Комплексное исследование количественного состава лейкоцитов и функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов крови в различные промежутки времени после наступления смерти организма тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Сафин, Равиль Якупович

• Сафин, Равиль Якупович
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Сафин, Равиль Якупович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. НЕЙТРОФИЛЬНЫЕ ЛЕЙКОЦИТЫ КРОВИ ЖИВОГО

ОРГАНИЗМА И ТРУПА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. Структура и функциональная активность нейтрофильных лейкоцитов крови живого организма.

1.2 Посмертные изменения нейтрофильных лейкоцитов крови.

1.3. Судебно-медицинский аспект изучения посмертных изменений лейкоцитов крови.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследования.

2.2. Метод подсчета общего количества лейкоцитов крови и процента живых клеток.

2.3. Метод оценки лейкоцитарной формулы крови.

2.4. Метод оценки внутриклеточного кислородзависимого метаболизма нейтрофилов крови с помощью НСТ-теста.

2.5. Метод исследования фагоцитарной активности нейтрофилов крови.

2.6. Методы статистической обработки материала.

ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ЛЕЙКЦИТОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ В РАЗЛИЧНЫЕ

ПРОМЕЖУТКИ ВРЕМЕНИ ХРАНЕНИЯ ОБРАЗЦОВ КРОВИ IN VITRO.

3.1. Изменения исследованных показателей крови в различные промежутки времени хранения образцов крови in vitro.

3.2. Анализ взаимосвязей между длительностью хранения образцов крови in vitro и изменениями исследованных показателей крови.

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ЛЕЙКОЦИТОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ТРУПНОЙ КРОВИ В РАЗЛИЧНЫЕ ПРОМЕЖУТКИ ВРЕМЕНИ ПОСЛЕ НАСТУПЛЕНИЯ СМЕРТИ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ (НЕЛИНЕЙНЫЕ КРЫСЫ).

4.1. Изменения изученных величин трупной крови в различные промежутки времени после наступления смерти лабораторных животных (нелинейные крысы).

4.2. Анализ взаимосвязей между временем, прошедшим после наступления смерти лабораторных животных, и изменениями исследованных показателей крови.

ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ЛЕЙКОЦИТОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ ТРУПНОЙ КРОВИ в РАЗЛИЧНЫЕ ПРОМЕЖУТКИ ВРЕМЕНИ ПОСЛЕ НАСТУПЛЕНИЯ

СМЕРТИ ЛЮДЕЙ.

5.1. Изменения изученных величин трупной крови в различные промежутки времени после наступления смерти людей.

5.2. Анализ взаимосвязей между временем, прошедшим после наступления смерти, и изменениями исследованных показателей трупной крови людей.

ГЛАВА 6. ВОЗМОЖНОСТЬ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ЛЕЙКОЦИТОВ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДАВНОСТИ НАСТУПЛЕНИЯ СМЕРТИ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комплексное исследование количественного состава лейкоцитов и функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов крови в различные промежутки времени после наступления смерти организма»

Актуальность проблемы

Проблема определения давности наступления смерти (ДНС) была и продолжает оставаться одной из наиболее актуальных и сложных в судебной медицине (Пиголкин Ю.И., Богомолов Д.В. и др., 1999; Витер В.И. Куликов В.А., 1999). К настоящему времени разработан широкий спектр методов для судебно-медицинского определения ДНС, который включает методы, изучающие ранние и поздние трупные изменения с использованием инструментальных методик, методы, построенные на изучении морфо-функциональных изменений, происходящих в органах, тканях и жидкостях трупа, и методы, в основе которых лежит создание математических моделей и специальных формул, позволяющих учитывать многообразие индивидуальных признаков, а также внутренних и внешних условий, влияющих на танатологические процессы (Henssge С. et al., 2002). Современный этап развития экспертной оценки определения ДНС предполагает переход от качественной к количественной оценке трупных изменений, происходящих в органах, тканях и жидкостях организма.

При рассмотрении проблемы определения ДНС важнейшим методологическим аспектом является выбор диагностической зоны (объекта исследования). В настоящее время, особенно в зарубежной литературе, широко обсуждается и исследуется возможность использования изменений, происходящих с трупной кровью в различные промежутки времени посмертного периода (Babapulle C.J., Jayasundera N.P., 1993; Koliakos G., Gaitatizi M. et al., 1999; Dokgoz H. et al., 2001; Edston E., Druid H., et al., 2001; Singh D., Prashad R. et al., 2002; Xu X.M., Gong Z. Q. et al., 2002; Unterer S., Lutz H. et al., 2004; Bardale R., Dixit P.G., 2007). В данных работах оцениваются такие параметры трупной крови, как электролиты (натрий, калий, кальций, магний, фосфор), глюкоза, азотистые соединения (мочевина, креатинин), энзимы (кислая и щелочная фосфатазы, амилаза, лактатдегидрогеназа), а также изменения, происходящие с форменными элементами крови. При этом основная часть исследований посвящена изучению морфологических изменений, происходящих с клетками крови в посмертном периоде (Эйдлин JI.M., 1928; Спижарская JI.M., 1966; Симонян К.С. Гутионтова К.П. и др., 1975; Науменко В.Г., Митяева Н.А., 1980; Кадиев Б.Б., Кононенко В.И., 1986; Кадиев Б.Б., 1987; Пальцин А. А. и др., 1991; De Bernardi A., Farditi P., 1965; Findlay A.B., 1976; Laiho К., Penttila A., 1981a,b; Tomita M., 1985; Babapulle C.J., Jayasundera N.P., 1993; Dokgoz H. et al., 2001; Mohammed M.A., 2004; Bardale R., Dixit P.G., 2007). Главный недостаток методов по определению ДНС, основанных на изучении изменений морфологии клеток в посмертном периоде, заключается в том, что в их основе лежит оценка качественных признаков, изменения которых происходят скачкообразно. Это приводит к тому, что точность определения времени посмертного интервала недостаточная. Данный недостаток мог бы быть исправлен, если в сочетании с исследованием морфологических изменений клеток оценивать также какие-либо качественные признаки, связанные с форменными элементами крови, например: количественный состав клеток крови, а также их функциональную активность. Однако, в современной литературе данному аспекту уделено недостаточное внимание, то есть в этих работах не нашли отражения важные не только для судебно-медицинской практики, но и для теоретической базы, вопросы о динамике изменения количественного состава клеток крови, а также их функциональной активности в посмертном периоде в плане определения давности наступления смерти.

