Макропористые гидрогели на основе сшитого поливинилового спирта тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.06, кандидат химических наук Артюхов, Александр Анатольевич

• Артюхов, Александр Анатольевич
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Артюхов, Александр Анатольевич

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Полимерные гидрогели - основные понятия.

2.2. Вода в гидрогелях.

2.3. Структура пористых полимерных материалов. 14 2.4 Структура и свойства поливинилового спирта.

2.4. Структурообразование в растворах поливинилового спирта

2.4.1. Физические гидрогели поливинилового спирта.

2.4.2. Использование низкомолекулярных сшивающих агентов для создания гидрогелей поливинилового спирта.

2.4.3. Радиационная сшивка гидрогелей поливинилового спирта.

2.4.4. Использование химически модифицированного поливинилового спирта для создания полимерных гидрогелей.

2.5. Гелеобразование в замороженных системах

2.5.1. Состав замороженной системы

2.5.2. Жидкая фаза в замороженных системах

2.5.3.Невымороженный растворитель

2.3.4. Гидрогели, образующиеся при реакциях в условиях криоструктурирования.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

3.1. Исследование процесса модификации поливинилового спирта глицидилметакрилатом.

3.2. Исследование закономерностей гелеобразования в растворах модифицированного поливинилового спирта в криоусловиях.

3.2.1. Влияние концентрации макромера в реакционной системе.

3.2.2. Влияние концентрации инициатора.

3.2.3. Влияние температуры.

3.2.4. Влияние степени замещения макромера.

3.3. Исследование морфологии образующихся полимерных макропористых гидрогелей.

3.3.1. Влияние концентрации макромера в реакционной смеси на структуру образующихся гидрогелей.

3.3.2. Влияние температуры синтеза на структуру образующихся гидрогелей.

3.3.3. Влияние концентрации инициатора на структуру образующихся гидрогелей.

3.4. Определение плотности пространственной сетки гидрогелей.

3.5. Исследование набухаемости полученных гидрогелей.

3.6. Взаимодействие полученных гидрогелей с тканями организма и примеры их практического применения.

3.6.1. Исследование токсичности полученных гидрогелей.

3.6.2. Примеры практического применения полученных гидрогелей. 89 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

4.1. Характеристика исходных веществ.

4.2. Исследование процесса модификации поливинилового спирта

4.2.1 Модификация поливинилового спирта.

4.2.2 Анализ состава модифицированного полимера.

4.2.3. Расчет констант скорости реакции модификации поливинилового спирта.

4.3. Синтез и исследование полимерных макропористых гидрогелей. 102 4.3.1 Синтез полимерных макропористых гидрогелей 102 4.3.2. Определения плотности пространственной сетки гидрогелей

4.3.3. Исследование морфологии поверхности полимерных гидрогелей.

4.3.4. Исследование осмотических свойств, полученных гидрогелей.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Макропористые гидрогели на основе сшитого поливинилового спирта»

Актуальность работы. Полимерные гидрогели, в силу ряда уникальных свойств, позволяющих использовать в их различных областях, связанных с медициной и биотехнологией, привлекают в последние десятилетия все большее внимание исследователей. Особое место среди полимерных гидрогелей занимают, так называемые, макро - и суперпористые полимерные гидрогели, то есть гидрогели, обладающие системой пор с размерами в десятки и сотни микрометров. В литературе описаны примеры их применения в качестве компонентов систем с контролируемым выделением лекарственного вещества, подложек для клеточной инженерии, материалов для имплантатов и пломбировочных материалов в хирургии, высокоэффективных сорбентов для разделения и очистки белков, и т.п.

Одним из наиболее доступных типов макропористых гидрогелей, являются, так называемые, криогели поливинилового спирта-полимера, обладающего высокой биосовместимостью и широко применяющегося в медицине на протяжении уже десятков лет, которые образуются при замораживании и последующем оттаивании растворов этого полимера.

Однако, как правило, такие системы являются термически нестабильными и разрушаются, переходя в водный раствор при нагревании, и, в силу этого, требуют дополнительного закрепления структуры, зачастую, с использованием токсичных сшивающих реагентов или жесткого излучения. Все это, в значительной степени, усложняет и удорожает технологию получения таких пористых систем, а также существенно ограничивает возможные сферы их применения.

Поэтому разработка методов и подходов, позволяющих получать на основе поливинилового спирта макропористые гидрогели, лишенные этих недостатков представляет значительный интерес.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось получение макропористых полимерных гидрогелей на основе « поливинилового спирта, обладающих, по сравнению с широко известными физическими криогелями поливинилового спирта, повышенной термической стабильностью и степенью развитости пор.

Для выполнения данной цели были поставлены следующие задачи:

- синтез модифицированного полимера на основе поливинилового спирта, содержащего в боковой цепи группы, содержащие кратные связи в количестве достаточном для образования трехмерной пространственной структуры в результате сшивки по свободно-радикальному механизму в присутствии инициаторов радикальной полимеризации, при незначительном изменении физико-химических и токсических свойств модифицированного полимера, по сравнению с исходным поливиниловым спиртом; исследование процесса модификации поливинилового спирта;

- изучение влияния различных факторов на процесс образования сшитых макропористых гидрогелей на основе модифицированного поливинилового спирта в воднозамороженных растворах и выявлении оптимальных условий синтеза;

- исследование свойств, строения, макроструктуры образующихся макропористых гидрогелей;

- исследование санитарно-токсикологических характеристик полученных гидрогелей, изучение возможности их практического применения;

Обоснование выбора объектов исследования. Конкретным объектом исследования стали макропористые полимерные гидрогели на основе метакриловых производных поливинилового спирта, образующиеся в результате радикальной полимеризации в воднозамороженных растворах.

