Липиды и контактные взаимодействия клеток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.06, доктор биологических наук Марголис, Леонид Борисович

• Марголис, Леонид Борисович
• доктор биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации доктор биологических наук Марголис, Леонид Борисович

ВВЕДЕНИЕ И ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

ГЛАВА I. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛИПОСОМ ДЛЯ ВОЗДЕЙСТВИЯ НА КЛЕТКИ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ/.

Введение.

I.Искусственные липидные мембраны.

1.1. Типы липидных мембран.

1.2. Характеристики липидных мембран. Фазовые переходы.

1.3. Моделирование свойств клеточной мембраны с помощью липидных бислоев.

П. Механизмы взаимодействия клеток с липидными мембранами /липосомами/.

П.1. Взаимодействие жидко-кристаллических липосом с клетками.

П.1А. Связывание с поверхностью.28.

П.1Б. Слияние липосом с клеткой.

П.IB. Эндоцитоз.

П.1Г. Обмен липидными молекулами между липосомальной и клеточной мембранами.

П.2. Взаимодействие "твердых" липосом с клетками. 40 П.З. Взаимодействие с клетками искусственно модифицированных липосом.

П.4. Липосомо-клеточные взаимодействия. Проблемы. 47 Ш. Использование липосом для введения различных веществ в клетки in vitro и in vivo. №

Ш.1. Введение заключенных в липосомы веществ в клетки in vitro.

Ш.2. Введение зондов в клеточные мембраны.

Ш.2А. Изучение компартментализации липидных молекул в клетках.

Ш.2Б. Динамика липидов в клеточных мембранах.

Ш.З. Модификация клеточных мембран липосомами.

Ш.4. Липосомы in vivo.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Липиды и контактные взаимодействия клеток»

I. Прикрепление клеток на плоские липидные мембраны.

Роль микровязкости).92

1.1. Структура и свойства плоских липидных мембран, адсорбированных на твердом носителе.92

1.2. Адгезивность фосфолипидных пленок для фиброблас-топодобных и эпителиоидных клеток.98

1.3. Латеральное движение на клеточной поверхности в области контакта с липидной пленкой.J04

1.4. Адгезия тромбоцитов к липидным пленкам.106

1.5. Адгезия тромбоцитов к пластам эпителиальных клеток.117

1.6. Резюме раздела 1.118

П. Связывание клетками липосом. (Роль микровязкости). .122

П.1. Связывание "твердых" липосом фибробластоподобны-ми клетками.».122

П.2. Связывание "твердых" липосом эндотелиальными и эпителиальными клетками.J32

П.З. Взаимодействие "жидких" липосом с фибробластопо-добными клетками.150

П.4. Взаимодействие "жидких" липосом с эпителиальными клетками.154

П.5. Роль проницаемости связавшихся с клеткой липосом в проникновении их содержимого в цитоплазму.155

П.6. Использование "жидких" липосом для введения в резистентные клетки митостатических ядов.J59

П.7. Конкуренция "твердых" и "жидких" липосом за связывание с клеточной поверхностью.J66

П.8. Конкуренция между различными липосомами и липо-протеидами крови за связывание с липосомо-связывающими центрами.169

П.9. Метод специфического связывания липосом с клетками.173

П.9А. Получение иммуноглобулин-содержащих липосом.174

П.9Б. Связывание иммунных липосом с клетками.175 П.10. Магнитолипосомы и сортировка клеток в магнитном поле. .183

П.ЮА. Получение магнотичувствительных липосом магнитолипосом/.184

П.ЮБ. Получение иммуномагнитолипосом.184

ПЛОВ. Сортировка клеток с помощью иммуномагнитолипосом.185

П.II. Резюме раздела П.191

Ш. Переход липидных молекул между модельными и клеточными мембранами.194

Ш.1. Введение радиоактивной метки в клеточные липиды.195

Ш.2. Переход липидов фибробластоподобных клеток на жидкие" липосомы.195

Ш.З. Переход липидов эпителиальных клеток на "жидкие" липосомы.201

Ш.4. Отсутствие перехода клеточных фосфолипидов на твердые" липосомы.202

Ш.5. Влияние связывания "твердых" липосом на переход клеточных липидов на "жидкие" липосомы.204

Ш.6. Резюме раздела III.¿04

IV. Изменение структуры липосом в результате взаимодействия с клетками.207

1У.1. Образование крупных липидных агрегатов и их проницаемость.207

1У.2. Частичная характеристика клеточных компонент, ответственных за трансформацию липосом.212

IV.З. Резюме раздела 1У.216

V. Влияние липосом на адгезивные и морфологические характеристики клеток.218

V.1. Влияние липосом на адгезию клеток к субстратам. 218 У.2. Угнетение липосомами межклеточной агрегации.223 У.З. Морфологические изменения клеток под действием липосом.223

У.4. Резюме раздела У.225

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.229

Введение.229

I. Адгезивность липидных мембран для клеток.229

П. Взаимодействие "твердых" и "жидких" липосом с клетками . .240

Ш. Взаимодействие иммуно- и иммуномагнитолипосом с клетками.255

IV. Модификация липосом под действием клеток.259

V. Модификация адгезионных и морфологических свойств клеток под действием липосом.2Ы

У1. Механизмы взаимодействия клеток с липосомами. Возможности и ограничения применения искусственных липидных мембран в фундаментальных и практических исследованиях.¿71

УН. Заключение. Взаимодействие клеточной поверхности с окружающей средой.275

ВЫВОДЫ.282

ЛИТЕРАТУРА.¿86

ВВЕДЕНИЕ И ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Проблема контактных взаимодействий клеток является одной из центральных для современной биологии и медицины. Благодаря таким взаимодействиям возникает упорядоченная организация многоклеточных систем - органов и тканей. С контактными взаимодействиями клеток связано восстановление правильных структур при регенерации. Нарушение контактных взаимодействий при злокачественной трансформации клеток приводит к таким тяжелым^последствиям, как инвазивный рост и метастазирование.

Особое место занимает проблема контактных взаимодействий в кардиологии. Ключевую роль в образовании тромбов играет адгезия тромбоцитов к поврежденным участкам сосудистого эндотелия: ин-тактный эндотелий неадгезивен для тромбоцитов. Целостность эндо-телиального слоя обеспечивается прочными контактами между соседними клетками, хотя причины его неадгезивности остаются во многом неизвестными.

Контактные взаимодействия клеток широко изучаются в последние годы на клеточных культурах. Однако, даже в таких системах, где сравнительно с целым организмом условия упрощены, контактные взаимодействия клеток остаются весьма сложным явлением. Дело в том, что контакт клеточных мембран быстро включает цепь внутриклеточных реакций: перестройку системы микрофиламентов, сборку и разборку микротрубочек, ретракцию и выбрасывание отростков, включение новых синтезов. Изменение цитоскелета и кортикальных белков клеток при межклеточных контактах широко изучаются. Между тем, хотя по определению контактные взаимодействия начинаются с контакта двух клеточных поверхностей, оставалось непонятным даже, какие свойства клеточных мембран определяют различные аспекты этих взаимодействий. Не была изучена роль основы биологических мембран - липидного би-слоя при контактных взаимодействиях клеток.

Липидная фаза определяет все динамические характеристики клеточных мембран. Плазматические мембраны в целом находятся в жидко-кристаллическом состоянии. Однако, в последнее время установлено существование в клеточной мембране более и менее вязких доменов. Значение тех и других для контактных взаимодействий клеток оставались совершенно неизвестными. Поэтому актуальной фундаментальной задачей представляется изучение зависимости различных аспектов межклеточных контактных взаимодействий от динамических характеристик липидного слоя клеточных мембран.

Изучение механизмов межмембранных взаимодействий актуально и с практической точки зрения. Эта проблема тесно связана с разработкой в последние годы методов направленной доставки лекарственных веществ с помощью искусственных мембран в форме липосом к клеткам и тканям организма, в частности, сердечно-сосудистой системы.

Предпринимались попытки моделировать межклеточные контактные взаимодействия на искусственных мембранах. Однако, результаты таких исследований часто трудно экстраполировать на взаимодействие живых клеток. Поэтому для решения поставленной задачи необходимо было разработать более адекватную экспериментальную систему, позволяющую исследовать как свойства мембран влияют на исход контактного взаимодействия клеток. Сказанное выше определило цели и задачи настоящей работы.

Цель и задачи работы. Цель работы состояла в исследовании роли липидного матрикса мембран в контактных взаимодействиях клеток. Мы поставили перед собой следующие задачи: I) разработать экспериментальную систему для изучения контактных взаимодействий клеток с модельными мембранами; 2) изучить зависимость таких взаимодействий от фазового состояния липидов мембран; 3) выяснить, какие структурные перестройки происходят в модельных и клеточных мембранах в процевсе их взаимодействия; 4) проверить имеют ли место закономерности, обнаруженные в модельных системах, при реальных межклеточных взаимодействиях; 5) на основании наученных закономерностей взаимодействий клеток с липидными мембранами разработать практические методы воздействия на клетки, в частности, с помощью ли-посом.

Научная новизна работы. Разработан новый экспериментальный подход к исследованию контактных взаимодействий клеток, состоящий в том, что одна из взаимодействующих клеток заменена на модельную липидную (протеолипидную) мембрану. В такой системе мы, с одной стороны, имеем интактную живую клетку, а с другой - искусственную мембрану, свойства которой задаются экспериментатором. Система использовалась в двух модификациях: "клетка - плоская липидная мембрана" и "клетка - липосома".

Впервые для изучения контактных взаимодействий клеток с плоскими мембранами использована система липидных пленок, адсорбированных на твердом носителе. Показано, что пленки представляют собой анизотропную структуру, состоящую из мультислоев липидов; измерены температуры фазовых переходов в таких мультислоях. Изучена адгезия тромбоцитов, фибробластов и эпителия к адсорбированным на твердом носителе липидным пленкам.

Впервые обнаружена зависимость клеточной адгезии от микровязкости липидного субстрата: показано, что липидные пленки в жидкокристаллическом состоянии неадгезивны для тромбоцитов, а также для фибробластоподобных и эпителиоидных клеток.

Проведено первое систематическое сравнительное изучение взаимодействия с клетками липосом в разных фазовых состояниях. Впервые обнаружено существование на клеточной поверхности центров, связываю' щих липидные мембраны и изучено их распределение на эндотелиалъных и эпителиальных пластах. Доказана концентрация таких центров в области межклеточных контактов.

Впервые обнаружено, что блокирование центров, связывающих ли-пидные мембраны, с помощью липосом угнетает адгезию клеток к сформированным клеточным слоям.

Получены первые данные о конкуренции липопротеидов низкой плотности крови и липосом за связывание с липосомо-связывакнцими центрами на клеточной поверхности.

В процессе контактного взаимодействия происходят структурные изменения липосомальной и клеточной мембраны, которые впервые детально исследованы. Продемонстрирована агрегация и увеличение проницаемости липосом под действием клеточных мембран. Структура клеточной поверхности также подвергается перестройке под действием липосом. Показано, что липосомальная мембрана при контакте с клетками захватывает клеточные фосфолипиды, меняя таким образом свой состав. Этот процесс опосредуется липосомо-связывакхцими центрами на поверхности клетки.

На основе обнаруженных закономерностей взаимодействия липосом различного фазового состояния с клеточной поверхностью разработаны новые методы применения липосом для воздействия на клетки: а) липосош впервые использованы для преодоления резистентности клеток к ингибирующему действию митостатика - заключенный в липо-сомы колхицин проникает в цитоплазму резистентных клеток; б) сконструированы липосомы, избирательно связывающиеся с антигенными мишенями на клеточной поверхности; в) получены иммуномагнитолипосомы, которые, связываясь избирательно с клетками, делают их подвижными в градиенте напряженности магнитного поля; продемонстрирована возможность сортировки клеток с помощью таких липосом.

Впервые высказана и подвергнута экспериментальной проверке гипотеза о непосредственном участии липидной фазы плазматических мембран в контактных взаимодействиях клеток друг с другом. Получено экспериментальное подтверждение этой гипотезы.

Научно-практическая ценность работы. Представленные в диссертации экспериментальные данные и теоретические обобщения создают основу нового направления фундаментальных исследований межклеточных контактных взаимодействий. Результаты работы представляют также практический интерес для применения искусственных липид-ных мембран, в частности, липосом в медицине.

Данные о роли фазового состояния липидов в адгезии клеток позволяют по-новому подойти к фундаментальной проблеме - изучению неадгезивности сосудистого эндотелия.

Результаты экспериментов по переходу фосфолипидных молекул между искусственными и клеточными мембранами демонстрируют возможность модификации фосфолипидного состава клеточных мембран. Эти опыты указывают также на возможную физиологическую роль межмембранного липидного оомена в регуляции липидного состава эндо-телиальных клеток.

Структурная перестройка липосом в процессе контакта с клетками указывает на возможную роль липидов в формировании различных клеточных контактов.

Обнаруженное связывание липопротвидов крови липосомосвязы-вающими центрами клеточной поверхности показывает существование еще одного пути связывания липопротеидов, опосредуемого их липид-7 ной фазой.

Неадгезивность жидко-кристаллических липидных пленок для тромбоцитов, продемонстрированная в наших опытах, может стать основой для создания новых нетромбогенных материалов, имитирующих физические свойства таких пленок.

Угнетение адгезии клеток под действием липосом может быть использовано .для разработки способов предотвращений повышенной агрегации и адгезии тромбоцитов при сердечно-сосудистых заболеваниях.

Обнаруженные принципиальные различия в механизме взаимодействия с клетками липосом с жидко-кристаллической и "твердой" (гелеобразной) мембраной диктует необходимость строгого выбора липидных везикул в зависимости от цели их введения в организм. Для введения химических агентов в цитоплазму целесообразно использовать жидко-кристаллические, а для создания лекарственного депо - "твердые" липосомы. Агрегация липосом и нарушение их проницаемости при контакте с клеточной поверхностью указывают на возможные побочные эффекты "липосомотерапии", которые следует обязательно учитывать при введении липидных везикул в организм.

Описанные в диссертации липосомы, несущие иммуноглобулины, положили основу использования липидных везикул для целенаправленной доставки физиологически активных веществ к тканям и органам-мишеням.

Разработанный в диссертации метод получения иммуномагнито-липосом и разделения с их помощью клеточных популяций представляет собой новый принцип сортировки клеток - процедуры* широко применяемой в лабораторной и клинической практике.

Для расшифровки фундаментальных механизмов контактных взаимодействий клеточных мембран необходима система, где в контролируемых условиях можно изучить роль отдельных мембранных компонентов в этих процессах. В настоящей диссертации предложена такая система. С ее помощью можно исследовать различные аспекты межмембранных контактных взаимодействий.

ШВА I. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛИП ОС Ш ДЛЯ ВОЗДЕЙСТВИЯ

НА КЛЕТКИ / ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ/ Введение

Работа различных ферментов и их систем в плазматической мембране, зависимость их активности от липидного окружения, динамические характеристики самих мембранных липидов и, наконец, взаимодействие мембранных систем друг с другом - основные проблемы мембра-нологии. Современная история этой науки и ее успехи связаны с появлением искусственных модельных мембран, сначала плоских ()У1ие11ег еЪ а1.1962,1965), а затем в форме липосом (¡Зап§11ап1 еЬ а1.1965£фр). Работы по изучению функционирования мембранных компонент в таких экспериментальных системах получили широчайшее развитие - их библиография состоит из нескольких тысяч названий. Исследования взаимодействия мембран друг с другом несмотря на очевидную важность задачи далеко не столь многочисленны.

