Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат медицинских наук Майстровский, Кирилл Валерьевич

  • Майстровский, Кирилл Валерьевич
  • кандидат медицинских науккандидат медицинских наук
  • 2014, ВладивостокВладивосток
  • Специальность ВАК РФ14.03.09
  • Количество страниц 165
Майстровский, Кирилл Валерьевич. Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей: дис. кандидат медицинских наук: 14.03.09 - Клиническая иммунология, аллергология. Владивосток. 2014. 165 с.

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Майстровский, Кирилл Валерьевич

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о роли иммунных механизмов в развитии

атеросклероза

1.1.1 .Участие врожденного иммунного ответа в атерогенезе

1.1.2. Участие адаптивного иммунного ответа в атерогенезе

1.1.3. Роль цитокинов в атеросклеротическом воспалении

1.2. Значение молекул адгезии в развитии атеросклероза

1.3. Иммунотерапия в комплексном лечении пациентов с ОАСНК

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА II. КОНТИНГЕНТ, МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.. ГЛАВА III. ОСОБЕННОСТИ ИММУННОГО И ЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА У ПАЦИЕНТОВ С ОАСНК

3.1. Характеристика состояния адаптивного клеточного иммунитета у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

3.2. Характеристика состояния адаптивного гуморального иммунитета у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

3.3. Характеристика состояния врожденного иммунитета у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

3.4. Характеристика состояния цитокинового статуса у пациентов с ОАСНК

в зависимости от степени тяжести заболевания

ГЛАВА IV. ЭКСПРЕССИЯ МОЛЕКУЛ АДГЕЗИИ У ПАЦИЕНТОВ С ОАСНК

4Л. Уровень растворимых молекул адгезии (sVCAM-1, sICAM-1, sP-selectin, sE-selectin) в сыворотке крови у пациентов с ОАСНК в зависимости от степени тяжести заболевания

ГЛАВА V. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМНОЙ ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ РЕАКЦИИ У ПАЦИЕНТОВ С ОБЛИТЕРИРУЮЩИМ АТЕРОСКЛЕРОЗОМ СОСУДОВ НИЖНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ 1. 5.1. Использование плазменных уровней цитокинов для характеристики хронического системного воспаления с помощью интегральных критериев

у пациентов с ОАСНК

ГЛАВА VI. ИММУНО-ПАТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ПОЛИСАХАРИДОВ БУРОЙ ВОДОРОСЛИ В КОМПЛЕКСЕ С БАЗИСНОЙ ТЕРАПИЕЙ У ПАЦИЕНТОВ С ОАСНК

6.1. Влияние Фуколама на показатели иммунного статуса у пациентов с ОАСНК

6.2. Влияние Фуколама на показатели цитокинового статуса у пациентов с ОАСНК

6.3. Влияние Фуколама на уровень растворимых молекул адгезии у пациентов с ОАСНК

6.4. Влияние Фуколама на состояние системы гемостаза и липидный обмен у пациентов с ОАСНК

6.5. Оценка эффективности терапии пациентов с ОАСНК с помощью

интегральных критериев

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И

ПРАКТИКУ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АПФ - ангиотензин- превращающий фермент

АПТВ - активированное парциальное тромбопластиновое время

АФК - активные формы кислорода

БАД - биологически активная добавка к пище

ГБ - гипертоническая болезнь

ГМК - гладкомышечные клетки

дас - диссеминированное внутрисосудистое свёртавание

дк - дендритные клетки

Днк - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИБС - ишемическая болезнь сердца

ИРИ - иммунорегуляторный индекс

КР - коэффициент реактивности

ЛПИ - лодыжечно-плечевой индекс

лик: - лимфоциты периферической крови

лпл - липопротеинлипаза

лпвп - липопротеиды высокой плотности

лпнп - липопротеиды низкой плотности

мЛПНП - модифицированные липопротеиды низкой плотности

ЛХАТ - лецитин — холестерол - ацилтрансфераза

лпс - липополисахарид

МДА - малондиальдегид

МКБ - международная классификация болезней

нет - нитросиний тетразолий

Нф - нейтрофилы

ОАСНК - облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей

охс - общий холестерин

РНК - рибонуклеиновая кислота

СВР - системная воспалительная реакция

ТВ - тромбиновое время

тг - триглицериды

УР - уровень реактивности

ФГ - фибриноген

ФП - фагоцитарный показатель

ФЧ - фагоцитарное число

ХрСВ - хроническое системное воспаление

CD - cell differentiation antigen или claster definition - антигены

кластеров дифференцировки клеток

C-FOS - ядерный транскрипционный фактор

С- Jun - ядерный транскрипционный фактор

CLR - лектиновые рецепторы С-типа

EGFR - рецепторы эпидермального фактора роста

ERK MARK - митогенактивирующая протеинкиназа

Fas/APO-1 - мембранный белок суперсемейства рецепторов TNF

HLA - human leukocyte antigens - антигены лейкоцитов человека

IFN - interferon - интерферон

IL - interleukin- интерлейкин

Ig - immunoglobulin - иммуноглобулин

INOS - индуцибельная NO- синтаза

LFA - лимфоцитарный функциональный антиген

MCP - моноритарный хемотаксический фактор

МНС - главный комплекс гйстосбвмёстймости

NF -kß - ядерный фактор транскрипции

NK - normal killer - нормальные киллеры

NKT - Т-лимфоциты с функцией натуральных киллерных клеток

N0 - оксид азота

РАМР - pathogen - associated molecular patters- патоген-ассоциирован-

ные молекулярные структуры

PPAR - паттерн-распознающие рецепторы

TCR -T-cell receptor - рецептор Т-лимфоцитов

TGF - трансформирующий фактор роста

TLR - Toll like receptors - ТоП-подобные рецепторы

Thl,2 - T-helper-1, 2- субпопуляции CD4+Т-лимфоцитов (хелперов)

TGF - трансформирующий фактор роста

TNF - tumor necrosis factor - фактор некроза опухолей

sE-selectin - sE-селектин

sICAM-1 - soluble ntercellular adhesion molecules type 1 - растворимая

молекула межклеточной адгезии 1 типа

sP-selectin - sP-селектин

VEGFR - vascular endothelial growth factor receptor - рецептор к

сосудистому эндотелиальному фактору роста

sVCAM-1 - soluble vascular cell adhesion molecule type 1 - растворимая

молекула адгезии сосудистого эндотелия 1 - го типа

VLA-4 - very late antigen-4 - гетеродимерный интегриновый рецептор

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Клиническая иммунология, аллергология», 14.03.09 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Иммунологический и цитокиновый статус в патогенетическом обосновании применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей»

ВВЕДЕНИЕ

Сердечно-сосудистые заболевания, вызванные развитием атеросклероза, являются главной причиной смертности в экономически развитых странах и России [21,37,38]. Облитерирующий атеросклероз сосудов нижних конечностей (ОАСНК) - один из вариантов атеросклероза, при котором поражаются преимущественно крупные артерии. По данным эпидемиологических исследований показатель распространенности окклюзионно-стенотических поражений артерий нижних конечностей среди взрослого населения составляет 2-3% в общей популяции, у пациентов старше 50 лет - более 20% [20]. При этом в действительности ОАСНК страдают гораздо больше людей: субклинические (асимптомные) формы встречаются в 3-4 раза чаще, чем клинические проявления (перемежающаяся хромота) [223]. К 2015 году прогнозируется увеличение смертности от атеросклероза еще на 10% [21].

На сегодняшний день существует много теорий, касающихся трактовки этиологии и патогенеза атеросклероза с позиций морфологии, биохимии, генетики, местных и системных воспалительных реакций, гиперплазии интимы, пролиферации гладкомышечных клеток [2,13,16,36,37,84,240]. Однако ни одна из них, даже самая популярная и аргументированная, не является общепризнанной и окончательно доказанной. Тем не менее, в настоящее время общепризнанно, что ведущим механизмом формирования атеросклеротического поражения сосудов является хроническое иммунное воспаление, на разных стадиях которого происходит активация клеток иммунной системы [19, 38, 150, 152, 153,177, 178].

При определении роли воспаления, лежащего в основе атерогенеза, различают локальное и системное воспаление. Локальное воспаление отражает процессы, происходящие в атеросклеротической бляшке. Системное воспаление проявляется накоплением в крови провоспалительных медиаторов (цитокинов, хемокинов, растворимых рецепторов цитокинов, молекул адгезии и др.), активацией клеточных элементов иммунной

системы, тромбоцитов [10, 32]. Системное воспаление, в отличие от локального, более демонстративно и доступно для исследования в условиях клиники. Доказана, в частности, сопряженность манифестации клинических симптомов атеросклеротической болезни и содержания активированных Т-лимфоцитов, растворимых молекул адгезии и проатерогенных цитокинов при ишемической болезни сердца, инфаркте миокарда, стабильной и нестабильной стенокардии [69, 73, 126, 204]. В то же время у пациентов с ОАСНК проявления системного воспаления изучены недостаточно, а данные о взаимосвязи количественного и функционального состояния циркулирующих Т-лимфоцитов и проатерогенных медиаторов воспаления — цитокинов, хемоадгезивных молекул, молекул адгезии, с тяжестью основного и сопутствующих заболеваний при ОАСНК немногочисленны и противоречивы [1, 7, 8, 31, 109].

Проблематичной остается и оценка степени выраженности воспалительной реакции при этом заболевании [10, 32], несмотря на обилие работ, посвященных использованию маркеров воспаления в качестве прогностических критериев при атеросклерозе [216]. В классификаторах болезней (МКБ-10 и национальных) отсутствуют синдромы, которые отражали бы понятие хронического системного воспаления, а критерии синдрома системной воспалительной реакции обладают в этом случае низкой специфичностью [10, 33]. Отсутствуют и формализованные критерии хронического воспаления, позволяющие качественно оценивать состояние пациента, эффективность проводимой терапии, прогнозировать возможные осложнения и при ОАСНК [56].

Несмотря на прогресс в медикаментозной терапии, атеросклероз

трудно поддается лечению, что диктует необходимость поиска новых

подходов к терапии. В настоящее время основным методом лечения больных

с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей является

консервативная терапия. Доказана важность амбулаторного этапа, уточнена

стратегия консервативной терапии, в частности, необходимость ее

7

непрерывности для всех больных ОАСНК, независимо от стадии артериальной недостаточности [1,4,21]. Развитие хронического иммунного воспаления при атеросклерозе сопряжено с изменениями в системе гемостаза и липидном обмене [3, 11, 12, 24, 59, 117]. В этой связи современный тактический подход к лечению больных с ОАСНК должен обеспечивать рациональное .сочетание, комплекса методов направленных, в числе прочего, на коррекцию липидного и углеводного обмена, тромбоцитарного гемостаза и иммунных нарушений [1, 3, 4, 6, 11, 19, 23]. Однако на практике у большинства пациентов с ОАСНК за рамками терапии остается терапия, направленная на подавление активации Т-лимфоцитов, гиперпродукции цитокинов и свободных радикалов.

Реализация этих направлений становится возможной при

использовании фармакологических средств, обладающих

многокомпонентным действием. В последнее время опубликовано много

работ, посвященных терапевтическому потенциалу фукоиданов

сульфатированных гомо- и гетерополисахаридов из бурых водорослей,

обладающих широким спектром биологической активности [63, 77, 78, 85,

141, 185, 196]. Полифункциональность их действия связана с особенностями

структуры (фукоиданы обладают некоторым структурным сходством с

компонентами внеклеточных тканей - гепарансульфатами, в т.ч. жидких

соединительных тканей - плазмы крови и лимфатической жидкости),

благодаря чему могут имитировать действие эндогенных факторов и

регулировать функции систем макроорганизма через важные ключевые

рецепторы клеток и ферментов [22]. Показано, что фукоиданы являются

мощными ингибиторами пролиферации гладкомышечных сосудистых клеток

(ГМКс) [137], уменьшают гиперплазию интимы [197], подавляют синтез

белка и коллагена V типа [108], препятствуют адгезии клеток к

фибронектину, блокируя сайты, которые распознаются лигандами

воспалительных клеток [135]. Антипролиферативные свойства фукоидана

связаны со способностью ингибировать синтез ДНК в гладкомышечных

8

клетках [262], а также снижать экспрессию и предотвращать ядерную транслокацию фосфорилированных митогенактивированных протеинкиназ [139]. Плейотропное противовоспалительное действие фукоидана включает ингибирование селектинов [71], комплемента и ферментов, участвующих в разрушении тканей при воспалении (таких как гепараназы и эластазы, . . металлопротеазы). [138, 220]. .Противовоспалительные свойства фукоидана в сочетании с антикоагулянтными [23], антитромботическими [235], липидемическими [81] свойствами предопределяют возможность его использования в лечении атеросклероза, в том числе и ОАСНК.

Вышеизложенное определяет актуальность и необходимость дальнейшего исследования иммунных механизмов в развитии и прогрессировании ОАСНК и определение эффективных лечебных подходов у пациентов, страдающих этим заболеванием.

Настоящая работа посвящена исследованию возможности коррекции дисфункции иммунной и цитокиновой системы, эндотелия, липидного обмена и гемостаза у пациентов с ОАСНК при включении в комплекс терапевтических мероприятий полисахаридов из бурых водорослей, а также перспективности использования метода оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции у пациентов с ОАСНК.

Цель исследования: на основании комплексной оценки иммунного статуса, цитокинового профиля и элементов гомеостаза пациентов с ОАСНК установить патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей для оптимизации базисной терапии.

Задачи исследования:

2. Исследовать состояние врожденного и адаптивного иммунитета у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени тяжести заболевания.

3. Изучить особенности функционирования системы цитокинов у

пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости

9

от степени тяжести заболевания. Оценить перспективность использования плазменных уровней цитокипов для характеристики ХСВ с помощью интегральных критериев СВР у пациентов с ОАСНК.

4. Изучить состояние системы гемостаза, липидного обмена и адгезивной функции эндотелия у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости.от степени тяжести заболевания.

5. Изучить влияние полисахаридов из бурых водорослей на состояние иммунной и цитокиновой системы, липидного обмена, гемостаза и адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК

Научная новизна: установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтену-Покровскому, выражающиеся в изменении функциональной активности нейтрофилов (усиление продукции АФК, снижение фагоцитарной активности и функционального резерва), активации гуморальных и клеточных факторов адаптивного иммунитета, усиливающихся по мере прогрессирования заболевания.

Установлено, что состояние цитокиновой системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтену-Покровскому характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с поляризацией иммунного ответа по Thl-типу (повышением уровня проатерогенных интерлейкинов (IFNy), снижением уровня противовоспалительных цитокинов (IL-10 и IL-4), выраженным увеличением хематтрактанта IL-8. Увеличение концентрации растворимых молекул адгезии в сыворотке крови (sVCAM-1, sICAM-1, sE-selectin, sP-selectin) отражает активацию адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК.

Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, уровень проатерогенных цитокинов, выраженность активационных процессов Т-системы и эндотелия, нарушения системы гемостаза зависят от степени тяжести основного и

сопутствующих заболеваний, и усиливаются по мере прогрессировать заболевания.

Доказана иммуно-патогенетическая эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей, применяемых в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК: снижение экспрессии активационных антигенов на лимфоцитах, нормализация уровня 1^0, сдерживание продукции проатерогенных цитокинов, модуляция окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов нейтрофилов, нормализация распределения холестерина между фракциями липопротеидов, снижение гиперкогуляционного потенциала крови.

Практическая значимость: Обоснована целесообразность применения полисахаридов из бурых водорослей для коррекции иммунной дисфункции, нормализации свободнорадикальных процессов и липидного обмена, снижения гиперкогуляционного потенциала крови у пациентов с ОАСНК. Разработана и внедрена в практическое здравоохранение Приморского края (ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 и ГБУЗ Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток) методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК, (методические рекомендации «Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК» (утверждены Департаментом здравоохранения администрации Приморского края). Определена возможность использования плазменных уровней цитокинов с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера развития хронического системного воспаления у пациентов с ОАСНК, оценки риска развития осложнений и осуществления мониторинга проводимой терапии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние иммунной системы у пациентов ОАСНК характеризуется активацией провоспалительных механизмов иммунной системы и

сопутствующей интенсификацией оксидативного стресса: высокой частотой обнаружения повышенных уровней сывороточного №N7 и 1Ь-8, фибриногена, маркеров активации адгезивной функции эндотелия (растворимые молекулы адгезии) и лейкоцитов (активационные антигены), усилением продукции АФК, отсутствием развития 1Ь-10-зависимых механизмов. - .... ■ ■ .

2. Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов, уровень проатерогенных цитокинов, выраженность активационных процессов Т-системы и эндотелия, нарушения системы гемостаза зависят от степени тяжести основного и сопутствующих заболеваний и усиливаются по мере прогрессирования заболевания.

3. Интегральные показатели системной воспалительной реакции — коэффициент реактивности и уровень реактивности, рассчитанные на основе сывороточного содержания пяти цитокинов (1Ь-6, 1Ь-8, 1Ь-10, Т№а и №N7) являются более эффективными критериями оценки системной воспалительной реакции при сопоставлении с частными признаками и могут использоваться для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с ОАСНК.

4. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, нормализует распределение холестерина между фракциями липопротеидов и снижает гиперкогуляционный потенциал крови.

Личный вклад автора:

Планирование исследований, анализ данных отечественной и

зарубежной литературы по теме диссертации, сбор материала для

исследований, участие в клиническом обследовании и исследовании

иммунного статуса пациентов с ОАСНК, анализ историй болезни,

12

статистическая обработка полученных результатов и их анализ, подготовка публикаций, написание диссертации выполнены лично автором.

Апробация материалов работы:

Результаты работы были представлены на научно - практических конференциях и симпозиумах международного, российского и регионального - уровня: II Объединенном иммунологическом форуме- (Санкт-Петербург, 2008); IV Всероссийской конфренции по клинической гемостазиологии и гемореалогии в сердечно-сосудистой хирургии с международным участием (. (Москва,2009), VIII Конференции иммунологов Урала (Сыктывкар, 2010); VII Дальневосточном региональном конгрессе с международным участием «Человек и лекарство» (Владивосток, 2010). Методика применения полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК апробирована и внедрена в практику в отделениях сердечно-сосудистой хирургии ГБУЗ Краевая клиническая больница № 1 и ГБУЗ Городская клиническая больница № 2 (г. Владивосток).

Публикации

Основные результаты диссертационной работы опубликованы в 10 печатных работах, в том числе — 5 статьей - в журналах, включенных в перечень рецензируемых научных журналов, рекомендованных ВАК Минобрнауки РФ для публикации основных положений диссертации.

