Комбинированное применение аутологичных клеток буккального эпителия и продуктов богатой тромбоцитами плазмы в лечении лимбально-клеточной недостаточности (экспериментальное исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Целая Татьяна Валерьевна

• Целая Татьяна Валерьевна
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Целая Татьяна Валерьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение, функции и физиология роговичного эпителия

1.2.Современные аспекты этиологии, клиники, диагностики и лечения лимбально-клеточной недостаточности

1.2.1.Определение, этиология, классификация лимбально-клеточной недостаточности

1.2.2. Диагностика лимбально-клеточной недостаточности

1.2.3. Принципы восстановления глазной поверхности при лимбально -клеточной недостаточности

1.2.3.1. Трансплантация тканей при лимбально-клеточной недостаточности

1.2.3.2. Трансплантация культивированных лимбальных эпителиальных клеток

1.3. Эпителий слизистой оболочки полости рта как альтернативный источник

стволовых клеток для восстановления роговичной поверхности при ЛКН

1.3.1. Строение слизистой оболочки полости рта

1.3.2. Применение слизистой оболочки полости рта в офтальмологии

1.4. Богатая тромбоцитами плазма

1.4.1. Общая характеристика богатой тромбоцитами плазмы

1.4.2. Применение богатой тромбоцитами плазмы в медицинской практике

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

2.2. Модель лимбально-клеточной недостаточной для изучения эффективности трансплантации аутологичных клеток буккального эпителия

2.3. Забор биоматериала для получения эпителиального пласта и изготовления комбинированной биоконструкции с буккальными эпителиальными клетками

2.4. Выделение эпителиального пласта буккальных клеток в I серии эксперимента

2.5. Изготовление комбинированной биоконструкции с аутологичными буккальными эпителиальными клетками

2.5.1. Модель комбинированной биоконструкции

2.5.2. Получение культуры буккальных эпителиальных клеток во II и III сериях экспериментов

2.5.3. Формирование комбинированной биоконструкции с культивированными буккальными эпителиальными клетками

2.5.4. Получение суспензии минимально манипулированных клеток II и III сериях экспериментов

2.5.5. Формирование комбинированной биоконструкции с минимально манипулированными буккальными клетками

2.6. Изготовление лизата аутологичной богатой тромбоцитами плазмы в IV серии эксперимента

2.7. Трансплантация аутологичных буккальных эпителиальных клеток при экспериментальной лимбально-клеточной недостаточности

2.7.1. Иссечение фиброваскулярного паннуса

2.7.2. Трансплантация эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта

2.7.3. Трансплантация комбинированной биоконструкции с аутологичными буккальными клетками

2.8. Применение лизата богатой тромбоцитами плазмы в IV серии экспериментов

2.9. Методы исследования

2.9.1. Экспериментально-клинические методы исследования

2.9.2. Морфологические методы исследования

2.3. Статистические методы

ГЛАВА 3. АНАЛИЗ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ОСОБЕННОСТЕЙ РЕГЕНЕРАЦИИ РОГОВИЦЫ ПОСЛЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЭПИТЕЛИАЛЬНОГО ЛОСКУТА СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА ПРИ ТОТАЛЬНОЙ ЛИМБАЛЬНО-КЛЕТОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ (I серия экспериментов)

3.1. Оценка жизнеспособности эпителиальных клеток в составе эпителиального пласта

3.2. Сравнение клинико-экспериментальных данных восстановления роговицы после трансплантации эпителиального лоскута и на фоне только консервативного лечения

3.3. Результаты морфологического исследования влияния трансплантации эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта и консервативного лечения на процессы регенерации и репарации роговицы

ГЛАВА 4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОПТИМАЛЬНОГО СРОКА ФИКСАЦИИ КОМБИНИРОВАННОЙ БИОКОНСТРУКЦИИ С АУТОЛОГИЧНЫМИ КЛЕТКАМИ БУККАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ ПОСЛЕ УСТРАНЕНИЯ ФИБРОВАСКУЛЯРНОГО ПАННУСА (II серия экспериментов)

4.1. Сравнение клинико-экспериментальных данных регенерации поверхности

роговицы при фиксации комбинированной биоконструкции в течение 3 и

суток

4.2 Результаты флюоресцентной микроскопии удаленных биоконструкций, фиксированных в течение 3-х и 5-ти суток

4.3 Морфологическая оценка регенерации роговицы при фиксации комбинированной биоконструкции в течение 3-х и 5-ти суток

ГЛАВА 5. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ КОМБИНИРОВАННОЙ БИОКОНСТРУКЦИИ С КУЛЬТИВИРОВАННЫМИ И МИНИМАЛЬНО МАНИПУЛИРОВАННЫМИ БУККАЛЬНЫМИ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫМИ КЛЕТКАМИ НА ПРОЦЕССЫ РЕГЕНЕРАЦИИ РОГОВИЦЫ ПРИ УСТРАНЕНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЛИМБАЛЬНО -КЛЕТОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ (III серия экспериментов)

5.1. Сравнение клинико-экспериментальных данных восстановления роговицы после трансплантации культивированных и минимально манипулированных

буккальных эпителиальных клеток

5.2. Результаты морфологического исследования влияния трансплантации культивированных и минимально манипулированных буккальных эпителиальных клеток в составе комбинированной биоконструкции на процессы регенерации и репарации роговицы

ГЛАВА 6. КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ ВОССТАНОВЛЕНИЯ РОГОВИЧНОЙ ПОВЕРХНОСТИ ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ПРИМЕНЕНИИ АУТОЛОГИЧНЫХ КЛЕТОК БУККАЛЬНОГО ЭПИТЕЛИЯ И ЛИЗАТА БОГАТОЙ ТРОМБОЦИТАМИ ПЛАЗМЫ ПРИ УСТРАНЕНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЛИМБАЛЬНО -КЛЕТОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ (IV серия экспериментов)

6.1. Сравнение клинико-экспериментальных данных восстановления роговицы после трансплантации комбинированной биоконструкции с последующим применением аутологичного лизата богатой тромбоцитами плазмы и на фоне консервативного лечения

6.2. Результаты морфологического исследования применения аутологичного лизата богатой тромбоцитами плазмы после трансплантации комбинированной биоконструкции с минимально манипулированными буккальными эпителиальными клетками по сравнению с только консервативным лечением149

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комбинированное применение аутологичных клеток буккального эпителия и продуктов богатой тромбоцитами плазмы в лечении лимбально-клеточной недостаточности (экспериментальное исследование)»

Актуальность темы и степень её разработанности

В настоящее время проблема слепоты и слабовидения является одной из социально и экономически значимых проблем. По данным Всемирной организации здравоохранения 2,2 миллиарда человек во всем мире страдают той или иной формой нарушения зрения или слепотой, из них 4,2 млн случаев приходится на помутнение роговицы. (World Health Organization, World report on vision, 2019). По данным регионов Российской Федерации за 2012 год роговичная слепота составляет 5,9% всех слепых и слабовидящих России. В структуре роговичной слепоты 37% приходится на кератиты, 27% на кератоувеиты, 21% на рубцы и помутнения роговицы различной этиологии, 9% на язвы роговицы и 6% на дистрофии роговицы (Нероев В.В., 2020 г.).

В патогенезе некоторых заболеваний роговицы (особенно хронических) важную роль отводят повреждению клеток зоны лимба. (Кавелина А.С., и др, 2013; Utheim T.A., 2015;). Ещё в 1944 г Mann W. и соавторы доказали, что регенерация эпителия роговицы происходит из пигментированного лимба (Mann W., 1944). В настоящее время достоверно известно, что в палисадах Фогта лимба в непосредственной близости к кровеносным сосудам (нише) расположена популяция самообновляющихся стволовых клеток (лимбальных эпителиальных стволовых клеток (ЛЭСК)), за счет которых происходит непрерывное обновление эпителия роговицы в гомеостатических условиях (Bonnet C. et all., 2021; Davanger M., Evensen A., 1971; Schofield 1983; Tseng, 1989; Van Buskirk E.M .,1989; Watt 2000г,). Пролиферативная способность ЛЭСК увеличивается при повреждении поверхностных слоев роговицы (Cotsarelis G, et al., 1989). Помимо поддержания целостности поверхности роговицы лимб, являясь своеобразным барьером, также препятствует распространению конъюнктивального эпителия на поверхность роговицы. Повреждение лимбальной зоны, сопровождающееся гибелью популяции ЛЭСК или нарушением их пролиферации в том числе и из-за разрушения ниши,

приводит к нарушению регенерации эпителия роговицы и нарушению барьерной функции, что клинически определяется как лимбально-клеточная недостаточность (ЛКН) (Ситник Г.В. 2005; Deng et al., 2019;, Holland E.J. 2015; Sejpal et al., 2013,).

Частота и распространенность ЛНК (лимбально-клеточная недостаточность) во всем мире неизвестны, но распространенность в Индии оценивается примерно в 1,5 миллиона (Vemuganti G.K., SangwanV.S., 2010), частота в Северной Америке приближается к "тысячам" (Schwab I.R., Isseroff R.R., 2000). Этиологическая структура ЛКН очень разнообразна. К значительному изменению в лимбальной зоне чаще всего приводят такие заболевания, как механическая травма зоны лимба, химические ожоги глаз, системные аутоиммунные заболевания с поражением глаз, воспалительные заболевания роговицы, а также существует идиопатическая форма ЛКН (Вит В.В., 2003; Черныш В.Ф., Бойко Э.В., Шишкин М.М., 2004; Ситник Г.В., 2005; Черныш В.Ф., Бойко Э.В., 2008; España E.M., et all, 2002, Javadi M.A., 2005; Kawashima M. 2007; Nakamura T.,2006; Shortt A.J. 2008).

Клиника ЛКН представляет картину роговичного синдрома (раздражение, эпифора, блефароспазм, светобоязнь, ощущение инородного тела, повторяющиеся эпизоды боли (из-за несостоятельного эпителия), ухудшение зрения (Qihua Le, 2019; Utheim 2015), сопровождающуюся персистирующими эрозиями и язвами. Биомикроскопически определяется потеря палисадов Фогта, непрозрачный нерегулярный эпителий роговицы с изменчивой толщиной, эпителиальная кератопатия, дефекты эпителия, нестабильная слезная пленка, неоваскуляризация роговицы, что в конечном итоге приводит к формированию фиброваскулярного паннуса. (Черныш В.Ф., Бойко Э.В., Шишкин М.М., 2004; Милюдин Е.С., 2006; Di lorio E. et all, 2010; Dua H.S. et all, 1990, España E.M.et all, 2002; Schwartz G.S.et all, 2005; Shortt A.J. et all, 2008; Vemuganti G.K. et all, 2010). Данное состояние значительно снижает качество жизни и затрудняет социальную адаптацию пациенту (Pfister R.R., 1994; Grueterich M. et al., 2003).

