Иммуноферментный анализ естественных антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в сыворотке крови человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Петроченко, Светлана Николаевна

• Петроченко, Светлана Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Петроченко, Светлана Николаевна

Список сокращений.

Введение.

1. Обзор литературы. Естественные антитела к физиологически активным соединениям.

1.1. Общая характеристика естественных антител.

1.2. Иммунохимичсские свойства естественных антител.

1.3. Физиологическая роль естественных антител.

1.4. Естественные антитела к низкомолекулярным соединениям.

1.5. Взаимосвязь между естественными антителами и аутоантителами при патологии.

2. Материалы и методы.

2.1. Материалы исследований.

2.2. Методы исследований.

2.3. Получение синтетических антигенов к опноидным пептидам и биогенным аминам на полимерном носителе.

2.3.1. Получение конъюгата Р-эндорфина на основе полимерной матрицы.

2.3.2. Получение конъюгата дерморфпна на основе полимерной матрицы.

2.3.3. Получение конъюгата серотонина на основе полимерной матрицы.

2.3.4. Получение конъюгата гистамина на основе полимерной матрицы.

2.3.5. Получение конъюгата дофамина на основе полимерной матрицы.

2.4. Разработка иммуноферментного анализа для определения антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам.

2.4.1. Определение рабочего разведения анализируемой сыворотки и концентрации антигена, сорбируемого на планшете.

2.5. ИФА определения антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам в сыворотке крови человека.

2.5.1. ИФА определения антител к р-эндорфину в сыворотке крови человека.

2.5.2. ИФА определения антител к дерморфину и его аналогам в сыворотке крови человека.

2.5.3. ИФА определения антител к серотонину в сыворотке крови человека.

2.5.4. ИФА определения антител к гистамнну в сыворотке крови человека.

2.5.5. ИФА определения антител к дофамину в сыворотке крови человека.

2.6. Выделение антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам из сыворотки крови человека.

2.6.1 Получение сорбента для аффинной хроматографии антител к дерморфину.

2.6.2. Получение сорбента для аффинной хроматографии антител к р-эндорфину.

2.6.3. Получение сорбента для аффинной хроматографии антител к гистамину.

2.6.4. Получение сорбента для аффинной хроматографии антител к серотонину.

2.6.5. Получение сорбента для аффинной хроматографии антител к дофамину.

2.6.6. Выделение антител к р-эндорфину аффинной хроматографией.

2.6.7. Выделение антител к дерморфину аффинной хроматографией.

2.6.8. Выделение антител к гистамину аффинной хроматографией.

2.6.9. Выделение антител к серотонину аффинной хроматографией.

2.6.10. Выделение антител к дофамину аффинной хроматографией.

2.7. Изучение иммунохимических свойств антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам.

2.7.1. Выбор условий проведения ингибиторного ИФА.

2.7:2. Ингибиторный ИФА для оценки специфичности и аффинности антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам.

2.7.3. Определение специфичности антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам.

2.7.4. Расчёт константы аффинности антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам.

3. Обсуждение результатов.

3.1. Получение реагентов для разработки иммуноферментного анализа определения антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам.

3.1.1. Синтез конъюгированных антигенов к биогенным аминам и опиоидным пептидам на полимерной матрице.

3.2. Разработка метода иммуноферментного анализа определения антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в сыворотке крови человека.

3.2.1. Определение антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в сыворотке крови человека методом иммуноферментного анализа.

3.3. Выделение аффинной хроматографией естественных антител к биогенным аминам, опиоидным пептидам и исследование их свойств.

3.3.1. Исследование иммунохимических свойств естественных антител к р — эндорфину, дерморфину, серотонину, дофамину и гистамину.

3.4. Исследование иммунохимических свойств антител к (3-эндорфину, дерморфину, выделенных из сыворотки крови доноров и больных наркоманией.

3.6. Сравнительное определение с помощью ИФА уровня естественных антител к биогенным аминам в сыворотке крови больных наркоманией и доноров.

3.7. Сравнительное определение с помощью ИФА уровня естественных антител против опиоидных пептидов в сыворотке крови больных наркоманией, нейродермитом и доноров.

3.8. Сравнительный анализ изменения уровня антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в норме и при заболеваниях зависимости.

3.9. Диагностическая значимость выявления антител к наркотикам, биогенным аминам, опиоидным пептидам у больных наркоманией.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммуноферментный анализ естественных антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в сыворотке крови человека»

Актуальность проблемы.

В последнее десятилетие интенсивно развивается новое научное направление биохимии, связанное с изучением функционирования гуморальной системы иммунитета. В этой области получены экспериментальные данные, имеющие важное, принципиальное значение. Прежде всего, необходимо отметить работы по выявлению в сыворотке крови здоровых людей естественных антител различной специфичности, направленных против эндо1енны\ макромолекулярных антигенов - белков цитоскелета, ферментов, нуклеиновых кислот, компонентов межклеточного матрикса и других антигенов [Maneta-Peyret L. 1991; Arnaud E. 1994; Iznaga Escobar N., Torres L.A. 1998; Misra N., Kaveri S.V. 2003; Kazatchkina M.D. 2005; Lacrois-Dismaress 2006].

Естественные антитела обнаружены и к низкомолскулярным эндогенным соединениям, пептидным гормонам, нейромедиаторам, которые в классическом понимании, сами по себе не являются антигенами. Механизм образования эндогенных конъюгированных антигенов низкомолскулярных соединений, способных индуцировать антитела, предложен в работах Ковалёва И.Е., Полевой О.Ю. 1985, 2002г.

Выполнены исследования, показавшие, что физиологической нормой для этих иммуноглобулинов является относительное единообразие репертуаров конститутивно экспрсссируемых естественных антител, которые сохраняются десятилетиями и мало зависят от возраста и пола здорового человека [Ayouba et al., 1997; Nobrega et al., 1997; Francoeur, 1988]. Индивидуальные различия по этим параметрам в норме весьма невелики. В то же время было установлено, что у лиц с теми или иными метаболическими нарушениями состава эндогенных биорегуляторов, сопровождающими течение различных заболеваний, происходят существенные долговременные и специфические количественные изменения в составе циркулирующих естественных антител. При этом содержание антител одной специфичности может повышаться, другой снижаться, третьей оставаться в пределах нормы. В зависимости от ситуации, выявляемые у пациентов изменения в продукции естественных антител могут быть адаптивными (компенсоторными), либо — дез адаптивными (паталогическнмн). Иммунная система отражает метаболические перестройки, происходящие в организме человека, а естественные антитела выполняют важную гомеостатическую функцию в организме. [Коренева Е.А., Шекоян В.А.