Объем и структура диссертационной работы

Диссертация изложена на 166 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзор литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов собственных исследований, заключения, выводов, указателя литературы, включающего 287 источников, из них 62 отечественных и 225 зарубежных авторов. Работа иллюстрирована 37 таблицами и 3 рисунками.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о роли иммунных механизмов в развитии атеросклероза

Объём публикаций в современной научной литературе свидетельствует о многогранности трактовки этиологии и патогенеза атеросклероза с позиций морфологии, биохимии, генетики, местных и системных воспалительных реакций, гиперплазии интимы, пролиферации гладкомышечных клеток и т.д. [2,13,16,36,37,84,240]. Наиболее ранние представления о механизме развития атеросклероза отражены в научных трудах Р. Вирхова [281], С. Рокитанского [238], Л. Ашоффа [79]. В последние 30 - 40 лет обсуждалось не менее 20 теорий патогенеза атеросклероза [30, 35, 36, 37, 38, 223, 245, 285]. Были сформулированы гипотезы, объясняющие возникновение и развитие атеросклероза как следствие повреждения эндотелия [37], моноклональной пролиферации гладкомышечных клеток (ГМК) [84, 240], дефектов функции рецепторов к липопротеидам низкой плотности (ЛПНП) [144], аутоиммунная теория [2,3,36], свободнорадикальная гипотеза, липидная гипотеза, макрофагальная теория [13], инфекционная теория,, Однако до настоящего времени ни одна из них, даже самая популярная и аргументированная, не является общепризнанной и окончательно доказанной.

Тем не менее, воспалительная теория атеросклероза, выдвинутая еще в середине XIX века, сейчас, как никогда, привлекает внимание многочисленных исследователей [35, 150,152, 153, 177, 178]. В соответствии с этой теорией атеросклероз рассматривается как ряд последовательно развивающихся клеточных и молекулярных нарушений, которые в совокупности могут быть описаны как хроническое воспалительное заболевание, развивающееся при участии как врожденного, так и адаптивного иммунитета [151,152, 153, 161, 177,235].

Включение иммунного компонента в атерогенез обусловлено реакцией на антигены, участвующие в инициировании и прогрессирования атеросклероза, на роль которых претендуют ЛПС, иммунные комплексы, белки теплового шока, факторы системы комплемента, лектины, вирусы, факторы роста, цитокины, окисленные липиды и липопротеины, тромбоцитарные факторы,.активные.радикалы кислорода, экосаноиды.и др. [153, 162, 254].

Иммунная система, включающая врожденный и адаптивный иммунитет, вовлечена во все стадии атеросклероза, от начала и прогрессирования до атеротромботических осложнений. Основными антигенами являются модифицированные липопротеины низкой плотности (мЛПНП), которые связываются со скевенджер-рецепторами макрофагов и Toll- подобными рецепторами (TLR) дендритных клеток [207,270,271] и презентируются антиген - специфическим С04+-Т-клеткам через МНС-белки II класса [217, 259]. Развитие адаптивного иммунного ответа включает клональную пролиферацию Т-клеток, продукцию цитокинов и иммуноглобулинов [74, 157].

Клеточные и гуморальные иммунные реакции, возникающие в ответ на мЛПНП, на начальном этапе выполняют защитную функцию, обеспечивая их удаление из крови [157,158,186,241]. При увеличении мЛПНП иммунное воспаление теряет защитные функции и приводит к повреждению стенки сосуда [10,12,13]. Исследования последних лет показывают, что каждая из субпопуляций гетерогенного пула иммунных клеток вносит свой вклад в направлении атерогенной или антиатерогенной оси [74,152,241,245]. Настоящий раздел обзора посвящен анализу роли моноцитов/макрофагов, ДК, лимфоцитов в инициации, развитии атеросклероза и его осложнений.

1.1. 1.Участие врожденного иммунного ответа в атерогенезе

К настоящему времени накоплены доказательства того, что

механизмы врожденного иммунитета могут участвовать в инициировании и

прогрессировании атеросклероза [13,93,231,279,286]. Врожденная иммунная

15

система состоит из эпителиально/эндотелиальных барьеров, циркулирующих клеток и неклоиальных наборов паттерн-распознающих рецепторов (pattern-recognition receptors (PRRs), которые связывают определенные молекулярные структуры (pathogen-associated molecular patterns (РАМР), характерные для больших групп патогенов [146]. Наиболее важными представителями семейства PRRS-являются толл-лодобные рецепторы, (Toll-like receptors TLR), экспрессирующиеся на клетках иммунной системы. Активация TLR эндогенными лигандами, сопровождающаяся быстрой дифференцировкой моноцитов в макрофаги и дендритные клетки, может быть одним из механизмов развития патологического повреждения тканей при атеросклерозе [89, 206, 270]. Выраженная экспрессия TLR наблюдается в эндотелиальных клетках и макрофагах в местах атеросклеротического поражения [89, 131], на моноцитах больных с острым коронарным синдромом и атеросклерозом коронарных артерий [128]. Растворимые TLRs обнаружены в атеросклеротических бляшках сонных артерий, гладкомышечных клетках и эндотелиальных клетках сосудов [129, 280].

Дендритные клетки, экспрессирующие сквенджер-рецепторы, рецепторы главного комплекса гистосовместимости (MHCII), лектиновые рецепторы С-типа (CLR), а также TLR и рецепторы для воспалительных цитокинов, играют связующую роль во взаимодействии врожденного и адаптивного иммунитета, обусловленную мощными антиген-представляющими свойствами ДК и способностью активировать Т-лимфоциты [270]. Незрелые и неактивированные ДК обнаруживаются в адвентиции [68] и интиме [213] кровеносных сосудов здоровых людей. Активированные дендритные клетки, экспрессирующие TLR, присутствуют вместе с Т-клетками н в атеросклеротических бляшках человека [124,130,133] и мышей [199,209], продуцируют большое количество 1L-12р40, TNP-a и ИФН-у, но не IL-10 [270], а также мигрируют в лимфоидные органы, активируя там Т-клетки [93,98]. Кроме того данные ряда авторов

указывают на определенную роль дендритных клеток в дестабилизации бляшки [92,124,272].

С другой стороны недавние данные свидетельствуют о критической роли ДК и TLR в подавлении иммунного ответа [287]. Показано, например, что стимуляция TLR2 зимозаном регулирует секрецию цитокинов в ДК и макрофагах, индуцируя иммунологическую толерантность (интенсивный синтез IL-10, незначительный - IL-6 и IL-12 (р70). Индукция IL-10 при этом зависит от Ш^-опосредованной активации ERK МАРК с помощью механизма, независимого от активации протеина 1 (АР-1) и фактора транскрипции c-Fos [287].

Ключевым моментом в атерогенезе является образование жировых

полосок, состоящих из нагруженных липидами «пенистых клеток» -

макрофагов, трансформированных из моноцитов, мигрировавших из

кровотока в субэндотелиальный слой интимы [13, 191, 266]. В свою очередь,

активированные макрофаги интимы секретируют в субэндотелиальное

пространство более ста активных молекул (факторы комплемента,

коагуляционные факторы, простагландины, лейкотриены, протеолитические

энзимы), поддерживающих воспаление. В обзорах [244,286] детально

рассматриваются вопросы взаимодействия макрофагов с липопротеидами,

особенности их рецепторного аппарата, механизмы синтеза медиаторов

воспаления. Нам представляется важным обратить внимание на работы,

связанные с исследованием неоднородности циркулирующих моноцитов и

тканевых макрофагов [145,245]. В обзоре [245] обобщены сведения о роли

«классически активированных» (М1) и «альтернативно активированных»

(М2) макрофагов, присутствующих в атеросклеротических бляшках.

Показано, что человеческие атеросклеротические бляшки содержат, помимо

классически активированных М1, макрофаги, экспрессирующие маннозный

рецептор - маркер альтернативных макрофагов М2, которые менее склонны к

преобразованию в пенистые клетки [158]. Сообщается, что классическая

активация моноцитов Thl-лимфоцитами в макрофаги М1, которые

17

вырабатывают провоспалительные цитокины, может переключаться на «альтернативную» активацию, индуцируемую ТЬ2 и формирующих пул М2. М2 снижают воспаление, синтезируя 1Ь-10, 1Ь1, (ТОР)-(З. Интересно, что макрофаги, выделенные из жировой ткани мышей, находящихся на постной диете, экспрессируют маркеры, характерные для "альтернативных" М2 фенотипов, в отличие от макрофагов, изолированных из жировой ткани получавших гиперхолестериновую диету и характеризующихся фенотипом "классически активированых» М1 клеток [200]. Приведенные выше данные интересны с точки зрения возможности использования подходов, связанных с активацией макрофагов "альтернативных" М2-фенотипов, а также дендритных клеток и субпопуляций регуляторных Т-лимфоцитов в терапевтическх стратегиях при атеросклерозе.

Нейтрофилы также участвуют в инициации и поддержании воспаления

сосудистой стенки, путем адгезии на мембране эндотелиальных клеток с

последующей активной инфильтрацией в интиму. Активированные

нейтрофилы участвуют в образовании супероксид-радикалов и активных

форм кислорода, усиливающих перекисное окисление белков и липидов,

денатурирующих белки и повреждающих ДНК [236]. Нейтрофилы

обладают гранулами, загруженными протеазами, способными к разложению

фагоцитированного материала и разрушению компонентов внеклеточного

матрикса, приводящему к расплавлению ткани [116]. Сведения об

изменениях функциональной активности циркулирующих нейтрофилов у

больных атеросклерозом немногочисленны и противоречивы [7, 47, 48]. Так,

в работе [47] установлено повышение активности циркулирующих

нейтрофилов при ишемической болезни сердца, связанное с увеличением в

крови концентрации ИЛ-1Ь, ФНО-а, накоплением продуктов перекисного

окисления липидов. М.В. Даниленко с соавт. [109] показали, снижение

фагоцитарной активности нейтрофилов на фоне увеличения способности к

продукции активных форм кислорода у пациентов с атеросклерозом артерий

нижних конечностей в стадии II. Умеренное снижение фагоцитарной

18

активности нейтрофилов у больных с атеросклерозом брюшной аорты и артерий нижних конечностей в предоперационном периоде документировано в исследовании [7]. Новицкий В.В. и др. [48], напротив установили, что течение ИБС сопровождается стимуляцией продукции нейтрофилами АФК и переваривающей способности клеток, угнетением .. -,: экспрессии CD 18-, Fey- и СЗЫрецепторов-на неитрофилах и выраженной деструкцией эндотелия.

Таким образом, на сегодняшний день нерешенным остается ряд вопросов, связанныех с участием клеток врожденного иммунитета в атерогенезе.

1.1.1 .Участие адаптивного иммунного ответа в атерогенезе

Участие адаптивного иммунитета в развитии атеросклероза определяется взаимодействием между антигенпредставляющими клетками (дендритные клетки, макрофаги, В-клетки, NK-клетки) и Т-клетками [237]; выделением целого ряда цитокинов из активированных Т-клеток, которые, в свою очередь, опосредуют дальнейшую атаку атеросклеротической бляшки; продукцией антител В-клетками Т- зависимым или Т- независимым образом [74, 157, 245].

Похожие диссертационные работы по специальности «Клиническая иммунология, аллергология», 14.03.09 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Клиническая иммунология, аллергология», Майстровский, Кирилл Валерьевич

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Согласно современным взглядам, атеросклероз рассматривается как ряд последовательно развивающихся клеточных и молекулярных нарушений, которые в совокупности могут быть описаны как хроническое воспалительное заболевание [35, 150,152, 153, 177, 178]. Активность воспаления при атеросклерозе является важной характеристикой процессов, способствующих развитию деструктивных изменений атеросклеротической бляшки.

Сопряженность систем иммунитеа, гемостаза с изменениями липидного обмена, лежащая в основе патогенеза атеросклероза предопределяет поиск препаратов, обладающих многоцелевым действием - противовоспалительным, антиатерогенным и иммуномодулирующим.

В этой связи мы провели оценку иммуно-патогенетической эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана у пациентов с ОАСНК, последовательно изучив состояние системы врожденного и адаптивного иммунитета, особенности функционирования системы цитокинов, состояние системы гемостаза, липидного обмена и функциональное состояние эндотелия при включении Фуколама в комплекс с базисной терапией.

Характеризуя состояние адаптивного и врожденного иммунитета у пациентов с ОАСНК, мы опирались на доказанное к настоящему времени положение об участии иммунной системы в атерогенезе [152, 153, 177, 178], и в частности, на факты, которые позволяют считать, что Т-лимфоциты могут выступать инициаторами иммунного воспаления в ответ на мЛГПТП, а их медиаторы - как растворимые, так и контактзависимые - играть решающую роль в формировании атеросклеротических поражений артерий [69, 129]. Приблизительно 30% Т-клеток в бляшках представляют собой CD3+CD4+, треть из них экспрессируют маркёры активации CD25, HLA-DR, -DQ [190]. Активированные Т-лимфоциты присутствуют на всех стадиях развития атеросклеротического поражения [114], секретируют IFN-y, IL-2, TNF-a и -ß,

которые приводят к сосудистой активации макрофагов и развитию иммунного воспаления. Показано, например, что увеличение активированных Т-клеток и макрофагов у АроЕ-нокаутных мышей с нарушенной TGF-ß сигнализацией на фоне гиперхолестеринемией сопровождается увеличением площади поражения [120]. Роль Thl в атерогенезе продемонстрирована и Zhou X. et. al. [274], показавших, что на ранних стадиях развития атеросклероза IgG-, антитела к окисленным ЛПНП представлены, главным образом, подтипом IgG2a, характерным для Thl-иммуного ответа, в то время как на поздних стадиях увеличивается уровень ТЪ2-специфических IgG [274]. Принимая во

внимание ключевую роль С04+-лимфоцитов в развитии активного воспаления в зоне повреждения интимы [44, 129], а также данные об увеличении активированных Т-лимфоцитов и уровня растворимых форм активационных антигенов по мере прогрессирования атеросклероза [126], мы провели сравнение показателей клеточного иммунитета у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей в зависимости от степени выраженности атеросклеротического процесса. Выполненные нами исследования позволили установить, что у пациентов с ОАСНК II-III стадии по Фонтейну -Покровскому показатели, характеризующие структуру основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови, находятся в границах значений, констатирующих удовлетворительную функцию иммунной системы. В то же время средние значения относительного содержания и абсолютного количества NK-клеток и NKT-клеток, обладающих спонтанной цитотоксической активностью, у пациентов с III стадией ОАСНК превышали таковые у здоровых доноров и пациентов с II стадией заболевания. Их повышение может быть связано с обострением аутоиммунных реакций, дестабилизацией атеросклеротической бляшки, приобретением ее компонентами антигенных свойств.

Увеличение абсолютного количества циркулирующих лимфоцитов, а

также усиление экспрессии рецептора к IL-2 (CD25), антигенов главного

комплекса гистосовместимости II класса (HLA-DR), апоптотического маркера

108

CD95/Fas на поверхности лимфоцитов свидетельствуют о том, что активация Т-клеток при ОАСНК не ограничивается зоной атеросклеротической бляшки. Количественные параметры, характеризующие соотношение субпопуляций лимфоцитов и выраженность активационных процессов, зависящих от степени тяжести основного и сопутствующих заболеваний, подтверждают участие циркулирующих активированных Т-лимфоцитов в патогенезе атеросклероза сосудов нижних конечностей.

Накопленные к настоящему времени данные доказывают, что апоптоз клеток играет важную роль в процессах, связанных нестабильностью бляшки. Следует подчеркнуть, что существуют фундаментальные различия между последствиями апоптоза эндотелиальных и воспалительных клеток (макрофагов/моноцитов и лимфоцитов) в зоне повреждения сосуда. Если апоптоз эндотелиоцитов и гладкомышечных сосудистых клеток является пусковым механизмом разрыва атеросклеротической бляшки, то гибель активированных Т-лимфоцитов и макрофагов, ограничивающая количество воспалительных клеток в зоне повреждения, стабилизирует процесс [253]. Анализ соотношения лимфоцитов, экспрессирующих активационные антигены, показал, что у пациентов с ОАСНК как II, так и III стадиями (у последних при более высоком уровне активационных антигенов) процессы активации клеток доминируют над процессами естественной гибели, поддерживая воспаление.

Повышенное содержание B-лимфоцитов у пациентов с заболеванием

III стадии, сопровождаемое значимым увеличением уровня IgG в сыворотке

крови, превышающим средние значения показателя среди всех

обследованных пациентов, отражает участие B-системы иммунитета в

развитии хронического воспалительного процесса у пациентов с ОАСНК и

может быть связано с усилением продукции анти-мЛПНП аутоантител.

Полученные результаты согласуются с литературными данными

отечественных и зарубежных авторов [109], демонстрирующих участие

гуморальных факторов иммунитета в атерогенезе указывает обнаружение в

109

[230] и свидетельствуют об активации гуморального звена иммунитета у исследуемой группы пациентов

При исследовании состояния клеточных элементов врожденного иммунитета у пациентов с ОАСНК, в частности, нейтрофилов, мы установили повышение показателей активности спонтанного НСТ-теста, отражающего

уровень.....продукции нейтрофилами супероксидного аниона и степень ..

функционального раздражения клеток in vivo, а также активность индуцированного НСТ-теста на фоне снижения индекса функционального резерва нейтрофилов снижался. Выявленные нами у пациентов с ОАСНК изменения функциональной активности нейтрофилов (снижение фагоцитарной активности на фоне активации кислородзависимого метаболизма и связанной с ним генерации активных форм кислорода) свидетельствуют о развивающейся недостаточности эффекторных функций клеток и связанны с истощением на фоне длительной активации. Анализируя полученные результаты, мы принимали во внимание двоякую роль этих клеток в атерогенезе. С одной стороны, нейтрофилы участвуют в инициации и поддержании воспаления сосудистой стенки, адгезируясь на мембране эндотелиальных клеток с последующей активной инфильтрацией в субэндотелиальное пространство, образуя активные формы кислорода, супероксид-радикалов, усиливающих перекисное окисление липидов и белков, с другой - играют важную роль в очистке модифицированных липопротеинов, нежелательных или мертвых клеток и клеточных обломков с помощью фагоцитоза. В этой связи очевидным становится поддержание баланса физиологической активности нейтрофилов, обеспечивающего адекватную эффекторную функцию клеток.