Возможно, это объясняется тем, что система контактных взаимодействий биологических мембран значительно сложнее, чем функционирование отдельных ферментов и других белков в составе мембраны. (Поэтому данные, полученные при моделировании контактов между модельными мембранами весьма трудно экстраполировать на биологические системы).

Для изучения контактных взаимодействий клеточных мембран необходима упрощенная экспериментальная система, где такие взаимодействия можно было бы изучать в контролируемых условиях. Сегодня становится видно, что такая система появилась уже в начале семидесятых годов, когда липосомы стали использоваться в работах по биологии клетки (см.Грегориадис 1983 ).

Однако, данные об изучении взаимодействия клеток с липосомами, как модели межклеточных взаимодействий, в литературе практически отсутствуют (то же можно сказать и об использовании плоских мембран для таких модельных опытов). Исследователей привлекают в основном возможности липосом, как переносчиков различных веществ в клетки in vivo , in vitro (см.Ладыгина и др. 1978, Торчилин и др. 1982, Антонов и др. 1981, Finkelstein a.Weissmann 1978, Gregoriadis 1978, Ryman et al. 1978,1979,1982,1984-, Ryman a.Tyrrell 1983, Papahadjopouios 1978 ). Поэтому, работы по изучению механизмов взаимодействия клеток с липосомами проводятся преимущественно с целью повышения эффективности липидных везикул, как носителей лекарственных веществ.

Наша работа является по-существу первым исследованием, где взаимодействие клеток с модельными мембранами рассматривается как аналог межклеточных контактных взаимодействий. Для такого подхода к взаимодействию клеток с искусственными мембранами необходимо прежде всего выяснить, что вообще известно про взаимодействие липосом с клетками. Нам представлялось, важным также критически разобрать данные по использованию липосом для модификации клеток. Этим вопросам и посвящен настоящий обзор.

Его основная часть посвящена работам по взаимодействию липосом с клеточной поверхностью. Отдельно рассмотрены результаты с "жидкими" (жидко-кристаллическими) и "твердыми" (гелеообразными) липосомами. Обзору предпослано краткое описание структуры и свойств искусственных липидных мембран, методов их изучения. Также кратко перечислецы какие характеристики клеточных мембран пытаются моделировать с помощью липидных бислойных мембран. Заключительная часть посвящена использованию липосом для направленной модификации клеток в биологических и медицинских исследованиях и перспективах, которые открывают такие исследования.

IИскусственные липидные мембраны

Несмотря на существенные различия в структуре и функциях различных биологических мембран, их основу, как правило, составляет бимолекулярный слой липидов, преимущественно фосфолипидов. В таком слое полярные головки липидов обращены наружу, а гидрофобные жир-нокислотные хвосты направлены друг к другу. Благодаря своим ам-фифильным свойствам выделенные из биологических мембран липиды самоорганизуются в водной фазе в анизотропные мембраноподобные структуры. В условиях избытка водной фазы для таких липидов характерна мультиламеллярная структура (см. Levine and Wilkins 1971, Бергельсон 1975, Ивков и Берестовский1981). Как и в биологических мембранах, жирнокислотные хвосты амфифильных липидных молекул направлены друг к другу. Полярные головки направлены в мультисло-ях также друг к другу, и между ними имеются молекулы воды. Такая мембраноподобная самоорганизация липидных молекул в воде позволила разработать методы получения искусственных липидных мембран, являющихся упрощенной моделью биологических мембран.

Искусственные мембраны дали возможность в строго контролируемых условиях изучать различные физико-химические процессы, происходящие в мембранах клеток.

Заключение диссертации по теме «Кардиология», Марголис, Леонид Борисович

ВЫВОДЫ

Для изучения межклеточных контактных взаимодействий разработана система, в которой одна из взаимодействующих клеток заменена на модельную мембрану. В такой системе изучены механизмы взаимодействия клеток с "жидкими" (дидко-кристалличесними) и "твердыми" (гелеобразными) плоскими липидными мембранами, липосо-мами и протеолипосомами. Полученные закономерности обнаружены и в системе "клетка-клетка".

1. Разработана система дня изучения взаимодействия с плоскими липидными мембранами, адсорбированными в виде пленок на твердом носителе. Эти мембраны представляют собой многослойные структуры с характерной температурой фазового перехода. В такой системе тромбоциты, фибробласты и эпителиальные клетки прикрепляются к липидным мембранам в "твердом" состоянии. Напротив, жидкокристаллические липидные пленки неадгезивны для тромбоцитов и других клеток. Клетки образуют с краем "твердой" липидной пленки стабильный контакт; движение компонентов клеточной поверхности в области такого контакта ограничено. С краем "жидкой" липидной мембраны стабильного контакта не возникает, продолжается латераль-юе движение мембранных компонентов клетки по поверхности клеточ-шх ламелл.

2. Липосомы, мембрана которых находится в "твердом" состоянии, :рочно связываются с поверхностью клеток, сохраняя свое содержимое, вязывание насыщаемо и чувствительно к трипсину. Связавшиеся ли-осомы подвергаются "чистке": они перемещаются по мембране клеток, свобождая поверхность распластанных ламелл. "Жидкие" липосомы, вязываясь с клеточной поверхностью, частично разрушаются. Их содзржимое попадает в клетку, а липидная фаза остается на клеточной поверхности и также подвергается "чистке". С помощью "жидких" липосом впервые удалось преодолеть резистентность клеток к митостатическому яду: колхицин из липосом проникает в цитоплазму и тормозит пролиферацию. "Жидкие" и "твердые" липосомы конкурируют друг с другом за связывание с поверхностью клеток. Таким образом, на поверхности клеток имеются центры связывания липосом ("липосомо-связывающие центры"). Липопротеиды низкой плотности крови также конкурируют с липосомами за связывание с этими центрами.

3. Эндотелиальные и эпителиальные клетки связывают липосомы только краевыми участками. При формировании клеточного пласта адгезивными для липосом остаются только свободные от межклеточных контактов края клеток. После разрушения межклеточных контактов липосомы связываются с обнажившимися краями клеток. Тав:им образом, липосомо-связывающие центры эндотелиальных и эпителиальных пластов находятся в области межклеточных контактов.

4. При контакте "жидких" липосом с поверхностью клеток происходит переход липидных молекул клеточной мембраны на липосомы. "Твердые" липосомы не вызывают такого перехода. Блокирование ли-посомо-связывающих центров на клеточной поверхности "твердыми" шпосомами угнетает переход клеточных липидов на "жидкие" липосомы. Следовательно, липосомо-связывающие центры опосредуют обмен липи-jami между жидко-кристаллической липосомальной и клеточной мембра-[амк;.

5. Клетки, у которых блокированы липосомо-связывающие центры, енее эффективно агрегируют в суспензии. Их адгезия к преформированным клеточным слоям и к пленкам "твердых" липидов также подавлена. Агрегация под действием лектина и адгезия к поверхности стекла и пластмассы происходит у обработанных липосомами клеток так же, как у контрольных. Таким образом, центры, связывающие липосомы на поверхности клеток, участвуют также в межклеточных контактах.

6. Липосомы, содержащие иммуноглобулины в своей мембране, (иммунолипосомы) избирательно связываются с клетками, несущими на своей поверхности соответствующие антигены. Таким образом, получены липосомы, направленно взаимодействующие с клетками-мишенями.

7. Иммунолипосомы, содержащие ферритовые частицы (иммуно-магнитолипосомы), избирательно связываясь с клетками-мишенями, придают им магниточувствительность. Такие клетки двигаются вдоль градиента напряженности магнитного поля. С помощью иммуномагни-толипосом удается сортировать клетки в смешанных клеточных популяциях.

8. Контакт липосом с клетками приводит к перестройке взаимодействующих мембран. Фракция липосом превращается в незамкнутые липидные агрегаты, а на поверхности клеток появляются микроворсинки.

9. На основании полученных: экспериментальных результатов 1редложены гипотезы об опосредуемых липосомо-связывающими центрами механизмах взаимодействия клеточной поверхности с окружающей )редой: а) центры клеточной поверхности способны связываться с фосфолипидами липопротеидов крови, участвуя, таким образом, в рецепции этих комплексов; б) поверхность одной клетки взаимодействует с липидными доменами в мембране другой клетки. Взаимодействие с гелеобразными доменами приводит к образованию стабильных клеточных контактов. Взаимодействие с жидко-кристаллическими доменами непрочно и закан' чивается дезагрегацией клеток, сопровождающейся обменом липидами мембран; в) неадгезивность эндотелиальных и эпителиальных пластов для тромбоцитов и других клеток определяется высокой латеральной подвижностью компонентов мембран. Имитация жидко-кристаллических свойств липидных мембран - возможный способ получения нетромбо-генных поверхностей.

УИ, ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КЛЕТОЧНОЙ ПОВЕРХНОСТИ С ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДОЙ

В предыдущих разделах мы обсудили различные аспекты взаимодействия клеток с искусственными липидными и протеолипидными мембранами. Рассмотрим,как можно экстраполировать обнаруженные закономерности на взаимодействия биологических мембран.

Прежде всего рассмотрим вопрос адгезии клеток. Клеточной адгезией определяются образование упорядоченных многоклеточных систем - органов и тканей в процессе эмбриогенеза и при регенерации, сохранение структур в процессе роста. С нарушением адгезии связывают такие характерные черты опухолевого роста, как инвазия и ме-тастазирование (см.Васильев и Гельфанд 1981, Viodavsky and Sachs 1977). С адгезии тромбоцитов к деэндотелизированным участкам кровеносных сосудов начинается процесс образования тромбов (см. Чазов 1983). Проблема создания неадгезивных для тромбоцитов искусственных материалов является одной из основных при протезировании элементов сердечно-сосудистой системы.

Адгезия возникает лишь с развитием в мембранах специализированных механизмов связывания клеток друг с другом. Наши опыты показывают, что простейшим из таких механизмов может быть увеличение микровязкости. Мы показали, что липидный слой в "твердом" (гелеобразном) состоянии адгезивен для клеток. Микровязкость клеточных мембран может меняться при данной температуре либо путем введения в нее новых липидов (в частности, холестерина), либо от-мешиванием уже находящихся в ней молекул (фазовая сегрегация). По-видимому, клетка использует оба типа регуляции. Это приводит к тому, что в клеточной мембране образуются домены различной микровязкости (Klausner et al.1980,Laggner 1981,Gordon et а1.1983,Рге1ге, Snyderi982). Поэтому клеточная мембрана гетерогенна: в целом жидко-кристаллическая, но локально может быть "твердой", в силу латеральной сегрегации ее компонентов. Наличие интегральных белков также приводит к появлению более вязких липидных доменов, состоящих из прочно связанных с белками липидных молекул (см.Ивков и Берестовский 1981,1983).

В последнее время выделен и охарактеризован ряд белков, участвующих в адгезии клеток. Однако, до настоящего времени совершенно игнорировалась возможная роль липидов мембран в адгезии клеток друг к другу. Казалось, что липидный бислой клеточных мембран находится под слоем "гликокаликса": слоя наружных белковых и углеводных молекул. Однако, данные о доступности клеточных липидов для фосфолипаз, липид-обменивающих белков и др. привели к выводу о наличии на клеточной поверхности открытых липидных участков. Наши опыты позволяют предположить, что эти участки играют важную роль в установлении контактов между клетками.

Согласно нашим результатам все "твердые" домены адгезивны для других клеток. Если отросток одной клетки войдет в контакт с липидным доменом на поверхности другой клетки, то судьба этого контакта зависит от микровязкости домена. С твердым доменом возникнет устойчивая связь. Если липидный домен находился в жидкокристаллическом состоянии, то прочный контакт не будет установлен, а клетки разойдутся. Согласно нашим модельным опытам, при этом может произойти обмен липидными молекулами между мембранами столкнувшихся клеток.

Таким образом, регулируя размер и количество твердых липидных доменов в плазматической мембране, можно регулировать в принципе ее адгезивность для других клеток. Экстраполируя модельные опыты, можно предположить, что на поверхности клеток имеются структуры белковой природы, опосредующие контакт поверхности одной клетки с липидными доменами на поверхности другой клетки. Такая гипотеза объясняет наши опыты по угнетению межклеточной адгезии липосомами.

Какое место в общей системе механизмов адгезии играет описанный выше механизм? Во всяком случае очевидно, такой тип адгезии не единственный. Это, во-первых, доказывают описанные в настоящей работе опыты по взаимодействию иммунолипосом с клетками. Введение в липидный бислой специфических белковых молекул позволяет липо-сомам связываться с клетками помимо липосомо-связываюдих центров. На поверхности клеток может находиться много типов белковых и гликопротеидных молекул, отвечающих за специфичность взаимодействия клеток. Адгезия клеток через липидную фазу мембран может служить для установления первоначального контакта между клетками. Затем в эту область могут мигрировать белки мембран (Chow and. Poo 1982), устанавливающие более прочные и специфические связи. Наоборот, установление специфического контакта клеток под действием лектина сопровождается концентрацией комплексов лектин-рецептор в области контакта. Образование кластеров мембранных белков должно сопровождаться "отвердением" окружающих их липидов и, как следствие этого^ увеличенишадгезивности. При этом в действие могут вступать механизмы связывания клеток через "твердые" домены мембранных липидов.

Маловероятно, что на изменении локальной микровязкости клеточных мембран может быть построен весь механизм специфической адгезии клеток. Однако, общая неадгезивность клеточной поверхности таким путем может быть достигнута. Примером полной неадгезивности для других клеток может служить поверхность клеточных пластов. В частности - пласт эндотелия.

Неадгезивность для тромбоцитов трех видов субстратов: эндо-телиальных пластов, эпителиальных пластов и жидко-кристаллических липидных пленок может указывать на общность причин их неадгезивности. Можно предположить, что компоненты мембран эпителиальных и эндотелиальных пластов обладают повышенной латеральной подвижностью. В этом случае, по аналогии с фосфолипидными пленками, они должны быть неадгезивны для клеток. Для эпителиальных клеток было показано, что за исключением краевых ламелл комплексы конканава-лин А - рецепторы не заякореваются микрофиламентами и находятся в свободном виде (Vasiliev et ai.1975,1976). Заметим, что в рассуждениях о возможных причинах неадгезивности пластов эпителиальных и эндотелиальных клеток нет ничего специфического для тромбоцитов. И действительно, как и жидко-кристаллические липидные пленки, пласты эпителия неадгезивны для фибробластов и других гетеро- и гомо-типических клеток. Заметим, что холестерин делает жидкокристаллические мембраны более вязкими (см.Ивков, Берестовский 1981) и, таким образом, может способствовать адгезии тромбоцитов. Наши опыты показывают, что целесообразно начать изучение причин неадгезивности эндотелиальных клеток с новых позиций и определить подвижность их липидных и белковых мембранных компонентов.

