Модуляция активности тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, доктор биологических наук Хлгатян, Светлана Вагинаковна

• Хлгатян, Светлана Вагинаковна
• доктор биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации доктор биологических наук Хлгатян, Светлана Вагинаковна

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I. Тучные клетки и их функциональное значение.

1.1. Распределение и происхождение тучных клеток.

1.2. Ультраструктура тучных клеток.

1.3. Процесс дегрануляции тучных клеток.

1.4. Внутриклеточные механизмы активации тучных клеток

1.5. Медиаторы тучных клеток.

1.6. Взаимодействие тучных клеток с клетками-мишенями, вовлекаемыми в аллергический процесс.

1.7. Индукторы активации тучных клеток.

Глава II. Аллергены из клещей домашней пыли рода Вегта1:ор1ш£о1с1е8: природа, антигенная и структурная характеристика, лечебные препараты

2.1. История открытия дерматофагоидных клещей и их роль в аллергозах человека

2.2. Иммунохимический и биохимический анализ клещевого экстракта

2.3. Синтез и секреция клещевых аллергенов

2.4. Физико-химические свойства и ферментативная активность клещевых аллергенов.

2.5. Антигенные свойства клещевых аллергенов.

2.6. Диагностические и лечебные клещевые аллергены.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Модуляция активности тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами»

Актуальность проблемы. Тучные клетки представляют собой особую функционально-лабильную группу клеток, располагающихся во всех органах и тканях без исключения. Такое широкое распространение обусловливает их участие как в нормальной жизнедеятельности организма, так и в ряде патологических процессов. Тучные клетки играют важнейшую роль в аллергических и воспалительных реакциях, в регуляции гемостаза и тканевого гомеостаза (Проценко,1987; БШаЬег С.,1999). Столь разнообразные функции реализуются благодаря секреции ими ряда биологически активных веществ, одни из которых постоянно присутствуют в клетке (гистамин, гепарин, протеазы, хемотаксические факторы и др.), а другие образуются в ходе ее активации (метаболиты арахидоновой кислоты и др.) (Магот Ъу\.,\99\).

Высвобождение медиаторов из тучных клеток обеспечивается целым комплексом взаимосвязанных реакций, начало которым положено взаимодействием индукторов с поверхностью клеточной мембраны (Гущин И. С., 1998; Но1§а1е Б., 1999). Индукторы дегрануляции тучных клеток условно делят на «иммунологические»*, действие которых на клетку опосредовано высокоаффинными рецепторами, и «неиммунологические»**, взаимодействующие с мембранными рецепторами, отличными от или вызывающие секреторный ответ клеток по нерецепторному механизму (Вгегтзка-Вк^сгукЕ., 1989; Козе^агс! В.К., 1986). - «иммунологические» индукторы (агенты) (пер. с англ. immunologic agents);

- «неиммунологические»индукторы (агенты) (пер. с англ. non-immunologic agents).

Действие иммунологических агентов на клетку - антигенов, аллергенов осуществляется благодаря наличию высокоаффинных рецепторов к Fc-фрагменту иммуноглобулина Е на тучных клетках (Henry А., 1997). Контакт между аллергеном и связанным с клеткой IgE служит началом аллергической реакции, приводящей к секреции медиаторов из тучных клеток (Гущин И.С., 1998). В настоящее время механизм, посредством которого различные аллергены, в том числе и аллергены из клещей Dermatophagoides farinae, осуществляют передачу внутриклеточного сигнала, остается неясным. Особый интерес представляет вопрос о взаимодействии модифицированной формы аллергена - аллергоида с тучными клетками, так как именно аллергоид получил наиболее широкое распространение и признание в клинической практике в качестве лечебного препарата, применяемого для специфической иммунотерапии больных с бронхиальной астмой (Bousquet J., 1989; Norman Ph., 1990 ).

Согласно данным литературы 50-85% случаев бронхиальной астмы наблюдается у лиц с аллергией к клещам домашней пыли (Адо А.Д.,1976). Изучение механизмов взаимодействия клещевого аллергена и аллергоида с тучными клетками имеет и непосредственно прикладное значение, т.к. понимание этого вопроса позволит найти верное решение для ряда клинических проблем лечения и профилактики аллергических заболеваний клещевой этиологии.

В настоящее время известен целый спектр неиммунологических дегрануляторов тучных клеток. К ним относятся вещество 48/80, брадикинин, субстанция Р, нейротензин, полимиксин В и др. Их действие реализуется благодаря наличию разнообразных рецепторов на поверхности тучных клеток (Columbo M.,1994). Имеются и единичные данные о способности провоспалительного фермента тромбина (Mita H.,1999) вызывать секреторный ответ костномозговых тучных клеток (Razin Е.,1984). Вместе с тем следует учитывать тот факт, что благодаря наличию специфических рецепторов тромбин может взаимодействовать практически со всеми клетками крови (кроме эритроцитов) (Goodnough L., 1982; McGowan Е., 1986), соединительной (фибробластами) и гладкомышечной ткани (Bauer Р., 1983; Cunningham D., 1986), нервной ткани (нейробластами) (Means Е., 1986; Snider R., 1987). В связи с этим исследование возможных механизмов взаимодействия тромбина с тучными клетками представляется особенно актуальным.

Исследованиями последних лет показано, что для реализации сигнала в тучных клетках включаются различные внутриклеточные механизмы в зависимости от природы индуктора. Полагают, что существуют, по крайней мере, три пути передачи сигнала в тучных клетках: аденилатциклазный, фосфоинозитольный (катализируемый фосфолипазой С) и иммунологический (катализируемый фосфолипазой А2). Реализация сигнала по каждому пути обеспечивается цепочкой мембранных белков, последовательно взаимодействующих друг с другом (Pearce F., 1989; Penner R., 1988). В цепи активации различных клеток (тромбоцитов, лимфоцитов, фибробластов и др.) большое значение имеет транспорт ионов (Костюк П.Г., 1988). Однако роль транспорта ионов в механизмах активации тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами практически не изучена. А вопрос о механизмах трансмембранной передачи сигнала в тучных клетках до настоящего времени остается нерешенным. В свете этих данных несомненна актуальность исследования механизмов активации тучных клеток агентами различной природы.

Цель и задачи исследования. Цель данной работы состояла в выяснении механизмов активации тучных клеток при действии на них иммунологических и неиммунологических агентов.

Исходя из этого были поставлены следующие задачи:

1. Выявить различия в механизмах трансмембранной передачи сигнала в тучных клетках, активированных иммунологическими и неиммунологическими агентами.

2. Исследовать in vitro действие иммунологических агентов -аллергена и аллергоида из клещей Dermatophagoides farinae на секреторную активность тучных клеток.

3. Провести сравнительное изучение физико-химических, антигенных и аллергенных свойств иммунологических активаторов тучных клеток - клещевого аллергена и его модифицированной формы (аллергоида).

4. Исследовать in vitro модулирующее влияние неиммунологических агентов (трипсина, тромбина и его модифицированных форм) на секреторную активность тучных клеток.

5. Исследовать влияние клещевого аллергена и его модифицированной формы - как иммунологических агентов и альфа-тромбина и трипсина - как неиммунологических агентов на секреторную активность тучных клеток in vivo.

Научная новизна. Выявлены различия в трансмембранных процессах при активации тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами, что имеет важное значение для понимания молекулярных механизмов, лежащих в основе аллергической и псевдоаллергической реакции. Установлено, что IgE-опосредованная активация тучных клеток имеет полисигнальный характер: передача внутриклеточного сигнала осуществляется по иммунологическому пути, катализатором которого является фосфолипаза Аг, и фосфоинозитольному пути, катализируемому фосфолипазой С. В реализации сигнала неиммунологических агентов ключевую роль играет фосфоинозитольный путь. Установлены следующие факты, имеющие существенное значение для понимания молекулярных механизмов трансмембранной передачи сигнала в тучных клетках при активации их иммунологическими и неиммунологическими агентами: 1) с помощью рН-чувствительного зонда показано, что активация тучных клеток различными агентами сопровождается изменением внутриклеточного рН; 2) получены доказательства существования в мембране тучных клеток сопряженной транспортной системы Иа/Н-обмена; 3) подтверждена ранее высказанная нами гипотеза о том, что изменение внутриклеточного рН, вызванное альфа-тромбином и клещевым аллергеном, является следствием активации систем анионного транспорта и Ка/Н-обмена; 4) доказано, что в регуляции Ка/Н-обмена в тучных клетках принимает участие протеинкиназа С; 5) показано, что в активацию тучных клеток клещевым аллергеном вовлекается не только иммунологический механизм передачи сигнала, но и фосфоинозитольный;. 6) выявлено, что активация тучных клеток альфа-тромбином осуществляется по фосфоинозитольному пути; 7) обнаружено, что неиммунологический агент - альфа-тромбин способен активировать тучные клетки в отсутствии внеклеточного кальция, в то же время для стимуляции секреторного ответа тучных клеток клещевым аллергеном необходим как внутриклеточный, так и внеклеточный кальций, причем последний является пусковым механизмом высвобождения медиаторов из тучных клеток.

Обнаружено, что модифицированная форма клещевого аллергена - аллергоид, в сравнимых с клещевым аллергеном концентрациях, практически не активирует тучные клетки и не вызывает секреции из них гистамина и гепарина. Установлено, что нарушение нативной конформации клещевого аллергена в результате модификации его формальдегидом в 500 раз снижает его способность вызывать секрецию медиаторов из тучных клеток. Кроме того, исследованиями физико-химических свойств доказано, что формалинизация клещевого аллергена приводит к практически полной потере им эстеразной активности, изменению величин изоэлектрических точек и смещению их в более кислую зону градиента рН. Выявленные в работе молекулярные механизмы передачи сигнала клещевого аллергена и его модифицированной формы - аллергоида представляются важными для понимания сущности патохимической стадии аллергической реакции и роли в ней медиаторов тучных клеток.

Установлено, что альфа-тромбин является новым модулятором активности тучных клеток, т.к. он способен специфически связываться с перитонеальными тучными клетками и вызывать рецептор-опосредованную секрецию из них гистамина и гепарина. Для стимуляции секреции медиаторов из тучных клеток молекуле тромбина необходимы как активный центр, так и центр узнавания высокомолекулярных соединений, отвечающий за взаимодействие с рецепторами клеток.

Результаты исследований могут быть использованы для регулирования секреторной деятельности тучных клеток и разработки методов управления аллергической реакцией. Расшифровка тонких механизмов активации тучных клеток, вовлекаемых в аллергическую реакцию, необходима для осмысленного подхода к использованию существующих и поиску новых методов лечения и профилактики аллергических заболеваний.

Практическая значимость.

1) Примененные в работе методы измерения внутриклеточного рН и кальция, количественного определения гистамина и гепарина открывают новые подходы к разработке тестов для оценки функционального состояния тучноклеточной популяции.

2) Разработанный способ определения гепарина, секретируемого тучными клетками, позволяет регистрировать очень низкие концентрации высвобождаемого медиатора.

3) Выявленная роль гепарина тучных клеток в поддержании антикоагулянтного потенциала крови дополняет представления о полифункциональности тучных клеток и их участии в процессах регуляции гемостаза, что важно для разработки способов управления механизмами свертывания крови при анафилаксии.

4) Показанная в работе высокая иммуногенность и сниженная аллергенность полученного нами клещевого аллергоида может служить в дальнейшем основанием для безопасного применения этого препарата при лечении аллергических заболеваний, вызванных сенсибилизацией к клещам Dermatophagoides/аппае.

5) Примененные в работе методы исследования физико-химических свойств аллергоида (изоэлектрофокусирование и определение эстеразной активности ферментов) можно рекомендовать для контроля модификации клещевого аллергена и стандартизации препарата клещевого аллергоида.

Основные положения, выносимые на защиту:

• Механизмы активации тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами различны. ^Е-опосредованная активация тучных клеток имеет полисигнальный характер: реализация сигнала осуществляется по иммунологическому (катализируемому фосфолипазой Аг) и фосфоинозитольному (катализируемому фосфолипазой С) пути. В передаче сигнала неиммунологических агентов ключевую роль играет фосфоинозитольный механизм.

Подтверждена ранее высказанная нами гипотеза, что мембранные системы сопряженного транспорта анионов и Иа/Н-обмена участвуют в регуляции внутриклеточного рН в тучных клетках при активации их клещевым аллергеном и альфа-тромбином. В процесс трансмембранной передачи сигнала в тучных клетках, активированных клещевым аллергеном и альфа-тромбином, включается каскад реакций с участием протеинкиназы С. Протеинкиназа С, активированная вторичными мессенджерами, оказывает модулирующее влияние на активацию Иа/Н-обмена в тучных клетках.

Альфа-тромбин способен активировать тучные клетки в среде, не содержащей ионы кальция. Клещевой аллерген в отсутствии внеклеточного кальция не вызывает секреции медиаторов из тучных клеток.

Модификация клещевого аллергена формальдегидом приводит к изменению величин изоэлектрических точек, значительной потере эстеразной активности и снижению аллергенности. Альфа-тромбин является новым модулятором активности тучных клеток. Он способен специфически связываться с перитонеальными тучными клетками и вызывать секрецию гистамина и гепарина.

