Метаболизм андрогенов в опухолях тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, доктор биологических наук Бабкина, Татьяна Викторовна

• Бабкина, Татьяна Викторовна
• доктор биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации доктор биологических наук Бабкина, Татьяна Викторовна

Список сокращений

Введение

Глава 1. Андрогены и канцерогенез (обзор литеретуры)

1.1.Биосинтез и метаболизм андрогенов

1.2.Андрогены в тканях-мишенях: норма и патология

1.3.Рак предстательной железы и андрогены

Глава 2. Материалы и методы

2.1.Краткая характеристика больных и материала

2.2.0чистка [3Н]стероидов-субстратов

2.3.Количественное определение стероидов при изучении метаболизма андрогенов в гомогенате тканей

2.4.Статистическая обработка

Глава 3. Собственные исследования

3.1. Активность ферментов метаболизма андрогенов в растворимой фракции биоптатов опухоли и неопухолевой ткани легкого

3.2. Активность ферментов метаболизма андрогенов в растворимой фракции биоптатов опухолей поджелудочной железы 100 3.3 Обсуждение результатов исследования активности 17(3-ГСР

3.4. Редуктазная и дегидрогеназная активность 17|3-ГСР

3.5. Активность КФК в растворимой фракции биоптатов опухолей

3.6. Сыворотка крови больных опухолями различной локализации

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Метаболизм андрогенов в опухолях»

Актуальность проблемы. Эндогенные факторы канцерогенеза, вероятно, можно отнести к ключевым. Среди них наибольшее внимание уделяется стероидным гормонам. Исследования, проводившиеся на протяжении многих десятилетий, убедительно показали, что с помощью некоторых гормонов при соблюдении определенных условий можно индуцировать злокачественные опухоли. Это дает основание считать некоторые гормоны канцерогенами, поскольку к канцерогенам относят вещества, вызывающие при соответствующих условиях развитие опухолей, которые без них не возникли бы.

На протяжении последних 50 лет исследователи пытаются выяснить возможную роль стероидных гормонов в развитии рака, однако проблему все еще нельзя считать решенной, поэтому накопление фактов по механизму канцерогенеза, которые подтверждают или отрицают имеющиеся теоретические представления или гипотезы в рамках этой проблемы, не теряют своей актуальности. Собрано громадное количество данных, связанных с непрямой ролью стероидов в этиологии многих злокачественных опухолей человека. Данные получены не только на модельных опытах с животными, с культурами клеток таких опухолей как РМЖ, рак эндометрия, РПЖ, но и при эпидемиологических исследованиях, в которых установлена роль стероидных гормонов как факторов риска высокой степени (Воппеу Ы.С. et al., 1986; Habib F.K., 1997; Stanford J.L. et al., 2000). В онкоэпидемиологических исследованиях концепцию «усиленной гормональной стимуляции» было предложено использовать при анализе причин и механизмов возникновения РМЖ, РПЖ, рака яичников, эндометрия, щитовидной железы, костной ткани, яичек (Habib F.K., 1997). Эта концепция первоначально сводилась к прямой связи между повышением концентрации в крови гормона-стимулятора (в данном случае стероидного) и усилением митогенеза в ткани-мишени. Последующее развитие злокачественного фенотипа связывалось с нарушением механизма клеточного деления, включая ошибки в копировании ДНК и пр. Однако, несмотря на кажущуюся очевидность, доказать прямую связь между уровнями стероидных гормонов и развитием рака у человека совсем не просто. Многое связано со сложностью доказательств влияния эндогенных стероидов в организме человека, включая и трудности, связанные с взаимоотношением между циркулирующими стероидами и активной («эффективной») концентрацией этих гормонов в клетке. Последнее чрезвычайно важно для андрогенов из-за их интенсивного метаболизма в большинстве тканей организма.

При анализе роли стероидных гормонов в канцерогенезе основное внимание уделяется половым стероидам и чаще всего эстрогенам и андрогенам.

Это можно объяснить несколькими основными причинами.

1. При лечении больных некоторыми злокачественными опухолями гормональная и антигормональная терапия, в том числе и удаление источника биосинтеза гормона (экстирпация соответствующей железы), является важной составляющей, особенно при опухолях органов-мишеней стероидов.

2. Механизмы участия стероидных гормонов в канцерогенезе изучаются достаточно давно и их роль в возникновении и прогрессии опухолей очевидна, хотя многие детали этих процессов все еще не ясны.

3. Изучение механизмов действия рецепторов стероидных гормонов позволяет выявить и другие факторы канцерогенеза, которые прямо или косвенно участвуют в росте опухоли эндокринно-(гормонально)-зависимых органов, где ведущая роль принадлежит стероидам.

Стероиды являются принципиально важными регуляторами в контроле клеточной пролиферации в органах-мишенях, а усиление клеточной пролиферации, видимо, - важная доминанта в патогенезе многих злокачественных опухолей человека. Для клетки, которая подвергается полной трансформации от нормального фенотипа до малигнизации, необходим ряд генетических изменений, которые приводят к активации протоонкогенов и инактивации генов супрессии опухоли. Ряд доминантных и рецессивных онкогенов кодируют большую группу активаторов транскрипции, к числу которых относятся и некоторые рецепторы гормонов, в первую очередь стероидов (Tabard L. et al., 1998). Все это связано с такими механизмами при делении клеток как соматическая мутация, транслокация или амплификация. Генетические факторы и/или факторы окружающей среды, которые изменяют гормональное окружение и, соответственно, скорости клеточного деления, вероятно, также влияют на скорость опухолевой трансформации (малигнизации) в этих тканях-мишенях.

Есть все основания полагать, что частота заболеваемости злокачественными новообразованиями, в том числе гормонозависимыми, может быть связана как с влиянием факторов внешней среды и образа жизни, так и с некоторыми этническими особенностями, присущими определенной популяционной группе. Эти особенности проявляют себя в значительной степени различиями в находящемся под генетическим контролем гормонально-метаболическом статусе, которые могут оказаться решающими при канцерогенезе.

Очевидно, что нельзя отрицать важной роли окружающей среды на секрецию и метаболизм стероидов, однако гормональный профиль организма регулируется генетически, что принципиально важно при рассмотрении проблемы взаимосвязи стероидов и канцерогенеза. Данные показывают, что значительное число злокачественных опухолей, в отдельные этапы этиологии и патогенеза которых так или иначе вовлечены гормональные и метаболические факторы, имеет «генетическую подложку» (Берштейн Л.М., 2000; Ross R.K. et al., 1998; Stanford J.L. et al., 2000).

Механизмы участия генетических факторов в процессе опухолевого роста могут быть достаточно многообразны. Как само функционирование эндокринных гомеостатов, так и их регуляция - в значительной степени результат генетических влияний. Например, в синдромы, наследуемые по аутосомно-рецессивному принципу, входят некоторые формы РПЖ (Ross R.K. et al., 1998; Stanford J.L. et al., 2000).

Изменение секреции гормонов нередко есть отражение «гормонального дисбаланса», возникающего в результате полного или частичного удаления или дисфункции соответствующего эндокринного органа (например, гонад), но, что важнее, она может являться и следствием закономерных возрастных изменений (Ross R.K. et al., 1998). Однако возрастные изменения, приводящие к нарушению регуляции экспрессии некоторых ферментов стероидогенеза, могут происходить и в самой ткани-мишени. Все это может приводить как к уменьшению, так и к - увеличению внутритканевой концентрации гормона-эффектора. В условиях дополнительного гормонального сигнала ткань-мишень может интенсивнее, чем обычно, пролиферировать, что, как предполагается, и способствует развитию новообразований. Интересно отметить, что можно выявить определенные черты сходства между особенностями старения репродуктивной системы и механизмами гормонального канцерогенеза. Более того, отличия между гормонозависимыми новообразованиями разной локализации характеризуются, помимо прочего, тем возрастным периодом, в котором они обнаруживаются с наибольшей частотой. Следовательно, несмотря на усложнение проблемы и методологии изучения гормонального канцерогенеза, определение уровня самих гормонов (особенно в проспективных исследованиях) сохраняло и сохраняет свое значение (Habib F.К., 1997).

