Характеристика ревертантов к прототрофности штаммов бактерий в условиях аминокислотного голодания тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.03, кандидат биологических наук Мона Али Фарид Ибрахим Саляма

• Мона Али Фарид Ибрахим Саляма
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мона Али Фарид Ибрахим Саляма

Введение.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Доказательства преадаптивного характера мутаций.

1.2. Адаптивный характер мутаций.

1.3. Клетки в условиях аминокислотногоголодания.

1.4. Механизм возникновения адаптивных мутаций.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1 Использоемые бактериальные штаммы и питательные среды.

2.2. Методы.

2.2.1. Характеристика роста штаммов.

2.2.2. Определение частоты возникновения реверсий.

2.2.3. Флуктуационный тест Лурия-Дельбрюка.

2.2.4. Метод Ли и Коулсона.

2.2.5. Определение частоты встречаемости ревертантов к прототрофности в неделящихся клетках бактерий.

2.2.6. Регуляция уровня транскрипции лейцинового оперона В. Subtilis.

2.2.7. Выделение хромосомной ДНК.

2.2.8. Генетическая трансформация клеток В. subtilis

2.2.9. ГШР-амплификация фрагмента гена his С.

2.2.10. Анализ продуктов амплификации в агарозном геле и очистка получившихся ПЦР-продуктов.

2.2.11. Выделение ДНК из агарозного геля.

2.2.12. Рестрикционный анализ ПЦР-фрагментов.

2.2.13. Определение нуклеотидной последовательности Парное выравнивание полученных последовательностей.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Характеристика мутации his С штамма SB-3922 В. Subtilis

3.2. Частота спонтанных реверсий к прототрофности в активно делящихся клетках бактерий.

3.3. Частота встречаемости ревертантов в голодающих культурах.

3.4. Влияние уровня транскрипции на частоту возникновения ревертантов в голодающих клетках бактерий.

3.5. Влияние системы "стресс - ответа" на частоту возникновения спонтанных ревертантов.