

13. Voragen, A. Cellulases of a mutant strain of Trichoderma viride QM 9414/ A. Voragen, G.Beldman, F.Rombouts // Methods Enzymol. 1988. - Vol. 160. -P. 243-251.

14. Production of beta-glucosidase, exo-beta-l,4-glucanase and endo-beta-1,4-glucanase by selected microscopic fungi // J. Augustin, J. Zemek, B. Kuniak, O.Fassatiova // Folia Microbiol. (Praha). 1981. - Vol. 26. - P. 14 -18.

15. Versteeg, C. Pectinesterases from the orange fruit their purification, general characteristics and juice cloud destabilizating properties / C. Versteeg //Versl. Landbouwkd. Onderz. (Agric. Res. Rep.). - 1979. - Vol. 892. - P. 1-109.

16. Trichoderma xylanases: their properties and application / Y. Kenk A. Wong, N. John, A. Saddler // Critical reviews in biotechnology. 2008. - Vol. 12 (5). -P.413 -435.

17. Ujiie, M. Low-Molecular-Weight Xylanase from Trichoderma viride / M. Ujiie, C. Roy, M. Yaguchi // Applied and environmental microbiology. 1991. -Vol. 4.-P. 1860-1862.

18. Collins, Т. Xylanases, xylanase families and extremophilic xylanases / T.Collins, C.Gerday, G. Feller // FEMS Microbiology Reviews. 2005. - Vol. 29, P. 3-23.

19. Kulkarni, N. Molecular and biotechnological aspects of xylanases / N. Kulkarni, A. Shendye, M. Rao //FEMS Microbiology Reviews. 1999. - Vol. 23. -P.411-456.

20. Dekker, R. Purification, properties and mode of action of hemicellulase-produced by Ceratocystis paradoxa / R. Dekker, G. Richards // Carbohydr. Res. -1975.-Vol. 39.- P. 97-114.

21. Mishra, С. Production and properties of extracellular endoxylanases from Neurospora crassa. / C. Mishra, S. Keskar, M. Rao // Appl. Environ. Microbiol. 1984. - Vol. 48. - P. 224 - 228.

22. Daniels, M. J. Using biological enzymes in papermaking / M.J. Daniels// Pap. Technol. 1992. - Vol.33(6). -P.14.

23. Eriksson, L. Biotechnology: three approaches to reduce the environmental impact of the pulp and paper industry / L. Eriksson // Sci. Progress. -1991.- Vol. 75.-P. 175.

24. Purification and properties of thermostable xylanase from Tuluromyces byssochlamydoides YH-50 / H. Yoshioka, N. Nagato, S. Chavanich, N. Nilubol, S. Hayashida // Agric. Biol; Chem. 1981. - Vol. 45. - P. 2425.

25. The cellulase of Trichoderma viride. Purification, characterization and comparison of all detectable endoglucanases, exoglucanases and P-glucosidases / G. Beldman, S. Leeuwen, M. Rombouts, F. Voragen // Eur. J. Biochem. 1985. - Vol. 146.-P.301. .

26. Tischer, W. Immobilized enzymes: methods and applications / W. Tischer, F. Wedekind // Top Curr Chem. 1999. - Vol. 200. - P. 95 -126.

27. Short recursive procedure for evaluating effectiveness factors for immobilized enzymes with reversible Michaelis Menten kinetics / C.Gomez, A.

28. Santoyo, E. Gomez, J.Rodriguez, M.Maximo Martin, M. Gomez // ' Biochemical Engineering Journal. 2008. - Vol. 39(1). - P. 58-65.

29. Thomas, S.M. Biocatalysis: applications and potentials for the chemical industry / S.M. Thomas, R. DiCosimo, V. Nagarajan // Trends Biotechnol.- 2002 . -Vol. 20.-P.23 8-242.

30. Padma, V. Enzyme stability and stabilization Aqueous and nonaqueous environment / V. Padma, L. Ananthanarayan // Process Biochemistry. -2008.-Vol. 43.-P.1019- 1032.

31. Bullock, C. Immobilized enzymes / C. Bullock//Sci Progress. 1995.-Vol.78. - P. 119-34.

32. Tischer, W. Immobilized enzymes: crystals or carriers? / W. Tischer, V. Kasche // Trends Biotechnol. 1999. - Vol.17. - P. 326-335.

