Микробиологическая и генетическая характеристика основных возбудителей гнойничковых заболеваний кожи в Таджикистане тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.11, кандидат медицинских наук Саидов, Хуршед Мирзокаримович

• Саидов, Хуршед Мирзокаримович
• кандидат медицинских наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Саидов, Хуршед Мирзокаримович

введен и к. а

ГЛАВА I ОБЮР ЛИТЕРАТУРЫ.

1Л. Кра гкм характеристика кионшк мэбудотслеИ пюйшпюма заболеваний КОЖИ.

1.LL Стафилококки. г.

1, 1,2. Обшив сведения о стрептококках. .II

1,1-3. Факторы ппйгашосп стафилококков н стрептококков.

1.1.4. Стафилококковые и стрептококковые поражении кожн и их диагностик*-,.-.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛ ЕДОВАН ИЯ.

2-1. Обккт исследования.

2.2. Идентификации микроорганизмов

2.3. Оцедежте спектра чувствительности микриоргинигмов к антибиотикам.

2.4. Флготнииро-ванис.

2.5. Стрептококки.-.

2.6. Выделение хромосомной ДИК.

2 7. Выделение цлюыилиоА ДНК.—.—,

2.8. "Электрофоре! ДНК в агарозном геле

2.9. Расикплсиие ДНК ресгрютпамн

2.10. Г locniMMft ОолКмсркШОй ЦСПНОЯ реакции.

2.11. Статистическая обработка.—

ГЛАВА 3 РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ ПНОДЕРМНТОВ В

РЕСПУБЛИКЕ ТАДЖИКИСТАН.,.

ГЛАВА 4 МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ

ОСНОВНЫХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ГНОЙНЫХ

ЗАБОЛЕВАНИЙ КОЖИ.

4-1 "Этнологическая структура ствфилолсрчии. стрептолермии и микробной жхмад, .„.,.

42. Фаютумгттиггслкиост». июлнрованиых штаммов золотистых стафилококков 54 4.3, Аитнбмэтикотрлммл итолированных штаммов стафилококков.

ГЛАВА 5 ГЕ НЕТИ ЧЕСКИ Й А НАЛ ИЗ X РОМ ОС ОМ НОЙ ДНК ШТАММОВ СТАФИЛОКОККОВ И С ТРЕПТОКОККОВ, И ЗОЛ И РОВ A11И MX ОТ БОЛЬНЫХ С ГНОЙНИЧКОВОЙ ПАТОЛОГИЕЙ

КОЖИ.*.

1АКЛЮЧЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

РЕКОМЕНДАЦИИ для ВНЕДРЕНИИ В НАУКУ И

ПРАКТИКУ.««.«.♦.„.♦.,««.«

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Микробиологическая и генетическая характеристика основных возбудителей гнойничковых заболеваний кожи в Таджикистане»

Актуальность работы. Гнойничковые заболевания кожи или пиодермнты являются актуальной проблемой для здравоохранения всех стран. Пиодермнты в структуре дерматозов занимаю! первое место и 3-4 место к общей структуре заболеваемости человека после гриппа, респираторных и сердечно-сосудистых заболеваний (175), Актуальность данной проблему обусловлена тем» что пиодермнты нередко принимают хроническое, рецидивирующее течение, требуют упорной, продолжительной терапии, которая не всегда приводит к желаемому результату (146, 159, 193). Данная проблема является актуальной и для органов здравоохранения нашей страны. Достаточно отметить, что только за последние 15 лет пребывание больных на больничном листе увеличилось в среднем с 6,8 до 9,4 дня, а общие трудовые потери в целом по стране при временной нетрудоспособности только по заболеваемости пиодермнтами составляют в год около 93-14 млн. рабочих дней (24).

В последние голы в результате широкого и бесконтрольного применения различных антибактериальных препаратов, под влиянием неспецнфнческия и специфических факторов защиты организма произошло изменение ряда биологических свойств возбудителей пнодермитов. Вей чаще появляются сообщения об увеличении числа полнрезнстентных штаммов основных возбудителей данной патологии - стафилококков и стрептококков, расширении спектра их устойчивосги к прогнвомикробным препаратам, возникновении трансформированных и Ь-лактамаэол роду пирующих мутантов (46, 91, 147). Поэтому вопросы микробиологии и генетики возбудителя, эпидемиологии, диагностики и профилактики гнойничковых заболеваний кожи остаются в центре внимания микробиологов, дерматовенерологов н эпидемиологов.

В структуре гнойничковых заболеваний кожи воду шее место занимают стафнлодермня, стрелтодермня и микробная экзема. Роль стафилококков и стрептококков человеческого происхождения в этнологии этих инфекций не вызывает сомнения. В тоже время н литераторе данные об этнологической значимости микроорганизмов, принадлежащих к животным экологическим вариантам, отсутствуют. Исследователи ограничивались в основном изучен и ем стафилококков и стрептококков без их внутривидовой серотиповой днфферсникровки. Нет данных о широте распространения и частоте встречаемости генов, кодирующих основные факгоры патогснностн у стафилококков и стрептококков* возбудителей гнойничковых заболеваний кожи.

Исходи hj вышеизложенного, перед нами была постай.ipiu цель изучить распространение гнойничковых заболеваний кожи и установление клинической значимости стафилококков и стрептококков различною происхождения при данной патологии кожи в Таджикистане. Задачи работы:

1. Изучить распространенность гнойничковых заболеваний кожи по обращаемости больных к врачам кож-венерологам.

2. Изучить этиологическую структуру и определить удельный вес стафилококков и стрептококков животного происхождения в возникновении гнойничковых заболеваний кожи в Таджикистане.

3. Изучить биологические особенности стафилококков и стрспотококков, выделенных у больных с пиодермией и микробной экземой.

4. Провести сравнительный анализ хромосомной ДНК, выделенных штаммов стафилококков и стрептококков при стрепго-стафилодермии и микробной экземы.

Паучник ни him на:

- Впервые в Республике Таджикистан установлено роль и удельный вес стафилококков, стрептококков человеческого и животного происхождения в возникновении стрсггто-стафнлодермнн и микробной экземы:

Впераые представлена антнбиотнкограмма и фотопейзаж стафилококков и стрептококков различных эковаров н ссротипов, возбудителей стафклодермин, стрептодсрми* и микробной экземы,

- Впервые усыновлена возможность возникновения гнойничковых заболеваний кожи, обусловленных стафилококкам и и стрептококками животных эковаров bo%'is и ovis.

- Изучена частота встречаемости генов хромосомной ДНК стафилококков н стрептококков, кодирующих основные факторы патогенности.

Практическая значимость работы.

Данные о заболеваемости ниодермнтамн позволяю! разрабатывать эффективные способы профилактики гнойничковой патологии кожн и каждом конкретном регионе Республики Таджикистан,

Установление этиологической роли штаммов, принадлежащих к животным эковарам золотистого стафилококка и серогипу стрептококка, констатирует необходимость проведения внутривидового и серотипового гнлирования этих микроорганизмов в условиях диагностических лабораторий

Для эффективного лечения кожных заболеваний стафилококковой и стрептококковой природы необходимо учитывать особенности антибнотикограмм этих микроорганизмов в зависимости от нх экологической принадлежности.

Проведен ПЦР-аналнз хромосомной ДНК и показано идентифицирующее значение lS-элемеитов хромосомы для внутривидовой и ссротн новой днфферениировки стафилококков и стрептококков.

ЛII роба пня результатов исследован ни.

Основные положения диссертационной работы были доложены на 51-й годичной научно-практической конференции с международным участием «Вола и злоровыг человека» (2003г.). на 52-й годичной научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы стоматологии» (2004г.), на 53-й годичной научно-практической конференции с международным участием «Лекарства и здоровье» (2005), Паем и Сино, приложение к № 1-2. 2006 г. „Съезда (конгресса) стоматологов Таджикистана. 2006 г,, материалы 1-ого апробированы на заседании кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Таджикского государственного Медицинского университета имени. Абуаяи ибни Сино. а также на заседании экспертной проблемной комиссии ТГМУ (октябрь, 2004г.),

Структура днссергаини.