Фундаментальные исследования последних лет свидетельствуют о

ведущей роли провоспалительных цитокинов в атерогенезе. В

экспериментальных и клинических исследованиях выявлены множественные

регуляторные эффекты провоспалительных цитокинов в очаге

атеросклеротического поражения, специфически связанные с патогенезом

110

атеросклероза [17]. Как источниками, так и мишенями действия цитокинов являются все клетки, присутствующие в зоне атеросклеротических повреждений -моноциты, макрофаги, нейтрофилы, клетки глии, эндотелиальные клетки, гладкомышечные клетки, фибробласты, кератиноциты, Т-и В-лимфоциты, №С-клетки. Основным продуцентом , цитокинов в .атеросклеротических бляшках являются макрофаги. Их репертуар включает провоспалительные цитокины ТЫБ-а, 1Ь-1, 1Ь-6, 1Ь-12, 1Ь-15 и 1Ь-18, противовоспалительные 1Ь-10 и ТОР-Р, целый ряд хемокинов. Эндотелиальные клетки продуцируют провоспалительные цитокины ТКГР-а, 1Ь-1(3, 1Ь-6, 1Ь-8 и 1Ь-15, противовоспалительный ТОБ-р, гемопоэтические факторы роста, в том числе для стволовых клеток (8СР), 1Ь-3, СМ-СЗБ, СБР и М-СБР, хемокины 1-309/ССЫ, МСР-1/ССЬ2, МСР-4/ССЫЗ, монокины, индуцированные ИФН-у (М^) / СХСЬ9, хемоаттрактант (1-ТАС) / СХС1Л 1, но не синтезируют 1Ь-10,1Ь-4 или 1Ь-13 [18, 179, 260, 261, 269]

При анализе пропорций оппозитных пулов провоспалительных и противовоспалительных цитокинов нами обнаружены выраженные нарушения в соотношении П^ЬТу и ТЬ-4, отражающем состояние баланса Т1т1/ТЬ2- клеток и девиацию иммунного ответа в сторону ТЫ. Значительное увеличение концентрации 1БЫу - ключевого проатерогенного цитокина - выявлено в сыворотке крови пациентов с сопутствующим диагнозом ИБС I и 11 степени, ГБ I и II степени. Сниженные сывороточные уровни 1Ь-10, свидетельствующие об отсутствии 1Ь-10-зависимых механизмов ограничения хронического системного воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, также могут быть обусловлены активацией ТЫ-ответа и повышенной продукцией активированными лимфоцитами ШЫу [10].

В ряде исследований продемонстрирована тесная связь между

повышением активности провоспалительных цитокинов в сыворотке крови и

тяжестью хронической сердечной недостаточности ишемической и

неишемической этиологии [49, 73]. Выявленные в нашем исследовании

наиболее высокие уровни 1Ь-8, П^ТЧу в сыворотке крови пациентов с

111

сопутствующим диагнозом ИБС I и II степени, ГБ I и II степени, подтверждают значение иммуновоспалительной активации, обусловленной хронической сердечной недостаточностью, в прогрессировании атеросклероза сосудов нижних конечностей и могут быть предложены в качестве маркеров прогрессирования заболевания и будущих осложнений.

, В то же время уровень IL-6, которому в последнее время уделяется большое внимание в связи с его ролью в атерогенезе [184, 194] по нашим наблюдениям изменялся в меньшей степени, хотя и различался значимо у пациентов с заболеванием II и III стадии, а также у пациентов с сопутствующим диагнозом ишемическая болезнь сердца. Наши данные согласуются с выводами авторов о второстепенной роли IL-6 в прогностической значимости при облитерирующем атеросклерозе сосудов нижних конечностей [172].

К настоящему времени существуют доказательства значимости в атерогенезе, а также прогрессировании сердечной недостаточности уровня IL-4 [49, 83]. Однако механизмы участия IL-4 в поражении сердечно-сосудистой системы остаются неясными. Известно, что как противовоспалительный цитокин, IL-4 подавляет секрецию цитокинов моноцитарного происхождения, цитотоксичность макрофагов, ингибирует экспрессию молекул адгезии эндотелием [215]. С другой стороны есть предположение о том, что в русле сосуда IL-4 проявляет провоспалительную активность [177]. Полученные нами данные о повышенном уровне IL-4 у пациентов с сопутствующим диагнозом ИБС. Стенокардия напряжения I - II ФК, ГБ I и II степени, возможно также ассоциированы с прогрессированием сердечной недостаточности.

Таким образом, выполненное исследование позволило установить, что у

пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей по мере

прогрессирования заболевания от II к III стадии усиливаются процессы Т-, В-

клеточной активации и синтеза провоспалительных цитокинов, диктующие

необходимость проведения противовоспалительной и иммуномодулирующей

112

терапии. Значимыми прогностическими маркерами, отражающими выраженность хронического воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, а также у пациентов с сопутствующим диагнозом ИБС, являются концентрация ШЫу, 1Ь-8 в сыворотке крови и уровень экспрессии активационных антигенов СЭ25 и НЬЛ-ОЯ на циркулирующих лимфоцитах.

Хроническое системное воспаление вообще и при атеросклерозе в

частности имеет принципиальные отличия от острого системного воспаления

и длительное время развивается на фоне относительного равновесия между

повреждающими факторами и буферными противовоспалительными

системами [10]. Однако с определённого момента прогрессирование ишемии

тканей может приводить к форсированию основных патогенетических

феноменов, которые сопровождают хроническое системное воспаление,

усугубляя местные проявления, болевую реакцию и способствуя развитию

критических осложнений [43]. Важным моментом в этой связи является

количественная и качественная оценка выраженности системной

воспалительной реакции. Иммунные нарушения, наблюдающиеся при

атеросклерозе и отражающие процессы хронизации воспаления, определяют

интерес к поиску возможных маркеров, среди которых рассматриваются белки

острой фазы, активационные антигены, проатерогенные цитокины, молекулы

адгезии, аутоантитела, иммунные комплексы и др. [45]. Используемые для

выявления факторов риска развития и прогрессирования

атеросклеротического повреждения артерий маркёры воспаления не дают

представления о целостном процессе [32,56]. Метод, предложенный Ю.М.

Гусевым с соавт. [42], основан на интегральных критериях, доступных для

массового использования в клинике и позволяет определять наличие и

характер системной воспалительной реакции, установить её клинически

значимые пороговые уровни, отражающие трансформацию классического

воспаления в системное, а также оценивать риск осложнений и осуществлять

мониторинг терапии. В качестве главного звена (эталонного критерия)

113

системной воспалительной реакции авторы предложили использовать уровень цитокинов (IL-6, 8 и 10, TNFa) и С-реактивного протеина в сыворотке крови.

При прогрессировании атеросклероза гиперпродукция

провоспалительных цитокинов приводит к срыву регуляции каскадных реакций иммунной системы с последующим развитием системного воспаления [112] В ряде исследований продемонстрирована „ тесная _ связь между повышением активности провоспалительных цитокинов в сыворотке крови и тяжестью хронической сердечной недостаточности ишемической и неишемической этиологии [45, 49, 73, 265]. Нами было показаны наиболее значимые изменения уровня IL-8 и IFND.

Значимо более высокие уровни IFND у пациентов с проявлением мультифокального атеросклероза, зарегистрированные нами, подтверждают значение иммуновоспалительной активации, обусловленной хронической сердечной недостаточностью, в прогрессировании атеросклероза сосудов нижних конечностей. Учитывая полученные результаты и данные литературы о значимости IFND в атерогенезе, мы использовали плазменные уровни этого цитокина в качестве одного из параметров при подсчёте коэффициента реактивности вместо С - реактивного белка. Включение IFND в качестве маркёра системной воспалительной реакции при облитерирующем атеросклерозе сосудов нижних конечностей отвечает принципу относительности включения показателей в коэффициент реактивности, постулируемому авторами метода и предлагающему возможность взаимозаменяемости маркёров, сопоставимых по биологической значимости при той или иной патологии, при сохранении общего принципа — суммирования трёх наибольших значений индекса реактивности.

С помощью интегральных критериев было установлено, что прогрессирование ишемии при атеросклерозе от II к III стадии сопряжено с развитием ХрСВ от первой (компенсированной) ко второй (неустойчивой компенсации) стадии. Наличие атеросклеротических поражений других

бассейнов (ншемическая болезнь сердца) ассоциируется с признаками третьей стадии хронического системного воспаления (субкомпенсированной).

Хроническое системное воспаление у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей характеризуется высокой частотой обнаружения, повышенных уровней сывороточного IFND и IL-8, фибриногена, маркёров активации эндотелия (растворимых, молекул адгезии) и лейкоцитов (активационные антигены), отсутствием развития IL-10-зависимых механизмов и наличием органной дисфункции. Устойчивость хронического системного воспаления к проводимому лечению диктует необходимость оптимизации патогенетической противовоспалительной терапии при облитерирующем атеросклерозе.

Таким образом, интегральные показатели - коэффициент и уровень реактивности, рассчитанные на основе сывороточных уровней пяти цитокинов (IL-6, 8, 10, TNFa, IFND), являются более эффективными критериями оценки системной воспалительной реакции при сопоставлении с частными признаками. В то же время индексы реактивности отдельных показателей, формирующих систему «коэффициент реактивности/ уровень реактивности», в частности индексы реактивности IL-8 и IFND, могут использоваться и в качестве самостоятельных маркёров при мониторинге заболевания. Метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей может быть рекомендован для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей.

С развитием знаний об атеросклеротическом процессе потенциальное

клиническое значение приобрели исследования молекул адгезии, в том числе

растворимых, открывающие новый взгляд на патофизиологию атеросклероза

и его последствия. Утверждение, что молекулы адгезии причинно связаны с

развитием атеросклероза поддерживается тем фактом, что нокаут мышей,

дефицитных по Е-селектину, Р-селектину или внутриклеточным молекулам

115

адгезии-1(1САМ-1) имеют пониженный ответ на атеросклеротические стимулы [229]. Кроме того, повышенная экспрессия молекул адгезии была обнаружена в человеческих атеросклеротических бляшках [189].

Оценка уровня молекул адгезии способствует пониманию механизмов, ответственных за инициирование, прогрессию и клинические проявления атеросклероза. Кроме того, другим потенциальным использованием растворимых молекул адгезии может быть мониторинг терапии, направленной на снижение воспалительного статуса и улучшения функции эндотелия.

1САМ-1 представляет собой интегральный мембранный белок с молекулярной массой 55 Ша, содержащий пять ^-подобных клеточных доменов - является лигандом для ЬРА-1, Мас-1 и СЭ43 и экспрессируется под влиянием провоспалительных цитокинов - 1Ь-1, ТМ^а и 1РЫу на различных типах клеток. В многофазном процессе взаимодействия лейкоцитов с сосудистым эндотелием 1САМ-1 обеспечивает фазу прочной адгезии лейкоцитов к эндотелиальным клеткам.

УСАМ-1 является лигандом интегрина УЬА-4 на лимфоцитах, моноцитах и эозинофилах. УСАМ-1/УЬА-4- взаимодействие опосредует прочное прилипание циркулирующих лейкоцитов (не относящихся к нейтрофилам) к эндотелию [113], обладает относительно селективной лейкоцитарной адгезией, обеспечивая накопление мононуклеарных клеток в процессе смены острой фазы воспаления хронической.

Е-селектин экспрессируется на сосудистом эндотелии при активации различных медиаторов, включая цитокины и эндотоксины. Р-селектин содержится в цитоплазме гранул тромбоцитов и быстро перемещаться к поверхности эндотелия после воздействия тромбина или гистамина.

Р-, Ь-и Е-селектины структурно похожи, представляют собой трансмембранные белки, связывающие углевод определенной структуры -тетрасахарид, известный как сиалил-Льюис X (81ех), который содержит сиаловую кислоту и остатки фукозы. Селектины рассматриваются в качестве

потенциально полезных маркеров для диагностики патологий, сопровождающихся развитием воспалительных реакций.

Недавние исследования [110] показали, что з1САМ-1 является значимым предиктором прогрессирования атеросклероза сосудов нижних конечностей в течение последующих 12 лет независимо от сердечно-сосудистых факторы риска. В другом исследовании [.70] в популяции пациентов с .облитерирующим атеросклерозом сосудов нижних конечностей, плазменные уровни бУСАМ-1 были 618±258 нг/мл (у пациентов без ОАСНК 496±164 нг/мл (р=0,016), з1САМ-1 344±239 нг/мл и 275± 99 нг/мл (р=0,079). Увеличение сердечнососудистых рисков было связано с повышением плазменных уровней бУСАМ-1, но не б1САМ. Расхождение между этими двумя исследованиями трудно объяснить. Экспрессия 1САМ-1 значительно усиливается под действием воспалительных цитокинов в эндотелиальных клетках, фибробластах, эпителиальных клетках и мультипотентных гемопоэтических клетках. Напротив, действие УСАМ-1 в большей степени ограничено активированными эндотелиальными клетками в зоне поражения [212].

Таким образом, хотя 1САМ-1 и УСАМ-1 структурно и функционально похожи, плазменные уровни з1САМ-1 можно считать маркером системного воспалительного процесса, в то время как УСАМ-1 является индикатором активности воспаления в бляшке. Вследствие этих различий, бУСАМ-1 выступает как предиктор риска у пациентов с выраженным атеросклерозом, а з1САМ-1- у здоровых людей. Стоит отметить, что при ОАСНК, прогностическая ценность бУСАМ-1 не зависит от классических факторов риска, предыдущих инфарктов миокарда и инсультов и других ситуаций, связанных с повышением уровня циркулирующих молекул адгезии [249]. Еще более важно, бУСАМ-1 измерение усиливает прогностическую ценность плече-лодыжечного индекса, который на сегодняшний день является наиболее мощным прогностическим показателем риска ОАСНК [125].

В 2005 г. были опубликованы данные 12-летнего Эдинбургского исследования, показавшие связь между высоким уровнем С-реактивного белка, 1Ь-6, 1САМ-1 и УСАМ-1 и прогрессированием облитерирующего атеросклероза сосудов нижних конечностей. А. РгасШап е1 а1. [225], проведя исследование уровня растворимых молекул адгезии у мужчин с заболеваниями периферических. артерий, показали, что повышение уровня бУСАМ- 1 сопряжено с прогрессированием облитерирующего атеросклероза, в то время как повышение з1САМ-1 является независимым предиктором развития заболевания у клинически здоровых людей.

Для уточнения механизмов дисфункции эндотелия при ОАСНК мы провели изучение уровня растворимых молекул адгезии (зУСАМ-1, з1САМ-1, зР-Бексйп, зЕ-5е1ес1:т) и установили значимое повышение показателей по сравнению с таковыми у здоровых доноров. Концентрация з1САМ-1 в

сыворотке крови пациентов ОАСНК составляла 349,8±230,2 нг/мл -389,4±127,1 нг/мл зУСАМ-1 - 433,3±65,4 нг/мл, БР-селектина 241,8±108,0 нг/мл - 232,3± 124,0 нг/мл , БЕ-селектина - 54,2±9,0.

По мере прогрессирования заболевания от II к III стадии концентрация растворимых молекул адгезии в сыворотке крови увеличивалась. Уровень з1САМ-1 и бУСАМ-1 нарастал от 327,3±96,1 нг/мл и 428,3±81,0 нг/мл у пациентов с II стадией ОАСНК до 385,4±70,2 нг/мл и 533,7±,7 нг/мл у пациентов с III стадией соответственно (р>=0,000). При анализе уровней бР-селектина и БЕ-селектина выявлена схожая закономерность: концентрация молекулы эР-селектина (284±121,7 нг/мл) и БЕ-селектина (59,5±9,7) у пациентов с III стадией ишемии была значимо выше, чем у пациентов с II стадией (216,3±111,0 нг/мл, /?=0,027) и 52,3±14,0 (р=0,025).

Приведенные факты указывают, что молекулы адгезии с одной стороны отражают течение хронического воспалительного процесса при атеросклерозе, с другой - являются предикторами осложнений сердечно-сосудистых заболеваний.

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что прогрессирование атеросклероза у пациентов с ОАСНК сопровождается активацией провоспалительных механизмов иммунной системы, сопутствующей интенсификацией оксидативного стресса, нарушениями функции эндотелия.

.....Актуальными остаются исследования в области, фармакологических

проблем, связанных с воспалением, включая разработку препаратов с целенаправленным действием на мишени, участвующие в реализации реакций врожденного и адаптивного иммунитета. Так, например, в экспериментах установлено, что статины снижают ФНО-а-индуцированную экспрессию ICAM-1 и VCAM-1 на поверхности эндотелиальных клеток человеческой пупочной вены [100], препятствуют рекрутированию и активации лимфоцитов и макрофагов, снижают индуцированную IFNy экспрессию антигенов MHCII на артериальных клетках, что приводит к подавлению дифференцировки Thl-клеточного ответа in vivo [218, 250]. В то же время К. Kröger et al. [121] не обнаружили количественных изменений маркеров клеточной активации (HLA-DR, CD25, CD69 и CD86) после терапии аторвастатином и клопидогрелем здоровых добровольцев и не установили значительных изменений в ответе лимфоцитов на митогены in vitro под действием аторвастатина

До недавнего времени при лечении воспалительных заболеваний основное внимание уделяли подавлению воспалительного процесса на стадии его инициации и/или развития. Несмотря на очевидные успехи, эта стратегия во многих случаях не приводит к полному излечению. Одна из центральных идей в тактике современного лечения воспаления заключается в эффективном разрешении _ воспаления: торможении притока нейтрофилов, усилении рекрутмента моноцитов, индуцировании апоптоза в нейтрофилах и быстрого их клиренса, восстановлении нарушенных структур тканей [239], а также модуляции апоптоза активированных Т-лимфоцитов [62, 232].

В этой связи, определенную значимость приобретает терапия, направленная на коррекцию клеточных нарушений в стенке сосуда и в сосудистом русле, сопряженных с развитием воспалительной реакции и деструктивных процессов. Проведены исследования, демонстрирующие, например, способность статинов оказывать противовоспалительное действие, ..-.сопряженное, с.иммуномодулирующими эффектами, снижением липидных и иммунологических маркеров атеросклероза [67], и предотвращать апоптоз эндотелиальных клеток [40].

Однако, на практике у большинства пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, как правило, используются препараты, направленные на улучшение микроциркуляции (чаще, трентал, актовегин) и на коррекцию гемостаза (гепарин, фраксипарин). За рамками терапии остается иммунотерапия, направленная на подавление активации Т-лимфоцитов, гиперпродукции цитокинов и свободных радикалов. В числе прочих факторов, одной из причин такого положения является высокая стоимость ■ фармакологических препаратов. Например, в последние годы в лечебной практике появились препараты простагландинов, в частности, вазапростан, имеющие выраженную противовоспалительную активность. Вместе с тем вазапростан - относительно дорогой препарат, что является основным препятствием для его широкого использования в клинической практике. Учитывая вышесказанное, одним из возможных подходов, направленных на подавление воспалительного процесса, эффективную коррекцию липидного и углеводного обмена, тромбоцитарного гемостаза и иммунных нарушений у больных с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, может явиться включение в комплексную терапию атеросклероза биологически активных веществ ...природного происхождения, обладающих многокомпонентным действием [203].