1988; March H., Pedersen B.K. 1995; Levy Soussan P., Avrameas S. 1996; Клюшиик Т.П. 1997; Морозов С.Г. 1997].

Эти исследования открывают перспективу применения полученных данных не только в научных целях, но и как важного клинико-лабораторного критерия для оценки нарушения функционирования иммунной системы организма при патологических состояниях.

На сегодняшний день наименее изученными являются процессы, касающиеся реакции гуморального звена иммунитета при наркомании, алкоголизме и всех состояний зависимости. В кровотоке практически всех здоровых люден обнаружены е-Ат к физиологически активным соединениям. Содержание таких антител изменяется при патологиях, обусловленных нарушением соответствующих биорегуляторов.

Эндогенные биорегуляторы, относящиеся к классу опиоидных пептидов и биогенных аминов, играют важную роль в механизме развития заболеваний, связанных с изменением деятельности нервной системы человека (стрессы, болезни зависимости, депрессии, и т.д.) [Коренева Е.А., Шекоян В.А. 1988; Абрамов В.В. и др. 1998; Hawk K.D., Кагр S.D. 1998]. Патогенетическая роль этих соединений отражается в увеличении их содержания в крови, изменении метаболизма, запускающего механизм, модулирующий влияние нервной системы на общий иммунный статус. На этом фоне может происходить качественное и количественное изменение уровня специфических естественных антител к указанным эндогенным биорегуляторам, участвующим в патогенезе заболевания.

Актуальна задача разработки надёжных методов контроля за состоянием здоровья человека. Определение специфических иммунных изменений, сопровождающих развитие указанных патологических процессов, поможет выявить новые маркеры, отражающие как начальные стадии, так и последующее течение заболевания, для дифференцированной системы комплексной диагностики, лечения и реабилитации больных.

Цель исследования.

Целью данного исследования является разработка методов определения естественных антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам на основе твердофазного иммуноферментного анализа, изучение их специфических биохимических свойств и сравнительное определение изменения их уровня в норме и при развитии патологических процессов.

Для достижения цели поставлены следующие задачи:

1. Разработать методы получения биохимических реагентов синтетических антигенов (Р-эндорфина. дерморфина, серотонина, дофамина, гистамина) на полимерном носителе - поли(4-нитрофенил) акрилате;

2. Разработать нммуноферментные методы определения антител к опиоидным пептидам (Р-эндорфину и дерморфину) в сыворотке крови человека, провести сравнительный анализ содержания антител у доноров и больных с различными патологиями;

3. Оптимизировать условия определения антител к биогенным аминам (серотонину, дофамину и гистамину) в сыворотке крови человека на основе использования в нммуноферментном анализе новых синтетических антигенов перечисленных соединений;

4. Синтезировать сорбенты для аффинной хроматографии, провести выделение антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам из сыворотки крови человека, исследовать биохимические свойства антител: аффинность и специфичность.

5. Провести сравнительный анализ содержания специфических антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам в сыворотке крови человека и установить практическую значимость разработанных вариантов иммуноферментного анализа.

Научная новизна.

Созданы новые способы получения конъюгатов опиоидных пептидов (р-эндорфина и дерморфина) и биогенных аминов (дофамина, серотонина и гистамина) с использованием поли(4-ннтрофенил) акрилата.

Разработаны оригинальные методы твердофазного иммуноферментного анализа ИФА для определения естественных антител к опиоидным пептидам (Р-эндорфину и дерморфину) в сыворотке крови человека. На основе их применения для исследования сыворотки крови доноров и больных обнаружены антитела к указанным нейромедиаторам. Причём, установлено изменение уровня антител к Р-эндорфину и дерморфину по сравнению с нормой, в случае возникновения в организме человека процессов, связанных с проявлением клиники патологического влечения к употреблению наркотических веществ, алкоголю, азартным играм.

Синтезированы новые сорбенты для аффинной хроматографии; из сыворотки крови человека выделены антитела к опиоидным пептидам ((3-эндорфину и дерморфину) и биогенным аминам (дофамину, серотонину и гистамину). Исследованы биохимические свойства аффинно очищенных антител. Измерена константа аффинности и специфичность. Установлена взаимосвязь между структурой дерморфина, его биологической активностью и специфичностью естественных антител.

Научно-практическал значимость работы.

Показана возможность использования новых методов иммуноферментного анализа определения естественных антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в практической медицине. Проведённое сравнительное определение содержания естественных антител к Р-эндорфину, дерморфину, дофамину, серотонину и гистамину позволило выявить их достоверное увеличение к указанным выше соединениям при наркомании и снижение их уровня при нейродермите и поллияозе. Найдена взаимосвязь между уровнем естественных антител к исследованным биорегуляторам в сыворотке крови больных и течением заболевания зависимости (наркомания, алкоголизм, игромания). Установлено, что определение естественных антител к гистамину при нейродермите и поллинозе может использоваться для оценки эффективности проводимой терапии. Разработанные способы анализа используются с 2006 года в Московском научно-практическом центре наркологии, Госпитале ФСБ России, а также ряде наркологических клиник страны.

Основные положения, выносимые на защит}'.

1. Метод иммуноферментного аналнза естественных антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам в сыворотке крови человека на основе полученных синтетических антигенов (3-эндорфина, дерморфина, дофамина, серотонина и гпстамина.

2. Исследование биохимических свойств естественных антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам, сравнительная оценка изменения их аффинности и специфичности в норме и при патологии.

3. Сравнительный анализ антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам в норме и при патологии. Определение практической значимости разработанных вариантов иммуноферментного анализа.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Петроченко, Светлана Николаевна

ВЫВОДЫ.