Проблема роли андрогенов при канцерогенезе в настоящее время рассматривается прежде всего в связи с генетическими нарушениями при возникновении и развитии опухолей. Роль этих генов не всегда одинакова (Tabard L. et al., 1998). Так, для продуктов ряда генов очевидна их роль в процессах малигнизации (РА, некоторые ферменты биосинтеза и метаболизма андрогенов), а роль других - опосредованна (некоторые белки-регуляторы, экспрессия которых может регулироваться андрогенами) или даже гипотетична, однако участие этих продуктов в механизмах развития опухолей, вызываемых андрогенами, может быть весьма существенным. В первую очередь это можно объяснить тем, что еще многое об участии тех или иных генов в развитии опухолей неизвестно. При этом анализ проблемы в существенной степени зависит от того, насколько вариабельны собственные функции белка, кодируемого различными аллелями, что справедливо и в отношении ферментов стероидогенеза, особенно биосинтеза и метаболизма андрогенов.

При попытках поиска генов предрасположенности к развитию злокачественных новообразований и приравнивания последних к некоторым другим полигенным заболеваниям не всегда учитывается, что в случае гормонозависимых опухолей существует специфическая особенность, на которую обратили внимание относительно недавно. Речь идет об аллельном полиморфизме генов биосинтеза и метаболизма стероидов, который может быть причиной усиленной продукции некоторых гормонов в специализированных эндокринных клетках и/или вне их и, как следствие, источником избыточной гормональной стимуляции тканей-мишеней. Так, носительство некоторых аллелей CYP17*, гена кодирующего цитохром Р450с 17а, фермента, обладающего 17а-гидроксилазной и 17,20-лиазной активностью, который участвует в образовании андрогенов в половых железах (Т и А4), увеличивает риск возникновения РПЖ или РМЖ у мужчин (Берштейн JI.M., 2000; Ross R.K. et al, 1998). Поскольку Т и А4 являются предшественниками эстрогенов, то очевидна значимость гена CYP17 при рассмотрении роли андрогенов в образовании опухолей не только мужчин, но и женщин (Ahonen М.Н. et al., 2000; Hamilton Т.С., 1999; Lapointe J., Labrie C., 1998) .

Актуальность данного исследования обусловлена ростом онкологических заболеваний и необходимостью поиска новых подходов к их лечению, основанных на более точных знаниях о биологии, механизмах регуляции злокачественного роста и путях воздействия на него. В настоящее

Здесь и далее курсивом обозначены названия генов время комбинированные методы лечения с использованием гормонов, в частности, антиандрогенов применяются лишь при опухолевых заболеваниях органов-мишений (например, РПЖ). Однако нередко их эффект бывает незначительным, причиной чего может быть неполное знание механизмов действия андрогенов в тканях-мишенях. В то же время некоторые исследователи считают, что половые стероидные гормоны связаны с этиологией 1/3 всех новообразований у человека (Sutherland С. et al., 1995).

В настоящее время известно, что ряд заболеваний связан с нарушением метаболизма (биотрансформации) андрогенов в тканях-мишенях, и, следовательно, с изменением активности ферментов, участвующих этом метаболизме. Широкое изучение процессов биотрансформации андрогенов в ? разных тканях, роли отдельных метаболитов даст возможность не только констатировать на уровне фактов изменение соотношений половых стероидных гормонов в клетках этих тканей при различных заболеваниях, объяснить обнаруженные факты, но и, самое важное, определить пути коррекции таких изменений. Сравнительное изучение метаболизма андрогенов в разных тканях при патологии также необходимо с точки зрения выяснения «смысла» метаболизма андрогенов для каждой ткани. Это особенно важно для злокачественных новообразований, тем более, что по ряду причин такие исследования проводятся достаточно редко. Кроме того, до сих пор не ясно, связана ли концентрация стероидных гормонов сыворотке крови с их метаболизмом и активностью соответствующих ферментов в тканях-мишенях и тканях-немишенях. Все вышесказанное позволяет считать изучение процессов андрогенеза в опухолях разных органов чрезвычайно актуальным.

Цель исследования. Изучение метаболизма андрогенов в опухолях различного гистологического строения: легких, поджелудочной железы, ПЖ, костей, взаимосвязи между активностью соответствующих ферментов метаболизма андрогенов и гормональным статусом больных для, возможного, обоснования методов эндокринной терапии и/или более эффективных методов.

Для достижения указанной цели решались следующие задачи:

1. Изучение активности 5сс-Р, За-ГСР, Зр-ГСР, 17Р-ГСР и КФК в первичных опухолях поджелудочной железы и легких.

2. Сравнение активности ферментов метаболизма андрогенов в опухоли и неопухолевой ткани легкого больных раком легкого.

3. Изучение редуктазной и дегидрогеназной активности 17Р-ГСР в первичных опухолях костей различного гистологического строения и новообразованиях ПЖ.

4. Анализ связи между активностью ферментов метаболизма андрогенов и гистологическим строением опухоли.

5. Оценка гормонального статуса указанных групп больных: определение концентрации в сыворотке крови стероидных гормонов (Т, ДГТ, А4) и ПСА.

6. Определение зависимости между активностью ферментов метаболизма андрогенов в опухоли и гормональным статусом указанных групп больных.

7. Анализ возможности использования полученных данных для обоснования методов эндокринной терапии указанных больных.

Практическая значимость работы. Настоящая работа представляет научный и практический интерес при анализе биологической роли андрогенов в опухолях разных органов.

Полученные данные помогут: оценить роль биотрансформации андрогенов в клиническом течении заболевания при опухолях ПЖ, костей, поджелудочной железы и легких; теоретически обосновать возможность использования принципиально новых подходов к гормональной терапии злокачественных опухолей ПЖ,

•Чгкостей, поджелудочной железы и легких, направленных в первую очередь на коррекцию биотрансформации андрогенов через воздействие на активность ферментов андрогенеза.

Апробация работы. Диссертационная работа апробирована на совместной научной конференции сотрудников лаборатории клинической биохимии, лаборатории патологической анатомии опухолей человека, хирургических отделений общей онкологии, торако-абдоминальной онкологии, урологии, печени и поджелудочной железы НИИ клинической онкологии и отделения изучения новых противоопухолевых лекарств РОНЦ им. Н.Н.Блохина 29 мая 2002 года.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 21 работа в отечественных и зарубежных изданиях.

Объем работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, которая включает описание материалов и методов и результатов исследования, обсуждения результатов, заключения, выводов, списка цитируемой литературы. Объем диссертации 201 страница машинописного текста. Список литературы включает 33 отечественных и 152 зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 22 таблицами и 35 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Бабкина, Татьяна Викторовна

Результаты исследования сыворотки крови больных раком поджелудочной железы представлены в таблицах 17 и 18.

ГЛАВА 4 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В настоящее время не вызывает сомнений, что одной из причин туморогенеза (канцерогенеза) являются активирующие мутации в онкогенах и инактивирующие повреждения в антионкогенах (супрессорных генах). Эти события нарушают экспрессию и/или функцию белков, участвующих в контроле клеточной пролиферации, дифференцировки и гибели клеток (ММзшЫта Н. е1 а1., 1999). Модельные эксперименты на животных и культурах клеток уже позволили выявить сотни потенциальных онкогенов и десятки возможных антионкогенов. Однако лишь некоторые из этих генов действительно повреждаются в опухолях человека. Большинство же генов, ассоциированных с неопластическим процессом в исследовательской лаборатории, остаются интактными в новообразованиях у пациентов. Подобные разногласия могут быть связаны не только с проблемой адекватности многих экспериментальных систем, но и подчеркивают необходимость дальнейшего детального изучения молекулярной генетики опухолевого роста у человека.

В целом можно сказать, что равно неоправданно как преуменьшать значение усиленной пролиферации в гормональном канцерогенезе, так и сводить дело только к ней. При этом не исключено, что образующиеся экстрагонадно стероиды в непосредственной близости от тканей-мишеней или в самих тканях-мишенях имеют больше шансов инициировать воздействие на ген, чем циркулирующие в крови, что в первую очередь относится к андрогенам из-за их интенсивного метаболизма во многих тканях. Кроме того, помимо многих факторов несомненное значение для типа ответа на избыточную гормональную стимуляцию имеют свойства самой ткани-мишени, ее гормоночувствительность и взаимодействие с сигналами, поступающими в организм извне (Вгалу1еу 0.\\Л е1 а1., 1998).