33. Jaeger, K.E. Protein technologies and commercial enzymes. White is the hypebiocatalysts on the move. / K.E. Jaeger // Curr. Opin. Biotechnol.- 2004. -Vol.15.-P. 269-271.

34. Дебабов, В.Г. Биотехнология/ В.Г. Дебабов, В.А. Лившиц. М.: Высшая школа, 1988. - 208 с.

35. Биотехнология / под ред. И. Хиггинса / перевод с английского / под ред. А.А. Баева. М.: Мир, 1988. - 479 с.

36. Woodley, JM. Immobilized biocatalysts./ J.M.Woodley // Solid Supports Catal Org Synth. 1992. - Vol.21.-P.254-271.

37. Panke, S. Enzyme technology and bioprocess engineering./ S. Panke, M. Wubbolts//Curr. Opin. Biotechnol. 2002. - Vol.13.-P. 111-116.

38. Immobilization of Streptomyces olivaceoviridis E-86 xylanase on Eudragit S-100 for xylo-oligosaccharide production // Process BiochemistryVolume.- 2005. Vol. 40 (8). - P.2707-2714.

39. Fungus (3-glycosidases: immobilization and use in alkyl-P-glycoside synthesis / M. Gargouri, I. Smaali, T. Maugard, M. Legoy, N. Marzouk // Journal of Molecular Catalysis B: Enzymatic. 2004. - Vol.29 (1-6). - P.89 - 94.

40. Mona, K. Catalytic properties of the immobilized Aspergillus tamarii xylanase / K. Mona, A. Abdel-Naby // Microbiological Research. 2002. - Vol. 157 (4).- P. 275-281.

41. Simultaneous purification and immobilization of Aspergillus niger xylanase on the reversibly soluble polymer Eudragit™ L-100 / S.Merya, R. Ipsita, N. Munishwar // Enzyme and Microbial Technology. 2000. - Vol. 27 (9). - P. 672 -679.

42. Kapoor, M. Immobilization of xylanase from Bacillus pumilus strain MK001 and its application in production of xylo-oligosaccharides./ M. Kapoor , R. Kuhad // Appl Biochem Biotechnol. 2007. - Vol. 142(2). - P.125-138.

43. Gawande, V. Preparation, characterization and application of Aspergillus sp. xylanase immobilized on Eudragit S-100 / V. Gawande, M. Y. Kamat // Journal of Biotechnology. - 1998. - Vol. 66 (2-3). - P. 165-175.

44. Methodology for the immobilization of enzymes onto mesoporous materials. / S. Hudson, E. Magner , J. Cooney, B. Hodnett // J Phys Chem B. 2005. -Vol. 109(41).-P. 19496 -506.

45. Кочетков, H.K. Химия углеводов/Н.К.Кочетков, А.Ф.Бочков, Б.А.Дмитриева, А.И.Усов. -М.:Химия, 1967. 673 с.

46. Stanek, J. The oligosaccharides / J. Stanek, M. Coerny, J. Pacak. стр, 1965 Prague: Pub. House of the Czechoslovak Academy of Sciences, 1965. 635 c.

47. Тихомирова, H.A. Технология продуктов функционального питания./Н.А. Тихомирова —M.: Франтэра. 2002.- 213 с.

48. Sako, Т. Recent progress on research and applications of non-digestible galacto-oligosaccharides./T.Sako, K.Matsumoto, R.Tanaka// International Dairy Journal. 1999. - Vol. 9. - P. 69 - 80.

49. Mussatto, S.I. Non-digestible oligosaccharides: a review/ S.I. Mussatto, I. M. Mancilha //Carbohydrate polymers. 2007. - Vol. 68 (3). - P. 587 - 597.

50. Gibson, G. R. Dietary modulation of the human colonic microbiota: Introducing the concept of prebiotics. / G.R.Gibson, M.B.Roberfroid // Journal of Nutrition. 1995. - Vol. 125. - P. 1401-1412.

51. Voragen, A. Technological aspects of functional food-related carbohydrates./ A.Voragen // Trends in Food Science & Technology. 1998. - Vol. 9. -P. 328 -335.