Использование высокомолекулярного макромера, содержащего в боковой цепи двойные связи, позволило получать химически сшитые гидрогели, устойчивые, в отличие от физических гидрогелей поливинилового спирта, даже при температуре близкой к точке кипения воды.

Проведение же процесса сшивки в условиях криоструктурирования позволило получать после оттаивания системы, обладающие развитой системой сообщающихся пор с размерами в десятки и сотни микрометров.

Научная новизна. В работе впервые в условиях криоструктурирования синтезированы макропористые полимерные гидрогели на основе поливинилового спирта устойчивые к нагреванию и не требующие дополнительной фиксации структуры. Исследован процесс сшивки в воднозамороженных растворах. Выявлено влияние условий синтеза на морфологию поверхности образующихся систем, изучены деформационные свойства и проведена оценка параметров пространственной сетки полученных гидрогелей. Выявлена корреляция между степенью развитости пористости полученных полимерных гидрогелей и их осмотическими свойствами. Продемонстрирована высокая биосовместимость полученных макропористых систем.

Практическая значимость работы. В работе синтезированы новые макропористые полимерные гидрогели поливинилового спирта, обладающие высокой термической стабильностью, значительным водопоглощением, незначительно изменяющимся при изменении внешних условий - ионной силы и величины водоррдного показателя раствора, высокой биосовместимостью, достаточной механической прочностью.

Предложено использовать разработанные макропористые гидрогели в качестве основы для материала для замещения дефектов мягких тканей и послеоперационных полостей, а также как компонент системы для лечения ран и ожогов.

2. Обзор литературы.

В последние десятилетия большое внимание привлекают материалы медико-биологического назначения (materials for medico-biological use), т.е. материалы, предназначенные для создания изделий, устройств и препаратов, применяемых в медицине, биотехнологии, сельском хозяйстве и т.п. и используемых для обеспечения и оптимизации жизнедеятельности человека, животных, растений, микроорганизмов. Во многих случаях материалы медико-биологического назначения (биоматериалы, biomaterials) функционируют в непосредственном взаимодействии с живыми тканями и клеточными объектами [1].

В качестве биоматериалов используются полимеры, металлы, неорганические материалы, материалы на основе углерода и композиты на их основе. Следует отметить, что с точки зрения ассортимента и возможностей использования полимерные биоматериалы значительно превосходят другие виды биоматериалов [1].

Работы в области полимерных биоматериалов являются частью чрезвычайно широкой и важной области - химии и технологии полимеров медико-биологического назначения.

Заключение диссертации по теме «Высокомолекулярные соединения», Артюхов, Александр Анатольевич

5. Выводы.

1. Путем радикального сшивания водорастворимого поливинилового спирта, модифицированного глицидилметакрилатом, в вводно-замороженных системах получены низкотоксичные пористые гидрогели пригодные для медико-биологического использования.

2. Исследованием процесса модификации поливинилового спирта глицидилметакрилатом, выявлены условия, позволяющие синтезировать полимеры с заданной степенью замещения, в том числе, растворимые в воде.

3. Установлено, что скорость сшивания модифицированного поливинилового спирта, в вводно-замороженных системах в присутствии инициирующей системы персульфат калия -тетраметилэтилендиамин и выход гидрогеля сшитого полимера достигают максимальных значений в диапазоне температур -12 - -18°С. При этом прочностные свойства гидрогеля являются оптимальными при количестве ненасыщенных заместителей 2,5-5 мол.%.

4. Электронно-микроскопическими исследованиями установлено, что полученные гидрогели представляют собой системы с развитой пористой структурой и размером открытых пор от единиц до сотен микрометров, причем общая пористость и средний размер пор снижаются по мере роста концентрации полимера и снижения температуры процесса, но практически не зависят от концентрации инициатора в реакционной смеси. Путем анализа кривых «напряжение-деформация» продемонстрировано, что на частоту сшивки полимерной матрицы гидрогелей в наибольшей степени оказывает влияние количество введенного инициатора и в меньшей степени - концентрация полимера и температура образования гидрогеля.

