Маркеры, характеризующие гликемический статус и развитие нейрональных нарушений у пациентов с сахарным диабетом 1-го типа тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Лотош, Наталья Юрьевна

• Лотош, Наталья Юрьевна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Лотош, Наталья Юрьевна

Сокращения и термины............................................................................................4

I. ВВЕДЕНИЕ........................................................................................................5

II. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.....................................................................................9

1. Введение..........................................................................................................9

2. Сахарный диабет 1-го типа: причины возникновения и иммунологические аспекты развития..............................................................................................................10

2.1. Экспериментальные модели для исследования СД1..........................................11

2.1.1. Токсический диабет......................................................................11

2.1.2. Спонтанный диабет......................................................................12

2.2. Стадии развития диабета 1-го типа.............................................................12

2.2.1. Инсулиты .................................................................................14

2.2.2. Медиаторы воспаления.................................................................15

2.2.3. Аутоантитела при диабете 1-го типа..................................................17

2.3. Диагностика сахарного диабета 1-го типа......................................................18

2.4. Дистальная полинейропатия.....................................................................19

2.5. Нейрональные антитела при СД1 ..............................................................21

3. Структура и функции человеческого сывороточного альбумина (ЧСА)...........................22

3.1. Окислительно-восстановительное состояние альбумина...................................23

3.2. Гликирование альбумина...........................................................................25

3.2.1. Ранние продукты гликирования........................................................26

3.2.2. Конечные продукты гликирования....................................................27

3.3. Гликирование белков плазмы крови.............................................................29

3.3.1. Фибриноген ..............................................................................29

3.3.2. Коллаген....................................................................................30

3.3.3. Ig G..........................................................................................30

3.4. Методы определения гликированного альбумина...............................................31

3.5. Исследование гликированного альбумина.......................................................34

3.5.1. Влияние гликирования и окисления на структуру и свойства

альбумина....................................................................................................34

3.5.2. Исследование сайтов связывания с глюкозой.......................................37

III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.......................................................'.................39

1. Исследование альбумина in vitro и в сыворотке крови..................................................39

2. Формирование групп пациентов с диагнозом СД1......................................................43

3. Определение проинсулина в сыворотке крови детей с СД1...........................................45

4. Электромиографическое исследование (ЭМГ)............................................................45

5. Определение аутоантител к нейрональным белкам в сыворотке детей с СД1.....................46

6. Экспериментальная модель диабета (СТЗ-крысы).......................................................46

7. Статистическая обработка данных..........................................................................47

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ..........................................................................47

1. Содержание проинсулина у детей с диабетом 1 - го типа..............................................47

2. Исследование гликированного альбумина in vitro.......................................................51

2.1. Окислительное гликирование альбумина in vitro.............................................52

2.1.1. Определение содержания кетоамина, SH-групп и карбонильных групп в молекуле альбумина, инкубированного в присутствии физиологических концентраций глюкозы......................................................................................................52

2.1.2. Определение сайтов гликирования в альбумине, предварительно гидролизированном трипсином, методами MALDI -TOF и HPLC/MS/MS...................54

2.1.3. Флуоресценция ЧСА и содержащегося в нём пентозидина...................58

2.1.4. Анионообменная ВЭЖХ различных препаратов альбумина..................61

2.2. Гликирование ЧСА в нефизиологических условиях..........................................64

3. Определение гликированного альбумина в сыворотке крови.........................................68

3.1. Подбор методик для выделения альбумина из сыворотки...................................68

3.2 Определение гликированного альбумина у детей с диабетом 1-го типа..................74

4. Выявление дистальной полинейропатии у детей с диабетом 1 -го типа.............................80

5. Определение аутоантител к нейрональным белкам у детей с диабетом 1 -го типа...............87

6. Определение нейроиальных аутоантител у крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином..............................................................................................90

V. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.................................................................................................94

VI. ВЫВОДЫ.......................................................................................................96

Список опубликованных научных работ по теме диссертации..........................................97

БЛАГОДАРНОСТИ.................................................................................................98

ЛИТЕРАТУРА.......................................................................................................99

Сокращения

ELIBA - enzymelinked boronatc immunoassay

GAD - glutamic acid decarboxylase

(декарбоксилаза глутаминовой кислоты)

HbAIc - гликированный гемоглобин

ИМ А - human mercaptalbumin (человеческий

меркаптоальбумин)

HNA1 - human nonmcrcaptalbuminl

(человеческий немеркаптоальбумин 1)

JAA - insulin autoantibodies (аутоантитела к

инсулину)

IA-2 - аутоантитела к тирозинфосфатазе

ICA - islet cell antibodies (аутоантитела к

островковым клеткам)

LC/MS - liquid chromatography/ mass

spectrometry (жидкостная хроматография/масс-

спектрометрия)

MALDI-TOF - Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization time of flight (времяпролетная матричио-активированная лазерная десорбция/ионизация) МНС - major histocompatibility complex (главный комплекс гисшсовместимости) MS - mass spectrometry (масс-спектрометрия) NOD - none-obese diabetic (диабетические мыши без ожирения)

m/z безразмерная величина, отношение массы и заряда иона

аАТ - аутоантитела

АПК - антигенпрезентирующие клетки ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГФКБ - глиальный фибриллярный кислый

белок

ДНФГ - 2,4-динитрофенилгидразин

ДПН - дистальная полинейропатия

ДТТИ - дитиотриитол

ИЛ - интерлейкин

ИНФ-у - интерферон

ИФА - иммуноферментный анализ

КПГ— конечные продукты гликирования

ОБМ - основной белок миелина

ПААГ - полиакриламидный гель

ПНС - периферическая нервная система

ПЭГ — полиэтиленглиголь

СД1 - сахарный диабет первого типа

СД2 — сахарный диабет второго типа

СТЗ - стрептозотоцин

ТНС - тетразолий нитросиний

ТФУ - трифторуксусная кислота

ФНО - фактор некроза опухолей

ФРН - фактор роста нервов

ЦНС - центральная нервная система

ЧСА - человеческий сывороточный альбумин

ЭМГ - электромиография

Термины

Оксиальбумин - коммерческий ЧСА, в котором содержится 0,4 M SH-групп в 1 M белка (0,4 М/М); Меркаптоальбумин - коммерческий ЧСА, в котором SH-группы восстановлены до 0,7 M в 1 M белка (0,7 М/М);

Супероксиальбумин - коммерческий ЧСА, в которм SH-группы окислены до 0,2 M в 1 M белка (0,2 М/М).

I. Введение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Маркеры, характеризующие гликемический статус и развитие нейрональных нарушений у пациентов с сахарным диабетом 1-го типа»

Актуальность работы

Сахарный диабет первого типа (СД1), или инсулинозависимый диабет является аутоиммунным заболеванием, при котором разрушаются р-клетки поджелудочной железы. СД1 — многофакторное заболевание, механизм возникновения которого до конца не изучен; известно, что его развитию могут способствовать такие факторы окружающей среды, как вирусы, токсины, стресс; так же играет роль генетическая предрасположенность. При данном заболевании необходимы постоянный контроль содержания глюкозы в крови и коррекция инсулинотерапии. Существующие па сегодняшний день маркеры гликемического контроля -содержание глюкозы и гликированного гемоглобина в крови - имеют ряд недостатков, вследствие чего требуется поиск дополнительных маркеров.

СД1 характеризуется рядом осложнений, самым распространенным из которых является дистальная полинейропатия (ДПН) - нарушение структуры и функции периферических нервных волокон. ДПН рассматривается как следствие ухудшения показателей компенсации углеводного обмена.

Итак, ввиду гетерогенности заболевания, вероятности развития множественных осложнений и необходимости тщательного гликемического контроля перед исследователями встают задачи по поиску новых диагностических критериев и маркеров.

Цель работы

Целью нашей работы стал поиск диагностических маркеров и отработка методологии их применения для выявления механизма развития СД1, оценки степени гликирования и окисления альбумина, выделенного из сыворотки крови пациентов с СД1 и для ранней диагностики развития у них нейрональных осложнений.

Задачи работы

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать гликированный человеческий сывороточный альбумин (ЧСА) in vitro:

а) получить препараты ЧСА с различной степенью окисления и гликирования и определить в них содержание кетоамина, карбонильных групп и SM-групп; также исследовать спектры флуоресценции альбумина;

б) проанализировать методом анионобменной ВЭЖХ степень окисления и гликирования ЧСА;

г) определить в гликироваином ЧСА методом LC/MS сайты связывания глюкозы с остатками лизина и аргинина.

2. Исследовать альбумин, выделенный из сыворотки крови детей с СД1:

а) апробировать методику выделения альбумина из сыворотки крови детей с СД1 с помощью аффинной хроматографии на голубом аффи-гсле и определить в нем содержание кетоамипа и SH-rpyrm;

б) проанализировать методом анионообменной ВЭЖХ степень окисления и гликирования выделенного альбумина;

3. Определить содержание проинсулина в сыворотке крови детей с СД1

для оценки частоты встречаемости такого типа СД1, который отличен от аутоиммунного;

4. Выявить наличие дисталыюй полинейропатии (ДПН) у детей с различными сроками

СЩ_

5. Определить аАТ к F(аЬ)2-фрагментам антиидиотипических аАТ к S100, ГФКБ, ОБМ и ФРН в сыворотке крови детей с различными сроками заболевания СД1 и в контрольной группе;

6. Определить аутоантитела (аАТ) к белкам нейрональной ткани S100, ГФКБ, ОБМ и ФРН в сыворотке крови крыс с диабетом, индуцированным стрептозотоцином, а также аАТ к инсулину и уровень глюкозы в крови, как показателей деструкции (З-клечок.

Научная новизна

Проведено систематическое изучение влияния окислительного гликирования на различные характеристики человеческого сывороточного альбумина (ЧСА) in vitro в условиях нормо- и гипергликемии, а также при нефизиологической концентрации глюкозы с учётом особенностей коммерческого альбумина. Было обнаружено, что альбумин, в котором сульфгидрпльные группы частично окислены, подвержен гликировашпо в большей степени, чем ЧСА с нормальным содержанием SH-rpynn.

Разработан метод разделения ЧСА на окисленную и восстановленную фракции с помощью анионообменной хроматографии и предложен показатель (коэффициент отношения площадей пиков флуоресценции), характеризующий глико-окислительный статус белка.

Апробирован модифицированный метод выделения ЧСА из сыворотки крови с помощью аффинной хроматографии на голубом аффи-геле с перспективой использования этого метода в условиях клинической лаборатории. Впервые были изучены следующие свойства ЧСА, выделенном из сыворотки крови детей с СД1 и без нарушения углеводного обмена (контрольная группа): содержание кетоамипа и его положительная достоверная корреляция с HbAlc, содержание SH-rpynn, коэффициент отношения хроматографических пиков, отражающий глико-окислительный статус.