Сульфатированные полисахариды из бурых водорослей и их

синтетические аналоги, стратегия использования которых для управления

воспалением основывается на способности имитировать действие эндогенных

120

факторов, а также регулировать активность ключевых молекул, участвующих в воспалительном процессе [38], являются перспективными кандидатами на роль соединений, влияющих на течение и исход как острых, так и хронических воспалительных процессов. Считают, что отдельные участки полисульфатированных цепей фукоиданов способны выступать в качестве миметиков природных лигандов белковых рецепторов, обуславливая тем самым, например, противовоспалительную активность, антикоагулянтное и антиангиогенное действие [22].

Разные виды бурых водорослей значительно различаются по содержанию и составу фукоиданов, наиболее богатым их источником являются представители порядка Fucales [58]. Бурые водоросли Fucus evanescens имеют обширный ареал, легко доступны, встречаются вдоль всего побережья Курильских островов и Камчатки, а также в Приморском крае и на Сахалине и могут служить доступным источником фукоиданов [60]. С практической стороны использование этой водоросли является перспективным вследствие высокого содержания фукозсодержащих полисахаридов (до 15%) [382]. Кроме того, тщательный контроль источников морских водорослей, современные методы экстракции и идентификации полисахаридов, позволяющие получать воспроизводимые препараты, новые нормативные подходы к стандартизации, делают возможным получение фракций фукоидана, которые могут стать основой для разработки лекарственных форм [94].

В работе К. Tanaka [258] селектин-блокирующий эффект фукоидана

положен в основу потенциального метода профилактики постишемического

реперфузионного и аутоиммунного поражения сердца. Автором показано

снижение концентрации маркеров воспаления в сыворотке, уменьшение

инфильтрации миокарда макрофагами и С04+-Т-клетками, улучшение

функции сердечной мышцы после 3-недельного внутрибрюшинного введения

фукоидана мышам с аутоиммунным миокардитом, индуцированным

инъекцией кардиального миозина. P. Thomes et al. [96] обнаружили

121

выраженный протективный эффект фукоидана из Cladosiphon okamurcmus при пероральном введении мышам с инфарктом миокарда, индуцированным изопротеренолом. Lee N.Y. et al. [176] установили, что фукоидан из Laminaria gwyanovae ингибирует фосфорилирование рецептора эпидермального фактора роста (EGFR) в мышиных клетках эпидермиса С141 JB6. .Тормозящее. влияние .фукоидана на фосфорилирование . EGFR обусловлено ингибированием EGFR-зависимого фосфорилирования внеклеточной сигналрегулирующей киназы 1/2 и C-Jun N-концевой киназы. Кроме того, фукоидан из Laminaria guiyanovae дозозависимо ослабляет C-FOS или C-Jun транскрипционную активность и тем самым препятствует связанную с активатором белка-1 (АТ-1) трансактивационную деятельность. In vitro анализ показал, что фукоидан непосредственно взаимодействует с EGFR. Ранее показано, что фукоидан из F. evanescens in vitro индуцирует апоптоз лимфоцитов периферической крови, обладает

иммуномодулирующими, противовоспалительными, антикоагулянтными свойствами [14, 23].

В настоящем исследовании мы установили, что включение полисахаридов из F. evanescens в комплекс с базовой терапией пациентов с ОАСНК сопровождается снижением уровня экспрессии активационных антигенов на клетках периферической крови, отражая процессы, способствующие подавлению активации Т- лимфоцитов и дифференциации Т - хелперов 1-типа, и приводящие в конечном итоге к снижению воспалительного ответа. Включение полисахаридов из F. evanescens в схему консервативной терапии также способствует восстановлению равновесиямежду процессами пролиферации-дифференцировки и апоптозом (ростом и гибелью клеток).

Учитывая способность фукоидана индуцировать апоптоз лимфоцитов

[14], снижение относительного содержания HLA-DR+", CD25+-, CD95+- Т-

лимфоцитов в группе пациентов, получавших в комплексе с базисной

терапией фукоидан, может быть связано с усилением апоптоза

122

активированных лимфоидных клеток, обусловленного потенциальными проапоптотическими свойствами фукоидана.

Применение полисахаридов из бурых водорослей оказывает положительный корригирующий эффект на показатели гуморального звена иммунитета пациентов с ОАСНК нормализует повышенный уровень IgG в сыворотке крови, а также способствовует благоприятной динамике. показателей фагоцитарной активности нейтрофилов - повышению ФП и ФЧ, модуляции окислительно-восстановительного потенциала и функционально-метаболических резервов клеток

При оценке влияния Фуколама на уровень цитокинов мы обнаружили, что у пациентов опытной группы при отсутствии значимых различий в содержании TNFd, IL-4, IL-10, IL-8 в сыворотке крови (по сравнению с показателями до начала терапии), в отличие от пациентов контрольной группы, у которых наблюдалось увеличение содержания IL-6 и IFNy в сыворотке крови, концентрация этих цитокинов, а также индекс соотношения IFNy/IL-4 и IFNy /IL-Ю опытной группы не увеличивались. Эти результаты обнадеживают с точки зрения возможности сдерживания продукции проатерогенных цитокинов при включение полисахаридов бурых водорослей в комплес базовой терапии пациентов с ОАСНК при более длительном курсе лечения. Подтвержением являются исследования, выполненны в лаборатории иммунологии ФГБУ «НИИЭМ» им. Г.П.Сомова СО РАМН совместно с ФГБУЗ МО ДВО РАН, в которых установлено снижение провоспалительных цитокинов в сыворотке крови пациентов с заболеваниями сердечнососудистой системы при длительном приеме полисахаридов бурых водорослей (3-6 месяцев) в комплексе с базовой терапией (неопубликованные данные).

Способность фукоиданов блокировать воспаление при попадании в системный кровоток отражена в ряде сообщений [255, 256, 2577]. Как уже отмечалась выше, механизм противовоспалительного действия фукоиданов обусловлен связыванием с Р- и L-селектинами и препятствием

взаимодействия лимфоцитов и нейтрофилов с эндотелием сосудов, а также со специфическими рецепторами, участвующими в передаче сигнала к клеткам .

Однако в наших исследованиях мы не получили ожидаемого снижения уровня растворимых молекул адгезии у пациентов с ОАСНК при включении Фуколама в комплекс с базисной терапией. Отсутсвие изменений уровня растворимых молекул адгезии в системном, кровотоке у пациентов с ОАСНК по нашему мнению объясняется широкими вариациями показателей у отдельных лиц, а также тем обстоятельством, что эти молекулы являются локальными, короткодистантными и короткоживущими медиаторами и возможно, короткий период пребывания их в сыворотке крови в свободном состоянии и способность активно связываться с растворимыми рецепторами, не позволяют выявить значимых изменений в содержании молекул адгезии в анализируемых группах. В то же время, отсутствие изменений в содержании растворимых молекул адгезии на фоне терапии диктуют необходимость оптимизации противовоспалительной терапии, в том числе и исследуемыми полисахаридами.

К настоящему времени получены доказательства патогенетической

связи между изменениями обмена липидов и системным воспалением,

являющимся одним из важнейших и неотъемлемых компонентов атерогенеза

[157, 186, 241]. ЛПНП модифицируются посредством множественных

механизмов, включая оксидацию, энзиматическую деградацию и агрегацию

[35], среди которых основным является окисление под действием свободных

радикалов и ферментов. В результате окисления полиненасыщенных жирных

кислот в фосфолипидах и эфирах холестерина образуются изменённые

продукты (например, малондиальдегид (МДА), которые ковалентно

связываются с аминокислотами, содержащими свободные аминогруппы в

апоВ-100 [250, 251], приводя к его разрушению на многочисленные

пептидные фрагменты. На сегодняшний день идентифицировано более 100

специфичных антител к пептидным фрагментам МДА-апоВ-100 [214],

которые обнаруживаются иммунной системой [157]. Увеличениные

124

количества анти- мЛПШТ антител обнаружены на ранних стадиях у пациентов с заболеваниями периферических сосудов, при атеросклерозе сонных артерий и ишемической болезни сердца, (ИБС) инфаркте миокарда [186].

Молекулярные механизмы изменения липидного метаболизма в настоящее время также рассматриваются с учетом изменений функциональной активности макрофагов, трансформирующихся., в пеиистые клетки . и включающей, по меньшей мере, два механизма. Один из них обусловлен связыванием модифицированных липопротеинов рецепторами, доминирующими среди которых являются скевенджер-рецепторы, другой — с действием провоспалительных цитокинов [13] с участием ядерных гормональных рецепторов: PPARy (peroxisome proliferator-activated receptors -ядерных рецепторов, активирующих пролиферацию пероксисом), LXR, RAR и др.) и транскрипционных факторов - ядерного каппа-В и АР-1 [278].

Противовоспалительные и гиполипидемические свойства сульфатированных полисахаридов из F.evanescens могут быть обусловлены блокированием скевенджер-рецепторов, для которых они являются лигандами [193] а также установленной ранее способностью фукоидана снижать исходно высокий уровень провоспалительных цитокинов, продуцируемых макрофагами - TNFa, IL-8, IL-1, IL-6 [14] и ослаблять C-FOS или C-Jun транскрипционную активность, препятствуя связанной с активатором белка-1 (АТ-1) трансактивационной деятельности [176].

Гиполипидемическое действие фукоидана может быть связано с

влиянием на адипоциты - клетки, участвующие в жировом обмене и

обладающие способностью накапливать жиры. Известно, что адипоциты

секретируют значительное число регуляторных молекул, включая

эндокринные, паракринные и аутокринные факторы. Увеличение уровня

продукции адипоцитами TNFa, IL-6 может стимулировать, в частности,

развитие воспалительного процесса и изменения в сосудистой стенке, а

секреция моноцитарного хемотаксического фактора-1 и макрофаг-

колониестимулирующего фактора оказывает влияние на развитие атером,

125

стимулируя образование пенистых клеток и, как следствие, склеротизацию сосудов [160]. В работе [187] установлена способность фукоидана подавлять дифференцировку адипоцитов, опосредованную уменьшением экспрессии генов PPARy (peroxisome proliferator-activated receptors -ядерных рецепторов, активирующих пролиферацию пероксисом), а также генов белка, связывающего жирные кислоты (АР2ацетил-КоА-карбоксилазы). Показана способность фукоидана повышать активность липопротеинлипазы (ЛПЛ) и лецитин-холестерол-ацилтрансферазы (ЛХАТ) — фермента, превращающего свободный холестерин ЛПВП в эфиры холестерина, являющиеся его более гидрофобной формой и способные, в силу высокой гидрофобности, перемещаться с поверхности липопротеина в ядро, освобождая место на поверхности частицы для захвата нового свободного холестерина. Эта реакция является чрезвычайно важной для процесса очищения периферических тканей от холестерина (обратного транспорта холестерина). Действие фукоидана связано с индукцией экспрессии мРНК липопротеинлипазы, а также индукцией секреции аполипопротеина C-TI - кофактора, ответственного за активацию липопротеинлипазы в капиллярах. Эти данные объясняют способность фукоидана регулировать дислипидемию, ограничевая абсорбциию липидов (ОХС и желчных кислот), активируя метаболические ферменты (ЛП, TIL, ЛХАТ) и повышая экспрессию рецепторов ЛПНП на клетках печени [149].

Показано также, что фукоидан стимулирует внутриклеточный транспорт липопротеинлипазы и уменьшает деградацию этого фермента в адипоцитах, что позволяет использовать его для ингибирования накопление жира [166]. Действие фукоидана в этом случае связано с индукцией экспрессии мРНК липопротеинлипазы, а также индукцией секреции аполипопротеина C-II — кофактора, ответственного за активацию липопротеинлипазы в капиллярах.

Регулирующее липидный метаболизм действие фукоидана при

пероральном введении может быть обусловлено его способностью

ингибировать гидролиз жира липазой поджелудочной железы при

126

пероральном введении, а также снижать уровень печеночной триацилглицерол-липазы в плазме крови и замедлять всасывание пищевых жиров в кишечнике [149,166]. Кроме того, полисахариды, связываясь в просвете кишечника с желчными кислотами, способны прерывать рециркуляцию богатого холестерином пула желчных кислот и усиливать их экскрецию с фекалиями..[18.7]. В результате в печеночных клетках развивается дефицит холестерина, для компенсации которого увеличивается количество мембранных рецепторов к ЛПНГТ, обеспечивающих дополнительный клиренс ХС ЛПНП из плазмы, что, в свою очередь, ведет к снижению уровня ХС в плазме крови.

Гипохолестеринемический эффект фукоидана может быть также связан с тем, что полисахариды слабее связывают гидрофильные желчные кислоты, способствуя увеличению в плазме относительного содержания гидрофобных желчных кислот, которые сильнее, чем гидрофильные кислоты, ингибируют активность холестерин-7 -гидроксилазы в печени [103].

Важным моментом с-, точки зрения доказательной . медицины является

возможность осуществления эффектов фукоидана при пероральном

применении. Подтверждением возможности трансформации фукоидана в

организме человека являются результаты последних исследований по

детекции фукоидана в периферической крови после пероралыюго применения

полисахарида. Возможность появления производных фукоидана в

периферической крови после пероралыюго применения полисахарида

подтверждена исследованиями М.Я. МптеЬ е1 а1. [64] обнаруживших с

помощью монокланальных антител к высокосульфатированному фукоидану

его производные - галактофукана сульфат - в плазме здоровых добровольцев,

принимавших перорально в течение 12 дней по 3 г/сут порошок водоросли

ипйапа, содержавший 10% производных фукоидана, и очищенный

галактофукана сульфат. Средняя концентрация обнаруженного фукоидана в

плазме составила соответственно 4,002 мг/л и 12,989 мг/л. У. ТоШа е1 а1.

[119] также обнаружили фукоидан из С1айоз1ркоп окатигапш в сыворотке

127

крови и моче здоровых добровольцев через 6 и 9 ч после приема полисахарида внутрь. Эти факты указывают на возможность деградации молекул фукоидана в организме человека. Учитывая данные литературы, можно предположить участие описанных выше механизмов в реализации противоспалительных эффектов фукоидана из F. evanescens при его пероральном применении.

.К настоящему, времени установлено, что иммунная система и гемостаз составляют единую защитную систему организма [3,17,24,117]. Определение особенностей системы гемостаза, иммунологических показателей при ОАСНК открывает новые возможности для оптимизации диагностики и лечения пациентов, прогнозирования течения патологического процесса.

Выявленные нарушения гемостаза у пациентов с ОАСНК, свидетельствуют о нарушениях гемостаза, сопровождающегося активацией прокоагулянтного звена (снижение АПТВ, увеличение концентрации фибриногена, укорочение ТВ). Включение сульфатированных полисахаридов из F.evanescens в схему консервативной терапии привело к снижению гиперкогуляционного потенциала крови пациентов.

Обсуждая механизмы взаимодействия иммунной системы и системы гемостаза в развитии воспаления сосудистой стенки, мы принимали во внимание тот факт, что провоспалительные цитокины (IL-1, IL-6, 1L-8, IL-12, TNFa) индуцируют усиление экспрессии тканевого фактора свертывания крови на эпдотелиальных клетках, моноцитах и макрофагах, а также подавляют активность естественных антикоагулянтов, способствуя усилению свертывания крови, тромбообразованию и развитию ДВС-синдрома. Нарушения в системе гемостаза развиваются при участии фактора свертывания крови VII, фактора X и его активной формы Ха, фактора свертывания V [24].

В обзоре литературы мы привели данные исследователей, изучивших

мехнизм антикоагулянтного действия фукоидана из F. evanescens и

показавших его действие на факторы внутреннего и внешнего путей

свертывания, а также на конечный этап свертывания или превращение

128

фибриногена в фибрин под воздействием тромбина [23, 46]. Показано также, что фукоидан оказывает антикоагулянтный эффект при парентеральном и длительном (30-кратном) пероральном введении животным [23]. Принимая во внимание приведенные выше данные, можно полагать, что нормализация нарушений в системе гемостаза пациентов с ОАСНК при назначении - полисахаридов, из F., evanescens в комплексе с базовой терапией обусловлена антикоагулянтными свойствами фукоидана. Кроме того, в экспериментах in vitro и in vivo установлена способность фукоидана из F. evanescens активировать систему фибринолиза, связанная с повышением плазминового потенциала [23]. Эти данные позволяют рассматривать фукоидан из F. evanescens его как потенциальное средство с тромболитической активностью.

Таким образом, проведенное исследование позволило выявить особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК, уточнить роль иммунных механизмов в развитии и прогрессировании заболевания, оценить иммуно-патогенетическую эффективность применения полисахаридов из бурых водорослей у пациентов с ОАСНК для оптимизации базисной терапии, а также определить перспективы практического использования методики оценки ХрСВ с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера СВР, оценки риска осложнений и мониторинга терапии. Результаты исследования показывают, что полисахариды, полученные из бурой водоросли F. evanescens, не только снижают степень выраженности воспалительного процесса у пациентов с ОАСНК, но и обладают способностью нормализовать показатели липидного обмена, системы гемостаза, функциональной активности клеток врожденного иммунитета. Сочетание противовоспалительных, иммуномодулирующих, антикоагулянтных и гиполипидемических свойств делают включение Фуколама в комплексную терапию данной категории пациентов патогенетически обоснованным.

В современной мировой практике известны биопрепараты, по общему

действию аналогичные фукоидану, однако они ограниченно представлены на

129

отечественном рынке и обладают высокой стоимостью. В то же время уникальность химических структур, наличие сырьевой базы в Дальневосточном регионе, экологически чистые и экономичные технологии производства создают предпосылки для более широкого использования в клинической практике фу кои дана из бурой водоросли К емапезсет.

выводы

1. Установлены особенности дисфункции иммунной системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейн-Покровскому, выражающиеся в изменении функциональной активности нейтрофилов (усиление продукции АФК, снижение фагоцитарной активности- и функционального резерва), активации гуморальных и клеточных факторов иммунитета, усиливающихся по мере прогрессирования заболевания.

2. Состояние цитокиновой системы у пациентов с ОАСНК II и III стадий ишемии по Фонтейн-Покровскому характеризуется дисбалансом сывороточных цитокинов с поляризацией иммунного ответа по Thl-типу (повышением уровня проатерогенных интерлейкинов (IFNy), снижением уровня противовоспалительных цитокинов IL-10 и IL-4), выраженным увеличением хематтрактанта IL-8.

3. Значимыми прогностическими маркерами, отражающими выраженность хронического воспаления у пациентов с атеросклерозом сосудов нижних конечностей, являются концентрация IFNy, IL-8 в сыворотке крови и уровень экспрессии активационных антигенов CD25 и HLA-DR на циркулирующих лимфоцитах.

4. Увеличение концентрации растворимых молекул адгезии в сыворотке крови (sVCAM-l, sICAM-1, sE-selectin, sP-selectin) отражает активацию адгезивной функции эндотелия у пациентов с ОАСНК.