52. Crittenden, R.G. Production, properties and applications of food-grade oligosaccharides / R.G.Crittenden, M.J. Playne // Trends in Food Science & Technology. 1996. - Vol. 7. - P. 353 - 361.

53. Playne, R. Commercially available oligosaccharides / R. Playne, F. Crittenden //Bulletin of IDF. 1996. - Vol. 313. - P. 10 - 22.

54. Oligosaccharides engineering from plants and algae applications in biotechnology and therapeutics / C. Delattre etc. // Minerva Biotech. 2005. - Vol. 17.-P.107 -117.

55. Хотимченко, Ю.С. Физико-химические свойства, физиологическая активность и применение альгинатов. полисахаридов бурых водорослей /Ю.С. Хотимченко, В.В. Ковалев, О.В. Савченко, О.А. Зиганшина // Биология моря,-2001.-Т. 27 (З).-С. 151-162.

56. Kumar, M. A review of chitin and chitosan applications / M. Kumar // React. Funct. Polym. 2000. - Vol. 46. - P. 1- 27.

57. Yermak, I.M. Chemical properties, biological activities and applications of carrageenans from red algae / I.M. Yermak, Yu.S. Khotimchenko // Rec. Adv. Mar. Biotechnol. Science Publishers. 2003. - Vol. 9. - P. 207 - 255.

58. Plaami, S.P. Content of dietary fiber in foods and its physiological effects / S.P. Plaami // Food Rev. 1997. - Vol. 13. - P. 29-76.

59. Новицкий, Б.Г. Применение акустических колебаний в химико-технологических процессах / Б.Г. Новицкий М.: Химия, 1983. - 192 с.

60. Гершал, Д. А. Ультразвуковая аппаратура / Д. А. Гершал, В.М. Фридман М.: Энергия, 1967. - 300 с.

61. Vinatoru, М. An overview of the ultrasonically assisted extraction of bioactive principles from herbs / Vinatoru M. // Ultrasonic Sonochemisty. 2001. -№8. -P.303 - 313.

62. Hromadkova, Z. Ultrasonic extraction of plant materials Investigation of hemicellulose release from buckwheat hulls. / Z. Hromadkova, A. Ebringerova // Ultrasonics Sonochemistry. - 2003. - Vol. 10. - P. 127-133.

63. Ultrasound-assisted extraction of xyloglucan from apple pomace./ F. Caili, T. Haijun, L. Quanhong, C. Tongyi, D. Wenjuan // Ultrasonics Sonochemistry. -2006.-Vol. 13.-P. 511-516.

64. Fractional and physicochemical characterization of hemicelluloses from ultrasonic irradiated sugarcane bagasse. / S. Jing, S. RunCang, S. Xiao, S. YinQuan // Carbohydrate Research. 2004. - Vol. 339. - P.291-300.

65. Hromadkova, Z. Comparison of classical and ultrasound-assisted extraction of polysaccharides from Salvia officinalis L. / A. Hromadkova, P. Ebringerova, C.Valachovic // Ultrasonics Sonochemistry. 1999. - Vol. 5. - P.163 -168.

66. Wang, Y. Optimization of ultrasonic-assisted extraction process of Poria cocos polysaccharides by response surface methodology / Y. Wang, C. Zhong, M. Jianwei, F. Minger. W. Xueqian // Carbohydrate Polymers. 2009. - Vol. 77 (4). - P. 713-717.

67. Polysaccharides from fruit calyx of Physalis alkekengi var. francheti: Isolation, purification, structural features and antioxidant activities / Y. Ge, Y. Duan, G. Fang, Y. Zhang, S. Wang // Carbohydrate Polymers. 2009. - Vol. 77 (2). -P.188-193.

68. Bao, Y. Anti-glycated activity of polysaccharides of longan {Dimocarpus longan Lour.) fruit pericarp treated by ultrasonic wave / Y. Bao, M. Zhao, Y. Jiang // Food Chemistry. 2009. - Vol. 114 (2). - P. 629-633.

69. Bao, Y. Effects of ultrasonic extraction on the physical and chemical properties of polysaccharides from longan fruit pericarp / Y. Bao, Y. Jiang,' M. Zhao, J. Shi, L. Wang // Polymer Degradation and Stability. 2008. - Vol. 93 (1). - P. 268272.

