Клинико-иммунологические особенности бруцеллеза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.10, кандидат медицинских наук Павлова, Ольга Михайловна

• Павлова, Ольга Михайловна
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Павлова, Ольга Михайловна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Клинические особенности и современные методы диагностики бруцеллеза.

1.2. Роль иммунной системы в патогенезе бруцеллеза.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Иммунологические методы исследования.

2.3. Статистическая обработка данных.

ГЛАВА III. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ.

ГЛАВА IV. СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ

ОСТРЫМ И ХРОНИЧЕСКИМ БРУЦЕЛЛЕЗОМ.

4.1. Особенности субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток периферической крови при бруцеллезе.

4.2. Функциональная активность иммунокомпетентных клеток периферической крови при бруцеллезе.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-иммунологические особенности бруцеллеза»

Актуальность проблемы

Рост заболеваемости, хроническое рецидивирующее течение, недостаточная эффективность существующих методов лечения и профилактики ставит бруцеллез в ряд наиболее актуальных проблем инфекционной патологии человека. Отмечено, что по своему распространению и социально-экономической значимости это заболевание занимает одно из первых мест среди зоонозов [Здродовский П.Ф. 1953, Яровой JI.B. 1959, 1977, Вершилова П.А., с соавт., 1972, 1974, Кортнев А.И., с соавт., 1976, Белозеров Е.С. 1985, Лямкин Г.И., с соавт., 1995, Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. 1999, Лобзин Ю.В., с соавт., 2000, Санникова И.В., с соавт., 2002, Boschiroli M.L., et al 2001, Godfroid J. 2002, Säuret J.M., Vilissova N. 2002].

Многообразие клинических проявлений, стертое клиническое течение и недостаточная эффективность существующих методов лечения бруцеллеза ведет к хронизации заболевания, с последующей стойкой инвалидизацией больных. В то же время, до настоящего момента не существует методов прогнозирования перехода острой формы бруцеллеза в хроническую, что обусловливает актуальность исследований, проводимых в этом направлении [Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. 1999, Лобзин Ю.В., с соавт., 2000].

Особенности жизненного цикла бруцелл и инфекционно-аллергический характер бруцеллеза позволяют констатировать ведущую роль нарушений иммунитета в патогенезе этого заболевания. В то лее время, многие аспекты иммунологии бруцеллеза, в частности особенности межклеточных взаимоотношений в процессе формирования противоинфекционного иммунитета при этой патологии изучены недостаточно, что не позволяет в полной мере использовать оценку иммунного статуса больных бруцеллезом для прогнозирования хронизации этой инфекции [Иванов К.С., с соавт., 1997,

Сафронова В.М., с соавт., 1997, Цирельсон JI.E., с соавт., 1997, Курманова Г.М., с соавт., 2002, Golding В., et al 2001, Moreno-Lafont М.С., et al 2002].

Открытие биологически активных веществ - цитокинов, регулирующих пролиферацию и уровень функциональной активности клеток как в норме, так и при патологии, позволяет с новых позиций оценить механизм формирования воспалительных реакций, аллергических и иммунных состояний и разработать новые методы прогнозирования характера инфекционного заболевания. Между тем, в доступной литературе роль нарушений обмена цитокинов при бруцеллезе не получила достаточного освещения, что и определяет актуальность исследований, проводимых в этом направлении.

Цель исследования

На основании клинико-иммунологического обследования изучить роль иммунной системы в патогенезе бруцеллеза и разработать объективные критерии, позволяющие прогнозировать вероятность его хронизации.

Задачи исследования

1. Изучить современные клинические особенности бруцеллеза.

2. Определить субпопуляционный состав иммунокомпетентных клеток периферической крови, уровень иммуноглобулинов сыворотки крови и активность нейтрофилов по данным НСТ-теста у больных острым и хроническим бруцеллезом.

3. Изучить in vitro спонтанную и стимулированную продукцию ИЛ1 (3, ИЛ2, ИЛ4, ИЛ6 и ФНОа в смешанной культуре мононуклеарных клеток, выделенных из периферической крови больных бруцеллезом.

4. Оценить диагностическую значимость отдельных клинических признаков и иммунологических показателей в прогнозировании хронизации бруцеллеза.

Научная новизна

Проведена комплексная, сравнительная оценка субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток в периферической крови больных острым и хроническим бруцеллезом.

Впервые выполнено сравнительное исследование in vitro спонтанной и стимулированной продукции цитокинов в культуре мононуклеарных клеток, выделенных из периферической крови больных острым и хроническим бруцеллезом.

На основании анализа диагностической значимости клинических симптомов, серологических и иммунологических данных разработана схема дифференциальной диагностики острого и хронического бруцеллеза. Предложены иммунологические критерии, позволяющие прогнозировать возможность хронизации инфекции.

Практическая значимость

Полученные результаты комплексного иммунологического обследования больных бруцеллезом позволяют рекомендовать его проведение в целях прогнозирования хронизации заболевания и могут служить основанием для проведения специфической иммунокорригирующей терапии.

Предложенная диагностическая таблица позволяет упростить дифференциальную диагностику острого и хронического бруцеллеза при отсутствии достоверных данных о продолжительности течения заболевания.

Внедрение результатов в практику

Полученные результаты внедрены в работу Краевого бруцеллезного центра г. Ставрополя и ЛПУ Ставропольского края. Материалы диссертации используются в лекциях и на практических занятиях по инфекционным болезням со студентами и слушателями факультета последипломного образования Ставропольской государственной медицинской академии.