Диссертация написана на русском языке, в классическом стиле, ей текст размещён на 106 страницах, проиллюстрирован 7 таблицами и 21 рисунками.

Диссертация состоит из 5 глав. Обзор литературы - I глава н 4-х глав собственных исследований.

Диссертацию завершают заключение, общие выводы* рекомендации для внедрения в науку н практику, а также список литерату ры. Основные положения, выносимые на зяшнту,

1. Показатели заболеваемости пиодермитами в Таджикистане коррелируют с факторами окружающей среды и особенностями макроорган изма, в частности пола и возраста больных.

2- Стафнлодермня и стрсптодермия вызываются соответствующими возбудителями, в основном в виде монокультуры. Ведущим возбудителем микробной экземы являются штаммы золотистого стафилококка

3. Стафилококки и стрептококки животного происхождения способны вызывать у человека гнойничковую патологию кожи.

4. Фагопейзаж золотистых стафилококков характеризуется высокой вариабел ьностыо.

5. Золотистые стафилококки зковара hominis, изолированные из патологического материала при гнойничковых заболеваниях кожи по спектру резистентности отличаются от пгтаммов эковара bovis.

6. Штаммы стафилококков и стрептококков различаются по частоте встречаемости генов, кодирующих факторы патоген ности микроорганизма.

Вкелрсние результатов работы. По материалам диссертации составлены методические рекомендации для преподавателей, студентов и практических врачей «Микробиологическая диагностика и лечение заболеваний стафилококковой и стрептококковой природы».

Результаты исследования внедрены в учебный процесс кафедры микробиологии и кожных болезней Таджикского государственного медицинского универиентета им. Абуалн ибнн Снно,

Публикация результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 7 статей и 20 актов внедрения (5 актов внедрения в учебный процесс и 15' в практику здравоохранения).

Достоверность полученных результатов подтверждается следующим: L Высокой чувствительностью использованных бактериологических и генетических методов исследования. 2. Проведением статистической обработки полученных данных общепринятыми методами.

Заключение диссертации по теме «Кожные и венерические болезни», Саидов, Хуршед Мирзокаримович

-83-ВЫВОДЫ

1. Пиодермиты в структуре дерматозов в Республике Таджикистан занимали первое место. Удельный вес обращаемости по их поводу во всех регионах был выше летом. Высокий уровень заболеваемости наблюдается в долинных районах: Хатлонской, Согдийской областях, в городе Душанбе и районах республиканского подчинения. Заболевание чаще регистрировалось среди сельхозработников, преимущественно у мужчин. Стрептодермии чаще встречались среди детей, стафилодермии - среди взрослых. Независимо от профессии и места жительства микробная экзема чаще отмечалась среди женщин(60,5%±8,0 и 30,5%±8,0 соответственно ).

2. При гнойничковых заболеваниях кожи из очагов поражения золотистые стафилококки и стрептококки в основном высевались в виде монокультуры. Ведущим этиологическим агентом микробной экземы являются золотистые стафилококки (78,9%±6,6), реже стрептококки (21,1%±6,6). Золотистые стафилококки животного происхождения (эковары bovis и ovis) и стрептококки группы D могут быть причиной пиодермии у человека.

3. Фагопейзаж золотистых стафилококков характеризуется высокой вариабельностью. При стафилодермии и микробной экземе штаммы в основном принадлежат к стафилококковым бактериофагам из первой и третьей фагогруппы. Золотистые стафилококки, изолированные при стрептодермии (как ассоцианты), чаще лизируются смешанным стафилококковым бактериофагом. Штаммы S.aureus эковаров bovis и ovis проявляют чувствительность только к фагам 102, 107 и 78 из набора КРС.

4. Золотистые стафилококки эковара hominis, изолированные из очагов пиодермии, по спектру резистентности отличаются от штаммов эковара bovis. Представители обоих эковаров сохраняют чувствительность ко многим часто применяемым антибиотикам.

-845. Штаммы стафилококков и стрептококков, относящиеся к разным видам, экологическим вариантам и серогруппам отличаются по наличию генов вирулентности и IS-элементов в хромосомной ДНК. 6. Продукты ПЦР-анализа хромосомной ДНК стафилококков и стрептококков, относящиеся к разным видам, экологическим вариантам и серогруппам четко отличаются между собой по электрофореграммам, что можно использовать в диагностических целях. рекомендации для внедрения в науку и практику

1. Банк данных о заболеваемости пнодсрмнтами в РТ н е£ регионах с учетом высоты расположения нал уровнем моря надо использовать при подготовке спсдналистов, профилактике и лечении гнойничковых заболеваниях кожи.

2. Бактериологическое исследование биогпатов при гнойничковых заболеваний кожи является наиболее высоконнформативным методом диагностики, который позволяет определить чувствительность к определенным антибиотикам н препаратам. Данный метод необходимо использовать во всех практических лабораториях нашей республнкн

3. ПНР является высокоепецнфичным н высокочувствительным методом, позволяющим определить возбудителя прн единичных копиях ДНК. Данный метол необходимо наладить во всех городских и областных бактериологических лабораториях Таджикистана.

ЗАКЛ ЮЧЕНИЕ

В настоящее время гнойничковые заболевания кожи представляют собой наиболее распространенные дерматозы. Основными возбудителями этих болезней являются стафилококки, стрептококки, различные виды грибов, грамотрицательные бациллы: псевдомонады, протеи, клебсиелы, актинобактерии и.другие микроорганизмы, которые выражено отличаются между собой по чувствительности к антибактериальным препаратам.

Известно, что этиологическая структура гнойно-воспалительных заболеваний кожи в разных странах и в различных регионах внутри одной страны не одинакова. Гнойничковые болезни кожи чаще встречаются в долинах, реже в высокогорье и среднегорье. Поэтому, периодический скрининг в этом направлении представляет большой научно-практический интерес.

Эффективная профилактика и терапия любого заболевания бактериальной природы зависит от специфичности применяемых методов диагностики. Исследователями или практическими врачами не всегда проводится внутривидовая или внутрисеротиповая дифференцировка возбудителей инфекции, что не позволяет установить источника инфекции и провести качественную микробиологическую и эпидемиологическую диагностику. Вместе с тем, на сегодня известно роль стафилококков и стрептококков животного происхождения при различных патологий человека. Однако, до сих пор нет данных о роли стафилококков и стрептококков животного происхождения в этиологии гнойничковых заболеваний кожи.

Исходя из вышеизложенного была сформулирована цель настоящей диссертационной работы - изучить клиническую значимость стафилококков и стрептококков различного происхождения при гнойничковых заболеваний кожи, определить биологические и генетические особенности этих микроорганизмов.

Для достижения поставленной в работе цели были разработаны следующие задачи:

• провести структурный анализ гнойничковых заболеваний кожи по обращаемости больных к врачам кожвенерологам

• изучить этиологическую структуру и определить удельный вес стафилококков и стрептококков животного происхождения в возникновении гнойничковых заболеваний кожи в Таджикистане.

• изучить фагочувствительность и антибиотикочувствительность стафилококков и стрепотококков, выделенных у больных с стрептодермией, стафилодермией и микробной экземой.

• провести сравнительный анализ хромосомной ДНК, выделенных штаммов стафилококков и стрептококков.

Исходя из поставленных задач, были обследованы 136 больных, из них: 53 со стафилодермией, 45-стрептодермией и 38 - с диагнозом микробная экзема. Статистическому анализу были подвергнуты 56204 статистических талонов (форма 25-в).

Для решения поставленных в работе задач было проведено бактериологическое исследование выделенных от больных с кожной патологии штаммы стафилококков и стрептококков. Генетический анализ хромосомной ДНК осуществили методом ПЦР.

На первом этапе исследования нами была изучена распространенность пиодермитов в различных регионах Таджикистана по материалам обращаемости (форма 25-в) в кожно-венеролгические учреждения различных областных центров и районов Республики Таджикистан, включая столицу республики - г.Душанбе.