5. Показано, что синтезированные макропористые полимерные гидрогели характеризуются высоким значением равновесной набухаемости, слабо зависящей от ионной силы и величины рН раствора. 6. Установлена высокая степень биосовместимости полученных полимерных систем и показана возможность их применения в качестве имплантатов и компонентов материалов для обработки кожных поражений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Артюхов, Александр Анатольевич, 2006 год

1. Shtilman M.I. Immobilization on polymers. VSP: Utreht-Tokyo.- 1993. -479 p.

2. Wichterle O., Lim D. Hydrophilic gels in biologic use // Nature.- 1960.-Vol. 185.- P. 117.

3. Hoffman A.S. Hydrogels for biomedical applications // Advanced Drug Delivery reviews.- 2002.- Vol.43.- P. 3-12.

4. Drury J. L., Mooney D. J. Hydrogels for tissue engineering: scaffold design variables and applications// Biomaterials.- 2003.- Vol. 24.- P. 4337-4351

5. Galaev I.Yu., Mattiasson B. 'Smart' polymers and what they could do in biotechnology and medicine// Tibtech August.- 1999.-Vol. 17.- P. 335-340

6. Ruel-Gariepy E., Leroux J. In situ-forming hydrogels—review of temperature-sensitive systems // European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics.- 2004.- Vol. 58.- P. 409-426

7. Hydrogels in medicine and pharmacy. In: Peppas NA, editor. Properties and applications, V. 3. Boca Raton: CRC Press, 1987

8. Muhlebach A, Muller B, Pharisa C, Hofmann M, Seiferling B, Guerry D. // Journal of Polymer Science A: Polymer Chemistry.- 1997.- V.35.- P. 36033611

9. Папков С.П. Студнеобразное состояние полимеров. М., 1974,256 с.

10. Prestwich G.D., Marecak D.M., Marecak J.F., Vercruysse K.P., Ziebell M.R. Controlled chemical modification of hyaluronic acid // J. Controlled Release.- 1998.- Vol. 53.- P. 93-103.

11. Nakamae K., Miyata Т., Jikihara A., Hoffman A.S. Formation of poly(glucosyloxyethyl methacrylate)-concanavalin A complex and its glucose sensitivity // J. Biomater. Sci. Polym. Ed.- 1994.- Vol. 6.- P. 79-90.

12. Morris J.E., Fischer R., Hoffman A.S. Affinity precipitation of proteins with polyligands // Anal. Biochem.- 1993.- Vol. 41.- P. 991-997.

13. Энциклопедия полимеров. M., 1974г., Т.2.

14. А.А. Тагер. Физикохимия полимеров. М., Химия. 1973

15. Chen J.,Park P., Park K. // Biomed. Mater. Res. -1999.- V. 44.- P. 53-62

16. Chen J, Blevins W.E, Park H, Park K. // J Controlled Rel.- 2000.- V.64.-P.39-51

17. Shapiro L., Cohen S. Novel alginate sponges for cell culture and transplantation // Biomaterials.- 1997.- V.l 8.- P. 583-593

18. Horâk D., Lednicky F., Bleha M. Effect of inert components on the porous structure of 2-hydroxyethyl methacrylate-ethylene dimethacrylate copolymers // Polymer.- 1996.- V. 37.- P. 4243-4249

19. Oxley, Corkhill P.H., Fitton J.H., Tighe B.J. Macroporous hydrogels for biomedical applications: methodology and morphology // Biomaterials.- 1996.-V.14.- P. 1064-1072V

20. Michâlek J., Pradny M., Artyukhov A., Slouf M., Smetana K. Macroporous hydrogels based on 2-hydroxyethyl methacrylate. Part 3. Hydrogels as carriers for immobilization of proteins.// J. Mat. Sci: Material in Medicine.- 2005.- V. 16, № 8.- P. 783-786

21. Lozinsky V.I., Plieva F.M., Galaev I.Yu. The potential of polymeric cryogels in bioseparation // Bioseparation.- Volume Date 2001.- 10(4/5).- P. 163188

22. Штильман М.И., Артюхов A.A., Козлов B.C. , Тсатсакис A.M. Эпоксидсодержащие пористые гидрогели поли- (2-гидроксиэтил-метакрилата): исследование влияния условий синтеза // Пластические массы.- 2002.- № 7.- С. 24-28

23. Джейл Ф.Х. Полимерные монокристаллы. JL: Химия, 1968

24. Энциклопедия полимеров // М.: Советская энциклопедия, Т.1.-1972

25. Хувинг Р., Ставерман А. Химия и технология полимеров // J1. Химия.-1965

26. Калиновски Е., Урбанчик Г.В. Химические волокна // М.: Химия.-1966

27. Лосев И.П., Тростянская Е.Б. Химия синтетических полимеров // М.: Химия.-1984

28. Штильман М.И., Коршак В.В. Полимеры в процессах иммобилизации и модификации природных соединений // М.: Наука.-1984

29. Hickey A.S., Peppas N.A. Mesh size and diffusive characteristics of semi crystal line polyvinyl alcohol) membranes prepared by freezing/thawing techniques // J. Memb. Scie.- 1995.- V. 107.- P. 229-237

30. Stammen J.A., Williams S., Ku D.N., Guldberg R.E. Mechanical properties of a novel PVA hydrogel in shear and unconfined compression // Biomaterials.- 2000, V. 22.- P. 799-806

31. Hassan C.M., Ward J.H., Peppas N.A. Modeling of crystal dissolution of poly (vinyl alcohol) gels produced by freezing/thawing processes // Polymer.-2000.- V. 41.- P.6729-6739

32. Hernández R., Sarafian A., López D., Mijangos C. A reappraisal of the 'thermoreversible' gelation of aqueous polyvinyl alcohol) solutions through freezing-thawing cycles // Polymer.- 2002.- V. 43.- P. 5661-5663