Таким образом, вышеизложенное подчеркнуло актуальность проблемы, и определило содержание представленной работы, а так же позволило сформулировать цель и задачи исследования.

Цель исследования

На основании комплексного исследования количественного состава лейкоцитов крови и функциональной активности нейтрофилов выявить, происходящие в них изменения после наступления гибели организма, и установить возможности применения данных методов исследования для определения давности наступления смерти.

Задачи исследования

1. Исследовать количественный состав лейкоцитов и функциональную активность нейтрофилов в образцах крови живых людей, хранившихся in vitro, в различные промежутки времени хранения. Оценить динамику исследованных величин при различных вариантах хранения материала с учетом продолжительности времени хранения.

2. Изучить количественный состав лейкоцитов, процент живых лейкоцитов и функциональную активность нейтрофилов в крови умерших лабораторных крыс в различные промежутки времени после наступления смерти. Оценить динамику величины фагоцитоза нейтрофильных лейкоцитов при различных вариантах хранения трупного материала с учетом продолжительности посмертного периода.

3. Определить количественный состав лейкоцитов и функциональную активность нейтрофилов в крови умерших людей в различные промежутки времени после наступления смерти.

4. Проанализировать полученные данные и выявить зависимость для каждого исследуемого параметра от времени, прошедшего с момента гибели организма или забора крови от живого человека.

5. Оценить возможность использования методов исследования лейкоцитов крови для определения давности наступления смерти.

Научная новизна

В данной работе было впервые проведено исследование ряда параметров трупной крови в различные промежутки времени после наступления смерти организма, а также крови, хранившейся in vitro, в различные промежутки времени ее хранения. Были оценены величины количественного состава лейкоцитов крови, а так же ряда функций нейтрофильных лейкоцитов. На основании полученных данных были выявлены изменения, происходившие с нейтрофильными лейкоцитами, находившимися в сосудистом русле трупов либо в условиях пробирки. Произведено сравнение результатов исследованных показателей крови, полученных при хранении трупного материала или образцов крови при различных температурных условиях внешней среды.

Получены новые сведения о процессах, происходящих с клетками в трупном материале, что имеет большое научно-прикладное значение для решения ряда важных вопросов в таких областях, как судебная медицина, реаниматология, трансплантология, оценено влияние факторов внешней среды на динамику изменения функциональной активности клеток.

Практическая и теоретическая значимость работы

Настоящее исследование позволит расширить имеющиеся представления об изменениях, происходящих с нейтрофильными лейкоцитами крови после наступления смерти организма, либо при хранении крови in vitro, а также особенностях этих сдвигов в зависимости от температурных условий среды хранения трупного материала или образцов крови. Полученные данные позволят определить новые критерии по установлению давности наступления смерти на момент исследования трупа. Сочетание полученных результатов этой работы с имеющимися на сегодняшний день данными о морфологических изменениях клеток крови в посмертном периоде может привести к созданию нового метода по определению давности наступления смерти, основанному на использовании сочетания качественных и количественных оценок.

Положения, выносимые на защиту

1. С увеличением времени, прошедшего с момента наступления смерти организма, отмечается постепенное снижение общего числа лейкоцитов крови, угасание жизненной активности и последующая гибель нейтрофильных лейкоцитов крови, что проявляется снижением процентного содержания этих клеток в трупной крови, а также их функциональной активности. Аналогичные изменения наблюдаются при хранении крови in vitro.

2. Температура окружающей среды влияет на скорость изменения фагоцитарной активности нейтрофилов трупной крови в раннем посмертном периоде. Подобные же закономерности наблюдаются с показателями количественного состава лейкоцитов и функциональной активности нейтрофилов крови, находящейся in vitro.

3. Изменения количественного состава лейкоцитов, а также функциональной активности нейтрофилов трупной крови в раннем посмертном периоде зависят от времени, прошедшего с момента наступления смерти организма, поэтому данные показатели могут быть использованы в качестве диагностических критериев для определения давности наступления смерти.

Апробация работы

Основные положения работы доложены на VI научно-практической конференции молодых ученых ЧелГМА (2008 г.) и заседаниях кафедры судебной медицины ГОУ ВПО ЧелГМА Росздрава (2006 - 2007 г.г.).

Реализация результатов исследования

Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедрах микробиологии, вирусологии, иммунологии и судебной медицины ГОУ ВПО «ЧелГМА Росздрава» и работу ОГУЗ «Челябинское областное бюро судебно-медицинской экспертизы».

Публикации

По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследования, 4-х глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы,

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Сафин, Равиль Якупович

выводы

1. В крови трупов в раннем посмертном периоде, а также при хранении образцов крови in vitro отмечаются постепенное снижение общего числа лейкоцитов, резкое падение процентного содержания нейтрофилов, а также показателей их функциональной активности (фагоцитоза и кислородзависимого метаболизма, оцененного с помощью теста восстановления нитросинего тетразолия). При этом процент лимфоцитов крови возрастает и к концу третьих суток посмертного интервала времени или хранения крови in vitro большую часть белых клеток крови составляют лимфоциты.

2. В ходе исследования процентного содержания живых лейкоцитов в крови трупов лабораторных животных в раннем посмертном периоде выявлено постепенное снижение числа живых лейкоцитов крови и почти полная их гибель к 72-м часам посмертного интервала времени.