Исследованием установлено, что гнойничковые заболевания кожи, в частности стафилодермия, стрептодермия чаще всего регистрировались в южных зонах Таджикистана: Курган-Тюбинская и Кулябская зоны Хатлонской области. Показатели заболеваемости пиодермитами в Согдской области и г.Душанбе (включая РРП) были примерно одинаковыми. Как следовало, и ожидать показатели заболеваемости в г. Хороге были значительно ниже, чем в других регионах. Интересные данные получены в результате анализа заболеваемости среди населения поселки Мургаб Мургабского района ГБАО. Установлено, что в этом самом высокогорном регионе гнойничковые заболевания кожи не регистрировались.

В целом по республике в структуре дерматозов пиодермиты составляли 49,2%.

При анализе заболеваемости пиодермитамн в центральном регионе Таджикистана установлено, что в г.Душанбе и РРП Таджикистана в структуре пиодермитов первое место занимает стрептодермия, второе место -стафилодермия и на последнем месте - стафило-стрептодермия.

В Курган-Тюбинской и Кулябской зонах Хатлонской области анализ заболеваемости пиодермитамн был проведен по данным обращаемости в Курган-Тюбинский и Кулябский кожно-венерологические диспансеры. Установлено, что как и в центральном регионе Таджикистана в южных зонах первое место занимала стрептодермия, затем стафилодермия и смешанная форма пиодермита, последние регистрировались значительно реже. В связи с тем, что показатели заболеваемости в Хатлонской области в частности в Курган-Тюбинской зоне были несколько выше, чем в других регионах, нами было проведено анализ заболеваемости пиодермитами в зависимости от месяца года среди взрослого населения и детей до 14 лет. Анализ показал, что в Хатлонской области относительно высокий удельный вес обращаемости наблюдается с апреля по сентябрь месяцев. С октября по март месяцы уровень обращаемости был примерно одинаковым и по сравнению с другими месяцами несколько низким. Аналогичная картина наблюдается и среди детей. В целом, заболеваемость была высокой в тех месяцах года, когда наблюдается высокая температура атмосферного воздуха, низкая влажность и минимальное количество выпадающих осадков. В тех месяцах, для которых характерно низкая температура атмосферного воздуха, повышения ее влажное (и и увеличения выпадающих осадков уровень заболеваемости была значительно низким.

Анализом установлено, что, несмотря на схожей природно-климатической характеристики и социально-бытовых условиях жизни, различные формы пиодермии - стрептодермня. стафнлодермня в Кулябской зоне регистрируются несколько меньше, чем в Курган-Тюбинекой зоне этой же области ,

В семерной зоне республики исследования проводилось и г, Хулжанде, центре Согдской области, на основании обращаемости в Согдский КВД,

При анализе структуры заболеваемости населения пнодермнтамн в jтом регионе обращает на себя внимание несколько частое случаев регистрации стафилодермнн, чем среди населения Кулябе кой зоне Хатлонской области и близкие показатели с данными о заболеваемости в центральной части и Курган-Тюбинской зоне Хатлонской области. Смешанная форма пиодермнта - стафнло-стреггтодермия регистрировалась примерно одинакова с таковыми в Курган-Тюбннской зоне, в 2 раза больше, чем в центральной зоне Таджикистана и в 2 раза меньше, чем в Кулябской зоне Хатлонской области.

Таким образом, ретроспективный анализ заболеваемости по данным обращаемости в кожно-венсродогнчсскнс диспансеры к врачам кожно-венерологам показывает, что "заболеваемость пнодермнтамн в различных регионах республики варьирует в больших диапазонах.

Анализ удельного веса обращаемости населения по месяцам года позволяет заключить, что уровень обращаемости к врачам кожно-венерологам повышается, начиная с май месяца и достигает максимума в период с июля по октябрь месяцы. Следовательно, можно резюмировать, что уровень заболеваемости повышается в тс месяцы, когда температура воздуха достигает максимальных величин при низкой влажности.

Исходя нз второй залачи настоящей диссертационной работы на следующем этане нами был изучен состав (профессия, возраст, пол) больных. от которых были выделены культуры стафилококков и стрептококков для микробиологического и генетического анализа.

При распределении больных на профессиональные группы установили, что гнойничковыми заболеваниями кожи чаще поражаются сельскохозяйственные рабочие, чем лица других профессий. Среди сельхозработников частота заболеваемости стафилодермией и стрептодермией была в 2 раза больше, чем среди лиц занятых другими видами трудовой деятельности. Однако, частота заболеваемости микробной экземой была примерно одинакова как среди сельхозработников, так и среди лиц других профессий (47,4%).

Наибольший интерес представляет внутривидовая дифференцировка стафилококков и стрептококков. При распределении штаммов стафилококков, выделенных из патологического материала больных стафилодермией по эковарам установлено, что основным возбудителем стафилодермии являются штаммы человеческого экологического варианта- S. aureus эковар hominis. Характерные для человека штаммы стрептококков- streptococcus гр. А и гр. В были ведущими возбудителями при стрептодермии . Дальнейшее исследование показало, что этиологическими агентами стафилодермии и стрептодермии наряду с характерным для человека эковаром золотистого стафилококка или серогрупп стрептококка могут являться штаммы животного происхождения.

Привлекает внимание этиологическая структура микробной экземы. При данной гнойной формы кожной патологии стафилококки выесевались в 3 раза чаще, чем штаммы стрептококка.

Выделения стафилококков и стрептококков животных экологических вариантов позволили нам предполагать, что между людьми и животными, происходит перекрестное инфицирование. Для подтверждения этого факта, выделенные коагулазоположительные штаммы стафилококков были подвергнуты фаготипированию.

Исследованием установлено, что фагопейзаж культур стафилококков, выделенных из патологического материала больных с гнойничковыми заболеваниями кожи характеризуются большим разнообразием. Выделенные штаммы наиболее часто лизировались фагами относящимся к 1 фагогруппе и . несколько реже были чувствительны к бактериофагам из 2 и смешанной группы фагов.

Выраженной фаготиповой варибельностью характеризовались штаммы эковара hominis, изолированные от больных с стрептодермией. Так, наибольшее количество этих штаммов проявляли чувствительность к фагам из различных фагогрупп, т.е. к смешанным фагам. Привлекает внимание лизабельность бактериофагами штаммов относящихся к эковару S.bovis, изолированных из патологического материала обследованных больных. Как мы и ожидали, эти штаммы лизировались только бактериофагами из набора «КРС». Наиболее часто стафилококки, принадлежащие этому эковару лизировались 102 и 107 фагами, реже 116-119. Все штаммы варианта S.ovis, лизировались только 78 фагом, что является идентифицирующим признаком для штаммов этого экова.

Таким образом, фагопейзаж культур, выделенных из патологического материала больных с различными формами пиодермии резко отличается. Если стафилококки -этиологические агенты стафилодермии чаще были чувствительны к фагам из первой фагогруппы, то возбудители стрептодермии чаще лизировались фагами из смешанной группы. Штаммы эковара S.bovis выделенные из патологического материала характеризуются фагомазаикой 102/107 из набора «КРС»

Количество антибиотиков различных групп, применяемых для терапевтических целей постоянно увеличивается, Изменяется и чувствительность к ним микроорганизмов., в том, числе стафилококков, в зависимости от частоты и условий применнения этих препаратов. Учитывая это, определение чувствительности возбудителей гнойных инфекции к широкому набору современных антибактериальных средств имеет первостепенное значение при выборе наиболее эффективной схемы лечения кожной патологии бактериальной природы.

Поэтому, следующим этапом нашего исследования являлось изучения антибиотикочувствительности штаммов стафилококков и стрептококков, полученных у больных с гнойными кожными патологиями.

Показано, что штаммы золотистого стафилококка человеческого экологического варианта, в основном проявляют устойчивость к тетрациклину и стрептомицину. Примерно в 2 раза реже встречались ампициллин- и левомицетин -устойчивые культуры этого экологического варианта стафилококка. Одинаковыми были количество оксациллин и рифампицин резистентных штаммов. Близкими были показатели устойчивости к неомицину и мономицину. Обращает также на себя внимания незначительное количество штаммов устойчивых к доксациклину, гентамицину, канамицину, клиндомицину. Еже реже встречались штаммы резистентные к цефотоксиму, эритромицину и ванкомицину. В наименьшем проценте случаев высевались штаммы устойчивые к ципрофлоксацину, азитромицину - всего по 2 штамма.