Апробация и публикации

Материалы диссертации доложены на XI итоговой конференции молодых ученых и студентов СГМА (г. Ставрополь, 2003), VI съезде инфекционистов России (г. С.-Петербург, 2003), краевых конференциях врачей инфекционистов (г. Ставрополь, 2002, 2003), V общероссийской конференции «Гомеостаз и инфекционный процесс» (г. Кисловодск, 2004) и на заседаниях кафедры инфекционных болезней с эпидемиологией СГМА (г. Ставрополь, 2003, 2004). По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Характерная динамика изменений иммунологических показателей в процессе хронизации бруцеллеза позволяет рекомендовать комплексное иммунологическое обследование для его прогнозирования.

2. Особенности иммунологических изменений при бруцеллезе патогенетически обосновывают назначение иммунотерапии у больных бруцеллезом с учетом характера и длительности течения заболевания.

3. Предложенная диагностическая таблица, учитывающая информативность отдельных клинических проявлений и иммунологических показателей, позволяет увеличить эффективность дифференциальной диагностики острого и хронического бруцеллеза.

Структура и объем работы

Работа изложена на 136 страницах машинописного текста и состоит из введения, четырех глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 26 таблицами и 13 рисунками. В библиографический указатель включено 179 источника литературы, из которых 68 - отечественных и 111 - зарубеленых.

Заключение диссертации по теме «Инфекционные болезни», Павлова, Ольга Михайловна

ВЫВОДЫ

1. При постановке диагноза острого бруцеллеза, помимо продолжительности заболевания до 3 месяцев, положительной гемокультуры и ПЦР, наибольшее дифференциально-диагностическое значение имеют следующие признаки: повышение температуры до 38° С, увеличение размеров печени и селезенки, титры агглютининов в реакции Райта и гемагглютининов в РПГА выше 1 : 400, слабоположительная или отрицательная проба Бюрне.

2. При постановке диагноза хронического бруцеллеза, помимо продолжительности заболевания более 6 месяцев и положительной ПЦР, наибольшее дифференциально-диагностическое значение имеют следующие признаки: нормальная температура тела, жалобы со стороны центральной и периферической нервной системы, снижение потенции у мужчин, нарушение менструальной функции у женщин, наличие миокардиодистрофии, остеохондроза и артрозов, титры аглютининов в реакции Райта и гемаглютининов в РПГА менее 1 : 200, положительная и резкоположительная проба Бюрне

3. При отсутствии у больного бруцеллезом выше перечисленных признаков или наличия комбинации признаков, характерных как для острого, так и для хронического бруцеллеза, целесообразно проведение углубленного иммунологического обследования, которое позволяет не только установить дополнительные дифференциально-диагностические критерии, но и прогнозировать риск хронизации заболевания.

4. У больных острым бруцеллезом наблюдается повышение в крови количества СБ 16-лимфоцитов, увеличение активности нейтрофилов по данным НСТ-теста и активности макрофагов, за счет увеличения продукции ими ИЛ1р и ФНОа. В процессе хронизации бруцеллеза наблюдается уменьшение абсолютного количества нейтрофилов в периферической крови и снижение активности макрофагов, за счет низкого уровня продукции HJIip и ФНОа.

5. При остром бруцеллезе наблюдается увеличение активности плазматических клеток, на что указывает повышение уровня иммуноглобулинов всех классов в сыворотке крови. Однако финальные процессы дифференцировки В-лимфоцитов в плазматические клетки у этих пациентов нарушены, на что указывает низкий уровень продукции ИЛ6 и увеличение содержания в крови CD21-лимфоцитов. У больных хроническим бруцеллезом активность плазматических клеток снижается, на что указывает низкий уровень продукции IgM. Дифференцировка В-лимфоцитов в плазматические клетки нарушается на всех этапах, подтверждением чего является низкий уровень продукции ИЛ6 и ИЛ4.

6. Активность клеточного звена иммунитета при остром бруцеллезе снижена о чем свидетельствует уменьшение количества CD3 и CD4-лимфоцитов и низкая продукция ИЛ2. У больных хроническим бруцеллезом нарушение клеточного иммунитета прогрессирует, что подтверждается снижением у них количества не только CD3 и CD4, но и СТ)8-лимфоцитов, а так же низким уровнем продукции ИЛ2 и ИЛ4.

7. Уменьшение абсолютного количества нейтрофилов, моноцитов, CD4, CD8, CD21-лимфоцитов и IgM в периферической крови, а так же снижение спонтанной и стимулированной продукции ИЛ1Р, ИЛ4, ИЛ6 и ФНОа в смешанной культуре мононуклеарных клеток in vitro можно расценивать как неблагоприятный прогноз в отношении хронизации бруцеллеза.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Предложенная диагностическая таблица критериев острого и хронического бруцеллеза позволяет упростить дифференциальную диагностику стадий этого заболевания в сомнительных случаях.

2. Определение субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток периферической крови, а также спонтанной и стимулированной продукции ими ИЛ1р, ИЛ4, ИЛ6 и ФНОа in vitro может быть рекомендовано для включения в комплексное обследование больных бруцеллезом с целью прогнозирования хронизации заболевания.

118

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Павлова, Ольга Михайловна, 2004 год

1. Байрамова Э.Б., Иванова В.Ф., Рахимова Р.З., Кузахмедова Э.А., Петрова И.Е. Клинико-эпидемиологичеекие особенности современного течения острого бруцеллеза // Здравоохранение Туркменистана. - 1989. - № 9. - С. 24 - 26.