Стратегии лечения ЛКН можно в широком смысле разделить на три категории: (а) трансплантация ткани лимба, содержащей ЛЭСК, (б) трансплантация культивированных эпителиальных клеток стволовых клеток и (в) альтернативные

подходы, которые включают имплантацию кератопротезов, повторную обработку конъюнктивальной ткани, бандажные контактные линзы, кислородотерапию, стероиды, ингибиторы ангиогенеза, смазывающие глазные капли, аутологичную сыворотку и др. (Utheim, 2015г.)

Первая успешная аутологичная трансплантация лимба в клинике была выполнена в 1989 году [Kenyon K.R., Tseng S.C., 1989]. С того времени и по настоящее время данная операция является методом выбора при лечении односторонней ЛКН. Однако, если лимбальная зона парного глаза хоть немного повреждена, забор трансплантатов повышает риск развития на глазу -доноре ятрогенной ЛКН, а при субтотальном или тотальном двустороннем поражении вообще становится невозможен. В связи с чем при двусторонней ЛКН стали применяться различные варианты аллолимбальной трансплантация, дающая хорошие функциональные результаты, однако требующие длительного применения иммуносупрессоров на фоне сохраняющегося при этом риском отторжения трансплантата и развитием рецидива конъюнктивизации (Solomon A., 2002; Holland E.J., 2015).

При односторонней ЛКН возможно проведение аутолимбальной трансплантации культивированных (CLET) или некультивированных лимбальных клеток (SLET) с парного здорового глаза (Sangwan V.S. et al., 2011; Malyugin B.S. et all, 2020; Nakamura T., et al., 2004; Pellegrini G., et al., 1997). Существует множество методик культивирования и фиксации трансплантата, дающие в целом хороший результат. Основными недостатком данных методик является невозможность их выполнения при двустороннем поражении и сохраняющийся риск развития ЛКН непораженного заболеванием глаза, а также ограниченность количества материала при необходимости повторной трансплантации. В таком случае альтернативным методом становится аллотрансплантация культивированных лимбальных клеток, источником которых являются лимбальные зоны кадаверных глаз или близких родственников (Schwab I.R., et al., 2000).

За последнее годы фокус внимания ученых сместился в сторону применения стволовых клеток из аутологичных тканей других структур. Одним из таких вариантов стал буккальный эпителий, максимально схожий по структуре с эпителием роговицы. Методику использования клеток буккального эпителия впервые описал Nakamura T. в 2003 г. Суть ее заключалась в том, что после двух недельной культивации клеток буккального эпителия, их перемещали на амниотическую мембрану и укладывали на глаз (Nakamura T. et al., 2003; Nishida K.et al., 2004; Nakamura T. et al., 2016). Это открытие представило собой значительный прогресс в регенеративной терапии роговицы.

После публикаций Sangwan V.S и соавт. о разработанном, успешно примененном и эффективном методе простой трансплантации лимбального эпителия (SLET), возник закономерный вопрос необходимости культивирования клеток буккального эпителия. Поскольку сложности, связанные с методами культивирования клеток, ограничивают возможность широкого применения культивированных эпителиальных буккальных клеток. Это дало толчок для исследований эффективности подобного способа лечения клетками буккального эпителия.

В 2019 г. учеными Inamochi A и Tomioka A были опубликованы результаты экспериментального исследования на 4 глазах кроликов простой трансплантации буккального эпителия, свидетельствующие об эффективности данного метода лечения (Inamochi A. et al., 2019). Однако, учитывая маленькую выборку, необходимо проведение дальнейших экспериментальных исследований эффективности трансплантации некультивированных клеток эпителия слизистой оболочки полости рта, поскольку этот метод может стать новым вариантом реконструкции глазной поверхности у пациентов с двусторонней ЛКН.

Для дополнительной стимуляции регенеративных процессов в тканях роговицы после трансплантации аутологичных буккальных клеток представляется перспективным использование обогащенной (или богатой) тромбоцитами плазмы (БоТП, или platelet rich plasma — PRP), содержащей биоактивные протеины и цитокины, которые инициируют и модулируют заживление ран, способствуют

восстановлению тканей (Nurden A.T. et all., 2008). В литературе приводятся данные успешного ее применения для ускорения регенерации тканей в таких областях медицины, как челюстно-лицевая хирургия (Anitua E. Et al.,2009; Garg A.K. et al. 2000), реконструктивная ортопедия (Sanchez M. et al.2, 2008), сердечно-сосудистая хирургия (Foster T.E., et al., 2009, Intini G., 2009), при восстановлении суставов и сухожилий (Sanchez M., et al.,2008), в пластической хирургии, а также в лечении пациентов с длительно незаживающими ранами мягких тканей (Оболенский В.Н., Ермолова Д.А., 2012).

В литературе представлены положительные результаты применения продуктов БоТП в офтальмологии при закрытии макулярного отверстия (Paques M., 1999), при таких патологиях роговицы как латентные язвы, синдром сухого глаза (Alio J.L. et al., 2011) , хронические эрозии роговицы на фоне перенесенного герпесвирусного кератита (Лошкарева, А.О.,Майчук Д.Ю., 2016), рецидивирующие эрозии роговицы (Lee J.H. et al,2014) постожоговые персистирующие эрозии роговицы (Федосеева Е.В. и соавт., 2019), эрозии роговицы при неэффективности стандартной кератопротекторной терапии (Ченцова Е.В., и соавт., 2020), при посттравматическом рубцевании тканей век (Филатова И.А. и соавт., 2020).

Однако, в настоящее время остается малоизученным и дискутабельным вопрос применения некультивированных клеток буккального эпителия в лечение ЛКН, кроме того, ни в отечественной, ни в зарубежной литературе нет данных об эффективности комбинированного применения аутологичных клеток буккального эпителия и продуктов богатой тромбоцитами плазмы в лечении дефектов роговицы при лимбально-клеточной недостаточности. При этом имеется ряд преимуществ: данный метод лечения дает возможность применения аутологичного клеточного материала, что исключает риск отторжения трансплантат и необходимость использования иммуносупрессивной терапии, а также позволяет ускорить процессы регенерации повреждений роговицы за счет биоактивных протеинов и цитокинов, содержащихся в продуктах БоТП, что обуславливает проведение исследований в данной области.

Цель исследования

Разработать в эксперименте новую технологию реконструкции роговичного эпителия при двусторонней лимбально-клеточной недостаточности.

Задачи исследования

1. Изучить клинико-морфологические особенности регенерации роговицы при тотальной лимбально-клеточной недостаточности после трансплантации эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта.

2. Определить оптимальный срок фиксации комбинированной биоконструкции с буккальными эпителиальными клетками после иссечения фиброваскулярного паннуса при тотальной лимбально -клеточной недостаточности.

3. Разработать комбинированную биоконструкцию с минимально манипулированными аутологичными клетками буккального эпителия слизистой оболочки полости рта.

4. Сравнить клинико-морфологические особенности восстановления роговицы при тотальной лимбально-клеточной недостаточности после трансплантации комбинированной биоконструкции с культивированными и минимально-манипулированными аутологичными клетками буккального эпителия.

5. Оценить эффективность комбинированного применения биоконструкции с аутологичными клетками буккального эпителия и лизата богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) для восстановления поверхности роговицы в условиях лимбально-клеточной недостаточности.

Научная новизна

1. На экспериментальной механической модели лимбально-клеточной недостаточности изучена клинико-морфологическая картина заживления ткани

роговицы после простой трансплантации эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта.

2. Установлен оптимальный срок фиксации комбинированной биоконструкции с аутологичными клетками буккального эпителия после устранения фиброваскулярного паннуса в условиях тотальной лимбально-клеточной недостаточности.

3. Впервые разработана технология изготовления и предложена к применению при тотальной лимбально-клеточной трансплантации комбинированная биоконструкция с аутологичными минимально манипулированными буккальными эпителиальными клетками (патент №2793525 от 04.04.2023г. «Способ хирургического лечения дефектов роговицы при лимбально-клеточной недостаточности»).

4. Впервые в офтальмологии экспериментально показано, что после устранения тотальной лимбально-клеточной недостаточности с помощью трансплантации комбинированной биоконструкции не наблюдается клинико-морфологических различий при применении аутологичных культивированных или минимально манипулированных клеток буккального эпителия слизистой оболочки полости рта в ее составе.

5. Впервые на экспериментальной модели лимбально-клеточной недостаточности изучена клинико-морфологическая картина заживления ткани роговицы при комбинированном применения разработанной комбинированной биоконструкции с аутологичными минимально манипулированными эпителиальными буккальными клетками и лизатом богатой тромбоцитами плазмы.

Теоретическая и практическая значимость

Применение как культивированных, так и минимально манипулированных клеток буккального эпителия слизистой оболочки полости рта в составе комбинированной биоконструкции при тотальной лимбально-клеточной недостаточности по данным клинико-морфологического исследования позволяет

добиться идентичных результатов по показателям эпителизации, прозрачности и неоваскуляризации роговицы. А применение лизата богатой тромбоцитами плазмы в раннем послеоперационном периоде после трансплантации комбинированной биоконструкции с буккальными клетками сокращает сроки заживления дефекта, несмотря на более выраженную воспалительную инфильтрацию, обусловленную аллогенным происхождением применяемого лизата. Полученные результаты позволяют рассматривать минимально манипулированные буккальные эпителиальные клетки в качестве потенциального источника аутологичных прогениторных клеток для восстановления поверхности роговицы при лимбально-клеточной недостаточности при проведении клинического этапа дальнейших исследований.

Методология и методы исследования

Методологической основой данного диссертационного исследования явилось последовательное применение методов научного познания. Работа выполнена в дизайне сравнительного открытого экспериментального исследования с использованием клинических, инструментальных и статистических методов.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Регенерация роговицы после простой трансплантации эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта при тотальной лимбально-клеточной недостаточности происходит по патологическому заместительному типу с эпителизацией роговичной поверхности цилиндрическим эпителием, характерным для конъюнктивы.

