Изучение мутационного процесса в хронически облучаемых популяциях Pinus sylvestris L. (сосна обыкновенная), произрастающих в зоне аварии на Чернобыльской атомной электростанции тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.01, кандидат биологических наук Игонина, Елена Викторовна

• Игонина, Елена Викторовна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Игонина, Елена Викторовна

ВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Радиационное загрязнение природных популяций растений.

1.2 Влияние ионизирующих излучений на растения.

1.2.1 Влияние ионизирующих излучений на вегетативные органы растений.

1.2.2 Влияние ионизирующих излучений на репродуктивные функции и органы растений.

1.2.3 Генетические последствия хронического облучения популяций.

1.2.4 Изменение радиочувствительности раститений при хроническом воздействии ионизирующих излучений.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Характеристика объекта исследования.

2.2 Характеристика изучаемых чернобыльских популяций сосен.

2.3 Метод белкового электрофореза.

2.4 Метод анализа аберраций хромосом в анафазе митоза.

2.5 Биометрические методы.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Цитогенетические эффекты. 51 3.2.1. Цитогенетические эффекты у сосны обыкновенной, облучённой в результате аварии.

3.2.2 Цитогенетические эффекты в семенах первого поколения.

3.2 Генетические эффекты во втором поколении чернобыльских популяций сосны. 58 3.3. Изменение радиочувствительности популяций сосны. 61 3.4 Влияние хронического облучения на семенную продуктивность и генеративные органы сосны обыкновенной. 65 3.4 Биометрические показатели вегетативной сферы. 76 ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение мутационного процесса в хронически облучаемых популяциях Pinus sylvestris L. (сосна обыкновенная), произрастающих в зоне аварии на Чернобыльской атомной электростанции»

Со времени аварии на ЧАЭС прошло уже 24 года, а в научном мире до сих пор не сложилось единого представления о последствиях этой аварии для флоры, фауны и человека. В настоящее время проблема последствий радиационного воздействия на население и природные популяции получила особую актуальность. В связи с перспективой истощения запасов углеводородов весь мир вступает в эпоху «атомного ренессанса». Правительство РФ в 2008 г. приняло программу развития атомной энергетики, которая предусматривает строительство 26 новых энергоблоков к 2030 г. Опыт радиационных аварий, без сомнения, будет учтён при создании новых более безопасных технологий в ядерной энергетике. Однако практика показывает, что все стадии ядерного топливного цикла, начиная от переработки сырья и заканчивая утилизацией отработанного ядерного топлива, могут стать источником радиационного загрязнения окружающей среды. История радиационных аварий показала востребованность знаний, накопленных радиационной биологией и радиационной генетикой.

Взаймодействие ионизирующих излучений с живыми организмами является сложным, многоуровневым процессом, к изучению которого человечество приступило относительно недавно, после открытия радиоактивности В. Рентгеном в 1896 г., т. е. немногим более 100 лет назад. Тогда была отмечена способность радиации проникать сквозь живые ткани. Позже возникло представление о повреждающем действии ионизирующей радиации на организм человека и животных.

Открытие в 1925 г. Г.А. Надсоном и Г.С. Филипповым радиационного мутагенеза привело к созданию новых методик изучения наследственности и дало новый импульс развитию генетики. В 1957 г. В. И. Корогодиным был открыт процесс восстановления радиационных повреждений — репарация разрывов • ДНК. Способность клеток к восстановлению и влияние модифицирующих факторов показали, что радиационное поражение — сложный, развивающийся во времени процесс, опосредованный внутриклеточным метаболизмом.

Достижения радиобиологии и радиационной генетики оказались особенно востребованными в связи с проведением испытаний ядерного оружия в атмосфере и возникновение угрозы атомной войны. В результате наземных испытаний ядреных взрывов возникли многочисленные очаги локального и регионального радиационного загрязнения. Интерес исследователей привлекли популяционный и эволюционный аспекты влияния радиации на живое. Изучение популяций растений и животных, обитающих в районах с повышенным радиационным фоном в 50-е - 60-е годы выявило наличие в них радиоиндуцированной генетической изменчивости, радиационной депрессии, радиостимуляции. Был описан процесс возникновения, накопления и элиминации радиоиндуцированных мутаций (Stone et al., 1958; Mewissen et al., 1959; Osburn, 1961; Mericle L., Mericle R., 1965). Последствия радиационного воздействия изучались в экспериментах по искусственному облучению популяций (Wallace, 1951, 1952; Wallece, King, 1951; Winger et. al., 1961; Sparrow et. al. 1965, Шевченко и др., 1970).

После прекращения испытаний ядерного оружия в атмосфере первостепенное значение приобрели «мирные» источники радиационного загрязнения окружающей среды, связанные с использованием радионуклидов предприятиями ядерной промышленности и энергетики и в других отраслях хозяйства. Изучение последствий облучения природных популяций на территории Восточно-Уральского радиоактивного следа были начаты сотрудниками лаборатории радиационной генетики института Биофизики АН СССР под руководством Н.П. Дубинина в 1962 г.

Авария на Чернобыльской атомной электростанции является самой значительной по масштабам радиационного загрязнения и ущербу, причинённому окружающей среде и здоровью людей. В 2007 г. в зоне радиоактивного загрязнения входило 4343 населенных пункта 14 субъектов

Российской Федерации, в которых проживало более 1,5 миллиона человек. В связи со снижением мощности дозы, к 2056 г. число населенных пунктов с дозой более 1мЗв/год останется 93 (ныне 428) (по материалам Официального сайта Роспотребнадзора). В то же время, последствия длительного проживания на загрязнённых территориях в условиях облучения малыми и сверхмалыми дозами до сих пор оцениваются неоднозначно (Яблоков и др., 2007; Chernobyl's Legacy,, 2006).