33. Lee P.I. Novel approach to zero-order drug delivery via immobilized nonuniform drug distribution in glassy hydrogels // J. Pharm. Sci.- 1984.- V.73.-P. 1344-1347

34. Ijima H., Ohchi Т., Ono Т., Kawakami K. Hydroxyapatite for use as an animal cell culture substratum obtained by an alternate soaking process // Biochemical Engineering Journal.- 2004.- Vol. 20.- P. 155-161

35. D. Darwis, P. Stasica, M.T. Razzak, J. M. Rosiak. Characterization of poly(vinyl alcohol) hydrogel for prosthetic intervertebral disc nucleus // Radiation Physics and Chemistry.- 2002.- V. 63.- P. 539-542

36. Ruiz J., Mantecón A., Cadiz V. Synthesis and properties of hydrogels from poly (vinyl alcohol) and ethylendiaminetetraacetic dianhydride // Polymer.- 2001.- V. 43.- P. 6347-6354

37. Kim S.J., Park S. J., Kim S. I. Swelling behavior of interpenetrating polymer network hydrogels composed of poly (vinyl alcohol) and chitosan // Reactive & Functional Polymers.- 2003.- V. 55.- P. 53-59

38. Pereira A., Vasconcelos W., Oréfíce R. Novel multicomponent silicate-poly(vinyl alcohol) hybrids with controlled reactivity // Journal of Non-Crystalline Solids.- 2000.- V. 273.- P. 180-185

39. Rosiak J.M., Ulanski P. Synthesis of hydrogels by irradiation of polymers in aqueous solution // Radiation Physics and Chemistry.- 1999.- V. 55.- P. 139151

40. Park K. R., Nho Y. C. Synthesis of hydrogels by irradiation of polymers in aqueous solution // Radiation Physics and Chemistry.- 2003.- V. 67.- P. 361365

41. M. T. Razzak, D. Darwis, Z. Sukirno. Irradiation of polyvinyl alcohol and polyvinyl pyrrolidone blended hydrogel for wound dressing. Radiation Physics and Chemistry.- 2001.- V. 62.- P. 107-113

42. Zhai M., Yoshii F., Kume T., Hashim K. Syntheses of PVA/starch grafted hydrogels by irradiation // Carbohydrate Polymers.- 2002.- V. 50.- P. 295-303

43. Yamamoto Y., Tagawa S. Radiolytically prepared polyvinyl alcohol) hydrogel containing a-cyclodextrin // Radiation Physics and Chemistry.- 2004.-V. 69.- P. 347-349

44. Yih-Wen Gung, Shyh Ming Kuo, Yng-Jiin Wang. Effect of PVA-AA on dentine bonding of HEMA // Biomaterials.- 1997.- V. 18.- P. 367-371

45. Martens P., Anseth K.S. Characterization of hydrogels formed from acrylate modified polyvinyl alcohol) macromers // Polymer.- 2000.- V. 41.7715-7722

46. Schmedlen R. H., Masters K. S., West J. L. Photocrosslinkable polyvinyl alcohol hydrogels that can be modified with cell adhesion peptides for use in tissue engineering //Biomaterials.- 2002.- V. 23.- P. 4325^1332

47. Gunanan C.M., Storie В., Smith P., Knight P.M // Polym.Mater.Sci.Eng.-1993.-Vol. 69.- P. 506-507.

48. Nuttelman C. R., Henry S. M., Anseth K. S. Synthesis and characterization of photocrosslinkable, degradable poly(vinyl alcohol)-based tissue engineering scaffolds. // Biomaterials.- 2002.- V. 23.- P. 3617-3626

49. Рихтер M., Аугустат 3., Ширбаум Ф. // Избранные методы исследования крахмала. Пер. с нем. М.: Пищ. пром-сть, 1975. С. 14 M.Richter, S.Augustat, F.Schierbaum Ausgewählte Methoden Der Starkchemie. Leipzig: VEB Fachbuchverlag, 1969.

50. Bringham J.E., Gidley M.J., Hoffmann R.A., Smith C.G. // Food Hydrocolloids. 1994. - V. 8, № 3/4.- P. 331-335

51. Tanaka R., Hatakeyama Т., Hatakeyama H. Formation of locust beam hydrogel by freezing-thawing // Polymer International.- 1998,- V. 45, № 1.- P. 118-121.

52. Lozinsky V.l., Damshkaln L.G., Brown C.R.T., Norton I.T. Study of cryostructruring of polymer system XIX. On the nature of intermolecular links in the cryogel oh locust bean gum // Polymer International.- 2000.- V. 49, № 11.-P. 1434-1442.

53. Рогожин C.B., Вайнерман E.C., Лозинский В.И. Образование пространственно-сшитых полимерных структур при замораживанииреагирующей системы //Докл. АН СССР.- 1982.- Т. 263, № . с. 115-121

54. Лозинский В.И., Вайнерман Е.С., Рогожин С.В. А. с. 1008214 СССР // Б.И.- 1983.-№ 12.-С. 1311-38

55. Лозинский В.И., Корнеева М.Н., Вайнерман Е.С., Рогожин С.В. Структурообразование при замораживании полимеризующейся системы, состоящей из винильного и дивинильного мономеров // Докл. АН СССР.-1983.- Т. 270, №1.-С. 101-103.