Обратимся еще к одному свойству липосомо-связываицих центров клеточной поверхности, выявленному в модельных опытах: связыванию липопротеидов. Взаимодействие с этими комплексами широко исследуется во многих лабораториях из-за важности этого процесса в развитии атеросклеротических заболеваний (см.Чазов 1983; Климов, На-горнов 1983). В последние годы показано, что на поверхности клеток имеются белковые рецепторы, высокоспецифично связывающие ЛНП (Brown a.Goldstein 1979,Anderson et al.1982). Эти рецепторы связываются с апопротеиновым фрагментом ЛНП . Однако, помимо такого ?вязывания значительная доля ЛНП связывается с клетками "неспеци-эично". Механизм "неспецифического" связывания остается неизвестен. 1ашк опыты указывают на существование нового способа связывания >тих компонентов крови с клетками. Если рассмотреть липопротеино-:ую частицу низкой плотности, то очевидно, что многие участки поверхности глобулы липопротеида идентичны поверхности липосомы. Значительная часть фосфолипидов, образующих эту поверхность, представлена фосфатидилхолином. Поэтому липосомо-связывакщие центры вряд ли могут отличить фосфатидилхолиновую липосому от глобулы липопротеида низкой плотности. По данном измерения микровязкости фосфолипидов этих липопротеидов, такие глобулы ближе во многом к "твердым" липосомам (Jonas et al.1977). Это делает их связывание с липосомо-связываицими центрами прочным. Следует изучить функциональную роль описанного типа связывания ли-попротеинов с клеточной поверхностью. Хотя сродство липидной поверхности с липосомо-связывающими центрами меньше, чем у специфических рецепторов, однако связывание через липосомо-связывающие центры может играть важную роль в случае генетических дефектов специфической рецепции липопротеидов.

Не только система липопротеидов может регулировать содержание липидов в клеточной поверхности. Существует липидный обмен с другими мембранами. Это показано в модельных опытах с липосомами и верно, по-видимому, и для клеток. Естественно предположить, что межклеточный обмен липидами идет по тем же механизмам, что и обмен фосфолипидами между липосомами и клетками, а именно через липосомо-связывающие центры. Возможно, что такой обмен происходит и между такими типами клеток, как тромбоциты и эндотелий кровеносных сосудов. Резкое различие между составами контактирующих мембран должно привести к неравновесному переходу липидов от одной клетки к другой. Следовательно, клетки подобно липопротеидам крови могут модифицировать липидный состав других клеток. В этой связи интересно исследовать липидный обмен между мембранами клеток крови и эн-дотелиальной стенкой сосудов в норме и при атеросклерозе.

Таковы гипотезы, возникающие из рассмотрения результатов моделирования процессов адгезии и липидного обмена с помощью искусственных мембран. Однако, любой аспект взаимодействия искусственной мембраны с клеточной можно рассматривать как модель межклеточного взаимодействия, возможно, еще неизвестного типа. Рассмотрим, например, повышение проницаемости липосом при контакте с клеточной поверхностью. Нам неизвестны данные об увеличении проницаемости клеточных мембран в области контакта. Возникающие в некоторых тканях высокопроницаемые контакты между клетками связывают обычно с образованием специфических структур. Такие контакты воз-•никают между клетками и создают условия для обмена различными веществами, в том числе и ионами. Клетки, соединенные высокопроницаемыми контактактами, электрически и метаболически связаны друг с другом. Высокопроницаемым контактам приписывается важная роль в функционировании сердечной мышци (см. Чайлахян, 1981).

Благодаря таким контактам, в частности, синхронизуется ритм сокращения отдельных клеток и создается устойчивость к воздействию локальных помех (см. Чайлахян, 1981). Высокопроницаемые межклеточные контакты появляются в результате образования высокоспе-Едализированных мембранных структур ("щелевых контактов"), по-видимому, белковой природы (Ben.net а. сооДепо^ь 1978 « Чайлахян, 1981). В свете полученных нами результатов следовало бы обратить внимание на возможную роль липидов в формировании структур высокопроницаемых контактов: "трансформация" липосом в процессе контакта с клеткой может быть моделью образования "щелевых" контактов.

Таким образом, изученные нами механизмы взаимодействия клеток с искусственными липидными мембранами можно экстраполировать на взаимодействие клеток с различными мембранами в организме, Некоторые экстраполяции уже имеют экспериментальные основания, например, адгезия клеток друг к другу. Другие требуют отдельной экспериментальной проверки.

В целом экспериментальная система "клетка-искусственная мембрана" позволяет изучать реакции живых клеток на контакт с мембранами, состав и свойства которых строго контролируемы. Выяснение фундаментальных механизмов взаимодействия клеточных и искусственных мембран позволяет разрабатывать методы направленной модификации клеток с помощью липосом, разрабатывать средства направленного транспорта лекарственных веществ в липосомах, получать новые типы неадгезивных для клеток поверхностей. С другой стороны, обнаруженные закономерности взаимодействия клеток с модельными мембранами могут быть экстраполированы на взаимодействие клеточных поверхностей друг с другом.

Настоящая работа лишь открывает это новое направление мембра-нологических исследований. Мы изучили взаимодействие клеток с наиболее простыми липидными и протеолипидными модельными мембранами, находящимися в разных фазовых состояниях. Однако, уже в такой системе удалось обнаружить новые механизмы взаимодействия клеток, в частности, адгезии.

Можно надеяться, что развитие этих работ приведет к созданию истинных искусственных мембран, т.е. таких, на которые клетки будут реагировать, как на плазматические мембраны живых клеток. В такой системе, поочередно извлекая или добавляя индивидуальные компоненты плазматических мембран, можно будет полностью расшифровать механизмы контактных взаимодействий мембран клеток.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Марголис, Леонид Борисович, 1984 год

1. Антонов В.Ф., Князев Ю.А., Мошковский Ю.Ш., Гшрузян Л.А., Тенцова А.И. Перспективы использования липосом в медицине. В кн: Липосомы и их взаимодействие с клетками и тканями. М: Наука, 1981, 3-9.

2. Баджинян С.А., Дунин-Барковский В.Л., Ковалев С.А., Чайлахян Л.IL Электрическое сопротивление области слипания бимолекулярных фоофолипидных мембран. Биофизика, 1971а, т.16, № 6, с.1019-1024.

3. Баджинян С.А., Чайлахян Л.М. Измерение электрической емкости области контакта двух бимолекулярных фосфолипидных мембран. Биофизика, I97I6, т.16, № 6, c.II49-II5I.

4. Беленький Б.Г., Ганкина Э.С., Нестеров В.В. Экспрессный ультрачувствительный метод идентификации n -концевых аминокислот в белках и пептидах с помощью тонкослойной хроматографии. Докл. АН СССР, 1967, т.172, № I, с. 91-93.

5. Бергельсон Л.Д. Биологические мембраны. М.: Наука, 1975. 183 с.

6. Бергельсон Л.Д. Комплексы парамагнитных металлов с фосфолипида-ии и их использование для изучения молекулярной организации мембран методом IBXO, 1976, с.21, № 6, с.638-650.

7. Бергельсон Л.Д., Дятловицкая Э.В., Молотковский Ю.Г., Батраков 1.Г., Барсуков Л.И., Проказова Н.В. Препаративная биохимия липи-10в. М: Наука, 1981, с.256.

8. Бердичевский В.Р., Маркосян P.A., Позин Е.Я., Смирнов В.Н., Дворов A.B., Торчилин В.П., Чазов Е.И. Влияние липосом на функцио-альное состояние тромбоцитов. Бюлл.эксп.биол.мед., 1979, т.8, .141-143.

9. Васильев Ю.М., Гельфанд И.М., Домнина Л.В., Захарова О.С. Влияние межклеточных контактов в эпителиальных пластах на способность поверхности клеток к агрегации и фагоцитозу частиц. Цитология, 1975, т.17, с.1400-1405.

10. Васильев Ю.М., Гельфанд И.М., Домнина Л.В., Плетюшкина О.Ю. Влияние агентов, разрушающих микротрубочки, на распределение рецепторов на поверхности культивируемых клеток. Цитология, 1978, т.20, с.796-801.

11. Васильев Ю.М., Гельфанд И.М. Взаимодействие нормальных и неопластических клеток со средой. М: Наука 1981, 220 с.

12. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. М: Наука, 1980. - 320 с.

13. Грегориадис Г. Липосомы как носители лекарств. Развитие и будущие концепции. В кн: Липосомы в биологических системах. М., Медицина, 1983, с.36-93.

14. Гришин А.Ф., Ненашев В.А., Берестовский Г.Н. Взаимодействие липосом с бимолекулярными мембранами. Биофизика, 1979, т.24, № 3, с.467-471.

15. Домнина Л.В., Захарова О.С. Адгезивные свойства верхней поверхности фибробластов и эпителия в культуре. Цитология, 1976, т.18, с.84-89.

16. Драчев Л.А., Каулен А.Д., Кондрашин A.A., Либерман Е.А., Немечек И.Б., Семенов А.Ю., Скулачев В.П., Ясайтис A.A. Генерация электрического тока цитохромоксидазой, Н+-АТФазой и бактериоро-допсином. Докл. АН СССР, 1974, т.218, с.481-484.

17. Егорова Е.М., Черномордик Л.В., Абидор И.Г., Чизмаджев Ю.А. Исследование взаимодействия липосом с плоскими бислоями потенцио-динамическим методом. Докл. АН СССР, 1981, т.256, № 2, с.476-479.

18. Иванова О.Ю., Марголис Л.Б. Использование искусственной липидной мембраны для получения культур клеток заданной формы. Бюлл.эв:сп.биол.мед., 1973, т.5, с.86-89.

19. Ивков В.Г., Берестовский Г.Н. Липидный бислой биологическихмембран. М: Наука, 1981. с.224. »

20. Ивков"В.Г., Берестовский Г.Н. Динамическая структура липидйо-го бислоя. М: Наука, 1981, с.296.

21. Кейтс М. Техника липидологии. М: Мир, 1975, с.322.

22. Климов А.Н., Нагорнев В.А. Механизмы проникновения липопротеи-дов в артериальную стенку. В кн: Стенка сосудов в атеро- и тром-богенезе/ под ред.Е.И.Чазова и В.Н.Смирнова, М: Медицина, 1983, с.Пб-123.

23. Кругляков П.М., Ровин Ю.Г. Физико-химия черных углеводородных пленок. М: Наука, 1978.с. 183.

24. Ладыгина Г.А., Тенцова А.И., Зизина О.С. Использование липосом для направленной доставки лекарственных веществ к органам и тканям. Фармиция, 1978, т.27, с.52-57.

25. Ларионова Н.И., Торчилин В.П. Современное состояние и перспективы использования в медицине иммобилизованных физиологически активных веществ белковой природы. Хим.фармацевт, ж., 1980, т.14, с. 21-36.

26. Лев A.A., Готлиб В.А., Бужинский Э.П. Катионная специфичность модельных бимолекулярных фосфолипидных мембран. Журн.эволюц. биохимии к физиологии, 1966, т.2, № 2, с.I09-117.

27. Леменовская А.Ф., Коэн Я.М., Перевощикова К.А., Збарский И.Б., ятловицкая Э.В., Бергельсон Л.Д. Фосфолипидный состав ядерных мемб->ан и ядер печени и гепатомы-27 крыс. Биохимия, 1976, т.41, .1000-1003.

28. Либерман Е.А., Ненашев В.А. Изучение взаимодействия юкусствен-ых фосфолипидных мембран. Биофизика, 1968, т.13, fe I, с.193-196.

29. Либерман Е.А., Ненашев В.А. Моделирование взаимодействия кле-эчных мембран на искусственных фосфолипидных мембранах. Биофизика, 1970, т.15, № 6, с.1014-1020.

30. Либерман Е.А., Ненашев В.А. Моделирование изшнений проницаемости клеточного контакта на бислойных фосфолипидных мембранах- Биофизика, 1972, т.17, № 6, с.1017-1023.

31. Лызина Л.А. О методике получения твердых слоев красителей осаждением из растворов и внесении поправок на отражение при измерении поглощения этих слоев. Оптика и спектроскопия, 1958, т.4, с.501-505.

32. Маркин В.С., Чизмаджев Ю.А. Индуцированный ионный транспорт.- М: Наука, 1974, с.251.

33. Меликян Г.Б., Абидор И.Г., Черномордик Л.В., Чайлахян Л.М. Электростимулируемое слияние и деление бислойных липидных мембран. Докл. АН СССР, 1982, т.263, № 4, с.1009-1012.

34. Меликян Г.Б. Взаимодействие и слияние бислойных липидных мембран. Автореф. дисс. канд.биол.наук ИПГШ АН СССР. М: 1984, с.21.

35. Молотковский Юл.Г., Бергельсон Л.Д. Периленоилмеченые липид--специфические флуоресцентные зонды. Биоорган. Химия, 1982, т.8, с.1256-1262.

36. Молотковский Юл.Г., Маневич Е.М,Бабак В.И., Бергельсон Л.Д. Интрил и периленоилмеченые липиды как мембранные зонды. - Биолог, лембр. 1984, т.1, с.33-43.

37. Посте Дж. Взаимодействие липидных везикул (липосом) с клетками 5 культуре и их использование как переносчиков лекарств и макро-юлекул. В кн: Липосомы в биологических системах. М: Медицина, 983, с.107-155.

38. Райхман Л.Т., Мошковский Ю.Ш., Пирузян Л.А. Концепция фармако-омы новый подход к созданию лекарственных средств. - Хим.-фар-ацевт.ж., 1978, т.12, с.18-22.

39. Ровин Ю.Г., Балавеев И.А., Руднев B.C. Формирование и свойства "сухих" плоских бислойных липидных мембран. Биофизика, 1980, т.25, te I, C.I83.

40. Розенберг O.A. Молекулярные основы болезней накопления липи-дов и современные подходы к их лечению. В кн; Генетика человека, М: ВИНИТИ, 1979, т.4, с.51-102.

41. Розенберг O.A., Бекренева В.Ю., Лошакова Л.В., Резвая С.П., Давиденкова Е.Ф., Хансон К.П. Повышенный захват опухолевыми клетками липосом приготовленных из аутологичных фосфолипидов. Вопр. онкологии, 1983, т.39, с.56-60.

42. Розенблат В.А., Серпинская A.C., Ставровская A.A. О механизме резистентности к колхицину сублинии мышиных клеток L . Докл. АН СССР, 1973, т.211, № 6, с.1460-1462.

43. Россельс А.Н., Ковалева Н.С., Вахрушева Л.Л., Долгинова Е.А., Зизина О.С. Влияние внутрижелудочного липосомального введения инсулина на крыс с аллоксановым сахарным диабетом. В кн: Липосомы и их взаимодействие с клетками и тканями. М, 1981, с.103-108.

44. Соколов Ю.В. Изучение взаимодействия липосом с плоскими би-слойными фосфолипидными мембранами. Дисс. на соиск.учен.степ, канд.биол.наук. - Киев, 1982.

45. Саляев Р.К., Кузеванов В.Я., Корзун A.M., Ненашев В.А., Бере'стовский Г.Н. Взаимодействие изолированных вакуолярных мембран растений с искусственной фосфолипидной мембраной. Докл. АН СССР, 1983, т. 270, te I, с.247-250.

46. Соколов Ю.В., Лишко В.К. Изучение слипания плоских бислойных £осфолипидных мембран с липосомами. Биохимия, 1979, т.44, с.317-323.

