Механизмы антипролиферативного действия ингибиторов деацетилаз гистонов на эмбриональные стволовые клетки мыши тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Чуйкин, Илья Александрович

• Чуйкин, Илья Александрович
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чуйкин, Илья Александрович

1.1 Актуальность проблемы.

1.2 Цели и задачи исследования.

ГЛАВА 2. Обзор литературы.

2.1 Эмбриональные стволовые клетки мыши, происхождение, способы получения. Тератокарциномы.

2.2 Транскрипционные факторы, маркеры мЭСК.

2.2.1 Oct-4.

2.2.2 Sox2.

2.2.3 Foxd3.

2.2.4 Nanog.

2.2.5 Влияние Nanog и Oct-4 на транскрипцию, роль белков группы Polycomb.

2.3 Сигнальные пути, участвующие в поддержании недифференцированного состояния ЭСК мыши.

2.3.1 LIF/STAT3 путь.

2.3.2 BMP/SMAD сигнальный путь.

2.3.3 MEK/ERK- зависимые пути.

2.3.4 Р13-киназный путь. ф 2.3.5 Путь через киназу cYes.

2.4 Особенности регуляции клеточного цикла мЭСК.

2.5 Вклад структуры хроматина в под держании высокопролиферативного статуса мЭСК.

2.6 Структура Wnt-сигнального пути позвоночных. Роль р-катенина в адгезии клеток и регуляции транскрипции.

2.7 Нарушение регуляции Wnt-сигнального пути при канцерогенезе. Роль Wnt-пути в регуляции функций стволовых клеток.

2.8 Роль Wnt-сигнального пути в дифференцировке клеток.

2.9 Баланс клеточной адгезии и Wnt сигналинга. Эпителиально-мезенхимальный переход (ЭМП).

2.10 Транскрипционный фактор АР-1- участник ЭМП и дифференцировки клеток.

2.10.1 Состав димеров АР-1 и консенсусные последовательности.

2.10.2 Партнеры АР-1 по образованию комплексов с элементами ДНК. Изменение консенсусных последовательностей АР-1 фактора.

2.10.3 Гены раннего ответа c-fos и c-jun и их регуляция на уровне транскрипции и посттрансляционных модификаций, структура регуляторных областей генов c-fos и с-jun.

2.10.4 Участие транскрипционного фактора АР-1 в дифференцировке клеток.

2.11 Роль р-катенина в сохранении плюрипотентности и дифференцировке мЭСК.

ГЛАВА 3. Материал и методика.

3.1 Культивирование клеток.

3.2 МТТ-тест.

3.3 Анализ активности каспаз в клеточных экстрактах.

3.4 Однопараметрический анализ распределения клеток методом проточной цитометрии.

• 3.4.1 Мечение CFSE для оценки интенсивности пролиферации.

3.5 Анализ активации транскрипции репортерной плазмиды e2f-luc.

3.6 Выявление активности SApGal в клетках.

3.7 Изучение локализации белков методом иммунофлюоресценции.

3.8 Выявление олигонуклеосомной фрагментации ДНК.

3.9 Вестерн-блотинг.

3.10 Анализ киназной активности in vitro.

3.12 Анализ транскрипции генов методом RT-PCR.

ГЛАВА 4. Результаты.

4.1 Влияние ингибиторов деацетилаз гистонов (HDAC) на пролиферацию и выживание мЭСК.

4.1.1 Скорость прироста популяции и клоногенная выживаемость мЭСК.

4.1.2 Распределение мЭСК по фазам клеточного цикла.

4.1.3 Индукция клеточной гибели после воздействия ингибиторов HDAC.

4.1.4 Активация каспаз в мЭСК после воздействия ингибиторов HDAC.

4.1.5 Замедление пролиферации мЭСК после воздействия TSA подтверждается с помощью мечения CFSE.

4.1.6 Подавление Е2Р-зависимой транскрипции в мЭСК после обработки ингибиторами HDAC.

4.1.7 Экспрессия генов, кодирующих регуляторы клеточный цикл после воздействия ингибиторов HDAC.

4.1.8 Обработка мЭСК TSA не вызывает индукции ускоренного клеточного старения и транскрипции гена pl6mk4a.

4.2. Внутриклеточная локализация Р-катенина, Е- и N-кадгеринов и актина в недифференцированных мЭСК.

4.3 Признаки эпителиально-мезенхимального перехода, наблюдаемые при дифференцировке.

4.3.1 Активность транскрипционного фактора АР-1 увеличивается в ходе дифференцировки клеток эмбриональной карциномы мыши линии F9.

4.3.2 Уровень транскрипции генов c-fos и c-jun увеличивается в ходе дифференцировки клеток F9.

4.3.3 В недифференцированных клетках F9 транскрипция гена c-fos находится под негативной регуляцией деацетилаз гистонов.

4.3.4 Дифференцировка мЭСК сопровождается экспрессией генов и проявлением морфологических признаков эпителиально-мезенхимального перехода.

4.3.5 Воздействие TSA не вызывает признаков ЭМП в мЭСК.

ГЛАВА 5. Обсуждение результатов.

5.1 Влияние ингибиторов HDAC на клеточный цикл мЭСК.

5.2 Влияние ингибиторов HDAC на жизнеспособность мЭСК.

5.3. Признаки дифференцировки и ускоренного клеточного старения после воздействия ингибиторов HDAC.

5.4. Признаки эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП) при дифференцировке клеток эмбриональной карциномы и эмбриональных стволовых клеток мыши.

5.4.1. Активность транскрипционного фактора АР-1 увеличивается при дифференцировке клеток эмбриональной карциномы мыши линии F9.

5.4. Локализация р-катенина в быстроделящихся недифференцированных мЭСК.

5.5. Необходимость Wnt-сигнального пути для реализации (ЭМП) в ранних эмбриональных клетках.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизмы антипролиферативного действия ингибиторов деацетилаз гистонов на эмбриональные стволовые клетки мыши»

ГЛАВА 1. Введение 1.1 Актуальность проблемы

В настоящее время, изучение механизмов пролиферации эмбриональных стволовых клеток представляет важное направление клеточной и молекулярной биологии. Эмбриональные стволовые клетки мыши (мЭСК) являются ценным объектом для изучения процессов раннего эмбрионального развития благодаря своей доступности и относительной простоте культивирования. Сохранение плюрипотентности в течение многих пассажей позволяет создавать химерные особи мышей и благодаря этому изучать функции генов in vivo. Способность к дифференцировке в различные типы клеток in vitro делает эмбриональные стволовые клетки перспективным объектом для разработки подходов направленной дифференцировки и их будущего использования в качестве материала для терапии поврежденных тканей (Brook, Gardner, 1997; Smith, 2001). Для создания и применения таких методов необходимо детально исследовать механизмы, обеспечивающие сохранение недифференцированного состояния эмбриональных стволовых клеток. Ряд морфологических и молекулярных признаков сближает недифференцированные мЭСК с трансформированными клетками. Можно отметить следующие признаки: высокий пролиферативный потенциал мЭСК и независимость пролиферации от экзогенных ростовых факторов (Schratt et al., 2001). Отличительной особенностью мЭСК является также их неспособность к длительной блокам G1/S или G2/M клеточного цикла при действии ДНК-повреждающих агентов и стресс-факторов, что говорит об отсутствии полноценных сверочных точек клеточного цикла (Малашичева и др., 2002). По-видимому, как в опухолевых клетках, так и в мЭСК постоянно функционируют эндогенные митогенные сигналы, которые стимулируют продвижение мЭСК по клеточному циклу.