2. Рекомендована фиксация комбинированной биоконструкции с аутологичными клетками буккального эпителия после устранения фиброваскулярного паннуса в условиях тотальной ЛКН в течении 5 суток.

3. Трансплантация комбинированной биоконструкции с минимально манипулированными клетками буккального эпителия слизистой оболочки полости

рта при тотальной ЛКН способствует восстановлению роговичной поверхности в той же мере, что и с культивированными буккальными эпителиальными клетками.

4. Субконъюнктивальные инъекции лизата БоТП на ранних сроках после трансплантации минимально манипулированных клеток буккального эпителия при ЛКН ускоряет сроки заживления ткани роговицы.

Степень достоверности полученных результатов

Степень достоверности полученных результатов определяется достаточным и репрезентативным объемом выборок исследований, экспериментальными данными, полученными в результате длительного наблюдения, использования современной техники и методов их регистрации, поэтапному следованию разработанному плану работы и детальному описанию всего хода исследования. А также подтверждена корректно выбранными методами статистической обработки данных.

Реализация и внедрение результатов исследования

Полученные в диссертационном исследовании результаты используются в научной и учебной работе отдела травматологии и реконструктивной хирургии ФГБУ «НМИЦ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава РФ (директор - д.м.н., проф. академик РАН Нероев В.В.). Материалы диссертации включены в программы лекций и семинаров на курсах повышения квалификации, сертификационных циклов последипломного образования для врачей-офтальмологов, проводимых на базе ФГБУ «НМИЦ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава РФ. Результаты данного исследования внедрены в лекционный материал кафедры офтальмологии ФДПО МГМСУ им. Евдокимова и в материалы занятий с врачами стажировки на рабочем месте, ординаторами, аспирантами кафедры непрерывного медицинского образования ФГБУ «НМИЦ глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава РФ (зав. кафедрой - д.м.н., проф. академик РАН Нероев В.В.).

Апробация результатов исследования

Основные положения диссертации были изложены и обсуждены на II Российском форуме с международным участием «Пролиферативный синдром в биологии и медицине» (Москва, 2022); XIII Съезде общества офтальмологов России совместно с конференцией молодых ученых «Федоровские чтения» (Москва, 2024); апробация диссертационной работы состоялась на межотделенческой конференции ФГБУ «МНИИ ГБ им. Гельмгольца» Минздрава России (Москва, 04.10.2023г).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 4 печатных работ, из них 3 - в журналах, рекомендуемых Высшей Аттестационной Комиссией РФ. Получен 1 патент РФ на изобретение №2793525 от 04.04.2023г.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 201 странице машинописного текста, содержит 12 таблиц и 76 рисунков. Работа состоит из введения, 6 глав (обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты собственных исследований), заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Список литературы содержит 203 источника (44 отечественных и 159 зарубежных).

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение, функции и физиология роговичного эпителия

Роговица - это прозрачная, бессосудистая преломляющая структура передней части глаза, которая пропускает и способствует фокусировке света на сетчатке [149]. Следовательно, изменение прозрачности роговицы приводит к выраженным нарушениям зрения или слепоте [163]. Роговица состоит из пяти слоев: эпителия, боуменовой мембраны, стромы, десцеметовой мембраны и эндотелия, - каждый из которых играет важную роль в поддержании прозрачности роговицы и стабильной зрительной функции [179]. В 2013 году Дуа и соавт. открыли новый шестой слой в роговице человека, расположенный между стромой и десцеметовой мембраной, так называемый слой Дуа или преддесцеметовый слой (в английской литературе - pre-Descemet's layer (PDL)) [85].

Роговичный эпителий - это наружный слой роговицы толщиной 50-60 мкм, который состоит из 5-7 клеточных слоев, и представляет собой многослойный плоский неороговевающий тип эпителия [11,142,159,179]. Он состоит из трех типов клеток: базальных клеток, крыловидных и поверхностных плоских клеток [ 179].

Наружные 2-3 слоя эпителия образованы поверхностными плоскими клетками многоугольной формы. Диаметр клеток составляет 40-60 мкм, а толщина 2-6 мкм [11,179]. Ядра клеток имеют удлиненные узкую форму и параллельно поверхности роговицы. [11,17]. На своей апикальной поверхности плоские клетки имеют обширные микроворсинки, за счет чего происходит увеличение площади контакта и сцепления между муциновым слоем слезной пленки и эпителием роговицы, а, следовательно, обеспечивается сглаживание микронеровностей роговичной поверхности. Между собой соседние поверхностные клетки соединены плотными контактами - десмосомами, что препятствует проникновению в межклеточные пространство, следовательно, предотвращает проникновение токсинов и микробов в более глубокие слои роговицы [179].

Под поверхностными плоскими клетками расположены 2-3 слоя шиповатых или крыловидных клеток. Клетки этих слоев представлены менее плоскими, многогранными клетками, отростки которых внедряются между соседними клетками эпителия, подобно крыльям. Ядра клеток имеют округлую форму. Шиповатые клетки также соединены между собой и с клетками соседних слоев с помощью плотных боковых межклеточных контактов - десмосом [11, 17, 179].

Самым глубоким клеточным слоем эпителия роговицы является базальный слой толщиной около 20 мкм, состоящий из расположенных в один ряд, призматической или кубической формы клеток с крупное овальным ядром, которое расположено близко к вершине клетки. [11,17]. Базальные клетки, являющиеся транзиторными амплифицирующими клетками, - единственные эпителиальные клетки роговицы способные к митозу [168] Они являются источником крыловидных и поверхностных клеток Базальные клетки соединены к подлежащей базальной мембраной с помощью полудесмосом, которые препятствует отделению эпителия от нижележащих слоев роговицы. Нарушения в этой системе межклеточных контактов приводит к рецидивирующим и персистирующим эрозиям роговицы [94].

Эпителий в центральной и периферической частях роговицы имеет небольшие различия. Так, эпителий центральной части состоит из 5 -7 слоев, базальные клетки цилиндрической формы, меланоциты и клетки Ларгенганса отсутствуют, базально-клеточный слой гладкий и содержит кератансульфаты. На периферии роговицы эпителий состоит из 7 -10 слоев, базальные клетки кубовидной формы., в эпителии присутствуют меланоциты и клетки Лангерганса., имеются волнообразные расширения базального слоя, отсутствуют кератансульфаты [179].

Основными функциями эпителия роговицы являются поддержание прозрачности роговицы и защита глубжерасположенных структур глаза от воздействия внешней среды [84,11].

Эпителий роговицы в течение всей жизни постоянно обновляется. Согласно предложенной в 1983 г Thoft R.A. и Friend J. гипотезе X,Y,Z , поддержание

постоянства эпителия роговицы может быть определено уравнением: X + Y = Ъ, где X - пролиферация базальных эпителиоцитов роговицы, Y -центростремительное движение периферических эпителиальных клеток, Ъ - потеря эпителиоцитов с поверхности роговицы. [189]. За счет периферических эпителиальных клеток, расположенных в лимбальной зоне, и поддерживается постоянное количество базальных клеток - транзиторных амплифицирующих клеток (TACs) [135]. В настоящее время доказано, что стволовые клетки эпителия роговицы расположены в лимбе, который представляет собой переходную зону между прозрачной роговицей и белой конъюнктивой [7,22,63,142,171]. Эти клетки получили название лимбальных эпителиальных стволовых клеток (ЛЭСК). Существующие данные свидетельствуют, что ЛЭСК находятся в базальном слое лимбального эпителия роговицы. Считается, что основная масса ЛЭСК сосредоточена в лимбальных палисадах Фогта, которые представляют собой радиально ориентированные фиброваскулярные гребни, особенно сконцентрированные в верхнем и нижнем отделах роговицы [ 7,101,138,] Стволовые клетки обычно расположены в так называемой "нише", особом месте в органе, где микроокружение поддерживает "стволовость" стволовых клеток и обеспечивает их защиту от стимулов, неблагоприятно влияющих на дифференцировку и вызывающих апоптоз клеток [96, 152]. Нишей ЛЭСК является лимбальная эпителиальная крипта, содержащая антигенпредставляющие клетки Лангерханса, меланоциты, супрессорные Т-лимфоциты, специфический внеклеточный матрикс, и окруженная большим количеством кровеносных сосудов, нервами и лимфатическими сосудами, которые обеспечивают ЛЭСК питательными веществами, регуляторными пептидами и кислородом [55,138,147]. При возникновении потребности в регенерации роговичного эпителия, ЛЭСК делятся, при этом одна из дочерних клеток остается «родительской» и пополняет пул ЛЭСК, а другая становится так называемой «транзиторной амплифицирующей клеткой», которая делится и дифференцируется, приобретая характерные черты роговичных эпителиальных клеток. Транзиторные ампфлицирующие клетки, располагаясь в базальном слое, перемещаются центростремительно от периферии к центру

роговицы. После определенного числа митозов эти клетки дифференцируются и становятся так называемыми «постмитотическими клетками», которые по мере миграции от глубоких слоев эпителия к поверхностным превращаются в терминально дифференцированные клетки, отмирающие через определенное время и слущивающиеся с поверхности роговицы [56,57,102,131,139,171,197].

Регуляторным пептидам (факторам роста, цитокинам, медиаторам) отводится ведущая роль в поддержании регенераторных и репарационных свойств зоны лимба и роговицы. В настоящее время разными авторами выделяют три основных типа цитокинов, принимающих участие в заживлении роговицы при ее повреждении [136]. К цитокинам I типа, синтезирующимся клетками роговичного эпителия, относятся фактор роста тромбоцитов В (PDGF-B), трансформирующий фактор роста альфа TGF-a), интерлейкин 1в (ГЬ-1Р). Цитокины II типа (инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF-1), фактор роста фибробластов (FGF), трансформирующие факторы роста в (TGF-в) влияют на пролиферативную активность эпителиальных клеток и фибробластов. Цитокины III типа (фактор роста кератиноцитов (KGF) и фактор роста гепатоцитов (HGF), синтезирующиеся фибробластами, стимулируют пролиферацию и миграцию клеток. При нарушении целостности эпителия вырабатывается эпителиальными клетками интерлейкин 1в, стимулирующий фибробласты синтезировать цитокины II типа, которые активируют пролиферацию ЛЭСК, и цитокины III типа, стимулирующие миграцию клеток от зоны лимба к центру роговицы [15,26,136,141].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Целая Татьяна Валерьевна, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Быков, В. Л. Гистология и эмбриология органов полости рта человека : учебное пособие / В. Л. Быков — 2-е изд., испр. — Санкт-Петербург : Специальная литература,1998. — 248 с.