5. Применение полисахаридов из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК оказывает иммуномодулирующее действие на факторы врожденного и адаптивного иммунитета, сопровождающееся снижением экспрессии активационных антигенов на лимфоцитах, нормализацией уровня IgG, модуляцией окислительно-восстановительного потенциала и функционально-

метаболических резервов нейтрофилов, сдерживанием продукции проатерогенных цитокинов.

6. Полисахариды из бурых водорослей в комплексе с базисной терапией у пациентов с ОАСНК нормализуют распределение холестерина между фракциями липопротеидов и снижают гиперкогуляционный потенциал крови.

7. Для пациентов с ОАСНК с ишемией II стадии характерно наличие первой стадии хронического системного воспаления (компенсированной), при ишемии III стадии системное воспаление приобретает характер неустойчивой компенсации (2 стадия), наличие сопутствующих заболеваний сердечно-сосудистой системы у части пациентов сопровождается развитием субкомпенсированных (3-я стадия) форм хронического системного воспаления.

8. Метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей СВР может использоваться для регистрации наличия' и характера развития ХрСВ у пациентов с ОАСНК, оценки риска развития осложнений и осуществления мониторинга проводимой терапии.

РЕКОМЕНДАЦИИ ДЛЯ ВНЕДРЕНИЯ В МЕДИЦИНСКУЮ НАУКУ И ПРАКТИКУ

1. На основании оценки иммуно-патогенетической эффективности полисахаридов из бурых водорослей рекомендовано включение БАД "Фуколам" в комплекс с базисной терапии пациентов ОАСНК с целью коррекции дисфункции иммунной системы, нормализации липидного обмена и снижает гиперкогуляционный потенциал крови.. Режим приема - по 1 капсуле 2 раза в день в течение 30 дней в комплексе с базисной терапией.

2. Рекомендуется использовать метод оценки хронического системного воспаления с помощью интегральных показателей для регистрации наличия и характера системной воспалительной реакции, оценки риска осложнений и мониторинга терапии у пациентов с ОАСНК.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Майстровский, Кирилл Валерьевич, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Андреев, В. В. Особенности клинического течения и выбор лечебной тактики при облитерирующем атеросклерозе артерий нижних конечностей в возрастном аспекте : дис. ... канд. мед. наук / Андреев Владимир Владимирович; [ГОУ ВПО «Санкт-Петербургская гос. мед. академия им. И. И. Мечникова» Минздравсоцразвишя.России]. - СПб., 2011. -25 с.

2. Аутоиммунная теория патогенеза атеросклероза и новые пути его лечения / В. А. Нагорнев, В. О. Константинов, А. Н. Климов, А. Д. Денисенко // Вестн. РАММ. - 2003. - 12. - С. 29-34.

3. Баркаган, 3. С. Эндотелиоз и воспалительная концепция атеротромбоза - критерии диагностики и проблемы терапии / 3. С. Баркаган, Г. И. Костюченко, Е. Ф. Котовщикова // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2004. -№ 4.-С. 3-11.

4. Бырихин, Н. И. Комплексный подход к лечению больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей : автореф. дис. ... докт. мед. наук : 14.00.44 / Бырихин Николай Иванович ; [Яросл. гос. мед. акад.]. - М., 2002. - 37 с. : ил.

5. Влияние иммуномодулятора фукоидана из бурых водорослей Fucus evanescens на показатели антиоксидантной системы, липидного и

углеводного обмена у мышей / К. В. Майстровский, Т. С. Запорожец, Л. Н.

/

Федянина [и др.] // Тихоокеанский мед. журн. - 2009. - № 3. - С. 97-100.

6. Влияние окситерола и аторвастатина на ЛПС-индуцированную секрецию фактора некроза опухоли и интерлейкина-10 макрофагами мыши / М. И. Душкин, О. М. Хощенко, Е. Н. Кудимова, Я. Ш. Шварц // Бюл. эксперимен. биол. - 2006. - Т. 141, №2.-С. 194-197.

7. Восканян, Ю. А. Прогнозирование и профилактика инфекционно-воспалительных осложнений в реконструктивной хирургии облитерирующего атеросклероза брюшной аорты и артерий нижних конечностей : автореф. ...

канд. мед. наук : 14.00.27; 14.00.44 / Восканян Юрий Эдуардович ; [Ставроп. гос. мед. акад.]. - Ставрополь, 1996. — 24 с.

8. Гайковая, Л. Б. Иммунологический статус у больных облите-рирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей с осложнениями после реконструктивных операций / Л. Б. Гайковая, А. В. Светликов, Т. X. Гамзатов // Мед. иммунология. -.2004. -Х-6,.№.3/5. - С. 399..

9. Гитель, Е. П. Роль интерлейкинов в патогенезе атеросклероза / Е. П. Гитель, Д. Е. Гусев, Е. Г. Пономарь // Клиническая медицина. — 2006, № 6. — С. 10-15.

10. Гусев, Е. Ю. Системное воспаление с позиции теории типового патологического процесса / Е. Ю. Гусев, В. А. Черешнев, Л. Н. Юрченко // Цитокины и воспаление. - 2007. - № 4. - С. 9-21.

11. Диагностика и коррекция нарушений липидного обмена с целью профилактики и лечения атеросклероза. Российские рекомендации. IV пересмотр [Электронный ресурс] / Комитет экспертов Всероссийского научного общества кардиологов (ВНОК). - М., 2009. - Режим доступа: http://www.solvay-pharma.ru/fi1es/articles/10046/ 1257496922390.pdf.] (Дата обращения: 20.10.2010).

12. Душкин, М. И. Интеграция сигнальных путей регуляции липидного обмена и воспалительного ответа / М. И. Душкин, Е. Н. Кудимова, Я. Ш. Шварц // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т. 6, № 2. - С. 12-18.

13. Душкин, М. И. Макрофаги и атеросклероз: патофизиологические и терапевтические аспекты / М. И. Душкин // Бюл. СО РАМН. - 2006. — № 2 (120).-С. 47-55.

14. Запорожец, Т. С. Клеточные и молекулярные механизмы им-муномодулирующего действия биополимеров морских гидробионтов : дис. ... докт. мед. наук : 14.00.36 / Запорожец, Татьяна Станиславовна; [НИИ эпидемиол. и микробиол Сиб. отд. РАМН; Тихоокеан. ин-т биоорганич. химии Дальневост. отд. РАН]. - Владивосток, 2006. - 355 с.

15. Земсков, A. M. Иммунные нарушения и их коррекция у оперированных больных облитерирующим атеросклерозом / А. М. Земсков, В. Г. Самодай // Хирургия. - 2006. - № 6. - С. 38-41.

16. Иммуностимулирующая и антикоагулянтная активность фукоидана из бурой водоросли Охотского моря Fucus evanescens / T. А. Кузнецова,..Т. С. Запорожец, Н. ~Н. Беседнова [и др.] // Антибиотики и химиотерапия. - 2003. - Т. 48, № 4. - С. 11-13.

17. Казанцев, А. В. Диагностика прогрессирующего течения облитерирующего атеросклероза бедренно-подколенно-берцовой локализации / А. В. Казанцев, Е. А. Корымасов // Фундаментальные исследования. — 2011. — № 1. - С. 62-67.

18. Кетлинский, С. А. Цитокины / С. А. Кетлинский, А. С. Симбирцев. - СПб. : Фолиант, 2008. - 552 с.

19. Козлов, В. А. Вакцины против атеросклероза: состояние проблемы и перспективы её развития / В. А. Козлов, М. И. Душкин, Е. И. Верещагин // Цитокины и воспаление. - 2008. - Т. 7, № 1 . - С. 8-14.

20. Кошкин, В. М. Облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей: недостатки и перспективы консервативного лечения / В. М. Кошкин // Клиническая фармакология и терапия. - 2005. - № 14. - С. 72-75.

21. Кошкин, В. М. Стратегия и тактика консервативной терапии больных хроническими облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей / В. М. Кошкин, Ю. М. Стойко // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2005. - Т. 11, № 1.-С. 132-135.

22. Крылов, В. Б. Синтез низкомолекулярных углеводных миметиков гепарина / В. Б. Крылов, H. Е Устюжанина, Н. Э. Нифантьев // Биоорганическая химия. - 2011. - Т. 37, № 6. - С. 745-779.

23. Кузнецова, Т. А. Коррекция нарушений иммунитета и гемостаза биополимерами из морских гидробионтов (экспериментальные и клинические аспекты) : дис. ... докт. мед. наук : 14.00.36 / Кузнецова Татьяна Алексеевна;

[ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН]. - Владивосток, 2009. - 296 с.

24. Кузник, Б. И. Клеточные и молекулярные механизмы регуляции системы гемостаза в норме и патологии / Б. И. Кузник. - Чита : Экспресс-издательство, 2010. - 828 с.

25. Куликова, А. Н. Облитерирующий атеросклероз артерий нижних конечностей на фоне сахарного диабета II типа (этиопатогенез, клиника, диагностика, хирургическое и медикаментозное лечение, профилактика) : автореф. дис. ... докт. мед. наук : 14.00.27 / Куликова Алла Николаевна ; ГОУ ВПО «Саратовский гос. мед. университет Фед. агенства по здравоохранению и соцразвитию». - Саратов, 2013. - 39 с.

26. Лапу нова, Л. Л. Иммунологические изменения при некоторых заболеваниях сердечно-сосудистой системы / Л. Л. Лапунова // Медицинские новости. - 1996. - № 11. - С. 3-8.

27. Лебедев, К. А. Иммунология в клинической практике / К. А. Лебедев, И. Д. Понякина. - М. : Наука, 1998. - 388 с.

28. Лисенков, А. Н. Математические методы планирования многофакторных медико-биологических экспериментов / А. Н. Лисенков. — М. : Медицина, 1979.-314 с.

29. Лутай, М. И. Ангиопротекторное, противоатеросклеротическое действие ингибиторов ангиотензинпревращающего фермента / М. И. Лутай // Украинский кардиологический журн. - 2002. - № 6. - С. 6.

30. Лутай, М. И. Атеросклероз: современный взгляд па патогенез / М. И. Лутай // Украинский кардиологический журн. — 2004. - № 1. — С. 22-34.

31. Макаров, И. В. Клинико-экспериментальное обоснование применения гравитационной терапии в комплексном лечении больных с облитерирующими заболеваниями артерий нижних конечностей : дис. ... докт. мед. наук : 14.00.27 / Макаров Игорь Валерьевич ; [Самарского гос. мед. унта]. - Самара, 2004. - С. 21-39.

32. Методология изучения системного воспаления / Е. Ю. Гусев, Л. Н. Юрченко, В. А. Черешнев, Н. В. Зотова // Цитокины и воспаление. - 2008. - Т. 7, № 1. - С. 15-25.

33. Молекулы адгезии бУСАМ-1 и 81САМ-1 и атеросклероз у мужчин / Д. Е. Гусев, Е. М. Пальцева, Б. Г. Потиевский [и др.] // Кардиология и -сердечногсосудистая хирургия. - 2010. - № 2. - С. 33-35.

34. Молекулы адгезии бУСАМ-1 и б1САМ-1 при различных формах ишемической болезни сердца / Д. Е. Гусев, Е. М. Пальцева, Б. Г. Потиевский [и др.] // Кардиология и сердечно-сосудистая хирургия. - 2009. - № 2. - С. 1114.

35. Нагорнев, В. А. Атерогенез как отражение развития иммунного воспаления в сосудистой стенке / В. А. Нагорнев, О. А. Яковлева, С. В. Мальцева // Вести. РАМН. - 2000. - № 10. - С. 45-50.

36. Нагорнев, В. А. Аутоиммунные и воспалительные механизмы развития атеросклероза / В. А. Нагорнев, С. В. Мальцева // Архив патологии. -2005.-№5.-С. 6-15.

37. Нагорнев, В. А. Современные представления о патогенезе атеросклероза. / В. А. Нагорнев, А. Н. Восканьянц // Вестн. РАМН. - 2006. - № 9-10.-С. 66-74.

38. Никитин, Ю. П. Новые фундаментальные и прикладные основы атерогенеза / Ю. П. Никитин // Бюл. СО РАМН. - 2006. - № 2. - С. 6-14.

39. Панин, Л. Е. Обмен липопротеинов и атеросклероз / Л. Е. Панин // Бюл. СО РАМН. - 2006. - № 2. - С. 16-22.

40. Парахонский, А.П. Индукция и регуляция апоптоза в атерогенезе / А.П.Парахонский // Фундаментальные исследования. — 2006. - № 3 - стр. 6768.

41. Парфенова, Е. В. Терапевтический ангиогенез: достижения, проблемы, перспективы / Е. В. Парфенова, В. А. Ткачу к // Кардиологический вестник. - 2007. - Т. 2, № 2. - С. 5-15.

42. Пат. № 2335771 РФ, МПК G01N. Способ диагностики и прогноза системного воспаления с верификацией фаз и стадий / Гусев Е. Ю., Юрченко JI. Н., Черешнев В. А., Зотова Н. В., Копалова Ю. А.; заявитель и патентообладатель Институт иммунологии и физиологии УрО РАН (RU). - № 2006124894; заявл. 11.07.2006; опубл. 10.10.2008, Бюл. № 28. - 56 с.

43______Патофизиологические феномены необратимой ишемии нижних

конечностей / JL Н. Юрченко, В. В. Кузьмин, Е. Ю. Гусев [и др.] // Клинич. анестезиология и реаниматология. - 2008. - № 4. - С. 24-28.

44. Пигаревский, П. В. Морфометрическое исследование клеток иммунорегуляторного и эффекторного звеньев иммунитета в аорте и парааортальных лимфатических узлов при атерогенезе у человека / П. В. Пигаревский // Цитокины и воспаление. - 2002. - Т. 1, № 4. - С. 21-26.

45. Прогнозирование фибрилляции предсердий по содержанию сывороточных маркеров воспаления при артериальной гипертензии / JI. М. Василец, А. В. Агафонов, О. В. Хлынова [и др.] // Казанский мед. журн. -2012. - Т. 93, № 4. - С. 642-646.

46. Противотромботическая и геморрагическая активности фукоидана, выделенного из водоросли Fucus evanescen / H. H. Дрозд, H. T. Мифтахова, E. Ю. Савчик [и др.] // Эксперимент, клин, фармакология. - 2011. — Вып.74, № 5. - С. 26-30.

47. Роль нейтрофилов в воспалительной реакции при ишемической болезни сердца / А. Е. Филиппов, А. В. Чечеткин, В. А. Данильченко [и др.] // Лабораторная диагностика. - 2004. - № 1.-С. 11-13.

48. Роль нейтрофилов в деструкции сосудистого эндотелия при операциях реваскуляризации миокарда в условиях искусственного кровообращения / В. В. Новицкий, С. П. Чумакова, О. И. Уразова [и др.] // Бюл. Сиб. медицины. - 2005. - № 4. - С. 49-53.

49. Серик, С. А. Про- и противовоспалительные цитокины у больных с ишемической болезнью сердца при прогрессировании хронической сердечной

недостаточности [Электронный ресурс] / С. А. Серик, С. В. Степанова, В. И.

139

Волков // Украинский кардиологический журнал. - 2004. - № 4. - С. 18-21. -Режим доступа: http://www.rql.kiev.ua/cardio_j /2004/4/serik.htm (дата обращения 10.03.2011).

50. Сульфатированные полисахариды как ингибиторы рецепторной активности Р-селектина и Р-селектинзависимого воспаления / А. В. Семенов, А. В. Мазуров, М. Е. Преображенская [и др.] // Вопр. мед. хим. - 1999. — Т. 44, Вып. 2.-С. 135-143.

51. Факторы риска системы гемостаза при заболеваниях аорты, магистральных и периферических сосудов : метод, пособие / А. JI. Мелкумян, К. М. Морозов, Н. Н. Самсонова, Е. Г. Тутов; НЦССХ им. А. Н. Бакулева РАМН. - М., 2001.-36 с.

52. Фенотипическая характеристика лимфоцитов периферической крови при коронарном и мультифокальном атеросклерозе / А. С. Гольдерова, И. Н. Николаева, А. Н. Романова, В. А. Козлов [и др.] // Бюлл. Сиб. отделения РАМН. - 2011. - Том 31, N 3. - С. 27-32.

53. Филиппов, А. Е. Сосудистые молекулы адгезии (VCAM-1) как маркеры активности коронарного атеросклероза. Фундаментальные и прикладные исследования в области атеросклероза / А. Е. Филиппов, Т. А. Шацева, А. С. Свистов // Мед. акад. журн. - 2006. - Т. 7, № 1, прил. - С. 23-29.

54. Филонова, Н. В. Иммуно-патогенетическая характеристика эффективности применения полисахаридов из бурых водорослей Тихого океана в комплексе с базисной терапией у пациентов с хроническим вирусным гепатитом С : автореф. дис. ... канд. мед. наук : 14.03.09 / Филонова Наталья Владимировна; [ФГБУ «НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН»]. -Владивосток : Б. и., 2012. - 22 с. : ил.

55. Хаитов, Р. М. Экологическая иммунология / Р. М. Хаитов, Б. В. Пинегин, X. И. Истамов. -М. : ВНИРО, 1995. - 218 с.

56. Хроническое системное воспаление как типовой патологический процесс / Е. Ю. Гусев, JI. Н. Юрченко, В. А. Черешнев [и др.] // Цитокины и воспаление.-2008.-№4.-С. 3-10.

57. Швальб, П. Г. К вопросу о системной воспалительной реакции у больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей при различных методах оперативного лечения [Электронный ресурс] / П. Г. Швальб, Р. Е. Калинин, А. А. Никифоров // Науч.-мед. вестн. Центрального Черноземья. - 2007. — № 30. - С. 122-125. - Режим доступа: http://www.vsma.ac.ru/publ/vest/030/site/index39.html (дата обращения 20.09.2010).

58. Шевченко, Н. М. Строение, биологическая активность полисахаридов некоторых бурых водорослей и продуктов их ферментативной трансформации : дис. ... канд. хим. наук : 02.00.10 / Шевченко Наталья Михайловна; [Тихоокеан. ин-т биоорган, химии ДВО РАН]. - Владивосток, 2001.-296 с. : ил.

59. Ширинский, И. В. Механизмы действия статинов, их эффективность и безопасность у больных аутоиммунными заболеваниями : автореф. дис. ... докт. мед. наук : 14.00.36 / Ширинский Иван Валерьевич ; [НИИ клинической иммунологии СО РАМН]. - Новосибирск, 2009. — 20 с.

60. Шунтов, В. П. Биология Дальневосточных морей России. Т. 1 / В. П. Шунтов. — Владивосток : ТИНРО-центр, 2001. — 579 с.

61. Щупакова, А. Н. Оценка взаимосвязи иммунного статуса и холестеринового профиля у пациентов с облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей / А. Н. Щупакова, В. В. Лагутчев // Вестник ВГМУ. - 2011. - Т. 10, № 1.-С. 69-76.