3. Влияние температурных условий окружающей среды выявлено только с 9-ти часов посмертного интервала времени. Отмечается более быстрое снижение показателей фагоцитарной активности нейтрофилов крови трупов лабораторных животных, находившихся при температуре окружающей среды в 37°С, чем при других использованных в данной работе температурных условиях. В тоже время средние (16-21°С) и низкие (4°С) температуры окружающей среды статистически значимого влияния на скорость изменения показателей фагоцитоза нейтрофилов крови не оказывают.

4. Выявленные зависимости динамики изменения исследованных параметров крови (процента живых лейкоцитов, процента нейтрофилов и их функциональной активности) от длительности посмертного периода позволяют использовать их в качестве критериев по определению давности наступления смерти организма.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

На основании результатов выполненной работы для повышения точности определения давности наступления смерти в раннем посмертном периоде рекомендуем использование достаточно простых по технике проведения и недорогих методов исследования лейкоцитов крови. Для лучшей интерпретации данных, полученных при исследовании лейкоцитов крови, необходимо проведение серий исследований через определенные промежутки времени.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Сафин, Равиль Якупович, 2008 год

1. Авакян, А А. Морфологическая картина белой крови и фагоцитарная активность лейкоцитов у трупов / А.А. Авакян, М.И. Алавердян // Сборник трудов кафедры судебной медицины I Ленинградского медицинского института. Л., 1958. - Вып. 2. - С. 83-86.

2. Авцын, А.П. Ультраструктурные основы патологии клетки / А.П. Авцын, В.А. Шахламов. М. : Медицина, 1979 - 320 с.

3. Ананьева, С.К. Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови в восстановительном периоде после клинической смерти, вызванной электротравмой / С.К. Ананьева // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1972. - Т.74, № 9. - С. 37-39.

4. Боровиков, В. Statistica: искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов / В. Боровиков СПб. : Питер, 2001 — 656 с.

5. Вагнер, В.И. Количественная оценка теста восстановления нитросинего тетразолия / В.И. Вагнер, О.С. Насонкин, Н.Д. Борскина //Лечеб. дело. 1989.-№12.-С. 31-33.

6. Витер, В.И. Современное состояние проблемы давности наступления смерти / В.И. Витер, В.Ю. Толстолуцкий // Казан, мед. журн. 1994. -№4. - С.320-324.

7. Витер, В.И. Вопросы методологии в решении проблемы определения давности наступления смерти / В.И. Витер, В.А. Куликов // Суд.-мед. эксперт. 1999. - Т.42, №3. - С.3-6.

8. Воробьев, В.Г. Использование светоотражающих свойств кожи для установления давности наступления смерти / В.Г. Воробьев, В.М. Бушков // Молодежь и медицинская наука в XXI веке : материалы конф. Киров, 2003. - С. 74-75.

9. Галкин, А.А. Методы исследования подвижности нейтрофилов : обзор лит. / А.А. Галкин, Е.Н. Тимин, А.А. Карелин. // Клинич. лаб. диагностика. 2003. - №1. - С. 22-33.

10. Гланц, С. Медико-биологическая статистика : пер. с англ. / С. Гланц. — М. : Практика, 1998. 459 с.

11. Гордиенко, С.М. Современные методические подходы к изучению фагоцитарной активности лейкоцитов / С.М. Гордиенко. // Лаб. дело. — 1984.-№5.-С. 285-289.

12. Горизонтов, П.Д. Стресс и система крови / П.Д. Горизонтов, О.И. Белоусова, М.И. Федотова. М. : Медицина, 1983. - 293 с.

13. Долгушин, И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин. Екатеринбург : Изд-во УрО РАН, 2001. — 288 с.

14. Иммунологические методы исследования : учеб. пособие / под ред. Е.А. Олейникова, Л.Я. Эберта. Саранск, 1981. - 92 с.

15. Кадиев, Б.Б. Применение гистохимических методов при исследовании степени альтерации лейкоцитов трупной крови / Б.Б. Кадиев, В.И. Кононенко // Диагностика давности процессов в объектах судебно-медицинской экспертизы. Кишинев : Штиница, 1986. - С. 14-15.

16. Кадиев, Б.Б. Установление давности наступления смерти по динамике посмертных изменений в форменных элементах крови // Суд.-мед. эксперт. 1987. - Т.ЗО, № 1. - С. 14-17.

17. Казарновская, M.JI. Репродукция лимфоцитов трупной крови. Судебно-медицинские и биологические аспекты / Казарновская M.JI. -Кишинев : Штиница, 1983. 104 с.

18. Караванов, Г.Г. Фагоцитарная деятельность лейкоцитов трупной крови / Г.Г. Караванов // Современные проблемы гематологии и переливания крови : тр. ин-та гематологии и переливания крови. М., 1935.-С. 96-99.

19. Ковальский, Г.Б. Количественная гистохимия дегидрогеназ / Г.Б. Ковальский // Введение в количественную гистохимию ферментов / под ред. Т.Б. Журавлевой, Р.А. Прочуханова. М. : Медицина, 1978. -Гл. З.-С. 58-115.

20. Коровин, А.А. Морфометрические подходы к диагностике давности наступления смерти / А.А. Коровин, Ю.И. Пиголкин, Д.В. Богомолов и др. // Суд.-мед. эксперт. 2001. - Т.44, №1. - С. 3-6.

21. Костылев, В.И. Применение иммунологических методов исследования для определения давности наступления смерти / В.И. Костылев // Суд.-мед. эксперт. 1984. - Т.27, №1. - С. 13-16.

22. Костылев, В.И. Динамика некоторых иммунных показателей в зависимости от места взятия крови и давности наступления смерти / В.И. Костылев // Суд.-мед. эксперт. 1985. - Т.28, №4. - С. 8-9.