Активность деацетилаз гистонов (HDAC) может быть связана как с поддержанием автономной пролиферации, так и трансформированного фенотипа, поскольку репрессия некоторых негативных регуляторов пролиферации и индукторов дифференцировки происходит с участием этих ферментов (Dokmanovic, Marks, 2005). Есть данные, позволяющие предполагать, что активность HDAC необходима для пролиферации ранних эмбриональных клеток. Изучение эмбрионов мышей, нокаутных по HDAC1, показало снижение числа клеток внутренней клеточной массы Щ и раннюю летальность зародышей. мЭСК, полученные из таких эмбрионов, имеют более низкую скорость прироста популяции (Lagger et al., 2002). С другой стороны, есть данные, показывающие, что активность HDAC необходима для дифференцировки мЭСК (Lee et al., 2004а). В настоящее время, ингибиторы HDAC рассматриваются как перспективные противоопухолевые агенты и активно используются в научных исследованиях. В зависимости от тканевой принадлежности и функционального состояния, различные клетки обладают разной чувствительностью к ингибиторам HDAC, реализуя как длительные блоки клеточного цикла с признаками дифференцировки и клеточного старения, так и кратковременные остановки с последующим запуском программы апоптоза. Изучение эффекта ингибиторов HDAC на мЭСК является актуальной и интересной задачей, поскольку щ это позволит получить информацию об особенностях системы регуляции клеточного цикла в этих клетках.

Механизмы автономной пролиферации мЭСК пока изучены недостаточно, в частности, нет четких данных о сигнальных путях, вовлеченных в этот процесс. Недавно было показано, что активация Wnt/p-катенинового пути способствует поддержанию плюрипотентного состояния мЭСК даже в отсутствии фактора LIF (Sato et al., 2004). Как известно, р-катенин выполняет в клетке разнообразные функции в разных компартментах клетки; вместе с Е-кадгерином он участвует в образовании межклеточных контактов, в составе комплексов с транскрипционными факторами семейства LEF/TCF р-катенин функционирует в качестве коактиватора транскрипции генов в ядре, а в составе цитоплазматических комплексов с белками CKI, GSK3p, АРС и аксином р-катенин фосфорилируется для последующей протеасомной деградации (Bienz, 2004). Поскольку р-катенин-зависимая транскрипция, отмечается в быстроделящихся клетках-предшественниках тканей (Не et al., 2004; Reya et al., 2003) и в различных типах опухолевых клеток (Fukuchi et al., 1998; Sparks et al, 1998; Koch et al., 1999), а экспрессия Е-кадгерина может # модулироваться на уровне структуры хроматина (Peinado et al., 2004), большой интерес представляет исследовать локализацию р-катенина в недифференцированных быстроделящихся мЭСК и при дифференцировке. Учитывая, что сигнальная функция р-катенина важна в ходе гаструляции при реализации эпителиально-мезенхимального перехода (Kemler et al., 2004), важно выяснить, как меняется экспрессия генов, ф характерных для эпителиальных и мезенхимных клеток при дифференцировке мЭСК.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Чуйкин, Илья Александрович

выводы

1. Ингибиторы деацетилаз гистонов вызывают подавление пролиферации мЭСК, индуцируя блок клеточного цикла и последующий запуск апоптотической гибели.

2. Подавление пролиферации мЭСК после воздействия ингибиторов деацетилаз гистонов сопровождается снижением уровня мРНК таких позитивных регуляторов клеточного цикла как циклин D1, циклин А, фосфатаза cdc25A, c-myc, e2fl и усилением экспрессии негативных регуляторов - p21Wafl и р57к,р2.

3. Воздействие ингибиторов деацетилаз гистонов вызывает появление некоторых признаков дифференцированных клеток, но не приводит к полноценной дифференцировке или к индукции ускоренного клеточного старения.

4. В недифференцированных быстроделящихся мЭСК р-катенин локализован в области клеточных мембран и не детектируется в ядрах клеток.

5. Установлено, что перемещение р-катенина в ядро, появление на мембране N-кадгерина и перераспределение Е-кадгерина из мембран в цитоплазму наблюдается при дифференцировке клеток, вызванной ретиноевой кислотой.

6. Показано, что дифференцировка мЭСК, индуцированная ретиноевой кислотой сопровождается изменением транскрипции генов, характерным для эпителиально-мезнхимального перехода.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ

ДИССЕРТАЦИИ

Лянгузова М. С., Чуйкин И. А., Поспелов В.А. Необходимость активации Р13-киназы для пролиферации клеток эмбриональной карциномы мыши линии F9. Цитология. 2004. Т 46. № 1. С. 26-34

Чуйкин И. А., Лянгузова М. С., Поспелов В. А. Транскрипция гена c-fos и ДНК-связывающая активность транскрипционного фактора АР-1 увеличиваются в результате дифференцировки клеток эмбриональной карциномы мыши линии F9. Цитология. 2004. Т. 46. № 12. С. 1080-91 Лянгузова М.С., Чуйкин И.А., Поспелов В.А. Фармакологические ингибиторы киназы PI3K вортманнин и LY294002 оказывают различное действие на пролиферацию эмбриональных стволовых клеток мыши. 2006. Цитология. Т. 48. № 7. С. 560-8

Чуйкин И. А., Лянгузова М. С., Поспелов В. А. Механизмы антипролиферативного действия ингибиторов деацетилаз гистонов на эмбриональные стволовые клетки мыши. Цитология. 2006. Т 48. № 8. С. 61223

Чуйкин И.А., Поспелов В.А. Анализ ДНК-связывающей активности фактора АР-1 и транскрипции генов раннего ответа c-fos и c-jun в клетках эмбриональной карциномы мыши линии F9. Всероссийский симпозиум 1-й съезд общества клеточной биологии. Санкт-Петербург, 14-16 октября 2003. Стендовое сообщение. Цитология. 2003. Т. 45. № 9. С. 945 Tchouikine I.A., Pospelov V.A. Regulation of AP-1 transcription factor through different signaling pathways in mouse F9 teratocarcinoma cells. Oral presentation. tVi

14 European Student Conference at Chante, Берлин, Германия. 4-9 ноября 2003. Abstract Book. P. 345

Чуйкин И.А., Лянгузова M.C., Поспелов B.A. Ингибитор Р13-киназы LY294002 вызывает обратимое подавление пролиферации эмбриональных стволовых клеток мыши линии IOUD-2. Международный симпозиум по биологии клетки в культуре «Стволовые клетки, регенерация, клеточная терапия». Санкт-Петербург, 25-27 октября 2004. Стендовое сообщение. Цитология. Т. 46. С. 946

Chuykin I.A., Liangouzova M.S., Pospelov V.A. PI3-kinase inhibitor LY294002 supresses proliferation of murine embryonic stem cells but does not affect STAT-3 phosphorylation. 3rd Annual Meeting of the International Society for Stem Cell Research. San-Francisco, June 23-25, 2005. Стендовое сообщение. Abstract book. P. 83

Чуйкин И.А., Лянгузова M.C., Поспелов B.A. Механизмы антипролиферативного действия ингибитора HDAC на эмбриональные стволовые клетки мыши. Конференция «Биология стволовых клеток: фундаментальные аспекты». Москва 17-18 ноября 2005 г. Устный доклад. Программа и тезисы докладов. С. 73-75

ГЛАВА 6. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Результаты настоящей работы говорят о том, что активность деацетилаз гистонов необходима для обеспечения высокопролиферативного статуса мЭСК. Ингибиторы HDAC оказывают негативное влияние на пролиферацию мЭСК, влияя на систему регуляции клеточного цикла. Инкубация с ингибиторами HDAC приводит к снижению экспрессии позитивных регуляторов клеточного цикла, циклина D1, А, фосфатазы cdc25A, c-myc, e2fl. Известно, что отсутствие длительных блоков клеточного цикла после ДНК-повреждающих воздействий на мЭСК, коррелирует с низким уровнем экспрессии негативного регулятора пролиферации, ингибитора циклин-киназных комплексов, p21Wafl (Малашичева и др., 2002). В настоящей работе показано, что ингибитор HDAC TSA индуцирует экспрессию гена p21Wa^ на уровне мРНК и белка и усиливает транскрипцию другого ингибитора циклин-киназных комплексов, р57к,р2. Воздействие ингибиторов HDAC приводит к снижению активности циклин-киназных комплексов, содержащих CDK2. CDK2 рассматривается как один из ключевых регуляторов пролиферации мЭСК, поскольку активность этой киназы высока и не снижается в ходе всего клеточного цикла (Stead et al., 2002). Негативное влияние HDAC на транскрипцию гена c-fos в недифференцированных клетках F9 является еще одним подтвержением тому, что активность HDAC участвует в поддержании недифференцированного состояния клеток.