47. Ставровская A.A. Резистентная к метафазным ингибиторам сублиния клеток L . Бюлл. зксп.биол.мед., 1973, т.76, с.112-115.

48. Торчилин В.П., Смирнов В.Н., Чазов E.I/1. Проблемы и перспективы .использования липосом для направленного транспорта лекарств.- Вопр.мед.химии, 1982, т.1, с.3-14.

49. Торчилин В.П., Бан Ан Ко, Бердичевский В.Р., Локе Э.Р., Смирнов В.Н., Хабер Э., Чазов Е.И. Сохранение специфической связывающей способности антителами ковалентно связанными с поверхностью липосом. -Докл. АН СССР, 1979, т.246, с.746-749.

50. Adams D.H., Joyce G., Richardson V.J., Ryman B.E., Wisniewsky H.M. Liposome toxicity in the mouse central nervous system. J.Neurol.Sci., 1977, v.31, N2, p.173-179.

51. Adrian G., Huang L. Entrap ment of proteins in phosphatidylcholine vesicles. Biochemistry, 1979, v.18, N25, p.5610-5614.

52. Alderson J.C.E., Green C. Enrichment of lymphocytes with cholesterol and its effect on lymphocyte activation. -FEBS Lett., 1975, v.52, p.208-215.

53. Alonso A., Saez R., Villena A., Goni F.M. Increase in size of sonicated phospholipid vesicles in the presence of detergents. J.Membr.Biol., 1982, v.67, N1, p.55-62.

54. Aloj S.M., Kohn L.D., Lee G., Meldolesi M.F. Binding thyrotropin to liposomes containing gangliosides. Biochem. Biophys.Res.Commun., 1977, v.74, p.1053-1059.

55. Alving C.R., Steck E.A., Chapman W.L., Waits V.B., Hendricks L.D., Swartz G.M., Hanson W.L. Therapy of leishmaniasis t superior efficacies of liposome-encapsulated drugs. -Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1978, v.75, p.2959-2953

56. Alving C.R., Steck E.A. The use of liposome-encapsulated drugs in leishmaniasis. Trends.Biochem.Sci., 1979, v.4, P.175-177

57. Alving C.R., Schneider I., Swartz G.M.,Jr., Steck E.A. Sporozoite-induced malaria: therapeutic effects of glycoli-pids in liposomes. Science, 1979, v.205, p.1142-1144.

58. Anderson R.G., Brown M.S., Beisiegel U., Goldstein J.L. Surface distribution and recycling of the low density lipoprotein receptor as visualized with antireceptor antibodies. -J.Cell Biol., 1982, v.93, p.523-531.

59. Axelrod D., Koppel D.E., Schlessinger J., Elson E., Webb W.W. Mobility measurements by analysis of fluorescence photobleaching recovery kinetics. Biophys.J., 1976, v.16, p.1055-1069.

60. Bangham A.D., Horne R.W. Negative staining of phospholipids and their structural modification by surface-active agents as observed in the electron microscope. J.Molec.Biol. 1964-, v.8, p.660-668.

61. Bangham A.D., Standish M.M., Watkins J.C. Diffusion of univalent ions across the lamellae of swollen phospholipids. -J.Mol.Biol., 1965a, v.13, p.238-252.

62. Bangham A.D., Standish M.M., Miller N. Cation permeability of phospholipid model membranes: effect of narcotics. -Nature, 1965b, v.208, p.1295-1297

63. Bangham A.D., Standish M.M., Weissmann G. Action of steroids and streptolysin S on the permeability of phospholipid structures to cations. J.Mol.Biol., 1965c, v.13, p.253-259.

64. Bangham A.D., Standish M.M., Watkins J.C., Weissmann G. The diffusion of ions from a phospholipid model membrane system. Protoplasma, 1967, v.63, p.183-187.

65. Bangham A.D. Lipid bilayers and biomembranes. Annu.Rev. Biochem., 1972, v.41, p.753-776.

66. Bangham A.D., Fill M.W., Mason W.T. A biochemical and biophysical view of anesthesia. in: Progress in anesthesio-logy/Fink B.R.ed. - N.Y.s Raven Press, 1960, v.2, p.69-77.

67. Barratt D.G., Sharon F.J., Thede A.E., Gant C.W.M. Isolation and incorporation into lipid vesicles of a concana-valin A receptor from human erythrocytes. Biochim.Biophys. ¿eta, 1977» v.465, p.191-197.

68. Barratt G.M., Ryman B.E., Begent R.H.J., Keep P.A., Searle F., Boden J.A., Bagshawe K.D. Improved radioimmuno-detection of tumours using liposomally entrapped antibody. -Biochim.Biophys.Acta, 1985» v.762, p.154-164.

69. Basu M., Basu S., Shanabruch W., Moskal J., Evans Ch. Lectin and cholera toxin binding to guinea pig tumor (104CI) cell surface before and after glycosphingolipid incorporation. Biochem.Biophys.Res.Comm., 1976, v.71, p.385-392.

70. Batzri S., Korn E.D. Single bilayer liposomes prepared without sonication. Biochem.Biophys.Acta, 1973» v.298, p.1015-1019.

71. Batzri S., Korn E.D. Interaction of phospholipid vesicles with cells. Endocytosis and fusion as alternate mechanisms for the uptake of lipid-soluble and water-soluble molecules. J.Cell 3iol., 1975, v.66, p.621-6J4.

72. Baumgartner H.R. Platelet interaction with collagen fibrils in flowing blood. Thrombosis and Haemostasis, 1977, v.37, p.1-16.

73. Bayer E.A., Rivnay B., Skutelsky E. On the mode of lipo-some-cell interactions biotin-conjugated lipids as ultrastructural probes. Biochim.Biophys.Acta, 1979, v.550, p.464—473.

74. Belchetz P.E., Braidman I.P., Crawley J.C.TC., Gregoriadis G. Treatment of Gaucher's disease with liposome -entrapped glucocerebroside: B-glucosidase. Lancet,1971, v.i, p.116-117.

75. Bennett M.V.L., Goodenough D. Gap junctions, electronic coupling and intercellular communication. Neurosci. Res.Progr.Bull., 1978, v.16, p.371-486.

76. Benz R., Frohlich 0., Lauger P., Montal M. Electrical capacity of black lipid films and of lipid bilayers made from monolayers. Biochim.Biophys.Acta, 1975» v.394, N3,1. P.323-334.

77. Bernier-Valentin F., Aunis D.r Rousset B. Evidence for tubulin-binding sites on cellular membranes: plasma membranes, mitochondrial membranes, secretory granule membranes. J.Cell Biol., 1983, v.97, p.209-216.

78. Berliner L.J. ed., Spin Labeling: theory and application N.Y., London: Academic Press., 1976, p.1-220.

79. Bigon E., Boarato E., Bruni A., Leon A., Toffano G. Pharmacological effects of phosphatidylserine liposomes. -Br.J.Pharm., 1979» v.66, N2, p.167-174.

80. Black C.D.V., Gregoriadis G. Interaction of liposomes with blood plasma proteins. r Biochem.Soc.Trans., 1976, v.4, N2, p.253-256.

81. Black C.D.V., Watson G.J., Ward R.W. The use of pentostam liposomes in the chemotherapy of experimental leishmaniasis. Trans.R.Soc.Teop.Med.Hyg., 1977, v.71, p.550-552.

82. Blumenthal R., Weinstein J.N., Sharrow S.D., Henkart P. Liposome-lymphocyte interactions Saturable sites for transfer and intracellular release of liposome contents. Proc.Natl. Acad.Sci.USA, 1977, v.74, p.5603-5607.

83. Blumenthal R., Ralston E., Dragsten P., Weinstein J.N. Transfer of liposome contents to lymphocytes: studies of mechanism. Biophys.J., 1979, v.25, N2, p.291a.

84. Boni L.T., Stewart T.P., Alderfer J.L., Hui S.W. Lipid-polyethylene glycol interactions: I.Induction of fusion between liposomes. J.Membr.Biol., 1981a, v.62, N1, p.65-70.

85. Boni L.T., Stewart T.P., Alderfer J.L., Hui S.W. Lipid-polyethylene glycol interactions: II.Formation of defects in bilayers. J.Membr.Biol., 1981b, v.62, N1, p.71-77.

86. Bonventre P.F., Gregoriadis G. Killing of intraphagocy-tic Staphylococcus aureus by dihydrostreptomycin entrapped within liposomes. Antimicrob.Agents Chemother., 1978, v.13, N6, p.1049-1051.

87. Bottomley J.M., Kramers M.T.C., Chapman D. Cholesterol depletion from biomembranes of murine lymphocytes and human tonsil lymphocytes. FEBS Lett., 1981, v.119, p.261-264.

88. Bouma S.R., Drislane F.W., Huestis W.E. Selective extraction of membrane-bound proteins by phospholipid vesicles. J.Biol.Chem., 1977, v.252, p.6759-6763.

89. Bourguignon L.J.M., Rader R.L. Surface binding of liposomal vesicles. J.Cell Biol., 1978, v.79, N2, Pt.2, p.239.

90. Bretscher M.S. Directed lipid flow in cell membranes. -Nature, 1976, v.206, p.21-23.

91. Bretscher M.S. Distribution of receptors for transferrin and low density lipoprotein on the surface of giant He La cells. Proc.Rati.Acad.Sci.USA, 1983, v.80, N2, p.454-458.

92. Brown M.S., Goldstein J.L. Receptor-mediated endocytosis: insights from the lipoprotein receptor system. Proc.Natl. Acad.Sci.USA, 1979, v.76, p.3330-3337.

93. Bruckdorfer K.R., Demel R.A., De Gier J., Deenem van L.L.M. The effect of partial replacement of membrane cholesterol by other steroids on the osmotic fragility and glycerol permeability of erythrocytes. Biochim.Biophys.Acta, 1969, v.183, p.334-342.

94. Brulet P., Mc Connell H.M. Protein-lipid interactions: glycophorin and dipalmitoylphosphatidylcholine. Biochem. Biophys.Res.Commun., 1976, v.68, p.363-368.

95. Brunner J., Skrabal P., Hauser H. Single bilayer vesicles prepared without sonication: Physico-chemical properties. Biochem.Biophys.Acta, 1976, v.455, N2, p.322-331•

96. Bussian R.W., Wriston J.C., Jr. Influence of incorporated cerebrosides on the interaction of liposomes with He La cells. Biochim.Biophys.Acta, v.471, p.336-340.

97. Caride V.J., Taylor V., Cramer J.A., Gottschalk A. Evaluation of liposome-entrapped radioactive tracers as scanning agents. J.Nucl.Med., 1976, v.17, N12, p.1067-1072.

98. Caride V.J., Zaret B.L. Liposome accumulation in regions of experimental myocardial infarction. Science, 1977» v',198, N4318, p.735-737.

99. Campbell P.I., Harding N.G.L., Eyman B.E., Tyrrell D.A. Redistribution and altered excretion of digoxin in rats receiving- digoxin antibodies incorporated in liposomes. Eur. J.Biochem., 1980, v.109, p.87-92.

100. Caron J.M., Berlin R.D. Interaction of microtubule proteins with phospholipid vesicles. J.Cell Biol., 1979, v.81, p.665-671.

101. Chen J.S., Del Fa A., Di Luzio A., Calissano P. Liposome -induced morphological differentiation of murine neuroblastoma. Nature, 1976, v.263, p.604-606.

102. Chen S., Keenan R.M. Effect phosphatidylcholine liposomes on the mitogen-stimulated lymphocyte activation. Bio-chem.Biophys.Res.Comm., 1979, v.79, p.852-858.

103. Chernomordik L.V., Sukharev S.I., Abidor I.G., Chizmadzhev Yu.A. The study of the BLM reversible electrical break2+down mechanism in the presence of . Bioelectrochem.2

104. Bioenerg., 1982, v.9, p.149-155.

105. Chow I.* Poo M.-M. Redistribution of cell surface receptors induced by cell-cell contact. J.Cell Biol., 1982, v.95, p.510-518.

106. Clejan S., Bittman R., Deroo P.T., Isaacson Y.A ., Rosenthal A.F. Permeability properties of sterol-containing liposomes from analogues of phosphatidylcholine lacking acyl groups. Biochemistry, 1977, v.18, N10. p.2118-2125.

107. Cohen B.E. The permeability of liposomes to non-electrolytes. J.Membr.Biol., 1975» v.20, p.205-235

108. Cohen C.M., Weissmann G., Hoffstein S., Awarthi Y.C., Srivastava S.E. Introduction of purified hexosaminidase A into Tay-Sacks leukocytes by means of immunoglobulin-coated liposomes. Biochemistry, 1976, v.15, p.4-52-260.

109. Cohen F.S., Zimmerberg J., Finkelstein A. Fusion of phospholipid vesicles with planar phospholipid bilayer membranes. II.Incorporation of a vesicular membrane marker into the planar membrane. J.Gen.Physiol., 1980, v.75, p.251-270.

110. Cook S.L., Bouma S.R., Huestis W.H. Cell-to-vesicle transfer of intrinistic membrane proteins: effect on membrane fluidity. Biochemistry, 1980, v.19, p.4601-4607.

111. Craig S.W., Cuatrecasas P. Mobility of cholera toxin receptors on rat lymphocyte membranes. Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1975, v.72, p.3844-3848.

112. Cullis P.R. Lateral diffusion rates of phosphatidylcholine in vesicle membranes: effects of cholesterol and hydrocarbon phase transitions. FEBS Lett., 1976, v.70, N1, p.223-228.

113. Cullis P.K., De Kruiff B. Lipid polymorphism and the functional roles of lipids in biological membranes. -Biochim.Biophys.Acta, 1979, v.559, P.339-4-20.

114. Dapergolas G., Gregoriadis G. Hypoglycaemic effect of liposome-entrapped insulin administered parenterally and intragastrically into rats. Lancet, 1976, v.2, p.824-827.

115. Dapergolas G., Neerunjun E.D., Gregoriadis G. Penetration of target areas in the rat by liposome-associated bleo-r mycin, glucose oxidase and insulin. FEBS Lett., 1976-, v.63, H2, p.235-239.

116. Deamer D., Bangham A.D. Large volume liposomes by an ether vaporization method. Biochim.Biophys.Acta, 1976, v.443, H3, p.629-634.

117. De Kruijff B., Wirtz K.W.A. Induction of a relatively fast transbilayer movement of phosphatidylcholine in vesicles. Biochim.Biophys.Acta, 1977» v.468, N2, p.318-32,6.

118. De Laat S.W., Van der Saag P.T., Elson E.L., Schlessin-ger J. Lateral diffusion of membrane lipids and proteins is increased specificaly in neurites of differentiating neuroblastoma cells. Biochim.Biophys.Acta, 1979, v.558, p.247-250.

119. Devaux P., McConnell H.M. Lateral diffusion in spin labeled phosphatidylcholine mutilayers. J.Amer.Chem.Soc., 1972, v.94, N13, p.4475-4481.

120. Dimitriadis G.J. Entrapment of ribonucleic acids in liposomes. FEBS Lett., 1978, v.86, p.289-293.

121. Dimitriadis G.G. Transformation of eucaryotic cells, in: Liposome Lett./Bangham A.ed. London, H.Y.: Academic Press, 1983, p.301-307.