Из патологического материала больных с диагнозом стафилодермией было выделено 6 штаммов золотистого стафилококка эковара bovis. и штаммы не проявляли устойчивость к таким антибиотикам как клиндомицин, цефотоксим, ванкомицин, цепрофлоксацин, азитромицин. При данной патологии из патологического материала нам удалось выделить только 2 штамма золотистого стафилококка характеризующихся как эковар ovis, что не позволило нам проводить детальный их антибиотикограмм.

При сравнительном анализе антибиотикограмм штаммов стафилококков, полученных от больных с микробной экземой с результатами изучения антибиотикочувствительности штаммов полученных от больных с стафилодермией выраженное различие не обнаружено.

При рассмотрении лекарственной устойчивости культур стрептококков привлекают внимание штаммы, изолированные от больных с микробной экземой. Среди изученных культур 24% были чувствительны ко всем использованном в работе антибиотикам. Здесь, показатель устойчивости по отношению ко всем антибиотикам был ниже средних показателей для штаммов, полученных у больных со стрептодермией. Наиболее часто выявлялась устойчивость к тетрациклину. Удельный вес стрептококков животного происхождения в этиологической структуре данных патологии были незначительными. Поэтому, для них статистическая обработка показателей антибиотикоустойчивости не проводились.

Учитывая факт, что стафилококки и стрептококки циркулирующих в Таджикистане до начало настоящей работы в генетическом плане оставались не изученными и недостаточной информации о генетическом контроле факторов патогенности и вирулентности у стафилококков и стрептококков другой задачей нашего исследования являлось генетический анализ и изучения частоты распространенности IS-элементов в хромосомной ДНК стафилококков и стрептококков, полученных от больных с гнойничковой патологии кожи.

Праймеры были сконструированы с использованием программ OLIGO и BLAST на основании нуклеотидных последовательностей генов, доступных в базе данных GenBank.

Для того чтобы иметь представления о генетике этих микроорганизмов, их хромосомная ДНК была проанализирована на наличие генов - scpB, cfb. cyl, scaB, lmb, hylB, bac, bca и IS элементов (IS861, IS 1548, ISSa4, IS 1381).

При ПЦР-анапизе хромосомной ДНК в зависимости от видовой принадлежности микроорганизма обнаружено, что штаммы стафилококков и стрептококков выражено, отличаются между собой по наличию в хромосоме проанализированных генов. Так, в хромосомной ДНК штаммов стафилококков был обнаружен только один ген (ген pic). В то же время, хромосомная ДНК штаммов стрептококков характеризовались значительно большим количеством проанализированных генов - от 6 до 8 генов.

Интересные данные получены при анализе хромосомной ДНК стафилококков и стрептококков в зависимости от их экологической принадлежности. Только хромосомная ДНК стрептококков гр.В. содержала все проанализированные (- scpB, cfb, cyl. scaB, lmb, hylB, bac, bca) гены. В хромосомной ДНК стрептококков гр.А были обнаружены 7 (bca, scpB, scab, hylB. cfb, cyl, lmb), а у штаммов стрептококков rp.D встречались 6 (scpB, scab, hylB, cfb, cyl, lmb) из 8 проанализированных хромосомных генов.

Обращает на себя внимание широта распространенности этих генов в хромосомной ДНК стафилококков различной экологической принадлежности. Так, штаммы всех эковаров этого вида бактерий в хромосомах содержали только один ген, При чем у всех был обнаружен один и тот же ген - pic.

Молекулярно-генетический анализ хромосомной ДНК и генотипирование стафилококков и стрептококков имеют как теоретическое, так и практическое значение. Важность представлений о распределении генотипов стафилококков и стрептококков при различных заболеваниях обусловлена тем, что установление генотиповой принадлежности штамма позволяет провести качественную диагностику и эффективный мониторинг и лечение заболеваний вызванный этими бактериями.

Исходя из выше изложенного, нами был проведен сравнительный анализ хромосомной ДНК исследуемых штаммов стафилококков и стрептококков посредством ПЦР. Результаты ПЦР-анализа были сопоставлены изучением характера электрофореграмм на геле. Показано, что штаммы различных видов стафилококков и стрептококков отличаются между собой по характеру электрофоретической подвижности паттернов. В тоже время наблюдается разница в электрофоретической подвижности паттернов у штаммов стрептококков принадлежащих различным серотипам.

Исследованием установлено, что штаммы стрептококков по наличию IS элементов в хромосоме являются более гетерогенными, чем по наличию генов вирулентности. Штаммы различного происхождения отличались по наличию IS элементов в хромосомной ДНК. Хромосомная ДНК стрептококков полученных от больных с кожной патологии содержали только один IS элемент - IS 1381, который также оказался общим для стрептококков, изолированных от больных с патологиями других органов.

По своей электрофоретической подвижности отличались между собой штаммы стрептококков, полученных от больных с различными нозологическими формами. Так, хромосомная ДНК штаммов стрептококков полученных от травматологических и гинекологических больных были обнаружены по 3 разных IS элементов. У штаммов травматологических больных - IS861, lSSa4 и IS1381, а у гинекологических - IS861, S1548 и IS1381.

Таким образом, резюмируя результаты проведенных исследований необходимо отметить, что в Таджикистане в структуре пиодермии ведущее место занимает стрептодермия, несколько реже стафилодермия и последнее место занимает смешанная форма данной кожной патологии - стафило-стрептодермия. Однако, в некоторых регионах эти показатели резко отличаются. В частности, низкий уровень обращаемости по поводу стафилодермии и несколько частая регистрация случаев больных с диагнозом стафило-стрептодермии по сравнению с другими регионами наблюдается в Кулябской зоне, а в условиях среднегорья одинаково, и пиодермии встречались в десятки раз реже в условиях высокогорья. По-видимому, такое состояние обусловлено климатическими факторами, уровнем медицинской и санитарной культуры населения, дефектами в организации рационального питания, характером производственной деятельности населения и др.

Следует отметить, что стафилококки, выделенные от больных с стафилодермией и микробной экземой, характеризуются частой резистентностью к тетрациклину и стрептомицину, проявляя чувствительность ко многим антибиотикам последнего поколения, которых можно рекомендовать как антибиотики выбора при лечении этих заболеваний. Стрептококки этиологические агенты стрептодермии и в некоторых случаях возбудители микробной экземы оказались наиболее чувствительными ко многим не пользованным в работе антибиотикам, также проявляя устойчивость к тетрациклину и стрептомицину.

ПЦР-аналнэом установлено, что бактерии, относящиеся к разным аилам, штаммы разного эковара, серо типа и происхождения отличаются по наличию генов вирулентности и распространенности IS элементов в хромосомной ДНК,

Полученные результаты позволяют усовершенствовать диагностику и лечение патологии, вызванные этими микроорганизмами и разработать более качественные профилактические мероприятия с учетом генетических особенностей этих микроорганизмов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Саидов, Хуршед Мирзокаримович, 2006 год

1. Акатов А. К., Зуева В. С. Стафилококки. М., 1983, с. 52.

2. Акатов А.К., Зуева B.C. Стафилококки. М. Медицина. —1983. —256 с.

3. Акатов А.К. // Жури, микробиол., Стафилококки, 1988, №12., с. 3—9.

4. Акатов А.К., Devriese L. Современные представления о систематике стафилококков. //Журн. микробиол., вирусол. и иммунобиол. —1980. —N. 5. с. 49—46.

5. Аллергические болезни у детей: Руководство для врачей. //Под ред. М.Я. Студеникина, И.И. Балаболкина, М., 1998.

6. Антоньев А.А., Сомов Б.А., Дыркунов Л.П. и соавт. Профессиональные болезни кожи. — Красноярск, 1996. — Т, I. — с. 36.

7. Артемьев Ю.К., Важбин Л.Б., Чувствительность микрофлоры к антибиотикам и диоксидину при пиодермитах и микробной экземе. // Военно—медицинский журнал, 1983 г., № 2 , с.— 64—65.