2. Быков, В.Л. Дендритные антигенпредставляющие клетки слизистой оболочки полости рта в норме и при патологических состояниях / В.Л. Быков // Архив патологии. — 1997. — Т. 59, № 2. — С. 71-75.

3. Вавилова, Т.П. Биохимия тканей и жидкостей полости рта : учебное пособие для студентов медицинских вузов / Т.П. Вавилова — Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2008. — 201 с.

4. Влияние обогащенной тромбоцитами плазмы на регенерацию эпителия роговицы при ее хронической эрозии (экспериментальное исследование) / В.А. Тарабрина, И.О. Гаврилюк, С.В. Чурашов [и др.] // Офтальмология. — 2021. — Т. 18, № 3. — С. 552-559.

5. Воздействие аутологичного эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта на процесс репарационной регенерации роговицы при лимбально-клеточной недостаточности в эксперименте / Ченцова Е.В., Боровкова Н.В., Целая Т.В. [и др.] // Сборник трудов научно-практической конференции с международным участием XV Российский общенациональный офтальмологический форум. — 2022. — Т. 2. - С. 457-462.

6. Войно-Ясенецкий, В.В. Разрастание и изменчивость тканей глаза при его заболеваниях и травмах / В.В. Войно-Ясенецкий. - Киев : Выща школа, 1979. - 146 с.

7. Гаврилюк, И.О. Применение культивированных буккальных эпителиальных клеток в лечении лимбальной недостаточности (экспериментальное исследование): дис. ... канд. мед. наук: 14.01.07 / Гаврилюк Илья Олегович; науч рук. А.Н. Куликов. — Санкт-Петербург, 2020. — 146 с.

8. Гемонов, В. В. Гистология и эмбриология органов полости рта и зубов : учебное пособие / В. В. Гемонов, Э. Н. Лаврова, Л. И. Фалин. — Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2019. — 320 с.

9. Гемонов, В.В. Защитные свойства поверхностных слоев эпителия слизистой оболочки полости рта / В.В. Гемонов, М.Л. Могильный // Стоматология. — 1996. — Т. 75, № 3. — С. 4-6.

10. Гистология, эмбриология, цитология : учебник / Н.В. Бойчук, Р.Р. Исламов, Э.Г. Улумбеков, Ю.А. Челышев ; под. ред. Э.Г. Улумбекова, Ю.А. Челышева — 4-е изд., перераб. и доп. — Москва : ГЭОТАР-Медиа;2016. — 928 с.

11. Глазные болезни: учебник для студентов мед. вузов / Э.С. Аветисов, С.Э Аветисов, В.Г. Белоглазов [и др.]; под ред. В.Г. Копаевой. — Москва: Медицина, 2002. — 560 с.

12. Данилов, Р.К. Гистология, эмбриология, цитология : учебник / Данилов Р.К., Боровая Т.Г. - Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2020. — 528 с.

13. Диагностика синдрома лимбальной недостаточности / Б.Э. Малюгин, С.А. Борзенок, С.Ю. Калинникова, М.Ю. Герасимов // Офтальмохирургия. — 2022. — № 3. — P. 82-97.

14. Диденко, И.Ю. Структурно-функциональная организация слизистой оболочки полости рта у человека в норме / И.Ю. Диденко, А.В. Петров, В.В. Спицин // Журнал анатомии и гистологии. — 2012. — Т. 1, № 4. — С. 9-24.

15. Егорова, Н.С. Лечение повреждений роговицы с помощью комбинированной биоконструкции с клетками буккального эпителия (экспериментально -клиническое исследование): дис. ... канд. мед. наук: 14.01.07 / Егорова Наталья Сергеевна; науч. рук. Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова. — Москва, 2018. — 151 с.

16. Зинин. В.Ю. Использование богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) в лечении больных с венозными трофическими язвами / В.Ю. Зинин, А. М. Кожевников, В.А. Зотов // Сборник материалов III хирургического конгресса «Научные исследования в реализации программы «Здоровье населения России». — Москва, 200. —С. 265— 266.

17. Значение строения и функции органа зрения в клинической практике: учебное пособие / А.Ф. Габдрахманова, Ф.А. Каюмов, С.Р. Авхадеева. - Уфа: ГБОУ ВПО БГМУ Минздрава России, 2015 - 70 с.

18. Использование лизата богатой тромбоцитами плазмы при неэффективности стандартной терапии у пациентов с эрозиями роговицы / Е.В. Ченцова, Е.В. Федосеева, А.О. Петрова [и др.] // Современные технологии в офтальмологии. 2020.

— № 4. — С. 45-46.

19. Использование обогащенной тромбоцитами плазмы при лечении ишемии нижних конечностей / А.Г. Драгунов, Ю.В Александров., С.В. Поляков [и др.] // Ангиология и сосудистая хирургия. — 2008. —№ 4. — С. 17-14.

20. Калинникова, С.Ю. Экспериментально-клиническое обоснование новой технологии реконструкции эпителия роговицы у пациентов с односторонним синдромом лимбальной недостаточности: дис. ... канд. мед. наук: 3.1.5; 3.1.14 / Калинникова Светлана Юрьевна; науч. рук Б.Э. Малюгин, С.А. Борзенок. — Москва, 2023. — 194 с.

21. Кузнецова, О.М. Фактор роста эндотелия сосудов: особенности секреции в костной ткани в норме и при патологии / О.М. Кузнецова, Н.Е. Кушлинский, Т.Т. Березов // Биомедицинская химия. — 2003. — Т. 49, № 4. — С. 360-373.

22. Лимбальная недостаточность: этиология, патогенез, принципы и перспективы хирургического лечения / А.С. Дубовиков, И.О. Гаврилюк, А.Н. Куликов [и др.] // Российский офтальмологический журнал. — 2019. — Т. 12, № 1.

— С. 103-111. doi: 10.21516/2072-0076-2019-12-1-103-111.

23. Лошкарева, А.О. Применение богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с хроническими эрозиями роговицы / А.О. Лошкарева, Д.Ю. Майчук // Современные технологии в офтальмологии. — 2016. — № 4. — С. 131 -132.

24. Макаров М.С. Особенности морфофункционального статуса тромбоцитов человека в норме и патологии: дис. ... канд. биол. наук: 14.01.21 / Макаров Максим Сергеевич; науч. рук. В.Б Хватов. — Москва, 2014. — 109 с.

25. Мелерзанов, А.В. Минимально манипулированный клеточный продукт в пластической хирургии и регенеративной медицине / А. В. Мелерзанов, Н.Е. Мантурова // Врач. — 2015. — №. 8. — С. 78-80.

26. Николаева, Л. Р. Лимбальная клеточная недостаточность / Л. Р. Николаева Е. В. Ченцова // Вестник офтальмологии. — 2006. — Т. 122, № 3. — С. 43-47.

27. Модификация экспериментальной механической модели лимбальной недостаточности / А.В. Безушко, А.С. Дубовиков, А.А. Суетов [и др.]// Современные технологии в офтальмологии. — 2017. — № 4. — С. 26- 28.

28. Морфофункциональные особенности плазмы, богатой тромбоцитами, и ее применение в офтальмологии / Е.В. Федосеева, Е.В. Ченцова, Н.В Боровкова [и др.] // Офтальмология. — 2018. — Т. 15, № 4. — С. 388-393.

29. Оболенский, В.Н. Применение тромбоцитарных факторов роста и коллагеновых биопрепаратов в лечении больных с хроническими трофическими язвами различной этиологии / В.Н. Оболенский, Д.А. Ермолова // Хирургия. Журнал им. Н.И. Пирогова. — 2012. —№ 5. — С. 42-47.

30. Оптимальный срок фиксации комбинированной биоконструк-ции с клетками буккального эпителия при лимбально-клеточной недостаточности / Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова, Т.В. Целая [и др.] // Офтальмологические ведомости. — 2023. — Т. 16, №2. — C. 63-72.

31. Опыт применения тромбофибринового сгустка богатой тромбоцитами плазмы при язвенном поражении роговицы / Е.В. Федосеева, Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова [и др.] // Российский офтальмологический журнал. — 2021. — Т. 14, №4. — C. 15-21.

32. Павленко, Ю.А. Лечение и профилактика рубцевания тканей век при последствиях травм: дис. ... канд. мед. наук: 3.1.5 / Павленко Юрий Александрович; науч рук. И.А. Филатова. — Москва, 2022. — 133 с.

33. Пат. № 2681753 Российская Федерация, A61B17/56 (2018.08). A61M5/00 (2018.08). A61K35/16 (2018.08). A61K9/19(2018.08). Способ лечения пациентов с переломом шейки плеча; № 2018118621; заявл. 21.05.2018: опубл. 12.03.2019 / Боровкова Н.В, Малыгина М.А., Макаров М.С., Сахарова О.М., Пономарев И.Н.:

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы "Научно-исследовательский институт скорой помощи имени Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения г. Москвы" (ГБУЗ "НИИ СП им. Н.В. Склифосовского ДЗМ"). — 9 с.

34. Пат. № 2699206 Российская Федерация, МПК А6П9/07 (2006.01). А61К35/19 (2015.01). А61Р27/02 (2019.05). Способ лечения дефектов роговицы с помощью аутологичного тромбофибринового сгустка; № 2019105662, заявл. 27.02.2019: опубл. 03.09.2019 / Ченцова Е.В., Федосеева Е.В., Пономарев И.Н., Боровкова Н.В.: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России). — 7 с.

35. Пат. № 2793525 Российская Федерация, А6П9/007 (2006.01). А61К35/37 (2015.01). А61Р27/02 (2006.01). Способ хирургического лечения дефектов роговицы при лимбально-клеточной недостаточности; № 2022124099; заявл. 12.09.2022: опубл. 04.04.2023 / Ченцова Е.В., Боровкова Н.В, Сторожева М.В., Целая Т.В., Макаров М.С., Пономарев И.Н.: Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России). — 10 с.