В общем случае возрастные изменения в основных эндокринных гомеостатических системах, независимо от того, выполняется при этом какая-то программа или они (наряду с некоторыми иными биохимическими реакциями) являются побочным продуктом последней, способны создавать условия, благоприятствующие опухолевому росту. Последнее в значительной степени связано с представлением о значении гормонов как «факторов, создающих условия для развития опухолей» (Берштейн Л.М., 2000).

Есть все основания выделять два типа гормонального канцерогенеза (вовлечения гормонов в процесс индукции опухолей): промоторный и генотоксический (Берштейн Л.М., 2000). Первый является в определенном смысле «естественным» и реализуется в случае избыточной гормональной стимуляции на базе физиологических (нередко митогенных) эффектов гормонов. Несколько обстоятельств повышают риск перевода подобного варианта гормонального канцерогенеза в генотоксический, при котором гормоны или продукты их метаболизма ведут себя как истинные канцерогены. К числу таких обстоятельств, следует отнести наложение усиленного гормонального сигнала на влияние некоторых факторов внешней среды и на особые периоды онтогенеза, способствующие формированию так называемых краевых эффектов гормонов. Наличие отдельных типов гормонального канцерогенеза - один из фундаментов для возникновения различных патогенетических вариантов гормонозависимых опухолей, вероятно, вместе с некоторыми этническими и генетическими особенностями организма. Вовлечение белковых гормонов и факторов роста в процесс канцерогенеза может быть самостоятельным, но, как правило, реализуется при участии системы гормональных посредников небелковой природы, в первую очередь - стероидных гормонов.

Как уже упоминалось, в прогрессии опухоли участвуют многие известные и еще неизвестные факторы на всех стадиях, однако следует подчеркнуть, что аккумуляция мутаций в генах, а не их порядок принципиально важен в промоции прогрессии опухоли: пациенты с первичной опухолью, в которой обнаружена высокая степень потери аллеллей, имеют высокую степень риска развития метастазов и плохой прогноз по выживаемости, чем пациенты с низкой частотой потери аллелей в своих опухолях (Kallioniemi О.-Р. et al., 1998).

Имеется два типа генетически обусловленных эмбриональных изменений ДНК, которые предрасполагают к раку (Ross R.K. et al., 1998).

Некоторые генетические изменения при эмбриогенезе непосредственно ведут к раку. Эти единичные наследуемые генетические признаки не свойственны популяции, т.е. несут низкий уровень популяционного риска заболевания, но для индивидуумов с такими наследуемыми единичными признаками может быть очень высокий абсолютный риск развития заболевания. Более общими являются чувствительные гены с низким абсолютным, но высоким популяционным риском, т.к. генотип высокого риска может быть достаточно общим в популяции. Эти типы генов (например, которые включены в метаболизм андрогенов и поэтому действуют на пролиферацию клеток органа-мишени) не вызывают рак прямо, но влияют опосредованно на риск заболевания раком. Вероятно, они влияют на риск развития рака в связи с другими факторами и их следует рассматривать в рамках полигенной этиологии рака, что дает возможность идентифицировать индивидуумов с высоким или низким риском полигенного профиля (Bruckheimer Е.М. et al., 1999; Kallioniemi О.-Р. et al., 1998; Ross R.K. et al., 1998).

Современное состояние знаний молекулярных механизмов злокачественной трансформации, по-видимому, не дают шансов на обнаружение универсального звена канцерогенеза опухолевого роста с участием андрогенов (Kokontis J.M., Liao S., 1999; Tabard L. et al., 1998). Это усложняет, но не исключает поиска ключевых биохимических мишеней для лечения андроген-зависимых опухолей, однако исследования в этой области проводятся столь интенсивно, что не вызывает сомнений в значительном прогрессе в самом ближайшем будущем.

В процессе всестороннего изучения проблем онкологии все очевиднее становится несомненная роль андрогенов в генезе злокачественных опухолей. После того, как было установлено, что рост рака молочной и предстательной желез зависит в первую очередь от половых стероидов (81:о11 В., 1984), в онкологии стали применять гормонотерапию. Постепенно гормонотерапия стала применяться в сочетании с химиотерапией, что часто может приводить к нежелательным последствиям. Причины этого могут быть разными. Одной из важных причин может быть неполное знание механизмов противоопухолевого действия. Методы химиотерапии разрабатываются на основе представлений о токсическом действии противоопухолевых препаратов, в то время как механизмы противоопухолевого действия гормонов до сих пор остаются до конца не выяснеными.

Как и для нормальных тканей-мишеней, так и для многих опухолей гормонозависимых органов характерен интенсивный метаболизм основного андрогена в организме взрослого человека - Т. Особое значение имеет превращение Т под действием 5а-Р в основной андроген-эффектор - ДГТ. Следует отметить, что интенсивный метаболизм в клетках-мишенях является уникальным свойством андрогенов (Мейнуоринг У., 1979).

Несмотря на то, что у андрогенов сходная химическая структура, функции их совершенно различны. Как известно, действие андрогенов в организме в значительной степени зависит от типа клетки-мишени, а также от физиологического состояния организма. В настоящее время в организме человека и животных относительно ясна роль только двух важных андрогенов - Т и ДГТ, а физиологическое значение других метаболитов андрогенов остается на уровне предположений. Следовательно, изучение не только самого метаболизма андрогенов, но и роли отдельных метаболитов как в здоровом организме, так и при канцерогенезе остается весьма актуальной проблемой.

Нарушения метаболизма андрогенов могут быть связаны с некоторыми заболеваниями и, возможно, с канцерогенезом и приводить к изменению соотношения образующихся в тканях метаболитов андрогенов. Последнее, безусловно, связано с изменением экспрессии ферментов метаболизма андрогенов и/или с изменением соотношения их активности. Одна из сложных и трудных проблем - поиск новых препаратов, которые могут влиять на активность ферментов метаболизма андрогенов. Последнее предполагает знания детальных механизмов участия ферментов в стероидогенезе, поэтому изучение метаболизма андрогенов в опухолях имеет важное значение для практической медицины.

При изучении метаболизма андрогенов в опухолях и неопухолевой ткани легких впервые была обнаружена активность основных ферментов метаболизма андрогенов. Активности ферментов различались в опухоли и неопухолевой ткани. Поскольку активность З^-ГСР была самой высокой в неопухолевой ткани легкого, а активность За-ГСР — в опухолевой, то можно сделать предположение, что метаболизм андрогенов различается в опухолевой и неопухолевой ткани легкого. На основании полученных нами данных можно сделать вывод, что в опухолях легких различного гистологического строения и в неопухолевой ткани легкого имеет место экспрессия основных ферментов метаболизма андрогенов, однако соотношение активности ферментов зависит от типа опухоли и от того, поражена ли ткань опухолью или нет.

В аденокарциноме поджелудочной железы нами впервые также была обнаружена активность основных ферментов метаболизма андрогенов. Как и в опухолях легких, в опухолях поджелудочной железы самая высокая активность была у За-ГСР, т.е. процесс метаболизма андрогенов сдвинут в сторону образования За-Д. В то же время обнаружена прямая зависимость между активностями За-ГСР и ЗР-ГСР. Эти данные могут быть подтверждением предположения о том, что важная физиологическая роль За-Д и Зр-Д заключается в их влиянии (вместе с соответствующими ферментами) на концентрацию в клетке-мишени истинного гормона-андрогена - ДГТ. Дальнейшие исследования должны внести определенные коррективы в данные, на основании которых можно определить физиологическую роль указанных диолов, которые, вероятно, нельзя считать просто катаболитами андрогенеза в клетках.