Неспособность мЭСК реализовать программу дифференцировки или ускоренного клеточного старения после воздействия ингибиторов HDAC, по всей видимости, связана с тем, что остановка пролиферации, вызванная этими агентами, приводит к запуску программы апоптоза. Система регуляции клеточного цикла мЭСК настроена на постоянное размножение, а постепенное снижение интенсивности деления может происходить при дифференцировке. В ходе дифференцировки происходит репрограммирование хроматина, процесс, при котором происходят многообразные посттрансляционные модификации гистонов. В одной из работ показано, что активность деацетилаз необходима для процесса дифференцировки (Lee et al., 2004). Поэтому обработка ингибиторами HDAC приводит к временному подавлению пролиферации, обратимому при возврате клеток в чистую среду и гибельному при продолжительном воздействии, но не может вызывать полноценную дифференцировку. То, что признаки апоптотической гибели, олигонуклеосомная фрагментация ДНК и активация каспаз отмечаются именно в плавающих, а не в прикрепленных клетках, может означать, что контакты клеток могут обеспечивать сигнал выживания. Известно, что эмбриональные стволовые клетки предпочитают расти колониями. В качестве модели дифференцировки в настоящей работе использовалось воздействие ретиноевой кислоты, отдельно или в сочетании с дибутирил-цАМФ. Показано, что в результате дифференцировки принципиально изменяется морфология клеток, экспрессия маркеров эпителиально-мезенхимального перехода, структура цитоскелета и локализация белков межклеточных контактов, Е- и N- кадгеринов, р-катенина. Показано, что в ходе дифференцировки клеток F9 увеличивается транскрипция генов c-fos, c-jun и ДНК-связывающая активность фактора АР-1, который может участвовать в ЭМП. Воздействие TSA, хотя и вызывает морфологические изменения клеток, а кроме того индуцирует транскрипцию гена c-fos, неспособно вызвать такие признаке эпителиально-мезенхимального перехода как экспрессию dab2, N-кадгерина и появление актиновых стресс-фибрилл. В настоящей работе показано, что в недифференцированных мЭСК, обладающих чертами трансформированного фенотипа и высоким пролиферативным потенциалом, Р-катенин локализуется исключительно у мембран и его локализация не меняется даже после активации Wnt-пути ингибитором киназы GSK3P, ВЮ. Ядерная локализация Р-катенина в клетках, обработанных ретиноевой кислотой, свидетельствует о том, что активация Wnt-пути происходит при дифференцировке мЭСК.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чуйкин, Илья Александрович, 2006 год

1. Абрамова М. В., Светликова С. Б., Аксенов Н. Д., Поспелова Т. В., Поспелов В. А. Игнбнтор деацетилаз гистонов останавливает пролиферацию клеток, трансформированных онкогенами Е1А и cHA-RAS. Цитология. 2003. Т. 45. № 11. С. 1100-108

2. Кислякова Т.В., Поспелова Т.В., Поспелов В.А. Ростовые и морфологические характеристики недифференцированных и дифференцированных клеток линии тератокарциномы мыши F9. Цитология. 19906. Т. 32. № 1. 54-60

3. Лянгузова М.С., Чуйкин И.А., Поспелов В.А. Фармакологические ингибиторы киназы PI3K вортманнин и LY294002 оказывают различное действие на пролиферацию эмбриональных стволовых клеток мыши. 2006. Цитология. Т. 48. № 7. С. 560-568

4. Малашичева А.Б., Кислякова Т.В., Саватьер П., Поспелов В.А. Эмбриональные стволовые клетки не вступают в арест клеточного цикла под воздействием ДНК-повреждающих факторов. Цитология. 2002. Т. 44. № 7. С. 643-8

5. Розанов Ю.М. Проточная цитометрия,- Методы культивирования клеток. Л.: Наука, 1987, с. 136-146

6. Туроверов К.К., Бикташев А.Г., Дорофеюк А.В., Кузнецова И.М. Комплекс аппаратных и программных средств для измерения спектральных, поляризационных и кинетических характеристик флуоресценции в растворе. Цитология. 1998. Т. 40. № 8/9. С. 806-17

7. Abraham R.T. Cell cycle checkpoint signaling throughthe ATM and ATR kinases. Genes Dev. 2001. V. 15. № 17. P. 2177-96

8. Aladjem M.I., Spike B.T., Rodewald L.W., Hope T.J., Klemm M., Jaenisch R., Wahl G.M. ES cells do not activate p53-dependent stress responses and undergo p53-independent apoptosis in response to DNA damage. Curr Biol. 1998. V. 8 № 3. P. 145-55

9. Anneren C., Cowan C.A., Melton D.A. The Src family of tyrosine kinases is important for embryonic stem cell self-renewal. 2004. J Biol Chem. V. 279. № 30. P.31590-8

10. Araki K., Nakajima Y., Eto K., Ikeda M. Distinct recruitment of E2F family members to specific E2F-binding sites mediates activation and repression of the E2F1 promoter. Oncogene. 2003. V. 22. № 48. P. 7632-41

11. Austin T.W., Solar G.P., Ziegler F.C., Liem L., Matthews W. A role for the Wnt gene family in hematopoiesis: expansion of multilineageprogenitor cells. Blood. 1997. V. 89. № 10. P. 3624-35

12. Avizienyte E., Wyke A.W., Jones R.J., McLean G.W., Westhoff M.A., Brunton V.G., Frame M.C. Src-induced de-regulation of E-cadherin in colon cancer cells requires integrin signalling. Nat Cell Biol. 2002. V. 4. № 8. P. 632-8

13. Bakiri L., Lallemand D., Bossy-Wetzel E., Yaniv M. Cell cycle-dependent variations in c-Jun and JunB phosphorylation: a role in the control of cyclin D1 expression. EMBO J. 2000. V. 19. №. 9. P. 2056-68

14. Batlle E., Sancho E., Franci C., Dominguez D., Monfar M., Baulida J., Garcia De Herreros A. The transcription factor snail is a repressor of E-cadherin gene expression in epithelial tumour cells. Nat Cell Biol. 2000. V. 2. № 2. P. 84-9

15. Behrens, J., Mareel, M. M., Van Roy, F. M., Birchmeier, W. Dissecting tumor cell invasion: epithelial cells acquire invasive properties after the loss of uvomorulin-mediated cell-cell adhesion. J Cell Biol. 1989. V. 108. № 6. P. 2435-47

16. Berx G., Cleton-Jansen A.M., Nollet F., de Leeuw W.J., van de Vijver M., Cornelisse C., van Roy F. E-cadherin is a tumour/invasion suppressor gene mutated in human lobular breast cancers. EMBO J. 1995. V. 14. № 24. P. 6107-15

17. Beug H. Activation of an inducible c-FosER fusion protein causes loss of epithelial polarity and triggers epithelial-fibroblastoid cell conversion. 1992. Cell. V. 71. № 7. P. 1103-16

18. Bienz M. P-Catenin: A Pivot between Cell Adhesion and Wnt Signalling. Curr Biol.2004. V. 15. №2. P. 64-6

19. Blais A., Dynlacht B.D. Hitting their targets: an emerging picture of E2F and cell cycle control. Curr Op Gen Dev. 2004. V. 14. № 5. P. 527-32

20. Bortvin A., Eggan K., Skaletsky H., Akutsu H., Berry D.L., Yanagimachi R., Page D.C., Jaenisch R. Incomplete reactivation of Oct4-related genes in mouse embryos cloned from somatic nuclei. Development. 2003. V. 130. № 8. P. 1673-80

21. Boyer В., Roche S., Denoyelle M., Thiery J.P. Src and Ras are involved in separate pathways in epithelial cell scattering. EMBO J. 1997. V. 16. № 19. P. 5904-13