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Хлгатян, Светлана Вагинаковна

ВЫВОДЫ

1. Выявлены различия в механизмах модуляции активности тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами, что является важным для понимания внутриклеточных процессов, лежащих в основе аллергической и псевдоаллергической реакции. Показано, что в реализацию 1£р-опосредованного сигнала клещевого аллергена включаются иммунологический (катализируемый фосфолипазой А2), и фосфоинозитольный (катализируемый фосфолипазой С) механизмы. Передача сигнала неиммунологического агента - альфа-тромбина осуществляется по фосфоинозитольному пути.

2. Установлено, что стимуляция тучных клеток клещевым аллергеном и альфа-тромбином сопровождается изменением внутриклеточного рН, которое, согласно ранее высказанной нами гипотезе, обусловлено активацией анионного транспорта и Ка/Н-обмена. Клещевой аллергоид практически не вызывает изменений внутриклеточного рН.

3. Выявлено, что к активации Ыа/Н-обмена клещевым аллергеном и альфа-тромбином приводит каскад реакций с участием протеинкиназы С.

4. Обнаружено, что в среде, не содержащей ионов кальция, альфа-тромбин способен активировать Иа/Н-обмен и вызвать секреторный ответ тучных клеток; вместе с тем клещевой аллерген в отсутствии внеклеточного кальция не приводит к секреции медиаторов сенсибилизированными тучными клетками.

5. Выявлено, что клещевой аллерген способен дозозависимо стимулировать секрецию гистамина и гепарина сенсибилизированными тучными клетками. В то же время секреция гистамина в ответ на клещевой аллергоид сравнима с секрецией, вызванной аллергеном в концентрации в 500 раз ниже концентрации аллергоида.

6. Установлено, что введенный in vivo альфа-тромбин вызывает высвобождение из тучных клеток перитонеальной жидкости и подкожной клетчатки меченого гепарина, ранее аккумулированного из кровотока. В опытах in vitro показано, что активация тучных клеток альфа-тромбином является рецептор-опосредованной и обусловлена взаимодействием центра узнавания высокомолекулярных соединений в молекуле тромбина со специфическими рецепторами на мембране тучных клеток. Определено, что секреторную активность тучных клеток можно модулировать избирательным блокированием в молекуле тромбина либо активного центра, либо центра узнавания высокомолекулярных соединений.

7. Установлено, что модифицированный формальдегидом аллерген из клещей Dermatophagoides farinae имеет белковые компоненты с близкими значениями pi (pi 3,5 - 4,85); практически лишен эстеразной активности, обладает высокой иммуногенностью и проявляет сниженные аллергенные свойства; последнее может служить основанием для применения клещевого аллергоида в качестве лечебного препарата при проведении специфической иммунотерапии.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ ПО РЕЗУЛЬТАТАМ ИССЛЕДОВАНИЯ

Тучные клетки участвуют как в нормальной жизнедеятельности организма, так и в ряде патологических процессов. Функции тучных клеток реализуются благодаря продукции и секреции ими ряда биологически активных веществ.

Процесс дегрануляции обеспечивается целым комплексом взаимосвязанных реакций, начало которым положено взаимодействием индукторов с поверхностью клеточной мембраны.

Индукторы дегрануляции тучных клеток условно делят на агенты иммунологической и неиммунологической природы (98, 328). Взаимодействие агентов иммунологической природы (антигенов, аллергенов) с тучными клетками осуществляется через ^Е-опосредованный механизм. Неиммунологические индукторы активируют тучные клетки без участия высокоаффинных рецепторов: они либо взаимодействуют с мембранными рецепторами иной природы, либо являются либераторами нерецепторного механизма действия.

Большое разнообразие появившихся в последние годы неиммунологических стимуляторов тучных клеток привело к широкому распространению псевдоаллергических реакций, имеющих в количественном отношении большее значение, чем истинные аллергические реакции. Существенное различие между истинными и ложными аллергическими реакциями заключается в механизмах их запуска, т.к. в отличие от псевдоаллергических реакций в основе истинных аллергических реакций лежит взаимодействие антигена с антителом (1). Известно, что псевдоаллергические реакции по своим клиническим проявлениям во многом напоминают истинные аллергические реакции. Кроме того, решающую роль как в истинных, так и в псевдоаллергических реакциях играет высвобождение медиаторов из тучных клеток (20). В настоящее время становится очевидным, что прогресс в понимании различий в механизмах истинных и ложных аллергических реакций может быть достигнут только исследованиями внутриклеточных процессов передачи сигнала в тучных клетках и других клетках-мишенях аллергической реакции. Применение иммунологических и неиммунологических стимуляторов тучных клеток позволило нам смоделировать процессы, лежащие в основе истинных и ложных аллергических реакций, и с помощью современных высокочувствительных методов исследования выявить различия в механизмах трансмембранной передачи сигнала в тучных клетках, активированных иммунологическими и неиммунологическими агентами.

Цель настоящей работы состояла в выяснении механизмов активации тучных клеток агентами иммунологической и неиммунологической природы.

В качестве иммунологических агентов мы использовали аллерген из клещей Dermatophagoides /агтае, который является важным сенсибилизирующим фактором, вызывающим аллергические заболевания человека, и его модифицированную форму - клещевой аллергоид.

Неиммунологическими индукторами служили трипсин, альфа-тромбин, который является ключевым ферментом гемостаза и обладает провоспалительными свойствами, и его модифицированные формы: ДИФ-альфа-тромбин и бета/гамма-тромбин.

Для изучения влияния данных препаратов на секреторный ответ тучных клеток in vivo и in vitro нами было проведено сравнительное исследование свойств клещевого аллергена и аллергоида, трипсина, тромбина и его модифицированных форм.

Данные литературы свидетельствуют о значительной гомологии первичных структур альфа-тромбина, компонента клещевого аллергена - Der fill, трипсина. Гомология аминокислотной последовательности особенно выражена в месте локализации каталитических участков активного центра (60,80 ).

Нами показано, что клещевой аллерген, тромбин, трипсин способны расщеплять специфический низкомолекулярный субстрат -этиловый эфир бензоил-Ь-аргинина (БАЭЭ). БАЭЭ является классическим субстратом для сериновых протеиназ семейства трипсина.

Результаты измерения эстеразной активности указывают на то, что активность клещевого аллергена сравнима с активностью трипсина и составила соответственно 19,36 и 23,75 мкМ БАЭЭ на 1 мг белка в минуту. В то же время альфа-тромбин обладает слабыми протеолитическими свойствами и его эстеразная активность оказалась равной 12,5 мкМ БАЭЭ на 1 мг белка в минуту. Модифицированная форма тромбина - бета/гамма-тромбин имел сходную с альфа-тромбином активность, а ДИФ-альфа-тромбин не имел протеолитической активности, вследствие блокады каталитического центра ДФФ.

Сравнительный анализ физико-химических свойств клещевого аллергена и аллергоида показал, что в результате модификации формальдегидом клещевой аллерген практически полностью терял эстеразную активность. Кроме того, процесс формалинизации приводил к изменению pi клещевого аллергена и уменьшению объема выхода при гель-фильтрации. Можно предположить, что все эти изменения прежде всего связаны с химическими и конформационными преобразованиями белковых компонентов.

Исследованиями антигенных и аллергенных свойств показано уменьшение количества реакционно-способных антигенных детерминант в молекуле аллергоида и снижение его аллергенной активности по сравнению с клещевым аллергеном.

В условиях in vivo в экспериментах активной системной анафилаксии на морских свинках обнаружена способность клещевого аллергоида стимулировать синтез аллергенспецифических антител, то есть иммуногенная активность клещевого аллергоида не уступала активности клещевого аллергена. Вместе с тем клещевой аллергоид обладал сниженными аллергенными свойствами и при введении в кровоток не вызывал гибели животных, сенсибилизированных клещевым аллергеном.

Реакция анафилактического шока, проявляющаяся у сенсибилизированных морских свинок при внутривенном введении разрешающей дозы клещевого аллергена, свидетельствовала о высвобождении медиаторов тучными клетками, на которых происходит встреча антигенов с фиксированными на них антителами (284).

Таким образом, тучные клетки отвечали на введение клещевого аллергена в кровоток секрецией медиаторов.

При введении альфа-тромбина в кровоток фиксировали секрецию ранее аккумулированного 358-меченого гепарина из тучных клеток перитонеальной полости крыс и подкожной клетчатки. ДИФ-альфа-тромбин вызывал эффект подобный альфа-тромбину. В то же время введение трипсина в кровоток не вызывало секреторного ответа тучных клеток и выброса ими гепарина.

Для исследования способности тучных клеток секретировать in vitro гистамин и гепарин в ответ на действие клещевого аллергена и аллергоида нами были подобраны условия (температура, разведение сыворотки, время и т.д.) пассивной сенсибилизации клеток.

Определение гепарина, секретируемого тучными клетками, проводили с помощью специально разработанного нами высокочувствительного способа с использованием катионного красителя берберина, позволившего определить количество гепарина на порядок более низкое, чем известными ранее методами (140, 394).

Высвобождение гистамина и гепарина в ответ на клещевой аллерген носит дозозависимый характер. Концентрация аллергена 10 мкг/мл, по-видимому, является оптимальной, так как она вызывала максимальное высвобождение медиаторов из тучных клеток: 48% гистамина и 23% гепарина. Увеличение дозы аллергена до 50 мкг/мл не вызывало достоверного повышения секреции медиаторов. Эффективная концентрация клещевого аллергена 0,1 мкг/мл оказалась на два порядка ниже максимальной, что свидетельствует о специфическом взаимодействии клещевого аллергена с тучными клетками.

Установлено, что клещевой аллергоид в концентрации 50 мкг/мл вызывал 18%-ную секрецию гистамина, сравнимую с секрецией в ответ на аллерген в концентрации 0,1 мкг/мл, то есть аллергенная активность клещевого аллергоида оказалась в 500 раз ниже активности клещевого аллергена. Секреция гепарина в ответ на данную концентрацию клещевого аллергоида (50 мкг/мл) не превышала базального уровня. Неполноценная секреция медиаторов тучными клетками в ответ на клещевой аллергоид, вероятно, обусловлена изменением конформации IgE-связывающих детерминант в молекуле аллергоида.

Неиммунологический индуктор тучных клеток альфа-тромбин в концентрации 1 нМ вызывал высвобождение гепарина и гистамина -28% и 31% соответственно. Количество медиаторов, выделяющихся из клеток, стимулированных альфа-тромбином, зависело от дозы индуктора. Нами отмечено, что при повышении концентрации альфа-тромбина до 10 нМ количество секретируемого клетками гепарина и гистамина снижается. При дальнейшем повышении концентрации индуктора до 1 мкМ секреция практически прекращается. Одним из возможных объяснений этому может служить явление десенсибилизации рецепторов.

Нами установлено, что в отличие от альфа-тромбина, ДИФ-альфа-тромбин с заблокированным активным центром, а также бета/гамма-тромбин с нарушенной структурой центра узнавания в.м.с. не способны стимулировать освобождение гистамина и гепарина тучными клетками.

По-видимому, способность альфа-тромбина в диапазоне концентраций от 0,01 до 1 нМ стимулировать перитонеальные тучные клетки в условиях in vitro опосредована взаимодействием лиганда с рецепторами высокого сродства. Анализ полученных нами данных показал, что ФИТЦ-меченый альфа-тромбин связывается с рецепторами тучных клеток с Кд= 1,3 х Ю"10 М и концентрацией связывающих мест - 3 нМ. Это высокоаффинное связывание характеризуется специфичностью, насыщаемостью и обратимостью.

Таким образом, альфа-тромбин является новым неиммунологическим модулятором активности тучных клеток и вызывает их секрецию, взаимодействуя с мембранными рецепторами высокого сродства.

Действие трипсина в низких концентрациях на тучную клетку не вызывает высвобождения медиаторов. Высокие концентрации трипсина приводили к протеолизу мембранных рецепторов, повреждению клеточной мембраны, высвобождению гистамина и гепарина и в дальнейшем к гибели клетки. Следовательно, так как низкие концентрации трипсина не оказывали влияния на клетку, а высокие разрушали ее, трипсин нельзя отнести к дегрануляторам тучных клеток.

Установив факт, что неиммунологический агент - альфа-тромбин и иммунологический агент - клещевой аллерген способны вызывать секрецию гистамина и гепарина из тучных клеток, мы предприняли попытку исследовать трансмембранные процессы передачи сигнала в тучных клетках, что является важным для понимания молекулярных механизмов, лежащих в основе аллергических и псевдоаллергических реакций.

Известно, что активация различных клеток (лимфоцитов, тромбоцитов, фибробластов) сопровождается изменениями внутриклеточного рН, в регуляции которого участвует универсальная транспортная система Ыа/Н-обмена (12 ).

Нами определена величина внутриклеточного рН интактных тучных клеток. Она оказалась равной 6,92 ±0,013 ед. Сравнивая рШ различных клеток: тромбоцитов, лимфоцитов и др., можно отметить более кислое содержимое тучных клеток.

Проведенное нами исследование внутриклеточного рН перитонеальных тучных клеток, стимулированных альфа-тромбином, показало двухфазное изменение р№: первая фаза - закисление цитоплазмы сменялась второй фазой увеличением рНг, превышающим базальный уровень. Причем обе фазы зависели от дозы альфа-тромбина и от температуры среды. Анализ кривой доза-эффект показал: чем больше доза альфа-тромбина, тем более выражена фаза закисления и менее выражена фаза защелачивания цитоплазмы.