В опухолях легких и поджелудочной железы, а также в неопухолевой ткани легкого нами обнаружено образование неизвестных метаболитов андрогенов, которые иногда называют «полярными», т.к. подвижность при хроматографии на силикагеле меньше, чем ЗР-Д. По известным литературным данным можно предполагать, что эти неизвестные «полярные» метаболиты андрогенов, являются дополнительно гидроксилированными производными 3(3-Д. Впервые образование гидроксилированных производных 3(3-Д в эксперименте было показано в 1977 году (Дегтярь В.Г и соавт). При гидроксилировании ЗР-Д в основном образуется 5а-андростан-Зр,6а,17Р-триол, меньше образуется 5а-андростан-Зр,7а, 17р-триола и 5а-андростан-Зр,7р,17Р-триола. По непонятным причинам почти не образуется 5а-андростан-Зр,бр,17Р-триол. Соотношение образующихся триолов может варьировать в зависимости от организма и ткани. Все указанные триолы считаются биологически неактивными катаболитами и плохо удерживаются в клетке, что показано на примере ПЖ крыс. Высказано предположение, что гидроксилирование ЗР-Д, вероятно, не связано с механизмами регуляции содержания ДГТ в клетках, так как активности ферментов, принимающих участие в гидроксилировании ЗР-Д, например, у человека, существенно не отличаются в нормальной ПЖ и в ПЖ при нодулярной гиперплазии. В то же время скорость образования триолов в ПЖ крыс на 2-3 порядка выше, чем в ПЖ человека, что может быть одной из причин развития нодулярной гиперплазии у человека. В наших исследованиях общая активность 6,7-ГСР была самой низкой, поэтому, вероятно, «инактивация» 3(3-Д в опухолях легких и поджелудочной железы протекает в очень незначительной степени, в отличие, например, от мозга и ПЖ крыс и человека. Это может быть также косвенным указанием на возможную биологическую роль Зр~Д в указанных опухолях, а также в неопухолевой ткани легкого больных опухолями легких.

В изучаемых опухолях была обнаружена также низкая активность 170-ГСР. Поскольку активность данного фермента чрезвычайно важна в общей схеме метаболизма андрогенов (рис. 1), мы сравнивали активность 17Р-ГСР в разных опухолях человека. При изучение общей редуктазной активности 17Р-ГСР в растворимой фракции биоптатов опухолей ПЖ обнаружено, что активность этого важного фермента метаболизма была значительно выше в злокачественных опухолях, чем в доброкачественных. Вероятно, редуктазная активность 17Р-ГСР может быть связана со злокачественными новообразованиями ПЖ человека. Косвенным подтверждением этому может быть то, что активность 17(3-ГСР в растворимой фракции биоптатов РПЖ была на порядок выше по сравнению с опухолевой и неопухолевой тканью легкого, поджелудочной железы и опухолями костей.

В опухолях костей обнаружено отличие редуктазной и дегидрогеназной активности 17Р-ГСР. Редуктазная активность 17Р-ГСР в опухолях костей различного гистологического строения была выше, чем дегидрогеназная активность. Последнее, по нашему мнению, достаточно важно, т.к. известно, что при некоторых патологических состояниях соотношение

172 редуктазной и дегидрогеназной активностей 17ß-rCP может значительно изменятся и играть важную роль при канцерогенезе.

Полученные нами данные дают основание полагать, что в опухолевых клетках ряда тканей изменена активность некоторых ферментов андрогенеза. Следовательно, один из возможных подходов при гормонотерапии исследованных нами опухолей - коррекция андрогенеза с помощью препаратов, которые могут изменять активность соответствующего(их) фермента(ов) метаболизма андрогенов. Перспективность таких исследований по нашему мнению не вызывает сомнений.

Даже не учитывая теоретическую важность рассмотренной проблемы как общебиологической, можно сказать, что знание механизмов гормонального канцерогенеза - это возможность обоснованного подхода к профилактике и лечению различного типа злокачественных опухолей, применения гормональной терапии и оценки эффективности лечения (Daliani D., Papandreou C.N., 1999; Habib F.K., 1997; Kallioniemi O.-P. et al., 1998; Stanford J.L. et al., 2000).

1. Метаболизм андрогенов в опухолях ПЖ, поджелудочной железы, костей и легких человека направлен, преимущественно, на образование активных метаболитов андрогенов, однако для каждой опухоли метаболизм андрогенов специфичен.

2. Впервые изучен метаболизм андрогенов в растворимой фракции опухолей поджелудочной железы. Активность основных ферментов метаболизма андрогенов обнаружена во всех образцах опухоли поджелудочной железы.

3. Впервые изучен метаболизм андрогенов в опухолях и неопухолевой ткани легкого больных раком легкого и впервые показано, что метаболизм андрогенов в опухолях легких и неопухолевой ткани легкого отличается: в растворимой фракции опухоли самая высокая активность обнаружена у За-ГСР, а в неопухолевой ткани легкого - у ЗР-ГСР.

4. Показано, что активность только двух ферментов андрогенеза -За-ГСР и ЗР-ГСР связаны между собой в опухолях поджелудочной железы, в опухолях и неопухолевой ткани больных раком легкого.

5. В опухолях костей изучена редуктазная и дегидрогеназная активность 17Р-ГСР и впервые показано, что соотношение редуктазной и дегидрогеназной активности 17Р-ГСР зависит от гистологического строения опухоли кости. Самая высокая редуктазная активность обнаружена в опухоли Юинга, а самая высокая дегидрогеназная активность - в ГКО.

6. Изучена редуктазная активность 17р-ГСР в биопсиях опухолей ПЖ различного гистологического строения. Впервые показано, что редуктазная активность 17Р-ГСР на порядок выше в злокачественных опухолях ПЖ по сравнению с нодулярной гиперплазией ПЖ.

7. Обнаружено, что редуктазная активность 17Р-ГСР в новообразованиях различных органов человека сравнима между собой, но на порядок выше в злокачественных опухолях ПЖ.

8. Изучена активность КФК в опухолях ПЖ и костей различного гистологического строения, в опухолях и неопухолевой ткани больных раком легкого, в опухолях поджелудочной железы, при этом показано, что общая активность КФК более чем в 2 раза выше в растворимой фракции РПЖ, чем в растворимой фракции НГПЖ.

9. Общая активность 17р-ГСР в растворимой фракции НГПЖ обратно пропорциональна концентрации тестостерона в сыворотке крови больных и обратно пропорциональна

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Бабкина, Татьяна Викторовна, 2002 год

1. Берштейн Л.М. Гормональный канцерогенез.-СПб.: Наука, 2000.- 199 с.

2. Блунк В. Детская эндокринология.М.¡Медицина, 1981.-292 с.

3. Виноградова Т.П. Опухоли костей.М.:Медицина, 1973.-324 с.

4. Дегтярь В.Г., Павлинов С.А., Лосева Л.А., Исаченков В.А. Метаболизм половых стероидных гормонов в нейроэндокринных органах // Пробл. эндокринологии.-1977.-№ 4.-С.70-76.

5. Дегтярь В.Г., Лосева Л.А. Рецепторы 5а-андростан-3(3,17(3-диола в гипофизе самцов и самок крыс / Актуал.Вопр. Эксперимен. Клинич. Медицины.-М: 1980.-С.15-16.

6. Дегтярь В.Г., Лосева Л.А., Исаченков В.А. Метаболизм андрогенов в гипоталамо-гипофизарной системе и его физиологическое значение / Тезисы 2-го Всесоюзного съезда эндокринологов.-Л., 1981.-С. 112.

7. Дегтярь В.Г., Лосева Л.А., Исаченков В.А. Зависимость метаболизма андрогенов в гипофизе и гипоталамусе крыс от возраста // Онтогенез.-1982.-Т.13.-№1.-С.62-70.

8. Дегтярь В.Г. Роль 5а-восстановленных 3,17-диолов у млекопитающих// Успехи совр. биологии.-1992.-Т.53.-С.422-433.

9. Дегтярь В.Г. Роль 5а-восстановленных 3,17-диолов у человека // Пробл.эндокринологии.-1992.-Т.38.-№ 3.-С.32-37.

10. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. Биотрансформация андрогенов в предстательной железе человека: ее значение в норме; причина или следствие нарушений метаболизма андрогенов при опухолях // Вестник ОНЦ РАМН России.-1998.-№2.-С.51 -57.

11. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. Восстановление 5а-дигидротестостерона в клетках-мишенях половых стероидов -катаболизм или направленная биотрансформация в гормоны // Известия РАН. Серия биол.-1998.-Вып.6.-С.664-669.

12. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. Метаболизм андрогенов // Успехи совр.биологии.-2000(а).-Т. 120.-С.48-59.

13. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. Метаболизм андрогенов в гипофизе и гипоталамусе крыс катаболизм дигидротестостерона или преобразование андрогенного сигнала? // Бюлл.экспер.биол.мед.-2000(б).-Т.129.-№ 5.-С.484-490.