22. Brabletz Т., Jung A., Reu S., Porzner M., Hlubek F., Kunz-Schughart L.A., Knuechel R., Kirchner T. Variable beta-catenin expression in colorectal cancers indicates tumor progression driven by the tumor environment. PNAS. 200l.V. 98. № 18. P. 10356-61

23. Brabletz Т., Jung A., Spaderna S., Hlubek F., Kirchner T. Migrating cancer stem cells an integrated concept of malignant tumour progression. Nat Rev Cancer.2005. V. 5. № 9. P. 744-9

24. Bradford M.M. A rapid and sensitive method for the quantitation of mocrogram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Annal Biochem. 1976. V. 72.248-54

25. Brembeck F.H., Schwarz-Romond Т., Bakkers J., Wilhelm S., Hammerschmidt M., Birchmeier W. Essential role of BCL9-2 in theswitch between p-catenin's adhesive and transcriptional functions. Genes Dev. 2004. V. 18. № 18. P. 2225-30

26. Brinster R.L. The effect of cells transferred into the mouse blastocyst on subsequent development. J Exp Med. 1974. V. 140. № 4. P. 1049-56

27. Brook F.A., Gardner R.L. The origin and efficient derivation of embryonic stem cells in the mouse. PNAS. 1997. V. 94. № 11. P. 5709-12

28. Bryja V., Pachernik J., Soucek K., Horvath V., Dvorak P., Hampl A. Increased apoptosis in differentiating p27-deficient mouse embryonic stem cells. Cell Mol Life Sci. 2004. V. 61 № 11. p. 1384-400.

29. Burdon Т., Smith A., Savatier P. Signalling, cell cycle and pluripotency in embryonic stem cells. 2002. Trends in Cell Biology. V. 12. № 9. P. 432-438

30. Burdon Т., Stracey C., Chambers I., Nichols J., Smith A. Suppression of SHP-2 and ERK signalling promotes self-renewal of mouse embryonic stem cells. Dev Biol. 1999. V. 210. № l.P. 30-43

31. Cartwright P., McLean C., Sheppard A., Rivett D., Jones K., Dalton S. LIF/STAT3 controls ES cell self-renewal and pluripotency by a Мус-dependent mechanism. 2005. Development. V. 132. № 5. P. 885-96

32. Carver E.A., Jiang R., Lan Y., Oram K. F., Gridley T. The mouse Snail gene encodes a key regulator of the epithelial-mesenchymal transition. Mol Cell Biol. 2001. V. 21. №23. P. 8184-8

33. Cervantes R.B., Stringer J.R., Shao C., Tischfield J.A., Stambrook P.J.Embryonic stem cells and somatic cells differ in mutation frequency and type. PNAS. 2002. V. 99. № 6. P. 3586-90

34. Chambers I., Colby D., Robertson M., Nichols J., Lee S., Tweedie S., Smith A. Functional Expression Cloning of Nanog, a Pluripotency Sustaining Factor in Embryonic Stem Cells. Cell. 2003. V. 113. № 5. P. 643-55

35. Chambers I., Smith A. Self-renewal of teratocarcinoma and embryonic stem cells. Oncogene. 2004. V. 23. № 43. P. 7150-60

36. Chenn A., Walsh C.A.Regulation of cerebral cortical size by control of cell cycle exit in neural precursors. Science. 2002. V. 297. № 5580. P. 365-9

37. Chinenov Y., Kerppola Т.К. Close encounters of many kinds: Fos-Jun interactions that mediate transcription regulatory specificity. Oncogene. 2001. V. 20. № 19. P. 2438-52

38. Ciruna В., Rossant J. FGF signaling regulates mesoderm cell fate specification and morphogenetic movement at the primitive streak. Dev Cell. 2001. V. 1. № 1. P. 3749

39. Dewey M.J., Martin D.W., Martin J.G.R., Mintz B. Mosaic mice with teratocarcinoma-derived mutant cells deficient hypoxanthine phosphoribosyltransferase. PNAS. 1977. V. 74. № 12. P. 5564-68

40. Dokmanovic M., Marks P. A. Prospects: Histone deacetylase inhibitors. J Cell Biochem. 2005. V. 96. № 2. P. 293-304

41. Dorsky R.I., Moon R.T., Raible D.W. Control of neural crest cell fate by the Wnt signalling pathway. Nature. 1998. V. 396. № 6709. P. 370-3

42. Dunn K.J., Williams B.O., Li Y., Pavan W.J. Neural-crest-directed gene transfer demonstrates Wntl role in melanocyte expansion and differentiation during mouse development. PNAS. 2000. V. 97. № 18. P. 10050-5

43. Edme N., Downward J., Thiery J.P., Boyer B. Ras induces NBT-II epithelial cell scattering through the coordinate activities of Rac and МАРК pathways. J Cell Sci. 2002. V. 115. № 12. P. 2591-601

44. Edwards S.A., Rundell A.Y., Adamson E.D. Expression of c-fos antisense RNA inhibits the differentiation of F9 cells to parietal endoderm. Dev Biol. 1988. V. 129. № 1. P. 91-102

45. Eriksson M., Leppa S. Mitogen-activated Protein Kinases and Activator Protein 1 Are Required for Proliferation and Cardiomyocyte Differentiation of PI 9 Embryonal Carcinoma Cells. J Biol Chem. 2002. V. 277. № 18. P. 15992-16001

46. Faast R., White J., Cartwright P., Crocker L., Sarcevic В., Dalton S. Cdk6-cyclin D3 activity in murine ES cells is resistant to inhibition by pl6(INK4a). Oncogene. 2004. V. 23. №2. P. 491-502

47. Fingar D.C., Blenis J. Target of rapamycin (TOR): an integrator of nutrient and growth factor signals and coordinator of cell growth and cell cycle progression. Oncogene. 2004. V. 23. № 18. P. 3151-71

48. Frixen U.H., Behrens J., Sachs M., Eberle G., Voss В., Warda A., Lochner D., Birchmeier W. E-cadherin-mediated cell-cell adhesion prevents invasiveness of human carcinoma cells. J Cell Biol. 1991. V. 113. № 1. P. 173-85

49. Fujita Y., Krause G., Scheffner M., Zechner D., Leddy H.E., Behrens J., Sommer T. Birchmeier W. Hakai, a c-Cbl-like protein, ubiquitinates and induces endocytosis of the E-cadherin complex. Nat Cell Biol. 2002. V. 4. № 3. P. 222-31

50. Fukada Т., Ohtani Т., Yoshida Y., Shirogane Т., Nishida K., Nakajima K., Hibi M., Hirano T. STAT3 orchestrates contradictory signals in cytokine-induced G1 to S cell-cycle transition. EMBO J. 1998. V. 17. № 22. P. 6670-7

51. Fukuchi Т., Sakamoto M., Tsuda H., Maruyama K., Nozawa S., Hirohashi S. Beta-catenin mutation in carcinoma of the uterine endometrium. Cancer Res. 1998. V. 58. № 16. P. 3526-8

52. Gat U., DasGupta R., Degenstein L., Fuchs E. De Novo Hair Follicle Morphogenesis and hair Tumors in Mice Expressing a Truncated b-Catenin in Skin. Cell. 1998. V. 95. № 10. P. 605-14

53. Gidekel S., Bergman Y. A unique developmental pattern of Oct-3/4 DNA methylation is controlled by a cis-demodification element. 2002. J Biol Chem. V. 277. №37. P. 34521-30

54. Gottardi C.J., Gumbiner B.M. Distinct molecular forms of beta-catenin are targeted to adhesive or transcriptional complexes. J Cell Biol. 2004. V. 167. № 2. P. 339^19

55. Gross V.S., Hess M., Cooper G.M. Mouse embryonic stem cells and preimplantation embryos require signaling through the phosphatidylinositol 3-kinase pathway to suppress apoptosis. Mol Reprod Dev. 2005. V. 70. № 3. P. 324-32