36. Репаративный эффект биоконструкции на основе коллагена I типа и клеток буккального эпителия при лечении глубоких дефектов роговицы в эксперименте / Н.С. Егорова, Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова [и др.] // Трансплантология. — 2017. -Т. 9, № 3. — С. 226-235.

37. Ситник, Г.В. Современные клеточные биотехнологии в офтальмологии. Амниотическая мембрана как субстрат для культивирования стволовых эпителиальных клеток / Г.В. Ситник // Медицинский журнал (БГМУ). — 2005. — № 3. — С. 13-16.

38. Случай применения аутологичного тромбофибринового сгустка у пациента с послеожоговой персистирующей эрозией роговицы / Е.В. Федосеева, Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова [и др.] // Трансплантология. — 2019. — Т. 11, № 2. — С. 150-157.

39. Трансплантация эпителиального пласта слизистой оболочки полости рта в лечении дефектов роговицы при тотальной лимбально-клеточной недостаточности / Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова, Т.В. Целая [и др.] // Офтальмологические ведомости. — 2022. — Т. 15, №2. — C. 83-91.

40. Федосеева, Е.В. Применение аутологичной богатой тромбоцитами плазмы в лечении повреждений переднего отрезка глаза: дис. ... канд. мед. наук: 3.1.5. / Федосеева Елена Викторовна; науч рук. Е.В. Ченцова. — Москва, 2022. — 119 с.

41. Филатова, И.А. Эффективность применения лизата богатой тромбоцитами плазмы при лечении пациентов с посттравматическими рубцовыми изменениями век. Обзор клинических случаев / И.А. Филатова, Ю.А. Павленко, С.А. Шеметов [и др.] // Российский офтальмологический журнал. — 2021. — Т. 14, № 14. — С. 2226.

42. Хлопин, Н.Г. Общебиологические и экспериментальные основы гистологии / Н.Г. Хлопин. — Ленинград : Изд-во Акад. наук СССР, 1946. — 491 с.

43. Целая, Т.В. Трансплантация клеток слизистой оболочки полости рта при лечении лимбально-клеточной недостаточности / Т.В. Целая, Е.В. Ченцова, Н.В. Боровкова // Трансплантология. — 2022. —T.14, № 1. — C. 68-78.

44. Эффективность применения лизата богатой тромбоцитами плазмы (БоТП) у пациентов с эрозией роговицы или посттравматическим рубцеванием тканей век / Н.В. Боровкова, И.А. Филатова, Е.В. Ченцова [и др.] // Российский офтальмологический журнал. — 2020. — Т. 13, № 3. — С. 8-14.

45. A platelet derived growth factor delivery system for bone regeneration / J.J. Delgado, E. Sánchez, M. Baro [et al.] // Journal of Materials Science: Materials in Medicine. — 2012. — Vol. 23, № 8. — Р. 1903-1912.

46. Adjuvant methods in macular hole surgery: intraoperative plasma-thrombin mixture and postoperative fluid-gas exchange / M.S. Blumenkranz, E. Ohana, S. Shaikh

[et al.] // Ophthalmic Surgery, Lasers and Imaging Retina. — 2001. — Vol. 32, № 3. — P. 198-207.

47. Adjuvant Role of Amniotic Membrane Transplantation in Acute Ocular StevensJohnson Syndrome: A Randomized Control Trial / N. Sharma, S.A. Thenarasun, M. Kaur [et al.] // Ophthalmology. — 2016. — Vol. 123, № 3. — P. 484-491.

48. Alio, J.L. The role of "eye platelet rich plasma" (E-PRP) for wound healing in ophthalmology / J.L. Alio, F. Arnalich-Montiel, E.A. Rodriguez // Current pharmaceutical biotechnology. — 2012. — Vol. 13, № 7. — P. 1257-1265.

49. Allograft conjunctival transplantation for bilateral ocular surface disorders / S. Kwitko, D. Marinho, S. Barcaro // Ophthalmology. — 1995. — Vol. 102, № 7. — P. 1020-1025.

50. Amniotic membrane transplantation for partial limbal stem cell deficiency / D.F. Anderson, P. Ellies, R.T. Pires, S.C. Tseng // British Journal of Ophthalmology. — 2001. — Vol. 85, № 5. — P. 567-575.

51. An in vivo confocal microscopic study of corneal nerve morphology in unilateral keratoconus/ N.K. Pahuja, R. Shetty, R.M. Nuijts [et al.] // BioMed Research International. — 2016. — Vol. 2016. — P. 5067853.

52. Autologous Platelet-rich Plasma Eye Drops in the Treatment of Recurrent Corneal Erosions / J.H. Lee, M.J. Kim, S.W. Ha, H.K. Kim // Korean Journal of Ophthalmology: KJO. — 2016. — Vol. 30, № 2. — P. 101-107.

53. Ball, S.G. Mesenchymal stem cells and neovascularization: role of platelet-derived growth factor receptors / S.G. Ball, C.A. Shuttleworth, C.M. Kielty // Journal of Cellular and Molecular Medicine. — 2007. — Vol. 11, № 5. — P. 1012-1030.

54. Ballen, P.H. Mucous membrane grafts in chemical (lye) burns / P.H. Ballen // American Journal of Ophthalmology. — 1963. — Vol. 55, № 2. — P: 302-312.

55. Baum, J.L. Melanocyte and Langerhans cell population of the cornea and limbus in the albino animal / J.L. Baum // American Journal Ophthalmology. — 1970. — Vol.64, № 4. — P. 669-676.

56. Buck, R.C. Cell migration in repair of mouse corneal epithelium / R.C. Buck // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1979. — Vol.18, № 8.— P. 767-784.

57. Buck, R.C. Measurement of centripetal migration of normal corneal epithelial cells in the mouse // R.C. Buck // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1985. — Vol.26. № 9. - P.1296-1299.

58. Burkhardt, A. Intraepithelial lymphocytesand Langerhans cells in the oral mucosadynamic aspects / A. Burkhardt // Journal of the Dental Association of South Africa. - 1992. — Vol. 47, № 5. — P. 200-203.

59. Central corneal basal cell density and nerve parameters in ocular surface disease and limbal stem cell deficiency: a review and meta-analysis / P. Bhattacharya, K. Edwards, D. Harkin, K.L. Schmid // British Journal of Ophthalmology. — 2020. — Vol.104, № 12.— P. 1633-1639.

60. Chan, C.C., Severe limbal stem cell deficiency from contact lens wear: patient clinical features / C.C. Chan, E.J. Holland // American Journal of Ophthalmology. — 2013. — Vol.155, № 3. — P. 544-549.

61. Changes in the micromorphology of the corneal subbasal nerve plexus in patients after plaque brachytherapy / A. Zhivov, K. Winter, S. Peschel [et al.] // Radiation Oncology Journal. — 2013. — Vol. 8. — P. 136.

62. Characterization of limbal stem cell deficiency by in vivo laser scanning confocal microscopy: a microstructural approach / S.X. Deng, K.D. Sejpal, Q. Tang [et al.] // Archives of Ophthalmology. — 2012. — Vol.130, № 4. — P. 440-445.

63. Chung, E.H. Localization of corneal epithelial stem cells in the developing rat / E.H. Chung, G. Bukusoglu, J. Zieske // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1992. — Vol.22, № 7.— P. 2199-2206.

64. Classification and staging of ocular surface disease / G.S. Schwartz, E.J. Holland, J.H. Krachrner [et al.] // Cornea. — 2011. — Vol.2. — P. 1713-1720.

65. Comparison of amniotic membrane transplantation and umbilical cord serum in acute ocular chemical burns: a randomized controlled trial / N. Sharma, D. Singh, P.K. Maharana [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 2016. — Vol. 168. — P. 157-163.

66. Comparison of surgically repaired Achilles tendon tears using platelet-rich fibrin matrices // M. Sanchez, E. Anitua, J. Azofra [et al.] // American Journal of Sports Medicine. — 2007. — Vol. 35, № 2. — P. 245-251.

67. Corneal alkali burns: a review of the literature and proposed protocol for evaluation and treatment / C.E. Hamill, S. Bozorg, H-Y.P. Chang [et al.] // International Ophthalmology Clinics. — 2013. — Vol. 53, № 4. — P. 185-194.

68. Corneal epithelial thickness measured using Anterior Segment Optical Coherence Tomography as a diagnostic parameter for limbal stem cell deficiency / Q. Liang, Q. Le, D.W. Cordova // American Journal of Ophthalmology. — 2020. — Vol.216.— P. 132139.

69. Corneal nerve alterations in different stages of Fuchs' endothelial corneal dystrophy: an in vivo confocal microscopy study / F. Bucher, W. Adler, H.C. Lehmann [et al.] // Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. — 2014. — Vol.252, № 7. — P. 1119-1126.

70. Corneal nerve alterations after Descemet membrane endothelial keratoplasty: an in vivo confocal microscopy study / F. Bucher, D. Hos, M. Matthaei [et al.] // Cornea. — 2014. — Vol.33, № 11. — P. 1134-1139.

71. Corneal reconstruction with tissue-engineered cell sheets composed of autologous oral mucosal epithelium / K. Nishida, M. Yamato, Y. Hayashida [rt al.] // The New England Journal of Medicine. — 2004. — Vol. 351, № 12. — P. 1187-1196.

72. Corneal sensitivity and morphology of the corneal subbasal nerve plexus in primary congenital glaucoma / Z. Gatzioufas, G. Labiris, F. Hafezi, A [et al.] // Eye. — 2014. — Vol.28, № 4. — P. 466-471.

73. Correlation between corneal innervation and inflammation evaluated with confocal microscopy and symptomatology in patients with dry eye syndromes: a preliminary study / T.C. Tepelus, G.B. Chiu, J. Huang [et al.] // Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. — 2017. — Vol. 255, № 9. — P. 1771-1778.

74. Correlation between the existence of the palisades of Vogt and limbal epithelial thickness in limbal stem cell deficiency / Q. Le, Y. Yang, S.X. Deng, J. Xu // Clinical and Experimental Ophthalmology. — 2017. — Vol. 45, № 3.— P. 224-231.

75. Cruzat, A. In vivo confocal microscopy of corneal nerves: analysis and clinical correlation / A. Cruzat, D. Pavan-Langston, P. Hamrah // Seminars of Ophthalmology.

— 2010. — Vol.25, № 6-7. — P. 171-177.

