Клиническое значение некоторых тканевых маркеров метастазирования при раке желудка тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Юрченко, Антон Андреевич

• Юрченко, Антон Андреевич
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Юрченко, Антон Андреевич

Введение.

ГЛАВА 1. Обзор литературы. Современные данные о распространенности и клиническом течении рака желудка, а также экспрессии nm23 и основных компонентов системы активации плазминогена в опухоли.

1.1. Современные данные о распространенности рака желудка и особенностях его клинического течения.

1.2. Активаторы и ингибиторы системы активации плазминогена в опухолях человека.

1.3. Экспрессия белка nm23 в опухолях.

ГЛАВА 2. Характеристика больных и методы исследования.

2.1. Общая характеристика обследованных больных.

2.2.Специальные лабораторные методы исследования.

2.3. Статистический анализ результатов исследования.

ГЛАВА 3. Экспрессия nm23 и содержание основных компонентов системы активации плазминогена в первичных опухолях больных раком желудка (результаты собственных исследований).

3.1. Возрастные особенности больных раком желудка.

3.2. Связь пола и стадии заболевания с некоторыми клиническими показателями у больных раком желудка.

3.3. Связь показателя uPA системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка с некоторыми клиническими факторами.

3.4. Связь показателя tPA системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка с некоторыми клиническими факторами.

3.5. Связь показателя PAI-1 системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка с учетом некоторых клинических факторови.

3.6. Корреляционные связи показателей системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка.

3.7. Иммуногистохимический анализ экспрессии молекулярно-биологического маркера nm23 и его связь с некоторыми клиническими признаками, а также с показателями системы активации плазминогена у больных раком желудка.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клиническое значение некоторых тканевых маркеров метастазирования при раке желудка»

Актуальность темы. Ежегодно в мире раком желудка заболевают более 1 млн. человек (Мерабишвили В.М., 2004). При этом в подавляющем большинстве стран заболеваемость раком желудка у мужчин в 2 раза выше, чем у женщин (Гарин A.M. и соавт., 2006). Однако уровень заболеваемости колеблется в достаточно широких пределах. Так, по данным МАИР в издании «Рак на 5 континентах» (т.7) максимальный уровень заболеваемости раком желудка отмечен у мужчин Японии (114,7), а минимальный - у белых женщин США (Чиссов В.М. и соавт., 2000; Мерабишвили В.М., 2001).

Наиболее высокие показатели заболеваемости раком желудка регистрируются в Японии, Китае, России, Белоруссии, Эстонии, Латвии, Новой Зеландии (Давыдов М.И.и соавт., 2006).

Программы скрининга рака желудка не работают нигде, кроме Японии (Мерабишвили В.М., 2004). Это связано с тем, что неизвестен специфический причинный фактор заболевания.

Необходимо отметить существующие различия диагностических критериев рака желудка у японских и западных патологоанатомов. Как указывает Schlemper R.J.et al. (1997), в Японии принято диагностировать рак желудка, руководствуясь нуклеарными и структурными критериями, даже в отсутствии инвазии, как это принято на Западе. Такой подход не может не оказать влияния как на уровень заболеваемости населения раком желудка, так и на эффективность его лечения.

В последние годы большое внимание при анализе причины возникновения рака желудка исследователи уделяют роли Helicobacter pylori (Аруин Л.И., 1997). В 1983 г. Marshall В.J., изучая биоптаты слизистой оболочки желудка больных язвенной болезнью, обнаружил и описал микроорганизм, классифицированный как Helicobacter pylori, в последствии признанный ведущим в этиологии хронического неиммунного антрального гастрита, исследователей заинтересовали его связи с возникновением рака желудка. При этом было показано исследователями в США и Англии, что риск возникновения рака желудка у инфицированных больных в 3,8 рака выше по сравнению с неинфицированными больными. Проспективные исследования выявили инфицированность Helicobacter pylori в 90%, а при исключении рака кардии этот процент становился еще выше. Гистологическое исследование биоптатов, проведенное японскими исследователями на наличие Helicobacter pylori у 68 пациентов с cancer in situ, показало, что Helicobacter pylori обнаружен у 86% больных с карциномой in situ кишечного типа и менее чем у половины обследованных с ранним раком диффузного типа (Endo S. et al., 1995). По классификации ВОЗ Helicobacter pylori относится к группе I - явные канцерогены. В патогенетической цепочке норма - поверхностный гастрит -атрофический гастрит - тонкокишечная метаплазия - толстокишечная метаплазия — дисплазия - рак желудка, Helicobacter pylori играет важную роль в первом, третьем и четвертом звеньях (Brissiand J.C. и соавт., 1998). Однако, маловероятно, что Helicobacter pylori является единственным фактором, ответственным за развитие рака желудка. Вместе с тем, важно, что он еще создает среду, способствующую реализации его канцерогенного потенциала (Исаков В.А. и соавт., 2003). Как указывают Walt B.et al. (1998), широкий прием антибиотиков людьми, инфицированными Helicobacter pylori, не дает ожидаемого эффекта и слишком дорог (Харченко В.П.и соавт., 1999).

В структуре онкологической заболеваемости и смертности населения России рак желудка занимает второе место после рака легкого (Чиссов В.И.и соавт., 2000). Ежегодно в России учитывается 48,8 тыс. новых случаев рака желудка и 45 тыс. больных умирает от рака желудка.

Наиболее высокий уровень заболеваемости раком желудка характерен для мужчин в возрасте 70 лет и старше (307,2), что в 68,2 раза больше, чем у 30-летних. У женщин отмечена та же тенденция, но на меньших в 2 раза показателях.

В среднем по России пациенты, отнесенные к IV стадии заболевания по раку желудка составляют 42,6%, а величина одногодичной летальности в среднем по России составляет приблизительно 56%. К сожалению, у 75% первично выявленных больных заболевание диагностируется в III-IV стадии, что предопределяет неудовлетворительные результаты лечения (Симонов Н.Н.и соавт., 2004). Частота обнаружения ранних форм рака желудка не превышает 10-20%, а у 83% больных при первично выявленном раке желудка уже существуют регионарные метастазы.

Морфологически рак желудка верифицирован по России в 71,6% (Чиссов В.И.и соавт., 2000). При этом подавляющую часть опухолей желудка составляют аденокарцинома и рак.

Основным и практически единственным методом радикального лечения рака желудка на сегодняшний день является операция, которая в ряде случаев позволяет добиться полного излечения (Давыдов М.И. и соавт., 2004). На основании предоперационных клинико-инструментальных методов обследования возможно получение исчерпывающей информации об особенностях опухолевого роста внутри желудка определить локализацию опухоли, протяженность поражения, анатомическую форму роста с подробным характером изъязвления, распространение опухолевой инфильтрации по окружности желудочной стенки, а также переход инфильтрации на пищевод, наличие интрамуральных метастазов. В последние годы многие авторы публикуют данные о достаточно высокой эффективности применения эндоскопического УЗИ для оценки глубины инвазии стенки желудка и предоперационного определения символа сТ (Uenosono Y. и соавт., 2001). Метод характеризуется достаточно высокой чувствительностью (76,3%). Причем наибольшая достоверность данного исследования отмечается при опухолях, ограниченных слизистой оболочкой -подслизистым слоем (сТ1) - 87,1%, а также при прорастании серозной оболочки, либо вовлечении окружающих структур (сТЗ/Т4) - 76,9%. В случаях, когда глубина инвазии ограничивается мышечной оболочкой, особенно при прорастании до уровня субсерозы, зачастую происходит гипердиагностика глубины инвазии, что отражается и на достоверности метода - 51,4% (Uenosono Y. et al., 2001).

Пятилетняя выживаемость больных раком желудка в европейских странах составила: у мужчин от 8,4 до 25,3%, а у женщин - от 10,1 до 32,1%. В большинстве стран Европы 5-летняя выживаемость женщин существенно выше не только по итоговому показателю, но и по возрастным группам. Наибольшие различия установлены для больных с разными стадиями опухолевого процесса.

Вместе с тем, остается окончательно не решенной проблема прогнозирования течения заболевания у больных раком желудка после радикального лечения. Известно, что прогноз заболевания в значительной степени определяется рядом морфологических прогностических факторов, которые тесно связаны с «биологическим поведением» опухоли и среди них: стадия заболевания (классификация TNM), тип роста, степень инвазии и дифференцировки опухоли, наличие регионарных метастазов (Давыдов М.И. и соавт., 2004). Однако использование только этих критериев явно недостаточно для оценки характера течения и прогноза заболевания.

В настоящее время интенсивно разрабатываются и внедряются в клиническую практику дополнительные молекулярно-биологические методы исследования, которые характеризуют степень агрессивности опухолевого процесса и, кроме того, позволяют индивидуализировать прогноз клинического течения и чувствительность опухоли к проводимой терапии (Лазарев А.Ф. и соавт., 2006). Среди них широкое распространение получили тканевые маркеры и, в частности, система активации плазминогена и белок nm23, экспрессия которых обнаружена во многих опухолях, в том числе и раке желудка.

Одним из потенциально важных маркеров, вовлеченных в процессы клеточной пролиферации, дифференцировки и контроля метастазирования при раке желудка, является белок nm23 (non-metastatic cells protein; белок NDP - nucleoside diphosphate kinase) (Ura H. et al., 1996; Ji S.Q. et al., 2002; Lee K.E. et al., 2003). Ген nm23-Hl расположен на хромосоме 17q21 и кодирует белок с относительной молекулярной массой 17 кД (Terada R. et al., 2002). Первоначально ген nm23 был описан как супрессор метастазирования, и в отдельных работах отмечалось снижение уровня экспрессии продукта гена nm23 при прогрессировании ряда опухолей человека. Однако в дальнейшем были отмечены более сложные взаимоотношения между появлением в раковых клетках белкового маркера и метастатической активностью опухоли (Kumar D.D. et al., 1999; Nesi G. et al., 2001). При этом, гиперэкспрессия белка nm23 обнаружена в некоторых злокачественных опухолях человека, таких как рак легкого, колоректальный рак, меланома, рак молочной железы, желчного пузыря, гортани. Особое внимание исследавателей было уделено изучению экспрессии белка nm23 при раке желудка (Yeung P. et al., 1998; Yoo С.Н. et al., 1999; Lee K.E. et al., 2003). При этом, в работах Muller W. et al. (1998), Nesi G. et al. (2001) показано, что экспрессия nm23 в злокачественных опухолях желудка была ассоциирована с неблагоприятным прогнозом заболевания.

Следует отметить, что клиническая значимость экспрессии nm23 и особенностей продукции основных компонентов системы активации плазминогена в опухолях начинают только интенсивно изучаться. Однако клиническими исследованиями показано, что уровень и соотношение экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухоли может служить показателем ее метастатической и инвазивной активности, а следствие этого и биологически значимым фактором прогноза при различных новообразованиях (Герштейн Е.С.и соавт., 2004).

Изучение системы активации плазминогена проводили при различных опухолях у человека: при колоректальном раке (Голубченко О.В., 2004), раке желудка (Щербаков А.М.и соавт., 2002; Ognerubov N.A. et al., 2003), молочной железы (Герштейн Е.С. и соавт., 2004), пищевода (Кушлинский Н.Е. и соавт., 2002), опухолях костей (Юсифов А.И.,

2001), новообразованиях щитовидной железы (Харидити Т.Ю.и соавт.,

2002). При этом, исследователям удалось выявить в большинстве злокачественных опухолей различного гистогенеза значительное увеличение концентрации иРА и PAI-1 по сравнению с гомологичными нормальными тканями и доброкачественными новообразованиями (Gershtein E.S. et al., 2002).