14. Дегтярь В.Г., Кушлинский Н.Е. За-Гидроксистероиддегидрогеназа в тканях животных и человека // Биохимия.-2001 .-Т.66.-С.318-331.

15. Жуковский М.А. Нарушение полового развития.-М.:Медицина, 1989.-267с.

16. Зезеров Е.Г., Северин Е.С. Молекулярные механизмы онкогенеза предстательной железы //Вестн.РАМН.-1998.-№ 5.-С.29-35.

17. Зезеров Е.Г., Северин Е.С. «Простатические» калликреины, половые гормоны, инсулиноподобные факторы роста комплекс регуляторныхэлементов у мужчин и женщин при физиологических процессах и канцерогенезе // Вестн.РАМН.-1999.- № 3.-С.49-56.

18. Корницкий М.А. Влияние андрогенов на развитие опухолей костей в эксперименте // Вопр. Онкол.-1974.-Т.20.-№11.-С.26-31.

19. Костылева О.И., Тайлаков Б.Б., Кушлинский Н.Е. и соавт. Рецепторы стероидных гормонов в опухолях Юинга // Вестник ОНЦ РАМН.-1997.-№2.-С.28-31.

20. Кушлинский Н.Е., Бассалык Л.С., Соловьев Ю.Н. и соавт. Секреция половых и гипофизарных гормонов у норморослых и высокорослых подростков, больных первичной остеогенной саркомой // Вопр. Онкол.-1992.-Т.38.-№3.-С.279-290.

21. Кушлинский Н.Е., Соловьев Ю.Н., Амирасланов А.Т. и соавт. Половые стероидные гормоны и остеогенная саркома. Чувствительность остеогенной саркомы к андрогенам и эстрогенам // Вестник ОНЦ РАМН.-1993.-№2.-С.31-37.

22. Кушлинский Н.Е., Дегтярь В.Г., Бабкина Т.В. и соавт. Опухоли костей и метаболизм андрогенов // Успехи физиол. наук.-1999.-Т.30.-№ 3.-С.14-22.

23. Мейнуоринг У. Механизмы действия андрогенов. -М.: Мир, 1979.-224 с.

24. Милку Ш.М. Терапия эндокринных заболеваний. -Будапешт: 1969.-326 с.

25. Лихтенштейн A.B., Киселева Н.П. Метилирование ДНК и канцерогенез // Биохимия.-2001 .-Т.66.-С.293-317.

26. Обут Т. А. Дегидроэпиандростерон, ретикулярная зона коры надпочечников и устойчивость к стрессу и болезням // Вестн.РАМН.-1998.-№ Ю.-С. 18-22.

27. Резников А.Г. Физиологические аспекты действия андрогенов/В кн.:Физиология гормональной рецепции. -JL: Наука, 1986.-С. 140-164.

28. Смирнова И.О., Соловьев Ю.Н. Гормональная регуляция костной ткани и опухоли скелета // Архив патол.-1986.-Ш.-С.82-86.

29. Старкова Н.Т. Клиническая эндокринология.-М.¡Медицина, 1983.317 с.

30. Трапезников H.H., Еремина H.A., Амирасланов А.Т., Синюков П.А. Опухоли костей.-М. Медицина, 1986.-303 с.

31. Физер JL, Физер М. Стероиды. -М.:Мир, 1964.-533 с.

32. Хефтман Э. Биохимия стероидов.-М.: Мир, 1972.-С.66-76, 114-128.

33. Adams J.B. Adrenal androgens and human breast cancer: a new approach // Breast Cancer Res.Treat.-1998.-Vol.51.-P.183-188.

34. Ahonen M.H., Zhuang Y.H., Aine R., Ylikomi T., Tuohimaa P. Androgen receptor and vitamin D receptor in human ovarian cancer: growth stimulation and inhibition by ligands // Int.J.Cancer.-2000.-Vol.86. P.40-46.

35. Akalu A., Dimajian D.A., Highshaw R.A. et al. Somatic mutation at the SRD5A2 locus encoding prostatic steroid 5alpha-reductase during prostate cancer progression // J.Urol.-1999.-Vol.68.-P.1355-1358.

36. Aono T., Kitamura Y., Fukuda S. Localization of 4-en-5a-Reductase, 17p-ol-dehydrogenase and aromatase in the rat ovary // J. Steroi Biochem. 1981.V14. -P.1369-1377.

37. Bakkevord K., Pettersen A., Arnest B. Tamoxifen therapy in unresectabkt adenocarcinoma of pancreas and papilla of vater // Br. J. Surg.-1990.-V.72.N7.-P.725-730.

38. Barhrach B.E., Smith E.P. The role of sex steroids in bone growth and development: evolving new concepts // J. Endocrinologist.-1996.-V.6.-P.362-368.

39. Bartsch W., Klein H., Schiemann U. et al. Enzymes of androgen formation and degradation in the human prostate // Ann.N.Y. Acad. Sci.- 1990.-V.595.-P.53-66.

40. Baulieu E-E., Jung I. A prostatic cytosol receptor// Biochem. Biophys. Res. Commun.-1970.-V.38.-P.559-561.

41. Bellido T., Jilka R.L., Boyce B.E. et al. Regulation of interleukin-6 osteoclastogenesis and bone mass by androgen receptor // J. Clin. Investig.-1995.-V.95.-P.2886-2895.

42. Brinkmann A.O., Jenster G., Ris C. et al. The human androgen receptor: structure/function relationship in normal and pathological situations // J. Steroid Biochem. Molec. Biol.-1992.-V.41.-P.361-368.

43. Bjelfman C., Söderström T.G., Brekkan E. et al. Differential gene expression of steroid 5a-reductase 2 in core needle biopsies from malignant and benign prostatic tissue // J.Clin.Endocrinol.Metab.-1997.-Vol.82.-P.2210-2214.

44. Blok L.J., de Ruiter P.E., Doesburg P. et al. Mechanisms of androgen receptor activation and function / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Quebec City, June 17-21, 1998.-P.70.3

45. Bonney R.C., Reed M.J., Beranek P.A. et al. Metabolism of H.oestradiolin vivo by normal breast and tumour tissue in postmenopausal women // J.Steroid Biochem.-1986.-Vol.24.-P.361-364.

46. Brawley O.W., Knopf K., Thompson I. The epidemiology of prostate cancer part II: the risk factors // Semin.Urol.Oncol.-1998.-Vol.16.-P. 193-201.

47. Bruchovsky N. Androgens and antiandrogens / In: Cancer Medicine, 4th Ed. (Eds.: J.F Holland et al.).-Baltimore: Williams and Wilkins, 1997.-P.1133-1148.

48. Bruckheimer E.M., Gjertsen B.T., McDonnell Y.J. Implications of cell death regulation in the pathogenesis and treatment of prostate cancer // Semin.Oncol.-1999.-Vol.26.-P.3 82-398.

49. Bui M., Reiter R.E. Stem cell genes in androgen-independent prostate cancer // Cancer Metastasis Rev. -1998-99.-Vol.l7.-P.391-399.

50. Craft N., Sawyers C.L. Mechanistic concepts in androgen-dependence of prostate cancer // Cancer Metastasis Rev. -1998-99.-Vol.l7.-P.421-427.

51. Cassorla G.F., Skerda M.C., Valk I.M. et al. The effects of sex steroids on growth during adolescence // J. Clin. Endocrinol. Metabol.-1984.-V.54.-P.717-720.

52. Caufriez A., Copinschi G. Somatomedins and steroids // Hormone Res.-1986.-V.24.-P. 185-188.

53. Celotti F., Melcangi R., Martini L. The 5a-reductase in the brain: molecular aspects and relation to brain function // Front.Neuroendocrinol.- 1992.-V.13.-P.163-215.

54. Chevalier S., Turcotte G., McKercher G. et al. Steroid metabolism and binding in relation to prostate cell growth and differentiation in vitro // Ann.N.Y. Acad. Sci.-1990.-V.595.-P.173-183.

55. Clark P.A., Rogol A.D. Growth hormones and sex steroid interactions at puberty // Endocrinology Metabol. Clinics North Amer.-1996.-V.25.-P.665-676.

56. Colvard D.C. Identification of androgen receptors in normal human osteoblast-like cells // Proc.Natl.Acad.Sci.USA.-1989.-P.854-857.