56. Gui C.Y., Ngo L., Xu W.S., Richon V.M., Marks P.A. Histone deacetylase (HDAC) inhibitor activation of p21Wafl involves changes in promoter-associated proteins, including HDAC1. PNAS. 2004. V. 101. № 5. P. 1241-6

57. Haegel H., Larue L., Ohsugi M., Fedorov L., Herrenknecht K., Kemler R. Lack of b-catenin affects mouse development at gastrulation. Development. 1995. V. 121. № 11. P. 3529-37

58. Hanna L.A., Foreman R.K., Tarasenko I.A., Kessler D.S., Labosky P.A. Requirement for Foxd3 in maintaining pluripotent cells of the early mouse embryo. Genes Dev. 2002. V. 16. № 20. P. 2650-61

59. Hari L., Brault V., Kleber M., Lee H.Y., Ille F., Leimeroth R., Paratore C., Suter U., Kemler R., Sommer L. Lineage-specific requirements of b-catenin in neural crest development. J Cell Biol. 2002. V. 159. № 5. P. 867-80

60. Hattori N., Nishino К., Ко Y.G., Hattori N., Ohgane J, Tanaka S, Shiota K. Epigenetic control of mouse Oct-4 gene expression in embryonic stem cells and trophoblast stem cells. J Biol Chem. 2004. V. 279. № 17. P. 17063-9

61. Hay D.C., Sutherland L., Clark J., Burdon T. Oct-4 knockdown induces similar patterns of endoderm and trophoblast differentiation markers in human and mouse embryonic stem cells. Stem Cells. 2004. V. 22. № 2. P. 225-35

62. He T.C., Sparks A.B., Rago C., Hermeking H., Zawel L., da Costa L., Morin P.J.,Vogelstein В., Kinzler K.W. Identification of c-MYC as a target of the APC pathway. Science. 1998.V. 281. № 5382. P. 1509-12

63. Hecht A., Vleminckx K., Stemmler M.P., Van Roy F., Kemler R. The p300/CBP acetyltransferases function as transcriptional coactivators of b-catenin in vertebrates. EMBO J. 2000. V. 19. № 8. P. 1839-50

64. Hochedlinger K., Yamada Y., Beard K., Jaenisch R. Ectopic Expression of Oct-4 Blocks progenitor-cell differentiation and causes dysplasia in epithelial tissues. 2005. Cell. V. 121. № 3. P. 465-77

65. Hoshikawa Y., Kwon H.J., Yoshida M., Horinouchi S., Beppu T. Trichostatin A induces morphological changes and gelsolin expression by inhibiting histonedeacetylase in human carcinoma cell lines. Exp Cell Res. 1994. V. 214. № 1. P. 189-97

66. Hong Y., Stambrook P.J. Restoration of an absent G1 arrest and protection from apoptosis in embryonic stem cells after ionizing radiation. PNAS. 2004. V. 101. № 40. P. 14443-8

67. Huber A.H., Weis W.I. The structure of the P-catenin/E-cadherin complex and the molecular basis of diverse ligand recognition by P-catenin. Cell. 2001. V. 105. № 3. P.391-402

68. Huelsken J., Vogel R., Brinkmann V., Erdmann В., Birchmeier C., Birchmeier W. Requirement for b-Catenin in Anterior-Posterior Axis Formation in Mice. J Cell Biol. 2000. V. 148. № 3. P. 567-78

69. Huelsken J., Vogel R., Erdmann В., Cotsarelis G., Birchmeier W. b-Catenin controls hair follicle morphogenesis and stem cell differentiation in the skin. Cell. 2001. V. 105. №4. P. 533-45

70. Hussein S.M., Duff E.K., Sirard C. Smad4 and b-catenin coactivators functionally interact with lymphoid-enhancing factor to regulate graded expression of Msx2. J Biol Chem. 2003. V. 278. № 49. P. 48805-14

71. Ichikawa N., Miyashita Т., Nishimune Y., Matsushiro A. Production, purification and characterization of the plasminogen activator in teratocarcinoma stem cells induced with sodium butyrate. Biken J. 1984. V. 4. P. 143-51

72. Insinga A., Minucci S., Pelicci P.G. Mechanisms of selective anticancer action of histone deacetylase inhibitors. Cell Cycle. 2005.V. 4. № 6. P. 741-3

73. Ishikawa F. Cellular senescence, an unpopular yet trustworthy tumor suppressor mechanism. Cancer Sci. 2003. V. 94. № 11. P. 944-7

74. Israsena N., Ни M., Fu W., Kan L., Kessler J.A. The presence of FGF2 signaling determines whether b-catenin exerts effects on proliferation or neuronal differentiation of neural stem cells. Dev Biol. 2004. V. 268. № 1. P. 220-31

75. Jamora C., DasGupta R., Kocieniewski P., Fuchs E. Links between signal transduction, transcription and adhesion in epithelial bud development. Nature. 2003 .V. 422. № 6929. P. 317-22

76. Jin C., Li H., Murata Т., Sun K., Horikoshi M., Chiu R., Yokoyama K.K. JDP2, a repressor of AP-1, recruits a histone deacetylase 3 complex to inhibit the retinoicacid-induced differentiation of F9 cells. Mol Cell Biol. 2002. V. 22. № 13. P. 481526

77. Jochum W., Passegue E., Wagner E.F. AP-1 in mouse development and tumorigenesis. Oncogene. 2001. V. 20. № 19. P. 2401-12

78. Jones S.M., Kazlauskas A. Growth factor-dependent signaling and cell cycle progression. FEBS Lett. 2001 V. 490. № 3. P. 110-6

79. Karasawa Y., Okisaka S. Inhibition of Histone Deacetylation by Butyrate Induces Morphological Changes in Y79 Retinoblastoma Cells. Jpn J Ophthalmol. 2004. V. 48. №6. P. 542-51

80. Karin M., Liu Z., Zandi E. AP-1 function and regulation. Curr Op Cell Biol. 1997. V. 9. № 2. P. 240-6

81. Kemp C., Willems E., Abdo S., Lambiv L., Leyns L. Expression of All Wnt Genes and Their Secreted Antagonists During Mouse Blastocyst and Postimplantation Development. Dev Dynamics. 2005. V. 233. № 3. P. 1064-75

82. Kleber M., Sommer L. Wnt signaling and the regulation of stem cell function. Curr Op Cell Biol. 2004. V. 16. № 6. P. 681-7

83. Koch A., Denkhaus D., Albrecht S., Leuschner I., von Schweinitz D., Pietsch T. Childhood hepatoblastomas frequently carry a mutated degradation targeting box of• the beta-catenin gene. Cancer Res. 1999. V. 59. № 2. P. 269-73

84. Korinek V., Barker N., Moerer P., van Donselaar E., Huls G., Peters P.J., Clevers H. Depletion of epithelial stem-cell compartments in the small intestine of mice lacking Tcf-4. Nat Genet. 1998. V. 19. № 4. P. 379-83

85. Korinek V., Barker N., Morin P.J., van Wichen D., de Weger R., Kinzler K.W., Vogelstein В., Clevers H. Constitutive transcriptional activation by a beta-catenin-Tcf complex in APC-/- colon carcinoma. Science. 1997. V. 275. № 5307. P. 1784-7

86. Kovary K., Bravo R. The jun and fos protein families are both required for cell cycle progression in fibroblasts. Mol Cell Biol. 1991. V. 12. № 11. P. 4466-72

87. Kukushkin A.N., Abramova M.V., Svetlikova S.B., Darieva Z.A., Pospelova T.V., Pospelov V.A. Downregulation of c-fos gene transcription in cells transformed by

88. Ф E1A and cHa-ras oncogenes: a role of sustained activation of MAP/ERK kinasecascade and of inactive chromatin structure at c-fos promoter. Oncogene. 2002. V. 21. №5. P. 719-30

89. Kuroda Т., Tada M., Kubota H., Kimura H., Hatano S.Y., Suemori H., Nakatsuji N., Tada T. Octamer and Sox elements are required for transcriptional cis regulation of Nanog gene expression. Mol Cell Biol. 2005. V 25. № 6. P. 2475-85