122. Dingle J.T., Gordon J.L., Hazleman B.E., Knight C.G.,

123. Dage-Thomas H.P., Phillips N.C., Shaw I.H., Fildes F.J.T., Oliver J.E., Jones G., Turner E.H., Lowe L.S. Novel treatment for joint inflammation. Nature (London), 1978, v.271, p.372-373.

124. Di Pasquale A., Bell,Jr.P. The upper surface: its inability to support active cell movement in culture. J.Cell Biol., 1974, v.62, p.198-214.

125. Dragsten P.R., Blumenthal R., Handler J.S. Membrane asymmetry in epithelia: is the tight junction a barrier to diffusion in the plasma membrane? Nature, 1981, v.294, p. 718-722.

126. Dunnick J.K., Kallman R.F., Kriss J.P. Lipid vesicle interaction with MT-6 tumor cells and effect on subsequent cell growth. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1976a, v.73, p. 619-621.

127. Dunnick J.K., Rooks J.D., Aragon S., Rriss J.P. Alteration of mammalian cells by interaction with artificial lipid vesicles. Cancer Res., 1976b, v.36, p.2385-2389.

128. Duzgunes N., Ohki S. Calcium-induced interaction of phospholipid vesicles and bilayer lipid membranes. Biochim.Bio-phys.Acta, 1977, v.467, N2, p.301-308.

129. Duzgunes N., Ohki S. Fusion of small unilamellar liposomes with phospholipid planar bilayer membranes and large single bilayer vesicles. Biochim.Biophys.Acta, 1981, v.640, N3, P.734-747.

130. Earle W.R. Production of malignancy in vitro: the mouse fibroblasts cultures and changes seen in living cells. J. Natl.Cancer Inst., 194-3» v.4, N1, p.165-212.

131. Edidin M., Weiss A. Antigen cap formation in cultured fibroblasts: A reflection of membrane fluidity and cell motility. Proc.Nat.Acad.Sci.USA, 1972, v.69, p.2456-2459

132. Edidin M. Molecular motions and membrane organization and function. in: Membrane structure and functions. Comprehensive Biochemistry./ Finean J.B., Michell R.H. eds., Amsterdam: Elsevier-North Holland. 1981. p.114-178.

133. Enoch H.G., Strittmatter P. Formation and properties ofo1000-A-diameter, single bilayer phospholipid vesicles. -Proc.Nat.Acad.Sci.USA., 1979, v.76, p.145-149.

134. Esser A.F., Bartholomew R.M., Parce J.W., McConnell H.M. The physical state of membrane lipids modulate the activation of the first component of complement. J.Biol.Chem., 1979* v.254, p.1768-1770.

135. Espinola L.G., Beaucaire J., Gottschalk A., Caride V.J. Radiolabeled liposomes as metabolic and scanning tracers in mice. J.Nucl.Med., 1979, v.20, N5, p.434-441.

136. Eytan G.D., Broza R. Role of charge and fluidity in the incorporation of cytochrome oxidase into liposomes. J.Biol. Chem., 1978a, v.171, p.505-508.

137. Eytan G.D., Broza R. Selective incorporation of cytochrome oxidase into small liposomes. FEBS Lett., 1978b,v.85, p.175-178.

138. Eytan G., Eytan E. Fusion of proteoliposomes and cells. J.Biol.Chem., 1980, v.255» P.4992-4995•

139. Eytan G.D. Use of liposomes for reconstruction of biological functions. Biochim.Biophys.Acta, 1982, v.694, p .185-202.

140. Fan D., Voeltz H. Phospholipid degradation by SV 40-transformed murine fibroblasts. Exper.Cell.Res., 1977» v.106, p.79-87.

141. Fan D., Voelz H. A plasma membrane associated phospholi-pase in SV-40-transformed 3T3 cells. Exper.Cell.Res., 1980, v»126, p.47-55.

142. Fendler J.H., Romero A. Liposomes as drug carriers.-Life Sci., 1977, v.20, p.1109-1120.

143. Ferber E., De Pasquale G., Resch K. Phospholipid metabolism of stimulated lymphocytes. Biochim.Biophys.Acta,1975» v.398, p.364-376.

144. Ferguson D.R., Burton K.A. Reconstitution in phospholipid vesicles of a glucose transport system from pig small intestine. Nature (London), 1977, v.265, p.639-642.

145. Fettiplace R., Gordon G.M., Hladky S.B., Requena J., Zingsheim H.P., Haydon D.A. Techniques in the formation and examination of black lipid bilayer membranes. In: Methods in membrane biology / Ed.E.D.Korn. N.Y.j L.: Plenum Press, 1975, v.4, p.1-75.

146. Fidler I.J. Therapy of spontaneous matastases by intravenous injection of liposomes containing lymphokines. -Science, 1980, v.208, N4451, p.1469-1471.

147. Finkelstein M., Weissmann G. The introduction of enzymes into cells by means of liposomes. J.Lipid Res., 1978, v.19, N2, p.289-303.

148. Finkelstein M.C., Weissmann G. Variations in lipid composition determine liposomal integrity in biological fluids. -Biochim.Biophys.Acta, 1979, v.587, N1, p.202-216.

149. Fishman P.H., Moss J., Richards R.L., Brady R.O., Alving C.R. Liposomes as model membranes for ligand-receptorinteractions: studies with choleragen and glicolipids. -Biochemistry, 1979, v.18, N12, p.2562-2567

150. Flamm M., Schachter D. Acanthocytosis and cholesterol enrichment decrease lipid fluidity of only the outer human erythrocyte membrane leaflet. Nature, 1982, v.298, p.290-292.

151. Folch J., Lees M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues. J.Biol.Chem., 1957, v.226, p.497-509.

152. Fraley R., Subramani S., Berg P., Papahadjopoulos D. Introduction of SV 40 DNA into cells via phospholipid vesicles (liposomes). Fed.Proceed., 1980, v.39, p.17^7.

153. Freire E., Snyder B. Compositional domain structure of lipid membranes. in: Membrane and transport / Martinosi A.N. ed., New York-London: Plenum Press, 1982, v.1, p.37-41.

154. Freise J., Müller W.H., Rauch S. Distribution of negatively charged liposomes on rat liver hepacytocytes and non-he-pacytocytes in cell suspension. Exper.Cell Res., 1980, v.126, p.57-62.

155. Gad A.E., Broza R., Eytan G.D. Fusion of cells and proteo-liposomesi incorporation of beef heart cytochrome oxidase into rabbit erythrocytes. FEBS Lett., 1979, v.102, p.230-234.

156. Gad A.E., Silver B.L., Eytan G.D. Polycation-induced fusion of negatively charged vesicles. Biochim.Biophys.Acta, 1982, v.690, N1, p.124-132.

157. Gingell D., Ginsberg L. Problems in the physical interpretation of membrane interaction and fusion. in: Membrane fusion. Cell surface reviews/ Poste G., Nicolson G.L., eds., Amsterdam: North-Holland Biomedical Press, 1978, v.5, p.791-833

158. Gordon L.M., Mobley P.W., Esgate J., HofmannG., Whetton A., Houslay M.D. Thermotropic lipid phase separations in human platelet and rat liver plasma membranes. J.Membr.Biol., 1983» v.76, p.139-149.

159. Grant C.W.M., Mc Connell H.M. Fusion of phospholipid vesicles with viable Acholeplasma laidlawii. Proc.Natl.Acad. Sci.USA, 1973» v.70, p.1238-1240.

160. Green J.P., Phillips M.C., Shipley G.G. Structural investigations of lipid, polypeptide and protein multilayers. -Biochim.Biophys.Acta, 1973» v.330, p.243-253.

161. Gregoriadis G., Leathwood P.D., Ryman B.E. Enzyme etrap-ment in liposomes. FEBS Lett., 1971» v.14, p.95-99.

162. Gregoriadis G., Ryman B.E. Lysosomal localisation of £-fructofuranosidase containing liposomes injected into rats-implications in the treatment of genetic disorders. Biochem.

163. J., 1972, v.129, p.123-133.

164. Gregoriadis G., Buckland R.A. Enzyme containing liposomes alleviate a model for storage disease. Nature, 1973» v.244, p.170-172.

165. Gregoriadis G., Neerunjun D.E. Control of the rate of hepatic uptake and catabolism of liposoine-entrapped proteins injected into rats. Eur.J.Biochem., 1974, v.47, N1, p.179-185.

166. Gregoriadis G., Neerunjun E.D. Homing of liposomes to target cells. Biochem.Biophys.Res.Comm., 1975» v.65, p.537

167. Gregoriadis G. Liposomes in therapeutic and preventive medicine: the development of the drug-carrier concept. -Ann.N.Y.Acad.Sci., 1978, V.3O8, p.343-370.

168. Grunze M., Deuticke B. Changes of membrane permeability due -to extensive cholesterol depletion in mammalian erythrocytes. Biochim.Biophys.Acta, 1974, v.356, p.125-130.

169. Hafeman D.G., Tscharner V., Mc Connell H.M. Specific antibody-dependent interactions between macrophages and lipid haptens in planar lipid monolayers. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1981, v.78, p.4552-4556.

170. Hale A., Ruebush M., Lyles D.S., Harris D. Antigen-lipo-some modification of target cells as a method to alter their susceptibility to lysis by cytotoxic T lymphocytes. Proc. Natl.Ac ad.Sci.USA, 1980, v.77, p.6405-6108.

171. Hallett M.B., Campbell A.K. Uptake of liposomes containing the photoprotein obelin by rat isolated adipocytes. Adhesion, endocytosis or fusion? Biochem.J., 1980, v.192, p. 587-596.

172. Hardy J.G., Kellaway I.W., Regers J., Wilson C.G. The distribution and fate of 1i-labelled liposomes. J. Pharm.Pharmacol., 1980, v.32, N5, p.309-313

173. Harris A.K. Cell surface movements related to cell locomotion. In» Locomotion in tissue culture: Ciba Foundation Symp.14 / ed. M.Abercrombie, Amsterdam: Assoc.Sci.Publ., 1973» v.14, p.3-20.

174. Hashimoto A., Kawada J. Effects of oral administration of positively-charged insulin-liposomes on alloxan diabetic rats. Endocrinology (Japan), 1979, v.26, p.337-343.

175. Haywood A.M. Virus infection of liposomes. In: Liposome Letters / Bangham A.D. ed., London: Academic Press. 1983, p.277-286.

176. Haywood A.M., Boyer B.P. Initiation of fusion and disassembly of Sendai virus membranes into liposomes. Biochim. Biophys.Acta, 1981, v.646, p. 31-35.

177. Haywood A.M., Boyer B.P. Sendai virus membrane fusion: time course and effect of temperature, pH, calcium and receptor concentration. Biochemistry, 1982, v.21, N24, p.6041-6046.

178. Heath T.D. Antibody-directed liposomes: achievements and potential. Cancer Surveys, 1982, v.1, N3, p.418-427.

179. Helenius A., Fries E., Kartenbeck J. Reconstitution of Semliky forest virus membrane. J.Cell Biol., 1971, v.75,N3, p.866-876.

180. Hemker H.C., Hermens W.T., Muller A.D., Zwaal R.F.A. Oral treatment of haemophilia by gastrointeslinal absorption of factor VIII entrapped in liposomes. Lancet, 1980, v.1, p.70-71.

181. Henkart P., Blumenthal R. Interaction of lymphocyteswith lipid bilayer membranes: a model for lymphocyte-mediated lysis of target cells. Proc.Eatl.Acad.Sci.USA, 1975fv.72, 1T7. p.2789-2793

182. Hill M.W. Interaction of lipid vesicles with anaesthetics. Ann.H.Y.Acad.Sci., 1978, v.308, p.101-110.

183. Hill M.W., Hoyland J., Bangham A.D. Effects of temperature and n-butanol ( a model anaesthetic ) on a behavioural function of goldfish. J.Comp.Physiol., 1980, v.135, P.327-332.

184. Hinkle G.E., Born G.S., Kessler-Wayne 7., Shaw S.M. Preferential localization of radiolabeled liposomes in liver. J.Pharm.Sci., 1978, v.67, *T6, p.795-798.

185. Hnatowich D.J., Clancy B. Investigations of a new highly negative liposome with improved biodistribution for imaging.-J.Nucl.Med., 1980, v.21, JT7, p.662-669.

186. Ho S.C., Huang L. Transfer of acetylcholine receptors to L-cell surface membranes by lipid vesicles containing Sendai virus envelope proteins. Fed.Proceed., 1980, v.39, p.1618.

187. Hoekstra D., Tomasini R., Scherphof G. Interaction of phospholipid vesicles with rat hepatocytes in primary monolayer culture. Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.542, p.456-469.

188. Hoekstra D., Scherphof G. Effect of fetal calf serum and serum protein fractions on the uptake of liposomal phosphatidylcholine by rat hepatocytes. Biochim.Biophys.Acta, 1979, v.551, P.109-121.

189. Hoekstra D., Yaron A., Carmel A., Scherphor G. Fusion of phospholipid vesicles containing a trypsin-sensitied fluoro-genic substrate and trypsin. FEBS Lett., 1979, v.106, p. 176-180.

190. Hoekstra D. Kinetics of intermixing of lipids and of aqueus contents during vesicle fusion. Biochim.Biophys. Acta, 1982, v.692, N1, p.-171-175»

191. Hoffman R.M., Margolis L.B., Bergelson L,D. Binding and entrapment of high molecular weight DNA by lecithin liposomes. FEBS Lett., 1978, v.93, N2, p.365-368.

192. Ho lz R.W., Stratford C.A. Effects of divalent ion on vesicle-vesicle fusion .Studies by a new luminescence assay for fusion. J.Membrane Biol., 1979, v.46, IT4, p.331-358.

193. Hope M.J., Bruckdorfer K.R., Hart C.A., Lucy J.A. Membrane cholesterol and cell fusion of hen and guinea-pig erythrocytes. Biochem.J., 1977, v.166, p.255-263.

194. Huang C.H. Studies on phosphatidylcholine vesicles: Formation and physical characteristics. Biochemistry, 1969, v.8, 1T1, p.3^4-353.

195. Huang L., Pagano R.E. Interaction of phospholipid vesicles with cultured mammalian cells. I.Characteristics of uptake. J.Cell Biol., 1975, v.67, p.38-48.

196. Huang L., Ozato K., Pagano R.E. Interactions of phospholipid vesicles with murine lymphocytes. I.Vesicle-cell adsorption and fusion as alternative pathways of uptake. Membr. Biochem., 1978, v.1, p.1-25.

197. Huang L., Kennell S.J. Binding of immunoglobulin D to phospholipid vesicles by sonication. Biochemistry, 1979, v.18, p.1702-1707.

198. Huang R.T.C., WahnkK., Klenk H.D., Rott R. Fusion between cell membrane and liposomes containing the glycoproteins of influenza virus. Virology, 1980, v.104, N2, p.294-302.

199. Hwang K.J., Luk K.S., Beaumier P.L. Hepatic uptake and degradation of unilamellar sphingomielin/cholesterol liposomes: A kinetic study. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1980, v.77, N7, p.4030-4034.

200. Huestis W.H. A sodium-specific membrane permeability defect induced by phospholipid vesicle treatment of erythrocytes. J.Biol.Chem., 1977, v.252, p.6764-6768.

201. Jett M., Alving C.R. Selective cytotoxicity of tumor cells induced by liposomes containing plant phosphatidylinositol. Biochem.Biophys.Res.Com., 1983, v.114, p.863-871.