23. Лаврова, B.C. Нейтрофилы и злокачественный рост / B.C. Лаврова, И.В. Чердынцева, Н.В. Васильев и др. Томск : Изд-во Томск, ун-та, 1992.- 124 с.

24. Лазорик, М.И. Показатели фагоцитоза в международной системе единиц / М.И. Лазорик // Лаб. дело. 1984. - №3. - С. 165-167.

25. Лимфоциты. Методы: руководство / С. Хайт и др. ;под ред. Дж. Клауса ; пер. с англ. А.Н. Maya, А.А. Фельдшеровой ; под ред. А.Н. Maya. М. : Мир, 1990. - 395 с.

26. Лисянский, Б.М. Гистоэнзимологическое исследование коры головного мозга при определении давности наступления смерти / Б.М. Лисянский, В.В. Язвиков, С.А. Морозов // Суд.-мед. эксперт. 1975. -Т. 18, №2. - С. 31-32.

27. Лопухин, Ю.М. Критерии жизнеспособности органов и тканей перед трансплантацией / Ю.М. Лопухин, Э.М. Коган. М. : Медицина, 1975. -280 с.

28. Лопухин, Ю.М. Ультраструктурные основы жизнеспособности печени, почек и сердца / Ю.М. Лопухин, Э.М. Коган, Я.Л. Караганов. М. : Медицина, 1977. - 256 с.

29. Лушников, Е.Ф. Гистохимическое определение активности некоторых дегидрогеназ на секционном материале / Е.Ф. Лушников, Э.В. Рабина // Арх. патологии. 1963. - Т.25, №2. - С. 70-75.

30. Лушников, Е.Ф. Возможности гистохимического изучения активности ферментов в тканях после смерти / Е.Ф. Лушников, Н.А. Шапиро // Арх. патологии. 1969. -Т.31, №1. - С. 8-14.

31. Лушников, Е.Ф. Аутолиз. Морфология и механизмы развития / Е.Ф. — -Лушников-Н.А. Шапиро. Мг: Медицина, 1974.- 200 с.---------

32. Лушников, Е. Ф. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития / Е. Ф. Лушников, В. М. Загребин // Арх. патологии. 1980. - Т.42, №.1. - С. 3-10.

33. Лушников, Е. Ф. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития / Е. Ф. Лушников, В. М. Загребин // Арх. патологии. 1987. - Т.44, №.2. - С. 84-89.

34. Лушников, Е.Ф. Гибель клетки (апоптоз) / Е.Ф. Лушников, А.Ю. Абросимов. М. : Медицина, 2001. - 192 с.

35. Маринов, Х.Г. Некоторые гистохимические особенности клеток селезенки / Х.Г. Маринов // Арх. патологии. 1966. - Т.28, №11. - С. 58-62.

36. Маянский, А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия : метод, рекомендации / А.Н. Маянский, М.К. Виксман. — Казань, 1979.- 11 с.

37. Маянский, А.Н. Реактивность нейтрофила / А.Н. Маянский, А.Н. Галиуллин. Казань : Изд-во Казан, ун-та, 1984. - 160 с.

38. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. Новосибирск : Наука. Сиб. отд-ние, 1989. - 340 с.

39. Маянский, А.Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А.Н. Маянский, О.И. Пикуза. Казань : Изд-во Казан, ун-та, 1993. - 122 с.

40. Маянский, А.Н. Апоптоз нейтрофилов / А.Н. Маянский, Н.А. Маянский, М.И. Заславская и др. // Иммунология. 1999. - № 6. — С. 11-20.

41. Маянский, Н.А. Апоптоз экссудативных нейтрофилов человека / Н.А. Маянский, М.И. Заславская, Н.А. Маянский // Иммунология. 2000. -№2.-С. 11-13.

42. Медведев, А.Н. Способ исследования поглотительной фазы фагоцитоза / А.Н. Медведев, В.В. Чаленко // Лаб. дело. 1991. - №2. -С. 19-20.

43. Медицинские и лабораторные технологии и диагностика : справочник / под ред. А.И. Каринщенко. СПб. : Интермедика, 1998. - 304 с.

44. Мельников, Ю.Л. Судебно-медицинское определение времени наступления смерти / Ю.Л. Мельников, В.В. Жаров. М. : Медицина, 1978.- 168 с.

45. Нагоев, Б.С. Функциональная активность лейкоцитов у больных пневмонией / Б.С. Нагоев, М.Г. Шубич // Клинич. медицина. — 1979. — Т.57, №4. С. 31-34.

46. Нагоев, Б.С. Значение теста восстановления нитросинего тетразолия для изучения функциональной активности лейкоцитов : обзор лит. / Б.С. Нагоев, М.Г. Шубич // Лаб. дело. 1981. - №4. - С. 195-198.

47. Нагоев, Б.С. Очерки о нейтрофильном гранулоците / Б.С. Нагоев. — Нальчик : Эльбрус, 1986. 142 с.

48. Науменко, В.Г. Гистологический и цитологический методы исследовании в судебной медицине / В.Г. Науменко, Н.Л. Митяева. — М. : Медицина, 1980. 304 с.

49. Пальцев, М.А. Межклеточное взаимодействие / М.А. Пальцев, А.А. Иванов. М. : Медицина, 1995. - 224 с.

50. Пальцын, А.А. Электронно-радиографическое исследование ----------- жизнеспособности клеток человека после смерти." Посмертнаяактивация синтеза РНК в нейтрофилах / А.А. Пальцын, О.А. Захарова,

51. Р.И. Каем и др. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1991. -Т. 111, №2.-С. 199-201.

52. Пермяков, Н. К. Патология реанимации и интенсивной терапии / Н. К. Пермяков. М. : Медицина, 1985. - 287 с.

53. Пиголкин, Ю.И. Современные методы определения давности наступления смерти / Ю.И. Пиголкин, Д.В. Богомолов, А.А. Коровин // Суд.-мед. эксперт. 1999. - Т.42, №3. - С. 31-33.

