Изучение сперматогенеза у мышей с ускоренным старением тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.30, кандидат биологических наук Гопко, Антон Витальевич

• Гопко, Антон Витальевич
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гопко, Антон Витальевич

ВВЕДЕНИЕ.

I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Биологическая модель ускоренного старения.

1.2. Сперматогенез у млекопитающих.

1.3. Карнозин - природный антиоксидант и геропротектор.

II МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

II. 1. Объекты исследований.

11.2. Фиксация материала и приготовление препаратов.

11.3. Окрашивание препаратов.

11.4. Цитогенетические методы.

11.4.1. Метод учёта сперматогониальных и мейотических микроядер.

11.4.2. Метод учёта аномалий форм головок спермиев (АГС).ЗО

11.5. Микроспектрофотометрия.

11.6. Статистическая обработка данных.

III РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

III. 1. Скорость роста животных.

111.2. Динамика возрастзависимых изменений массы семенников.

111.3. Возрастные изменения абсолютного числа клеток сперматогенного эпителия у мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.4. Гистологическое исследование структуры семенных канальцев у разновозрастных мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.5. Цитогенетический анализ сперматогенеза у мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.5.1. Морфология ядерных и хромосомных нарушений в развивающихся сперматогенных клетках мышей линий SAM.

111.5.2. Оценка частоты возникновения спонтанных микроядерных аберраций в сперматогониальных клетках.

111.5.3. Оценка частоты возникновения спонтанных микроядерных аберраций в ранних постмейотических клетках (округлых сперматидах).

111.6. Сперматогенез у мышей-долгожителей SAMP1, склонных к ускоренному старению.

III.6.1 .Количественный анализ.

111.6.2. Морфо-гистологический анализ.

111.6.3. Цитогенетический анализ.

111.7. Влияние карнозина на развитие мужских половых клеток мышей линий SAMP1 и SAMR1.

111.7.1. Количественные и качественно-морфологические изменения сперматогенеза мышей SAM под влиянием карнозина.

111.7.2. Влияние карнозина на частоту встречаемости генетически аномальных половых клеток в семенниках мышей SAM.

IV ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

IV.1. Количественная характеристика сперматогенного эпителия у мышей линий SAM.

IV.2 Качественный морфо-гистологический анализ сперматогенеза мышей линий SAM.

IV.3. Цитогенетический анализ сперматогенеза мышей линий SAM.

V ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение сперматогенеза у мышей с ускоренным старением»

Модель ускоренно стареющих мышей (SAM, senescence-accelerated mouse), впервые разработанная японскими исследователями из Университета Киото (Takeda et al., 1981, 1997) в ходе селективного инбридинга животных, произошедших от случайного скрещивания американских мышей линии AKR/J, страдающих наследственной формой лейкемии, с мышами неизвестного происхождения, ввела в поле зрения генетиков и биологов совершенно новое явление, а именно: наследуемое в поколениях сверхбыстрое угасание жизненно важных функций вследствие нарастания за короткое время частот мутаций, неустойчивостей и напряженностей в работе ферментных комплексов, участвующих, как известно, во многих внутриклеточных метаболических процессах и в формировании структур, повышенной чувствительности к изменениям условий окружающей среды.

В дальнейшем инбредные мыши SAM были разделены на две основные группы-серии: мышей, склонных к ускоренному старению (senescence-accelerated mouse prone, линии SAMP1) и мышей, устойчивых к ускоренному старению (senescence-accelerated mouse resistant, линии SAMR). И хотя мыши линий SAMP и линий SAMR родственны, имеют одно и то же происхождение, они отличаются друг от друга по срокам жизни. Для первых средняя продолжительность жизни составляет 9,7 мес, а максимальная - 15 мес, для вторых - соответственно, 18,3 и 24 мес.

Ценность модели SAM заключается в том, что она открывает большие возможности для раскрытия причин катастрофического сокращения продолжительности жизни и возникновения различных патологических состояний. С другой стороны, познание специфических, нелинейных закономерностей, действующих в системе ускоренно стареющих мышей, имеет значение не только для общей теории старения, но и для понимания природы сверхбыстрых процессов и их роли в развитии и эволюции.

Еще большее значение, на наш взгляд, биологическая модель ускоренного старения может иметь в исследованиях, проводимых в рамках фармакологической стратегии, направленной на повышение жизнеспособности, улучшения качества жизни и ее продления. Ясно, что обнаружение биологически активных соединений, способных упорядочивать уклонившиеся от линейного развития клеточные системы, усиливать репродуктивный потенциал, изменять облик организма, и, наконец, отодвигать старение и смерть на более поздние стадии индивидуального развития, будет крупным научным успехом.