56. Lozinsky V.I., Korotaeva G.F., Vainerman E.S., Rogozhin S.V. Study of ciyostructumtion of polymer systems: Ш. Ciyostructuration in inorganic media // Colloid & Polymer Sci.-1984.- V. 262, № 8.- P. 617-622

57. Лозинский В.И. Криотропное гелеобразование растворов поливинилового спирта // Успехи химии.- 1998.- Т. 67, № 7.- С. 641.

58. Mori Y., Tokura Н., Yoshikawa М. Properties of hydrogel synthezed by freezing and thawing aqueous polyvinyl alcohol solutions and their applications // J. Materials Sci.- 1997.- У. 32, №2.- P. 491-498.

59. Lozinsky V.I., Damshkaln L.G. Study of cryostructuration of polymer systems. XVII. Polyvinyl alcohol) cryogels: Dynamics of the cryotropic formation // J. Appl. Polym. Sci.- 2000.- V. 77, №9.- P. 2017-2023.

60. Smith P., Pennings A.J. Eutectic crystallization of pseudobinary systems of polyethylene and high melting diluents // Polymer. 1974.- V. 15, № 7.- P. 413-419

61. Берлин А.А., Пенская Е.А. Об образовании активных молекул при криолизе водных растворов крахмала // Докл. АН СССР.- 1956.- Т. 45, № 4.-С. 585-591

62. Kuhn W., Majer Н. Normale und anomale Gefrierpunktserniederung // Angew. Chem.- 1956.- V. 68, № 10.- P. 345-349

63. Jellinek H.H.G., Fok S.Y. // Makromol. Chem.- 1967.- В. 104. № 1, S. 1824.

64. Барамбойм H.K. // Механохимия высокомолекулярных соединений. M: Химия, 1978. С. 275.

65. Bruice T.C., Butler A.R. Catalysis in Water and Ice. II. The Reaction of Thiolactones with Morpholine in Frozen Systems // J. Amer. Chem. Soc.- 1964.-V. 86, № 19.- P. 4104-4108

66. Pincock R.E., Kiovsky Т.Е. Kinetics of reactions in frozen solutions // J. Chem. Educ.- 1966.- V. 43, № 7.- P. 358.

67. Pincock R.E. Reactions in frozen systems //Ace. Chem. Res.- 1969.- V. 2, №4.- P. 97-109

68. Pincock R.E., Kiovsky Т.Е. Bimolecular reactions in frozen organic solutions // J. Amer. Chem. Soc.- 1965.- V. 87, №9.- P. 2072-2085

69. Сергеев Г.Б., Батюк B.A., Степанов М.Б., Сергеев Б.М. Кинетическая модель химических реакций в замороженных растворах // Докл. АН СССР.- 1973.- Т. 213, № 4.- С. 891-899

70. Вода и водные растворы при температурах ниже 0°С. / под ред. Франкса Ф., пер. с англ., Киев: Наукова думка, 1985. 387 с. Water and Aqueous Solutions at Subzero Temperatures. F.Franks editor. New York -London: Plenum Press, 1982.

71. Katayama S., Fujiwara S. NMR Study of the freezing/thawing mechanism143of water in Polyacrylamide gel // J. Phys. Chem.- 1980.- V. 84, № 18.- P. 23202327

72. Suzuki E., Nagashima N. // Bull. Chem. Soc. Japan.- 1982.- V. 55, №9.-P. 2730-2737

73. Gusev D.G., Lozinsky V.l., Vainerman E.S., Bakhmutov V.l. Study of the1. О nfrozen water-poly(vinyl alcohol) system by H and С NMR // Magn. Res. in Chem.- 1990-. V. 28, № 7.- P. 651-660

74. Kuntz I.D. Hydration of macromolecules. III. Hydration of polypeptides // J. Amer. Chem. Soc.-1971.- V. 93, № 2.- P. 514-522

75. Ogino К., Sato H. NMR characteriszation of styrene-divinylbenzene gel beads using freezing point depression of benzene // J. Polym. Sei., Polym. Phys.-1995.- V. 33, №3.- P.445-452

76. Horii F., Masuda K., Kaji H. CP/MAS ,3C NMR Spectra of Frozen Solutions of Polyvinyl alcohol) with Different Tacticities // Macromolecules.-1997.- V. 30, № 8.- P. 2519-2523

77. Masuda K., Horii F. CP/MAS I3C NMR Analyses of the Chain Conformation and Hydrogen Bonding for Frozen Polyvinyl alcohol) Solutions //Macromolecules.- 1998.- V.31,№ 17.- P. 5810-5818

78. Mikhalev O.I., Serpinski M., Lozinsky V.l., Kapanin P.V., Chkeidze I.I., Alfimov M.V. // Cryo-Letters.-1991.- V. 12, № 4.- P. 197-203.