1. Синтезированы конъюгированные антигены р-эндорфина, дерморфина, гистамина, дофамина и серотонина с использованием поли(4-нитрофенил)акрилата. Получены конъюгаты, содержащие различный диапазон замещения гаптеном матрицы (100% молекул лиганда; 30-50% молекул лиганда; 10-15% молекул лиганда), связанных с полимером. Изучено влияние замещения гаптеном полимерной матрицы на результаты иммуноферментного анализа.

2. Разработаны условия проведения твердофазного иммуноферментного метода определения антител к р-эндорфину, дерморфину, гистамину, дофамину и серотонину в сыворотке крови человека с использованием новых синтетических антигенов. Изучено влияние структуры антигена на полноту выявления специфических антител. Установлено изменение уровня антител к указанным антигенам у людей с различными патологиями, по сравнению с нормой.

3. Оптимизированы условия для определения антител к биогенным аминам (серотонину, дофамину и гистамину) в сыворотке крови человека на основе использования в иммуноферментном анализе новых синтетических антигенов с оптимальным замещением (10-15%) гаптеном высокомолекулярной матрицы.

4. Выделены аффинной хроматографией антитела к р-эндорфину, дерморфину, гистамину, дофамину и серотонину из сыворотки крови человека на основе синтезированных сорбентов. Изучены иммунохимические свойства данных антител и установлено, что при развитии заболеваний происходит их качественное и количественное изменение: увеличивается константа аффинности, повышается уровень высокоспецифичных антител класса.

5. Установлена взаимосвязь между содержанием естественных антител к биогенным аминам и опиоидным пептидам и течением патологических процессов. Показана принципиальная возможность применения теста по определению антител к р-эндорфину, дофамину и серотонину для оценки эффективности лечения заболеваний зависимости.

Заключение.

Данное исследование проведено на стыке иммунологии и медицины и для создания подходов комплексной системы экспертизы и диагностики, которая позволяет выбрать методы дифференцированного лечения и реабилитации больных, страдающих различными видами зависимости и аллергическими заболеваниями.

Рядом исследователей, специализирующихся в области наркологии, высказано предположение, что в основе патогенетических механизмов заболеваний зависимости лежат те же факторы, что и при развитии классических случаев зависимости от психоактивных веществ (наркотиков и алкоголя), хотя очень часто болезни зависимости и не связаны с прямым действием экзогенного токсического вещества на организм человека. На сегодняшний день установлено, что при развитии некоторых видов наркомании происходит специфическое изменение гуморального иммунитета, выражающееся в увеличении уровня антител, связывающих как экзогенный наркотик, так и эндогенные нейромедиаторы. В механизме формирования наркотической зависимости ведущая роль принадлежит таким низкомолекулярным нейромедиаторам, как опиоидные пептиды, катехоламины и серотонин. Постоянное введение наркотиков животным способствует увеличению дофамина, норадреналина и серотонина. Для больных с различными видами наркомании на первой стадии формирования зависимости в плазме обнаружено увеличение уровня как самих нейромедиаторов, так и их метаболитов. При хроническом употреблении наркотиков происходит падение активности структур мозга, и уменьшение концентрации биогенных аминов. Необходимый уровень нейромедиаторов поддерживается за счет увеличения дозы наркотических веществ. Эти процессы способствуют в дальнейшем формированию физической и психической зависимости.

Иммунная реакция находится в тесной взаимосвязи с нервной системой организма. Опиоидные пептиды мозга являются одними из основных гуморальных факторов, осуществляющих эту взаимосвязь. В свою очередь, эти и другие виды нейропептидов, вырабатываемые клетками иммунной системы, служат каналом обратной связи иммунной системы с нейроэндокринными органами. Таким образом, опиоидные пептиды являются передатчиками; осуществляющими как прямые, так и обратные связи между нервной и иммунной системой организма.

Антитела к опиоидным пептидам и биогенным аминам здоровых людей являются частью иммунорегуляторной системы, модулирующей функции центральной нервной системы. При нарушениях взаимодействия этих систем организма, имеющих место при первичных психогенных заболеваниях, такие антитела могут выполнять важную компенсаторную, адаптивную, иммунорегулируюгцую функцию. Антитела могут вырабатываться на свойственные организму низкомолекулярные и высокомолекулярные соединения. В нормальных условиях имеются низкие титры к этим веществам. При определенных патологических состояниях, сопровождающихся нарушением обмена и повышением уровня эндогенных веществ или их метаболитов, происходит индукция иммунологических механизмов. Такой иммунологический процесс, направленный на метаболизм и выведение собственных молекул, протекает постоянно и является обязательным дополнением к ферментативным процессам, протекающим в организме.

Создание новых методов выявления уровня естественных антител, которые могут являться теми природными маркерами, отражающими течение заболевания, и его начальные стадии, позволит впервые получить не использовавшийся ранее в медицинской практике диагностический тест.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Петроченко, Светлана Николаевна, 2009 год

1. Барнет Ф. «Клеточная иммунология» // Москва «Мир» - 1971 -542 страницы.

2. Беляев М.П. «Справочник лабораторных и функциональных показателей здорового человека» // Москва «Медицина» - 1992 - 28 страниц.

3. Брэдуэлл JI. «Антитела: методы» // Москва «Мир» - 1989 — в 2-х томах - 298 страниц.

4. Власов В.В. «Эффективность диагностических исследований» // Москва -«Медицина» выпуск 1 - 1988 - 297 страниц.

5. Глинн Л., Стьюард М. «Образование антител» // Москва «Мир» - 1983 - 196 страниц.

6. Глинн Л., Стьюард М. «Структура и функции антител» // Москва «Мир» - 1983 -200 страниц.

7. Гомазков O.A. «Роль ферментных систем в регуляции «триггерной» функции физиологически активных пептидов» // Вопросы медицинской химии 1988 — №1 -С. 12-18.

8. Гомазков O.A. «Функциональная биохимия регуляторных пептидов» // Москва -«Наука» 1993 - 160 страниц.

9. Гомазков O.A. «Современные тенденции в исследовании физиологически активных пептидов» // Успехи современной биологии 1996 - №1 - Т.116 - С. 6068.