Сперматогенез - сложная динамическая система развития мужских половых клеток. В тотальном плане сперматогенная система генетически строго детерминирована, упорядочена, устойчива. Она жестко подчиняется пространственно-временным закономерностям, функционально взаимодействует с соседними специализированными структурами соматического типа. Морфологические нарушения в ней локальны и незначительны. Сперматогенез включает в себя такие процессы-явления как самообновление и коммитация стволовых клеток, пролиферация и клеточная гибель, репарации и регенерации, мейоз и дифференцировки (Данилова, 1982; Райцина, 1982; Захидов, 1998). В настоящее время детальное и глубокое изучение этих фундаментальных биологических явлений на экспериментальных генетических (мутационных) моделях способно принести новые ключи для быстрого роста наших знаний о регуляторных механизмах, лежащих в основе процессов становления, размножения, роста и созревания сперматогенных клеток, скрытых линиях их развития, а также о причинах мужского бесплодия, генетических и репродуктивных рисках, возникающих под влиянием тех или иных воздействий, в том числе и под влиянием времени. Вообще с теоретической точки зрения совершенно очевидна актуальность любых исследований проблем гаметогенеза, как в норме, так и в состояниях, не отвечающих оптимальным. Ведь именно половые клетки связывают поколения, противостоят беспорядку и тем самым гарантируют непрерывность жизненного процесса и бессмертие генов.

Поэтому систематические и системные (комплексные) исследования сперматогенеза у ускоренно стареющих мышей, в том числе и с привлечением экспериментальных подходов, важны и необходимы, поскольку хорошо известно, что системы с ускорением развиваются неустойчиво, неравномерно, непредсказуемо. Ранее уже было показано (Захидов и др., 1999, 2000, Урываева и др., 1999), что мыши линий SAM характеризуются высоким уровнем генетической нестабильности соматических и половых клеток. Все это заставило нас сделать новые шаги в направлении наращивания фактологического материала, объединение которого позволит составить более полную и рациональную картину течения сперматогенеза в условиях ускоренного темпа развития биологических процессов, а заодно подготовить надежную теоретическую основу для развертывания в будущем широких экспериментальных исследований.

Цель настоящего исследования — сравнительное и экспериментальное изучение возрастной динамики сперматогенеза у мышей линии SAMP1, склонных к ускоренному старению, и мышей линии SAMR1, устойчивых к ускоренному старению.

Цель исследования предусматривает решение следующих основных задач:

- количественная характеристика возрастзависимых изменений клеток сперматогенного эпителия;

- качественное, морфологическое описание возрастзависимых изменений пространственной организации сперматогенной структуры.

- онтогенетическое изучение интенсивности спонтанного хромосомного мутагенеза в системе развития мужских половых клеток;

- изучение особенностей сперматогенного процесса у мышей-долгожителей SAMP1;

- установление закономерностей развития мужских половых клеток у ускоренно стареющих мышей, подвергшихся влиянию биологически активного соединения, антиоксиданта карнозина.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Заключение диссертации по теме «Биология развития, эмбриология», Гопко, Антон Витальевич

V. в ы в о д ы

В онтогенезе мышей, склонных (линия SAMP1) и устойчивых (линия SAMR1) к ускоренному старению, количественные и морфологические закономерности развития мужских половых клеток принципиально не различаются.

Цитогенетическая картина сперматогенеза у мышей SAMP1 и SAMR1 представлена широким спектром ядерных и хромосомных аномалий. По критерию сперматогониальных и мейотических микроядер частота выхода аберрантных клеток у мышей SAMP1 и SAMR1 достигает пределов, характерных для индуцированного искусственного мутагенеза. Возрастзависимые изменения частот встречаемости как сперматогониев с микроядрами, так и округлых сперматид с микроядрами носят хаотический, колебательный характер.

У мышей-долгожителей SAMP1, склонных к ускоренному старению, значительные количественные и морфологические изменения в организации сперматогенного эпителия сопровождаются становлением в сети семенника (rete testis) новых молодых канальцев, включающих в себя клетки, по структуре напоминающие гоноциты и молодые клетки Сертоли. У старых ускоренно стареющих мышей SAMP1 возможны два реализующихся на фоне высокой генетической нестабильности пути дифференцировки спермиогенных клеток. У одних животных сохраняется нормальный постмейотический процесс, завершающийся формированием морфологически нормальных спермиев. У других этот процесс сильно нарушен, причём мутации затрагивают не только форму и размеры головок спермиев, но и внутреннюю организацию ядерного хроматина. Длительное воздействие карнозина вызывает деструкцию большинства семенных канальцев в гонадах мышей SAMP1, в то время как у мышей SAMR1, получавших карнозин, сперматогенный эпителий сохранял целостность и высокую упорядоченность.