62. Ярилин, А. А. Апоптоз: природа феномена и его роль в норме и при патологии: избранные лекции / А. А. Ярилин // Актуальные проблемы патофизиологии / под ред. Б. Б. Мороза. -М. : Медицина, 2001. - С. 13-56.

63. A comparative study of the anti-inflammatory, anticoagulant, antiangiogenic, and antiadhesive activities of nine different fucoidans from brown seaweeds / A. Cumashi, N. A. Ushakova, M. E. Preobrazhenskaya [et al.] // Glycobiology. - 2007. - Vol. 17, № 5. - P. 541-552.

64. A quantitative method to detect fucoidan in human plasma using a novel antibody / M. R. Irhimeh, J. H. Fitton, R. M. Lowenthal, P. Kongtawelert // Methods Find. Exp. Clin. Pharmacol. - 2005. - Vol. 27, № 10. - P. 705-711.

65. A role for interleukin 4 in production of matrix metalloproteinase 1 by human aortic smooth muscle cells / T. Sasaguri, N. Arima, A. Tanimoto [et al.] // Atherosclerosis.-1998.-Vol. 13 8, №2.-P. 247-253. . ... .....

66. A sulfated polysaccharide, fucans, isolated from brown algae Sargassum vulgare with anticoagulant, antithrombotic, antioxidant and antiinflammatory effects / C. M. Dore, A. M. G. Faustino, L. S. Will [et al.] // Carbohydr. Polym. - 2013. - Vol. 2, № 91 (1). - P. 467-475.

67. Accumulation of plasma cells in atherosclerotic lesions of Watanabe heritable hyperlipidemic rabbits / Y. Sohma, H. Sasano, R. Shiga [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1995. - Vol. 92, № 11. - P. 4937-4941.

68. Activation of arterial wall dendritic cells and breakdown of self-tolerance in giant cell arteritis / W. Ma-Krupa, M. S. Jeon, S. Spoerl [et al.] // J. Exp. Med. - 2004. - Vol. 199, №2.-P. 173-183.

69. Acute T-cell activation is detectable in unstable angina / G. G. Neri Serneri, D. Prisco, F. Martini [et al.] // Circulation. - 1997. - Vol. 95, № 7. - P. 1806-1812.

70. Adhesion molecules and cardiovascular risk in peripheral arterial disease. Soluble vascular cell adhesion molecule-1 improves risk stratification / A. Silvestro, G. Brevetti, V. Schiano [et al.] // Thromb. Haemost. - 2005. - Vol. 93, № 3.-P. 559-563.

71. Affinity of low molecular weight fucoidan for P-selectin triggers its binding to activated human platelets / L. Bachelet, I. Bertholon, D. Lavigne [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. - 2009. - Vol. 1790, №2.-P. 141-146.

72. An inflammatory pathway of IFN-y production in coronary atherosclerosis / H. Ranjbaran, S. Sokol, A. Gallo [et al.] // J. Immunol. - 2007. -Vol. 178, № l.-P. 592-604.

73. An overview of inflammatory cytokines cascade in chronic heart failure / J. T. Parissis, S. Adamopoulos, S. M. Karas [et al.] // Hellenic. J. Cardiology. -2002.-№43.-P. 18-28.

74. Andersson, J. Adaptive immunity and atherosclerosis / J. Andersson, P. Libby, G. K. Hansson // Clinical. Immunology. - 2010. - Vol. 134, № 1. - P. 33-46.

75. Anti-inflamantory drugs in experimental . . atherosclerosis. 7. Spontaneous atherosclerosis in WHHL rabbits and inhibitions by cortisone acetate / A. N. Maklieja, S. Bloom, R. Muesing [et al.] // Atherosclerosis. - 1989. - Vol. 76, №2-3.-P. 155-161.

76. Anti-inflammatory effect of fucoidan extracted from Ecklonia cava in zebrafish model / S. H. Lee, C. I. Ko, Y. Jee [et al.] // Carbohydr. Polym. - 2013. -Vol. 30, №92(1).-P. 84-89.

77. Anti-inflammatory effects of fucoidan through inhibition of NF-kB, MAPK and Akt activation in lipopolysaccharide-induced BV2 microglia cells / H. Y. Park, M. H. Han, C. Park [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2011. - Vol. 49, № 8. -P. 174578. Antitumor and antimetastatic activity of fucoidan, a sulfated

polysaccharide isolated from the Okhotsk sea Fucus evanescens brown alga / T. V. Alekseyenko, S. Y. Zhanayeva, A. A. Venediktova [et al.] // Bull. Exp. Biol. Med. -2007. - Vol. 143, № 6. - P.730-732.

79. Aschoff, L. Atherosclerosis : in lectures on pathology / L. Aschoff. -NY. rHoeber, 1924.-P. 131-153.

80. Association of soluable cell adhession molecules with Ancle-brachial index in a biethnic cohort of predominantly hypertensive individuals Mahyar Khaleghi / A. Zeenat, H. M. Thomas, Jr. Stephen [et al.] // Clin. Chem. - 2008. -Vol. 54, № 11.-P. 1788-1795.

81. Aviezer, D. Differential structural requirement of heparin and heparan sulfate proteoglycans that promote binding of basic fibroblast growth factor to its receptor / D. Aviezer, E. Levy, M. Safran [et al.] // J. Biol. Chem. - 1994. - Vol. 269, № l.-P. 114-121.

82. B cell depletion reduces the development of atherosclerosis in mice / H. Ait-Oufella, O. Herbin, J.-D. Bouaziz [et al.] // J. Exp. Med. - 2010. - Vol. 207, № 8.-P. 1579-1587.

83. Barks, J. L. TNF-alpha and IL-4 synergistically increase vascular cell adhesion molecule-1 expression in cultured vascular smooth muscle cells / J. L. Barks, J. J. McQuillan, M. F. Iademarco // J.. Immunol.,,- Vol. 159, № 9. - P. 45324538.

84. Benditt, E. P. The origin of atherosclerosis / E. P. Benditt // Sci. Am. -1977.-№236.-P. 74-85.

85. Berteau, O. Sulfated fucans, fresh perspectives: structures, functions, and biological priperties of sulfated fucans and overview of enzymes active toward this class of polysaccharide / O. Berteau, B. Mulloy // Glycobiology. - 2003. - Vol. 13, №6.-P. 29-40.

86. Bevilacqua, M. P. Interleukin 1 acts on cultured human vascular endothelium to increase the adhesion of polymorphonuclear leukocytes, monocytes and related leukocytes cell lines / M. P. Bevilacqua, J. S. Pober // J. Clin. Invest. — 1989.-Vol. 76, №5.-P. 2003-2011.

87. Bifunctional effects of fucoidan on the expression of inducible Nitric oxide synthase / J. W. Yang, S. Y. Yoon, S. J. Oh [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2006. - Vol. 346, № 1. - P. 345-350.

88. Biological effects of fucoidan isolated from Fiicus vesiculosis on thrombosis and vascular cells / K. W. Kwak, K. S. Cho, O. J. Hahn [et al.] // Korean J. Hematol.-2010.-Vol. 45, № l.-P. 51-57.

89. Bjorkbacka, H. Multiple roles of toll-like receptor signaling in atherosclerosis / H. Bjorkbacka // Curr. Opin. Lipidol. - 2006. - Vol. 17, № 5. - P. 527-533.

90. Blann, A. Soluble L-selectin in peripheral arterial disease: relationship with soluble E-selectin and soluble P-selectin / A. Blann, J. Morris, C. McCollum // Atherosclerosis. - 1996. - Vol. 126, № 2. - P. 227-331.

91. Blockade of Interleukin-12 function by protein vaccination attenuates atherosclerosis / A. D. Hauer, C. Uyttenhove, P. de Vos [et al.] // Circulation. -2005.-Vol. 112, №7. -P. 1054-1062.

92. Bobryshev, Y. V. Dendritic cells and their role in atherogenesis / Y. V. Bobryshev // Lab. Invest. - 2010. - Vol. 90, № 7. - P. 970-984.

93. Bobryshev, Y. V. Dendritic.cells in atherosclerosis: „current status of the problem and clinical relevance / Y. V. Bobryshev // Eur. Heart J. — 2005. — Vol. 26, № 17.-P. 1700-1704.

94. Botanical Drug Products : guidance for industry [Электронный ресурс] / US Department Health Human Services, FDA; Center Drug Evaluation Research (CDER). - 2004. 52 p. Режим доступа: http://www.fda.gov/cder/guidance/index.htm (дата обращения 20.05.2011).

95. Brevetti, G. Cellular adhesion molecules and peripheral arterial disease / G. Brevetti, V. Schiano, M. Chiariello // Vascular. Med. - 2006. - Vol. 11, № 1. -P. 39-47.

96. Cardioprotective activity of Cladosiphon okamuranus fucoidan against isoproterenol induced myocardial infarction in rats / P. Thomes, M. Rajendran, B. Pasanban, R. Rengasamy // Phytomedicine. - 2010. - Vol. 18, № 1. - P. 52-57.

97. CD8+ T lymphocytes regulate the arteriogenic response to ischemia by in!ltrating the site of collateral vessel development and recruiting CD4+ mononuclear cells through the expression of interleukin-16 / E. Stabile, T. Kinnaird, A. la Sala [et al.]// Circulation.-2006.- Vol.3.- P. 118-124.

98. CDllc(+) dendritic cells maintain antigen processing, presentation capabilities, and CD4(+) T-cell priming efficacy under hypercholesterolemic conditions associated with atherosclerosis / R. R. Packard, E. Maganto-Garcia, I. Gotsman [et al.] // Circ. Res. - 2008. - Vol. 103, № 9. - P. 965-973.

99. CDld-dependedent activation of NKT cells aggravates atherosclerosis / E. Tupin, A. Nicoletti, R. Ethage [et al.] // J. Exp. Med. - 2004. - Vol. 199, № 3. -P. 417-422.

100. Cerivastatin reduces cytokine - induced surface expression of ICAM-1 via increased shedding in human endothelial cells / M. Landsberger, B. Wolff, F. Jantzen [et al.] // Atherosclerosis. - 2007. - Vol. 190, № 1. - P. 43-52.

101. Changes in serum interleukin-8 and interleukin-12 levels in patients with ischemic heart disease in a Chinese population / R. H. Zhou, Q. Shi, H. Q. Gao, B. J. Shen // J. Atheroscler. Thromb. - 2001. - Vol. 8, № 1. - P. 30-32.

102. Chen, D. Sulfated polysaccharides and immune response: promoter or inhibitor? / D. Chen, X. Z. Wu, Z. Y. Wen // Panminerva Med. - 2008. - Vol. 50, № 2.-P. 177-183.

103. Cholesterol-lowering properties and safety of chitosan / R. Ylitalo, S. Lehtinen, E. Wuolijoki [et al.] // Drug Res. - 2002. - Vol. 52, № 1. - P. 1-7.

104. Circulating adhesion molecules VCAM-1, ICAM-1, and E-selectin in carotid atherosclerosis and incident coronary heart disease cases: the atherosclerosis risk in communities (ARIC) study / S. J. Hwang, C. M. Ballantyne, A. R. Sharrett [et al.] // Circulation. - 1997. - Vol. 96, № 12. - P. 4219-4225.

105. Circulating blood markers and functional impairment in peripheral arterial disease / M. M. McDermott, K. Liu, L. Ferrucci [et al.] // J. Am. Gere. Society. - 2008. - Vol. 56, № 8.-P. 1504-1510.

106. Circulating soluble adhesion molecules ICAM-1 and VCAM-1 and incident coronary heart disease: the PRIME Study / G. Luc, D. Arveiler, A. Evans [etal.]//Atherosclerosis.-2003.-Vol. 170, № l.-P. 169-176.

107. Circulating vascular cell adhesion molecule-1 correlates with the extent of human atherosclerosis in contrast to circulating intercellular adhesion molecule-1, E-selectin, P-selectin, and thrombomodulin / K. Peter, P. Nawroth, C. Conradt [et al.] // Arterioscler Thromb. Vase. Biol. - 1997. - Vol. 17, № 3. - P. 505-512.

108. Collagen synthesis by vascular smooth muscle cells in the presence of antiproliferative polysaccharides / D. Logeart, D. Letoumeur, J. Joze-fonvicz, P. Kern [et al.] //J. Biomed. Mater. Res. - 1996. - Vol. 30, № 4. - P. 501-508.

109. Correction by sodium nucleinate of immunologic disorders in patients with atherosclerotic lesions of the arteries of the lower limbs / M. V. Danilenko, V. M. Zemskov, A. N. Chugunov[et al.] // Khirurgiia (Mosk). - 1991. - № 4. - P. 108111.

110. C-reactive protein, interleukin-6, and soluble adhesion molecules as predictors..of ^progressive, peripheral »atherosclerosis in the general population: Edinburgh Artery Study / I. Tzoulaki, G. D. Murray, A. J. Lee [et al.] // Circulation. - 2005. - Vol. 112, № 7. - P. 976-983.

111. Cui, Y. Q. Fucoidan: advances in the study of it's antiinflammatory and antioxidative effects / Y. Q. Cui, D. Z. Luo, X. M. Wang // Yao Xue Xue Bao. -2008.-Vol. 43, № 12.-P. 1186-1189.

112. Curtiss, L. K. Emerging role of Toll-like receptors in athero-sclerosis / L. K. Curtiss, P. S. J. Tobias // J. Lipid Res. - 2009. - № 50. - P. 340-345.

113. Cytokines and cytokine receptors in advanced heart failure: an analysis of the cytokine database from the vesnarinone trial (VEST) / Deswal A., Petersen N.J., Feldman A.M. [et al.] // Circulation. - 2001. - Vol. 103, № 16. - P. 20552059.

114. Daugherty, A. T lymphocytes in atherosclerosis: the Yin-Yang of Thl and Th2 influence on lesion formation / A. Daugherty, L. Debra // Circ. Res. - 2002. -Vol. 90, № 10.-P. 1039-1040.

115. Davignon, J. Role of endothelial dysfunction in atherosclerosis / J. Davignon , P. Ganz // Circulation. -2004.- Vol.109.- P.III27-III32.

116. Mayranpaa, M.T. Desquamation of human coronary artery endothelium by human mast cell proteases: implications for plaque erosion / M.I Mayranpaa, H.M. Heikkila, K.A Lindstedt et al. // Coronary Artery Disease. — 2006. — Vol. 17. —P. 611-621.

117. Delvaeye, M. Coagulation and innate immune responses: can we view them separately? / M. Delvaeye, E. M. Conway // Blood. - 2009. - Vol. 114, № 12. -P. 2367-2374.

118. Determination of alginic sodium diester orally disintegrating tablets / L. J. Ren, F. Su, T. Zhang, L. Yu // Chin. J. Pharm. - 2008. - № 39. - P. 853-854.

119. Development of a fucoidan-specific antibody and measurement of fucoidan in serum and urine by sandwich ELISA / Y. Tokita, K. Nakajima, H. Mochida [et al.] // Biosci. Biotechnol. Biochem. - 2010. - Vol. 74, № 2. - P. 350........ 357...............

120. Disruption of TGF-beta signaling in T cells accelerates atherosclerosis / A. K. Robertson, M. Rudling, X. Zhou [et al.] // J. Clin. Invest. - 2003. - Vol. 112, №9.-P. 1342-1350.

121. Effect of atorvastatin and Clopidogrel on cellular immune function / K. Kröger, M. Lindemann, E. Kreuzfelder [et al.] // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids.-2003.-Vol. 68, №3.-P. 251-255.

122. Elevated soluble CD40 ligand is related to the endothelial adhesion molecules in patients with acute coronary syndrome / D. Q. Peng, S. P. Zhao, Y. F. Li [et al.]//Clin. Chim. Acta. - 2002. - Vol. 319, № l.-P. 19-26.

123. Elevation of serum levels of the anti-inflammatory cytokine inter-leukin-10 and decreased risk of coronary events in patients with unstable angina / I. Anguera, F. Miranda-Guardiola, X. Bosch [et al.] // Am. Heart J. - 2002. - Vol. 144, №5.-P. 811-817.

124. Emergence of dendritic cells in rupture-prone regions of vulnerable carotid plaques / A. Yilmaz, M. Lochno, F. Traeg [et al.] // Atherosclerosis. - 2004. -Vol. 176,№ l.-P. 101-110.

125. Endothelial dysfunction and cardiovascular risk prediction in peripheral arterial disease: additive value of flow-mediated dilation to ankle-brachial pressure index / G. Brevetti, A. Silvestro, V. Schiano, M. Chiariello // Circulation. -2003. - Vol. 108, № 17. - P. 2093-2098.

126. Evaluation of serum levels of solubilized adhesion molecules and cytokine receptors in coronary heart disease / M. Porsch-Oezcuememez, D. Kunz, LI. U. Kloer, C. Luley // J. Am. Coll. Cardiol. - 1999. - Vol. 34, № 7. - P. 19952001.

127. Exogenous interferon-y enhances atherosclerosis in apolipoprotein E-/- mice / S. C. Whitman, P. Ravisankar, H. Elam, A. Daugherty // Am. J. Pathol. -2000.-Vol. 157, № 6.-P. 1819-1824.

128. Expansion of circulating Toll-like receptor 4-positive monocytes in patients with acute coronary syndrome / H. Methe, J. O. Kim, S. Kofler [et al.] // Circulation. - 2005. - Vol. 111, № 20. - P. 2654-2661.

129. Expression of activation antigens on lymphocyte surface and circulating plateletleukocyte aggregates in ischaemic heart disease / A. Czyz, E. Kolacz, D. Angerer [et al.] // Kardiol. Pol. - 2005. - Vol. 62, № 3. - P. 189-200.

130. Expression of Toll-like receptors in human atherosclerotic lesions: a possible pathway for plaque activation / K. Edfeldt, J. Swedenborg, G. K. Hansson, Z. Q. Yan//Circulation. - 2002. - Vol. 105, № 10.-P. 1158-1161.

131. Expression of Toll-like receptors on human platelets / R. Shiraki, N. Inoue, S. Kawasaki [et al.] // Thromb. Res. - 2004. - Vol. 113, № 6. - P. 379-385.

132. Fonseca, R. J. Effects of polysaccharides enriched in 2,4-disulfated fucose units on coagulation, thrombosis and bleeding. Practical and conceptual implications / R. J. Fonseca, G. R. Santos, P. A. Mourao // Thromb. Haemost. -2009. - Vol. 102, № 5. - P. 829-836.

133. Frantz, S. Mechanisms of disease: Toll-like receptors in cardiovascular disease / S. Frantz, G. Ertl, J. Bauersachs // Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. - 2007. - Vol. 4, № 8. - P. 444-454.

134. Frostegard, J. Autoimmunity, oxidized LDL and corticovascular disease / J. Frostegard // Autoimmun. Rev. 2001. - Vol. 1, № 4. - P. 233-237.