Протеолитически неактивная форма альфа-тромбина - ДИФ-альфа-тромбин в диапазоне концентраций от ОД пкМ до 1 нМ, подобно альфа-тромбину, вызывал двухфазное изменение pHi. В то же время бета/гамма-тромбин с нарушенной структурой центра узнавания высокомолекулярных соединений вызывал лишь начальную фазу закисления цитоплазмы.

Что касается трипсина, то он в низких концентрациях практически не изменял pHi, а в высоких приводил к устойчивому закислению цитоплазмы, что, по-видимому, свидетельствовало о гибели клеток.

При действии на пассивно сенсибилизированные тучные клетки клещевым аллергеном и аллергоидом наблюдали двухфазное изменение pHi. Рост внутриклеточного рН в ответ на клещевой аллерген в концентрации 0,05 мкг/мл был значительно более высоким, чем при действии альфа-тромбина. Однако модифицированная форма -аллергоид не приводил к столь сильным изменениям pHi даже в концентрации 5 мкг/мл, что, по-видимому, обусловлено как уменьшением числа антигенных детерминант в аллергоиде, так и недоступностью для IgE остальных детерминант, скрытых внутри агрегированных, укрупненных белковых молекул аллергоида (172).

Вероятно, в наших экспериментах закисление цитоплазмы в ответ на альфа-тромбин и клещевой аллерген можно объяснить активацией системы сопряженного транспорта анионов в перитонеальных тучных клетках, что доказывается опытами с блокатором анионных каналов -SITS, введение которого в клетку предотвращало снижение pHi.

Нами показано, что в перитонеальных тучных клетках функционирует мембранная транспортная система Na/H-обмена. Об этом свидетельствуют изменения pHi в ответ на К/Н-ионофор -нигерицин, который вызывал защелачивание цитоплазмы в ответ на быстрое ее закисление. Блокатор Na/H-обмена EIPA подавлял этот эффект.

Повышение pHi тучных клеток, стимулированных клещевым аллергеном и альфа-тромбином, по-видимому, обусловлено активацией Na/H-обмена, так как EIPA подавлял этот эффект.

Активация Na/H-обмена в ответ на альфа-тромбин не зависела от внеклеточного кальция, в то же время в бескальциевой среде клещевой аллерген не вызывал секрецию медиаторов из тучных клеток. Следовательно, для высвобождения гистамина тучным клеткам, стимулированным иммунологическими агентами, необходим не только внутриклеточный, но и внеклеточный кальций. Вход кальция извне, вероятно, является триггерным механизмом для активации Na/H-обмена и секреции медиаторов. Уровень внутриклеточного кальция, в этом случае, играет важную, но не решающую роль.

Как показали наши данные, в активации Na/H-обмена в тучных клетках, стимулированных клещевым аллергеном и альфа-тромбином, принимает участие протеинкиназа С. Соединение Н-7 - ингибитор протеинкиназы С, полностью блокировало повышение pHi, вызванное альфа-тромбином. Однако ингибитор протеинкиназы С не приводил к полному подавлению фазы защелачивания цитоплазмы, вызванной клещевым аллергеном. Можно полагать, что в активации Na/H-обмена в тучных клетках, стимулированных клещевым аллергеном, принимает участие не только протеинкиназа С, но и другие внутриклеточные посредники.

Еще одним подтверждением этого предположения явились эксперименты по введению в тучные клетки альфа-тромбина и клещевого аллергена на фоне максимальной активации протеинкиназы С форболовым эфиром - экзогенным имитатором 1,2-диацилглицерина. Нами показано, что 0,1 нМ альфа-тромбин на фоне РМА не вызывал повышения р№, в то же время введение клещевого аллергена в момент максимальной активации протеинкиназы С форболовым эфиром приводило к дальнейшему защелачиванию цитоплазмы. Вероятно, эти данные свидетельствуют о том, что реализация сигнала клещевого аллергена в тучных клетках приводит к запуску одновременно нескольких путей передачи, в частности иммунологического и фосфоинозитольного, а активация тучных клеток альфа-тромбином осуществляется преимущественно по фосфоинозитольному механизму.

Следовательно, согласно нашим данным иммунологический агент - клещевой аллерген и неиммунологический агент - альфа-тромбин, взаимодействуя с тучными клетками, вызывают изменения рЩ в регуляцию которого включаются системы сопряженного транспорта анионов и Ыа/Н-обмена. К активации Иа/Н-обмена иммунологическими и неиммунологическими агентами приводит каскад внутриклеточных реакций с участием протеинкиназы С.

Таким образом, нами выявлены различия в механизмах модуляции активности тучных клеток иммунологическими и неиммунологическими агентами. Установлено, что в реализацию опосредованного сигнала иммунологического агента (клещевого аллергена), приводящего, в конечном счете, к секреции медиаторов из тучных клеток, вовлекаются одновременно иммунологический (катализируемый фосфолипазой А2), и фосфоинозитольный (катализируемый фосфолипазой С) механизмы. Передача внутриклеточного сигнала неиммунологического агента (альфа-тромбина) осуществляется по фосфоинозитольному пути.

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Хлгатян, Светлана Вагинаковна, 2000 год

1. Адо А.Д. Общая аллергология. М.: Медицина, 1978,4§4 с.

2. Адо А.Д., Адрианова Н.В. Бронхиальная астма. В кн.: Частная аллергология. - М.: Медицина, 1976, с. 57-210.

3. Аксельсен Н.Х., Бок Э., Крелль И, Сравнение антигенов и антител. Руководство по количественному электрофорезу: Методы и применение. М.: Мир, 1977, с. 216-224.

4. Альберте Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Роберте К., Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки. М.: Мир, 1987, т. 1-3.

5. Березин И.В., Клесов A.A. Практический курс химической и ферментативной кинетики. М.: МГУ, 1976,321 с.

6. Вайсфельд И.А., Кассиль Г.Н. Гистамин в биохимии и физиологии. -М.: Наука, 1981, 277 с.

7. Вееке Б. Ракетный иммуноэлектрофорез. Руководство по количественному электрофорезу: Методы и применение. М.: Мир, 1977, с. 43-57.

8. Веренинов A.A., МараховаИ.И. Транспорт ионов у клеток вкультуре. Л.: Наука, 1986,292 с.

9. Виноградов В.В., Воробьева Н.Ф. Тучные клетки. -Новосибирск: Наука, 1973,127 с.

10. Внутриклеточная сигнализация (Под ред. Костюка П.Г., Островского М.А.). М.: Наука, 1988, 236 с.

11. Глебов Р.Н. Эндоцитоз и экзоцитоз. М.: Высш. шк., 1987, 95 с.

12. Государственная Фармакопея СССР. М.: Медицина, 1990, изд. 11, вып. 2 , с.31.

13. Гущин И.С. Аллергическое воспаление и его фармакологический контроль. М.: Фармарус Принт, 1998, 252 с.

14. Гущин И.С. Немедленная аллергия клетки. М.: Медицина, 1976, 174 с.

15. Емельянова О.Ю. Характеристика иммунохимических свойств клещевых аллергенов. Автореф. дис. на соискание степени канд. биол. наук, 1992, 25 с.

16. Емельянова О.Ю. , Перова H.A., Голышева М.А., Бержец В.М. Антигенные и аллергенные свойства экстракта из клещей домашней пыли Dermatophagoides farinae. Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол., 1992, № 4, с. 51-54.

17. Иммунология (Под ред. У. Пола). М.: Мир, 1987, т. 1-3.

18. Йегер Л. Клиническая иммунология и аллергология. М.: Медицина, 1990, т.1, с. 106-114.

19. Канчурин А.Х., Вайцекаускайте P.JI. Аллергия к клещам. -Вильнюс: Мокслас, 1998, 119 с.

20. Козловская JI.B., Николаев А.Ю. Учебное пособие по клиническим и лабораторным методам исследования. М.: Медицина, 1984, с.30-32.

21. КрелльИ. Линейный иммуноэлектрофорез. Руководство поколичественному иммуноэлектрофорезу: Методы и применение. -М.: Мир, 1977, с. 78-88.

22. Кудряшов Б.А. Биологические проблемы регуляции жидкого состояния крови и ее свертывания. М.: Медицина, 1975, 488 с.

23. Кудряшов Б.А., Струкова С.М. Значение молекулярных особенностей тромбина во взаимодействии с рецепторными структурами в организме. Успех, соврем, биологии, 1984, т. 97, с. 193-207.

24. Кульберг А.Я. Рецепторы клеточных мембран. М.: Высш. шк. , 1987, 103 с.

25. Лавренчик Е.И. , Корытина О.Л. Сравнительная оценка биологической активности аллергенов и аллергоидов, изготовленных из пыльцы растений, методом двойной радиальной иммунодиффузии.- Журн. микробиол., эпидемиол. и иммунол., 1989, № 9, с. 94-96.

26. Левицкий Д.О. Кальций и биологические мембраны. М.: Высш. шк., 1990,124 с.

27. Линднер Д.П., Коган Э.М. Тучные клетки как регуляторы тканевого гомеостаза и их место в ряду биологических регуляторов.- Арх. патологии, 1976, № 8, с. 3-14.

28. Линднер Д.П., Поберий И.А., Розкин М.Я. и др. Морфометричес-кий анализ популяции тучных клеток.-Арх. пат., 1980, № 6, с. 60-64.

29. Михайлов А.Г., Симирский В.Н. Методы иммунохимического анализа в биологии развития. М.: Наука, 1991, с.162-176.

30. Остерман Л.А. Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами. М.: Наука, 1983, 304 с.

31. Остерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование. М.: Наука, 1981, 354 с.

32. Остерман JI.А. Хроматография белков и нуклеиновых кислот. -М.: Наука, 1985, 536 с.

33. Перова H.A. Получение аллергоида из клещей Dermatophagoides farinae и характеристика его физико-химических и иммунобиологических свойств. Автореферат дис. на соискание степени канд. биол. наук, 1994, 22 с.

34. Проценко В.А., Шпак С.И., Доценко С.М. Тканевые базофилы и базофильные гранулоциты. -М.: Медицина, 1987, 128 с.

35. Райкис Б.Н., Воронкин Н.И. Лечебные аллергены. Л.: Медицина, 1987, с. 13-40.

36. Райкис Б.Н., Иллютович H.A. Иммунологическая характеристика аллергоида из растительной пыльцы. Бюлл.эксп.биологии и медицины, 1981, № 1, с. 74-75.

37. Ригетти П. Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы, применение. -М.: Мир, 1986, 398 с.

38. Ройт А. Основы иммунологии. М.: Мир, 1991, 328 с.

39. Рокицкий П.И. Биологическая статистика.- Минск: Высш. шк., 1973, с.94.

40. Руководство по гематологии (Под ред. Воробьева А.И., Лорие Ю.И.). М.: Медицина, 1979, 584 с.

41. Серебряный С.Б. Тромбин: его строение и особенности катализа. В кн.: Биохимия животных и человека. - Киев: Наукова Думка, 1982, с.14-26.

42. Серов В.В., Шехтер А.Б. Соединительная ткань. М.: Наука, 1981,312 с.

43. Соловьев В.Н. Фирсов A.A. Филов В.А. Фармакокинетика. М.: Медицина, 1980, 423 с.

44. Струков А.И., Струкова С.М., Хлебникова Т.Г., Умарова Б.А. Анализ тучноклеточной популяции при возбуждении и блокадепротивосвертывающей системы. -Бюлл. экспер. биол. мед., 1982, № 6, с. 116-118.

45. Струкова С.М., Серейская A.A., Осадчук Т.В. Структурные основы специфичности тромбина. Успехи соврем, биол., 1989, т.107. с. 41-54.

46. Струкова С.М., Умарова Б.А., Киреева Е.Г., Кудряшов Б.А. Сравнение каталитических свойств а и ß/y-тромбина. Биохимия, 1978, т.43, с. 708-716.

47. Струкова С.М., Хлебникова Т.Г., Умарова Б.А., Кулибали М. Секреция гепарина тучными клетками как показатель состояния противосвертывающей системы. Бюлл. экспер. биол. и мед., 1984, №2, с. 131-134.

48. Титова С.М. Аллергические реакции и методы реакции анафилаксии. Руководство по иммунологии. М.: Медицина, 1973, с. 369-375.

49. Фрадкин В.А. Диагностические и лечебные аллергены. М.: Медицина, 1990, 256 с.

50. Шульц Г., Ширмер Р. Принципы структурной организации белков. М.: Мир, 1982, с. 82-103.

51. Экспериментально-производственный регламент № 385-92 аллергена из клещей Dermatophagoides farinae для диагностики и лечения.

52. Юров C.B., Пчелинцев С.Ю. Афанасьев С.С. и др. Использование микроточечного иммуноферментного анализа с визуальной идентификацией для определения туляремийных антител. Журн. микробиол., 1991, № 3, с.61-64.

53. Abraham W.M., Abraham M.K., Ahmed T. Protective Effect of Heparin on Immunologically Induced Tracheal Smooth Muscle Contraction in Vitro. Int. Archs. Allergy Immunol., 1996, v. 110, N 1, pp 79-84.

54. Ahmed T., Abraham W.M., Dbrot J. Effects of Inhaled Heparin on Immunological and Nonimmunological Bronchoconstrictor Responses in Sheep. Am. Rev. Resp. Dis., 1992, v. 145, N 3, pp 566-570.

55. Alfonso A., Botana M.A., Vieytes M.R., Botana L.M. Sodium, PMA and calcium play an important role on intracellular pH modulation in rat mast cells. Cell Physiol. Biochem., 1998, v.8, N 6, pp 314-27.