У мышей SAMPI карнозин не вызывает существенных изменений в частоте встречаемости микроядерных аберраций в популяциях сперматогониев и округлых сперматид, но у мышей SAMR1 существенно увеличивает выход генетически аномальных половых клеток.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гопко, Антон Витальевич, 2005 год

1. Агроскин Л.С., Папаян Г.В. Цитофотометрия//М. «Наука», 1977.

2. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза// Изд-во "Мир". 1978.

3. Болдырев А.А. Карнозин: Биологическое значение и возможности применения//Издательство Московского Университета, 1998.

4. Болдырев А.А. Проблемы и перспективы исследования биологической роди карнозина//Биохимия, 2000, Т. 65, С. 884 890.

5. Болдырев А.А., Юнева М.О., Сорокина Е.В. с соавт. Антиоксидантные системы в тканях мышей линий SAM (senescence-accelerated mice), характеризующейся ускоренным процессом старения//Биохимия, 2001, т. 66, С. 1430-1437.

6. Габаева Н.С. О строении и функциях фолликулярного эпителия семенников позвоночных//В кн. «Современные проблемы сперматогенеза», 1982, М.: Наука, С. 108 159.

7. Галлант С., Семёнова М., Юнева М. Карнозин как потенциальное «средство» против старения//Биохимия, 2000, Т. 65, С. 1018 1021.

8. Гордеева О.Ф. Особенности развития мужских половых клеток у ускоренно стареющих мышей линий SAM (senescence-accelerated гшсе)//Диссертация на соискаие учёной степени кандидата биологических наук, 2000, Москва, ИБР РАН.

9. Ю.Гусев В. А., Панченко Л. Ф. Современные концепции свободнорадикальной теории старения//Нейрохимия, 1997, т. 14, №1, с. 14-28.

10. Данилова Л.В. Сперматогонии, сперматоциты, сперматиды//В кн. «Современные проблемы сперматогенеза», 1982, М.: «Наука», С. 25 72.

11. Данилова Л.В. Полиморфизм сперматозооидов и атипичный сперматогенез//В кн. «Сперматогенез и его регуляция», 1983, М., «Наука», С. 98 140.

12. И.Егоров Е.Е., Семёнова И.В. с соавт. Корреляция выживаемости эмбриональных фибробластов и их пролиферативного потенциала с продолжительностью жизни мышей различных линий//Биологические мембраны, 2000, Т. 17, С. 685 688.

13. Захидов СТ. Процессы нормального и атипичного сперматогенеза у животных. //Автореф. Дис. Докт. Биол. Наук., М., изд-во МГУ. 1993.

14. Захидов С.Т., Маршак Т.Л., Махран Х.А.Х., Голиченков В.А. Изв. РАН, сер. биол. 1994, N6, с.870-879.

15. Захидов С.Т., Маршак Т.Л., Голиченков В.А. Возможность перехода высокодифференцированных клеток Сертоли к пролиферации после действия химических мутагенов//ДАН, 1995, т. 3446 С. 692 694.

16. Захидов С. Т. Современные достижения в исследованиях проблемы сперматогенеза//В кн. «Проблемы репродуктивной биологии в трудах профессора С. И. Кулаева и его последователей», 1998, М.: Изд во Московского ун - та, С. 234 - 259.

17. Захидов СТ. Развитие с ускоренным старением//В кн. "Синергетика", Изд-во МГУ, Труды семинара, 1999. т. 6. С. 155 159.

18. Захидов СТ., М.Л.Семенова, О.Ф.Гордеева, А.А.Беляева. Сперматогенез у мышей линии SAMP1, склонных к ускоренному старению// ДАН. 1999. Т. 365. С 403-405.

19. Климонтович Ю.Л. Синергетика//М., Изд-во МГУ, 2000, т.З, с.368.

20. Курносова Т.Р. Деструкция и регенерация семенных канальцев после локального рентгеновского облучения семенников половозрелых крыс// Онтогенез, 1987, Т. 18, С. 183-191.

21. Райцина С. С. Цикл сперматогенного эпителия и кинетика сперматогенеза у млекопитающих//В кн. «Современные проблемы сперматогенеза», 1982, М.: Наука, С. 73- 107.

22. Рапопорт И.А. Микрогенетика//М., "Наука". 1965. С. 426.

23. Розенфельд С.В., Того Е.Ф. с соавт. Возрастная динамика частоты хромосомных повреждений у самцов мышей разных линий//Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2001, Т. 131, С. 568 570.

24. Розенфельд С.В., Того Е.Ф. с соавт. Влияние эпиталона на частоту хромосомных повреждений у мышей SAM с ускоренным старением// Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 2002, Т. 133, С. 320 -322.

25. Рузен-Ранге Э. Сперматогенез у животных//М., «Мир», 1980.

26. Скулачёв В.П. Сто лет открытию Гулевича//Биохимия, 2000, т. 65, С. 883.