Система активации плазминогена представляет собой протеолитический каскад, участвующий в разрушении окружающей опухоль базальной мембраны и внеклеточного матрикса, способствуя выходу опухолевых клеток из их первоначального окружения и образованию опухолевых узлов в отдаленных органах и тканях (Герштейн Е.С.и соавт., 2002). Ключевыми компонентом этой системы является сериновая протеаза - активатор плазминогена урокиназного типа (иРА), которая расщепляет плазминоген до плазмина (Огнерубов Н.А. и соавт., 2005). Плазмин уменьшает уровень внеклеточных матричных гликопротеидов и активирует некоторые про-металлопротеазы, что играет решающую роль в процессах инвазии и метастазирования (Mignatti P. et al., 1993). В ранних исследованиях изучение системы активации плазминогена в опухолях и окружающей слизистой больных раком желудка показало, что уже на ранних стадиях заболевания проявляется характерное для большинства злокачественных опухолей усиление активации плазминогена по урокиназному типу.

Известно, что активность иРА регулируется несколькими способами, в частности, подавляется двумя белковыми ингибиторами класса серпинов - PAI-1 и PAI-2 (Andreasen P.A. et al., 1990). Помимо uPA в активации плазминогена может участвовать также активатор тканевого типа (tPA), однако, его роль при развитии опухолей, по-видимому, противоположна роли иРА и сводится к разрушению опухолевых клеток и защите окружающих тканей от распространения опухоли (Bell W.R., 1996).

Уровень и соотношение экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани может служить показателем метастатической и инвазивной активности опухоли, являясь вследствие этого биологически значимым фактором прогноза при различных новообразованиях (Герштейн Е.С. и соавт., 2001, 2004; Duffy M.J. et al., 1999). Кроме того, подавление активации плазминогена по урокиназному типу может стать одним из подходов к разработке новых схем антиметастатической терапии (Schmitt М. et al., 1997).

Несмотря на то, что исследования системы активации плазминогена проводили при различных опухолях, большинству исследователей удалось выявить общую закономерность, заключающуюся в том, что в злокачественных опухолей различного гистогенеза происходит значительное увеличение концентрации иРА и PAI-1 по сравнению с гомологичными нормальными тканями и доброкачественными новообразованиями. Все это может иметь как теоретическое, так и практическое значение. С одной стороны, оно свидетельствует о том, что усиление активации плазминогена по урокиназному типу, сопровождающееся усилением защиты опухолевых клеток от саморазрушения (за счет увеличения уровня PAI-1), является достаточно универсальным признаком малигнизации. С другой стороны, повышенная экспрессия иРА в опухоли по сравнению с окружающей тканью делает этот фермент перспективной избирательной мишенью для антиметастатической противоопухолевой терапии, характеризующемся достаточно низкой чувствительностью к стандартным видам химиотерапии.

Прогноз рака желудка определяет целый ряд клинико-морфологических и молекулярно-биологических факторов. В настоящее время известно большое количество молекулярно-генетических маркеров опухолей, которые являются показателями биологической активности раковых клеток и могут быть использованы в качестве прогностических критериев в онкологической клинике. Наличие или отсутствие экспрессии отдельных маркеров делает возможной более точную оценку такого сложного, комплексного, многоступенчатого процесса как метастазирование опухоли. Вместе с тем, значение большинства этих факторов окончательно не изучено.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ изучение экспрессии белка пш23 и содержания основных компонентов системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка для оценки их взаимосвязи с основными клиническими и морфологическими характеристиками заболевания, прогнозом.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Провести иммуногистохимический анализ экспрессии белка nm23 в первичных опухолях больных раком желудка и сопоставить его показатели с основными клиническими и морфологическими характеристиками болезни.

2. Провести сравнительное изучение особенностей продукции основных компонентов системы активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в первичных опухолях у больных раком желудка.

3. Провести анализ корреляционной зависимости между содержанием основных компонентов системы активации плазминогена в опухоли больных раком желудка и клинико-морфологическими характеристиками заболевания (возраст больных, морфологический вариант строения и степень дифференцировки опухоли, стадия заболевания).

4. Определить клиническую роль особенностей экспрессии белка nm23 и продукции основных компонентов системы активации плазминогена в первичной опухоли больных раком желудка при оценке прогноза заболевания.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА ИССЛЕДОВАНИЯ

Впервые проведен анализ экспрессии белка nm23 с учетом продукции основных компонентов системы активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в первичных опухолях больных раком желудка. Анализ исследуемых показателей проведен с учетом основных клинических и морфологических характеристик заболевания, а также изучена связь выше указанных биохимических показателей с клиническим течением и прогнозом рака желудка.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Настоящая работа представляет практический интерес для анализа роли экспрессии белка nm23 с учетом основных компонентов системы активации плазминогена в первичных опухолях больных раком желудка, а результаты исследования позволили представить молекулярно-биологические критерии в оценке прогноза заболевания у этой категории пациентов. Высокие уровни продукции PAI-1 в опухоли больных раком желудка, следует считать неблагоприятным фактором прогноза общей выживаемости, которые связаны с повышенной экспрессией белка nm23 в ядрах опухолевых клеток. Количественное определение уровней экспрессии nm23 и продукции PAI-1 в первичной опухоли больных раком желудка после радикального хирургического лечения в сочетании с другими клиническими и морфологическими показателями позволят дифференцированно подходить к выбору методов адъювантного лечения этой категории пациентов и оценке прогноза болезни.

Апробация работы Материалы диссертации доложены на конференции «Национальные дни лабораторной медицины России-2005» (Москва, 11-14 октября 2005г.); на IX Российском онкологическом конгрессе (Москва, 22-24 ноября 2005г.); на Международной научно-практической конференции «Ведущий многопрофильный госпиталь страны: основные функции, достижения и направления развития» (Москва 1-2 июня 2006г.).

Диссертация апробирована 6 февраля 2007 г. на совместной научной конференции сотрудников лаборатории клинической биохимии, отдела патологической анатомии опухолей человека, хирургического отделения диагностики опухолей, торако-абдоминального отдела ГУ Российского онкологического научного центра им. Н.Н.Блохина РАМН, кафедры онкологии Московского государственного медико-стоматологического университета ФПДО.

Публикации

По материалам диссертации опубликованы 6 научных работ.

Структура и объем работы Диссертация состоит из введения, обзора литературы, главы «Характеристика обследованных больных и методы исследований», главы результатов собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов и указателя литературы. Общий объем диссертации 163 листа машинописного текста. Указатель литературы содержит 234 работы отечественных и зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 35 таблицами и 32 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Юрченко, Антон Андреевич

Выводы

1. Экспрессия белка пш23 в цитоплазме клеток рака желудка выявлена у 63% больных, а ядерная экспрессия этого белка обнаружена в опухолях 22% больных.

2. Цитоплазматическая экспрессия белка шп23 чаще выявлялась в аденокарциномах желудка, чем в перстневидноклеточном раке, а также в опухолях больных в возрасте до 50 лет по сравнению с опухолями больных старшей возрастной группы.

3. Ядерная экспрессия nm23 не была достоверно связана с основными клинико-морфологическими факторами, можно отметить лишь ее отсутствие в перстневидноклеточном раке желудка.

4. Многофакторный анализ взаимосвязи уровней иРА и PAI-1 в опухолях больных раком желудка с основными клинико-морфологическими характеристиками заболевания показал, что наиболее выраженная и достоверная связь наблюдается с возрастом пациентов, гистологическим строением опухоли и показателем Т; для tPA значимых взаимосвязей с клинико-морфологическими факторами не выявлено.

5. Взаимосвязи между уровнями иРА и экспрессией белка nm23 в цитоплазме и ядрах клеток опухолей больных раком желудка не выявлено. Концентрация PAI-1 в опухолях больных раком желудка также не была достоверно связана с уровнем экспрессии белка пш23 в цитоплазме и ядрах опухолевых клеток.

6. Отмечена положительная корреляция уровня tPA и интенсивности окрашивания цитоплазмы клеток антителами к nm23 (rs=0,4; р=0,01), взаимосвязи уровня tPA со степенью окрашивания ядер антителами к nm23 не обнаружено.

7. Из всех изученных показателей только высокий уровень медианы PAI-1 в опухоли (>0,6 нг/мг белка) является фактором неблагоприятного прогноза общей выживаемости больных раком желудка.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Рак желудка считается одной из наиболее важных проблем современного здравоохранения. В мире ежегодно регистрируется более одного миллиона новых случаев рака желудка и около 750 тысяч случаев смерти от этого заболевания (2-е место по показателям смертности после рака легких). Россия относится к странам с высокими показателями заболеваемости раком желудка - 33,4 случаев на 100000 населения (Давыдов М.И. и соавт., 2001).

Известно, что основным условием успешного лечения больных раком желудка является своевременная диагностика опухоли на ранней стадии опухолевого процесса. К сожалению, до настоящего времени результаты диагностики рака желудка в нашей стране нельзя считать удовлетворительными, что также в значительной мере относится и к странам Европы и США. Изучение ранних стадий заболевания является основой не только для улучшения результатов лечения рака желудка, но для понимания патогенеза и факторов риска возникновения опухолевого процесса. Существенный прогресс в диагностике и лечении раннего рака желудка достигнут в Японии, где показатели заболеваемости раком желудка наиболее высокие в мире, а показатели диагностики ранних форм рака впечатляющие - более 40-50% случаев опухолей диагностируется в ранней стадии развития опухолевого процесса, а показатели 5-летней выживаемости после хирургических и эндоскопических операций составляют 95%. По данным японских исследователеей это связано не только с совершенствованием методик хирургических вмешательств, но и в первую очередь с улучшением ранней диагностики. В России при высоком уровне заболеваемости только 5-10% случаев рака желудка диагностируется в ранней стадии, а у большинства пациентов выявляется запущенный опухолевый процесс, который требует помимо хирургического вмешательства, дополнительных лекарственных методов терапии. В настоящее время ни у кого не вызывает сомнения, что хирургический метод является самым важным и необходимым этапом в лечении большинства солидных опухолей, в том числе и рака желудка. Однако только с помощью хирургического удаления злокачественной опухоли избавиться от болезни часто бывает невозможно. Чем больше опухоль, тем больше вероятность развития метастазов.

В настоящее время интенсивно разрабатываются и внедряются в клиническую практику дополнительные молекулярно-биологические методы исследования, которые характеризуют степень агрессивности опухолевого процесса и, кроме того, позволяют индивидуализировать прогноз клинического течения и чувствительность опухоли к проводимой терапии. Среди них широкое распространение получили тканевые маркеры и, в частности, система активации плазминогена и белок nm23, экспрессия которых обнаружена во многих опухолях, в том числе и раке желудка.

Опухолевые клетки способны проникать в кровеносное русло и распространяться по всему организму. Инвазия и метастазирование являются основными проявлениями прогрессии опухоли, причем эти процессы взаимосвязаны (Огнерубов Н.А. и соавт., 2004). В настоящее время пристальное внимание исследователей направлено на изучение этих процессов. При этом некоторые процессы, связанные с механизмами инвазии и метастазирования опухолевых клеток, уже известны. К ним относится адгезия и межклеточное взаимодействие, протеолитическая активность и подвижность опухолевых клеток, а также неоангиогенез. Также немаловажную роль играет иммунная система организма, так как в результате ее толерантности некоторые клоны опухолевых клеток выживают и дают начало новым (вторичным) опухолям.

Известно, что процесс метастазирования довольно сложен и представляет собой ряд последовательных этапов. Так, чтобы образовать метастатическую опухоль клетка должна быть способна покинуть первичную опухоль, внедриться в ткани в другом месте и, наконец, выжить и пролиферировать. Для осуществления этого сложного процесса необходимо проникновение клеток в микроциркуляторное русло, прикрепление их в отдаленном кровеносном или лимфатическом сосуде, выход из сосуда в интерстиций и паренхиму органа с последующей пролиферацией и образованием метастатического очага. Все эти процессы тесно связаны с инвазивной способностью опухолевых клеток. Опухолевые клетки пенетрируют базальную мембрану и внедряются в подлежащий интерстиций. При этом известно, что сама базальная мембрана представляет собой сеть коллагена IV типа, протеогликанов, гликопротеинов и в норме не содержит пор, достаточных по размеру для прохождения злокачественных клеток. Таким образом, инвазия базальной мембраны является активным процессом и опухолевым клеткам необходимо пройти через внеклеточный матрикс в ходе процессов инвазии и метастазирования. Для более быстрого прохождения опухолевые клетки способны секретировать и выделять в окружающую среду ряд протеолитических ферментов, которые способны разрушать межклеточное вещество и базальные мембраны, в состав которых входят следующие белки: коллаген, эластин, ламинин и др.). В некоторых случаях опухолевые клетки сами не образуют протеаз, а привлекают макрофаги, фибробласты и нейтрофилы, которые способны выполнять за них инвазивную функцию.