На примерах растительных сообществ, обитающих в зонах радиоактивного загрязнения, сотрудниками лаборатории радиационной генетики было описано явление радиоадаптации (Шевченко и др., 1970; Дубинин и др., 1972; Чережанова и др., 1971, 1975; Кальченко и др., 1976). На целом ряде объектов была показана относительно более высокая генетическая эффективность излучений с низкой мощностью дозы в пересчёте на единицу дозы (Шевченко и др., 1978; Шевченко, Померанцева, 1985). В экспериментах по хроническому облучению большого числа поколений одноклеточной водоросли хлореллы и высших растений была разработана математическая модель накопления и элиминации мутаций в облучаемых природных популяциях (Шевченко и др., 1976, 1985, 1992). Было обнаружено возрастание частоты эмбриональных леталей в хронически облучаемых популяциях Arabidopsis thaliana Heynh. (L.) (Абрамов и др., 1992).

В работах, проведенных на популяциях Ceantaurea scabiosa L. и Pinns sylvestris L. показано существование отбора в пользу определённых аллелей изоферментных локусов в условиях хронического воздействия ионизирующих излучений (Кальченко и др., 1989; Кальченко и др., 1993а, 1995; Рубанович, Кальченко, 1994; Шевченко и др., 1996). В популяциях P. sylvestris L., обитающих на ВУРСе, в зоне аварии на ЧАЭС и в окрестностях Семипалатинского полигона, была оценена частота мутаций изоферментных локусов для различных поглощённых доз (Кальченко и др. 1989, 1993, 1995; Шевченко и др., 1996).

Наиболее удобным объектом для изучения последствий Чернобыльской аварии стала сосна обыкновенная, которая является хорошо изученным радиобиологическим объектом. Её отличает высокая радиочувствительность, которая была показана во многих экспериментах. Она образует большое количество семян и произрастает практически повсеместно, в том числе и в 30км зоне ЧАЭС.

Сотрудники лаборатории экологической генетики (ИОГен РАН) начали работу по сбору семенного материала сосны в зоне ЧАЭС летом 1986 г. В семенах сосны первой послеаварийной репродукции был выявлен высокий уровень цитогенетических повреждений и генных мутаций (Кальченко и др., 1993; Шевченко и др., 1996). Данная диссертационная работа является продолжением этих исследований.

Актуальность работы

Возрастание частоты мутаций под воздействием ионизирующих излучений выявлено в многочисленных экспериментах. Однако данные о мутационном процессе в хронически облучаемых природных популяциях противоречивы. Накопление и элиминация генетических нарушений у организмов, существующих в реальных экологических условиях, происходят иначе, чем при облучении в условиях in vivo. Поэтому особую практическую и теоретическую ценность имеют результаты изучения динамики мутационного процесса в природных популяциях.

Целью диссертационной работы является изучение влияния ионизирующих излучений на динамику мутационного процесса в хронически облучаемых популяциях сосны.

Задачи:

1) Определить динамику возникновения и элиминации цитогенетических эффектов хронического облучения в популяциях сосен, получивших различную степень радиационных повреждений.

2) Провести исследование мутационного процесса у представителей облучённых популяций на молекулярно-генетическом уровне.

3) Изучить изменение радиочувствительности чернобыльских популяций сосны.

4) Выявить проявление отдалённых последствий радиационного воздействия в репродуктивной и вегетативной сфере облучённых растений и их потомства.

Положения, выносимые на защиту:

1. В проростках семян от облучённых сосен Pinus sylvesris L. сохранялся повышенный уровень хромосомных аберраций на протяжении не менее 15 лет после аварии на ЧАЭС.

2. У потомков второго поколения облучённых сосен не произошло накопления генных мутаций и цитогенетических нарушений, но наблюдаются многочисленные морфологические аномалии, спектр которых совпадает с основными типами радиоморфозов.

Научная новизна

Цитогенетические исследования были начаты в первый год после аварии, что позволило проследить динамику радиационных повреждений на протяжении длительного времени в двух поколениях сосны обыкновенной.

Впервые изучена динамика радиобиологических и цитогенетических эффектов в семенном потомстве сосны, произрастающей в зонах сублетального, сильного, среднего и слабого радиационного повреждения в зоне аварии на ЧАЭС.

Впервые была изучена радиочувствительность проростков сосны из хронически облучаемых популяций зоны аварии на ЧАЭС.

Впервые был проведён анализ морфометрических характеристик второго поколения облучённых сосен.

Практическая значимость

Так как ядерная энергетика продолжает развиваться, и её мощность в перспективе будет только возрастать, то вероятность попадания радионуклидов в окружающую среду в процессе ядерного топливного цикла сохраняется. В представленной работе выявлена высокая способность популяций сосны к восстановлению, проявляющаяся, прежде всего, в уменьшении до контрольного уровня радиоиндуцированных цитогенетических и генетических нарушений. Полученные данные позволят оптимизировать затраты на ликвидацию последствий возможных радиационных аварий и инцидентов.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Игонина, Елена Викторовна

ВЫВОДЫ.

1. Многолетний ' (1986-2004гг.) цитогенетический мониторинг популяций сосны обыкновенной, произрастающих в зоне аварии на ЧАЭС выявил два периода с высокой частотой возникновения мутаций (1986 и 1993-1997гг). После этих максимумов наблюдалось снижение количества цитогенетических нарушений до контрольного уровня. Очищение популяций от индуцированных мутаций происходило дважды: в 1990 и 2004 годах.

2. Анализ частоты генных мутаций в эндоспермах семян 2004 г. не выявил возрастания интенсивности мутационного процесса в изоферментных локусах Gdh, Adhl, Adh2, Skdhl, Skdh2, Got2, Got3. В то же время, в семенах деревьев из облучённых популяций наблюдаются случаи значимого отклонения от равновероятного распределения аллелей, что может быть проявлением отбора в хронически облучаемых популяциях.