56. Alfonso A., Lago J., Botana M.A., Vieytes M.R., Botana L.M. Characterization of the Na+/Ca2+ Exchanger on Rat Mast Cells, evidence for a functional role on the regulation of the cellular response. Cell Physiol. Biochem., 1999, v. 9, N 2, pp 53-71.

57. Andersen A. Isolation and characterization of an allergen-rich fraction derived from cultures of Dermatophagoides pteronyssinus. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1989, v. 89, pp 17-23.

58. Ando T., Ino Y., Haida M., Honma R., Maeda H., Yamakawa H., Iwaki M., Okudaira H. Isolation of Cysteine Protease in the Crude Mite Extract, Dermatophagoides-Farinae. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1991, v. 96, N 3, pp 199-205.

59. Arlian L.G., Bernstein I.L., Geis D.P. et al. Investigations of culture medium free house dust mites. III. Antigens and allergens of body andfecal extract of Dermatophagoides farinae. J. Allergy Clin. Immunol., 1987, v. 79, pp 457-466.

60. Arora N., Gangal S.V. Allergen entrapped in liposomes reduce allergenicity and induce immunogenicity on repeated injections in mice. -- Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1990, v.91, pp 22-29.

61. Arulanandam A.R.N., Koyasu S., Reinherz E.L. T-Cell Receptor-Independent CD2 Signal Transduction in Fcr+ Cells. J. Exp. Med., 1991, v. 173, N 4, pp 859-868.

62. Babina M., Weber S., Mammeri K., Henz B.M. Signal-Transduction via Cd43 (Leukosialin, Sialophorin) and Associated Biological Effects in a Human Mast-Cell Line (HMC-1). Biochem.& Biophys. Res. Comm., 1998, v. 243, Nl,pp 163-169.

63. Baker E.N., Drenth J. Biological Macromolecules and Assemblies. -Wiley & Sons, N.Y., 1989, pp 314-321.

64. Baldo B.A., Uhlenbrock G. Selective isolation of allergens. I. Reaction of house dust mite extracts with tridacnin and concanavalin A and examination of the allergenicity of the isolated components. Clin. Allergy, 1977, v. 7, pp 429-443.

65. Barker SA, Lujan D, Wilson B.S. Multiple roles for PI 3-kinase in the regulation of PLCgamma activity and Ca2+ mobilization in antigen-stimulated mast cells. J. Leukoc. Biol., 1999, v.65, N 3, pp 321-329.

66. Bauer P.I., Machovich R., Aranyi P., Buri K.G., Csonka E., Horvath I. Mechanism of thrombin binding to endothelial cells. Blood, 1983, v.61, N2, pp 368-372.

67. Befiis A.D. Mast cells are that polymorfic. Region Immunol., 1989, v.2,pp 176-187.

68. Behrendt H., Schmitzies W., Zinne K., Wenners J., Nissen M., Eggeling C. Mastzellen: Morphologic and Herkunft. Atenn. -Langenukb., Jabrgang, 1986, v. 12, N 2, s54-s58.

69. Bender J.G., van Epps D.E., Stewart C.C. Characterization of granulocytes and mast cells in cultures of mouse bone marrow stimulated with interleukin-3. J.Cell. Physiol., 1988, v.135, pp 71-78.

70. Bennett B.J., Thomas W.R. Cloning and Sequencing of the Group-6 Allergen of Dermatophagoides Pteronyssinus. Clin. Exp. Allergy, 1996, v. 26, N 10, pp 1150-1154.

71. Berlin G., Enerback L. Mast cell secretion. Rapid sealing of exocytotic cavities demonstrated by cytofluorometry. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1984, v.73, N 3, pp 256-262.

72. Berlin G., Enerback L. The dynamic of mast cells secretion studied by vital berberine staining. Agents and Actions, 1984, v. 14. N 3A, pp 401404.

73. Berliner L.E., Birktoft J.J., Miller T.L., Musci G., Scheffler J.E., Shen J.J., Sugawara J. Thrombin: Active-Site topography. In: Bioregulatory functions of thrombin (Eds. Walz D.A. et al.), Ann. N.Y. Acad. Sei., 1986, v.485, pp 80-96.

74. Bidri M., Ktorza S., Vouldoukis I., Legoff L., Debre P., Guillosson J.J., Arock M. Nitric-Oxide Pathway Is Induced by Fc-Epsilon-Ri and Up-Regulated by Stem-Cell Factor in Mouse Mast-Cells. Eur. J. Immunol., 1997, v. 27, N 11, pp 2907-2913.

75. Bienenstock J. An update on mast cell heterogeneity. J. Allergy Clin. Immunol., 1988, v.81, N 5, part 1, pp 763-769.

76. Bienenstock J., Macqueen G., Sestini P., Marshall J.S., Stead R.H., Perdue M.H. Mast Cell/Nerve Interactions In vitro and In vivo. Am. Rev. Resp. Dis., 1991, v. 143, N 3, pp S55-S58.

77. Bischoff S.C., Dahinden C.A. C-Kit Ligand A Unique Potentiator of Mediator Release by Human Lung Mast Cells. - J. Exp. Med., 1992, v. 175, N 1, pp 237-244.

78. Bizios R., Lai L., Fenton J.W.II et al. Thrombin induced Chemotaxis and aggregation of neutrophils. J. Cell. Physiol., 1986, v. 128, pp 485490.

79. Bousquet J., Calvayrac P., Guerin B. Immunotherapy with a standardized Dermatophagoides pteronyssinus extract. I. In vivo and in vitro parameters after a short course of treatment. J.Allergy Clin. Immunol., 1985, v.76, pp 734-741.

80. Bousquet J., Guerdon B., Michel F.B. Regulatory and standardization of allergenic extracts. In: Third Paul Ehrlich-Seminar, Gustav Fisher Verlag, Stuttgart, 1985, pp 291-309.

81. Bousquet J., Hale R., Michel F.B. Enzymatic activities of house dust extracts. Ann. Allergy, 1980, v.45, pp 316-321.

82. Bousquet J., Hejjaoui A., Michel F. Specific immunotherapy in asthma. J.Allergy Clin. Immunol., 1990, v.86, N 3, pp 292-305.

83. Borgeat P., Samuelsson B. Arachidonic acid metabolism in polymorphonuclear leukocytes: Effects of ionophore A 23187. Proc. Nat. Acad. Sei. USA, 1979, v.76, pp 2148-2152.

84. Bowler S.D., Smith S.M., Lavercombe P.S. Heparin Inhibits the Immediate Response to Antigen in the Skin and Lungs of Allergic Subjects. Am. Rev. Resp. Dis., 1993, v. 147, N 1, pp 160-163.

85. Brezinska-Blaszczyk E., Cruwaj M. Isolation and sensitivity of human mesenteric mast cells to immunological and nonimmunological histamine releasers. Agents and Actions, 1987, v.20, N 3/4, pp 226-228.

86. Bruijnzeel P.L.B., Gebhardt M., Vanoverveld F.J. Mast Cells and Basophils Their Bearing on Allergic Diseases. - Schweizerische Medizinische Wochenschrift, 1991, v. 121, N 46, pp 1675-1685.

87. Brunei C., Hebert J. Hrf of 30 kDa Evidence for Active Synthesis. -Agents and Actions, 1993, v. 39, N 3-4, pp 97-103.

88. Cabado A.G., Despa S., Botana M.A., Vieytes M.R., Gonzalez M., Botana L.M. Membrane potential changes associated with calcium signals in human lymphocytes and rat mast cells. Life Sei., 1999, v. 64, N 8, pp 681-696.

89. Campbell A.M., Chanez P., Couret I., GodardP., Michel F.B., Bousquet J. In vitro Activation of Bronchoalveolar Lavage Cells by House Dust Mite Allergens. Ann. Allergy, 1992, v. 68, N 2, pp 159-164.

90. Cantwell M.E., Foreman J.C. Phorbol esters induce a slow, non-cytotoxic release of histamine from rat peritoneal mast cells. Agents and actions, 1987, v.20, N 3/4, pp 165-175.

91. Chakravarty N. Calcium uptake in mast cells, energy metabolism and histamine secretion. Agents and actions, 1987, v.20, N 3/4, pp 153156.

92. Chakravarty N. Mechanism of histamine secretion. Agents and Actions, 1990, v. 30, N 1/2 , pp 5-12.

93. Chakravarty N. The role of protein kinase C in histamine secretion from mast cells. Acta Physiol. Scand., 1990, v. 139, pp 319-331.

94. Chapman M.D., Heymann P.W., Platts-Mills T.A.E. Epitope mapping of two major inhalant allergens Der pi and Der fl, from mites of the genus Dermatophagoides. J. Immunology, 1987, v. 139, pp 14791484.

95. Chapman M.D., Heymann P.W., Platts-Mills T.A.E. Mite Allergy. -USB Institute of Allergy, Brassels, 1988, pp 27-29.

96. Chapman M.D., Platts-Mills T.A.E. Purification and characterization of the major allergen from Dermatophagoides pteronyssinus antigen PI. - J. Immunol, 1980, v. 125, pp 587-592.

97. Chapman M.D., Platts-Mills T.A.E., Gabriel M., Ng N.K., Allan W., Hill L., Nunn A. Antibody response following prolonged desensitization with D.pteronyssinus extract. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1980, v.61,pp 431-440.

98. Chua K.Y., Dilworth R.J., Thomas W.R. Expression of Dermatophagoides pteronyssinus allergen, Der pll in Escherichia coli and binding studies with human IgE. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1990, v.91, pp 124-129.

99. Chua K.Y., Doyle C.R., Simpson R.J., Turner K.J., Stewart G.A., Thomas W.R. Isolation of cDNA coding for the major mite allergen Derpll by IgE plaque immunoassay. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1990, v.91,pp 118-123.

100. Chua K.Y., Stewart G.A., Thomas W.R. Sequence analysis of cDNA coding for a major house dust mite allergen Der pi: homology with cysteine proteases. J. Exp. Med., 1988, v. 167, pp 175-182.

101. Church M.K., Ellati S., Caulfield J.P. Neuropeptide-Induced Secretion from Human Skin Mast Cells. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1991, v. 94, N 1-4, pp 310-318.

102. Church M.K., Ellati S., Okayama Y. Biological Properties of Human Skin Mast Cells. Clin. Exp. Allergy, 1991, v. 21, N S3, pp 1-9.

103. Church M.K., Okayama Y., Ellati S. Mediator Secretion from Human Skin Mast-Cells Provoked by Immunological and Nonimmunological Stimulation. Skin Pharmacology, 1991, v. 4, N SI, pp 15-24.

104. Cirino G., Cicala C., Bucci M.R., Sorrentino L., Maraganore J.M., Stone S.R. Thrombin functions as an inflammatory mediator through activation of its receptor. J. Exp. Med., 1996, v. 183, N 3, pp 821-827.

105. Coleman J.W., Holliday M.R., Kimber I., Zsebo K.M., Galli S.J. Regulation of Mouse Peritoneal Mast-Cell Secretory Function by Stem-Cell Factor, IL-3 or IL-4. J. Immunol., 1993, v. 150, N 2, pp 556-562.

106. ContiP., Reale M., Barbacane R.C., Panara M.R., Bongrazio M., Theoharides T.C. Role of Lipoxin-A4 and Lipoxin-B4 in the Generation of Arachidonic-Acid Metabolites by Rat Mast Cells and Their Effect on

107. H-3) Serotonin Release. Immunol. Letters, 1992, v. 32, N 2, pp 117124.

108. Costello P.S., Turner M., Walters A.E., Cunningham C.N., Bauer-P.H., Downward J., Tybulewicz V.L.J. Critical Role for the Tyrosine Kinase Syk in Signaling Through the High-Affinity IgE Receptor of Mast-Cells. Oncogene, 1996, v. 13, N 12, pp 2595-2605.

109. Cunningham D.D., Farrell D.H. Thrombin interactions with cultured fibroblasts: relationship to mitogen stimulation. In: Bioregulatory functions of thrombin (Eds. Walz D.A. et al.), Ann. N.Y. Acad. Sci., 1986, v.485, pp 240-249.

110. DaeronM., Malbec O., Latour S., ArockM., FridmanW.H. Regulation of High-Affinity IgE Receptor-Mediated Mast-Cell Activation by Murine Low-Affinity IgG Receptors. J. Clin. Investig., 1995, v. 95, N 2, pp 577-585.

111. Dale S., Landmark H. Characterization of allergens in a crude extract of Dermatophagoides farinae. Allergy, 1984, v.39, N 8, pp 572-585.

112. Dandeu J.P., Le Mao J., Lux M., Rabillon J., David B. Antigens and allergens in Dermatophagoides farinae mite. II. Purification of Ag II, amajor allergen in Dermatophagoides farinae. Immunology, 1982, v.46, pp 676-687.

113. Dilworth R.J., Chua K.Y., Thomas W.R. Sequence Analysis of cDNA Coding for a Major House Dust Mite Allergen, der-F-I. -Clin.Exp. Allergy, 1991, v. 21, N 1, pp 25-32.

114. Drazen J.M., Austen K.F., Lewis R.A., Clark D.A., Goto G., Marfat A., Corey E.J. Comparative airway and vascular activities of leukotrienes C-l and D in vivo and in vitro. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1980, y.11, pp 4354-4358.