В настоящее время известны 4 класса протеаз, участвующих в процессах опухолевой инвазии: 1) металлопротеиназы (коллагеназы, желатиназы, стромелизины); 2) цистеиновые протеиназы - катепсины В и L; 3) аспартиловая протеаза (катепсин D); 4) сериновые протеазы -плазмин, активаторы плазминогена урокиназного и тканевого типов. Некоторые их этих протеаз выделяются опухолевыми клетками во внеклеточное пространство (коллагеназа), другие оказываются связанными с поверхностью клеток (протеазы, деградирующие фибронектин внеклеточного матрикса). Для некоторых протеаз обнаружен рецептор на поверхности клетки, и поэтому они могут находиться как в связанном, так и в свободном состоянии (иРА). Кроме веществ, активирующих протеолиз, в ткани опухоли и в плазме крови присутствуют вещества, специфически ингибирующие действие этих ферментов. К ним относятся тканевые ингибиторы металлопротеиназ и ингибиторы активаторов плазминогена. В настоящее время уже известны два ингибитора активаторов плазминогена - PAI-1 и PAI-2. Причем, с увеличение экспрессии PAI-1, повышается риск возникновения метастазов и рецидива опухоли, а повышение уровня PAI-2 в ткани опухоли коррелирует с благоприятным прогнозом опухолевого процесса. Это явление объясняется тем, что PAI-1 защищает саму опухоль от разрушающего действия протеаз (Constantini Y., 1996). В последние годы все большее число публикаций свидетельствует о существенной роли плазминогена в развитии опухолевого процесса, а точнее в механизмах инвазии и метастазирования. Следовательно, необходимо проведение дополнительных исследований по изучению факторов, биологически активных веществ, которые способствуют развитию, инвазии, метастазированию и прогрессии опухолевого процесса.

В последние годы пристальное внимание исследователи уделяют изучению экспрессии белка nm23 (Yeung P. et al., 1998; Yoo С.Н. et al., 1999; Lee K.E. et al., 2003), который считают одним из важных маркеров, тесно связанных с процессами клеточной пролиферации и контролем метастазирования при различных опухолях, в том числе, и при раке желудка (Ji S.Q. et al., 2002; Lee K.E. et al., 2003). При этом отмечены довольно сложные взаимоотношения между появлением в раковых клетках белкового маркера и метастатической активностью опухоли (Kumar D.D. et al., 1999; Nesi G. et al., 2001). Следует отметить, что гиперэкспрессия белка пш 23 обнаружена в различных злокачественных опухолях человека, таких как рак легкого, колоректальный рак, меланома, рак молочной железы, желчного пузыря, гортани. По данным некоторых авторов показано, что экспрессия nm23 в злокачественных опухолях желудка ассоциируется с неблагоприятным прогнозом болезни (Muller W. et al., 1998; Nesi G. et al., 2001). Клиническая значимость экспрессии nm23 и особенностей продукции основных компонентов системы активации плазминогена в опухолях желудка начинают только интенсивно изучаться. Однако по данным предварительных клинических исследований установлено, что уровень и соотношение экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухоли может служить показателем ее метастатической и инвазивной активности, а следствие этого и биологически значимым фактором прогноза (Герштейн Е.С. и соавт., 2004; Огнерубов Н.А. и соавт., 2004).

Изучение системы активации плазминогена проводили при различных опухолях у человека: при колоректальном раке (Голубченко О.В., 2004), раке желудка (Щербаков A.M. и соавт., 2002; Ognerubov N.A. et al., 2003), молочной железы (Герштейн Е.С. и соавт., 2004), пищевода (Кушлинский Н.Е. и соавт., 2002), опухолях костей (Юсифов А.И., 2001), новообразованиях щитовидной железы (Харидити Т.Ю. и соавт., 2002). При этом, исследователям удалось выявить в большинстве злокачественных опухолей различного гистогенеза значительное увеличение концентрации иРА и PAI-1 по сравнению с гомологичными нормальными тканями и доброкачественными новообразованиями (Gershtein E.S. et al., 2002).

Система активации плазминогена представляет собой протеолитический каскад, участвующий в разрушении окружающей опухоль базальной мембраны и внеклеточного матрикса, способствуя выходу опухолевых клеток из их первоначального окружения и образованию опухолевых узлов в отдаленных органах и тканях (Герштейн Е.С. и соавт., 2002). Ключевыми компонентом этой системы является сериновая протеаза - активатор плазминогена урокиназного типа (иРА), которая расщепляет плазминоген до плазмина (Огнерубов Н.А. и соавт., 2005). Плазмин уменьшает уровень внеклеточных матричных гликопротеидов и активирует некоторые про-металлопротеазы, что играет решающую роль в процессах инвазии и метастазирования (Mignatti P. et al., 1993). В ранних исследованиях изучение системы активации плазминогена в опухолях и окружающей слизистой больных раком желудка показало, что уже на ранних стадиях заболевания проявляется характерное для большинства злокачественных опухолей усиление активации плазминогена по урокиназному типу. Известно, что активность иРА регулируется несколькими способами, в частности, подавляется двумя белковыми ингибиторами класса серпинов - PAI-1 и PAI-2 (Andreasen Р.А. et al., 1990). Помимо иРА в активации плазминогена может участвовать также активатор тканевого типа (tPA), однако, его роль при развитии опухолей, по-видимому, противоположна роли иРА и сводится к разрушению опухолевых клеток и защите окружающих тканей от распространения опухоли (Bell W.R., 1996).

Уровень и соотношение экспрессии различных компонентов системы активации плазминогена в опухолевой ткани может служить показателем метастатической и инвазивной активности опухоли, являясь вследствие этого биологически значимым фактором прогноза при различных новообразованиях (Герштейн Е.С. и соавт., 2001, 2004; Duffy

M.J. et al., 1999). Кроме того, подавление активации плазминогена по урокиназному типу может стать одним из подходов к разработке новых схем антиметастатической терапии (Schmitt М. et al., 1997).

Несмотря на то, что исследования системы активации плазминогена проводили при различных опухолях, большинству исследователей удалось выявить общую закономерность, заключающуюся в том, что в злокачественных опухолей различного гистогенеза происходит значительное увеличение концентрации иРА и PAI-1 по сравнению с гомологичными нормальными тканями и доброкачественными новообразованиями. Все это может иметь как теоретическое, так и практическое значение. С одной стороны, оно свидетельствует о том, что усиление активации плазминогена по урокиназному типу, сопровождающееся усилением защиты опухолевых клеток от саморазрушения (за счет увеличения уровня PAI-1), является достаточно универсальным признаком малигнизации. С другой стороны, повышенная экспрессия иРА в опухоли по сравнению с окружающей тканью делает этот фермент перспективной избирательной мишенью для антиметастатической противоопухолевой терапии, характеризующемся достаточно низкой чувствительностью к стандартным видам химиотерапии.

Прогноз рака желудка определяет целый ряд клинико-морфологических и молекулярно-биологических факторов. В настоящее время известно большое количество молекулярно-генетических маркеров опухолей, которые являются показателями биологической активности раковых клеток и могут быть использованы в качестве прогностических критериев в онкологической клинике. Наличие или отсутствие экспрессии отдельных маркеров делает возможной более точную оценку такого сложного, комплексного, многоступенчатого процесса как метастазирование опухоли. Вместе с тем, значение большинства этих факторов окончательно не изучено.

Настоящее исследование посвящено изучению экспрессии белка пш23 и содержания основных компонентов системы активации плазминогена в опухолях больных раком желудка для оценки их взаимосвязи с основными клиническими и морфологическими характеристиками заболевания, прогнозом. В работе использованы современные высокочувствительные иммуноферментные методы определения тканевых молекулярно-биологических маркеров в опухоли у 108 больных раком желудка, прошедших обследование и лечение в Воронежском областном клиническом онкологическом диспансере и НИИ клинической онкологии ГУ Российском онкологическом научном центре им. Н.Н.Блохина РАМН с 2001 по 2005 гг.

По данным настоящего исследования обнаружено, что содержание иРА в цитозольной фракции опухолей желудка колебалось в довольно широких пределах - от 0,01 до 1,34 нм/мг белка. При этом не было выявлено связи продукции иРА с учетом пола обследованных пациентов и весь последующий анализ полученных результатов проводили в общей группе больных. Представленные нами данные подтверждают исследования других авторов, которые так же выявили широкий разброс иРА в опухолях желудка (Nekara Н. et al., 1994, 1998). Результаты изучения уровня антигенов tPA и uPA Y.Umehara et al. (1991) в экстрактах 30 карцином желудка и непораженной опухолевым процессом нормальной слизистой показано, что уровень tPA был выше в нормальной слизистой, а иРА - в опухоли. Кроме того, при сравнении уровней иРА в опухолях обследованных нами больных раком желудка с учетом стадии процесса обнаружены достоверные различия. Так, у больных с ранней стадией 1Б значения иРА были наименьшими (медиана 0,07 нм/мг белка), у пациентов II и IIIA стадиями медианы составили 0,2 и 0,41 нм/мг белка, соответственно. У больных с ШБ стадией медиана уровней иРА была больше в 5,9 раз по сравнению с пациентами 1Б стадией, а у больных с IV стадией медиана уровней иРА также была выше (0,17 нм/мг белка), чем у пациентов в 1Б стадии. Таким образом, с увеличением стадии заболевания содержание иРА в цитозольной фракции опухолей достоверно увеличивалось.

Кроме того, анализ значений иРА с индексами системы TNM показал, что средние значения иРА в опухолях больных раком желудка повышались при увеличении индекса (Т), значение медианы

126 | увеличивалось в 2,7 раза при индексе (Т4) по сравнению с группой больных с индексом (Т2). Однофакторный дисперсионный анализ сравнения средних значений иРА с учетом индекса (Т) показал, что различия тенденциозны (р=0,05), однако при учете множественности сравнений выявлено достоверное различие между группами пациентов T2-T4 (р=0,02) и Т3-Т4 (р=0,05). Аналогичная закономерность изменения средних значений иРА выявлена и при увеличении индекса (N). При изучении уровней этого индекса с учетом наличия прорастания опухоли в соседние органы, и состояния слизистой желудка выявили, что наиболее высокие уровни иРА выявлены при прорастании опухоли в соседние органы (медиана составила 0,82 нм/мг белка) и изъязвлении слизистой (медиана 0,53 нм/мг белка). Медиана иРА была наиболее низкой у больных без прорастания всех слоев стенки желудка или изъязвления слизистой (0,15 нм/мг белка). Следует отметить, что по данным Y.Umehara et al. (1991) и Y.Okusa et al. (2000) uPA был также выше в опухолях желудка с инвазией сосудов, метастазами в печени или канцероматозом брюшины. А по данным N.Tanaka et al. (1991) самое высокое соотношение uPA/(uPA+tPA) наблюдалось в центральной части опухоли желудка, уменьшалось к периферии, и было самым низким в нормальной слизистой оболочке органа. Представленные нами данные и анализ отечественной и зарубежной литературы показывают, что высокий уровень экспрессии иРА в опухолях желудка следует считать универсальным признаком злокачественного процесса, поскольку большинство исследователей выявили высокие значения иРА в цитозольной фракции многих опухолей человека (рак молочной железы, колоректальный рак, рак печени, матки, яичников). Группа итальянских исследователей убедительно показала, что иРА является не только активным участником в процессах инвазии и роста рака желудка, но и в процессе прогрессии предраковых заболеваний желудка в злокачественную опухоль (Farinati F. Et al., 1996). Авторы пришли к заключению, что усиление экспрессии иРА при предраковых заболеваниях желудка (хроническом атрофическом гастрите с дисплазией) может способствовать процессам опухолевой трансформации. Подтверждением этому могут быть результаты проведенного анализа показателей иРА с учетом степени дифференцировки рака желудка. Так, по данным настоящего исследования показано, что средние значения иРА и его медианы у больных раком желудка с учетом степени дифференцировки опухоли были самые низкие в аденокарциномах с высокой степенью дифференцировки (медиана 0,12 нм/мг белка). Самые высокие уровни иРА обнаружены в опухоли больных с умеренной степенью дифференцировки аденокарцином (0,53 нм/мг белка). И несмотря на то, что эти различия были недостоверными, тем не менее, эта тенденция нами была отмечена. Несмотря на то, что не было выявлено достоверных различий в показателях средних значений иРА и его медианы в группе больных аденокарциномой по сравнению с больными перстневидноклеточным раком желудка. У женщин, в отличие от мужчин, нами выявлен факт повышения концентрации иРА в цитозольной фракции аденокарцином, по сравнению с перстневидноклеточным раком желудка. Объяснение этому может быть связано с различным гормональным фоном пациентов, кроме того, ранее было показано, что рак желудка мужчин и женщин отличается по уровню рецепторов эстрогенов в опухоли.