54. Поликар, А. Элементы патологии клетки : пер. с фр. / А. Поликар, М. Бесси. М.: Мир, 1970. - 348 с.

55. Ребров, Л.Б. Некоторые энзиматические аспекты посмертного аутолиза / Л.Б. Ребров, В.Л. Козельцев, С.С. Шишкин и др. // Вестн. АМН СССР. 1983. -№10. -С. 82-89.

56. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. М. : Медиа Сфера, 2003. - 312 с.

57. Сапрыкин, В.П. Морфологические варианты нейтрофильных гранулоцитов крови практически здоровых людей / В.П. Сапрыкин, С.Л. Кузнецов // Морфология. 2001. - Т. 120, №6. - С. 37-41.

58. Селье, Г. Стресс без дисстресса : пер. с англ. / Г. Селье. М. : Прогресс, 1979. - 124 с.

59. Симонян, К.С. Посмертная кровь в аспекте трансфузиологии / К.С. Симонян, К.П. Гутионтова, Е.Г. Цуринова. М. : Медицина, 1975.

60. Скудина, М.Г. Переливание трупной крови / М.Г. Скудина. М. : Медгиз, 1940.- 105 с.

61. Спижарская, JI.M. Морфологическая характеристика и некоторые функциональные свойства кроветворных клеток посмертного мозга и изменения их при хранении в консервирующих растворах : дис. . канд. мед. наук / JI.M. Спижарская. JL, 1966. - 125 с.

62. Струков, А. И. Патологическая анатомия / А. И. Струков, В.В. Серов. М. : Медицина, 1993. - 687 с.

63. Томилин, В.В. Определение давности наступления смерти / В.В. Томилин, В.В. Жаров, Г.М. Мельникова // Суд.-мед. эксперт. — 1984 — Т.27, №4. С. 44-47.

64. Томилин, В.В. Проблема переживаемости тканей при использовании современных методов морфологического исследования / В.В. Томилин, В.П. Туманов, О.А. Захарова и др. // Суд.-мед. эксперт. — 1999. Т.42, №4. - С. 12-15.

65. Тотолян, А.А. Клетки иммунной системы / А.А. Тотолян, И.С. Фрейдлин. СПб. : Наука, 2000. - 231 с.

66. Федоров, Б.М. Стресс и система кровообращения / Б.М. Федоров. -М.: Медицина, 1991. 320 с.

67. Физиология лейкоцитов человека / В.А. Алмазов, Б.В. Афанасьев, ------ А.Ю. Зарицкий и др. JI. : Наука, 1979. - 232 с. ----------

68. Цуринова, Е.Г. Переливание фибринолизной крови / Е.Г. Цуринова. -М.: Медгиз, 1960.- 155 с.

69. Хижнякова, К.И. Возможности судебно-медицинской экспертизы при определении времени наступления смерти / К.И. Хижнякова. — М. : ЦОЛИУВ, 1973.-Ч. 1. -43 с.

70. Щепочкин, О. В. Определение давности наступления смерти по результатам краниоэнцефальной термометрии / О. В. Щепочкин // Проблемы экспертизы в медицине. Ижевск : Экспертиза, 2001. -Вып. 3. -С. 9-13.

71. Шор, Г.В. О смерти человека (введение в танатологию) / Г.В. Шор. -СПб. : Изд-во СПбГМУ, 2002. 271 с.

72. Шубич, М.Г. NBT-тест у детей в норме и при гнойно-бактериальных инфекциях / М.Г. Шубич, В.Г. Медникова // Лаб. дело. 1978. - №9. -С. 515-518.

73. Шубич, М.Г. Цитохимия фагоцитоза / М.Г. Шубич // Цитохимические и биохимические исследования в эксперименте и клинике : межвуз. сб. вопр. теоретич. м клинич. медицины. Нальчик, 1979. - Вып. 8. — С. 26-27.

74. Шумаков, В.И. Консервация органов / В.И. Шумаков, Е.Ш. Штенгольд, Н.А. Онищенко. М. : Медицина, 1975. — 252 с.

75. Эйдлин, JI.M. Белые тельца в крови трупа / JI.M. Эйдлин // Суд.-мед. эксперт. 1928. — №9. — С: 61-65. ----------~ —

76. Aderjan, R. Investigation of cardiac glycoside levels in human postmortem blood and tissues determined by a special radioimmunoassay procedure / R. Aderjan, H. Buhr, G. Schmidt // Arch. Toxicol. 1979. - Vol.42. - P.107.

77. Althaus, L. Rectal temperature time of death nomogram: sudden change of ambient temperature / L. Althaus, C. Henssge // Forensic Sci. Int. 1999. -Vol. 99.-P. 171-178.

78. Babapulle, C.J. Cellular changes and time since death / С J. Babapulle, N.P. Jayasundera // Med. Sci. Law. 1993. - Vol.33, №3. - P. 213-222.

79. Baccino, E. Outer ear temperature and time of death / E. Baccino, L. De Saint Martin, Y. Schuliar et al. // Forensic Sci. Int. 1996. - Vol. 83. - P. 133-146.

80. Baccino, E. Letter to the Editor / E. Baccino // Forensic Sci. Int. 1997. -Vol. 87.-P. 173.

81. Bardale, R. Evaluation of Morphological Changes in Blood Cells of Human Cadaver for the Estimation of Postmortem interval / R. Bardale, P.G. Dixit // Medico-legal update. 2007. - Vol. 7, №2. - P. 35-41.

82. Bins, M. Neutrophil granulation stained with May Grunwald Giemsa or ~ pure'Azure B-eosin'Y quantified by image'analysisV'MrBins, WrHuiges,

83. T. Timmers, et al. // Blut. 1989. - Vol. 58, №2. - P. 79 - 82.

84. Braunstein, H. A histochemical study of the enzymatic activity of lymph nodes / H. Braunstein, D.G. Freiman, W. Thomas et al. // Cancer. 1962. -Vol.15.-P. 130-138.