Впервые были исследованы аутоантитела (аАТ) к нейрональным белкам, имеющим различную локализацию в периферической нервной системе и в поджелудочной железе (S100,

ФРН, ОБМ м ГФКБ) в сочетании с СД1 и наличием/отсутствием ДПН. Установили, что повышенный уровень нейроиальных аАТ встречается с высокой частотой (более 30%) в крови детей, больных СД1, и это явление не зависит от продолжительности диабета и наличия ДПН. Поскольку нсйропальные аАТ обнаружены как у детей с ранними сроками диабета, так и со стажем, можно предположить, что эти аАТ сохраняются довольно долго, в отличие от аАТ к компонентам р-клеток поджелудочной железы, которые к моменту манифестации СД1 уже не обнаруживаются. Таким образом, аАТ к нейрональным белкам могут служить как предвестниками развития ДПН, так свидетелями уже происходящих нарушений. Установили, что ДПН встречается у детей с различными сроками заболевания практически с одинаковой частотой. Полученные данные по высокой частоте нейрофизиологических нарушений, не зависящей от компенсации углеводного обмена и продолжительности СД1, позволили предположить участие нейрогенных механизмов в развитии СД1.

При изучении динамики появления нейроиальных аАТ у крыс с диабетом, вызванным СТЗ, обнаружили достоверный подъём аАТ к ГФКБ и ФРН на 5-ый день после введения СТЗ с последующим снижением уровня антител. Кроме того, впервые было установлено, что наравне с аАТ к нейрональным белкам одновременно повышаются аАТ к инсулину. Это может свидетельствовать том, что два патогенетических процесса - гибель Р-клеток и клеток нервной системы — идут одновременно. Поскольку в литературе отмечались нейрофизиологические нарушения у С'ГЗ-крыс (на 3-7 дни после введения СТЗ - в ЦНС, спустя 2 месяца — в ПНС), нейро аАТ можно рассматривать как предвестников развития ДПН.

Практическая значимость работы

Измерение содержания проинсулипа, (а не С-пептида и/или инсулина) может оказаться полезным для выявления механизмов развития СД1.

Для оценки эффективности инсулинотерапии и её коррекции предложены два маркера: содержание кетоампна в ЧСА и коэффициент отношения площадей пиков, полученных при анион-обменной ВЭЖХ (А1/АП), которые могут охарактеризовать глико-окислительное состояние ЧСА. Использование аАТ к нейрональным белкам в качестве диагностических маркеров ДПН позволит предположить развитие данного осложнения без применения ЭМГ (что актуально для детей младшего возраста) и, следовательно, своевременно начинать превентивное лечение.

Основные положения, выносимые на защиту

- систематическое изучение свойств коммерческого препарата альбумина в окисленном и восстановленном состоянии выявило наличие остатков глюкозы. Дальнейшая инкубация с нормальным содержанием глюкозы не сопровождалась увеличением степени гликирования; при повышенном содержании глюкозы происходило увеличение содержания кетоамина, причем в

окисленном альбумине содержание кетоамина возрастало с большей скоростью, чем в восстановленном;

для определения глико-окислительного состояния альбумина предложено использовать коэффициент отношения площадей пиков, полученных методом анионообменной ВЭЖХ с флуоресцентной детекцией;

- содержание кетоамина в альбумине, выделенном из сыворотки детей, больных СД1, хорошо коррелирует с гликированпым гемоглобином, что позволяет рекомендовать его в качества маркера для оценки гликемического состояния больных за более короткий промежуток времени (например, в период нахождения пациента в стационаре);

- определение содержания проинсулина в сыворотке крови детей, больных СД1, способствует уточнению диагноза заболевания;

- одновременно с СД1 развиваются нейрональные нарушения и появляются нейрональные аАТ, которые обнаруживаются также на поздних сроках заболевания.

Апробация работы

Основные положения и результаты диссертационной работы были представлены на:

- XXII зимней молодежной научной школе «Перспективные направления физико-химической биологии и биотехнологии» ИБХ РАН, Москва, февраль 2010;

- Международной научно-практической конференции «Новые концепции механизмов воспаления, аутоимунного ответа и развития опухоли», Казанская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, Казань, май 2010 (два тезиса);

- VI Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития», Москва, март 2011;

- II Всероссийском конгрессе «Инновационные технологии в эндокринологии», Москва, май 2014.

Публикации

По теме диссертационной работы опубликовано 3 научные статьи в журналах, рекомендованных ВАК, 4 тезиса в сборниках докладов научных конференций.

Структура диссертации

Диссертация состоит из введения, литературного обзора, обсуждения результатов, экспериментальной части, заключения, выводов и списка цитируемой литературы, включающего 215 источников. Работа изложена на 116 страницах, содержит 49 рисунков и 15 таблиц.

II. Литературный обзор 1. Введение

Баланс глюкозы в организме регулируется противоположными но действию гормонами инсулином и глюкагопом, продуцируемыми в ß- и а- клетках островков Лангерганса поджелудочной железы соответственно. Основное действие инсулина заключается в снижении концентрации глюкозы в крови. Сахарный диабет это эндокринное заболевание, при котором нарушается углеводный обмен. Диабет характеризуется, прежде всего, хронически высоким уровнем глюкозы, что может привести к серьёзным осложнениям - ангиопатии, ретинопатии, нефропатии, нейропатии и другим, а также к смертельному исходу из-за гипер- или гипогликемии. По данным ВОЗ за 2013 год во всём мире диабетом страдают 347 миллионов человек [1]. Различают два основных типа диабета - сахарный диабет 1-го типа (СД1), или ипсулинзависимый диабет, и сахарный диабет 2-го типа (СД2), или инсулиннезависимый диабет.

Развитие СД2 связано с метаболическими нарушениями, обусловленными снижением количества рецепторов к инсулину в мышцах и жировых клетках, т.е. резистентностью к инсулину [2]. Этот тип диабета чаще всего возникает у пожилых людей, у людей с ожирением. СД1 существенно отличается от СД2 тем, что при СД1 инсулин отсутствует в организме вследствие аутоиммунного разрушения ß-клеток. СД1 также называют ювенильиым диабетом, так как он чаще всего встречается в детском и юношеском возрасте. В России около 3 млн. человек страдает СД2 и около 300 тысяч - СД1.

Однако в последнее время появляются сообщения о том, что диабет — более гетерогенное заболевание, чем существующие первый и второй типы. Немаловажный фактор развития диабета - окружающая среда, подразумевающая и образ жизни, - претерпевает довольно быстрые изменения, что представляется наиболее вероятным объяснением увеличения заболеваемости диабетом у восприимчивых лиц [2, 3]. Многие пациенты имеют генетическую предрасположенность к обоим типам, образуя гибридные формы диабета (например, латентный аутоиммунный диабет взрослых, LADA). Диабет 2-го типа, со своей стороны, постепенно омолаживается - число подростков с ожирением и с диабетом 2-го типа постоянно увеличивается [3, 4].

Итак, на сегодняшний момент существует необходимость понимания механизма возникновения СД1, своевременной диагностики СД1 и осложнений, корректной оценки гликемического статуса.

2. Сахарный диабет 1-го типа: причины возникновения и иммунологические

аспекты развития

СД1 - аутоимунное заболевание, при котором иод действием активированных (т. н. диабетогенных, т.е. направленных против поджелудочной железы) Т-лимфоцитов разрушаются [3-клеткп в островках Лангергапса поджелудочной железы. В период разрушения р-клеток заболевание протекает бессимптомно, а процесс этот может занимать несколько лет. Заболевание диагностируется, когда 90% Р-клеток уже разрушено, и появляются симптомы — потеря веса, жажда, полиурия, запах ацетона изо рта. Возможны также тяжелые состояния -кетоацидоз, кома. В качестве лечения назначается экзогенный инсулин. Причина возникновения аутоиммунной атаки неизвестна. Здесь играют роль совокупность как факторов окружающей среды, таких как вирусная инфекция, стресс, токсины, чак и генетическая предрасположенность [5, 6]. Генетическим факторам придается большое, но не решающее значение в патогенезе СД1. Восприимчивость к СД1 ассоциирована с несколькими генами, расположенными в различных локусах. Наиболее выражено сцепление с генами главного комплекса гистосовмсстимости МНС класса II, в частности, с аллелями НЬА-ОЯ и НЬА-ОС) [7]. В группу высокого генетического риска попадают ближайшие родственники больных СД1, однако, чаще всего заболевают дети с неотягощенной наследственностью по СД1. В нашей практике из 260 детей с СД1 только 4 имели родственников с этим заболеванием. По литературным данным частота встречаемости СД1 у идентичных близнецов составляет 40% [8]. Следовательно, не-генетические факторы также играют важную роль в развитии болезни. Поиск «агента», который мог бы быть причиной аутоиммунной атаки затруднен тем, что между началом процесса и его последствиями — клиническими проявлениями - проходит много времени (месяцы или даже годы). К этому моменту «следы» агента могут быть потеряны.

Вирусам как причине возникновения СД1 в литературе уделено очень много внимания. В качестве кандидатов рассматриваются цитомегаловирус, рокширус и другие [9-11], но наиболее вероятным называют вирус Коксаки В4 из семейства энчеровирусов [12-15]. Самое раннее предположение о связи вируса Коксаки и СД1 датируется 1969 годом. Такой вывод был сделан на основании данных о высоком титре антител к вирусу Коксаки у пациентов с впервые выявленным диабетом по сравнению со здоровыми донорами [16]. В дальнейшем теория была подтверждена более современным методом - ПЦР [17] и на животной модели [13]. Одним из подтверждений данного предположения является факт обнаружения вируса в клетках островков поджелудочной железы [15], [18]. Вирусная теория базируется на способности вирусов к молекулярной мимикрии [19]. Так, было обнаружено сходство в строении белковых эпитопов вирусов и белков Р-клеток - вАО и 1А-2 [20].

Ещё одна пристально изучаемая теория возникновения диабета - нейрональиая.

Ведущие исследователи в этой области, учёные из Канады, опираются на сходство в строении нейрональной ткани и ткани эндокринной части поджелудочной железы, а именно оболочки, окружающей островок Лангерганса, состоящей из шванновских клеток. По этой теории, исследуемой на модельной системе СД1 - мышах со спонтанным диабетом (Non-obese diabetic, NOD-мыши,) шванновские клетки экспрессируют белки, имеющие нейрональную природу: S100P, глиальный фибриллярный кислый белок (ГФКБ) и декарбоксилазу глутаминовой кислоты (GAD). Эш аутоантигены могут являться первичной мишеныо для Т-лимфоцитов, разрушающих Р-клетки [21-23].