2. Белозеров Е.С. Бруцеллез. Л.: Медицина, 1985. - 184 с.

3. Беркоу Р. Руководство по медицине. Диагностика и терапия. В 2-х томах. Т. 1.: Пер. с англ. / Под ред. Р. Беркоу, Э. Флетчера. М., Мир. -1997.- 1045 с.

4. Блохин Б.М., Дубровина Е.С., Щербина А.Ю., Алдонина В.В., Чертов Б.Л. Клиническое значение фактора некроза опухоли // Гематология и трансфузиология. 1995. - Том 40, №5. - С.34 - 35

5. Брондз Б.Д. Т-лимфоциты и их рецепторы в иммунологическом распознавании: Пер. с англ. М.:Наука, 1987. - 348 с.

6. Бруцеллез / П.А. Вершилова, A.A. Голубева и др.; под ред. П.А. Вершиловой. М.Медицина, 1972. - 440 с.

7. Бунин В.Н. Показатели фагоцитоза к S- и R-формам бруцелл у больных острым и хроническим бруцеллезом, вызванным Brucella abortus // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. -1986. № 4. - С.89 - 90.

8. Бунин В.Н. Показатели фагоцитоза и неферментных катионных белков при бруцеллезе с учетом активности процесса: Автореф. дис. канд. мед. наук. Новосибирск, 1990. - 19 с.

9. Вершилова П.А., Чернышева М.И., Князева Э.Н. Патогенез и иммунология бруцеллеза. М.: Медицина, 1974. - 272 с.

10. Винницкий Л.И. Диагностические возможности современных иммунных технологий в хирургической клинике // Аллергология и иммунология. 2002. - Том 3 - №1. - С.198-203.

11. Возианов А.Ф., Бутенко А.К., Зак К.П. Цитокины. Биологические ипротивоопухолевые свойства. Киев.: Наукова думка, 1998. - 317 с.

12. Гланц С. Медико-биологическая статистика. Пер. с англ. М.: Практика, 1998.-459 с.

13. Грачева Л.А. Цитокины в онкогематологии. М.: Алтус, 1996. -122с.

14. Громыхина Н.Ю. Механизмы комплексного участия макрофагов в регуляции гуморального иммунного ответа // Автореферат дис. д-ра биол. наук. СПб., 1992 - 28 с.

15. Гублер Е.В. Вычислительные методы распознования патологических процессов. Л.: Медицина, 1970. - 294 с.

16. Джалилов К. Д., Гариб Ф.Ю., Ниязова Т.А. Содержание имуноглобулинов класса М, G, А при бруцеллезе // Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций: Тез. докл. науч. конф. Ставрополь, 1991. - С. 20 - 21

17. Долгих В.Т. Основы иммунологии. М.: Медицинская книга, 2003. -227 с.

18. Желудков М.М., Чернышева М.И., Павлова И.П., Сулейманов А.К., Курманова К.Б., Полыцикова H.H., перекопский И.С. Специфические иммуноглобулины разных классов при бруцеллезе людей // Терапевтический архив. 1990. - Том. 62, № 11 - С. 42 - 46.

19. Жетписбаева Х.С., Белозерова Е.С. Особенности иммнологического реагирования больных первично- и вторично-хроническим бруцеллезом // Иммунология. 1989. - № 1. - С. 83 - 85.

20. Жумадилова З.К., Байсугуров Ж.Б. Ферментные системы фагоцитирующих мононуклеаров при различных вариантах течения бруцеллеза // Здравоохранение Казахстана. 1989. - № 6. - С.29 - 31.

21. Здродовский П.Ф. Бруцеллез современное учение применительно к патологии человека. М.: Медгиз, 1953. - 243 с.

22. Иванов К.С., Курманова К.Б., Левитов Т.А., Хаинсон В.Х. Применение препаратов тимуса при лечение больных бруцеллезом //

23. Военно-медицинский журнал. 1997. - № 9. - С. 51 - 52.

24. Кетлинский С.А., Калинина H.A. Иммунология для врача. СПб., 1998.- 155 с.

25. Клиническая иммунология и аллергология: Учебное пособие / A.B. Караулов, A.M. Земсков и др.; под ред. А.В: Караулова. М.: Медицинское информационное агенство, 2002. - 651 с.

26. Козинец Г.И. Физиологические системы организма человека, основные показатели. М., Триада-Х. - 2000. - 384 с.

27. Козинец Г.И., Высоцкий В.В., Погорелов В.М., Еровиченков A.A., Малов В.А. Кровь и инфекция. М.: Триада-фарм. - 2001. - 456 с.

28. Колупаева В.Е. Преимущества метода ПЦР в реальном времени (Real Time PCR) // Генодиагностика инфекционных заболеваний. Сборник тезисов 4-й Всеросийской научно-практической конференции. М., 2002.-С. 182- 185.

29. Кондратенко И.В., Ярилин A.A., Хахалин JI.H. Интерлейкин-2 и его роль в развитии иммунодефицитов и других иммунопатологических состояний // Иммунология. 1992. - №1. - С.6 - 10.

30. Кортнев А.И., Перекопская Т.И., Харина Н.П. Бруцеллез. -Челябинск.: Южно-Уральское книжное издательство, 1976. 144 с.