202. Jonah M.M., Cerny E.A., Rahman Y.E. Tissue distribution of EDTA encapsulated within liposomes of varying surface properties. Biochim.Biophys.Acta, 1975. v.401, N2, p.336-348.

203. Jonas A. Microviscosity of lipid domains in human serum lipoproteins. Biochim.Biophys.Acta, 1977, v.486, N1, p.10-22.

204. Joniau M., De Cuyper M. Interaction of tubulin with phospholipid vesicles studied by free flow electrophoresis. -Biol.Cell., 1983, v.47, p.136.

205. Juliano R.L., Stamp D. The effect of particle size and charge on the clearance rates of liposomes and liposome encapsulated drugs. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1975» v.63, N3, P.651-658.

206. Juliano R.L., Hsu M.J., Peterson D., Regen S.L., Singh A< Interaction of conventional or photopolymerized liposomes with platelets in vitro. Exper.Cell Res., 1983, v.146, p.422-427.

207. Kaduce J.L., Schmidt R.W., Spector A.A. Acylcoenzyme Aï cholesterol acyltransferase activity; solubilization and reconstitution in liposomes. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1978, v.81, p.462-468.

208. Kantor H.K., Prestegard J. Fusion of fatty acid containing lecithin vesicles. Biochemistry, 1975, v.14, p.1790-1794.

209. Kasahara M., Hinkle P.C. Reconstitution of D-glucose transport catalysed by a protein fraction from human erythrocytes in sonicated liposomes. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1976, v.73, p.396-400.

210. Kasahara M., Hinkle P.C. Reconstitution and purification of the D-glucose transport from human erythrocytes. J.Biol. Chem., 1977, v.252, p.7384-7390.

211. Kawai K., Fujita M., Nakao M. Lipid components of two different regions of an intestinal epithelial cell membrane of mouse. Biochim.Biophys. Acta, 1974-, v.369, p.222-233.

212. Kaye S .B., Boden J.A., Ryman B.E. The effect of liposome (phospholipid vesicle) entrapment of actinomycin D and methotrexate on the in vivo treatment of sensitive and resistant solid murine tumours. Eur.J.Cancer, 1981, v.17, p.279-290.

213. Kimelberg H.K., Mayhew E., Papahadjopoulos D. Distribution of liposome-entrapped cations in mice. Life Sci., 1975i v.17, N5, p.715-723.

214. Kimelberg H.K. Protein liposome interactions and their relevance to the structure and function of cell membranes. -Mol.Cell Biochem., 1976, v.10, p.171-190.

215. Kimelberg H.K., Mayhew E.G. Properties and biological effects of liposomes and their uses in pharmacology and toxicology. CRC Crit.Rev.Toxicol., 1979, v.6, p.25-79.

216. Kinne R., Faust R.G. Incorporation of D-glucose, L-ala-nine and phosphate-transport systems from rat renal brush-border membranes into liposomes. Biochem.J., 1977, v.168, p.311-314.

217. Kinsky S.C. Antibody-complement interaction with lipid model membranes. Biochim.Biophys.Acta, 1972, v.265, p.1-23.

218. Kinsky S.C. Immunogenieity of liposomal model membranes. -Ann.N.Y.Acd.Sci., 1978, v.301, p.111-123.

219. Kitagawa J., Inoue K., Nojima S. Properties of liposomal membranes containing lysolecithin. J.Biochem., 1976, v.79, p.1123-11^5.

220. Klausner R.D., Kleinfeld A.M., Hoover R.L., Karnovsky M.J. Lipid domains in membranes. Evidence derived from structural perturbations induced by free fatty acids and lifetime heterogeneity analysis. J.Biol.Chem., 1980, v.255, p.1286-1295.

221. Klausner R.D., Kumar N., Weinstein J.N., Blumenthal R., Flavin M. Interaction of tubulin with phospholipid vesicles. I.Physical changes of the protein. J.Biol.Chem., 1981, v. 256, P.5879-5885.

222. Klein J., Moore L., Pastan I. Effect of liposomes containing cholesterol on adenylate cyclase activity of cultured mammalian fibroblasts. Biochim.Biophys.Acta, 1978, V.5O6, P.42-53.

223. Knight C.G.(ed.) Liposomes: from physical structure to therapeutic application. Amsterdam: Elsevier/North-Holland Biomedical Press, 1980, p.249.

224. Knutton S., Summer M.C.B., Pasternak C.A. Role of microvilli in surface changes of synchronized P815Y mastocytoma cells. J.Cell Biol., 1975, v.66, p.568-576.

225. Kornberg R.D., Mc Connell H.M. Inside-outside transitions of phospholipids in vesicle membranes. Biochemistry, 1971, v.10, N7, p.1111-1120.

226. Koter M., De Kruijff B., Van Deenen L.L.M. Calcium-induced aggregation and fusion of mixed phosphatidylcholine-phos-phatidic acid vesicles as studied by 51 NMR. Biochim.Biophys.Acta, 1978, V.514, p.255-262.

227. Kramers M.T., Patrick J., Bottomley J., (Jinn P.J., Chapman D. Studies of liposome interactions with rat thymocytes. Eur.J.Biochem., 1980, v.110, p.579-585«

228. Kremer J.M.H., Esker M.W., Pathmamanoharam C., Wiersema P.H. Vesicles of variable diameter prepared by a modified injection method. Biochemistry, 1977» v.16, N17, P«3932-3935

229. Krupp L., Chobanian A.V., Brecher P.I. The in vivo transformation of phospholipid vesicles to a particle resembling HDL in the rat. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1976, v.72, N4, p.1251-1258.

230. Kumar N., Klausner R.D., Weinstein J.N., Blumenthal R., Flavin M. Interaction of tubulin with phospholipid vesicles. II.Physical changes of the protein. J.Biol.Chem., 1981, v.256, p.5886-5889.

231. Kumar N., Blumenthal R., Henkart M., Weinstein J., Klausner R. Aggregation and calcium-induced fusion of phosphatidylcholine vesicle-tubulin complexes. J.Biol.Chem., 1982, v.257, p.1537-1544.

232. Machatkova M., Pospisil Z. Biological characteristics of cell lines derived from the respiratory tract of a bovine foetus. Folia Biol.(Praha), 1975, v.91, p.117-121.

233. Magee W.E., Goff C.W., Schoknecht J., Smith M.D., Cheri-an K. The interaction of cationic liposomes containing entrapped horse radish peroxidase with cells in culture. J.Cell. Biol., 1974, v.53, p.492-504.

234. Magee W.E., Cronenberger J.H., Thor D.E. Marked stimulation of lymphocyte-mediated attack on tumor cells by target-directed liposomes containing immune T?NA. Cancer Res., 1978, v.38, p.1173-1176.

235. Maget-Dard R., "Roche J\.C., Monsigny M. Interactions between vesicles containing gangliosides and lectins, Limulin and wheat germ agglutinin. FEBS Lett., 1977» v.79, p.305-309.

236. Marchetti D., Blaustein D.I., Giagomoni D. Liposome-me-diated insertion of intact DNA into isolated nuclei. Exper. Cell.Res., 1983, v.149, p.177-187.

237. Mayhew E., Papahadjopoulos D., Rostum Y.M., Dave C. Use of lipid vesicles for the enchancement of the cytotoxic effects of cytosine arabinoside. Cancer Res., 1976, v.96, p.4406-4411. .

238. Mayhew E.f Gotfredsen C., Schneider Y.-J., Trouet A. Interaction of liposomes with cultured cells: effect of serum. Biochem.Pharmacol., 1980, v.29, N6, p.877-886.

239. Martin F.J., Mc Donald R.C. Lipid vesicle-cell interactions. I Hemagglutination and hemolysis. J.Cell Biol.,1976a, v.70, p.494-505.

240. Martin F.Y., Mc Donald R.C. Phospholipid exchange between bilayer membrane vesicles. Biochemistry, 1976b, v.15, N2, p.321-327.

241. Martin P.Y., Mc Donald R.C. Lipid vesicle-cell interactions III Introduction of a new antigenic determinant into erythrocyte membranes. J.Cell Biol., 1976c, v.70, p.515-526.

242. Maroudas N.G. Chemical and mechanical requirements for fibroblast adhesion. Nature, 1973. v.244, p.353-354.

243. Mason W., Miller N.G.A. Fusion of charged and uncharged liposomes by n-alkylbromides. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1979, v.91, N3, p.878-885.

244. Mazzari S., Zanotti A., Orlando P., Raciti R., Toffano G. Interaction of phosphatidylserine (PS) vesicles with plasma membranes in vivo and in vitro. Abstracts of FEBS special meeting. Athens. 1982, p.219.

245. Mayhew E., Papahadjopoulos D., O'Malley J., Carter W.A., Vail W.J. Interactions of liposomes with cultured cells. -Molec.Pharmacol., 1977, v.13, p.488-495.

246. Mc Connell H. A model of cell surface recognition. in: Lipsome Letters/Bangham A.D. ed. - N.Y.-London: Academic Press, 1983, p.386-389.

247. Mc Leod A.J., Suckling K.E., Walton P.L., Johnson M. Effects of in vitro incorporation of cholesterol and cholesterol analogues into rat platelets. Biochim.Biophys.Acta, 1982, v.688, p.581-585.

248. Millard P.C. Studies on the release of exogenous molecules from rat liver lysosomes. Ph.D.Thesis, University of Keele, 1979.

249. Miller C., Racker E. Ca -induced fusion of fragmentedsarcoplasmic reticulum with artificial planar bilayer. J. Membrane Biol., 1976, v.30, N3, p.283-300.

250. Miller K.W. Anaesthetized liposomes. in: Liposome Let-ters/Bangham A.D.ed. London: Academic Press, 1983, p.251-259.

251. Montai M., Mueller P. Formation of bimolecular membranes from lipid monolayers and a study of their electrical properties.- Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1972, v.69, N12, p.3561-3566.

252. Moore M.R. Fusion of liposomes containing conductance •probe with black lipid films. Biochim.Biopys.Acta, 1976, v.426, p.765-771.M

253. Morley C.J., Bangham A.D., Johnson P., Thorburn G.D., Jenkin G. Physical and physiological prop^ies of dry lung surfactant. -Nature, 1978, v.271, p.162-163.

254. Mueller P., Rudin D.Q;, Tien H., Wescott W. Reconstitution of cell membrane structure in vitro and its transformation into an excitable "system. Nature, 1962, v.194, p.979.

255. Mueller P., Rudin D.O., Tien H.T., Wescott W.C. Reconstitution of excitable cell membrane structure. J.Phys.Chem., 1963, v.67, p.534-535.

256. Mukherjee A.B., Orloff S., Butler J.de B., Triche 'T., Lalley P., Schulman J.D. Entrapment of metaphase chromosomes into phospholipid vesicles (lipochromosomes): Carrier potential in gene transfer. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1978, v.75, p.1361-1365.

257. Ng M.H., Ng W.S., Ho T.K.K., Fung E.P., Lamelin J.P. Modulation of phytohaemagglutinin-mediated lymphocyte stimulation by egg lecithin. Exper.Cell.Res., 1978, v.116, p.387395.

258. New R.R.C., Chance M.L., Thomas S.C., Peters W. Antilei-shmanial activity of antimonials entrapped in liposomes.

259. Nature, 1978, v.272, N1, p.55-56.

260. Nicco M.C., Tegos S., Gallamini A., Toffano G., Pollery A., Massarotti M. Brain cortex phospholipids liposomes effects on prolactin and somatotropin in man. J.Neural.Transm., 1978, v.4-9, N2, p.93-102.

261. Nicolau C., Le Pape A., Soriano Ph., Fargette F., Muh J. P., Juhel M.F. Liposome mediated gene transfer in vivo. Expression of rat insulin by rat splenic macrophages and Kupfer cells. Abstracts of the Special FEBS Meeting, Athens,1982.

262. Nicolau C. Liposomes as carriers for in vivo uptake and expression of genetic material. in: Liposome Letters/Bang-ham A., ed. - London, N.Y.: Academic Press, 1983. p.290-299.

263. Ohki S., Duzgunes N. Divalent cation-induced interaction of phospholipid vesicle and monolayer membranes. Biochim. Biophys .Acta, 1979, v.552, p.4-38-4-4-9.

264. Oku N., Scheerer J.F., Mc Donald C. Preparation of giant liposomes. Biochim.Biophys.Acta, 1982, v.692, p.384— 388.

265. Osborne M.P., Richardson V.J., Jeyasingh K., Ryman B.E. Radionuclide-labelled liposomes a new lymph node imaging agent. - Int.J.Nucl.Med.Biol., 1979, v.6, p.75-83.

266. Osborne M.P., Richardson V.J., Pagne J.R., Mc Gready V.P., Ryman B.E. Technetium-99m labelled liposome axillary lymphoscintigraphy in breast cancer. Clin.Oncol, 1980, v.6, p.289-290.

267. Osborne M.P., Ryman B.E., Payne J.H., Mc Cready V.R. The use of -labelled neutral liposomes in lymphoscintigraphy. in: Progress in Radiopharmacology/Cox P.K., ed. -Amsterdam: North-Holland Biomedical Press, 1981, v.2, p.317-325.

268. Osborne M.P., Richardson V.J., Jeyasingh K.f Ryman B.E. Potential applications of radionuclide-labelled liposomes in the detection of the lymphatic spread of cancer. Int.J.Nucl. Med.Biol., 1982, v.9, p.47-51.

269. Ostro M.J«, Giacomoni D., Lavelle D., Paxton W., Dray S. Evidence for translation of rabbit globin in RNA after liposome mediated insertion into a human cell line. Nature,1978,v.274, p.921-923.

270. Ostro M.J., Lavelle D., Paxton W., Matthews B., Giacomoni D. Parameters affecting the liposome-mediated insertion of RNA into eucaryotic cells in vitro. Arch.Biochem.Biophys., 1980, v.201, N2, p.392-402.

271. Ott P., Hope M., Verkleij A., Roelofsen B., Brodbeck U., Van Deenen L.M. Effect of dimiristoyl phosphatidylcholine on intact erythrocytes. Biochim.Biophys.Acta, 1981, v.641, p. 79-87.

272. Ozato K., Ziegler H.K., Henney C.S. Liposomes as model membrane systems for immune attack. J.Immunol., 1978, v.121, p.1383-1388.

273. Ozawa M., Asano A. The preparation of cell-fusion.induced proteoliposomes from purified glycoproteins of HVJ (Sendai virus) and chemically defined lipids. J.Biol.Chem., 1981, v.256, p.5954-5956.

274. Pagano R.E., Huang L., Weg G. Interaction of phospholipid vesicles with cultured mammalian cells. Nature, 1974, v.252, p.166-167.

275. Pagano R.E., Huang L. Interaction of phospholipid vesicles with cultured mammalian cells II Studies of mechanism. -J.Cell Biol., 1975, v.67, p.49-60.

276. Pagano R.E., Takeichi M. ILdhesion of phospholipid vesicles to Chinese hamster fibroblasts. Role of cell surface proteins. J.Cell Biol., 1977, v.74, p.531-546.

277. Pagano R.E., Weinstein J.N. Interactions of liposomes with mammalian cells. Ann.Rev.Biophys.Bioeng., 1978, v.7,p.435-368.