10. Данилова ТА. «Гетерофильные антитела при патологических процессах человека» // Иммунология 1987 - №4 - С. 5-11.

11. Дин П., Джонсон У., Мидл Ф. «Аффинная хроматография: методы» // Москва -«Мир» 1988 - 278 страниц.

12. Добродеева Л.К., Суслонова Г.А. «Аутоантитела у практически здоровых людей» // Иммунология 1990 - №2 - С. 52-55.

13. Зотиков Е.А. «Антигенные системы человека и гомеостаз» // Москва 1982.

14. Ильчевич Н.В., Зеленская Т.М., Стошич-Богданович Н. «Гематотестикулярный барьер и аутоиммунные реакции в онтогенезе» // Физиологический журнал 1984- №1 Т.ЗО - С. 91-96.

15. Ильчевич Н.В., Лисяный Н.И., Янчий Р.И. «Антитела и регуляция функций организма» // Киев «Наукова думка» - 1986 - 248 страниц.

16. Ковалёв И.Е. «Иммунитет как функция системы организма, инактивирующей чужеродные химические соединения» // Химико-фармацевтический журнал 1977 -№12-С. 3-14.

17. Ковалёв И.Е., Полевая О.Ю. «Антитела к физиологически активным соединениям» // Москва «Медицина» - 1981 — 127 страниц.

18. Ковалёв И.Е., Полевая О.Ю. «Биохимические основы иммунитета к низкомолекулярным химическим соединениям» // Москва «Наука» - 1985 - 302 страницы.

19. Корнева Е.А., Шекоян В.А. «Регуляция защитных функций организма» // Ленинград «Наука» - 1982 - 139 страниц.

20. Кочетов Г.А. «Практическое руководство по энзимологии» // Москва — «Высшая школа» 1980.

21. Крупник В.Е., Полевая О.Ю., Самсонов В.А. и другие «Динамика содержания аутоантител против гистамина у больных нейродермитом» // Вестник дерматологии и венерологии 1987 - №11 - С.12-14.

22. Кузник Б.И., Васильев Н.В., Цыбиков H.H. «Иммуногенез, гемостаз и неспецифическая резистентность организма» // Москва — «Медицина» 1989 - 320 страниц.

23. Кульберг А .Я., Елистратова И. А., Тарханова И.А., Бартова Л.М., Черноусова Л.М. «Естественные антитела: строение и происхождение» // Иммунология 1986 — №2 -С. 14-19.

24. Ломакин М.С., Майский И.Н., Ларин A.C. и другие «Антигены, общие для micobacterium bovis (БЦЖ) и некоторых злокачественных и нормальных тканей дабороторных животных» // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины- 1977-№1 С.65.

25. Ломакин М.С., Бочко Г.М. «Медиаторы системы иммунологического надзора» // Иммунология 1987 - №3 - С. 17-22.

26. Минцер О.П., Угарова Б.Н., Власова В.В. «Методы обработки медицинской информации» // Киев «Вища школа» - 1982 — 250 страниц.

27. Мишер А., Фолендер М. «Иммунопатология в клинике и эксперименте и проблема аутоантител» // Москва «Медгиз» - 1963 — 356 страниц.

28. Мягкова М.А., Трубачева Ж.Н., Панченко О.Н. «Иммуноферментный анализ для выявления естественных антител к катехоламинам» // Клиническая лабораторная диагностика 1997 - №3 - С.8-12.

29. Мягкова М.А. «Естественные антитела» // Монография — Москва.-1997.

30. Нго Т.Т., Ленхофф Г. «Иммуноферментный анализ» // Москва — «Мир» 1988 -198 страниц.

31. Остерман JI.A. «Хроматография белков и нуклеиновых кислот» // Москва -«Наука» 1985 - 536 страниц.

32. Пол У. «Иммунология» // Москва «Мир» - в 3-х томах - 1989.

33. Полевая О.Ю., Данилова Н.П., Крупник В.Е. и другие «Твердофазный иммуноферментный метод выявления аутоантител к простагландинам» // Синтез и исследование простагландинов: Тезисы докладов всесоюзного симпозиума — Таллин 1986-С.47.

34. Полевая О.Ю., Крупник В.Е. «Выявление иммунофермептным методом свободноциркулирующих и связанных в иммунные комплексы аутоантител в сыворотках человека» // Иммунология 1988 - №3 - С.88-90.

35. Полевая О.Ю., Перфильева Е.А., Селезнева JI.A. и другие «Конкурентный иммуноферментный метод количественного определения простагландина F2a» // Иммунология 1988 - №4 - С.76-79.

36. Полетаев А.Б. «Регуляторные антитела» // Сборник «Моноклональные антитела в нейробиологии» Новосибирск - 1995 - С. 37-47.

37. Торосян А.Ц. «Аффинность антител» // Успехи современной биологии 1980tom89. № 3.-C. 419-432.

38. Ailus K., Palosuo T. «IgM class autoantibodies in human cord serum» // J. Reprod. Immunol 1995 - 29(1) - P.61-67.

39. Algiman M., Dietrich G., Nydegger LI., Boieldieu D., Sultan Y., Kazatchkine M.D. «Natural antibodies to factor. VIII antihemophilic factor in healthy individuals» // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - V. 89. - P. 3795.

40. Ames P.R., Alves J., Murat I. et al. «Oxidative stress in systemic lupus erythematosus and allied conditions with vascular involvement» // Rheumatology Oxford 1999 -38(6) - P.529-534.

41. Andersson A., Forsgren S., Soderstrom A., Holmberg D. «Monoclonal natural antibodies prevent development, of diabetes in the nonobese diabetic NOD mouse» // J. Autoimmun. 1991. - V. 4 - P. 733.

42. Andris J.S., Copra J.D. «Variable region gene utilizationin human antibodies to exogeneous antigens» // In:. Zanetti, M., Capra, J.D. Eds. The Antibodies. Harwood Academic Publishers Amsterdam - 1996 -P.l.

43. Adih M.r Ragimbeau,/., Avrameas S., Ternynck T. «IgG autoantibody activity in normal mouse serum is controlled by IgM» // J. Immunol. 1990 - V. 145 - P. 3807.