79. Mikhalev O.I., Yakovleva I.V., Trofimov V.l., Shapiro A.B. // Cryo-Letters.- 1985.- V.6, № 4.- P. 245-255

80. Михалев О.И., Каплан A.M., Трофимов В.И., Тальрозе B.JI. Состояние воды в замороженных водно-солевых растворах полимеров // Докл. АН СССР.- 1986.- Т. 287, № 2.- С. 385-389

81. Mikhalev O.I., Karpov I.N., Kazarova Е.В., Alfimov M.V.The effect of crystallization of the dispersion phase in emulsions on the rate of interfacial reactions // Chem. Phys. Lett.- 1989.- V. 164, № 1.- P.96-102

82. Андроникашвили Э.Л. // Биофизика.- 1972.- Т. 17, № 6.- С. 1068-1074

83. Pouchly J., Biros J., Benes S. // Makromol. Chem.- 1979.- Vol. 180, №3.1441. P. 745-749

84. Nakamura K., Hatakeyama T., Hatakeyama H. Relationship between hydrogen bonding and bound water in polyhydroxylstyrene derivates // Polymer.- 1983.- V. 24, №7.- P. 871-876

85. Hatakeyama T., Nakamura K., Hatakeyama H. // Makromol. Chem.-1983.- B. 21, № 6. S. 1265-1274

86. Kamide K., Okajima K., Matsui T., Kobayashi H. // Polym. J.- 1984.- V. 16, №3.-P. 259-263

87. Kumagai H., Nakamura K., Fujiwara J. // Agric. Biol. Chem.- 1985.- V. 49, №11.- P. 3097-3099

88. De Vringer T., Joosten J.G.H., Junginger H.E. A study of the hydration of polyoxyethylene at low temperatures by differential scanning calorimetry // Colloid & Polymer Sei.- 1986.- V. 264, № 7.- P. 623-630

89. Ross Y.H. // J. Food Sei.- 1986.- V. 51, № 3.- P. 684-690.

90. Hatakeyama T., Yoshida H., Hatakeyama H. A differential scanning colorimetry study of the phase transition of the water-sodium cellulosesulphate system // Polymer.- 1987.- V. 28, №8.- P. 1282-1287

91. Lovric T., Pilizota V., Janekovic A. // J. Food Sei.- 1987.- V. 52, №3.- P. 772-780

92. Miyawaki O., Abe T., Yano T. // Agric. Biol. Chem. 1988. V. 52. №12. P. 2995-3001

93. Charoenrein S., Reid D.S. The use of DSC to study the kinetics of heterogeneous and homogeneous nucleation of ice in aqueous systems.// Thermochim. Acta.- 1989.- V. 156, №3.- P. 373-380

94. Simatos D., Blond G. // B kh.: Water Relationships in Food. / no,q pe^. Levine H., Slade L. New-York: Plenum Press.-1991.- P. 139

95. Kerr W.L., Ju J., Reid D.S. Enthalpy of Frozen Foods Determined by Differential Compensated Calorimetry // J. Food Sei.- 1993.- V. 58, № 3.- P. 675-681

96. Goff H.D. The use of thermal analysis in the development of a better145understanding of frozen food stability // Pure & Appl. Chem.- 1995.- V. 67, № 11.- P. 1801-1809

97. Tanaka R., Hatakeyama Т., Hatakeyama H. // В кн.: Gums and Stabilizers for the Food Industry. / под ред. Williams P.A., Phillips G.O. London: Publ. Royal Soc. Chem.- 1998.- P. 43.

98. Hatakeyama H., Hatakeyama T. Interaction between water and hydrophilic polymers // Thermochim. Acta 1998.- V. 308, №1/2.- P. 3-22

99. Tanaka N., Motomura Т., Ishii N., Shimura K., Onishi M., Mochizuki A., Hatakeyama T. Cold crystallization of water in hydrate poly(2-methoxyethyl acrylate) (PMEA) // Polymer International.- 2000.- V. 49, № 12.- P. 1709-1717

100. Podorozhko E.A., Kurskaya E.A., Kulakova V.K., Lozinsky V.I. Cryotropic structuring of aqueous dispersion of fibrous collagen: influence of the initial pH values // Food Hydrocolloids.- 2000.- V. 14, № 2.- P. 111-118

101. Huang L., Nishinari K. Interaction between poly(ethylene glycol) and water as studied by differential scanning calorimetry // J. Polym. Sci., Polym. Phys.- 2001 ,V.39, № 5.- P. 496-502

102. Khokhlov A.R., Khalatur P.O. Protein-like copolymers: computer simulation // Physica A.- 1998.- V. 249 № 2.- P. 249-255

103. Zheligovskaya E.A., Khalatur P.O., Khokhlov A.R. Properties of AB copolymers with a special adsorption-tuned primary structure // Phys. Rev. E.-1999.- V. 59, № 3.- P. 3071-3077

104. Лозинский В.И., Сименел И.А., Курская E.A., Кулакова В.К., Гринберг В.Я., Дубовик А.С., Галаев И.Ю., Маттиассон Б., Хохлов А.Р. // Докл. Акад. Наук.- 2000.- Т. 375, № 5.- С. 637-640

105. Kudela V. // In.: Encyclopedia of Polymer Science and Engineering. New York e.a.: J.Wiley & Sons.- 1987.- V. 7.- P. 783.

106. Tanaka Т. // В кн.: Structure and Dynamics of Biopolymers. / под ред. Nicolini С. M. Dordrecht e.a.: Martinus Nijhoff Publ.- 1987. P. 237.