3. Дополнительное острое у-облучение семян сосны обыкновенной выявило возрастание радиоустойчивости растений из хронически облучаемых популяций на 20% по сравнению с контролем. Величина удваивающей дозы для сосны обыкновенной, определённая в результате этого эксперимента, оказалась очень низкой — 15,8 сГр, что очень близко к радиочувствительности млекопитающих и человека.

4. В период с 1997 по 2004 гг. количество жизнеспособных семян в некоторых чернобыльских популяциях сосны было снижено в 1,5-8 раз. Однако высокая изменчивость этого показателя, как в контроле, так и в облучаемых популяциях, не позволяет сделать вывод об устойчивом снижении семенной продуктивности вследствие облучения.

5. Морфологический анализ второго поколения облучённых сосен выявил повышение частоты морфозов, связанных с нарушением апикального доминирования, в 5-10 раз по сравнению с контролем. Существенных изменений выживаемости и скорости роста у потомков облученных сосен не выявлено. Высокую частоту морфологических аномалий во втором поколении можно считать главным отдалённым последствием воздействия ионизирующих излучений на популяции сосны в результате аварии на ЧАЭС.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Особенностью сосны обыкновенной, выявленной в данной работе, является её способность к полному восстановлению всех процессов жизнедеятельности даже после облучения в сублетальных дозах. В то же время, по результатам изучения действия острого и хронического облучения, она является одним из наиболее радиочувствительных растений. Такое сочетание у одного вида высокой радичувствительности и способности к восстановлению связано с особенностями биологии сосны.

Выявленные в чернобыльских популяциях сосны частоты хромосомные аберрации, как правило, оказываются летальными для клетки. Элиминация таких мутаций на тканевом уровне осуществляется в меристеме. Если доля повреждённых клеток невелика, функция роста восстанавливается за счёт репопуляции меристем. Внешне этот процесс проявляется в снижении скорости роста побегов и корней у облучённых растений, задержкой смены фенофаз. Если же доля клеток с летальными повреждениями достигает некоторого критического уровня, то почка или побег погибает.

Механизм защиты от радиационного воздействия на тканевом уровне действует не только по отношению к вегетативным, но и к репродуктивным органам и семенам. После гибели 50-60% архегониев, женская шишка сосны опадает. Для выживания зародыша критической является величина 7-8% аберрантных клеток корневой меристемы. В процессе изучения последствий радиационных аварий у сосны выявлен механизм 'временного приостановки репродуктивной функции, который можно сравнить с подобным явлением у млекопитающих. Сосна прекращает семенное воспроизводство при облучении сублетальной дозой и возобновляет его после снижения дозовой нагрузки. Т. е., при критической частоте повреждений половые клетки либо вовсе не образуются, либо архегоний и зародыш элиминируются, предотвращая тем самым передачу генных мутаций следующему семенному поколению. Эти особенности ответа сосны на повреждающие воздействие радиации видоспецифичны и не отмечены у других древесных, а, тем более, травянистых растений.

Благодаря защитным механизмам на уровне тканей и органов, генные мутации и хромосомные аберрации имеют больше шансов для реализации в условиях малых и средних доз острого облучения (до 4Гр). Возможно, с прохождением через соответствующие уровни хронического облучения был связан, выявленный в этой работе, второй максимум цитогенетических эффектов в 1994-1997 гг. в зонах среднего поражения сосновых насаждений. Значительных изменений семенной продуктивности при этом не отмечалось.

После снижения радиационного воздействия восстановление органа начинается с развития покоящихся почек замещения, радиоустойчивость которых на порядок выше, чем у активных меристем. Таким образом, количество радиационных повреждений значительно снижается. По количеству почек замещения сосна • находится на первом месте среди всех растений (Чепик, 1982).

В чернобыльских популяциях сосны наблюдалось следующая динамика радиобиологических и цитогенетических эффектов. Повышенная частота генных мутаций была выявлена только в семенах репродукции 1987г. и только в популяциях со средней степенью поражения. Значительные уровни генных мутаций наблюдались одновременно со снижением семенной продуктивности. В 30-км зоне в этот же год отмечалось большое количество цитогенетических нарушений, полное поражение репродуктивной функции и гибель части популяции. Таким образом, интенсивный мутационный процесс в этот год происходил одновременно с отбором на всех уровнях: клеточном, тканевом и организменном.

В семенах урожая 1993 г. из всех отмеченных ранее радиобиологических и генетических эффектов в чернобыльских популяциях сосны сохранилась только высокая частота цитогенетических нарушений и морфозов. Гибель деревьев,, вызванная облучением высокими дозами, к этому времени практически прекратилась, репродуктивная функция во всех популяциях полностью восстановилась.

В 2001 г. было зафиксировано последние повышение частоты аберраций хромосом в одной из популяций. До настоящего времени в облучаемых популяциях сохраняется единственный радиоиндуцированный эффект — повышенная частота морфологических аномалий.

Несмотря на высокую радиочувствительность, облучённые сосны быстрее всего восстановили те функции, которые наиболее важны для жизнедеятельности: вегетативную и репродуктивную сферы. В докладе МКРЗ 2004 г. именно радиобиологические эффекты признаются наиболее значимыми факторами радиационного воздействия (Валентин, 2004).

Генетические изменения, которые произошли в облучаемых популяциях, нашли отражение в выявленном в этой раьботе повышении радиоустойчивости. Цитогенетические нарушения и морфологические аномалии, которые регистрировались в-отдалённый период после аварии, уже не оказывали заметного влияния на жизнеспособность и семенную продуктивность популяций.