Многофакторный анализ связи изучаемых признаков с изменением уровней иРА в опухолях больных раком желудка показал, что наиболее важными оказались такие признаки как пол совместно с локализацией опухоли (р=0,0008), возраст пациентов (р=Ю,002), а также гистологическое строение опухоли (р=0,013) и индекс (Т) (р=0,02).

Клиническое значение tPA при раке желудка значительно менее изучено, чем роль остальных компонентов урокиназной системы. Вместе с тем, нами обнаружено, что показатель tPA у больных в опухолях изменялся в широких пределах - от 0,01 до 2,36 нм/мг белка, а в 25,9% наблюдений он был равен нулю. При этом, средние уровни tPA в опухолях желудка у мужчин и женщин достоверно не различались (р=0,4), а при учете стадии заболевания также не было выявлено достоверных различий в показателе tPA. Индексы (Т) и (N), а также степень дифференцировки опухоли не были связан с изменением уровней tPA. Как и при анализе показателей иРА в опухолях желудка значения tPA не были связаны с локализацией рака в органе. Вместе с тем, во всех возрастных группах больных раком желудка средние уровни tPA у мужчин были примерно в 2 раза ниже, чем у женщин, а дисперсионный анализ показал, что возраст был связан с изменением уровней tPA в опухолях как у мужчин, так и у женщин. Однако, достоверное различие уровней tPA (р=0,014) наблюдали только у мужчин старше 65 лет (0,2±0,06 нм/мг белка, медиана - 0,29 нм/мг белка) по сравнению с более молодыми пациентами (0,60±0,08 нм/мг белка, медиана - 0,55 нм/мг белка). В группе женщин такой закономерности выявлено не было. При этом, у мужчин выявили достоверную обратную корреляционную зависимость между уровнями tPA в опухолях и их возрастом (rs=-0,39 [95% С1=0,7-0,63]; р=0,017), причем у больных с низкой степенью дифференцировки рака желудка зависимость усиливалась до значения (rs=-0,71 [95% С1=0,4-0,86]; р=0,0002), а при индексе (N0) эта зависимость была максимальной (rs=-0,85 [95% С1=0,57=0,95]; р=0,0001). В группе женщин возраст не был связан корреляционной зависимостью с изменением уровней tPA в опухолях.

Таким образом, в опухолях больных раком желудка при однофакторном анализе нами выявлено достоверное уменьшение уровней tPA в группе мужчин старше 65 лет. При многофакторном анализе изменений уровней tPA в опухолях достоверные различия выявлены только при совместном проявлении таких признаков как пол, возраст и показатель Т (р=0,049).

Особое внимание в клинических исследованиях уделяется ингибиторам активаторов плазминогена и, в частности, PAI-1 в оценке прогноза некоторых опухолей человека. Первое сообщение об активности PAI-1 и его прогностической значимости при раке молочной железы было опубликовано в 1991 году Janicke F. et al. (1991). Высокие уровни PAI-1 свидетельствовали о неблагоприятном прогнозе болезни. Работ по исследованию PAI-1 при раке желудка немного. Полученные нами результаты показали, что PAI-1 выявлен практически во всех обследованных опухолях, однако колебания концентраций PAI-1 в цитозольной фракции рака желудка были наиболее выраженными по сравнению с иРА и tPA. Показатели PAI-1 не зависели от пола пациентов, но были связаны со стадией опухолевого процесса. Так, при стадии 1Б медиана PAI-1 была наименьшей (0,12 нм/мг белка), а при стадиях ШБ и IV медианы показателя возрастали в 5-8 раз. Подобные закономерности были выявлены в работах зарубежных авторов. Высокодостоверно (р=0,00006) различались уровни PAI-1 при учете индекса (Т): медиана PAI-1 при (Т3) была в 1,7 раза (р=0,01), а при (Т4) -в 5,2 раза выше по сравнению с индексом (Т2) (рЮ,0003). Наибольшее значение PAI-1 в опухоли желудка (9,7 нм/мг белка) было отмечено у больного раком желудка с индексом (Т4). Вместе с тем, индекс (N), так же как и локализация опухоли в органе и ее гистогенез, степень дифференцировки не были достоверно связаны с изменением уровней PAI-1 в опухолях пациентов раком желудка. Таким образом, нами обнаружено, что повышенные уровни PAI-1 в опухолях больных раком желудка отмечены при поздних стадиях заболевания, у больных аденокарциномой, в возрасте старше 70 лет. Многофакторный дисперсионный анализ выявил, что достоверное повышение уровней PAI-1 было связано только с индексом (Т) (р=0,0014).

Вместе с тем, анализ корреляционных зависимостей между уровнями uPA, tPA и PAI-1 в опухолях больных раком желудка с учетом основных клинических признаков выявил достоверную положительную зависимость между показателями иРА и PAI-1 (г=0,69; р=0,0001). Стало быть, при увеличении уровней иРА в опухоли желудка одновременно нарастали и показатели PAI-1. Зависимость была одинаково характерна как для мужчин, так и для женщин. Эта закономерность проявлялась при всех стадиях индексы (Т) и (N), при всех локализациях, при учете гистогенеза опухоли, но не зависела от степени дифференцировки и возраста пациентов и, таким образом, эта закономерность была свойственна всем больным раком желудка.

Зависимость между уровнями иРА и tPA также была значимой (г=0,43; р=0,005). При этом, у женщин зависимость усиливалась до значения г=0,81 (р=0,001). Показатель tPA был связан с PAI-1 также достоверной корреляционной зависимостью в опухолях больных раком желудка (г=0,57; р=0,0001), и также более выраженной в группе женщин (г=0,98; р=0,0001).

Для выявления структуры связей между признаками нами проводился «факторный анализ» с использованием метода выделения главных компонент и было выделено 3 общих фактора, которые, наиболее полно характеризовали общую группу больных раком желудка. Рост индекса (Т) сопровождался повышением уровней PAI-1. Гистологическое строение и степень дифференцировки опухоли были связаны с полом больного. Показатели иРА и tPA изменялись согласованно. В то же время при проведении факторного анализа отдельно в группе мужчин и женщин выявили некоторые особенности в указанных связях. Так, для мужчин было характерно в большей степени согласованное увеличение показателей Т, PAI-1 и иРА. Изменение показателя tPA было связано с возрастом. Локализация опухоли была связана с гистологическим ее строением.

В то же время в группе женщин первым и наиболее важным общим фактором было согласованное изменение в опухолях показателей PAI-1, uPA, tPA независимо от других признаков. Индекс (Т) был связан с локализацией и гистологическим строением опухоли, а степень ее дифференцировки - с возрастом пациенток.

Таким образом, нами выявлены значительные различия в характере связей основных показателей системы активации плазминогена в опухолях мужчин и женщин, больных раком желудка и их зависимости с другими клиническими и морфологическими признаками болезни.

Помимо основных компонентов системы активации плазминогена, одним из потенциально важных маркеров, тесно связанных с процессами клеточной пролиферации, дифференцировки и контроля метастазирования, является белок nm23 (Pal S. et al., 2004). При этом стало известно, что ген пш23 играет важную роль в защите организма от прогрессирования злокачественных опухолей. Следует отметить, что представленные результаты по изучению пш23 указывают на сложные взаимоотношения между появлением в опухолевых клетках белкового маркера и их метастатической активностью, с неоднозначным отношением к действию этого белка (Wang C.S. et al., 2002; Gao Q.L. et al., 2004).

Нами проведен иммуногистохимический анализ уровня экспрессии белка пш 23 в 108 злокачественных эпителиальных опухолях желудка и одновременно изучали концентрацию основных компонентов системы активации плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) в цитозольной фракции этих опухолей. Экспрессия белка пш23 проявлялась в виде диффузного, гомогенного окрашивания цитоплазмы опухолевых клеток. По интенсивности экспрессии белка шп23 в цитоплазме клеток опухоли больные были разделены на 3 группы: 1) отсутствие экспрессии или очень слабая экспрессия, 2) низкий уровень экспрессии, 3) высокий уровень экспрессии. В настоящем исследовании накопление белка nm23 (низкий и высокий уровень экспрессии) выявили в 68 образцах цитоплазмы клеток опухолей (63,0%). При этом, наибольшее число опухолей было с низкой экспрессией (37,0%) белка nm23 в цитоплазме клеток. Отсутствие экспрессии было у 11,1% больных, а высокий уровень экспрессии - у 25,9% больных. Пол больных не был связан с уровнем экспрессии белка nm 23 в цитоплазме клеток опухоли. Таким образом, на основании полученных нами результатов исследования, а также по данным зарубежной литературы экспрессия белка nm23 в злокачественных эпителиальных опухолях желудка неоднородна и у большинства пациентов она низкая или отсутствует. Кроме того, нами не выявлено связи экспрессии пш23 с индексами (Т) и (N). И, в отличие от опухолей, локализованных в теле желудка, экспрессия nm23 в карциномах антрального отдела желудка выявлялась крайне редко или была сниженной. Также, у преобладающего числа больных, опухоли которых имели строение перстневидноклеточного рака, экспрессия белка nm23 не выявлялась или была крайне низкой. Следовательно, снижение экспрессии nm23 характерно для низкодифференцированных опухолей, которые имеют крайне неблагоприятное клиническое течение и прогноз.

Интересен факт увеличения частоты выявления экспрессии nm23 в опухолях больных в более молодом возрасте (до 50 лет). Причем эта закономерность была характерна как для мужчин, так и для женщин. Уровни иРА недостоверно изменялись при изменении окрашенности цитоплазмы клеток, однако медиана показателя иРА была наиболее высокой (0,23 нм/мг белка) у больных раком желудка с высоким уровнем экспрессии nm23 в цитоплазме клеток опухолей. Эти различия в группе женщин были более выражены, хотя также недостоверны. Так, например, медиана иРА у женщин с высоким уровнем экспрессии nm23 в цитоплазме клеток опухолей в 2,8 раза превышала уровень иРА в опухолях женщин с отсутствием экспрессии белка nm23 в цитоплазме клеток. Не было выявлено корреляционной зависимости между уровнями иРА и экспрессией белка nm23 в цитоплазме клеток опухолей больных раком желудка как в общей группе, так и в группах с учетом других клинических признаков болезни.