115. Dreborg S., Einarsson R., Longbottom J.L. The chemistry and standardization of allergens. In: Handbook of Experimental Immunology (Ed. Weir D.M.), Oxford, Blackwell Scientific Publications, 1986, v. 1, pp 1-28.

116. Dust mite allergens and asthma: Report of a Second International Workshop. J.Allergy Clin. Immunol., 1992, v.89, pp 1046-1060.

117. Eastmond N.C., Banks E.M.S., Coleman J.W. Nitric-Oxide Inhibits IgE-Mediated Degranulation of Mast Cells and Is the Principal Intermediate in IFN-Gamma-Induced Suppression of Exocytosis. J. Immunology, 1997, v. 159, N 3, pp 1444-1450.

118. Ellati S.G., Dahinden C.A., Church M.K. Complement Peptides C3A -Induced and C5A-Induced Mediator Release from Dissociated Human Skin Mast Cells. J. Investig. Dermatol., 1994, v. 102, N 5, pp 803-806.

119. Enerback L. Mast cells. In: Histochemistry in pathologic diagnosis (Eds. Spicer S.S.), Marcel, Denner, Inc., N.Y., Basel, 1986, N 24, pp 695728.

120. Enerback L. The Differentiation and Maturation of Inflammatory Cells Involved in the Allergic Response Mast Cells and Basophils. -Allergy, 1997, v. 52, N 1, pp 4-10.

121. Epel D., Dube F. Intracellular pH and cell proliferation. In: Control of animal cell proliferation, Acad. Press, Inc., 1987, v.l 1, pp 363-393.

122. Frelin C., Vigne P., Ladoux A., Lazdunski M. The regulation of the pH in cells from vertebrates. Eur. J. Biochem., 1988, v. 174, pp 3-14.

123. Friechman J. Human thrombin autoantibody. Thromb. Res., 1978, v,13,N 4, pp 681-688.

124. Friis U.G., Johansen T. Dual Regulation of the Na+/H+-Exchange in Rat Peritoneal Mast Cells Role of Protein-Kinase-C and Calcium on pH(I) Regulation and Histamine-Release. - British J. Pharmacol., 1996, v. 118, N6, pp 1327-1334.

125. Friis U.G., Johansen T., Hayes N.A., Foreman J.C. IgE-Receptor Activated Chloride Uptake in Relation to Histamine-Secretion from Rat Mast-Cells. British J. Pharmacol., 1994, v. 111, N 4, pp 1179-1183.

126. Furuta G.T., Ackerman S.J., Lu L., Williams R.E., Wershil B.K.Stem-Cell Factor Influences Mast-Cell Mediator Release in

127. Response to Eosinophil-Derived Granule Major Basic-Protein. Blood, 1998, v. 92, N3,pp 1055-1061.

128. Galli S.J., Tsai M., Wershil B.K.Regulation of Mast-Cell Proliferation, Maturation and Function by Stem-Cell Factor, a Ligand for the C-Kit Receptor. Int. Archs. Allergy Immunol., 1992, v. 99, N 2-4, pp 234-237.

129. Galli S.J., Tsai M., Wershil B.K.The C-kit Receptor, Stem-Cell Factor, and Mast-Cell What Each Is Teaching Us About the Others. -American J. Pathology, 1993, v. 142, N 4, pp 965-947.

130. Gentile D.A., Skoner D.P. A Role for the Sodium, Potassium Adenosine-Triphosphatase (Na+,K+ ATPase) Enzyme in Degranulation of Rat Basophilic Leukemia-Cells. Clin. Exp. Allergy, 1996, v. 26, N 12, pp 1449-1460.

131. Germano P., Gomez J., Kazanietz M.G., Blumberg P.M., Rivera J. Phosphorylation of the Gamma-Chain of the High-Affinity Receptor for Immunoglobulin-E by Receptor-Associated Protein-Kinase C-Delta. -J. Biolog. Chem., 1994, v. 269, N 37, pp 23102-23107.

132. Gigl G., Hartwed D., Sanchez-Delgado C., Metz G., Gietzen K. Calmodulin antagonism: a pharmacological approach for the inhibition of mediators release from mast cells. Cell calcium, 1987, N 8, pp 327-344.

133. Goodnough L.T., Saito H. Specific binding of thrombin by human peripheral blood monocytes.-J.Lab.Clin.Med., 1982,v. 9, N 6, pp 873-884.

134. Grammer L.C., Shaughnessy M.A., Patterson R. Modified forms of allergen immunotherapy-J.Allergy Clin.Immunol.,1985,v.76, pp397-401.

135. Greene W.K., Chua K.Y., Stewart G.F., Thomas W.R. Antigenic analysis of group I house dust mite allergens using random fragments of Der pi expressed by recombinant DNA libraries. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1990, v.92, pp 30-38.

136. Greene W.K., Thomas W.R. IgE Binding Structures of the Major House Dust Mite Allergen der-P-I. Molecular Immunol., 1992, v. 29, N 2, pp 257-262.

137. Grinstein S., Rotin D., Mason M.J. Na+/H+ exchange and growth factor-induced cytosolic pH changes. Role in cellular proliferation. -Biochem. et Biophys. Acta, 1989, v. 988, pp 73-97.

138. Grosman N., Nielsen K.A. The influence of tetradecanoyl-phorbol-acetate (TPA) on histamine release from isolated rat mast cells. Agents and Actions, 1988, v.24, N 1/2, pp 40-48.

139. Grundemar L., Hakanson R. Neuropeptide-Y, Peptide-YY and C~ Terminal Fragments Release Histamine from Rat Peritoneal Mast-Cells. -British J. Pharmacol., 1991, v. 104, N 4, pp 776-778.

140. Grynkiewicz G., Poenie M., Tsuen R.Y. A new generation of Ca indicators with greatly improved fluorescence properties. J.Biol. Chem., 1985, v. 260, pp 3440-3450.

141. Gulbenkian A., Myers J., EganR.W., Siegel M.I. The role of a

142. Ca /calmodulin dependent plasma membrane Ca channel during concanavalin A activation of MC 9 mast cells. Agent and Action, 1987, v. 22, N 1/2, pp 16-23.

143. Gushchin I.S., Babakhin A.A., Andreev S.M., Wheeler A.W. Modulation of immunological properties of allergen by chemical modification of its epitopes. Allergy, 1997, v.52, suppl. 37, p 105.

144. Habeeb A.F.S.A. A study of the antigenicity of formaldehyde- and glutaraldehyde treated bovine serum albumin and ovalbumin - bovine serum albumin conjugate - J. Immunology, 1969, v. 102, N 2, pp 457-465.

145. Haida M., Okudaira H., Ogita N., Ito K., Miyamoto T., Nakajima T., Hongo O.J. Allergens of the house-dust D.farinae immochemical studies of four allergenic fractions. - J.Allergy Clin. Immunol., 1985, v.75, N 6, pp 687-692.

146. Hamawy M.M., Mergenhagen S.E., Siraganian R.P. Protein-Tyrosine Phosphorylation as a Mechanism of Signaling in Mast-Cells and Basophils. Cellular Signalling, 1995, v. 7, N 6, pp 535-544.

147. Hamberg M., Samuellson B. Prostaglandin endoperoxides. Novel transformation of arachidonic acid in human platelets. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1974, v.71, pp 3400-3404.

148. Harenberg J., Heene D.L. Pharmacology and special application by alfa-thrombin of low-molecular-weight heparuns. Am. J. Hematol., 1988, v.29, pp 233-240.

149. Harmon J.T., Tandon N.N., Hoeg J.M., Jamieson P. Thrombin binding and response in platelets stimulus response coupling in type II hyperlipoproteinemia. - Blood, 1989, v. 68, N 2, pp 498-505.

150. Hartmann K., Henz B.M., Krugerkrasagakes S., Kohl J., Burger R., Guhl S., Haase I., Lippert U., Zuberbier T. C3A and C5A Stimulate Chemotaxis of Human Mast-Cells.-Blood, 1997, v.89, N8, pp 2863-2870.

151. Hasegawa S, Pawankar R, Suzuki K, Nakahata T, Furukawa S,

152. Okumura K, Ra C. Functional expression of the high affinity receptor for IgE (FcepsilonRI) in human platelets and its' intracellular expression in human megakaryocytes. Blood, 1999, v. 93 N 8, pp 2543-51.

153. Hatanaka K., Minamiyama M., Tanaka K., Taguchi T., Tajima S., Kitamura Y., Yamamoto A. High susceptibility to ADP-induced thrombin formation in mast cell deficient W/Wv mice. - Thromb. Res., 1985, v.40, N 4, pp 453-464.

154. Hayashi H., Tsuda T., Tsurumi N. et al. Anticoagulant substance released from human lung mast cells by stimulation with anti-IgE or Ca-ionophore A-23187. Acta Med. Okayama, 1987, v. 41, N 2, pp 85-87.

155. He S., Gaca M.D.A., Walls A.F. A Role for Tryptase in the Activation of Human Mast-Cells Modulation of Histamine-Release by Tryptase and Inhibitors of Tryptase. -J. Pharmacol. Exp. Therap., 1998, v. 286, Nl,pp 289-297.

156. He S.H., Walls A.F. Human Mast-Cell Chymase Induces the Accumulation of Neutrophils, Eosinophils and Other Inflammatory Cells in-Vivo. British J. Pharmacol., 1998, v. 125, N 7, pp 1491-1500.

157. He S.H., Walls A.F. The Induction of a Prolonged Increase in Microvascular Permeability by Human Mast-Cell Chymase. -Eur. J. Pharmacol., 1998, v. 352, N 1, pp 91-98.

158. Hejjaoui A., Dhivert H., Michel F.B., Bousquet J. Specific immunotherapy with standardized Dermatophagoides pteronyssinus extract. IY. Systemic reactions according to the immunotherapy schedule. J. Allergy Clin. Immunol., 1990, v.85, pp 473-479.

159. Hewitt C.R., Fosters S., Phillips C., Horton H., Jones R.M., Brown A.P., Hart B.J., Pritehard D.I. Mite allergens: significance of enzymatic activity. Allergy, 1998, v. 53, N 48 suppl., pp 60-63.

160. Heymann P., Chapman M., Aalberse R., Fox G., Platts-Mills Th. Antigenic and structural analysis of group II allergens (Der ill and Der pll ) from house dust mites (Dermatophagoides sp.). J. Allergy Clin. Immunol., 1989, v.83, pp 1055-1067.

161. Higgins J.A., Thorpe C.J., HayballJ.D., OhehirR.E., LambJ.R. Overlapping T-Cell Epitopes in the Group-I Allergen of Dermatophagoides Species Restricted by HLA-DP and HLA-Dr Class-II Molecules. J. Allergy Clin. Immunology, 1994, v. 93, N 5, pp 891-899.

162. Hoick A., Dale S., Stetten K. Purification and characterization of a major allergen from the house dust mite Dermatophagoides farinae. -Allergy, 1986, v.41, pp 408-417.

163. Holgate S.T. The Mast-Cell and Its Function in Allergic Disease. -Clin. Exp. Allergy, 1991, v. 21, N S3, pp 11-16.

164. Holgate S.T., Church M.K. The Mast-Cell. British Med. Bull., 1992, v. 48, N 1, pp 40-50.

165. Holgate S.T., Mavroleon G. J. The molecular and cell biology of allergy. Laryngol. Otol., 1998, v. 112, N 12, pp 1126-37.

166. Horn N., Lind P. Selection and characterization of monoclonal antibodies against a major allergen in D.pteronyssinus: species- specific and common epitopes in three Dermatophagoides species. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1987, v.83, pp 139-142.

167. Horner A.A. Heterogeneity of rat skin heparin chains with high affinity for antithrombin. Biochem. J., 1987, v.244, pp 693-698.

168. Hsu C.H., Chua K.Y., Tao M.H., Huang S.K., Hsieh K.H. Inhibition of Specific IgE Response in-Vivo by Allergen-Gene Transfer. Int. Immunology, 1996, v. 8, N 9, pp 1405-1411.

169. Iikura M., Takaishi T., Hirai K., Yamada H., Iida M., Koshino T., Morita Y. Exogenous Nitric-Oxide Regulates the Degranulation of Human Basophils and Rat Peritoneal Mast-Cells. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1998, v. 115, N 2, pp 129-136.

170. Ino Y., Ando Th., Haida M., Nakamura K., Awaki M., Okudaira H., Miyamoto T. Characterization of the proteases in the in the crude mite extract. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1989, v.89, pp 321-326.

171. Irani A.-M.A., Schwartz L.B. Mast cell heterogeneity. Clin. Exper. Allergy, 1989, v. 19, pp 143-155.

172. Isaacs I., Savion N., Gospodarowicz D., et al. Covalent binding of thrombin to specific sites on corneal endothelial cells. Biochemistry, 1981, v.20,N 2, pp 399-403.

173. Ishii A., Ito K., Ino Y., Miyamoto T. Experimental asthma in guinea pigs sensitized with mites (Dermatophagoides farinae). Int. Arch. Allergy Appl. Immunol., 1989, v.89, pp 400-403.

174. Ishii A., Noda K., Nagai Y. et al. Biological and biochemical properties of the house dust mite extract Dermatophagoides farinae. Jap. J. Exp. Med., 1973, v.43, pp 495-507.

175. Ishizaca T. Analysis of triggering events in mast cells for immunoglobulin E mediated histamine release. - J.Allergy Clin. Immunol., 1981, v. 67, pp 90-96.