Облучаемые популяции сосны прошли все стадии изменений, вызванных действием ионизирующих излучений, описанных в модельных экспериментах на дрозофиле и хлорелле. Это возникновение мутаций, их элиминация и переход популяции на новый уровень радиоустойчивости. ■

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Игонина, Елена Викторовна, 2010 год

1. Абатуров Ю.Д., Абатуров А.В., Быков А.В. и др. Влияние ионизирующего излучения на сосновые леса в ближайшей зоне Чернобыльской АЭС. М.: «Наука». 1996. 240с.

2. Абрамов В.И., Рубанович А. В., Шевченко В.А., Шевченко В.В., Гриних JI. И. Генетические эффекты в популяциях растений, произрастающих в зоне Чернобыльской аварии // Радиационная биология, радиоэкология. 2006. Т. 46. № 3. С. 259-267.

3. Абрамов В.И., Сергеева С.А., Птицына С.Н. и др. Генетическике эффекты и репарация однонитевых разрывов ДНК в популяциях Arabidopsis thaliana, произрастающего в окрестностях Чернобыльской АЭС // Генетика. 1992. Т. 28. № 6. С. 69-73.

4. Алексахин P.M. История лесной радиоэкологии, её достижения и некоторые внешние задачи. Проблемы лесной радиоэкологии. Под ред. Алексахина P.M. и Карабаня Р.Т .М.: «Гидрометеоиздат». 1979. С. 6-26.

5. Алексахин P.M., Корнеев Н.А. Сельскохозяйственная радиоэкология. М.: Экология». 1991.400с.

6. Алексеев В. А. Лесные экосистемы и атмосферное загрязнение. Ленинград.: «Наука». 1990. 200с.

7. Алтухов Ю.П. Генетические процессы в популяциях. М.: Наука, 1989. 389с.

8. Артёмов В.А., Козубов Г.М., Остапенко Е.К. Репродуктивные процессы. // Радиационное воздействие на хвойные леса в районе аварии на Чернобыльской АЭС. Под ред. Козубова, А.И. Таскаева. Сыктывкар. 1990. С 90-126.

9. Архипов А.Н., Войцехович О.В., Гладков Г.Н. и др. // Бюллетень экологического состояния зоны отчуждения за первое полугодие 1995 года (для информирования нселения). Вып. 5. Чернобыль: «Сильвер полиграф». 1995.40с.

10. Барсуков О.А., Барсуков К.А. Радиационная экология М.: Научный мир, 2003. 253 -с.

11. Белоконь Ю.С., Политов Д.В., Белоконь М.М. и др. Генетический контроль изоферментов сосны обыкновенной (Pinus silvestris L.) из Зауралья.// Генетика. 1995. Т.31. №11. С.1521-1528.

12. Буторина А.К., Калаев В.Н., Миронов А.Н. и др. Цитогенетическая изменчивость в популяциях сосны обыкновенной // Экология. №3, 2001. С. 197-203.

13. Валентин Я. Основные принципы оценки воздействия ионизирующих излучений на живые организмы, за исключением человека. Публикация 91 МКРЗ. Пер с англ. М.: Изд. «Комтехпринт», 2004. 76с.

14. Васильев Д.В. Использование частоты цитогенетических нарушений в вегетативных и репродуктивных органах Pinus sylvestris L. для биоиндикации антропогенного загрязнения // Авторефер. . канд. биол. наук. Обнинск. 2002. 25с.

15. Ганасси Е.Э. Радиационное повреждение и репарация хромосом. М.: Наука. 1976. 134с.

16. Гераськин С.А. Ванина Ю.С., Дикарев В.Г. и др. Генетическая изменчивость в популяции сосны обыкновенной из районов Брянской области //Радиационная биология. Радиоэкология. 2009. Т. 49. №2. С. 136-146.

17. Гераськин С.А., Дикарёв В.Г., Удалова А.А. и др. Закономерности индукции малыми дозами ионизирующего излучения цитогенетических повреждений в корневой меристеме проростков ячменя // Радиационная бология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. №4. С. 373-384.

18. Гераськин С.А., Мозолин Е.М., Дикарев В.Г. и др. Цитогенетические эффекты в популяциях Koeleria gracilis Pers. с территории семипалатинского испытательного полигона // Радиационная биология. Радиоэкология. 2009. Т. 49. №2. С. 147-157.

19. Гостимский С.А., Левинских М.А., Сычёв В.Н. и др. Исследование генетических эффектов в потомстве растений гороха, выращенных в течение полного цикла онтогенеза в космической оранжерее на борту PC МКС. Генетика.-2007. Т. 43. №8. С. 1050-1057.

20. Гродзинский Д.М. Надёжность растительных систем. Киев: Наук. Думка, 1983. 368с.

21. Гродзинский Д.М. Коломиец К.Д., Булах А.А. и др. Антропогенная радионуклидная аномалия и растения. Киев: Лыбидь. 1991. 158 с

22. Гудков И.Н. Клеточные механизмы пострадиационного восстановления растений. Киев: «Наукова думка», 1985. 224с.

23. Делоне И.Л. Перестройки хромосом, вызванные ионизирующими излучениями. Ионизирующие излучения и наследственность // Итоги науки. Биол. науки. М.: Издательство АН СССР. 1960. Т. 3. С. 104-122.

24. Дмитриева С.А., Парфенов В.И., Давидчик Т.О. Цитогенетический мониторинг природных популяций растений в связи с воздействием выбросов Чернобыльской катастрофы // Цитология. 1999. - Т. 41, № 12. - С. 1062 - 1063.