31. Костюченко А.Л., Белоцерковский М.В., Соколов A.A. Острый эндотоксикоз. Медицинская лабораторная диагностика / Под ред. А.И. Карпищенко. СПб.: Интермедика, 1997. 307 с

32. Курманова К.Б., Ходжаева Л.У., Алтухов A.A., Тлеугобылова A.M., Бекетов Б.И. Сравнительное изучение серологических методов диагностики бруцеллеза // Здравоохранение Казахстана. 1989. - № 11. - с.47 -48.

33. Курманова К.Б., Кхамфыанг С., Юдин С.М. Эффективность пефлоксацина при бруцеллезе // Антибиотики и химиотерапич. 1995. -Том. 40, №7.-С. 39-42.

34. Лабораторные методы исследования. / Под ред. В.В. Меньшикова

35. М.: Медицина, 1987. 368 с.

36. Лебедев К. А., Понякина И.Д. Иммунология в клинической практике // ЦПИ: «Электронная медицинская книга», 1996. 373 с.

37. Лямкин Г.И., Таран И.Ф., Ляпустина Л.В., Дальвадянц В.Г., Луканина Л.М. Эпидемиологические особенности бруцеллеза в регионе северного кавказа // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 1995. - № 4. - С.39 - 42.

38. Марушвили Г.М., Барамидзе И.В., Цагарели З.Г., Втюрин Б.В. Электронно-микроскопическое исследование морфологии бруцелл и механизма фагоцитоза их клетками крови // Архив патологии. 1980. - Том. 42, Вып. 8. - С. 70 - 75.

39. Маянский А.Н. Современная эволюция идеи И.Н. Мечникова о внутрисосудистом воспалении // Иммунология. 1995. - №4. - С.8 -14.

40. Муковозова Л.А. Клиника современного бруцеллеза, вызванного Вг.МеШж^э // Клиническая медицина. 1986. - Том. 64, № 11. - С.51 -55.

41. Муковозова Л.А. Количественное содержание Тр. и Ту- лимфоцитов и их отношение у больных бруцеллезом // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1986. - № 4. - С.83 - 88.

42. Муковозова Л.А. Динамика субпопуляций лимфоцитов, иммуноглобулинов и специфических антител при остром бруцеллезе // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1986. -№ 10. - С.85 - 88.

43. Муковозова Л.А. Содержание Тц,-, Ту- лимфоцитов и их сочетание у больных бруцеллезом с различной очаговостью // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1987. - № 4. - С.55 -57.

44. Муковозова Л.А. Клинико-иммунологическая характеристика и иммуномодулирующая терапия бруцеллеза: Автореф. дис. док-рамед.наук. М., 1989. - 47 с.

45. Нагоев Б.С., Ахмедов Д.Р., Сааев Н.М. Функционально-метаболическая активность лейкоцитов у больных хроническим бруцеллезом // Терапевтический архив. 2001. - № 11. - С. 30 - 34.

46. Назаренко Г.И., Кишкун A.A. Клиническая оценка результатов лабораторных исследований. М.: Медицина, 2002. - 539 с.

47. Оценка иммунного статуса и дифференциальная иммунокоррекция при бруцеллезе: Методические рекомендации. / Сост. Г.М. Курманова, А.К. Дуйсенова и др. Алматы, 2002. - 30 с.

48. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. Иммунодиагностика иммунодифицитов // Иммунология. 1997. - №4. - С.4 - 7.

49. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология: Пер. с англ. М.: Мир, 2000. - 592.

50. Руководство по инфекционным болезням / Ю.В. Лобзин, Т.М. Зубик и др.; под. ред. Ю.В. Лобзина СПб.: Издательство Фолиант, 2000. -936 с.

51. Садыков К.Б., Смагулов З.Н. Розенсон Р.И., Садыков С.С. Клинико-иммунологические особенности подострого бруцеллеза // Здравоохранение Казахстана. 1992. - № 6. - С.42 - 43.

52. Сафронова В.М., Локтев H.A., Ляпустина Л.В. Некоторые показателиклеточного иммунитета к бруцеллезу // Иммунология и специфическая профилактика особо опасных инфекций. Материалы Российской науч. конф. Саратов, 1993. - С. 97 - 98.

53. Сафронова В.М., Локтев H.A., Ткаченко Л.И., Логвиненко О.В., Горбунов H.A., Ширанович М.П. Функционально-метаболическая активность нейтрофилов крови при разных клинических формах бруцеллеза // Журнал микробиологии. 1997. - № 1. - С.61 - 63.

54. Смирнов B.C., Фрейдлин И.С. Иммунодефицитные состояния. -СПб.: «Фолиант», 2000 568 с.

55. Сулейманов А.К. Клинико-иммунологические аспекты патогенеза, лечения и иммунореабилитации больных бруцеллезом: Автореф. дис. док-pa мед. наук. М., 1992. - 48 с.

56. Сулейманов А.К., Желудков М.М., Чернышева М.И., Лебедев В.В., Магомедова Д.А. Динамика уровней специфических иммуноглобулинов классов G, А, М и Е в процессе лечения больных хроническим бруцеллезом // Териториальный архив. 1992. -№ 11. - С.26 - 28.

57. Сулейманов А.К., Ющук Н.Д., Никулин В.Н., Кузнецов В.Ф., Желудков М.М. Функциональная активность нейтрофилов периферической крови у больных хроническим бруцеллезом // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1993. - № 4. - С.99 - 103.