135. Fucan inhibits Chinese hamster ovary cell (CHO) adhesion to fibronectin by binding to the extracellular matrix / H. A. Rocha, C. R. Franco, E. S. Trindade [et al.] // Planta Med. - 2005. - Vol. 71, № 7. - P. 628-633.

136. Fucans, sulfated polysaccharides extracted from brown seaweeds,

inhibit vascular smooth muscle cell proliferation. II. Degradation and molecular

weight effect / D. Logeart, S. Prigent-Richard, C. Boisson-Vidal [et al.] // Eur. J.

Cell Biol. - 1997. - Vol. 74, № 4. - P. 385-390.

149

137. Fucans, sulfated polysaccharides extracted from brown seaweeds, inhibit vascular smooth muscle cell proliferation. I. Comparison with heparin for antiproliferative activity, binding and internalization / D. Logeart, S. Prigent-Richard, C. Boisson-Vidal [et al.] // Eur. J. Cell Biol. - 1997. - Vol. 74, № 4. - P. 376-384.

.138. Fucoidan a sulfated polysaccharide from brown algae is a potent modulator of connective tissue proteolysis / K. Senni, F. Gueniche, A. Foucault-Bertaud [et al.] // Arch. Biochem. Biophys. - 2006. - Vol. 445, № 1. - P. 56-64.

139. Fucoidan inhibits smooth muscle cell proliferation and reduces mitogen-activated protein kinase activity / P. Religa, M. Kazi, J. Thyberg [et al.] // Eur. J. Vase. Endovasc. Surg. - 2000. - Vol. 20, № 5. - P. 419-426.

140. Fucoidan, a sulfated polysaccharide from brown algae, against myocardial ischemia-reperfusion injury in rats via regulating the inflammation response / C. Li, Y Gao, Y Xing [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2011. - Vol. 49, №9.-P. 2090-2095.

141. , Fucoidan: advances in the study of its antiinflammatory and antioxidative effects / Y. Q. Cui, D. Z. Luo, X. M. Wang // Acta Pharmaceutica Sinica.-2008.-Vol. 43, № 12.-P. 1186-1189.

142. Gearing, A. J. H. Circulating adhesion molecules in disease / A. J. H. Gearing // Immunol. Today. - 1993. - Vol. 14, №» 10. - P. 506-511.

143. Girn, I I. R. An overview of cytokine interactions in atherosclerosis and implications for peripheral arterial disease / H. R. Girn, N. M. Orsi, S. Iiomer-Vanniasinkam // Vase. Med. - 2007. - Vol. 12, № 4. - P. 299-309.

144. Goldstein, J. L. Atherosclerosis: the lowdensity lipoprotein receptor hypothesis / J. L. Goldstein, M. S. Brown // Metabolism. - 1977. - Vol. 26, № 11. -P. 1257-1275.

145. Gordon, S. Monocyte and macrophage heterogeneity / S. Gordon, P. R. Taylor // Nat. Rev. Immunol. - 2005. - Vol. 5, № 12. - P. 953-964.

146. Gordon, S. Pattern recognition receptors: doubling up for the innate

immune response / S. Gordon // Cell. - 2002. - Vol. 111, № 7. - P. 927-930.

150

147. Grainger, D. J. Transforming growth factor beta and atherosclerosis: so far, so good for the protective cytokine hypothesis / Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2004. - Vol. 24. № 3. - P. 399-404.

148. Guan, H. S. Study on the new drug Polysaccharide sulfate sodium / H. S. Guan // Med. Res. - 1999. - № 28. - P. 8-9.

149. Han, L-K. Anti-obesity effects of fucoidan prepared from Cladosiphon .. -Okamuranus tokida (Okinawamozuku) / L-K. Han, G. Kensaku, O. Hiromichi // Japan. J. Constitution. Med. - 2004. - Vol. 66, № 1-2. - P. 55-60.

150. Hansson, G. K. Accumulation of IgG and complement factor C3 in human arterial endothelium and atherosclerotic lesions / G. K. Hansson, J. Holm, J. G. Krai // Acta Pathol. Microbiol. Immunol. Scand. A. - 1984. - Vol. 92, № 6. - P. 429-435.

151. Hansson, G. K. Inflammation and atherosclerosis / G. K. Hansson, A. L. Robertson, C. Soderberg-Naucler //Ann. Rev. Pathol. Mech. Dis. - 2006. - № 1. - P. 297-329.

152. Hansson, G. K. The immune response in atherosclerosis: a double-edged sword / G. K. Hansson, P. Libby // Nat. Rev. Immunol. - 2006. - Vol. 6, № 7.-P. 508-519.

153. Hansson, G. K. The immune system in atherosclerosis / G. K. Hansson, A. Hermansson // Nat. Immunol. - 2011. - Vol. 12, № 3. - P. 204-212.

154. Harvey, E. J. Interferon-gamma and atherosclerosis: pro- or antiatherogenic? / E. J. Harvey, D. P. Ramji // Cardiovasc. Res. - 2005. — Vol. 67, № l.-P. 11-20.

155. Hasdai, D. Increased serum concentration of interleukin 1(3 in patient with coronary artery disease / D. Hasdai, M. Scheinowitz // Heart. — 1996. — Vol. 76,№ l.-P. 24-28.

156. Harikrishnan, R. Immunomodulatory effect of sodium alginate enriched diet in kelp grouper Epinephelus brneus against Streptococcus iniae / R. Harikrishnan, M. Kim, J.Kim .// Fish Shellfish Immunol. -2011.- Vol. 30, № 2,-P.543-549.

157. Horkko, S. Immunological responses to oxidized LDL / S. Horkko, C. J. Binder, P. X. Shaw // Free Radic. Biol. Med. - 2000. - Vol. 28, № 12. - P. 1171 -1179.

158. Human atherosclerotic plaque alternative macrophages display low cholesterol handling but high phagocytosis because of distinct activities of the PPAR and LXRa pathways / G. Chinetti-Gbaguidi, M. Baron, M. A. Bouhlel [et al.] // Circ. Res. - 2011. - Vol. 108, № 8. - P. 985-995.

159. Hypercholesterolemia is associated with a T helper (Th) 1/Th2 switch of the autoimmune response in atherosclerotic apo E-knockout mice / X. H. Zhou, G. Paulsson, S. Stemme, G. K. Flansson // J. Clin. Invest. - 1998. - Vol. 101, № 8. -P. 1717-1725.

160. Hypolipidemic effect of fucoidan from Laminaria japonica in hyperlipidemic rats / L. Huang, K. Wen, X. Gao, Y. Liu // Pharm. Biol. - 2010. -Vol. 48, № 4. - P. 422-426.

161. Immune mechanisms in atherosclerosis / G. K. Hansson, L. Jonasson, P. S. Seifert, S. Stemme // Arteriosclerosis (Dallas, Tex.). - 1989. - Vol. 9, № 5. -P. 567-578.

162. Immunology of atherosclerosis. Demonstration of heat shock protein 60 expression and T lymphocytes bearing alpha/beta or gamma/delta re-ceptor in human atherosclerotic lesions / R. Kleindienst, Q. Xu, J. Willeit [et al.] // Am. J. Path.- 1993.-Vol. 142, №6.-P. 1927-1937.

163. Immunomodulation of atherosclerosis with a vaccine / P. K. Shah, K. Y. Chyu, G. N. Fredrikson, J. Nilsson // Nat. Clin. Pract. Cardiovasc. Med. - 2005. -Vol. 2, № 12.-P. 639-646.

164. Immunomodulatory function of murine NK cell activity by alginate / E.-W. Son, K. Yang, D. Rhee, S. Pyo //Archives of Pharmacal. Research . -2005.-Vol.28,№ 11.- P. 1282-1286.

165. In vitro antioxidant and in vivo antiinflammatory potential of crude polysaccharide from Turbinaria ornata (Marine Brown Alga) / S. Ananthi, H. R.

Raghavendran, A. G. Sunil [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2009. - Vol. 48, № 1. -P. 187-192.

166. Increased effect of fiacoidan on lipoprotein lipase secretion in adipocytes / T. Yokota, M. Nagashima, M. Ghazizadeh, O. Kawanami // Life. -2009.-Vol. 84, № 15-16.-P. 523-529.

167. Increased inflammatory status and. higher prevalence of threevessel coronary artery disease in patients with concomitant coronary and peripheral atherosclerosis / G. Brevetti, F. Piscione, A. Silvestro [et al.] // Thromb. Haemost. -2003.-Vol. 89, №6.-P. 1058-1063.

168. Increased soluble E-selectin levels in type 2 diabetic patients with peripheral arterial disease / M. S. Boulbou, G. N. Koukoulis, K. G. Vasiou [et al.] // Int. Angiol.-2004.-Vol. 23, № l.-P. 18-24.

169. Induction of interferon-gamma production in Thl CD4+ T cells: evidence for two distinct pathways for promoter activation / J. Yang, T. L. Murphy, W. Ouyang, K. M. Murphy // Eur. J. Immunol. - 1999. - Vol. 29, № 2. - P. 548555.

170. Induction of regulatory T cell type 1 response reduces the development of atherosclerosis in apolipoprotein E- knockout mice / Z. Mallat, A. Gojova, V. Brun [et al.] // Circulation. - 2003. - Vol. 108, № 10. - P. 1232-1237.

171. Inflammatory status and endothelial function in asymptomatic and symptomatic peripheral arterial disease / A. Silvestro, .F. Scopacasa, A. Ruocco [et al.] // Vase. Med. - 2003. - Vol. 8, № 4. - P. 225-232.

172. Inflammatory, haemostatic, and rheological markers for incident peripheral arterial disease: Edinburgh Artery Study / I. Tzoulaki, G. D. Murray, A. J. Lee [et al.] // Eur. Heart. J. - 2007. - Vol. 28, № 3. - P. 354-362.

173. Influence of interferon-gamma on the extent and phenotype of dietinduced atherosclerosis in the LDLR-deficient mouse / C. Buono, C. E. Come, G. Stavrakis [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2003. - Vol. 23, № 3. - P. 454-460.

174. Inhibition of lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory responses by Sargassum hemiphyllum sulfated polysaccharide extract in RAW 264.7 macrophage cells / P. A. Hwang, S. Y. Chien, Y. L. Chan [et al.] // J. Agric. Food Chern. - 2011. - Vol. 59, № 5. - P. 2062-2068.

175. Inhibitory effect of fucoidan on Nitric oxide production in lipopolysaccharide-activated primary ..microglia. L Y. Q. Cui, L. J.. Zhang, T. Zhang [et al.] // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. - 2009. - Vol. 16, № 4. - P. 422-428.

176. Inhibitory effects of fucoidan on activation of epidermal growth factor receptor and cell transformation in JB6 C141 cells / N. Y. Lee, S. P. Ermakova, T. N Zvyagintseva [et al.] // Food Chem. Toxicol. - 2008. - Vol. 46, № 5. - P. 17931800.

177. Innate and acquired immunity in atherogenesis / C. J. Binder, M. K. Chang, P. X. Shaw [et al.]//Nat. Med. - 2002.-Vol. 8,№ ll.-P. 1218-1226.

178. Innate and adaptive immunity in the pathogenesis of atherosclerosis / G. K Hansson, P. Libby, U. Schonbeck, Z. Q. Yan // Circ. Res. - 2002. - № 91. - P. 281-291.

179. Interleukin-1 receptor antagonist expression in human endothelial cells and atherosclerosis / R. Dewberry, H. Holden, D. Crossman, S. Francis // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2000. - Vol. 20, № 11. - P. 2394-2400.

180. Interleukin-17 producing CD4+ effector T cells develop via a lineage distinct from the T helper type 1 and 2 lineages / L. E. Harrington, R. D. Hatton, P. R. Mangan [et al.] // Nat. Immun. - 2005. - Vol. 6, № 11. - P. 1123-1132.

181. Interleukin-4 augments acetylated LDL-induced cholesterol esterification in macrophages / J. A. Cornicelli, D. Butteiger, D. L. Rateri [et al.] // J. Lipid. Res. - 2000. - Vol. 41, № 3. - P. 376-383.

182. Interleukin-6 exacerbates early atherosclerosis in mice / S. A. Huber, P. Sakkinen, D. Conze [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19, № 10.-P. 2364-2367.

183. Interleukin-8 as a sensitive marker of unstable coronary artery dis-ease / T. Kanda, Y. Hirao, S. Oshima [et al.] // Amer. J. Cardiol. - 1996. - Vol. 77, № 4. -P. 304-307.

184. Interleukins in atherosclerosis: molecular pathways and therapeutic potential / J. H. von der Thusen, J. Kuiper, T. J. van Berkel, E. A. Biessen // Pharmacol. Rev..-2003.v-.Vol.-55, №1. - P. -133-166.. -

185. Janet, H. Fitton therapies from Fucoidan: multifunctional marine polymers /H. Janet//Mar. Drugs. -2011. - Vol. 9, № 10. - P. 1731-1760.

186. Kearney, J. F. Immune recognition of OxLDL in atherosclerosis / J. F. Kearney//J. Clin, Invest.-2000.-Vol. 105,№ 12.-P. 1683-1685.

187. Kim, M. J. Inhibitory effects of fucoidan in 3T3-L1 adipocyte differentiation / M. J. Kim, U. J. Chang, J. S. Lee // Mar. Biotechnology. - 2009. -Vol. 11, №5.-P. 557-562.

188. Kinetic analysis of heparin and glucan sulfates binding to P-Selectin and its impact on the general understanding of selectin inhibition / D. Simonis, J. Fritzsche, S. Alban, G. Bendas // Biochemistry. - 2007. - Vol. 46, № 20. - P. 61566164.

189. Levels of expression of P-selectin, E-selectin, and intercellular adhesion molecule-1 in coronary atherectomy specimens from patients with stable and unstable angina pectoris / A. N. Tenaglia, A. J. Buda, R. G. Wilkins [et al.] // Am. J. Cardiol. - 1997. - Vol. 79, № 6. - 742-747.

190. Libby, P. Vascular endothelium and atherosclerosis /P.Libby, M.Aikawa , M.K.Jain // Handb. Exp. Pharmacol. - 2006. - Vol. 176 .- P. 285-306.

191. Libby, P. Inflammation in atherosclerosis / P. Libby // Nature. - 2002. — Vol. 420, № 6917. - P. 868-874.

192. Libby, P. Vascular endothelium and atherosclerosis / P.Libby, M. Aikawa, M.Jain // Handb Exp Pharmacol. - 2006.- Vol. 176.- P.285-306.

193. Ligand of scavenger receptor class A indirectly induces maturation of human blood dendritic cells via production of tumor necrosis factor / J.-O. Jin, H.Y. Park, Q.Xu [et al.]//Blood. - 2009. - Vol. 113, №23.-P. 5839-5847.

155

194. Long-term interleukin-6 levels and subsequent risk of coronary heart disease: two new prospective studies and a systematic review / J. Danesh, S. Kaptoge, A. G. Mann [et al.] // PLoS. Med. - 2008. - Vol. 5, № 4. - P. 78.

195. Low molecular weight fucoidan increases VEGF165-induced endothelial cell migration by enhancing VEGF165 binding to VEGFR-2 and NRP1 / A. C. Lake, R. Vassy, M. di Benedetto [et al.] // J. Biol. Chem. - 2006. - Vol. 281, №49.-P. 37844-37852.

196. Low molecular weight fucoidan prevents intimal hyperplasia in rat injured thoracic aorta through the modulation of matrix metalloproteinase-2 expression / H. Hlawaty, N. Suffee, A. Sutton [et al.] // Biochem. Pharmacol. -2011.-Vol. 81, №49.-P. 233-243].

197. Low molecular weight fucoidan prevents neointimal hyperplasia in rabbits iliac artery instent restenosis model / J.-F. Deux, A. Meddahi-Pelle, A. F. L. Blanche [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2002. - Vol. 22, № 10. - P. 1604-1609.

198. Low numbers of FOXP3 positive regulatory T cells are present in all developmental stages of human atherosclerotic lesions / O. J. de Boer, J. J. van der Meer, P. Teeling [et al.] // PLoS ONE. - 2007. - Vol. 2. - P. 779.

199. Low-grade chronic inflammation in regions of the normal mouse arterial intima predisposed to atherosclerosis / J. Jongstra-Bilen, M. Haidari, S.-N. Zhu [et al.] // J. Exp. Med. - 2006. - Vol. 203, № 9. - P. 2073-2083.

200. Lumeng, C. N. Obesity induces a phenotypic switch in adipose tissue macrophage polarization / C. N. Lumeng, J. L. Bodzin, A. R. Saltiel // J. Clin. Invest. - 2007. - Vol. 117, № 1. - P. 175-184.

201. Major, A. S. B-lymphocyte deficiency increases atherosclerosis in LDL receptor-null mice / A. S. Major, S. Fazio, M. F. Linton // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.-2002.-Vol. 22, № 11.-P. 1892-1898.

202. Mallat, Z. Regulatory T-cell immunity in atherosclerosis / Z. Mallat, H. Ait-Oufella, A. Tedgui // Trends Cardiovasc. Med. - 2007. - Vol. 17, № 4. - P. 113-118.

203. Marine Pharmacology in 2009-2011 : marine compounds with antibacterial, antidiabetic, antifungal, anti-Inflammatory, antiprotozoal, antituberculosis, and antiviral activities; affecting the immune and nervous systems, and other miscellaneous mechanisms of action : review / A. M. S. Mayer, A. D. Rodriguez, O. Taglialatela-Scafati, N. Fusetani // Mar. Drugs. - 2013. - Vol. 11, № 7.-P. 2510-2573.

204. Markers of inflammation and rapid coronary artery disease progression in patients with stable angina pectoris / E. Zourdidakis, P. Avanzas, R. Arroyo-Espliguero [et al.] // Circulation. - 2004. - Vol. 110,№ 13.-P. 1747-1753.

205. Matsui, M. S. Sulfated polysaccharides from red microalgae have antiinflammatory properties in vitro and in vivo / M. S. Matsui, N. Muizzuddin, S. Arad// Appl. Biochem. Biotechnol. - 2003. -Vol. 104, № l.-P. 13-22.

206. Michelsen, K. S. Toll-like receptor signaling and atherosclerosis / K. S. Michelsen, M. Arditi // Curr. Opin. Hematol. - 2006. - Vol. 13, № 3. - P. 163-168.

207. Minimally modified LDL binds to CD 14, induces macrophage spreading via TLR4/MD-2, and inhibits phagocytosis of apoptotic cells / Y. I. Miller, S. Viriyakosol, C. J. Binder [et al.] // J. Biol. Chem. - 2003. - Vol. 278, № 3.-P. 1561-1568.

208. Mitjatovic, T. Interleukin-4 and-12 inhibit tumor necrosis factor-alpha mRNA translational activation in lipopolysaccharide-induced mouse macrophages / T. Mitjatovic, V. Kruys, D. Caput // J. Biol. Chem. - 1997. - № 272. - P. 1439414398.