25. Дубинин Н.П., Шевченко В.А., Алексеенок А.Я. И др. О генетических процессах в популяциях, подвергающихся хроническому воздействию ионизирующей радиации // Успехи современной генетики. 1972. Вып. 4. С. 170-206.

26. Жученко А.А., Король А. Б. Рекомбинация в эволюции и селекции. М. Наука, 1985. 400 с.

27. Зайнуллин В.Г. Генетические эффекты хронического облучения в малых дозах генетического излучения. СПб.: «Наука». 1998. 100с.

28. Захаров В.М., Крысанов Е.Ю. (ред.) Последствия Чернобыльской катастрофы: Здоровье среды. М.: Центр экологической политики России. 1996. 170с.

29. Зяблицкая Е.А., Алексахин P.M. Формирование радиоустойчивости в онтогенезе Ml поколения контрастных по радиоустойчивости сортов гексаплоидной пшеницы Радиобиология. Т. XXIX. Вып 2. 1989. 241-246.

30. Ипатьев В.А., Багинский В.Ф., Булавик И.М. и др.// Лес Человек Чернобыль. Лесные экосистемы после аварии на Чернобыльской АЭС: состояние, прогноз, реакция населения, пути реабилитации. Гомель. 1999. 454 с.

31. Йощенко В.И. Бондарь Ю.О. Дозовая зависимость частоты морфологических изменений у сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.) в чернбыльской зоне отчуждения//Радиационная биология. Радиоэкология. 2009. Т. 49, №1, с 117-126.

32. Калаев В.Н. Цитогенетический мониторинг окружающей среды с использованием растительных объектов // Автореферат на соискание степени к. б. н. Воронеж. 2000. 23 С.

33. Калинина В.Н., Панкин В.Ф. Математическая статистика. М.: «Высшая школа». 1994 г. 336 с.

34. Кальченко В.А., Архипов Н.П., Федотов И.С. Мутагенез ферментных локусов, индуцированный в мегаспорах Pinus Sylvestris L. ионизирующим излучением при аварии на Чернобыльской АЭС // Генетика, 1993, т.29, №2. С. 266-273.

35. Кальченко В.А., Калабушкин Б.А., Рубанович А.В. Хроническое облучение как экологический фактор, влияющий на генетическую структуру популяций // Генетика. 1991. Т. 27. № 4. С. 676-683.

36. Кальченко В.А., Пристер Б.С., Полякова В.И. и др. Зависимость частоты аберраций хромосом и видимых мутаций от дозы облучения // Генетика Т. 12, № 12, 1976. С. 32-39.

37. Кальчнко В.А., Рубанович А.А., Костина JI.H. и др. Генетические эффекты в хронически облучаемых популяциях Centaurea scabiosa L., произрастающих на Восточно-уральском радиоактивном следе. Генетика. 1999. Т. 35. № 9. С 236-243.

38. Кальченко В.А., Рубанович А.В., Федотов И.С. и др. Генетические эффекты, индуцированные чернобыльской аварией, в половых клетках сосны обыкновенной (Pinus Sylvestris L.) //Генетика. 1993. Т. 29. №7. С 1205-1212.

39. Кальченко В.А., Спирин Д.А. Генетические эффекты в популяциях сосны обыкновенной, произрастающих в условиях хронического облучения малыми дозами //Генетика. 1989. Т. XXV. №6. С. 1059-1064.

40. Кальченко В.А., Шевченко В.А., Абрамов В.И. и др. изучение радиорезистентности хронически облучаемых популяций растений // Информ. бюл. Науч. Совета АН СССР по пробл. Радиобиологии. М.: «Наука». 1976. Т. 19. С. 98-101.

41. Кальченко В.А., Шевченко В.А., Иофа Э.Л. Изучение радиорезистентности хронически облучаемой популяции ячменя // Информ. бюл. Науч. Совета АН СССР по пробл. Радиобиологии. 1977. Т. 20. С. 115-117.

42. Карабань Р.Т., Мишенков Н.Н., Спирин Д.А. и др. Поражение древесного яруса леса при остром гамма-облучении в разные фенофазы // Докл. АН СССР. 1980. Т. 252. №3. С. 766.

43. Карабнь Р.Т., Мишенков Н.Н., Пристер Б.С. и др. Действие острого гамма-облучения на лесной биогеоценоз // Проблемы лесной радиоэкологии. Под ред. Р. М. Алексахина и Р. Т. Карабаня. М.: «Гидрометеоиздат». 1979. С. 27-52.

44. Козлов А.А. К проблеме «малых доз» в радиобиологии. Радиобиология.1988. Т.26. №3. 424-426.

45. Козубов Г.М. Восстановительные процессы в хвойных лесах в районе аварии на ЧАЭС // Биологические эффекты малых доз ионизирующей радиации и радиоактивное загрязнение среды: Тез докл. междунродной конференции. Сыктывкар. 2001. С. 65-67.

46. Козубов Г.Н., Таскаев А.И. // Радиобиологические и радиоэкологические исследования древесных растений. СПб: "Наука". 1994. 256с.

47. Козубв Г.М., Таскаев А.И. Радиобиологические исследования хвойных в районе Чернобыльской катастрофы (1986-2001). М.: ИПЦ «Дизайн. Информация. Картография». 2002. 272с.

48. Козубов Г.М., Таскаев А.И., Федотов И.С. и др. Карта-схема радиационного поражения лесов в районе аварии на Чернобыльской АЭС: Пояснительная записка. Сыктывкар. 1991. 10с.

49. Криволуцкий Д.А., Тихомиров Ф.А., Федоров Е.А. и др. Действие ионизирующей радиации на биогеоценоз. М.: Наука, 1988. 240 С.

50. Крышев И.И. Радиоактивность районов АЭС. М.: ИАЭ им. Курчатова. 1991. 126 с.