27. Тюлина О.В., Каган В.Е., Болдырев А.А. Модулирующий эффект карнозина и родственных соединений на дыхательный взрыв лейкоцитов, активированных сульфатом бария//Бюл. эксп. биол. мед, 1994, Т. 118, С. 463-466.

28. Урываева И.В., Фактор В.М. Фракция роста печени, ее состав по плоидности и изменение при старении// Онтогенез. 1975. Т. 6. С. 458-465.

29. Урываева И.В., Маршак Т.Л., Захидов СТ., Семенова М.Л., Делоне Г.В. Накопление с возрастом микроядерных аберраций в клетках печени ускоренно стареющих мышей линий БАМ//Докл. РАН. 1999. Т. 368. С 703-705.

30. Хипкис А.Р. Карнозин и карбонильные группы белка: возможная взаимосвязь//Биохимия, 2000, т. 65, С. 907 916.

31. Холлидей Р., МакФарланд Г.А. Роль карнозина в поддержании жизнедеятельности клеток//Биохимия, 2000, т. 65, С. 991 — 997.

32. Allan DJ, Harmon BV, Kerr JFR. Cell death in spermatogenesis//^: Potten CS (ed) Perspectives on mammalian cell death. Oxford University Press, Oxford, 1987, pp. 229-258.

33. Allan DJ, Harmon BV, Roberts SA. Spermatogonial apoptosis has three morphologically recognizable phases and shows no circadian rhythm during during normal spermatogenesis in rat//Cell Prolif, 1992, Vol. 25 pp. 241 -250.

34. Bellgrau D, Gold D, Selawry H et al. A role for CD95 ligand in preventing graft rejection//Nature, 1995, Vol. 337, pp. 630 632.

35. Billig H, Furuta I, Rivier С et al. Apoptosis in testis germ cells: developmental changes in gonadotropin dependence and localization to selective tubule stages//Endocrinology, 1995, Vol. 136, pp. 5 12.

36. Bianco-Rodriguez J, Martinez-Garcia C. Spontaneous germ cell death in the testis of the adult rat takes the form ov apoptosis: re-evaluation of cell types that exhibit the ability to die during spermatogenesis//Cell Prolif, 1996, Vol. 29, pp. 13-31.

37. Boekelheide K, Lee J, Shipp EB et al. Expression of Fas system-related genes in the testis during development and after toxicant exposure//Toxicol Lett, 1998, Vol. 102 103, pp. 503 - 508.

38. Braun RE, Behringer RR, Peschon JJ et al. Genetically haploid spermatids are phenotypically diploid//Nature, 1989, Vol. 337, pp. 373 375.

39. Bustos-Obregon E, Ramirez O. Ageing and testicular function in Octogon degMs//Andrologia, 1997, Vol. 29, pp. 319 326.

40. Carp RI, Meeker HC, Kozlowski P, Sersen EA. An endogenous retrovirus and exogenous scrapie in a mouse model of aging//Trends in Microbiology, 2000, Vol. 8, pp. 39-42.

41. Chan WKM, Decker EA, Chow CK et al. Effect of dietary on plasma and tissue antioxidant concentrations and on lipid oxidation in rat skeletal muscle//Lipids, 1994, Vol. 29, pp. 461 -466.

42. Chiarini-Garcia H, Russell LD. High resolution light microscopic characterization of mouse spermatogonia// Biol. Reprod., 2001, Vol. 65, pp 1170- 1178.

43. Chiarini-Garcia H, Rayner AM, Russell LD. Non-random distribution of spermatogonia in rats: evidence of niches in the seminiferous tubules//Reproduction, 2003, Vol. 126, pp. 669 680.

44. Cho C, Jung-Ha H, Willis WD et al. Protamine 2 deficiency leads to sperm DNA damage and embryo death in mice//Biol. Reprod., 2003, Vol. 69, pp. 211 -217.

45. Clermont Y. Quantitative analysis of spermatogenesis in the rat: arevised model for the renewal of spermatogonia//Am J Anat, 1962, Vol. 111, pp. 111129.

46. Cobellis G, Meccariello R, Pierantoni R, Fasano S. Intratesticular signals for progression of germ cell stages in vertebrates//General and Comparative Endocrinology, 2003, Vol. 134, pp. 220 228.

47. Coucouvanis EC, Sherwood SW, Carswell-Crumpton С et al. Evidence that the mechanism of prenatal germ cell death in the mouse is apoptosis//Exp. Cell Res., 1993, Vol. 209, pp. 238-247.

48. Dawkins R. The Extended Phenotype//Oxford University Press, 1982.

49. Dolle M.E., Giese H., van Steeg H., Vijg J. Mutation accumulation in vivo and the importance of genome stability in aging and cancer//Results Probl. Cell Differ. 2000. V. 29. P. 165-180.