В качестве других потенциальных природных факторов рассматриваются бактерии, белки коровьего молока [24, 25], протеины пшеницы [26], недостаточность витамина D [27]. Впрочем, эти теории не получили особого распространения.

2.1. Экспериментальные модели для исследования СД1

Животные модели широко используются для исследования диабета. Ранние опыты с панкреатэктомией у собак подтвердили главную роль поджелудочной железы в гомеостазе глюкозы, что привело к открытию инсулина. Сегодня большинство исследований проводится на грызунах. Нехирургические методы исследования основываются на введении токсинов -стрептозотоципа и аллоксана. Другая модель - врожденный диабет у мышей без ожирения -NOD-мыши. Модельные системы диабета позволяют исследовать осложнения, гестациопный диабет, действие лекарственных препаратов, трансплантацию островковых клеток.

2.1.1. Токсический диабет

Токсический диабет основан на способности некоторых химических веществ вызывать селективную десфукцию панкреатических р-клеток. Стрептозотоцин (рис. 1А) наиболее часто прнменяе1ся для моделирования диабета 1-го типа у крыс. Это производное нитрозомочевины, был выделен из Streptomyces achromogenes, грамм-положительной бактерии, как антибиотик широкого спектра деисишя и противоопухолевый препарат. Стрептозотоцин является мощным алкилирующим агентом и благодаря своей структуре, схожей с молекулой глюкозы, транспортируется внутрь клетки, подавляет функцию пнококиназы, вызывает множественные разрывы в цепи ДНК [28]. Однократное введение стрептозотоципа в большой дозе (70-80 мг/кг веса) или ввдение малых доз (40 мг/кг веса) в течение нескольких дней вызывает инсулинопению и диабет у крыс. На фоне токсического воздействия также имеет место аутоиммунная деструкция Р-клеток, приводящая к инсулитам [28].

Б

А

О

HN

Л

NH

ОН I

он

о

о

о

Рисунок 1. А - молекула стрептозотоцина; Б — молекула аллоксана.

Аллоксап (мезоксалипомочевина, эритровая кислота, 2,4,5,6-пиримидинэтетрон) -обладает способностью избирательно уничтожать ß-клетки, что используется для моделирования СД1 у грызунов. Аллоксан накапливается в ß-клетках посредством поглощения с помощью транспортера GLUT2 глюкозы и вызывает окисление ДНК и белков за счет образования активных форм кислорода. Действие свободных радикалов приводит к деструктивному процессу ß-клеток [29].

На моделях токсического диабета были зафиксированы признаки аутоиммунного диабета - гипоинсулипемия, гипергликемия, появление островковых аутоаитител [30, 31] и характерные для диабета нейрональные нарушения [32-35].

Диабетические мыши без ожирения (ЫСЮ-мыши) также часто используются как модели с медленно развивающимся диабетом, имеющим сходство с диабетом 1 -го типа человека.

ЫСЮ-мыши впервые были выведены для изучения катаракты. Они имеют полиморфизм в гене, который кодирует МПС П. В возрасте 4-5 недель у мышей развивается ипсулит, а затем происходит субклиническая деструкция (3-клеток с образованием инсулитов, т.е. инфильтрации лимфоцитов в область островка. Клинический диабет развивается на 12-30 неделе. У N00-мышей обнаруживаются аутоантитела к инсулину [36, 37] и к островковым клеткам [38] и развиваются нейропатии [39, 40].

2.1.2. Спонтанный диабет

2.2. Стадии развития диабета первого типа

Предпосылками для развития СД1 служат наличие генетической предрасположенности (полиморфизм генов НЬА II класса, кодирующих ОЯ 3, ОЯ 4 и ПС)) и воздействие каких-либо

факторов окружающей среды (вирусная инфекция, стресс, питание, лекарственные препараты). Совокупность этих факторов приводит к запуску аутоиммунного процесса. Схема развитя диабета во времени изображена на рисунке 2.

Большую роль в патогенезе СД1 играет хронический воспалительный процесс. Воспаление при СД1 характеризуется несколькими стадиями [2, 41]:

индукция аутоиммунной атаки против панкреатических ß-клеток. Провоцирующий агент - какой-либо внешний или высвобожденный ß-клетками антиген -захватывается антигеипрезептирующими клетками и презентируется через МНС класса II. Антиген распознается Т-лимфоцитами CD4+, в результате Т-лимфоциты становятся активированными, т.е. диабетогенными;

- образование и развитие инсулита. CD4+ и CD8+ клетки, привлекаемые хемоаттрактантами, мигрируют в поджелудочную железу к очагу воспаления - островку, окружают его, образуя инфильтрат. Воспалительный инфильтрат состоит преимущественно из Т-лимфоцитов (CD8+ клетки численно превосходят CD4+), небольшого количества В-лимфоцитов и макрофагов [42]. В это же время в периферической крови подавляются Т-супрессоры (Treg -регуляторные Т-клетки) и активируются эффекторные Т- лимфоциты (Т -хелперы, или Т-цитотоксические клетки);

- разрушение ß-клеток. К месту воспаления посредством медиаторов воспаления (ИНФ-у, ФНО-а, CXCLI0) привлекаются другие клетки иммунной системы - макрофаги, нейтрофилы, натуральные киллеры. Был предложен Fas/FasL механизм деструкции ß-клеток, т.е. посредством апоптоза. Было показано, что ß-клегка экспрессирует Fas, а инфильтрованные лимфоциты - FasL [42, 43]. Разрушение ß-клеток происходит в доклинический период. В это время в крови можно обнаружить специфические аАТ к компонентам ß-клеток: к декарбоксилазе глутаминовой кислоты (GAD), тирозинфосфагазе (IA-2), инсулину (IAA), островковым клеткам (ICA-2). Эти антитела появляются задолго до манифестации (за несколько лет) и служат единственными иммунологическими маркерами для выявления людей группы риска и прогнозирования заболевания (по увеличению титра). На этой стадии ещё сохраняется нормальная секреция инсулина. Глюкоза остаётся в пределах нормы, но возможно нарушение толерантности;

- цикличность процесса. Сигнал от апоптозных ß-клеток приводит к повторному рекрутированию аутореактивных Т-клеток. При второй волне разрушения ß-клеток в процесс вовлекается перфорин, выбрасываемый цитотоксическими клетками CD8+. Дальнейшее разрушение вновь вызывает высвобождение ß-клеточных антигенов, и иммунологические нарушения принимают выраженный характер, что приводит к прогрессирующему снижению секреции инсулина. Новая волна разрушения ß-клеток является более серьёзной и приводит к

почти полному истощению Р-клеточной массы и, следовательно, полной потери функции. Между тем, аутоиммунное воспаление может стимулировать пролиферацию Р-клеток, так что Р-клеточная масса временно частично восстанавливается. Кроме того, Т-супрессорный ответ иногда может превалировать над Т-эффекторным. Такие «ремиссии» р-клеток случаются на протяжении всего аутореактивного процесса;

- манифестация СД1. В результате остаётся только 10-30% Р-клеточпой массы и тогда СД1 диагностируется - отмечается высокое содержание глюкозы в крови, потеря веса, жажда, полиурия. Остаточная секреция С-пептида при этом может сохраняться. Ремиссия после клинически диагностированного диабета называется «медовый месяц». При полной деструкции Р-клеток аутоантитела в крови не обнаруживаются.

клинические симптомы

несколько дней, несколько дней, месяцы несколько время

месяцев или лет месяцев или лет или годы недель

Рисуиок 2. Сроки развития сахарного диабета 1-го типа.

2.2.1. Инсулиты

Наличие инсулитов, т.е. образование инфильтрата из лимфоцитов вокруг островка, является наглядным доказательством воспалительного процесса непосредственно в очаге. Инсулит можно выявить иммуногистохимическим способом, но подобные исследования островков человека затруднены из-за ограниченной доступности соответствующего материала.

Наличие инфильтрата из макрофагов вокруг островка было показано на экспериментальной модели - Т^ОО-мышах, которым были введены Т-лимфоциты С04+, активированные конкапавалином А (авторы называют такие лимфоциты «диабетогенными»)

[44]. Наглядно развитие инсулита, обусловленного С04+ и С08+ клетками, было продемонстрировано канадскими исследователями. ЖЮ-мышам вводили Т-лимфоциты, активированные ГФКБ [22, 23] (рис. 3). Деструктивному и инвазивному инсулиту предшествовали перииисулит (мононуклеарная инфильтрация клетками СП4+ и СЭ8+ вокруг островков) и периферический инсулит (присутствие лимфоцитов на периферии островков).

£

а

5К

Рисунок 3. Этапы гибели бета-клеток под действием активированных Т-лимфоцитов (диабетогенных) в островках Лангерганса 1ЧОП-мышей [23|.

а - островки Лангерганса окружены шванновскими клетками: выявление антителами к ГФКБ (расположен по периферии островка) и к инсулину (внутри островка);

б- развитие периинсулита у 7-недельных 1\00-мышей — накопление СОЗ+ Т-клеток у границы островка;

в- повреждение оболочки из шванновских клеток у 9-неделы1ых РШП-мышей; г- разрушенные шванновские клетки и пивазивный инсулит у 14-недельных NOD-мыIнeй; д - разрушенный островок (отсутствие ГФКБ и инсулина). Возникновение диабета.

При исследовании аутопсийного материала поджулудочной железы людей с недавно диагностированным СД1 были обнаружены популяции С08+ клеток в превалирующем количестве, в меньшем - СЮ4+, также были обнаружены С068+ (макрофаги), небольшое количество СЮ20+ (В-клетки) и крайне малое - натуральных киллеров [45]. Так же были выявлены дендритные клетки, окружающие островок, наблюдалась экспрессия молекул МНС класса II и гиперэкспрессия МНС класса I. ИНФ-у и хемокиновый лиганд СХСЬЮ выявлялся как в Р-, так и в а-клетках [46].

2.2.2. Медиаторы воспаления

В патогенезе СД1 значительную роль играют медиаторы воспаления, привлекающие различные виды лейкоцитов посредством хемотаксиса в очаг воспаления - островки Лангерганса.