Концентрации tPA в цитозольной фракции опухолей желудка не изменялись при различной степени окрашенности цитоплазмы клеток антителами к nm23 (р=0,3), однако медианы увеличивались с ростом интенсивности окрашивания. Кроме того, была выявлена слабая, но достоверная корреляционная зависимости между уровнями tPA и экспрессией белка nm23 в цитоплазме клеток опухолей больных раком желудка в общей группе (rs=0,34; р=0,01). С увеличением экспрессии белка шп23 в цитоплазме опухолевых клеток отмечено снижение продукции этими клетками его ингибитора - PAI-1 (р=0,9).

Таким образом, анализ экспрессии белка nm23 в цитоплазме клеток опухолей больных раком желудка с учетом показателей системы активации плазминогена показал, что при высокой экспрессии белка концентрации tPA достоверно, а иРА недостоверно были выше.

В 24 из 108 (22,2%) опухолей было выявлено окрашивание ядер опухолевых клеток антителами к nm23. Показатели иРА и tPA не отличались между опухолями желудка с окрашенными и не окрашенными ядрами клеток. При этом, в случаях перстневидноклеточного рака желудка, окрашенные ядра отсутствовали во всех опухолях, при аденокарциномах желудка таких наблюдений было значительно больше (30%). Различия статистически достоверны (р=0,03). Степень дифференцировки аденокарцином желудка не была связана с наличием окрашенности ядер клеток опухоли (р=0,9).

Факторный анализ показал, что в опухолях больных раком желудка индекс Т был связан с окрашенностью ядер раковых клеток и показателем РА1-1 в опухоли (39,8% общей дисперсии), а окрашенность цитоплазмы клеток опухоли была связана с иРА и tPA (22,0% общей дисперсии).

Таким образом, в настоящем исследовании получены данные, указывающие на связь уровней экспрессии белка пш23 в цитоплазме и ядрах клеток опухоли с основными показателями, характеризующими систему активации плазминогена, а также со стадией заболевания индекс (Т). Дальнейшее изучение этих зависимостей, возможно, позволит разработать методы коррекции возникающих нарушений у больных раком желудка.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Юрченко, Антон Андреевич, 2007 год

1. Аруин Л.И., Григорьев П.Я., Исаков В.А., Яковенко Э.П. Хронический гастрит.-Амстердам.-1993 .-362с.

2. Аруин Л.И. Инфекция Helicobacter pylori канцерогенна для человека // Архив патологии.-1997.-Т.З.-С.74-78.

3. Аруин Л.И., Капуллер Л.Л., Исаков В.А. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника // Издательство «Триада-Х».-М.-1998.-483с.

4. Белохвостов А.С., Румянцев А.Г. Онкомаркеры: молекулярно-генетические, иммунохимические, биохимические анализы: Пособие для врачей. 2-е изд., перераб. и доп. - М.:МАКС Пресс. - 2003. - 91с.

5. Белявская В.А., Вардосанидзе К.В., Гервас П.А. и соавт. Генетический статус р53 опухолевых клеток при раке желудка // Тезисы Российской конференции по фундаментальной онкологии «Петровские чтения-2005».-Сн.-Петербург.-2005.-С.6.

6. Берштейн Л.М. Онкоэндокринология (традиции, современность и перспективы).-Сн.-Петербург.-Наука.-2004.-343с.

7. Гарин A.M., Базин И.С. Десять наиболее распространенных злокачественных опухолей // М.-2006.-266с.

8. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Система активации плазминогена в оценке прогноза и гормоночувствительности рака молочной железы // Вестник РОНЦ РАМН. 1999. - №2. - С.52-59.

9. Гершейн Е.С., Грицаенко Е.В., Щербаков М.Е., Щербаков A.M., Огнерубов Н.А., Кушлинский Н.Е. Фактор роста эндотелия сосудов и компоненты системы активации плазминогена при раке и гиперплазии эндометрия Вопросы онкологии.-2003.-т.49, №6.-С.725-729.

10. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Значение системы активации плазминогена в опухолях человека // В материалах III съезда онкологов и радиологов стран СНГ.-Минск.-Издательство ОДО «Тонпик».-2004.-Часть I.-C.273.

11. Гланц С. Медико-биологическая статистика // М.-Практика.-1999.-455с.

12. Голубченко О.В. Клиническое значение исследования компонентов системы активации плазминогена в опухолях толстой кишки // Автореф.дисс.канд.мед.наук.-М.-2004.-Р0нц им. Н.Н.Блохина РАМН.-25с.

13. Давыдов М.И., Тер-Ованесов М.Д., Абдихакамов А.Н., Марчук В.А. Рак желудка: предоперационное обследование и актуальные аспекты стадирования // Практическая онкология. 2001. - т.З, №7. - С.9-24.

14. Давыдов М.И., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ в 2004 г. Вестник Российского онкологического научного центра им. Н.Н.Блохина РАМН.-2006.-t.17, №3.-с.28-29.

15. Делекторская В.В., Перевощиков А.Г., Кушлинский Н.Е. Экспрессия белков NM23 и C-ERBB-2 в клетках первичного колоректального рака и его метастазов // Архив патологии.-2003.-т.65.-С.11-15.

16. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2002 году/ Под ред. М.И.Давыдова и Е.М.Аксель. М.: Мед.информ.агенство.-2004.-279с.

17. Казьмин А.И., Огнерубов Н.А., Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. Состояние системы активации плазминогена у больных раком желудкапри различных стадиях // В материалах VII Российского онкологического конгресса.-М.-2003 .-С.218.

18. Исаков В.А., Домарадский И.В. Хеликобактериоз // Издательство «Медпрактика-М».-М.-2003.-411 с.

19. Кушлинский Н.Е., Герштейн Е.С. Система активации плазминогена в опухолях человека Труды Всероссийской конференции «Проблемы медицинской энзимологии. Современные технологии лабораторной диагностики нового столетия».-М.-2002.-С.134-135.

20. Лазарев А.Ф., Климачев В.В., Зорькин В.Т., Бобров И.П., Авдалян A.M. Роль биомолекулярных онкогенов в оценке местной распространенности рака желудка // Проблемы клинической медицины.-2006.-№2(6).-с.30-35.

21. Лойт А.А., Гуляев А.В., Михайлов Г.А. Рак желудка. Лимфогенное метастазирование // М.-«МЕДпресс-информ».-2006.-56с.

22. Нечипай A.M. Роль эндоскопического исследования в диагностике предопухолевой патологии и формировании «группы риска» // Автореф.дисс. докт.мед.наук.-М.-1992.

23. Онкологические заболевания: профилактика и методы лечения/Под ред.В.В.Маршака. -М.:Новый изд.дом, 2004. 348с.

24. Организация онкологической службы в России; нормативные документы. 41./Под ред. Б.Н.Ковалева, В.В.Старинского, В.И.Чиссова. М., 2004. -/Ассоциация онкологов России. - МНИОИ им.П.А,Герцена.

25. Подшивалов Б.В., Рябиков А. А. Современная диагностика злокачественных новообразований: Пособие для врачей. Мелитополь. — 2004. - 78с.

26. Предрак и рак желудка: этиология, патогенез, морфология, лечебный патоморфоз/ Василенко И.В., Садчиков В.Д., Галахин К.А. и др. -К.:Книга плюс, 2001. 232с.

27. Ревуцкий E.J1. Опухоли желудка// Клиническая гастроэнтерология. -Киев: «Здоров'я». 1979. - С.44-47.

28. Сергиенко В.И., Бондарева И.Б. Математическая статистика в клинических исследованиях // М.-Издательская группа «ГЕОТАР-Медиа».-2006.-283с.

29. Трапезников Н.Н., Аксель Е.М. Статистика злокачественных новообразований в России и странах СНГ // М.-РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН.-2001.-296с.

30. Трофимов А.В., Князькин И.В., Кветной И.М. Молекулярная биология нейроэндокринных клеток желудочно-кишечного тракта в моделях преждевременного старения // Издательство «СП Минимакс».-Санкт-Петербург.-2004.-192с.

31. Фельдман М., Л.Эйзенбах. Причины метастазирования клеток. В мире науки (Scientific American). 1989.-N.1.-C.24-32.

32. Фишелева Е.Л. Helicobacter pylori и злокачественные опухоли желудка // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии.-1996.-Т.6, №4.-С.23-25.

33. Хансон К.П. Молекулярная онкология: фундаментальные достижения и практические перспективы // Тезисы Российской конференции по фундаментальной онкологии «Петровские чтения-2005».-Сн.-Петербург.-2005.-С.З-4.

34. Харитиди Т.Ю., Казанцева И.А., Смирнов В.В. и соавт. Ферменты регуляции активности плазминогена (uPA, tPA, PAI-1) при заболеваниях щитовидной железы // В тезисах докладов IX Российского Национального Конгресса «Человек и лекарство».-М.-2002.-С.482.

35. Харченко В.П., Лютфалиев Т.А., Кунда М.А. Рак желудка в вопросах и ответах.-М.-Издательство РУДН.-1999.-28с.

36. Черноусое А.Ф., Поликарпов С.А., Черноусое Ф.А. Хирургия рака желудка. М.: ИздАТ. 2004. - 560с.

37. Чиссов В.И., Старинский В.В. (под ред.) Злокачественные новообразования в России в 1999 году (заболеваемость и смертность) // М.-2000.-263с.

38. Чиссов В.И., Дарьялова С.Л. Онкология (клинические рекомендации) // М.-Издательская группа «ГЕОТАР-Медиа».-2006.-с.317-350.

39. Щербаков A.M., Казьмин А.И., Герштейн Е.С., Огнерубов Н.А., Кушлинский Н.Е.Компоненты системы активации плазминогена при раке желудка Тезисы докладов VI ежегодной Российской онкологической конференции.М.-2002.-С. 169.

40. Юсифов И.А. Активаторы плазминогена урокиназного и тканевого (иРА, tPA) типов и их ингибитор (PAI-1) при опухолях костей // Автореф.дисс. .канд.мед.наук.-М.-2001 .-31 с.

41. Яребински М., Влаинац X., Аданя В. Оценка взаимосвязи некоторых бисоциальных факторов и рака желудка результаты клинико-анатомического исследования в Белграде // Тер. архив. - 1989.-№10. -с.40-44.

42. Abidi S.M, Howard E.W., Dmytryk J.J., Pento J.T. The influence of antiestrogens on the release of plasminogen activator (uPA) by MDA-MB-231 and MCF-7 breast cancer cells // Clin.Exp.Metastasis. 1998. - Vol.16 -P.235-241.

43. Ahn Y.O. Diet and stomach cancer in Korea// Int. J.Cancer 1997. - Suppl. 10.-P.7-9.

44. Akaza H, Tsuruo T, Saijo N, et al. Cancer screening// Gan To Kagaku Ryoho. -2005. Vol.32, N.l. - P. 125-34.

45. Allan E.H., Martin T.J. Prostaglandin E2 regulates production of plasminogen activator isoenzymes, urokinase receptor, and plasminogen activator inhibitor-1 in primary cultures of rat calvarial osteoblasts// J.Cell Physiol. 1995. -Vol.165. -P.521-529.

46. Almgren MA, Henriksson КС, Fujimoto J, Chang CL. Nucleoside diphosphate kinase A/nm23-Hl promotes metastasis of NB69-derived human neuroblastoma // Mol. Cancer Res.- 2004. Vol.2, N.7. - P.387-394.

47. Andreasen P.A., Nielsen L.S., Kristensen P., J. et al. Plasminohen activator inhibitor from human fibrosarcoma cells binds urokinase-type plasminogen activator, but not it's proenzyme // J.Biol.Chem.- 1986. Vol.261. - P.7644-7651.

48. Andreasen P.A., Georg В., Lund L.R. et al // Mol. Cell Endocrinol. 1990.-Vol. 68.-P.l-19.

49. Antalis T.M., Reeder J.A. Butyrate regulates gene expression of the plasminogen activating system in colon cancer cells // Int. J. Cancer. 1995. -Vol.62.-P.619-626.