8. Ашмарин И.П., Воробьёв А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л., 1962.

9. Барбинов В. В., Комплексная терапия хронической пиодермии с учетом иммунологической реактивности организма и антибиотикорезистентности стафилококков. // Военно—медицинский журнал, — 1987 г., № 8, —е.—28—30.

10. Ю.Баканов А.И. Количественная оценка доминирования в экологических сообществах. — Борок, 1987. — 64 с. — Деп. в ВИНИТИ 27.10.87, № 8593 — В87.

11. П.Белоусова Т. А., Современные подходы к наружной терапии аллергодерматозов // Materia Medica, 2002, № 3 4, с.60—73.

12. Белоусова Т.А., Иванов О.Л., Дерматиты // Приложение к журналу «Здоровье», № 4, 2000, с.64.

13. Бербер И., Кокмус К., Аталан Е., Сравнение Staphylococcus spp. по белковым профилям после денатурирующего электрофореза клеточныхи внеклеточных белков в полиакриламидном геле. //Микробиология, — 2003г. т.72. М I, с. 54—59

14. Бигон М., Харпер Д., Таунсенд К. Экология. Особи, популяции и сообщества, в 2—х т.: Пер. с англ. — М., 1989. — Т. 2. — с. 115 — 118.

15. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. // Медицинское информационное агентство, М., 2000 г., — с. 301—315

16. Бутов Ю. С. Кожные болезни и инфекции, передающиеся половым путем. М.: Медицина; 2002, с.138—139.

17. Быков А. С. Структура и функциональные особенности бактерий при гнойной инфекции и антибактериальной терапии. Автореф.дис. д—ра мед. наук. — М., 1985.

18. Быков А.С., Пашков Е. П., Селезнев А.С. и соавт. Пиодермиты// Бюл. экспер. биол. и мед. — 1986. — № 1. — С. 68— 71.

19. Быков А.С., Солнцева В.К., Воробьев А.А. и соавт. Микробиоценоз кожи больных хроническими дерматозами. // ЖМЭИ, —2000 г., № 6, е.—51—55.

20. Герасименко Д.Д., Павлова В.А., Данилейко Л.В., Чувствительность к антибиотикам и фагам стафилококков, выделенных при ЛОР— заболеваниях. // Микробиологический журнал, 1981, т.43, № 6, с.786— 790.

21. Государственный доклад о состоянии здоровья населения Российской Федерации в 1998 г. // Здравоохр. Рос. Федерации. — 2001. — № I.e. 7—14; № 3. — С, 8—26; № 4,— С. 10—22.

22. Иванов А. А. Микрофлора кожи человека — клинико— диагностическое значение. Материалы науч.—практ. конф. М., 1989, с. 3—11.

23. Иллариошкин С.Н. ДНК—диагностика и медико—генетическое консультирование.// ООО "Медицинское информационное агентство"—2004 г., с.—51—55

24. Ильин Б.И., Влияние антибиотиков и стимулирующей терапии на течение пиодермитов. //Военно—медицинский журнал, 1978 г., № 6, с. 80 82.

25. Калюжная Д. Д. Чудо—крем против атонического дерматита. Медицина для всех, 1997; 5: 28—29.

26. Коваленко Э.Б., Гавриленко О.Л., Лежнева А.Б. и соавт. II Материалы 8—го Съезда гигиенистов и санитарных врачей. М., 1996. — Т. I. с. 136—139.

27. Колесов А.Н., Столбовой А.В., Кочеровец В.И. Анаэробная инфекция в хирургии, Л.: Медицина, 1989, 218 с.

28. Кочергин Н.Г., Иванов О.Л., Кожный синдром лекарственной болезни. //Терапевтический архив. — 2005 г., № 1, с.80—81

29. Кошелева И. В., Иванова О. Л., Кулаков А. Г. и др. Стрептодермня// Рос.журн. кож. и вен. бол., 2001, № 6. с. 34—38.

30. Красильников А.П, Романовская Т.Р., Микробиологический словарь— справочник, Минск, Асар, 1999, с.310—311.

31. Кубанова А. А. Кожные болезни. М.: ГЭОТАР—МЕД, 1998, с. 178.

32. Лихачева Н. П., Кутькова О. Н. Теоретическая иммунология — практическому здравоохранению.//Таллин, 1978. с. 42—43.

33. Максимова А.Е., Мокроносова М.А., Батуро А.П. Наличие Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis на коже больных атопическим и себорейным дерматитом. //ЖМЭИ, —1995 г., № 6.

34. ЗБ.Маланчин И. Н. Носительство золотистых стафилококков среди различных групп населения. // Микробиол. журн., —1993, № 4, с. 68— 73.

35. Маркова О. Н. Микробная экзема: клиника, патогенез и принципы лечения. //Военно—медицинский журнал. — 2004 г., №7. с.23—25

36. Медицинская микробиология // под ред. Покровского В.И., Поздеева O.K., М., ГЭОТАР МЕД, 1998, с. 183—192.

37. Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. М., Федеральный центр Госсанэпиднадзора МЗ РФ, 2004г.

38. Методические указания по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам методом диффузии в агар с использованием дисков. М„ 1983.

39. Методы изучения бактерицидных свойств сыворотки крови и фагоцитов. Методические рекомендации. / Под ред. А.Л.Красилыцикова.— Минск, 1984 г. с —46.

40. Навашин С. М., Сазыкин Ю. О.//Антибиотики.— 1985.—Т. 30, № 1, с. 3—16.

41. Нагоев Б.С., Шубин. М.Г. Значение теста восстановления нитросинего тетразолия для изучения функциональной активности лейкоцитов // Лаб. дело., 1981, № 4, с.196—198.

42. Никитина В.Е., Игнатов В.В., Крапивина Л.И. Особенности химического состава клеточной стенки золотистого стафилококка и его апигментированных мутантов при кулитивировании в аэробных и анаэробных условиях. //Физиология и биохимия микроорганизмов.

43. Горький: Изд—во Горьк. ун—та, 1975, № 3, с. 32—35.

44. Нобл У.К. Микробиология кожи человека (пер. с англ.). //М. «Медицина». —1986. с.-496.

45. Новожилов Г.Н., Мернушев И.А., Антимикробное белье как средство профилактики пиодермитов. // Военно—медицинский журнал, —1987 г., № 6, с.46—47

46. Пасечников В.Д. Полимеразная цепная реакция в диагностике Н. pylori— ассоциированных заболеваний. //Диагностика и лечение. — М—1998.—С. 8—10.

47. Печуркин Н.С. Популяционная микробиология.— Новосибирск, 1978. №4. с.24—27

48. Попов В.А., Воробьев В.В. Панариций —Л, 1986 г., с-3—7

49. Применение метода отпечатков на «Бактотесты» при санитарно—биол. контроле на предприятиях обществ, питания. Мет. указания. — М., 1994.

50. Руководство по медицинской микробиологии // под ред. Перадзе Т.В., перевод с англ., М., Медицина, 1982, т.2., с.9—18.

51. Самгин М.А., Сивидова Л.Ю., Эффективность латикорта при стероидочувствительных дерматозах // Рос. Журнал кож.и вен. бол., 1998, № 1, с. 37—38.

52. Сатторов С.С. Сравнительная характеристика стафилококков выделенных от людей и животных. // Душанбе 1986 г., с— 52—56.

53. Скрыпкин Ю. К. Кожные и венерические болезни: Руководство для врачей. М.: Медицина; 1995. т. 2: с.88—89.

54. Сомов Б.А., Перламутров Ю.Н., Матвеев Н.В. и соавт. Клиническая иммунология, М., 1998. с. 209—258.

55. Степанов Э. А., Чахава О.В., Гиподман Г.А. //Клин. хир.— 1981, №8, с. 68—70.

56. Суворов А.Н. Генетическая характеристика патогенных стрептококков группы А и В. //Автореф. дисс. . д.м.н., Санкт—Петербург 1997, 30с.