70. Hromadkova, Z. Comparison of conventional and ultrasound-assisted extraction of phenolics-rich heteroxylans from wheat bran. / Z. Hromadkova, Z. Kost'alova, A. Ebringerova // Ultrasonics Sonochemistiy. 2008. - Vol. 15 (6). - P. 1062-1068.

71. Applications and opportunities for ultrasound assisted extraction in the food industry .A review / V. Kamaljit, M. Raymond, S. Lloyd, P.Darren // Innovative Food Science and Emerging Technologies. 2008. - Vol. 9. - P.161-169.

72. Муравьева, Д.А. Фармакогнозия / Д.А. Муравьева, И.А. Самылина, Г.П. Яковлев М.:Медицина. - 2002. - 656 с.

73. Paulsen B.S. Plant polysaccharides with immunostimulatoiy activities / B.S.Paulsen//Current Organic Chemistry.-2001.- Vol. 5. P. 939-950.

74. О результатах фармакологического изучения полисахаридов, выделенных из ряски и пижмы / Р.Г. Оводова и др. // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения. 2001. - №4. - С.260-268.

75. Пилат Т.Д. Биологически активные добавки к пище / Т.Д. Пилат, А.А. Иванов М.: Слово, 2002. - 710 с.

76. Перспективы использования растительных полисахаридов в качестве лечебных и лечебно-профилактических средств / Н.А. Криштанова и др. //Вестник ВГУ. Серия: химия, биология, фармация. 2005. - №1. - С.212 -221.

77. Турова А.Д. Биологическая активность полисахаридов растительного происхождения / А.Д. Турова, А.С. Гладких // Фармакология и токсикология. 1965. -№4. - С.498 - 504.

78. Мельникова Т.И. Растительные олигосахариды перспективный класс пребиотиков / Т.И. Мельникова //Фиторедиум. - 2003. -№2 - С.32-35.

79. Hromadkova Z. Ultrasound-assisted extraction of water-soluble polysaccharides from the roots of valerian (Valeriana officinalis L.) / Z. Hromadkova Z., A. Ebringerova, P. Valachovic // Ultrasonic Sonochemisty. 2002. - Vol. 9. - P. 37-44.

80. Structural investigations of the neutral polysaccharide of Linum usitatissimum L. seeds mucilage / J. Warrand etc. // International Journal of Biological Macromolecules 2005. -№35. - P. 121 -125.

81. Rheological and Light Scattering Properties of Flaxseed Polysaccharide Aqueous Solutions / K.T. Kelvin, D. Goh, N. Pinder, C. Hall Y. Hemar // Biomacromolecules. -2006. Vol. 7. - P. 3098-3103.

82. Flaxseed reduces plasma cholesterol and atherosclerotic lesion formation in ovariectomized Golden Syrian hamsters / E. A. Lucas, A. Lightfoot, L. Hammond, L. Devareddy, A. Khalil, ect //Atherosclerosis. 2004. - Vol. 173. - P. 223 - 229.

83. Варфоломеев, С.Д. Химическая энзимология. / С.Д.Варфоломеев. -М., Academa, 2005. 480 с.

84. Иммобилизованные ферменты. / И.В. Березин, Н.Л.Клячко, А.В.Левашов, К.Мартинек, В.В Можаев, Ю.Л.Хмельницкий М. Высшая школа, 1987.-162 с.

85. Фурье-спектрометр инфракрасный ИнфраЛЮМ ФТ-02. /Руководство по эксплуатации. Версия 2.1 Санкт-Петербург, «Люмекс». -2005.- 110 с.

86. Смит, А. Прикладная ИК-спектроскопия /А. Смит. М., 1982. - 328 е., ил.

87. Viles, F.J. Determination of starch and cellulose with antrone / F.J. Viles, L.Silverman // Analytical chemistry. 1949. - Vol. 31 (8). - P. 950-953.

88. Scherz, H. Analytical chemistry of carbohygidrates. / H.Scherz, G.Boon. // Stuttgart. New York. Georg Thieme, Verlag. 1998. - Vol. 1. - p.33-34.

89. Государственная Фармакопея СССР М.: Медицина, 1968. - 1082 с.

90. Муравьев, А.Г. Руководство по определению показателей качества воды полевыми методами. 3-е изд., доп. и перераб./ А.Г. Муравьев С.-Пб.: «Крисмас+», 2004. - 248 с.