57. Czerwiec F.S., Liaw J.J., Liu S.B. et al. Absence of androgen transcriptional effects in osteoblastic cells despite presence of androgen receptors // Bone.-1997.-V.21.-P.49-56.

58. Craft N., Shostak Y., Carey M., Sawyers C.L. A mechanism for hormone-independent prostate cancer through modulation of androgen receptor signaling by the HER-2/neu tyrosine kinase // Nat.Med.-1999.-Vol.5.-P.280-285.

59. Crawford E.D., Boccon-Gibod L., Bruchovsky N. et al. / In: Prostate Cancer. 2nd Int.Consultation on Prostate Cancer June 27-29, 1999, Paris (Eds.: G.Murphy, S.Khoury, A.Partin, L.Denis).-Health Publication Ltd.: 2000.-P.353-394.

60. Cronauer M.V., Nessier-Menardi C., Klocker H. et al. Androgen receptor protein is down-regulated by basic fibroblast growth factor in prostate cancer cells // Br.J.Cancer.-2000.-Vol.82.-P.39-45.

61. Daliani D., Papandreou C.N. Markers of androgen-independent progression of prostate carcinoma // Semin.0ncol.-1999.-Vol.26.-P.399-406.

62. Degtiar W.G., Loseva L.A., Isachenkov V.A. In vitro metabolism of androgens in hypothalamus and pituitary from infantile and adolescent of rats of both sexes //Endocrinol.exp.-1981.-V.15.-P. 181-190.

63. Dufort I., Rheault P., Huang X.F. et al. Characteristics of a highly labile human type 5 17beta-hydroxysteroid dehydrogenase // Endocrinology.-1999.-Vol.140.-P.568-574.

64. Erskine M.S., Hippensteil M., Kornberg E. Metabolism of dihydrotestosterone to 3a-androstanediol in brain and plasma: effect on behavioral activity in female rats// J. Endocrinol.-1992.-V.134.-P.183-195.

65. El-Alfy M., Berger L., Pelletier G. et al. Immunolocalization of androgen and receptors in the human prostate / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Québec City, June 17-21, 1998.-P.153.

66. Foresta C., Ruzza G., Mioni R. Osteoporosis and decline of gonadal function in the elderly male//Hormone Res.-1984.-V.19.-P. 18-22.

67. Frederiksen D.W., Wilson J.D. Partial characterization of the nuclear reduced nicotinamide adenine dinucleotide phosphate: 4A-3-ketosteroid 5 a-oxidoreductase ofratprostate//J. Biol. Chem.-1971.-V.246.P.2584-2585.

68. Fenton M.A., Shuster T.D., Fertig A.M. et al. Functional characterization of mutant androgen receptors from androgen-independent prostate cancer // Clin.Cancer Res.-1997.-Vol.3 .-P. 1383-1388.

69. Fingert HJ., Campasi J., Pardee A.B. Cell proliferation and differentiationtii1.: Cancer Medicine, 4 Ed. (Eds.: J.F Holland et al.).-Baltimore: Williams and Wilkins, 1997.-P.3-18.

70. Gasperino J. Androgenic regulation of bone mass in women//Clin-Orthop.-1995.-V.311.-P.278-286.

71. Guiraud J.-M., Samperez S., Jouan P. Studies on the 5a-androstane-3ß,17ß-diol-6a-hydroxylase and on the 5a-androstane-3ß,17ß-diol-7a-hydroxylase in anterior hypophysis of male rats// Steroids.-1982.-V.40.-P.625-639.

72. Geck P., Szelei J., Jimenez J., Sonnenschein C., Soto A.M. Early gene expression during androgen-induced inhibition of proliferation of prostate cancer cells: a new suppressor candidate // J.Steroid Biochem.Mol.Biol.-1999.-Vol.68.-P.41-50.

73. Gemzik B., Green J. Parkinson A. Hydroxylation of 5oc-androstane-3ß,17ß-diol by rat prostate microsomes: effect of antibodies and chemical inhibitors of cytochrome P-450 enzymes // Arch.Biochem.Biophys.-1992.-Vol.296.-P.355-365.

74. Gleave M., Bruchovsky N., Goldenberg S.L., Rennie P. Intermittent androgen suppression for prostate cancer: rationale and clinical experience // Eur.Urol.-1998.-Vol.34(Suppl.3).-P.37-41.

75. Gregory C.W., Kim D., Ye P. et al. Androgen receptor up-regulates insulinlike growth factor binding protein-5 (IGFBP-5) expression in a human prostate cancer xenograft // Endocrinology.-1999.-Vol.l40-.P.2372-2381.

76. Habib F.K. Steroid hormone and cancer. IV Prostate cancer // Eur.Surg.Oncol.-1997.-Vol.23.-P.625-639.

77. Hakimi J.M., Schoenberg M.P., Rondinelli R.H. et al. Androgen receptor variants with short glutamine or glycine repeats may identify unique subpopulation of men with prostate cancer // Clin.Cancer.Res.-1997.-Vol.3.-P. 1599-1608.

78. Hamilton T.C. Hormonal etiology of epithelial ovarian cancer with a hypothesis concerning the role of androgens and progesterone // J.Natl.Cancer Inst.-1999.-Vol.91 .-P.650-651.

79. Hastings C.D., Brekke I., Purvis R. et al. Cofactor dependency of soluble 3a-hydroxysteroid oxidoreductase in rat testis, prostate and epididymis // Endocrinology.- 1980.-V.107.- P.l 762-1763.

80. Higuchi T., Villee C.A. Aromatization of epitestosterone by human placenta //Endocrinology.-1970.-V.86.-P.912-914.

81. Horton R., Tait J.F. Androstenedione production and interconversion rates measured in peripheral blood and studies on the possible site of its conversion to testosterone // J. Clin. Invest.-1966.-V.45.-P.301-303.

82. Ho Shuk-mei, Ofner P. Prostatic cytosol binding of 3|3-diol and estradiol-17P // Steroids.-1986.-V.47.-P.21-23.

83. Hendersen B.E., Bernstein L., Ross R.K. Hormones and the etiology of cancer / In: Cancer Medicine, 4th Ed. (Eds.: J.F Holland et al.).-Baltimore: Williams and Wilkins, 1997.-P.277-292.

84. Hsiao P.W., Chang C. Isolation and characterization of ARA160 as the first androgen receptor N-terminal-associated coactivator in human prostate cells // J.Biol.Chem.-1999.-Vol.274.-P.223 73-22379.

85. Huang W., Shostak Y., Tarr P. et al. Cooperative assembly of androgen receptor into a nucleoprotein complex that regulates the prostate-specific antigen enhancer// J.Biol.Chem.-1999.-Vol.274.-P.25756-25768.

86. Jansa R., Prezelj J., Kocijancic A. et al. Andostanediol glucuronide in patients with pancreatic cancer and those with chronic pancreatitis // Horm.Metab.Res.-1996.-Vol.28.-P.3 81-383.

87. Jensen E.V., DeSombre E.R. Steroid hormone binding and hormonethreceptors / In: Cancer Medicine, 4 Ed. (Eds.: J.F Holland et al.).-Baltimore: Williams and Wilkins, 1997.-P. 1049-1060.

88. Jenster G. The role of the androgen receptor in the development and progression of prostate cancer // Semin.Oncol.-1999-.Vol.26.-P.407-421.

89. Irvine R.A., Ma H., Yu M.C. et al. Inhibition of pi 60-mediated coactivation with increasing androgen receptor polyglutamine length // Hum.Mol.Genet.-2000.-Vol.-9.-P.267-274.

90. Kallioniemi O.-P., Kolmer M., Bubendorf L. et al. Molekular mechanisms contributing to hormone-refractory prostate cancer / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Québec City, June 17-21, 1998.-P.53.

91. Kennedy B.J. Hormone physiology and endocrine ablation / In: Cancer Medicine, 4th Ed. (J.F Holland et al., eds).-Baltimore: Williams and Wilkins, 1997.-P.1061-1066.

92. Kokontis J.M., Liao S. Molecular action of androgen in normal and neoplastic prostate // Vitam.Horm.-1999.-Vol.55.-P.219-307.

93. Krieg M., Smith K., Bartsch W. Demonstration of a specific androgen receptor in rat muscle: relationship between binding, metabolism and tissue levels of androgens // Endocrinology.-1978.-Vol.l03.-P.1686-1694.