51. Крышев И.И. Радиоэкологичнские последствия чернобыльской аварии. М.: ИАЭ им. И.В. Курчатова, 1991 г. 172 с.

52. Кузий A.M., Березина Н.М., Каушанский А.Д. и др. Предпосевное у-облучение семян сельскохозяйственных культур. М.: Атомиздат, 1974.124 С.

53. Кучма Н.Д., Архипов Н.П., Федотов И.С. и др. Радиоэкологические и лесоводственные последствия загрязнения лесных экосистем зоны отчуждения. Чернобыль: 1994. 24с.

54. Лурье Н.А. Сельскохозяйственная радиология и радиоэкология. М.: Изд. МСХА. 1999.218 с.

55. Лысенко Е.А., Кальченко В.А., Шевченко В.А. Изменчивость полиморфных систем Centaurea scabiosa L. под действием хронического облучения // Радиационная биология, Радиоэкология. 1999. Т. 396 №6. С. 623629.

56. Мамихин С.В., Тихомиров Ф.А., Щеглов А.И. Динамика содержания Cz в лесных биогеоценозах, подвергшихся радиоактивному загрязнению врезультате аварии на Чернобыльской АЭС. // Экология №2, 1994. С 43-49.

57. Митрофанов Ю.А. Индуцированная изменчивость хромосом эукариот. М.: «Наука». 1994. 140с.

58. Муратова Е.Н., Зубарева О.Н. Цитогенетические характеристики сосны обыкновенной (Pinus sylvestris L.) в районе выбросов тепловой электростанции // Изв. Сиб. отд. АН СССР. Сер биол. наук. 1990. Вып. 3. С. 36-44.

59. Нариманов А.А., Корыстов Ю.Н. Стимулирующее действие малых доз ионизирующего излучения на развитие растений // Радиационная биология. Радиоэкология. 1997. Т. 37. Вып. 3. С. 312-319.

60. Новикова Т. М. Особенности семеношения сосны обыкновенной в географических культурах в Красноярской лесостепи // Хвойные бореальной зоны. 2008г., №1-2, с. 62-67

61. Паушева З.П. Практикум по цитологии растений. М.: «Колос». 1970. 255с.

62. Пельтек С.Е., Горячковская Т. Н., Потапова Т. В., Будашкина Е. Б., Шумный В. К. Изучение популяций высших растений, находящихся в зоне влияния Семипалатинского полигона // Цитология и генетика.1996. Т. 30. №4. С. 9-14.

63. Переволоцкий А.Н., Булавик И.М., Переволоцкая Т.И. и др. Прогнозная оценка Накопления 137Cs в древесине сосновых насаждений «ближнего следа радиоактивных выпадений Чернобыльской АЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 2007. Т. 46., №6. С. 746-752.

64. Перепечина Ю.П. Изменчивость шишек и качество семян на лесосеменных участках сосны обыкновенной. // Лесная геоботаника и биология древесных растений. Сб. научных трудов. Брянск. 1986. С. 113-119.

65. Плэтт Р.Б. Экологическое действие ионизирующей радиации на оргнизмы, сообщества и экосистемы // Вопросы радиоэкологии. Под ред. В.И. Баранова. М.: «Атомиздат». 1968. С. 31-56.

66. Позолотина В.Н. Исследование локальных ценопопопуляций одуванчика (Taraxacum officinale S.L.) из радиационно-загрязнённых зон // Экология №2, 2001. С. 117-125.

67. Позолотина В.Н. Отдалённые последствия действия радиации на растения. Екатиринбург: «Академкнига». 2003. 244с.

68. Позолотина В.Н., Собакин П.И., Молчанова Н.В. и др. Миграция и биологическое действие на растения тяжёлых естественных радионуклидов // Экология, №1, 2000. С. 17-23.

69. Попова О.Н., Шершунова В.И., Беляева Р.А. Частота проявления хлорофильных мутаций в популяциях Festuca pratensis Huds.,1. Л'ЗОинтродуцированной на участке с повышенным содержнием в почве U и 226Ra // Радиобиология. 1988. Т XXVIII. Вып. 4. С. 502-506.

70. Попова О.Н., Таскаев А.И., Фролова Н.П. // Генетическая стабильность и изменчивость семян в популяциях травянистых фитоценозов в районе аварии на Чернобыльской АЭС. Санкт-Петербург: «Наука». 1992. 144с.

71. Попова О.Н., Таскаев А.И., Фролова Н.П. Индикация радиоактивного загрязнения окружающей среды по его гаметоцидному действию // Радиобиология. 1991. Т.31. Вып. 2. С.171-174.

72. Попова О.Н., Шершунова В.И., Коданева Р.П. и др. Изменчивость популяции V. cracca L. на территории, имитирующей ураново-радиевое загрязнение. // Научн. докл. Коми фил-л АН СССР. Вып. № 127. Сыктывкар. 1985. 34с.

73. Правдин Л.Ф, Сосна обыкновенная. Изменчивость, внутривидовая систематйка и селекция. Москва: «Наука». 1964. 188 с.

74. Пухальский В.А., Соловьёв А.А., Бадаева Е.Д. и др. Практикум по цитологии и цитогенетики растений. М.: КолосС, 2007. 198с.

75. Рогозин М.В. Объём выборки при изучении выхода семян из шишек сосны обыкновенной //Лесное хозяйство. 1987. №12. С 41-43.

76. Рокицкий П.Ф. Основы вариационной статистики. Минск: «Изд-во Белгосуниверситета». 1961.222с.

77. Романовский М.Г., Рябоконь С.М. Гетерозиготность особи как мутагенный фактор // Генетика. 1992. т. 28. № 12. С. 88-97.

78. Романовский М.Г. Формирование урожая сосны в норме и при мутагенном загрязнении М.: «Наука». 1997. 112с.