50. Anwar S, Frayling IM, Scott NA, Carlson GL.Systematic review of genetic influences on the prognosis of colorectal cancer // Br. J. Surg. 2004. -Vol.91, N.10.-P.1275-1291.

51. Arabski M., Klupinska G., Chojnacki J. et al. DNA damage and repair in Helicobacter pylori-infected gastric mucosa cells // Mutat. Res. 2005. -Vol.570, N.l. -P.129-35.

52. Ayabe Т., Tomita M., Matsuzaki Y. et al. Micrometastasis and expression of nm23 messenger RNA of lymph nodes from lung cancer and the postoperative clinical outcome // Ann. Thorac. Cardiovasc. Surg. 2004. - Vol.10, N.3. -P.152-159.

53. Baker M.S., Bleakley P., Woodrow G.C., Doe W.F. Inhibition of cancer cell urokinase plasminogen activator by its specific inhibitor PAI-2 and subsequent effects on extracellular matrix degradation // Cancer Res. 1990. -Vol.50. -P.4676-4684.

54. Bashar H., Urano Т., Fukuta K. et al. Plasminogen activators and plasminogen activator inhibitor 1 in urinary tract cancer // Urol. Int. 1994. - Vol.52. -P.4-8.

55. Bell W.R. // Semin. Thromb. Hemost. 1996. - Vol. 22. - P. 459-478. (uPA)

56. Bosnar M.H., De Gunzburg J., Bago R. et al. Subcellular localization of A and В Nm23/NDPK subunits // Exp. Cell Res. 2004. - Vol.298, N.l. -P.275-284.

57. Brissiand J.C. et al. Le cancer gastrique au Senegal // Med. Trop.-1998.-Vol.58, N.2, Suppl.-p.54.

58. Cajot J.F., Sordat В., Druithof E.K.O., Bahman F. Human primary colon carcinomas xenografted into nude mice. Characterization of plasminogen activators expressed by primari tumor and thier xenografts // J. Natl. Cancer Inst. 1996. - Vol.77. - P.703.

59. Castellote J.C., Grau E., Linde M.A., Pujol-Moix N., Rutllant M.L. Detection of both type 1 and type 2 plasminogen activator inhibitors in human monocytes // Thromb. Haemost. 1990. - Vol.63. - P.67-71.

60. Chapman H.A, Vavrin Z., Hibbs J.B. Macrophage fibrinolytic activity: identification of two pathways of plasmin formation by intact cells and of a plasminogen activator inhibitor // Cell. 1982. - Vol.28. - P.653-662.

61. Chen Zu-Lin and Sidney Strickland. Neuronal Death in the Hippocampus Is Promoted by Plasmin-Catalyzed Degradation of Laminin // Cell. 1997. -Vol.91.-P.917-925.

62. Cho J.Y., Chung H.C, Noh S.H. et al. High level of urokinase-type plasminogen activator is a new prognostic marker in patients with gastric carcinoma // Cancer. 1997. - Vol.79, N.5. - P.878-883.

63. Collard J.G., Shilven, Roos E. Invasive and metastatic potencial induced by ras-transfection into mouse BW5147 T-lymphoma cells // Cancer Res. 1987. -Vol.47.-P. 754.

64. Crowe S.E. Helicobacter infection, chronic inflammation, and the development of malignancy // Curr. Opin. Gastroenterol. 2005. - Vol.21, N.l. - P.32-38.

65. Cui J.W., Wang J., He K. et al. Proteomic analysis of human acute leukemia cells: insight into their classification // Clin/Cancer Res. 2004. - Vol.10, N.20. - P.6887-6896.

66. D'Angelo A., Zollo M. Unraveling genes and pathways influenced by H-prune PDE overexpression: a model to study cellular motility // Cell Cycle. 2004. Vol.3, N.6. - P.758-761.

67. De Witte H., Sweep F., Brunner N. et al. Complexes between urokinase-type plasminogen activator and its receptor in blood as determined by enzyme-linked immunosorbent assay // Int. J. Cancer. 1998. - Vol.77. - P.236-242.

68. De Witte J.H., Sweep C.G., Klijn J.G. et al. Prognostic value of tissue-type plasminogen activator (tPA) and its complex with the type-1 inhibitor (PAI-1) in breast cancer // Br. J. Cancer. 1999. - Vol.80. - P.286-94.

69. Dear A.E. Medcalf R.L. The Urokinase-type-Plasminogen-activator receptor (CD87) is a pleiotropic molecule // Eur. J. Biochem. 1998. - Vol.252. -P.185-193.

70. Ding K.F., Wu J.M. Expression of sialylated carbohydrate antigens and nm23-Hl gene in prognosis of breast cancer // Zhejiang Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban.- 2004. Vol.33, N.4. - P.326-330.

71. Diniz G., Aktas S., Ortac R. et al. Alternative prognostic factors in pediatric embryonal rhabdomyosarcoma: Nm23 expression, proliferative activity and angiogenesis // Turk. J. Pediatr.-2004. Vol.46, N.3. - P.239-244.

72. Dobrilla G., Benvenuti S., Amplatz S., Zancanella L. Chronic gastritis, intestinal metaplasia, dysplasia and helicobacter pylori in gastric cancer: Putting the pieces together // Ital. J. Gastroenterol. 1994. - Vol.26, N.9. -P.449-458.

73. Duffy M.J., Maguire T.M., McDermott E.W. et al. // J. Surg. Oncol. 1999.1. Vol.71.-P.130-135.

74. Duggan C., Kennedy S., Kramer M.D. et al. Plasminogen activator inhibitor type 2 in breast cancer // Br. J. Cancer. 1997. - Vol.76. - P.622-627.

75. Eaton D.L., Scott R.W., Baker J.B. Purification of human fibroblast urokinase proenzime and analysis of its regulation by proteases and protease nexin // J. Biol. Chem. 1984. - Vol.259. - P.6241-6247.

76. Endo S., Ohrusa Т., Saito Y. et al. Detection of Helicobacter pyloris in early stage gastric cancer // Cncer (Philad.).-1995.-Vol.75.-P.2203-2208.

77. Engel M., Mazurek S., Eigenbrodt E., Welter C. Phosphoglycerate mutase-derived polypeptide inhibits glycolytic flux and induces cell growth arrest in tumor cell lines // J. Biol. Chem. 2004. - Vol.279, N.34. - P.35803-35812.

78. Erickson L.A., Hekman C.M., Lokutoff D.J. The primary plasminogen activator inhibitors in endothelial cells, platelets, serum and plasma are immunologically related // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1985. - Vol.82. -P.8710-8714.

79. Farina A.R., Coppa A., Tiberio A. et al. Transforming growth factor-betal enhances the invasiveness of human MDA-MB-231 breast cancer cells by up-regulating urokinase activity // Int. J. Cancer. 1998. - Vol.75. - P.721-730.

80. Feil G., Krause F.S., Zumbraegel A. et al. Ki67, p53, nm23, and DNA cytometry in bladder cancer: potential markers for detection of recurrence? // Adv. Exp. Med. Biol. 2003. - Vol.539. - Vol.99-109.

81. Ferrier C.M., de Witte H.H., Straatman H. et al. Comparison of immunohistochemistry with immunoassay (ELISA) for the detection of components of the plasminogen activation system in human tumour tissue // Br. J. Cancer . 1999. - Vol.79. - P. 1534-1541.

82. Fidler I.J., Hart I.R. Biologic diversity in metastatic neoplasms: origins and implications // Science.-1982.-Vol.217.-P.998.

83. Foekens J.A., Buesseker F., Peters H.A. et al. Plasminogen activator inhibitor-2: prognostic relevance in 1012 patients with primary breast cancer // Cancer Res.-1995.-Vol.55.-P. 1423-1427.

84. Foekens J.A., Shmitt M., van Putten W.L.J. et al. Plasminogen activator inhibitor-1 and breast cancer metastasis // J. Clin. Oncol.-1994.-Vol.12.-P.1648-1658.

85. Fruit and Vegetables. -Lyon: IARS Press, 2003.-376p. (IARCHandbooks of Cancer Prevention.Vol.8).

86. Fukumoto S., Allan E.H., Yee J.A., Gelehrter T.D., Martin T.J. Plasminogen activator regulation in osteoblasts: parathyroid hormone inhibition of type-1 plasminogen activator inhibitor and its mRNA // J. Cell Physiol.-1992.-Vol. 152.-P.346-355.

87. Gao Q.L., Ma D., Meng L. et al. Association between Nm23-Hl gene expression and metastasis of ovarian carcinoma // Ai Zheng.-2004.-Vol.23, N.6.-P.650-654.

88. Gatti L.L., Burbano R.R., de Assumpcao P.P. et al. Interleukin-1 beta polymorphisms, Helicobacter pylori infection in individuals from Northern Brazil with gastric adenocarcinoma // Clin. Exp. Med.-2004.-Vol.4, N.2.-P.93-98.

89. Gershtein E.S., Sherbakov A.M., Klokotova E.A. et al. Plasminogen activation system components in various tumors: clinico-pathologic evaluation // ISFP/IFRS Conference.-Munich.-2002.-T. 11-32.

90. Goncharuk V.N., del-Rosario A., Kren L. et al. Co-downregulation of PTEN, KAI-1, and nm23-Hl tumor/metastasis suppressor proteins in non-small cell lung cancer // Ann. Diagn. Pathol.-2004.-Vol.8, N.1.-P.6-16.

91. Gong L., Chen Z.L., Hu J., Huo H.Y. Expression of pi 6 and nm23 genes in salivary gland tumors // Hua Xi Kou Qiang Yi Xue Za Zhi.-2004.-Vol.22, N.2.-P.155-157.

92. Graham C.H., Forsdike J., Fitzgerald C.J., Macdonald-Goodfellow S. Hypoxia-mediated stimulation of carcinoma cell invasiveness via upregulation of urokinase receptor expression // Int. J. Cancer.-1999.-Vol.80.-P.617-623.

93. Grebenschikov N., Sweep F., Geurts A. et al. ELISA for complexes of urokinase-type and tissue-type plasminogen activators with their type-1 inhibitor (uPA-PAI-1 and tPA-PAI-1) // Int. J. Cancer.-1999.-Vol.81.-P.598-606.

94. Grondahl-Hansen J., Peters H. A., Wim L. J. et al. Prognostic Significance of the receptor for urokinase plasminogen activator in breast cancer // Clinical Cancer Res.-1995.-N.l.-P. 1079-1087.

95. Hackel C., Czerniak В., Ayala A.G. et al. Expression of plasminogen activators and plasminogen activator inhibitor 1 in dedifferentiated chondrosarcoma//Cancer.-1997.-Vol.79.-P.53-58.

96. Han S., Kim H.S., Jang H.C. et al. A case of gastric cancer initially presenting with polydipsia // Korean J. Intern. Med.-2004.-Vol. 19, N.4.-P.266-70.

97. Hantschmann P., Beysiegel S., Assemi C., Kurzl R. Immunohistologic detection of nm23-Hl protein in squamous cell carcinoma of the vulva // J. Reprod. Med.-2004.-Vol.49, N.10.-P.787-795.

98. Harrison L.E., Zhang Z.F., Karpeh M.S. et al. The role of dietary factors in the intestinal and diffuse histologic subtypes of gastric adenocarcinoma: A case-control study in the US // Cancer.-1997.-Vol.80, N.6.-p. 1021-1028.

99. Herszenyi L., Plebani M., Cardin R. et al. The role of urokinase-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in gastric cancer // Acta Physiol. Hung.-1995.-Vol.85-p.213-221.

100. Hewin D.F., Savage P.B., Alderson D., Vipond M.N. Plasminogen activators in oesophageal carcinoma// Br. J. Surg.-1996.-Vol.83.-p.l 152-1155.

101. Hirohashi Y., Sumi K., Matsuyama S.Two cases of gastric cancer with multiple liver metastases responding to TS-1 with hepatic arterial infusion of CDDP following low-dose 5-FU and CDDP chemotherapy // Gan To Kagaku Ryoho.-2005.-Vol.32, N. 1 .-p.85-88.