176. Ishizaka K. Regulation of IgE synthesis. Ann. Rev. Immunol., 1984, v. 2, pp 159-182.

177. Jamur M.C., Vugman I. Acid phosphatase activity during maturation of rat mesentery mast cells. Cellular. Molecular. Biology, 1987, v.33, N l,pp 69-72.

178. Janson T., Grimmer O. Test conditions and sensitivity of the activated partial thromboplastin time (APTT) test "Cephotest". -Farmakoterapi., 1976, v.XXXII, N 1-2, pp 36-46.

179. Jaques L.B. Mast cells as an expression of their major component, anion polyelectrolytes.-Pharmacol. Sci., 1982, v.3, N10, pp 410-415.

180. Jensen T.B., Friis U.G., Johansen T. Role of Physiological HC03-Buffer on Intracellular pH and Histamine-Release in Rat Peritoneal Mast-Cells. Pflugers Archiv-Eur. J. Physiol., 1998, v. 436, N 3, pp 357-364.

181. Johansen T., Praetorius H. Increased Na+/K+-Pump Activity and Adenosine-Triphosphate Utilization After Compound 48/80-Induced Histamine-Secretion from Rat Mast-Cells. Biochemical Pharmacology, 1994, v. 47, N 10, pp 1731-1736.

182. Kefalides N.A. Biochemical aspects of the vessel wall.-In: Hemostasis and Thrombosis (Eds. Colman E.W. et al), Philad., 1987, pp 793-804.

183. Khiav B.E., Pearce F.L. Role of Serine Esterases in Mast-Cell Activation. British J. Pharmacol, 1998, v. 123, N 6, pp 1267-1273.

184. Kido H., Nakano A., Okishima N., Wakabayashi H., Kishi F., Nakaya Y., Yoshizumi M., Tamaki T. Human Chymase, an Enzyme Forming Novel Bioactive 31-Amino Acid Length Endothelins. -Biological Chemistry, 1998, v. 379, N 7, pp 885-891.

185. King C., Simpson R.J., Moritz R.L., Reed G.E., Thompson P.J., Stewart G.A. The Isolation and Characterization of a Novel Collagenolytic Serine-Protease Allergen (der-P-9) from the Dust-Mite

186. Dermatophagoides-Pteronyssinus. J. Allergy Clin. Immunol., 1996, v. 98, N 4, pp 739-747.

187. Kimata M, Shichijo M, Miura T, Serizawa I, Inagaki N, Nagai H. Ca2+ and protein kinase C signaling for histamine and sulfidoleukotrienes released from human cultured mast cells. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1999, v. 257, N 3, pp 895-900.

188. Kitamura Y., Kanakura Y., Sonoda S., Arai H., Nakano T. Mutual phenotypic changes between connective tissue type and mucosal mast cells. Int. Archs. All. Appl. Immunol. 1987, v. 82, pp 244-248.

189. Kitamura Y., Nakano T., Kanakura Y. Transdifferentiation between mast cell subpopulations (review). Develop. Growth diff., 1986, v.28, N4, pp 321-325.

190. Kitamura Y., Taguchi T., Yokoyama M., Inone M., Yamatodani A., Assano H., Koyama T., Kanamaru A., Hatanaka K., Wershil B.K., Galli

191. J. Higher susceptibility of mast cell deficient WAVv mutant mice to brain thromboembolism and mortality caused by intravenous injection of India Ink. - Am. J. Pathol., 1986, v. 122, N 3, pp 469-480.

192. Knudsen T., Ferjan I., Johansen T. Activation of the Na+/K+-Pump in Rat Peritoneal Mast-Cells Following Histamine-Release A Possible Role in Cell Recovery.-British J.Pharmacol., 1993,v.l08,N 1, pp 120-125.

193. Konig W., Knoller J., Preiffer P., Sconfeld W„ Theobald K., Gross-Weege W. Mastzellen: function atemw. Lungenkrkb, Jabrgang, 1986, v.12, N2, s60-s80.

194. Kraft D. Regulation of IgE Synthesis. Wiener Klinische Wochenschrift, 1993, v. 105, N 23, pp 669-671.

195. Lake F.R., Ward L.D., Simpson R.J., Thompson P.J., Stewart G.A. Allergenicity and Physicochemical Characterization of House Dust Mite Derived Amylase. Int. Arch. Allergy Appl. Immunol., 1991, v. 94, N 14, pp 357-358.

196. Lake F.R., Ward L.D., Simpson R.J., Thompson P.J., Stewart G.A. House Dust Mite-Derived Amylase Allergenicity and Physicochemical Characterization.-J.Allergy Clin.Immunol.,1991,v.87, N 6, pp 1035-1042.

197. Lavens S.E., Warner J.A. The Role of the Tyrosine Kinase, Syk, in IgE-Mediated Signal-Transduction in Human Lung Mast-Cells (Hlmc) and Basophils. Faseb Journal, 1995, v. 9, N 4, pp A781-A781.

198. Lealberumen I., Conlon P., Marshall J.S. IL-6 Production by Rat Peritoneal Mast-Cells Is Not Necessarily Preceded by Histamine-Release and Can Be Induced by Bacterial Lipopolysaccharide. J. Immunology, 1994, v. 152, N 11, pp 5468-5476.

199. Lemao J., Mayer C.E., Peltre G., Desvaux F.X., David B., Weyer A., Senechal H. Mapping of Dermatophagoides-Farinae Mite Allergens by 2-Dimensional Immunoblotting. J. Allergy Clin. Immunol., 1998, v. 102, N 4, pp 631-636.

200. Leung D.Y.M. Molecular-Basis of Allergic Diseases. Molecular Genetics and Metabolism, 1998, v. 63, N 3, pp 157-167.

201. Lim H.W., He D., Esquenazibehar S., Yancey K.B., Soter N.A. C5A, Cutaneous Mast-Cells, and Inflammation In vitro and In vivo Studies in a Murine Model. -J. Invest. Dermatol., 1991, v. 97, N 2, pp 305-311.

202. Lin K.L., Wang S.Y., Hsieh K.H. Analysis of House Dust Mite-Specific IgE, IgG4, and IgG Antibodies During Immunotherapy in Asthmatic-Children. Ann. Allergy, 1991, v. 67, N 1, pp 63-69.

203. Lind P. Purification and partial characterization of two major allergens from the house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus. -J.Allergy Clin. Immunol., 1985, v.16, pp 753-761.

204. Lind P., Lowenstein H. Identification of allergens in Dermatophagoides pteronyssinus mite body extract by crossed radioimmunoelectrophoresis with two different rabbit antibody pools. -Scand. J. Immunol., 1983, v.17, pp 263-273.

205. Lindahl U., Feingold D.S., Roden L. Biosynthesis of heparin. -TIBS, 1986, v.ll, N 5, pp 221-225.

206. Ljungberg B., Beving H., Egberg N., Johansson M., Vesterqvist O. Immediate effects of heparin and LMW heparin on some platelet and endothelial derived factors. Thrombos. Res., 1988, v.255, N 21, pp 10279-10283.

207. Lombardero M., Heymann P., Platts-Mills T.A.E., Fox Y., Chapman M. Conformational stability of B cell epitopes of group I and group II Dermatophagoides spp. allergens. J.Immunology, 1990, v. 144, N 4, pp 1353-1360.

208. Lovik M., Gaarder P.I.,Mehl R. The house-dust mite: its biology and role in allergy. A synopsis. Allergy, 1998, v.53, N 48 Suppl., pp 121-35.

209. Lundblad R.L. A rapid method for the purification of bovine thrombin and the inhibition of the purified enzyme with phenyl-methyl-sulfonyl fluoride. Biochemistry, 1971, v. 10, N 13, pp 2501-2505.

210. Maeyama K., Taguchi Y., Sakurai E., Sasaki M., Yamatodani A., Watanabe T. Effects of Inhibitors of Protein-Kinase-C on the Release and Synthesis of Histamine in Rat Basophilic Leukemia-Cells (2H3).-Japan. J. Pharmacol., 1992, v. 58, N 3, pp 291-298.

211. Mailing H.-J. New ideas in allergen specific immunotherapy. -Amer. J. Rhinol., 1990, v.4, N 4, pp 155-158.

212. Marcum J.A., Rosenberg R.D. Anticoagulantly active heparin-like molecular from mast cell deficient mice. - Am. J. Physiol., 1986, v.250. pp H879-H888.

213. Marcum J.A., Rosenberg R.D. Anticoagulantly active heparan sulfate proteoglycan and the vascular endothelium. Semin. Thromb. Hemost., 1987, v.13, N 4, pp 464-474.

214. Marom Zvi.M. The role of mast cells in bronchial asthma: mechanisms and possible therapeutic implications. The Mount Sinai Journal of Medicine, 1991, v.58, N 6, pp 472-482.

215. Marone G., Casolaro V., Patella V., Florio G., Triggiani M. Molecular and Cellular Biology of Mast-Cells and Basophils. Int. Arch. Allergy Appl. Immunol., 1997, v. 114, N 3, pp 207-217.

216. Marquardt D.L., Walker L.L. Inhibition of Protein-Kinase-A Fails to Alter Mast-Cell Adenosine Responsiveness. Agents and Actions, 1994, v. 43, N 1-2, pp 7-12.

217. Marsh D.G., Goodfriend L., King T.B. Allergen nomenclature. -Bull.Who., 1986, v.64, pp 767-770.

218. Marsh D.G., Lichtenstein L.M., Campbell D.H. Studies on allergoides, prepared from naturally occurring allergens. I. Assay of allergenicity and antigenicity of formalinized rye Group I component. -Immunology, 1970, v. 18, pp 705-720.

219. Marsh D.G., Norman P.S., Roebber M., Lichtenstein L.M. Studies on allergoids from naturally occurring allergens. III. Preparation of ragweed pollen allergoids by aldehyde modification in two steps. -J.Allergy Clin. Immunol., 1981, v. 68, pp 449-459.

220. Marshall J.S., Lealberumen I., Nielsen L., Glibetic M., Jordana M. Interleukin (IL)-10 Inhibits Long-Term IL-6 Production But Not Preformed Mediator Release from Rat Peritoneal Mast Cells. J. Clin. Invest., 1996, v. 97, N 4, pp 1122-1128.

221. Maruo K., Akaike T., Ono T., Okamoto T., Maeda H. Generation of Anaphylatoxins Through Proteolytic Processing of C3 and C5 by House-Dust Mite Protease.-J.Allergy Clin Immunol., 1997,v. 100,N 2,pp253-260.

222. Matsushima A., Shioya K., Kobayashi M., Noguchi Y., Nakai H., Kodera Y., Inada Y. Inhibition of a Mite Protease (DF-Protease) by Synthetic Inhibitors. Biomed. Research, 1994, v. 15, N 1, pp 55-58.

223. Matthews G., Neher E., Penner R. Chloride conductance activated by external agonists and internal messengers in rat peritoneal mast cells. -J.Physiol., 1989, v.418,pp 131-144.

224. Matthews G., Neher E., Penner R. Second messenger activated calcium influx in rat peritoneal mast cells. - J.Physiol., 1989, v.418, pp 105-130.

225. McGowan E.B., Detwiler T.C. Modified platelet responses to thrombin. J.Biol. Chem., 1986, v.261, N 2, pp 739-746.

226. Means E.D., Anderson D.K. Thrombin interaction with central nervous system tissue and implications of these interactions. In: Bioregulatory functions of thrombin (Eds. Walz D.A. et al.), Ann. N.Y. Acad. Sci., 1986, v.485, pp 314-323.

227. Melikhova E.M., Kurochkin I.N., Zaitsev S.V., Varfolomeev S.D. Analysis of ligand-receptor binding by the difference method. -Analytical Biochemistry, 1988, v. 175, N 1-2, pp 507-515.

228. Menon A.K., Holowka D., Webb W.W., Baird B. Cross-linking of receptor-bound Ig E to aggregates larger that dimers leads to rapid immobilization. J. Cell. Biol., 1986, v. 102, pp. 541-550.

229. Metcalfe D.D., Baram D., Mekori Y.A. Mast-Cells.- Physiological

230. Reviews, 1997, v. 77, N 4, pp 1033-1079.

231. Metcalfe D.D., Kaliner M., Donion M.A. The mast cell. Crit. Rev. Immunol., 1981, N 3, pp 23-74.

232. Metcalfe D.D., Lewis R.A. Silbert J.E., Rosenberg R.D., Wasserman S., Austen K.F. Isolation and characterization of heparin for human lung. -J. Clin. Invest., 1979, v. 64, pp 1537-1543.

233. Meyer G., Doppierio S., Vallin P., Daffonchio L. Effect of Frusemide on CI- Channel in Rat Peritoneal Mast-Cells. European Respiratory Journal, 1996, v. 9, N 12, pp 2461-2467.

234. Mio M., Izushi K., Tasaka K. Substance-P-Induced Histamine-Release from Rat Peritoneal Mast-Cells and Its Inhibition by Antiallergic Agents and Calmodulin Inhibitors. Immunopharmacology, 1991, v. 22, Nl,pp 59-66.

235. Mita H., Ishii T., Akiyama K. Generation of thromboxane A2 from highly purified human sinus mast cells after immunological stimulation. -Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids, 1999, v.60, N 3, pp 175-180.

236. Moller A., Grabbe J., Czarnetzki B.M. Mast-Cells and Then-Mediators in Immediate and Delayed Immune-Reactions.- Skin Pharmacology, 1991, v. 4, N SI, pp 56-63.