57. Суворова К.Н., Куклин В.Т., Руковишникова В.М., Пиодермии, Детская дерматовенерология, Казань, 1996, с. 142—168.

58. Сытник С. И. Таксономическая структура и характер доминирования в кожном микробиоценозе молочных желез.//ЖМЭИ, 1994 г., №2, с. 27 — 31

59. Сытник А.Н. Стафилококки в микробиоценозе кожи рук. // ЖМЭИ, 1992 г., № 4, с. 4—6.

60. Сытник С.И. Антибиотикочувствительность стафилококков, выделенных с поверхности кожи молочных желез кормящих //Антибиотики и химиотерапия — 1988 — т.34—№2, с. 112—116

61. Сытник С.И. Микробиоценоз кожи молочных желез и его биологическая коррекция: Дис. д—ра мед. наук. — Тернополь, 1989.

62. Сытник С.И. Антибиотикочувствительность стафилококков, выделенных с поверхности кожи молочных желез беременных женщин. //Антибиотики и химиотерапия — 1988 — т.ЗЗ —№7 с.536—539

63. Сытник А.Н. Микробиоценоз кожи рук рабочих машиностроительного завода. // Микробиол. жури., —1993, № 2, с.— 13—17

64. Херрингтон С., Магки Дж. Молекулярная клиническая диагностика.— М,—«Мир»,—1999.—С. 13—14.

65. Шендеров Б. А., Медицинская микробиология, экология и функциональное питание, т.1: Микрофлора человека и животных и её функции, М. ГРАНТЪ, 1998, с. 14—17.

66. Юрмин Е.А., Шутка В.Я., Фии Ю.Я.//Врач.дело— 1988. № И. с. 102—103.

67. Юсупова Л.А., Хафизьянова Р.Х., Результаты лечения больных атопическим дерматитом с использованием димефосфона. //Терапевтический архив, — 2005 г., № 12, с.—70—73

68. Яцына И.В., Коновалова Т.А., Коротеева Е.Н. и соавт. Эпидемиология, факторы риска и современные аспекты профилактики аллергических заболеваний населения промышленного центра. // Вестник Российской АМН, № 3, — 2005 г., с.36—39

69. Akiyama Н, J Tada. Y Toi et. al. Changes in Staphylococcus aureus density and lesion severity after topical application of povidone—iodine in cases of atopic dermatitis. Journal of Dermatological Science 16: 1 (NOV 1997) P.-23—30.

70. Archer GL., Mayhall CG. Comparison of epidemiological markers used in the investigation of outbreak of methicilin resistant Staphylococcus attreus infection Hi. Microbiol. -1993, -V. 18, -P. 395—399.

71. Atalan E. Selective isolation, characterization and identification of some Streptomyces species: Ph.D. Thesis. Newcastle University, Newcastle Upon Tyne, England, UK. -1993

72. Ayliffe G.A. The progressive intercontinental spread of methicillin—resistant Staphylococcus aureus // Clin. Infect. Dis. -1997, -V. 25, № 574 579.

73. Aziz N. at al. Comparison of rapid intrapartum screening methods for group В streptococcal vaginal colonization. Hi. Matern. Fetal. Neonatal. Med. — 2005. —V. 18. —N 4. -P. 225—229.

74. Baird—Parker A. S. The basic for the present classification of Staphylococci and micrococci//Ann. N. Y. Acad. Sci.—1974. — V. 236. — P. 7—13.

75. Bannerman T.L., Hancock GA., Tenover F.C. et. al. Pulsed—field gel electrophoresis as a replacementfor bacteriophage typing of Staphylococcus aureus. // Clin. Microbiol 1995. -V. 33. № 3. -P. 551—555.

76. Bayer AS, Chow AW, Anthony BF et. al. Serious infections in adults due to group В streptococci: clinical and serotypic characterization. //Am j Med1976— V. 61 — P. 498—503.

77. Bergey's manual of systematic bacteriology, 8th ed. by J.G. Holt. — 1986.1. V. 2, —P. 999—1035.

78. Bergh К. Stoelhaug A. Loeseth K. Bevanger L. Detection of group В streptococci (GBS) in vaginal swabs using real—time PCR with TaqMan probe hybridization. //Indian. J. Med. Res. —2004. —V. 119 (Suppl). -P. 221—223

79. Birnbaum DM., Chow A.W. Epidemiological typing systems for coagulase negative staphylococci // Infect. Control Hosp. Epidemiol. -1991. -V. 12. — P. 319—326.

80. Bisno AL, Stevens DL. Streptococcal infections of skin am soft tissues. /NEngl J Med— 1996 — V.334 — P. 240—245.

81. Bjornson A. B. Role of humoral factors in host resistance to the Bacteroides fragilis group // Rev. Infect. Diseases.— 1990.—12, N 2.—P. 1612—1618.

82. Bohnsack JF; Whiting AA; Martinez G , et al. Serotype III Streptococcus agalactiae from bovine milk and human neonatal infections. //Emerging Infectious Diseases Emerg Infect Dis. 2004. V. 10 № 8, - P. 1412-1419.

83. Brimil N at al. Epidemiology of Streptococcus agalactiae colonization in Germany. //Int. J. Med.Microbiol. —2006. —V. 296. -N. 1. —P. 39—44.

84. Cafiso V, Bertuccio T, Santagati M et al. Presence of the lea operon in clinical isolates of Staphylococcus epidermidis and its role in biofllm production. //Clin Microbiol Infect — 2004 — V. 10 — P. 1081—1088.

85. Cartwright K. Group A streptococcal infections in humans. //Soc Appl Bacterial Symp Ser— 1997— V. 26— P. 52—61.

86. Chambers HF. The changing epidemiology of Staphylococcus aureus// Emerg Infect Dis —2001—V. 7—P. 178—182.

87. Chelsom J; Halstensen A. Streptococcus group A infections of skin, soft tissue and blood. //Tidsskrift For Den Norske Laegeforening Tidsskr Nor Laegeforen.-2001. -V. 121 №28,-P. 3310—3314.

88. Cieslewicz MJ; Chaffin D; Glusman G, et al. Structural and genetic diversity of group В streptococcus capsular polysaccharides. // Infection And Immunity Infect Immun. 2005. -V. 73 №5,-P. 3096—3103.

89. Cohen S., Sweeney H. Modulation of protein A formation in staphylococcus aureusby genetic determinant for meticillin resistance. // J. Bact., 1979, V. -140, P.-1028—1035.

90. Costas M., Cookson B.D., Talsania H.G., Hill LA. Numerical analysis of electrophoretic protein patterns of methicilin—resistant strains of Staphylococcus aureus. // J. Clin. Microbiol. 1989. - V. 27. - P. 2574— 2581.

91. Couto I, Pereira S, Miragaia M, Santos Sanches I, de Len—castre H, Identification of clinical staphylococcal isolates from humans by internal transcribed spacer PCR.// J din Microbiol— 2001— V. 39— P. 3099— 3103.

92. Coytn C.R. at at. Detection of Mycoplasma genitalium in women with laparoscopically diagnosed acute salpingitis. //Sex. Transm. Infect. —2005. —V. 81. -N. 6. —P. 463—6.

93. Davidson I. A collaborative investigation of phages for typing of bovine staphylococci. // Bull. W.H.O., — 1972, V. —46, P. 261 - 270.

94. Dmitriev A., Shen A; Shen X, et al. ISSa4—based differentiation of Streptococcus agalactiae strains and identification of multiple target sites for ISSa4 insertions. // Journal Of Bacteriology J Bacterid. 2004. - V. 186 №4,-P. 1106—1109.

95. Dmitriev A; Suvorov A; Shen AD, et al. Clinical diagnosis of group В streptococci by scpB gene based PCR. The Indian Journal Of Medical Research Indian J Med Res. 2004. - V. № 119 Suppl, - P. 233—236.

96. Dogan В., Schukken Y.H„ Santisteban C. et. al. Distribution of serotypes and antimicrobial resistance genes among Streptococcus agalactiae isolates from bovine and human hosts. //J. Clin. Microbiol. — 2005. — V. 43. -N. 12. P. 5899—5906.