58. Ткаченко Л.И. Функционально-метаболическая активность нейтрофильных гранулоцитов у больных различными клиническими формами бруцеллеза в процессе комплексного лечения. // Дисс. канд.мед. наук. Ставрополь, 1995 - 205 с.

59. Тотолян A.A., Марфичева H.A., Тотолян H.A. Иммуноглобулин в клинической лабораторной диагностике. СПб., 1996. - 28 с.

60. Цирельсон Л.Е., Курманова К.Б. Клеточные иммунноаллергические реакции у больных бруцеллезом // Здравоохранение Казахстана. -1997. -№ 10.-С.78-80.

61. Шиффман Фред Дж. Патофизиология крови / Пер. с англ. М. -СПб.: БИНОМ. - 2000. - 448 с.

62. Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. Лекции по инфекционным болезням. Том 1. М.: ВУНМЦ, 1999.-454 с.

63. Якубов Х.К. Состояние некоторых показателей клеточного иммунитета у больных бруцеллезом // Медицинский журнал Узбекистана. 1986. - № 2. - С. 37 - 38.

64. Ярилин A.A. Основы иммунологии. М.: Медицина, 1999. - 608 с.

65. Яровой Л.В. Бруцеллез овечье-козьего типа у человека. / Вопросы эпидемиологии и профилактики. Ставрополь.: Ставропольская правда, 1959.- 159 с.

66. Яровой Л.В. Бруцеллез у человека. Ставрополь, 1977. - 77 с.

67. Aggarwal В.В., Natarajan K.K. Tumor necrosis factors: Developments during the last decade // Eur. Cytokine Netw. 1996. - Vol.7, N2. - P.93 -124.

68. Ahmed K., Al-Matrouk K.A., Martinez G., Oishi K., Rotimi V.O., Nagatake T. Increased serum levels of interferon-gamma and interleukin-12 during human brucellosis. // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1999. - Vol.61, N 3. -P.425 -427.

69. Akova M., Uzun O., Akalin H.E., Hayran M., Unal S., Gur D. Quinolones in treatment of human brucellosis: comparative trial of ofloxacin-rifampin versus doxycycline-rifampin. // Antimicrob. Agents. Chemother. 1993. -Vol. 37,N9.-P.1831 - 1834.

70. Al-Shamahy H.A., Wright S.G. Enzyme-linked immunosorbent assay for brucella antigen detection in human sera. // J. Med. Microbiol. 1998. -Vol. 47, N 2. - P.169 - 172.

71. Araj G.F. Human brucellosis: a classical infectious disease with persistent diagnostic challenges. // Clin. Lab. Sci. 1999. - Vol. 12, N 4. - P. 207 -212.

72. Baldwin C.L, Winter A.J. Macrophages and Brucella. // Immunol. Ser. -1994,-Vol. 60.-P.363 380.

73. Barton B.E. The biological effects of interleukin 6. // Med. Res. Rev. -1996. Vol.16, N1. - P.87 - 109.

74. Bemelmans M.H., van Tits L.J., Buurman W.A. Tumor necrosis factor: function, release and clearance. // Crit. Rev. Immunol. 1996. - Vol.16, Nl.-P.l -11.

75. Beyaert R., Fiers W. Molecular mechanisms of tumor necrosis factor-induced cytotoxicity. What we do understand and what we do not. // FEBS Lett. 1994. - Vol. 340, N1 - 2. - P.9 - 16.

76. Boschiroli M.L., Foulongne V., O'Callaghan D. Brucellosis: a worldwide zoonosis. // Curr. Opin. Microbiol. 2001. - Vol. 4, N 1. - P.58 - 64.

77. Boyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1968. - Vol.21, N3 - P.77 - 82.

78. Brown M.A., Hural J. Functions of EL-4 and control of its expression. // Crit. Rev. Immunol. 1997. - Vol.17, N1. - P. 1 - 32.

79. Bustin S.A. Absolute quntification of mRNA using real-time reverse trascription polymerase chain reaction assaus // Journal of Mollecular Endocrinology. 2000. - N 25. - P. 169 - 193.

80. Caballero A., Bravo M.J., Nieto A., Colmenero J.D., Alonso A., Martin J. TNFA promoter polymorphism and susceptibility to brucellosis. // Clin. Exp. Immunol. 2000. - Vol. 121, N 3. - P.480 - 483.

81. Caron E., Gross A., Liautard J.P., Dornand J. Brucella species release a specific, protease-sensitive, inhibitor of TNF-alpha expression, active on human macrophage-like cells. // J. Immunol. 1996. - Vol. 156, N 8. - P. 2885-2893.

82. Cheville N.F., Kunkle R.A., Jensen A.E., Palmer M.V. Persistence of Brucella abortus in the livers of T cell-deficient nude mice. // Lab. Invest. -1995. Vol. 73, N 1. - P.96 - 102.

83. Chomarat P., Banchereau J. An update on interleukin-4 and its receptor. // Eur. Cytokine Netw. 1997. - Vol.8, N4. - P.333 - 344.

84. Dabdoob WA, Abdulla ZA. A panel of eight tests in the serodiagnosis and immunological evaluation of acute brucellosis. // East. Mediterr. Health. J. -2000.-Vol. 6, N 2-3. P.304 - 312.

85. Delespesse G., Yang L.P., Ohshima Y., Demeure C., Shu U., Byun DG., Sarfati M. Maturation of human neonatal CD4+ and CD8+ T lymphocytes into Thl/Th2 effectors. // Vaccine. 1998. - Vol.16, N14 - 15. - P.1415 -1419.