76. Cultivated corneal epithelial stem cell transplantation in ocular surface disorders / N. Koizumi, T. Inatomi, T. Suzuki [et al.] // Ophthalmology. — 2001. — Vol. 108, № 9.

— P. 1569-1574.

77. Cultivated Oral Mucosa Epithelium in Ocular Surface Reconstruction in Aniridia Patients / D. Dobrowolski, B. Orzechowska-Wylegala, B. Wowra [et al.] // BioMed Research International. — 2015. — Vol. 2015. — P. 281870.

78. Daya, S.M. Cornea Society nomenclature for ocular surface rehabilitative procedures / S.M. Daya, C.C. Chan, E.J. Holland // Cornea. — 2011. — Vol. 30, № 10.

— P. 1115-1119.

79. Decreased corneal sensation and subbasal nerve density, and thinned corneal epithelium as a result of 360-degree laser retinopexy / N. Bouheraoua, L. Hrarat, C.F. Parsa [et al.] // Ophthalmology. — 2015. — Vol.122, № 10. — P. 2095-2102.

80. Denig, R: A surgical treatment for alkali burns of the eye / R. Denig // Münchener Medizinische Wochenschrift. — 1912. — Vol. 1. — P:579-590.

81. Denig, R. Circumcorneal transplantation of buccal mucous membrane as a curative measure in diseases of the eye / R. Denig // Archives of ophthalmology. — 1929. — Vol. 1, № 3. — P. 351-357.

82. Diagnosis of limbal stem cell deficiency based on corneal epithelial thickness measured on anterior segment optical coherence tomography / A. Mehtani, M.C. Agarwal, S. Sharma, S. Chaudhary // Indian Journal of Ophthalmology. — 2017. — Vol. 65, № 11.— P. 1120-1126.

83. Diagnostic Algorithm for Surgical Management of Limbal Stem Cell Deficiency / B. Malyugin, S. Kalinnikova, R. Isabekov // Diagnostics. — 2023. — Vol.13, № 2. — P. 199.

84. Dohlman, C.H. The function of the corneal epithelium in health and disease: The Jjonas S. Friedenwald memorial lecture / C.H. Dohlman // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1971. — Vol.10, № 6.— P. 383-407.

85. Dua, H.S. Human corneal anatomy redefined: A novel pre-descemet's layer (dua's layer) / H.S. Dua, L.A. Faraj // Ophthalmology. — 2013. — Vol.120, № 9.— P. 17781785.

86. Dua, H.S. Limbal stem cells of the corneal epithelium / H.S. Dua, A. Azuara-Blanco // Survey of Ophthalmology. — 2000. — Vol.44. № 5. - P.415-425.

87. Dua, H.S. Stem cells of the ocular surface: Scientific principles and clinical applications / H.S. Dua // British Journal of Ophthalmology. — 1995. — Vol.79, № 11. — P. 968-969.

88. Dua, H.S. The conjunctiva in corneal epithelial wound healing / H.S. Dua // British Journal of Ophthalmology. — 1998. — Vol.82, № 12. — P. 1407-1411.

89. Efficacy of autologous platelets in macular hole surgery / A. Konstantinidis, M. Hero, P. Nanos, G.D. Panos // Clinical Ophthalmology. — 2013. — Vol. 7. — P. 745750.

90. Epithelial thinning in limbal stem cell deficiency / E.H. Chan, L. Chen, F. Yu, S.X. Deng // American Journal of Ophthalmology. — 2015. — Vol.160, № 4. — P. 669-677.

91. Effect of autologous platelet concentrate in surgery for idiopathic macular hole: results of a multicenter, double-masked, randomized trial / M. Paques, C. Chastang, A Mathis [et al.] // Ophthalmology. — 1999. — Vol. 106, № 5. — P. 932-938.

92. Effectiveness of two methods for preparation of autologous platelet-rich plasma: an experimental study in rabbits / M.J. Nagata, M.R. Messora, F.A. Furlaneto [et al] // European Journal of Dentistry. — 2010. — Vol. 4, № 4. —395-402.

93. Evaluation of ocular surface disorders: a new diagnostic tool based on impression cytology and confocal laser scanning microscopy // V. Barbaro, S. Ferrari, A. Fasolo [et al.] // British Journal of Ophthalmology. — 2010. — Vol.94, № 7. — P. 926-932.

94. Farjo, A. Corneal anatomy, physiology, and wound healing annuary / A. Farjo, M. McDermott, H.K. Soong // Ophthalmology — 2009. — P. 203-208.

95. Focus on limbal stem cell deficiency and limbal cell transplantation / E. Tonti, G.A. Manco, L. Spadea, M. Zeppieri // World Journal of Transplantation. — 2023. — Vol.13, № 6. — P. 321-330.

96. Fuchs, E. Stem cells: a new lease of life / E. Fuchs, J. Segre // Cell. — 2000. — Vol.100, № 1. — P. 143-155.

97. Gas-permeable scleral contact lens therapy in ocular surface disease / T. Romero-Rangel, P. Stavrou, J. Cotter [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 2000. — Vol. 130, № 1. — P. 25-32.

98. Gipson, I.K. Transplant of oral mucosal epithelium to rabbit ocular surface wounds in vivo // I.K. Gipson, H.S. Geggel, S.J. Spurr-Michaud // Archives of Ophthalmology.

— 1986. — Vol. 104, № 10. — P. 1529-1533.

99. Global Consensus on Definition, Classification, Diagnosis, and Staging of Limbal Stem Cell Deficiency / S.X. Deng, V. Borderie, C.C. Chan [et al.] // Cornea. - 2019. -Vol.38, №3. - P. 364-375.

100. Global Consensus on the Management of Limbal Stem Cell Deficiency / S.X. Deng, F. Kruse, J.A.P. Gomes, C.C. Chan [et al.] // Cornea. - 2020. - Vol.39, №10. - P. 1291-1302.

101. Goldberg, M.F. Limbal palisades of Vogt / M.F. Goldberg, A.J. Bron // Transactions of the American Ophthalmological Society. — 1982. — Vol.80. — P. 155171.

102. Grueterich, M. Ex vivo expansion of limbal epithelial stem cells: amniotic membrane serving as a stem cell niche / M. Grueterich, E.M. Espana, S.C. Tseng // Survey of Ophthalmology. - 2003. - Vol. 48.- №. 6. - P. 631 - 646.

103. Heldin, C.H. Platelet-derived growth factor: mechanism of action and possible in vivo function / C.H. Heldin, B. Westermark // Cell regulation. — 1990. — Vol. 1, № 8.

— P. 555-566.

104. Herman, W.K. Conjunctival autogfaft transplatation for unilateral ocular surface diseslases / W.K. Herman, D.J. Doughman, R.L. Lindstrom // Ophthalmology — 1983.

— Vol. 90, № 9. — P1121-1126.

105. High-Resolution optical coherence tomography angiography characteristics of limbal stem cell deficiency / S. Varma, S.S. Shanbhag, P.R. Donthineni [et al.]. — DOI: 10.3390/diagnostics11061130. - Text: electronic // Diagnostics — 2021. — Vol. 11, № 6.— P. 1130.

106. Holland, E.J. Epithelial transplantation for the management of severe ocular surface disease / E.J. Holland // Transactions of the American Ophthalmological Society. — 1996. — Vol. 94. — P. 677-743.

107. Holland, E.J. Management of aniridic keratopathy with keratolimbal allograft: a limbal stem cell transplantation technique / E.J. Holland, A.R. Djalilian, G.S. Schwartz // Ophthalmology. — 2003. — Vol. 110, № 1. — P. 125-130.

108. Holland, E.J. Management of Limbal Stem Cell Deficiency: A Historical Perspective, Past, Present, and Future/ E.J. Holland // Cornea. — 2015. — Vol. 34. — P. 9-15.

109. Holland, E.J. Ocular Surface Disease: Medical and Surgical Management / E.J. Holland, M.J. Mannis, N.B. Richardson. — New York: Springer, 2002. — 293 p.

110. Holland, E.J. The evolution of epithelial transplantation for severe ocular surface disease and a proposed classification system / E.J. Holland, G.S. Schwartz // Cornea. -1996. - Vol. 15, № 6. - P. 549-556.

111. Huang, A.J. Alteration of epithelial paracellular permeability during corneal epithelial wound healing / A.J. Huang, S.C. Tseng, K.R. Kenyon // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1990. — Vol.31, № 3.— P. 429-435.

112. Huang, A.J.W. Corneal epithelial wound healing in the absence of limbal epithelium / A.J.W. Huang, S.C.G. Tseng // Investigative ophthalmology and visual science. — 1991. — Vol. 32, № 1. — P. 96-105

113. Imaging and quantification of subbasal nerve plexus in healthy volunteers and diabetic patients with or without retinopathy / A. Zhivov, K. Winter, M. Hovakimyan [et al.] // PLOS One. — 2013. — Vol.8, № 1. — P. e52157.

114. Immunocytochemical diagnosis of limbal stem cell deficiency: comparative analysis of current corneal and conjunctival biomarkers / M. Poli, C. Burillon, C. Auxenfans [et al.] // Cornea. — 2015. — Vol.34, № 7.— P. 817-823.

115. Impression cytology and in vivo confocal microscopy in corneas with total limbal stem cell deficiency / A.L. Araújo, J.R. Ricardo, V.N. Sakai [rt al] // Arquivos Brasileiros de Oftalmologia. . — 2013. — Vol.76, № 5. — P. 305-308.

116. Impression cytology of the ocular surface: a review / M. Calonge, Y. Diebold, V. Saezal [et al.] // Experimental eye research. — 2004. — Vol.78, № 3. — P. 457-472.

117. In vivo confocal microscopic analysis of limbal stroma in patients with Limbal Stem Cell Deficiency // G.P. Chidambaranathan, S. Mathews, A.K. Panigrahi [et al.] // Cornea. — 2015. — Vol.34, № 11.— P. 1478-1486.

118. In vivo confocal microscopic evaluation of corneal changes in chronic StevensJohnson syndrome and toxic epidermal necrolysis / L.S. Vera, J. Gueudry, A. Delcampe [et al.] // Cornea. — 2009. — Vol.28, № 4. — P. 401-407.

119. In vivo confocal microscopy indicates an inverse relationship between the sub-basal corneal plexus and the conjunctivalisation in patients with limbal stem cell deficiency / M. Caro-Magdaleno, A. Alfaro-Juarez, J. Montero-Iruzubieta [et al.] // British Journal of Ophthalmology. — 2019. — Vol.103, № 3.— P. 327-331.