107. Филиппова O.E. «Восприимчивые» полимерные гели. // Высокомолек. соед. А.- 2000.- Т. 42, № 12.- С. 23-28

108. Шиц А.А. // В кн. Энциклопедия полимеров. М.: Советская энциклопедия.- 1972.- Т. 1.- С. 594.

109. Иржак В.И., Розенберг Б.А., Ениколопян Н.С. // Сетчатые полимеры. М.: Наука.- 1974.- 248 с.

110. Роговина JI.3., Слонимский Г.Л. Природа студнеобразования, структура и свойства студней полимеров // Усп. Химии.- 1974.- Т. 43, №6.-С. 1102.

111. Flory P.J. // В кн.: Encyclopedia of Polymer Science and Engineering. New York e.a.: J.Wiley & Sons.- 1987.- V. 10.- P. 95

112. Kaetsu I., Okubo H., Ito A., Hayashi K. Radiation-induced polymerization of glass-forming system. I. Effect of temperature on the initial polymerization rate //J. Polym. Sci., Polym. Chem.- 1972.- V. 10, № 8.- P. 2203-2209.

113. Kaetsu I. Radiation synthesis of polymeric materials for biomedical and biochemical application // Adv. Polym. Sci.-1993.- V. 105.- P. 81-89

114. Kaetsu I, Ito A., Hayashi K. Radiation-induced polymerization of glass-forming system. VI. Polymerization rate at higher conversion in binary system //J. Polym. Sci., Polym. Chem.- 1973.-V. 11, №8.- P. 1811-1818

115. Yoshida M., Kumakura M., Kaetsu I. Immobilization of enzymes by radiation-induced polymerization of glass-forming monomers: 1. Immobilization of some enzymes by poly(2-hydroxyethyl methacrylate // Polymer.- 1979, V. 20.- №1, P. 3-8

116. Yoshida M., Kumakura M., Kaetsu I. Immobilization of enzymes by radiation-induced polymerization of glass-forming monomers: 2. Effects of cooling rate and solvent on porosity and activity of immobilized enzymes // Polymer.- 1979.- V. 20, №1.- P. 9-12.

117. Каргин В.А., Кабанов В.А. Полимеризация в структурированных системах // ЖВХО.- 1964.- Т. 9, № 6.- С. 602

118. Nambu М. // Kobunshi Ronbunshu.-1990.- V. 47, № 9.- P. 695.

119. Kaetsu I., Kumakura M., Yoshida M. Enzyme immobilization by radiation polymerization of 2-hydroxyethyl methacrylate at low temperature //147

120. Biotechnol. and Bioeng.- 1979.- V. 21, №5.- P. 847-850.

121. Fujimura T., Kaetsu I. // Z. Naturforsch.- 1982.- B. 37, № 2.- S. 102-107

122. Kumakura M., Kaetsu I. // J. Appl. Biochem.- 1983- V. 5, № 3.- P. 165171

123. Kumakura M., Kaetsu I. // J. Appl. Biochem.- 1983- V. 5, № 4/5.- P. 348355

124. Fujimura T., Kaetsu I. // Appl. Biochem. Biotechnol.- 1983.- V. 8, №2.-P. 145-150.

125. Kumakura M., Kaetsu I. // J. Chem. Technol. Biotechnol.- 1983.- V.33B, №2.- P. 95-102.

126. Kumakura M., Kaetsu I. Immobilization of microbial cells on cellulose-polymer surface by radiation polymerization // J. Appl. Polym. Sci.- 1983.-V. 28, № 12.- P. 3759-3763.

127. Kaetsu I., Kumakura M., Kikuchi S., Adachi S., Suzuki M. // Z. Naturforsch.- 1983.- B. 38, № 9/10.- S. 812-820

128. Fujimura T., Kaetsu I. // Int. J. Appl. Radiat. Isotop.- 1983.- V. 34, №6.-P. 929-935

129. Kumakura M., Kaetsu I. Behavior of enzyme activity in immobiled proteases // Int. J. Biochem.- 1984.- V. 16, № 11.- P. 1159-1164

130. Kumakura M., Kaetsu I. // Polymer J.- 1984.- V. 16, № 2.- P. 113-119.

131. Kumakura M., Kaetsu I. Immobilization of celluase using porous polymer matrix // J. Appl. Polym. Sci.- 1984.- V. 29, № 9.- P. 2713-2720

132. Kumakura M., Kaetsu I., Kobayashi T. Properties of thermolysin immobilized in polymer matrix by radiation polymerization // Enzyme Microb. Technol.- 1984.- V. 6, № 1.- P. 23-26

133. Kumakura M., Kaetsu I. Immobilization of enzymes masks their active site //Bioscience Reports.- 1984.- V. 4, № 3.- P. 181-189

134. Kumakura M., Kaetsu I, Nisizawa K. Cellulase production from immobilased growing cell composites prepared by radiation polymerization // Biotechnol. Bioeng.- 1984, V. 26, №1, P. 17-25

135. Kumakura M., Kaetsu I. // Process Biochem.- 1984.- V. 19, № 3.- P. 124131

136. Fujimura T., Kaetsu I. // Z. Naturforsch.- 1985.- B. 407, № 7/8.- S. 576580

137. Kumakura M., Kaetsu I., Nisizawa K. // Biotechnol. Appl. Biochem.-1986.- V. 8, №2/3.- P. 195-201

138. Kumakura M., Kaetsu I. // Process Biochem.- 1988.- V. 23, № 2.- P. 5162

139. Tamada M., Kasai N., Kaetsu I. Effect of structure of polymer support on the growth of Sporotrichum cellulophilum immobilized by polymerization inducted bygamma rays // Biotechnol. Bioeng.- 1988.- V. 32, №3.- P. 386-393