На начальной стадии болезни антигенпрезентируюгцие клетки (АПК) (в основном макрофаги и дендритные клетки) представляют специфические антигены Р-клеток наивным СЭ4+ТН О-лимфоцитам посредством иммунного синапса (с участием пар МНС II - ТСЯ и корецепторных взаимодействий). АПК продуцируют ИЛ-12, который способствует дифференцировке СЭ4+Тп О-лимфоцитов в С04+Тн 1-лимфоциты. Затем СЭ4+ТН I-лимфоциты начинают продуцировать ИНФ-у и ИЛ-2. Эти цитокины стимулируют покоящиеся макрофаги, которые образуют ИЛ-1Р, ФНО-а и активные формы кислорода. Комплексное действие ИЛ-ф,

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Лотош, Наталья Юрьевна, 2015 год

Литература

1. Danaei G., Finucane M.M., Lu Y. et al. National, regional, and global trends in fasting plasma glucose and diabetes prevalence since 1980: systematic analysis of health examination surveys and epidemiological studies with 370 country-years and 2.7 million participants // Lancet. - 2011. - V. 378 (9785). -P. 31-40.

2. van Belle T.L., Coppieters K.T., von Herrath M.G. Type 1 Diabetes: Etiology, immunology, and therapeutic strategies // Physiol Rev. - 2011. - V. 91. - P. 79-118

3. Tuomi Т., Santoro N., Caprio S., Cai M., Weng J., Groop L. The many faces of diabetes: a disease with increasing heterogeneity //Lancet. -2014. - V. 383(9922). P. 1084-1094.

4. Tieh P., Dreimane D. Type 2 diabetes mellitus in children and adolescents // Indian J. Pediatr. 2014.-V. 81(2).-P. 165-169.

5. Egro F.M. Why is type 1 diabetes increasing? // J Mol Endocrinol. - 2013. - V. 51 (1). - P.

1-13

6. Atkinson M.A, Eisenbarth G.S. Type 1 diabetes: new perspectives on disease pathogenesis and treatment // Lancet. - 2001. - V. 358. - P. 221-229

7. Noble J.A., Valdes A.M. Genetics of the HLA region in the prediction of type 1 diabetes // CurrDiabRep. -20U.V. 11(6). - P. 533-42.

8. Jun H.S., Yoon J.W. A New Look at Viruses in Type 1 Diabetes // Diabetes Metab Res Rev.

- 2003. -V. 19(1).-P. 8-31

9. Sadeharju K.., Lonnrot M., Kimpimaki Т., et. al. Enterovirus antibody levels during the first two years of life in prediabeticautoantibody-positive children // Diabetologia. -2001. - V. 44(7). - P. 818-823

10. Banatvala J.E., Bryant J., Schernthaner G., Borkenstein M., Schober E. Coxsackie B, mumps, rubella, and cytomegalovirus specific IgM responses in patients with juvenile-onset insulin-de-pendent diabetes mellitus in Britain, Austria, and Australia // Lancet. - 1985. - V. I. - P. 14091412

11. Blomqvist M., Juhela S., Erkkila S., Korhonen S., Simell Т.. Rotavirus infections and development of diabetes-associated autoantibodies during the first 2 years of life // Clin Exp Immunol. -2002.-V. 128,- P. 511-515

12. Filippi C.M., von Herrath M.G. Viral trigger for type 1 diabetes pros and cons // Diabetes.

- 2008. - V. 57. - P. 2863-2871

13. Jai'dane H., Sané F., Gharbi J., Aouni M., Romond M.B., Hober D. Coxsackievirus B4 and type 1 diabetes pathogenesis: contribution of animal models // Diabetes Metab Res Rev. - 2009. - V. 25(7). - P. 591-603

14. Richer M.J., Horwitz M.S. Coxsackievirus infection as an environmental factor in the etiology of type 1 diabetes // Autoimmun Rev. - 2009. V. 8(7). - R 611 -615

15. Richardson S.J., Willcox A., Bone A.J., Foulis A.K., Morgan N.G. The prevalence of enteroviral capsid protein vpl immunostaining in pancreatic islets in human type 1 diabetes // Diabetologia. - 2009. V. 52(6). - P. 1143-1151

16. Gamble D.R., Kinsley M.L., FitzGerald M.G., Bolton R., Taylor K.W. Viral antibodies in diabetes mellitus // Br Med J - 1969. V. 3. - P. 627-630

17. Clements G.B., Galbraith D.N., Taylor K.W. Coxsackie B virus infection and onset of childhood diabetes // Lancet. - 1995. -V. 346. - P. 221-223

18. Dotta F., Censini S., van Ilalteren A.G., Marselli L., Masini M., et. al. Coxsackie B4 virus infection of beta cells and natural killer cell insulitis in recent-onset type 1 diabetic patients // Proc Natl Acad Sci USA.-2007. V. 104(12).- P. 5115-5120

19. Jai'dane H., Hober D. Role of coxsackievirus B4 in the pathogenesis of type 1 diabetes // Diabetes Metab. - 2008. - V. 34(6 Pt 1). - P. 537-548

20. Honeyman M.C., Stone N.L., Harrison L.C. T-ccll epitopes in type 1 diabetes autoantigen tyrosine phosphatase IA-2: potential fomimicry with rotavirus and other environmental agents // Mol Med. - 1998-V. 4.-P. 231-239

21. Tsui H., Razavi R„ Chan Y., Yantha J., Dosch H.M. Sensing' autoimmunity in type 1 diabetes // Trends Mol Med. - 2007. V. 13(10). - P. 405-413

22. Tsui H., Chan Y., Tang L., Winer S., Cheung R.K., Paltser G., Sclvanantham T., Elford A.R., Ellis J.R., Becker D.J., Ohashi P.S.,Dosch H.M. Targeting of pancreatic glia in type 1 diabetes // Diabetes. - 2008. - V.57(4). - P. 918-928

23. Winer S., Tsui H., Lau A., Song A., Li X., Cheung R.K., Sampson A., Afifiyan F., Elford A., Jackowsk G., Becker D.J., Santamaria R, Ohashi P., Dosch H.M. Autoimmune islet destruction in spontaneous type 1 diabetes is not beta-cell exclusive // Nat Med. -2003.-V. 9(2). - P. 198-205

24. Karjalainen J., Martin J.M., Knip M., Ilonen J., Robinson B.H. A bovine albumin peptide as a possible trigger of insulin-dependent diabetes mellitus // N Engl J Med. - 1992- V. 327. - P. 302307

25. Study design of the Trial to Reduce IDDM in the Genetically at Risk (TRIGR) // Pediatr Diabetes. - 2007. - V. 8. - P. 117-137

26. Norris J.M., Barriga K., Klingensmith G., Hoffman M., Eisenbarth G.S., Erlich H.A.,

Rcwers M. Timing of initial cereal exposure in infancy and risk of islet autoimmunity // JAMA. -2003, V. 290. - P. 1713-1720

27. Mohr S.B., Garland C.F., Gorham E.D., Garland F.C. The association between ultraviolet В irradiance, vitamin D status and incidence rates of type 1 diabetes in 51 regions worldwide // Diabetologia. - 2008.-V. 51,- P. 1391-1398

28. Rees D. A., Alcolado J. C. Animal models of diabetes mellitus // Diabetic Medicine. -2005. V. 22. P. 359-370

29. Писарев В. Б., Сиигур Г. J1., Спасов А. А., Самохина М. П. Клеточная гибель бета-эндокриноцитов панкреатических островков, обусловленная аллоксановой цитотоксичностыо // Бюллетень Волгоградского научного центра РАМН. - 2008. - V. 4. - с. 24-25

30. Панков Ю. А., Кондратьев Я. Ю., Горскова Е А., Кеда Ю. М., Осипова Т. А., Арбузова М. П., Садовникова Н. Е, Федотов Е П. Гипоинсулинсмия, гипергликемия и циркулирующие аутоантитела к островковым клеткам при развитии стрегггозотоцинового диабета у крыс // Пробл. эндокринол. - 1990. - Т. 36. - N. 2. - С. 70-73.

31. Kohnert K.D., Besch W., Schroder D., Ziegler В., Hehrnke В., Fait K., Ziegler M. Detection of antibodies to islet cell and splenic lymphocytes in diabetes-prone BB and adjuvant-streptozotocin treated Lewis rats by ELISA and immunoblot analysis // Allerg Immunol (Lcipz). -1990. -V. 36(4).-P. 321-331

32. Vinik А.1., Park T.S., Stansberry K.B., Pittenger G.L. Diabetic neuropathies // Diabetologia. - 2000. - V. 43. - P. 957-973

33. Hellweg R, Raivich G., Hartung H.D., et. al. Axonal transport of endogenous nerve growth factor (NGF) and NGF receptor in experimental diabetic neuropathy // Exp Neurol. — 1994. -V. 130(1).- P. 24-30.

34. Lebed Y.V/, Orlovsky M.A., Nikonenko A.G., Ushakova G.A., Skibo G.G. Early reaction of astroglial cells in rat hippocampus to streptozotocin-induced diabetes // Neurosci Lett. - 2008. - V. 444(2). - P. 181-185.

35. Afsari Z.H., Renno W.M., Abd-El-Basset E. Alteration of glial fibrillary acidic proteins immunoreactivity in astrocytes of the spinal cord diabetic rats // Anat Rec (Hoboken). - 2008. - V. 291(4).- P. 390-399

36. Michel C., Boitard C., Bach J.F. Insulin autoantibodies in non-obese diabetic (NOD) mice // Clin Exp Immunol. - 1989. - V. 75(3). - P. 457-460

37. Yu L., Robles D.T., Abiru N.. Kaur P., Rewers M., Kclemen K., Eisenbarth G.S. Early expression of antiinsulin autoantibodies of humans and the NOD mouse: evidence for early determination of subsequent diabetes // Proc Natl Acad Sci USA.- 2000. V. 15;97(4). - P. 1701-1706

38. Myers M.A., Laks M.R., Feeney S.J., Mandel Т.Е., Koulmanda M., Bone A., Barley J., Rowley M.J., Mackay I.R. Antibodies to ICA512/IA-2 in rodent models of 1DDM // J Autoimmun. -1998. - V. 11(3).-P. 265-272

39. Schmidt R.E., Dorsey D.A., Beaudet L.N. et.al. Non-obese diabetic mice rapidly develop dramatic sympathetic neuritic dystrophy: a new experimental model of diabetic autonomic neuropathy // Am J Pathol. -2003. -V. 163(5). - P. 2077-2091

40. Beauquis J., Homo-Delarche F., Revsin Y., De Nicola A.F., Saravia F. Brain alterations in autoimmune and pharmacological models of diabetes mellitus: focus on hypothalamic-pituitary-adrenocortical axis disturbances // Neuroimmunomodulation. - 2008. -V. 15(1). - P. 61-67

41. Смирнова O.M., Горелышева В.А., Дедов И.И., Характеристика фазы ремиссии при впервые выявленном инсулинзависимом сахарном диабете // Сахарный диабет. - 1999. - №1. -с. 9-12

42. Foulis А.К. Pancreatic pathology in type 1 diabetes in human // Novartis Found Symp. -2008. - V. 292.-P. 2-13

43. Wen L., Green E. A.,. Stratmann Th, Panosa A., et. al. In vivo diabetogenic action of CD41 T lymphocytes requires Fas expression and is independent of IL-1 and IL-18 // Eur. J. Immunol. - 2011. - V. 41. - P. 1344-1344

44. Calderon В., Suri A., Unanue E. R.. In CD4_ T-Cell-Induced Diabetes, Macrophages Are the Final Effector Cells that Mediate Islet p-cell killing. // Am. J. Path., v. 169, №. 6, 2006. pp. 21372147

45. Willox A., Richardson S.J., Bone A.J., Foulis A.K., Morgan N.G.. Analysis of inflammation in human type 1 diabetes. // Clin. Exp. Imm. - 2008. - V. 155. - P. 173-181.