94. Kasva M., Grynpas M.D. The effect of androgens on the mechanical properties of primate bone // Bone.-1995.-V.17.-P.265-270.

95. Kelch R.P., Lindholm U.B., Jaffe R.B. Testosterone metabolism in target tissues: 2. Human fetal and adult reproductive tissues, perineal skin and skeletal muscle // J. Clin. Endocr.-1971.V.32.P.449-450.

96. Kind F.A. Anabolic steroids / In:Methods in Hormone Research. Ed.: R.J.Dorfman.-N. Y.: Acad. Press, 1965.-V.4.-P.21-65.

97. Kirschner M.A., Coher F.B., Jespersen D. Estrogen production and its origin in men with gonadotrophin-producing neoplasms // J. Clin. Endocr.-1974.-V.39.-P.112-115.

98. Lapointe J., Labrie C. Isolation of genes regulated by androgens in breast cancer cells / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Quebec City, June 17-21, 1998.-P. 141.

99. Lapointe J., Founder A., Richard V., Labrie C. Androgens down-regulate bcl-2 protooncogene expression in ZR-75-1 human breast cancer cells // Endocrinology.-1999.-Vol.l40.-P.416-421.

100. Liao D.Z., Pantaziss C.G., Hou X., Li S.A. Promotion of estrogen-induced mammary gland carcinogenesis by androgen in the male Noble rat: probable mediation by steroid receptors // Carcinogenesis.-1998.-Vol.l9.-P.2173-2180.

101. Liao S., Liang T., Fang S. et al. Steroid structure and androgenic activity. Specificities involved in receptor binding and nuclear retention of various androgens // J. Biol. Chem.-1973.-V.248.-P.6154-6157.

102. Longcopt C., Kato T., Horton R. Conversion of blood androgens to estrogens in normal adult men and women//J. Clin. Invest.-1969.-V.48.-P.2191-2193.

103. Loseva L.A., Degtiar W.G., Isachenkov V.A. 5a-Androstane-3|3,17P-diol in feedback between gonads and hypothalamo-pituitary system of male rats//J. Steroid. Biochem.-1980.-Y. 13.-P.939-944.

104. Lu S., Tsai S.Y., Tsai M.J. Molecular mechanisms of androgen-independent growth of human prostate cancer LNCaP-AI cells // Endocrinology.-1999.-Vol. 140.-P.5054-5049.

105. Macridakis N.M., Ross R.K., Pike M.C. et al. Association of mis-sense substitution in SRD5A2 gene with prostate cancer in African-American and Hispanic men in Los Angeles, USA // Lancet.-1999.-Vol.354.-P.975-978.

106. Magi-Galluzzi C., Murphy M., Cangi M.G., Loda M. Proliferation, apoptosis and cell cycle regulation in prostatic carcinogenesis // Anal.Quant.Cytol.Histol.-1998.-Vol.20.-P.343-350.

107. Matsushima H., Goto T., Hosaka Y. et al. Correlation between proliferation, apoptosis, and angiogenesis in prostate carcinoma and their relation to androgen ablation // Cancer.-1999.-Vol.85.-P.1822-1827.

108. Meyer S., Brumm C., Stegner H.E., Sinnecker G.H. Intracellular sex hormone-binding globulin (SHGB) in normal and neoplastic breast tussue -an additional marker for hormone dependency // Exp.Clin.Endocrinol.-1994.-Vol.l02.-P.334-340.

109. Mainwaring W.I.P. A soluble androgen receptor in the cytoplasm of rat prostate // J. Endocrinol.-1969.-V.45.-P.531-534.

110. Martini L., Celotti F., Lechuga M.J. et al. Androgen metabolism in different target tissues // Ann. N.Y. Acad. Sci.-1990.-V.595.-P.184-196.

111. Malkolm M.M., Arlin L.A.M. Testosterone treatment of constitutional delay in growth and development: effect of dose on predicted versus definitive height pediatric endocrinology // Acta ândocrinol.-1986.-V.70.-P.147-149.

112. Manolagas S.C., Bellido F., Jilka R.L. Sex steroids, cytokines and bone marrow: new concepts on the pathogenesis of osteoporosis.Non-Reproductive actions of sex steroids / Ciba Foundation Series: Symposia 191.-1995.-P. 187196.

113. Milevich L., Shaw C.B., Sontheimer R.D. Metabolism of androgen in lung // Ann N.Y.Acad.Sci.-1982.-V.548.-P.66-70.

114. Morrison D., Capewell S., Reynolds S. et al. Testosterone levels during systematic and inhaled corticosteroid therapy // Respir. Med.-1994.-V.88.-P.659-663.

115. Murakami R., Izumi K., Yomaoka I. Androgen-dependent and independent process of bone formation in the distal segment of penis in the rat // European J. Morphol.-1995.-V.4.-P.393-400.

116. Moghrabi N., Anderson S. 17(3-hydroxysteroid dehydrogenase: physiological roles in health and disease // Trends Endocrinol.Metab.-1998.-V.9.-P.265-270.

117. Morfin R.F., DiStefano S., Charles J.P., Floch H.H. 3(3-Diol and 5a-andostane-3P,7a,17P-triol in the human hyperplastic prostate // J.Steroid Biochem.-1980.-Vol. 13.-P.529-532.

118. Negri-Cesi P., Colciago A., Poletti A., Motta M. 5alpha-reductase isozymes and aromatase are differentially expressed and active in the androgen-independent human prostate cancer cell lines DU145 and PC3 // Prostate.-1999.-Vol.41.-P.224-232.

119. Njar V.C., Brodie A.M. Inhibition of 17alpha-hydroxylase/17,20-lyase (CYP17): potential agents for the treatment of prostate cancer // Curr.Pharm.Des.-1999.-Vol.5.-P. 163-180.

120. Naftolin F., Ryan K.J., Petro Z. Aromatization of androstenedione by the limbic system tissue from human fetuses // J. Endocrinol.-197 l.-V. 51.-P.795-798.

121. Nakano Y., Morimoto I., Ishida O. et al. The receptor, metabolism and effects of androgen in osteoblastic MC3T3-E1 cell // Bone Mineral.-1994.-V.26.-P.245-259.

122. Ofner P., Sousa R.L., Vena R.L. et al. Metabolism of radiotestosterone to 3(3, 6a- and 3(3, 7a-dihydroxy 5a-steroids by rat, ventral canine and human prostate in organ culture // J.Steroid Biohem.-1983.-V.l8.-P.415-423.

123. Olli A., Li-Xin Shan. Structure and function of the androgen receptor // Ann. N.Y.Acad Sci.-1991.-V.626.-P.81-89.

124. Ongphihadhanakul B., Mahidol U., Ramathibodi H. et al. Serum testosterone and its relation to bone mineral density and body composition in normal males // Clin. Endocrinol.-1995.-V.43.-P.727-733.

125. Penning T.M. Molecular endocrinology of hydoxysteroid dehydrogenases // Endocr.Rev.-1997.-Vol.l8.-P.281-305.

126. Peterziel H., Gast A., Mink S., Cato A.C.B. Novel cytoplasmatic actions of androgen receptor in prostate cancer cells / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Quebec City, June 17-21, 1998.-P.153.

127. Pettaway C.A. Racial differences in the androgen/androgen receptor pathway in prostate cancer // J.Natl.Med.Assoc.-1999.-Vol.91.-P.653-660.

128. Planz B., Aretz H.T., Wang Q. et al. Immunolocalization of the keratinocyte growth factor in benign and neoplastic human prostate and its relation to androgen receptor//Prostate. -1999. -Vol.41.-P.233-242.

129. Reuter S., Mayer D. Transport of dehydroepiandrosterone and dehydroepiandrosterone sulfate into rat hepatocytes // J. Steroid Biochem.Molec.Biol.-1995.-Vol.54.-P.227-235.

130. Risch H.A. Hormonal etiology of epithelial ovarian cancer, with a hypothesis concerning the role of androgen and progesterone // J.Natl.Cancer Inst.-1998.-Vol.90.-P. 1774-1786.

131. Rosner W., Hryb D., Khan M.S. et al. Sex hormone-binding globulin as a mediator of steroid hormone signal transduction / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Quebec City, June 17-21, 1998.-P.96.