50. Eddy EM. Role of heat shock protein HSP70-2 in spermatogenesis//Rev. Reprod., 1999, Vol. 4, pp. 23 30.

51. Fawcett DW. Intercellular bridges//Exp. Cell Res. Suppl., 1961, vol. 1, pp. 174 187.

52. Franca LR, Godinho CL. Testis morphometry, seminiferous epithelium cycle length, and daily sperm production in domestic cats//Biol. Reprod., 2003, Vol. 68, pp. 1554- 1561.

53. Freire R, Mirguia JR, Tarsounas M et al. Human and mouse homologs of S. pombe radl and Saccaromyces cerevisae RAD 17: linkage to checkpoint control and mammalian meiosis//Genes Dev, 1998, Vol. 12, pp. 2560 2573.

54. French LE, Hahne M, Viard I et al. Fas and Fas ligand in embryos and adult mice: ligand expression in several immune-privileged tissues and coexpression in adult tissues caractrized by apoptotic cell turnover//.! Cell Biol, 1996, Vol. 133, pp. 335-343.

55. Furuchi T, Masuko K., Nishimune Y., et al.// Inhibition of testicular germ cells apoptosis and differentiaton in mice expressing Bcl-2 in spermatogonia// Development. 1996. V. 122. P. 1703-1709.

56. Geiger H., Zant G.V. 2002. The aging of limpho-hematopoietic stem cells// Nature immunolgy, V.3, P.329-333.

57. Hacker-Klom UB. Age dependence of murine spermatogenesis, 1995, Z Naturforsch. Mar-Apr;50(3-4) pp. 303-10

58. Hasty P, Vijg J Genomic priorities in ageing//Science,2002, vol. 296, pp. 1250 -1251.

59. Haywood M, Spaliviero J, Jimenez M et al. Sertoli and germ cell development in hypogonadal (hpg) mice expressing transgenic follicle-stimulating hormone alone or in combination with testosterone// Endocrinology, 2003, Vol. 144, pp. 509-517.

60. Не Р, Yasumoto К. Dietary butylated hydroxytoluene counteracts with paraquat to reduce the rate of hepatic DNA single strand breaks in senescence-accelerated mice//Mech. Ageing Dev. 1994. V. 76. P. 43 48.

61. Headle JA, Hite M, Kirkhart В et al. The induction of micronuclei as a measure of genotoxicity//Mutat. Res., 1983, Vol. 123, pp. 61 118.

62. Higuchi K., Wang J., Kitagawa K'., et al. Accelerated senile amyloidosis induced by amyloidogenic Apoa-II gene shortens the life span of mice but does not accelerate the rate of senescence// J. Gerontol. 1996. V. 51. P. 295-302.

63. Higuchi K. Genetic characterisation of senescence-accelerated mouse (SAM)//Experimental Gerontology, 1997, V. 32, P. 129 138.

64. Hipkiss AR. Carnosine, a protective, anti-ageing peptide?//The International Journal of Biochemistry and Cell Biology, 1998, Vol. 30, pp. 863 868.

65. Hosokawa M., Fuisawa H., Zhu Bing-Hua, et al. In vitro study of the mechanisms of senescence acceleration// Exp. Gerotol. 1997. V. 32. P. 197203.

66. Hosokawa M. A higher oxidative status accelerates senescence and aggravates age-dependent disorders in SAMP strains of mice// Mech Ageing Dev., 2002, Nov;123(12):1553- 1561.

67. Johnson F.B., Sinclair D.A., Guarente L. Molecular biology of aging// Cell, 1999. V. 96. P. 291-302.

68. Johnson RS, Spiegelman BM, Papaioannou V. Pleiotropic effects of a null mutation in the c-fos proto-oncogene//Cell, 1992, Vol. 71, pp. 577 586.

69. Johnson Т.Е. Genetic influences on aging// Exper. Gerontol. 1997. V. 32. P. 11-22.

70. Kanadsu-Shinohara M, Toyokuni S, Morimoto T et al. Functional assessment of self-renewal activity of male germ-line stem cells following cytotoxic damage and serial transplantation//Biol. Reprod., 2003, Vol. 68, pp. 1801 — 1807.

71. Kashiwabara S, Noguchi J, Zhuang T et al. Regulation of spermatogenesis by testis-specific, cytoplasmic poly(A)polymerase TPAP//Sciense, 2002, Vol. 298, pp. 1999-2002.

72. Koji T. Nonradioaktive in situ nick translation: a useful molecular histochemical tool to detect single-stranded DNA breaks//Acta Histochem Cytochem, 1996, Vol. 29, pp. 71 79.

73. Koji Т., Wang R-A. Male germ cell death in mouse testes//In: Yamada T, Hashimoto Y (eds) Apoptosis: its role and mechanism. Business Center for Academic Societies Japan, Tokyo, 1998, pp. 85 96.