86. Dinarello C.A. Biologic basis for interleukin-1 in disease. // Blood. -1996. Vol.87, N6. - P.2095 - 2147.

87. Dinarello C. A. Biological basis for interleukin-2 disease. // Blood. -1996.-Vol. 87, N6. P.49 - 51.

88. Dinarello C.A. Interleukin-1. // Cytokine Growth Factor Rev. 1997. -Vol.8, N4. - P.253 - 265.

89. Dinarello C.A. Interleukin-1, interleukin-1 receptors and interleukin-1 receptor antagonist. // Int. Rev. Immunol. 1998. - Vol.16, N5 - 6. - P.457 -499.

90. Ding X.Z., Fernandez-Prada C.M., Bhattacharjee A.K., Hoover D.L. Over-expression of hsp-70 inhibits bacterial lipopolysaccharide-induced production of cytokines in human monocyte-derived macrophages. // Cytokine. 2001. - Vol. 16, - N6. - P. 210 - 219.

91. Fernandes D.M., Jiang X., Jung J.H., Baldwin C.L. Comparison of T cell cytokines in resistant and susceptible mice infected with virulent Brucella abortus strain 2308. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 1996. - Vol. 31, N 16(3-4). -P. 193-203.

92. Gad El-Rab M.O., Kambal A.M. Evaluation of a Brucella enzymeimmunoassay test (ELISA) in comparison with bacteriological culture and agglutination. // J. Infect. 1998. - Vol. 36, N 2. - P.197 - 201.

93. Galanakis E., Makis A., Bourantas K.L., Papadopoulou Z.L. Interleukin-3 and interleukin-4 in childhood brucellosis. // Infection. 2002. - Vol. 30, N 1. -P.33 - 34.

94. Gesbert F., Delespine-Carmagnat M., Bertoglio J. Recent advances in the understanding of interleukin-2 signal transduction. // J. Clin. Immunol.- 1998. Vol.18, N5. - P.307 - 320.

95. Godfroid J. Brucellosis in wildlife. // Rev. Sci. Tech. 2002. - Vol. 21, N 2. - P.277 - 286.

96. Golding B., Zaitseva M., Golding H. The potential for recruiting immune responses toward type 1 or type 2 T cell help. // Am. J. Trop. Med. Hyg. 1994. - Vol. 50, N 4. - P. 33 - 40.

97. Golding B., Scott D.E., Scharf O., Huang L.Y., Zaitseva M., Lapham C., Eller N., Golding H. Immunity and protection against Brucella abortus. // Microbes. Infect. 2001. - Vol. 3, N 1. - P.43 - 48.

98. Grossens V., Grooten J., De Vos K., Fiers W. Direct evidence for tumor necrosis factor-induced mitochondrial reactive oxygen intermediates and their involvement in cytotoxicity. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA 1995. -Vol.92, N18.-P.8115-8119.

99. Hibi M., Nakajima K., Hirano T. IL-6 cytokine family and signal transduction: a model of the cytokine system. // J. Mol. Med. 1996. -Vol.74, N1. - P.l - 12.

100. Higuchi R. Kinetic PCR Analysis: Real-time of DNA amplification reaction//Biotechnologi. 1993. - N 11. - P. 1026 - 1030.

101. Hoffmann E.M., Houle J.J. Contradictory roles for antibody and complement in the interaction of Brucella abortus with its host. // Crit. Rev. Microbiol. 1995. - Vol. 21, N 3. - P.153 - 163.

102. Jaattela M. Biology of disease. Biologic activities and mechanisms of action of tumor necrosis factor-a. // Lab. Invest. 1991. - Vol.64, N6. -P.724 - 742.

103. Jiang X., Baldwin C.L. Effects of cytokines on intracellular growth of Brucella abortus. //Infect. Immun. 1993. - Vol.61, N1. -P.124 - 134.

104. Kishimoto T., Akira S., Narazaki M., Taga T. lnterleukin-6 family of cytokines and gp 130 // Blood. 1995. - Vol.86, N 4. - P.1243 - 1254.

105. Ko J, Splitter G.A. Molecular host-pathogen interaction in brucellosis: current understanding and future approaches to vaccine development for mice and humans. // Clin. Microbiol. Rev. 2003. - Vol. 16, N1. - P.65 -78.

106. Lazutka J.R. Genetic toxicity of cytokines. // Mutat. Res. 1996. -Vol.361, N2-3.-P.95- 105.

107. Liautard J.P., Gross A., Dornand J., Kohler S. Interactions between professional" phagocytes and Brucella spp. // Microbiologia. 1996. - Vol. 12, N 2. - P.197 - 206.

108. Lucero N.E., Foglia L., Ayala S.M., Gall D., Nielsen K. Competitive enzyme immunoassay for diagnosis of human brucellosis. // J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37, N 10. - P.3245 - 3248.

109. Memish Z.A., Almuneef M., Mah M.W., Qassem L.A., Osoba A.O. Comparison of the Brucella Standard Agglutination Test with the ELISA IgG and IgM in patients with Brucella bacteremia. // Diagn. Microbiol. Infect. Dis. 2002. - Vol. 44, N 2. - P.129 - 132.