90. Larue L., Bellacosa A. Epithelial-mesenchymal transition in development and cancer: role of phosphatidylinositol 3' kinase/AKT pathways. Oncogene. 2005. V. 24. № 50. P. 7443-54

91. Lee J.H., Hart S.R., Skalnik D.G. Histone Deacetylase Activity Is Required for Embryonic Stem Cell Differentiation. Genesis. 2004. V. 38. № 1. P. 32-8

92. Lee T.I., Jenner R.G., Boyer L.A., Guenther M.G., Levine S.S., Kumar R.M.,

93. Chevalier В., Johnstone S.E., Cole M.F., Isono K., Koseki H., Fuchikami Т., Abe

94. K., Murray H.L., Zucker J.P., Yuan В., Bell G.W., Herbolsheimer E., Hannett N.M., Sun K., Odom D.T., Otte A.P., Volkert T.L., Bartel D.P., Melton D.A., Gifford

95. D.K., Jaenisch R., Young R.A. Control of developmental regulators by Polycomb in human embryonic stem cells. Cell. 2006. V. 125. № 2. P. 301-13

96. Leonard D.A., Rajaram N., Kerppola Т. K. Structural basis of DNA bending and oriented heterodimer binding by the basic leucine zipper domains of Fos and Jun. PNAS. 1997. V. 94. № 10. P. 4913-18

97. Leptin M. Twist and Snail as positive and negative regulators during Drosophila mesoderm development. Genes Dev. 1991. V. 5. № 9. P. 1568-76

98. Levanon D., Goldstein R.E., Bernstein Y., Tang H., Goldenberg D., Stifani S., Paroush Z., Groner Y. Transcriptional repression by AML1 and LEF-1 is mediated by the TLE/Groucho corepressors. PNAS. 1998. V. 95. № 20. P. 11590-95

99. Li L.Y., Luo X., Wang X. Endonuclease G is an apoptotic DNase when released from mitochondria. Nature. 2001. V. 412. № 6842. P. 95-9

100. Li M., Sendtner M., Smith A. Essential function of LIF receptor in motor neurons. Nature. 1995. V. 378. № 6558. P. 724-7

101. Lickert H., Bauer A., Kemler R., Stappert J. Casein kinase II phosphorylation of E-cadherin increases E-cadherin/beta-catenin interaction and strengthens cell-cell adhesion. J Biol Chem. 2000. V. 275. № 7. P. 5090-5

102. Lickert H., Kemler R. Functional analysis of cis-regulatory elements controlling initiation and maintenance of early Cdxl gene expression in the mouse. Dev Dyn. 2002. V. 225. № 1. P. 216-20

103. Liu P., Wakamiya M., Shea M.J., Albrecht U., Behringer R.R., Bradley, A. Requirement for Wnt3 in vertebrate axis formation. Nat Genet. 1999. V. 22. № 4. P. 361-5

104. Lloyd S., Fleming T.P., Collins J.E. Expression of Wnt genes during mouse preimplantation development. Gene Expr. Patterns. 2003. V. 3. № 3. P. 309-12

105. Logan C.Y., Miller J.R., Ferkowicz M.J., McClay D.R. Nuclear beta-catenin is required to specify vegetal cell fates in the sea urchin embryo. Development. 1999. V. 126. №2. P. 345-57

106. Loh Y., Wu Q., Chew J., Vega W.B., Zhang W., Cheng X., Bourque G., George J., Leong В., Liu J., Wong K., Sung K.W., Lee C.W.H., Zhao X., Chiu K., Lipovich L., Kuznetsov V.A., Robson P., Stanton L.W., Wei C., Ruan Y., Lim В., Ng H. The

107. Oct-4 and Nanog transcription network regulates pluripotency in mouse embryonic stem cells. Nat Genet. 2006. V. 38. № 4. P. 431-40

108. Malashicheva A.B., Sakabedoyan C., Bourillot P., Aksoy I., Afanassieff M.,

109. Savatier P. LIF/STAT3 controls cyclin E:Cdk-2 kinase activity and the Gl/S transition via regulation of Pim-1 in ES cells. 2006. Oncogene. (In Press)

110. Mathas S., Hinz M., Anagnostopoulos I., Krappmann D., Lietz A. Aberrantly expressed c-Jun and JunB are a hallmark of Hodgkin lymphoma cells, stimulate proliferation and synergize with NF-kappa B. EMBO J. 2002. V. 21. №. 15. P. 4104-13

111. Matsuda Т., Nakamura Т., Nakao K., Arai Т., Katsuki M., Heike Т., Yokota T. STAT3 activation is sufficient to maintain an undifferentiated state of mouse embryonic stem cells. EMBO J. 1999. V. 18. № 15. P. 4261-9

112. Mitsui K., Tokuzawa Y., Itoh H., Segawa K., Murakami M., Takahashi K.,

113. Maruyama M., Maeda M., Yamanaka S. The Homeoprotein Nanog Is Required for Maintenance of Pluripotency in Mouse Epiblast and ES Cells. Cell. 2003. V. 113. № 5. P. 631-42

114. Miyashita Т., Yamamoto H., Nishimune Y., Nozaki M., Morita Т., Matsushiro A. Activation of the mouse cytokeratin A (endo A) gene in teratocarcinoma F9 cells by the histone deacetylase inhibitor Trichostatin A. FEBS Lett. 1994. V. 353. № 2. P. 225-9

115. Montgomery N.D., Yee D., Chen A., Kalantiy S., Chamberlain S.J., Otte A.P., Magnuson T. The murine polycomb group protein Eed is required for global histone H3 lysine-27 methylation. Curr Biol. 2005. V. 15. № 10. P. 942-7

116. Moon R.T. Kohn A.D., De Ferrari G.V., Kaykas A. Wnt and beta-catenin signaling: desease and therapies. Nat Rev Genet. 2004. V. 5. № 9. P. 689-99

117. Morali O.G. Delmas V., Moore R., Jeanney C., Thiery J.P., Larue L. IGF-II induces rapid beta-catenin relocation to the nucleus during epithelium to mesenchyme transition. Oncogene. 2001. V. 20. № 36. P. 4942-50

118. Morin P.J. Beta-catenin signaling and cancer. BioEssays. 1999. V. 21. № 12. P. 1021-9

119. Muller Т., Choidas A., Reichmann E. & Ullrich A. Phosphorylation and free pool of P-catenin are regulated by tyrosine kinases and tyrosine phosphatases during epithelial cell migration. J Biol Chem. 1999. V. 274. № 15. P. 10173-83

120. Muller R., Wagner E.F. Differentiation of F9 teratocarcinoma stem cells after transfer of c-fos protooncogene. Nature. 1984. V. 311. № 5985. P. 438-42

121. Munro J., Barr N.I., Ireland H., Morrison V., Parkinson E.K. Histone deacetylase inhibitors induce a senescence-like state in human cells by a pl6-dependent mechanism that is independent of a mitotic clock. Exp Cell Res. 2004. V. 295. № 2. P. 525-38

122. Murakami M., Ichisaka Т., Maeda M., Oshiro N., Нага K., Edenhofer F., Kiyama H., Yonezawa K., Yamanaka S. mTOR is essential for growth and proliferation in early mouse embryos and embryonic stem cells. Mol Cell Biol. 2004. V. 24. № 15. P. 6710-8

123. Nelson W.J., Nusse R. Convergence of Wnt, beta-Catenin, and Cadherin Pathways. Science. 2004. V. 303. № 5663. P. 1483-7

124. Nichols J., Chambers I., Taga Т., Smith A. Physiological rationale for responsiveness of mouse embryonic stem cells to gpl30 cytokines. Development. 2001. V. 128. № 12. P. 2333-9

125. Nichols J., Davidson D., Taga Т., Yoshida K., Chambers I., Smith A. Complementary tissue-specific expression of LIF and LIF-receptor mRNAs in earlymouse embryogenesis. Mech Dev. 1996. V. 57. № 2. P. 123-31

126. Nieto M.A., Sargent M.G., Wilkinson D.G., Cooke J. Control of cell behavior during vertebrate development by Slug, a zinc finger gene. Science. 1994. V. 264. №5160. P. 835-9

127. Niwa H., Burdon Т., Chambers I., Smith A. Self-renewal of pluripotent embryonic stem cells is mediated via activation of STAT3. Genes Dev. 1998. V. 12. № 13. P. 2048-60

128. Niwa H., Miyazaki J., Smith A. Quantitative expression of Oct-3/4 defines differentiation, dedifferentiation or self-renewal of ES cells. Nat Genet. 2000. V. 24. № 4. P. 372-6

129. Niwa H., Toyooka Y., Shimosato D., Strumpf D., Takahashi K., Yagi R., Rossant J. щ Interaction between Oct3/4 and Cdx2 Determines Trophectoderm Differentiation.