79. Рубанович А.В., Кальченко В.А. Нарушение сегрегации в хронически облучаемых популяциях Pinus sylvestris L., произрастающей в районе аварии на ЧАЭС. Генетика. 1994. Т. 30, №1. С. 126-128.

80. Савченко В.К., Касинская С.И., Добина А.И. и др. Отбор и мутационный процесс в популяциях. Минск: «Наука и техника», 1985. 129с.

81. Серебряный A.M., Морозова И.С., Зоз Н.И. К природе адптивного ответа у растений. Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. Т. 34. Вып. 6. С. 818-826.

82. Сидоров В.П. Цитогенетический эффект в клетках хвои сосны обыкновенной при облучении в результате аварии на ЧАЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 1994. Т. 34. Вып. 6. С. 847-851.

83. Скок А.В., Глазун И.Н., Самошкин Е.Н. Влияние радиоактивного загрязнения сосны обыкновенной на жизнеспособность и аномалии сосны обыкновенной в Брянском округе зоны широколиственных лесов // Лесной журнал. 2005. №5. С. 7-11.

84. Спэрроу А.Х., Вудвелл Дж.М. Чувствительность растений к хроническому у-облучению // Вопросы радиоэкологии. Под ред. В.И. Баранова. М.: «Атомиздат». 1968. С 57-60.

85. Спэрроу А.Х., Шейрер JI.A., Вудвелл Дж.М. Радиоустойчивость сосны (Pinus rigida) в условиях 10-ти летнего хронического облучения // Вопросы радиоэкологии. Под ред. В. И. Баранова. М.: «Атомиздат». 1968. С. 57-86.

86. Стрельчук С.И.' Основы эксперементального мутагенеза. Киев. «Вища школа»: 1981. 215с.

87. Тельнов В.И. Распределение генетических маркёров у потомков облучённых людей // Радиационная биология. Радиоэкология. 2008. Т. 48. №5. С 545-552.

88. Тихомиров Ф.А. Действие ионизирующих излучений на экологические системы. М.: «Атомиздат». 1972. 76с.

89. Тихомиров Ф.А. // Распределение и миграция радионуклидов в лесах ВУРС при радиоактивных выпадениях. В кн. Экологические последствия радиоактивного загрязнения на Южном Урале. М.: «Наука». 1993. С. 21-39.

90. Тихомиров В.А., Федотов И.С. Радиочувствительность семян различных популяций сосны обыкновенной // Радиобиология. Том XXV. Вып. 3. 1985. С. 419-422.

91. Тихомиров Ф.А., Щеглов А.И. Последствия радиоактивного загрязнения лесов в зоне влияния аварии на ЧАЭС // Радиационная биология. Радиоэкология. 1997. т 37. Вып. 4. С 664-673.

92. Третьякова И.Н. Цитоэмбриология аномальных женских шишек кедра сибирского // Ботан. журн. 1982. Т. 67, № 4. С. 514-520.

93. Федотов И.С., Тихомиров Ф.А. Действие химических мутагенов и ионизирующих излучений на семена фасоли. // Информ. бюл. Науч. Совета АН СССР по пробл. Радиобиологии. М.: «Наука». 1976. Т. 19. С. 48-50.

94. Федотов И.С., Тихомиров Ф.А., Карабнь Р.Т. и др. Действие гамма-излучения на вегетативные и репродуктивные органы сосны // Проблемы лесной радиоэкологии. Под ред. P.M. Алексахина и Р.Т. Карабаня. М.: «Гидрометеоиздат». 1979. С 53-67.

95. Фёдоров Е.А., Смирнов Е. Г., Гуро Н.В. // Радиоэкология сообществ и популяций дикорастущих растений. В кн. Экологические последствия радиоактивного загрязнения на Южном Урале. М.: «Наука». 1993. С. 307-311.

96. Филиппова Т.В., Санников С.Н., Петрова И.В. и др. Феногеография популяций сосны обыкновенной на Урале. Екатеринбург: УрО РАН, 2006. 122 с.

97. Фролова Н.П., Попова О.Н. Мониторинг семян Хронически облучающихся природных популяций Plantago lanceolata L. Радиобиология. 1990. Т. 30, вып. 4. С. 446-449.

98. Фролова Н.П., Попова О.Н., Таскаев А.И. Семенное возобновление природной популяции Plantago lanceolata L. на участках с различным уровнем у-фона//Радиобиология. 1991. Т. 31. Вып. 2. С. 167-170.

99. Хомиченко А.А., Скоробогатова И.В., Карсункина Н.П. и др. Гормональные и генетические эффекты, индуцированные облучением в малых дозах у Tradescantia (клон 02) // Радиационная биология. Радиоэкология. 2007. Т. 47. №5. С. 578-583.

100. Хромова JI.B., Романовский М.Г., Духарев В.А. Частичная стерильность сосны в 1986 и 1987 гг. в зоне аварии на ЧАЭС // Радиобиология. 1990. Т. 30. Вып. 4. С. 450-457.

101. Шевченко В.А. О генетической адаптации популяций хлореллы к хроническому облучению. Генетика. Т. VI. №8. 1970. С. 64-74.

102. Шевченко В.А. Радиационная генетика одноклеточных водорослей. М.: «Наука». 1979. 256с.

103. Шевченко В.А., Абрамов В.И., Кальченко В.А. и др. Генетические последствия для популяций растений радиоактивного загрязнения окружающей среды в связи с Чернобыльской аварией // Радиационная биология. Радиоэкология. 1996. Т. 36. Вып. 4. С. 531-545.