74. Koji T. Male germ cell death in mouse testes: possible involvement of Fas and Fas ligand//Med Electron Microsc, 2001, Vol. 34, pp. 213 222.

75. Koji T, Hishikawa Y, Ando H et al. Expression of Fas and Fas ligand in normal and ischemia-reperfusion testes: involvement of the Fas system in the induction of germ cell apoptosis in the damaged mouse testis//Biol Reprod, 2001, Vol. 64, pp. 946-954.

76. Krishnamurthy H, Danilovich N, Morales CR, Sairam MR. Qualitative and quantitative decline in spermatogenesis of the follicle-stimulating hormone receptor knockout (FORKO) mouse// Biol Reprod, 2000, Vol. 62, pp. 1146 -1159.

77. Kuro-o M., Matsumura Y., Aizawa H., et al. Mutation of the mouse Klotho gene leads to a syndrome resembling ageing//Nature. 1998. V. 390. P. 45-51.

78. Kuro-o M. Disease model: human aging//Trends in Molecular Medicine, 2001, Vol. 7,pp. 179-181.

79. Lee J, Richburg J, Shipp E et al. The Fas system, a regulator of germ cell apoptosis, is differentially up-regulated in Sertoli cell versus germ cell injury of the testis//Endocrinology, 1999, Vol. 140, pp. 852 858.

80. Lindahl T. Supression of spontaneous mutagenesis in human cells by DNA base excision-repair// Mutat. Res. 2000. V. 462. P. 129-135.

81. Lithgow G.J.,Andersen J.K. The real Dorian Grey mouse // BioEssay. 2000. V.22. P. 410-413.

82. Lutz W.K. Endogenous genotoxic agents and processes as a basis of spontaneous carcinogenesis//Mutat. Res. 1990. V. 275. P. 305-315.

83. Maier B, Gluba W, Bernier В et al. Modulation of mammalian life span by the short isoform of p53//Genes & Development, 2004, Vol. 18, pp. 306 319.

84. McClearn G.E. Biogerontologic theories// Exp. Gerontol. 1997. V. 32. P. 3-10.

85. McLaren A. Mammalian germ cells: birth, sex, and immortality//Cell Structure and Function, 2001, Vol. 26, pp. 119 122.

86. McLean DJ, Friel PJ, Johnston DS, Griswold MD Characterisation of spermatogonial stem cells maturation and differentiation in neonatal mice//Biol. Reprod., 2003, Vol. 69, pp. 2085-2091.

87. Medvedev Z.A. On the immortality of the germ line: genetic and biochemical mechanism. A review. // Mech. Ageing Dev. 1981. V. 17. P. 331 -359.

88. Meistrich ML, Hunter RV, Suzuki N et al. Gradual regeneration of mouse testicular stem cells after exposure to ionizing radiation/VRadiat. Res., 1978, Vol. 74, pp. 349-362.

89. Mendoza-Lujambio I, Burfeind P, Dixkens С et al. The Hookl gene is nonfunctional in the abnormal spermatozoon head shape (azh) mutant mouse//Human Molecular Genetics, 2002, Vol. 11, pp. 1647-1658,2002

90. Miething A. Germ-cell death during prespermatogenesis in the testis of the golden hamster//Cell Tissue Res, 1992, Vol. 267, pp. 583 590.

91. Miyamoto H., Manabe N., Akiyama Y., Mitani Y., Sugimoto M., Sato E. 1994 Quantative studies on spermatogenesis in the senescence-accelerated mouse//The SAM Model of Senescence, Excerpta Medica, Elsevier Science B. V., Amsterdam.

92. Monnat R.J., Loeb L.A. Mechanisms of neoplastic transformation// Cancer Invest. 1983. V. l.P. 175-183.

93. Muller W.U., Streffer С 1994. Micronucleus assays// In: Advances in Mutagenesis Research (ed. by G.Obe) Springer Verlag, Berlin-Heidelberg-New York. 1994. P. 4-134.

94. Munsie M, Schlatt S, deKretser DM, Loveland KL. Expression of stem cell factor in the postnatal rat testis//Mol. Reprod. Dev., 1997, Vol. 47, pp. 19 25.

95. Nagano R, Tabata S, Nakanishi Y et al. Reproliferation and relocation of mouse male germ cells (gonocytes) during prespermatogenesis//Anat. Rec., 2000, Vol. 258, pp. 210-230.

96. Nagata S, Golstein P. The Fas death factor//Science, 1995, Vol. 267, pp. 1449- 1456.

97. Nandi S, Baneijee PP, Zirkin BR. Germ cell apoptosis in the testes of Sprague Dawley rats following tastosterone withdrawal by ethane 1,2-dimethane sulfonate administration: relationship to Fas?// Biol Reprod, 1999, Vol. 61, pp. 70-75.