85. Brecher, G. Present status of speculated red cells and their relationship to the discocyte-echinocyte transformation: critical review / G. Brecher, M. Bessis // Blood. 1972. - Vol.40, №3. - P.333-344.

86. Carrel, A. The fundamental processes of fibroblast and macrophage. II. The macrophage / A. Carrel, A.H. Ebeling // J. Exp. Med. 1925. - Vol.44. - P. 285.

87. Chitnis, D. Inhibition of apoptosis in polymorphonuclear neutrophils from burn patients / D. Chitnis, C. Dickerson, A.M. Munster et al. // J. Leukoc. Biol. 1996. - Vol.59, №6. - P.835-839.

88. Сое, J.I. Post-mortem chemistry, practical considerations and a review of the literature / J.I. Сое // Forensic Science. 1974. - Vol.19. - P. 13-19.

89. Сое, J.I. Postmortem peripheral blood glucose and cardiopulmonary resuscitation / J.I. Сое // Forensic Sci. Gaz. 1975. - Vol.6, №4. - P.l.

90. Сое, J.I. Postmortem chemistry of blood, cerebrospinal fluid, and vitreous humour / J.I. Сое // Forensic Medicine / ed. by C.G. Tedeschi, G.E. William, L.G. Tedeschi. Philadelphia, London, Toronto : Saunders company, 1977. - Vol. 2. - P. 1033-1036.

91. Сое, J.I. Postmortem biochemistry of blood and vitreous humour in paediatric practice / J.I. Сое // Pediatric Forensic Medicine and Pathology / ed. by J. K. Mason. London : Chapman & Hall Medical, 1989. - P. 191203.

92. Сое, J.I. Vitreous potassium as a measure of the postmortem interval: an historical review and critical evaluation / J.I. Сое // Forensic Science Int. -1989.-Vol.42.-P.201.

93. Сое, J.I. Post-mortem chemistry update: Emphasis on forensic application / J.I. Сое // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1993. - Vol.14. - P.91-117.

94. De Bernardi, A. Rillievi tanatologicic snigli ellementi firurati del sangue. Nota limit della indentificabilita dei granulociti a contrasto di fase / A. De Bernardi, P. Farditi // Minerva Med. Leg. 1965. - Vol. 85. - P. 23-26.

95. De Chatelet, L.R. Effect of phorbol myristate acetate on the oxidative metabolism of human polymorphonuclear leukocytes / L.R. De Chatelet, P.S. Shirley, R.B. Johnston // Blood. 1976. - Vol. 47. - P. 545-554.

96. De Letter, E.A. Can routinely combined analysis of glucose and lactate in vitreous humour be useful in current forensic practice? / E. A. De Letter, M. H. Piette // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1998. - Vol.19, №4. - P.335.

97. Densen, P. Granulocytic phagocytes / P. Densen, W.R. Clark, W.M. Nauseff // Principles and Practice of Infectious Diseases; Eds. G.L. Mandell, J.E. Bennett, R. Dolin. 3rd ed. - New York : Churchill Livingstone, 1995. - P. 78-101.

98. Dix, J. Time of death, decomposition and identification: an atlas / J. Dix, M. Graham. Boca Raton, Florida : CRC Press LLC, 2000. - 119 p.

99. Dix, J. Color atlas of forensic pathology / J. Dix. Boca Raton, Florida : CRC Press LLC, 2000. - 181 p.

100. Dixon, K.C. Protein in dying B-cell of the pancreatic islets / K.C. Dixon, A.J. King, T. Malinin // Quart. Rev. Exp. Physiol. 1960. - Vol. 45. - P. 202.

101. Dixon, K.C. Events in dying cells / K.C. Dixon // Proc. Roy. Soc. Med. -1967.-Vol. 60.-P. 217.

102. Dokgoz, H. Comparison of morphological changes in white blood cells- after death and in vitro storage of blood for the estimation of postmortem"interval / H. Dokgoz, N. Arican, I. Elmas et al. // Forensic Science Int. -2001.-Vol.124.-P. 25-31.

103. Edston, E. Postmortem measurements of thyroid hormones in blood and vitreous humour combined with histology / E. Edston, H. Druid, M. Ostrom // Am. J. Med. Pahtol. 2001. - Vol.22, №1. - P.78-83.

104. Findlay, A.B. Bone marrow changes in the post mortem interval / A.B. Findlay // J. Forensic Sci. Soc. 1976. - Vol.16, №3. - P.213-218.

105. Frickenstein, M.L. Untersuchungen uber den ATP, ADP und AMPGehaltim Leichenblut in Beziehung zum Leichenalter / M.L. Frickenstein -Marburg : Philipps-Universitat, 1967. 57 p.

106. Gineste, J. Storage of Blood / J. Gineste, M. Forest, B. Munpin. London : Academic Press, 1968. - 225 p.

107. Gormsen, H. The diagnostic value of postmortem blood glucose determinations in cases of diabetes mellitus / H. Gormsen, A. Lund // Forensic Sci. Int. 1985. - Vol.28. - P.103.

108. Hebert, M.J. Sequential morphologic events during apoptosis of human neutrophils. Modulation by lipoxygenase-derived eicosanoids / M.J. Hebert, Т. Takano, H. Holthofer et al. //J. Immunol. 1996. - Vol.157, №7. — P.3105-3115.

109. Henke, S.E. Changes in vitreous humour associated with postmortem interval in rabbits / S.E. Henke, S. Demarais // Am. J. Vet. Res. 1992. -Vol.53, №l.-P.73-77.

110. Henry, J.B. Estimation of the post-mortem interval by chemical means / J. B. Henry, F.A. Smith // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1980. - №1. - P. 341-347.