46. Tanaka S., Nishida Y., Aida K. et.al. Enterovirus infection, CXC chemokine ligand 10 (CXCL10) and CXCR3 circuit: a mechanism of accelerated beta-cell failure in fulminant type 1 diabetes // Diabetes. - 2009. - V.58(10) - P. 2285-2291

47. Воробьев А.А., Быков А. С., Караулов А. В. Иммунология и аллергология.// Практическая медицина. - 2006. - М. - 288 с.

48. Eizirik D.L, Colli M.L., Ortis F. The role of inflammation in insulitis and beta-cell loss in type 1 diabetes // Nat Rev Endocrinol. - 2009. - V. 5(4). - P. 219-226

49. Зак К.П., Попова В.В. Хемокины при сахарном диабете 1-го типа у человека (обзор литературы и собственные данные) // Укр. Мед. Часопис. - 2008. - Т.6 (68).- С. 69-77

50. Aribi М., Moulessehoul S., Kendouci-Tani М., Benabadji А.В., Hichami A., Khan N.A. Relationship between ititcrleukin-1 beta and lipids in type 1 diabetic patients // Med Sci Monit. - 2007. - V. 13(8). - P. 372-378

51. Chatzigeorgiou A., Harokopos V., Mylona-Karagianni C., Tsouvalas E., Aidinis V., Kamper E.F. The pattern of inflammatory/anti-inflainmatory cytokines and chemokincs in type 1 diabetic patients over time // Ann Med. - 2010. - V. 42(6). - P. 426-438

52. Erbagci A.B., Tarakçioglu M., Coçkun Y., Sivasli E., Sibel Namiduru E. Mediators of inflammation in children with type I diabetes mellitus: cytokines in type I diabetic children // Clin Biochem. - 2001. - V. 34(8). - P. 645-650

53. Pfleger C., Kaas A., Hansen L„ Alizadeh B„ Hougaard P., Moll R., Kolb IT, Roep B.O., Mortensen II.B., Schloot N.C. Relation of circulating concentrations of chemokine receptor CCR5 ligands to C-peptide, proinsulin and HbAlc and disease progression in type 1 diabetes // Clin Immunol. - 2008. - V. - 128(1). - P.57-65

54. Zineh I., Beitelshees A.L., Silverstein J.H., Haller M.J. Serum monocyte chemoattractant protein-1 concentrations associate with diabetes status but not arterial stiffness in children with type 1 diabetes // Diabetes Care. - 2009. - V. 32(3). - P. 465-467

55. Antonelli A., Fallahi P., Ferrari S.M., Pupilli C., d'Annunzio G., Lorini R., Vanelli M., Ferrannini E. Serum TTi 1 (CXCL10) and Th2 (CCL2) chemokine levels in children with newly diagnosed Type I diabetes: a longitudinal study// Diabet Med. -2008. - V. 25(11). - P. 1349-1353

56. Morii T. Fujita I I, Narita T., Shimotomai T., Fujishima H., Yoshioka N., Imai H., Kakei M., Ito S. Association of monocyte chemoattractant protein-1 with renal tubular damage in diabetic nephropathy//J Diabetes Complications.-2003. - V. 17(1).-P. 11-15.

57. Nicololctti F., Conget I, Di Mauro M., Di Marco .R, Mazzarino M.C., Bendtzen K., Messina A., Gomis R. Serum concentrations of the interferon-gamma-inducible chemokine IP-10/CXCL10 are augmented in both newly diagnosed Type I diabetes mcllitus patients and subjects at risk of developing the disease // Diabetologia. - 2002. - V. 45(8). P. - 1107-1110.

58. Ozer G., Teker Z., Cetiner S., Yilmaz M., Topaloglu A.K., Onenli-Mungan N., Ytikscl B. Scrum IL-1, IL-2, TNFalpha and INFgamma levels of patients with type 1 diabetes mellitus and their siblings // J Pediatr Endocrinol Metab. - 2003. - V.16(2). - P. 203-210.

59. Lo I I.C., Lin S.C., Wang Y.M. The relationship among serum cytokines, chemokine, nitric oxide, and leptin in children with type 1 diabetes mellitus // Clin Biochem. - 2004. - V. 37(8). - P. 666672

60. Kimpimaki T., Kulmala P., Savola K., Kupila A., Korhonen S., Simell T., Ilonen J., Simell O, Knip M. Natural history of beta-cell autoimmunity in young children with increased genetic susceptibility to type 1 diabetes recruited from the general population // J Clin Endocrinol Mctab. — 2002. -V. 87(10). - P. 4572-4579

61. Brooks-Worrell B.M., Niclson D., Palmer J.P. Insulin autoantibodies and insulin antibodies have similar binding characteristics // Proc Assoc Am Physicians. - 1999. - V. 111 ( 1 ). P. 92-

62. Vähäsalo P. Autoantibodies to insulin have similar affinity to that of antibodies to exogenous insulin but lower binding capacity // Eur J Clin Invest. - 1992. - V. 22(12). - P. 772-676

63. Wichterle D., Stolba P., Bendlovä В., Krnäkova A. Anti-insulin antibodies and insulin resistance//Vnitr Lek. - 1995. - V. 41(2). - P. 146-150

64. Wiggin T. D., Sullivan K. A., Pop-Busui R. Amato A, et al. Elevated Triglycerides Correlate With Progression of Diabetic Neuropathy // Diabetes. - 2009. - V. 58. - P. 1634-1640.

65. Dyck P.J., Litchy W.J. et al. Variables influences neuropathic endpoints. The Rochester Diabetic Neuropathy Study of Health Subjects // Neurology. - 1995. - V. 45. - P. 1115-1121

66. Meh D., Denislic M. Subclinical neuropathy in type I diabetic children // Electroencephalography and clinical Neurophysiology. - 1998. - V. 109. - P. 274-280

67. Karsidag S., Morali S., Sargin M., Salman S., Karsidag K., Us.O. The electrophysiological findings of subclinical neuropathy in patients with recently diagnosed type 1 diabetes mellitus // Diabetes Res Clin Pract. - 2005. V. 67(3). - P. 211 -219

68. Boucek P. Advanced Diabetic Neuropathy: A Point of no Return? // Rev Diabet Stud. -2006.-V. 3(3). - P. 143-150

69. Vinik А.1., Anandacoomaraswamy D., Ullal J. Antibodies to neuronal structures: innocent bystanders or neurotoxins? // Diabetes Care. - 2005. - V. 28(8). - P. 2067-72.

70. Luppi P., Cifarelli V., Wahren J. C-peptide and long-term complications of diabetes // Pediatric Diabetes.-2011. V. 12,- P. 276-292

71. Waksman B.H., Adams R.D. Allergic neuritis: an experimental disease of rabbits induced by the injection of peripheral nervous tissue and adjuvants // J Exp Med. - 1955. - V. 102. - P. 213236

72. Савельев С.В., Барабанов В.М., Кривова Ю.С., Прощина А.Е. Неврогенные механизмы развития сахарного диабета 1-го типа // Архив патологии. - 2008,- N 6,- С. 9-13

73. Teepker М., Münk К., Mylius V., Haag А., Möller J.С, Oertel W.H., Schepclmann К. Serum Concentrations of si 00b and NSE in Migraine. // Headache. - 2009. - V. 49(2). - P. 245-252

74. Морозова Ю.А., Камчатнов П.P., Ахметжанова Л.JI.. Содержание белка S-100 и фактора некроза опухоли альфа в сыворотке крови больных дисциркуляторной энцефалопатией // Журнал неврологии и психиатрии. - 2009. - № 5. - С. 53-56

75. Лебедева A.B. Гехт А.Б. Гусев E.H. Аутоантитела к фактору роста нервов и белкам-маркерам нейроглии у больных, перенесших ишемический инсульт при осложненном и неосложненном течении заболевания // Журнал неврологии и психиатрии. - 2009.- N 11,- С. 6-12

76. Камчатнов Г1. Р, Чугунов А. В.,. Рулева II. 10, Дугин С. Ф., Бурячковская JT. И., Умарова X. Я. Аутоантигела к глиальному фибриллярному кислому белку у больных с различными формами цереброваскулярной патологи // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2008. №11.- С. 58-61

77. Теплицкая JI.E. Ястребова Н.Е., Ветров Ю.Д., Ванеева Н.П. Иммунологическая аутоагрессия у пациентов с диабетической ретинопатией при диабете 1-го тина // Микробиология. - 2006. № 7. - Р. 59-62

78. Hoeldtke R.D., Bryner K.D., Hobbs G.R. et al. Antibodies to glutamic acid decarboxylase and peripheral nerve function in type 1 diabetes // J Clin Endocrinol Metab. — 2000. — V. 85. - P.