104. Шевченко В.А., Визигин, В.П., Алексеенок А.Я. и др. Изучение мутационного процесса в популяциях одноклеточных водорослей Chlorella и Chlamidomonas при остром и хроническом облучении ионизирующими излучениями // Генетика. Т. 5, №9, 1969. С 61-73.

105. Шевченко В.В., Гриних Л.И. Цитогенетические эффекты в хронически облучаемых популяциях Crepis tectorum L., произрастающих в районе Восточно-Уральского радиоактивного следа // Радиационная биология. Радиоэкология. 1998. Т. 38. №3. С. 330-336.

106. Шевченко В.А., Кальченко В.А., Абрамов В.И. и др. Генетические эффекты в популяциях растений, произрастающих в зонах Кыштымской и Чернобыльской аварий. // Радиационная биология. Радиоэкология. 1999. Т. 39. №1. С. 162-176.

107. Шевченко В.А, Печкуренков B.JI. Генетическая эффективность облучения с низкой мощностью дозы // Информ. Бюл. Науч. совета АН СССР по пробл. Радиобиологии. М.: «Наука», 1976. Т. 19. С. 33-34.

108. Шевченко В.А., Печкуренков В.Л., Абрамов В.И. Радиационная генетика природных популяций. Генетические последствия Кыштымской аварии. М.: «Наука», 1992. 221с.

109. Шевченко В.А., Абрамов В.И., Печкуренков В.Л. Генетические исследования на Восточно-Уральском радиоактином следе. В кн. Экологические последствия радиоактивного загрязнения на Южном Урале. М.: «Наука». 1993. С. 21-39.

110. Шевченко В.А. Померанцева М.Д. Генетические последствия действия ионизирующих излучений. М.: Наука. 1985. 279с.

111. Юшков П.И., Тарчевская С.В." Морфогенез сосны обыкновенной и лиственницы сукачёва в условиях хронического гмма-облучения // Проблемы лесной радиоэкологии. Под ред. P.M. Алексахина и Р.Т. Карабаня. М.: Гидрометеоиздат. 1979. С 124-129.

112. Яблоков А.В., Нестеренко В.Б., Нестеренко А.В. Чернобыль. Последствия катастофы для человека и природы. СПб.: «Наука». 2007. 376с.

113. Abramov V.I., Fedorenko О.М., Shevchenko V.A.//Genetic consequences of radioactive contamination for population of Arabidopsis. The Science of Total Environment. №112. 1992. P. 19-28.

114. Dvornyk V. Genetic variability and differentiation of geographically marginal Scots pine populations from Ukraine // Silvae genetica. 2001, V. 50. №2. Pp. 64-69.

115. Chernobyl's LegacyPDF (902KB), by the Chernobyl Forum (UN), updated in 2006.

116. Concle M.T., Hodgskiss P.D. Nunnally L.B. et al. Starch gel electrophoresis of conifer seeds // A Laboratory manual Pacific Southwest and Range Experiment station P. O. Box 245. Barkely. California. 1982. P. 1-18.

117. Glazko V. I., Glazko Т. T. Geene pool changes after ecological catastrophe (Chernobil's example) // Агроеколопчний журнал. № 3, 2005. С 42-51.

118. Kormutak A., Vookova B., Manka P. et. al. Abortive embryogenesis in hybrid swarm populations of Pinus sylvestris L. and Pinus muga Turra II Trees structure and function. 2008. V 22, №5. P. 657-662.

119. Manchenco G. P. Handbook of detection of enzymes on electrophoretic gels. Boca Raton, Fl: CRC Press. 1994. 34lp.

120. Mergen F., Staies G.R. Low level chronic gamma irradiation of a pitch pine-oak forest—its physiological and genetical effects on sexual reproduction // Ibid. 1962. Vol. 2, N3/4. P. 205-216.

121. Mericle L.W., Mericle R.P., Possessing the biological roul of background of terrestrial radiation as a constituent of the natural environment // Helf Phis. 1965. N 11. P. 1607-1620.

122. Mewissen D.Y., Damblon J., Bacq Z.M. Comparative sensitivity to radiation of seeds from wild plant growth on uraniferrous and non-uraniferrous soils // Nature, 1959, Vol. 183, N 4673. P. 1449.

123. Osburn W.S. Variation in clonus of Penstimon growing in natural areas of differing radioactivity. Scince, 1961. Vol. 134, N3475. P.342.

124. Peackock A.C., Bunting S.L., Queen K.G. Serum Protein Electrophoresis in Acrylamid Gel: Patterns from Normal Human subjects // Science. 1965. V. 147. P. 1451-1452.

125. Sax K. The stimulation of plant growth by ionising radiation // Radiat. Bot. 1963. Vol.3. N3. P. 179—186.

126. Sparrow A.H., Woodwell G.M., Prediction of the sensibility of plants to chronic ganma irradiation. Radioecology. N. Y.: Reinhold Publ. Corp., 1963. P. 257.

127. Sparrow A.H., Schairer L.A., Woodwel G.M. Tolerance of Pinus rigida trees to a ten-year exposures to chronic gamma irradiation from cobalt-60 // Radiation Botany . 1965. Vol. 5. № 1. P. 7-22.

128. Stone W., Welson F. Genetic studies of irradiated natural populations of Drosophila test. II, 1957 // Proc. Nat. Acad. Sci. US. 1958. Vol. 44. 565-575.

129. Walles B. Genetic changes within populations after x-irradiation. Geneticz. 1951. Vol. 36. P. 612

130. Walles B. Studies of populations exposed to radiation // Science. 1952. Vol. 115. P. 487.

131. Walles В., King J.C. Genetic changes in populations under irradiation. Amer. Naturalist. 85. №823. 209. 1951.

132. Winger H., Napp M., Maciel M.P. et. al. Genetic effects of y-radiation on natural populations of D. willistoni. Experimental, 17, 406, 196.