278. Pagano R.E., Struck D.K., Schroit A.J. Introduction of iphospholipids into mammalian cell surfaces via lipid vesicles. in: Liposomes and immunobiology/Tom B., Six H. eds. -Amsterdam:Elsevier/North Holland Biomedical Press., 1980, p. 193-209.

279. Pagano R.E.,Longmuir K.J., Martin O.C., Struck D. Metabolism and intracellular localization of a fluorescently labeled intermediate in lipid biosynthesis within cultured fibroblasts. J.Cell Biol., 1981, v.91, p.872-877.

280. Papahadjopoulos D., Poste G., Mayhew E. Cellular uptake of cyclic AMP captured within phospholipid vesicles and effect on cell-growth behaviour. Biochim.Biophys.Acta, 1974a, v. 363, p.404-418.

281. Papahadjopoulos D., Poste G., Schaeffer B.E., Vail W.J. Membrane fusion and molecular segregation in phospholipid vesicles. Biochim.Biophys.Acta, 1974b, v.352, N1, p.10-28.

282. Papahadoopoulos D., Hui S., Vail W.J., Poste G. Studies of membrane fusion. I Interactions of pure phospholipid membranes and the effect of myristic acid, lysolecithin, proteins and dimethylsulfoxide. Biochim.Biophys.Acta, 1976a, v.448, N1, P.245-264.

283. Papahadjopoulos D., Hui S., Vail W.J,, Poste G. Studies on membrane fusion. II.Induction of fusion in pure phospholipid membranes by Ca^+ and after divalent metals. Biochim. Biophys. Acta, 1976b, v.¿1-48, N1, p.265-283.

284. Papahadjopoulos D.f Jacobson K., Vail W.J., Newton C., Nir S., Poste G., Lazo R. Studies on membrane fusion.Ill.The role of calcium-induced phase changes. Biochim.Biophys. Acta, 1977, v.465, p.579-598.

285. Papahadjopoulos D.(ed.) Liposomes and their uses in biology and medicine. Ann.N.Y.Acad.Sci., 1978, v.308, p.1-462.

286. Patel H.M., Ryman B.E. Oral administration of insulin by encapsulation within liposomes. FEBS Lett., 1976, v.62, p.60-63

287. Patel H.M., Harding N.G.L., Logue F., Eeesson C., Mc Cuish A.C., Mc Kenzie J.C,, Ryman B.E., Scobie I. Intra-¿jejunal absorption of liposomally-entrapped insulin in normal man. Biochem.Soc.Trans., 1978, v.6, p.784-785.

288. Pilch P.F., Thompson P.A., Czech M.P. Coordinate modulation of D-glucose transport activity and bilayer fluidity in plasma membranes derived from control and insulin-treated adipocytes. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1980, v.77, p.915-918.

289. Podack E.R., Biesecker G., Muller-Eberhard H.J. Membrane attack complex of complement: generation of high affinity phospholipid binding sites by fusion of five hydrophilic plasma proteins. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1979» v.76, N2, p.897-901.

290. Pohl G.W., Stark G., Trissl H.W. Interaction of liposomes with black lipid membranes. Biochim.Biophys.Acta, 1973» v.318, m, p.478-481.

291. Portis A., Newton C., Pangborn ¥., Papahadjopoulos D.

292. Studies on mechanism of membrane fusion: evidence for an in2+ 2+ termembrane Ca -phospholipid complex, synergism with Mgand inhibition by spectrin. Biochemistry, 1979» v.18, N5»p.780-790.

293. Poste G., Papahadjopoulos D. Lipid vesicles as carriers for introducing materials into cultured cells: Influence of vesicle lipid composition on mechanism (s) of vesicle incorporation into cells. Proc.Fatl.Acad.Sci.USA, 1976, v.73, p. 1603-1607.

294. Poste G., Papahadjopoulos D., Vail W.J. Lipid vesicles as carriers for introducing biologically active materials into cells. Methods Cell Biol., 1976, v.14, p.33-71.

295. Poste G., Porter C.W., Papahadjopoulos D. Identification of a potential artifact in the use of electron microscope autoradiography to localize saturated phospholipids in cells. -Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.50, p.256-263.

296. Poste G., Kirsh R., Fogler W.E., Fidler I.J. Activation of tumoricidal properties in mouse macrophages by lymphokines encapsulated in liposomes. Cancer Res., 1979, v.39, N3, p.881-892.

297. Poste G., Lyon N.C., Macander P., Porter C.W., Reeve P., Bachmeyer H. Liposome-mediated transfer of integral membrane glycoproteins into the plasma membrane of cultured cells. -Exper.Cell Res., 1980, v.129, p.393-^08.

298. Poste G., Fidler I.J. Activation of macrophages by lymphocyte mediators encapsulated in liposomes. in; Manual of macrophage methodology. New York: Marcel Dekker,Inc., 1981, p.451.438.

299. Poznansky M., Czekanski S. Cholesterol movement between human skin fibroblasts and phosphatidylcholine vesicles. -Biochim.Biophys.Acta, 1982, v.685, p.182-190.

300. Prestegard J.H., Fellmeth B. Fusion of dimyristoylleci-thin vesicles as studied by proton magnetic resonance spectroscopy. Biochemistry, 1974, v.13, p.1122-1126.

301. Racker E. Reconstitution of membranes. in: Liposome Letters/Bangham A.D., ed.rLondon: Academic Press, 1983, p. 169-179.

302. Rahman Y.E., Wright B.J. Liposomes containing chelating agents. Cellular penetration and possible mechanism of metal removal. J.Cell Biol., 1975, v.65, p.112-122.

303. Rahman Y.E., Rosenthal M.W., Cerny E.A. Intracellular plutonium: removal by liposome-encapsulated chelating agent. -Science, 1973, v.180, p.300-302.

304. Rahman Y.E., Wright B.J. Liposomes containing chelating agents. J.Cell Biol., 1975, v.65, N1, p.112-122.

305. Rahman Y.E. Potential of the liposomal approach to metal chelation therapy. in: Lysosomes in Biology and Pathology/ Dingle J.T., Jacques P.J., Shaw I.H., eds. Elsevier-North-Holland Biomedical Press, 1979, v.6, p.625-652.

306. Rahman Y.E. Liposomes as carriers for chelators. in: Liposome Letters/Bangham A., ed.-London,N.Y.:Academic Press, 1983, p.336-340.

307. Ralston E., Blumenthal R., Weinstein J.N., Sharrow S.O., Henkart P. Lyso phosphatidylcholine in liposomal membranes. -Biochim.Biophys.Acta, 1980a, v.597, p.543-551.

308. Ralston E., Sharrow S.O., Blumenthal R. Correlation between membrane permeability and transfer of lipid vesicle contents to red blood cells. Fed.Proceed., 1980b, v.39» p.2123.

309. Ralston E. Carboxyfluorescein as a probe for liposome-cell interactions. Effect of impurities and purification of the dye. Biochim.Bio^phys.Acta, 1981, v.649» P.133-137.

310. Rando R.R., Slama J., Bangerter F.W. Functional incorporation of synthetic glycolipids into cells. Proc.Natl.Acad. Sci.USA, 1980, v.77, p.2510-2513.

311. Raz A., Bucana C., Foger W., Poste G., Fidler I. Biochemical and ultrastructural studies on the uptake of liposomes by murine macrophages. Cancer Res., 1981, v.41, p.487-494.

312. Razin M., Ginsburg H. Fusion of liposomes with planar lipid bilayers. Biochim.Biophys.Acta, 1980, v.598, N1, p.285-292.

313. Redwood W.R., Jansons V.K., Patel B.C. Lectin receptor interactions in liposomes. Biochim.Biophys.Acta, 1975» v.406, p.347-361.

314. Renswoude van A.J.B.M., Westenberg P., Scherphof G.L. In vitro interaction of Zajdela ascites hepatoma cells with Lipid vesicles. Biochim.Biophys.Acta, 1979» v.558, p.22-40.

315. Resch K., Ferber E. Phospholipid metabolism of stimulated Lymphocytes. Effect of phytohemagglutinin, concanavalin A and anti-immunoglobulin serum. Eur.J.Biochem., 1972, v.27» P.153-161 .

316. Revesz T., Greaves M. Ligand-induced redistribution of .ymphocyte ganglioside GM-1. Nature, 1975» v.257, p.103-106.

317. Reynolds G.D., Baker H.J., Reynolds R.H. Enzyme replace-lent using liposome carriers in feline m1G gangliosidosis fib-•oblasts. Nature, 1978, v.275, P.754-755.

318. Richardson V.J., Jeyasingh K., Jewkes R.F., Ryman B.E.,

319. Tattersall M.H.N» Possihle tumour localisation of ^mTc-labe-lled liposomes: Effects of lipid composition, charge and liposome size. J.Nucl.Med., 1978, v.19, P.1049-1054.

320. Richardson V.J., Ryman B.E., Jewkes R.F., Jeyasingh K., Tuttersall M.H.N., Newlands E.S., Kage S.B. Tissue distribution and tumour localization of 99m-technetium-labelled liposomes in cancer patients. Br.J.Cancer, 1979, v.40, p.35-43.

321. Ritter C., Rutman R.J. Alterations of muscarinic synaptic activity by anionic liposomes. Res.Comm.Chem.Path.Pharm., 1981, v.33, p.69-79.

322. Roerdink F.H., Van Renswoude A.J., Wielinga B.Y., Kroon A.M., Scherphof G.L. Incorporation of enzymes into living cells with the use of liposomes. J.Mol.Med., 1976, v.1, p. 257-263.

323. Roerdink F., Dijkstra J., Hartman G., Bolscher В., Sher-phof G. The involvement of parenchymal, Kupffer and endothelial liver cells in the hepatic uptake of intravenously injected liposomes. Biochim.Biophys.Acta, 1981, v.677, p.79-89.

324. Roseman M., Litman B.J., Thompson Т.Е. Transbilayer exchange of phosphatidylethanolamine for phosphatidylcholine and N-acetimidoylphosphatidylethanolamine in single-walled bilayer vesicles. Biochemistry, 1975, v.14, N22, p.4826-4830.

325. Roseman M.A., Thompson Т.Е. Mechanism of spontaneous transfer of phospholipid between bilayers. Biochemistry, 1980, v.19, p.439-444.

326. Rosenthal M.W., Rahman Y.E., Moretti E.S., Cerny E.A. Removal of polymeric plutonium by DTPA directed into cells by liposome encapsulation. Radiation Res., 1975, v.63, p.262-274.

327. Rostum Y.M., Mayhew E., Szoka P., Campbell J. Inability of liposome encapsulated 1-B-D-arabinofuranosylcytosine nucleotides to overcome drug resistance in L 1210 cells. Eur.

328. J.Cancer Clin.Oncol., 1981, v.17, N7, p.809-817.

329. Rozenberg O.A., Hanson K.P., Zerbin E.A. Radiopaque liposomes for imaging of the spleen and liver. Radiology, 1983, N12, p.877-878.

330. Rousselet A., Guthmann C., Matricon J., Bienvenue A., Devaux P.F. Study of the transverse diffusion of spin labeled phospholipids in biological membranes. I.Human red blood cells. Biochim.Biophys.Acta, 1976, v.426, p.357-371.

331. Ryman B.E., Jewkes R.F., Jeyasingh K., Osborne M.P., Patel H.M., Richardson V.J., Tattersall M.H.N., Tyrell D.A. Potential applications of liposomes to therapy. Ann.N.Y. Acad.Sci., 1978. v.308, p.281-307.

332. Syman B.E., Tyrell D.A. Liposomes-methodology and applications. in* Lysosomes in Biology and Pathology/Dingle J.T., Jacques P.J., Shaw B.V.,eds. - Amsterdam:Elsevier/North-Holl-and Biomedical Press, 1979, v.6, p.549-597.

333. Ryman B.E., Tyrrell D.A. Liposomes bags of potential. -in: Essays in Biochemistry/Campbell P.N., Marshall R.D.,eds. -N.Y.: Academic Press, 1980, v.16, p.49-98.

334. Ryman B.E., Barratt G.M., Patel H.M., Tuzel N.S. Possible use of liposomes in drug delivery. in: Optimisation of Drug Delivery. Proc.Alfred Benzon Symp./Bundgaard H., Hanson A.B., Koford H.,eds. - Copenhagen: Munksgaard, 1982, v.17, p.351-362.

335. Ryman B.E. Liposomes thoughts on targetting. - in: Ly-posome Letters/Bangham A.D.,ed.-London,N.Y.:Academic Press, 1983, p.341-356.

336. Sakakibara K., Momoi Т., Uchida Т., Nagai Y. Evidence for association of glycosphingolipid with a colchicine-sensi-tive microtubule like cytoskeletal structure of culture cells. - Nature, 1981, v.293. p.77-79.

337. Sandra A., Pagano R.E. Liposome-cell interactions. Studies of lipid transfer using isotopically asymmetric vesicles. J.Biol.Chem., 1979, v.254, p.2244-2249.

338. Sandra A., Paltzer W., Thomas M. Morphological differentiation of murine neuroblastoma induced by liposomes. Lipid specificity and pathway of liposome uptake. Exper.Cell.Res.s1981, v.132, p.473-477.

339. Sandra A., Fyler P.J. Effect of liposome-adipocyte interaction on hexose uptake and insulin action. Am.J.Physiol., 1981, v.241, p.E281-E290.

340. Saracte K. Association of Pseudomonas cytochrome oxidase with liposomes. Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.507, p.17-25

341. Schaefer-Ridder M., '.Vang Y., HofSchneider P.H. Liposomes as gene carriers: efficient transformation of mouse L cells by thymidine kinase gene. Science, 19?2, 7.215» p.166-168.

342. Schroit I.J., Pagano R.E. Capping of a phospholipid analog in the plasma membrane of lymphocytes. Cell, 1981, v.23» p.105-113.

343. Scherphof G., Roerdink F., Waite M., Parks J. Disintegration of phosphatidylcholine liposomes in plasma as a result of interaction with HDL. Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.542,1. H2, p.296-307.

344. Schieren H., Weissmann G., Seligman M., Coleman P. Inte

345. Tactions of immunoglobulins with liposomes. Biochim.Biophys .Res .Commun. , 1978, v.82, N4, p.1160-1167.

346. Schiffman F.J., Klein I. Rapid induction of amphotericin B sensitivity in L 1210 leukaemia cells by liposomes containing ergosterol. Nature, 1977, v.269, p.65-66.

347. Schneider H., Lemasters J.J., Hochli M., Hackenbrock Ch.R. Fusion of liposomes with mitochondrial inner membranes. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1980a, v.77, p.442-446.

348. Schneider H., Lemasters J., Hochli M., Hackenbrock Ch.R. Liposome-mitochondrial inner membrane fusion. Lateral diffusion of integral electron transfer components. J.Biol. Chem., 1980b, v.255, P.3748-3756.

349. Sharma P., Tyrrell D.A., Ryman B.E. Some properties of liposomes of different sizes. Biochem.Soc.Trans., 1977, v.5, N4, p.1146-1149.

350. Sedlacek H.H., Stark J., Seiler F.R., Ziegler W., Wiegand H. Cholera toxin induced redistribution of sialogly-colipid receptors at the lymphocyte membrane. FEBS Lett., 1976, v.61, p.272-276.