140. Kumakura M., Kaetsu I. Porous substances immobilizing enzymes with polymer matrix // J. Appl. Polym. Sci.- 1989, V. 37, № 8.- P. 2229-2236

141. Kumakura M. //J. Mol. Catal. B. Enzym.- 1995.- V. 1, № 1.- P. 11-15

142. Kaetsu I. Biomedical materials, devices and drug delivery systems by radiation techniques // Radiat. Phys. Chem.- 1996.- V. 47, № 3.- P. 419-425

143. Higa O.Z., Kumakura M. Preparation of polymeric urease discs by an alectron beam irradiation technique // Biomaterials.- 1997.- V. 18, № 9.- P. 697701

144. Kumakura M. Preparation method of porous polymer materials by radiation technique and its application // Polym. Adv. Technol.- 2001.- V. 12, №7.- P. 415-421

145. Sutani K., Kaetsu I, Uchida K. The synthesis and the electric-responsiveness of hydrogels entrapping natural poly electrolyte // Radiat. Phys. Chem.- 2001.- V. 61, №1.- P. 49-54

146. Fujimura T., Kaetsu I. Nature oh yeast cell immobilized by radiation polymerization // Biotechnol. Bioeng.- 1987.- V. 29, № 2.- P. 171-177

147. Kumakura M., Kaetsu I. // Makromol. Chem.- 1983.- B. 184, № 9.- P. 1831-1838

148. Yoshi F., Kaetsu I. // Appl. Biochem Biotechnol.- 1983, V. 8.- № 2.- P.149115.122

149. Kumakura M., Kaetsu I. Effect of the polymer matrix on the thermal stability of immobilized trypsin // J. Mol. Catal.- 1984.- V. 23, № 1.- P. 1-8

150. Kumakura M., Kaetsu I. // J. Chem. Technol. Biotechnol.- 1984.- V. 34B, №1.- P.39-44

151. Piskin K., Area E., Piskin E. // Appl. Biochem. Biotechnol.- 1984.- V. 10, №1.- P. 73-60

152. Shtilman M.I., Ostaeva G.Yu, Artyukhov A.A., Tsatsakis A.M., Kozlov V.S. Epoxy-containing porous hydrogels of acrylamide: the influence of synthesis conditions // International Polymer Science and Technology.- 2003.-V. 30, №1.- P. 47-52

153. Штильман М.И., Остаева Г.Ю., Артюхов А.А., Тсатсакис A.M., Козлов B.C. Эпоксидсодержащие пористые гидрогели акриламида: исследование влияния условий синтеза // Пластические массы.- 2002.-№.3.- С.25-28

154. Tighe В J. // В сб. Proceedings of the 3rd Internat. Conf. on Diffusion in Polymers, York, UK, 13-15 February.-1991 .- P. 11

155. Righetti P.O., Brost B.S.W., Snyder R.S. // J. Biochem. Biophys. Meth.-1981.- V. 4, №5/6.- P. 347-355.

156. Гордон А., Форд P. // Спутник химика пер. анг..- М: «Мир».- 1976,546 с.

157. Торутина Л.И., Позднякова Ф.О. // Спектральный анализ полимеров.- Л.: «Химия».- 1986.- 250 с.

158. Штильман М.И., Артюхов А.А., Козлов B.C., Тсатсакис А.М. Сополимеризация гидроксиэтилметакрилата в криоусловиях // Деп. ВИНИТИ.-2002. 1202 от 27.06.2002.- 26 с.

159. Штильман М.И., Остаева Г.Ю., Артюхов А.А., Тсатсакис A.M., Козлов B.C. Сополимеризация акриламида с эпоксидсодержащими соединениями в криоусловиях// Деп. ВИНИТИ.-2002. 1203 от 27.06.2002, 26 с

160. Козлов B.C. Эпоксидсодержащие криогели 2-гидроксиэтил-метакрилата // Дис. канд. хим. наук. М.: РХТУ, 2003, 136 с.

161. Артюхов А.А., Штильман М.И., Чалых А.Е., Семенчук О.В., Тсатсакис A.M. Криогели ионогенных мономеров // Пластические массы.-2006.-№2.- С. 21-25

162. Habbs P.V. // Ice physics.- Oxford, 1974.- 211 p.

163. Чалых A.E. // Структура, кинетика набухания и деформационно151прочностные свойства гранул ПВС.- М.: РХТУ им. Д.И. Менделеева.-1996.-81 с.

164. Артюхов А.А., Штильман М.И., Тсатсакис A.M., Козлов B.C., Остаева Г.Ю. Эпоксидсодержащие пористые гидрогели акриламида: исследование физико-химических характеристик // Пластические массы.-2002.-№9.-С. 32-37

165. Черонис Н.Д., Ma Т.С. // Микро- и полумикрометоды органического функционального анализа пер. с англ..- М.: «Химия»,- 1973.- 576 с.