111. Henssge, C. Integration of different methods casework. In the estimation of the time since death in the early post-mortem period / C. Henssge, B. Knight, T. Krompecher et al. London : Edward Arnold, 1995. — 269 p.

112. Henssge, C. The estimation of the death in early postmortem period / C. Henssge, B. Knight, T. Krompecher et al. 2nd ed. - London : Edward Arnold, 2002.-271 p.

113. Homburg, C.H. Apoptosis of neutrophils / C.H. Homburg, D. Roos // Curr. Opin. Hematol. 1996 - Vol.3, №1. - P. 94-99.

114. James, R. A. Determination of postmortem interval by sampling vitreous humour / R. A. James, P. A. Hoadley, B. G. Sampson // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1997. - Vol. 18, №2. - P. 158.

115. James, R. A. Precision of estimating time of death by vitreous potassium. Comparison of vitreous equations / R.A. James, P.A. Hoadley, B.G. Sampson // Am. J. Forensic Med. Pathol. 1997. - Vol.18, №2. - P. 158162.

116. Knight, B. Forensic Pathology / B. Knight. London : Edward Arnold, 1991.-421 p.

117. Krause, J.R. Automated "differentials"in the hematology laboratory / J.R7 Krause // Am. J. Pathol. 1990. - Vol. 93, №4, Suppl.l. - S. 11-16.

118. Krause, J.R. The automated white cell differential. A current perspective / J.R. Krause // Heamtol. Oncol. Clin. North Am. 1994. - Vol.8, №4. - P. 605-616.

119. Kernbach, G. Biochemical measurements of glucose metabolism in relation to cause of death and postmortem effects / G. Kernbach, K. Puschel, B. Brinkmann // Z. Rechtsmed. 1986. - Vol. 96, №3. - P. 199-213.

120. Koliakos, G. Stability of serum TSH concentration after nono-refrigerated storage / G. Koliakos, M. Gaitatizi, P. Grammaticos // Panminerva Med. -1999. -Vol.41, № 2. -P.99-101.

121. Kolmer, J.A. Liquid preservation of granulocytes for transfusion / J.A. Kolmer//Progress Clin. Biol. Res. 1977.-Vol.13.-P. 185-191.

122. Laiho, K.U. The relationship between cell viability and changes in mitochondrial ultrastructure, cellular ATP, ion and water content following injury of Ehrlich ascites tumor cells / K.U. Laiho, B.F Trump // Virchows Arch. 1974. - Vol.15. -P.267-277.

123. Laiho, K. Autolytic changes in blood cells and other tissues of human cadavers viability and ion studies / K. Laiho, A. Penttila // Forensic Science Int. 1981. - Vol.17, №2. - P. 109-120.

124. Laiho, K. Autolytic changes in blood cells of human cadavers II, Morphological studies / K. Laiho, A. Penttila // Forensic Science Int. -1981. Vol.17, №2. -P.121-132.

125. Lange, N. Human postmortem interval estimation from six different studies. /N. Lange, S.T. Swearer, W.Q. Sturner // Forensic Sci. Int. 1994. -Vol. 66.-P. 159-174.

126. Lewis, W.H. The survival of cells after the death of the organism / W.H. Lewis, C.C. McCoy // Bull. Johns Hopk. Hosp. 1922. - Vol. 33. - P. 284.

127. Lindquist, O. Determination of insulin and glucose postmortem / O. Lindquist//Forensic Sci. 1973. -Vol. 2. — P.55.

128. Lythgoe, A.S. The activity of lactate dehydrogenase in cadaver sera: A comparison of different sampling sites /A.S. Lythgoe // Med. Sci. Law. -1980.-Vol.20.-P.48.

129. Lythgoe, A.S. Postmortem activity of alkaline phosphatase in serum from different sites of the cadaver cardiovascular system / A.S. Lythgoe // J. Forensic Sci. Soc. 1981. - Vol.21. - P.337.

130. Madea, B. Estimating time of death from measurement of the electrical excitability of skeletal muscle. / B. Medea // J. Forensic Sci. Soc. — 1992. — Vol. 32.-P. 117-129.

131. Madea, B. Postmortem biochemical examination of synovial fluid — a preliminary study / B. Medea, С Kreuser, S. Banaschak // Forensic Sci. Int. -2001.-Vol. 118.-P. 29-35.

132. Maeda, H. Evaluation of postmortem oxymetry with reference to the cause of death / H. Maeda, K. Fukita, S. Oritani et al. // Forensic Sci. Int. 1997. -Vol.87.-P.201-210.

133. Mallach, H.J. Comparative studies with enzymatic methods on vital and cadaveric blood with regard to the time of death / H.J. Mallach, G. Laudahn // Klin. Wochenschr. 1964. - Vol. 42. - P. 693-699.

134. McDowal, K.L. The use of absolute refractory period in the estimation of the erly postmortem interval / K.L. McDowal, D.V. Lenihan, A. Busuttil et al. // Forensic Sci. Int. 1998. - Vol. 91. - P. 163-170.

135. Metcalf, J.A. Laboratory manual of neutrophil function / J.A. Metcalf, J.I. Gallin, W.M. Naussefet al.-N.Y., 1985.-191 p.

136. Mohammed, M.A. Blood changes as a possible tool for estimation of the postmortem interval. Thesis Electronic Recourse. / M.A. Mohammed /

137. Faculty of Medicine, Cairo University. 2004. - Mode of access: http://www.cdml.edu.eg.

138. Phillips, H.J. Dye exclusion tests for cell viability. / H.J. Phillips // Tissue Culture, Methods and Applications / ed. by P.F. Kruse, M.K. Patterson. -N. Y.; London : Academic Press, 1973. P. 406-408.

139. Querido, D. Linear rate of change in the product of erythrocyte water content and potassium concentration during the 0—120 hour postmortem period in the rat / D. Querido, B. Pillay // Forensic Sci. Int. 1988. -Vol.38, №1-2.-P.101-112.