237. Mosbech H., Dirksen A., Dreborg S. et al. Hyposensitization in asthmatics with mPEG-modified and unmodified house dust mite extract. IY. Occurrence and prediction of side effects. Allergy, 1990, v.45, pp 142-150.

238. Mosbech H., Dreborg S., Pahlman I. Et al. Modification of house dust mite allergens by monomethoxypolyethylene glycol. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1988, v.85, pp 145-149.

239. Mota I. The Discovery of the Relationship Between Mast-Cells, Histamine and IgE. Immunology Today, 1994, v. 15, N 5, pp 242-245.

240. Mota I. The Mast-Cell Revisited. Brazil. J. Med. Biological Research, 1995, v. 28, N 8, pp 895-901.

241. Mueller U., Reisman R., Elliott W. et al. Studies of chemically modified honeybee venom. I. Biochemical. Toxicologic and immunologic characterization. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1982, v.68, pp 312-319.

242. Murakami M., Kudo I., Suwa Y., Inoue K. Release of 14-kDa Group-II Phospholipase-A2 from Activated Mast-Cells and Its Possible Involvement in the Regulation of the Degranulation Process. Eur. J. Biochemistry, 1992, v. 209, N 1, pp 257-265.

243. Mustafa S.B., Pearce F.L. Histamine-Secretion from Mast-Cells Stimulated with Platelet-Activating-Factor (PAF). Agents and Actions, 1992, NSIC, pp C265-C267.

244. Nakada Sh., Ito K., Urata Ch. et al. Allergenicity and immunogenecity of house dust mite (Dermatophagoides farinae) antigens treated with glutaraldehyde. Ann. Allergy, 1985, v.54, pp 437-441.

245. Nakata Y., Hide I. Calcium Signaling and Protein-Kinase-C for TNF-Alpha Secretion in a Rat Mast-Cell Line. Life Sciences, 1998, v. 62, N 17-18, pp 1653-1657.

246. Nayar R., Fidler I.J. The systemic activation of macrophages by lyposomes containing immunomodulators. Springer. Semin. Immunopathol., 1985, v.8, p.413.

247. Neher E. The influence of intracellular calcium concentration on degranulation of dialysed mast cells from rat peritoneum. J. Physiol., 1988, v. 395, pp 193-214.

248. Neher E., Aimers W. Fast calcium transients in rat peritoneal mast cells are not sufficient to trigger exocytosis. The EMBO Journal, 1986, v.5,Nl,pp 51-53.

249. Nishiyama C., Yasuhara T., Yuuki T., Okumura Y. Cloning and Expression in Escherichia-Coli of cDNA-Encoding House-Dust Mite Allergen der-F-3, Serine-Protease from Dermatophagoides-Farinae. -FEBS LETTERS, 1995, v. 377, N 1, pp 62-66.

250. Nishiyama C., Yuuki T., Usui Y., Iwamoto N., Okumura Y., Okudaira H. Effects of Amino-Acid Variations in Recombinant der FII on Its Human IgE and Mouse IgG Recognition. Int. Archs. Allergy Immunol., 1994, v. 105, N 1, pp 62-69.

251. Norman Ph., Creticos P., Marsh D. Frequency of booster injections of allergoids. J. Allergy Clin. Immunol., 1990, v.85, pp 88-94.

252. Ohkubo Т., Shibata M., Inoue M., Kaya H., Takahashi H. Autoregulation of Histamine-Release via the Histamine H-3 Receptor on Mast-Cells in the Rat Skin. Archs. Int. de Pharmacodynamic et de Therapie, 1994, v. 328, N 3, pp 307-314.

253. Okayama Y., Church M.K. IL-3 Primes and Evokes Histamine-Release from Human Basophils But Not Mast-Cells. Int. Archs. Allergy Immunol., 1992, v. 99, N 2-4, pp 343-345.

254. Oneill G.M., Donovan G.R., Baldo B.A. Glutathione-S-Transferase a Major Allergen of the House-Dust Mite, Dermatophagoides Pteronyssinus. Immunology Letters, 1995, v. 48, N 2, pp 103-107.

255. Orr E.L. Nervous System - Associated mast cells: gatekeepers of neural and immune interactions. - Drug Development Res., 1998, v. 15, pp 195-205.

256. O'Sullivan S.On the role of PGD2 metabolites as markers of mast cell activation in asthma. Acta Physiol. Scand., Suppl., 1999, v. 644, N l,p74.

257. Paolini R., Jouvin M.H., Kinet J.P. Phosphorylation and Dephosphorylation of the High- Affinity Receptor for Immunoglobulin-E Immediately After Receptor Engagement and Disengagement. Nature, 1991, v. 353, N 6347, pp 855-858.

258. Pappenhagen A., Koppel J.L., Olwin J.H. Use of fluorescein -labeled fibrin for the determination of fibrinolytic activity. J. Lab. Clin. Med., 1962, v.59, N 6, pp 1039-1045.

259. Parwaresh M.R., Horny H., Lennert K. Tissue mast cells in health and disease. Immunology, 1985, N 3, pp 439-461.

260. Patterson R., Suszko I.M., McOntire F.C. Polymerized ragweed antigen E. I. Preparation and immunologic studies. J. Immunol., 1973, v. 110, pp 1402-1412.

261. Pauli G., Bessot J.C., Bigot H. Clinical and immunological evaluation of tyrosine-adsorbed Dermatophagoides pteronyssinus extract: a double-blind placebo-controlled trial. J. Allergy Clin. Immunol., 1984, v.74, pp 524-535.

262. Pawankar R., Ra C. IgE-Fc-Epsilon-Ri Mast-Cell Axis in the Allergic Cycle. Clin. Exper. Allergy, 1998, v. 28, N S3, pp 6-14.

263. Pearce F.L. Mast cells: function, differentiation and activation. -Current opinion in immunology, 1989, v.l, pp 630-636.

264. Pearce F.L., Ennis M., Truneh A., White J.R. Role of Intracellular and Extracellular Calcium in Histamine-Release from Rat Peritoneal Mast Cells. Agents and Actions, 1994, v. 43, N 3-4, pp 144-148.

265. Pecht I., Corcia A. Stimulus-secretion coupling mechanisms in mast cells. Biophys. Chemistry, 1987, v.26, pp 291-301.

266. Penner R. Multiple signaling pathways control stimulus secretion coupling in rat peritoneal mast cells. - Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1988, v.85, pp 9856-9860.

267. Penner R., Matthews G., Neher E. Regulation of calcium influx by second messengers in rat mast cells. Nature, v.334, N 6182, pp 499-504.

268. Penner R., Neher E. Stimulus-secretion coupling in mast cells. In: Secretion and its control, Rockfeller Univ. Press, 1989, pp 296-310.

269. Perelmutter L. IgE regulation during immunotherapy of allergic diseases. Ann. Allergy, 1986, v.57, pp 78-84.

270. Pervin R., Kanner B.I., Marx G., Razin E. Thrombin-induced degranulation of cultured bone marrow-derived mast cells: effects on calcium uptake. Immunology, 1985, v. 56, pp 667-671.

271. Pesquet C., Murrieta M., Michelen V. et al. Blocking activity of mite-specific IgG antibodies studied by skin tests. -Allergy, 1989, v.44, pp 427-431.

272. Platts-Mills T.A.E., Chapman M.D. Dust mites: immunology, allergic disease and environmental control. J.Allergy Clin. Immunol., 1987, v. 80, pp 755-775.

273. Price J.T., Warner G., Hey E., Turner M.A. A controlled trial hyposensibilization with absorbed tyrosine Dermatophagoides pteronyssinus antigen in childhood asthma: in vivo aspects. Clin. Allergy, 1984, v.14, N 3, pp 209-219.

274. Rabenstein D.L., Bratt P., Peng J. Quantitative Characterization of the Binding of Histamine by Heparin. Biochemistry, 1998, v. 37, N 40, pp 14121-14127.

275. Razin E., Baranes D., Marx G. Thrombin mast cell interactions binding and cell activation. - Exp.Cell.Res., 1985,v. 160,N 2, pp 380-386.

276. Razin E., Marx G. Thrombin-induced degranulation of cultured bone marrow-derived mast cells. J. Immunology, 1984, v. 133, N 6, pp 32823285.

277. Razin E., Pecht I., Rivera J. Signal-Transduction in the Activation of Mast-Cells and Basophils.-Immunol.Today, 1995,v. 16, N 8, pp 370-373.

278. Redrup A.C., Foreman J.C., Hayes N.A., Pearce F.L. Fc(Epsilon)Ri -Mediated Chloride Uptake by Rat Mast-Cells Modulation by Chloride Transport Inhibitors in Relation to Histamine-Secretion.- British J. Pharmacology, 1997, v. 122, N 6, pp 1188-1194.

279. Relyveld F.H., Ickovic M.R., Henocq E., Garcelon M. Calcium phosphate adjuvanted allergens.-Ann.Allergy,1985,v.54,N 6, pp 521-527.

280. Rivera V.M., Brugge J.S. Clustering of Syk Is Sufficient to Induce Tyrosine Phosphorylation and Release of Allergic Mediators from Rat Basophilic Leukemia-Cells. Molecular and Cellular Biology, 1995, v. 15, N 3, pp 1582-1590.

281. Robertson D., Holowka D., Baird B. Cross-linking of immunologlobulin E receptor complexes induced their interaction with the cytoskeleton of rat basophilic leukemia cells. - J. Immunology, 1986, v. 136, N 12, pp 39-44.

282. Robinson B.W.S., Venaille Th. J., Mendis A.H.W., McAeer R. Allergens as proteases: an Aspergillus fumigatus proteinase directly induce human epithelial cell detachment. J. Allergy Clin. Immunol., 1990, v.86,pp 726-731.

283. Romanin C., Reinsprecht M., Pecht I., Schindler H. Immunologically Activated Chloride Channels Involved in Degranulation of Rat Mucosal Mast-Cells. EMBO JOURNAL, 1991, v. 10, N 12, pp 3603-3608.

284. Rosengard B.R., Mahalik C., Cochrane D.E. Mast cell secretion: differences between immunologic and non-immunologic stimulation. -Agents and Actions, 1986, v. 19, N 3/4, pp 133-140.

285. Rossi G.L., Olivieri D. Does the Mast-Cell Still Have a Key Role in Asthma. CHEST, 1997, v. 112, N 2, pp 523-529.

286. Rottem M., Okada T., Goff J.P., Metcalfe D.D. Mast-Cells Cultured from the Peripheral-Blood of Normal Donors and Patients with Mastocytosis Originate from a Cd34+ Fc(Epsilon)Ri(-) Cell-Population. -Blood, 1994, v. 84, N 8, pp 2489-2496.

287. Sagi-Elsenberg R., Foreman J.C., Raval P.J., Cockroft S. Protein and diacylglycerol phosphorylation in the stimulus secretion coupling of rat mast cells. - Immunology, 1987, v.61, pp 203-206.

288. Sahnoun Z., Jamoussi K., Zeghal K.M. Free-Radicals Fundamental Notions and Methods of Exploration (2nd Part). - Therapie, 1998, v. 53, N4, pp 315-339.

289. Sato H., Nakajima A. Kinetic study on the initial stage of the fibrinogen fibrin conversion by thrombin. (1) Application of mathematical treatment to turbidimetrical method. - Thromb. Res., 1984, v.33, pp. 645-651.

290. Schmidt J., Fleissner S., Heimannweitschat I., Lindstaedt R., Szelenyi I. Histamine Increases Anti-CD3 Induced IL-5 Production of T(H)2-Type T-Cells via Histamine H-2-Receptors. Agents and Actions 1994, v. 42, N 3-4, pp 81-85.

291. Schwartz L.B., Bradford T.R. Regulation of tryptase from human lung mast cells by heparin. J. Biol. Chem., 1986, v.261, N 16, pp 73727379.

292. Schwartz L.B., Bradford T.R., Irani A.-M.A., Debbois G., Graig S.S. The major enzymes of human cells secretory granules. Am. Rev.Respir. Dis., 1987, v,135,pp 1186-1189.

293. Schwartz L.B., Riedel G., Schratz J.J., Austen K.F. Localization of carboxypeptidase a to the macromolecular heparin proteoglycan protein complex in secretory granules of rat serosal mast cells. - J. Immunol., 1982, v. 128, N 3, pp 1128-1133.

294. Sedmak J.J., Grosseberg S.E A rapid sensitive and vessatile assay for protein using Coomassie brilliant blue G-250. Anal. Biochem., 1977, v.79, N 1/2, pp 544-552.

295. Shen H.D., Chua K.Y., Lin W.L., Hsieh K.H., Thomas W.R. Molecular-Cloning and Immunological Characterization of the House-Dust Mite Allergen der-F-7. Clin. Exper. Allergy, 1995, v. 25, N 10, pp 1000-1006.

296. Shibasaki M., Isoyama S., Takita H. Influence of Age on IgE Responsiveness to Dermatophagoides-Farinae An Immunoblot Study.-Int. Archs. Allergy Immunol., 1994, v. 103, N 1, pp 53-58.

297. Shore P.A., Burchalter A.A., Chon V.H. A method for the fluorometric assay tissue J.Pharm. Exp. Ther.,1959, v.127, pp. 182-186.