3297-3308

79. Milicevic Z., Ncwlon P.G., Pittenger G.L., Stansberry K.B., Vinik A.I. Anti-ganglioside GM1 antibody and distal symmetric "diabetic polyneuropathy" with dominant motor features // Diabetologia. - 1997. - V. 40(11). - P. 1364-1365

80. Vinik A.I., Pittenger G.L., Stansberry K.B. Powers A: Phospholipid and glutamic acid decarboxylase autoantibodies in diabetic neuropathy// Diabetes Care. - 1995. V. 18. - P. 1225-1232

81. Смирнов В.В., Петряйкина Е.Е., Макушева В.Г., Полетаев А.Б.. Содержание естественных аутоантитле различной специфичности у детей, больных сахарным диабетом // Педиатрия, - 2006.-№ 4.-С. 15-18

82. Афонин А.А., Морозова Н.В., Галкина Г.А., Комкова М.В.. Клинико-диагностическое значение нейротропных факторов при диабетической периферической полинейропатии у детей и подростков // Педиатрия. - 2008. - Том 87(5). - С. 21-25

83. Hovsepyan M.R., Haas M.J., Boyajyan A.S., Guevorkyan A.A., Mamikonyan A.A., Myers S.E., Mooradian A.D. Astrocytic and neuronal biochemical markers in the sera of subjects with diabetes mellitus // Neurosci Lett. - 2004. - V. 369(3). - P. 224-227

84. Anguizola J., Matsuda R., Barnaby O.S., Hoy K.S., Wa C., Bolt E„ Koke M., Ilage D. S. Review: Glycation of human serum albumin // Clinica Chimica Acta. - 2013. — V. 425. — P. 64-76

85. Fasano. M., Curry S., Terreno E., et. al. The extraordinary ligand binding properties of human serum albumin // IUBMB Life. -2005. V. 57(12). - P. 787-796

86. Oettl K., Stauber R.E.. Physiological and pathological changes in the redox state of human serum albumin critically influence its binding properties // British Journal of Pharmacology. — 2007.-V. 151.-P. 580-590

87. Gutteridge J. M. , Halliwell B. The measurement and mechanism of lipid peroxidation in biological systems // Trends Biochem Sci. - 1990. -V. 15(4). - P. 129-135

88. Szapacs M.E., Riggins J.N., Zimmerman L.J., Liebler D.C. Covalent adduction of human

scrum albumin by 4-hydroxy-2-nonenal: kinctic analysis of competing alkylation reactions // Biochemistry. -2006. - V. 45(35). - P. 10521-10528

89. Hayashi T., Era S., Kawai K., Imai H., Nakamura K., Onda E., Yoh M. Observation for redox state of human serum and aqueous humor albumin from patients with senile cataract // Pathophysiology. - 2000. - V. 6. P. 237-243.

90. Jourd'Heuil D., Halle 'n K., Feelisch M., Grisham M.B. Dynamic state of S-nitrosothiols in human plasma and whole blood // Free Radic Biol Med. - 2000. - V. 28. - P. 409^117

91. Stamler J.S. S-nitrosothiols in the blood. Roles, amounts, and methods of analysis // Circ Res. - 2004. - V. 94. - P. 414-417

92. Zhang H., Means G.E. S-nitrosation of scrum albumin: spectrophotometric determination of its nitrosation by simple S-nitrosothiols //Anal. Biochem. - 1996. - V. 237. - P. 141-144

93. Marley R., Patel R.P., Orie N., et. al. Formation of nanomolar concentrations of S-nitrosoalbumin in human plasma by nitric oxide // Free Radic Biol Med. - 2001. - V. 31. - P. 688-696

94. Ogasawara Y., Mukai Y., Togawa T., Suziki T., Tanabe S., Ishij K. Determination of plasma thiol bound to albumin using affinity chromatography and high-performance liquid chromatography with fluorescence detection: ratio of cysteinyl albumin as a possible biomarker of oxidative stress // J Chromatogr B. - 2007. - V. 845. - P. 157-163

95. Soejima A., Matsuzawa N., Hayashi T., Kimura R., Ootsuka T., Fukuoka K. et al. (2004). Alteration of redox state of human albumin before and after hemodialysis // Blood Purif. - 2004. - V. 22. - P. 525-529

96. Sogami M., Era S., Nagaoka Sm Kuwata K., Kida K., Shigami J., Miura K. et al. Highperformance liquid chromatographic studies on non-mercapt - mercapt conversion of human serum albumin II // J Chromatogr. - 1985. - V. 332. - P. 19-27

97. Kadota K., Yui Y., Hattori R., Murohara Y., Kawai C. Decreased sulfhydryl groups of serum albumin in coronary artery disease // Jpn Circ J. - 1991. -V. 55. - P. 937-941

98. Suzuki E., Yasuda K., Takeda N., Sakata S., Era S., Kuwata K. et al. Increased oxidized form of human serum albumin in patients with diabetes mellitus // Diabetes Res Clin Pract. - 1992. -V. 18.-P. 153-158

99. Era S., Kuwata K., Imai H., Nakamura K., Hayashi T., Sogami M. Age-related change in redox state of human scrum albumin // Biochim Biophys Acta. - 1995. - V. 1247. - P. 12-16

100. Imai II., Hayashi T., Negawa T., Nakamura K., Tomida M., Koda K. et al.Strenous exercise-induced change in redox state of human serum albumin during intensive kendo training// Jpn

J Physiol. - 2002. - V. 52. - P. 135-140

101. Levinc R. Carbonyl modified proteins in cellular regulation, aging, and disease // Free Radic Biol Med. - 2002. - V. 32. - P. 790-796

102. Bourdon E., Loreau N., Blache D., Glucose and free radicals impair the antioxidant properties of serum albumin // FASEB J. - 1999. V. 13 - P. 233-244

103. Guedes S., Vitorino R., Domingues R., Amado F., Domingues P. Oxidation of bovine serum albumin: identification of oxidation products and structural modifications // Rapid Commun Mass Spectrom. - 2009. - V. 23(15). - P. 2307-2315

104. Shaklai N., Garlick R.L., Bunn H.F. Nonenzymatic glycosylation of human serum albumin alters its conformation and function // J Biol Chem. - 1984. -V. 259(6). - P. 3812-3817.

105. Vlassopoulos A., Lean M.E., Combet E. Role of oxidative stress in physiological albumin glycation: a neglected interaction // Free Radic Biol Med. -2013. - V. 60. - P. 318-324.

106. Roohk H.V., Zaidi AR. A review of glycated albumin as an intermediate glycation index for controlling diabetes // J Diabetes Sci Technol. -2008. - V. 2. - P. 1114-1121

107. Mendez D.L., Jensen R.A., McElroy L.A., Pena J.M., Esquerra R.M. The effect of nonenzymatic glycation on the unfolding of human serum albumin // Arch. Biochem. Biophys. - 2005. -V. 444. _ p. 92-99

108. Arif B, Jalaluddin M., Moinuddin A., Ahmad J., Arif Z., Alam K. Structural and immuno-logical characterization of Amadori-rich human serum albumin: role in diabetes mellitus // Arch Biochem Biophys. - 2012. - V. 522. - P. 17-25

109. Singh V.P., Bali A., Singh N., Jaggi A.S. Advanced glycation end products and diabetic complications // Korean J. Physiol. Pharmacol. - 2014. - V. 18(1). - P. 1-14

110. Cohen M.P. Intervention strategies to prevent pathogenetic effects of glycated albumin. Arch Biochem Biophys//2003. - V. 419(1). - P. 25-30

111. Ahmad S., Moinuddin, Ali A. Immunological studies on glycated human IgG // Life Sci.2012. - V. 90. - P. 980-987

112. Scheijen J.L., van de Waarenburg M.P., Stehouwer C.D., Schalkwijk C.G. Measurement of pentosidine in human plasma protein by a single-column highperformance liquidchromatography method with fluorescence detection // J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. - 2009. - V. 1 ;877(7). - P. 610-614.

113. Fu M., Requena J., Jenkins A., et al. The advanced glycation end-product, N£-(carboxymethyl)lysine, is a product ofboth lipid peroxidation and glycoxidation reactions // J B iol Chem. - 1996. - V. 271 . - P. 9982-9986

114. Wa Ch., Cerny R.L., Clarke W.A., Ilage D.S.. Characterization of glycation adducts on

human serum albumin by matrix assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry // Clin Chim Acta.- 2007. -V.385( 1-2).- P. 48-60

115. Barzilay J.I., Jablonski K.A., Fonseca V., et al. The impact of salsalate treatment on serum levels of advanced glycation end products in type 2 diabetes // Diabetes Care. - V. 37(4). - P. 1083-1091

116. Ilanssen N.M., Engelen L., Ferreira I. at. al. Plasma levels of advanced glycation endproducts Ns-(carboxymethyl)lysine, Ns-(carboxyethyl)lysine, andpentosidine are not independently associated with cardiovascular disease in individuals with or without type 2 diabetes: the Hoorn and CODAM studies // J Clin Endocrinol Metab. - 2013. - V. 98(8).-P. 1369-1373

117. van Eupen M.G., Schräm M.T., Colhoun H.M., Scheijen J.L., Stehouwer C.D., Schalkwijk C.G Plasma levels of advanced glycation endproducts are associated with type 1 diabetes and coronary artery calcification // Cardiovasc Diabetol. - 2013. - V. 12(1). - P. 149.

118. Mäcsai E., Takäts Z., Derzbach L., Körner A., Väsärhelyi B. Verification of skin autofluorescence values by mass spectrometry in adolescents with type 1 diabetes: brief report // Diabetes Technol Ther. - 2013. - V. 15(3). - P. 269-272

119. Ryle C., Donaghy M. Non-enzymatic glycation of peripheral nerve proteins in human diabetics // J. Neurol Sei. - 1995. - V. 129. - P. 62-68

120. Requena J.R., Price D.L., Thorpe S.R., Baynes J.W. Measurement of pentosidine in biological samples // Methods Mol Med. - 2000. - V. 38. - P. 209-217

121. Kerkeni M., SaTdi A., Bouzidi H, et al. Pentosidine as a biomarker for microvascular complications in type 2 diabetic patients // Diab Vase Dis Res. - 2013. - V. 10(3). - P. 239-245

122. Sell D.R., Nagaraj R.H., Grandhee S.K., et al. Pentosidine: a molecular marker for the cumulative damage to proteins in diabetes, aging, and uremia // Diabetes Metab Rev. - 1991. - V. 7. -P. 239-25 1

123. Rother K.I. Diabetes treatment-bridging the divide // N Engl J Med. - 2007. - V. 356. -P. 1499-1501

124. Valcourt U., Merle B., Gineyts E., Viguet-Carrin S., Delmas P.D., Garnero P. Non-enzymatic glycation of bone collagen modifies osteoclastic activity and differentiation // J Biol Chem. -2007.-V. 282. - P. 5691-5703

125. Dunn E.J., Philippou H., Ariens R.A., Grant P.J. Molecular mechanisms involved in the resistance of fibrin to clot lysis by plasmin in subjects with type 2 diabetes mellitus // Diabetologia. -2006.-V. 49. - P. 1071-1080

126. Lund T., Svindland A., Pepaj M. Jensen A.B., Berg J.P., Kilhovd B., Hanssen K.F.

Fibrin(ogcn) may be an important target for methylglyoxal-derived AGE modification in elastic arteries of humans//Diab Vase Dis Res. -2011. - V. 8,- P. 284-294

127. Said G., Guilbert M., Millerot-Serrurot E., Van Gulick L., Terryn C., Garnotel R., Jeannesson P. Impact of carbamylation and glycation of collagen type 1 on migration of HT1080 human fibrosarcoma cells // Int J Oncol. - 2012. - V. 40. - P. 1797-1804

128. Min-Xin Fu, Kevin J. Wells-Knecht, James A. Blackledge, Timothy J. Lyons, Suzanne R. Thorpe, John W. Baynes. Glycation, glycoxidation, and cross-linking of collagen by glucose. Kinetics, mechanisms, and inhibition of late stages of the Maillard reaction. DIABETES , VOL. 43, 1994,676-683

129. Toure F., Zahm J-M., Garnotel R., Lambert E., et. al. Gillery and Ph. RIEU. Receptor for advanced glycation end-products (RAGE) modulates neutrophil adhesion and migration on glycoxidated extracellular matrix.Biochem. J. (2008) 416, 255-261

130. Wang Y., Dou C., Yuan C., Datta A. Development of an automated enzymatic assay for the determination of glycated serum protein in human serum // Clin. Chem. 2005. - V. 51. - P. 19911992.