44. Avrameas S., Dighiero G., Lymberi P., Guilbert B. «Studies on natural antibodies and autoantibodies» // Ann. Inst. Pasteur Immunol. 1983. - V. 134D. -P. 103.

45. Avrameas S. «Natural autoantibodies: from 'horror au-totoxicus' to 'gnothi seauton'» // Immunol Today-1991.-V. 12.-P. 154.

46. Avrameas S., Ternynck T. «Natural autoantibodies: the other side of the immune system» // Res. Immunol. 1995. - V. 146. - P. 235.

47. Ayouba A., Peltre G., Cautinho A. «Quantitative analysis of multiple V region interactions among normal human IgG» // Eur. J. Immunol. 1996. -V. 26,- P. 710.

48. Ayouba A., Ferreira C, Coutmho A. «Distinguishable patterns of connectivity in serum immunoglobulins from SLE patients and healthy individuals» // Scand. J. Immunol. -1997. V. 45. - P. 408.

49. Bakimer R.: Fishman P., Blank M., Sredni B„ Djaldetti M., Shoenfeld Y. «Induction of primary antiphospholipid syndrome in mice by immunization with a human monoclonal anticardiolipin antibody H-3» // J. Clin. Invest. 1992. - V. 89. - P. 1558.

50. Bayry J., Lacroix-Desmazes S., Kazatchkine M.D., Hermine O., Tough D.F., Kaveri S.V. «Modulation of dendritic cell maturation and function by B lymphocytes» // J Immunol.-2005. -V.7.- P. 15-20.

51. Besredka M «Les antihemolysines naturelles» // Ann. Inst. Pasteur. 1901 - V. 15. - P. 758.

52. Blocher IT. «Receptors, antibodies and diseases» // Clin. Chem. 1984. - V. 30(7). - P. 1137-1156.

53. Boyden S.V. «Natural Antibodies and the Immune Response» In: Advanses in Immunology, ed by F.J. Dixon, J.H. Hhumphre Academic. Press — New York - 1966 - 5 - P.1-28.

54. Burnet M. «'The Clonal Selection Theory of Acquired Immunity. Vanderbilt University Press»//Nashville 1959.

55. Calzi L., Battiato S., Santini F., et al. «Autoantibodies to Thyroxin and Triiodthyronine in the immunoglobulin G Fraction of Serum» // Clinical Chemistry 1988 - V.34 -№12 - P.2561-2562.

56. Carlan M.C., Peres A., Nardi N.B. «Frequency of B cells in normal mice which recognize self proteins» // Braz. J. Med. Biol. Res. 1997 - 30(2) - P.225-230.

57. Casali P., Burastero S.E., Nakamura M., et al. «Human Lymphocytes Making Rheumatoid Factor and Antibody to ssDNA Belong to Leu-1+ B-Cell Subset» // Science 1987 - V.236 - P.77-81.

58. Challenor V.F. «Angiotensin converting enzyme inhibitors in Raynaud's phenomenon» // Drugs 1994. - V. 48. - №6 - P. 864-867.

59. Chen P.P., Albrandt K., Orida N.K. et al. «Genetic Basis for the Cross-Reactive Idiotypes on the Light Chains of Human IgM anti-IgG Autoantibodies» // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1986 - 83(21) - P.8318-8322.

60. Chen J.J., Kaveri S., Kohler II. «Cryptic T cell epitopes in polymorphic immunoglobulin regions: evidence for positive repertoire selection during fetal development» // Eur J. Immunol. 1992 - V. 22 - P. 3077.

61. Chow D., Bennet R. «Low natural antibody and low in vivo tumor resistance, in xidbearing B-cell deficient mice» // J. Immunol. 1989. - V. 142. - P. 3702.

62. Cohen I.R., Cooke A. «Natural autoantibodies might prevent autoimmune disease» // Immunol. 1986. - Today 7 - P. 363.

63. Colnaghi M.J., Menard S., Togliabue E., et al. «Heterogeneity of the natural humoral anti-tumor immune response in mice as shown by monoclonal antibodies» // J. Immunol. 1982 - V.128 - P.2757.

64. Coscnza M. «Detection of anti-idiotype reactive cells in the response to phosphorylcholine» // Europ. J. Immunol. 1976 - V.6 - P.l 14.

65. Coulmho A. «Beyond clonal selection and network» // Immunol. Rev. — 1989. — V. 110 -P. 63.

66. Coutinho A., Kazatchkine M.D., Avrameas S. «Natural autoantibodies» // Curr. Opinion Immunol. 1995 - 7(6) - P.812-818.

67. Coutinho. A. «Simple developmental programs of gene expression and cellular composition of lymphoid organs at the origin of natural tolerance» // Res. Immunol. -1995- 146(4-5)-P.321-332.

68. Diaw L., Magnac C., Pritsch O. et al. «Structural and affinity studies of IgM polyreactive natural autoantibodies» // J. Immunol 1997 - 158(2) - P.968-976.

69. Dietrich G., Piechaczyk M, Раи В., Kazatchkine M.D. «Evidence for a restricted idiotypic and epitopic specificity of anti-thyroglobulin autoantibodies in patients with autoimmune thyroiditis» // Eur. J. Immunol. 1991. - V. 21. -P. 811.

70. Dietrich G.r Algiman M.f Sultan ¥., Nydegger ILK, Kazatchkine M.D. «Origin of anti-idiotypic activity against anti-factor VIII autoanti bodies in pools of normal human immunoglobulin G IVIg» // Blood 1992. - V. 79. - P 2946.

71. Dighiero C., Lymberi P., Masie J.C. et al. «Murine Hybridomas Secreting Natural Monoclonal Antibodies Reacting With Self Antigens» // J. Immunol. 1983 - 131(5) -P.2267-2272.

72. Dighiero G., Lymberi P., Guilbert B. et al. «Natural Autoantibodies Constitute a Substantial Part of Normal Circulating Immunoglobulins» // Ann. N. Y. Acad. Sei. -1986 V.475 - P. 134-144.

73. Dighiero G., Lymberi P., Holmberg D. et al. «High frequency of natural autoantibodies in normal newborn mice» // J. Immunol. 1985 - V. 134 - №2 - P.765-771.