351. Sefton B.M., Gaffney B.J. Complete exchange of viral cholesterol.- Biochemistry, 1979, v.18, p.438-443.

352. Segal A.W., Wills E.J., Richmond J.E., Slavin G., Black C.D.V., Gregoriadis G. Morphological observations on the cellular and subcellular destination of intravenously adminestered liposomes. Br.J.Exp.Path., 1974, v.55, N3, p.320-327.

353. Sessa G., Weissmann G. Phospholipid spherules (liposomes) as a model for biological membranes. J.Lipid Res., 1968, v.9, p.310-318.

354. Severina I.I. Nystatin-induced increase in photocurrentin the system "bacteriorhodopsin proteoliposome/bilayer planar membrane". Biochim.Biophys.Acta, 1982, v.681, p.311-317.

355. Shaw I.H., Knight C.G., Dingle J.T. Liposomal retention of a modified anti-inflammatory steroid. Biochem,J., 1976, v.158, p.473-476.

356. Shaw I.H., Knight C.G., Page Thomas D.P., Phillips N.C. Liposome-incorporated corticosteroids: I.The interaction of liposomal Cortisol palmitate with inflammatory synovial membrane. Br.J.Exp.Pathol., 1979, v.60, p.142-150.

357. Shchipakin V., Chuchlova E., Evtodienko Y. Reconstitution of mitochondrial H- trans porting system in proteoliposom.es. -Biochem.Biophys.Res.Commun., 1976, v.69, p.123-127.

358. Shinitzky M., Barenholz Y. Dynamics of the hydrocarbon layer in liposomes of lecithin and sphingomyelin containing dicetylphosphate. Biol.Chem., 1974, v.249, p.2652-2657.

359. Shinitzky M., Inbar M. Difference in microviscosity induced by different cholesterol levels in the surface membrane lipid layer of normal lymphocytes and malignant lymphoma cells. J.Mol.Biol., 1974, v.85, p.603-615.

360. Shinozawa S., Araki Y., Oda T. Antitumor effect of neo-carzinostatin entrapped in liposomes. Gann., 1980, v.71, N1, p.107-111.

361. Simon S.A., Lis L.J., McDonald R.C., Kauffman J.W. Thenoneffect of a large linar hydrocarbon, squalene, on the phosphatidylcholine packing structure. Biophys.J., 1977, v.19, N1, p.83-90.

362. Sikha S.C., Green G., Chauhan V.P., Karlu V.K. Proteo-liposomes interaction with human erythrocyte membranes. Functional implantation of jp-glutamyl transpeptidase. Biochemistry, v.21, p.2356-2365.

363. Skulachev V.P. Proteoliposomes: a model for studying lJxB. generating systems. in: Liposome Letters/Bangham A.D.,ed.-London:Academic Press, 1983, p.197-214.

364. Slama J.S., Rando R.R. Lectin-mediated aggregation of liposomes containing glycolipids with variable hydrophilic spacer arms. Biochemistry, 1980, v.19, p.4595-4600.

365. Smith L.C., Pownall M.J., Gotto A.M. The plasma lipoproteins structure and metabolism. Ann.Rev.Biochem., 1978, v. 47. P-551-577.

366. Steger L.D., Decnick R.J. Enzyme therapy. Comparative in vivo fates and effects on lysosomal integrity of enzyme entrapped in negatively and positively charged liposomes. -Biochim.Biophys.Acta, 1977, v.464, N3, p.530-546.

367. Stern P.L. and Bretscher M.S. Capping of exogeneous For-ssman glycolipid on cells. J.Cell Biol., 1979, v.82, p.829-833.

368. Stoker M.G.P. Role of diffusion boundary layer in contact inhibition of growth. Nature, 1973, v.246, p.200-203.

369. Struck D.K., Pagano R.E. Insertion of fluorescent phospholipids into the plasma membrane of a mammalian cell. J. Biol.Chem., 1980, v.255» p.5404-5410.

370. Svetashev V.I., Vaskovsky V.E. A simplified technique for thin-layer microchromatography of lipids. J.Chromatogr., 1972, v.67, p.376-378.

371. Szoka P. ., Papahadjopoulos D. Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse phase evaporation. - Proc.Natl.Acad.Sci. USA, 1978, v.75, p.4194-4198.

372. Szoka F.C. ., Jacobson K., Papahad¿jopoulos D. The use of aqueous space markers to determine the mechanism of interaction between phospholipid vesicles and cells. Biochim. Biophys.Acta, 1979, v.551, p.295-303.

373. Szolca F., Papahadjopoulos D. Comparative properties and methods of preparation of liposomes. Ann.Rev.Biopys.Bioeng., 1980, v.9. p.467-508.

374. Szoka F., Jacobson E., Derzko Z., Papahajopoulos D. Fluorescence studies on the mechanism of liposome-cell interactions in vitro. Biochim.Biophys.Acta, 1980, v.600, p.1-18.

375. Szoka F., Magnusson K.E., Wojcieszyn J., Hou Yu., Derzko Z., Jacobson K. Use of lectins and polyethylene glycol for fusion of glycolipid-containing liposomes with eukaryotic cells. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1981, v.78, p.1685-1689.

376. Tall A.R. Studies on the transfer of phosphatidylcholine from unilamellar vesicles into plasma high density lipoproteins in the rat. J.Lipid Res., 1980, v.21, N3, p.354-363.

377. Tans G., Zutphen H., Comfurius P., Hemker H.C., Zwaal R.F.A. Lipid phase transitions and procoagulant activity. -Eur.J.Biochemistry, 1979, v.95, N3, p.449-457.

378. Tanaka T., Taneda K., Kobayashi H., Okumura K., Mura-mishi S., Sezaki H. Application of liposomes to the pharmaceutical modification of the distribution characteristics of drugs in the rat. Chem.Pharm.Bull., 1975» v.23, N12, p.3069-3074.

379. Thompson N.L., Axelrod D. Reduced lateral mobility of a fluorescent lipid probe in cholesterol-depleted erythrocyte membrane. Biochim.Biophys.Acta, 1980, v.597, p.155-165.

380. Tien H.T. Bilayer lipid membranes (BLM): Theory and Practice. N.Y.: Marcel Dekker, 1974, p.655.

381. Torchilin V.P., Khaw B.A., Smirnov V.N., Haber E. Preservation of antimyosin antibody activity after covalent coupling to liposomes. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1979, v.89, N4, p.1114-1119.

382. Torchilin V.P., Berdichevsky V.R., Barsukov A.A., Smirnov V.N. Coating liposomes with protein decreases their capture by macrophages. PEBS Lett., 1980, v.3, N1, p.184-188.

383. Torchilin V.P., Klibanov A.L. Immobilization of proteins on liposome surface. Enzyme Microb.Technol., 1981, v.3, p. 297-304.

384. Toyoshima S., Osawa T. Cholesterol inhibition of the temporary increase of membrane fluidity of lymphocytes induced by mitogenic lectins. Exper.Cell.Res., 1976, v.102, p.438-441.

385. Tragi K.H., Pohl A., Kinast H. Oral administration of insulin by means of liposomes in animal experiments. Wiener Klin. Woch., 1979, V.13, p.448-451.

386. Turner M.J., Sanderson A.R. The preparation of liposomes bearing human (HLA) transplantation antigens. Biochem.

387. J., 1978, v.171» p.505-508.

388. Tyrrell D.A., Heath T.D., Colley C.M., Ryman B.E. New aspects of liposomes. Biochim.Biophys.Acta, 1976a, v.457, p.259-302.

389. Tyrrell D.A., Ryman B.E., Keeton B.R., Dubowitz V. Use of liposomes in treating type II glycogenosis. Br.Med.J., 1976b, v.2, p.88-92.

390. Tyrrell D.A., Richardson V.J., Ryman B.E. The effect of serum protein fractions on liposome-cell interactions. Biochim.Biophys .Acta, 1977, v.497, N3, p.469-480.

391. Tyrrell D.A., Campbell P.I., Harding N.G.L., Munro A., Ryman B.E. Antidigoxin antibody incorporation into liposomes a potential therapy for digoxin toxicity. - Biochem. Soc.Trans., 1978, v.6, p.1239-1241.

392. Ukena T.E., Karnovsky M.J. The role of microvilli in the agglutination of cells by concanavalin A. Exp.Cell.Res., 1977, v.106, p.309-325.

393. Ulmius J., Wennerstrom H., Lindblom G., Arwidson G. Proton magnetic resonance bandshape studies of lamellar liquid crystals and gel plases containing lecithins and cholesterol. Biochim.Biophys.Acta, 1975, v.389, F2, p.179-202.

394. Vakirtzy-Lemonias C., Gregoriadis G. Uptake of liposome-entrapped agents by the Trypanosome: Crithidia fasculata. -Biochem.Soc,Trans., 1978, v.6, p.1241-1244.

395. Van den Besselaar A.M.H.P., Van den Bosch H., Van Dee-nen L.L.M. Transbilayer distribution and movement of lysophosphatidylcholine in liposomal membrane. Biochim.Biophys. Acta, 1977, v.465, N3, p.454-465.

396. Vasiliev Yu.M., Gelfand I.M., Domnina L.V., Zacharova O.S., Ljubimov A.V. Contact inhibition of phagocytosis in epithelial sheets: alteration of cell surface properties induced by cell-cell contacts. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1975» v.72, p.719-722.

397. Vasiliev Yu.M., Gelfand I.M., Domnina L.V. Active cell edge and movements of concanavalin A receptors on the surface of epithelial cells. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1976,v.73, p.4085-4089.

398. Vasiliev Yu.M., Gelfand I.M. Neoplastic and normal cells in culture. Cambridge: Cambridge University Press, 1981, P.345.

399. Vaskovsky V.E., Latyshev N.A. Modified Jungnickel's reagent for detecting phospholipids and other phosphorus compounds on thin-layer chromatograms . J.Chromatogr., 1975, v.115, p.246-249.

400. Vaskovsky V.E., Kostetzky E.Y., Vasendin I.M. A universal reagent for phospholipid analysis. J.Chromatogr., 1975» v.114, p.129-141.

401. Vlodavsky J., Fielding P.E., Prelding C.J., Gospodaro-witcz D. Role of contact inhibition in the regulation of receptor-mediated uptake of low density lipoprotein in cultured vascular endothelial cells. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1978, v.75, p.356-360.

402. Vlodavsky K., Sachs L. Difference in the calcium regulation of concanavalin A agglutinability and surface microvilli in normal and transformed cells. Exper.Cell Res., 1977, v.105, N1, p.179-189.

403. Volsky D.J., Cabantchik Z.I., Beigel M., Logter A. Implantation of the isolated human erythrocyte anion channel into plasma membranes of Friend erythro-leukemic cells by use of Sendai virus envelopes. Proc.Natl.Acad.Sci., 1979» v.76, p.5440-5444.

404. Volsky D.J., Loyter A. An efficient method for reassembly of fusogenic Sendai virus envelopes after solubilization of intact virions with Triton x-100. FEBS Lett., 1978,v.92, p.190-194.

405. Walker F.I., Esmon C.T. The effects of phospholipid and factor Va on the inhibition of factor Xa by antithrombin III. Biochem.Biophys.Res.Commun., 1979, v.90, N2, p.641-647.

406. Weinstein J.N., Yoshikami S., Henkart P., Blumenthal R., Hagins W.A. Liposome-cell interaction: transfer and intracellular release of a trapped fluorescent marker. Science, 1977, v.195, p.489-492.

407. Weinstein J.N., Blumenthal R., Sharrow S., Henkart P.A. Antibody-mediated targeting of liposomes. Binding to lymphocytes does not ensure incorporation of vesicle contents into the cells. Biochim.Biophys.Acta, 1978, v.509, p.272-288.

408. Weissmann G., Sessa G., Weissmann S. Effect of steroids and Triton X-100 on glucose filled phospholipid/cholesterol structures. Nature (London), 1965, v.208, p.649-651.

409. Weissmann G., Sessa G., WeissmannS. The action of steroids and Triton X-100 upon phospholipid/cholesterol structures. Biochem.Pharmacol., 1966, v.15, p.1537-1551.

410. Weissmann G., Brahd A., Franklin E.C. Interaction of immunoglobulines with liposomes. J.Clin.Invest., 1974, v.53, N2, p.536-543.

411. Weissmann G., Collins T., Evers A., Dunham P. Membrane perturbation: studies employing a calcium-sensitive dye arse-nazo III in liposomes. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1976, v.73, p. 510-514.

412. Weissmann G., Cohen C., Hoffstein S. Introduction of enzymes, by means of liposomes, into non-phagocytic human cells in vitro. Biochim.Biophys.Acta, 1977, v.498, p.375-385.

413. Weissmann G., Bloomhawat B.K. Monosialoganglioside lipo-some-entrapped enzyme uptake by hepatic cells. Biochim.Biophys.Acta, 1977, v.497, N3, p.760-765.

414. Weksler B.B., Marcus A.J., Jaffe B.A. Synthesis of prostaglandin Ig (prostacyclin) by cultured human and bovine endothelial cells. Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1977, v.74, N9, p.3922-3926.

415. Wilschut J .C., Regts J., Scherphof G. Reactivation of B-hydroxybutyrate dehydrogenase by phosphatidylcholine/phosphatidyl ethanol amine mixtures: evidence for a temperature induced phase separation. FEBS Lett., 1976, v.63, p.328-332.

416. Wilson T., Papahadjopoulos D., Taber R. Biological properties of poliovirus encapsulated in lipid vesicles: Antibody resistance and infectivity in virus-resistant cells. -Proc.Natl.Acad.Sci.USA, 1977» v.74, p.3471-3475.

417. Wilson T., Papahadjopoulos D., Taber R. The introduction of poliovirus RNA into cells via lipid vesicles (liposomes).- Cell, 1979, v.17, p.77-84.

418. Wirtz K.W.A. Transfer of phospholipids between membranes. Biochim.Biophys.Acta, 1974, v.344, p.95-117.

419. Yoshikami S., Noll G.N. Isolated retinas synthesize visual pigments from retinal congeners delivered by liposomes.- Science, 1978, v.200, p.1393-1395.

420. Yuli I., Wilbrandt W., Shinitzky M. Glucose transport through cell membranes of modified lipid fluidity. Biochemistry, 1981, v.20, p.4250-4256.

421. Zborovsky J., Roerdink P., Scherphof G. Leakage of sucrose from phosphatidylcholine liposomes induced by interaction with serum albumin. Biochim.Biophys.Acta, 1977, v.497, N1, p.183.

422. Zetterberg A., Auer G. Proliferative activity and cyto-chemical properties of nuclear chromatin related to local density of epithelial cells. Exper.Cell Res., 1970, v.62, N2, p.262-266.

423. Zilberman J., Lichtenberg D., Gutman Y. The use of phospholipid liposomes for lithium administration. J.Pharm. Pharmacol., 1979, v.31, N9, p.619-621.

424. Zimmerberg J., Cohen F.S., Finkelstein A. Fusion of phospholipid vesicles with planar phospholipid bilayer membranes. I.Discharge of vesicular contents across the planar membrane.- J.Gen.Physiol., 1980a, v.75, p.241-250.

425. Zimmerberg J., Cohen F.S., Finkelstein A. Micromolar Ca^+ stimulates fusion of lipid vesicles with planar bilayers containing a calcium-binding protein. Science, 1980b, v.210, N4472, p.906-908.