110. Mishal J, Ben-Israel N, Levin Y, Sherf S, Jafari J, Embon E, Sherer Y. Brucellosis outbreak: analysis of risk factors and serologic screening. // Int. J. Mol. Med. 1999. - Vol. 4, N 6. - P.655 - 658.

111. Morata P., Queipo-Ortuno M.I., Reguera J.M., Garcia-Ordonez M.A., Pichardo C., Colmenero J.D. Posttreatment follow-Up of brucellosis by PCR assay. // J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37, N 12. - P.4163 - 4166.

112. Morata P., Queipo-Ortuno M.I., Reguera J.M., Miralles F., LopezGonzalez J.J., Colmenero J.D. Diagnostic yield of a PCR assay in focal complications of brucellosis. // J. Clin. Microbiol. 2001. - Vol.39, N 10. - P.3743 - 3746.

113. Mosmanu T.R. Functions of CD8+ T-cell secreting differant cytokine potterns // Seminars in Immunology. 1997. - Vol.9. - P.87 - 92.

114. Navarro E., Escribano J., Fernandez J., Solera J. Comparison of three different PCR methods for detection of Brucella spp in human blood samples. // FEMS Immunol. Med. Microbiol. 2002. - Vol. 34, N 2. -P.147 - 151.

115. Nelms K., Huang H., Ryan J., Keegan A., Paul W.E. Interleukin-4 receptor signaling mechanisms and their biological significance. // Adv. Exp. Med. Biol. 1998. - Vol.452, N5. - P.37 - 43.

116. Nelms K., Keegan A.D., Zamorano J., Ryan J.J., Paul W.E. The IL-4 receptor: signaling mechanisms and biologic functions. // Annu. Rev. Immunol. 1999. - Vol.17, N1999. - P.701 - 738.

117. Nelson B.H., Willerford D.M. Biology of the interleukin-2 receptor. // Adv. Immunol. 1998. - Vol.70, N442. - P.l - 81.

118. Newman I., Wilkinson P.C. Chemotactic activity of lymphotoxin and tumour necrosis factor alpha for human neutrophils. // Immunology. -1989. Vol.66, N2. - P.318 - 320.

119. Nielsen K., Gall D. Fluorescence polarization assay for the diagnosis of brucellosis: a review. // J. Immunoassay. Immunochem. 2001. - Vol. 22, N 3. - P.183 - 201.

120. Ocon P., Reguera J.M., Morata P., Juarez C., Alonso A., Colmenero J.D. Phagocytic cell function in active brucellosis. // Infect. Immun. 1994. -Vol. 62, N 3. - P.910 - 914.

121. Oliveira S.C., Zhu Y., Splitter G.A. Recombinant L7/L12 ribosomal protein and gamma-irradiated Brucella abortus induce a T-helper 1 subset response from murine CD4+ T cells. // Immunology. 1995. - Vol. 83, N 4.-P. 659-664.

122. Pahlavani M.A., Richardson A. The effect of age on the expression of interleukin-2. // Mech. Ageing. Dev. 1996. - Vol.89, N3. - P.125 - 154.

123. Queipo-Ortuno M.I., Morata P., Ocon P., Manchado P., Colmenero J.D. Rapid diagnosis of human brucellosis by peripheral-blood PCR assay. // J. Clin. Microbiol. 1997. - Vol. 35, N 11. - 2927 - 2930.

124. Reed W.A., Elzer P.H., Enright F.M., Jaynes J.M., Morrey J.D., White K.L. Interleukin 2 promoter/enhancer controlled expression of a synthetic cecropin-class lytic peptide in transgenic mice and subsequent resistance to

125. Brucella abortus. 11 Transgenic. Res. 1997. - Vol. 6, N 5. - P.337 - 347.

126. Rieckmann P., Tuscano J.M., Kehrl J.H. Tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) and interleukin-6 (EL-6) in B-lymphocyte function. // Methods. 1997. - Vol.11, N1. - P.128 - 132.

127. Rink L., Kirchner H. Recent progress in the tumor necrosis factor-alpha field. // Int. Arch. Allergy. Immunol. 1996. - Vol.111, N3. - P. 199 - 209.

128. Rittig M.G., Alvarez-Martinez M.T., Porte F., Liautard J.P., Rouot B. Intracellular survival of Brucella spp. in human monocytes involves conventional uptake but special phagosomes. // Infect. Immun. 2001. -Vol. 69, N 6. - P.3995 - 4006.

129. Rodriguez-Zapata M., Reyes E., Sanchez L., Espinosa A., Solera J., Alvarez-Mon M. Defective reactive oxygen metabolite generation by macrophages from acute brucellosis patients. // Infection. 1997. - Vol. 25, N 3. - P.187 - 188.

130. Romero C., Gamazo C., Pardo M., Lopez-Goni I. Specific detection of Brucella DNA by PCR. // J. Clin. Microbiol. 1995. Vol. 33, N 3. - P.615 -617.

131. Ruiz J., Lorente I., Perez J., Simarro E., Martinez-Campos L. Diagnosis of brucellosis by using blood cultures. // J. Clin. Microbiol. 1997. - Vol. 35, N 9. - P.2417 - 2418.

132. Sacks T., Klinman D.M. Long-term effect of primary immunization on subsequent immune responsiveness. // Cell. Immun. 1997. - Vol. 177, N 2.-P. 162-168.

133. Salmon-Ehr V., Gillery P., Kalis B., Banchereau J., Maquart F.X. Interleukin-4: from B-lymphocyte to fibroblast. // Pathol. Biol. 1994. -Vol.42, N3.-P.262-268.