102. Hlupic L., Jakic-Razumovic J., Bozikov J. et al. Prognostic value of different factors in breast carcinoma // Tumori.-2004.-Vol.90, N.l.-p.l 12-119.

103. Hong S.I., Park I.C., Son Y.S. et al. Expression of urokinase-type plasminogen activator, its receptor, and its inhibitor in gastric adenocarcinoma tissues //J. Korean Med. Sci.-1996.-Vol.l 1, N.l.-p.33-37.

104. Hoyer-Hansen G., Ploug M., Behrendt N. et al. Cell-surface acceleration of Urokinase-catalyzed receptor cleavage // Eur. J. Biochem.-1997.-Vol.243.-p.21-26.

105. Hsu N.Y., Chow K.C., Chen W.J. et al. Expression of nm23 in the primary tumor and the metastatic regional lymph nodes of patients with gastric cardiac cancer //Clin Cancer Res.- 1999.-Vol.5, N.7.-p. 1752-1757.

106. Huang Z.H., Su G.Q., Mao Q.G. et al. Expressions of vascular endothelial growth factor and nm23-Hl gene and their relation to the prognosis of breast cancer in young women // Di Yi Jun Yi Da Xue Xue Bao.-2004.-Vol.24, N.12.-p.l398-1401.

107. Ilson D.H. Phase III trial of weekly irinotecan/cisplatin in advanced esophageal cancer // Oncology (Huntingt).-2004.-Suppl.l4.-p.22-25.

108. Inoue M., Tajima K., Yamamura Y. et al. Influence of habitual smoking on gastric cancer by histologic subtype // Int. J. Cancer.-1999.-Vol.81, N.l.-p.39-43.

109. Iwashita S., Fujii M., Mukai H. et al. Lbc proto-oncogene product binds to and could be negatively regulated by metastasis suppressor nm23-H2 // Biochem. Biophys. Res. Commun.-2004.-Vol.320, N.4.-p.l063-1068.

110. Joosten M., Blazquez-Domingo M., Lindeboom F. et al. Translational control of putative protooncogene Nm23-M2 by cytokines via phosphoinositide 3-kinase signaling // J. Biol. Chem.-2004.-Vol.279, N.37.-p.38169-38176.

111. Kanai and S. Hirohashi. Invasion and metastasis In: Gastric Cancer Ed. by T. Sugimura andM.Sasako, Oxford University Press.-1997.-p.l09-123.

112. Kanno H., Kitamura M., Suzuki Y. et al. A case of postoperative liver metastases from gastric cancer successfully treated with hepatic arterial infusion of paclitaxel // Gan To Kagaku Ryoho.-2005.-Vol.32, N.l.-p.89-91.

113. Kapitanovic S., Cacev Т., Berkovic M. et al. nm23-Hl expression and loss of heterozygosity in colon adenocarcinoma // J. Clin. Pathol.-2004.-Vol.57, N.12.-p.1312-1318.

114. Karpeh M.S., Leon L., Klimstra D. et al. Lymph node staging in gastric cancer: is location more important than number? An analysis of 1,038 patients // Ann. Surg.-2000.-Vol.232, N.3.-p.362-371.

115. Kashiwagi H. Ulcers and gastritis // Endoscopy.-2005.-Vol.37, N.2.-p.ll0-115.

116. Kim W.Yu., Kovalski K., Ossowski L. Requirement for Specific Proteases in Cancer Cell Intravasation as Revealed by a Novel Semiquantitative PCR-Based Assay // Cell.-1998.-Vol.94.-p.353-362.

117. Koretz K., Moller P., Schwartz-Albiez R. Plasminogen activators and plasminogen activator inhibitors in human colorectal carcinoma tissues are not expressed by the tumour cells // Eur. J. Cancer.-1993 .-Vol.29.-p.l 184-1189.

118. Koscielny S., Tubiana M., Valleron A.-J. A simulation model of the natural history of human breast cancer // Br. J. Cancer.-1985.-Vol.52.-p.515.

119. Krishnakumar S., Lakshmi A., Shanmugam M.P. et al. Nm23 expression in retinoblastoma//Ocul. Immunol. Inflamm.-2004.-Vol. 12, N.2.-p.l27-135.

120. Kunisaki C., Shimada H., Nomura M. et al. Surgical outcome in patients with gastric adenocarcinoma in the upper third of the stomach // Surgery.-2005.-Vol.137, N.2.-p. 165-171.

121. La Vecchia C., Davazo В., Franceschi S. et al. Menstrual and reproductive factors and gastric cancer risk in women // Int. J. Cancer.-1994.-Vol.59, N.6.-p.761-764.

122. Lambrecht V., Boilly В., Le Bourhis X. Regulation of cell proliferation and urokinase plasminogen activation of human breast epithelial cells by carrageenans // Int. J. Oncol.-1998.-Vol.l2.-p.l397-1401.

123. Lee J.H., Koh J.T., Shin B.A. et al. Comparative study of angiostatic and anti-invasive gene expressions as prognostic factors in gastric cancer // Int. J. Oncol.-2001 .-Vol. 18, N.2.-p.355-361.

124. Lee K.H., Bae S.H., Lee J.L. et al. Relationship between urokinase-type plasminogen receptor, interleukin-8 gene expression and clinicopathological features in gastric cancer // Oncology.-2004.-Vol.66, N.3.-p.210-217.

125. Levenson A.S., Kwaan H.C., Svoboda K.M. et al. Oestradiol regulation of the components of the plasminogen-plasmin system in MDA-MB-231 human breast cancer cells stably expressing the oestrogen receptor // Br. J. Cancer.-1998.-Vol.78.-p.88-95.

126. Li Т., Xia L., Meng Q., Chen J. The expression of nm23-Hl in the investing papilloma and it's cancerated tissue of nasal cavity and parasinuses // Lin Chuang Er Bi Yan Hou Ke Za Zhi.-2004.-Vol. 18, N.2.-p.86-87

127. Lijnen H.R., De.Cock F., Collen D. Characterization of the binding of Urokinase-type Plasminogen activator (uPA) to Plasminogen, to Plasminogen-activator inhibitor-1 and to the uPA receptor // Eur. J. Biochem.-1994.-Vol.224.-p.567-574.

128. Liotta L.A., Steeg P.S., Stetler-Stevenson W.G. Cancer metastasis and angiogenesis; an inbalance of positive and negative regulation // Cell.-1991.-Vol.64.-p.327-336.

129. Liu J., Wang Y.K., Liu Y. et al. The effect of postoperative chemotherapy after esophagectomy on the survival rate to patients with original squamous cell carcinoma of esophagus // Zhonghua Liu Xing Bing Xue Za Zhi.-2004.-Vol.25, N.4.-p.346-350.

130. Maeda N., Hada Т., Murakami-Nakai C. et al. Effects of DNA polymerase inhibitory and antitumor activities of lipase-hydrolyzed glycolipid fractions from spinach // J. Nutr. Biochem.-2005.-Vol. 16, N.2.-p. 121-128.

131. Marshall B.J., Warren J.R. Unidentified curved bacilli in the stomach of patients with gastritis and peptic ulceration // Lancet.-1984.-Vol. 1.-p. 13111315.

132. Mechanisms of Carcinogenesis: Contribution of Molecular Epidemiology / Ed. by P.Buffer, J.Rice, R.Baan et al. Lyon, 2004. - 450p. - (IARC. Scientific Publications N157).

133. Migita Т., Sato E., Saito K., Mizoi T. et al. Differing expression of MMPs-1 and -9 and urokinase receptor between diffuse and intestinal-type gastric arcinoma// Int. J. Cancer.-1999.-Vol.84, N.l.-p.74-79.

134. Mignatti P., Robins E., Rifkin D. Tumor invasion through the human amniotic membrane: requirement for a proteinase cascade // Cell.-1986.-Vol.47.-p.487.

135. Mignatti P., Rifkin D.B. //Physiol. Rev.-1993.-Vol.73.-P. 161-195. (uPA)

136. Ming S.C. Tumors of the esophagus and stomach. Fascicle 7. -Washington. -1985.

137. Murakami M., Lan K., Subramanian C., Robertson E.S. Epstein-Barr virus nuclear antigen 1 interacts with Nm23-Hl in lymphoblastoid cell lines and inhibits its ability to suppress cell migration // J. Virol.-2005.-Vol.79, N.3.-p.1559-1568.

138. Nekarda H., Schmitt M., Ulm K. et al. Prognostic impact of urokinase-type plasminogen activator and its inhibitor PAI-1 in completely resected gastric cancer // Cancer Res.-1994.-Vol.54, N.l l.-p.2900-2907.

139. Neugut A.J., Hayek M., Howe G. Epidemiology of gastric cancer // Semin. Oncol.-1996.-Vol.23, N.3.-p.342-391.

140. Nomura S., Suzuki H., Masaoka T. et al. Effect of Dietary Anti-Urease Immunoglobulin Y on Helicobacter pylori Infection in Mongolian Gerbils // Helicobacter.-2005.-Vol.10, N.l.-p.43-52.

141. Ohta S., Lai E.W., Pang A.L. Downregulation of metastasis suppressor genes in malignant pheochromocytoma // Int. J. Cancer.-2005.-Vol.114, N.l.-p. 139143.

142. Okusa Y., Ichikura Т., Mochizuki H., Shinomiya N. Urokinase type plasminogen activator and its receptor regulate the invasive potential of gastric cancer cell lines // Int. J. Oncol.-2000.-Vol.l7, N.5.-p.l001-1005.

143. Olson D., Pollanen J., Hoyer-Hansen G. et al. Internalization of the urokinase-plasminogen activator inhibitor type-1 complex is mediated by the urokinase receptor // J. Biol. Chem.-1992.-Vol.267.-p.9129-9133.

144. Ono H.A., Davydova J.G., Adachi Y. et al. Promoter-controlled infectivity-enhanced conditionally replicative adenoviral vectors for the treatment of gastric cancer//J. Gastroenterol.-2005.-Vol.40, N.l.-p.31-42.

145. Ossovski L.J. In vivo ivasion of modified chorioallantoic membrane by tumor cells: the role of cell surface-bound urokinase // Cell. Biol.-1988.-Vol. 107.-p.2437-2445.

146. Pal S, Vishwanath SN, Erdjument-Bromage H. et al. Human SWI/SNF-associated PRMT5 methylates histone H3 arginine 8 and negatively regulates expression of ST7 and NM23 tumor suppressor genes // Mol. Cell Biol.-2004.-Vol.24, N.21.-p.9630-9645.

147. Pan W., Wang Y.X., Li G. et al. Study on the expression of nm23-Ml/NDPK a during the blastocyst adhesiveness in the mouse endometrium // Shi Yan Sheng Wu Xue Bao.-2004.-Vol.37, N.4.-p.289-294.

148. Park D.S., Lee Y.T., Lee J.M. Prediction of lymph node metastasis based on p53 and nm23-Hl expression in muscle invasive grade III transitional cell carcinoma of bladder // Adv. Exp. Med. Biol.-2003.-Vol.539.-p.67-85.

149. Pedersen A.N., Brunner N., Hoyer-Hansen G. et al. Determination of the Complex between Urokinase and Its Type-1 Inhibitor in Plasma from Healthy Donors and Breast Cancer Patients // Clin. Chem.-1999.-Vol.45.-p.l206-1213.

150. Plebani M., Herszenyi L., Cardin R. et al. Cysteine and serine proteases in gastric cancer // Cancer.-1995.-Vol.76, N.3.-p.367-375.

151. Plebani M., Herszenyi L., Carraro P. et al. Urokinase-type plasminogen activator receptor in gastric cancer: tissue expression and prognostic role // Clin. Exp. Metastasis.-1997.-Vol. 15.-p.418-425.