120. In vivo confocal microscopy of the sclerocorneal limbus after limbal stem cell transplantation: Looking for limbal architecture modifications and cytological phenotype correlations / L. Mastropasqua, R. Calienno, M. Lanzini [et al.] // Molecur Vision. — 2016. — Vol.22. — P. 748-760.

121. In vivo imaging of limbal epithelium and palisades of Vogt / K. Falke, R.K. Prakasam, R.F. Guthoff, O. Stachs // Klinische Monatsblätter fur Augenheilkunde. — 2012. — Vol.229, № 12. — P. 1185-1190.

122. In vivo volumetric imaging of the human corneo-scleral limbus with spectral domain OCT / K. Bizheva, N. Hutchings, L. Sorbara [et al.] / Biomedical Optics Express. — 2011. — Vol.2, № 7.— P. 1794-1802.

123. Intraarticular administration of platelet-rich plasma with biodegradable gelatin hydrogel microspheres prevents osteoarthritis progression in the rabbit knee / M. Saito, K.A. Takahashi, Y. Arai [et al.] // Clinical and Experimental Rheumatology. — 2009. — Vol. 27, № 2. — P. 201-207.

124. Kate, A. Review of the Diagnosis and Treatment of Limbal Stem Cell Deficiency / A. Kate, S. A. Basu. — DOI: 10.3389/fmed.2022.836009. - Text: electronic // Frontiers in Medicine. — 2022. — Vol.9.— P. 836009.

125. Kenyon, K.R. Limbal allograft transplantation for ocular surface disorders / K.R. Kenyon, P.A. Rapoza. // Ophthalmology. 1995. — Vol. 102, Sup.1 — P. 101-102.

126. Kenyon, K.R. Limbal autograft transplantation for ocular surface disorders / K.R. Kenyon, S.C. Tseng // Ophthalmology. — 1989. — Vol. 96, № 5. — P. 709-723.

127. Keratin 13 immunostaining in corneal impression cytology for the diagnosis of limbal stem cell deficiency / M. Poli, H. Janin, V. Justin [et al.] // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 2011. — Vol.52, № 13.— P. 9411-9415.

128. Keratin 13 is a more specific marker of conjunctival epithelium than keratin 19 / A. Ramirez-Miranda, M.N. Nakatsu, S. Zarei-Ghanavati [et al.] // Molecullar Vision. — 2011. — Vol.17.— P. 1652-1661.

129. Kim, K.H. Diagnosis of corneal limbal stem cell deficiency / K.H. Kim, S.I. Mian // Current Opinion in Ophthalmology. — 2017. — Vol.28, № 4. — P. 355-362.

130. Kobayashi, A. In vivo corneal confocal microscopic findings of palisades of Vogt and its underlying limbal stroma / A. Kobayashi, K. Sugiyama // Cornea. — 2005. — Vol.24, № 4. — P. 435-437.

131. Kruse, F.E. Stem cells and corneal epithelial regeneration // F.E. Kruse // Eye. — 1994. — Vol. 8. Pt. 2. - P.170-183.

132. Le, Q. Diagnostic criteria for limbal stem cell deficiency prior to surgical intervention - A systematic literature review and analysis / Q. Le, T. Chauhan, S.X. Deng // Survey of Ophthalmology. - 2020. - Vol.65, № 1. - P.32-40.

133. Le, Q. The application of human amniotic membrane in the surgical management of limbal stem cell deficiency / Q. Le, S.X. Deng // Ocular Surface. — 2019. — Vol. 17, № 2. — P. 221-229.

134. Le, Q. The diagnosis of limbal stem cell deficiency / Q. Le, J. Xu, S.X. Deng // Ocular Surface. — 2018. — Vol.16, № 1. — P. 58-69.

135. Lehrer, M.S. Strategies of epithelial repair: Modulation of stem cell and transit amplifying cell proliferation / M.S. Lehrer, T.T. Sun, R.M Lavker // Journal of Cell Science. — 1998. — Vol.11, № 19.— P. 2867-2875.

136. Li, D. Q. Three patterns of cytokine expression potentially involved in epithelial-fibroblast interactions of human ocular surface / D.Q. Li, S.C. Tseng // Journal of Cellular Physiology. — 1995. — Vol.163. № 1. - P.61-79.

137. Limbal basal cell density decreases in limbal stem cell deficiency / E.H. Chan, L. Chen, J.Y. Rao [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 2015. — Vol.160, № 4. — P. 678-684.

138. Limbal epithelial crypts: A novel anatomical structure and a putative limbal stem cell niche / H.S. Dua, V.A. Shanmuganathan, A. O Powell-Richards, [et al.] // British Journal of Ophthalmology. — 2005. — Vol.89, № 5. — P. 529-532.

139. Limbal stem cell deficiency: concept, aetiology, clinical presentation, diagnosis and management / H.S. Dua 1, J.S. Saini, A. Azuara-Blanco, P. Gupta // Indian Journal of Ophthalmology. — 2000. — Vol.48, № 2.— P. 83-92.

140. Limbal Stem Cell Deficiency: Current Treatment Options and Emerging Therapies / M. Haagdorens, S.I. Van Acker, V. Van Gerwen[et al.] // Stem Cells International. — 2016. — Vol.2016.- P. 9798374.

141. Limbal stem cell transplantation in chronic inflammatory eye disease / C. M.Samson, C. Nduaguba, S. Baltatzis, C. S. Foster //Ophthalmology. — 2002. — Vol.109. № 5. - P.862-868.

142. Location and clonal analysis of stem cells and their differentiated progeny in the human ocular surface / G. Pellegrini, O. Golisano, P. Paterna [et al.] // Journal of Cell Biology. — 1999. — Vol.145, № 4.— P. 769-782.

143. Long-term impact of a treatment protocol for acute ocular involvement in StevensJohnson syndrome/toxic epidermal necrolysis / S.S. Shanbhag, R. Rashad, J. Chodosh [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 2019. — Vol. 208. — P. 331-341.

144. Long-term outcome of keratolimbal allograft with or without penetrating keratoplasty for total limbal stem cell deficiency / A. Solomon, P. Ellies, D.F. Anderson [et al.] // Ophthalmology. - 2002. — Vol. 109, № 6. — P. 1159-1166.

145. Long-term Outcomes of Ocular Surface Stem Cell Allograft Transplantation / A. Movahedan, A.Y. Cheung, M. Eslani // American journal of ophthalmology. — 2017. — Vol. 184. — P. 97-107.

146. Long-term restoration of damaged corneal surfaces with autologous cultivated corneal epithelium / G. Pellegrini, C.E. Traverso, A.T. Franzi [et al.] // Lancet. — 1997.

— Vol. 349, № 9057. — P. 990-993.

147. Lymphocytes and Langerhans cells in the normal human cornea / L. Vantrappen, K. Geboes, L. Missotten L[et al.] // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1985. — Vol.26, № 2.— P. 220-225.

148. Malyugin, M. Glueless Simple Limbal Epithelial Transplantation: The Report of the First 2 Cases / B.E. Malyugin, M.Y. Gerasimov, S.A. Borzenok // Cornea. — 2020.

— Vol.39, № 12. — P. 1588-1591.

149. Massoudi, D. Collagens and proteoglycans of the cornea: Importance in transparency and visual disorders / D. Massoudi, F. Malecaze, S.D. Galiacy // Cell and Tissue Research. — 2016. — Vol.363, № 2. — P. 337-349.

150. Midterm results on ocular surface reconstruction using cultivated autologous oral mucosal epithelial transplantation / T. Inatomi, T. Nakamura, N. Koizumi [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 2006. — Vol. 141, № 2. — P. 267-275.

151. Mishra, A. Treatment of chronic elbow tendinosis with buffered platelet-rich plasma // A. Mishra, T. Pavelko // American Journal of Sports Medicine. — 2006. — Vol. 34, № 11. — P. 1774-1778.

152. Moore, K.A. Stem cells and their niches / K.A. Moore, I.R. Lemischka // Science.

— 2006. — Vol.311, № 5769. — P. 1180-1885.

153. Morphological changes in ocular surface in dry eyes and other disorders by impression cytology / L. Rivas, M.A. Oroza, A. Perez-Esteban, J. Murube-del-Castillo // Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. — 1992. — Vol.230, № 4. — P. 329-334.

154. Namazi, H. Investigating the effect of intra-articular PRP injection on pain and function improvement in patients with distal radius fracture / H. Namazi, A. Mehbudi // Orthopaedics & traumatology, surgery & research: OTSR. — 2016. — Vol. 102, № 1. — P. 47-52.

155. Nerves and neovessels inhibit each other in the cornea / G. Ferrari, A.R. Hajrasouliha, Z. Sadrai [et al.] // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 2013.

— Vol. 54, № 1. — P. 813-820.

156. Ocular surface abnormalities in aniridia // K. Nishida, S. Kinoshita, Y. Ohashi [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 1995. — Vol.120, № 3. — P. 368-375.

157. Ocular surface reconstruction using stem cell and tissue engineering / T. Nakamura, T. Inatomi, C. Sotozono [et al.] // Progress in retinal and eye research. — 2016. — Vol. 51. — P. 187-207.

158. Oie, Y. Evaluation of corneal neovascularization using optical coherence tomography angiography in patients with limbal stem cell deficiency / Y. Oie, K. Nishida // Cornea. — 2017. — Vol. 36, Sup. 1.— P. 72-75.

159. Optical coherence tomography angiography of perilimbal vasculature: validation of a standardised imaging algorithm // C.N. Patel, A.K. Antony, H. Kommula [et al.] // British Journal of Ophthalmology. — 2020. — Vol. 104, № 3.— P. 404-409.

160. Pfister, R.R. Corneal stem cell disease: concepts, categorization, and treatment by auto- and homotransplantation of limbal stem cells // R R Pfister // Eye and Contact Lens.

— 1994. - Vol. 20, № 1. - P. 64-72.

161. Platelet-rich plasma: from basic science to clinical applications / T.E. Foster, B.L. Puskas, B.R. Mandelbaum [et al.] // American Journal of Sports Medicine. — 2009. — Vol. 37, № 11. — P. 2259-2272.