209. Monocyte subsets differentially employ CCR2, CCR5, and CX3CR1 to accumulate within atherosclerotic plaques / F. Tacke, D. Alvarez, T. J. Kaplan [et al.]//J. Clin. Invest.-2007.-Vol. 117, № 1.-P. 185-194.

210. MS80, a novel sulfated polysaccharide, inhibits CD40-NF-kappa B pathway via targeting RIP2 / X. Du, S. Jiang, X. Xin [et al.] // Mol. Cell Biochem. -2010.-Vol. 337, № 1-2.-P. 277-285.

211. Natural regulatory T cells control the development of atherosclerosis in mice / H. Ait-Oufella, B. L. Salomon, S. Potteaux [et al.] // Nat. Med. - 2006. - № 12. - P. 178-180.

212. Neovascular expression of E-selectin, intercellular adhesion molecule-1, and vascular cell adhesion molecule-1 in human atherosclero-sis and their relation to intimal leukocyte content / K. D. o'Brien, T. O. McDonald, A. Chait [et al.] // Circulation. - 1996. - № 93. - P. 672-682.

213. Network of vascular-associated dendritic cells in intima of healthy young individuals / G. Millonig, H. Niederegger, W. Rabl [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2001. - Vol. 21, № 4. - P. 503-508.

214. Nilson, J. Immunomodulation of atherosclerosis. Implication for vaccine development / J. Nilson, G. K. Hansson, P. K. Shah // Artherioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2005. - Vol. 25, № 1. - P. 18-28.

215. Opal, S. M. Anti-Inflammatory cytokines / S. M. Opal, V. A. de Palo // Chest.-2000.-Vol. 117, №4.-P. 1162-1172.

216. Packard, R. R. S. Inflammation in atherosclerosis: from vascular biology to biomarker discovery and risk prediction // R. R. S. Packard, P. Libby // Clinical Chemistry. - 2008. - Vol. 54, № 1. - P. 24-38.

217. Palinski, W. Immune response to oxidative neoepitopes on LDL and phospholipids modulate the development of atherosclerosis / W. Palinski, J. L. Wirtztum // J. Intern. Med. - 2000. - Vol. 247, № 3. - P. 371-380.

218. Palinski, W. Immunomodulation: a new role for statins? / W. Palinski //Nat. Med.-2000.-Vol. 6, № 12.-P. 1311-1312.

219. Palinski, W. Low density lipoprotein undergoes oxidative modification in vivo / W. Palinski, M. E. Rosenfeld, S. Yla-Hertuala // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1989.-Vol. 86, №4.-P. 1372-1376.

220. Parish, C. R. Heparanase: a key enzyme involved in cell invasion / C. R. Parish, C. Freeman, M. D. Hulett // Biochim. Biophys. Acta. - 2011. - Vol. 1471, № 3. - P. M99-M108.

221. Parums, D. V. The localization of immunoglobulin in chronic periaortitis / D. V. Parums, D. R. Chadwick, M. J. Mitchinson // Atherosclerosis. -1986.-Vol. 61, №2. -P. 117-123.

222. Paul, W. Interleukin-4: a prototypic immunoregulatory lymphokine / W. Paul. // Blood.- 1991.- Vol. 77.- P. 1859-1870.

223.. Peripheral arterial disease in the elderly: the Rotterdam Study / W. T. Meijer, A. W. Hoes, D. Rutgers [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1998. -Vol. 18, №2.-P. 185-192.

224. Peripheral blood mononuclear cell production of interleukin-8 and IL-8-dependent neutrophil function in hypercholesterolemic patients / E. Porreca, R. Sergi, G. Baccante [et al.] // Atherosclerosis. - 1999. - Vol. 146, № 2. - P. 345-350.

225. Pradhan, A. D. Soluble intercellular adhesion molecule-1, soluble vascular adhesion molecule-1, and the development of symptomatic peripheral arterial disease in men / A. D. Pradhan, N. Rifai, P. M. Ridker // Circulation. - 2002. - Vol. 106, № 7. - P. 820-825.

. 226. Prognostic value of serum cytokines in patients with congestive heart failure Orus J., Roig E., Perez-Villa F. [et al.] // J. Heart. Lung Transplant. - 2000. -Vol. 19, №5.-P. 419-425.

227. Protective immunity against atherosclerosis carried by B cells of hypercholesterolemic mice / G. Caligiuri, A. Nicoletti, B. Poirier, G. K Hansson // J. Clin. Invest. - 2002. - Vol. 109, № 6. - P. 745-53.

228. Protective role of interleukin-10 in atherosclerosis / Z. Mallat, S. Besnard, M. Duriez [et al.] // Circ. Res. - 1999. - Vol. 85, № 8. - P. 17-24.

229. P-selectin or intercellular adhesion molecule (ICAM)-l defi-ciency substantially protects against atherosclerosis in apolipoprotein E-deficient mice / R. G. Collins, R. Velji, N. V. Guevara [et al.] // J. Exp. Med. - 2000. - Vol. 19, № 1. -P. 189-194.

230. Qouzi, A. Immunophenotyping of perepheral blood lymphocytes in

Saudi Men / A.A. Qouzi, A.l. Salamah, R. Rasheed [et al.] // Clin. Diagn. Lab.

Immunol. - 2002. - Vol.9, №2. - P. 279-281.

159

231. Rabbit and human atherosclerotic lesions contain IgG that recognizes epitopes of oxidized LDL / S. Yla-LIerttuala, W. Palinski, S. W. Butler [et al.] // Arterioscler. Thromb. - 1994. - Vol. 14, № 1. - P. 32-40.

232. Ranjit, S. Potential role of dendritic cells for progression of atherosclerotic lesions / S. Ranjit, L. Dazhu // Postgrad. Med. J. - 2006. - Vol. 82, №971.-P. 573-575. .

233. Rathmell, J. C. Apoptosis and B cell tolerance / J. C. Rathmell // Curr. Dir. Autoimmun. - 2003. - Vol. 6. - P. 38-60.

234. Regulatory T cells and immune tolerance / S. Sakaguchi, T. Yamaguchi, T. Nomura, M. Ono // Cell. - 2008. - Vol. 133, № 5. - P. 775-787.

235. Relationship between antithrombotic activities of fucans and their structure / C. Boisson-Vidal, F. Chaubet, L. Chevolot [et al.] // Drug. Devel-opment. Research. - 2001. - Vol. 51, № 4. - P. 216-224.

236. Roberts, C.K. Oxidative stress and dysregulation of NAD(P)H oxidase and antioxidant enzymes in diet-induced metabolic syndrome / C.K. Roberts // Metabolism. — 2006. — Vol. 55. — P. 928-934.

237. Robertson, A. K. T cells in atherogenesis: for better or for worse? / A. K. Robertson, G. K. Hansson // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2006. - Vol. 26, № 11.-P. 2421-2432.

238. Rokitansky, von. C. A manual of pathological anatomy. Vol. 4. Sydenham Society / C. von Rokitansky. - London, 1852. - 261 p.

239. Role of neutrophil apoptosis in the resolution of inflammation / D. El Kebir, J. G. Filep//Scientific World J.-2010.-№. 10.-P. 1731-1748.

240. Ross, R. Atherosclerosis and the arterial smooth muscle cell: Proliferation of smooth muscle is a key event in the genesis of the lesions of atherosclerosis / R. Ross, J. A. Glomset // Science. - 1973. - Vol. 180, № 4093. - P. 1332-1339.

241. Samson, S. Immune response to lipoproteins in atherosclerosis : review article / S. Samson, L. Mundkur, V. V. Kakkar // Cholesterol. - 2012. - №. 2012. -P. 1-12.

242. Schachinger, V. Z Atherosclerosis-associated endothelial dysfunction / V. Schachinger, A.Zeiher // Kardiol.- 2000.- Vol. 89, № 1.- P. 70-74.

243. Serum levels of the antiinflammatory cytokine interleukin-10 are decreased in patients with unstable angina / D. A. Smith, S. D. Irving, J. Sheldon [et al.] // Circ. -2001.- Vol. 104, № 7. - P. 746-749.

244. Shibata, N. Regulation of macrophage function in inflammation and atherosclerosis / N. Shibata, C. K. Glass // J. Lipid Res. - 2009. - № 50. - P. S277-S281.

245. Shimada, K. Immune system and atherosclerotic disease heterogeneity of leukocyte subsets participating in the pathogenesis of atherosclerosis / K. Shimada//Circ. J.-2009.-Vol. 73, №6.-P. 994-1001.

246. Shimizu, T. Lipid mediators in health and disease: enzymes and receptors as therapeutic targets for the regulation of immunity and inflammation / T. Shimizu // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 2009. - № 49. - P. 123-150.

247. Soluble adhesion molecules and prediction of coronary heart disease: a prospective study and meta-analysis / I. Malik, J. Danesh, P. Whincup [et al.] // Lancet. - 2001. - Vol. 358, № 9286. - P. 971-975.

248. Soluble P selectin in peripheral vascular disease: relationship to the location and extent of atherosclerotic disease and its risk factors / A. D. Blann, M. Seigneur, M. R. Boisseau [et al.] // Blood Coagul. Fibrinolysis. - 1996. - Vol. 7, № 8.-P. 789-793.

249. Soluble vascular cell-adhesion molecule-1 and soluble intercellular adhesion molecule-1 correlate with lipid and apolipoprotein risk factors for coronary artery disease in children / T. Ohta, K. Saku, K. Takata, N. Adachi // Eur. J. Pediatr. - 1999. - Vol. 158, № 7. - P. 592-598.

250. Statins (HMG-CoA Reductase Inhibitors) as a novel type of immunosuppressor / B. Kwak, F. Mulhaupt, S. Myit, F. Mach // Nat. Med. - 2000. -№6.-P. 1399-1402.

251. Steinberg, L. Oxydative modification of LDL and atherosclerosis / L.

Steinberg//Circulation. - 1997.-№95.-P. 1062-1071.

161

252. Steinberg, U. Role of superoxide in endothelial cell modification of lowdensity lipoproteins / U. Steinberg // Biochim. Biophys. Acta. - 1988. - № 959. -P. 20-30.

253. Stoneman, V. E. Role of apoptosis in atherosclerosis and its therapeutic implications / V. E. Stoneman, M. R. Bennett // Clin Sci (Lond). - 2004. -Vol. 107, №4.-P. 343-354. ......- ...

254. Subendotelial retention of atherogenic lipoproteins in early atherosclerosis / K. Skalen, M. Gustaffson, E. K. Rydberg [et al.] // Nature. - 2002. -Vol. 417, №6890.-P. 750-754.

255. Sugawara, I. Fucoidan blocks macrophage activation in an induc-tive phase but promotes macrophage activation in the effector phase /1. Sugawara, K. C. Lee // Microbiol. Immunol. - 1984. - Vol. 28, № 3. - P. 371-377.

256. Sulfated fucans extracted from algae Padina gymnospora have antiinflammatory effect / C. T. Marques, T. C. G. de Azevedo, M. S. Nascimento [et al.] // Rev. Bras. Farmacogn. - 2012. - Vol. 22, № 1. - P. 115-122.

257. Sulfated galactofucan from Lobophora variegata: anticoagulant and anti-inflammatory properties / V. P. Medeiros, K. C. Queiroz, M. L. Cardoso [et al.] // Biochemistry (Mosc.). - 2008. - Vol. 73, № 9. - P. 1018-1024.

258. Sulfated polysaccharide fucoidan ameliorates experimental autoimmune myocarditis in rats / K. Tanaka, M. Ito, M. Kodama [et al.] // J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. - 2011. - Vol. 16, № 1. - P. 79-86.

259. T lymphocytes from human atherosclerotic plaques recognize oxi-dized LDL / S. Stemme, B. Faber, J. Holm [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1995. -Vol. 92, №9.-P. 3893-3897.

260. Takahashi, M. Inflammatory cytokines in the pathogenesis of atherosclerosis / M. Takahashi // Nihon Rinsho. - 2011. - Vol. 69, № 1. - P. 30-33.

261. Tedgui, A. Cytokines in atherosclerosis: pathogenic and regulatory pathways / A. Tedgui, Z. Mallat // Physiol. Rev. - 2006. - Vol. 86, № 2. - P. 515581.

262. The antimitogenic action of the sulphated polysaccharide fiicoidan differs from heparin in human vascular smooth muscle cells / B. Mulloy, K. L. Gallagher, L. O'Brien, A. D. Hughes // Thromb. Haemost. - 2002. - Vol. 87, № 1. -P. 149-154.

263. The inhibitory effects of fucoidan on delayed-type hypersensitivity suggested that it may be potential medication for chronic inflammatory diseases in the future / Z. Quanbin, L, Zhien, Z. Gefei // Chin. J. Oceanology Limnology. -2003. - Vol. 21, № 4. - P. 324-328.

264. The role of adaptive T cell immunity in atherosclerosis / Z. Mallat, S. Taleb, H. Ait-Oufella, A. Tedgui // J. Lipid Res. - 2009. - № 50. - P. S364-S369.

265. The role of CD4+CD25+ regulatory T cells in macrophage-derived foam-cell formation / J. Lin, M. Li, Z. Wang [et al.] // J. Lipid. Res. - 2010. - Vol. 51,№ 5.-P. 1208-1217.

266. The role of the macrophage in atherosclerosis. Deficiency of TGF-P signaling in CDllc positive dendritic cells, macrophages and NK cells accelerates atherosclerosis by inducing inflammatory cell influx / D. Lievens; A.-K. Robertson; L. Beckers [et al.] // Circulation. - 2008. - № 118. - P. S510.

267. The Thl7/ Treg imbalance in patients with acute coronary syndrome / X. Cheng, X. Yu, Y. J. Ding [et al.] // Clin. Immunol. - 2008. - Vol. 127, № 1. - P. 89-97.

268. Thrombogenesis and endothelial damage/dysfunction in peripheral artery disease. Relationship to ethnicity and disease severity / A. J. Makin, N. A. Chung, S. H. Silverman, G. Y. Lip // Thromb. Res. - 2003. - Vol. 111, № 4-5. - P. 221-226.

269. Thusen, von der J. H. Interleukins in atherosclerosis: molecular pathways and therapeutic potential / J. H. von der Thusen, J. Kuiper // Pharmacol. Rev.-2003.-Vol. 55, № ]._p. 133-166.

270. TLR activation triggers the rapid differentiation of monocytes into macrophages and dendritic cells / S. R. Krutzik, B. Tan, H. Li [et al.] // Nat. Med. -2005. - Vol. 11, № 6. - P. 653-660.

271. Toll-like reeeptor-4-dependent and -independent cytokine secretion induced by minimally oxidized low density lipoprotein in macrophages / Y. I. Miller, S. Viriyakosol, D. S. Worrall [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. -2005. - Vol. 25, № 7. - P. 1213-1219.

272. Toll-like receptor-4 and mitogen-activated protein kinase signal system are inolved in activation of dendritic cells in patients -with acute coronary syndrome / L. Wang, D. Li, K. Yang [et al.] // Immunology. - 2008. - Vol. 125, № 1. - P. 122-130.

273. Transcriptional inhibition by interleukin-6 of the class A macro-phage scavenger receptor in macrophages derived from human peripheral monocytes and the THP-1 monocytic cell line / H. S. Liao, A. Matsumoto, H. Itakura [et al.] // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 1999. - Vol. 19, № 8. - P. 1872-1880.

274. Transfer of CD4+-T cells aggravates atherosclerosis in immunode-ficient apolipoprotein knockout mice / X. Zhou, A. Nicoletti, R. Elhage, G. K. Hansson // Circulation. - 2000. - Vol. 102, № 24. - P. 2919-2922.

275. Use of ankle brachial pressure index to predict cardiovascular events and death: a cohort study / G. C. Leng, F. G. Fowkes, A. J. Lee [et al.] // Br. Med. J. - 1996.-313, №7070.-P. 1440-1444.

276. Vaccination using oxidized low-density lipoprotein-pulsed dendritic cells reduces atherosclerosis in LDL receptor-deficient mice / K. L. L. Habets, G. H. M. van Puijvelde, L. M. van Duivenvoorde [et al.] // Cardiovasc. Res. - 2010. - 85, № 3. - P. 622-630.

277. Validity of duplex scanning in the detection of peripheral arterial disease in the general population / F. G. Fowkes, P. L. Allan, C. Tsampoulas [et al.] // Eur. J. Vase. Surg. - 1992. - Vol. 6, № 1. - P. 31-35.

278. Varga, T. Nuclear receptors, transcription factors linking lipid metabolism and immunity: the case of peroxisome proliferators - activated receptor gamma / T. Varga, L. Nagy // Eur. J. Clin. Invest. - 2008. - Vol. 38, № 10. - P. 695-707.

279. Vessel wallembedded dendritic cells induce T-cell autoreactivity and initiate vascular inflammation / J. W. Han, K. Shimada, W. Ma-Krupa [et al.] // Circ. Res. - 2008, № 5. - Vol. 102. - P. 546-553.

280. Vessel-specific Toll-like receptor profiles in human medium and large arteries / O. Pryshchep, W. Ma-Krupa, B. R. Younge [et al.] // Circulation. - 2008. -Vol. 118, № 12.-P. 1276-1284.

281. Virchow, R. Die cellularpathologie / R. Virchow. - Berlin : Verlag von August Hirschwald, 1871. - 400 p.

282. Wang, S. Z. Clinic observation of fucoidan on patients with hyperlipidemia / S. Z. Wang, A. F. Bi // Med. J. Qilu. - 1994. - Vol. 16. - P. 173174.

283. Weber, C. Chemokines: key regulators of mononuclear cell recruitment in atherosclerotic vascular disease / C. Weber, A. Schober, A. Zernecke // Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. - 2004. - Vol. 24, № 11. - P. 1997.

284. Whitman, S. C. Interferon-y deficiency exerts gender-specific effects on atherogenesis in apolipoprotein E -/- mice / S. C. Whitman, P. Ravisankar, A. Daugherty // J. Interferon Cytokine Res. - 2002. - Vol. 22, № 6. - P. 661-670.

285. Wick, G. Autoimmune and inflammatory mechanisms in atherosclerosis / G. Wick, M. Knoflach, Q. Xu // Ann. Rev. Immunol. - 2004. -Vol. 22.-P. 361-403.

286. Yan, Z. Q. Innate immunity, macrophage activation, and atherosclerosis / Z. Q. Yan, G. K. Hansson // Immunol. Rev. - 2007. - Vol. 219. - P. 87-203.

287. Yeast zymosan, a stimulus for TLR2 and dectin-1, induces regulatory antigen-presenting cells and immunological tolerance / S. Dil-lon, S. Agrawal, K. Banerjee [et al.] // J. Clin. Invest. - 2006. - Vol. 116, № 4. - P. 916-928.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.