152. Plebani M., Herszenyi L., Carraro P. et al. Urokinase-type plasminogen activator receptor in gastric cancer: tissue expression and prognostic role // Clin. Exp. Metastasis.-1997.-Vol. 15, N.4.-p.418-425.

153. Pollanen J., Sakseba O., Salonen E.M. et al. Distinct localisation or urokinase-type plasminogen activator and its type 1 inhibitor under cultured human fibroblasts and sarcoma cells // J. Cell. Biol.-1987.-Vol.l04.-p.1085-1097.

154. Praus M., Wauterickx K., Collen D., Gerard R.D. Reduction of tumor cell migration and metastasis by adenoviral gene transfer of plasminogen activator inhibitors // Gene Ther.-1999.-Vol.6.-p.227-236.

155. Pyun D.K., Moon G., Han J. et al. A carcinoid tumor of the ampulla of Vater treated by endoscopic snare papillectomy // Korean J. Intern. Med.-2004.-Vol.19, N.4.-p.257-260.

156. Qiu Y., Langmann M.J., Eggo M.C. Targets of 17beta-oestradiol-induced apoptosis in colon cancer cells: a mechanism for the protective effects of hormone replacement therapy? // J. Endocrinol.-2004.-Vol.181, N.2.-p.327-337.

157. Quintero E, Pizarro MA, Rodrigo L, Association of Helicobacter pylori-related Distal Gastric Cancer with the HLA Class II Gene DQB10602 and cagA Strains in a Southern European Population // Helicobacter.-2005.-Vol.10, N.l.-p.l2-21.

158. Rajput В., Degen S.F., Reich I. et al. Chromosomal localisation of human tissue plasminogen activator and urokinase genes // Science.-1985.-Vol.230.-p.672-674.

159. Ray P., Bhatti R., Gadarowski J. et al. Inhibitory Effect of Amiloride on the Urokinase Plasminogen Activators in Prostatic Cancer // Tumor Biology.-1998.-Vol.l9.-p.60-64.

160. Ray S., Chattopadhyay N., Biswas N., Chatterjee A. Regulatory molecules in tumor metastasis // J. Environ. Pathol. Toxicol. Oncol.-1999,-Vol. 18, N.4.-p.251-259.

161. Reich R., Thompson I., Iwamoto Y. et al. Effects of inhibitors of plasminogen activator, serine proteinases, and collagenase IV on the ivasion of basement membranes by metastatic cells // Cancer Res.-1988.-Vol.48.-p.3307.

162. Riccio A., Grimaldi G., Verde P. et al. The human urokinase gene and its promoter//Nucleic Acids. Res.-1986.-Vol.l3.-p.2759-2771.

163. Romer J., Руке С., Lund L.R. et al. Expression of uPA and its receptor by both neoplastic and stromal cells during xenograft invasion // Int. J. Cancer.-1994.-Vol.57.-p.553-560.

164. Russell R.L., Pedersen A.N., Kantor J. et al. Relationship of nm23 to proteolytic factors, proliferation and motility in breast cancer tissues and cell lines // Br. J. Cancer.-1998.-Vol.78, N.6.-p.710-717.

165. Sakusabe M., Ouchi S., Seki H. et al. A case of effective weekly paclitaxel administration for gastric cancer recurrence with carcinomatous pericarditis // Gan To Kagaku Ryoho.-2005.-Vol.32, N.l .-p.77-79.

166. Sarris M., Scolyer R.A., Konopka M. et al. Cytoplasmic expression of nm23 predicts the potential for cerebral metastasis in patients with primary cutaneous melanoma // Melanoma Res.-2004.-Vol. 14, N. 1 .-p.23-27.

167. Schiffer J.T., Park C., Jefferson B.K. Cases from the Osier Medical Service at Johns Hopkins University // Am. J. Med. 2003.

168. Schmitt M., Harbeck N., Thomssen C. // Thromb. Haemost.-1997.-Vol.78.-p.285-296.

169. Schlechte W., Murano G., Boyd D. Examination the role of the urokinase receptor in human colon cancer mediated laminin degradation // Cancer Res.-1989.-Vol.49.-p.6064-6069.

170. Schuster M. Helicobacter pylori: reasons for eradication // Schweiz Rundsch. Med. Prax.-2004.-Vol.93, N.51-52.-p.2135-2141.

171. Shinmura K., Yin W., Isogaki J. et al. Stage dependent evalution of microsatellite instabilyty in gastric carcinoma with familial clusterig // Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev.-1997.-Vol.6, N.9.-p.693-697.

172. Siren V., Myohanen H., Antti V., Immonen I. Transforming Growth Factor Beta Induces Urokinase Receptor Expression in Cultured Retinal Pigment Epithelial Cells // Ophthalmic Research.- 1999.-Vol.31.-p. 184-191.

173. Soliani P., Ziegler S., Romani A. et al. Prognostic significance of nm23 gene product expression in patients with colorectal carcinoma treated with radical intent // Oncol. Rep.-2004.-Vol.l 1, N.6.-p.l 193-1200.

174. Sonohara S., Mira-y-Lopez R., Brentani M.M. Laminin and estradiol regulation of the plasminogen-activator system in MCF-7 breast-carcinoma cells // Int. J. Cancer.-1998.-Vol.76.-p.77-85.

175. Stark A.M., Tongers K., Maass N. et al. Reduced metastasis-suppressor gene mRNA-expression in breast cancer brain metastases // J. Cancer Res. Clin. Oncol.- 2005.-Vol. 131, N.3.-p.l91-198.

176. Stephens R.W., Nielsen H.J., Christensen I.J. Plasma urokinase receptor levels in patients with colorectal cancer: relationship to prognosis // J. Natl. Cancer Inst.-1999.-Vol.91 .-p.869-874.

177. Stoppelli M.P., Tacchetti С., Cubellis M.V. et al. Autocrine saturation of prourokinase receptors on human A431 cells // Cell.-1986.-Vol.45.-p.675-684.

178. Sumiyoshi K., Baba S., Sakaguchi S. et al. Increase in levels of plasminogen activator and type-1 plasminogen activator inhibitor in human breast cancer: possible roles in tumor progression and metastasis // Thromb. Res.-1991.-Vol.63.-p.59-71.

179. Sun Y.Q., Girgensone I., Leanderson P. et al. Effects of Antioxidant Vitamin Supplements on Helicobacter pylori-induced Gastritis in Mongolian Gerbils // Helicobacter.-2005.-Vol.10, N.l.-p.33-42.

180. Taal B.G., van Loon H.J., Kahn N. et al. The role of genatic factors in the development of gastric cancer // Ned. Tijdschr. Geneeskd.-1999.-Vol. 143, N.7.-p.342-346.

181. Takano Y., Kato Yo, Saegusa M. et al. The role of the Epstein-Barr virus in the oncogenasis of EBV(+) gastric carcinoma // Virchows Arch.-1999.-Vol.434, N.l.-p.l7-22.

182. Takiuchi H., Goto M., Kawabe S. et al. Second-line chemotherapy in gastric cancer // Gan To Kagaku Ryoho.-2005.-Vol.32, N.l.-p.19-23.

183. Tanaka N., Fukao H., Ueshima S. et al. Plasminogen activator inhibitor 1 in human carcinoma tissues // Int. J. Cancer.-1991.^-Vol.48, N.l .-p.481-484.

184. Timar J. Report of the National Oncology Research and Developement Consortium, 2003 // Magy Oncol.-2004.-Vol.48, N.l.-p.75-79.

185. Tran-Thang C., Kruithof E., Lahm H. et al. Modulation of the plasminogen activation system by inflammatory cytokines in human colon carcinoma cells // Br. J. Cancer.-1996.-Vol.74.-p.846-852.

186. Uenosono Y., Ishigami S., Baba M. et al. Extracorporeal ultrasonography is useful to evaluate preoperative staging in gastric cancer // Proceeding of the 4th1.ternational Gastric Cancer Congress.-New-York, USA, 2001.-Manduzzi Editore, 2000.-p.807-810.

187. Umehara Y., Kimura Т., Yoshida M. et al. Relationship between plasminogen activators and stomach carcinoma stage // Acta Oncol.-1991.-Vol.30, N.7.-p.815-818.

188. Von Rahden B.H., Feith M., Stein H.J. Carcinoma of the cardia: classification as esophageal or gastric cancer? // Int. J. Colorectal Dis.-2005.-Vol.20, N.2.-p.89-93.

189. Walt В., Kerr G. Can eradicating H. pylori gastric cancer? // Lancet.-1998.-Vol.351, N.9106.-p.887.

190. Wang C.S., Lin K.H., Hsu Y.C. et al. Alterations of thyroid hormone receptor alpha gene: frequency and association with Nm23 protein expression and metastasis in gastric cancer // Cancer Lett.-2002.-Vol. 175, N.2.-p.121-127.

191. Wang J., Mazar A., Quan N. et al. Plasminogen activation by pro-Urokinase in complex with its receptor dependence on a tripeptide Spectrozyme plasmin // Eur. J. Biochem.-1997.-Vol.247.-p.256-261.

192. Wang L.S., Chow K.C., Lien Y.C. et al. Prognostic significance of nm23-Hl expression in esophageal squamous cell carcinoma // Eur. J. Cardiothorac. Surg.-2004.-Vol.26, N.2.-p.419-424.

193. Wang L.S., Chow K.C., Wu Y.C. et al. Inverse expression of dihydrodiol dehydrogenase and glutathione-S-transferase in patients with esophageal squamous cell carcinoma // Int. J. Cancer.-2004.-Vol.111, N.2.-p.246-251.

194. Wang Y.F., Chow K.C., Chang S.Y. et al. Prognostic significance of nm23-H1 expression in oral squamous cell carcinoma // Br. J. Cancer.-2004.-Vol.90, N.l l.-p.2186-2193.

195. Wei H., Wu F., Zhou J. Expression of nm23/NDPK, integrin, type IV collagenase and uPA in transplanted tumors with various metastatic potential in nude mice and surgical specimens // Zhonghua Yi Xue Za Zhi.-1997.-Vol.77, N.8.-p.597-600.

196. Whelan S. L., Parkin D.M. and Masuyer E. Trends in Cancer Incidence and Mortality // Lyon, France, IARC Scientific Publications.-1993.

197. Wilman В., Chmielevska J., Ramby M., Inactivation of tissue plasminogen activator in plasma. Demostration of a complex with a new rapid inhibitor // J. Cell. Biochem.-1984.-Vol.259.-p.3644-3647.

198. Yamashita J., Ogawa M., Yamashita S. et al. Differential biological significance of tissue-type and urokinase-type plasminogen activator in human breast cancer // Br. J. Cancer.-1993.-Vol.68.-p.524-529.

199. Yamashita J., Ogawa M., Sakai K. Prognostic significance of three novel biologic factors in a clinical trial of adjuvant therapy for node-negative breast cancer // Surgery.-1995.-Vol. 117.-p.601 -608.

200. Yasuda Т., Sakata Y., Kitamura K., Morita M., Ishida T. Localization of plasminogen activators and their inhibitor in squamous cell carcinomas of the head and neck // Head Neck.-1997.-Vol. 19.-p.611-616.

201. Yeung P., Lee C.S., Marr P. et al. Nm23 gene expression in gastric carcinoma: an immunohistochemical study // Aust. N. Z. J. Surg. 1998. Vol.68, N.3.-p.l80-l 82.

202. Zhou X.D. Recurrence and metastasis of hepatocellular carcinoma: progress and prospects // Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int.-2002.-Vol.l, N.l .-p.35-41.

203. Zhu Y.L., Zheng S., Du Q. et al. Characterization of CagA variable region of Helicobacter pylori isolates from Chinese patients // World J. Gastroenterol.-2005.-Vol. 11, N.6.-p.880-884.

204. Zollo M., Andre A., Cossu A. et al. Overexpression of h-prune in breast cancer is correlated with advanced disease status // Clin. Cancer Res.-2005.-Vol.l 1, N.l.-p.l99-205.