162. Platelet-rich plasma: intra-articular knee injections produced favorable results on degenerative cartilage lesions / E. Kon, R. Buda, G. Filardo [et al.] // Knee surgery, sports traumatology, arthroscopy: official journal of the ESSKA. — 2010. — Vol. 18, № 4. — P. 472-479.

163. Population-based assessment of visual impairment and pattern of corneal disease: Results from the CORE (Corneal Opacity Rural Epidemiological) study / R. Mukhija, N. Gupta, P. Vashist [et al.] // British Journal of Ophthalmology. — 2019. — Vol.104, № 7.

— P. 994-998. doi: 10.1136/bjophthalmol-2019-314720.

164. Prospective Clinical Trial of Corneal Reconstruction With Biomaterial-Free Cultured Oral Mucosal Epithelial Cell Sheets / Y.J. Kim, H.J. Lee, J.S. Ryu [et al.] // Cornea. — 2018. — Vol. 37, № 1. — P. 76-83.

165. Stem cell differentiation and the effects of deficiency // H.S. Dua, A. Joseph, V.A. Shanmuganathan, R.E. Jones // Eye. — 2003. — Vol.17, № 8. — P. 877-885.

166. Prosthetic replacement of the ocular surface ecosystem scleral lens therapy for patients with ocular symptoms of chronic Stevens-Johnson syndrome / M. Heur, D. Bach, C. Theophanous, G.B. Chiu // American Journal of Ophthalmology. — 2014. — Vol. 158, № 1. — P. 49-54.

167. Ramos, J.L. Clinical and research applications of anterior segment optical coherence tomography - a review // J.L. Ramos, Y. Li, D. Huang // Clinical and Experimental Ophthalmology. — 2009. — Vol.37, № 1.— P. 81-89.

168. Regional heterogeneity in human corneal and limbal epithelia: an immunohistochemical evaluation / L. Wiley, N. SundarRaj, T.T. Sun, R.A. Thoft // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1991. — Vol.32, № 3.— P. 594-602.

169. Reproducibility and Daytime-Dependent Changes of Corneal Epithelial Thickness and Whole Corneal Thickness Measured with Fourier Domain Optical Coherence Tomography / J. Wasielica-Poslednik, W. Lisch, K. Bell [et al.] // Cornea. — 2016. — Vol.35, № 3.— P. 342-349.

170. Sabater, A.L. Amniotic membrane use for management of corneal limbal stem cell deficiency / A.L. Sabater, V.L. Perez // Current Opinion in Ophthalmology. — 2017. — Vol. 28, № 4. — P. 363-369.

171. Schermer, A. Differentiation-related expression of a major 64K corneal keratin in vivo and in culture suggests limbal location of corneal epithelial stem cells / A. Schermer, S. Galvin, T.T. Sun // Journal of Cell Biology. — 1986. — Vol.103, № 1.— P. 49-62.

172. Schwab I.R. Successful transplantation of bioengineered tissue replacements in patients with ocular surface disease / I.R. Schwab, M. Reyes, R.R Isseroff // Cornea. -2000 — Vol. 19, № 4. — P. 421-426.

173. Scleral contact lenses: the expanding role / K.W. Pullum, M.A. Whiting, R.J. Buckley // Cornea. — 2005. — Vol. 24, № 3. — P. 269-277.

174. Shimazaki, J. Amniotic membrane transplantation for ocular surface reconstruction in patients with chemical and thermal burns / J. Shimazaki, H. Yang, K. Tsubota // Ophthalmology. — 1997. — Vol. 104, № 12. — P. 2068-2076.

175. Short-term effects of overnight orthokeratology on corneal sub-basal nerve plexus morphology and corneal sensitivity // M. Nombela-Palomo, G. Felipe-Marquez, J.L. Hernandez-Verdejo, A. Nieto-Bona // Eye & Contact Lens. — 2018. — Vol.44, № 2. — P. 77-84.

176. Simple Limbal Epithelial Transplantation (SLET): a novel surgical technique for the treatment of unilateral limbal stem cell deficiency / V.S. Sangwan, S. Basu, S. MacNeil, D. Balasubramanian // British Journal of Ophthalmology. — 2012. — Vol. 96, № 7. — P. 931-934.

177. Simple Limbal Epithelial Transplantation: Long-Term Clinical Outcomes in 125 Cases of Unilateral Chronic Ocular Surface Burns / S. Basu, S.P. Sureka, S.S. Shanbhag [et al] // Ophthalmology. — 2016. — Vol. 123, № 5. — P. 1000-1010.

178. Simple oral mucosal epithelial transplantation in a rabbit model / A. Inamochi, A. Tomioka, K. Kitamoto [et al.] // Scientific Reports. — 2019. — Vol. 9, № 1. — P. 18088.

179. Sridhar, M.S. Anatomy of cornea and ocular surface / M.S. Sridhar // Indian Journal of Ophthalmology. — 2018. — Vol.66, № 2.— P. 190-194.

180. Successful primary culture and autologous transplantation of corneal limbal epithelial cells from minimal biopsy for unilateral severe ocular surface disease / T. Nakamur, T. Inatomi, C. Sotozono [et al.] // Acta Ophthalmologica Scandinavica. - 2004.

- Vol. 82, № 4. - P. 468-471.

181. Surgical strategies for fornix reconstruction based on symblepharon severity / A. Kheirkhah, G. Blanco, V. Casas [et al.] // American Journal of Ophthalmology. — 2008.

— Vol. 146, № 2. — P. 266-275.

182. Systemic immunosuppression in ocular surface stem cell transplantation: results of a 10-year experience / E.J. Holland, G. Mogilishetty, H.M. Skeens [et al..] // Cornea. — 2012. — Vol. 31, № 6. — P. 655-661.

183. TFOS DEWS II Management and Therapy Report / L. Jones, l.E. Downie, D. Korb [ et al.] // Ocular Surface. — 2017. — Vol. 15, № 3. — P. 575-628.

184. The cincinnati procedure: technique and outcomes of combined living-related conjunctival limbal allografts and keratolimbal allografts in severe ocular surface failure / J.M. Biber, H.M. Skeens, K.D. Neff, E.J. Holland // Cornea. — 2011. — Vol. 30, № 7. — P. 765-771.

185. The new legal framework for minimally manipulated cells expands the possibilities for cell therapy in Russia / O.A. Krasilnikova, I.D. Klabukov, D.S. Baranovskii [et al.] // Cytotherapy. — 2021. — Vol. 23, № 8. — P. 754- 755.

186. The successful culture and autologous transplantation of rabbit oral mucosal epithelial cells on amniotic membrane / T. Nakamura, K. Endo, L.J. Cooper [et al] // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 2003. — Vol. 44, № 1. — P. 106116.

187. Thoft, R.A. Conjunctival transplantation // R.A Thoft // Archives of Ophthalmology. — 1975. — Vol. 95, № 8. — P. 1425-1427.

188. Thoft, R.A. Keratoepithelioplasty / R.A. Thoft // American Journal of Ophthalmology. — 1984. — Vol. 97, № 1. — P. 1-6.

189. Thoft, R.A. The X, Y, Z hypothesis of corneal epithelial maintenance / R.A. Thoft, J. Friend // Investigative Ophthalmology & Visual Science. — 1983. — Vol.24, № 10.— P. 1442-1443.

190. Three-Dimensional structure of the mammalian limbal stem cell niche / K. Grieve, D. Ghoubay, C. Georgeon [et al.] // Experimental Eye Research. — 2015. — Vol. 140.— P. 75-84.

191. Transplantation of cultivated autologous oral mucosal epithelial cells in patients with severe ocular surface disorders / T. Nakamura, T. Inatomi, C. Sotozono [et al.] // British Journal of Ophthalmology. — 2004. — Vol. 88, № 10. — P. 1280-1284.

192. Transplantation of cultivated oral mucosal epithelial cells for severe corneal burn / D.H. Ma, M.T. Kuo, Y.J. Tsai [et al] // Eye. — 2009. — Vol. 23, № 6. — P. 1442-1450.

193. Treatment of acute ocular chemical burns / N. Sharma, M. Kaur, T. Agarwal [et al.] // Survey of Ophthalmology. — 2018. — Vol. 63, № 2. — P. 214-235.

194. Treatment of ocular surface syndrome after LASIK with autologous platelet-rich plasma / J.L Alio, S. Pastor, J. Ruiz-Colecha [et al.] // Journal of Refractive Surgery. — 2007. — Vol. 23, № 6 — P. 617-619.

195. Tsai, R.J. Human allograft limbal transplantation for corneal surface reconstruction / R.J. Tsai, S.C. Tseng // Cornea. — 1994. — Vol. 13, № 5. — P. 389-400.

196. Tsai, R.J. Reconstruction of damaged corneas by transplantation of autologous limbal epithelial cells / R.J. Tsai, L.M. Li, J.K. Chen // New England Journal of Medicine.

- 2000. — Vol. 343, № 2. — P. 86-93.

197. Tseng S.C. Concept and application of limbal stem cells / S.C. Tseng // Eye. — 1989. — Vol. 3, Pt 2. — P. 141-57.

198. Use of autologous platelet-rich plasma in the treatment of dormant corneal ulcers / J.L. Alio., M. Abad, A. Artola [et al.] // Ophthalmology. — 2007. — Vol. 114, № 7. — P. 1286-1293.

199. Use of corneal confocal microscopy to detect corneal nerve loss and increased dendritic cells in patients with multiple sclerosis // G. Bitirgen, Z. Akpinar, R.A. Malik, A. Ozkagnici // JAMA Ophthalmology. — 2017. — Vol.135, № 7. — P. 777-782.

200. Vastine, D.W. Reconstraction of the periocular mucous membrane by autologuos conjunctival transplantation / D.W. Vastine, W.B. Stewart, I.R. Schwab // Ophthalmology

— 1982. — Vol. 89, № 9. — P. 1072-1081.

201. Visual improvement after cultivated oral mucosal epithelial transplantation / C. Sotozono, T. Inatomi, T. Nakamura [et al.] // Ophthalmology. — 2013. — Vol. 120, № 1. — P. 193-200.

202. White, J.G. EDTA-induced changes in platelet structure and function:clot retraction / J.G. White // Platelets. — 2000. — Vol. 11, № 1. — P. 49-55.

203. Zheng, T. Age-related changes of human limbus on in vivo confocal microscopy // T. Zheng, J. Xu // Cornea. — 2008. — Vol.27, № 7. — P. 782-786.