134. Sangari F.J., Agüero J. Molecular basis of Brucella pathogenicity: an update. //Microbiología. 1996. - Vol. 12, N 2. -P.207 - 218.

135. Sari R., Buyukberber N., Sevinc A., Bayindir Y., Buyukberber S. Brucellosis in the etiology of febrile neutropenia: case report. // J. Chemother. 2002. - Vol. 14, N1. - P.88 - 91.

136. Sathiyaseelan J., Jiang X., Baldwin C.L. Growth of Brucella abortus in macrophages from resistant and susceptible mouse strains. // Clin. Exp. Immunol. 2000. - Vol. 121, N 2. - P.289 - 294.

137. Saunders B.M., Liu Z., Zhan Y., Cheers C. Interleukin-6 production during chronic experimental infection. // Immunol. Cell. Biol. 1993. -Vol. 71, N 4. - P.275 - 280.

138. Sauret J.M., Vilissova N. Human brucellosis. // J. Am. Board. Fam. Pract. 2002. - Vol. 15, N 5. - P.401 - 406.

139. Scott D.E., Agranovich I., Inman J., Gober M., Golding B. Inhibition of primary and recall allergen-specific T helper cell type 2-mediated responses by a T helper cell type 1 stimulus. // J. Immunol. 1997. - Vol. 159,N1.-P. 107-116.

140. Sedlacek H-H., Moroy T. Immune reactions. Springer-Verlag Berlin Heidelberg New York. 1995. - 58lp.

141. Shamelian S.O. Diagnosis and treatment of brucellosis. // Neth. J. Med. 2000. - Vol. 56, N 5. - P.198 - 200.

142. Sifuentes-Rincon A.M., Revol A., Barrera-Saldana H.A. Detection and differentiation of the six Brucella species by polymerase chain reaction. // Mol. Med. 1997. - Vol. 3, N 11. - P.734 - 739.

143. Simpson R.J., Hammacher A., Smith D.K., Matthews J.M., Ward L.D. Interleukin-6: structure-function relationships. // Protein Sci. 1997. -Vol.6, N5. - P.929 - 955.

144. Splitter G.A., Everlith K.M. Brucella abortus regulates bovine macrophage-T-cell interaction by major histocompatibility complex class II and interleukin-1 expression. // Infecí. Immun. 1989. - Vol. 57, N 4. - P.1151-1157.

145. Svetic A., Jian Y.C., Lu P., Finkelman F.D., Gause W.C. Brucella abortus induces a novel cytokine gene expression pattern characterized by elevated IL-10 and IFN-gamma in CD4+ T cells. // Int. Immunol. 1993. -Vol. 5, N 3. - P. 877- 883.

146. Takatsu K. Cytokines involved in B-cell differentiation and their sites of action. //Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1997. - Vol.215, N2. -P.121 - 133.

147. Tcherneva E., Rijpens N., Jersek B., Herman L.M. Differentiation of Brucella species by random amplified polymorphic DNA analysis. // J. Appl. Microbiol. 2000. - Vol. 88, N 1. - P.69 - 80.

148. Trujillo I.Z., Zavala A.N., Caceres J.G., Miranda C.Q. Brucellosis. // Infect. Dis. Clin. North. Am. 1994. - Vol. 8, N 1. - P.225 - 241.

149. Vidziunaite R., Mikulskis P., Kulys J. Chemiluminescent immunoassay (CLIA) for the detection of brucellosis and tularaemia antigens. // J. Biolumin. Chemilumin. 1995. - Vol. 10, N 4. - P.199 - 203.

150. Wang J.M., Walter S., Mantovani A. Re-evaluation of the chemotactic activity of tumour necrosis factor for monocytes. // Immunology 1990. -Vol.71, N3.-P.364-367.

151. Wang M., Qureshi N., Soeurt N., Splitter G. High levels of nitric oxide production decrease early but increase late survival of Brucella abortus in macrophages. // Microb. Pathog. 2001. - Vol. 31, N 5. - P.221 - 230.

152. Yagupsky P. Detection of Brucellae in blood cultures. // J. Clin. Microbiol. 1999. - Vol. 37, N 11. - P.3437 - 3442.

153. Zhan Y., Yang J., Cheers C. Cytokine response of T-cell subsets from Brucella abortus-infected mice to soluble Brucella proteins. // Infect. Immun. 1993. - Vol. 61, N 7. - P.2841 - 2847.

154. Zhan Y., Kelso A., Cheers C. Differential activation of Brucella-reactive CD4+ T cells by Brucella infection or immunization with antigenic extracts. // Infect. Immun. 1995. - Vol. 63, N 3. - P.969 - 975.

155. Zhan Y., Liu Z., Cheers C. Tumor necrosis factor alpha and interleukin-12 contribute to resistance to the intracellular bacterium Brucella abortus by different mechanisms. // Infect. Immun. 1996. - Vol. 64, N7. - P.2782 -2786.

156. Zhan Y., Cheers C. Control of IL-12 and EFN-gamma production in response to live or dead bacteria by TNF and other factors. // J. Immunol. -1998. Vol. 161, N 3. - P.1447 - 1453.

157. Zerva L., Bourantas K., Mitka S., Kansouzidou A., Legakis N.J. Serum is the preferred clinical specimen for diagnosis of human brucellosis by PCR. // J. Clin. Microbiol. 2001. - Vol. 39, N. 4. - P. 1661 - 1664.