130. Cell. 2005. V. 123. № 5. P. 917-29

131. Novak A., Hsu S.C., Leung-Hagesteijn C., Radeva G., Papkoff J., Montesano R., Roskelley C., Grosschedl R., Dedhar S. Cell adhesion and the integrin-linked kinase regulate the LEF-1 and beta-catenin signaling pathways. PNAS. 1998. V. 95. № 8. P. 4374-9

132. Ogryzko V.V., Hirai Т.Н., Russanova V.R., Barbie D.A., Howard B.H. Human fibroblast commitment to a senescence-like state in response to histone-deacetylase inhibitors is cell-cycle dependent. Mol Cell Biol. 1996. V. 16. № 9. P. 5210-18

133. Okamoto K., Okazawa H., Okuda A., Sakai M., Muramatsu M., Hamada H. A novel octamer binding transcription factor is differentially expressed in mouse embryonic cells. Cell. 1990. V. 60. № 3. P. 461-72

134. Okumura-Nakanishi S., Saito M., Niwa H., Ishikawa F. Oct-3/4 and Sox2 Regulate Oct-3/4 Gene in Embryonic Stem Cells. J Biol Chem. 2005. V. 280. № 7. P. 530717

135. Otero J.J., Fu W., Kan L., Cuadra A.E, Kessler J.A. P-Catenin signaling is required Ф for neuronal differentiation of embryonic stem cells. Development. 2004. V. 131. №15. P. 3545-57

136. О'Shea K.S. Self -renewal vs differentiation of mouse embryonic stem cells. Biol Reprod. 2004. V. 71. № 4. P. 1755-65

137. Ozawa M., Baribault H., Kemler R. The cytoplasmic domain of the cell adhesion molecule uvomorulin associates with three independent proteins structurally related in different species. EMBO J. 1989. V. 8. № 6. P. 1711-17

138. Paling N.R., Wheadon H., Bone H.K., Welham M.J. Regulation of embryonic stem cell self-renewal by phosphoinositide 3-kinase-dependent signaling. J Biol Chem. 2004. V. 279. № 46. P. 48063-70

139. Passegue E., Jochum W., Behrens A., Ricci R., Wagner E.F. JunB can substitute for Jun in mouse development and cell proliferation. Nat Genet. 2002. V. 30. № 2. P. 58-66

140. Passegue E., Wagner E.F. JunB suppresses cell proliferation by transcriptional activation of pl6(INK4a) expression. EMBO J. 2000. V. 19. №. 12. P. 2969-79

141. Peart M.J., Tainton K.M., Ruefli A A., Dear A E., Sedelies K.A., O'Reilly L.A., Waterhouse N.J., Trapani J.A., Johnstone R.W. Novel Mechanisms of Apoptosis Induced by Histone Deacetylase Inhibitors. Cancer Res. 2003. V. 63. № 15. 446071

142. Peinado H., Portillo F., Cano A. Transcriptional regulation of cadherins during development and Carcinogenesis. Int J Dev Biol. 2004. V. 48. P. 365-75

143. Pesce M. Scholer H.R. Oct-4: Gatekeeper in the Beginnings of Mammalian Development. 2001. Stem Cells. V. 19. № 4. P. 271-8

144. Polakis P. Wnt signaling and cancer. Genes Dev. 2000. V. 14. № 15. P. 1837-51

145. Polesskaya A., Seale P., Rudnicki M.A. Wnt signaling induces the myogenic specification of resident CD45+ adult stem cells during muscle regeneration. Cell.2003. V. 113. №7. P. 841-52

146. Prunier C., Howe P.H. Disabled-2 (Dab2) Is Required for Transforming Growth Factor-induced Epithelial to Mesenchymal Transition (EMT). J Biol Chem. 2005. V. 280. № 17. P. 17540-8

147. M., Beug H. Activation of an inducible c-FosER fusion protein causes loss of epithelial polarity and triggers epithelial-fibroblastoid cell conversion. Cell. 1992. V. 71. № 7. P. 1103-16

148. Reya Т., Duncan A.W, Ailles L., Domen J., Scherer D.C., Willertk K., Hintz L„ Nussek R., Weissman I.L. A role for Wnt signalling in self-renewal of haematopoietic stem cells. Nature. 2003. V. 423. № 6983. P. 409-14

149. Reya Т., Morrison S.J., Clarke M.F. Weissman I.L. Stem cells, cancer, and cancer stem cells. Nature. 2001. V. 414. № 6859. P. 105-11

150. Richon V.M., Sandhoff T.W., Rifkind R.A., Marks P.A. Histone deacetylase inhibitor selectively induces p21Wafl expression and gene-associated histone acetylation. PNAS. 2000. V. 97. № 18. P. 10014-9

151. Ringrose L., Paro R. Epigenetic regulation of cellular memory by the Polycomb and Trithorax group proteins. Annu Rev Genet. 2004. V. 38. P. 413-43

152. Roose J., Molenaar M., Peterson J., Hurenkamp J., Brantjes H., Moerer P., van de Wetering M., Destree O., Clevers H. The Xenopus Wnt effector XTcf-3 interacts

153. Ф with Groucho-related transcriptional repressors. Nature. 1998. V. 395. № 6702. P.608.12

154. Ruefli A.A., Ausserlechner M.J., Bernhard D., Sutton V.R., Tainton K.M., Kofler R., Smyth M.J., Johnstone R.W. PNAS. 2001. V. 98. № 19. P. 10833-38

155. Saez E., Rutberg S.E., Mueller E., Oppenheim H., Smoluk J., Yuspa S.H., Spiegelman B.M. c-fos Is Required For Malignant Progression of Skin Tumors. Cell. 1995. V. 82. № 5. P. 721-32

156. Sanders L.C., Matsumura F., Bokoch G.M., de Lanerolle P. Inhibition of myosin light chain kinase by p21-activated kinase. Science. 1999. V. 283. № 5410. P. 20835

157. Sanson В., White P., Vincent J.P. Uncoupling cadherin-based adhesion from wingless signalling in Drosophila. Nature. 1996. V. 383. № 6601. P. 627-30

158. Sato N., Meijer L., Scaltsounis L., Greengard P., Brivanlou A.H. Maintenance of pluripotency in human and mouse embryonic stem cells through activation of Wnt signaling by a pharmacological GSK-3-specific inhibitor. Nat Med. 2004. V. 10. № l.P. 55-63

159. Savatier P., Huang S., Szekely L., Wiman K.G., Samarut J. Contrasting patterns of retinoblastoma protein expression in mouse embryonic stem cells and embryonic fibroblasts. Oncogene. 1994. V. 9. № 3. P. 809-18

160. Schreiber E., Matthias P., Muller M.M., Schaffner W. Rapid detection of octamer binding proteins with 'mini-extracts', prepared from a small number of cells. Nucl Acid Res. 1989. V. 17. № 15. P. 6419

161. Shao Y., Gao Z., Marks P.A., Jiang X. Apoptotic and autophagic cell death induced by histone deacetylase inhibitors. PNAS. 2004. V. 101. № 52. P. 18030-5