74. Dinarello C.A. «Is there a role for Interleukm-1 blokade in Intravenous Immunoglobulin therapy» // Immunol. Rev. 1994 - V. 139. - P. 173.

75. Dmarello C, Thompson R.C. «Blocking IL-1: interleukin 1 receptor antagonist in vivo and in vitro. Immunol» // Today 12. 1991. - P. 404.

76. Durandy A., Schiff C., Botmefoy J. Y. «Induction by anti-CD40 ligand and cytokines of IgG, IgA and IgE production by B cells from patients with X-linked IgM syndrome» // Eur. J. Immunol. 1993. - V. 23. - P. 2294.

77. Dwyer D.S., Bradley R.J., Urquhart C.K., Kearney J.F. «Naturally occurring anti-idiotypic antibodies in myasthenia gravis patients» // Nature. 1983. - V. 301. -P. 611.

78. Eisenberg R.A., Theofilopoulos A.N., Andrews B.C., et al. Natural Thymocytotoxic autoantibodies in autoimmune and normal mice // J. Immunol. — 1979. V.122, N 6. -P.2272.

79. Eliat D., Hochberg M., Pumphrey J., et al. Monoclonal antibodies to DNA and RNA from NZB/NZW Fl mice: antigenic specificities and NH2 terminal amino acid sequences // J. Immunol. 1984.-v.133, N 1. - P.489-494.

80. Els W.J., Helman S.I. Dual role of prostaglandins (PGE2) in regulation of channel density and open probability of epithelial Na+ channels in frog skin (R. pipiens). // J. Membrane Biol. 1997. - V. 155, N 1. - P.75-87.

81. Elson C.J., Naysmith J.D., Taylor KB. «B-cell tolerance and autoimmunity» // Int Rev. Exp. Pathol. 1979. - V. 19. - P. 137.

82. Elson C.J., Williams N.A. «Autoreactive T cells repertoire» // Immunol Today 1995 -V. 16.-P. 71.

83. Filion M.C., Bradley A J., Devine D.V., Decary F., Chartrand P. «Autoreactive T cells in healthy individuals show tolerance in vitro with characteristics similar to but distinct from clonal anergy» // Eur. J. Immunol. 1995. - V. 25 - P. 3123.

84. Finnegan A., White N.B., Hodes R.J. «Function of autoreactive T-cells in immune respoces» // Immunol. Rev. 1990. - V. 116. - P. 15-31.

85. Fischer E., Rieux V., Guillet J.G., Kazatchkine M.D. «The human immunodeficiency virus preventive vaccine research at the French National Agency for acquired immunodeficiency syndrome research» // Mem Inst Oswaldo Cruz.-2005,- V.2.- P. 7984.

86. Francoeur A.M. «Antibody fingerprinting: a novel method for identifying individual people and animals» // Biotechnology. 1988. - V. 6. - P. 822.

87. Gatili U., Clark M.R., Shohet S.B. «Excessive binding of natural anti-alpha-galactosyl immunoglobulin G to sickle erythrocytes may contribute to extra-vascular cell destruction» // J Ctin Invest 1986. - V. 77. - P. 27.

88. Gilles J.G., Saint-Remy J.M. «Healthy subjects produce both anti-factor VDI and specific anti-idiotypic antibodies» // J. Clin. Invest. 1994. - V. 94 - P. 1496.

89. Glowinski J., Iversen L. «Regional studies of catecholamines in the rat brain» // J. Neurochem 1966. - V. 13. - № 8. - P. 655-669.

90. Grabar P."Self' and "not-self' in immunology // Lancet. 1974. - V.l, N 7870. -p.1320-1322.

91. Grabar P. Autoantibodies and the physiological role of immunoglobulins // Immunol. Today. 1983. - V.4, N 12. - P.337-340.

92. Grabar P. Hypothesis. Auto-antibodies and Immunological Theories: Analytical Reviw // Clin. Immunol. Immunopathol. 1975. - 4(4). - P.453-466.

93. Grabar P. Les Globulines du Serum Sanguin // Liege. 1987. - P.25.

94. Grabar S., Moing V.L., Goujard C., Egger M., Leport C., Kazatchkine M.D., Weiss L.,

95. CostagliolaD. « Response to Highly Active Antiretroviral Therapy at 6 Months and Long-Term Disease Progression in HIV-1 Infection» // J Acquir Immune Defic. Syndr. 2005,- V.7.- P.284-292.

96. Greenberg A.H., Chow D.A., Wolosin L.B. «Natural antibodies: origin, genetics, specificity and role in host resistance to tumors» // Clin. Tnimunel. Allergy. 3. 1983. -P. 389.

97. Gttigou V.f Guilbert B., Moinier D. «Ig repertoire of human polyspeciflc antibodies and B-cell ontogeny» // J. Immunol. 1991. - V. 146. - P. 1368.

98. Guilhert B., Dighiero G., Avrameas S. «Naturally occuring antibodies against nine common antigens in normal human sera. I. Detection, isolation, and haracterization» // J. Immunol. 1982. - V. 128. - P. 2779.

99. Guilpain P., Chanseaud Y., Tamby M.C., Larroche C., Guillevin L., Kaveri S.V., Kazatchkine M.D., Mouthon L. «Immunomodulatory effects of intravenous immunoglobulins» // Presse Med.-2004.- V.10.- P.9-23.

100. Hahn B.H. «Characteristics of pathogenic subpopulations of antibodies to DNA» // Arthritis. Rheum. 1981. - V. 25. - P. 747.

101. Hahn-Zoric B., Carlsson J., Bjorkander A.D., Osterhaml M.E., Mellander L., Hanson L.A. «Presence of non-maternal antibodies in newborns of mothers with antibody deficiencies» // Pediatric. Res. 1992. - V. 32. - P. 150.

102. Hanson L.A., Telemo E. «Immunobiology and epidemiology of breast feeding in relation to prevention of inffections from a global perspective» // In: Eds. Mucosal. Immunol. Academic Press 1997.

103. Harrap S.B., Nicolaci J.A., Doyle A.E. «Persistent effects on blood pressure and renal hemodynamics following chronic angiotensin converting enzyme inhibition with perindopril» // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1986. - V. 13. - P. 753-765.