98. Nisitani S., Hosokawa M., Sasaki M.S. et al. Acceleration of chromosome aberrations in the senescence-accelerated stains of mice//Mutat. Res. 1990. V. 237. P. 221-228.

99. Nonclercq D, Reverse D, Toubeau G et al. In situ demonstration of germinal cell apoptosis during diethilstilbestrol-induced testis regression in adult male Syrian Hamsters//Biol Reprod, 1996, Vol. 55, pp. 1368 1376.

100. Ohbo K, Yoshida S, Ohmura M et al. Identification and characterization of stem cells in prepubertal spermatogenesis in mice//Developmental Biology, 2003, Vol., 258, pp. 209 225.

101. Packer Al, Besmer P, Bacharova RF. Kit ligand mediates survival of type A spermatogonia and dividing spermatocytes in postnatal mouse testes//Mol Reprod Dev, 1995, Vol. 42, pp. 303 310.

102. Pavlov AR, Revina AA, Dupin AM et al. The mechanism of interaction of carnosine with superoxide radicals in water solutions//Biochim. Biophys. Acta, 1993, Vol. 1157, pp. 304 312.

103. Pierantoni R, Cobellis G, Meccariello R, Fasano S. Evolutionary aspects of cellular communication in the vertebrate hypothalamo-hypophysio-gonadalaxis//Int. Rev. Cytol., 2002, Vol. 218, pp. 69 141.

104. Plant T, Marshall G. The functional significance of FSH in spermatogenesis and the control of its secretion in male primates//Endocr. Rev., 2001, Vol. 22, pp. 764 786.

105. Poss KD, Nechiporuk A, Stringer KF et al.Germ cell aneuploidy in zebrafish with mutations in the mitotic checkpoint gene mpsl//Genes & Development, 2004, Vol. 18 pp. 1527 1532.

106. Print C.G., Loveland K.L., Gibson L., et al. Apoptosis regulator bcl-w is essential for spermatogenesis but appears otherwise redundant// PNAS, 1998, V. 95. P. 12421-12431.

107. Richburg JH, Nanez A, Williams LR et al. Sensivity of testicular germ cells to toxicant-induced apoptosis in gld mice that express a nonfunctional form of Fas ligand//Endocrinology, 2000, Vol. 141, pp. 787 793.

108. Riggs J.E. Aging, increasing genomic entropy, and neurodegenerative disease//NeuroI. Clin. 1999. V. 16. P. 757-770.

109. Roosen-Runge EC. Germinal cell loss in normal metazoan spermatogenesis//.!. Reprod. Fertil., 1973, Vol. 35, pp. 339-235.

110. Rotter V., Schwartz D., Almon E., et al.// Mice with induced level of protein exhibit the testicular giant-cell degenerative syndrome// PNAS. 1993. V. 90. P. 9075-9079.

111. Ross A., Waimare K., Moss J., et al.// Testicular degeneration in Bcl-w-deficient mice//Nature, genetic. 1998. V. 18. P. 251-256

112. Russell LD, Clermont Y. Degeneration of germ cells in normal, hypophysectomized and hormone treated hypophysectomized rats//Anat Rec, 1997, Vol. 187, pp. 347-366.

113. Sassone-Corsi P. Unique chromatine remodelling and transcriptional regulation in spermatogenesis//Science, 2002, Vol. 296, pp. 2176-2178.

114. Schoeffner DJ, Warren DA, Muralidara S et al. Organ weights and fat volume in rats as a function of strain and age//J Toxicol Environ Health A., 1999, Apr 9;56(7):449-62.

115. Schmid W., 1975 The micronucleus test // Mut. res., V. 31, P. 9 15.

116. Schultze C. Response of the human testis to long-term estrogen treatment: morphology of Sertoli cells, leydig cells and spermatogonial stem cells//Cell Tissue Res, 1988, Vol. 251, pp. 31 -43.

117. Schwartz D., Goldfinger N. Kam Z., Rotter V. p53 control low DNA damage-dependent premeiotic checkpoint and facilitates DNA repair during spermatogenesis// Cell Growth Differ. 1999. V. 10. P. 665-675.

118. Selva DM, Tirado ОМ, Toran M et al. Meiotic arrest and germ cell apoptosis in androgen-binding protein transgenic mice//Endocrinology, 2000, Vol. 141, pp. 1168- 1178.

119. Shimizu N., Itoh N., Utiyama H., Wahl G.M. Selective enrapment of extrachromosomally amplified DNA by nuclear budding and micronucleation during S phase//J.Cell Biol. 1998. V.140. P. 1307 1320.

120. Shimura M., Tanaka Y., Nakamura S. et al. Micronuclei formation and aneuploidy induced by Vpr, an accessory gene of Human immunodeficiency virus type III//FASEB J. 1999. V.13. P. 621- 637.