91. The composition of flaxseed mucilage / E. Anderson and H. Lowe // The journal of biological chemistry. 1947. - Vol. 168. - P. 289-297.

92. Паспорт носителя SEP ABE ADS EC-EP403 / PDS 06051

93. Паспорт носителя SEPABEADS EC-EP403 / PDS 06061

94. Рухлядева, А. П. Методы определения активности гидролитических ферментов/ А. П. Рухлядева, Г. В. Полыгалина. М.: Легкая и пищевая промышленность, 1981. - 288 с.

95. Koshijima, Т. The number-average molecular weight of native hardwood xylans / T. Koshijima, Т. E. Timell, M. Zinbo // Journal of Polymer Science Part C: Polymer Symposia. 2007. - Vol. 11 (1). - P.265 - 279.

96. Филиппович, Ю.Б. Практикум по общей биохимии./ Ю.Б. Филиппович, Т.А. Егорова, Г.А. Севастьянова. М.: Просвещение, 1982. - 311 с.

97. Kinetics and subsite mapping of a D-xylobiose- and d-xylose-producing Aspergillus niger endo-(l—»4)-{3-d -xylanase / Y. Bernard, J. Tao, M. Chow, J. Reilly // Carbohydrate Research Volume. 1988. - Vol. 173 (2). - P. 273-283.

98. Expression of endo-1, 4-beta-xylanase from Trichoderma reesei in Pichia pastoris and functional characterization of the produced enzyme / J, He, B. Yu, K. Zhang, X. Ding, D. Chen // BMC Biotechnology. 2009. - Vol. 9. - P.56

99. Functional importance of Asp37 from a family 11 xylanase in the binding to two proteinaceous xylanase inhibitors from wheat / A. Tahir, A. Durand, K. Gebruers, A. Roussel, etc. // FEMS Microbiology Letters. 2004. - Vol. 239 (1). -P. 9-15.

100. Анализ поверхности методами ОЖЕ- и рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии / Под ред. Д. Бриггса и М.П. Сиха. М.: Мир 1987.-598 с.

101. Драго, Р. Физические методы в химии / Р. Драго. М.: Мир, 1981. -456 с.

102. Пентин, Ю.А. Физические методы исследования в химии / Ю.А. Пентин, JI.B. Вилков. М: Мир, 2006. - 683 с.

103. Watts J.F. An Introduction to Surface Analysis by XPS and AES./ J. F. Watts, J. Wolstenholme. Изд. John Wiley & Sons Ltd (Англия), 2003. - 226 с.

104. Wagner C.D. Studies of the charging of insulators in ESCA // J. of Electron Spectroscopy and Related Phenomena. 1980. - Vol. 18. - P. 345.

105. Бондаренко, B.M. Экспресс-метод диагностики дисбактериоза кишечника / В.М.Бондаренко, B.M. Виноградов, Ю.В. Червинец // Гастроэнтерология Санкт-Петербурга. 2004. - №2. - С. 163.

106. Методика изучения адгезивного процесса / В.И. Брилис и др. // Лаб. дело. 1986. - № 4. - С. 210-212.

107. Coaggregation of urogenital bacteria in vitro and in vivo / G.Reid et al. // Curr. Microbiol. 1990. - №20. - P. 47-52.

108. Способность к формированию биопленок в искусственных системах у различных штаммов Salmonella typhimurium / Ю.М. Романова и др. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 2006. - № 4. -С. 38-42.

109. Stephen A.M. The polysaccharides / A.M. Stephen // Academic Press, Orlando (FL), 1983. 480 p.

110. Государственный реестр селекционных достижений, допущенных к использованию,т. 1.Сорта растений,М.,МСХ, 2009. 320 с.

111. Large-Scale Purification of Water-Soluble Polysaccharides from Flaxseed Mucilage, and Isolation of a New Anionic Polymer / J. Warrand etc. // Chromatographic 2003. - Vol. 58. - p.331 -335.

112. Краткое описание и основные технические характеристики.

113. Уровень и масштабы внедрения; конкретные показатели, характеризующие результаты внедрения.

114. От Тверского государственного технического университета,проф., д.х.н-:1. Т^»1. Э. М. Сульман2009 г.проф., д.х.н.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.