97. Enright M.C., Robinson D.A., Randle G. et al. The evolutionary history of methicillin—resistant Staphylococcus aureus (MRSA) // PNAS. — 2002, V . 99 , № 11 , - P. 7687—7692.

98. Farley MM, Harvey RC, Stull T et al. A population—bayedassessment of invasive disease due to group В streptococcus in non— pregnant adults. // N Engl Med — 1993 — V. 328 — P. 1807—1811.

99. Fasola E, Livdahl C, Ferrieri P. Molecular analysis of multiple isolates of the major serotypes of group В streptococci. // Clin Microbiol —1993 —V. 31 — P. 2616—2620.

100. Fekety FR Jr. The epidemiology and prevention of staphylococcal infection. Medicine. — 1964; — V. 45: —V. 593—613.

101. Ferrazzini G, Kaiser R, Hirsig Chen K, Wehrli M. Microbiological aspects of diaper dermatitis. //Dermatology — 2003 — V. 206 — P. 136—141.

102. Fleurette J., Modjadedy A. Attempts to combine and simplify two methods for serotyping of Staphylococcus aureus. // Ed. J. Jaljaswicz. -Stuttgard л Fischer —1976, — P. 71—80

103. Gertz, S., S. Engelmann, R. Schmid, A. K. Ziebandt, K. Tischer, C. Scharf, J. The hacker, and M. Hecker. Characteristic В regulon in Staphylococcus aureus. J. Bacteriol, — 2000.

104. Goh S —H., Byrne E.E., Zhang T.L., Chow A.W. Molecular typing of Staphylococcus aureus on the basis of coagulase gene polymorphisms // J. Clin. Microbiol. — 1992, — V. 30, P. 1642 — 1645.

105. Hanifin, J. M. & Rogge, J. L. (1977). Staphylococcal infections in patients with atopic dermatitis. Archives of Dermatology 113, — P. 1383-6

106. Hansen S.M. Uldbjerg N. Kilian M. Sorensen U.B. Dynamics of Streptococcus agalactiae colonization in women during and after pregnancy and in their infants. //J. Clin. Microbiol. —2004. —V. 42. —N1. P. 83—89.

107. Hebb JK; Cohen CR; Astete SG, et al. Detection of novel organisms associated with salpingitis, by use of 16S rDNA polymerase chain reaction. // The Journal Of Infectious Diseases J Infect Dis. — 2004. — V. 190 № 12, —P. 2109—2120.

108. Heelan J.S., Hasenbein M.E., McAdam A.J. Resistance of group В streptococcus to selected antibiotics, including erythromycin and clindamycin. Hi. Clin. Microbiol. —2004. —V. 42 . -N 3. —P. 1263— 1264.

109. Heidt MC; Mohamed W; Hain T, et al. Human infective endocarditis caused by Streptococcus suis serotype 2. // Journal Of Clinical Microbiology J Clin Microbiol. — 2005. — V. 43 № 9, — P. 4898— 4901.

110. Henneke P; Morath S; Uematsu S, et al. Role of lipoteichoic acid in the phagocyte response to group В streptococcus. // Journal Of Immunology (Baltimore, Md. : 1950) J Immunol. — 2005. — V. 174 № 10, — P. 6449—6455.

111. Herbert M.A., Beveridge C.J., Saunders N.J. Bacterial virulence factors in neonatal sepsis: group В streptococcus. //Curr. Opin. Infect. Dis. —2004. —V. 17. -N 3. P. 225—229.

112. Hookey J.V., Richardson J.F., Cookson B.D. Molecular Typing of Staphylococus aureus on PCR Restriction Fragment Length Polimorphism and DNA Sequence Analysis of the Coagulase Gene. Ibid. — 1998, — V. 36 №4, P. 1083- 1089.

113. Ichiyama S., Ohta M., Shimokata K., Kato /V., Takechi J. Genomic DNA fingerprinting by pulsed—field gel electrophoresis as an epidemiological marker for study of nosocomial infections caused by methicilin—resistant

114. Staphylococcus aureus // J. Clin. Microbiol. — 1991. — V. 29. — P. 2690—2695.

115. Ito Т., Katayama Y., Hiramatsu K. Cloning and Nucleotide Sequence Determination of the entire mec DNAofpre—methicillin—resistant Staphylococcus aureus N 315. // Antimicrob. Agents Chemoth. — 1999, — V. 43, № 6, — P. 1449 — 1458.

116. Jackson LA, Hilsdon R, Farley MM et al. Risk factors for group В Streptococcal disease in adults. // Ann Intern Med — 1995 — V. 123 — P. 415—420.

117. Jefferson S. J., Parisi J. T. BacBacteriophage typing of coagulase negative staphylococci. // J. clin. Microbiol., — 1979, — V. 10, — P.468— 479.

118. Jodan W, Lawson K, Berg R, Franxman J, Marrer A. Diaper dermatitis: frequency and severity among a general infant population. //Pediatr Dermatol — 1986 —V. 3 — P. 198—207.

119. Joiner K. A. Getfand J. A., Onderdonk A. B. et al. Host factors in theformation of abscesses // J. Meet. Diseases.—1980.—142, N 2.—P. 40—49.

120. Jordan F.T. Williams N.J. Wattret A. Jones T. Observations on salpingitis, peritonitis and salpingoperitonitis in a layer breeder flock. //Vet. Rec. —2005. —V. 157. -N. 19. — P. 573—577.

121. Kiska DL, Thiede B. Invasive group A streptococcal infections in North Carolina: epidemiology, clinical features, and genetic and serotype analysis of causative organisms. // Infect Dis — 1997— V. 76 — P. 992— 1000.

122. Kloos WE, Bannerman TL. Update on clinical significance of coagulase—negative staphylococci.// Clin Microbiol Rev — 1994— V. 7— P. 117—140.

123. Kloss W. E., Schkeifer K.R.//Int. J.system. Bact. — 1975, — Vol. 25, N 1.—P. 381—395.

124. Kloss W.E., Lambe D.W. Staphylococcus Manual of clinical microbiology 5th ed. / Eds—. Balows A. et at.Washington: Am. Soc. Microbiol., —1991. —P. 222—237.

125. Kong F; Ma L; Gilbert GL. Simultaneous detection and serotype identification of Streptococcus agalactiae using multiplex PCR and reverse line blot hybridization. // Journal of Medical Microbiology J Med Microbiol. —2005, —V. 54 № 12, — P. 1133—1138.

126. Ко WC, Lee HC, Wang LR et. al. Sero—typing and antimicrobial susceptibility of group В streptococcus over an eight—year period in southern Taiwan. //Eisr J Clin Micrabiol Infect Dis — 2001 — V. 20 — P. 334—339.

127. Lauer P; Rinaudo CD; Soriani M, et al. Genome analysis reveals pili in Group В Streptococcus. // Science Science. — 2005. — V. 309 № 5731, —P. 105.

128. Le C.T., Lewin E.B. Teichoic acid serology in staphylococcal infections of infants and children. // J. Pediat., 1978, V. 93, P. - 572 - 577.

129. Martine* MA; Ovalle A; Dtiran C, et al, Serotypes and antimicrobial susceptibility of Streptococcus agalactiae. //Revista Metlica De Chile Rev Med Chi I. — 2004, — V. 132 Jfe 5, — P. 549—555,

130. Mascnga, J.+ Garbe, C, Wagner. J. & Orfanos, С. E. (1990). Staphylococcus aureus in atopic dermatitis and in nonatopic dermatitis. International Journal of Dermatology 29, — P. 5 79-82

131. Miyake K. lijima S, Bacterial capsular polysaccharide and sugar transferases, // Advances In Biochemical Engineering Biotechnology Adv Biochem Eng Biotechnol. — 2004. — V. № 90, — P. 89—111.

132. Monti, G., Tonetto, P., Mostert, M. & Oggero, R. (1996). Staphylococcus aureus skin colonization in infants with atopic dermatitis. Dermatology 193, — P. 83-7.

133. Namavar P., Verweij van Vught A. M. J. J., Bal M., MacLaren D. M. Effect of Baderoides fragilis cellular components on chemotactic activity of polymorphinonuclear leukocytes towards Escherichia coli // J. Med. Microbiol.—1987,—24, N 2.—P. 119— 124.