121. Shirashi K, Naito K, Yoshito K. Nitric oxide promotes germ cell necrosis in the delayed phase after experimental testicular torsion of rat//Biol Reprod, 2001, Vol. 65, pp. 514 521.

122. Simons J.W. Coming of age: "dysgenetics" a theory connecting induction of persistent delayed genomic instability with disturbed cellular ageing// Int. J. Radiat. Biol. 2000. V. 76. P. 1533-1543.

123. Siu MKY, Cheng CY Dynamic cross-talk between cells and the extracellular matrix in the testis//BioEssays, 2004, Vol. 26, pp. 978 992.

124. Slagboom P.E. The aging genome: determinant or target?// Mutat. Res. 1990. V. 237. P. 183-187.

125. Steinberger E. Establishment of the male reproductive biology club//J. Androl., 2000, Vol. 21, pp. 164 173.

126. Strehler B.L. Deletional mutations are the basic cause of aging: historical perspectives// Mutat. Res. 1995. V. 338. P. 3-17.

127. Suzuki N., Withers H.R. 1978. Exponential decrease during aging and random lifetime of mouse spermatogonial stem cells// Science, 1978, V.202, P.1314-1315.

128. Szilard L. On the nature of the aging process// PNAS. 1959. V. 45. P. 30-45.

129. Takeda Т., Hosokawa M., Takeshita S., et al. A new murine model of accelerated senescence//Mech. Aging Dev. 1981. V. 17. P. 183-194.

130. Takeda Т., Hosokawa M., Huguchi K. Senescence-accelerated mouse (SAM). A novel murine model of aging// In: The SAM model of senescence (ed. Takeda Т.), Amsterdam-London-New York-Tokyo, Excerpta Medica. 1994. P. 15-22.

131. Takeda Т., Hosokawa M., Higuchi K. Senescence-accelerated mouse (SAM): A novel murine model of senescence// Exp. Gerontol. 1997a. V. 32. P. 105-109.

132. Takeda Т., Matsushita Т., Kurozumi M., et al. Pathobiology of the senescence-accelerated mouse (SAM)// Exp. Gerontol. 1997b. V. 32. P. 117127.

133. Tegelenbosch R, de Rooij D A Quantitative study of spermatogonial multiplication stem cell renewal in the C3H/101F1 hybrid mouse//Mutat. Res.,1993, Vol. 290, pp. 193-200.

134. Thepot D, Weitzman JB, Barra J et al. Targeted disruption of the murine junD gene results in multiple defects in male reproductive fiinction//Development, 2000, Vol. 127, pp. 143- 153.

135. Vijg J. Somatic mutations and aging: a re-evaluation// Mutat. Res. 2000. V. 447. P. 117-135.

136. Warner HR, Sierra F. Models of accelerated ageing can be informative about the molecular mechanisms of ageing and/or age-related pathology//Mechanisms of Ageing and Development, 2003, Vol. 124, pp. 581 -587.

137. Wirobek A., Bruce W. 1978 The induction of sperm-shape abnormalities in mice and humans // Chemical mutagens, V.5, Plenum press, N. Y. London, P. 258 - 286.

138. Woolveridge I, de Boer-Brouwer M., Taylor MF et al. Apoptosis in the rat spermatogenic epithelium following androgen withdrawal: changes in apoptosis-related genes// Biol Reprod, 1999, Vol. 60, pp. 461 470.

139. Xia C, Higuchi K., Shimizu M., et al. Genetic typing of the senescence-accelerated mouse (SAM) strains with microsatellite markers// Mamm Genome. 1999. V. 10. P. 235-238.

140. Yamagimachi R, Wayakama T, Kishikawa H et al. Production of fertile offspring from genetically infertile male mice//PNAS, 2004, vol. 101, pp. 1691 -1695

141. Yan W., Samson M., Jegou В., Toppori J.// Bcl-w forms complexes with Bax and Bak, and elevated ratios of spermatocyte apoptosis in the testis // Molecular Endocrinol. 2000. V. 14. P. 682-699.

142. Yin Y, Dewolf WC, Morgentaler A. Experimental cryptorchidism induces testicular germ cell apoptosis by p53-dependent and -independent pathways in mice//Biol Reprod, 1998, Vol. 58, pp. 492 496.

143. Yoshinaga К, Nishikawa S, Ogawa M et al. Role of c-kit in mouse spermatogenesis: identification of spermatogonia as a specific site of c-kit expression and function// Development, 1991, Vol. 113, pp. 689 699.

144. Yuan L, Liu JG, Zhao J et al. The murine SCP3 gene is required synaptonemal complex assembly, chromosome synapsis, and male fertility//Mol. Cell., 2000, Vol. 5, pp. 73 83.