140. Querido, D. Linearization of the relationship between postmortem plasma chloride concentration and postmortem interval in rats / D. Querido // Forensic Sci. Int. 1990. - Vol.45, №1-2. - P.l 17.

141. Querido, D. In vitro loss of potassium from erythrocytes during the 0 — 108 hours postmortem period in rats: relationship between potassium loss and postmortem interval / D. Querido // Forensic Sci. Int. 1991. - Vol.51, № 1. -P.l 11.

142. Querido, D. A preliminary study of changes in scalp impedance during the early post-mortem periods in rats / D. Querido // Forensic Sci. Int. 1999. — Vol.101.-P.123-130.

143. Penttila, A. Transformation of rat blood cells postmortem. A scanning electron microscopic study / A. Penttila, J. Ohman // Zacchia. 1978. -Vol.13. -P.l-16.

144. Penttila, A. Postmortem and in vitro changes of human red blood cells. II Scanning electron microscopic studies / A. Penttila, H. Sumuvuori, J. Ohman // Proc. 6th Scand. Meeting Forensic Med. Helsinki, 1976. -P.218-226.

145. Perry, V.P. Techniques of viable tissue storage / V.P. Perry // Fed. Proc. -1963.-Vol. 22.-P. 102.

146. Rajs, J. Comparison of anoxic changes in isolated rat cardiac myocytes in suspension and in histological sections / J. Rajs, D. P. Jones, S. W. Jakobsson // Acta Pathol. Microbiol. Scand. Sect. A. 1978. - Vol.86. -P.401-408.

147. Rohr, K. Das menschliche Knochenmark / K. Rohr. Stuttgart, 1960. - 160 P

148. Rosenholtz, M. Morphologic histochemical aminopeptidase / M. Rosenholtz, L.W. Wattenberg // Arch. Path. 1961. - Vol.71. - P. 63.

149. Schenck, P. A. Effects of storage on serum ionized calcium and pH values in clinically normal dogs / P. A. Schenck, D. J. Chew, C. L. Brooks // Am. J. Res. 1995. - Vol.56, №3. p. 304-307.

150. Schleyer, F. Postmortem blood viscosity, blood cell volume, osmotic erythrocyte resistance and blood sedimentation in relation to cadaver age and cause of death / F. Schleyer // Virchows Arch. 1958. - Vol.331, №3. -P. 276-286.

151. Schleyer, F. Uber Bezichungen zwischen postmortaler Leukozytenvitalitat und Leichenalter / F. Schleyer // Blut. 1960. - № 6. - P. 147-150.

152. Snyderman, R. Molecular and cellular mechanisms of leukocyte chemotaxis / R. Snyderman, E.J. Goetzl // Science. 1981. - Vol.231. - P. 830.

153. Smolen, J.E. Function of neutrophils / J.E. Smolen, L.A. Boxer // Williams hematology; Eds. E. Beutler, M.A. Lichtman, B.S. Coller and T.J. Kipps. -New York : McGraw-Hill, 1995. P. 779-798.

154. Takubo, T. Quality control in a manual and an automated leukocyte differential count / T. Takubo, N. Tatsumi // Southeast Asian J. Trop. Med. Public Health. 1999. - Vol.30, Suppl.3. - P.66-74.

155. Thomsen, H. The postmortem activation status of platelets / H. Thomsen, B. Krisch // Int. Leg. Med. 1994. - Vol.107. - P. 111-117.

156. Thomsen, H. How and why does the platelet count in postmortem blood change during the early postmortem interval / H. Thomsen, H. J. Kaatsch, B. Krisch//Forensic Sci. Int. 1999. - Vol.101. - P. 185-194.

157. Tomita M. Studies on autolytic changes in red blood cells after death / M. Tomita//Jap. J. Legal Medicine. 1985. - Vol. 39, №5. -P.371-385.

158. Trump, B.F. The pathogenesis of subcellular reaction to lethal injury / B.F. Trump, F.L. Ginn // Methods and Achievements in experimental Pathology / ed. by E. Bajusz, G. Jasmin. -Basel; N. Y. : Karger, 1969. Vol.4. - P. 129.

159. Vogelaar, S. A. Blood sample stability at room temperature for counting red and white blood cells and platelets / S.A. Vogelaar, D. Posthuma, D. Boomsma et al. // Vascul. Pharmacol. 2002. - Vol.39, №3. - P. 123-125.

160. Unterer, S. Evaluation of an electrolyte analyzer for measurement of ionized calcium and magnesium concentrations in blood, plasma, and serum of dogs / S. Unterer, H. Lutz, B. Gerber et al! // Am. J. Vet. Res. — 2004.-Vol.65, №2.-P. 183- 187.

161. Urban, R. Todeszeitbestimmung Mogglichkeiten und Grenzen der Elektrolyt estimmung in Leichenliquor / R. Urban, H. D. Troger // Beitr. Gerichtl. Med. 1987. -Vol.45. - P. 157-161.

162. Warner, B. A. A field evaluation of the Coulter-STKS / B. A. Warner, D. M. Reardon // Am. J. Clin. Pathol. 1991. - Vol. 95. - P. 207-217.

163. Xu, X. M. Study on the relationship between PMI and the concentration of magnesium and iron in the vitreous humour of rabbit after death / X. M. Xu, Z. Q. Gong, Y. G. Sun. // Fa Yi Xue Za Zhi. 2002. - Vol. 18, №2. - P. 65 - 66.

164. Zimmerman, H. Kritisches zur histochemischen darstellung pyridinnucleotid-gebundener dehydrogenasen / H. Zimmerman // Acta histochem. 1961. -Bd.2, Suppl.l. - P. 164.

165. Zucker-Fronnkin, D. Electron microscopic studies human granulocytes / D. Zucker-Fronnkin // Semin. Hematol. 1968. - Vol. 15. - P. 109-111.139