104. Heard I., Potard V., Foulot H., Chapron C., Costagliola D., Kazatchkine M.D. « High Rate of Recurrence of Cervical Intraepithelial Neoplasia After Surgery in HIV-Positive Women» // J Acquir Immune Defic. Syndr.- 2005.- V.4.- P.412-418.

105. Hintner H. Romani N., Stanzl U., Gntbauer G., Fritsch P., Lawley T.J. «Phagocytosis of keratin filament aggregates following opsonization with Ig anti- keratin filament autoantibodies» // J. Invest. Dermatol. 1987. - V. 88. - P. 176.

106. Holmberg D., Forsgren S., Ivars F., Coutinho A. «Reactions amongst IgM antibodies derived from normal, neonatal mice» // Eur. J. Immunol. 1984. - V. 14. -P. 435.

107. Holmberg D., Wennerstrom G., Andrade L., Coutinho A. «The high idiotypic connectivity of 'natural' newborn antibodies is not found in adult mitogen-reactive B cell repertoires» // Eur. J. Immunol. 1986. - V. 16. - P. 82.

108. Huetz F., Larsson-Sciard E.L., Pereira P., Portnoy D., Coutinho A. «T-cell dependence of the natural autoreactive B cell activation in the spleen of normal mice» // Eur. J. Immunol. 1988. - V. 18.-P. 1615.

109. Hurez V., Dietrich G., Kaveri S. V., Kazatchkine M.D. «Polyreactivity is a property of natural and disease associated human autoantibodies» // Scand. J. Immunol 1993 - V. 38 - P. 190.

110. Jerne N.K. «Towards network theory of the immune system» // Ann. Immunol. (Inst. Pasteur) 1974. - V. 125. - P. 373-389.

111. Isenberg D.A., Shoenfeld Y., MadaioM.P. «Anti-DNA antibody idiotypes in systemic lupus erythematosus» // Lancet. I — 1934. P. 417.

112. Iwai K, Shimoike H., Ohmichi N., Kinoshita M «Angiotensinogen gene and blood pressure in the Japanese population» // J. Hypertension. 1995. - V. 25 (4 Part 2) - P. 688-693.

113. Jerne N.K. «The generative grammar of immune system» // EMBO J. 1985. - V. 4. -P. 847.

114. Kanost D. «Anergic B cells constitutively present self antigen: enhanced immunoglobulin receptor-mediated presentation of antigenic determinants by B cells is hierarchical» // Eur. J. Immunol. 1994. - V. 24. - P. 1186.

115. Kay M.M.B., Goodman S., WntfieldC., Wong P., Zaki L, Rudolqff V. «The senescent cell antigen is immunologically related to band» // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1983 -V. 80.-P. 1631.

116. Kazatchkine M.D., Dietrich G., Hurez V. «V Region mediated selection of autoreactive repertoires by. intravenous immunoglobulin IVIg» // Immunol. Rev. — 1994. V. 139. -P. 79.

117. Kearney J., Vakil M. «Idiotype directed interactions during ontogeny play a major role in the establishment of the adult B cell repertoire» // Immunol. Rev. 1986. - V. 94. - P.

118. Kellerman S.A., McCormick D.J., Freeman S.L., Morris J.C., Conti-Fine B.M. «TSH receptor sequences recognized by CD4 q T cells in Graves disease patients and healthy controls» // J. Autoimmun. 1995. - V. 8. - P. 685.

119. Kitamwa D., Roes « Kuhn R., Rajewsky K. «A B cell-deficient mouse by targeted disruption of the membrane exon of the immunoglobulin m chain gene» // Nature. -1991.-V. 350-P.423.

120. Klein-Nulend J.S., Cornelis M., Birger E.H. Prostaglandin mediated modulation Physiol. 1996. -V.168,N 1.-P.1-7.

121. Kluskens L., Kohler H. Regulation of immune response by autogenous antibody against receptor// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1974. - V.71, N 12. - P.5083.

122. Knut A., Lloyd K.O., Lipkin M., et al. Natural Antibodies in Human Sera Directed Against Blood-Group-Related Determinants Expressed on Colon Cancer Cells // Internat. J. Cancer. 1983. - V.32, N 2. - P. 199-204.

123. Lacroix-Desmazes S., Kaveri S. V., Mouthon L., Ayouba A., Malanchere K, Coutinho A., Kazatchkine M.D. «Self-reactive antibodies (natural autoantibodies) in healthy individuals» // Journal of Immunological Methods 1998. - V. 216. - P. 117-137.

124. Landsteiner K. «The nature and specificity of antibodies» // In: Eds The Specificity of Serological Reactions Harvard Univesity Press Cambridge MA - 1945 - P. 127.

125. Undstrom J., SheltonD., Fujii Y. «Myasthenia gravis» // Adv. Immunol. 1988. - V. 42

126. Lim W., WiemerG., Gohlke P., linger T., Scholkens B.A. «Contribution of kinins to thecardiovascular actions of angiotensin converting enzyme inhibitors» // Pharmacol. Rev. -1995. V. 47. - № 1. - P. 25-49.

127. Lundkvist / CoutinhoA, Varela F., HolmbergD. «Evidence for a functional idiotypicnetwork among natural antibodies in normal mice» // Proc. Natl. Acad. Sci.1. USA- 1989 -V. 86-P. 5074.

128. Lutz H., Bussolino F., Flepp R. «Naturally occuring anti-band 3 antibodies and complement together mediate phagocytosis of oxidatively stressed human eryhtrocytes» // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - V. 84. - P. 7368.

129. Lutz H.U., Stammler P., Jelezarova K, Nater M, Spath P.J. «High doses of immunoglobulin G attenuate immune aggregate-mediated complement activation by enhancing physiologic cleavage of C3b in C3bn-IgG complexes» // Blood. 1996. - V. 88-P. 184.

130. Lymheh P., Blancher A., Calvas P., Avmmeas S. «Natural autoantibodies in nude and normal outbred Swiss and inbred B ALB r c mice» // J. Autoimmim. 1989. - V. 2 - P. 283.

131. Malanchere E., Huetz F., Coutinho A. «Maternal IgG stimulates B lineage cell development in the progeny» // Eur. J. Immunol. 1997. - V. 27. - P. 788.