162. Shaulian E., Karin M. AP-1 in cell proliferation and survival. Oncogene. 2001. V. 20. № 19. P. 2390-400

163. Sherr C.J., Roberts J.M. CDK inhibitors: positive and negative regulators of Gl-phase progression. Genes Dev. 1999. V. 13. № 12. P. 1501-12

164. Silva J., Chambers I., Pollard S., Smith A. Nanog promotes transfer of pluripotency after cell fusion. Nature. 2006. V. 441. № 7096. P. 997-1001

165. Smith A.G. Embryo-derived stem cells: of mice and man. Ann Rev Cell Dev Biol. 2001. V. 17. P. 435-62

166. Smith A.G., Heath J.K., Donaldson D.D., Wong G.G., Moreau J., Stahl M., Rogers D. Inhibition of pluripotential embryonic stem cell differentiation by purified polypeptides. Nature. 1988. V. 336. № 6200. P. 688-90

167. Sparks A.B., Morin P. J., Vogelstein В., Kinzler K.W. Mutational analysis of the APC/beta-catenin/TCF pathway in colorectal cancer. Cancer Res. 1998. V. 58. № 6. P. 1130-4

168. Stead E., White J., Faast R., Conn S., Goldstone S., Rathjen J., Dhingra U., Rathjen # P., Walker D., Dalton S. Pluripotent cell division cycles are driven by ectopic Cdk2,cyclin A/E and E2F activities. Oncogene. 2002. V. 21. P. 8320-33

169. Stevens C., La Thangue N.B. E2F and cell cycle control: a double-edged sword. Arch Biochem Biophys. 2003.V. 412. P. 157-69

170. Stewart C.L., Kaspar P., Brunet L.J., Bhatt H., Gadi I., Kontgen F., Abbondanzo S.J. Blastocyst implantation depends on maternal expression of leukaemia inhibitory factor. Nature. 1992. V. 359. № 6390. P. 76-9

171. Stockinger A., Eger A., Wolf J, Beug H., Foisner R. E-cadherin regulates cell growth by modulating proliferation-dependent fl-catenin transcriptional activity. J Cell Biol. 2001. V. 154. № 6. P. 1185-96

172. Stoker M., Perryman M. An epithelial scatter factor released by embryo fibroblasts. J Cell Sci. 1985. V. 77. P. 209-23

173. Strickland S. Mouse teratocarcinoma cells: prospects for the study of embryogenesis and neoplasma. Cell. 1981. V. 24. № 2. P. 277-8

174. Sun H., Lesche R., Li D.M., Liliental J., Zhang H., Gao J., Gavrilova N., Mueller В., Liu X., Wu H. PTEN modulates cell cycle progression and cell survival by

175. Ф regulating phosphatidylinositol 3,4,5,-trisphosphate and Akt/protein kinase Вsignaling pathway. PNAS. 1999. V. 96. № 11. P. 6199-204

176. Takahashi К., Mitsui К., Yamanaka S. Role of ERas in promoting tumour-like properties in mouse embryonic stem cells. Nature. 2003. V. 423. № 6939. P. 541-5

177. Tetsu O. McCormick F. b-catenin regulates expression of cyclin D1 in colon carcinoma cells. Nature. 1999. V. 398. № 6726. P. 422-26

178. Thiery J.P. Epithelial-mesenchymal transitions in tumour progression. Nat Rev Cancer. 2002.V. 2. № 6. P. 442-54

179. Verheijen M., Wothuis R., Bos J., Defize L. The Ras/Erk pathway induces primitive endoderm but prevents parietal endoderm differentiation of F9 embrional carcinoma cells. J Biol Chem. 1999. V. 274. № 3. P. 1487-94

180. Villar-Garea A., Esteller M. Histone deacetylase inhibitors: understanding a new wave of anticancer agents. Int J Cancer. 2004. V. 112. № 2. P. 171-8

181. Wang Q.T., Piotrowska K., Ciemerych M.A., Milenkovic L., Scott M.P., Davis R.W., Zernicka-Goetz M.A. Genome-wide study of gene activity reveals developmental signaling pathways in the preimplantation mouse embryo. Dev Cell. 2004. V. 6. № l.P. 133-44

182. Warrener R, Beamish H, Burgess A, Waterhouse NJ, Giles N, Fairlie D, Gabrielli B. Tumor cell-selective cytotoxicity by targeting cell cycle checkpoints. FASEB J. 2003. V. 17. № 11. P. 1550-2

183. Watanabe S., Umehara H., Murayama K., Okabe M., Kimura Т., Nakano T. Activation of Akt signaling is sufficient to maintain pluripotency in mouse and primate embryonic stem cells. Oncogene. 2006. V 25. № 1. P. 156-63

184. Wenzel A., Iseli H.P., Fleischmann A., Hafezi F., Grimm C. et al. Fra-1 substitutes for c-Fos in AP-1-mediated signal transduction in retinal apoptosis. J Neurochem. 2002. V. 80. №6. P. 1089-94

185. Whitehead I., Kirk H., Kay R. Expression cloning of oncogenes by retroviral transfer of cDNA libraries. Mol Cell Biol. 1995. V. 15. № 2. P. 704-10

186. Whitmarsh A.J., Davis R.J. Transcription facror AP-1 regulation by mitogen-activated protein kinase signal transduction pathways. J Mol Med. 1996. V. 74. № 10. P. 589-607

187. Wiles M.V., Johansson B.M. Embryonic stem cell development in a chemically defined medium. Exp Cell Res. 1999. V. 247. № 1. P. 241-8

188. Wisdom R. API: one Switch to many signals. Exp. Cell Res. 1999. V. 253. № 1. P. 180-5

189. Wisdom R., Johnson R.S., Moore C. c-Jun regulates cell cycle progression and apoptosis by distinct mechanisms. EMBO J. 1999. V. 18. № 1. P. 188-97

190. Xiao H., Hasegawa Т., Miyaishi O., Ohkusu K., Isobe K. Sodium butyrate induces NIH3T3 cells to senescence-like state and enhances promoter activity ofp21 Wafl/CIPl in p53-independent manner. Biochem Biophys Res Commun. 1997. V. 237. № 2. P. 457-60

191. Yamaguchi-Iwai Y., Satake M., Murakami Y., Sakai M., Muramatsu M., Ito Y. Differentiation of F9 embryonal carcinoma cells induced by the c-jun and activated c-Ha-ras oncogenes. PNAS. 1990. V. 87. №. 21. P. 8670-74

192. Yamane Т., Dylla S.J., Muijtjens M., Weissman I.L. Enforced Bcl2 expression• overrides serum and feeder cell requirements for mouse embryonic stem cell self-renewal. PNAS. 2005. V. 102. № 9. P. 3312-17

193. Ying Q., Nichols J., Chambers I., Smith A. BMP induction of Id proteins Supresses differentiation and sustains embryonic stem cell self-renewal in collaboration with STAT3. Cell. 2003. V. 115. № 3. P. 281-92

194. Yokogami K., Wakisaka S., Avruch J., Reeves S.A. Serine phosphorylation and maximal activation of STAT3 during CNTF signaling is mediated by the rapamycin target mTOR. Curr Biol. 2000. V. 10. № 1. P. 47-50

195. Nicola N.A. Evidence for the formation of a heterotrimeric complex of leukaemiainhibitory factor with its receptor subunits in solution. Biochem J. 1997. V. 325. № 3. P. 693-700.

196. Zhu A.J., Watt F.M. beta-catenin signalling modulates proliferative potential of human epidermal keratinocytes independently of intercellular adhesion. Development. 1999. V. 126. № 10. P. 2285-981. БЛАГОДАРНОСТИ

197. Хочу выразить признательность Татьяне Витальевне Кисляковой, моему первому руководителю в Институте цитологии.

198. Я благодарен за советы и помощь Павлу Грудинкину, Глебу Турчиновичу, большое спасибо за проведение протока с CFSE сотруднику фирмы АлкорБио Георгию Александрову.

199. Огромное спасибо моим близким за всяческую поддержку и помощь в правке диссертации.