131. Lapolla A., Fedele D., Garbeglio M., Martano L., Tonani R., Seraglia R., Favretto D., Fedrigo M.A., Traldi P. Matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry, enzymatic digestion, and molecular modeling in the study of non-enzymatic glycation of IgG // J Am Soc Mass Spectrom. 2000.- 11,- P. 153-159

132. Vrdoljak A., Trescec A., Benko B., Hecimovic D., Simic M. In vitro glycation of human immunoglobulin G // Clin Chim Acta. 2004. - V. 345(1-2). - P. 105-111

133. Kennedy D.M, Skillen A.W., Self C.H. Glycation of monoclonal antibodies impairs their ability to bind antigen // Clin Exp Immunol. - 1994. - V. 98. - P. 245-251

134. Bork P., Holm L., Sander C. The immunoglobulin fold. Structural classification, sequence patterns and common core // J Mol Biol. - 1994. - V. 242. - P. 309-320

135. Austin G.E., Mullins R.H., Morin L.G. Non-enzymic glycation of individual plasma proteins in normoglycemic and hyperglycemic patients // Clin Chem. - 1987. - V. 33(12). - P. 2220-4

136. Mashiba S., Uchida K., Okuda S.,Tomita S. Measurement of glycated albumin by the nitroblue tetrazolium colorimetric method // Clin Chim Acta. - 1992. - V. 212( 1 -2). - P. 3-15

137. Guerin-Dubourg A., Catan A., Bourdon E., Rondeau P. Structural modifications of human albumin in diabetes // Diabetes Metab. -2012. - V.38. - P. 171-178

138. Cohen M. Measurement of circulating glycated proteins to monitor intermediate-term

changes in glycacmic control // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. - 1992. - V. 30. - P. 851-859

139. Lee E.Y., Lee B.W., Kim D., et al. Glycated albumin is a useful glycation index for monitoring fluctuating and poorly controlled type 2 diabetes patients // Acta Diabetol. - 2011. V. 48. -P. 167-172

140. Armbruster D.A. Fructosamine: structure, analysis, and clinical usefulness. Clin. Chem 1987;33. - P. 2153-2163

141. Baker J.R., Zyzak D.V., Thorpe S.R., Baynes J.W. Chemistry of the fructosamine assay: D-glucosone is the product of oxidation of Amadori compounds // Clin Chem. - 1994. - V. 40. - P. 1950-1955

142. David A. Armbruster. Fructosamine: Structure, Analysis, and Clinical Usefulnes // CLIN. CIIEM.- 1987,-V. 33(12).-P. 2153-2163

143. Kobayashi K., Yoshimoto K., Hirauchi K., Uchida K., A novel colorimetric method for determination of glycated protein based on 2-keto-

glucose release withhydrazine // Biol. Pharm. Bull. - 1993.-V. 16(2).-P. 195-198.

144. Yatscoff R.W., Tevaarwerk G.J., MacDonald J.C. Quantification of nonenzymically glycated albumin and total serum protein by affinity chromatography // Clin. Chem. - 1984. - V. 30. P. 446 -449.

145. Poduslo J.F., Curran G.L. Increased permeability across the blood -nerve barrier of albumin glycated in vitro and in vivo from patients with diabetic polyneuropathy // Proc. Nat.l Acad. Sci. USA. - 1992. - V. 89. - P. 2218-2222.

146. Yasukawa K., Abe F., Shida N., Koizumi Y., Uchida T., Noguchi K., Shima K. Highperformance affinity chromatography system for the rapid, efficient assay of glycated albumin // J. Chromatogr. - 1992. - V. 597(1-2). - P. 271-275.

147. Takatsy A. Boddi K., Nagy L., et al. Enrichment of Amadori products derived from the nonenzymatic glycation of proteins using microscaleboronate affinity chromatography // Anal. Biochem. - 2009. - V. 93(1).-P. 8-22.

148. Ikeda K., Sakamoto Y., Kawasaki Y., Miyake T., Tanaka K., Urata T., Katayama Y., Ueda S., Horiuchi S. Determination of glycated albumin by enzyme-linked boronate immunoassay (ELBIA) // Clin. Chem. - 1998. - V. 44(2). - P. 256-263.

149. Cohen M.P., Hud E. Measurement of plasma glycoalbumin levels with a monoclonal antibody based ELISA // J. Immunol. Methods. - 1989. V. 122. - P. 279-83.

150. Kohzuma T., Koga M. Lucica GA-L glycated albumin assay kit. A new diagnostic test

for diabetes mellitus // Mol. Diagn. Thcr. - 2010. V. 14. - P. 49 -51.

151. Dingari N.C., Horowitz G.L., Kang J.W., Dasari R.R., Barman I. Raman spectroscopy provides a powerful diagnostic tool for accurate determination of albumin glycation // PloS. One. 2012.-V. 7. - e32406.

152. Marie A.L., Przybylski C., Gonnet F., Daniel R., Urbain R., Chevreux G., Jorieux S., Taverna M. Capillary zone electrophoresis and capillary electrophoresis-mass spectrometry for analyzing qualitative and quantitative variations in therapeutic albumin // Anal. Chim. Acta. — 2013. — V. 24 (800).-P. 103-110.

153. Pereira Morais M.P., Mackay J.D., Bhamra S.K. et al. Analysis of protein glycation using phenylboronate acrylamide gel electrophoresis // Proteomics. 2010. - V. 10. - P. 48 —58.

154. Martin G.J., Rand J.S., Hickey S.A. Separation of serum glycated proteins by agarose gelelectrophoresis and nitrobluc tctrazolium staining in diabetic and normal cats // Vet. Clin. Pathol. -2006. V. 35. -P. 307-310.

155. Zheng C.M., Ma W.Y., Wu C.C., Lu K.C. Glycated albumin in diabetic patients with chronic kidney disease//Clin. Chim. Acta 2012. -V. 413. P. 1555-1561.

156. Guerin-Dubourg A., Catan A., Bourdon E., Rondeau P. Structural modifications of human albumin in diabetes // Diabetes Metab. - 2012. - V. 38. - P. 171 -178

157. Shaklai N., Garlick R.L., Bunn H.F. Nonenzymatic glycosylation of human serum albumin alters its conformation and function // J Biol Chem. -1984 V. 259. - P. 3812-3817

158. Али Хан M.B., Рашид 3., Али Хан В., Али Р.. Биохимический, биофизический и термодинамический анализ сывороточного альбумина человека, гликированного in vivo // Биохимия. - 2007. - т. 72. - вып. 2. - С. 175-183

159. Nakajou К., Watanabe Н., Kragh-Hansen U., Maruyama Т., Otagiri М. The effect of glycation on the structure, function and biological fate of human serum albumin as revealed by recombinant mutants // Biochim Biophys Acta. - 2003. V. 1623. - P. 88-97

160. Barzegar A, Moosavi-Movahedi AA, Sattarahmady N, et al. Spectroscopic studies of the effects of glycation of human serum albumin on L-trp binding // Prot Pep Lett. - 2007. - V. 14. - P. 13-18

161. Okabe N., Hashizume N. Drug binding properties of glycosylated human serum albumin as measured by fluorescence and circular dichroism // Biol Pharm Bull. — 1994. - V. 17. - P. 16-21

162. Howard M.J., Smales C.M. NMR analysis of synthetic human serum albumin a-helix28 identifies structural distortion upon Amadori modification // J Biol Chem. - 2005. - V.280(225) - P. 82-89

163. Taneda S., Monnier V.M. ELISA of pentosidine, an advanced glycation endproduct, in

biological specimens // Clin Chem. - 1994. - V. 40. - P. 1766-1773

164. Lee C., Yim M.B., Chock P.B., Yim Y.S., Kang S.O. Oxidation-reduction properties of methylglyoxal-modified protein in relation to free radical generation // J Biol Chem. - 1998. - V. 273. -P. 25272-25278

165. Iberg N., Fluckiger R. Nonenzymatic glycosylation of albumin in vivo // J Biol Chem. -1986.-V. 261. P. 13542-13545

166. Schleicher E., Wieland O.H. Specific quantitation by HPLC of protein (lysine) bound glucose in human serum albumin and other glycosylated proteins // J Clin Chem Clin Biochem. -1981.-V. 19. -P. 81-87

167. Ahmed N., Argirov O.K. Minhas H.S., Cordeiro C.A.A., Thomalley P.J. Assay of advanced glycation end products (AGEs ): survey in gAGEs by chromatographic assay with derivatization by 6-aminoquinolyl-N-hydroxysuccinimidyl carbamate and applica-tion to Ns-carboxymethyl-lysine- and N£-(l-carboxyethyl)lysine-modified albu-min // Biochem J. - 2002. - V. 364. - P. 1-14

168. Barnaby O.S., Cerny R.L., Clarke W„ Hage D.S. Quantitative analysis of glycation patterns in human serum albumin using 160/180-labeling and MALDI-TOF MS// Clin Chim Acta. -2011,- V. 412(17-18). - P. 1606-1615

169. Wa C., Cerny R.L., Clarke W.A., Hage D.S. Characterization of glycation adducts on human serum albumin by matrixassisted laser desorption/ioni zation time-of-flight mass spectrometry // Clin Chim Acta. - 2007. - V.385(l-2). - P. 48-60

170. Frolov A., Hoffman R. Analysis of Amadori peptides enriched by boronic acid affinity chromatography // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 2008. - V. 1126. P. 253 - 256.