132. Marchalonis J. J., Kaymaz H., Dedeoglu F., Schlutter S.F., Yocum D.E., Edmundson A.B. «Human autoanti-bodtes reactive with synthetic autoantigens from T-cell receptor B chain» // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. - V. 89. - P. 3325.

133. Marchaloms J.J., Kaymaz H., Schluter S.F., Yocum D.E. «Naturally occurring human autoantibodies to defined T-cell receptor and light chain peptides» // Adv. Exp. Med. Biol. 1994.-V. 347.-P. 135.

134. Martin R.r Jaraquemada D., Flerlage M. «Fine specificity and restriction of myelin basic protein specific cytotoxic T cell lines from multiple sclerosis patients and healthy controls» // J. Immunol. 1990. - V. 145 - P. 540.

135. MendeLsohn F.A.O., Allen A.M., Chai S.Y., McKinley M.J. «The brain angiotensinsystem: Insights from autoradiographic mapping of angiotensin receptors and converting enzyme» // Proc. Austr. Physiol, and Pharmacol. Soc. 1989. - V. 20. -№ 1. - P. 1-14.

136. MichaelJ.G. «Natural antibodies» // Curr. Top. Microbiol. Immunol. 1969 - V. 48 - P. 43.

137. Michel C, Gonzalez R., Bon/our K, Avrameas S. «A concurrent increasing of natural antibodies and enhancement of resistance of furonculosis in rainbow trout» // Ann. Rech. Vet. 1990.- V. 21. -P. 211.

138. Miletic V.D., Hester C.G., Frank MM «Regulation of complement activity by immunoglobulin» // J. Immunol. 1996. - V. 156. - P. 749.

139. Misra N., Bayry J., Lacroix-Desmazes S., Kazatchkine M.D., Kaveri S.V. «Cutting edge: hurnan CD4+CD25+ T cells restrain the maturation and antigen-presenting function of dendritic cells» // J Immunol.-2004.- V.4.- P.72-80.

140. Moiola L, Karachunski P., Protti MR, Howard J.F., Conti-Troncom B.M. «Epitopes of the b subunit of human muscle acetylcholine receptor by CD4 q T cells of myasthenia gravis patients and healthy subjects» // J. Clin. Invest. 1994. - V. 93. - P. 1020.

141. Navin 71, Krug K, Pearson R. «Effect of immunoglobulin M from normal human serum on Leishmania donovani promastigote agglutination, complement mediated killing and phagocytosis by human monocytes» // Infect. Immun. 1989. - V. 57. - P. 1343.

142. Nobrega A., Malanchere K, Hecker L., Haury M, Grandien A., CoutinhoA. «Diversity of antibody repertoire. Clonal frequencies of reactivities and patterns of complex clonal mixtures on immunoblots of natural antigens» // Eur. J. Immunol. -1997.

143. Poutsiaka D.D., Clark B.D., Vannier E., Dinaretto C.A. «Production of XL-receptor antagonist and IL-1B by peripheral blood mononuclear cells is differentially regulated» //Blood.- 1991. V. 78.-P. 1275.

144. Roux K.H., Tankersley D.L. «A view of the human idiotypic repertoire, electron microscopic and immunologic analyses of spontaneous idiotype-anti-idiotype dimers in pooled human IgG» // J. Immunol. 1990. - V. 144. - P. 1387.

145. Rudensky A.Y., Maze! SM, Turin V.L. «Presentation of endogenous immunoglobulin determinants to immunoglobulin recognizing T cell clones by the thymic cells» // Eur. J. Immunol. 1990. - V. 20. - P. 2235.

146. Ruiz de Soma V., Carreno M.P., Kaveri S.V. «Selective induction of interleukin-1 receptor antagonist and interleukin-8 in human monocytes by normal poly specific. IgG intravenous immunoglobulin» // Eur. J. Immunol. 1995. - V. 25. - P. 1267.

147. Saenko V.A., Kabakov A.K, Poverermy AM. «Hidden high-avidity anti-DNA antibodies occur in normal human gammaglobulin preparations» // Immunol. Lett. -1992 P. 34.

148. Stewart J.M. «Immunoglobulins did not arise in evolution to fight infection» // Immunol. 1992 - Today. 13 - P 396.

149. Sultan Y., Rossi F., Kazatchkine M.D. «Recovery from anti-VIII: C antihemophilic factor autoimmune disease is dependent on generation of antiidiotypes against anti-VIII: C autoantibodies» // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1987. - V 84. - P. 828.

150. Tankersley D.L., PrestonM.S., Finlayson J.S. «Immunoglobulin G dimer: an idiotype-antiidiotype complex» // Mol. Immunol. 1988. - V. 25. - P. 41.

151. Thornton B.P., Vetvicka V., Ross G.D. «Natural antibody and complement-mediated antigen processing and presentation by B lymphocytes» // J. Immunol. 1994. - V. 152. -P. 1727.

152. Tighe H., Chen P.P., Tucker R. «Function of B cells expressing a humanimmunoglobulin M rheumatoid factor autoantibody in transgenic mice» // J. Exp. Med. -1993.-V. 177. P. 109.

153. Varela F., Coutinho A. «Second generation immune networks» // Immunol. — 1991. -Today. 12.-P. 159.

154. Vassilev T., Bineva L, Dietrich G., Kaveri S.V., Kazatchkine MIA «Variable region-connected, dimeric fraction of intravenous immunoglobulin enriched in natural autoantibodies» // J. Autoimmun. 1995. - V. 8. - P. 405.

155. Wei L., Alhenc-Gelas F., Corvol P., Clauser E. «The two homologous domains of human angiotensin I-converting enzyme are both catalytically active» // J. Biol. Chem. -1991. V. 266. - № 14. - P. 9002-9008.

156. Wilson G.S., Miles A A. «The natural antibodies: their nature, origin and behaviour» // In: Wilson T.A. Ed. Principle of Bacteriology and Immunity. Edward Arnold -London-1964.-P. 1315.

157. Witz L, Yaakubowicz M., Gelernter L «Studies on the level of natural antibodies reactive with various tumor cells during urethane carcinogenesis in BALB/c mice» // Immunobiology. 1984. - V. 166. - P. 131.