298. Siffert W., Akkerman J.W.N. Evidence for a novel G protein that inhibited receptor mediated activation of the platelet Na+ /H^ exchanger. - Thromb. Haemost., 1989, v.62 (1), N 297, pp 99.

299. Siffert W., Akkerman J.W.N. Activation of sodium proton exchange is a prerequisite for Ca2+ mobilization in human platelets. -Mac. J. Ltd, 1987, v.325, N 6103, pp 456-458.

300. Smith W.A., Chua K.Y., Kuo M.C., Rogers B.L., Thomas W.R. Cloning and Sequencing of the Dermatophagoides- Pteronyssinus Group-Ill Allergen, der-P-III. Clin. Exp. Allergy, 1994,v. 24, N 3, pp 220-228.

301. Smith W.A., Thomas W.R. Comparative-Analysis of the Genes Encoding Group-3 Allergens from Dermatophagoides-Pteronyssinus and

302. Dermatophagoides-Farinae. Int. Archs. Allergy Immunol., 1996, v. 109, N 2, pp 133-140.

303. Snider R.M. Thrombin effects on cultured nerve cells: clinical implications and evidence for a novel mechanism of neuronal activation. In: Bioregulatory functions of thrombin (Eds. Walz D.A. et al.), Ann. N.Y. Acad. Sci., 1986, v.485, pp 310-314.

304. Stenton G.R., Lau H.Y.A. Inhibition of Rat Peritoneal Mast-Cell Exocytosis by Frusemide A Study with Different Secretagogues. -Inflammation Research, 1996, v. 45, N 10, pp 508-512.

305. Stewart G.A., BirdC.H., KrskaK.D., ColloffM.J., Thompson P.J. A comparative study of allergenic and potentially allergenic enzymes from Dermatophagoides pteronyssinus, D.farinae and Euroglyphus maynei. Exp. & Appl. Acarology, 1992, v. 16, pp 165-180.

306. Stewart G.A., Butcher A., Lees K., Acklaud J. Immunochemical and enzimatic analysis of extracts of the house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus. J. Allergy Clin. Immunol., 1986, v. 77, pp 14-24.

307. Stewart G.A., Kollinger M.R., King C.M., Thompson P.J. A Comparative-Study of 3 Serine Proteases from Dermatophagoides-Pteronyssinus and Dermatophagoides-Farinae. Allergy, 1994, v. 49, N 7, pp 553-560.

308. Stewart G.A., Lake F.R., Thompson P.J. Fecally Derived Hydrolytic Enzymes from Dermatophagoides- Pteronyssinus Physicochemical Characterization of Potential Allergens. - Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1991, v. 95, N 2-3, pp 248-256.

309. Stewart G.A., McWilliam A.C., Doyle C. Immune response to liposome entrapped mite allergen. New Engl. Regional Proc., 1988, v.9, p.737.

310. Stewart G.A., Simpson R.J., Thomas W.R., Turner K.J. Physicochemical characterization of a major protein allergen, Der pi, from the house dust mite Dermatophagoides pteronyssinus. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1987, v.82, pp 444-446.

311. Stewart G.A., Thompson P.J., Simpson R.J. Protease antigens from the house dust mite. Lancet, 1989, v.2, pp 154-155.

312. Stewart G.A., Ward L.D., Simpson R.J., Thompson P.J. The Group-Ill Allergen from the House Dust Mite Dermatophagoides-Pteronyssinus Is a Trypsin-Like-Enzyme.- Immunology, 1992, v. 75, N 1, pp 29-35.

313. Suzuki H., Takei M., Nakahata T., Fukamachi H. Inhibitory Effect of Adenosine on Degranulation of Human Cultured Mast-Cells upon Cross-Linking of Fc-Epsilon-Ri. Biochemical and Biophysical Research Communications, 1998, v. 242, N 3, pp 697-702.

314. Svendsen L., Blomback B., Blomback M., Olsson P.I. Synthetic chromogenik substrates for determination of trypsin, thrombin and thrombin-like enzymes. Thromb. Res., 1972, v.l, N 3, pp 267-278.

315. Swenson C.E., Popescu M.C., Ginsberg R.S. Preparation and use of liposomes in the treatment of microbial infections. Crit.Rev. Microbiol., 1988, v.l 5, pp 1-31.

316. Sylvia V.L., Schwartz Z., Curry D.B., Chang Z., Dean D.D. Boyan B.D. l,25(Oh)(2)D-3 Regulates Protein-Kinase-C Activity Through 2 Phospholipid-Dependent Pathways Involving Phospholipase-A(2) and

317. Phospholipase-C in Growth Zone Chondrocytes. J. Bone and Mineral Research, 1998, v. 13, N 4, pp 559-569.

318. Takafuji S., Tadokoro K., Ito K., Nakagawa T. Release of Granule Proteins from Human Eosinophils Stimulated with Mast-Cell Mediators. Allergy, 1998, v. 53, N 10, pp 951-956.

319. Takei M., Ueno M., Endo K. Role of Intracellular Ca2+ on Histamine-Release from Rat Peritoneal Mast-Cells. J. Pharmaceutical Sciences, 1992, v. 81, N 6, pp 518-520.

320. Tam S.W., Fenton J.W.II, Detwiler T.C. Platelets thrombin receptors (binding of alfa-thrombin is coupled to signal generation by a chymotrypsin-sensitive mechanism). J. Biol. Chem., 1980, v.255, N 14, pp 6626-6632.

321. Tamir I., Schweitzerstenner R., Pecht I. Immobilization of the Type-I Receptor for IgE Initiates Signal-Transduction in Mast-Cells.-Biochemistry, 1996, v. 35, N 21, pp 6872-6883.

322. Tasaka K., Mio M., Fujisawa K., Aoki I. Role of Microtubules on Ca2+ Release from the Endoplasmic-Reticulum and Associated Histamine-Release from Rat Peritoneal Mast-Cells. Biochemical Pharmacology, 1991, v. 41, N 6-7, pp 1031-1037.

323. Tasaka K., Mio M., Okamoto H. The role of intracellular Ca in the degranulation of skinned intracellular mast cells. Agents and Actions, 1987, v.20, N3/4, pp 157-160.

324. Tatham P.E.R., Gomperts B.D. ATP inhibits onset of exocytosis is permeabilised mast cells. Bioscien. Report, 1989, v.9, N 1, pp 99-109.

325. Tedeschi A., Palella M., Arquati M., Milazzo N., Miadonna A. Ionic Regulation of Human Basophil Releasability. 3. Effects of Na+ and Ca2+ on Histamine-Release Induced by Different Stimuli.-Pharmacological Research, 1994, v. 30, N 3, pp 229-241.

326. Tharp M.D. Mastocytosis. Current Problems in Dermatology US, 1998, v. 10, N 5, pp 181-210.

327. Thomas W.R., Chua K.Y., Stewart G.A., Doyle C.R., Turner K.J., Simpson R.J., Dilworth K.J. Analysis and expression of cDNA clones coding for house dust mite allergens. Adv. Biosci., 1989, v.74, pp 139141.

328. Thomas B., Heap P., Carswell F. Ultrastructural-Localization of the Allergen der-Pi in the Gut of the House Dust Mite Dermatophagoides-Pteronyssinus. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1991, v. 94, N 1-4, pp 365-367.

329. Thompson S.J., Carswell F. The major allergen of the house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus, is synthesized and secreted into its alimentary canal. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1988, v. 85, pp 312-315.

330. Thon I.L., Uvnas B. Degranulation and histamine release two consecutive steps in the response of rat mast cells to compound 48/80. -Acta Physiol. Scand., 1967, v. 71, pp 303-315.

331. Torn H., Eguchi M., Matsumoto R., Yanagida M., Yata J., Nakahata T. Interleukin-4 Promotes the Development of Tryptase and Chymase Double-Positive Human Mast-Cells Accompanied by Cell Maturation.

332. Blood, 1998, v. 91, N 1, pp 187-195.

333. Torn H., Pawankar R., Ra C., Yata J., Nakahata T. Human Mast-Cells Produce IL-13 by High-Affinity IgE Receptor Cross-Linking -Enhanced IL-13 Production by IL-4-Primed Human Mast-Cells. J. Allergy Clin. Immunol., 1998, v. 102, N 3, pp 491-502.

334. Tovey E.R., Baldo B.A. Detection of house dust mite allergens and frequency of IgE binding following electroblotting and enzyme immunoassay-Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1985, v.76, pp 82-85.

335. Tovey E.R., Chapman M.D., Platts-Mills T.A.E. Mite faeces are a major source of house dust allergens. Nature, 1981, v.289, pp 592-593.

336. Trudinger M., Chua K.Y., Thomas W.R. CDNA-Encoding the Major Mite Allergen der-F-II. Clin. Exp. Allergy, 1991, v. 21, N 1, pp 33-37.

337. Tsang F., Koh A.H.M., Ting W.L., Wong P.T.H., Wong W.S.F. Effects of Mitogen-Activated Protein-Kinase Kinase Inhibitor Pd-098059 on Antigen Challenge of Guinea-Pig Airways in-Vitro. British J. Pharmacology, 1998, v. 125, N 1, pp 61-68.

338. Vergnolle N., Hollenberg M.D., Wallace J.L. Pro- and antiinflammatory actions of thrombin: a distinct role for proteinase-activated receptor-1. Br. J. Pharmacol., 1999, v. 126, N 5, pp 1262-1268.

339. Vilarino N., Vieytes M.R., Vieites J.M., Botana L.M. Modulatory Effect of HCO-3 on Rat Mast Cell Exocytosis: Cross-Talks between Bicarbonate and Calcium. Biochem. Biophys. Res. Commun., 1999, v. 24, N 260(1), pp 71-79.

340. Villena F., Montoya G.A., Roa J., Jofre A., Goset C. Mast cells and synaptic transmission in sympathetic ganglia. Cell. Mol. Biol., 1986, v.32, N 3, pp 253-259.

341. Voorhorst R., Spiekema-Boezeman M.J.A., Spieksma F. Th.M. Is a mite (Dermatophagoides pteronyssinus) the producer of the house dust allergen? Allergue und asthma, 1964, v.10, pp 329-334.

342. Wahn U., Schweter C., Lind P., Lowenstein H. Prospective study on immunologic changes induced by two different Dermatophagoides pteronyssinus extracts prepared from whole mite culture and mite bodies. J. Allergy Clin. Immunol., 1988, v.82, pp 360-370.

343. Wang L, Correia I, Basu S, Theoharides TC. Ca2+ and phorbol ester effect on the mast cell phosphoprotein induced by Cromolyn. Eur. J. Pharmacol., 1999, v. 371, N 2-3 , pp 241-249.

344. Warren R., Wysocki A. Assay of heparin blood. A critical. -Surgery, 1958, v.44, N 3, pp 435-441.

345. Wasserman S.I. Mast cell mediated inflammation in asthma. -Hosp. Pract., 1990, v.23, pp 49-58.

346. Weigle N.G., Cochrane C.C., Dixon F.I. Anaphylactogenic properties of soluble antigen-antibody complexes in the guinea-pig and rabbit. J.Immunol., 1960, v.85, N 5, pp 469-477.

347. White G.C.II, Knupp C.L., Lundblad R.L. The interaction of thrombin with platelets. In: The thrombin (Eds. Machovich R.) CRC. Press Inc., Boca Raton, Florida, 1987, v.l, pp 25-43.

348. White J.C. Anatomy and structured organization of the platelet. In:

349. Hemostasis and Thrombosis (Eds. Colman E.W. et al.), J. B.Lippincott company, Philad., 1987, pp 537-555.

350. Wills-Karp M. Immunologic basis of antigen-induced airway hyperresponsiveness. Ann. Rev. Immunol., 1999, v. 17, pp 255-281.

351. Yamashita N., Haida M., Suko M. et al. Allergens of the house dust mite Dermatophagoides farinae. II. Immunological characterization of four allergenic molecules. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1989, v.88, pp 173-175.

352. Yasueda H., Mita H., Yui Y., Shida T. Isolation and characterization of allergens from Dermatophagoides farinae. Int. Archs. Allergy Appl. Immunol., 1986, v.81, pp 214-223.

353. Yong J.L.C. The mast cell: IY. An ultrastructural and autoradiographi study of the distribution and maturation of peritoneal mast cells in the rat. Pathology, 1981, v. 13, pp 497-515.

354. Young M.B., Nemeth E.F., Scarpa A. Measurement of the internal pH of mast cell granules using microvolumetric fluorescence and isotopic techniques. Arch. Biochem. Biophys., 1987, v.254, N 1, pp 22-233.

355. Yssel H., Abbal C., Pene J., Bousquet J. The role of IgE in asthma. -Clin. Exp. Allergy, 1998, v.28, suppl.5, pp 104-109.

356. Zavoico G.B., Cragoe E.J., Feinstein M.B. Regulation of intracellular pH in human platelets. J. Biol. Chem., 1986, v. 261, N 28, pp 13160-13167.

357. Zhang S., Anderson D.F., Bradding P., Coward W.R., Baddeley S.M., MacLeod J.D., McGill J.I., Church M.K., Holgate S.T., Roche W.R. Human mast cells express stem cell factor. J. Pathol., 1998, v. 186, Nl,pp 59-66.

358. Zhao Q.E., Mihara T., Sugimoto Y., Kamei C. Mechanism of Bradykinin-Induced Histamine-Release from Rat Peritoneal Mast-Cells. -Biological & Pharmaceutical Bulletin, 1996, v. 19, N 2, pp 237-240.