134. Nelson D.B. Factors predicting upper genital tract inflammation among women with lower genital tract infection. //Worn. Health. —V. 7. — P. 1033—1040.

135. O'Brien KL, Beall B, Barrett NL et al. Epidemiology of invasive group A streptococcus disease in the United States, 1995—1999. //Clin Infect Dis —2002—V. 35—P. 268—276.

136. Oeding P. Serological typing of staphylococci // Acta Pathol. Microbiol. Scand. — 1957. — V. 93. — P. 356—363.

137. Oliveira D.C., de Lencastre H. Multiplex PCR strategy of structural types and variants of the mecelement in methicillin—resistant Staphylococcus aureus. Ibid. —2002, — V. 46, — V. 2155 — 2161,

138. Onderdonk А. В., Cisneros R. L., Finberg R. et al. Animal model system for studyng virulence of and host response to Bacteroides fragilis // Rev. Infect. Diseases.— 1990.—12, N 2.—P. 169—177.

139. Pedersen H; Engberg JH; Oturai PS. Acute multifocal osteomyelitis caused by haemolytic group В streptococci. //Ugeskrift For Laeger Ugeskr Laeger. -2006. V. -№ 168 (6), P. 589—590.

140. Pennington TL., Marker C., Thomson—Carter FM. Identification ofcoagulase negative staphylococci by using sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis and rRNA restriction patterns // J. Clin. Microbiol. -1987. V. 29. № 2. P. - 390—392.

141. Perera G; Hay R. A guide to antibiotic resistance in bacterial skin infections. // Journal of The European Academy of Dermatology And Venereology: JEADV J Eur Acad Dermatol Venereol. -2005. V. 19 № 5, P.-531—545.

142. Perez—Ruiz M., Rodriguez—Granger JM; Bautista—Marin MF at. al. Genetic diversity of Streptococcus agalactiae strains colonizing the same pregnant woman. //Epidemiol. Infect. —2004. —V. 132. -N. 2. P. 375— 378.

143. Prevost G., Jaulhac В., Piemont Y. DNA fingerprinting by pulsed— field gel electrophoresis is more effective than ribotyping in distinguishing among methicilin—resistant Staphylococcus aureus isolates // J. Clin. Microbiol.V. -30. P. 967—973.

144. Rasmussen B.A., Bush K., Tally F.P. Anti—microbial resistanse in anaerobes. //Clin. Infect. Dis. — 1997 — V. 24, Suppl. 1.

145. Rechardt M., Saarinen J. Psychic factors and immunologic reactions in atopic dermatitis. Acta Dermato—Venerol. (Stockh.) 1991; V. - 156, P. -56.

146. Rekola J., Blomgvist K. Dermatologic—psychiatic consultations. Acta Dermato—Venereol. (Stockh.) -1991; suppl. — 156, P. 54.

147. Romero Gutierrez G; Pacheco Leyva G; Garcia Ortiz J, et al. Prevalence of Streptococcus agalactiae colonization in pregnant women atterm.//Ginecologia Y Obstetricia De Nfexico Ginecol Obstet Мех. 2005. V. 73 № 12, P. - 648—652.

148. Schellekens JF, Schouls LM, van Pelt W et al. Group A streptococci: a change in virulence? // Neth J Med —1998 —V. 52 —P. 209—217.

149. Schellekens JF, Schouls LM, van Silfhout A et al The resurgence of group A Streptococcal disease.//Netherlands Tiidschrift Med Microbiol — 1995—V.4—P. 78—83.

150. Schwan A. IgG antibodies against anaerobic bacteria in blood donor sera // J. Clin.Pathol.—1981 .—34, № 1 .—P. 416.

151. Sergey's Manual of Systematic Bacteriology — 8—th FH /J. 0. Holt.—Baltimore, 1986.—Vol. 2,—R 999—1035.

152. Skov—L., Baadsgaard—O. Bacterial superan—tigens and inflammatory skin diseases. //Clin. Exp. Dermatol.— 2000— V. 25— P. 57—61.

153. Sompolinsky DZ., Samra W.W., Karakawa W.F.V., Schneersen R., Malik Z. Encapsulation and capsular types in isolates of Staphylococcus aureus from different sources and relationship to phage types // Clin. Microbiol. 1985. - V. 22. P. - 828—834.

154. Stapleton R.D. at al. Risk factors for group В streptococcal genitourinary tract colonization in pregnant women. //Obstet. Gynecol. — 2005.—V. 106 —N6, —P. 1246—1252.

155. Stevens DL, Tanner MH, Winship J et al. Severe group A streptococcal infections associated with a toxic shock—like syndrome and scarlet fever toxin //A. N Engl J Med — 1989— V. 321— P. 1—7.

156. Stoakes L., John MA., Lanningan R., Schives B.C., Ramos M., Hadley D., Hussain Z. Gas—liquid chromatography of cellular fatty acids for identification of staphylococci // J. Clin. Microbiol. 1994. V. -32. № 8. P. - 1908—1910.

157. Sukhnanand S; Dogan B: Ayodele MO, et al. Molecular subtyping and characterization of bovine and human Streptococcus agalactiae isolates. //

158. Journal Of Clinical Microbiology J Clin Microbiol. 2005. V. - 43 № 3, P.1177—86.

159. Sunderkotter C; Herrmann M; Jappe U. Antimicrobial therapy in dermatology .//Journal Der Deutschen Dermatologischen Gesellschaft Journal Of The German Society Of Dermatology: JDDG J Dtsch Dermatol Ges. 2006. V. - 4 № 1, P. - 10—27.

160. The Working Group on Severe Streptococcal Infections. Defining the group A Streptococcal toxic shock syndrome. //Rationale and consensus definition. JAMA — 1993 —V. 269 —P. 390—391.

161. Tkacikova E., Mikula I., Dmitriev A. Molecular epidemiology of group В streptococcal infections. //Folia Microbiol. (Praha). —2004. —V. 49. —N 4. P. 387—397.

162. Tranter S, Tassou С Nychas J. The effect of the olive phenolic compound, oleuropein, on growth and entero—toxin В production by Staphylococcus aureus. //Appl Bacteria! — 1993 —V. 74—P. 253—259.

163. Trivalle C, Martin E, Martel P, Jacque Б, Menard JF Lemeland JF. Group Б Streptococcal bacteremia in the elderly. // Med Microbiol —19981. V. 47 — P. 649—652.

164. Tyrrell GJ, Senzilet LD, Spika JS et al. Invasive disease due to group В streptococcal infection in adults: results from a Canadian, population—based, active laboratory surveillance study—1996. //Sentinel

165. Health Unit Surveillance System Site Coordinators. / Infect Dis — 2000— V. 182— P. 168—173.

166. Uh Y; Kim HY; Jang IH, et al. Correlation of serotypes and genotypes of macrolide—resistant Streptococcus agalactiae. // Yonsei Medical Journal Yonsei Med J. -2005. V. 46 № 4, P. - 480-^183.

167. Van. der Waai D. Antibiotic Choice: The Importance of Colonization Resistance. —New York, 1984.

168. Von Both U., Buerckstuemmer A., Fluegge K., Berner R. Heterogeneity of genotype—phenotype correlation among macrolide— resistant Streptococcus agalactiae isolates. //Antimicrob, Agents Chemother. —2005. —V. -49. —N 7. P. 3080—3082.

169. White, M. I. & Noble, W. C. (1986). Consequences of colonization and infection by Staphylococcus aureus in atopic dermatitis. Clinical and Experimental Dermatology. —V.— 11, P.— 34-40.

170. Willenburg KS; Sentochnik DE; Zadoks RN . Human Streptococcus suis meningitis in the United States. The New England Journal Of Medicine N Engl J Med. -2006. V. 354 № 12, P. - 1325.

171. Zeng X; Kong F; Wang H, et al. Simultaneous detection of nine antibiotic resistance—related genes in Streptococcus agalactiae using multiplex PCR and reverse line blot hybridization assay. // Antimicrobial1. Qhn