132. Ross R.K., Pike M.C., Goetzee G.A. et al. Androgen metabolism and prostate cancer: establishing a model of genetic susceptibility // Cancer Res.-1998.-Vol.58.-P.4497-4504.

133. Raisz L.G., Wiita B., Artis A. et al. Comparision of the effect of estrogen alone and estrogen plus androgen on biochemical markers of bone formation and resorption in postmenopausal women // J.Clin. Endocrinol. Metab.-1996.-V.81-P.37-43.

134. Reddy V.V.R., Naftolin F., Ryan K.J. Conversion of androstenedione to estrone by neural tissues from fetal and neonatal rats // Endocrinology.-1974.-V.94.-P. 117-120.

135. Ribot C., Fromolliers F. Sexual steroids and bone tissue // Ann. Endocrinol.-1995.-V.56.-P.49-55.

136. Rochefort H., Capony F., Garcia M. Mechanism of action of antiestrogens and androgens on the estrogen receptor // J. Steroid Biochem.- 1979.-V.il.-P.1635-1638.

137. Sadar M.D. Androgen independent induction of prostate-specific antigen expression via cross-talk between the androgen receptor and protein kinase A signal transduction pathways // J.Biol.Chem.-1999.-Vol.274.-P.7777-7783.

138. Sadar M.D., Hussain M., Bruchovsky N. Prostate cancer: molecular biology of early progression to androgen independence // Endocr.Relat.Cancer.-1999.-Vol.6.-P.487-502.

139. Saric T., Shain S.A. Androgen regulation of prostate cancer cell FGF-1, FGF-2, and FGF-8: preferential down-regulation of FGF-2 transcripts // Growth Factors.-1998.-Vol.l6.-P.69-87.

140. Sciarra A., Casale P., DiChirio C. et al. New aspects on prostatic cancer: hereditary form, development estrogenization and differentiation therapy // Minerva Urol.Nefrol.-1998.-Vol.50.-P. 185-190.

141. Shaw G., Renfree M.B., Leihy M.W. et al. Prostate formation in a marsupial is mediated by the testicular androgen 5 a-androstane-3 a, 17 P-diol // Proc.Natl.Acad.Sci.-2000.-Vol.97.-P. 12256-12259.

142. Shimazaki J. Development and progression of prostate cancer in relation with androgen dependency // Nippon Rinsho.-1998.-Vol.56.-P.1953-1958.

143. Soucy P., Dallaire F., Luu-The V. Study of the regulation of 17a-hydroxylase/17,20 lyase activity of cytochrome P450C17 / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Québec City, June 17-21, 1998.-P.179.

144. Stanford J.L., Damber J.A., Fair W.R., Sancho-Garnier H., Griffiths K., Gu

145. F.-L., Kiemeney L.A. Epidemiology of prostate cancer / In: Prostate Cancer. 2nd Int.Consultation on Prostate Cancer June 27-29, 1999, Paris (Eds.:

146. G.Murphy, S.Khoury, A.Partin, L.Denis).-Health Publication Ltd.: 2000.-P.23-55.

147. Sultan C., Terouanne B., Tahiri B., Lumbroso S., Avances C., Orio F. Androgen-independent prostate carcinoma and androgen receptor: recent progress in molecular genetics // Bull.Cancer.-1999.-Vol.86.-P.618-621.

148. Schindler A.E., Ebert A., Freidrich E. Conversion of androstenedione to estrone by human fat tissue // J. Clin. Endocrinol.-1971.-V.35.-P.627-629.

149. Schweikert H.M., Wolf L., Romalo G. Oestrogen formation from androstendione in human bone // 741,Clin. Endocrinol.-1995.-V.43.-P.37-42.

150. Schweikert H.U., Kulf W., Niederle H.E. et al. Testosterone metabolism in human bone // Acta endocrinol.-1980.-V.95.-P.258-264.

151. Schweikert H.U., Milewich L., Wilson J.D. Aromatization of androstenedion by human hairs // J. Clin. Endocrinol.-1975.-V.40.-P.413-45.

152. Sholiton L.J., Taylor B.B., Lewis H.P. The uptake and metabolism of labeled testosterone by the brain and pituitary of the male rhesus monkey // Ibid.-1974.-V.24.-P.537-547.

153. Siiteri P.K., Murai J.T., Hammond G.L. et al. The serum transport of steroid hormone //Recent. Prog. Horm. Res.-1982.-V.38.-P.457-510.

154. Silberberg N., Silberberg R. Steroid hormones and bone in the biochemistry and physiology of bone // N.Y.: Academic Press.-1956.- P.624-668.

155. Skinner R.W.S., Pozderac R.V., Counsell R.E., Weinhold P.M. The inhibitive effects of steroid analogues in the binding of 5 a-dihydrotestosterone to receptor proteins from rat prostate tissue // Steroids.-1975.-V.25.-P. 185-189.

156. Soule S.G., Conway G., Prelenic G.M. et al. Osteopenia as a feature of the androgen insensitivity syndrome // Clin. Endocrinol.-1996.-V.43.-P.671-675.

157. Tabard L., Joly M.O., Nicolas B. et al. Androgen responsive genes in prostate cancer cells / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Quebec City, June 17-21, 1998.-P.120.

158. Tabuchi Ch., Simmons D., Fausto A. Bone deficit in ovariectomized rats // J. Clin. Invest.-1986.-V.78.-P.638-642.

159. Tenniswood M.P., Bird C.E., Clark A.F. The role androgen metabolism in the control of androgen action in the rat prostate // Mol. Cell. Endocrinol.-1982.-V.27.-P.89-96.

160. Tremblay R.R., Forest M.G., Shalf J. et al. Studies on the dynamics of plasma androgens and on the origin of dihydrotestosterone in dogs // Endocrinology.-1972.-V.91.-P.556-559.

161. Tilley W.D., Buchanan G., Hickey T.E., Bentel J.M. Mutations in the androgen receptor gene are associated with progression of human prostate cancer to androgen independence // Clin.Cancer Res.-1996.-Vol.2.-P.277-285.

162. Toppari J., Skakkebaek N.E. Sexual differentiation and environmental endocrine disrupters // Baillieres Clin.Endocrinol.Metab.-1998.-Vol.12.-P.143-156.

163. Toscano V., Monti S., Yarasano P. et al. Distribution of androgens and growth factors in benign prostatic hyperplasia (BHP) / Program.Abstrs.Xth Intern.Congr. on Hormonal Steroids.-Quebec City, June 17-21, 1998.-P.154.

164. Vanderschueren D. Androgens and their role in skeletal homeostasis // Horm. Research.-1996.-V.46.-P.95-98.

165. Verhoeven G., Cailleao J. Prolonged exposure to androgens suppresses FSH-induced aromatase activity in rat Sertoli cells cultures // Mol.Cell.Endocrinol.-1988.-V.57.-P.61-67.

166. Vittek J., Altman K., Gordon G., Southern A. The metabolism of 7a3H.-testosterone by rat mandibular bone // Endocrinology.-1974.-V.94.-P.325-329.

167. Vittek J., Gordon G., Southern A. Metabolism of 7a3H.-testosterone by human mandibular bone in vitro // Med. Sci. Res.-1990.-V.18.-P.67-68.

168. Wang C. Sublingual testosterone replacement improves muscle mass and strength, decreases bone resorption, and increases bone formation markers in hypogonadal men//J. Clin. Endocrinol. Metabol.-1996.-V.81.-P.3654-3662.

169. Wilson J.D. , Gloyna R.E. The intranuclear metabolism of testosterone in the accessory organ of reproduction // Recent Progr. Horm. Res.-1970.-V.26.-P.309-311.

170. Wheeler M.J. The determination of bio-available testosterone // Ann.Clin.Biochem.-1995.-Vol.32.-P.345-357.

171. Wilson J.D. The role of androgens in male gender role behavior // Endocrine Rev.-1999.-Vol.20.-P.726-737.201

172. Yong E.L., Ghadessy F.J., Wang Q., Mifsud A., Ng S.C. Androgen receptor transactivation domain and control of spermatogenesis // Rev.Reprod.-1998.-Vol.3.-P.141-144.

173. Yu H., Berkel H. Prostate-specific antigen (PSA) in women // J.La.Atate Med.Soc.-1999.-Vol. 151 .-P.209-213.