171. Garlick R.L., Mazer J.S. The principal site of nonenzymatic glycosylation of human serum albumin in vivo Hi Biol Chem. 1983. - V.258(10). P. 6142-6146

172. Baraka-Vidot J., Guerin-Dubourg A., Bourdon E., Rondeau P. Impaired drug-binding capacities of in vitro and in vivo glycated albumin // Biochimie. - 2012. - V. 94(9). - P. 1960-1967

173. Bohney J.P., Feldhoff R.C. Effects of nonenzymatic glycosylation and fatty acids on tryptophan binding to human serum albumin // Biochem Pharmacol. - 1992. - V. 43(8). - P. 18291834

174. Rondeau P., Bourdon E. The glycation of albumin: structural and functional impacts // Biochimie. - 2011. - V. 93(4). - P. 645-58

175. Joseph K.S., Anguizola J., Hage D.S. Binding of tolbutamide to glycated human serum albumin // J. Pharm. Biomed Anal. - 2011. -V. 54. P. 426 -432

176. Matsuda R., Anguizola J., Joseph K.S., Hage D.S. High-performance affinity

chromatography and the analysis of drug interactions with modified proteins: binding of gliclazide with glycated human serum albumin //Anal Bioanal Chem 2011. - V. 401. - P. 2811-2819

177. Okabe N., Hashizume N. Drug binding properties of glycosylated human serum albumin as measured by fluorescence and circular dichroism // Biol Pharm Bull. - 1994. - V. 17(1). - P. 16-21.

178. Kawakami A, Kubota K, Yamada N, et. al. Identification and characterization of oxidized human serum albumin. A slight structural change impairs its ligand-binding and antioxidant functions // FEBS J. - 2006. - V. 273(14). P. 3346-3357

179. Thornalley P.J. Quantitative screening of advanced glycation endproducts in cellular and extracellular proteins by tandem mass spectrometry // Biochem J. - 2003. - V. 375. - P. 581-592

180. Frolov A., Hoffmann R. Identification and relative quantification of specificglycation sites in human serum albumin // Anal Bioanal Chem. - 2010. - V. 397. - P. 2349-2356

181. Kisugi R., Kouzuma T., Yamamoto T., et al. Structural and glycation site changes of albumin in diabetic patient with very high glycated albumin // Clin Chim Acta. - 2007. - V. 382. - P. 59-64

182. Priego-Capote F., Scherl A., Muller M., Waridel P., Lisacek F., Sanchez J.C. Glycation isotopic labelingwith 13 C-reducing sugars for quantitative analysis of glycated proteins in human plasma // Mol Cell Proteomics. - 2010. - V. 9. - P. 579-597

183. Barnaby O.S., Wa C., Cerny R.L., Clarke W., Hage D.S. Quantitative analysis of glycation sites on human serum labeling using 160/180 labeling and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-fiight mass spectrometry // Clin Chim Acta. - 2010. - V. 411. - P. 102— 110

184. Frost L., Chaudhry M., Bell T., Cohenford M. In vitro galactation of human serum albumin: analysis of the protein's galactation sites by mass spectrometry // Anal Biochem. - 2011. - V. 410. P. 248-256

185. Zeng J., Davies M.J. Evidence for the formation of adducts and S-(carboxymethyl)cysteine on reaction of alpha-dicarbonyl compounds with thiol groups on amino acids, peptides, and proteins // Chem. Res. Toxicol. - 2005. - V. 18. - P. 1232-1241

186. Mostaía A.A., Randell E.W., Vasdev S.C., Gill V.D., Han Y., Gadag V., Raouf A.A., El Said H. Plasma protein advanced glycation end products, carboxymethyl cysteine, and carboxyethyl cysteine, are elevated and related to nephropathy in patients with diabetes // Mol. Cell Biochem. -2007.-V. 302.-P. 35-42

187. Aitken A., Learmonth M. Quantification and location of disulfide bonds in proteins // Methods Mol Biol.- 1997. - V. - 64. P. - 317-328

188. Levine R.L., Garland D., Oliver C.N., et al. Determination of carbonyl content in

oxidatively modified proteins. Methods Enzymol // 1990. - V. 186. P. 464-478

189. Досон P., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика // Мир. - 1991. -

544 с.

190. Debro J.R., Tarver Н., Korner A. J. The determination of serum albumin and globulin by a new method // Lab Clin Med. - 1957. - V. 50(5). P. 728-732

191. Domingues M.R. et al. Do charge-remote fragmentations occur under matrix-assisted laser desorption ionization post-source decompositions and matrix-assisted laser desorption ionization collisionally activated decompositions?//J. Am. Soc. Mass Spectrom. - 1999. -V. 10(3). - P. 217-223

192. Nikolaev E.N. et al. Implementation of low-energy surface-induced dissociation (eV SID) and high-energy collision-induced dissociation (keV CID) in a linear sector-TOF hybrid tandem mass spectrometer// Int. J. Mass Spectrom. - 2001. - V. 212(1). - P. 535-551

193. Vauhkonen I., Niskanen L., Knip M., et al. Subtle hyperproinsulinaemia characterises the defective insulin secretory capacity in offspring of glutamic acid decarboxylase antibody-positive patients with latent autoimmune diabetes mellitus in adults // Eur. J. Endocrinol. - 2005. - V. 153. - P. 265-273

194. Galloway J.A., Hooper S.A., Spradlin C.T., Howey D.C., Frank B.H., Bowsher RR., Anderson J.H. Biosynthetic human proinsulin. Review of chemistry, in vitro and in vivo receptor binding, animal and human pharmacology studies, and clinical trial experience // Diabetes Care. —

1992,-V. - 15(5). P. - 666-692

195. Bain SC, Gill GV, Dyer PH, et al. Characteristics of Type 1 diabetes of over 50 years duration (the Golden Years Cohort) // Diabet Med. - 2003. - V. 20. - P. 808-811

196. Hartling S.G., Knip M., Roder M.E., et al. Longitudinal study of fasting proinsulin in 148 siblings of patients with insulin-dependent diabetes mellitus. Study Group on Childhood Diabetes in Finland // Europ. J. Endocrin. - 1997. - V. - 137. - P. 490-494

197. Lindgren F.A., Hartling S.G., Dahlquist G.G. et al. Glucose-induced insulin response is reduced and proinsulin response increased in healthy siblings of type 1 diabetic patients // Diabetic Medicine. - 1991. - V. 8. - P. 638-643

198. Morlensen II.В., Houqaard P., Swift P. et al. New definition for the partial remission period in children and adolescents with type 1 diabetes // Diabetes Care. - 2009. - V.32 (8). - P. 13841390

199. Roder M.E., Knip M., Hartling S.G. et al. Disproportionately elevated proinsulin levels precede the onset of insulin-dependent diabetes mellitus in siblings with low first phase insulin responses. The Childhood Diabetes in Finland Study Group // J. Clin. Endocrin.Metab. — 1994. - V. 79.

-Р. 1570-1575

200. Dib S.A. Heterogeneity of type 1 diabetes mellitus // Arq. Bras. Endocrinol.Metabol. -2008. - V.-52(2).-P. 205-218

201. Guerin-Dubourg A., Catan A. Bourdon E., Rondeau P. Structural modifications of human albumin in diabetes // Diabetes Metab. - 2012. - V. - 38(2). - P. 171 -178

202. ISPAD Consensus Guidelines for the Management of Type 1 Diabetes Mellitus in Children and Adolescents // International society for pediatric and adolesccnt diabetes. - 2000. -128

203. Бадалян Л.О., Скворцов И.А. Клиническая электромиография // М: Медицина. -1986.-368 с.

204. Гехт Б.М., Касаткина Л.Ф., Самойлов М.И. и др. Электромиография в диагностике нервно-мышечных заболеваний // Таганрог: ТРТУ. - 1997. - 370 с.

205. El-Salem К., Ammani F., Khader Y., Dhaimat О. Elevated glycosylated hemoglobin is associated with subclinical neuropathy in neurologically asymptomatic diabetic patients: a prospective study// Clin Neuriphysiol. - 2009. - V. 26(1). - P. 50-53

206. Лотош Н.Ю., Линева О.А., Волков Н.Э., Муталова З.М., С.В. Савельев, Селищева А.А. Дистальная полинейропатия у детей с сахарным диабетом 1-го типа // Журнал неврологии и психиатрии. - 2012. - Т. 1. - С. 26-30

207. Клюшник Т.П. Морозов С.Г. Лабораторная диагностика последствий перинатальных поражений нервной системы: технология «Нейро-тест» // Психиатрия. -2010. -Т. 3. - С. 13-17

208. Renno W.M., Alkhalaf М., Afsari Z. et. al. Consumption of green tea alters glial fibrillary acidic protein immunoreactivity in the spinal cord astrocytes of STZ-diabetic rats // Nutr Neurosci. - 2008. - V. 11(1).- P. 32-40

209. Coleman E., Judd R., et. al. Effects of diabetes mellitus on astrocyte GFAP and glutamate transporters in the CNS // Glia. - 2004. - V. 48(2). - P. 166-178

209. Hernández-Pedro N., Ordóñez G., Ortiz-Plata A., et. al. All-trans retinoic acid induces nerve regeneration and increases serum and nerve contents of neural growth factor in experimental diabetic neuropathy // Transí Res. - 2008. - V. 152(1). - P. 3 1-37210. Kennedy J.M., Zochodne D.W. Experimental diabetic neuropathy with spontaneous recovery: is there irreparable damage? // Diabetes. - 2005. - V. 54. - P. 830-837

211. Selagzi H., Buykakilli B. Cimen B. et al. Protective and therapeutic effects of swimming

exercise training on diabetic peripheral neuropathy of streptozotocin-induced diabetic rats // J Endocrinol Invest. - 2008. -V.31(11). - P. 971-978

212. Чехонин В.П., Турина О.И., Дмитриева Т.Б. Моноклональные антитела к нейронспецифическим белкам // М.: Медицина. - 2007. - 344 с.

213. Рулева Н.Ю., Бурячковская Л.И., Камчатнов П.Р. и др. Содержание нейроспецифических белков и аутоантител к ним в сыворотке крови больных с острым ишемичсским инсультом // Ж-л неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. - 2009. - № 5. -С. 69-72

214. Полетаев А.Б. Алферова В.В. Абросимова А.А. Комисарова И.А. Соколов М.А. Гусев Е.И. Естественные нейротропные аутоантитела и патология нервной системы // Нейроиммунология. - 2003. - Т. - С. 11-17

215. Теплицкая Л.Е., Ястребова Н.Е., Ветров Ю.Д., Ванеева Н.П. Иммунологическая аутоагрессия у больных диабетической ретинопатией при сахарном диабете I типа // Журн. микробиол. - 2006. - Т. 7. - С. 59-62